ОПТИМИЗАЦИЯ ПРОГРАММЫ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ У ПАЦИЕНТОК С РИСКОМ РАЗВИТИЯ ТРОМБОФИЛИИ тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.01, кандидат медицинских наук Охтырская, Татьяна Анатольевна

• Охтырская, Татьяна Анатольевна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Охтырская, Татьяна Анатольевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Роль тромбофилии в повторных неудачах имплантации в программах ЭКО (обзор литературы).

1.1. Возможные причины неудач имплантации в программах ВРТ.

1.2.Роль состояния эндометрия в имплантации эмбриона.

1.3. Система гемостаза в программах ЭКО: наследственные и приобретенные факторы риска развития тромбофилии:.

1.3.1 .Наследственные факторы риска развития тромбофилии.

1.3.2.Антифосфолипидный синдром.

1.4. Применение низкомолекулярных гепаринов в программах ЭКО.

ГЛАВА П.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследования.

2.2. Методы исследования.

2.3.Протокол стимуляции суперовуляции.

2.4.Статистический анализ.

ГЛАВА III.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Клиническая характеристика пациенток исследуемых групп.

3.2. Результаты комплексного клинико-лабораторного обследования:.

3.2.1. Результаты обследования на наследственный полиморфизм генов предрасположенности к тромбофилии.

3.2.2. Результаты обследования на антифосфолипидный синдром.

3.3.Характеристика циклов ЭКО в исследуемых группах.

3.4.0ценка параметров гемостазиограммы в программе ЭКО у пациенток исследуемых групп.

3.5.Оценка эффективности программ ЭКО у пациенток исследуемых групп.

3.6. Морфологическая и иммуногистохимическая характеристика эндометрия у пациенток исследуемых групп.

3.7. Результаты обследования на наследственный полиморфизм генов фолатного обмена.

ГЛАВА IV

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «ОПТИМИЗАЦИЯ ПРОГРАММЫ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ У ПАЦИЕНТОК С РИСКОМ РАЗВИТИЯ ТРОМБОФИЛИИ»

Актуальность темы

В- последние годы предметом активного - обсуждения исследователей ----становится проблема повышения результативности циклов ЭКО. Несмотря на более чем 30 летнюю историю существования метода вспомогательных репродуктивных технологий, эффективность программ ЭКО за последние годы значительно не изменяется. Только 15-20% эмбрионов, перенесенных в программах ЭКО, успешно имплантируются [10]. При этом высказываются предположения, что в 2/3 случаев имплантационные потери связаны с нарушением рецептивности эндометрия [24, 92]. Под рецептивностью эндометрия понимают комплекс структурно-функциональных характеристик эндометрия с четкими временными и пространственными константами, определяющий способность эндометрия к имплантации [21].

Среди факторов, снижающих рецептивность эндометрия, на первое место выносят анатомические дефекты матки, хронический эндометрит, несоответствие толщины эндометрия дню переноса, сочетанную гинекологическую патологию (аденомиоз, миома матки), соматические, заболевания (в том числе аутоиммунные), тромбофилии [6,14,16,19,21]. Вероятнее всего, разная патология реализуется через различные механизмы нарушения рецептивности эндометрия. Предполагают сходство механизмов, лежащих в основе имплантационных потерь, с привычным невынашиванием беременности на раннем сроке [76]. При этом, по мнению большинства авторов, от 30 до 60% случаев привычного невынашивания беременности связано с состоянием тромбофилии [3,12,22].

Взаимосвязь между тромбофилическими состояниями и неудачными исходами ВРТ активно обсуждается в литературе, но механизмы влияния тромбофилии на исходы программ ВРТ до сих пор не ясны [97]. На фоне стимуляции суперовуляции происходит изменение коагуляционных параметров свертывающей системы крови, что коррелирует с уровнем эстрадиола в крови [7,17]. У женщин группы риска по развитию тромбофилии (нарушение жирового обмена, курение, аутоиммунные — нарушения, наследственный полиморфизм- генов предрасположенности к — тромбофилии) степень изменений в системе гемостаза более выражена, что может приводить к нарушению микроциркуляции крови и тромбообразованию. Обсуждается возможная причинно-следственная связь гиперкоагуляции и гипофибринолиза с повторными имплантационными потерями в программах ЭКО [29,97]. Однако, также существует противоположное наблюдение о наличии корреляции между ранним повышением маркеров тромбинемии и более высокой частотой наступления беременности в циклах ЭКО и ПЭ [7].

В настоящее время к наиболее изученному наследственному полиморфизму генов предрасположенности к тромбофилии относятся: мутация БУ Лейдена, мутация протромбина, полиморфизм генов РА1-1, фибриногена, тромбоцитарных гликопротеинов ГГСА2, ШЗВЗ. К приобретенным факторам риска развития тромбофилии относят антифосфолипидный синдром [12,13].

Наряду с влиянием полиморфизма генов системы гемостаза и. антифосфолипидного синдрома на состояние свертывающей и фибринолитической системы крови, микроциркуляцию и рецептивность эндометрия в литературе обсуждается влияние антифосфолипидных антител на качество ооцитов и эмбрионов в программах ЭКО [40,105].

