Оценка эффективности различных методов диагностики инфекции вируса лейкоза крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат ветеринарных наук Двоеглазов, Николай Геннадьевич

• Двоеглазов, Николай Геннадьевич
• кандидат ветеринарных наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Двоеглазов, Николай Геннадьевич

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1. Структурная, морфологическая, генотипическая и иммунологическая характеристика ВЛКРС.

1.2. Методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.

1.2.1. Серологические методы диагностики.

1.2.1.1. Реакция иммунодиффузии в геле агара.

1.2.1.2. Иммуноферментный анализ, как альтернатива РИД.

1.2.1.3. Иммуноблотинг.

1.2.1.4. Причины выпадения серологических реакций.

1.2.2. Молекулярные методы диагностики.

1.2.2.1. Полимеразная цепная реакция.

1.2.2.2. Способы оптимизации и особенности проведения ПЦР.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка эффективности различных методов диагностики инфекции вируса лейкоза крупного рогатого скота»

Актуальность проблемы. Распространение BJIKPC представляет угрозу скотоводству во всем мире. С внедрением в 70-х годах прошлого столетия в диагностику лейкоза КРС серологических методов было установлено, что степень распространения инфекции и количество инфицированного крупного рогатого скота намного выше, чем предполагалось ранее. В последнее время, все больше поступает сообщений о вновь выявленных очагах его распространения в тех странах, где раньше его не регистрировали. На сегодня известно, что JIKPC распространен более чем в трети всех стран мира (R.F. DiGiacomo, 1992; W. Wittmann, 1993; J.L.F. Cordeiro et al, 1994; H.T. Kaura and O.J.B. Hubschle, 1994; K. Losieczka and S. Klimentowski, 1994; J. Meszaros et al., 1994; E.H. Birgel et al., 1995; R.M. Jacobs et al., 1995; A. Kurdi et al., 1999; S. Meas et al., 2000, 2002; K.G. Trono et al., 2001; A. Zaghawa et al., 2002).

Ретроспективный анализ по числу неблагополучных пунктов и количеству выявленных больных животных по Российской Федерации за сорокалетний период (1966-2003 гг.) показал, что в структуре инфекционной патологии крупного рогатого скота на лейкоз приходится 57% от всех инфекционных болезней. Представленные данные свидетельствуют об усилении эпизоотической напряженности по лейкозу как в целом по стране, так и большинству территорий. Количество вновь объявленных неблагополучных пунктов, превышает число оздоровленных. К числу наиболее неблагополучных субъектов следует отнести Ростовскую, Волгоградскую, Воронежскую, Саратовскую, Псковскую области, Краснодарский, Ставропольский края, Республику Марий Эл и другие территории, где уровень зараженности крупного рогатого скота вирусом лейкоза составляет от 20 до 45 %. В отдельных хозяйствах, среди взрослых животных, инфицированность ВЛКРС превышает 80 и более процентов. Вместе с тем, анализируя сведения о проведенных лабораторных исследованиях на лейкоз, можно сделать вывод, что официальные статистические сведения по лейкозу в ряде субъектов являются явно заниженными и не отражают истинных масштабов распространения, как заболеваемости, так и инфицированности животных ВЛКРС.

Полученные данные свидетельствуют о том, что при примерно одинаковом количестве гематологических исследований за 1991-2003 гг. по РФ выявлено значительно больше больных животных (133,4 тыс.) при этом процент выявленных больных животных увеличился с 1,8% до 2,64%, а уровень зараженности ВЛКРС за этот же период практически не изменился и составил соответственно 14,2 и 13,1% (В.А. Апалькин и соавт., 2005).

Каждый год появляется все больше сообщений о новых особенностях течения лейкозной инфекции, ее этиологическом агенте (ВЛКРС). Например, стало известно, что некоторые телята, рожденные от инфицированных коров, являются толерантными к ВЛКРС и не синтезируют антитела, оставаясь при этом источником инфекции (В.А. Крикун, 2002). Расширяется и набор методологических средств применяемых для изучения лейкоза. Используемая сегодня в России, и ряде других стран для серологической диагностики РИД не отвечает современному уровню знаний о ЛКРС. При неоспоримой простоте постановки реакции, она значительно уступает в чувствительности другим, более современным методам, например, таким как ИФА и иммуноблотинг (О.А. Верховский и соавт., 2002; K.G. Trono et al., 2001). Невозможность автоматизации делает РИД не удобной при массовых исследованиях и вносит долю субъективизма в оценку результатов.

Однако все животные-вирусоносители не могут быть выявлены ни одним из серологических методов. Это связано с тем, что они регистрируют только ответную иммунологическую реакцию организма на патологического агента в форме наработки антител, в то время как некоторые инфицированные животные имеют слишком низкие для детекции титры антител или не синтезируют их совсем. Также, содержание антител в крови может меняться в зависимости от физиологического состояния. Такие животные, в дальнейшем, могут служить источником новых вспышек инфекции в оздоровленных стадах (М.И. Гулюкин и соавт., 2002; В .А. Крикун, 2002; D. Beier et al., 1998).

В подобных случаях актуальным является примененение генно-молекулярных методов диагностики, таких как молекулярная гибридизация и ПНР. ПЦР позволяет выявлять, по разным данным, на 10-42% больше инфицированных ВЛКРС животных, чем РИД или ИФА (Н.В. Кузнецова и соавт., 1997; Л.Б. Прохватилова и соавт., 1998; В.А. Бусол и соавт., 1999; Н.Т. Джапаралиев и соавт., 2000; В.А. Апалькин и соавт., 2005; К.В. Mullis et al., 1986; Н.М. Naif et al., 1990; A. Popov et al., 1993; H. Poon et al., 1993; H. Fechner et al., 1996a; U. Czarnik et al., 2000; S.E. Gutierrez et al., 2001; M. Rola and J. Kuzmak, 2002; D.W. Nagy et al., 2003; C.J. Kuckleburg et al., 2003). Также, при помощи ПЦР возможно отличить инфицированных телят от телят с колостральными антителами (A. Agresti et al., 1993; F.W. Eaves al., 1994).

Однако в связи с тем, что все перечисленные методы имеют недостатки, актуальными являются исследования по оптимизации регламента для каждого метода в системе оздоровительно-профилактических мероприятий при лейкозе.

Обобщая сведения о распространении лейкоза в нашей стране, а также данные лабораторных исследований следует сделать вывод, что в целом продолжает иметь место негативная динамика усиления напряженности по лейкозу, а во многих субъектах РФ лейкоз приобрел характер эпизоотии. Это требует принятия более радикальных и эффективных мер борьбы с лейкозом, принятие специальной государственной программы и внесения дополнений в существующие «Правила по профилактике и борьбе с лейкозом» 1999 года (В.А. Апалькин и соавт., 2005).

Цель работы: провести сравнительное изучение эффективности существующих методов диагностики BJIKPC-инфекции (РИД, ИФА и ПЦР) и оптимизировать регламент их применения в системе оздоровления крупного рогатого скота от лейкоза.

Задачи исследований:

1. Провести сравнительный анализ диагностической эффективности методов РИД и ИФА в сопоставлении с результатами ПЦР на крупном рогатом скоте неблагополучных по лейкозу хозяйств.

2. Оптимизировать регламент применения методов РИД, ИФА и ПЦР в системе оздоровления крупного рогатого скота от лейкоза.

Научная новизна работы. Установлено, что относительное содержание антител к BJIKPC в сыворотке крови коров выше, чем у молодняка крупного рогатого скота. Так, у взрослых животных этот показатель, по результатам ИФА, составил 42,29 о.е. (для отрицательных в РИД), 75,46 о.е. (для слабоположительных в РИД, титр антител от 1:1 до 1:4) и 85,45 о.е. (для положительных в РИД, титр антител свыше 1:8), у телок случного возраста - 35,59 о.е., 49,23 о.е. и 78,25 о.е. соответственно.

