Оценка бектерицидной активности биологических жидкостей в норме и при патологии с помощью лазерной проточной цитометрии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Будихина, Анна Сергеевна

• Будихина, Анна Сергеевна
• кандидат медицинских наук
• 0

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Будихина, Анна Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Неспецифическая защита макроорганизма от микроорганизмов.

Сыворотка крови - биологическая жидкость с бактерицидными свойствами.

Слюна - биологическая жидкость с бактерицидной активностью.

Основные антимикробные протеины и пептиды биологических жидкостей.

Антимикробные протеины.

Антибактериальные пептиды.

Механизм действия катионных пептидов.

Мембранные взаимодействия антибактериальных пептидов.

Внутриклеточные мишени антибактериальных пептидов.

Роль антимикробных пептидов при заболеваниях человека.

Заболевания, связанные с нарушениями иммунной системы.

Заболевания, связанные с дефицитом иммуноглобулинов.

Заболевания с дефицитом компонентов комплемента.

Хроническая гранулематозная болезнь.

Хронический рецидивирующий фурункулез.

Множественная миелома.

Хронический рецидивирующий афтозный стоматит.

Красный плоский лишай.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Характеристика обследованных групп населения.

Реактивы и оборудование.

Реактивы.

Оборудование.

Приготовление образцов биологических жидкостей.

Оценка бактерицидного действия биологических жидкостей методом проточной лазерной цитометрии.

Оценка бактерицидной активности биологических жидкостей бактериологическим методом.

Фотометрический метод оценки ингибирующей рост бактериальной культуры активности сыворотки крови.

Определение активности лизоцима в слюне.

Выделение лейкоцитов на желатине.

Оценка внутриклеточного содержания а-дефензинов в лейкоцитарной суспензии

Определение содержания дефензинов в плазме крови.

Определение содержания С4-компонента комплемента в сыворотке крови.

Статистическая обработка результатов.

Использованные в работе компьютерные программы и компьютерные базы данных.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

Оценка бактерицидной активности биологических жидкостей с помощью проточной цитофлюориметрии.

Бактерицидная активность биологических жидкостей доноров.

Влияние разведения биологических жидкостей на их бактерицидную активность.

Влияние прогревания биологических жидкостей на их бактерицидную активность.

Корреляционный анализ метода проточной лазерной цитометрии с бактериологическим методом оценки бактерицидное™ биологических жидкостей.;.

Корреляционный анализ метода проточной лазерной цитометрии с фотометрическим методом оценки бактерицидности биологических жидкостей.

Оценка бактерицидной активности биологических жидкостей при патологиях иммунной системы.

Оценка бактерицидной активности сыворотки крови больных с агаммаглобулинемией.

Оценка бактерицидной активности сыворотки крови больных с дефицитом системы комплемента.

Оценка бактерицидной активности сыворотки крови больных хронической гранулематозноп болезнью

Оценка бактерицидной активности сыворотки крови у больных хроническим рецидивирующим фурункулезом.

Оценка бактерицидной активности сыворотки крови у больных множественной миеломой.

Оценка бактерицидной активности слюны при хроническом рецидивирующем афтозном стоматите.

Оценка бактерицидной активности слюны при красном плоском лишае.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка бектерицидной активности биологических жидкостей в норме и при патологии с помощью лазерной проточной цитометрии»

Оценка иммунного статуса человека - одна из главнейших задач клинической иммунологии, которая заключается в определении состояния гуморальных и клеточных звеньев иммунитета, а так же местного иммунитета. Поэтому для получения наиболее полной картины о патологическом процессе, о динамике его течения необходимо разрабатывать и внедрять в клиническую лабораторную практику новые простые в исполнении методы исследования, а так же усовершенствовать уже имеющиеся.

Бактерицидные свойства крови и других биологических жидкостей организма играют важную роль в защите организма от инфекции. Бактерицидные свойства сыворотки крови обусловлены как иммунными так и не иммунными механизмами. К первым относится бактериолитический эффект антител и комплемента, ко вторым - различные бактерицидные белки и антибактериальные пептиды [Caccavo D., et al., 2002, Ginsburg I. 2002; Li Y. M., et al., 1998]. Способность организма убивать микробы является важным параметром в оценке иммунного статуса человека в норме и при патологии. Ослабление бактерицидности сыворотки способствует повышению чувствительности к инфекциям [Jankowski S., 1995].

