Оптимизация основных элементов технологического процесса размножения винограда биотехнологическим методом тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.08, кандидат наук Батукаев Магомед Султанович

• Батукаев Магомед Султанович
• кандидат наук
• 2020

Оглавление диссертации кандидат наук Батукаев Магомед Султанович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ:

1.1. Особенности микроклонального размножения плодово-ягодных растений и винограда

1.2. Адаптация in vitro растений винограда к нестерильным условиям среды (in vivo)

1.3. Применение корневых и внекорневых обработок в технологиях ускоренного размножения плодово-ягодных растений и винограда

ГЛАВА 2.ОБЪЕКТЫ, УСЛОВИЯ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА

ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ:

2.1.Объекты исследований

2.2. Организация проведения работы

2.3. Методика проведения исследований

2.3.1. Подготовка и стерилизация питательных сред

2.3.2. Приготовление питательных сред

2.3.3. Работа в стерильном боксе

2.3.4. Элементы учетов и методы обработки полученных данных

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ:

3.1. Оптимизация основных элементов технологического процесса размножения винограда in vitro

3.1.1. Введение различных сортов винограда в культуру in vitro

3.1.2. Совершенствование состава питательных сред при микрочеренковании винограда in vitro

3.1.3. Влияние минерального состава питательной среды на развитие микропобега различных сортов виноград

3.1.4. Влияние регуляторов роста на укоренение, рост и развитие растений

винограда in vitro

3.2. Оптимизация основных элементов технологического процесса адаптации растений винограда in vitro к условиям in vivo

3.2.1. Изучить влияние корневых и внекорневых подкормок Супер гумисола на показатели роста и развития растений винограда

3.2.2. Изучить влияние обработки биоудобрениями на рост и развитие растений винограда, выращенных in vitro в условиях ex vitro

3.2.3. Использование цеолитового субстрата при адаптации и доращивании растений винограда в полиэтиленовых сосуд пакетах и закрытом грунте

3.2.4. Доращивание растений винограда из полиэтиленовых сосуд пакетов в условиях теплицы

Глава 4. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ РАЗМНОЖЕНИЯ ВИНОГРАДА БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИМ МЕТОДОМ IN VITRO

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оптимизация основных элементов технологического процесса размножения винограда биотехнологическим методом»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность. Современное виноградарство и садоводство России должно базироваться на производстве сертифицированного посадочного материала сортов, отвечающих современным требованиям интенсивного виноградарства и садоводства, свободного от всех известных вирусов, что является основой долговечности и рентабельности многолетних насаждений.

Главное предназначение системы производства посадочного

материала винограда - создание долголетних, ежегодно плодоносящих,

удобных в эксплуатации, быстро окупающихся и стабильно приносящих

прибыль, адаптированных к местным природно-климатическим и

рыночным условиям насаждений технических и столовых сортов винограда.

Современное сельскохозяйственное производство должно решать и

ряд других задач, таких как снижение издержек на единицу произведенной

продукции, эффективное использование в процессе производства

природных, материальных и трудовых ресурсов, степень экологического

воспроизводства - восстановления равновесного состояния агроэкосистемы

и снижения техногенного воздействия на природную среду (Е.А. Егоров с соавт., 2005).

В настоящее время в ряде стран Европы и Америки уже невозможно представить систему производства оздоровленного посадочного материала без широкого использования методов культуры изолированных тканей. Применение биотехнологических приемов позволяет:

1) получить посадочный материал, свободный от грибных, фитоплазменных и вирусных заболеваний, за короткое время и в достаточном количестве;

2) быстро размножить ценный клон растения (сорт);

3) получить в большом количестве вегетативное потомство трудноразмножаемых в обычных условиях сортов и форм растений;

4) работать в лабораторных условиях круглый год и планировать выпуск растений к определённому сроку;

4

5) длительно сохранять растительный материал в условиях in vitro, a также обменивать его в международном масштабе без риска заражения карантинными вредителями и болезнями.

В последнее время возросла потребность в оздоровленном посадочном материале, что связано с широким распространением вирусных, фитоплазменных и грибных заболеваний. Однако в полевых условиях не существует эффективных приёмов массового оздоровления многолетних растений. Это ставит задачи получения оздоровленного посадочного материала винограда в достаточном количестве, что неизбежно связано с высокими технологиями оздоровления и тестирования. Степень разработанности проблемы.

Научные исследования по микроклональному размножению плодово-ягодных культур и винограда проводили Бутенко Р.Г. (1983), Высоцкий В.А. (1995, 1998), Шевелуха В.С. (1998), Батукаев А.А. (1998), Деменко В.И. (2007), Дорошенко Н.П. (2004, 2005), Акимова С.В. (2005), Белошапкина О.О. (2006), Корнацкий С.А. (2001, 2003), Упадышев М.Т. (1993, 1998).

Однако в этих и других исследованиях не изучены ряд технологических элементов оздоровления (введения в культуру in vitro ) и размножения винограда биотехнологическим методом. Основные исследования проведены на плодовых и ягодных культурах. Таким образом, вопросы по совершенствованию оздоровления и размножения винограда биотехнологическим методом in vitro являются актуальными в свете расширения площадей под виноградом в Российской Федерации.

Цель исследований - оптимизация основных элементов технологического процесса оздоровления и размножения винограда биотехнологическим методом, а также усовершенствование способов адаптации растений, размноженных методом in vitro для увеличения приживаемости их в условиях in vivo и обеспечие повышение выхода и качественного посадочного материала винограда.

В этой связи нами применительно к культуре винограда решались следующие задачи:

- изучить факторы, влияющие на регенерацию вегетативных органов и оптимизировать состав питательных сред на всех этапах культивирования эксплантов;

- выявить оптимальные концентрации регуляторов роста и других биологически активных веществ при длительном культивировании и хранении пробирочных растений;

- изучить возможность освобождения от вирусов получаемых растений методом культуры изолированных апексов (получение безвирусных клонов с целью производства здорового посадочного материала винограда);

- совершенствовать эффективные способы переноса пробирочных растений in vitro в нестерильные условия in vivo и определить оптимальные условия выращивания при адаптации растений, полученных in vitro, и на основе их использования разработать технологические приемы;

- изучить эффективность действия корневых и некорневых стимуляторов роста при адаптации и выгонке растений полученных in vitro и рекомендовать наиболее перспективные из них для практического использования.

Научная новизна данной работы заключается в проведении изучения процесса клонального микроразмножения перспективных сортов винограда с учётом их биологических особенностей. Впервые разработан новый способ мокрочеренкования винограда in vitro (Патент № 2521992. Зарегестрирован в Государственном реестре изобретений РФ 14 мая 2014г.). Введены в культуру in vitro новые комплексно - устойчивые сорта винограда и разработаны под них питательные среды. Дано обоснование и показана целесообразность чередования питательных сред с различным составом минеральных солей и различной концентрацией регуляторов роста на этапе размножения. Показана целесообразность совместного применения разных регуляторов роста на этапе микроразмножения на примере

винограда.Усовершенствована технология адаптации растений винограда in vitro к условиям in vivo.

Теоретическая и практическая значимость исследований. В итоге проведения исследований теоретически обоснованы и практически отработаны технологические процессы клонального микроразмножения in vitro перспективных сортов винограда, приёмы адаптации растений к условиям in vivo.

Применение разработанных элементов технологии клонального микроразмножения сортов винограда, позволило существенно увеличить выход качественного посадочного материала, снизить себестоимость производимых растений и повысить рентабельность. Растения, полученные с использованием биотехнологических методов, использованы для закладки маточных насаждений на опытном участке ЧНИИСХ (0,7га), и на производственных участках виноградарского хозяйства ГУП «Бурунный» Шелковского района Чеченской Республики (10га).

Методология и методы исследований. Теоретической и методологической основой при планировании и проведении исследований явились научные труды отечественных и иностранных исследователей. В ходе работы использовались общие методы исследований: наблюдения, измерения, сравнения. Статистическая обработка данных проводилась по Доспехову В.А. (1985) с использованием пакета Microsoft Office Excel и других методических материалов.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Экспериментальное определение оптимальных значений ключевых культуральных параметров на этапе получения оздоровленных растений in vitro: мультипликация, укоренение и адаптация.

2. Оптимизированный способ микрочеренкования винограда in vitro на основе регулирования состава питатательной среды минеральным и гормональным составом.

3. Технология адаптации растений винограда in vitro к условиям in vivo путем использования корневых и внекорневых подкормок Супер

7

гумисола, Гумат +7В; регуляторов роста ауксинового и цитокининого характера действия; использование различных субстратов (песок, перлит, цеолит) в полиэтиленовых сосуд - пакетах и закрытом грунте, влияющих на адаптацию, рост и развитие растений винограда.

Степень достоверности и апробация работы. Результаты исследований доложены на заседаниях кафедры плодоовощеводства и виноградарства Чеченского государственного университета и отдела виноградарства Чеченского научно-исследовательского института сельского хозяйства, а также внутривузовских итоговых научно-практических конференциях Чеченского государственного университета (2009-2019г.г.).