Проведенный на репрезентативном поголовье сравнительный анализ эффективности методов РИД, ИФА и ПЦР при диагностике ВЛКРС-инфекции показал, что ни один из этих методов не позволяет полностью выявить всех животных-вирусоносителей. Так эффективность РИД составила 76,1%, ИФА - 83,3%, ПЦР - от 58,3 до 72,6%.

Научно обоснован регламент использования ИФА и ПЦР в хозяйствах с разной эпизоотической ситуацией по BJTKPC-инфекции.

Практическое значение работы. Инструментальный вариант учета результатов ИФА в сопоставлении с визуальным, позволяет дополнительно выявлять до 2% инфицированных животных, так как пробы сыворотки крови, дающие сигнал менее 30 о.е. при инструментальном учете, при визуальном оцениваются как сомнительные.

Предложен вариант применения ИФА в системе общепринятых методов диагностики инфекции BJIKPC, который предусматривает регламент исследований животных в зависимости от напряженности эпизоотической ситуации по лейкозу. С целью рационального использования ИФА рекомендуется применять данный тест при первичном разделении неблагополучного стада и на завершающей стадии оздоровления.

Оптимизирован регламент применения тест-систем РИД, ИФА и ПЦР при диагностике ВЛКРС-инфекции.

Результаты исследований использованы при разработке методических рекомендаций.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Результаты сравнительного изучения эффективности тест-систем РИД и ИФА в сопоставлении с ПЦР при диагностике ВЛКРС-инфекции.

2. Оптимизированный регламент применения РИД, ИФА и ПЦР в системе оздоровительно-профилактических мероприятий при ВЛКРС-инфекции.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях ученого совета ГНУ ИЭВСиДВ СО Россельхозакадемии (2002-2004 гг.); научно-практической конференции, посвященной 70-летию Иркутской НИВС (Иркутск, 2002); международной научно-практической конференции «Современные проблемы эпизоотологии» (Новосибирск, 2004); международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2005); Сибирской Межрегиональной научно-практической конференции (Новосибирск, 2008).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 8 научных работ, в том числе одна - в журнале «Сибирский вестник сельскохозяйственной науки», рекомендованном ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 125 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 15 таблицами и 4 рисунками. Список использованной литературы включает 245 источников.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Двоеглазов, Николай Геннадьевич

4. ВЫВОДЫ

1. ИФА позволяет дополнительно к РИД выявлять до 15,3% животных в зависимости от эпизоотической ситуации по инфекции ВЛКРС.

Для получения более объективных результатов сыворотка животных, показавших сомнительную в РИД реакцию, подлежит дополнительному исследованию в ИФА, так как 71% сомнительных в РИД проб по результатам ИФА содержит антитела к ВЛКРС.

Инструментальная оценка результатов ИФА более объективна (достоверна) в сопоставлении с визуальной. До 2% реагирующих в ИФА проб по результатам инструментальной оценки остаются неучтенными при визуальной. Сигнал, ниже 30 о.е., регистрируемый при инструментальном учете, при визуальном оценивается как сомнительный.

2. Слабоположительные реакции в РИД (титры антител до 1:4) чаще (33%) регистрируются у коров и значительно реже (12%) у телок случного возраста. Уровень относительного содержания антител к ВЛКРС, регистрируемый в ИФА, выше у коров, чем у телок. У коров, слабоположительных в РИД, относительное количество антител составило -75,4б±4,57 о.е., тогда как у телок - 49,23±6,29 о.е. (Р<0,001).

При более низком уровне инфицированности ВЛКРС (15,4%) коров, в сопоставлении с телками случного возраста (19,4%), случаи дополнительного выявления в ИФА среди взрослых животных были выше и составили 4,4% против 1,5% у телок.

3. Из двух тест-систем на основе ПЦР «nested»-ITUP более чувствительная в сравнении с коммерческой ПЦР тест-системой «Лагис», что, по-видимому, связано с использованием в «nested»-nUP двух пар праймеров. Из 120 исследованных проб в ПЦР] («Лагис») дополнительно было выявлено - 5 проб, а в ПЦР2 («nested»-fIIJP) — 12 проб.

4. Соотношение всех реагирующих животных, выявленных разными методами, составляет: РИД - 76,1%, ИФА - 83,3%, ПЦР] («Лагис»)

58,3%, ПЦР2 («nested»-nLIP) - 72,6%. Таким образом, для максимального выявления всех инфицированных BJIKPC животных необходимо комбинированное использование серологических и молекулярных методов.

У гематологически больных лейкозом животных наличие BJIKPC было подтверждено РИД, ИФА и ПЦР методами в 100% случаев.

5. Регламент применения ИФА и ПЦР в сельскохозяйственных предприятиях обусловлен особенностями эпизоотической ситуации по ВЛКРС-инфекции. С целью рационального применения ИФА возможно использование данного теста при первичном разделении неблагополучного стада и на завершающей стадии оздоровления хозяйств от инфекции.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для реализации в условиях ветеринарной практики разработаны методические рекомендации:

1. «Иммуноферментный анализ при диагностике инфекции вируса лейкоза крупного рогатого скота» (утв. подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока», прот. № 2 от 29.06.2007 г.).

2. «Комплексная система оздоровления и профилактики лейкоза крупного рогатого скота в Новосибирской области на 2007-2011 гг. (теоретические и практические аспекты)» (утв. подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока», прот. № 14 от 5.10.2007 г.).

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Двоеглазов, Николай Геннадьевич, 2009 год

1. Агаркова, Т.А. Эколого-иммунологическая характеристика крупного рогатого скота разных территорий Сибири с учетом оздоровления стад от лейкоза: автореф. дис. канд. вет. наук / Т.А. Агаркова. Новосибирск, 2000.-24с.

2. Апалькин, В.А. Лейкоз крупного рогатого скота. / В.А. Апалькин, М.И. Гулюкин, Н.И. Петров // Петролазер. Санкт- Петербург. 2005. -106 с.

3. Бурба, Л.Г. Диагностика лейкозов сельскохозяйственных животных. / Л.Г. Бурба, А.А. Кунаков //М.: Колос. 1983. - С. 31-34.

4. Бусол, В.А. Тест-система для выявления ВЛКРС полимеразной цепной реакцией. / В.А. Бусол, О.Ю. Лиманская, А.П. Лиманский, В.И. Цымбал // Ветеринария. 1999. - № 6. - С. 27-30.

5. Брокхаус, М. Обнаружение гликолипидных антигенов с помощью моноклональных антител. / М. Брокхаус // Иммунологические методы исследований: пер. с англ. под ред. И, Лефковитса, Б. Перниса. М.: Мир, 1988.-С. 159-172.

6. Васильев, Н.Т. Лейкозы сельскохозяйственных животных. / Н.Т. Васильев, Н.В. Румянцев // М.: Колос. 1975. - С. 158-161.

7. Верховский, О.А. Иммуноферментный анализ в диагностике лейкоза крупного рогатого скота. / О.А. Верховский, В.В. Цибезов, М.В. Баландина, И.В. Непоклонова // Ветеринария. 2002. - № 12. - С. 810.

8. Гулюкин, М.И. Разработка эффективных мероприятий против лейкоза крупного рогатого скота. / М.И. Гулюкин, Л.А. Иванова, Н.В. Замараева, Н.В. Баркова, К.П. Грек, В.В. Храмцов, А.С. Донченко // Ветеринария. -2002. -№ 12.-С. 3-8.

9. Гусева, Е.В. Инфекционные болезни северных оленей. / Е.В. Гусева, Т.А. Сатина. //Владимир: ОКНИИиМС, 2000. - С. 101-112.

10. Иванов, В. Л. Применение метода иммунофлуоресценции для обнаружения специфического антигена при лейкозе крупного рогатого скота. // Лейкоз крупного рогатого скота. Рига: Зинатне. — 1974. С. 109112.

