Оптимизация тактики ведения пациенток с папиллома-вирусной инфекцией гениталий с учетом комплекса молекулярно-генетических предикторов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.01, кандидат наук Бестаева, Нонна Владиславовна

• Бестаева, Нонна Владиславовна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Бестаева, Нонна Владиславовна

ВВЕДЕНИЕ........................................................................................................................................................3

Глава 1. ПАПИЛЛОМАВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ

(обзор литературы)..............................................................................................................................12

1.1. Распространенность ПВИ..................................................................................................12

1.2. Роль ВПЧ в развитии CIN и РШМ..............................................................................16

1.3. Современные методы диагностики ПВИ..............................................................20

1.4. Принципы современных методов лечения CIN................................................33

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.................. 37

2.1. Материалы исследования....................................................................................................37

2.2. Методы исследования............................................................................................................38

2.3. Методы статистической обработки............................................................................48

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ................51

3.1. Результаты ВПЧ-генотипирования и клиническая характеристика обследуемых женщин................................................................................51

3.2. Результаты цитологического исследования......................................................59

3.3. Результаты кольпоскопического исследования..............................................61

3.4. Результаты гистологического исследования....................................................66

3.5. Результаты исследования вариабельности генов Е6/Е7 ВПЧ

52 и 58 типов....................................................................................................................................................68

3.6. Результаты исследования экспрессии мРНК генов........................................69

3.7. Результаты лечения пациенток с CIN, обусловленной ВПЧ 52 и

58 типов..........................................................................................................................................................83

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ......................87

ВЫВОДЫ........................................................................................................................................................100

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ................................................................................102

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ..............................................................................................................104

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ......................................................... 106

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оптимизация тактики ведения пациенток с папиллома-вирусной инфекцией гениталий с учетом комплекса молекулярно-генетических предикторов»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы исследования

Активное внедрение новых скрининговых программ по профилактике рака шейки матки (РШМ) не оказало существенного влияния на снижение частоты встречаемости данного заболевания, которое продолжает занимать третье место среди злокачественных опухолей репродуктивной системы у женщин [73]. По данным Международного агентства по изучению рака, ежегодно в мире регистрируются 470 000 новых случаев РШМ, половина из которых заканчиваются смертельным исходом (на женщин от 20 до 34 лет приходится 15% РШМ) [97].

Значительная вариабельность заболеваемости и смертности от РШМ отмечается не только в различных странах мира, но и в различных областях одной и той же страны [18]. К примеру, в Восточной Азии на долю РШМ в Таиланде приходится 23.8%, в Корее - 15.4%, в Гонконге - 9.8%, в Японии -6.7%, в Китае - 3.2%. В Западной Азии, в Индии РШМ составляет 18.2%, в Пакистане - 7.5%, в Турции - 5.1% [42].

В Великобритании в 2009 году диагностировано 3378 случаев РШМ. В 2010 году 936 женщин умерли от данного заболевания, средний возраст на момент постановки диагноза - 48 лет. РШМ когда-то была самой распространенной причиной смертности от рака среди американских женщин. В 2011 году в США зафиксировано 12 710 случаев РШМ, 4 290 женщин умерли от данного заболевания. В настоящее время, благодаря скрининговым программам, уровень смертности от РШМ в США снизился на 50% и чаще встречается до 50 лет, а после 65 лет - в 15% [140].

В России от РШМ ежегодно умирает более 6000 женщин. К примеру, в 2004 году в России было зарегистрировано 12 700 женщин с РШМ, что составляет около 5% от всех злокачественных опухолей и 31% от злокачественных новообразований женских половых органов [13,26]. Так, по

данным Минздрава в 2014 г. в России было зарегистрировано 21 846 новых случаев РШМ. За период с 2006 по 2014 гг. прослеживается общий прирост заболеваемости РШМ с 203,9 до 224,3 на 100 000 женского населения. Количество умерших женщин от РШМ в 2014 году составило 5 651 случаев. Кроме того, в последнее время обозначилась тенденция роста заболеваемости у женщин в возрастной группе до 30 лет, прирост данного показателя с 1993 по 2002 года составил 150%. По данным ВОЗ (2016) в России РШМ является 2-й наиболее частой формой рака у женщин в возрасте от 15 до 44 лет [141]. Кроме того, растет показатель запущенности заболевания; удельный вес больных РШМ П-^ стадий составил 60-75% [11].

В 95 % случаях РШМ, подтвержденного гистологическими методами исследования, выявляются высокоонкогенные типы вируса папилломы человека (ВПЧ) [40]. По данным ВОЗ (2016) 73,8% РШМ обусловлено ВПЧ 16 и 18 типов [141]. Важно определить тип ВПЧ. При этом спектр генотипов ВПЧ варьирует в различных регионах. Актуальные и интересные данные ряда исследований подкрепляют предположение о возможности изменения распределения типов ВПЧ среди случаев предраковых заболеваний шейки матки и РШМ с течением времени в конкретной популяции. Но чаще проводится определение тех типов ВПЧ, к которым имеются вакцины - 6, 11, 16, 18, а использующиеся ранее методы гибридизации и ПЦР на сегодняшний день оказались недостаточно информативными, так как позволяют определить в биоматериале ВПЧ и его принадлежность к группам высокого или низкого онкогенного риска, но без генотипирования. Соответственно, данные относительно распространенности различных типов ВПЧ в России, разноречивые. Широкое внедрение ВПЧ-генотипирования (21 тип) методом ПЦР в режиме реального времени позволит определить тип вируса, вирусную нагрузку, риск развития неопластической трансформации эпителия шейки матки и позволит дифференцировать персистенцию вируса от нового заражения. Мониторинг распространенности различных типов ВПЧ среди

пациентов с ВПЧ-ассоциированными заболеваниями аногенитального тракта уже проводится во многих странах. ВПЧ-генотипирование включено в скрининговые программы обследования женщин для профилактики РШМ. Так, в 2015 году FDA одобрила включение ВПЧ-генотипирования в первичный скрининг патологии шейки матки в США у женщин старше 25 лет [119,131].

Большой научный интерес представляет изучение частоты встречаемости ВПЧ 52 и 58 типов, которые распространены в странах Азии, обладают высокоонгогенным потенциалом, но, в отличие от ВПЧ 16 и 18 типов, мало изучены. Уровень инфицирования ВПЧ 58 типа в мировой популяции невысок (мировой уровень распространенности - 2%, 7-ое место по частоте среди всех типов ВПЧ), особенно высок в странах Азии, Африки и некоторых других регионах (уровень инфицирования до 30%, 2-ое место по частоте после ВПЧ 16 типа) [31]. Кроме того, выявлена связь вариабельности генов Е6/Е7 ВПЧ 52 и 58 типов (C632T (T20I) и G760A (G63S)) с повышенным риском развития и со степенью тяжести неоплазии эпителия шейки матки [53]. В связи с этим, весьма актуальным является определение частоты встречаемости ВПЧ 52 и 58 типов, выявление цервикальных интраэпителиальных неоплазий (CIN) различной степени тяжести и РШМ, обусловленные ВПЧ 52 и 58 типов, изучение вариабельности генов Е6/Е7 ВПЧ 52 и 58 типов, определение наличия вариантов C632T (T20I) и G760A (G63S), связанных с повышенным риском развития и/или со степенью тяжести CIN в когорте российских женщин, определение факторов риска, разработка тактики ведения.

Современные исследования больше фокусируют свое внимание на изучении типов ВПЧ, значимости вирусной нагрузки, иммуноцитохимических и иммуногистохимических маркеров в дифференциальной диагностике степени тяжести CIN. Однако реакция макроорганизма при ВПЧ-ассоциированных заболеваниях, как прогностического маркера, не достаточно изучена. При CIN и РШМ происходит изменение уровня экспрессии мРНК функциональных генов человека в эпителии шейки матки, регулирующих пролиферацию и

клеточный цикл, апоптоз, инвазию, рецепторный аппарат клеток, опухолевую супрессию, сигнальный пептид, что является актуальным для оценки риска развития и прогрессирования CIN.