Результаты исследований апробированы на научных конференциях различного уровня: «Современные проблемы и перспективы развития аграрной науки» (Махачкала, 2010), "Генетические ресурсы и селекционное обеспечение современного виноградарства", (Новочеркасск 2011г), «Инновационные пути восстановления и развития АПК ЧР» (Грозный 2011), «Научное обеспечение устойчивого развития АПК в СевероКавказском федеральном округе» (Нальчик, 2013), «Биологически активные вещества растений-изучение и использование» (Минск, 2013), «Инновационно-технологическое обеспечение устойчивого развития садоводства, виноградарства и виноделия» (Махачкала, 2013), «Биотехнология и качество жизни» (Москва, 2014.), «Биотехнологические приемы в сохранении биоразнообразия и селекции растений» (Минск, 2014), «Актуальные вопросы плодоводства и декоративного садоводства в начале ХХ1 века» (Сочи, 2014), «Биотехнология как инструмент сохранения биоразнообразия растительного мира» (Ялта, 2016), «Механизмы устойчивости растений и микрорганизмов к неблагоприятным условиям среды» (Иркутск, 2018), IX Съезд общества физиологов растений России «Физиология растений - основа создания растений будущего» (Казань,2019), «Актуальные проблемы биотехнологии: оздоровление и размножение плодовых, ягодных, дикорастущих культур и винограда» (Грозный,2019).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 45 работ, в том числе 11 статей в изданиях, рекомендованных ВАК РФ, 3 статьи опубликованы в изданиях Scopus, 1 монография,1 патент на изобретение. Часть работы выполнена при финансовой поддержке Минобрнауки РФ (уникальный идентификатор проекта RFMEFI57718X0292) в ФГБОУ ВО «Чеченский государственный университет».

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 149 страницах и содержит 17таблиц, 5 рисунка и 2 приложения. Работа включает следующие главы: введение, обзор литературы, методика проведения исследований, результаты исследований, экономическая оценка, заключение. Список использованной литературы включает 175 наименований, в том числе 31 иностранных источников.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Особенности микроклонального размножения плодово-ягодных

растений и винограда

В питомниководстве методы культуры изолированных тканей и органов используют для решения двух основных проблем - получения исходного оздоровленного материала и его форсированного размножения. Оздоровление может проводиться с помощью культуры изолированных апексов побегов, через каллусную культуру и с помощью культуры пыльников. Наибольшее распространение получил способ оздоровления посадочного материала через культуру изолированных апексов. Этот метод основан на неодинаковой концентрации вирусных частиц в различных органах растения. Минимальная концентрация или полное их отсутствие характерно для точек роста. Причина этого явления до конца не ясна, однако можно предположить, что пониженная концентрация вирусных частиц в активно делящихся меристематических клетках связана с отсутствием развитой сосудистой системы (Высоцкий В.А., 2007), их физиологическими особенностями, в частности, специфичным балансом биологически активных веществ (например, ауксинов), проницаемостью стенок меристематических клеток. Кроме того, нельзя исключить возможное ингибирующее влияние на репликацию вирусных частиц отдельных компонентов питательной среды (ауксины, цитокинины и пр.).

Кроме того, безвирусный посадочный материал можно получить путем регенерации растений в каллусной культуре. Таким методом были получены оздоровленные экземпляры картофеля (1.БуоЬоёоуа, 1966). Очень привлекательными являются и способы клонального микроразмножения растений, которые прочно вошли в практику питомниководства. На наш взгляд, они наиболее приемлемы именно в системе производства оздоровленного посадочного материала. Причин этому несколько. Прежде всего хочется отметить, что в результате

различных манипуляций, связанных с получением исходных оздоровленных

10

экземпляров, таких как отбор внешне здоровых образцов, проведение термотерапии или хемотерапии, культура изолированных апексов и иных приемов, на выходе мы имеем все-таки единичные здоровые экземпляры. Статус безвирусного растения может быть присвоен только после обязательного тестирования.

Строение исходных эксплантов, вводимых в стерильную культуру, зависит от целей, которые при этом преследуются. Это могут быть изолированные апексы для получения оздоровленного посадочного материала или клонального микроразмножения, изолированные верхушечные или боковые почки с фрагментами стебля или без него, листовые диски или целые листовые пластинки, отрезки черешков и междоузлий для исследований, связанных с получением каллуса, отбора сомаклональных вариантов, получения трансгенных растений, пыльники, семяпочки, фрагменты цветка, зародыши разных фаз развития для селекционных целей и другие части растений.

Наиболее часто используют экспланты, включающие собственно меристематический купол и один или несколько примордиальных листьев, размер которых составляет 0,1-1,0 мм (T.Murashige 1974; J.B.Jones, 1967). Слишком маленькие экспланты некоторых культур, по-видимому, не способны к развитию (Holling M., O.M.Stone, 1963), а культура истинных меристем без окружающих тканей возможна лишь для ограниченного круга растений. Успешное культивирование большинства видов растений достигается только при использовании апексов с 2-3 и более примордиальными листьями (D.Walkey, 1972; O.P.Jones, 1979). Присутствие субапикальной ткани для целей оздоровления является нежелательным вследствие наличия там элементов сосудистой системы. Однако, при микроразмножении экспланты могут нести некоторое количество нижерасположенной ткани стебля, так как это положительно влияет на скорость развития изолированных апексов (Gur A., Altman A., Stern R., Wolowitch B. 1986).

Во многих случаях, когда не удавалось добиться успешного культивирования меристематических верхушек, исследователи шли по пути увеличения размера инициальных эксплантов. Эта тенденция сохранилась и до сегодняшних дней, когда при сложностях введения в культуру инициальных эксплантов некоторых видов рода Vacclnlum, проблема была решена путем увеличения размера эксплантов до нескольких сантиметров (Bottcher I., Zoglauer K., Goring H, 1988).

Современные теоретические исследования в области микроклонального размножения пытаются решить две основные проблемы. С одной стороны - это достижение достаточного коэффициента размножения, с другой - сведение к минимуму возможности отклонения от сорта. Первые данные о нестабильности в культуре тканей появились в 1961 году (Хон Б., 1990).

Кроме того, безвирусный посадочный материал можно получить путем регенерации растений в каллусной культуре. Таким методом были получены оздоровленные экземпляры картофеля (Svobodova J., 1966). Использование минимально возможных по размеру отрезков побегов или других органов для регенерации целых растений при определенных условиях позволяет получить здоровые экземпляры. В ряде случаев путем укоренения или прививки на здоровые растения терминальных участков побегов удалось получить безвирусные растения (Holmes F.O., 1956).

Среди факторов, оказывающих наибольшее влияние на морфогенетические процессы в культурах изолированных тканей и органов, по видимому в первую очередь, необходимо выделить состав питательной среды, генетические особенности растений доноров, строение иницильного экспланта, физиологическое состояние растения-донора, предварительную обработку и условия культивирования. Обзоры, посвященные этой проблеме, регулярно публиковались в научной литературе (Murashige Т., 1974; Высоцкий В.А., 1983; Бутенко Р.Г., 1964).

Как правило, в питательных растворах необходимо достаточно точно соблюдать баланс питательных элементов, в зависимости от их формы.

Нередко избыток или недостаток одного из них может существенно изменить поглощение других. Так, в случае избытка аммонийного азота наблюдается у ряда видов растений снижение содержания кобальта и меди (Follet I.M., Douglas I.A., 1987), фосфора и калия (Batten G.B., Wardlow I.F.,1987), ингибируется поглощение цинка и кальция (Smirnoff N.. Stewart G.R.1987; Zornosa I., Carpena О., Nijera A., 1987).

В настоящее время уже ни у кого не вызывает сомнения необходимость использования оздоровленного посадочного материала для закладки маточных насаждений и промышленных плантаций. Урожайность таких плантаций на 20-30% выше, потребительские качества продукции лучше. Вегетативное размножение плодовых, ягодных н декоративных растений способствовало накоплению патогенов, распространяемых с посадочным материалом. Это в первую очередь относится к вирусным, фитоплазменным, грибным, бактериальным заболеваниям, клещам, нематодам и некоторым другим паразитарным организмам. В принципе, вряд ли найдется хотя бы один вид культурного растения, на котором не обнаружено вирусных заболеваний (Шпаяр Д., 1986).

Показано, что лучшей формой азотного питания для культивируемых тканей и эксплантов являются нитраты (Бутенко Р.Г., 1964). Избыток калия в питательный среде вызывает у ряда культур излишнюю обводненность тканей эксплантов (Bottcher I., Zoglauer K., Goring H., 1988). Положительную роль оказывает в несение в питательные среды миоинозита, входящего в состав фосфолипидов и выполняющего другие важные функции (Толочко В.В., Гамбург К.З., 1978), изолированные апексы в питательных средах, содержащих ауксины сначала образуют корни, а затем развивают надземную часть. Позднее препараты этой группы стали широко использоваться в системах клонального микроразмножения для укоренения побегов, развившихся на средах с цитокининами (Boxus Ph., 1974; Jones O.P., 1979; Высоцкий В.А., 1982; Трушечкин В.Г., Высоцкий В.А., Леонтьев-Орлов О.А., 1985; Высоцкий В.А., Олешко Е.В., 1985).

Цитокинины обладают стимулирующим действием на развитие

побегов в культуре изолированных апексов (Щелкунова С.Е., Попов Ю.Г., 1970), но могут препятствовать образованию корней (Jones O.P., 1967). Важным свойством цитокининов, помимо стимуляции клеточного деления, является вызываемый ими эффект снятия апикального доминирования у культивируемых эксплантов, что способствует закладке и развитию боковых почек и побегов (Бутенко Р.Г., 1964).

