Оптико-биосенсорный анализ термодинамических характеристик белок-белковых комплексов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Раченкова, Наталья Ивановна

• Раченкова, Наталья Ивановна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Раченкова, Наталья Ивановна

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Метод оптического биосенсора для исследования 11 взаимодействия биомолекул в реальном времени

2.2. Термодинамические параметры.

2.3. Растительные белковые ингибиторы протеолитических 15 ферментов

2.3.1. Ингибиторы протеиназ из бобовых. Распространение и 17 классификация

2.3.2. Семейство ингибитора Кунитца

2.3.3. Реактивные центры ингибиторов

2.3.4. Механиз действия ингибиторов

2.4. Капликреин-кининовая система

2.4.1. Калликреины

2.4.2. Прекалликреин и калликреин плазмы крови

2.4.3. Контактная система активации прекалликреина

2.4.4. Тканевые калликреины

2.5. Общие представления о молекулярной организации 41 электрон-транспортных цепей в Р450-содержащих монооксигеназных системах

2.5.1. Молекулярная организация электрон-транспортной цепи 43 Р450сат-содержащей монооксигеназной системы

2.6. Рапамицин и FKPB

2.6.1. Рапамицин и циклоспорины

2.6.2. Иммунофилины - FKPB

2.7. Актинопорины

2.7.1. Фармакологические исследования актинопоринов

2.7.2. Механизм действия актинопоринов

2.7.3. RTX-SII -актинопорин тропической актинии Radianthus 58 macrodactylus

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

3.1. Процедура иммобилизации белка на подложку кюветы 60 3.1.1. Иммобилизация белка на карбоксиметилдекстрановую и аминосилановую кюветы

3.2. Расчет кинетических и термодинамических параметров 74 образования и распада комплексов

4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

4.1. Анализ взаимодействия РРТ с STI

4.2. Анализ взаимодействия ВРС с ВРТ

4.3. Анализ взаимодействия РРК с STI

4.4. Анализ взаимодействия Р450 cam с t-, d-b

4.5. Анализ взаимодействия FKPB с рапамицином

4.6. Анализ взаимодействия G-актина с RTX-SII 102 ЗАКЛЮЧЕНИЕ 106 ВЫВОДЫ 109 БЛАГОДАРНОСТИ 110 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список сокращений

PBS/t Фосфатно-солевой буфер

NHS N-гидроксисукцинимид

EDC 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид

КР калий-фосфатный буфер

Pd Путидаредоксин

PdR путидаредоксин редуктаза

Ad Адренодоксин

AdR адренодоксин редуктаза

Р450 сам цитохром Р450 сам

Ь5 цитохром Ь d-b5 полноразмерный цитохром Ь t-b5 трункированный цитохром Ь

NADH Никотинамидадениндинуклеотид восстановленный

NADPH Никотинамидадениндинуклеотидфосфат восстановленный

STI соевый ингибитор трипсина (семейство Кунитца)

BBI соевый ингибитор трипсина (семейство Баумана-Бирк)

РСБ (RBP) ретинол-связывающий белок

РРТ трипсин (свинной)

ВРС химотрипсин (бычий)

PBTI основной панкреатический ингибитор трипсина

РРК калликреин (свинной)

FKPB FK-связывающий белок

RTX-S II актинопорин тропической актинии Radianthus macrodactylus коп k0ff константа равновесия реакции комплексообразования константа скорости реакции ассоциации комплексов константа скорости реакции диссоциации комплексов

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оптико-биосенсорный анализ термодинамических характеристик белок-белковых комплексов»

Актуальность

Актуальность исследования белок-белковых взаимодействий обусловлена их важной ролью в реализации жизненно-важных функций в организме. В то же время белок-белковые взаимодействия являются наиболее перспективной мишенью лекарственных веществ [Veselovsky et al., 2002]. При конструировании лекарственных форм нового поколения бывает необходимо выявить и охарактеризовать функциональные белковые комплексы с целью предсказания влияния лекарства на взаимодействие белков в этих комплексах.

Для адекватного описания белок-белкового взаимодействия важно знать кинетические параметры комплексообразования (константы скоростей образования и распада комплексов), а также термодинамические параметры этих реакций (энтальпию и энтропию). Анализ значений термодинамических величин может раскрыть природу сил, связывающих молекулы друг с другом.