11. Испуллаев, А.И. Диагностическая ценность РИД с полипептидным (р24) антигеном ВЛКРС в выявлении больного лейкозом крупного рогатого скота: дис. канд. вет. наук / А.И. Испуллаев. — Новосибирск, 1993,- 139с.

12. Крикун, В.А. Лейкоз крупного рогатого скота и иммунологическая толерантность. / В.А. Крикун // Ветеринария. 2002. -№ 6. - С. 7-9.

13. Кузнецова, Н.В. Использование полимеразной цепной реакции для выявления инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота. / Н.В. Кузнецова, Н.В. Кузнецов, Г.А. Симонян // Ветеринария. 1997. -№5.-С. 12-15.

14. Кукайн, Р.А. Вирус лейкоза крупного рогатого скота. / Р.А. Кукайн и др.. // под ред. Р.А. Кукайн, Л.И. Нагаевой. Рига: Зинатне. - 1982. -175 с.

15. Кумков, В.Т. Реакция связывания комплемента при лейкозе крупного рогатого скота. / В.Т. Кумков, В.А. Крикун // Теоретические и практические вопросы ветеринарии. Лейкозы. Тарту, 1979. - Т.2. - С. 8893.

16. Левашев, А.Т. Методические аспекты серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота. / А.Т. Левашев // Диагностика и" профилактика заразных болезней сельскохозяйственных животных. — Новосибирск. 1992. - С. 67-73.

17. Лемеш, В.М. Лейкоз крупного рогатого скота. / В.М. Лемеш и др.. -Мн.: Ураджай, 1987. 224 с.

18. Лиманский, А.П. Молекулярно-генетические методы — основа программ по искоренению лейкоза крупного рогатого скота. / А.П. Лиманский, О.Ю. Лиманская // Биотехнология. — 2001. №3. - С. 4050.

19. Луговцев, В.Ю. Классификация и номенклатура вирусов позвоночных: учебное пособие. / В.Ю. Луговцев, Д.А. Васильев. Ульяновск, — 2002. -С. 65-77.

20. Малоголовкин, С.А. Роль моноклональных антител в диагностике лейкоза крупного рогатого скота. / С.А. Малоголовкин // Ветеринария. — 1997.-№4.-С. 16-19.

21. Мальцева, Н.А. Лабораторная диагностика и специфическая профилактика лейкоза крупного рогатого скота. / Н.А. Мальцева // Новочеркасск, 2002. - 81с.

22. Маниатис, Т. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. / Т. Маниатис, Э. Фрич, Дж. Сэмбрук. М.: Мир, - 1984. -480 с.

23. Мацакова, Н.Г. Диагностическая эффективность серологических исследований при лейкозе крупного рогатого скота. / Н.Г. Мацакова,

24. В.Ф. Островская, В.М. Велик // Лейкозы крупного рогатого скота, сборник научных трудов. MB А, 1985. - С. 20-23.

25. Москалик, Р.С. Сывороточные и колостральные анти-ВЛКРС-антитела у больных лейкозом коров. / Р.С. Москалик // Лейкозы крупного рогатого скота, сборник научных трудов. МВА, 1985. - С. 33-36.

26. Москалик, Р.С. Диагностическое преимущество использования молозива для обнаружения анти-ВЛКРС антител. / Р.С. Москалик,

27. A.M. Сандросян // Проблемы адаптации с.-х. животных. Новосибирск, -1997.-С. 167-168.

28. Нго, Т. Иммуноферментный анализ. / Т. Нго и Г. Ленхофф. М.: Мир, -1988. - 446 с.

29. Орлянкин, Б.Г. Классификация ретровирусов и характеристика вируса лейкоза крупного рогатого скота. / Б.Г. Орлянкин, М.И. Гулюкин, Н.В. Замараева, К.Ю. Кунаков // Ветеринария. 2000. - № 5. - С. 17-19.

30. Попов, Ю.Г. Биометрическая обработка результатов научно-производственных опытов при оформлении курсовых и выпускных работ: учебно-методическое пособие / Ю.Г. Попов и др.. Новосиб. гос. аграр. ун-т. - Новосибирск, 2000. - 24 с.

31. Прохватилова, Л.Б. Диагностика лейкоза КРС методом полимеразной цепной реакции. / Л.Б. Прохватилова, А.И. Ломакин, С.Н. Колосов,

32. B.В. Дрыгин, С.С. Рыбаков, А.А. Гусев // Вестник РАСХН. 1998. -№ 5.-С. 65-68.

33. Прохватилова, Л.Б. Применение ПЦР для раннего обнаружения провируса лейкоза крупного рогатого скота у экспериментально инфицированных животных. / Л.Б. Прохватилова, С.Н. Колосов,

34. A.И. Ломакин, В.В. Дрыгин, А.А. Гусев // Ветеринария. 2001. - № 8. -С. 17-21.

35. Сергеев, В.А. Структура и биология вирусов животных. / В.А. Сергеев, Б.Г. Орлянкин. М.: Колос, - 1983. - С. 296-313.

36. Смирнов, П.Н. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота: Рекомендации / П.Н. Смирнов, В.В. Смирнова, А.Т. Левашев,

37. B.В. Храмцов, А.С. Опанасюк, И.В. Фирсов, А.Г. Незавитин // ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние. ИЭВСиДВ. Новосибирск, 1989. - 48 с.

38. Смирнов, П.Н. Проблемы лейкоза животных. / П.Н. Смирнов, А.Г. Незавитин, В.В. Смирнова, В.В. Храмцов // под ред. П.Н. Смирнова. -Новосибирск, 1992. - С. 3-211.

39. Смит, К. Анализ генома / К.Смит, Ф.Коллинз, Ч.Кантор. М., 1990. -58с.

40. Сюрин, В.Н. Вирусные болезни животных. / В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В.Соловьев, Н.В. Фомина. М.: ВНИТИБП, - 1998.1. C. 383-406.

41. Файзулин, Р.З. Иммуноферментная тест-система для выявления инфицированных вирусом лейкоза животных. / Р.З. Файзулин, В.М. Чекишев, Н.В. Попова, В.В. Храмцов, З.Ф. Богаутдинов,

42. A.И. Кабанцев // Эпизоотология, диагностика, профилактика и меры борьбы с болезнями животных. Новосибирск, 1997. - С. 96-100.

43. Федоров, Н.А. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). — Методическое пособие для начинающих. / Н.А. Федоров, Ю.С. Суханов, А.Х. Асади Мобархан, М.И. Артемьев. М., - 1996. - 33 с.

44. Чекишев, В.М. Перспективы использования достижений биотехнологии в диагностике инфекционных болезней животных /

45. B.М. Чекишев // Эпизоотические и инфекционные процессы / РАСХН. Сиб. отд-ние. ИЭВСиДВ. Новосибирск, 1992. - С. 53-56.

46. Шишков, В.П. Лейкозы и злокачественные опухоли животных. / Л.Г Бурба, А.Ф. Валихов, В.А. Горбатов и др. // под ред. В.П. Шишкова, Л.Г Бурбы. М.: Агропромиздат, 1988. -400 с.

47. Шукель, А. А. Сравнительная характеристика иммунологических методов диагностики инфекции ВЛКРС в системе противолейкозных мероприятий: автореф. дис. канд. вет. наук. / А.А. Шукель. Барнаул, 1998.- 18 с.

48. Aida, Y. Monoclonal antibodies define antigenic regions on the major internal protein p24 of bovine leukemia virus (BLV). / Y. Aida, M. Onuma, K. Tsukiyama, Y. Ogawa, T. Fujieda, T. Mikami, H. Izawa // Arch. Virol. -1987a. -V. 94.-P. 315-321.

