ОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ КЛОНАЛЬНОГО МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ ПЕЛАРГОНИИ КОРОЛЕВСКОЙ (Pelargonium grandiflorum (Andrews) Willd.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат наук Корчагина Анна Владимировна

• Корчагина Анна Владимировна
• кандидат наук
• 2016

Оглавление диссертации кандидат наук Корчагина Анна Владимировна

ВВЕДЕНИЕ..........................................................................................................5

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ......................................................................11

1.1. Род Pelargonium L'Herit. - морфологические особенности...................11

1.2. Основные представители рода Pelargonium L'Herit...............................13

1.3. Отношение пеларгонии к факторам окружающей среды......................22

1.4. Клональное микроразмножение растений..............................................24

1.5. Зависимость морфогенеза от генотипа, типа экспланта, состава питательной среды и регуляторов роста........................................................29

1.6. Клональное микроразмножение представителей рода Pelargonium L'Herit..............................................................................................................34

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ...................................42

2.1. Исходный растительный материал..........................................................42

2.2. Условия возделывания донорных растений............................................46

2.3. Схема проведения опытов.......................................................................49

2.4. Методика проведения исследований.......................................................54

2.4.1. Методика лабораторных опытов.......................................................54

2.4.2. Оценка растений-регенерантов.........................................................58

2.4.3. Статистическая обработка данных...................................................62

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ...................................................64

3.1. Оптимизация физиологических факторов, влияющих на морфогенез эксплантов.......................................................................................................64

3.1.1. Выбор типа экспланта пеларгонии королевской для введения в культуру in vitro...........................................................................................64

3.1.2. Влияние срока изоляции эксплантов на их морфогенетическую активность .................................................................................................... 66

3.2. Выбор режима стерилизации для введения эксплантов в культуру in vitro..................................................................................................................67

3.3. Подбор питательных сред для введения эксплантов пеларгонии королевской в культуру in vitro....................................................................... 69

3.4. Оптимизация концентрации и соотношения регуляторов роста для эффективного получения регенерантов пеларгонии королевской ............... 72

3.4.1. Определение концентрации регуляторов роста на этапе введения эксплантов пеларгонии в культуру in vitro.................................................73

3.4.2. Определение оптимальной концентрации регуляторов роста на этапе микроразмножения трансплантов пеларгонии королевской...........79

3.4.3. Влияние кинетина на индукцию морфогенеза эксплантами пеларгонии королевской..............................................................................82

3.5. Изучение влияния аскорбиновой кислоты на морфогенез эксплантов и трансплантов пеларгонии королевской..........................................................85

3.6. Укоренение побегов и адаптация регенерантов пеларгонии королевской к условиям in vivo............................................................................................92

3.7. Влияние длительности культивирования in vitro трансплантов пеларгонии королевской на пролиферацию пазушных почек......................94

Глава 4. ОЦЕНКА РАСТЕНИЙ-РЕГЕНЕРАНТОВ R0 ПЕЛАРГОНИИ КОРОЛЕВСКОЙ................................................................................................97

4.1. Характеристика регенерантов по морфологическим признакам...........98

4.2. Сроки наступления основных фенофаз растений-регенерантов.........101

4.3. Оценка растений-регенерантов по хозяйственно-ценным признакам 102

Глава 5. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДСТВА ОЗДОРОВЛЕННОГО ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА ПЕЛАРГОНИИ КОРОЛЕВСКОЙ В УСЛОВИЯХ IN VITRO....................................................106

ЗАКЛЮЧЕНИЕ................................................................................................109

ВЫВОДЫ..........................................................................................................110

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА ПЕЛАРГОНИИ КОРОЛЕВСКОЙ............111

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ...........................................112

ПРИЛОЖЕНИЯ................................................................................................139

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

Сокращенное название Полное название

ФГБНУ ВНИИО Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт овощеводства"

P grandiflorum P grandiflorum (Andrews) Willd.

БАП 6 - бензиламинопурин

НУК а-нафтилуксусная кислота

К кинетин

ИУК индолилуксусная кислота

MS питательная среда Мурасиге-Скуга (Murahige T., Skoog F., 1962)

BM питательная среда BM (Debergh P., Maene L., 1977)

N азот

K калий

Р фосфор

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «ОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ КЛОНАЛЬНОГО МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ ПЕЛАРГОНИИ КОРОЛЕВСКОЙ (Pelargonium grandiflorum (Andrews) Willd.)»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность. Представители рода Pelargonium L'Herit. издавна имеют большое значение для озеленения. Пеларгонии используются повсеместно в цветниках, в виде горшечных культур в открытом грунте и как комнатные растения в зимний период (Слободчикова Е.С., 2004). Наиболее востребованными на рынке декоративных культур являются Р. zonale (L) L'Herit., P. peltatum (L) L'Herit., P. grandiflorum (Andrews) Willd., а также множество гибридов, полученных на их основе (Key H., 2000).

Среди всех видов пеларгоний наиболее изысканной и распространенной считается пеларгония крупноцветковая, которую также именуют королевской (P grandiflorum или regal) благодаря её крупным цветкам (Van der Walt. J.J.A., 1984; Мохно, В.С., 2014). Венчик достигает 7 см в диаметре, в каждом соцветии может находиться до 10 цветков яркой насыщенной окраски. Палитра цветов представлена всеми оттенками красного: от белоснежного до темно-бордового цвета (Левинских М., 2004).

Ценность пеларгонии королевской обуславливается не только ее богатыми пышными соцветиями с яркими цветками, расположенными на компактном густооблиственном кусте, но и способностью сохранять свои декоративные качества в течение длительного времени. Это достигается за счет постепенного раскрытия бутонов на соцветии, а также равномерного появления новых соцветий по мере отмирания отцветших (Гончарова Е.Ю., 2006, Гутиева Н.М., 2010).

В Российской Федерации доля пеларгонии королевской составляет 15% на рынке декоративных культур (Широкова Н.В., 2006). Основными поставщиками маточного материала являются Голландия и Германия, где проводится большая селекционная работа по созданию новых сортов (Гутиева Н.М., 2014). В последние годы на российском рынке появились новинки английской, австралийской, американской и французской селекции, что позволило расширить сортимент сортов (Мохно В.С., 2014).

В промышленных масштабах P. grandiflorum размножают зелёным черенкованием (Abo El-Nil M.M., 1990). Это традиционный способ получения готового цветущего растения пеларгонии в короткие сроки. При видимых плюсах данного метода существует ряд сложностей, сопровождающих вегетативное размножение этой культуры. И в первую очередь это передача инфекции от материнского растения к дочерней особи, а также низкая доля приживаемости черенков и подверженность заболеваниям, особенно на стадии укоренения (Cassells A.C., 1992; Rajeswara Rao B.R., 2003).

В связи со сложностями, возникающими при традиционном вегетативном размножении пеларгонии, все большую актуальность приобретает клональное микроразмножение данной культуры (Lewu F.B., 2007; Arrigoni-Blank M.F., 2011). Благодаря тщательному отбору и подготовке эксплантов, а в последующем - их культивированию в стерильных условиях in vitro, возможно получить оздоровленный посадочный материал, свободный от бактериальных, грибных и вирусных инфекций, а также увеличить выход высококачественной продукции с единицы площади (Charlwood B.V., 2003).

Особенно применение метода in vitro неоценимо для производства элитных маточников ценных сортов пеларгонии королевской (Wojtania A., 2004). Маточное растение должно быть получено в чистой культуре, сохранять в себе все признаки исходного сорта, быть свободным от болезней и вредителей. Этим требованиям полностью удовлетворяет получение материнских растений методом клонального микроразмножения из апикальных меристем (Шевелуха В.С., 2003).

Степень разработанности темы. В нашей стране и за рубежом по теме размножения P. grandiflorum в культуре in vitro крайне мало разработок, однако имеются исследования по культуре тканей других представителей этого рода, в основном эфироносных пеларгоний, выращиваемых в промышленных масштабах для получения гераниевого масла (Satyakala G., 1995; Rajeswara Rao B.R., 2000; Viateur U., 2012; Егорова Н.А., 2013).

Среди публикаций по размножению P. grandiflorum в условиях in vitro

обнаружены данные Дунбара (Dunbar K.B., 1991) и Ясуги (Yasugi S., Mochiyama Y., 1996) о получении регенерантов этой культуры из каллуса.

В связи с недостаточной информацией по культивированию in vitro пеларгонии королевской и отсутствием методики для получения регенерантов из апикальных тканей, тема оптимизации условий клонального микроразмножения P. grandiflorum является востребованной и актуальной.

Целью исследований являлась оптимизация условий клонального микроразмножения пеларгонии королевской (Pelargonium grandiflorum (Andrews) Willd.) для ускоренного размножения эксплантов апикального происхождения и получения оздоровленного посадочного материала.

Для достижения цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Определить оптимальные сроки изолирования почек с донорных растений, отработать режимы стерилизации.

2. Подобрать оптимальный состав питательных сред для культивирования эксплантов и трансплантов in vitro, а также состав и соотношение регуляторов роста на каждом этапе возделывания микроклонов для индукции морфогенеза и пролиферации пазушных почек.

3. Изучить влияние аскорбиновой кислоты на образование фенолов, а также на морфогенез эксплантов пеларгонии королевской.

4. Определить влияние длительности культивирования трансплантов in vitro на величину коэффициента размножения.

5. Провести оценку полученных регенерантов пеларгонии королевской по основным признакам (морфологическим, фенологическим, хозяйственно-ценным).

Научная новизна работы. Впервые оптимизированы факторы, влияющие на эффективность in vitro культивирования пеларгонии королевской на всех этапах биотехнологического процесса.

Установлено, что культивирование in vitro апексов на среде MS с содержанием БАП в концентрации от 1,5 до 2,0 мг/л и НУК - 0,1 мг/л способствует индукции морфогенеза и позволяет получить 88-96%

морфогенных эксплантов в зависимости от сорта.

Определено, что для пролиферации пазушных почек эффективной является концентрация БАП 1,0 мг/л и НУК - 0,1 мг/л, позволяющая получить от 3,4 до 4,1 побегов на один трансплант.

Показано, что применение раствора аскорбиновой кислоты увеличивает долю эксплантов без видимого проявления фенолов до 95%, а также увеличивает способность побегов к росту в 1,3 раза по сравнению с эксплантами без обработки.

Установлено, что растения-регенеранты соответствуют исследуемым сортам по морфологическим и фенологическим признакам и менее подвержены вертициллёзному увяданию и серой гнили, чем растения, полученные методом черенкования.

Теоретическая и практическая значимость. Оптимизированы условия для размножения пеларгонии королевской in vitro. Усовершенствованные элементы технологии производства ценного посадочного материала являются экономически эффективными. Их применение позволяет получить в год до 1 млн.руб. чистой прибыли при реализации регенерантов P.grandiflorum, выращенных в условиях in vitro из одного экспланта. Полученные оздоровленные растения-регенеранты пеларгонии королевской используются в качестве маточников в тепличном комбинате ООО «ПО Егорьевское».

Методология и методы исследований. Лабораторные исследования проведены с использованием классических и современных методов культуры клеток и тканей in vitro на современном оборудовании. Оценка растений-регенерантов проведена по общепринятым методикам. Полностью методология описана в главе «Объекты и методы исследований».

Степень достоверности результатов. Достоверность полученных результатов подтверждается обширными экспериментальными исследованиями, выбором необходимого количества повторностей и объема выборки в процессе закладки опытов, а также статистической обработкой полученных

данных. Для обработки экспериментальных данных применяли программу Microsoft Word Excel с надстройкой для статистической оценки и анализа результатов полевых и лабораторных опытов «AgCStat» (Гончар-Зайкин П.П., 2003).