В настоящее время существуют различные методы определения характеристик комплексообразования: спектрофотометрический метод, метод изотермальной титрационной калориметрии, метод тушения флуоресценции и т.д. Однако, как правило, они не позволяют измерить одновременно все перечисленные выше параметры, либо обладают сравнительно невысокой чувствительностью [Данилов и соавт., 1986] и требуют большого количества образца. Новые методы, основанные на использовании нанотехнологии, такие как оптический биосенсор, позволяют быстро и с высокой точностью определять одновременно все кинетические характеристики: константы скоростей образования и распада комплексов, константы ассоциации и диссоциации, энтальпию и энтропию реакции комплексообразования [Stites, 1997]. Преимуществом метода оптического биосенсора также является то, что он позволяет регистрировать в реальном времени межмолекулярные взаимодействия без введения каких-либо меток в анализируемые молекулы. Этот метод характеризуется высокой чувствительностью (до 10"12 М) и быстротой анализа - несколько минут [Davies et al., 1994]. Метод оптического биосенсора в последнее время широко используется для определения кинетических параметров белок-белковых взаимодействий [Ivanov et al., 2001; Ivanov et al., 2001; Ivanov et al., 1997; Ivanov et al., 1999; Archakov and Ivanov, 1999; Морозов и соав., 1999; Ivanov et al., 2000; Ivanov et al., 1999].

В данной работе был использован метод оптического биосенсора для изучения белок-белковых взаимодействий следующих белковых пар: белки цитохром Р450-содержащей системы и протеолитические ферменты.

Протеолитические ферменты представляют огромный интерес для изучения, так как играют важную роль в обмене веществ всех живых организмов. Белки-ингибиторы протеолитических ферментов чрезвычайно широко распространены и встречаются у животных, растений и микроорганизмов. Имеются данные о том, что присутствие значительных количеств ингибиторов протеиназ в пищевых продуктах может играть благоприятную роль, например, препятствовать развитию ряда злокачественных образований, таких как рак простаты, прямой кишки, грудной полости и некоторых других [Troll and Wiesner, 1983]. Ингибиторы протеиназ могут играть важную роль в защите растений от поражения вредными насекомыми и патогенными микроорганизмами [Мосолов, 1983; Richardson, 1977]

Калликреин - кининовая система (ККС) является ключевой протеолитической системой, участвующей в регуляции широкого спектра физиологических функций организма и развитии многих патологических состояний. Этим объясняется большой интерес к структурно - функциональным особенностям и молекулярной биологии отдельных компонентов системы, молекулярным механизмам их взаимодействия и связи с другими системами регуляции. Накопленный в этой области за последние два десятилетия материал проясняет роль ККС в морфогенезе клеток, контроле тонуса гладкой мускулатуры некоторых органов, снижении кровяного давления, увеличения проницаемости сосудистой стенки, в том числе гематоэнцефалического барьера, развитии воспаления, трансформации клеток и других физиологических и патологических процессов [Яровая, 2000].

Актуальность изучения взаимодействия цитохром Р450-содержащих систем обусловлена их важной ролью в организме, так как эти системы ответственны за протекание ключевых биологических реакций, в которых участвуют посредством белок-белковых взаимодействий [Archakov and Bachmanova, 1990]. Цитохром Р450-содержащие монооксигеназные системы ответственны за метаболизм широкого класса эндогенных (холестерин, стероидные гормоны, простагладины) и экзогенных (лекарственные препараты, канцерогены, мутагены) веществ. Превращая исходный гидрофобный субстрат в более полярный продукт, цитохромы Р450 выполняют функцию по удалению неполярных молекул из организма и препятствуют накоплению токсичных гидрофобных соединений.

Циклоспорины - совершенно новый класс иммуносупрессивных препаратов. Это циклические пептиды, продуцируемые грибками. К белкам группы циклоспоринов относятся циклоспорин А, рапамицин, FK-506, они обладают сходным механизмом действия. Рапамицин - макролид, выделенный из Stephomyces higroscopicus. Рапамицин, лекарственный препарат, широко используемый для предотвращения отторжения трансплантированных органов, также он может найти применение и в онкологии. Как показали американские исследователи, его применение во время курса лучевой терапии опухолей головного мозга резко снижает вероятность прогрессирования опухолевого процесса и вероятность развития рецидивов [Зимин, 2002].

Цитолитические токсины (цитолизины) - это вещества белковой природы, которые при взаимодействии с цитоплазматической мембраной вызывают нарушение её структуры, приводящее к потере морфологической целостности клеток. В настоящее время возрос интерес к веществам, обладающим мембранотропным и/или цитостатическим действием, лежащим в основе противоопухолевого, кардиостимулирующего, дерматонекротического, антимикробного, антипаразитарного и других фармакологических свойств этих соединений, и в последнее десятилетие в изучении цитолизинов актиний наблюдается значительный прогресс [Anderluh, Macek, 2002].

ЦЕЛЬ РАБОТЫ. Целью настоящей работы являлось создание стабильных белок-содержащих биочипов для определения с помощью оптического биосенсора кинетических и термодинамических параметров формирования и распада белок-белковых комплексов:

- Трипсин/соевый ингибитор трипсина,

- а-химотрипсин/основной панкреатический ингибитор трипсина,

- калликреин/соевый ингибитор трипсина,

- Р450 cam/t-b5, Р450 cam/d-b5,

- рапамицин/РК-связывающий белок,

- G-aKTHH/RTX-S II.