Принимая во внимание вышеизложенное, целью нашего исследования явилось:

повышение эффективности диагностики и прогнозирования течения заболеваний шейки матки, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией, с учетом клинических, молекулярно-генетических и морфологических особенностей.

Задачи исследования:

1. Оценить эффективность ВПЧ-генотипирования (21 тип) в первичном скрининге выявления патологии шейки матки и частоту встречаемости ВПЧ 52 и 58 среди других типов ВПЧ.

2. Оценить результаты цитологического исследования и расширенной кольпоскопии среди ВПЧ-позитивных и ВПЧ-негативных женщин в сравнительном аспекте.

3. Определить частоту встречаемости CIN различной степени тяжести и РШМ у пациенток с ВПЧ 52 и 58 типов.

4. Определить факторы риска возникновения CIN у пациенток с ПВИ, обусловленной ВПЧ 52 и 58 типов.

5. Изучить вариабельность генов Е6/Е7 ВПЧ 52 и 58 типов, определить наличие вариантов, связанных с повышенным риском развития и/или со степенью тяжести CIN (C632T (T20I) и G760A (G63S)) в когорте российских женщин.

6. Изучить экспрессию мРНК функциональных генов человека, регулирующих пролиферацию и клеточный цикл (MKI 67 (KI67), CDKN2A (P16)), апоптоз (BCL2, BAG1, BAX), инвазию (CTSL2), рецепторный аппарат

клеток (ESR1, PGR, CD68), опухолевую супрессию (PTEN), сигнальный пептид (SCUBE2) и их связь с риском развития и прогрессирования CIN.

7. Разработать тактику ведения пациенток с ВПЧ-ассоциированными заболеваниями шейки матки с учетом комплекса молекулярно-генетических маркеров.

Научная новизна исследования

Впервые проведено ВПЧ-генотипирование (21 тип) в первичном скрининге патологии шейки матки у женщин репродуктивного возраста, выявлена распространенность ВПЧ 52 и 58 типов среди других типов, определена их роль в возникновении CIN различной степени тяжести и РШМ. Проведен сравнительный анализ результатов цитологического исследования и расширенной кольпоскопии среди ВПЧ-позитивных и ВПЧ-негативных женщин. Впервые изучена последовательность генов Е6/Е7 ВПЧ 52 и 58 типов в когорте российских женщин, установлена их низкая вариабельность, не выявлены варианты C632T (T20I) и G760A (G63S), связанные с повышенным риском развития и/или со степенью тяжести CIN. Впервые изучена экспрессия мРНК 11 функциональных генов человека (MKI 67 (KI67), CDKN2A (P16)), BCL2, BAG1, BAX, CTSL2, ESR1, PGR, CD68, PTEN, SCUBE2) и их связь с риском развития CIN. Определены прогностические маркеры риска развития CIN: мРНК генов MKI67 (KI67), CDKN2A (P16), PGR, BCL2. На основе изменении уровня экспрессии данных маркеров проведен многофакторный анализ при помощи бинарной логистической регрессии с построением модели для выявления пациенток с риском развития CIN и РШМ. Разработан алгоритм ведения пациенток с наличием и/или персистенцией высокоонкогенных типов ВПЧ и плоскоклеточным интраэпителиальным поражением низкой степени тяжести (LSIL).

Практическая значимость работы

Определена диагностическая информативность ВПЧ-генотипирования (21 тип) с определением вирусной нагрузки методом ПЦР в режиме реального времени и целесообразность его включения в алгоритм обследования женщин репродуктивного возраста. Определены высокоонкогенный потенциал ВПЧ 52 и 58 типов и факторы риска возникновения CIN в когорте российских женщин. Всем женщинам с наличием ВПЧ высокого риска, независимо от результатов цитологии, следует проводить расширенную кольпоскопию для раннего выявления ВПЧ-ассоциированных заболевании шейки матки. Определена прогностическая значимость изученных маркеров мРНК генов в эпителии шейки матки, связанных с риском развития CIN и доказана целесообразность их включения в комплексное обследование пациенток с персистенцией высокоонкогенных типов ВПЧ и LSIL.

Для выявления пациенток с риском развития неопластических процессов эпителия шейки матки и РШМ можно использовать следующую модель: Z = 0,8*ln [KI67]/[PGR] + 1,6*ln [P16]/[BCL2] - 4, где [KI67]/[PGR] - отношение уровней экспрессии мРНК генов KI67 и PGR, [P16]/[BCL2] - отношение уровней экспрессии мРНК генов P16 и BCL2.

Положения 1 положение, выносимое на защиту:

Установлена высокая диагностическая информативность ВПЧ-генотипирования (21тип) с определением вирусной нагрузки методом ПЦР в режиме реального времени в первичном скрининге патологии шейки матки у женщин репродуктивного возраста для выявления группы высокого риска по развитию CIN и РШМ. Определены наиболее распространенные типы ВПЧ: 16, 58, 31, 52, 33 (группа А9). Аномальная цитология у ВПЧ-позитивных женщин встречается в 4.6 раза чаще, чем среди ВПЧ-негативных. Нормальная цитология у ВПЧ-позитивных женщин не исключает наличия поражения эпителия шейки

матки и требует проведения расширенной кольпоскопии, что позволяет дифференцировано подходить к дальнейшей тактике ведения пациенток.

2 положение, выносимое на защиту:

Определены часто встречающиеся типы ВПЧ при цервикальных интраэпителиальных неоплазиях различной степени тяжести - 16, 58 и 52. В обследованной когорте российских женщин установлены высокоонкогенный потенциал ВПЧ 52 и 58 типов, низкая вариабельность генов Е6/Е7 ВПЧ 52 и 58 типов, не выявлены варианты C632T (T20I) и G760A (G63S), связанные с повышенным риском развития и/или со степенью тяжести CIN.

3 положение, выносимое на защиту:

Повышение экспрессии мРНК генов MKI67 (KI67), CDKN2A (P16), снижение экспрессии BCL2 и PGR наиболее выражено при HSIL и РШМ, что может свидетельствовать о стимуляции пролиферативных процессов и подавлении апоптоза. Данные маркеры могут быть рекомендованы в клинической практике в качестве дополнительных методов обследования. Предложена модель бинарной логистической регрессии, позволяющая выделить группу пациенток с высоким риском развития цервикальной интраэпителиальной неоплазии и РШМ. При выявлении риска рекомендуется сокращение сроков скрининга или проведение биопсии шейки матки.

Личный вклад автора

Автор участвовал в выборе темы диссертационной работы, клинико-лабораторном обследовании пациенток, сборе биологического материала и лечений, в проведении анализа медицинской документации, в статистической обработке материала и обобщении полученных результатов.

Соответствие диссертации паспорту полученной специальности

Научные положения диссертации соответствуют специальности 14.01.01 - «акушерство и гинекология», полученные в работе результаты соответствуют области исследования по специальности, пунктам 3, 4, 5 паспорта акушерства и гинекологии.