Данные литературы относительно целесообразности обследования на факторы риска развития тромбофилии пациенток с повторными неэффективными программами ЭКО неоднозначны. Требуют детального анализа возможные механизмы влияния наследственного полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии и антител к фосфолипидам на реализацию репродуктивной функции в программах ВРТ; нет единого мнения о необходимости проведения профилактической патогенетической терапии у пациенток с наследственными и приобретенными факторами риска развития тромбофилии.

В настоящее время- одной из стратегий, направленных на повышение- --эффективности ЭКО, является применение антикоагулянтной терапии. При этом высказываются мнения о возможном положительном эффекте схем профилактической прегравидарной терапии антикоагулянтами не только на систему гемостаза, но и на белки, участвующие в формировании рецептивности эндометрия и адекватной имплантации [63,76,97]. Однако сроки и схемы этой терапии детально не исследованы.

Таким образом, изучение особенностей реализации программы ЭКО у пациенток с наследственными и приобретенными факторами риска развития тромбофилии, уточнение времени начала и длительности профилактической антикоагулянтной терапии является актуальным и современным.

Цель исследования

Изучить влияние наследственного полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии и антифосфолипидного синдрома на особенности реализации программы ЭКО у пациенток с бесплодием.

Задачи исследования

1.Оценить клинико-анамнестические данные, частоту и структуру наследственного полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии и антифосфолипидного синдрома у пациенток с 2-мя и более неудачными попытками ЭКО в анамнезе.

2.Оценить влияние полиморфизма гена PAI-1 675 5G/4G на морфологическое состояние эндометрия и экспрессию "классических" маркеров рецептивности эндометрия (пиноподии, стероидные рецепторы, LIF) в период "окна имплантации" у пациенток с неудачами ЭКО в анамнезе.

3. Оценить влияние полиморфизма гена PAI-1 675 5G/4G на экспрессию остеопонтина, VEGF и белка PAI-1 в эндометрии в период "окна имплантации" у пациенток с неудачами ЭКО в анамнезе.

4.Провести сравнительную оценку показателей гемостазиограммы в процессе реализации программы ЭКО у пациенток с высокой и низкой частотой полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии.

5.Провести сравнительную оценку фолликуло-, оогенеза, раннего эмбриогенеза у пациенток с высокой и низкой частотой полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии.

6.Оценить влияние профилактической схемы антикоагулянтной терапии на исходы программ ЭКО. Разработать алгоритм предварительного обследования пациенток программы ЭКО на наследственные и приобретенные факторы риска развития тромбофилии, подготовки их к реализации программы и проведению этапов ЭКО.

Научная новизна

В результате выполнения данной работы установлено, что у пациенток с повторными неэффективными попытками ЭКО повышена экспрессия белка PAI-1 в поверхностном эпителии эндометрия в период "окна имплантации", что дает новую информацию о механизмах, лежащих в основе нарушения имплантации. Определены маркеры рецептивности эндометрия, на экспрессию которых оказывает влияние наследственный полиморфизм гена PAI-1 675 5G/4G. Выявлена прямая корреляционная зависимость между 4G аллелем PAI-1 и уровнем белка PAI-1 в эндометрии.

Практическая значимость

В результате проведенной работы выявлено влияние полиморфизма гена PAI-1 675 5G/4G на рецептивность эндометрия. Полученные нами данные указывают на целесообразность обследования пациенток программы

ЭКО на наследственный полиморфизм генов предрасположенности к тромбофилии.

Установлено, что-у-пациенток с высокой частотой полиморфизма генов системы гемостаза отмечается более частое и выраженное повышение Д-димера ко дню переноса эмбрионов в полость матки, что указывает на высокий риск активации внутрисосудистого свертывания крови и тромботических осложнений у пациенток данной группы.

В данной работе продемонстрировано повышение эффективности программы ЭКО до 40% на фоне профилактической антикоагулянтной терапии по сравнению с 22,2% в стандартном протоколе ЭКО у пациенток с неудачными попытками ЭКО в анамнезе и высокой частотой полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии. Разработан алгоритм предварительного обследования пациенток программы ЭКО на лабораторные маркеры риска развития тромбофилии, подготовки их к реализации программы и проведению этапов ЭКО.

Положения, выносимые на защиту

1.Пациентки с 2-мя и более неэффективными попытками ЭКО в. анамнезе характеризуются высокой частотой наследственного полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии в различных сочетаниях (89,9%), из которых наиболее часто встречается гомо- и гетерозиготный полиморфизм генаРАЫ (40АЮ, 50/40) - 30,5% и 47,2%.

2.Более частое и выраженное повышение Д-димера в лютеиновую фазу цикла ЭКО у пациенток с высокой частотой полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии свидетельствует о повышенном риске активации внутрисосудистого свертывания крови, что является основанием для профилактического использования низкомолекулярных гепаринов.