ЗАДАЧИ РАБОТЫ:

• Произвести экспериментальный подбор условий ковалентной иммобилизации каждого из белков-партнеров на подложке оптического биосенсора для создания стабильных биочипов с целью исследования взаимодействий белковых пар: трипсин/соевый ингибитор трипсина, а-химотрипсин/основной панкреатический ингибитор трипсина, калликреин/ соевого ингибитора трипсина, P450cam/t-b5, P450cam/d-b5, рапамицин/РК-связывающий белок, G-aKTHH/RTX-S II.

• Осуществить подбор регенерационных буферов для полного распада комплексов, не приводящий к деградации иммобилизованного белка.

• Разработать методику измерения и определить температурную зависимость констант скорости образования и распада белок-белковых комплексов с помощью оптического биосенсора и рассчитать термодинамические параметры формирования белковых комплексов.

• Подтвердить теоретические представления о том, что стабильный комплекс может образовываться только в случае пары P450cam/t-b5, но не P450cam/d-b5.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА:

1. Разработана методика ковалентной иммобилизации на поверхности кюветы оптического биосенсора следующих белков: трипсина, соевого ингибитора трипсина, а-химотрипсина, основного панкреатического ингибитора трипсина, калликреина, P450cam, t-b5, d-b5, рапамицина, FK-связывающего белка, G-актина и RTX-S II.

2. Впервые измерены зависимости констант скорости образования и распада комплексов от температуры и рассчитаны константы равновесия, энтальпии и энтропии реакций комплексообразования P450cam/t-b5, рапамицин/РК-связывающий белок, G-aKTHH/RTX-S II.

3. Показано, что энтропийная составляющая играет ведущую роль в образовании комплексов: P450cam/t-b5, рапамицин/РК-связывающий белок, G-актин/RTX-S II.

4. Подтверждены теоретические представления о том, что стабильный комплекс может образовываться только в случае пары P450cam/t-b5, но не P450cam/d-b5.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ:

• Созданы стабильные оптикобиосенсорные белок-содержащие биочипы, которые позволяют измерять кинетические характеристики белок-белковых взаимодействий.

• Полученные температурные зависимости констант скоростей образования и распада комплексов могут быть использованы для проверки математических моделей, описывающих эти взаимодействия.

• Измеренные кинетические и термодинамические параметры важны для поиска мишеней и конструирования лекарственных форм нового поколения.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.

Основные положения диссертации были представлены на следующих конференциях:

15th International Symposium on Microsomes and Drug Oxidation: Chemical Biology in the Postgenomic Era New Approaches and Applications (Mainz, Germany, 2004);

International Symposium "Nano and Giga Challenges in Microelectronics Research and Development Opportunities" (Cracow, Poland, 2004);

Региональная научная конференция "Исследования в области физико-химической биологии и биотехнологии" (Владивосток, 2004);

14th International Conference on Cytochromes P450: Biochemistry, Biophysics and Bioinformatics (Dallas, Texas, U.S.A., 2005);

HUPO 4th Annual World Congress from Defining the Proteome to Understanding Function (Munich, Germany, 2005).

Работа выполнена в ГУ НИИ БМХ РАМН при финансовой поддержке гранта "Медицинские диагностические системы будущего", в рамках работы: "создание нового поколения биоиммуносенсоров и биочипов", грантов РФФИ ( № 05-04-48690 и научной школы № 325.2003.4), INTAS № 01-470, а также Janssen Research Foundation, Федеральной целевой программы: "Протеомика в медицине и биотехнологии (государственная поддержка протеомных исследований: нанобиотехнология и компьютерное конструирование лекарств)", контрактами с Федеральным агентством по науке и инновациям по теме лотов ЖС-13.5/002), ЖС-КП.6/003, ФЦНТП "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники на 2002-2006 годы", а также грантом 1.2.29 ОАО МКНТ (2005 г).

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ.

Н.И. Раченкова, Ю.Д. Иванов, B.C. Скворцов, А.С. Иванов, А.А. Молнар, А.И. Арчаков, Уи Бон Уа. Исследование взаимодействия цитохромов Р450сат и Ь5 с помощью метода оптического биосенсора и компьютерного моделирования. Биомедицинская химия, 2005, т. 51, № 5, с. 501-512;

Н.И. Раченкова, Ю.Д. Иванов, А.А. Молнар, А.И. Арчаков. Исследование взаимодействия трипсина и соевого ингибитора трипсина с помощью метода оптического биосенсора. Биомедицинская химия, 2005, т. 51, № 6, с. 617-625;

Ivanov Yu.D., Konstantinova N.A., Svetlov S.K., Hui Bon Hoa G. and Archakov A.I. The optical biosensor study of redox partners' interactions in the P450cam system in hydroxylation conditions. 15th International Symposium on Microsomes and Drug Oxidation: Chemical Biology in the Postgenomic Era New Approaches and Applications. 4-9 July, 2004. Mainz, Germany, p. 124;