Ротовая полость является входными воротами инфекции. Слизистая оболочка ротовой полости является важным барьером на пути проникновения микробов. Слюна играет важную роль в обеспечении гомеостаза ротовой полости. Слюна содержит большое число протеинов (лизоцим, лактоферрин, лактопероксидаза, иммуноглобулины, муцины, агглютинины и др.) и пептидов (гистатины, дефензины, кателицидины), обладающих антимикробными свойствами. По данным Andoh A., Fujiyama Y. и сотр. в слюне содержатся и активные компоненты системы комплемента, которые так лее могут участвовать в местных иммунных и воспалительных ответах в ротовой полости [Andoh А., Fujiyama Y., et al., 1997].

Использование проточной лазерной цитометрии на сегодняшний день является идеальным методическим подходом для оценки бактерицидных свойствбиологических жидкостей. По сравнению с другими методами (бактериологическим, спектрофотометрическим, радиобиологическим),позволяющими оценить этот показатель, цитометрия имеет существенные преимущества: высокая скорость и точность измерения, объективность, простота постановки реакции и быстрое получение результата.

Цель работыЦелью работы явилось оценить бактерицидную активность биологических жидкостей in vitro с помощью цитометрического метода в норме и при различных патологиях.

Задачи исследования:1. Разработать цитофлюориметрический метод определения бактерицидной активности биологических жидкостей.

2. Исследовать бактерицидную активность сыворотки периферической крови и слюны здоровых доноров in vitro для определения интервалов нормальных значений показателей.

3. Оценить влияние времени инкубации на бактерицидную активность биологических жидкостей in vitro.

4. Оценить вклад комплемента в бактерицидность биологических жидкостей in vitro.

5. Исследовать бактерицидную активность сыворотки крови у больных с нарушениями в иммунной системе и бактерицидную активность слюны у больных с воспалительными заболеваниями ротовой полости.

Научная новизнаВпервые предложена и внедрена в клиническую практику модифицированная цитометрическая методика для оценки киллинга St. aureus Cowan I биологическими жидкостями человека с использованием двойной метки ФИТЦ+-ПИ+.

С помощью предложенного нового метода исследована бактерицидная активность сыворотки крови и слюны в норме и при патологиях, а так же количественно оценен вклад системы комплемента и антител в процесс бактериолиза, индуцированного биологическими жидкостями.

Продемонстрировано, что при нарушениях в гуморальном звене (при агаммаглобулинемии, при дефиците компонентов системы комплемента, при множественной миеломе) происходит уменьшение бактерицидности. Кроме того, показано, что уменьшение бактерицидности сыворотки крови зависит от иммунохимического варианта множественной миеломы.

Впервые показано, что у детей с ХГБ и у пациентов с ХРФ в стадии обострения бактерицидная активность сыворотки крови увеличена. Увеличение бактерицидности у детей с ХГБ, возможно, связано с увеличением в сыворотке крови а- дефензинов.

Впервые использован цитометрический подход для оценки местного иммунитета при воспалительных заболеваниях ротовой полости. Было показано, что бактерицидная активность слюны увеличивается у больных с хроническим афтозным стоматитом и уменьшается при прогрессировании заболевания (при появлении эрозий и язв), а так же, на примере больных с красным плоским лишаем, отмечено, что бактерицидность слюны зависит от формы заболевания.

Практическая значимость работыРазработанный метод оценки бактерицидного действия биологических жидкостей подтвержден другими методами исследований. Тесты просты в исполнении, поэтому их можно использовать для поточных исследований в лаборатории клинической иммунологии. Набраны нормативные показатели бактерицидности биологических жидкостей (сыворотки крови и слюны).

На примере различных патологий показана возможность исследования бактерицидности биологических жидкостей с помощью проточной цитофлюориметрии. Цитометрический метод оценки бактерицидностибиологических жидкостей является перспективным в комплексе методов оценки иммунной системы человека.