Апробация диссертационной работы. О результатах работы был сделан доклад на VIII Международном симпозиуме «Фенольные соединения: фундаментальные и прикладные аспекты» (Москва, 2-5 октября 2012 г.), а также на заседаниях методической комиссии по биотехнологии ФГБНУ ВНИИО (2009-2012 гг.).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

• повышенная концентрация БАП и умеренная - НУК позволяют индуцировать морфогенез на этапе введения эксплантов в культуру in vitro;

• снижение концентрации БАП на этапе размножения трансплантов способствует пролиферации пазушных почек и увеличению коэффициента размножения;

• использование аскорбиновой кислоты в качестве предобработки почек или наличие её в среде позволяет снизить долю эксплантов с образованием фенольных веществ и увеличить способность эксплантов к морфогенезу;

• применение безгормональной среды способствует эффективному укоренению побегов сортов Шоко, Петтикот и Лотос; добавление в среду ИУК увеличивает выход укорененных растений сорта Лавендер;

• полученные in vitro регенеранты пеларгонии королевской обладают признаками, характерными для исходных сортов, и меньше поражаются вертициллёзным увяданием и серой гнилью, чем укорененные черенки.

Публикации результатов исследований. В ходе экспериментальной работы по теме диссертации было опубликовано 5 статей в научных изданиях, в том числе 3 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации.

Структура и объем диссертационной работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературных данных по теме, объектов и методов исследований, результатов исследований и их обсуждения, заключения, выводов, предложений для использования в промышленном производстве, списка использованной литературы (255 источников, среди них 149 работ иностранных авторов, а также ресурсы Интернет). Диссертация изложена на 141 странице, включает в себя 30 таблиц, 20 рисунков, 2 приложения.

Выражаю глубокую признательность своему научному руководителю -доктору биологических наук, профессору Алексею Васильевичу Полякову за чуткое руководство, конструктивные советы и помощь в ходе выполнения настоящей работы.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Род Pelargonium L'Herit. - морфологические особенности

Род Pelargonium L'Herit. - крупнейший в семействе Гераниевых (Geraniaceae). Он является одним из пяти родов данного семейства и включает в себя около 280 видов растений, многие из которых представляют большой интерес как эфиромасличные и декоративные культуры (Van der Walt J.J.A., 1984; Bakker F.T., 2004; Jacqueline Y.Y., 2006).

Родина большинства видов пеларгоний - Южная Африка, где они входят в состав своеобразной Капской флоры. Многие из них являются эндемиками и произрастают только в определенных частях Капской провинции. Также в диком виде пеларгония произрастает в Северной Африке, Австралии, Новой Гвинее и островах Тихого и Атлантического океанов (Hollingsworth P.M., 1999). Представители рода Pelargonium в основном встречаются в саваннах, где растут на каменистых или песчаных почвах или же на выходах горных пород. Значительная их часть - ксерофиты, приспособившиеся к жизни в засушливых условиях и запасающие значительные количества влаги в утолщенных стеблях (Van der Walt J.J.A., P.J. Vorster, 1983; Albers F., Becker M., 2012).

Среди представителей рода Pelargonium имеются растения с различными жизненными формами: травы, полукустарники, кустарники. В декора -тивном озеленении наибольшее распространение получила травянистая форма пеларгоний (Гончарова Е.Ю., 2006). По продолжительности жизненного цикла пеларгонии бывают однолетними, двулетними и многолетними (Lis-Balchin M., 2002).

В естественной среде обитания у представителей рода Pelargonium прямые или ползучие стебли, склонные к ветвлению. Листья красивые, простые, пальчатые или пальчато-рассеченные, с прилистниками, часто с опушением; расположены поочередно или супротивно (Bakker F.T., 2004). Некоторые виды пеларгоний (P sidoides) имеют клубни на корнях, которые

используются в медицинских целях (Lis-Balchin M., 2002; Brendler T., 2008).

Наличие простых или эфироносных волосков является характерным признаком всех представителей рода Pelargonium. Внешне железистые эфироносные образования проявляют себя как опушение практически всех частей растения. Волоски имеют на кончике вздутие, в котором собираются эфирные масла, придающие характерный аромат многим представителям семейства, в первую очередь из группы душистых пеларгоний (Lalli J.Y.Y., 2006).

Цветок у пеларгонии обоеполый, пятичленный, зигоморфный. В зависимости от вида растения, цветки пеларгоний могут иметь различную форму, от звезды до воронки, а также различную окраску: от белого и оранжевого до темно-фиолетового (Хертли Б., 2002; Гончарова Е.Ю., 2006). Цветки собраны в зонтиковидные соцветия на верхушках побегов.

Чашечка пятираздельная, состоит из свободных, иногда сросшихся до середины чашелистиков. Венчик двугубый, пятилепестковый; тычинок 10 (из них обычно 3 без пыльников), расположенных в 2 круга. Завязь пестика верхняя, он возвышается над остальными частями цветка (Hollingsworth P.M., 1999; Комарова Г.В., 2007).

В естественных условиях произрастания пеларгония - перекрестно-опыляемое растение. Для нее характерно опыление с помощью пчел, шмелей, бабочек. У некоторых видов возможно самоопыление. В процессе созревания плода верхняя часть завязи значительно удлиняется (Struck M., 1996).

Плод пеларгонии - коробочка с остающимися чашелистиками, она вскрывается путем отделения гнезд снизу вверх. Плод распадается на 5 односемянных плодиков (Тахтаджан А.Л.,1982).

Анатомия вегетативных органов большинства видов пеларгоний и их гибридов однотипна. Стебель покрыт эпидермой с незначительно утолщён -ной наружной тангенциальной стенкой. В комплекс эпидермы входят многочисленные кроющие и железистые трихомы. Первичная кора представлена пластинчатой колленхимой, хлоренхимой и крахмалоносным

влагалищем. Хорошо выражено склеренхимное кольцо перициклического происхождения. Центральный цилиндр представлен открытыми коллатераль -ными пучками. Мезофилл листа дифференцирован на столбчатый и губчатый. Жилка укреплена уголковой колленхимой и склеренхимными тяжами вдоль проводящих тканей. Имеются два типа железистых образований (волосков) в эпидерме вегетативных органов: мелкие железистые трихомы с одноклеточной головкой и одноклеточной ножкой, крупные железистые трихомы с одноклеточной и длинной многоклеточной ножкой (Лысякова Н.Ю., 2010).

1.2. Основные представители рода Pelargonium L'Herit.

Пеларгонии представляют собой весьма разнородную группу с широким спектром условий и мест произрастания. Это часто создает трудности в описании и классификации этих растений.

Первую попытку систематизировать род Pelargonium предпринял Роберт Свит в 1822 г. При описании семейства Geraniaceae он выделил отдельные роды Geranium, Erodium, Monsonia, Sarcocaulon и Pelargonium, разбив последний на 3 секции: Campylia, Hoarea и Jenkinsonia (Sweet R., 1822).

В дальнейшем было предложено множество секционных классификаций рода Pelargonium, основанных на морфологических признаках различных видов пеларгоний (De Candolle A. P., 1824; Ecklon C. F. & Zeyher K.L., 1835; Harvey W. H., 1860).

Главную таксономическую систематику рода Pelargonium, положенную в основу всех современных классификаций, разработал немецкий уче -ный Кнут (1912). Внутри рода он выделил 15 секций: Hoarea, Seymouria, Polyactium, Otidia, Ligularia, Jenkinsonia, Myrrhidium, Peristera, Campylia, Dibrachya, Eumorpha, Glaucophyllum, Ciconium, Cortusina и Pelargonium.

В 80-е годы ХХ в. учеными в результате кариологических, палинологических, биохимических и хромосомных исследований было произведено разделение рода Pelargonium на 2 подрода. Данная классифика-

ция основана на различном размере хромосом в клетках растений пеларгонии (Albers F., 1984; Gibby M., 1986).

Подрод Ciconium, охватывающий примерно 20% видов пеларгоний, ха-рактеризуется большим размером хромосом (>1,5 нм в длину); представители подрода Pelargonium имеют хромосомы меньшего размера (<1,5 нм). Последний включает 80% видов пеларгоний (Bakker F.T. et al., 2000; 2004).

В последней классификации (которая, однако, не является окончатель -ной) немецким ученым Йоахимом Рошенблеком было полностью пересмотрено таксономическое строение рода (2014). В основу данной классификации легли обширные исследования ДНК, морфологии пыльцы, строения хлоропластов, наличия или отсутствия ряда фенольных соединений, флавоноидов. Многие виды были перемещены из одной секции в другую. Й.Рошенблек разделил род Pelargonium на 4 таксономические группы (англ. clade): A, B, C1 и С2, соответствующие четырем подродам:

•А (подрод Pelargonium L'Her.): Campilia (Sweet) DC., Cortusina Bakker; Poliactium (Eckl. & Zeyh.) DC.; Pelargonium (DC.) Harv.; Otidia (Lindl) Harv.; Magnistipulacea Roeschenbl. & F. Albers; Ligularia (Sweet) Harv.; Hoarea (Sweet) DC.

•B (подрод Parvulipetala Roeschenbl. & F. Albers): Peristera DC.; Reniformia (Knuth) Dreyer; Isopetalum DC.

•C1 (подрод Magnipetala Roeschenbl. & F. Albers): Chorisma Albers; Myrrhidium DS; Jenkinsonia (Sweet) Harv.

•C2 (подрод Paucisignata Roeschenbl. & F. Albers): Ciconium (Sweet) Harv; Subsucculentia J.J.A.Van der Walt. (Ruschenbleck J.et al., 2014).

Данная классификация не противоречит, а только подтверждает более раннее деление рода Pelargonium на подроды на основе размера хромосом, -ветви А и B совпадают подродом Pelargonium с маленькими хромосомами, а ветви С1 и С2 - с подродом Ciconium с большими хромосомами.

Подрод Pelargonium L'Her. (ветвь А)

В подроде Pelargonium представлено 167 видов с маленькими хромосомами, основное число которых Х=11 , у некоторых представителей Х=8, 10 (Weng M.-L. et al., 2012).

Большинство видов произрастает в области зимних осадков в Юго-Западной и Западной области мыса Южной Африки (Bakker F.T. et al, 2004).

В основном это многолетние растения с ксерофитным строением, а также кустарники или полукустарники, реже - однолетние травянистые растения (Bakker F.T. et al., 2000).

Наиболее характерной секцией подрода Pelargonium является секция Pelargonium (DC.) Harv. Она насчитывает 34 вида, произрастающих в регионе зимних осадков в юго-западной, южной и западной части Капской провинции, некоторые виды встречаются северо-западнее, в Зимбабве с летними ливневыми осадками (Van der Walt J.J.A., 1984).

Это виды, различающиеся значительным морфологическим разнообразием, в основном многолетние кустарники или полукустарники с раскидистыми побегами и одревесневающим стеблем. Листорасположение очередное или супротивное, листья простые, пальчатолопастные или перистораздель-ные, либо почти округлые, либо сильнорассеченные, у многих представите -лей с характерным ароматом и опушением. Цветок зигоморфный, состоит из 5-ти лепестков и 7 тычинок, 4 из которых длинные, 1 средняя и 2 короткие. Окраска цветка варьирует от белой и бледно-розовой до темно-фиолетовой (Van der Walt J.J.A., 1984).

В секцию Pelargonium входят некоторые виды, имеющие огромное значение для садоводческой промышленности и для коммерческого производства гераниевого масла. Среди них P. cucullatum (L.) L'Herit. (клобучковая), P. grandiflorum (Andrews) Willd. (крупноцветковая), P. crispum (L.) L'Her (курчавая), P. graveolens L'Herit., на основе которых получено множество современных сортов декоративных пеларгоний.

Одним из наиболее ярких представителей секции Pelargonium является P. grandiflorum. Современные сорта пеларгонии крупноцветковой, которую также именуют королевской, (P. grandiflorum или regal), получены в результате скрещивания пеларгоний двух видов - P. cucullatum и P. grandiflorum. Пеларгония крупноцветковая - это полукустарник высотой почти до 2-ух метров, нижняя часть которого со временем может одревесневать. Стебли тонкие (0,4-0,7 см в диаметре), сочные, покрыты незначительным количеством эфироносных волосков. Листья округлые, 5-7 см, часто складчатые, у некоторых сортов напоминают кленовые, ярко-зеленой окраски, зубчатые или пильчатые по краям, покрытые редким жестким опушением. Многочис -ленные зигоморфные цветки собраны в пышное соцветие-зонтик по 5-7 шт. Лепестков 5, два верхних лепестка обычно крупнее и темнее остальных, а три нижних имеют более яркие контрастирующие тона. Цветки имеют целую гамму оттенков, от белых до более темных - бордовых, пурпурных, сиреневых, малиновых, коричневых и почти черных (Key H., 2000).