Ivanov Yu.D., Konstantinova N.A., Gnedenko O.V., Lipov P.A., Viglinskaya A.O., Archakov A.I. Optical resonant mirror biosensor nanochips for investigation of cytochrome P450cam and P4502B4 monooxygenase systems. International Symposium "Nano and Giga Challenges in Microelectronics Research and Development Opportunities". 13-17 September, 2004. Cracow, Poland, p. 126;

Клышко E.B., Константинова Н.И., Иванов Ю.Д., Монастырская М.М., Киселева М.И., Козловская Э.П., Исследование межмолекулярного взаимодействия G-актина и актинопорина RTX-S II из актинии Radianthus macrodactylus. Региональная научная конференция "Исследования в области физико-химической биологии и биотехнологии". 2004. Владивосток, с. 57;

Ivanov Yu.D., Ivanov A.V., Kuznetsov V. Yu., Konstantinova N.A., Strushkevich N.V., Usanov S.A. and Archakov A.I. Nanospies trace the formation and decay of P450-contaning complexes. 14th International Conference on Cytochromes P450: Biochemistry, Biophysics and Bioinformatics. 31 May-5 June, 2005. Dallas, Texas, U.S.A., p. 150;

Ivanov Yu.D., Ivanov A.V., Gnedenko O.V., Konstantinova N.A., Pleshakova Т.О., Svetlov S.K., Frantsuzov P.A. and Archakov A.I. AFM and Optical Biosensor Nanotechnology in Revelation of Protein Complexes. HUPO 4th Annual World Congress from Defining the Proteome to Understanding Function. 29 August - 1 September, 2005. Munich, Germany, p. 330.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Раченкова, Наталья Ивановна

выводы

1. Созданы стабильные оптико-биосенсорные белок-содержащие биочипы, которые позволяют измерять кинетические характеристики и их температурные зависимости для белковых пар: P450cam/t-b5, P450cam/d-b5, трипсин/соевый ингибитор трипсина, а-химотрипсин/основной панкреатический ингибитор трипсина, калликреин/ соевого ингибитора трипсина, рапамицин/РК-связывающий белок, G-актин/RTX-S II.

2. Из температурной зависимости определены константы скоростей образования и распада белок-белковых комплексов и рассчитаны термодинамические параметры. Показано, что энтропийная составляющая играет ведущую роль в образовании комплексов данных белковых пар.

3. Подтверждена гипотеза о том, что стабильный комплекс может образовываться только в случае пары P450cam/t-b5, но не P450cam/d-b5.

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор выражает искреннюю благодарность своему руководителю -заведующему лабораторией нанобиотехнологии Института Биомедхимии им. В.Н. Ореховича РАМН, доктору биологических наук, кандидату физико-математических наук Юрию Дмитриевичу Иванову за предоставление темы для настоящей работы, руководство, помощь и поддержку при её выполнении.

Особо благодарю сотрудников лаборатории микросомального окисления Института д.б.н. Карузину Ирину Ивановну, к.б.н. Кузнецову Галину Петровну и к.б.н. Саменкову Наталью Федоровну за выделение белков цитохромов. Выражаю глубокую признательность Dr. Hui Bon Ноа за предоставленные белки.

Глубоко признательна сотрудникам Тихоокеанского института биоорганической химии за предаставленную пару белков G-amiH/RTX-S II, отдельное спасибо к.б.н. Клышко Елене за помощь в проведении экспериментов.

Выражаю глубокую признательность сотрудникам лаборатории нанобиотехнологии и лаборатории биохимии и химической патологии белков ГУ НИИ Биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН за полезные советы и помощь в работе.

Автор благодарен зав. лабораторией молекулярно-графического конструирования лекарств ГУ НИИ БМХ РАМН д.б.н. Иванову Алексею Сергеевичу и сотруднику этой лаборатории к.б.н. Скворцову В. С. за помощь в работе.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В соответствии с поставленной целью - создание оптико-биосенсорных белковых биочипов для определения термодинамических и кинетических параметров формирования и распада белок-белковых комплексов - были проведены исследования взаимодействия данных белковых пар с помощью оптического биосенсора. Было продемонстрировано, что константа диссоциации реакции комплексообразования, измеренная методом оптического биосенсора для сериновых протеиназ, изучаемых в данной работе, совпадало с литературными данными. Это указывает на применимость данного метода для исследования белковых пар:

- Трипсин/соевого ингибитора трипсина,

- а-химотрипсин/основного панкреатического ингибитора трипсина,

- калликреин/соевого ингибитора трипсина,

- Р450 cam/t-b5,

- Р450 cam/d-b5,

- Рапамицин/РК-связывающий белок,

- G-aKTHH/RTX-S II.