Апробация диссертации

Материалы диссертации доложены на XVII Всероссийском конгрессе «Амбулаторно-поликлиническая практика: проблемы и перспективы» (Москва, 22-25 марта 2011), на XII Всероссийском конгрессе «Мать и дитя» (Москва, 2023 сентября 2011), на курсах усовершенствования врачей «Диагностика, лечение, профилактика патологии шейки матки. Кольпоскопия» (Москва, 17-21 декабря 2012), на VII Международном конгрессе по репродуктивной медицине (Москва, 21-24 января 2013), на XIX Всероссийском конгрессе «Амбулаторно-поликлиническая помощь - в эпицентре женского здоровья» (Москва, 12-15 марта 2013), на курсах усовершенствования врачей «Кольпоскопия и патология шейки матки» (Москва, 3-16 апреля 2013), на Научно-практической конференций с международным участием «Национальный и международный опыт охраны репродуктивного здоровья девочек» (Москва, 4-7 июня 2013), на XXIX Международном конгрессе с курсом эндоскопии «Новые технологии в диагностике и лечении гинекологических заболеваний» (Москва, 7-10 июня 2013), на XIV Всероссийском конгрессе «Мать и дитя» (Москва, 24-27 сентября 2013), на VIII Международном конгрессе по репродуктивной медицине (Москва, 20-23 января 2014), на XX Юбилейном Всероссийском конгрессе с международным участием «Амбулаторно-поликлиническая помощь в эпицентре женского здоровья» (Москва, 18-21 марта 2014), на XV Всероссийском форуме «Мать и Дитя» (Москва, 23-26 сентября 2014), на Еш^т 2015 (Севилья, Испания, 4-7 февраля 2015), на VIII региональном форуме «Мать и дитя» (Сочи, 29-июня-1 июля 2015), на XXII Всероссийском конгрессе с международным участием «Амбулаторно-поликлиническая практика: диагностика, лечение, профилактика» (Москва, 4-7 апреля 2016), на

XXIII Российском национальном конгрессе «Человек и Лекарство» (Москва, 11-14 апреля 2016), на XIX Международном конгрессе по репродуктивной медицине (Москва,17-20 января 2017).

Диссертационная работа обсуждена на межклинической конференции научно-поликлинического отделения (НПО) (21.04.2016г.) и заседании апробационной комиссии ФГБУ «НЦАГиП им. В.И. Кулакова» Минздрава России (09.06.2016г., протокол № 7).

Внедрение результатов в практику

Алгоритмы ведения пациенток с ВПЧ-ассоциированными заболеваниями шейки матки, основанные на результатах исследования, используются в практической деятельности врачей акушеров-гинекологов НПО ФГБУ «НЦАГиП им. В.И. Кулакова» Минздрава России.

По теме диссертации опубликовано 15 научных работ, из них 5 - в изданиях рецензируемых ВАК Министерства образования РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, 4 глав, выводов, практических рекомендаций, приложения и списка литературы. Работа изложена на 120 страницах машинописного текста, содержит 25 рисунка, 12 таблиц. Список литературы содержит 142 работы, в том числе 25 отечественных и 117 работ зарубежных авторов.

Глава 1 . ПАПИЛЛОМАВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ (обзор литературы)

1.1. Распространенность ПВИ

Известно около 120 типов ВПЧ, примерно 40 из них инфицируют аногенитальную область [2,3,21,23,29]. Все генитальные серотипы ВПЧ отнесены к подгруппе А, которая согласно филогенетической классификации, подразделена на основе различий последовательностей генов L1, Е6, Е7 на 7 филогенетических групп генитальных ВПЧ: А5, А6, А7, А8, А9, А10, А11 (45 серотипов). Группа А9 включает 16, 31, 33, 35, 52, 58, 67 типы, А7 - 18, 39, 45, 59, 68, 70 типы и с 85 типа и далее, А5 - 26, 51, 69, 82 типы, А6 - 30, 53, 56, 66 типы, А11 - 34, 73 типы [39,45,48]. Разделение по группам важно для динамического наблюдения за вирусной инфекцией и более точного прогнозирования ее развития, так как разные типы ВПЧ обладают разным онкогенным потенциалом, а также способностью к персистенции. Так доказано, что 51 и 56 типы ВПЧ являются наименее канцерогенными и более эффективно элиминируются из организма [37,120].

По данным Европейского отделения Международного общества по изучению инфекций в акушерстве и гинекологии ЬГОБОО-ЕиЕОРЕ, ВПЧ подразделяются на следующие группы онкологического риска: высокого (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 46, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82 типы) и низкого (6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81) [22].

Известно, что спектр генотипов ВПЧ варьирует в различных регионах. Например, при исследовании, проведенном среди жительниц Чехии в 1999г, методом ПЦР, ВПЧ был обнаружен в 44% образцов. Чаще всего (в 55% случаев) в образцах присутствует ВПЧ 16 типа [38].

По отечественным данным, ВПЧ выявлен у 30.3% здорового населения Европейского региона страны [1]. При этом наиболее распространенными типами являются ВПЧ 16 (61.6%), 18 (7%), 33 (5%), 45 (3.6%), 31 (3.3%) [38]. В

Испании ВПЧ инфицированы всего лишь 5% женщин, в Австрии - 68% [38]. Среди жительниц Китая и Южной Бразилии с РШМ и предраковыми поражениями, выявлено широкое распространение ВПЧ 52 и 58 типов - 23.8% и 13.8% соответственно. В 2010г Ding T. et al. представили следующие результаты по Азиатским регионам: ВПЧ 16 (33.3%), ВПЧ 58 (23.8%) - имеется тенденция к увеличению (12% в 1999 г.), ВПЧ 33 (8%), ВПЧ 18 (8%), ВПЧ 31 (8%) [36,50,53,77].

В Европе наиболее распространенными типами ВПЧ у женщин с CIN и РШМ считаются 16 (61.6%) и 18 (7%), в Китае - 16 (33.3%) и 58 (23.8%), в Мексике - 58 (28.5%), 16 (25.7%) и 18 (13.3%), в Южной Бразилии - 16 (34.7%), 58 (13.8%) и 33 (13.8%) типы [44,61,78,79,139]. Мета-анализ, включающий 14 японских исследований показал, что часто встречающимися типами в Японии являются ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 52, 58 типов. N. Munoz et al. (2004) сообщили, что в Юго-Восточной Азии ВПЧ 16 и 18 типов при РШМ выявлялись в 73.5%, в Северной Африке - 76.9% , в Европе - 71.5%. В Юго-Восточной Азии ВПЧ 52 и 58 типов были обнаружены в 6.1% случаях РШМ, в Северной Африке - 1.5%, в Европе (Северной Америке) - 1.1% [32,60]. В Японии ВПЧ 16 и 18 типов встречались реже (58.8%), а ВПЧ 52 и 58 типов были более распространенными (13.7%). Таким образом, ВПЧ 52 и 58 типов в последнее время часто выявляются при CIN и РШМ, но их значение в развитии предраковых заболеваний шейки матки в популяции женщин РФ не изучено.

Молекулярная филогеография является «золотым стандартом» описания генеалогии, трансмисии и распространения вируса в прошлом и мощным эпидемиологическим инструментом определения связи ВПЧ 58 типа с РШМ. Однако в связи с неравномерным распределением определенных для международной популяции уровней заболеваемости, в дополнение к отсутствию информации по некоторым нациям и регионам с высокой распространенностью ВПЧ 58 типа, результаты филогеографического анализа глобального географического распределения ВПЧ 58 типа еще не доложены.

Ни в одной из рассмотренных публикаций не было проведено подробной аналитической оценки глобальной филогеографии ВИЧ 58 типа, как и истории миграции вируса. Следует отметить, что для Континентального Китая, являющегося регионом с исключительно высокой распространенностью ВПЧ 58 типа, накоплено недостаточно данных по нуклеотидным последовательностям генома ВПЧ 58 для проведения анализа. Как сформировалась уникальная картина распределения ВПЧ различных типов? Связана ли она с миграцией и эволюцией вариантов ВПЧ, либо с восприимчивостью популяции и региональными различиями программ скрининга? Молекулярная филогеография является подходящим методом разрешения этих вопросов, позволяет не только отслеживать миграцию и распространения «древних» штаммов вируса, но также является и мощным эпидемиологическим инструментом определения связи различных типов ВПЧ с РШМ. В прошлом принципы филогеографии были использованы для анализа ВПЧ 16 типа, результаты которого вдохновили и озадачили нас. В течение долгого времени различия внутри типов ВПЧ считались довольно ограниченными, так как различия нуклеотидных последовательностей гена L1 укладывались в 2%-ный диапазон. Таким образом, эволюция ВПЧ отражает картину миграции и эволюции человека. Однако было проведено только небольшое число исследований, направленных на изучение филогеографии ВПЧ 58 типа. Calleja-Macias I.E. (2005) определил отсутствие четкого сходства филогенетической топологии ВПЧ 58 и 16 типов [30,117,142].