Определение бактерицидной активности биологических жидкостей может быть полезным для диагностики состояния иммунной защиты организма, а так же при мониторинге за течением инфекционных и воспалительных заболеваний, для оценки эффективности проводимой терапии. А так же возможно использование этого метода для отбора высоко эффективных сывороток и плазм на станциях переливания крови.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Будихина, Анна Сергеевна

выводы

1. Предложен новый метод для оценки бактерицидности биологических жидкостей с помощью проточной лазерной цитометрии, заключающийся в двойном окрашивании флюорохромами бактерий, удобный для поточных исследований в практике лабораторий клинической иммунологии. Результаты цитометрического метода высоко коррелировали с результатами бактериологического метода (г = 0,84, при р< 0,05) и фотометрического метода (г = 0,92, при р< 0,05).

2. При исследовании группы здоровых доноров определены нормативные значения показателя бактерицидности сыворотки крови и слюны 20,98±6,2% и 23,8±9,0%, соответственно.

3. Имеются отличия в бактерицидном действии сыворотки крови и слюны: в первом случае максимальный эффект достигается через 3 часа, во втором -через 24 часа.

4. Бактерицидная активность сыворотки крови складывается из эффекта термолабильных (44%) и из термостабильных (56%) компонентов, а бактерицидность слюны определяется только термостабильными компонентами.

5. У больных с агаммаглобулинемией, с дефектом системы комплемента и с и 1§М - вариантами множественной миеломы наблюдается снижение бактерицидной активности сыворотки крови, тогда как, у больных с хроническим рецидивирующим фурункулезом и хронической гранулематозной болезнью - существенное повышение.

6. У больных хроническим афтозным стоматитом наблюдается увеличение бактерицидной активности слюны, у пациентов с эрозиями слизистой рта и с красным плоским лишаем - снижение.

7. Оценка бактерицидных свойств крови доноров может использоваться на станциях переливания крови для отбора сывороток, обладающих максимальными протективными свойствами.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Будихина, Анна Сергеевна, 0 год

1. Абдулкадырова К. М. Гематология: Новейший справочник. СПб., "Сова", 2004.

2. Воробьев А. И. Справочник практического врача. М., "ОНИКС 21 век" "Мир и Образование", 2003.

3. Гамалея Н. Ф. Учебник медицинской микробиологии. М., "НАРКОМЗДРАВ СССР Медгиз", 1943.

4. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М., "Практика", 1999.

5. Йегера Л. Клиническая иммунология и аллергология. М., "Медицина", 1990.

6. Кондратенко И. В., Резник И. Б. Первичные иммунодефициты. Вопросы гематологии, онкологии и иммунопатологии в педиатрии, 2002, т.1, №2, с. 40-46.

7. Михайлова Н. А., Биткова Е. Е., Скала Л. 3. Оценка антимикробного потенциала иммунных сывороток. Журн. Микробиология, 2005, №6, с.34-38.

8. Покровский В. М., Коротько Г. Ф. Физиология человека: Учебник. М, "Медицина", 1999.

9. Резникова Л.С. Комплемент и его значение в иммунологических реакциях. М., "Медицина", 1967.

10. Ю.Сетдикова Н.Х. Иммуномодуляторы в комплексной терапии иммунокомпроментированных пациентов. Диссертация. д-ра мед. наук. М., 2002.

11. Скала Л. 3., Нехорошева А. Г., Лукин И. Н. Современные технологии в клинической микробиологии и химиотерапии. Автоматизированное рабочее место врача-микробиолога, химиотерпевта и эпидемиолога. Клин, лаб. диагн., 2001, №12, с.25-33.

12. Смирнов В. С., Фрейдлин И. С. Имму но дефицитные состояния. СПб., "Фолиант", 2000.

13. Тельнюк Я. И., Сетдикова Н. X., Пинегин Б. В. Изучение особенностей функционирования иммунной системы у больных рецидивирующим фурункулезом. Иммунология, 2002, № 4, с.218-220.