3. Для женщин с неудачными попытками ЭКО в анамнезе в эндометрии в период "окна имплантации" характерно снижение экспрессии ЬП7, УЕОБ, остеопонтина и высокий уровень белка РА1-1 по сравнению с группой здоровых фертильных женщин. Присутствие аллеля РА1-1 сопровождается более высокой экспрессией белка РА1-1 в эндометрии.

4.Терапия малыми дозами антикоагулянтов в лютеиновую фазу цикла ---

ЭКО у пациенток с неудачными попытками ЭКО в анамнезе и высокой частотой полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии является профилактикой активации внутрисосудистого свертывания крови и позволяет повысить результативность программы ЭКО до 40%.

Внедрение результатов исследования в практику

Применение профилактической антикоагулянтной терапии в лютеиновую фазу цикла ЭКО у пациенток группы риска развития тромбофилии внедрено в практику работы отделения 1 гинекологии «НЦ АГиП им. академика В.И. Кулакова» Минздравсоцразвития России.

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, в т.ч. 3 в изданиях, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 134 страницах компьютерного текста, состоит из введения и 4 глав (обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты собственных исследований и их обсуждение, заключение), а также выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа иллюстрирована 27 таблицами и 18 рисунками. Использованная литература включает 22 источника на русском и 103 источника на английском языках.

Заключение диссертации по теме «Акушерство и гинекология», Охтырская, Татьяна Анатольевна

выводы

1.У 22,5% пациенток с 2-мя и более неудачными попытками ЭКО в анамнезе и носительством полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии отягощен семейный тромботический анамнез;. в репродуктивном анамнезе в 2,7 раза чаще отмечены случаи самопроизвольного прерывания беременности (38,9%), в том числе у 10,1% женщин - привычное невынашивание беременности. Различные варианты сочетания наследственного полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии (мутация БУ Лейдена, протромбина 020210А, фибриногена С455А, РА1-1 -675 5в/40, тромбоцитарных гликопротеинов ГГСА2 и ГГСВЗ) отмечены у 90% женщин с повторными неудачами ЭКО; наиболее часто (77,7%) выявляется гетеро- и гомозиготный полиморфизм гена РА1-1 675 5С/4а

Повышенные уровни антифосфолипидных антител выявлены у 22,2% пациенток с повторными неудачами ЭКО, при этом у 18,5% обследованных женщин повышение антител носит транзиторный характер.

2. Для пациенток с повторными неудачами ЭКО независимо от носительства полиморфизма гена РА1-1 675 50АЮ в период "окна имплантации" при нормальной морфологической структуре эндометрия характерен низкий процент пиноподий (<50%), снижение экспрессии ЬШ, что отражается на рецептивности эндометрия и приводит к неудачам имплантации.

3. В период "окна имплантации" у пациенток с повторными неудачами ЭКО независимо от носительства полиморфизма гена РА1-1 выявлено снижение экспрессии УЕОБ, снижение и перераспределение экспрессии остеопонтина, повышение в 3-4 раза уровня белка РА1-1 в поверхностном эпителии эндометрия по сравнению с группой фертильных женщин. Выявлена взаимосвязь между 40 аллелем РА1-1 и уровнем белка РА1-1 в эндометрии. У пациенток с гетеро- и гомозиготным полиморфизмом РА1-1

40АЮ и 50/40) отмечен более высокий уровень белка РА1-1 в эндометрии, что может быть одной из причин неудач имплантации.

4. При сопоставимых параметрах стимуляции овуляции, фолликуло- и оогенеза в группе женщин с высокой частотой встречаемости полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии ко дню переноса эмбрионов в полость матки в 2,1 раза чаще отмечено повышение Д-димера, что указывает на высокий риск активации внутрисосудистого свертывания крови и тромботических осложнений.

5.Эффективность программы ЭКО при сопоставимых параметрах фолликуло-, оогенеза и раннего эмбриогенеза у женщин с высокой частотой полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии ниже, чем у пациенток с низкой частотой или отсутствием полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии (22,2% и 27%, р>0,05).

6. Использование профилактических доз низкомолекулярных гепаринов (надропарин кальция 0,3 мл и/к) в лютеиновую фазу стимулированного цикла у женщин с повторными неудачами ЭКО в анамнезе и высокой частотой полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии позволяет увеличить частоту наступления беременности до 40% по сравнению с 22,2% в стандартном протоколе ЭКО.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1.Пациенткам с неудачами имплантации в анамнезе для определения индивидуальной подготовки к следующему циклу ЭКО необходимо проведение комплексного обследования, включающего в себя диагностику наследственного полиморфизма генов предрасположенности к тромбофилии, антител к фосфолипидам, исследование параметров гемостазиограммы, морфологическое и иммуногистохимическое исследование эндометрия.

2. При наличии у пациентки мутации Лейдена, протромбина, а также сочетания 3-х и более гетерозиготных или 2-х и более гомозиготных полиморфизмов по генам РА1-1, фибриногену, тромбоцитарным гликопротеинам ГГСА2, ГГСВЗ, положительных антител к фосфолипидам пациентка должна быть отнесена к группе высокого риска по активации внутрисосудистого свертывания крови на фоне гормональной стимуляции в программе ЭКО.