Исследование взаимодействия Р450сат с t-b5 и d-b5 методом оптического биосенсора показали, что для пары d-b5/P450cam не наблюдалось образования комплексов в диапазоне температур от 15°С до 40°С как при иммобилизации d-b5, так и при иммобилизации Р450сат. Для пары t-b5/P450cam комплексообразование существенно зависит от того, какой из белков иммобилизован на поверхности оптического биосенсора. Комплексообразование наблюдалось только в случае иммобилизации t-b5, что указывает на участие аминогрупп Р450сат во взаимодействии с Ь5. Так как с ростом температуры константа скорости формирования комплексов t-b5/P450cam растет, а константа скорости диссоциации практически не изменяется, сделан вывод о существенном вкладе энтропийной составляющей в реакцию комплексообразования. Рассчитана энергия активации формирования и распада комплекса t-b5/P450cam из зависимостей констант скорости ассоциации и диссоциации от температуры.

Исследование формирования и распада комплексов сериновых протеиназ PPTim/STI, BPCjm/BPTI, PPKjm/STI показало, что комплексообразование также существенно зависит от того, какой из белков иммобилизован на поверхности оптического биосенсора через его аминогруппы. В случае иммобилизации STI и BPTI комплексообразования не наблюдалось, что указывает на участие аминогрупп STI и BPTI в комплексообразовании. Константа скорости формирования комплексов PPTim/STI, BPCim/BPTI, PPKjm/STI растет с ростом температуры, а диссоциации не изменяется. Рассчитаны активационные параметры кинетических констант формирования и распада комплексов PPTjm/STI, BPCjm/BPTI, PPKjm/STI из зависимостей констант скорости ассоциации и диссоциации от температуры. Показан решающий вклад энтропийной составляющей в реакцию комплексообразования.

Взаимодействие белков FKPB/рапамицин зависит от температуры. С ростом температуры увеличивается константа скорости образования комплексов, следовательно, можно сделать вывод, что в реакцию комплексообразования существенный вклад вносит энтропийная составляющая. Рассчитана энергия активации и энергия распада данных белковых комплексов. Впервые определены кинетические константы образования и распада комплексов FKPB/рапамицин.

Впервые было исследовано взаимодействие RTX-S II с G-актином методом оптического биосенсора и расчитаны кинетические и термодинамические параметры. Показано, что комплексообразование существенно зависит от того, какой из белков иммобилизован на поверхности оптического биосенсора. Образование комплексов наблюдалось только в случае иммобилизации RTX-S II, что указывает на участие аминогрупп G-актина во взаимодействии с RTX-S II. Так как с ростом температуры константа скорости формирования комплексов RTX-S ll/G-акгин растет, сделан вывод о существенном вкладе энтропийной составляющей в реакцию комплексообразования. Из зависимостей констант скорости реакций ассоциации и диссоциации от температуры рассчитана энергия активации формирования и распада комплекса RTX-S ll/G-акгин.

Таким образом, взаимодействие неполярных (гидрофобных) молекул с водной средой играет главную роль в комплексообразовании данных белковых пар. Неполярное (гидрофобное) связывание возникает в результате стремления гидрофобных групп к ассоциации друг с другом, вследствие чего их контакт с молекулами воды ослабевает. При этом происходит стабилизация системы уменьшается ее свободная энергия при одновременном увеличении энтропии), что в итоге приводит к появлению сил притяжения. Возникновение гидрофобных взаимодействий является эндотермическим процессом, определяемым энтропией, и сила таких взаимодействий возрастает с температурой.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Раченкова, Наталья Ивановна, 2005 год

1. Белоусов Ю.Б., Моисеев B.C., Лепахин В.К. Клиническая фармакология и фармакотерапия, 2000.

2. Иванов А.С., Молнар А.А., Козловская Э.П., Монастырная М.М. Действие токсина из Radianthus macrodactylus на проводимость биологических и модельных мембран // Биол. мембраны, 1987. Т. 4. с. 243-248.

3. Колодзейская М.В., Пивненко Т.Н., Маленьких Л.Г., Кладницкая Г.В. // Приклад, биохим. и микробиол, 1988. 24. №3. с. 353-360

4. Клышко Е.В., Ильина А.П., Лихацкая Г.Н., Исаева М.П., Гузев К.В., Монастырская М.М., Козловская Э.П., Липкин А.В., Барсова Е.И., Крышко И.Б., Трифонов Е.В., Нурминский Е.А., Актинопорины: структура и функция // Вестник ДВО РАН, 2004. 4, с. 51-56

5. Мосолов В.В. // Протеолитические ферменты, 1971, М. Наука с. 414

6. Мосолов В.В. // Белковые ингибиторы как регуляторы процессов протеолиза, 1983 М. Наука, с. 40

7. Мосолов В.В., Валуева Т.А., Соколова Е.В., Антонов В.К. // Докл. АН СССР, 1976. 221. №2. с. 484-497

8. Мосолов В.В., Колосова Г.В., Валуева Т.А., Дронова Л.А., // Биохимия, 1982. 47. №5 с. 797-802

9. Мосолов В.В., Соколова Е.В., Ливенская О.А. // Биохимия, 1984. 49. №8.с. 13341342

10. Мецлер Д., // Биохимия, 1980, издательство "Мир",

11. Нестеренко М.В., Гвоздева Е.Л., Мицкевич Л.Г., Мосолов В.В. // Биохимия, 1989. 54. №5.с. 838-845.