На этапе укоренения используют ароматические (гидрооксикоричные) кислоты: кофейную, парааминобензойую, феруловую, коричную, хлорогеновую) и некоторые другие, которые проявляют синергитический эффект с веществами группы ауксинов в отношении корнеобразования (Бутенко Р.Г., Вардия Т., 1967; Острейко С.А., Панькова Т.Ф., 1973).

Концентрация агара может оказывать влияние на ростовые процессы (GolosinB., RadojevlcL., 1987).

Составы различных питательных сред для конкретных видов растений и типов тканей приводятся в специальных руководствах (FossardR.A., 1977). Помещение «операционной» регулярно обрабатывают растворами антисептиков и ежедневно облучают ультрафиолетом (Высоцкий В.А., Упадышев М.Т., 1991).

Стимулирующий эффект на развитие стебля оказывают препараты, обладающие цитокининовой активностью (Щелкунова С.Е., Попов Ю.Г., 1970).

Для ряда культур предложен эффективный и более экономичный способ массового получения побегов, получивший название "Hedge-System", позволяющий исключить частые пересадки конгломератов побегов на свежие среды и использовать для укоренения побеги только определенного размера (Корнацкий С. А., Высоцкий В. А., Трушечкин В.Г., 1991).

Успешное культивирование изолированных апексов яблони было впервые осуществлено при работе с сеянцами в возрасте нескольких месяцев (WalkeyD.G., 1972).

Известно, что биологически активные вещества фенольной природы

способны ингибировать активность гиббереллинов, подавляя образование н функцию гидролитических ферментов и угнетая рост стебля. Антогонистическое действие природных ингибиторов обнаружено и в отношении цитокининов, что отрицательно сказывается на росте по чек in vitro (Кефели В.И., 1974).

Клональное микроразмножение ирги возможно и вполне оправдано для массового получения посадочного материала от ограниченного количества исходных растений, что имеет место в случае интродукции новых сортов и форм этой культуры или производства безвирусных клонов для использования в качестве подвоев (В. А. Высоцкий, 1995).

Экспериментально показано, что число дополнительных почек и побегов при культивировании возрастает с повышением концентрации этого препарата в питательной среде. Однако высокие концентрации 6-бензиламинопурина могут привести к появлению у эксплантов аномальных побегов (Мещерякова Н.И., Банков В.Ф., 1981).

Несмотря на все перечисленные трудности в мире создано огромное число коммерческих лабораторий. Первые лаборатории в США начали создаваться еще в середине 60-х годов. Наиболее развитой лабораторией того времени считалась лаборатория Гавайского университета. Неудивительно - этой лабораторией руководил доктор Мурасига. Наиболее крупная лаборатория в мире - Твайфордская лаборатория в Англии была создана в 1959 год (Гринченко И.В., 1985).

В настоящее время она производит более 10 млн. растений. В лаборатории работает 120 операторов, которые размножают 12 различных видов растений, несколько сот клонов. Мощность лаборатории и профессионализм сотрудников таковы, что за 6 месяцев она в состоянии произвести 10000 растений от одного маточного. Набор культур очень разнообразен. В лаборатории размножают картофель, капусту, косточковые, подвои, розы, пальмы, герберу, папаю, лилии, каучуконосы, киви. Продукция поставляется в Австралию, Бельгию, Италию, США, Африку и только 5% остается в Англии (JrwinJ. E., CheePh. D., 1988).

Вместе с тем очень важно создать условия, обеспечивающие не только укоренение, но и рост побегов in vitro и in vivo, что позволяет увеличить процент приживаемости растений in vivo. Способность к росту побегов зависела от сорта и гормонального состава среды укоренения (Dalet F., 1988).

Успешное развитие биотехнологических исследований, включающих современные направления по оздоровлению садовых растений, их ускоренному размножению, получению новых перспективных форм и хранению растений, является основой для устойчивого развития садоводства (Куликов И.М., Упадышев М.Т., Высоцкий В.А., 2016).

В результате использования биотехнологического метода были получены от трех комбинаций скрещивания с привлечением раносозреващих сортов Дионис, Салют и Veecot, также из семян от свободного опыления сортов Никитский и Салют, и выделены как перспективные шесть форм абрикоса (55: 56: 62: 80: 130 и 4-2/1), (3-я декада июня - 1-я декада июля) среднего размера, хорошим их вкусом (дегустационная оценка 4,0 балла и выше по пятибалльной шкале (Горина В.М., Митрофанова О.В., Лесникова Н.П., 2016).

Растения, полученные в культуре in vitro, превосходят по числу листьев, плетей и розеток маточные растения, размноженные традиционным способом. Установлено, что среднее количество плетей и дочерних розеток на одно растение, выращенное традиционным способом, составило 10,5 шт. и 14,6 шт., после культуры in vitro - 14,0 и 22,9 шт. соответственно (Сидоренко Т.Н., Левзикова Е.Г., Лаврененко Н.В., 2016).

За рубежом и в России существуют научные и производственные лаборатории, по получению безвирусных растений винограда. Но, несмотря на эффективность, этот метод не получил широкого распространения в сельскохозяйственном производстве России, так как его внедрение в производство требует значительных финансовых вложений на начальном этапе, поскольку относится к высокотехнологичному наукоёмкому

производству и может реализоваться только при наличии специфического

16

оборудования и хорошо подготовленного персонала (Рундя А.П., Фролова Л.В., Глушанкова Е.И., 2016).

В практике фитосанитарной селекции применение современных методов диагностики вирусных заболеваний и бактериального рака винограда, микроклонального размножения в культуре invitro повышают эффективность селекционного процесса и способствуют более быстрому внедрению в производство выделенных клонов.

Полученные результаты указывают на перспективность применения штаммов-антагонистов для разработки методов, предупреждающих вторичное заражение бактериальным раком (Хаустов Е.И., Проданюк Е.Р., Султанова О.Д., Бондарчук В.В., 2016).

Способ включает микроразмножение пробирочных растений и высадку их на жидкую питательную среду с добавлением макроэлементов, витаминов и биопрепаратов. При этом на основе субстрата Мурасиге-Скуга исключают активированный уголь, снижают содержание солей и кислот в 24 раза и добавляют Гумат+7В в количестве 5-10 мл/л. Способ позволяет повысить эффективность и ускорить размножение оздоровленных от вирусной инфекции перспективных сортов винограда (Батукаев М.С., Дадаева Т. А., Батукаев А. А., 2018).

Изучена возможность применения жасмоновой кислоты при хранении микрорастений жимолости (Lonicera) в культуре in vitro при различных температурных режимах. Депонирование микрорастений жимолости в культуре in vitro на средах с добавлением жасмоновой кислоты (в различных концентрациях) и при низкой положительной температуре обеспечивает их жизнеспособность на протяжении 36 месяцев беспересадочного культивирования (Бъядовский И. А., 2018).

Приспособление к новым условиям культивирования, а именно перенос растительного материала из открытого грунта в условия асептической культуры (invitro), имеет комплексный характер и основывается на лабильности и толерантности биохимических и физиологических параметров, пределы которых обусловлены генетической

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Батукаев Магомед Султанович, 2020 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Акимова С.В., Викулина А.Н., Буянов И.Н., Глинушкин А.П.,

Совершенстование способов подготовки микрорастений малины к адаптации // Плодоводство и ягодоводство россии. - 2014. - Том XXXIX. - С. 16-19

2. Акимова, С.В. Разработка новых элементов технологии зеленого черенкования ягодных кустарников: Автореф. дис. канд. с.-х. наук:06.01.07 / Светлана Владимировна Акимова- М., 2005. - 24 с.

3. Акимова С.В., Раджабов А.К., Бухтин Д.А., Киркач В.В., Аладина О.Н., Деменко В.И., Белошапкина О.О. Адаптация к нестерильным условиям растений винограда укорененных in vitro на питательной среде обогащенной кремнийорганическими соединениями // Известия ТСХА. - Вып. 5. - 2019. - С. 34-53

4. Аладина, О.Н. Влияние лигногуматов на укореняемость и развитие зеленых черенков крыжовника при их укоренении в грядах и кассетах / О.Н. Аладина, С.В. Акимова // Инф. сборник Теплицы России.- С-П. -2004. - № 3. - С. 34-36.

5. Аладина, О.Н. Мицефиты в технологии зеленого черенкования ягодных культур / О.Н. Аладина, С.В. Акимова, И.Г. Тараканов, Д.Н. Никиточкин // Агротехнологии XXI века: Сб. трудов Международной научно-практической конференции. - М.,2007. - С. 171-173.

6. Аладина, О.Н. Роль внекорневых обработок в зеленом черенковании садовых растений / О.Н. Аладина, С.В. Акимова, Н.П. Карсункина, И.В. Скоробогатова // Известия ТСХА. - 2006. - № 3.- С. 46-55.

7. Алтунин, Д.А. Применение гуминового препарата «Гумисол» под различные культуры / Д. А. Алтунин, И.Н. Титов, Т.И. Шишова, Д.В. Трофимов // Достижения науки и техники в АПК. - 2000. - №6. - С. 912.