3.Пациенткам с неудачными попытками ЭКО в анамнезе и носительством гетеро- или гомозиготного полиморфизма гена РА1-1 50ЛЮ с целью повышения эффективности программы ЭКО рекомендованы профилактические дозы низкомолекулярных гепаринов (надропарин кальция 0,3 мл х 1 раз в день п/к) в течение 10 дней, начиная со следующего дня после трансвагинальной пункции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Охтырская, Татьяна Анатольевна, 2011 год

1. Бюллетень Всемирной организации здравоохранения. Стать матерью во что бы то ни стало: муки бесплодия // Бюллетень ВОЗ. 2010. Вып. 88, №12. Режим доступа: http://www.who.int/bulletin.

2. Блинецкая C.JI. Основные наследственные тромбофилии и их роль при привычном невынашивании беременности: дисс. . канд. мед. наук. М., 2009. 153 с.

3. Джанджгава Ж.Г. Клиническое значение выявления тромбофилии у пациенток с бесплодием и неудачами ЭКО: дисс. . канд. мед. наук. М., 2005. 120 с.

4. Доброхотова Ю.Э., Щеголева A.A. Тромботические состояния в акушерской практике: пособие. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. 128 с.

5. Дюжева Е.В. Гормональная подготовка эндометрия у пациенток с неэффективными попытками ЭКО в анамнезе: дисс. . канд. мед.наук. М., 2010. 120 с.

6. Иванец Т.Ю. Влияние стимуляции суперовуляции на гемостаз при экстракорпоральном оплодотворении и переносе эмбрионов в полость матки: дисс. . канд. мед. наук. М., 2004. 120 с.

7. Калашникова Е.А., Кокаровцева С.Н., Коваленко Т.Ф. и др. Частоты мутаций в генах V фактора (FV Leiden), протромбина (G20210A) и 5,10 метилентетрагидрофолатредуктазы (С677Т) у русских // Медицинская генетика. 2006. Т. 5, №7 (49). С. 27-29.

8. Кирющенко П.А., Сидельникова В.М. Патофизиологические механизмы влияния антифосфолипидного синдрома на течение беременности // Фармакотерапия в акушерстве и гинекологии. 2010. № 4. С. 22-25.

9. Корсак B.C. ВРТ в России. Отчет за 2008 г. // Проблемы репродукции. 2010. Т. 16, № 6. С. 15-16.

10. Кулаков В .И., Леонов Б.В., Кузьмичев Л.Н. Лечение женского и мужского бесплодия // Вспомогательные репродуктивные технологии. М.: Медицинское информационное агенство, 2005. С. 9-11.

11. Макацария А.Д., Бицадзе В.О. Тромбофилии и противотромботическая терапия в акушерской практике. М.: Триада-Х, 2003. 904 с.

12. Момот А.П. Патология гемостаза. Принципы и алгоритмы клинико-лабораторной диагностики. СПб.: ФормаТ,.2006. 208 с.

13. Ольховская М.А. Комплексная оценка состояния эндометрия в программе экстракорпорального оплодотворения: дисс. .канд. мед.наук. М., 2007. 120 с.

14. Панченко Е.А., Добровольский А.Б. Тромбозы в кардиологии. Механизмы развития и возможности терапии. М., 1999. С. 164-173.

15. Рудакова Е.Б., Пилипенко М.А., Полторака Е.В. и др. Влияние патологии эндометрия и нарушений в системе гемостаза на исходы вспомогательных репродуктивных технологий // Вестник РУДН. 2009. № 7. С.101-107.

16. Сароян Т.Т. Особенности течения беременности у женщин с тяжелой формой синдрома гиперстимуляции яичников: дисс. . канд. мед.наук. М., 2009. 120 с.

17. Сидельникова В.М., Сухих Г.Т. Невынашивание беременности: руководство для практикующих врачей. М.: Медицинское информационное агенство, 2010. С. 225-257.

18. Станкович Е. Роль нарушений функции щитовидной железы при реализации программ ЭКО у пациенток с бесплодием: дисс. . канд. мед. наук. М., 2009. 120 с.

19. Судома И.А., Маслий Ю.В. Алгоритм обследования и лечения пациентов с многократными неудачными программами ВРТ // Репродуктивные технологии сегодня и завтра. Казань, 2007. С. 20-21.

20. Шуршалина А.В. Хронический эндометрит у женщин с патологией репродуктивной функции: дисс. . д-ра мед. наук. М., 2007.

21. Ходжаева 31С. Основы профилактики и лечения наследственных тромбофилий // Эффективная фармакотерапия в акушерстве и гинекологии. 2010. №4. С. 26-31.

22. Aghajanova L., Stavreus-Evers A., Nikas Y. et al. Coexpression of pinopodes and leukemia inhibitory factor, as well as its receptor, in human endometrium //Fertil. Steril. 2003. Vol. 79 (Suppl. 1). P. 808-814.

23. Achache H., Revel A. Endometrial receptivity markers, the journey to successful embryo implantation // Hum. Reprod. Update. 2006. Vol. 12. P. 731746.