В последнее время среди садоводов популярна пеларгония курчавая (Р. crispum) благодаря своим ажурным листьям с легким лимонным ароматом. Это небольшой полукустарничек с прямостоячим, иногда полегающим, стеблем, высотой до 75 см и диаметром куста до 50 см. В ювенильной фазе развития стебель травянистый с зелеными сочными железистыми волосками, но со временем нижняя часть стебля одревесневает, и волоски становятся жесткими. Пеларгония курчавая (от англ. crisp - кудрявый) названа так благодаря морфологии своих листьев: листовая пластина трехдольчатая, с пильчато-зубчатым курчавым краем, сильноопушенная, до 15 мм в диаметре. Зигоморфные цветки небольшие, до 1 см в диаметре, имеют 5 лепестков, 2 верхних крупнее нижних, загнуты в форме ложки. Окраска лепестков варьирует от белой до темно-розовой (Van der Walt. J.J.A., 1984). Пеларгония курчавая является родоначальником большинства душистых сортов, а также представителей группы «ангелов» (angel) (Cooke B., 2014).

Пеларгонии группы angel (ангел, виолоцветная) - это гибрид,

полученный в результате скрещиваний пеларгонии крупноцветковой (P. grandiflorum) и пеларгонии курчавой (P. crispum). Это сильноветвистые кустарнички высотой до 30 см с ажурной листвой и прямостоячими или поникающими побегами. Яркие крупные цветки (2-4 см), собранные в зонтиковидное соцветие, похожи на цветки виолы: два верхних лепестка значительно крупнее трех нижних и имеют более темную окраску. Число цветков на одном растении так велико, что иногда они почти скрывают листья. Эти растения великолепны для подвесных кашпо и оконных ящиков благодаря ниспадающим побегам. А прямостоячие формы прекрасно смотрятся в декоративных горшках и в садовых композициях (Brawner F., 2003).

Если вышеописанные виды и гибриды пеларгоний имеют только декоративное применение, то P. graveolens L'Herit. используется в промышленности для получения гераниевого масла. P. graveolens имеет несколько названий: ароматная, душистая, сильнопахнущая. В ее листьях содержится около 30 химических соединений, в основном терпеноидов, определяющих парфюмерные и медико-биологические свойства гераниевого масла. Основные компоненты гераниевого масла - цитронеллол и гераниол. Именно благодаря присутствию большого количества цитронеллола масло пеларгонии душистой пахнет розой (Rana V.S. et al., 2002). P. graveolens -кустарник с одревесневающим опушенным стеблем, до 1 м высотой. Листья 5-7-лопастные, с глубоковыемчатыми лопастями, с пильчатым краем, сильноопушенные, расположены супротивно на длинных черешках. Лиловые цветки собраны в зонтиковидное соцветие. Пеларгония душистая является родителем многочисленной группы душистых сортов и гибридов, полученных в результате скрещивания ее с P. capitatum (L.) L'Herit. и P. radens H.E.Moore (Van der Walt. J.J.A., 1984).

Самой многочисленной секцией в подроде Pelargonium является Hoarea (Sweet) DC. В ее состав входят 72 вида пеларгоний, среди них: Р. oblongatum, leipoldtii, fumarifolilum, nervifolium, asarifolium, undulatum,

petroselenifolium, vinaceum, monШforme, luteolum, leptum, auritum, rapaceum, fissifolium. Это геофиты, обладающие очень коротким утолщенным стеблем с 1-3 овальными клубнями. Имеют длительный период покоя, который прекращается с приходом дождей. Сначала появляются сизоватые листья, а уже после их отмирания распускаются цветы. У различных представителей секции имеется 5 или 2 лепестка, 2-5 тычинок и удлиненный гипантий, который всегда больше цветоножки (СгаШ С., 2001).

Подрод РагуыИре1а1а Roeschenbl. & F. Albers (ветвь В)

Данный подрод включает в себя три секции. В секции РепБ1ега DC. представлены однолетние травянистые растения с полегающим стеблем и сочными зелеными листьями. Небольшие симметричные цветки состоят из 5 -ти лепестков, 4-7 тычинок, укороченного гипантия (Баккег ЕТ., 1998).

Яет/огтЬа Dreyer представляет собой небольшую секцию, в

которую входят растения, произрастающие в области летних осадков на востоке и в центре Южной Африки. Это полукустарники с травянистым, реже суккулентным стеблем, прямостоячие или стелющиеся. Листья простые, яйцевидные или сердцевидные, край листовой пластинки зубчатый или го-родчатый. Зигоморфные цветки имеют разнообразную окраску от белой до темно-фиолетовой. Лепестков 5, они узкие, два верхних лепестка значительно выступают над остальными частями лепестка и имеют отметины и прожилки. Некоторые представители данной секции обладают ароматическими свойствами (Бгеуег Ь.Ь., 2000).

Секция Ьоре1аШт DC. представлена всего одним видом -P.cotyledonis БС. Это эндемичное растение, обнаруженное на острове Св. Елены. Это небольшой многолетний листопадный кустарник с сочными укороченными стеблями без колючек. Молодые побеги серо-зеленые, с возрастом одревесневают и становятся серовато-коричневыми с шелушащейся корой. Мелкие неароматные листья расположены очередно на

длинных черешках. Листовая пластинка сердцевидная, гладкая. Симметричный цветок белого цвета, имеет 5 овальных лепестков и 5 тычинок, гипантий длиннее цветоножки (Van der Walt J.J.A., 1983).

Подрод Magnipetala Roeschenbl. & F. Albers (ветвь С1)

В данном подроде, представленном 3-мя секциями, наиболее примечательна секция Chorisma Albers. Она была выделена сравнительно недавно (1995) на основе числа хромосом (Х=11), морфологии пыльцы и феноль-ного состава ее представителей. В нее поместили 4 вида пеларгоний из секций Ligularia и Jenkinsonia: P exhibens Vorster, P. mollicomum Fourcade, P. tetragonum L'Herit, P. worcesterae Knuth (Albers F., 1995).

Это многолетние раскидистые кустарники или полукустарники с изна -чально травянистым стеблем, который с возрастом частично одревесневает. Листья простые, слабо (P mollicomum Fourcade) или сильнорассеченные (P exhibens Vorster), сочные, блестящие или сильноопушенные. Цветки зигоморфные с 4 (только у P. tetragonum) или 5 лепестками (верхние два значительно крупнее нижних), и 5 или 7 тычинками. Цветки по 3-6 шт. собраны в небольшие соцветия, венчающие стебель. У всех представителей данной сек -ции на корнях имеются клубни, только у P. tetragonum клубни образуются не всегда (Bakker F.T., 2004).

Ареал произрастания данных видов - юг и юго-восток Капской провинции (Van der Walt J.J.A., 1983).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Корчагина Анна Владимировна, 2016 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Атанасов, А.И. Биотехнология в растениеводстве / А.И. Атанасов. - Новосибирск : Наука, 1993. - 242 с.

2. Бабикова, А.В. Растение как объект биотехнологии / А.В. Бабикова, Т.Ю. Горпеченко, Ю.Н. Журавлев // Комаровские чтения. - 2007. - Вып. LV. -С. 184-211.

3. Батыгина, Т.Б. Проблемы морфогенеза in vivo и in vitro. Эмбриоидогенез у покрытосеменных растений / Т.Б. Батыгина, В.Е. Васильева, Т.В. Ма-метьева // Бот. журнал. - 1978. - Т. 63, № 1. - С. 87-110.

4. Батыгина, Т.Б. Размножение растений / Т.Б. Батыгина, В.Е. Васильева. -СПб. : Изд-во С.-Петерб. ун-та, 2002. - 232 с.

5. Бекер, М.Е. Биотехнология / М.Е. Бекер, Г.К. Лиепиньш, Е.П. Райпулис. -М. : Агропромиздат, 1990. - 334 с.

6. Беляева, Р.Г. Изменчивость содержания флавонолов во флоральном морфогенезе растений / Р.Г. Беляева, Л.И. Евдокимова // Онтогенез. -2004. - 35, №1. - С. 16-22.

7. Бердичевец, Л.Г. Биотехнологические подходы культивирования представителей рода Digitalis L. / Л.Г. Бердичевец, Т.И. Фоменко // Биотехнологические приемы в сохранении биоразнообразия и селекции растений: Сборник статей Международной научной конференции (18-20 августа 2014). - Минск, 2014. - Т. 18. - С. 55-59.

8. Бородулина, И.Д. Адаптация растений-регенерантов земляники садовой сорта Московский Деликатес к условиям ex vitro / И.Д. Бородулина, Т.В. Плаксина // Acta Biologica Sibirica. - 2015. - Т. 1, № 1-2. - С. 74-84.

9. Бутенко, Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе / Р.Г. Бутенко. - М. : ФБК-Пресс, 1999. - 160 с.

10. Бутенко, Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений / Р.Г. Бутенко. - М. : Наука, 1964. - 272 с.

11.Былов, В.Н. Основы сравнительной сортооценки и декоративности растений / В.Н. Былов // Интродукция и селекция цветочно-декоративных культур. - 1978. - № 3. - С. 14-16.

12.Ван-Ункан, Н.Ю. Регенерация растений колонновидных слаборослых генотипов яблони из эксплантов различного происхождения : дис. ... канд. с.-х. наук : 06.01.05 / Надежда Юрьевна Ван-Ункан. - Мичуринск, 2014. - 132 с.

13. Верещагина, И.В. Флоксы в Сибири / И.В. Верещагина, В. Рубцова, А. Чигаева - Новосибирск : Наука, 1969. - 99 с.

14.Вехов, В.Н. Практикум по анатомии и морфологии высших растений / В.Н. Вехов, Л.И. Лотова, В.Р. Филин. - М. : Изд-во Моск. ун-та, 1980. -196 с.

15.Вечернина, Н.А. Методы биотехнологии в селекции, размножении и сохранении генофонда растений: монография / Н.А. Вечернина. -Барнаул, 2004. - 205 с.

16.Вечернина, Н.А. Ускоренное размножение голубики топяной in vitro / Н.А. Вечернина, О.К. Таварткиладзе, А.А. Эрст, А.Б. Горбунов // Вестник АГАУ - 2008. - №6. - C. 21-25.

17. Волынец, А. Фенольные соединения в жизнедеятельности растений / А. Волынец. - Минск : Litres, 2013. - 283 с.

18.Высоцкий, В.А. Клональное микроразмножение растений / В.А. Высоц -кий. - М: Наука, 1983. - 96 с.

19. Гамбург, Г.З. Ауксины в культурах тканей и клеток растений / Г.З. Гамбург, Н.И. Рекославская, С.Г. Швецов. - Новосибирск : Наука (СО), 1990. - 243с.

20.Гончар-Зайкин, П.П. Надстройка к Excel для статистической оценки и анализа результатов полевых и лабораторных опытов / П.П. Гончар-Зайкин, В.Г. Чертов // Сборник «Рациональное природопользование и

сельскохозяйственное производство в южных регионах Российской Федерации». - М. : «Современные тетради», 2003. - с. 559-564.

21.Гончарова, Е.Ю. Пеларгонии / Е.Ю. Гончарова, Е.П. Кравченко. - М. : Мир книги, 2006. - 238 с.

22. Горбачев В.В. Витамины. Макро- и микроэлементы / В.В. Горбачев, В.Н. Горбачева. - М. : Мед. Книга, 2011. - 432 с.

23.Гутиева, Н.М. Культура Pelargonium grandiflorum в условиях влажных субтропиков Черноморского побережья Кавказа / Н.М. Гутиева // Сб. трудов «Декоративное садоводство Сибири: проблемы и перспективы». -Барнаул : Европринт, 2010. - С.131-134.

24. Гутиева, Н.М. Особенности отбора гибридов при селекции пеларгонии крупноцветковой / Н.М. Гутиева // Садоводство и виноградарство. - 2014. - №4. - С. 32-36.

25.Деменко, В.И. Микроклональное размножение садовых растений. Учебное пособие / В.И. Деменко. - М. : РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева, 2007. - 55 с.

26. Деменко, В.И. Укоренение - ключевой этап размножения растений in vitro / В.И. Деменко, К.А. Шестибратов, В.Г. Лебедев // Изв. ТСХА. - 2010. -Вып. № 1. - С. 73-84.