8. Арестова Н.О. Регенерационная активность подвоев винограда при

клональном микроразмножении / /Плодоводство и виноградарство Юга России. -2012.- № 16 (4).- С. 37-43

9. Арестова Н.О., Рябчун И.О., Влияние органо-минерального удобрения

италполлина, мир хлороз на показатели роста и развития винограда // Перспективы использования инновационных форм удобрений, средств защиты и регуляторов роста растений в агротехнологиях сельскохозяйственных культур: Материалы докладов участников 10-й научно-практической конференции / Под редакцией В.Г. Сычева.-2018. - С. 11-13

10.Байрамбеков Ш.Б., Гуляева Г.В., Влияние регулятора роста растений Аргун на формирование структурных элементов и урожайность картофеля // Перспективы использования инновационных форм удобрений, средств защиты и регуляторов роста растений в агротехнологиях сельскохозяйственных культур: Материалы докладов участников 10-й научно-практической конференции / Под редакцией

В.Г. Сычева.- 2018. - С.23-25

11.Балашова И.Т., Козарь Е.Г., Мащенко Н.Е., Использование фенольных соединений класса стероидных гликозидов для повышения адаптивных свойств овощных культур // Фенольные соединения: функциональная роль в растениях. -М., 2018. - С. 28-35

12.Батукаев А.А., Палаева Д.О., Собралиева Э.А. Совершенствование состава питательных сред при микрочеренковании винограда invitro // Научные труды Северо-Кавказского федерального научного центра садоводства, виноградарства, виноделия. - Краснодар,2018.- Т. 18.- С. 76-80.

13.Батукаев М.С., Дадаева Т. А., Батукаев А. А. Способ микрочеренкования винограда in vitro // Проблемы развития АПК региона.- 2018.- № 2 (34).- С. 23-27.

14.Батукаев М.С., Палаева Д.О., Батукаев А.А. Микрочеренкование винограда in vitro // Механизмы устойчивости растений и микроорганизмов к неблагоприятным условиям среды: сборник материалов Годичного собрания Общества физиологов растений России. - 2018. - С. 1172-1175.

15.Белаш О.В., Влияние некорневой подкормки смородины черной агрохимикатом фитоферт энерджи (FERTICO D.O.O. Сербия)// Перспективы использования инновационных форм удобрений, средств защиты и регуляторов роста растений в агротехнологиях сельскохозяйственных культур: материалы докладов участников 10-й научно-практической конференции / Под редакцией В.Г. Сычева. -2018. - С. 32-37

16. Белошапкина О. О. Система оздоровления земляники садовой от вирусов: Автореф. дисс.... д-р. с. -х. наук - М., 2006. - 40с.

17. Белошапкипа О.О., Жаркова И.В. Использование биопрепаратов при клональном микроразмножении земляники // Доклады ТСХА. -2001. -№273.-Ч.2.-С. 284-289.

18.Белоус О.Г., Рындин А.В., Проведение испытаний новых регуляторов роста с учетом особенностей субтропических культур и условий влажных // Перспективы использования инновационных форм удобрений, средств защиты и регуляторов роста растений в агротехнологиях сельскохозяйственных культур: Материалы докладов участников 10-й научно-практической конференции / Под редакцией В.Г. Сычева. - 2018. - С. 29-32.

19.Березина Е.В., Криволапова Л.В., Брилкина А.А., Веселов А.П., Содержание фенольных соединений в каллусах клюквы в присутствии мицелиальных углеводов и белков в питательной среде // Фенольные соединения: функциональная роль в растениях. - М., 2018. - С. 45-58.

20.Беседина Е. Н., Усовершенствование метода клонального микроразмножения подвоев яблони in vitro: Дисс. на соискание уч. степени к. с.-х. наук.- Краснодар, 2015.

21.Беседина Е.Н., Бунцевич Л. Л., Костюк М.А., Изучение эффективности

новых стимуляторов роста различной природы при клональном микроразмножении подвоев яблони серии СК // Плодоводство и ягодоводство россии. - 2014. - Том XXXIX. - С. 29-32

22.Божидай Т.Н., Кухарчик Н.В. Влияние генотипа и ауксина на процесс ризогенеза ex vitro сортов брусники обыкновенной (VCCINIUM VITIS-ADAEA L.) // Биотехнология в плодоводстве: международная научная конференция. - Смохваловичи,2016. - С. 99-102

23.Браткова Л.Г., Малыхина А.Н., Цаценко Н.Н. Приемы адаптации мериклонов винограда к условиям in vivo // Плодоводство и виноградарство Юга России.- 2015.- № 34 (4). - С. 14-29.

24.Брыкалов А.В., Радчевский П.П., Эффективность использования микроудобрений глицерол бор и глицерол цинк при некорневой подкормке винограда // Перспективы использования инновационных форм удобрений, средств защиты и регуляторов роста растений в агротехнологиях сельскохозяйственных культур: материалы докладов участников 10-й научно-практической конференции / Под редакцией

B.Г. Сычева. - 2018. - С. 39-41

25.Булдаков С.А., Щегорец О.В. Микроразмножение картофеля на Сахалине // Картофель и овощи. - 2014. - № 2. - С. 25-27.

26.Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений.- М.: "Наука", 1964.- С. 23-29.

27.Бутенко Р.Г. Технология n vitro в сельском хозяйстве//Сельскохозяйственная биология.- 1983.- N 5.- С.5.

28.Бутенко Р.Г., Вардия Т. К вопросу получения целых растений в культуре ткани табака // Рост и клеточная дифференцировка растений.-М.: "Наука", 1967.- С. 158-168.

29. Бургутин, А.Б. Быстрое клональное размножение виноградного растения / Р. Г. Бутенко Н. В., Катаева, П.Я. Голодрига //Сельскохозяйственная. биология. — 1983. — № 7. — с. 48-50.

30.Бъядовский И. А. Влияние жасмоновой кислоты и пониженной температуры на длительность хранения жимолости (lonicera) в культуре in vitro // Плодоводство и ягодоводство России.- 2018. - Т. 55.-

C. 64-68.

31.Бъядовский И.А. Влияние различных источников углерода и пониженной температуры на способность к хранению груши в культуре in vitro // Плодоводство и ягодоводство России. - 2016.- Том. 44. -С. 121-125

32.Ван-Ункан Н.Ю., Савельев Н.И., Олейникова О.Я., Микроклональное размножение колонновидных сортов яблони // Биотехнология в плодоводстве: международная научная конференция.- Смохваловичи, 2016. - С. 32-34

33.Видершпан А.Н., Головацкая И.Ф., Бойко Е.В., Плюснин И.Н., Содержание флавоноидов в клеточной культуре лихниса зависит от продолжительности культивирования // Фенольные соединения: функциональная роль в растениях.- М., 2018. - С. 87-89

34.Волынец А.П., Фенольные соединения в системе эндогенных регуляторов роста // Фенольные соединения: функциональная роль в растениях. - М., 2018. - С. 91-96

35.Волынец, В.Ф. Аналитическая химия азота / В.Ф. Волынец, М.П.Волынец - Москва: Наука, 1977. - 307 с.

36. Высоцкий В. А. Клональное микроразмножение растений // Культура клеток растений и биотехнология: тез.докл. IV всесоюзной конференции.- Кишинев: «Штиинца», 1983.- С.6-7.

37.Высоцкий В. А. Опыт клонального микроразмножения ирги // Плодоводство и ягодоводство России.-М., 1995.- С. 123-127.

38. Высоцкий В. А. Применение методов культуры изолированных тканей и органов для размножения плодовых и ягодных растений // Ягодоводство в Нечерноземье.- 1982.- С.30-41.

39.Высоцкий В.А., Олешко Е.В. Совершенствование питательной среды для микроклонального размножения вишни // Агротехника и сортоизучение плодовых культур: сб.научных трудов НИЗИСНП.-М., 1985.- С. 72-76.

40. Высоцкий В. А., Упадышев М.Т. Способ выращивания растений in vitro // A.C.N 1685323.- SU A 01 Н 4/00, опубл. Б.И. N 39.- 23. 10.91.

41.Высоцкий, В. А. Биотехнологические приемы в современном садоводстве / В.А., Высоцкий // Сборник научных работ ВСТИСиП РАСХН - T.XXVI - М., 2011.- С.3-10

42.Галдина Т.Е., Совершенствование технологии доращивания растений полученных в культуре ткани in vitro // Успехи современной науки и образования. - 2017.- Т. 7.- № 2.- С. 174-177.

43.Галдина Т.Е., Чаркина С.Р., Бражников П.А. Применение ростовых веществ при размножении зелеными черенками // Воронежский государственный лесотехнический университет им. Г.Ф. Морозова. -2016.- Том 11.- № 12.- С. 16-18

44.Гамбург К.З. Использование изолированной культуры тополя берлинского (POPULUS х BEPOLINENSIS DIPP.) для его модификации // Вестник ИрГСХА.- 2011.- № 44.- С. 22-30.

45.Гвасалия М.В., Клональное микроразмножение растений чая (Thea sinensis L.) в культуре in vitro // Садоводство и виноградарство.- 2013. -№ 4.- С. 20-22

46.Горина В.М., Митрофанова О.В., Лесникова Н.П., Использование биотехнологического метода в селекции абрикоса и алычи // Биотехнология в плодоводстве: международная научная конференция.-Смохваловичи, 2016. - С. 150-154

47.Гринченко И.В. Компания Твайфордплант лаборатория. /И.В.Гринченко.Посольство СССР в Великобритании. - 1985.

48. Даскалов Г.Ж. Влияние природных цеолитов на рост, развитие и урожай хлопчатника // Природные цеолиты: сб. трудов научн. конф. -София, 1986.