49. Aida, Y. Use of viable-cell ELISA for detection of monoclonal antibodies recognizing tumour-associated antigens on bovine lymphosarcoma cells. /

50. Y. Aida, M. Onuma, N. Kasai, H. Izawa // Am. J. Vet. Res. 1987b. - V. 48. -P. 1319-1324.

51. Andersen, M. Indirect hemagglutination test for detection of antibody against bovine leukemia virus. / M. Andersen // Ann. Rech. Vet. 1978. -V. 9. - P. 675-682.

52. Asfaw, Y. Distribution and superinfection of bovine leukaemia virus genotypes in Japan / Y. Asfaw, S. Tsuduku, M. Konishi, K. Murakami, T. Tsuboi, D. Wu, H. Sentsui // Arch. Virol. 2004. - V. 111. - P. 109-120.

53. Batmaz, H. Serological and haematological diagnosis of enzootic bovine leukosis in cattle in turkey. / H. Batmaz, K.T. Carli, M. Kahraman, C. Cetin, E. Kennerman // Vet. Rec. 1995. - V. 136. - P. 42-44.

54. Baumgartener, L.E. Survey for antibodies to leukemia (C-type) virus in cattle. / L.E. Baumgartener, C. Olson, J.M. Miller, M.J. Van der Maaten // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1975. - V. 166. - P. 249-251.

55. Beier, D. Blutserologische, pathologischhistologische und hamatologische Untersuchungen an mit bovinem Leukosevirus infizierten tumorosen Rindern. / D. Beier, E. Starick, W. Wittmann, B. Nitschke // Arch. Exper. Vet. Med. -1987. -V. 41.-P. 763-766.

56. Bembridge, G.P. Cd45Ro expression on bovine T-cells-relation to biological function. / G.P. Bembridge, N.D. Machugh, D. Mckeever, E. Awino, P. Soop,

57. R.A. Collins, K.I. Gelder, С J. Howard // Immunology. 1995. - V. 86. -P. 537-544.

58. Birgel, E.H. Prevalence of the infection by the bovine leukosis virus in jersey dairy-cattle, raised in the state of Sao Paulo Pesquisa. / E.H. Birgel, J. Dangelino, F.J. Benesi //Vet. Brasileira. 1995. - V. 15. - P. 93-99.

59. Brandon, R.B. Early detection of bovine leukosis virus DNA in infected sheep using the polymerase chain reaction. / R.B. Brandon, H. Naif, R.C.W. Daniel, M.F. Lavin // Res. Vet. Sci. 1991. - V. 50. - P. 89-94.

60. Bruck, C. Topographical analysis by monoclonal antibodies of BLV-gp51 epitopes involved in viral functions. / C. Bruck, D. Portetelle, A. Burny, J. Zavada // Virology. 1982b. - V. 122. - P. 353-362.

61. Bruck, C. Epitopes of bovine leukemia virus glycoprotein gp51 recognized by sera of infected cattle and sheep. / C. Bruck, D. Portetelle, M. Mammerickx, S. Mathot, A. Burny // Leuk. Res. 1984b. - V. 8. - P. 315-321.

62. Buehring, G.C. Evidence for bovine leukemia-virus in mammary epithelial-cells of infected cows. / G.C. Buehring, P.M. Kramme, R.D. Schultz // Lab. Invest. 1994. - V. 71. - P. 359-365.

63. Bunger, I. Detection of antibodies against the enzootic bovine leukemia-virus in milk and serum samples by immunoblotting. / Bunger I., H. Khalaf, C. Cripe, M. Rimpler // Dtsch. Tierarztl. Wschr. 1994. - V. 101. - P. 402405.

64. Bunger, I. Pmfung von Anitgenpraparationen des vims der enzootischen Rinderleukose auf Eignung im Immunblot. / I. Bunger, H. Khalaf, M. Rimpler // Dtsch. Tierarztl. Wschr. 1996. - V. 103. - P. 516-519.

65. Burridge, M.J. Duration of colostral antibodies to bovine leukemia virus by two serologic tests. / M.J. Burridge, M.C. Thurmond, J.M. Miller, M.J.F. Schmerr, M.J. Van der Maaten // Am. J. Vet. Res. 1982. - V. 43. -P. 1866-1867.

66. Calafat, J. Structure of C-type virus particles in lymphocyte cultures of bovine origin. / J. Calafat, P.C. Hageman, A.A. Ressang // J. Natl. Cancer Inst. 1974. - V. 52. - P. 507-519.

67. Carli, K.T. Comparison of serum, milk and urine as sampels in an enzyme-immunoassay for bovine leukemia-virus. / K.T. Carli, H. Batzmaz, A. Sen, A. Mibay // Res. Vet. Sci. 1993. - V. 55. - P. 394-395.

68. Carli, K.T. Detection of IgG antibody to Bovine Leukaemia Virus in urine and serum by two enzyme immunoassays. / K.T. Carli, A. Sen, H. Batzmaz, E. Kennerman // Letters in Applied Microbiology. 1999. - V. 28. - P. 416418.

69. Cheng-Mayer, C. Host range, replicative, and cytopathic properties of human immunodeficiency virus type 1 are determined by very few amino acid changes in tat and gpl20. / C. Cheng-Mayer, T. Shioda, J.A. Levy // J. Virol. -1991.-V. 65.-P. 6931-6941.

70. Cheng, S. Effective amplification of long targets from cloned inserts and human genomic DNA. / S. Cheng, C. Fockler, W. Barnes, R. Higuchi // Proc. Natl. Acad. Sci. 1994. - V. 91. - P. 5695-5699.

71. Chiba, T. Immunohistologic studies on subpopulations of lymphocytes in cattle with enzootic bovine leukosis. / T. Chiba, M. Hiraga, Y. Aida, T. Ajito, M. Asahina, D. Wu // Vet. Path. 1995. - V. 32. - P. 513-520.

72. Cockerell, G.L. The correlation between the direct and indirect detection of bovine leukemia virus infection in cattle. / G.L. Cockerell, J. Rovnak // Leuk. Res. 1988. - V. 12. - P. 465-469.

73. Cordeiro, J.L.F. Identification and control of bovine leukosis in a daiiy herd. / J.L.F. Cordeiro, F. Descyhamps, E. Martins, V.M.V. Martins // Pesquisa Agropecuaria Brasileira. 1994. - V. 29. - P. 1287-1292.

74. Czarnik, U. Modified procedure for PCR detection of proviral DNA of bovine leukaemia virus. / U. Czarnik, S. Kaminski, J. Rulka, K. Walawski // Bull. Veter. Inst, in Pulawy. 2000. - V. 44. № 2. - P. 143-146.

75. Derse, D. Nucleotide sequence and structure of integrated bovine leukemia virus long terminal repeats. / D. Derse, A.J. Diniak, J.W. Casey, P.L. Deininger //Virology. 1985.-V. 141.-P. 162-166.

76. Derse, D. Trans-acting regulation of bovine leukemia virus mRNA processing. / D. Derse // J. Virol. 1988. - V. 62. - P. 1115-1119.

77. Deschamps, J. Experiments with cloned complete tumorderived bovine leukemia virus information prove that the virus is totally exogenous to its target animal species. / J. Deschamps, R. Kettmann, A. Burny // J. Virol. 1981. -V. 40.-P. 605-609.

78. Deshayes, L. Proteins of bovine leukemia virus. I. Characterization and reactions with natural antibodies / L. Deshayes, D. Levy, A.L. Parodi, J.P. Levy // J. Virol. 1977. - V. 21. - P. 1056-1060.

79. Devare, S.G. Bovine lymphosarcoma: development of a radioimmunologic technique for detection of the etiologic agent. / S.G. Devare, J.R. Stephenson, S. Chander, P.S. Sarma, S.A. Aaronson // Science. 1976. - V. 194. - P. 14281430.