27. Дерябин, А.Н. Образование и морфологические показатели микро -клубней картофеля in vitro при разном составе сахаров в среде / А.Н. Дерябин, Н.О. Юрьева // Сельскохозяйственная биология. - 2011. - № 1. - С. 5459.

28.Дитченко, Т.И. Культура клеток, тканей и органов растений: курс лекций / Т.И. Дитченко. - Минск : БГУ, 2007. - 102 с.

29.Доспехов, Б.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований) / Б.А. Доспехов. - 5-е изд. - М. : Агропромиздат, 1985. - 351 с.

30.Егорова, Н.А. Получение исходного материала для селекции

эфиромасличной герани методами культуры ткани / Н.А. Егорова, А.М. Бугара, А.М. Ермилова // Труды ИЭЛР. - 1998. - Т. 24. - С. 98-110. Егорова, Н.А. Исследование устойчивости к солевому стрессу каллюсных культур эфиромасличной герани / Н.А. Егорова // Физиология и биохимия культурных растений. - 2009. - Т. 41, № 6. - С.523-530.

31.Егорова, Н.А. Микроразмножение эфиромасличных растений с использованием культуры изолированных тканей и органов in vitro / Н.А. Егорова, А.Г. Кривохатко, И.В. Ставцева // Таврюкий вюник аграрной науки. - 2013. - №1. - С. 9-14.

32.Егорова, Н.А. Некоторые аспекты биотехнологии эфиромасличных растений: индукция каллюсо- и морфогенеза, использование сомаклональной вариабельности / Н.А. Егорова // Физиология растений и генетика. - 2014 - Т. 46, №2. - С. 108-120.

33.Егорова, Н.А. Некоторые аспекты клонального микроразмножения и сохранения in vitro эфиромасличных растений / Н.А. Егорова, И.В. Ставцева, О.В. Якимова, Л.И. Каменек, А.Г. Кривохатко // Таврический вестник аграрной науки. - 2015. - № 1(3). - С 18-24.

34.Ефимов, С.В. Комплексное изучение и оценка морфологических признаков пиона (Paeonia L.) при интродукции / С.В. Ефимов // Ученые записки Таврического национального университета им. В.И. Вернадского. Серия «Биология, химия». Спецвыпуск. - 2014. - Том 27 (66), №5. - С. 47-62.

35.Загоскина, Н.В. Биотехнология: теория и практика / Н.В. Загоскина, Л.В. Назаренко, Е.А. Калашникова, Е.А. Живухина. - М. : Оникс, 2009. -496с.

36.Зайцева, Ю.Г. Особенности морфогенеза и размножения in vitro некоторых представителей рода Rhododendron L. : дис. канд. ... биол. наук : 03.02.01 / Юлианна Геннадьевна Зайцева. - Новосибирск, 2015. - 128 с.

37.Зарипова, A.A. Начальные этапы клонального микроразмножения пиона уклоняющегося боковыми почками / A.A. Зарипова // Вестн. Оренбург. гос. ун-та. - 2009. - № 6. - С. 140-142.

38.3обова, Н.В. Условия обеспечения эффективных процессов регенерации в культуре изолированных зародышей ячменя, пшеницы и овса / Н.В. Зо-бова, С.Ю. Луговцова, В.Ю. Ступко // Вестник КрасГАУ - 2011. - №12. -С. 109-115.

39.Иванова, В. Регенерация и размножаване ин витро на Pelargonium peltatum / В. Иванова, С. Денкова, В. Кондакова // Науч.трудове. - Болг.: Аграрен унив. - 2001. - Т. 46, кн. 4. - С. 197-201.

40.Иванова, Н.Н. Клональное микроразмножение некоторых лиственных декоративных растений / Н.Н. Иванова // Биотехнологические исследования садовых и других ценных многолетних культур: Труды Никит. бот. сада. - 1977. - Т. 119. - С. 153-168.

41.Иванова, Н.Н.Особенности развития эксплантов фехойа на этапе введения в условиях in vitro / Н.Н. Иванова, И.В. Митрофанова, Е.Л. Шишкина // Уч. зап. Таврического нац. ун-та им. В.И. Вернадского. Серия «Биология, химия». - 2012. - Т. 25 (64), № 4. - С. 72-77.

42.Калинин, Ф.Л. Технология микроклонального размножения растений / Ф.Л. Калинин, Г.П. Кушнир, В.В. Сарнацкая. - Киев : Наукова думка, 1992. - 232 с.

43.Катаева, Н.В. Клональное микроразмножение растений / Н.В. Катаева, Р.Г. Бутенко. - М. : Наука, 1983. - 97 с.

44.Киев, Г.В. Оздоровление пеларгонии от вирусных болезней методом культуры тканей / Г.В. Киев, В.Н. Кафтанат // Тезисы докладов. -Кишинев, 1989. - С. 80-81.

45.Клименко, З. Пеларгонии. В доме и в саду / З. Клименко, В. Зыкова. - М. : Фитон+, 2003. - 144 с.

46. Комарова, Г.В. Пеларгония: покупка, размещение в помещении,

пересадка, полив, подкормка, размножение, болезни и вредители: практическое руководство / Г.В. Комарова. - М. : АСТ; Донецк: Сталкер, 2007. - 31 с.

47. Константинова, Т.Н. Взаимное влияние света и гормонов на регуляцию морфогенетических процессов в культуре in vitro / Т.Н. Константинова, Н.П. Аксенова, Л.И. Сергеева, М.Х. Чайлахян // Физиология растений. -1998. - Т. 34, № 4. - С. 795-802.

48.Конысбаева, Д.Т. Сортоизучение пеларгонии (P. Pelargonium) и ее адаптационные возможности в условиях Костанайской области / Д.Т. Конысбаева, М.М. Рулёва // Вестник Костанайского гос. пед. ин-та. -2015. - №1 (37). - С. 25-30.

49.Кренке, Н.И. Регенерация растений / Н.И. Кренке. - М.-Л. : Изд-во АН СССР, 1950. - 675 c.

50.Крицкая, Т.А. Клональное микроразмножение пиона тонколистного (Paeonia tenuifolia L.) / Т.А. Крицкая, А.С. Кашин // Изв. Сарат. ун-та: Сер. Химия. Биология. Экология. - 2015. - №1. - С. 55-61.

51.Кулаева, О.Н. Цитокинины, их структура и функция / О.Н. Кулаева. - М. : «Наука», 1973. - 264 с.

52.Кутас, Е.Н. Клональное микроразмножение в сохранении биоразнообразия растений / Е.Н. Кутас // Теоретические и прикладные аспекты интро -дукции растений как перспективного направления развития науки и народного хозяйства: Материалы Международной научной конференции, посв. 75-летию со дня обр. ЦБС НАН Беларуси. - Минск : Эдит ВВ. -2007. - Т. 1. - С. 77-80.

53.Кучеренко, Л.А. Подходы к разработке технологии массовой регенерации растений in vitro / Л.А. Кучеренко // Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. - М. : Наука. - 1991. - С. 232 - 243.

54.Ленинджер, А. Основы биохимии. Т.1 / А. Ленинджер. - М. : Мир, 1985. -369 с.

55.Линник, Т.А. Повышение эффективности способов размножения сортов земляники садовой (Fragaria x ananassa Duch.), характеризующихся низкой побегообразующейся способностью : дис. ... канд. с.-х. наук : 06.01.05 / Татьяна Александровна Линник. - М., 2014. - 141 с.

56.Лутова, Л.А. Влияние генотипа растения на регенерационные процессы / Л.А. Лутова, Л.В. Бондаренко, И.С. Бузовкина, Е.А. Левашина // Генетика. - 1994. - Т. 30, № 8. - С. 1065-1074.

57.Лутова, Л.А. Биотехнология высших растений / Л.А. Лутова. - СПб. : Изд-во С.-Петерб. Ун-та, 2003. - 228 с.

58.Лутова, Л.А. Генетика развития растений / Л.А., Лутова, Т.А. Ежова, И.Е. Додуева, М.А. Осипова. - СПб., 2011. - 432 с.

59.Лысякова, Н.Ю. Структура железистого аппарата у представителей рода Pelargonium L. / Н.Ю. Лысякова, Н.О. Симагина // Ученые записки Таврического национального университета им. В. И. Вернадского. Серия «Биология, химия». - 2010. - Т. 23 (62), № 1. - С. 58-64.

60. Матушкина, О.В. Технология клонального микроразмножения яблони и груши / О.В. Матушкина, И.Н. Пронина / Методические рекомендации. -Мичуринск-наукоград РФ, 2008.- 32 с.

61.Матушкина, О.В. Витрификация побегов in vitro: анатомическое строение и возможные пути решения проблемы / О.В. Матушкина, И.Н. Пронина, Е.Н. Ткачёв // Достижения науки и техники АПК. - 2012. - №9. - С. 58-60.

62. Методика государственного сортоиспытания сельскохозяйственных культур. - М. : Колос, 1968. - Вып. 6 (декоративные культуры). - 224 с.

63. Методика сравнительной сортооценки декоративных культур. - М. : ГБС, 1973. - 143 с.

64. Методические рекомендации по культуре декоративных пеларгоний. -Ялта : Гос. Никит. бот. сад. - 1983. - 14 с.

65.Митрофанова, И.В. Соматический эмбриогенез как система in vitro размножения культурных растений / И.В. Митрофанова // Физиол. и био-хим. культурных растений. - 2009. - Т. 41, № 6. - С. 496-509.

66.Михальская, С.И. Оптимизация метода индукции регенерации in vitro инбредных линий и гибридов подсолнечника / С.И. Михальская, А.Г. Комисаренко, А.Э. Малина и др. // Физиол. биохим. культ. раст. - 2009. -Т. 41, №3. - C. 255-262.

67.Мохно, В.С. О селекции тюльпанов и пеларгонии для выращивания во влажных субтропиках / В.С. Мохно, Е.В. Братухина, Н.М. Гутиева, О.И. Пащенко // Сельскохозяйственная биология. - 2014. - №3. - С.70-75.

68.Новикова, Т.И. Использование биотехнологий для размножения декоративных растений / Т.И. Новикова // Изв. Иркутского гос. ун-та. Серия «Биология. Экология». - 2011. - Т. 4, № 2 (10). - С. 74-81.

69.Носырева, М.В. Регенерация и размножение растений бегонии in vitro М.В. Носырева, М.А. Вечернина, О.К. Таварткиладзе // Известия Алтайского гос. унив. Серия «Биология». - 2004. - № 3. - С. 94-97.

70.Оразбаева, Г.К. Клональное размножение растений красной малины (Rubusidaeus L.) in vitro / Г.К. Оразбаева, И.Л. Майсупова, В.Т. Хасанов, В.К. Швидченко // Вестник науки КазАТУ им. С. Сейфуллина. - 2012. -№1 (72). - С. 140-149.

71.Пивень, Н.М. Индуцированный морфогенез ореха грецкого in vitro / Н.М. Пивень, Г.Г. Мельничук, А.С. Фелалиев // Биополимеры и клетка. - 1991. - Т. 7, №. 4. - С. 61-65.

72.Подваленко, П.П. Клоновая селекция - современная основа продуктивности современных виноградников / П.П. Подваленко, А.С. Звягин, Л.П. Трошин // Научный журнал КубГАУ. - 2009. - № 51 (7). - C. 1-25.

73.Полевой, В.В. Роль ауксина в системах регуляции у растений / В.В. Полевой. - Л. : Наука, 1986. - 80 с.

74.Поляков, А.В. Влияние способа стерилизации питательной среды и регуляторов роста на морфогенез льна-долгунца в культуре ткани / А.В.Поляков, О.Ф. Чикризова // Селекция, семеноводство, возделывание и первичная обработка льна-долгунца : Сб.науч.трудов ВНИИЛ. - Торжок.

- 1994. - Вып. 28-29. - С. 131 - 134.

75.Поляков, А.В. Получение регенерантов овощных культур и их размножение in vitro / А.В. Поляков. - М. : ГНУ ВНИИО Россельхозакадемии, 2005.

- 36 с.