12. Нортроп Д., Кунитц М., Харриот Р. // Кристаллические ферменты, 1950 М. Ин. Лит. с. 346

13. Орлов Б.Н., Гелашвили Д.Б. // Зоотоксинология. Ядовитые животные и их яды, 1985. М.: Высшая школа. 280 с.

14. Радюк В.Г., Шкуматов В.М., Чащин В.Л., Ахрем А.А. Реконструкция холестерингидроксилирующей системы на основе иммобилизованного адренодоксина // Биохимия, 1983 . 48. с. 454-463.

15. Сафронова Н. //"Медицинский Вестник", 2004 №27 (298),

16. Яровая Г.А. // Калликреин-кининовая система: новые факты и концепции (Обзор), 2000А

17. Ako Н., Foster R.J., Rayn С.А. Mechanism of action of naturally occurring proteinase inhibitors. Studies with anhydrotrypsin and anhydrochymotrypsin purified by affinity chromatography. // Biochemestry. 1974. 13. N. 1. p. 132-139

18. Anderluh G. and Macek P. Actinoporins, pore-forming toxins of sea anemones (Actiniaria) Menes-08.qxd p. 132-148

19. Anderluh, G., Macek, P., Cytolytic peptide and protein toxins from sea anemones (Anthozoa: Actiniaria). // Toxicon, 2002. 40, p. 111-124.

20. Aoki M., Ishimuri K.,Morishima 1. Roles of negatively charged surface residues of Putidaredoxin in interactions with redox partners in P450 cam monooxygenase system. // Biochem. Biophys. Acta. 1998.1386,1. p.157-167.

21. Archakov A.I., Bachmanova G.I. Cytochrome P450 and Active Oxygen.- London, New York, Philadelphia, Taylor&Francis, 1990. p. 275.

22. Archakov, A.I., Ivanov, Yu.D., In Biophysics of Electron Transfer and Molecular Bioelectronics, Plenium Publication Corporation, 1999, p. 173-194.

23. Athanasiadis, A., Anderluh, G., Macek, P., Turk, D., Crystal structure of the soluble form of equinatoxin II, a pore-forming toxin from the sea anemone Actinia equina. // Structute, 2001. 9, p. 341-346.В

24. Batista, Jezernik, 1992 Morphological changes ofV-79 cells after equinatoxin II treatment. // Cell Biol Int Rep. 1992; 16(2): 115-23.

25. Batista U, Macek P, Sedmak В The cytotoxic and cytolytic activity of equinatoxin II from the sea anemone Actinia equina. // Cell Biol Int Rep. 1990;14(11):1013-24.

26. Baugh R.J. and Trowbridge C. G. Calorimetry of some trypsin-trypsin inhibitor reactions. // J. Biol. Chem, 1972, 247, 7498.

27. Beaubien G., Rosinski Chupin I., Mattei M.G., Mbikay M., Chretien M., Siedan N.G. Gene structure and chromosomal localization of plasma kallikrein. // Biochemistry, 1991, 30,1628 - 1635.

28. Bidlingmeyer D.V.U., Chrispeels M. J. Purification and characterization of vicilin peptidohydrolase, the major endopeptidase in the cotyledons of mung-bean seedlings. // Eur J Biochem. 1977, 77 (1). 223-233

29. Bidlingmeyer D.V.U., Leary T.R., Laskowski M., Identity of the tryptic and alpha-chymotryptic reactive sites on soybean trypsin inhibitor (Kunitz). // Jr. Biochemestry. 1972. II. N. 17. p. 3303-3310

30. Bhoola K.D., Figueroa C.D., Worthy K. Bioregulation of kinins: kallikreins, kininogens, and kininases. // Pharmacol. Rev. 1992, 44, p. 1 60.

31. Blanquet. Propetties and composition of the nematocyst toxin of the sea anemone, Aiptasiapallida // Comp Biochem Physiol. 1968;25(3):893-902.

32. Brady A., MacDonald R.J. The expression of two kallikrein gene family members in the rat kidney. //Arch.Biochem.Biophys. 1990, 278, p. 342 349.

33. Bonina T.A., Gilep A.A., Estabrook R.W., Usanov S.A., Engineering of proteolytically stable NADPH-cytochrome P450 reductase. // Biochemistry (Mosc), 2005, 70(3), 357-65

34. Bonner G., Preis S., Schunk U., Iwersen D. The Kallikrein Kinin System in Health and Disease., Germany: Limbach - Verlag Braunschweig, 1988, p. 79 - 96.