24. Altmae S., Stavreus-Evers A., Ruiz J.R., Laanpere M. et al. Variations in folate pathway genes are associated with unexplained female infertility // Fertil. Steril. 2010. Vol. 94, № 1. P. 130-137.

25. American Society of Reproductive Medcine, Birmingham, Alabama. Antiphospholipid Antibodies Do Not Affect IVF Success // Fertil. Steril. 2008. Vol. 90, №5(1). P. 172-173.

26. Andersen AN, Gianaroli L, Felberbaum R, de Mouzon J, Nygren KG 2005 Assisted reproductive technology in Europe. Results generated from European registers by ESHRE // Hum. Reprod. 2001. Vol. 20. P. 1158-1176.

27. Angeles Martínez-Zamora M., Creus M., Tassies D. et al. Reduced plasma fibrinolytic potential in patients with recurrent implantation failure after IVF and embryo transfer // Hum. Reprod. 2011. Vol. 26 (3). P. 510-516.

28. Apparao K.B.C., Murray M.J., Fritz M.A. et al. Osteopontin and Its Receptor orvB3 Integrin Are Coexpressed in the Human Endometrium during the Menstrual Cycle But Regulated Differentially // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2001. Vol. 86, №10. P. 4991-5000:

29. Armant D.R., Kilburn B.A., Petkova A. et al. Human trophoblast survival at low oxygen concentrations requires metalloproteinase-mediated shedding of heparin-binding EGF-like growth factor // Development. 2006. Vol. 133. P. 751-759

30. Azem F., Many A., Yovel I. et al. Increased rates of thrombophilia in women with repeated IVF failures // Hum. Reprod. 2004 Vol. 19. P.368-370.

31. Bare S.N., Poka R., Balogh I., Ajzner E. Factor V Leiden as a risk factor for miscarriage and reduced fertility // Aust. N. Z. J. Obstet. Gynaecol. 2000. Vol. 40. P. 186-190.

32. Bellver J., Soares S., Alvarez C. et al. The role of trombophilia and thyroid autoimmunity in unexplained infertility, implantation failure and recurrent spontaneous abortion // Hum. Reprod. 2008. Vol. 23(2). P. 278-284.

33. Behjati R., Modarressi M., Jeddi-Tehrani M. et al. Thrombophilic mutations in Iranian patients with infertility and recurrent spontaneous abortion // Ann. Hematol. 2006. Vol. 85. P. 268-271.

34. Boxmeer J.C., Macklon N.S., Lindemans J. et al. IVF outcomes are associated with biomarkers of the homocysteine pathway in monofollicular fluid // Hum. Reprod. 2009. Vol. 24. P. 1059 1066.

35. Buchholz T., Lohse P., Rogenhofer N. et al. Polymorphisms in the ACE and PAI-1 genes are associated with recurrent spontaneous miscarriages // Hum. Reprod. 2003. Vol. 18. P. 2473-2477.

36. Buckingham K.L., Stone P.R., Smith J.F. et al. Antiphospholipid antibodies in serum and follicular fluid—is there a correlation with IVF implantation failure? // Hum. Reprod. 2006. Vol. 21. P. 728-734

37. Caccavo D., Pellegrino N.M., Lorusso F. et al. Anticardiolipin antibody levels in women undergoing first in vitro fertilization/embryo transfer // Hum. Reprod. 2007. Vol. 22. P. 2494-2500.

38. Catalano R.D., Johnson M.H., Campbell E.A. et al. Inhibition of Stat3 activation in the endometrium prevents implantation: a nonsteroidal approach to contraception // Proc. Natl. Acad. Sci. 2005. Vol. 102. P. 8585-8590.

39. Chan W.S., Ginsberg J.S. A review of upper extremity deep vein thrombosis in pregnancy: unmasking the 'ART' behind the clot // J. Thromb. Haemost. 2006. Vol. 4. P. 1673-1677.

40. Coulam C.B., Jeyendran R.S., Fishel L.A. et al. Multiple thrombophilic gene mutations are risk factors for implantation failure // Reprod. Biomed. Online. 2006. Vol. 12. P. 322-327.

41. Coulam C., Jeyendran D. Trombophilic gene polymorphisms are risk factors for unexplained infertility // Fertil Steril. 2009. Vol. 91(4). P. 1516-1517.

42. Coulam C., Roussev R. Antiphospholipid antibodies inhibit angiogenesis // J. Reprod. Immunol. 2009. Vol. 81(2). P. 149.

43. Dey S.K., Lim H., Das S.K. et al. Molecular cues to. implantation // Endocr. Rev. 2004. Vol. 25. P. 341-373.

44. Dimitriadis E., White C.A., Jones R.L. et al. Cytokines, chemokines and growth factors in endometrium related to implantation // Hum. Reprod. Update. 2005. Vol. 11. P. 613-630.

45. Di Simone N., Di Nicuolo F., Sanguinetti M. et al. Low-molecular weight heparin induces in vitro trophoblast invasiveness: role of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors // Placenta. 2007. Vol. 28. P. 298-304.