76.Поляков, А.В. Флокс метельчатый (Phlox paniculata L.): от пробирки до цветника / А.В. Поляков, О.Ф. Чикризова, Н.Н. Лебедева. - М. : ГНУ ВНИИО Россельхозакадемии, 2007. - 22 с.

77.Потемкина, Н.В. Цитогенетические исследования растений эфиро-масличной герани, полученных в культуре тканей / Н. В. Потемкина, Н.А. Егорова, А.М. Бугара // Цитология и генетика. - 2004. - № 2. - С. 26-30.

78.Рахинбаев, И.Р. Биотехнология зерновых культур / И.Р. Рахинбаев, Ж. Тивари, Н.К. Бишимбаева, С.В. Кушнаренко, Е.Д. Азимов. - Алма-ата : Гылым, 1992. - 40 с.

79. Рабочая тетрадь по курсу «Основы научных исследований в агрономии». М. : Министерство с/х и продовольствия РФ, МСХА им. К.А. Тимирязева, кафедра земледелия и МОД, 2003. - 100 с.

80.Рункова, Л.В. Действие регуляторов роста на декоративные растения / Л.В. Рункова. - М.: Наука, 1985. - 150 с.

81.Рябушкина, Н.А. Клональная и микроклональная изменчивость растений / Н.А. Рябушкина // Биотехнология. Теория и практика. - 2015. - №2. - С. 17-27.

82.Синнот, Э. Морфогенез растений / Э. Синнот. - М. : Изд-во иностр. лит., 1963. - 603с.

83.Сироватская, Л.С. Азбука цветовода / Л.С. Сироватская, А.И. Гречишкин, Е.Ш. Белорусец. - Киев : «Урожай», 1993. - 272 с.

84.Скапцов, М.В. Оптимизация сред для культивирования растений in vitro на примере щавеля водного (Rumex aquaticus L.) / М.В. Скапцов, Д.В. Балабова, М.Г. Куцев // Сельхозбиология. - 2014. - №1. - С. 32-35.

85.Слободчикова, Е.С. Герань, или пеларгония: виды, уход, размножение / Е.С. Слободчикова. - Ростов на Дону : Феникс, 2004. - 25 с.

86.Соловых, Н.В. Использование биотехнологических методов в работе с ягодными культурами. Методические рекомендации / Н.В. Соловых. -Мичуринск : ГНУ ВНИИГ и СПР им. И.В. Мичурина, изд-во. Мичуринского гос. агроун., 2009. - 47 с.

87.Сорокина, И.К. Основы биотехнологии растений. Культура клеток и тканей: Учебное пособие / И.К. Сорокина, Н.И. Старичкова, Т.Б. Решетникова, Н.А. Гринь. - Новосибирск : НГУ, 2002. - 45 с.

88.Тахтаджан, А.Л. Жизнь растений: в 6 т. Т. 5: Семейство Geraniacea / А.Л. Тахтаджан. - М. : Просвещение, 1982. - 543 с.

89. Тимофеева, И.В. Опорный конспект лекций по дисциплине «Биотехнология растений» / И.В. Тимофеева. - Павлодар : Мин.обр. и науки респ. Казахстан. Инновационный Евразийский университет, 2009. -37 с.

90.Тимофеева, О.А. Культура клеток и тканей растений. Учебное пособие / О.А. Тимофеева, Н.И. Румянцева. - Казань : Казанский (Приволжский) Федеральный Университет. Биолого-почвенный факультет, 2012. - 88 с.

91.Трушечкин, В.Г. Микроклональное размножение сортов и подвоев косточковых культур. Методические указания / В.Г. Трушечкин, В.А. Высоцкий, Е.В. Олешко. - М. : Гос. агропром. Ком. СССР, 1987. - 17 с.

92.Фоменко, Т.И. Особенности морфогенеза и регенерации растений в культуре in vitro люпина узколистного / Т.И. Фоменко, М.К. Малюш // Физиология и биохимия культурных растений. - 2010. - Т. 42, № 4. - С. 306-314.

93.Хасси, Г. Размножение сельскохозяйственных культур in vitro / Г. Хасси //

Биотехнология сельскохозяйственных растений. - М. : Агропромиздат, 1987. - С. 105-133.

94.Хертли, Б. Садовые цветы / Б. Хертли, П. Кирмайер, М. Никих. -Калининград : «Янтарный сказ», 2002. - 240 с.

95.Черевченко, Т.М. Биотехнология тропических и субтропических растений in vitro / Т.М. Черевченко, А.Н. Лаврентьева, Р.В. Иванников. - Киев : Наукова думка, 2008. - 559 с.

96.Шевелуха, В.С. Рост растений и его регуляция в онтогенезе / В.С. Шевелуха. - М. : Колос, 1992. - 594 с.

97.Шевелуха, В.С. Сельскохозяйственная биотехнология / В.С. Шевелуха, Е.С. Калашникова, Е.С. Воронин. - М. : Наука, 2003. - 469 с.

98.Широков, А.И. Основы биотехнологии растений. Электронное учебно -методическое пособие / А.И. Широков, Л.А. Крюков. - Н.Н. : Нижегор. гос-унив., 2012. - 49 с.

99.Шоинбекова, С.А. Современное состояние и перспективы применения регуляторов роста растений в сельском хозяйстве / С.А. Шоинбекова, О.Т. Жилкибаев, Н.Б. Курманкулов // Известия научно-технического общества «Кахах». - 2013. - № 1 (40). - С. 113-121.

100.Щербакова, Е.Н. Влияние компонентов питательной среды на рост изолированной ткани Pelargonium roseum / Е.Н. Щербакова, О.Г. Севрук, З.В. Маршавина // Физиология растений, ин-т микробиологии Ак. наук АССР. - 1977. - Т. 24, вып. 3. - С. 648-651.

101.Эрст, А.А. Адаптация регенерантов Rhododendron hybridum к условиям ex vitro / А.А. Эрст, Т.И. Новикова // Научные ведомости Белгородского государственного университета. - 2012. - Т. 19, №. 9. - C. 44-48.

102.Эссер, М. Пеларгонии / М. Эссер. - М. : Лабиринт пресс, 2003. - 144 с.

103.Якимова, О.В. Каллусогенез и морфогенез в культуре изолированных органов и тканей Melissa officinalis L. in vitro / О.В. Якимова, Н.А. Егорова // Уч. зап. Таврического нац. ун-та им. В.И. Вернадского, серия

«Биология, химия». - 2014. - Т. 27 (66), №5. - С. 191-201.

104.Abdelwahd, R. Use of an adsorbent and antioxidants to reduce the effects of leached phenolics in in vitro plantlet regeneration of faba bean / R. Abdelwahd, N. Hakam, M. Labhilili, S.M. Udupa // African Journal of Biotechnology. -2008. - Т. 7, № 8. - Р. 996-1002.

105.Abo El-Nil, M.M. Geranium (Pelargonium) / M.M. Abo El-Nil // Handbook of plant cell culture. - 1990. - Vol. 5. - P. 439-460.

106.Agarwal, P.K. Regeneration of plantlets from leaf and petiole explants of Pelargonium x hortorum / P.K. Agarwal, R.S. Ranu // In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant. - 2000. - Т. 36, №. 5. - С. 392-397.

107.Albers, F. Untersuchungen zur Kariologie und Mikrosporogenese von Pelargonium sect. Pelargonium (Geraniaceae) / F. Albers, J.J.A. Van der Walt // Plant Systematics and Evolution. - 1984. - Vol. 147. - P. 177-188.

108.Albers, F. Phylogeny and Speciation in Succulent Geraniaceae (Geraniales) / F. Albers, M. Becker M. // Evolution of succulent plant families: Schumannia Biodiversity & Ecology. - 2010. - Vol. 3. - P. 59-67.

109.Albers F., Gibby M., Austmann M. A reappraisal of Pelargonium sect. Ligularia (Geraniaceae) / F. Albers, M. Gibby, M. Austmann // Plant System-atics and Evolution. - 1992. - Vol. 179. - P. 257-276.

110.Aldrufeu, A. Rooting and acclimatization of Pelargonium zonale plantlets / A. Aldrufeu // Acta hortic. Wageningen. - 1987. - Vol. 2. - P. 361-366.

111.Anderson, W.C. Etiolation as an aid to rooting / W.S. Anderson // Combined Proceedings of International Plant Propagation Society. - 1982. - Vol. 31. - P. 138-141.

112.Appelgren, M. Effects of light quality on stem elongation of Pelargonium in vitro / M. Appelgren // Scientia Horticulturae. - 1991. - Vol. 45, №. 3. - P. 345-351.

113.Aremu, A.O. In vitro pharmacological evaluation and phenolic content of ten South African medicinal plants used as anthelmintics / A.O. Aremu, A.R.

Ndhla-la et. al. // South African Journal of Botany. - 2010. - Vol. 76. - P. 558566.

114.Arnaldos, T.L. Changes in phenol content during strawberry (Fragaria x ananasa, cv. Chandler) callus culture / T.L. Arnaldos, R. Munoz, M.A. Ferrer, A.A. Calderon // Physiol. Plant. - 2011. - Vol. 113. - P. 315-322.

115.Arrigoni-Blank, M.F. Micropropagation and acclimatization of geranium (Pelargonium graveolens L.) / M.F. Arrigoni-Blank et al. // Revista Brasileira de Plantas Medicinais. - 2011. - Vol. 13, №. 3, 2011. - P. 271-275.

116.Arshad, M. Thidiazuron-induced shoot organogenesis from mature leaf explants of scented Pelargonium capitatum cultivars / M. Arshad, J. Silvestre, G. Merlina, C. Dumat, E. Pinelli, J. Kallerhoff // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. - 2012. - Vol. 108 (2). - P. 315-322.

117.Baas, R. Growth regulation of bedding plants and poinsettia using low phosphorus fertilization and ebb-and flow irrigation / R. Baas, A. Brandts, N. Straver // Workshop on Environmental Regulation of Plant Morphogenesis. -1993. - Vol. 378. - P. 129-138.

118.Bakker, F.T. Phylogenetic relationships within Pelargonium sect. Peristera (Geraniaceae) inferred from nrDNA and cpDNA sequence comparisons / F.T. Bakker, D. Hellbrügge, A. Culham, M. Gibby // Plant Systematics and Evolution. - 1998. - Vol. 211, Is. 3. - P. 273-287.

119.Bakker, F.T. Mitochondrial and chloroplast DNA-based phylogeny of Pelargonium (Geraniaceae) / F.T. Bakker, A. Culham, C.E. Pankhurst, M. Gibby // American Journal of Botany. - 2000. - Vol. 87(4). - P. 727-734.

120.Bakker, F.T. Phylogeny of Pelargonium (Geraniaceae) based on DNA sequences from three genomes / F.T. Bakker et.al // Taxon. - 2004. - Vol. 53. -P. 17-28

121.Basal, S.K. Ornamental Plants and Biotechnology / S.K. Basal. - Iaipur : Book Enclave, 2007. - 308 p.

122.Benazir, J.F. In vitro regeneration and transformation studies on Pelargonium

graveolens (geranium) - an important medicinal and aromatic plant / J.F. Benazir et al. // Journal of Medicinal Plants Research. - 2013. - Vol. 7, №. 38. - P. 2815-2822.

123.Birnbaum, K.D. Slicing across kingdoms: regeneration in plants and animals / K.D. Birnbaum, A.S. Alvarado // Cell. - Elsevier. - 2008. - Vol. 132, Is. 4. - P. 697-710.

124.Brawner, F. Geraniums. The Complete Encyclopedia / F. Brawner. - USA : Schiffer Publishing, 2003. - 176 p.

125.Brendler, T. A historical, scientific and commercial perspective on the medicinal use of Pelargonium sidoides (Geraniaceae) / T. Brendler, B.E. van Wyk // Journal of ethnopharmacology. - Elsevier, Ireland. - 2008. - Vol. 119. -P. 420-433

126.Buchheim, J.A.T. Micropropagation of peony (Paeonia ssp.) / J.A.T. Buchheim, Jr.M.M. Meyer // Biotechnology in Agriculture and Forestry. -1992. - Vol. 20, № 4. - P. 269-285.

127.Cassells, A.C. Plant and in vitro factors influencing the micropropagation of Pelargonium cultivars by bud-tip culture / A.C. Cassells, G. Minas // Scientia Horticulturae. - 1983. - Vol. 21, №. 1. - С. 53-65.