80. DiGiacomo, R.F. The epidemiology and control of bovine leukemia virus infection. / R.F. DiGiacomo // Vet. Med. 1992. - P. 248-257.

81. Diglio, C.A. Induction of syncytia by the bovine C-type leukemia vims. / C.A. Diglio, J.F. Ferrer// Cancer. Res. 1976. - V. 36. - P. 1056-1067.

82. Dimmock, C.K. Lymphocyte subpopulationes in sheep with lymphosarkoma resulting from experimental infection with bovine leukemia virus. Immunol. /

83. C.K. Dimmock, W.H. Ward, K.F. Truemann // Cell. Biol. 1990. - V. 68. -P. 45-49.

84. Dolz, G. Comparison of agar gel immunodiffusion test, enzyme-linked immunosorbent assay and western blotting for the detection of BLV antibodies. / G. Dolz, E. Moreno // Zentralbl Veterinarmed. 1999. - V. 46. -P. 551-558.

85. Don, R.H. "Touchdown" PCR to circumvent spurious priming during gene amplification. / R.H. Don, P.T. Cox, B.J. Wainwright, K. Baker, J.S. Mattick // Nucl. Acids. Res. 1991. - V. 19. - P. 4008-4019.

86. Eaves, F.W. A field evaluation of the polymerase chain reaction procedure for the detection of bovine leukaemia virus proviral DNA in cattle. / F.W. Eaves, J.B. Molloy, C.K. Dimmock, L.E. Eaves // Vet. Microbiol. -1994. -V. 39.-P. 313-321.

87. Eisenstein, B.J. The polymerase chain reaction. A new method of using molecular genetics for medical diagnosis. / B.J. Eisenstein // New Engl. J. Med. 1990.-V. 322.-P. 178-183.

88. Engelberg, N.C. Detection of microbial nucleic acid for diagnostic purposes. / N.C. Engelberg, В J. Eisenstein // Ann. Rev. Med. 1992. -V. 43.-P. 147-155.

89. Erlich, H.A. Spezific DNA amplification. / H.A. Erlich, D.H. Gelfand, R.K. Saiki //Nature. 1988. - V. 331. - P. 461-462.

90. Fechner, H. Evaluation of polymerase chain reaction (PCR) application in diagnosis of bovine leukaemia virus (BLV) infection in naturally infected cattle. / H. Fechner, A. Kurg, L. Geue, P. Blankenstein, G. Mewes, D. Ebner,

91. D. Beier// Zentralbl. Veterinarmed. В. 1996a. - V. 43. - P. 621-630.

92. Fechner, H. Direct use of cell lysates in PCR-based diagnosis of bovine leukemia virus infection. / H. Fechner, A. Kurg, P. Blankenstein, G. Mewes, L. Geue, C. Albrecht, D. Ebner // Berl. Munch. Tierarztl. Wochenschr. -1996b. -V. 109.-P. 446-450.

93. Ferrer, J.F. Studies on the relationship between infection with bovine C-type virus, leukemia, and persistent lymphocytosis in cattle. / J.F. Ferrer, D.A. Abt, B.M. Bhatt, R.R. Marshak // Cancer. Res. 1974. - V. 34. - P. 893-900.

94. Ferrer, J.F. Serological diagnosis of infection with the putative bovine leukemia virus. / J.F. Ferrer, D.M. Bhatt, D.A. Abt, R.R. Marshak, V.L. Baliga // Cornell Vet. 1975. - V. 65. - P. 527-542.

95. Forschner, E. ELISA-Ablaufbestimmende Einflussparameter, deren Auswirkungen auf die Testsicherheit and praxisgerechte Prufmethoden. Tierarztl. / E. Forschner, D. Heiseke // Umschau. 1988. - V. 43. - P. 786-796.

96. Frenzel, B. Immunofluorescence test for bovine leukosis-associated complement-fixing antibodies / B. Frenzel, M. Mussgay, L.G. Schneider, O.C. Straub // Zbl. Veterinarmed. 1975. - V. 22. - P. 519-523.

97. Ghysdael, J. Translation of bovine leukemia virus virion RNAs in heterologous protein-synthesizing systems. / J. Ghysdael, R. Kettmann, A. Burny//J. Virol. 1979.- V. 29.-P. 1087-1098.

98. Ghysdael, J. Bovine leukemia virus. / J. Ghysdael, C. Bruck, R. Kettmann, A. Bumy. // Cum Top. Microbiol. Immunol. 1984. - V. 112. - P. 1-19.

99. Graves, D.C. A reverse transcriptase assay for detection of the bovine leukemia virus. / D.C. Graves, C.A. Diglio, J.F. Ferrer // Am. J. Vet. Res. -1977. -V. 38.-P. 1739-1744.

100. Grover, Y.P. An immunoblotting procedure for detection of antibodies against bovine leukemia virus in cattle. / Y.P. Grover, B. Guillemain // J. Vet. Med. B. 1992. - V. 39. - P. 48-52.

101. Grundboeck, M. Syncytial testing in the diagnosis of bovine leukemia-possibilities and limitationes. / M. Grundboeck, J. Kuzmak, E. Buzala // Medycyna Wet. 1994. - V. 50. - P. 205-207.

102. Heeney, J.L. Alterations in humoral immune response to bovine leukaemia virus antigens in cattle with lymphoma. / J.L. Heeney, V.E. Valli, J. Montesanti //J. Gen. Virol. 1988. -V. 69. - P. 659-666.

103. Heeney, J.L. Transformed phenotype of enzootic bovine lymphoma reflects differentiation-linked leukemogenesis. / J.L. Heeney, V. Valli // Lab. Invest. -1990.-V. 62.-P. 339-346.

104. Heeney, J.L. Evidence for bovine leukemia virus infection of peripheral blood monocytes and limited antigen expression in bovine lymphoid tissue. / J.L. Heeney, PJ.S Valli, R.M. Jacobs, V.E.O. Valli // Lab. Invest. 1992. -V. 66.-P. 608-615.

105. Hoff-Jorgensen, R. An international comparison of different laboratory tests for the diagnosis of bovine leukosis: Suggestions for international standardization / R. Hoff-Jorgensen // J. Virol. Methods. 2004. - V. 115. -№2.-P. 167-175.

106. Hruskova-Heidingsfeldova, O. Proteins of bovine leukemia-virus and human T-cell leukemia viruses. / O. Hruskova-Heidingsfeldova // Fol. Biol. (Praha). -1995.-V. 41.-P. 201-212.

107. Johnson, R. Lymphocyte colony formation by aleukemic sheep infected with bovine leukemia-virus. / R. Johnson, J.B. Kaneene, J.W. Lloyd // Сотр. Immunol. Microbiol. Infect. Dis. 1994. - V. 17. - P. 1-13.

108. Kaaden, O.R. Isolation of a pi 5 polypeptide from bovine leukemia virus and detection of specific antibodies in leukemic cattle. / O.R. Kaaden, B. Frenzel, B. Dietzschold, F. Weiland, M. Mussgay. // Virology. 1977. - V. 77. - P. 501509.

109. Kaaden, O.R. Eine Methode zum Direktnachweis des Rinderleukosevirus. / O.R. Kaaden, B. Frenzel // Fortschr. Vet. 1980. - V. 30. - P. 184-187.

110. Kaura, H.T. The occurrence of enzootic bovine leukosis (EBL) in Namibia. / H.T. Kaura, O.J.B. Hubschle // Dtsch. Tierarztl. Wschr. 1994. - V. 101. -P. 66-67.

111. Kenyon, SJ. Properties of density gradient-fractionated peripheral blood leukocytes from cattle with bovine leukemia virus. / S.J. Kenyon, C.E. Piper // Infect. Immun. 1977. - V. 16. - P. 898-903.

112. Kettmann, R. Integration of bovine leukemia virus DNA in the bovine genome. / R. Kettmann, M. Meunier-Rotival, J. Cortadas, G. Cuny, J. Ghysdael, M. Mammerickx, A. Burny, G. Bernardi // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. - V. 76. - P. 4822-4826.