Высокая распространенность ВПЧ 58 типа выявлена у пациенток с предраковыми заболеваниями шейки матки в Южной Бразилии. Частота и генотипирование ВПЧ определялись методом ПЦР у женщин с наличием атипических клеток при цитологическом и/или гистологическом исследовании. Были оценены образцы шейки матки у 256 пациенток, из них 51% оказались ВПЧ-позитивными. Наиболее распространенными генотипами были ВПЧ 16 (34.7%) и 58 (13.8%) типов, далее - ВПЧ 33 (9.72%), 11 (8.33%), 18 (5.55%), 53

(5.55%), и 6 (4.2%). В четырех образцах (5,55%) выявлены несколько типов ВПЧ [79].

В аналогичном исследовании определялась распространенность ВПЧ у 332 женщин Гонконга с наличием атипических клеток в цитологических мазках. Общее количество ВПЧ-позитивных женщин составило 44.3%. ВПЧ был выявлен у 18.6% женщин с воспалительными изменениями шейки матки, 36.4% - с кондиломами, 64.7% - с CIN I, 37.9% - с CIN II, 68. 3% - с CIN III и 77.8% - с карциномой шейки матки. Несколько типов ВПЧ были обнаружены в 31,3% случаях у женщин с нормальной цитограммой и цитограммой воспаления, в 10.5% - с CIN и карциномой шейки матки. Наиболее часто определяющимися типами были ВПЧ 16 (33.3%), ВПЧ 58 (23.8%), ВПЧ 11, 18, 31 (8.8%) и ВПЧ 33 (6.8%). Редко встречающийся во всем мире ВПЧ 58 типа оказался вторым наиболее распространенным генотипом, обнаруженным у пациенток с цервикальной карциномой. Наличие ПВИ, обусловленной ВПЧ 58 типа, показало значительную корреляцию с CIN/карциномой (95% ДИ = 1.2214.35) и значительную тенденцию увеличения распространенности с увеличением степени тяжести поражения шейки матки [36,50,77]. Таким образом, высокая распространенность ВПЧ 58 типа у пациенток с карциномой шейки матки играет важную роль в области разработки новых методов выявления ВПЧ и вакцин.

В Мексике проводилось исследование по определению частоты и типов ВПЧ в биоптатах шейки матки у 200 женщин с CIN и РШМ. Так, 186 женщин были ВПЧ-позитивными; у 55.9% из них - плоскоклеточное интраэпителиальное поражение низкой степени (LSIL), у 36% -плоскоклеточное интраэпителиальное поражение высокой степени (HSIL) и у 8.1% - инвазивный РШМ. Частота ВПЧ составила 56.4% случаев, ВПЧ 58 типа была выявлена у 28.5%, ВПЧ 16 - 25.7%, ВПЧ 18 - 13.3%, ВПЧ 33 - 11.4% и 31 - 8.5%. Во всех случаях наиболее часто выявлялся ВПЧ 58 типа [78].

В исследовании, проведенном в Норвегии, также было выявлено изменение распределения типов ВПЧ: повышение частоты выявляемости ВПЧ 16 типа при снижении выявляемости ВПЧ 18 типа среди случаев злокачественных новообразований шейки матки с 1990 по 2003 гг., по сравнению с периодом 1990-1994 гг.

Актуальные и интересные данные предыдущих исследований подкрепляют предположение о возможности изменения распределения типов ВПЧ среди случаев РШМ с течением времени в конкретной популяции. Изменение типов ВПЧ в различных регионах мира после вакцинации против ВПЧ также нельзя отрицать. Таким образом, ВПЧ 52 и 58 типов относятся к филогенетической группе - А9 (высоконкогенные типы), также же, как и ВПЧ 16, 31, 33, 35, но в отличие от последних мало изучены.

1.2. Роль ВПЧ в развитии CIN и РШМ

В структуре патологии шейки матки у женщин репродуктивного периода CIN составляют 17-20%. После инфицирования ВПЧ цервикальная интраэпителиальная неоплазия высокой степени (CIN II-III) развивается уже через 3 года у 27% женщин [3]. Исследованиями последних лет доказано, что в 50-80% образцах CIN II и CIN III эпителия шейки матки обнаружен ВПЧ высокой степени онкогенного риска (преимущественно 16 и 18 типов), в то время как в 25-30% случаев обнаружены другие типы ВПЧ [3,38].

Факторы риска развития ПВИ: особенности сексуального поведения (раннее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, наличие партнеров, имеющие контакты с женщиной, у которой диагностирован РШМ или аногенитальные кондиломы, другие заболевания, передающиеся половым путем - хламидиоз, гонорея, трихомониаз, сифилис, герпес-вирусная инфекция и т.д.), беременность, неоднократные аборты, неоднократные роды, курение, употребление алкоголя, изменение иммунного статуса, авитаминоз, молодой возраст, длительное использование гормональных контрацептивов

(более 5 лет). Факторами риска развития CIN являются ВПЧ-инфекция, раннее начало половой жизни, наличие большого числа половых партнеров, роды и аборты в очень молодом возрасте [15,68,70,74].

Наиболее опасным фактором прогрессии является длительная персистенция ВПЧ (более 2-х лет) [58,83,136]. Персистенция ВПЧ более 6 месяцев чаще встречается с увеличением возраста женщины и обусловлена типом ВПЧ [109].

При ВПЧ-ассоциированных заболеваниях, как и при других хронических процессах с длительной персистенцией вирусов, развиваются иммунодефицитные состояния, которые рассматриваются как вторичные иммунодефициты, обусловленные недостаточностью разных звеньев иммуной системы [6,17]. ВПЧ «обманывает» иммунную систему за счет вирусных белков [25,52,109].

Важен семейный анамнез: у женщин, чьим матерям и сестрам поставлен диагноз РШМ, риск развития РШМ в 2-3 раза больше.

Некоторые исследования показали, что в механизме развития CIN и РШМ играет роль еще и диета с низким содержанием фруктов и овощей, а также избыточный вес, которые могут быть факторами риска развития неопластических процессов эпителия шейки матки.

У женщин, матери которых принимали во время беременности диэтилстильбестрол, повышается риск развития РШМ. Данный препарат широко применялся в США с 1940 по 1971 гг. Связь между использованием диэтилстильбестрола и развитием РШМ была доказана в 1971 году. К счастью, РШМ встречался редко -1 случай на 1000 девочек, матери которых принимали ДЭС [51]. Особенностью являлось то, что РШМ выявлялся у женщин в молодом возрасте (где-то с 20 лет), хотя раньше он не встречался у женщин в таком возрасте. В результате эту форму рака назвали "фундаментально новым ятрогенным заболеванием" [122].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Бестаева, Нонна Владиславовна, 2017 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Александрова Ю.Н., Лыщев А.А., Сафронникова Н.Р. Папилломавирусная инфекция у здоровых женщин Санкт-Петербурга. Вопросы онкол.-2000.-Т.б.-.№2.- С.175-179.

2. Аполихина И.А., Кулаков В.И. Папилломавирусная инфекция гениталий: актуальная проблема современной гинекологии и пути ее решения. -Москва, 2006. - 98 с.

3. Ашрафян Л.А., Киселев В.И. Опухоли репродуктивных органов (этиология и патогенез). - М.: Изд-во Дмитрейд График Групп, 2008. 216 с., ил 26.

4. Баггиш М. Кольпоскопия. Атлас-справочник. Пер. с англ.-М., «Практика», 2008. 340 с., 865 цв. илл.

5. Бахидзе Е.В., Аршавская И.Л. Роль вируса папилломы человека в диагностике, мониторинге и прогнозе рака шейки матки // Сибирский онкологический журнал, 2012.№ 3. С. 34-40.