128.Cassells, A.C. Micropropagation of commercial Pelargonium species and hybrids (glasshouse geraniums) / A.C. Cassells // Biotechnology in agriculture and forestry. - 1992. - Vol. 20. - p. 286-306.

129.Charlwood, B.V. Micropropagation and biotechnological approaches to tissue culture of Pelargonium species and production of essential oils of scented / B.V. Charlwood, M. Lis-Balchin // Geranium and Pelargonium: History of Nomenclature, Usage and Cultivation, 2003. - P. 218 - 232.

130.Chawla H.S. Introduction to plant biotechnology / H.S. Chawla. - Enfield : Science Publishers, 2002. - 538 p.

131.Contour, A.D. Short-term effect of light on phenolic compounds in isolated leaf epidermis of Pelargonium hortorum / A.D. Contour, P. Louguet // J. Plant

Phsiol. - 1985. - Vol. 120, № 3. - P. 223-231.

132.Conversa, G. Influence of biochar, mycorrhizal inoculation and fertilizer rate on growth and flowering of pelargonium (Pelargonium zonale L.) plants / G. Conversa, A. Bonasia, C. Lazzizera, A. Elia // Frontiers in Plant Science. -2015. - Vol. 6. - C. 429-440.

133.Cooke, B. Pelargoniums: an illustrated guide to varieties, cultivation and care, with step-by-step instructions and over 170 beautiful photographs paperback / B. Cooke. - UK : Southwater, 2014. - 64 p.

134.Craib, C. Geophytic pelargoniums. Field and cultivation studies of Pelargonium section Hoarea / C. Craib. - Hatfield : Umdaus Press, 2001. -126 p.

135.De Candolle, A. P. Prodromus systematis naturalis regni vegetabilis / A.P. De Candolle. - Paris: TreutteS & Wurtz, 1824. - Vol. 1. - 268 p.

136.Debergh, P. Rapid clonal propagation of pathogen-free pelargonium plants starting from shoot tips and apical meristems / P. Debergh, L. Maene // ISHS Acta Horticulturae: Symposium on Tissue Culture for Horticultural Purposes, 1978. - P. 449-454.

137.Debergh, P.C. Micropropagation / P.C. Debergh, R.A. Read // Micropropagation . - The Netherlands : Kluwer Academic Publishers , 1991. -P. 1-13.

138.Desilets, H. Clonal propagation of Pelargonium x hortorum through tissue culture: Effects of salt dilution and growth regulator concentration / H. Desilets, Y. Desjardins, R.R. Belanger // Canadian Journal of Plant Science. -1993. - Vol. 73 (3). - P. 871-878.

139.Desjardins, Y. In vitro culture of plants: a stressful activity / Y. Desjardins, J.F. Dubuc, A. Badr // Acta Hort. - 2009. - Vol. 812. - P. 29-50.

140.Dixson, R.A. Plant cell culture: a practical approach / R.A. Dixson. - Oxford, Washington : IPL Press Limited, 1985. - 236 p.

141. Dodds, J.H. Experiments in Plant Tissue Culture / J.H. Dodds, L.W. Roberts.

- Cambridge : Camb. Un. Press, International Potato Center, 1985. - 232 p.

142. Dreyer, L.L. Section Reniformia, a new section in the genus Pelargonium (Geraniaceae) / L.L. Dreyer, E.M. Marais // South African Journal of Botany.

- 2000. - Vol. 66, No.1. - P. 44-51.

143. Doina, C. Tissue culture and ex-vitro acclimation of Rhododendron sp. / C. Doina, Al. Fira // Buletin USA MV-CN. - 2007. - Vol. 64, №1-2. - P. 39-43.

144. Doltu, M. The influence of the nutrition regime on the quality characteristics of some Pelargonium peltatum varieties multiplied in greenhouse / M. Dolty et al. // Lucrari Sjtiintjfice-Universitatea de Sjtiintp Agronomice sj Medicina" Veterinara" Bucuresjti. Seria B, Horticultural - 2011. - №. 55. - P. 216-219.

145.Dorion, N. Methods for In vitro propagation of Pelargonium x hortorum and others: From meristems to protoplasts / N. Dorion et al. // Protocols for In Vitro Propagation of Ornamental Plants. - Humana Press, 2010. - P. 197-211.

146.Dunbar, K.B. Shoot regeneration of hybrid seed geranium (Pelargonium x hortorum) and regal geranium (Pelargonium x domesticum) from primary callus cultures / K.B. Dunbar, C.T. Stephens // Plant Cell Tiss. Org. Cult. -1989. - Vol. 19. - P. 13-21.

147.Dunbar, K.B. Geranium tissue culture for the development of bacterial blight resistance. Ph.D. Thesis / K.B. Dunbar. - Michigan : Mich. State University, East Lansing, 1990. - 30 p.

148.Dunbar, K.B. Plant regeneration from callus-derived protoplasts of Pelargonium x domesticum / K.B. Dunbar, C.T. Stephens // Plant Cell Reports. - 1991. - Vol. 10, Is. 8. - P. 417-420.

149.Ecklon, C.F. Enumeralio plantarum africae australis extratropicae. Vol. 1 / C.V. Ecklon, K.L. Zeyher. - Hamburg, 1835.

150.Frey, L. Organogenesis in Carnation / L. Frey, J. Janick // J. Amer. Soc. Hort. Sci. - 1991. - Vol. 116(6). - P. 1108-1112.

151.Gibby, M. A cytological study of Pelargonium sect. Eumorpha (Geraniaceae)

/ M. Gibby, J. Westfold // Plant Systematics and Evolution. - 1986. - Vol. 153.

- P. 205-222.

152.Gibby, M. Molecular studies in Pelargonium (Geraniaceae). A taxonomic appraisal of section Ciconium and the origin of the 'Zonal' and 'Ivy-leaved' cultivars / M. Gibby, J.A. Barrett // Plant Systematics and Evolution. - 2004. -Vol. 243, Is. 3-4. - P. 131-146.

153.Gomez, M.A. Biotecnología aplicada a la mejora de Pelargonium. Tese (Doutorado) / M.A. Gomez. - Madrid : Departamento de Genética, Universidad Complutense de Madrid, 2002. - 142 p.

154.Gupta, R. Development of a Superior Somaclone of Rose-scented Geranium and a Protocol for Inducing Variants / R. Gupta, S. Banerjee, G.R. Mallavarapu, S. Sharma et al. // Hortisience. - 2002. - Vol. 37(4). - P. 632-636.

155.Haberlandt, G. Culturversuche mit isolierten Pflanzenzellen / Haberlandt G. // Sitzungsber. Akad. Wiss. Wien. - 1902. - K.1, III. - P. 69-92.

156.Haensch, K. Thidiazuron-induced morphogenetic response in petiole cultures of Pelargonium x hortorum and Pelargonium x domesticum and its histological analysis / K. Haensch // Plant Cell Reports. - 2004. - Vol. 23. - P. 211-217.

157.Hammerschlag, F. Effect of plant age on callus growth, plant regeneration and anther culture of geranium / F. Hammerschlag, P. Bottino // J. Am. Soc. Hort. Sci. - 1981. - Vol. 106. - P. 114-116.

158.Hamza, A.M. Direct micropropagation of English lavender (Lavandula angustifolia Munstead) plant / A.M. Hamza, M. Omaima, Abd. El-Kafie, M.M. Kasem // J. Plant Product., Mansoura Univ. - 2011. - Vol. 2, № 1. - P. 81-96.

159.Harvey, W.H. Flora Capensis. Vol. 1 / W.H. Harvey. - Dublin : Hedges & Smith, 1860.

160.Hassanein, A. Efficient plant regeneration system from leaf discs of zonal (Pelargonium x hortorum) and two scented (P.capitatum and P.graveolens) Geraniums / A. Hassanein, N. Dorion // Plant Cell, Tissue and Organ Culture.

- 2005. - Vol. 83, Is. 2. - P. 231-240.

161.Hollingsworth, P.M. Molecular Systematics and Plant Evolution / P.M. Hollingsworth, R.M. Bateman, R.J. Gornall. - NY : CRC Press, 1999. - 504 p.

162.Horst, R.K. In vitro regeneration of shoot and root growth from meristem tips of Pelargonium x hortorum Bailey / R.K. Horst, S.H. Smith, H.T. Horst, W.A. Oglevee // Acta Hort. - 1976. - Vol. 59. - Р. 131-141.

163.Hughes, K.W. In vitro ecology: exogenous factors affecting growth and morphogenesis in plant culture systems / K.W. Hughes // Env. Expt. Bot. - 1981. -Vol. 21. - P. 281-288.

164.Huijun, H. Study on the tissure culture and fast reproduction of Pelargonium graveolens / H. Huijun et al // Journal of Shandong Forestry Science and Technology. - 2006. - Vol. 5. - P. 12-17.

165.Hutchinson, M.J. Role of purine metabolism in thidiazuron-induced somatic embryogenesis of geranium (Pelargonium x hortorum Bailey) hypocotyl cultures / M.J. Hutchinson, P.K. Saxena // Physiol. Plant. - 1996. - Vol. 98. - P. 517 522.

166.Lalli, J.Y.Y. The essential oil composition and chemotaxonomical appraisal of South African Pelargoniums (Geraniaceae) / J.Y.Y. Lalli, A.M. Viljoen, K. Husnu, C. Baser et al. // Journal of Essenial Oil Research. - 2006. - Vol. 18. - P. 89-105

167.Jonas, V. Optimizing fertilization and water regimes of ivy geranium (Pelargonium peltatum) / V. Jonas // Masters Thesis, Kansas State Univ., Manhattan, 2000. - P. 35-45.

168.Kamo, K. The establishment of cell suspension cultures of gladiolus that regenerate plants /K. Kamo, J. Chen, R. Lawson // In Vitro Cell Dev. Biol. -1990. - Vol. 26. - P. 102-105.

169.Kanwar, J.K. In vitro propagation of Gerbera - a review / J.K. Kanwar, S. Kumar // Hort. Sci., Prague. - 2008. - Vol. 35. - P. 35-44.

170.Kaul, V. Shoot regeneration from stem and leaf explants of Dendranthema grandiflora Tzvelev (syn. Chrysanthemum morifolium Ramat.) / V. Kaul,

R.M. Miller, J.F. Hutchinson, D. Richards // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. - 1990. - Vol. 21, Is. 1. - P. 21-30.

171.Key, H. 1001 Pelargoniums / H. Key. - UK : B.T. Batsford, 2000. - 184 p.

172.Knuth, R. Geraniaceae / R. Knuth. - Berlin, Germany : A. Engler (ed.), Das Pflanzenreich, 1912. - 640 p.

173.Kong, X. S. Fast propagation of tree peony / X.S. Kong, M.X. Zhang // Northwest Hort. - 1998. - Vol. 3(4). - P. 87-89.

174.Lewu, F.B. Clonal propagation of Pelargonium sidoides: A threatened medicinal plant of South Africa / F.B. Lewu, D.S. Grierson, A.J. Afolayan // Afr. J. Biotechnol. - 2006. - Vol. 5. - P. 123-125.

175.Lewu, F.B. Micropropagation of Pelargonium sidoides / F.B. Lewu, D.S. Grierson, A.J. Afolayan // Catrina. - 2007. - Vol. 2. - P. 77-81.

176.Linsmaier, E.M. Organic growth factor requirements of tobacco tissue cultures / E.M. Linsmaier, F. Skoog // Physiol. Plant. - 1965. - Vol. 18. - P. 100127.

177.Lis-Balchin, M. Geranium and pelargonium: the genera Geranium and Pelargonium / M. Lis-Balchin. - London, UK : South Bank University, 2002. - 318 p.

178.Lu, C.Y. Efficient direct plant regeneration from stem segments of chrysanthemum (Chrysanthemum moritolium Ramat cv. Royal Purple) / C.Y. Lu, G. Nugent, T. Wardley // Plant Cell. Repts. - 1990. - Vol. 8, № 12. - P. 733-739.

179.Mayer-Hörster, L. Wachstum und Organbildung an in vitro kultivierten Segmenten von Pelargonium zonale und Cyclamen persicum / L. MayerHörster // Planta. - 1956. - T. 47, №. 4. - C. 401-446.