35. Bosterling В., Quast U. Soybean trypsin inhibitor (Kunitz) is doubleheaded. Kinetics of the interaction of alpha-chymotrypsin with each side. // Biochem. et Biophys. Acta. 1981. 657. N1. p. 58-72

36. Bowman D.E. Ibid. 1946. 63. N3. p. 547-550

37. Bunc M, Drevensek G, Budihna M, Suput D. Effects of equinatoxin II from Actinia equina (L.) on isolated rat heart: the role of direct cardiotoxic effects in equinatoxin II lethality // Toxicon. 1999;37(1 ):109-23.

38. Bunc M, Frangez R, Horvat I, Turk T, Suput D. Effects of equinatoxins in vivo. Possible role of degranulation of thrombocytes and granulocytes // Ann N Y Acad Sci. 1994 Mar 9;162-7.

39. Bunc M, Rozman J, Stare R, Macek P, Suput D. Equinatoxin ll-induced lysis Of the cultured endothelial cell line ECV-304. // Cell Mol Biol Lett. 2002;7(2), p. 351-353.С

40. Cardin A.D., Jackson R.L., Donaldson V.H., Chao J., Margolius H.S. Processing of apolipoprotein B-100 of human plasma low density lipoproteins by tissue and plasma kallikreins. //Adv. Exp. Med. Biol. 1986, 198.Part B, p.195 202

41. Chauvet J., Acher R. The reactive sites of Kunitz bovine-trypsin inhibitor. Role of lysine-15 in the interaction with chymotrypsin. // Eur. J. Biochem. 1975. 54. N 1. p. 31-38

42. Chao J., Chai K.X., Chao L. Tissue kallikrein inhibitors in mammals. // Immunopharmacology. 1996, 32, p. 67 72.

43. Chu J.W, Kimura T. Studies on adrenal steroid hydroxylases. Molecular and catalytic properties of adrenodoxin reductase (flavoprotein). // J. Biol. Chem. 1973. 248. p. 20892094.

44. Colman R.W. Surface-mediated defense reactions. The plasma contact activation system. // J. Clin. Invest. 1984, 73, p. 1249 1253.

45. Colman R.W. Inhibitory and antiadhesive properties of human kininogens. // Agent. Action. Suppl. 1993, 42, p. 125 -143.

46. Colman R. W. et. al. // Circulation. 1996, 94, p.1-42.

47. Colman R.W. // Immunopharmacology, 1996 32, p. 9 -18.D

48. Davie E.W., Fujikawa K., Kisiel W. The coagulation cascade: initiation, maintenance, and regulation. // Biochemistry 1991, 30, p. 10363-10370.

49. Davies, R.J., Edwards, P.R., Watts H., Lowe C.R., Buckle P.E., Yeng D. The resonant mirror: a versatile tool for the study of biomolecular interactions. // Techniques in Protein Chemistry. Acad. Press, Inc, 1994. p. 285-292.

50. DeLa Cadena R., Colman R. The sequence HGLGHGHEQQHGLGHGH in the light chain of high molecular weight kininogen serves as a primary structural feature for zinc-dependent binding to an anionic surface. // Protein Sci. 1992, 1, p. 151-160.

51. DeLa Cadena R.A., Wachtvogel Y.T., Colman R.W. // Hemostasis and . Trombosis: Basic Principles and Clinical Practice, 1974.

52. De los Rios. Mechanism of the leakage induced on lipid model membranes by the hemolytic protein sticholysin II from the sea anemone Stichodactyla helianthus // Eur J Biochem. 1998,1 ;252(2):284-9.

53. De los Rios V., Mancheno J.M., del Pozo A.M., Alfonso C., Rivas G., Onaderra M., Gavilanes J.G. Sticholisin II, a cytolysin from the sea anemone Stichodactyla helianthus, is a monomer-tetramer associating protein // FEBS Letters, 1999. V. 455. P. 27-30.

54. Devlin, Isolation and partial purification of hemolytic toxin from sea anemone, Stoichactis helianthus//J Pharm Sci., 1974;63(9):1478-80.

55. Dotsenko V.L., Neshkova H.A., Yarovaya G.A The regulating interrelationship of some serine proteinases from leukocyte with the human plasma kallikrein-kinin system. // Agent Action. Supl., 1992. 38, p. 144-156.

56. Dunn J.T., Kaplan A.P. Formation and structure of human Hageman factor fragments. //J.Clin.Invest., 1982, 70, p. 627 631.E

57. Elmoujahed A., Gutman N., Brillard M., Gouthier F. Substrate specificity of two kallikrein family gene products isolated from the rat submaxillary gland. // FEBS Lett., 1990, 265, p. 137-140.

58. Espana F., Estelles A., Griffin J.H., Aznar J. Interaction of plasma kallikrein with protein С inhibitor in purified mixtures and in plasma. // Thrombosis and Haemostasis, 1991, 65, p. 46-51.F

59. Ferlan I., Equinatoxin, a lethal protein from Actinia equina-l. Purification and characterization // Toxicon, 1974 Jan;12(1):57-61.