6. Использование циклоферона в терапии папилломавирусной инфекции. Рекомендации для врачей / Исаков В. А., Ермоленко Д. К., Кутуева Ф. Р. [и др.]. 2007, СПб-Великий Новгород, 64 с.

7. Киселев В.И., Муйжнек Е.Л. Молекулярные механизмы развития дисплазии шейки матки: новые знания - новые возможности // «Лаборатории ДНК-диагностики» - 2011, N4(13). - 20 с.

8. Клиническое значение молекулярных маркеров при инфекции / Роговская С.И., Трофимов Д.Ю., Коган Е.А., Сабдулаева Э.Х. // Акушерство и гинекология. - 2011. - № 4. - С. 4-10.

9. Кнорре Д. Г., Мызина С. Д. Биологическая химия. — 3. — Москва: Высшая школа, 2000. — 479 с. — 7000 экз. — ISBN 5060037207.

10. Комплексная борьба с раком шейки матки. Краткое практическое руководство. В0З.2010. 278 с.

11. Комплексное лечение дисплазии эпителия шейки матки умеренной и тяжелой степени на фоне ВПЧ-инфекции / Доброхотова Ю.Э., Венедиктова М.Г., Гришин И.И., Саранцев А.Н., Морозова К.В., Луценко Н.Н. Гинекология, 2015.Т17. №1. С. 8-12.

12. Коханевич Е.В. Патология шейки матки и тела матки. Руководство для врачей.-Нежин:Гидромакс, 2009. - 352 с.

13. Кулаков В.И., Прилепская В.Н., Паавонен Й. Профилактика рака шейки: Руководство для врачей.-М.: МЕДпресс-информ, 2008. - 56 с.:ил

14. Кулаков В.И., Савельева Г.М., Манухин И.Б. Гинекология. Национальное руководство.- М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 1088 с.

15. Минкина Г.Н., Манухин И.Б., Франк Г.А. Предрак шейки матки. -М.: Аэрограф-медиа, 2001. - С. 66-69.

16. Молекулярная биология клетки: в трех томах / Альбертс Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Робертс К., Уотсон Дж. — 2. — Москва: Мир, 1994. — Т. 1. — 517 с.

17. Нестерова И. В. Стратегия и тактика иммунотерапии вторичных иммунодефицитов с инфекционным синдромом. Вестник МЕДСИ, -2009; 3: 2432.

18. Новик В.И.. Эпидемиология РШМ, факторы риска, скрининг. Практическая онкология, Т3, №3, 2002, С. 156-165.

19. Новое в кольпоскопии / Роговская С.И., Подзолкова Н.М., Минкина Г.Н. [и др.] // Гинекология. - 2011 - № 13 (5) - С. 62-66.

20. Папилломавирусная инфекция: диагностика, лечение и профилактика / Прилепская В.Н., Роговская С.И., Кондриков Н.И., Сухих Г.Т.-М.:МЕДпресс-информ, 2007. - 32 с.

21. Прилепская В.Н. Заболевания шейки матки, влагалища и вульвы. Клинические лекции. Изд. 4-е.М.: МЕД пресс-информ, 2005. - 432 с.

22. Рекомендации по диагностике и лечению папилломавирусных инфекций женского генитального тракта. Официальная публикация

Европейского Общества по инфекционным заболеваниям в акушерстве и гинекологии // European J. Inr. Immunol. Diseases in Obstetrics and Gynaecology. Vol. 4, 5. Supplement 212001.

23. Роговская С.И. Папилломавирусная инфекция у женщин и патология шейки матки: в помощь практикующему врачу.- Изд. 2-еМ.: ГЭОТАР-Медиа, 2008.-192 с.

24. Современные требования к диагностике генитальной папилломавирусной инфекции: количественный подход. / Куевда Д.А., Шипулина О.Ю., Минкина Г.Н., Пиксасова О. // Тезисы 2-го Всероссийского конгресса дерматовенерологов, С-Пб, 2007. С. 144.

25. Стерн П.Л., Г.С.Китченер; пер с анг.; под общ ред акд. РАМН Г.Т. Сухих, проф. В.Н. Прилепской. Вакцина для профилактики РШМ.-М: МЕДпресс-информ, 2009.-192с.:ил.

26. Сухих Г.Т., Прилепская В.Н. Профилактика рака шейки матки: руководство для врачей.- Изд. 3-е.М.: МЕДпресс-информ, 2012.-192с.:ил.

27. Шабалова И.П. Цитологический атлас. Критерии диагностики заболеваний шейки матки. М.: Триада-X, 2001. - 113 с.

28. A higher level of human papillomavirus 16 DNA was associated with increased risk for cervical carcinoma in situ / Josefsson A.M., Magnusson P.K., Ylitalo N. [et al.] // J. Lancet.2000. 355:2189—2193.

29. A review of human carcinogens. Part B. Biological agents / Bouvard V., Baan R., Straif K., Grosse Y., Secretan B., el Ghissassi F., Benbrahim-Tallaa L., Guha N., Freeman C., Galichet L., Cogliano V. // Lancet. Oncol. 2009, 10, 321-322.

30. A statistical phylogeography of influenza A H5N1 / Wallace R.G., Hodac H., Lathrop R.H. [et al. ] // Proc Natl Acad Sci USA, 2007, 104: 4473—4478.

31. ACCPAB members. Human papillomavirus type distribution in women from Asia: a meta-analysis / Bao Y.P., Li N., Smith J.S., Qiao Y.L. // Int. J. Gynecol. Cancer 2008; 18:71-9.

32. Against which human papillomavirus types shall we vaccinate and screen? The international perspective / Munoz N., Bosch F. X., Castellsagu'e X. [et al.] // Int J Cancer, 2004, 111: 278-285.

33. American Cancer Society Guideline for the Early Detection of Cervical Neoplasia and Cancer / Saslow D. [et al.] // CA Cancer J Clin. 2002; 52: 342-362.

34. American Society for Colposcopy and Cervical Pathology. Journal of Lower Genital Tract Disease, 2012, 16(3): 00Y00.

35. Asian-American variants of human papillomavirus 16 and risk for cervical cancer: a case-control study / Berumen J. [et al.] // J Natl Cancer Inst 2001;93:1325-1330.

36. Association of human papillomavirus type 58 variant with the risk of cervical cancer / Chan P.K., Lam C.W., Cheung T.H. [et al.] // J Natl Cancer Inst, 2002, 94: 1249—1301.

37. Bernard H.U., Calleja-Macias I.E., Dunn S.T. Genome variation of human papillomavirus types: Phylogenetic and medical implications // Int. J. Cancer. - 2006. - Vol. 118. - P. 1071-1076.

38. Bosch F.X., Castellsague X., S. de Sanjose. Cancer Epidemiology and Registration Unit, IDIBELL, Institut Catala de Oncologia, Hospitalet del Llobregat, Barcelona, Spain. British Journal of Cancer, 2008; 98, 15-21.

39. Bravo I.G., de Sanjose S., Gottschling M: The clinical importance of understanding the evolution of papillomaviruses. Trends Microbiol 2010;18:432-438.

40. Cameron J.E., Hagensee M.E. Human papillomavirus infection and disease in the HIV+ individual. Cancer Treat Res. 2007;133:185-213.

41. Carcopino X., Henry M., Benmoura D. Determination of HPV type 16 and 18 viral load in cervical smears of women referred to colposcopy. J Med Virol. 2006 Aug; 78(8): 1131-1140.

42. Cervical Cancer Working Group Report / Konno R., Sagae S., Yoshikawa H. [et al.] // Jpn. J. Clin. Oncol, 2010, 40: p. 44-50.

43. Chan P.K. Human papillomavirus type 58: the unique role in cervical

cancers in East Asia. Cell Biosci. 2012 May 9;2(1): 17.

44. Characteristic of HPV prevalence among women in Liaoning province, China / Sun Z.R., Ji Y.H., Zhou W.Q., Zhang S.L., Jiang W.G., Ruan Q. // Int. J. Gynaecol. Obstet. 2010, 109, 105-109.