14. Хаитов Р. М., Игнатьева Г. А., Сидорович И. Г. Иммунология Учебник. М., "Медицина", 2002.

15. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Вторичные иммунодефицита: диагностика и иммунотерапия. Лечащий врач, 1999, № 2-3, с.63-69.

16. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Вторичные иммунодефицита: клиника, диагностика, лечение. Иммунология, 1999, № 1, с.14-17.

17. Ярилин А. А. Основы иммунологии: Учебник. М., " Медицина ", 1999.

18. Ярцев М. Н., Яковлева К. П. Регистр первичных иммунодефицитных состояний института иммунологии МЗ РФ. Физиология и патология иммунной системы, 2004, №2, с. 11-19.

19. Ярцев М.Н., Яковлева К.П. Иммунная недостаточность: клинико-лабораторная оценка. Иммунология, 2005, № 1, с.36-44.

20. Ahmad M., Piludu M., Oppenheim F. G., Helmerhorst E. J., Hand A. R. Immunocytochemical localization of histatins in human salivary glands. J. Histochem Cytochem Pharmacol, 2004, v.52, N3, p.361-70.

21. Antinyazar H. C., Gurel А., Коса R., Armutcu F., Unalacak M. The status of oxidants and antioxidants in the neutrophils of patients with recurrent aphthous stomatitis. Turk J. Med Sci, 2006, v.36, p.87-91.

22. Andoh A., Fujiyama Y., Kimura Т., Uchihara H., Sakumoto H., Okabe H., Bamba T. Molecular characterization of complement components (СЗ, C4, and factor B) in human saliva. J. Clin Immunol, 1997, v. 17, N 5, p.4004-4007.

23. Bals R. Epitelial antimicrobial peptides in host defense against infection. Respir. Res., 2000, v.l, N3,p.l41-150.

24. Boman H. G. Peptide antibiotics and their role in innate immunity. Annu. Rev. Immunol, 1995, v.13, p.61-92.

25. Borregaard N., Kjeldsen L., Lollike K., Sengelov H. Granules and secretory vesicles of the human neutrophil. J. Clin. Exp. Immunol., 1995, v. 101, p.6-9.

26. Brogden K. A. Antimicrobial peptides: pore formers or metabolic inhibitors in bacteria? Nature reviews microbiology, 2005, v.3, p.238-250.

27. Caccavo D., Pellegrino N. M., Altamura M., Rigon A., Amati L., Amoroso A., Jirillo E. Antimicrobial and immunoregulatory functions of lactoferrin and its potential therapeutic application. J. Endotoxin Res., 2002, v.8, N6, p.403-17.

28. Chang T. L., Vargas J., DelPortillo A., Klotman M. E. Dual role of a-defensins-1 in anti-HIV-1 innate immunity. J. Clin. Invest., 2005, v.l 15, N 3, p.765-773.

29. Chertov O., Yang D., Howard O. M. Z., Oppenheim J. J. Leukocytes granule proteins mobilize innate host defenses and adaptive immune responses. Immunological. Reviews, 2000, v.l77, p.68-78.

30. Cole A. M. Antimicrobial peptide microbicides targeting HIV. Protein and Peptide Letters, 2005, v.12, p.41-47.

31. Cole A. M., Waring A. J. The role of defensins in lung biology and therapy. Am. J. Respir., 2002, v. 1, N4, p.249-59.

32. Conneely O. M Antiinflammatory activities of Lactoferrin. J. of the American College of Nutrition, 2001, v.20, N5, p.389-395.

33. Cooper M. A., Pommering T. L., Korányi K. Primary Immunodeficiencies. Am. Fam. Physician, 2003, v.68, N10, p.2001-2011.

34. Dale B. V., Fredericks L. P. Antimicrobial peptides in oral environment: expression and function in Health and disease. Curr. Issues. Mol. Biol., 2005, v.7, N2, p.119-133.

35. Dennison S. R., Wallace J., Harris F., Phoenix D. Amphiphilic a-helical antimicrobial peptides and their structure, function relationships. Protein and Peptide Letters, 2005, v. 12, p.31-39.