46. Di Simone N., Luigi M.P., Marco D.A. et al. Pregnancies complicated with antiphospholipid syndrome: the pathogenic mechanism of antiphospholipid antibodies: a review of the literature // Ann. N Y Acad. Sci. 2007. Vol. 1108. P. 505-514.

47. Edwards R.G. Implantation, interception and contraception // Hum. Reprod. 1994. Vol. 9. P. 985-995.

48. Egbase P.E., A1 Sharhan M., Diejomaoh M. et al. Antiphospholipid antibodies in infertile couples with two consecutive miscarriages after in-vitro fertilization and embryo transfer// Hum. Reprod. 1999. Vol. 14. P. 1483-1486.

49. Empson M., Lassere M., Craig J.C. et al. Recurrent pregnancy loss with antiphospholipid antibody: a systematic review of therapeutic trials // Obstet. Gynecol. 2002. Vol. 99. P. 135-144.

50. Fouladi-Nashta A.A., Mohamet L., Heath J.K. et al. Interleukin 1 signaling is regulated by leukemia inhibitory factor (LIF) and is aberrant in Lif-/-mouse uterus // Biol. Reprod. 2008. Vol. 79. P. 142-153.

51. Fauser B.C., Devroey P. Reproductive biology and IVF: ovarian stimulation and luteal phase consequences // Trends Endocrinol. Metab. 2003. Vol. 14. P. 236-242.

52. Fiedler K., Wurfel W. Effectivity of heparin in assisted reproduction // Eur. J. Med. Res. 2004. Vol. 9. P. 207-214.

53. Forges T., Monnier-Barbarino P., Alberto J.M. et al. Impact of folate and homocysteine metabolism on human reproductive health // Hum. Reprod. Update. 2007. Vol. 13. P. 225-238.

54. Focus on Reproduction. News letter of the European Society of Human Reproduction and Embryology. January, 2011. http://www.eshre.eu.

55. Ganapathy R., Whitley G.S J., Cartwright J.E. et al. Thilaganathan B. Effect of heparin and fractionated heparin on trophoblast invasion // Hum. Reprod. 2007. Vol. 22. P. 2523-2527.

56. Genbacev O.D., Prakobphol A., Foulk R.A. et al. Trophoblast L-selectin-mediated adhesion at the maternal-fetal interface // Science. 2003. Vol. 299. P. 405—408.

57. Glasser S.R., Aplin J.D. The endometrium. Taylor & Francise, 2002.

58. Gleicher N., Vidali A., Karande V. The immunological 'Wars of the Roses': disagreemants amongst reproductive immunologists // Hum. Reprod. 2002. Vol. 17. P. 539-542.

59. Glueck C.J. et al. Increased Frequency of the Hypofibrinolytic 4G/4G Polymorphism of the Plasminogen Activator Inhibitor-1 (PAI-1) Gene in Women with Obstetric Complications // Obstet. Gynecol. 2001. Vol. 97. P. 44-48.

60. Goodman C., Jeyendran R.S., Coulam C. P53 tumor suppressor factor, plasminogen activator inhibitor, and vascular endothelial growth factor gene polymorphisms and recurrent implantation failure // Fertil. Steril. 2009. Vol. 92 (2). P. 494-498.

61. Goppel W., Ludwig M., Junge A.K. et al. Selected pressure for factor V Leiden mutation and embryo implantation // Lancet. 2001. Vol. 13, № 358. P. 1238-1239.

62. Grandone E., Colaizzo D:, Lo Bue A. et al. Inherited thrombophilia and in vitro fertilization implantation failure // Fertil. Steril. 2001. Vol. 76. P. 201202.

63. Greer I.A. Thrombophilia: Implications for pregnancy outcome // Thromb. Res. 2003. Vol. 109. P. 73-81.

64. HajMohammadi S., Enjyoji K., Princivalle M. et al. Normal levels of anticoagulant heparan sulfate are not essential for normal hemostasis // J. Clin. Invest. 2003. Vol. 111. P. 989-999.

65. Hassan M.A., Kilick S.R. Is previous aberrant reproductive outcome predictive of subsequently reduced fecundity? // Hum. Reprod. 2005. Vol. 20. P. 657-664.

66. Heimerhorst F.M., Perquin D.A., Donker D. et al. Perinatal outcome of singletons and twins after assisted conception: a systematic review of controlled studies // Br. Med. J. 2004. Vol. 328. P. 261

67. Hills F.A., Abrahams V.M., Gonzalez-Timon B. et al. Heparin prevents programmed cell death in human trophoblast // Mol. Hum. Reprod. 2006. Vol. 12. P. 237-243.

68. Horcajadas J. A., Minguez P., Dopazo J. et al. Controlled Ovarian Stimulation Induces a Functional Genomic Delay of the Endometrium with Potential Clinical Implications // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2008. Vol. 93, № 11. P. 4500-4510.