45. Classification of papillomaviruses (PVs) based on 189 PV types and proposal of taxonomic amendments. / Bernard H.U. [et al.] // Virology 2010;401:70-79.

46. Comparetto C. Human Papillomavirus Infection : Overview / C. Comparetto, F. Borruto // Handbook on human papillomavirus: prevalence, detection and management / H.B. Smith. - New York: Nova Science Publishers, Inc., 2013. -Vol. 1. - P. 1-137

47. Comprehensive cervical cancer control. A guide to essential practice -Second edition. WHO 2014; 364 p.

48. de Villiers EM: Cross-roads in the classification of papillomaviruses. Virology 2013;445:2-10.

49. Decreased expression of SCUBE2 is associated with progression and prognosis in colorectal cancer / Song Q., Li C., Feng X., Yu A., Tang H., Peng Z., Wang X. // Oncol Rep. 2015 Apr;33(4): 1956-64.

50. Determinants of cervical human papillomavirus infection: Differences between high- and low-oncogenic risk types / Chan P.K., Chang A.R., Cheung J.L. [et al.] // J Infect Dis, 2002, 185: 28—35.

51. Diethylstilbestrol, the effects on the health of users and their children // in: Harden, A. (ed.), Women and Pharmaceuticals Bulletin, Amsterdam, Wemos/HAI International Group on Women and Pharmaceuticals, Nov 1990, pp. 5-7.

52. Disaia P.J., Creasman W.T. Клиническая онкогинекология. Пер. с англ. под ред. Е.Г.Новиковой. - М.: ООО «Рид Элсивер», 2011. - Т.1. - 316с.:ил.

53. Distribution of human papillomavirus 58 and 52 E6/E7 variants in cervical neoplasia in Chinese women / Ding T., Wang X., Ye F., Cheng X., Ma D., Lu W., Xie X. // Gynecol Oncol. 2010 Dec; 119(3):436-43.

54. Distribution of human papillomavirus type 16 E6 and E7 gene variants in the progression of cervical dysplasia in Korean women / Lee C.W., Bae J.H., Lee S.J., Ho E.M., Lee I.H., Park Y.G., Park J.S. // J Obstet Gynaecol Res. 2011 Oct;37(10):1320-6.

55. Distribution of Human Papillomavirus Type 58 Variants in Progression of Cervical Dysplasia in Korean Women / Bae Jeong-Hoon, Jo L.K. Cheung , Sung-Jong Lee, Alfred C.S. Luk , Seo-Yun Tong , Paul K.S. Chan , and Jong-Sup Park. // J. Microbiol. Biotechnol. (2009), 19(9), 1051-1054.

56. Diversifying selection in human papillomavirus type 16 lineages based on complete genome analyses / Chen Z. [et al.] // J Virol 2005;79:7014-7023.

57. E6 and E7 variants of human papillomavirus-16 and -52 in Japan, the Philippines, and Vietnam. / Azumi Ishizaki, Kaori Matsushita, Huyen Thi Thanh Hoang, Dorothy M Agdamag, Cuong Hung Nguyen, Vuong Thi Tran, Toshiyuki Sasagawa, Kunikazu Saikawa, Raphael Lihana, Hung Viet Pham, Xiuqiong Bi, Van Thanh Ta, Thuc Van Pham, Hiroshi Ichimura // J Med Virol 2013 Jun;85(6): 1069-76.

58. Edgren G. Risk of anogenital cancer after diagnosis of cervical intraepithelial neoplasia : a prospective populationbased study / G. Edgren, P. Sparen // Lancet Oncol. - 2007. - Vol. 8. - P. 311-316.

59. Efficacy of HPV-based screening for prevention of invasive cervical cancer: follow-up of four European randomised controlled trials / Ronco G., Dillner J., Elfstrom K.M. [et al.] // Lancet. 2013;383:524-532.

60. Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer / Munoz N., Bosch F.X., de Sanjose S., Herrero R., Castellsague X., Shah K.V., Snijders P.J., Meijer C.J. // N. Engl. J. Med. 2003, 348, 518-527.

61. European Code Against Cancer and scientific justification: third version (2003) / Boyle P., Autier P., Bartelink H. [et al.] // Ann of Oncology 2003;14:973-1005.

62. European Guidelines for Quality Assurance in Cervical Cancer Screening.Second Edition—Summary Document / M.Arbyn, A. Anttila, J.

Jordan , G. Ronco , U. Schenck , N. Segnan , H. Wiener , A. Herbert , L.von Karsa.// Ann Oncol. 2010 Mar; 21(3): 448-458.

63. Evolution and taxonomic classification of Alphapapillomavirus 7complete genomes: HPV18, HPV39, HPV45, HPV59, HPV68 and HPV70 / Chen Z. [et al.] // PLoS One 2013;8:e72565.

64. Evolutionary dynamics of variant genomes of human papillomavirus types 18, 45, and 97 / Chen Z. [et al.] // J Virol 2009;83:1443-1455.

65. Explanation and use of the colposcopy terminology of the IFCPC (International Federation for Cervical Pathology and Colposcopy) Rio 2011 / J.Quaas [et al.] // Geburtshilfe Frauenheilkd. - 2013. - Bd. 73 (9). - S. 901-907.

66. Expression of Fas Ligand and bcl-2 in Cervical Carcinoma and Their Prognostic Significance / Satoru M., Omi W., Kazutomo O. [et al.] // Am J Clin Pathol, 2005; 123: 879-885.

67. Expression of cysteine protease cathepsin L is increased in endometrial cancer and correlates with expressionof growth regulatory genes / Skrzypczak M., Springwald A., Lattrich C., Häring J., Schüler S., Ortmann O., Treeck O. // Cancer Invest. 2012 Jun;30(5):398-403.

68. Factors that influence the rate of epithelial maturation in the cervix in healthy young women / L.Y. Hwang [et al.] // J. Adolesc. Health. - 2009. - Vol. 44(2). - P. 103-110.

69. For the 2006 ASCCP-Sponsored Consensus Conference. 2006 consensus guidelines for the management of women with abnormal cervical screeninig tests // Wright Jr. Et al. / J Low Genit Tract Dis. 2007. Vol. 11(4). P. 201-222.

70. Genital human papillomavirus infection: incidence and risk factors in a cohort of female university students / R.L. Winer [et al.] // Am. J. Epidemiol. - 2003. - Vol. 157 (3). - P. 218-226.

71. Genomic diversity of human papillomavirus-16, 18, 31, and 35 isolates in a Mexican population and relationship to European, African, and Native American variants / Calleja-Macias I.E. [et al.] // Virology 2004;319:315-323.

72. Genomic polymorphism of human papillomavirus type 52 in women from Northeast China. / Sun Z., Lu Z., Liu J., Wang G., Zhou W., Yang L., Liu C., Ruan Q. // Int J Mol Sci. 2012; 13(11): 14962-14972.

73. Global cancer statistics, 2002. / Parkin DM, Bray F, Ferlay J, Pisani P. // CA Cancer J Clin 2005;55:74-108.

74. Hellberg, D. The biological role of smoking, oral contraceptive use and endogenous sexual steroid hormones in invasive squamous epithelial cervical cancer (49 refs) / D. Hellberg, U. Stendahl // Anticancer Res. - 2005. - Vol. 25. - P.3041-3046.

75. High grade cervical lesions are caused preferentially by non-European variants of HPVs 16 and 18. / Sichero L. [et al.] // Int J Cancer 2007;120:1763-1768.

76. High load for most high risk human papillomavirus genotypes is associated with prevalent cervical cancer precursors but only HPV16 load predicts the development of incident disease / Gravitt P.E., Kovacic M.B., Herrero R. [et al.] // Int. J. Cancer. - 2007. - Vol. 121. - P. 2787-2793.

77. High prevalence of human papillomavirus type 58 in Chinese women with cervical cancer and precancerous lesions / Chan P.K., Li W.H., Chan M.Y., Ma W.L., Cheung J.L., Cheng A.F. // J Med Virol. 1999 Oct; 59(2):232-238.