49.Джура Н.Ю., Павлова А.Ю., Результаты использования регуляторов

роста фенольной природы при укоренении зеленых черенков крыжовника // Фенольные соединения: функциональная роль в растениях.- М., 2018. - С. 121-125

50.Долгих С.Г., Нурдинова А.Б., Оптимизация клонального микроразмножения клоновых подвоев яблони // Биотехнология в плодоводстве: международная научная конференция. - Смохваловичи, 2016. - С. 44-46.

51.Дорошенко Н.П., Лузгин Г.В., Карлов А.Ф. Патент № 2120739 от 27.10.1998 г. МПК A01H4/00 // Разведение растений из тканевых культур.

52. Дорошенко Н.П., Семенова Л.Н. Адаптация оздоровленных пробирочных растений к нестерильным условиям // Перспективы внедрения современных биотехнологических разработок для повышения эффективности сельскохозяйственного производства. - Ставрополь, 2000. - С.25-29.

53.Дорошенко Н.П. Кравченко Л.В. Современная технология производства базисного посадочного материала // Питомниководство винограда.- Краснодар: СКЗНИИСиВ, 2004. - С.51-59.

54.Дорошенко Н.П., Соколова Г.В. Разведение растений из тканевых культур. -Патент № 2265319 от 10.12.2005 г. МПК A01H4/00

55.Егорова Н.А., Кривохатко А.Г., Ставцева И.В., Каменек Л.И. Микроразмножение эфиромасличных растений с использованием культуры изолированных тканей и органов in vitro // Таврический вестник аграрной науки. -2013. -№ 1.- С. 9-14.

56.Егорова Н.А., Ставцева И.В., Якимова О.В., Каменек Л.И., Кривохатко А.Г. Некоторые аспекты клонального микроразмножения и сохранения in vitro эфиромасличных растений // Таврический вестник аграрной науки.-2015.- № 1 (3).- С. 18-24.

57. Ермаков Е.И., Попов А.И., Некорневая обработка растений гуминовыми веществами, как экологически гармоничная корректировка продуктивности и устойчивости агроэкосистем // Вестник Рос. акад. с.-х. наук. -2003.- №4.-С.7-11.

58.Жученко А. А. Повысить качество посадочного материала // Промышленное производство оздоровленного посадочного материала плодовых, ягодных и цветочно-декаративных культур.- М., 2001.-С.З-5.32.

59.Загоскина Н.В., Маляровская В.И., Нечаева Т.Л., Лапшин П.В., Фенольные соединения в in vitro культуре Camellia japónica // Плодоводство и ягодоводство России.- 2015.- Том 43.- С.83-88

60.Запольский Я.С. Влияние стимуляторов роста на укоренение черенков жимолости съедобной (LONICERA CAERULEA L.) // Плодоводство и ягодоводство России.- 2017.- Т. 48.- № 2.- С. 98-102.

61.Землянухина О.А., Соколенко Г.Г., Карпеченко Н.А. Долговременное культивирование картофеля в условиях in vitro // Актуальные проблемы картофелеводства: фундаментальные и прикладные аспекты:

материалы всероссийской научно-практической конференции с международным участием. Ответственный редактор М.В. Ефимова. -2018.- С. 219-221.

62. Калашникова Б.А. Клональное микроразмножение растений / Е.А. Калашникова // Сельскохозяйственная биотехнология.- 1998. - С. 3666.

63.Калинин Ф.Л. Технология микроклонального размножения растений / Ф.Л. Калинин, Г.П. Кушнир, В.В. Сарнацкая. - Киев: Наукова думка, 1992.-232 с.

64.Кашин В.И. Научное обеспечение питомниководства России // Промышленное производство оздоровленного посадочного материала плодовых, ягодных и цветочно-декоративных культур.- М., 2001.-С.5-17.

65.Кашин В.И. Поликарпова Ф.Я. Научные основы и технология размножения садовых растений зеленым черенкованием // Промышленное производство оздоровленного посадочного материала плодовых, ягодных и цветочно-декоративных культур. -М., 2001. —С.97-102.

66.Кефели В.И. Природные ингибиторы роста и фитогормоны.- М.: «Наука», 1974.- 253 с.

67. Кипайкина Н.В. Использование биологически активных веществ для повышения устойчивости высших растений к стрессовым факторам /Н.В. Кипайкина, С. А. Лукатин, Д.И. Башмаков // Биотехнология на рубеже двух тысячелетий: Мат. междунар. научн. конф. - Саранск, 2001. -С.231-233.

68.Киркач В.В., Подготовка микрорастений малины ремонтантной к пересадке в нестерильные условия // В мире научных открытий: Материалы V Всероссийской студенческой научной конференции (с международным участием).- 2016.- С. 85-87.

69.Коваленко Н.Н., Поливара Н.В., Культура апекальных меристем отдаленных гибридов Cerasus Mill // Биотехнология в плодоводстве: международная научная конференция. -Смохваловичи, 2016. - С. 147150

70.Колбанова Е.В., Ризогенез крыжовника в культуре in vitro // Биотехнология в плодоводстве: Международная научная конференция.- Смохваловичи,2016. - С. 70-77

71.Корнацкий С.А., Высоцкий В.А., Трушечкин В.Г. Проблемы клонального микроразмножения косточковых культур // Достижения в плодоводстве в Нечерноземной зоне РСФСР.- М., 1991.- С.104-116.

72. Корнацкий С. А. Наиболее значимые элементы промышленной технологии клонального микроразмножения древесных культур. / Корнацкий С.А. // Промышленное производство оздоровленного посадочного материала плодовых, ягодных и цветочно-декоративных культур. - М., 2001.-С.103-104.

73.Котова З.П., Найда Н.М., Парфенова Н.В. Усовершенствованная технология размножения мини-клубней картофеля в условиях

изоляции // Известия Санкт-Петербургского государственного аграрного университета. -2017.- № 1 (46).- С. 41-47.

74.Кузнецова И. Б., Макаров С. С., Абдурасули Бобохон, Влияние росторегулирующих веществ на органогенез растений-регенерантов на этапе «собственно микроразмножение» при клонировании ягодных культур // Плодоводство и ягодоводство России. - 2014. - Том XXXXVII. - С. 198-202

75.Куликов И.М., Упадышев М.Т., Высоцкий В.А., Достижения и перспективные направления биотехнологических исследований в ФГБНУ «Всероссийский селекционно-технологический институт садоводства и питомниководства» // Биотехнология в плодоводстве (материалы международной научной конференции). - 2016. - С. 26-28

76.Кухарчик Н.В., Биотехнологии в плодоводстве Беларусии // Наука и инновации.- 2016. -№6 (160).- С. 17-22

77.Кухарчик Н.В., Кастрицкая М.С., Тычинская Л.Ю., Сокол В.П. Морфологические и химические характеристики растений-регенерантов, инфицированных вирусом шарки сливы, при хемотерапии в культуре in vitro // Биотехнология в плодоводстве: Международная научная конференция.- Смохваловичи, 2016. - С. 178182

78.Кухарчик Н.В., Семенас С.Э., Отдел биотехнологии РУП «Институт плодоводства». Хронология исследований и основные результаты // Биотехнология в плодоводстве: материалы международной научной конференции Национальная академия наук Беларуси, Институт плодоводства сборник трудов конференции. - 2016. - С. 9-17

79.Лопаткина Е.В., Некоторые вопросы создания оздоровленных базисных маточников винограда с учетом почвенно-грунтовых условий // Вестник Донского государственного аграрного университета.- 2018.-№ 4-1 (30). - С. 18-23.

80.Лукичева Л.А., Влияние состава питательной среды и генофонда на клональное микроразмножение вишни и сливы invitro // Биотехнология в плодоводстве: международная научная конференция.- Смохваловичи, 2016. - С. 57-63.

81.Маршания И.И. Эффективность использовани природного цеолита под эфиромаслиничную герань // Применение природных цеолитов в животноводстве и растениеводстве: тез. докл.-Тбилиси,1984.

82.Матушкин С.А., Ярмоленко Л.В., Влияние биологически активных веществ на пролиферацию и удлинение микропобегов смородины черной и малины // Биотехнология в плодоводстве: международная научная конференция. - Смохваловичи, 2016. - С. 67-70

83.Матушкина О. В., Пронина И. Н., Регенерационная способность перспективных сортов яблони in vitro // Плодоводство и ягодоводство России: сб. науч. тр. ФГБНУ ВСТИСП. - 2016.- Том XXXXVII. - С. 211-215.

84.Матушкина О.В., Пронина И.Н., Технология беспересадочного

культивирования яблони и груши in vitro // Технологии пищевой и перерабатывающей промышленности АПК-продукты здорового питания. - 2016.- № 5.- С. 31-37.

85.Мацнева О.В., Ташматова Л.В., Орлова Н.Ю., Шахов В.В., Микроклональное размножение земляники садовой // Селекция и сорторазведение садовых культур.- 2017.- Т. 4.- №1-2.- С. 93-96

86.Машкина О.С., Табацкая Т.М., Морковина С.С., Панявина Е.А. Выращивание посадочного материала тополя белого (populus alba l.) на основе коллекции in vitro и оценка его себестоимости // Лесотехнический журнал. - 2016.- Т. 6.- № 1 (21).- С. 28-44.

87.Машкина О.С., Табацкая Т.М., Сиволапов А.И. Производство посадочного материала сортов тополя сереющего, размноженных in vitro // Актуальные направления научных исследований XXI века: теория и практика.- 2013.- № 4.- С. 117-121.