113. Kettmann, R. Chromosome integration domain for bovine leukemia provims in tumors. / R. Kettmann, J. Deschamps, Y. Cleuter, D. Couez, J.J. Claustriaux, R. Palm, A. Burny // J. Virol. 1983. - V. 47. - P. 146-156.

114. Klintevall, K. Evaluation of an indirect ELISA for the detection of antibodies to bovine leukaemia virus in milk and serum. / K. Klintevall, K. Nasland, G. Svedland, L. Hajdu, N. Linde, B. Klingeborn // J. Virol. Methods. 1991. - V. 33. - P. 319-333.

115. Klintevall, K. Bovine leukemia virus: rapid detection of proviral DNA by nested PCR in blood and organs of experimentally infected calves. / K. Klintevall, A. Ballagi-Pordany, K. Naslund, S. Belak // Vet. Microbiol. -1994. -V. 42.-P. 191-204.

116. Kuckleburg, C.J. Detection of bovine leukemia virus in blood and milk by nested and real-time polymerase chain reactions. / C.J. Kuckleburg,

117. C.C. Chase, E.A. Nelson, S.A. Marras, M.A. Dammen, J.J Christopher-Hennings // Vet. Diagn. Invest. 2003. - V. 15. - P. 72-76.

118. Kurdi, A. Serologic and virologic investigations on the presence of BLV infection in a dairy herd in Syria. / A. Kurdi, P. Blankenstein, O. Marquardt,

119. D. Ebner // Berl. Munch. Tierarztl. Wochenschr. 1999. - V. 112. - P. 18-23.

120. Kuzmak, J. Detection of the bovine leukaemia virus by the polymerase chain reaction. / J. Kuzmak, A. Moussa, J. Grundboeck-Jusko // Acta. Biochim. Pol. 1991.-V. 38.-P. 107-110.

121. Kuzmak, J. Application of nonradioactive method of DNA detection in the diagnosis of bovine leukemia virus infection. / J. Kuzmak, A. Skorupska, A. Moussa, J. Grandboeck // Bui. Vet. Inst. Pulway. 1993a. - V. 37. - P. 3-8.

122. Kwok, S. Avoiding false positives with PCR. / S. Kwok, R. Higuchi // Nature. 1989. - V. 339. - P. 237-238.

123. Lagarias, D.M. Transkriptional activation of bovine leukemia virus in blood cells from experimentally infected, asymptomatic sheep with latent infections. / D.M. Lagarias, K. Radke // J. Virol. 1989. - V. 63. - P. 2099-2107.

124. Lefebvre, L. Subcellular localization of the bovine leukemia virus R3 and G4 accessory proteins. / L. Lefebvre, V. Ciminale, A. Vanderplasschen, D. D'Agostino, A. Burny, L. Willems, R. Kettmann // J. Virol. 2002a. -V. 76. №15.-P. 7843-7854.

125. Levkut, M. Expression and quantification of IgG and IgM molecules on the surface of lymphocytes of cattle infected with bovine leukemia-virus. / M. Levkut, W. Ponti, D. Soligo, N. Quirici, M. Rocchi // Res. Vet. Sci. -1995.-V. 59.-P. 45-49.

126. Licursi, M. Genetic heterogeneiti among bovine leukemia virus genotypes and its relation to humoral responses in hosts. / M. Licursi, Y. Inoshima, D. Wu, T. Yokoyama, E. Gonzalez, H. Sentsui. // Virus Research. 2002. -V. 86.-P. 101-110.

127. Losieczka, K. Epizootiological analysis of the occurrence of enzootic bovine leukemia in individual farms. / K. Losieczka, S. Klimentowski // Medycyna Wet. 1994.- V. 50.-P. 118-121.

128. Mammerickx, M. Comparative study of four diagnostic methods of enzootic bovine leukosis / M. Mammerickx, A. Burny, D. Dekegel, J. Ghysdael, R. Kettmann, D. Portetelle // Zbl. Vet. Med.- 1977a. V.24. - P. 733-740.

129. Mammerickx, M. Study on the diagnosis of enzootic bovine leukosis by complement-fixation. / M. Mammerickx, D. Portetelle, A. Bumy // Zbl. Vet. Med. 1977b. - V. 24. - P. 349-357.

130. Mammerickx, M. Eradication of enzootic bovine leukosis based on the detection of the disease by gp immunodiffusion test. / M. Mammerickx, A. Cormann, A. Bumy, D. Dekegel, D. Portetelle // Ann. Rech. Vet. 1978. -V. 9.-P. 885-894.

131. Mamoun, R.Z. Bovine lymphosarkoma: expression of BLV-related proteins in cultured cells. / R.Z. Mamoun, T. Astier, B. Guillemain, J.F. Duplan // J. Gen. Virol. 1983.-V. 64.-P. 2791-2795.

132. McDonald, H.C. Detection, quantitation and characterization of the major internal virion antigen of the bovine leukemia virus by radioimmunoassay. / H.C. McDonald, J.F. Ferrer // J. Natl. Cancer Inst. 1976. - V. 57. - P. 875882.

133. Meas, S. Seroprevalence of bovine immunodeficiency virus and bovine leukemia virus in draught animals in Cambodia. / S. Meas, K. Ohashi, S. Turn, M. Chhin, К. Те, К. Miura, С. Sugimoto, M. Onuma // J. Vet. Med. Sci. -2000.-V. 62. №7.-P. 779-781.

134. Meas, S. Seroprevalence and molecular evidence for the presence of bovine immunodeficiency virus in Brazilian cattle. / S. Meas, FJ. Ruas, T. Usui,

135. Y. Teraoka, A. Mulenga, K.S. Chang, A. Masuda, C.R. Madruga, K. Ohashi, M. Onuma // Jpn. J. Vet. Res. 2002. - V. 50. № 1. - P. 9-16.

136. Menard, A. Bovine leukemia virus: purification and charakterization of the aspartic protease. / A. Menard, R.Z. Mamoun, S. Geoffre, M. Castraviejo, S. Raymond, G. Precigoux, M. Hospital, B. Guillemain // Virology. 1993. -V. 68.-P. 494-499.

137. Meszaros, J. Eradication of bovine leukosis from a heavily infected herd by the use of own offspring. / J. Meszaros, T. Antal, A.T. Polner, L. Sumeghy, I. Szabo // Acta V. Hung. 1994. - V. 42. - P. 421-432.

138. Miller, J.M. Virus-like particles in phytohemagglutinin-stimmulating lymphocyte cultures with reference to bovine lymphosarcoma / J.M. Miller, L.D. Miller, C. Olson, K.G. Gillette // J. Natl. Cancer Inst. 1969. - V. 43. -P.1297- 1305.

139. Miller, J.M. Brief communication: Precipitating antibody to an internal antigen of the C-type virus associated with bovine lymphosarcoma. / J.M. Miller, C. Olson // J. Natl. Cancer Inst. 1972. - V. 49. - P. 1459-1462.

140. Miller, J.M. A complement-fixation test for the bovine leukemia (C-type) virus. / J.M. Miller, M.J. Van der Maaten // J. Nat. Cancer Inst. 1974. -V. 53.-№6.-P. 1699-1702.

141. Miller, J.M. Serological detection of bovine leukemia virus infection. / J.M. Miller, M.J. Van der Maaten // Vet. Microbiol. 1976. - V. 1. - P. 195202.

142. Miller, J.M. Use of glycoprotein in the immunodiffusion test for bovine leukemia virus antibodies. / J.M. Miller, M.J. Van der Maaten // Europ. J. Cancer. 1977. - V. 13. - P. 1369-1375.

143. Miller, J.M. Studies of a glycoprotein associated with bovine leukemia virus. / J.M. Miller, M.J. Van der Maaten, M. Phillips // Comm. Europ. Commun. Luxembourg. 1977. - P. 69-82.