78. High prevalence of human papillomavirus type 58 in Mexican colposcopy patients / González-Losa Mdel R., Rosado-Lopez I., Valdez-González N., Puerto-Solís M. // J Clin. Virol. 2004 Mar; 29(3):202-5.

79. High prevalence of human papillomavirus type 58 in patients with cervical pre-malignant lesions in southern Brazil / Paesi S., Pretto E.S., Barea F. [et al.] // Brazil. J Med Virol. 2009; 81:1270-1275.

80. High-risk human papillomavirus DNA load in a population-based cervical screening cohort in relation to the detection of high-grade cervical intraepithelial neoplasia and cervical cancer / Hesselink A.T., Berkhof J., Heideman D.A. [et al.] // Int J Cancer, 2009;124:381.

81. HPV16 genetic variation and the development of cervical cancer worldwide / Cornet I. [et al.] // Br J Cancer 2013;108:240-244.

82. HPV16 sublineage associations with histology-specific cancer risk using HPV whole-genome sequences in 3,200 women / Mirabello L. [et al.] // J Natl Cancer Inst 2016;108(9): djw100.

83. Human papillomavirus genotypes and the cumulative 2-year risk of cervical precancer // Wheeler C.M. [et al.] // J Infect Dis, 2006:194: 1291-1299.

84. Human Papillomavirus in cervical cancer screening: important role as biomarker / Boulet G.A., Horvath C.A., Berghmans S. [et al.] // Cancer Epidemiol Biomarkers Prep 17:810-817, 2008.

85. Human papillomavirus infection in Shenyang city, People's Republic of China: A population-based study / Li L.K., Dai M., Clifford G.M., Yao W.Q., Arslan A., Li N., Shi J.F., Snijders P.J., Meijer C.J., Qiao Y.L., Franceschi S. // Br. J. Cancer 2006, 95, 1593-1597.

86. Human papillomavirus infections among. Japanese women: Age-related prevalence and type-specific risk for cervical cancer / Onuki M., Matsumoto K., Satoh T., Oki A., Okada S., Minaguchi T., Ochi H., Nakao S., Someya K., Yamada N., Hamada H., Yoshikawa H. // Cancer Sci.2009, 100, 1312-1316.

87. Human papillomavirus type 16 and 18 variants: race-related distribution and persistence / Xi L.F.[et al.] // J Natl Cancer Inst 2006;98:1045-1052.

88. Human papillomavirus type 16 genetic variants: phylogeny and classification based on E6 and LCR /Cornet I. [et al.] // J Virol 2012;86:6855-6861.

89. Human papillomavirus type 16 variant lineages in United States populations characterized by nucleotide sequence analysis of the E6, L2, and L1 coding segments / Yamada T. [et al.] // J Virol 1995;69:7743-7753.

90. Human papillomavirus type 16 variants and risk of cervical cancer / Hildesheim A. [et al.] // J Natl Cancer Inst 2001;93:315-318.

91. Human papillomavirus type 18 variant lineages in United States populations characterized by sequence analysis of LCR-E6, E2, and L1 regions / Arias-Pulido H. [et al.] // Virology 2005;338:22-34.

92. Human papillomavirus type 33 polymorphisms and high-grade squamous intraepithelial lesions of the uterine cervix / Khouadri S. [et al.] // J Infect Dis 2006;194:886-894.

93. Human papillomavirus type distribution in 30,848 invasive cervical cancers worldwide: variation by geographical region, histological type and year of publication / N. Li [et al.] // Int. J. Cancer. - 2011. - Vol. 128. - P. 927-935.

94. Human papillomavirus types 52 and 58 are prevalent in uterine cervical squamous lesions from Japanese women / Takehara Kz, Toda T., Nishimura T., Sakane J., Kawakami Y., Mizunoe T., Nishiwaki M., Taniyama K. // Patholog Res Int. 2011; 2011: 246936.

95. Immunoexpression of Cyclin D1 and PTEN in Various Endometrial Pathologies / Shawana S., Kehar S.I., Masood S., Aamir I. // J Coll Physicians Surg Pak. 2016 Apr;26(4):277-82. doi: 2291.

96. Increased risk for cervical disease progression of French women infected with the human papillomavirus type 16 E6-350G variant / Grodzki M., Besson G., Clavel C., Arslan A., Franceschi S., Birembaut P., Tommasino M., Zehbe I. // Cancer Epidemiol. Biomark. Prev. 2006, 15, 820-822.

97. Intracellular Human Papillomavirus E6, E7 mRNA quantification predicts CIN 2+ in cervical biopsies Better than Papanicolaou Screening for women regardless of age / Deirdre Pierry, Gerald Weiss, Benjamin Lack, Victor Chen, Judy Fusco // Arch Pathol Lab Med, 2012, 136: 956-960.

98. Is human papillomavirus viral load a clinically useful. Predictive marker? A longitudinal study / Constandinou-Williams C., Collins S.I., Roberts S. [et al.] // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. - 2010. - Vol. 19. - P. 832-837.

99. Jentschke M., Soergel P., Hillemanns P. Importance of HPV genotyping for the screening, therapy and management of cervical neoplasias. Geburtsh Frauenheilk. 2012;72:507-512.

100. Jentschke M., Hillemanns P. Systematic Comparison of Different Metaanalyses, Systematic Reviews and HTA Reports on Cervical Cancer Screening based on Cytology or HPV Test. Geburtshilfe Frauenheilkd. 2016 Oct; 76(10): 1081-1085.

101. Management of atypical squamous cells of undetermined significance or low-grade squamous intraepithelial lesions of the uterine cervix with human papilloma virus infection among young women aged less than 25 years / Ryu K.J., Lee S., Min K.J., Hong J.H., Song J.Y., Lee J.K., Lee N.W. // Diagn Cytopathol. 2016 Dec;44(12):959-963.

102. Marketta J. A., Jodlowski T.Z. Prevention and Treatment of Human Papillomavirus Infections, US Pharm. 2010;35(9):32-40.

103. Mendes de Oliveira C., Levi J.E. The Biological Impact of Genomic Diversity in Cervical Cancer Development // Acta Cytol. 2016;60(6):513-517.

104. Molecular detection methods of human papillomavirus / Zaravinos A., Mammas I.N., Sourvinos G., Spandidos D.A. // Int.J.Biol.Markers, 2009, 24(4): 21522.

105. Molecular variants of human papillomavirus types 16 and 18 preferentially associated with cervical neoplasia / Villa L.L. [et al.] // J Gen Virol 2000;81(pt 12):2959-2968.

106. Molecular Variants of HPV Type 16 E6 Among Honduran Women / Tabora N., Melchers W.J., van Doorn L.J., Quint W., Ferrera A. // Int J Gynecol Cancer. 2010 Apr;20(3):323-8.

107. Monsonego J. Prevention of cervical cancer: screening, progress and perspectives // Presse Med. - 2007. - Vol. 36, N 1, pt 2. - P. 92-111.

108. Natural history of cervical human papillomavirus infection in young women. A longitudinal cohort study / C.B. Woodman [et al.] // Lancet. - 2001. - Vol. 357. - P. 1831-1836.

109. Natural history of cervicovaginal HPV infections in young women / Ho GYF, Bierman R., Beardsley L. [et al.] // NEJM, 1998, 338: 423-428.

110. Obstetric outcomes after conservative treatment for intraepithelial or early invasive cervical lesions: systematic review and meta-analysis / Kyrgiou M. [et al.] // Lancet. 2006. Vol. 367. P. 489-498.].

111. Olaniyan O.B. Validity of colposcopy in the diagnosis of early cervical neoplasia : a review / O.B. Olaniyan // Afr. J. Reprod. Health. - 2002. -Vol. 6 (3). -P. 59-69.

112. Overview of human papillomavirus-based and other novel options for cervical cancer screening in developed and developing countries / Cuzick J. [et al.] // Vaccine 2008. Vol.10. P. 29-4.