180.Menard, D. Micropropagation du Pelargonium a partir de meristemes / D. Menard, M. Coumans, T. Gaspar // Meded. Fac. Landbouw. Rijksuniv. Gent., Belgium. - 1985. - T. 50, № 2a. - P. 327-331.

181.Metwally, A.W. Role of Water and Cultural Practices on Oedema of Pelargonium hortorum Ait.) / A.W. Metwally, G.E. Beck, B.E. Struckmeyer // J. Am. Soc. Hort. Sci. - 1970. - Vol. 95 (6). - P. 808-813.

182.Meyers, M. Pelargoniums: an herb society of America guide / M. Meyers. -USA, Kirtland : The Herb Society of America, 2006. - 73 p.

183.Micheal, B. Zonal and Ivy Geraniums: Avoiding the Pitfalls / B. Micheal // Grower Talks. - 1996. - Vol. 54 (13). - P. 35-40.

184.Minas, G.J. Sanitation and micropropagation of geranium (Pelargonium spp.) cultivars starting from meristem tip / G.J. Minas G.J // International Conference on Quality Management in Supply Chains of Ornamentals, 2007. -P. 331-338.

185.Mithila, J. Recent advances in Pelargonium in vitro regeneration systems / J. Mithila, S.J. Murch, R.S. Krishna, P.K. Saxena // Plant Cell Tiss. Org. Cult. -2001. - Vol. 67. - P. 1-9.

186.Mori, K. Localization of viruses in apical meristem and production of virusfree plants by means of meristem and tissue culture / K. Mori, D. Hosokawa // Acta Horticult. - 1977. - Vol. 78. - P. 389-396.

187.Mortensen, L. M. Effects of various day and night temperature treatments on the morphogenesis and growth of some greenhouse and bedding plant species / L.M. Mortensen, R. Moe // II European Workshop on Thermo- and Photomorphogenesis in Plants. - 1992. - P. 77-86.

188.Moure, A.A. Natural antioxidants from residual sources / A.A. Moure, J.M. Cruz, D. Franco, J.M. DomoAnguez et.al. // Food Chemistry. - 2001. - Vol. 72, № 2. - P. 145-171.

189.Moyo, M. Conservation strategy for Pelargonium sidoides DC: phenolic profile and pharmacological activity of acclimatized plants derived from tissue culture / M. Moyo, A.O. Aremu, J. Gruz et.al. // J. Ethnopharma. - 2013. -Vol.149. - P. 557-561.

190.Moyo, M. Photoperiod and plant growth regulator combinations influence

growth and physiological responses in Pelargonium sidoides DC / M. Moyo, M.J. Koetle, J. Van Staden // In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant.

- 2014. - Vol. 50, №. 4. - C. 487-492.

191.Murasaki, K. Improvement on clonal propagation of cyclamen in vitro by the use of etiolated petioles / K. Murasaki, H. Tsurushima // Acta Hortic. - 1988. -Vol. 226. - P. 721-724.

192.Murashige, T. A Revised Medium for Rapid Growth and Bioassays with Tobacco Tissue Cultures / T. Murashige, F. Skoog // Physiol. Plant. - 1962. - Vol. 15. - P. 473-497.

193.Nassour, M. Plant regeneration from protoplasts of micropropagated Pelargonium x hortorum 'Alain': effect of some environmental and medium factors on protoplast system efficiency / M. Nassour, N. Dorion // Plant Science. - 2002.

- T. 163, № 1. - P. 169-176.

194.Nassour, M. Optimization of protoplast-to-plant system for Pelargonium x hortorum 'Alain'and genetic stability of the regenerated plants / M. Nassour, G. Chasseriaux, N. Dorion // Plant Science. - 2003. - T. 165, №. 1. - P. 121128.

195.Nitsch, J.P. Haploid plants from pollen grains / J.P. Nitsch, C. Nitsch // Science, N.Y. - 1969. - Vol. 163. - P. 85-87.

196.Nowak, K. Regeneracja Pelargonium graveolens L. w kulturze in vitro / K. Nowak, K. Zajac // «Pr. nauk. USI. Katowicach. Acta biol. Siles». - 1987. -№7. - P. 9-14.

197.Oglevee, W.A. Culture-indexing for vascular wilts and viruses / Oglevee W.A.

// Geraniums, Vol. IV, Ball Publishing Co., 1993. - P. 277-285. 198.Oliveira, A.C.L. In Vitro Establishment of Aromatic Geranium from Brazil / A.C.L. Oliveira et al. // XXVIII International Horticultural Congress on Science and Horticulture for People (IHC2010): A New Look at Medicine, 2010. - P. 327-334.

199.Onisei, T. Rapid clonal propagation of scented geranium / T. Onisei // An. Sti.

Univ. Sec. 2. - 1993. - №39. - P.125-127.

200.Pareek, A. Direct somatic embryogenesis and plant regeneration from leaf cultures of ornamental species of Dianthus / A. Pareek, S.L. Kothari // Scientia Hort. - 2003. - Vol. 98. - P. 449-459.

201.Park, H.R. Ascorbic acid and citric acid reduce explant darkening during shoot tip culture of Adonis amurensis / H.R. Park, H.H. Jung, K.S. Kim // Hort. Env. and biotechnology. - 2006. - T. 47, № 1. - P. 41-44.

202.Pierik, R.L.M. Commercial aspects of micropropagation / R.L.M. Pierik // Horticulture - New Technologies and Applications, Kluwer Acad Publisher Dordrecht, the Netherlands, 1991. - P. 141-153.

203.Pospisilova, J. Acclimatization of micropropagated plants to ex vitro conditions / J. Pospisilova, I. Ticha, P. Kadlecek et al. // Biologia Plantarum. -1999. - Vol. 42 (2). - P. 481-497.

204.Quiroz-Figueroa, F.R. Embryo production through somatic embryogenesis can be used to study cell differentiations in plants / F.R. Quiroz-Figueroa, R. Rojas-Herrera, R.M. Galas-Avalos, V.M. Loyola-Vargas // Plant Cell Tissue and Organ. Cult. - 2006. - Vol. 86. - P. 285-301.

205.Rajasekaran, K. Endogenous plant growth regulators in leaves and tissue cultures of Pennisetum purpureum Schum / K. Rajasekaran, M.B. Hein, G.C. Davis et al. // J. Plant Physiol. - 1987. - Vol. 121. - P. 119-122.

206.Rajeswara Rao, B.R. Rose-scented geranium (Pelargonium species): Indian and international perspective / B.R. Rajeswara Rao // J. Med. Arom. Plant Sci. - 2000. - Vol. 22 (1B). - P. 302-312.

207.Rajeswara Rao, B.R. Cultivation and distillation of geranium oil from Pelargonium spesies in India / B.R. Rajeswara Rao // Geranium and Pelargonium: History of Nomenclature, Usage and Cultivation. - London : CRC Press, 2003. - P. 212-217.

208.Ramgareeb, S. Elimination of virus and rapid propagation of disease-free sugarcane (Saccharum spp. cultivar NCo376) using apical meristem culture /

S. Ramgareeb, S.J. Snyman, T. van Antwerpen, R.S. Rutherford // Plant Cell, Tissue Organ Culture. - 2010. - Vol. 100. - P. 175-181.

209.Rana, V. Chemical constituents of essential oil of Pelargonium graveolens leaves / V.S. Rana et al. // International Journal of Aromatherapy. - 2002. -Vol.12, Is.4. - P. 216-218.

210.Rao, P.V.L. In vitro plant regeneration of scented-leaved geranium Pelargonium graveolens / P.V.L. Rao // Plant Sci., Limerick. - 1994. - Vol. 98. - P. 193-198.

211.Reichling, J. Chamomilla recutita (L.) Rauschert (Camomile): In Vitro Culture and the Production of Secondary / J. Reichling, R. Beiderbeck // Medicinal and Aromatic Plants. - 2012. - T. 15. - P. 156-159.

212.Reuther, G. Untersuchungen zur Vermehrung von Pelargonienvarietäten durch Gewebekultur / G. Reuther // Experiments on Propagation of Pelargonium Varieties by Tissue Culture, Gartenbauwissenschaft. - 1975. - P. 181-187.

213.Reuther, G. Propagation of disease-free Pelargonium cultivars by tissue culture / G. Reuther // Acta Hortic. - 1983. - Vol. 131. - P. 311-319.

214.Rout, G.R. In vitro somatic embryogenesis from callus cultures of Cephaelis ipecacuanha A. Richard / G.R. Rout, S. Samantaray, P. Das // Scientia Horticulturae. - 2000. - Vol. 86. - P. 71-79.

215.Roeschenbleck, J. Phylogenetics, character evolution and a subgeneric revision of the genus Pelargonium (Geraniaceae) / J. Roeschenbleck, F. Albers, K. Muller, S. Weinland, J. Kudla // Phytotaxa. - 2014. - Vol. 159 (2). - P. 31-76.

216.Ryschka, S.Anatomical studies on the development of somatic embryoids in wheat and barley explants / S. Ryschka, U. Ryschka, J. Schulze // Biochem. Physiol. Pflanzen. - 1991. - Vol. 187. - P. 31-41.

217.Sanago, M.H.M. Morphoregulatory role of thidiazuron: morphogenesis of root outgrowths in thidiazuron-treated geranium (Pelargonium x hortorum Bailey) / M.H.M. Sanago, S.J. Murch, T.Y. Slimmon, S. KrishnaRaj, P.K. Saxena // Plant Cell Rep. - 1995. - Vol. 15. - P. 205-211.

218.Satyakala, G. In vitro micropropagation of scented geranium (Pelargonium graveolens L. Her. ex Ait: syn P roseum Willd.) / G. Satyakala, M.M. Rao, G.L. Sita // Current Science. - 1995. - Vol. 68, Is. 7. - P. 762-765.

219.Saxena, G. An efficient in vitro procedure for micropropagation and generation of somaclones of rose scented Pelargonium / G. Saxena, S. Banerjee, L. Rahman et al. // Plant Science. - 2000. - V.155, №2. - P.133-140.

220.Schenk, R.U. Medium and techniques for induction and growth of monocotyledonous and dicotyledonous plant cell cultures / R.U. Schenk, A.C. Hildebrandt // Can. J. Bot. - 1972. - Vol. 50. - P. 199-204.

221.Singab, A.N.B. Standardization of Polyphenol Content for certain Species Belonging to Genus Pelargonium cultivated in Egypt / A.N.B. Singab, H.M. El-Hefnawy, D.G. El-Kolobby // International Journal of Pharma Sciences and Research. - 2014. - Vol. 5. - P. 935-938.

222.Skirvin, R.B. Tissue culture-induced variation in scented Pelargonium spp. / R.B. Skirvin, J. Janick // J. Am. Soc. Hortic. Sci. - 1976. - Vol. 101. - P. 281290.

223.Smith, R.H. Plant Tissue Culture: Techniques and Experiments / R.H. Smith. - USA, Texas : Academic Press, Elsevier, 2013. - 188 p.

224.Song, J.Y. Efficiency of shoot regeneration from leaf, stem, petiole and petal explants of six cultivars of Chrysanthemum morifolium / J.Y. Song, N.S. Mattson, B.R. Jeong B // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. - 2011. -Vol. 107, Is. 2. - P. 295-304.

225.Struck, M. Floral structure and pollination in Pelargonium / M. Struck, J.J.A. Van der Walt // The Biodiversity of African Plants. - 1996. - P. 631-638.

226.Sukhumpinij, P. In vitro regeneration from mature leaf explants of Pelargonium rapaceum (L.) L'Herit / P. Sukhumpinij, F. Kakihara, M. Kato // Scientia horticulturae. - 2010. - T. 126, №. 3. - P. 385-389.

227.Sweet, R. Geraniaceae. Vol. 1 / R. Sweet. - London : James Ridgway, 1822.

228.Taibl, K. In-vitro Kultur von Pelargonium zonale "Isabell" / K. Taibl, W. Rucker // Versuchsergebnisse. Hohere Bundeslehr- und Versuchsanstalt fur Gartenbau, Wien-Schonbrunn. - 1991. - T. 27, - P. 46-49.