69. Hornstein M.D., Davis O.K., Massey J.B. Antiphospholipid antibodies and in vitro fertilization success: a meta-analysis // Fertil. Steril. 2000. Vol. 73. P. 330-333:

70. Heller D.S., Rush D., Baergen R.N. Subchorionic hematoma* associated with thrombophilia: report of three cases // Pediatr. Dev. Pathol. 2003. Vol. 6. P. 261-264

71. Inge M.W., Ebish M.S.,Chris M.G. et al. Review of the role of the plasminogen activator system and vascular endothelial growth factor in subfertility // Fertil. Steril. 2008. Vol. 90 (6). P. 2340-2350.

72. Khamsi F., Armstrong D.T., Zhang X. Expression of urokinase-type plasminogen activator in human preimplantation embryos // Mol. Hum. Reprod. 1996. Vol. 2, № 4. P. 273-276.

73. Kimber S J. Leukaemia inhibitory factor in implantation and uterine biology//Reproduction. 2005. Vol. 130(2). P. 131 145.

74. Koller M., Kutscha-Lissberg F., Brom J. et al. Influence of low molecular weight heparin (certoparin) and unfractionated heparin on the release of cytokines from human leukocytes // Inflammation. 2001. Vol. 25. P. 331-337

75. Kowalik A., Vichnin M., Liu H-C. et al. Midfollicular anticardiolipin and antiphosphatidylserine antibody titers do not correlate with in vitro fertilization outcome //Fertil. Steril. 1997. Vol. 68. P. 298-304.

76. Kutteh W.H., Yetman D.L., Chantilis S.J. et al. Effect of antiphospholipid antibodies in women undergoing in-vitro fertilization: role of heparin and aspirin // Hum. Reprod. 1997. Vol. 12. P. 1171-1175.

77. Krüssel J.S., Behr B., Milki A.A., Hirchenhain J., Wen Y. Vascular endothelial growth factor (VEGF) mRNA splice variants are differentially expressed in human blastocysts // Mol. Hum. Reprod. 2001. Vol. 7 (1). P. 57-63.

78. Lebovic D.I., Shifren J.L., Ryan I.R. et al. Ovarian steroid and cytokine modulation of human endometrial angiogenesis // Hum. Reprod. 2000. Vol. 15 (Suppl. 3).P. 67-77.

79. Ledee-Bataille N., Lapree-Delage G., Taupin J.L. et al. Concentration of leukaemia inhibitory factor (LIF) in uterine flushing fluid is highly predictive of embryo implantation // Hum. Reprod. 2002. Vol. 17. P. 213-218;

80. Lee S-R., Park E-J., Kim S-H. et al. Influence of antiphospholipid antibodies on pregnancy outcome in women undergoing in vitro fertilization and embryo transfer // Am. J. Reprod. Immunol. 2007. Vol. 57. P. 34-39.

81. Ma W.G., Song H., Das S.K. et al. Estrogen is a critical determinant that specifies the duration of the window of uterine receptivity for implantation // Proc. Natl. Acad. Sei USA. 2003. Vol. 100. P. 2963-2968.

82. Mara M., Koryntova D., Rezabek K. et al. Thromboembolic complications in patients undergoing in vitro fertilization: retrospective clinical study // Ceska Gynekol. 2004. Bd. 69. S. 312-316.

83. Margalioth E., Ben-Chetrit A., Gal M. et al. Investigation and treatment of repeated implantation failure following IVF-ET // Hum. Reprod. 2006. Vol. 21 (12). P. 3036-3043.

84. Martineiii I., Taioli E., Ragni G. et al. Embryo implantation after assisted reproductive procedures and maternal thrombophilia // Haematologica. 2003. Vol. 88. P. 789-793.

85. Matsubayashi H., Sugi T., Arai T. et al. Antiphospholipid antibodies in serum and follicular- fluid: is there a correlation with IVF implantation failure? // Hum Reprod. 2007. Vol. 22. P. 3043-3044.

86. Moller A.V., Jorgensen S.P., Chen J.W. et al. Glycosaminoglycans increase levels of free and bioactive IGF-I in vitro // Eur. J. Endocrinol. 2006. Vol. 155. P.297-305

87. Möller B., Rasmussen C., Lindblom B. et al. Expression of the angiogenic growth factors VEGF, FGF-2, EGF and their receptors in normalhuman endometrium during the menstrual cycle // Mol. Hum. Reprod. 2001. Vol. 7 (1).P. 65-72.

88. Nelson S.M., Greer I.A. The potential role of heparin in assisted conception//Hum. Reprod. Update. 2008. Vol. 14 (6). P. 623 645.

89. Piccinni M.P., Beloni L., Livi C. Defective production of both leukemia inhibitory factor and type 2 T-helper cytokines by decidual T cells in unexplained recurrent abortions // Nat. Med. 1998. Vol. 4. P. 1020-1024.

90. Qublan H.S., Eid S.S., Ababneh H.A. et al. Acquired and inherited-thrombophilia: implication in recurrent IVF and embryo transfer failure // Hum. Reprod. 2006. Vol. 21. P. 2694-2698.