88. Мещерякова Н.И., Банков В.Ф. Гормональная регуляция побегообразования в изолированной культуре апикальных меристем розы эфиромасличной // Регуляторы роста и развития растений: тез. докл. I Всесоюз. конф.- М.: «Наука», 1981.- С.166-167

89. Митрофанова И.В., Палий А.Е., Гребенников О.А., Браилко В.А., Лесникова-Седошенко Н.П., Работягов В.Д., Митрофанова О.В., Адаптационная способность перспективных сортов лаваццы и лавандина при культивировании in vitro и ex vivo // Сельскохозяйственная биология.- 2018. - Том 53.- № 3.- С. 539-546

90. Мишке, И.В. Микробные фитогормоны в растениеводстве / И.В. Мишке // АН ЛатвССР. Ин-т микробиологии им. А. Кирхенштейна. -Рига: Зинатне, 1988 - С. 150.

91. Насимов А. З., Зленко В. А. Совершенствование способов адаптации растений винограда, размноженных методом in Vitro // Материалы научн. конф. молод. учен. и спец. Казахстана, посвящ. 70-летию Великой Окт. соц. рев. — Алма-Ата, 1987.

92. Никольский М.А., Панкин М.И., Якуба Ю.Ф., Воздействие

микроэлементов на анатомическое строение и регенерационную активность однолетних побегов винограда // Плодоводство и ягодоводство России. - 2015.- Том 43.- С. 324-328.

93. Остапчук И.Н. Влияние стерилизующих соединений на жизниспособность эксплантов облепихи при введении в культуру in vitro // Биотехнология в плодоводстве: Международная научная конференция.- Смохваловичи,2016. - С. 95-99

94. Острейко С.А., Панькова Т.Ф. А.С. N 403388 // Открытия, изобретения, промышленные образцы, товарные знаки.- 1973.-N- 43.

95.Ойстренко С.А, Дроздовский Э.М. О некоторых актуальных проблемах в исследовании роста и развития растений в связи с изучением механизмов адаптации к условиям среды // Плодоводство и ягодоводство России. - 1997.- Т. IV. -С.33-43.

96. Острикова О.В., Лыкова О.В., Влияние состава питательной среды на

эффективность клонального микроразмножения отдалённых триплоидных гибридов вишни на этапе подготовки микрорастений к ризогенезу // Плодоводство и ягодоводство России.- 2015.- Том 43.- С. 329-332

97. Павлова Н.Ю. Использование цеолита для контейнерной культуры крыжовника / Н.Ю. Павлова, И.И. Крылова // Плодоводство и ягодоводство России. - 1996.- Т. 3.- С. 135-140.

98. Панин А.П. Тормозящее действие ГК3 , 2,4-Д и кумарина на процесс корнеобразования у листовых и стеблевых черенков фасоли./А.П.Панин // Физиология растений.-1986.-Т.ЗЗ. - Вып. 5.-С. 951-957.

99. Покинбара В.А. и др. Испытания гуминовых препаратов / В.А. Покинбара, СВ. Довыденко, Т.О. Скородумова // Агрохимический. вестник. -2001. -№2. -С.6-11.

100. Поляков С.А. Адаптация растений регенерантов земляники к неблагоприятным условиям./С.А.Поляков, СП. Расторгуев, А.В.Верзилин // Повышение эффективности садоводства в современных условиях. -2003.-№1.-С. 335-339.

101. Попова И. В., Крыжовник. - М.: Агропромиздат, 1985. - 39 с.

102. Поух Е.В., Кобринец Т.Н., Иванова О.С., Результаты работы в области

биотехнологии в отделе плодоводства РУП «Брестская ОСХОС НАН Беларуси» // Биотехнология в плодоводстве: материалы международной научной конференции. - 2016. - С. 18-19. 103. Проворченко, В.Н. Подорожный, В.Ф. Гавриш // Промышленное производство оздоровленного посадочного материала плодовых, ягодных и цветочно-декоративных культур. - М., 2001. - С.79-81.

104. Пронина И. Н., Длительное хранение эксплантов яблони и груши на

этапе ризогенеза in vitro и его влияние на адаптацию ех vitro // Биотехнология в плодоводстве: материалы международной научной конференции, ФГБНУ «Всероссийский НИИ садоводства им. И.В. Мичурина». - Мичуринск. - С. 47-50

105. Ребров А.Н., Развитие оздоровленных in vitro растений винограда после

адаптации к нестерильным условиям // Плодоводство и виноградарство Юга России.- 2012.- № 18 (6).- С. 117-123.

106. Ребров А.Н. Введение в культуру in vitro новых перспективных столовых сортов винограда. Ребров А.Н., Дорошенко Н.П., Трошин Л.П., Алзубайди Х. К.// Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета.- 2016.- № 124.- С. 168-180.

107. Рундя А.П., Особенности использования субстратов с добавлением AQUASORB 3005 KB при адаптации растений в условиях ex vitro // Плодоводство: Сборник научных трудов. - Самохваловичи, 2015.- С. 165-172.

108. Рундя А.П., Фролова Л.В., Глушанкова Е.И. Введение и

микроразмножение в культуре in vitro двух элитных гибридов малины

белорусской селекции // Биотехнология в плодоводстве: Международная научная конференци .-Смохваловичи, 2016. - С. 78-82

109. Серпуховитина К. А. Питомниководство и продуктивное виноградарство // Питомниководство винограда.- Краснодар: СКЗНИИСиВ, 2004. -С. 3-7.

110. Сидоренко Т.Н., Левзикова Е.Г., Лаврененко Н.В., Результаты работы в области биотехнологии в отделе картофелеводства и плодоводства РУП «Гомельская ОСХОС НАН Беларуси» // Биотехнология в плодоводстве: материалы международной научной конференции. -2016. - С. 20-23

111. Синкевич Н.А., Мисюк Е.М., Рулинская М.Е., Результаты работы, проведенной в лаборатории микроклонального размножения отдела садоводства РУП «Гродненский ЗИР НАН Беларуси» // Биотехнология в плодоводстве: материалы международной научной конференции. -

2016. - С. 24-25

112. Соболев В.И., Мистратова Н.А., Демина Н.А., Носкова М.А., Носкова Н.Е. Перспективы развития виноградарства в красноярском крае в свете использования современных технологий // Инновационные тенденции развития российской науки: материалы XI Международной научно-практической конференция молодых ученых.- 2018.- С. 199201.

113. Соловых Н.В., Генетические основы селекции сельскохозяйственных культур // Материалы международной научно-практической конференции, посвященной памяти академика РАН, доктора с.-х. наук, профессора Н.И. Савельева 24-26 мая 2017г.- Мичуринск-наукоград,

2017. - С. 285-292

114. Спиваковский, Н.Д. Удобрение плодовых и ягодных культур / Н.Д. Спиваковский - М.: Сельхозиздат, 1962 - 360 с.

115. Стоилов Г.П. Итоги экспериментальной оценки применения природных цеолитов в растениеводстве // Природные цеолиты : сб. трудов научной конференции. -София, 1986.

116. Тимофеева С. Н., Юдакова О. И., Степанова А. И. Гистологические аспекты клонального микроразмножения LABURNUM ANAGYROIDES МББ1С // Бюллетень ГНБС.- 2016.- Выпуск 120. -2016. - С. 30-35.

117. Тихонова К.О., Упадышев М.Т., Метлицкая К.В., Донецких В.И., Петрова А.Д., Оздоровление малины от вредоносных вирусов с использованием современных методов биотехнологии и вирусологии // Плодоводство и ягодоводство России.- 2014. - Том XXXIX. - С. 212216.

118. Тихонова М.А., Мурсалимова Г.Р., Влияние предпосадочной обработки зеленых черенков винограда стимуляторами роста на укореняемость и развитие надземной части // Плодоводство и ягодоводство России.-2014. - Т. XXXIX. - С. 208-211

119. Тихонова М.А., Мурсалимова Г.Р., Действие гуминовых препаратов на

развитие черенков винограда в условиях закрытого грунта // Перспективы использования инновационных форм удобрений, средств защиты и регуляторов роста растений в агротехнологиях сельскохозяйственных культур: материалы докладов участников 10-й научно-практической конференции / Под редакцией В.Г. Сычева.-2018. - С. 235-237

120. Толоконцев Д.В., Усков А.И., Тиханова Н.Н., Эффективность оздоровления сортов картофеля ранней группы спелости при помощи культуры апикальной меристемы // Плодоводство и ягодоводство России.- 2014. - Том XXXIX. - С. 217-222

121. Толочко В.В., Гамбург К.З. Возможные функции миоинозита в растениях // Успехи современной биологии.- 1978.-Т. 85.- N 1.- С. 5062.

122. Трушечкин В.Г., Высоцкий В.А., Леонтьев-Орлов О.А. Методические указания по клональному микроразмножению подвоев и сортов яблони.- М., 1985.- 19 с.

123. Турбин П.А., Богдан М.Н., Урожайность и физико-механические свойства плодовишни сорта Вянок в саду, заложенном безвирусным посадочным материалом // Биотехнология в плодоводстве: международная научная конференция.- Смохваловичи,2016. - С. 201205

124. Умралина А.Р., Ким Д. Введение в культуру in vitro эндемика ASTRAGALUS DUANENSIS SAPOSHN. Ex sumn. (астрагала дуанского) // Известия ВУЗов (Кыргызстан). - 2013.- № 5.- С. 66-70.