36. Devine D. A., Hancock R. E. W., Cationic Peptides: Distribution and mechanisms of resistance. Current Pharmaceutical. Design, 2002, v.8, p.703-714.

37. Dinauer M. C. Chronic granulomatous disease and other disorders of phagocyte function. Hematology, 2005, v.l, p.89-95.

38. Fierer J., Finley F., Braude A. I., Release of C51-endotoxin from bacteria as assay of serum bactericidal activity. J. Immunol., 1974, v.l 12, p.2184-2192.

39. Gallo R. L., Nizet V. Endogenous production of antimicrobial, paptides in innate immunity and human disease. Current Allergy and Asthma reports, 2003, v.3, p.402-409.

40. Ganz T. Defensins: antimicrobial peptides of innate immunity. Immunology, 2003, v.3, p.710-720.

41. Ganz T. Antimicrobial polypeptides in host defense of respiratory tract. Immunology. J. Clin. Invest, 2002, v. 109, N6, p.693-697.

42. Gandara B. K., Isutsu K. T., Truelove E. L., Mandel I. D., Sommers E. E., Ensign W. Y. Sial.ochemictry of Whole? Parotid? And Labial minor gland saliva inpatients with oral lichen planus. J. Dent. Res., 1987, v.66, N 11, p.1619-1622.

43. Ginsburg I. Bactericidal cationic peptides can also function as bacteriolysis-inducting agents mimicking beta-lactam antibiotics? It is enigmatic why this concept is consistently disregarded. Medical. Hypotheses, 2004, v.62, p.367-374.

44. Ginsburg I. The role of bacteriolysis in the pathophysiology of inflammation? Infection and post- infection sequelae. APMIS, 2002, v.l 10, N11, p.753-770.

45. Gronroos J. O., Laine Veli J. O., Nevalainen T. J. Bactericidal group IIA phospholipase A2 in serum of patients with bactericidal infections. The Journal of Infectious Dideases, 2002, v.185, p.1767-1772.

46. Gudmundsson G. H., Agerberth B. Neutrophil antibacterial peptides, multifunctional effector molecules in the mammalian immune system. J. Immunological. Methods, 1999, v. 232, p.45-54.

47. Helmerhorst E. J., Troxler R. F., Oppenheim F. G. The human salivary peptide histatin 5 exerts its antifungal activity through the formation of reactive oxygen species. Microbiology, 2001, v. 98, N 25, p. 14637-14642.

48. Hiemstra P. S., van Wetering S., Stolk J. Neutrophils serine proteinases and defensins in chronic obstructive pulmonary disease: effects on pulmonary epithelium. J. Eur. Respir., 1998, v.12, p.1200-1208.

49. Jankowski S. The role of complement and antibodies in impaired bactericidal activity of neonatal sera against gram-negativa bacteria. Acta Microbiol. Pol., 1995, v.44, N1, p.5-14.

50. Jenssen H., Hamill P., and Hancock R. E. W. Peptide antimicrobial agents. Clinica. microbiology reviews, 2006, v. 19, N3, p.491-511.

51. Johnston R.B. Clinical aspects of chronic granulomatous disease. Curr. Opin. Hematol., 2001, v. 8, N1, p.17-22.

52. Kaufman E., Lamster I. B. Analisis of sal.iva for periodontal diagnosis. J. Clin. Periodontol., 2000, v.27, p.453-465.

53. Kavanagh K., Dowd S. Histatins: antimicrobial peptides with therapeutic potential. J. Pharm. Pharmacol., 2004, v.56, N3, p.285-289.

54. Levy O. Antimicrobial proteins and peptides: anti-infective molecules of mammalian leukocytes. J. of Leukocyte Biology, 2004, v.76, p.909-926.

55. Levy O. Antimicrobial proteins and peptides of blood: templates for novel antimicrobial agents. Blood, 2000, v.96, N8, p.2664-2672.

56. Levy O. A neutrophil-derived anti-infective molecule: bactericidal/permeability — increasing protein. Antimicrobial agents and chemotherapy, 2000, v.44, N11, p.2925-2931.