91. Quenby S., Mountfield S., Cartwright J.E. et al. Effects of low-molecular-weight and unfractionated heparin on trophoblast function // Obstet. Gynecol. 2004. Vol. 104. P. 354-361

92. Ramon L.A., Gilabert-Estelles J., Cosin R. et al. Plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) 4G/5G polymorphism and endometriosis. Influence of PAI-1 polymorphism on PAI-1 antigen and mRNA expression // Thrombosis Res. 2008. Vol. 122 (6). P. 854-860.

93. Rahimi Z., Vaisi-Raygani A., Mozafari H. Prevalence of factor V Leiden (G1691A) and prothrombin (G20210A) among Kurdish population from Western Iran // J. Thromb. Thrombolysis. 2008. Vol. 25. P. 280-283.

94. Sa-Ra Lee, Eun-Joo Park, Sung-Hoon Kim et al. Influence of antiphospholipid antibodies on pregnancy outcome in women undergoing in vitrofertilization and embryo transfer // Am. J. Reprod. Immunol. 2007. Vol. 57. P. 3439.

95. Sebire N.J., Backos M., El Gaddal S. et al. Placental pathology, antiphospholipid antibodies, and pregnancy outcome in recurrent miscarriage patients // Obstet. Gynecol. 2003. Vol. 101. P. 258-263

96. Schofield G., Kimber S.J. Leukocyte subpopulations in the uteri of leukemia inhibitory factor knockout mice during early pregnancy // Biol. Reprod. 2005. Vol. 72. P. 872-878.

97. Sibug R.M., Helmerhorst F.M., Tijssen A.M.I, et al. Gonadotrophin stimulation reduces VEGF120 expression in the mouse uterus during the periimplantation period // Hum. Reprod. 2002. Vol. 17 (6). P. 1643-1648.

98. Schenk L.M., Butler L., Morris J.P. et al. Heparin and Aspiring Treatment Yield Higher Implantation Rates in IVF Patients with Antiphospholipid Antibody Seropositivity Compared to Untreated Seronegative Patients // Am. Soc. Reprod. Med. 1996.

99. Sharkey A.M., Day K., McPherson A. et al. Vascular Endothelial Growth Factor Expression in Human Endometrium Is Regulated by Hypoxia // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2000. Vol. 85, № 1. P. 402-409.

100. Soltanghoraee H., Memariani T., Aarabi M. Association of ACE, PAI-1 and coagulation factor XIII gene polymorphisms with recurrent spontaneous abortion in Iranian patients // J. Reprod. Infertil. 2007. Vol. 7 (4), № 29.

101. Stevenson J.L., Choi S.H., Varki A. Differential metastasis inhibition by clinically relevant levels of heparins—correlation with selectin inhibition, not antithrombotic activity // Clin. Cancer Res. 2005. Vol. 11. P. 7003-7011.

102. Stavreus-Evers A., Aghajanova L., Brismar H. Co-existence of heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor and pinopodes inhuman endometrium at the time of implantation // Mol. Hum. Reprod. 2002. Vol. 8. P. 765-769

103. Stewart, C.L., Kaspar, P., Brunet, L.J. et al. Blastocyst implantation depends on maternal expression of leukaemia, inhibitory factor // Nature. 1992. Vol. 359. P. 76-79.

104. Tan B.K., Vandekerckhove P., Kennedy R. Investigation and current management of recurrent IVF treatment failure in the UK // Br. J. Obstet. Gynecol. 2005. Vol. 112. P. 773.

105. Tsai H.D., Chang C.C., Hsieh Y.Y. et al. Leukemia inhibitory factor expression in different endometrial locations between fertile and infertile women throughout different menstrual phases // J. Assist. Reprod. Genet. 2000. Vol. 17. P. 415-418.

106. Urman B., Ata B., Yakin K. et al. Luteal phase empirical low molecular weight heparin administration in patients with failed ICSI embryo transfer cycles: a randomized open-labeled pilot trial // Hum. Reprod. 2009. Vol. 24 (7). P. 1640- 1647.

107. Van Horn J.T., Craven C., Ward K. et al. Histologic features of placentas and abortion specimens from women with antiphospholipid and antiphospholipid-like syndromes //Placenta. 2004. Vol. 25. P. 642-648

108. Von Rango U., Alfer J., Kertschanska S. et al. Interleukin-11 expression: its significance in eutopic and ectopic human implantation // Mol. Hum. Reprod. 2004. Vol. 10. P. 783-792.

109. Walton K.J., Duncan J.M., Deschamps P. et al. Heparin acts synergistically with interleukin-11 to induce STAT3 activation and in vitro osteoclast formation // Blood. 2002. Vol. 100. P. 2530-2536.

110. Wang L., Brown J.R., Varki A. et al. Heparin's anti-inflammatory effects require glucosamine 6-O-sulfation and are mediated by blockade of L- and P-selectins // J. Clin. Invest. 2002. Vol. 110. P. 127-136

111. Yong-Mei G., Carlberg M., Brüse C. et al. Effects of hormones on uPA, PAI-1 and suPAR from cultured endometrial and ovarian endometriotic stromal cells // Acta Obstet. Gynecol. Scand. 2002. Vol. 81 (5). P. 389-397.