113. P16ink4a - a possible marker in HPV persistence screening / Bleutu C., Botezatu A., Goia C.D. [et al.] // Roum Arch. Microbiol Immunol 2009; 68 (3): 1839.

114. P16(INK4a) immunohistochemistry is a promising biomarker to predict the outcome of low grade cervical intraepithelial neoplasia: comparison study with HPV genotyping/ Nishio Sakiko, Fujii Takuma, Nishio Hiroshi, Kameyama K., Saito M., Iwata T., Kubushiro K., Aoki D. // J Gynecol Oncol. 2013 Jul;24(3):215-21.

115. Peitsaro P., Johansson B., Syrjanen S. Integrated human papillomavirus type 16 is frequently found in cervical cancer precursors as demonstrated by a novel quantitative real-time PCR technique // J. Clin. Microbiol. 2002. Vol. 40. P. 886-891.

116. Pereira T., Naik S., Tamgadge A. Quantitative Evaluation of Macrophage Expression Using CD68 in Oral Submucous Fibrosis: An Immunohistochemical Study. Ann Med Health Sci Res. 2015 Nov-Dec;5(6):435-41.

117. Phylogeographic analysis of human papillomavirus 58. / Li Y.Y., Li Z. F., He Y. F., Kang Y. [et al.] // Sci China Ser C-Life Sci, 2009;52(12): 1164-1172.

118. Prevalence and viral load of oncogenic human papillomavirus types associated with cervical carcinoma in a population of North Italy / Broccolo F.,

Chiari S., Piana A., Castiglia P., Dell'Anna T. [et al.] // J.Med Virol. 2009 Feb; 81(2):278-87.

119. Primary cervical cancer screening with human papillomavirus: end of study results from the ATHENA study using HPV as the first-line screening test / Wright T.C., Stoler M.H., Behrens C.M., Sharma A., Zhang G., Wright T.L. // Gynecol Oncol. 2015 Feb;136(2):189-97.

120. Prophylactic quadrivalent human papillomavirus (types 6, 11 16 and 18) L1 virus-like particle vaccine in young women a randomized double-blind placebocontrolled multicentre phase II efficacy trial / Villa L.L., Costa R.L, Petta C.A. [et al.] // Lancet Oncol, 2005, 6: 271—278.

121. PTEN, a putative protein tyrosine phosphatase gene mutated in human brain, breast, and prostate cancer / Li J., Yen C., Liaw D., Podsypanina K., Bose S., Wang S.I., Puc J., Miliaresis C., Rodgers L., McCombie R., Bigner S.H., Giovanella B.C., Ittmann M., Tycko B.,Hibshoosh H.,Wigler M.H., Parsons R. // Science. 1997 Mar 28;275(5308): 1943-7.

122. Rakusen J., "DES", in: Phillips, A., Rakusen, J. (eds) and the Boston Women's Health Collective, The New Our Bodies, Ourselves (2nd UK edition), London, Penguin Books, 1989, p520.

123. Richart R.M. A modified terminology for cervical intraepithelial neoplasia / R.M. Richart // Obstet. Gynecol. - 1990. - Vol. 75 (1). - P. 131-133.

124. Sanger F. The Croonian Lecture, 1975. Nucleotide sequences in DNA // Proceedings of the Royal Society of London. Series B, Containing papers of a Biological character. Royal Society, 1975. - Vol. 191. - №1104. - P. 317-333.

125. Sanger F., Coulson A. R. A rapid method for determining sequences in DNA by primed synthesis with DNA polymerase // Journal of molecular biology. -1975. - Vol. 94. - №3. - P. 441-448.

126. Schiffman M. Integration of human papillomavirus vaccination , cytology, and human papillomavirus testing // Cancer. 2007;111(3): 145-53.

127. Sequence imputation of HPV16 genomes for genetic association studies / Smith B. [et al.] // PLoS One 2011;6:e21375.

128. Sequence variants of human papillomavirus type 16 in clinical samples permit verification and extension of epidemiological studies and construction of a phylogenetic tree / Ho L. [et al.] // J Clin Microbiol 1991;29:1765-1772.

129. Shafi M. European quality standards for the treatment of cervical intraepithelial neoplasia (CIN). European Federation of Colposcopy. [http://www.e-f-c.org]. Accessed July 1, 2014.

130. Snijders P., van den Brule A., Meijer C. The clinical relevance of human papillomavirus testing: relationship between analytical and clinical sensitivity. J. Pathology 2003; Vol: 201: 1-6.

131. Stoler M.H., Austin R.M., Zhao C. Point-Counterpoint: Cervical Cancer Screening Should Be Done by Primary Human Papillomavirus Testing with Genotyping and Reflex Cytology for Women over the Age of 25 Years // J Clin Microbiol. 2015 Sep;53(9):2798-804.

132. Surgery for cervical intraepithelial neoplasia / Martin-Hirsch P.P., Paraskevaidis E., Bryant A., Dickinson H.O., Keep S.L. // Cochrane Database Syst Rev. 2010 Jun 16;(6):CD001318.

133. The Bethesda System for Reporting Cervical Cytology: Definitions, Criteria and Explanatory Notes (2nd ed.) / Solomon D, Nayar R, eds.. / New York, NY: Springer, 2004:169-75.

134. The E6 oncoprotein encoded by human papillomavirus types 16 and 18 promotes the degradation of p53 / Scheffner M., Werness B.A., Huibregtse J.M., Levine A.J., Howley P.M. // Cell. 1990 Dec 21;63(6):1129-36).

135. The Korean guideline for cervical cancer screening / Kyung-Jin Min, Yoon Jae Lee, Mina Suh, Chong Woo Yoo, Myong Cheol Lim, Jaekyung Choi, Moran Ki, Yong-Man Kim, Jae-Weon Kim, Jea-Hoon Kim, Eal Whan Park, Hoo-Yeon Lee, Sung-Chul Lim, Chi-Heum Cho, Sung Ran Hong, Ji Yeon Dang, Soo Young Kim, Yeol Kim, Won-Chul Lee, and Jae-Kwan Lee. // J Gynecol Oncol. 2015

Jul; 26(3): 232-239.

136. The presence of persistent high-risk HPV genotypes in dysplastic cervical lesions is associated with progressive disease: Natural history up to 36 months / Remmink A.J., Walboomers J.M., Helmerhorst T.J., Voorhorst F.J., Rozendaal L., Risse E.K., Meijer C.J., Kenemans P. // Int. J. Cancer 1995, 61, 306311.

137. Tumor suppressor SCUBE2 inhibits breast-cancer cell migration and invasion through the reversal of epithelial-mesenchymal transition / Lin Y.C., Lee Y.C., Li L.H., Cheng C.J., Yang R.B. // J Cell Sci. 2014 Jan 1;127(Pt 1):85-100.

138. Use of primary high-risk human papillomavirus testing for cervical cancer screening: interim clinical guidance / Huh W.K., Ault K.A., Chelmow D. [et al.] // Gynecol Oncol. 2015;136:178-182.

139. Variants of human papillomavirus types 53, 58 and 66 identified in Central Brazil / Cerqueira D.M., Camara G.N., da Cruz M.R. [et al.] // Virus Genes, 2003, 26: 83—87.

140. What are the key statistics about cervical cancer? American Cancer Society. Atlanta, GA: American Cancer Society; 2015. Accessed at www.cancer.org/cancer/cervicalcancer/detailedguide /cervical-cancer-key-statistics on 10 April 2015).

141. WHO/ICO Information Centre on HPV and Cancer. Russian Federation: Human Papillomavirus and Related Cancers, Fact Sheet 2016 (October 7, 2016) [http: //www. hpvcentre.net].

142. Worldwide genomic diversity of the high-risk human papillomavirus types 31, 35, 52, and 58, four close relatives of human papillomavirus type 16. / Calleja-Macias I.E., Villa L. L., Prado J. C. [et al.] // J Virol, 2005, 79: 13630—13640.