125. Упадышев, М.Т. Спектральный состав света при микроразмножении растений родов Rubus и Sorbuc / М.Т. Упадышев // Доклады РАСХН. -2002.- № 6. - С. 16-19

126. Упадышев М.Т. Роль фенольных соединений в процессе жизнедеятельности садовых растений / Упадышев М.Т.. - М.:Изд.дом МСП, 2008. - С. 319.

127. Упадышев М.Т. Оздоровление малины от вредоносных вирусов с использованием современных методов биотехнологии и вирусологии // Тихонова К.О., Упадышев М.Т., Метлицкая К.В., Донецких В.И., Петрова А.Д. Плодоводство и ягодоводство России. 2014. Т.39. с.212-216.

128. Фирсанова Г.Н. Влияние фитогормонов на анатомическую структуру листьев яровой пшеницы / Г.Н. Фирсанова, Д.А. Климачев // Регуляторы роста и развития растений: Тез.доклада 4 межд. конф. -М., 1997. - С. 83.

129. Хаустов Е.И., Проданюк Е.Р., Султанова О.Д., Бондарчук В.В. Биотехнология получения здоровых клонов винограда //Биотехнология в плодоводстве: Международная научная конференция.-Смохваловичи, 2016. - С. 113-116

130. Хон Б. Мобильность генома растений/Б.Хон,Э.Денис. - М.: Агропромиздат,1990.-271 с.

131. Цаценко Н.Н., Браткова Л.Г., Малыхина А.Н., Мащенко М.Н., Выращивание мериклонов винограда в нестерильных условиях // Плодоводство и виноградарство Юга России. - 2017.- № 43 (1).- С. 3041.

132. Чернец А.М., Калашян Ю.А., Чебан Е.Ф., Проданюк Л.Н., Лукица В.И., Перевод сортимента черешни республики молдова на безвирусную основу // Биотехнология в плодоводстве: материалы междунар. науч. конф. - Самохваловичи :РУП «Ин-т плодоводства», 2016. - С. 183-186.

133. Чернова С.Ю. Выявление оптимальной фазы корнеобразования у зеленых черенков крыжовника для внекорневых обработок регуляторами роста / С.Ю. Чернова, С.В. Акимова, О.Н. Аладина // Доклады ТСХА. - 2007.- В. 279. - С. 551-553.

134. Шабаев Н.Е. Использование лигнина и биорганического концентрата для получения посадочного материала облепихи // Материалы научн.конф., посвящ. 85-летию со дня рождения И.И. Синягина. -Новосибирск, 1996. - С. 60-62

135. Шапорева В.А., Змушко А.А., Колбанова Е.В., Адаптация ex vitro

подвоя 54-118 яблони на различных субстратах // Биотехнология в плодоводстве: материалы международной научной конференции Национальная академия наук Беларуси. - Минск,2016. - С. 35-40

136. Шахов В.В., Ташматова Л.В., Мацнева О.В., Хромова Т.М.,

Эффективность стерилизующих агентов при введении сортов вишни в культуру in vitro // Современное садоводство - Contemporary horticulture. - 2018.- №4. - 2018. - С. 32-37

137. Шпаяр Д. Хозяйственное значение вирусных болезней культурных растений // Борьба с вирусными болезнями растений.-М.: Агропромиздат, 1986. - С.9-36.

138. Шевелуха, B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / Под ред. B.C. Шевелухи. - М.: Высшая школа, 1998. - 416 с.

139. Щелкунова С.Е., Попов Ю.Г. Получение свободных от вирусов растений малины путем культуры изолированных апексов //Физиология растений.- 1970.- Т. 17.- N 3.- С. 618-622.

140. Якимова О.В., Егорова Н.А., Индукция каллусогенеза в культуре

изолированных органов ORIGANUM VULGARE L // Масличные культуры. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур. -2014. - Вып. 2 (159-160). - С. 81-86

141. Якимова О.В., Егорова Н.А., Клональное микроразмножение мелиссы

лекарственной (MELISSA OFFICINALIS L.) в культуре in vitro // Методические рекомендации. Научно-исследовательский институт сельского хозяйства Крыма. -Симферополь,2018. - 28 с.

142. Янковская, М. Б. Модификация питательных сред при работе с

культурой in vitro / М. Б. Янковская // Генетические основы селекции сельскохозяйственных культур: материалы междунар. науч.-практ. конф. посвящ. памяти акад. РАН, д-ра с.-х. наук, проф. Н. И. Савельева

(24-26 мая 2017 г.). - Мичуринск-наукоград РФ. - Воронеж: Кварта, 2017. - С. 362-366.

143. Ярошенко О.В., Попова В.П., Эффективность применения новых форм удобрений в интенсивных насаждениях яблони // Перспективы использования инновационных форм удобрений, средств защиты и регуляторов роста растений в агротехнологиях сельскохозяйственных культур: материалы докладов участников 10-й научно-практической конференции / Под редакцией В.Г. Сычева.- 2018. - С. 235-237

144. Abbott A. J. Practice and promise of micropropagation of Woody Species //Acta Horticult. - 1978. - V. 75. - P. 113-128.

145. Batten G.B., Wardlow I.F. Senescence and grain development in wheat plants grown- with contrasting phosphorus regimes // Austral. J.Plant Physiol.- 1987.- V. 14.-N 3.- P. 253-265

146. Biondi S. Polyamines and Ethylene in relation to adventitious root formation in Prunus avium shoot culture.// Physiol. Plant. - 1990. - V. 78. -№3. - P. 475-483.

147. Bottcher I., Zoglauer K., Goring H. Induction and reversion of vitrification of plants cultured in vitro // Physiol. Plant.- 1988.- V.72.- N 3.-P.560-564.

148. Bowden A. Transferring tissue - cultured plants in particular grevilleas to nursery environment.// Comb. Proc. Inter. Plant. Propagator's Soc. - 1985. - V. 34. - P. 76-78

149. Boxus Ph. La micropropagation "in vitro" du fraisier // Proc. XIX intern, hortic. congr.- 1974 b.- V. la.- P. 65.

150. Bratkova, L.G. Priemy adaptacii meriklonov vinograda k uslovijam in vivo / L.G. Bratkova, A.N. Malyhina, N.N. Cacenko // Plodovodstvo i vinogradarstvo Juga Rossii. - 2015. - № 34 (04). - S. 14-29.

151. Broertyes C, Lock С. The use of irradiated soil in establishing in vitro adventitious plantlets of chrysanthemus.// Acta Botanic. Nederlandic. -1984. - V. 33.-№3.-P. 375.

152. Garre, M. La cultur de meristemes et la multilpication Végetative in Vitro au service de la pepiniere / M. Garre, J. Martin-Tanguy, P. Mussillon // Bulletin Petits Fruit. - 1979. - № 14. - P. 7-65.

153. Dalet F. Effect of IAA and IBA on the regrowth in greenhaus conditions of plantlets of Prunus avium rooted in vitro.// Comptes Rendes Academic a Agriculture de France. - 1988. - V. 73. - №6. - P. 95-102.

154. Ellen Sutter.// J. Am. Soc. Hort. Sci. - 1988. - V. 113. - №2. - P. 234238.

155. Follet I.M.. Douglas I.A. Effect of nitrate: ammonium rations on growth of asparagus seedlings in sand culture // N.Z. I.Exp. Agr. - 1987.- V. 15.- N4.- P. 497-499

156. Fossard R.A. Tissue culture propagation. The horizons of tissue culture propagation / A seminar directed by Dr. R.A. Fossard for N.S.W.Assotiation of Nurserymen Ltd., University of Sydney., 3-4 December 1977.- P.1-14.

157. Fuchigami L. H., Cheng T. V. Abaxial Transpiration and Water Loss in Aseptically cultured plum.// J. Am. Soc. Hort. Sic. - 1981. - V. 106. - №4. - P. 519-522.

158. Golosin B., Radojevlc L. Micropropagation of apple rootstocks //Acta Horticulturae.-1987.- V.2.- N 212.- P. 589-594.

159. Gur A., Altman A., Stern R., Wolowitch B. The role of myo-inositol and cytokinins in the survival of roots peach cuttings. // Acta Horticultural, 1986.-№ 179.-P. 853-860.

160. Du Hui-ying, Xue Shi-chuan, Suu Zhi-mei, Yang Yun-ma, Wang Yang-gun, Li Ying-chung. Hebai nongye daxue xuebao // J. Agr. Univ. Hebai. -2004.27, № 4,-C63-66.

161. Hicks G. S. Adventitious rooting of apple microcuttings in vitro: an anatomi study.// Can. J. of Botany. - 1987. - V. 65. - №9. - P. 1913-1920.

162. Holmes F.O. Elimination of spermivirus from the nightingale chrysanthemum // Phytopathology.-1956.- V.46.-P.599-600.

163. Jones O.P. Effect of benzyladenine on isolated apple shoots // Nature.-1967.- V. 215.- N 5109.- P. 1514-1515.

164. Jones O.P. Metodl ed appllcazlonl della propagazlone "In vitro" delle piante de frutto // Tecniche di colture "in vitro" per la propagazione sa vasta scala delle specie ortoflorofrutticole, Pistoia.-1979 a.- P.95-106

165. Jrwin J. E., Chee Ph. D. The Role of micropropagation in commercialization of plant biotechnology.// Inter symposium for Horticult. -1988. - P. 11-15.