229.Tanaka, M. Clonal propagation of Phalaenopsis by leaf culture / M. Tanaka, Y. Sakanishi // Am. Orchid Soc. Bull. - 1977. - Vol. 46. - P. 733-737.

230.Thorpe, T.A. Organogenesis in vitro: structural, physiological and biochemical aspects / T.A. Thorpe // International Review of Cytology. - 1980. -Suppl. 11A. - P. 71-111.

231.Tomos, C. Differential Fertilization and Nutritive Substrates Effect on the Flowering Degree of Pelargonium Zonale / C. Tomos, M. Marghitas // Bulletin of University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj -Napoca. Agriculture. - 2013. - T. 70, №. 1. - P. 141-149.

232.Toussaint, A. Distribution of Odontoglossum ringspot virus in apical meristems of infected Cymbidium cultivars / A. Toussaint, D. Dekegel, G. Vanheule // Physiological Plant Pathology. - 1984. - Vol. 25. - P. 297-305.

233.Tuleja, M. Morphological and histological events in the preliminary tissue cul-ture of haploid and diploid Pelargonium zonale var. «Kleiner libeling» / M. Tuleja, A. Krupa, G. Goralski, Bartosz J. Plachno // Modern Phytomorphology. - 2014. - Vol. 6. - P. 39-40.

234.Van der Walt, J.J.A. A taxonomic revision of the type section of Pelargonium L'Herit. (Geraniaceae) / J.J.A. Van der Walt // Bothalia. -1984. - Vol. 15, No 3/4. - P. 345-385.

235.Van der Walt, J.J.A. A taxonomic revision of the section Myrrhidium of Pelargonium (Geraniaceae) in southern Africa / J.J.A. Van der Walt, D.A. Boucer // S. Afr. J. Bot. - 1986. - Vol. 52. - p. 438-462.

236.Van der Walt, J.J.A., Vorster P. J. Phytogeography of Pelargonium / J.J.A. Van der Walt, P.J. Vorster // Bothalia. - 1983. - Vol. 14, No 3/4. - P. 517-523.

237.Vasil, I.K.Clonal propagation / I.K. Vasil, V. Vasil // International Review of Cytology, Academic Press. - 1980. - Vol. 1, 1980. - P. 145-173.

238.Viateur, U. Comparative study of in vitro regeneration efficiency of shoot-tip explants of Pelargonium graveolens and some cultivars of banana (Musa spp.) grown in Rwanda in response to different concentrations of cytokinins / U. Viateur, B. Dhed., K.J. Nzeyumwami //African Journal of Biotechnology. -2012. - T. 11, №41. - P. 9741-9752.

239.Vöchting, H. Über Organbildung im Pflanzenreich / H. Vöchting. - Bonn, Germany : Max Cohen, 1878.

240.Wojtania, A. Effect of cytokinins and amino acids on multiplication of Pelargonium cultivars / A. Wojtania, E. Gabryszewska // Acta Soc. Bot. Pol. -2001. - Vol. 70. - P. 203-207.

241.Wojtana, A. Regeneracja pelargonii w warunkach in vitro / A. Wojtania, E. Gabryszewska // Acta agrobotanica. - 2003. - Vol. 56, Lublin. - P. 1-5.

242.Wojtania, A. Regeneration of Pelargonium x hederaefolium "Bonete" from petiole explants / A. Wojtania, E. Gabryszewska, A. Marasek // Acta Physiologiae Plantarum. - 2004. - Vol. 26, Is. 3. - P. 255-262.

243.Wojtania, A. Effect of meta-topolin on in vitro propagation of Pelargonium x hortorum and Pelargonium x hederaefolium cultivars / A. Wojtania // Acta Soc. Bot. Pol. - 2010. - Vol. 79. - P. 101-106.

244.Wojtania, A. Ethylene and cytokinin interaction in the morphogenesis of Pelargonium x hortorum L.H. Bailey in vitro / A. Wojtania, E. Wegrzynowicz-Lesiak // Acta Physiol. Plant. - 2012. - Vol. 72. - P. 2407-2412.

245.Wojtania, A. Effects of cytokinins on antioxidant enzymes in in vitro grown shoots of Pelargonium hortorum L.H. Bailey / A. Wojtania, E. Skrzypek //Acta Agrobotanica. - 2014. - T. 67, №4. - P. 33-42.

246.Weng, M.L. Phylogeny, rate variation, and genome size evolution of Pelargonium (Geraniaceae) / M.L. Weng, T.A. Ruhlman, M. Gibby, R.K. Jansen // Molecular Phylogenetics and Evolution. - 2012. - Vol. 64, Is. 3. - P. 654-670.

247.Wilkinson, A. The passion for Pelargoniums: how they found their place in

the garden / A. Wilkinson. - Gloucest., UK : The History Press, 2013. - 214 p.

248.Yasugi, S. Inducing callus formation from leaf or petiole segments and culture of callus in Pelargonium / S. Yasugi, Y. Mochiyama // Comb. Proc.-Intern. Plant Propagators Soc., Seattle, Wash. - 1996. - T. 46. - P. 743-744.

249.Zaidi, N. Bulbous and cormous monocotyledonous ornamental plants in vitro / N. Zaidi, N.H. Khan, F. Zafar, S.I. Zafar // Science. - 2000. - Vision 6. - P. 58-73.

250.Zimmerman, J.L. Somatic embryogenesis: A model for early development in higher plants / J.L. Zimmerman // Plant Cell. - 1993. - Vol. 5. - P. 1411-1423.

251.Ziv, M. Enhanced shoot and cormlet proliferation in liquid cultured gladiolus buds by growth retardants/ M. Ziv // Plant Cell Tissue Organ Cult. - 1989. -Vol.17. - P. 101-110.

252.Ziv, M. Vitrification: morphological and physiological disorders of in vitro plants / M. Ziv // Micropropagation Technology and Applications, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, 1991. - P. 45-69.

253.Ziv, M. Vegetative propagation of Alstroemeria in vitro / M. Ziv, R. Kanterovitz, A.H. Halevy // Sci. Hort. - 1973. - Vol. 1 - P. 271-277.

254.http://kitanoseeds.ua/articles/item61/

255.http://medbe.ru/materials/problemy-i-metody-biotekhnologii/klonalnoe-mikrorazmnozhenie-rasteniy/

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение А

Оценка существенности разности между выборочными долями на среде МБ

и ВМ при качественной изменчивости (морфогенетическая активность), п=50

Сравнение MS1 и BM1 Сравнение MS2 и BM2

Сорта Значения статистических показателей

Pl±to5xSpi P2±t05XSp2 tфакт Pl±t05 x Sp 1 P2±t05xSp2 ^акт.

Шоко 0,84± 0,80± 0,52 0,94±2,01x 0,98± 1,03

2,01x0,052 2,01x0,057 0,034 2,01x0,020

Лотос 0,88± 0,86± 0,30 0,96±2,01x 0,96± 0

2,01x0,046 2,01x0,049 0,028 2,01x0,028

Априкот 0,90± 2,01x0,042 0,86± 2,01x0,049 0,62 1,00±2,01x 0 0,98± 2,01x0,020 1,01

Петтикот 0,82± 0,84± 0,27 0,92±2,01x 0,94± 0,39

2,01x0,054 2,01x0,052 0,038 2,01x0,034

to5=2,01 при n=50

Приложение Б

Экономическая эффективность получения растений-регенерантов пеларгонии королевской сорта Шоко методом клонального микроразмножения из пазушных

почек

Статьи затрат Затраты

трудовые, человеко-часов энергетические, кВт денежные, руб.

Возделывание донорных растений

Стоимость укоренных черенков (5 шт.) - - 1250,00

Возделывание донорных растений, в т.ч.: 30 259,2 2509,85

- уход за растениями 30 - 1350,00

- досветка (16 ч в сут. - 0,36 кВт/ч) - 259,2 1054,94

- расходные материалы - - 100,00

- полив (0,3 м ) - - 4,91

Итого: 30 259,2 3759,85

Введение эксплантов в культуру in vitro

Приготовление питательной среды (0,6 л), в т.ч.: 4 14,6 883,34

- питательная среда - - 600,00

- расходные материалы - - 70,00

- электроэнергия - 2,0 8,14

- ручной труд 4 - 180,00

- автоклавирование (12,6 кВт/ч - 2 ч) - 12,6 25,20

Введение эксплантов в культуру in vitro 4 3,0 318,84

- расходные материалы - - 90,00

- электроэнергия - 3,0 48,84

- ручной труд 4 - 180,00

Культивирование эксплантов в течение 30 суток, в т.ч.: - 504,8 2461,55

- затраты энергии световой установкой (0,36 кВт/ч - 16 ч/сут.) - 172,8 703,30

- затраты энергии сплит-системой (0,6 кВт/ч - 24 ч/сут.) - 432,0 1758,25

Амортизационная стоимость оборудования - - 2547,83

Итого: 8 522,4 6211,56

Размножение микроклонов пеларгонии королевской в условиях in vitro

Приготовление питательной среды (6 л), в т.ч.: 8 17,6 6740,55

- питательная среда - - 6000,00

- расходные материалы - - 340,00

- электроэнергия - 5,0 15,35

- ручной труд 8 - 360,00

- автоклавирование (12,6 кВт/ч - 2 ч) - 12,6 25,20

Посадка побегов in vitro, в т.ч.: 20 - 1531,05

- расходные материалы - - 570,00

- электроэнергия - 15,0 61,05

- ручной труд 20 - 900,00

Культивирование трансплантов в течение 99 суток (3 пассажа по 33 сут.), в т.ч.: 1995,9 8123,07

- затраты энергии световой установкой (0,36 кВт/ч - 16 ч/сут.) - 570,3 2320,88

- затраты энергии сплит-системой (0,6 кВт/ч - 24 ч/сут.) - 1425,6 5802,19

Амортизационная стоимость оборудования - - 8233,38

Итого: 28 2028,5 24628,05

Укоренение побегов в условиях in vitro

Приготовление питательной среды (6 л), в т.ч.: 8 17,6 6570,55

- питательная среда - - 6000,00

- расходные материалы - - 170,00

- электроэнергия - 5,0 15,35

- ручной труд 8 - 360,00

- автоклавирование (12,6 кВт/ч - 2 ч) - 12,6 25,20

Посадка побегов in vitro, в т.ч.: 18 15,0 1421,05

- расходные материалы - - 550,00

- электроэнергия - 15,0 61,05

- ручной труд 18 - 810,00

Культивирование побегов in vitro в течение 45 сут. (3 цикла по 15 сут.), в т.ч.: - 907,2 3692,30

- затраты энергии световой установкой (0,36 кВт/ч - 16 ч/сут.) - 259,2 1054,94

- затраты энергии сплит-системой (0,6 - 648,0 2637,36

кВт/ч - 24 ч/сут.)

Амортизационная стоимость оборудования - - 3836,08

Итого: 26 939,S 15519,9S

Адаптация полученных регенерантов к условиям in vivo

Адаптация растений in vitro в течение 9 2 181,4 828,46

суток (3 пассажа по 3 сут.), в т.ч.:

- затраты энергии световой установкой (0,36 кВт/ч - 16 ч/сут.) - 51,8 210,99

- затраты энергии сплит-системой (0,6 кВт/ч - 24 ч/сут.) - 129,6 527,47

- затраты ручного труда 2 - 90,00

Посадка растений-регенерантов в 16 - 4620,00

микроконтейнеры, в т.ч.:

- расходные материалы (торфяные - - 1800,00

микроконтейнеры - 1000 шт.)

- микротеплицы (10 шт.) - - 2100,00

- ручной труд 16 - 720,00

Адаптация растений-регенерантов в 5 604,8 2686,54

условиях ex vitro в течение 30 сут. (3

пассажа по 10 сут.), в т.ч.:

- затраты энергии световой установкой (0,36 кВт/ч - 16 ч/сут.) - 172,8 703,30

- затраты энергии сплит-системой (0,6 кВт/ч - 24 ч/сут.) - 432,0 1758,24

- затраты ручного труда 5 - 225,00

Амортизационная стоимость оборудования - - 2240,00

Итого: 23 7S6,2 10375,00

ИТОГО: 115 4536,1 60494,44

ИТОГО на один регенерант: 0,15 4,5 60,49