57. Levy O., Canny G., Serhan C.N. and Colgan S.P. Expression of BPI (bactericidal/permeability-increasing protein) in human mucosal epithelia. Biochemical. Society Transactions, 2003, v.31, N4, p.795-800.

58. Li Y. M. Glycation ligand binding motif in lactoferrin. Implications in diabetic infection. Adv. Exp. Med. Biol., 1998, v.443, p.57-63.

59. Liese J. H., Jendrossek V., Jansson A., Pertopolou T., Kloss S., Gahr M., Belohradsky B. H. Chronic. granulomatous disease in adults. Lancet, 1996, v.347, N8996, p.220-223.

60. Lim M. S. and Elenitoba-Johnson K. S. J. The Molecular Pathology of Primary Immunodeficiencies. Journal of Molecular Diagnostics, 2004, v.6, N2, p.59-83.

61. Lukac J., Mravak-Stipetic M., Knezevik M., Sistig S., Ledinsky M., Kusic Z. Phagocytic functions of salivary neutrophils in oral, mucous membrane diseases. J. Oral. Pathol. Med., 2003, v.32, p.271-274.

62. Muschel L. H., Treffers H. P., J. Immunol., 1956, v.76, N1, p.11-20.

63. Mcphee J. B., Hancock R. E. W. Function and therapeutic potential of host defence peptides. J. Peptide Sci., 2005, v.ll, p.677-687.

64. Newburger P. E. Disorders of neutrophil number and function. Hematology, 2005, v.l, p.104-110.

65. Nieuw Amerongen A. V., Bolscher J. G. M., Veerman E. C. I. Salivary proteins: protective and diagnostic value in cariology? Caries Research, 2004, v.38, p.247-253.

66. Nieuw Amerongen A. V., Veerman E. C. I. Saliva the defender or oral cavity. Oral. Dis., 2002, v.8, p. 12-22.76.0tvos L. Antimicrobial peptides and proteins with multiple cellular targets. J. Peptide Sci., 2005, v.ll, p.697-706.

67. Panyutich A.V., Panyutich E.A., Krapivin V.A., Baturevich E.A., Ganz T. Plasma defensin concentrations are elevated in patients with septicemia or bacterial meningitis. J. Lab. Clin. Med. 1993, v. 122, p.202-207.

68. Pauline P. W., Uribe-Luna S., Conneely O.M. Lactoferrin and host defense. Biochem. Cell Biol., 2002, v.80, p.95-102.

69. Ratner A. J., Prince A. Lactoperoxidase new recognition of an «old» enzyme in airway defenses. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 1999, v.20, p.642-644.

70. Rogan M. P., Geraghty P., Greene C. M., O'Neill S. J., Taggart C. C. and McElvaney N. G. Antimicrobial proteins and polypeptides in pulmonary innate defense. J. Respiratory Res., 2006, v. 17, p.7-29.

71. Ruissen A. L. A., Groenink J., Helmerhorst E. J., Walgreen-Weterings E., Van't Hof W., Veerman E. C. I., Niuew Amerongen A. V. Effects of histatin 5 and derived peptides on Candida albicans. J. Biochem., 2001, v.356, p.361-368.

72. Sahl H. G., Pag U., Bonness S., Wanger S., Antcheva N.,Tossi A. Mammalian defensins: structures and mechanism of antibiotic activity. J. of Leukocyte Biology, 2005, v.77, p.466-475.

73. Saresella M., Roda K., Speciale L., Taramelli D., Mendozzi E., Guerini F. and Ferrante P. A flow cytometric method for the analysis of phagocytosis and killing by polymorphonuclear leukocytes. Ann. N.Y. Acad. Sci., 1997, v. 832, p.53-61.

74. Schutte B. C., McCray P. B. Jr. P Defensins in lung host defense. Annu. Rev. Physiol., 2002, v.64, p.709-48.

75. Scully C., Beyli M., Ferrero M. C. Update on oral lichen planus: etiopathogenesis and management. Crit. Rev. Oral. Big. Med., 1998, v.9, p.86-122.

76. Selsted M. E., Brown D. M., DeLange R. I., Lehrer R. I. Primary structures of MCP-1 and MCP-2, natural peptide antibiotics of rabbit lung macrophages. J. Cell Biol. Chem., 1983, v.258, p.14485-14489.