144. Miller, L.D. Export testing for enzootic bovine leukosis. / L.D. Miller // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1980. - V. 177. - P. 620-622.

145. Molteni, E. Molecular characterization of a variant of proviral bovine leukaemia virus (BLV). / E. Molteni, A. Agresti, R. Meneveri, A. Marozzi, M. Malcovati, L. Bonizzi, G. Poli, E. Genelli. // J. Vet. Med. B. 1996. -V. 43.-P. 201-211.

146. Mullis, K.B. Specific enzymatic amplification of DNA in vitro: The polymerase chain reaction. / K.B. Mullis, F.A. Faloona, S.J. Scharf, R.K. Saiki, G.T. Horn, H.A. Erlich // Cold Spring Habor Symp. Quant. Biol. 1986. -V. 51.-P. 263-273.

147. Mullis, K.B. Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerasecatalysed chain reaction. / K.B. Mullis, F.A. Faloona // Methods Enzymol. 1987. -V. 155.-P. 335-350.

148. Murtaugh, M.P. Detection of bovine leukemia virus in cattle by the polymerase chain reaction. / M.P. Murtaugh, G.F. Lin, D.L. Haggard, A.F. Weber, J.C. Meiske // J. Virol. Methods. 1991. - V. 33. - P. 73-85.

149. Nagy, D.W. Use of a polymerase chain reaction assay to detect bovine leukosis virus in dairy cattle. / D.W. Nagy, J.W. Tyler, S.B. Kleiboeker, A. Stoker//J. Am. Vet. Med. Assoc. -2003. V. 222. - № 7. - P. 983-985.

150. Naif, H.M. Bovine leukemia proviral DNA detection in cattle using the polymerase chain reaction., / H.M. Naif, R.B. Brandon, R.C.W. Daniel, M.F. Lavin // Vet. Microbiol. 1990.'- V. 25. - P. 117-129.

151. Nguyen, V.K. Evaluation of an enzymo linked immunosorbent assay for detection of antibodies to bovine leukemia virus in serum and milk. / V.K. Nguyen, R.F. Maes // J. Clin. Microbiol. 1993. - V. 31. - P. 979-981.

152. Okada, K. In situ hybridization for the demonstration of bovine leukemia virus transcripts in lymphosarcoma cells using biotinylated probes. / K. Okada, Y. Hosokawa, Y. Aida; K.-I. Ohshima // J. Vet. Med. 1991. - V. 38. - P. 707713.

153. Onuma, M. An ether-sensitive antigen associated with bovine leukemia virus infection / M. Onuma, C. Olson, L.E. Baumgartener, L.D. Pearson // J. Nat. Cancer Inst. 1975. - V. 54. - P. 1199- 1202.

154. Onuma, M. Studies on the sporadic and enzootic forms of bovine leukosis. / M. Onuma, T. Honma, T. Mikami, S, Ichijo, T. Konishi // J. Сотр. Path. — 1979.-V. 89.-P. 159-167.

155. Onuma, Mi. Integration of bovine leukemia virus DNA in the genomes of bovine lymphosarcoma cells. / M. Onuma, N. Sagata, K. Okada, Y. Ogawa, Y. Ikawa, K. Oshima // Microbiol. Immunol. 1982. - V. 26. - P. 813-820.

156. Oroskar, A.A. Detection of immobilized amplicons by ELISA-like techniques. / A.A. Oroskar, S.E. Rasmussen, H.N. Rasmussen, S.R. Rasmussen, B.M. Sullivan, A. Johansson // Clin. Chem. 1996. -V. 42. -P. 1547-1555.

157. Oroszlan, S. Primary structure analysis of the major internal protein p24 of human type С Tcell leukemia virus. / S. Oroszlan, M.G. Sarngadharan,

158. T.D. Copeland, V.S. Kalranaraman, R.V. Gilden, R.C. Gallo // Proc. Natl. Acad. Sci. 1982. - V. 79. - P. 1291-1294.

159. Paul, P.S. Evidence for the replication of bovine leukemia virus in В lymphocytes. / P.S. Paul, K.A. Pomeroy, D.W. Johnson, C.C. Muscoplat, P.S. Handwerger, F.F. Soper, D.K. Sorensen // Am. J. Vet. Res. 1977a. -V. 38.-P. 873-876.

160. Paul, P.S. Detection of bovine leukemia virus in B-lymphocytes by the syncytia induction assay. / P.S. Paul, K.A. Pomeroy, A.E. Castro, D.W. Johnson, C.C. Muscoplat, D.K. Sorensen // J. Natl. Cancer Inst. -1977b. -V. 59.-P. 1269-1272.

161. Poon, H. Detection of bovine leukemia virus RNA in serum using the polymerase chain reaction. / H. Poon, E. Jimenez, R.M. Jacobs, Z. Song, B. Jefferson//J. Virol. Methods. 1993. - V. 41. - P. 101-112.

162. Popov, A. Detection of bovine leukemia provirus by polymerase chain-reaction followed by nonradioactive blot hybridization. / A. Popov, V.A. Adarichev, S.M. Kalachikov, E.S. Mishina, G.M. Dymshits // Voprosy Virusologii. 1993. - V. 38. - P. 113-116.

163. Portetelle, D. Detection of complement-dependent lytic antibodies in sera from bovine leukemia virusinfected animals. / D. Portetelle, C. Bruck, A. Burny, D, Dekegel, M. Mammerickx, J. Urbain // Ann. Rech. Vet. 1978. -V. 9.-P. 667-674.

164. Portetelle, D. Use of two monoclonal antibodies in an ELISA test for the detection of antibodies to bovine leukaemia virus envelope protein gp51. / D. Portetelle, M. Mammerickx, A. Burny // J. Virol. Methods. 1989c. - V. 23. -P. 211-222.

165. Quirke, P. The molekular revolution coming your way soon. / P. Quirke // Gut. - 1992. -V. 33.-P. 1-3.

166. Ressang, A.A. Studies of bovine leukosis VII: Further experience with an ELISA for the detecction of antibodies to bovine leukosis virus. / A.A. Ressang, A.L.J. Gielkens, N. Mastenbroek, J. Quak // Vet. Quarterly. -1981.-V. 3.-P. 31-33.

167. Rice, N.R. The nucleotide sequence of the env gene and post-env region of bovine leukemia virus. / N.R. Rice, R.M. Stephens, D. Couez, J. Deschamps, R. Kettmann, A. Burny, R.V. Gilden // Virology. 1984. - V. 138. - P. 82-93.

168. Rice, N.R. The gag and pol genes of bovine leukemia vims: nucleotide sequence and analysis. / N.R. Rice, R.M. Stephens, A. Burny, R.V. Gilden // Virology. 1985. - V. 142. - P. 357-377.

169. Rola, M. The detection of bovine leukemia vims proviral DNA by PCR-ELISA. / M. Rola, J. Kuzmak // J. Virol. Methods. 2002. - V. 99. - P. 33-40.

170. Rossler, H. Ein verbeserter Test zum Nachweis der reversen Transkriptase des Rinderleukosevirus. / H. Rossler, O. Werner, B. Brescher, W. Wittmann, P. Venker, S. Rosenthal // Arch, exper. Vet. med. 1980. - V. 34. - P. 595615.

171. Rosen, C.A. The 3.region of bovine leukemia virus genome encodes a transactivator protein. / C.A. Rosen, J.G. Sodroski, L. Willems, R. Kettmann, K. Camobell, R. Zaya, A. Burny, W.A. Haseltine // EMBO J. 1986. - V. 5. -P. 2585-2589.

172. Rovnak, J. Assessment of Bovine Leukemia Virus Transcripts In Vivo. / J. Rovnak, J.W. Casey // J. Virol. 1999. - V. 73. № 10. - P. 8890-8897.