166. Loreti F., Pisani P. L. Physiological and technical factors affecting rooting in woody species.// Proceed. XXI st. Inter. Hort. Cong. - 1982. - P. 294-310.

167. Marietta Papuchatri P. In vitro Propagation of Hosta decorata "Thomas Hogs", using cultured shoot Tips.//J. Am. Soc. Hort. Sci. - 1981. -V. 106. - №2. - P. 232-236.

168. Murashige T. Plant propagation through tissue cultures // Ann. Rev. Plant Physiol.- 1974.- V.25.- P. 135-166.

169. Pocock S. Procedures and problems associated with the transfer of tissue-cultured plants.// Comb. Proc. Inter. Plant. Propagators Soc. - 1984. -№ 33. - P. 316-320.

170. Robert L. Tichnor. Techniques for improving rooting during propagation.// Am. Nurseryman. - 1982. - V. 155. - №1. - P. 67-71.

171. Schuyler Suley. Hormonal Transudation of Environmental stresses.// Hort. Sci. - 1990. - V. 25. - №11. - P. 1303-1365.

172. Smirnoff N.. Stewart G.R. Nitrogen assimilation and Zinc toxi-ty to zinc-tolerant and nontolerant clons of Descham-psia caespitosa (L.) // New Phytol.-1987.- V. 107.- N 4.- P. 671-680.

173. Svobodova J. Elimination of viruses by means of callus tissue culture // Proc. Intern.Cong. Plant Viruses.- Wagenin-gen, 1966.- P. 48-53.

174. Walkey D.G.A. Production of apple plantlets from axillary but meristems // Canad. J. Plant Sci.- 1972.- V. 52.- N 6.-P.1085-1086.

175. Zornosa I., Carpena 0., Nijera A., Penalosa I. Effect of light intensity on NH + tolerance in tomato plants // Plant and Soil.- 1987.- V. 102.- N 1.-P. 93-97.

П Р И Л О Ж Е Н И Я

ПРИЛОЖЕНИЕ 1

100 90 80 70 60 0 40 30 20 10 0

87,5

45,4

13 8 13 11 978

2 0 2 3 2133

^^т 1

Количество Инфицировано, шт. Погибло, шт. Приживаемость, Приживаемость, % высаженных шт.

кластер-побегов, шт.

■ Ркацители ■ Юбилей Платова ■ Фламинго ■ Надежда АЗОС

Рисунок 1- Приживаемость кластер-побегов и образование регенерантов

растений

Ш .1

шт ■1

1-вариант, 2 - вариант, среда 1 - вариант, 2 - вариант, среда 1-вариант, 2 - вариант, среда контроль-МС1/2 сГумат + 7В контроль-МС1/2 сГумат + 7В контроль-МС1/2 сГумат + 7В

Кишмиш лучистый Надежда АЗОС Августин

> Кол-во междоузлий с листом, шт II Длина побега, см 8 Кол-во корней, шт

НСР-0.81 НСР-0,82 НСР-0.42

Рисунок 2- Влияние минерального состава питательной среды на развитие микропобегов различных сортов винограда

б - песок-перлит (1:1) Супер Гумисол - 2х-кратная листовая обработка 40мл на Юл воды -2х-кратная корневая подкормкаЮОмлна Юл воды (Полив чистой водой 2 раза в нед.)

5 - песок-перлит (1:1) Супер Гумисол-2х-кратная листовая обработка 40мл на Юл воды (Полив чистой водой 2 раза в нед.)

4 - песок-перлит (1:1)Биоплант Флора- 2х-кратная листовая обработка 40мл на Юл воды - 2х-кратная корневая подкормкаЮОмлна Юл воды (Полив чистой водой 2 раза в нед.)

3 - песок-перлит (1:1) Биоплант Флора-2х-кратная листовая обработка 40мл на Юл воды (Полив чистой водой 2 раза в нед.)

2 - песок-перлит (1:1) (Полив р-ром Чеснокова 2 раза в нед.)

1 - контроль -промытый песок (Полив р-ром Чеснокова 2 раза в нед.)

0

Приживаемость. % ■ Приживаемость (среднее), шт. НСР-2,55

20 40 60 80 100

Рисунок 3 - Приживаемость растений винограда выращенных в условиях in vitro после пересадки в полиэтиленовые сосуд-пакеты (сорт Преображение) n=16

5 - песок-кокосовая стружка (1:1) Супер Гумисол-2х-кратная некорневая обработка 40мл на Юл воды - 2х-кратная корневая подкормка 100 мл на Юл воды (Полив чистой водой 2 раза в нед.)

4 - песок-кокосовая стружка (1:1) Гумат-7В-2х-кратная корневая обработка 50мл на Юл воды (Полив чистой водой2 раза в нед.)

3 - песок-перлит (1:1)СуперГумисол-2х-кратная некорневая обработка 40мл на Юл воды + 2х-кратная корневая подкормка 100 мл на 10 л воды (Полив чистой водой 2 раза в нед.)

2 - песок-перлит (1:1) Супер Гумисол-2х-кратная некорневая обработка 40 мл на 10 л воды (Полив чистой водой 2 раза в нед.)

1 - контроль -промытый песок (Полив р-ром Чеснокова 2 раза в нед.)

91,7

93,8

С

15,3 95,8

79,2

81,3

0%

Приживаемость (среднее), шт.

НСР-1,81

20% 40% 60% Приживаемость, %

80%

100%

Рисунок 4 - Приживаемость растений винограда выращенных в условиях in vitro после пересадки в полиэтиленовые сосуд-пакеты (сорт Молдова) n=16

Рисунок 5. - Влияние биоудобрений на формирование корневой системы растений винограда в сосуд-пакетах (сорт Преображение)

Таблица 1 - Влияние различных, питательных сред на рост и развитие растений винограда при микрочеренковании in vitro (сорт Августин)

(через 41 сутки после черенкования)

Кол-во основных корней, шт Кол- во листьев, шт Высота растений, см

Варианты Повторно сти Все Средн ее на 1 Повторно сти Все Среднее на 1 Повторно сти Все Средне е на 1

1 2 3 го растен ие 1 2 3 го расте ние 1 2 3 го растен ие

Вариант-

контроль, модифицирова 1,7 1,5 2,3 5,5 1,8 6,1 7 5,5 5,8 17,5 5,8 7,0 5,3 6,3 18,6 6,2

нная среда МС

Питательная 2,0 1,5 1,8 5,3 1,8 3,1 3,3 1,0 7,5 2,5 2,2 3 1,2 6,4 2,1

среда №1 7

Питательная 1,7 1,3 1,0 4,0 1,3 0,5 1,0 1,2 2,7 0,9 0,5 0,8 0,7 2,0 0,7

среда №2

Питательная 1,7 1,8 1,8 5,3 1,8 6,3 5,5 6,3 18,2 6,1 7,0 6,5 7,3 20,8 6,9

среда №3 3

Питательная 1,8 2,0 2,2 6,0 2,0 6,3 6,5 5,8 18,7 6,2 7,3 7,7 7,8 22,8 7,6

среда №4 3

НСР-1,25 НСР-2,14 НСР-2,39

ПРИЛОЖЕНИЕ- 2

Фото1 - Растения на 3 неделю после посадки

Фото2 - На 5 неделю после посадки

Фото 3- Работа в ламинар боксе

Фото 4 - Через 56 дней после посадки на питательнуюсреду

Фото 5 - Черенки сортов винограда с использованием Гумата

Фото 6 - Культуральная комната. Общий вид

Фото7 - Растоновка пробирок с растениями на стелажах в шахматном

порядке

Фото8 - Пробирочные растения, пересаженные в сосуд-пакеты для

доращивания

Фото 9 - Открытие сосуд-пакетов на 50 % для адаптации к естественным

условиям

Фото 10 - Полностью открытые сосуд-пакеты с добавкой в субстрат

перлита

Фото 11 - Посадка пробирочных растений в тепличные условия

Фото 12 - Готовый для адаптации к in vivo условиям пробирочный

саженец

Фото 13 - Высадка окоренившихся пробирочных кастений в тепличный

грунт

Фото 14- Высадка винограда с пробирок в теплицу и адаптаци к

естественным условиям

Фото 15 - Адаптация к условиям in vivo. Общий вид

Фото 16 - Саженцы после снятия пленочного укрытия в in vivo условиях

Фото 17- Адаптировынные к естественным условиям растения

Фото 18 - Корневая система готовых к высадке на постоянное место

саженцев винограда

Фото 19 - Закладка микроматочников винограда

НА ИЗОБРЕТЕНИЕ

№2521992

СПОСОБ МИКРОЧЕРЕНКОВАНИЯ ВИНОГРАДА in vitro

11атгнтообладатель(ли): ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРА ЗОВА ТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "ЧЕЧЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ' (КГ), Государственное Научное Учреждение ЧЕЧЕНСКИЙ НА ЬЧНО-ИССЛЕДОВА ТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА (М/)

Автор(ы): с.м. на обороте

Заявка №2013100337

Приоритет изобретения 09 января 2013 г.

Зарегистрировано в Государственном роестре изобретений Российской Федерации 14 мая 2014 г, Срок действия патента истекает 09 января 2033 г.

Руководитель Федеральной службы по интеллектуальной собственности

Б.11. Симонов