77. Sorensen O. E. The human cathelicidin hCAP-18. Dan. Med. Bull., 2005, v.52, p.1-10.

78. Sorensen O., Borregaard N. Methods for quantitation of human neutrophil proteins, a survey. The Journal of Immunological methods, 1999, v.232, p.179-190.

79. Starner T. D., Agerberth B., Gudmundsson G. H., McCray P. B. Jr. Expression and activity of {beta}-defensins and LL-37 in the developing human lung. J. Immunol., 2005, v.174, N3, p.1608-15.

80. Stiehm E. R., Johnston R. B. Jr. A History of Pediatric Immunology. Pediatr. Res., 2005, v.57, N3, p.458-467.

81. Tanida T., Okamoto T., Okamoto A., Wang H., Hamada T., Ueta E., Osaki T. Decreased excretion of antimicrobial proteins and peptides in saliva of patients with oral candidacies. Oral. Pathol. Med., 2003, v.32, N10, p.586-94.

82. Taylor P. W. Bactericidal and bacteriolytic activity of serum against Gramnegative bacteria. Microbiological. Reviews, 1983, v.47, N1, p.46-83.

83. Tjabringa S., Rabe K. F., Hiemstra P. S. The Human cathelicidin LL-37: multifunctional peptide involved in infection and inflammation in the lung. Pulmonary pharmacology and therapeutics, 2005, v. 18, p.321-327.

84. Tjabringa S., Voost J. B., Olthuis D., Ninaber D. K., Rabe K. F., Schalkwijk J., Hiemstra P. S. Zeeuwen P. L. J. M. Host defense effector molecules in mucosal, secretions. Immunology and medical. Microbiology, 2005, v.45, p.151-158.

85. Van Wetering S., Tjabringa S., Hiemstra P. S. Interaction between neurtophil-delided antimicrobial peptides and airway epithelial cells J. of Leukocyte Biology, 2005, v.77, p.444-450.

86. Weinrauch Y., Abad C., Liang N., Lowry S. F., Weiss J. Mobilization of potent plasma bactericidal activity during systemic bacterial challenge role of group IIA phospholipase A. T. Clin. Invest., 1998, v. 102, p.633-638.

87. West N. P., Pyne D. B., Renshaw G., Cripps A. Antimicrobial peptides and proteins? Exercise and innate mucosal immunity. FEMS Immunol. Med. Microbiol., 2006, v.48, p.239-304.

88. Wimvan't HOF, Veermann E. C. I, Helmerhorst E. J., Nieuw Amerongen A. V. Antimicrobial. Peptides: properties and applicability. J. Biochem., 2001, v.382, p.597-619.

89. Wilton D. C. Phospholipase A2: structure and function. Eur. J. Lipid. Sci. Technol., 2005, v. 107, p. 193-205.

90. Wunder D., Dong J., Baev D., Edgerton M. Human Salivary histatin 5 fungicidal action does not induce programmed cell death pathways in Candida albicans. Antimicrobial agents and chemotherapy, 2004, v.48, p.l 10-115.

91. Yang D., Biragyn A., Hoover D. M., Lubkowski J., Oppenheim J. J. Multiple roles of antimicrobial, defensins, cathelicidins, and eosinophil-derived neurotoxin in host defense. Annu. Rev. Immunol., 2004., v.22, p.181-215.

92. Yang D., Biragyn A., Kwak L. W. and Oppenheim J. J. Mammalian Defensins in immunity: more than just microbicidal. TRENDS in Immunology, 2002, v.23, N6, p.987-98.

93. Yang D, Chertov O, Oppenheim J. J. The role of mammalian antimicrobial, peptides and proteins in awakening of innate host defenses and adaptive immunity. Cell Mol. Life Sci., 2000, v. 58, N7, p.978-89.

94. Yount N. Y., Yeaman M. R. Immunoconsiluum: Perspectives in Antimicrobial. Peptide Mechanisms of Action and Resistance Protein and Peptide Letters, 2005, v.12, p.49-67.