173. Rulka, J. TI diagnostic values of 2 antigens in the immunodiffusion test -containing only bovine leukemia (BLV) and comprising BLV plusparainfluenza virus. / J. Rulka, B. Kozaczynska, M. Reichert, E. Buzala // Medycyna Wet. 1994a. - V. 50. - P. 144.

174. Rulka, J. Immunogenicity of enzootic bovine leukemia virus in calves infected with FLK cells and lymphocytes from leucemic cattle. / J. Rulka, J. Stec, B. Kozaczynska, S. Klimentowski // Medycyna Wet. 1994b. -V. 50.-P. 79-81.

175. Sagata, N. Molecular cloning of bovine leukemia virus DNA integrated into the bovine tumor cell genome. / N. Sagata, Y. Ogawa, J. Kawamura, M. Onuma, H. Izawa, Y. Ikawa // Gene. 1983. - V. 26. - P. 1-10.

176. Saiki, R.K. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA-polymerase. / R.K. Saiki, D.H. Gelfand, S. Stoffel, S.J. Scharf, R. Higuchi, G.T. Horn, K.B. Mullis, H.A. Erlich // Science. 1988. -V. 239.-P. 487-491.

177. Sambrook, J. Molekular cloning: A laboratory manual, 2nd ed. / J. Sambrook, E.F. Fritsch, T. Maniatis // Cold Spring Habor Laboratory Press: New York, 1989.

178. Schramm, G. Fallstudie uber den Einflu. von Leukose und Leukosebekampfungsma.nahmen auf die Produktions- und Reproduktionsleistungen einer Milchviehherde in Cost Rica. / G. Schramm, A. Aragon // Tierarztl. Umschau. 1994. - V. 49. - P. 26-31.

179. Schwartz, I. Pathobiology of bovine leukemia-virus. /1. Schwartz, D. Levy // Vet. Res. 1994. - V. 25. - P. 521-536.

180. Stott, M.L. Integrated bovine leukosis proviral DNA in T helper and T cytotoxic/supressor lymphocytes. / M.L. Stott, M.C. Thurmond, StJ. Dunn, B.I. Osburn, J.L. Stott // J. Gen. Virol. 1991. - V. 72. - P. 307-315.

181. Straub, O.C. Horizontal transmission studies on enzootic bovine leukosis. / O.C. Straub // Ann. Rech. Vet. 1978. - V. 9. - P. 809-813.

182. Tajima, S. Complete bovine leukemia virus (BLV) provirus is conserved in BLV-infected cattle throughout the course of B-cell lymphosarcoma development. / S. Tajima, Y. Ikawa, Y. Aida. // Journal of Virology. -1998. -V. 72.-№9.-P. 7569-7576.

183. Tajima, S. Mutant tax protein from bovine leukemia virus with enhanced ability to activate the expression of c-fos. / S. Tajima, Y. Aida // J. Virol. -2002. V. 76. - P. 2557-2562.

184. Thurmond, M.C. Decay of colostral antibodies to bovine leukemia vims with application to detection of calfhood infection. / M.C. Thurmond, R.L. Carter, D.M. Puhr, M.J. Burridge // Am. J. Vet. Res. 1982. - V. 43. -P. 1152-1155.

185. Uckert, W. Proteins of bovine leukemia virus: pi5 is the major phosphoprotein. / W. Uckert, V. Wunderlich // Acta biol. med. germ. 1979. -V. 38.-P. 35-42.

186. Ulrich, R. Synthesis of Bovine Leukemia-Virus Antigens in Escherichia-Coli. / R. Ulrich, H. Siakkou, C. Platzer et al. // Arch, exper. Vet. med. -1990. V. 44, № 6. - P. 909-916.

187. Ulrich, R. Expression of Bovine Leukemia-Virus Antigens Fused to Ms2 Polymerase in Escherichia-Coli. / R. Ulrich, S. Bahring, H. Siakkou, S. Rosenthal // Acta virologica. 1991. - V. 35, № 4. - P. 391-395.

188. Walker, P.J. A protein immunoblot test for detection of bovine leukemia virus p24 antibody in cattle and experimentally infected sheep. / P.J. Walker, J.B. Molloy, B.J. Rodwell // J. Virol. Methods. 1987. - V. 15. - P. 201-211.

189. Wang, H. Analysis of bovine leukemia virus gag membrane targeting and late domain function. / H. Wang, K.M. Norris, L.M. Mansky // J. Virol. -2002. V. 76. № 16. - P. 8485-8493.

190. Weber, R. PCR in der Diagnostik. In: M. Wink und H. Wehrle (eds.): PCR im medizinischen and biologischen Labor. / R. Weber and H. Wehrle // GIT: Darmstadt, 1. Aufl. 1994. - P. 97-136.

191. Willems, L. The bovine leukemia virus p34 is a transactivator protein. / L. Willems, A. Gegonne, G. Chen, A. Burny, R. Kettmann, J. Ghysdael // EMBO J. 1987. - V. 6. - P. 3385-3389.

192. Willems, L. In vivo transfection of bovine leukemia provirus into sheep. / L. Willems, D. Portetelle, P. Kerkhofs, G. Chen, A. Burny, M. Mammerickx, R. Kettmann//Virology. 1992. - V. 189. - P. 775-777.

193. Willems, L. In vivo infection of sheep by bovine leukemia-virus mutants. / L. Willems, R. Kettmann, F. Dequiedt, D. Portetelle, V. Voneche, I. Cornil, P. Kerkhofs, A. Burny, M. Mammerickx // J. Virol. 1993a. - V. 67. -P. 4078-4085.

194. Willems, L. Bovine leukemia virus, an animal model for the study of intrastrain variability. / L. Willems, E. Thienpont, P. Kerkhofs, A. Burny, M. Mammerickx, R. Kettmann // J. Virol. 1993b. - V. 67. - P. 1086-1089.

195. Willems, L. Attenuation of bovine leukemia-virus by deletion of R3 and G4 open reading frames. / L. Willems, P. Kerkhofs, F. Dequiedt, D. Portetelle // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1994. - V. 91.-P. 11532-11536.

196. Williams, D.L. Enumeration of T and В lymphocytes in bovine leukemia virus infected cattle, using monoclonal antibodies. / D.L. Williams, G.F. Amborski, W.C. Davis // Am. J. Vet. Res. 1988a. - V. 49. - P. 10981103.

197. Williams, D.L. Molecular studies of T-lymphocytes from cattle infected with bovine leukemia virus. / D.L. Williams, O. Barta, G. Amborski // Vet. Immunol. Immunopathol. 1988b. - V. 19. - P. 307-323.

198. Wittmann, W. Leukosen der Wiederkauer. / W. Wittmann // Gustav Fischer Verlag, Jena Stuttgart. 1993. - P. 1-259.

199. Wyatt, C.R. Persistent infection of rabbits with bovine leukemia virus associated with development of immune dysfunction. / C.R. Wyatt, D. Wingett,

200. J.S. White, C.D. Buck, D. Knowles, R. Reeves, N.S. Magnuson // J. Virol. -1989.-V. 63.-P. 4498-4506.

201. Yoshinaka, Y. Bovine leukemia virus postenvelope gene coded protein: Evidence for expression in natural infection. / Y. Yoshinaka, S. Oroszlan // Biochem. Biophys. Res. Com. 1985. - P. 131, 347-354.

202. Yoshinaka, Y. Bovine leukemia virus protease: purification, chemical analysis and in vitro processing of gag precursor polyproteins. / Y. Yoshinaka, I. Katoh, T. Copeland, G.W. Smythers, S. Oroszlan // J. Virol. 1986. -V. 57.-P. 826-832.

203. Zabransky, A. Study of the Proteinase from bovine leukemia virus. / A. Zabransky // Fol. biol. (Praha). 1993. - V. 41. - P. 201-212.