60. Finkenstadt W.R., Laskowski M., Jr. Peptide bond cleavage on trypsintrypsin inhibitor complex formation. //J. Biol. Chem., 1965. 240. N 2. p. 962-963

61. Fisher R.S., Goldberg R.B. // Cell,. 1982. 29. N 2. p. 651-660

62. Fritz H.,Jochum H., Geiger R., Duswald Kh., Dittmer H., Kortmann H., Neumann S., Lang H. Folia Histochem Cytobiol. // Citobiol., 1986, 24, p. 99 -119.

63. Freedman M.N., Grossberg A.L., Pressman D. The effects of complete modification of amino groups on the antibody activity of antihapten antibodies. Reversible inactivation with maleic anhydride// Biochemistry, 1968. 7. N 5. p. 1941-1950

64. Fujikawa K., Davie E.W. Human factor XII (Hageman factor). // Meth. Enzymol., 1981, 80, p. 198-211.G

65. Galettis P., Norton R.S. Biochemical and pharmacological studies of the mechanism of action of tenebrosin C, a cardiac stimulatory and hemolytic protein from the sea anemone, Actinia tenebrosa //Toxicon, 1990. V. 28. P. 695-706.

66. Garcia-Olmedo F., Salcedo G., Sanchez-Monge R., Gomez L., Royo J., Carbonero P. // Oxf. Surv. Plant Mol. Cell Biol., 1987. 4. p. 275-334

67. Geren K., Tuls J., O'Brien P., Millett F., Peterson Y.A. The involvment of carboxylate groups of putidaredoxin reductase//J. Biol. Chem. 1986. 261. p. 15491-15495.

68. Gomara M.J., Ercilla G., Alsina M.A., Наго I. Assessment of synthetic peptides for hepatitis A diagnosis using biosensor technology // J. Immunol. Methods, 2000, 246, p. 1324.

69. Green N.M. Competition among trypsin inhibitors. // J. Biol. Chem., 1953. 205. N 2. p. 121-138

70. Gurewich V., Johnstone M., Loza J.P., Pannel R. Pro-urokinase and prekallikrein are both associated with platelets. Implications for the intrinsic pathway of fibrinolysis and for therapeutic thrombolysis.//FEBS Lett., 1993,318, p. 317-321.

71. Gunsalus, I. C., and Wagner, G.C. Bacterial P-450cam methylene monooxygenase components: cytochrome m, putidaredoxin, and putidaredoxin reductase. // Methods Enzymol., 1978, 52, p. 166-188.H

72. Haniu M., Armes L.G., Yasunobi K.T., Shastry B.A. and Gunsalus L.C. Amino acid sequence of the Pseudomonas putida cytochrome P-450, parts I and II. // J. Biol. Chem., 1982.257, p. 12657-12667.

73. Haynes R., Osuga D.T., Feeney R.E. Modification of amino groups in inhibitors of proteolytic enzymes// Biochemistry, 1967. N 2. p. 541-547

74. Hedegaard J., Gunsalus I.C. Mixed function oxidation. IV. An induced methylene hydroxylase in camphor oxidation // J.Biol.Chem., 1964. 240. p. 4038-4043.

75. Hintz M. J., MockD.M., Peterson L.L., Tuttle K., Peterson J.A. Equilibrium and kinetic studies of the interaction of cytochrome P450cam and putidaredoxin //J.Biol.Chem., 1982. 257. p. 14324-14332.

76. Hessinger. Binding of human lymphotoxin to target-cell membranes and its relation to cell-mediated cytodestruction // Proc Natl Acad Sci USA, 1973 Nov;70(11):3082-6.

77. Hojima Y., Pieree J.V., Pisano J.J. Pumpkin seed inhibitor of human factor Xlla (activated Hageman factor) and bovine trypsin // J.Biol.Chem., 1983, 258, p. 400 406.

78. Holden М., Mayhew M., Buuk D, Roitberg A., Vilker V. Probing the interactions ofputidaredoxin with redox partners in camphor P4505-monooxygenase by mutagenesis of surface residues// J.Biol.Chem., 1997. 272, 35. p. 21720-21725.

79. Honkakoski P., Linnala-Kankkunen A., Usanov S.A., Lang M.A., Highly homologous cytochromes P-450 and b5: a model to study protein-protein interactions in a reconstituted monooxygenase system // Biochim. Biophys. Acta, 1992 Jul 13; 1122 (1), 6-14

80. Jochum M., Machleidt W., Fritz H. // Handbook of Mediators in Septic Shock, London, Tokyo:CRC Press. 1993, p. 335 361.

81. Jung, C., Hui Bon Hoa, G., Schroeder, K.-L., Simon, M., and Doucet, J.P. // Biochemistry 1992, 31, p. 12855-12862.К

82. Kaplan A.P., Silverberg M. The coagulation-kinin pathway of human plasma. // Blood. 1987, 70, p. 1 -15.

83. Koide Т., Ikenaka T. Studies on soybean trypsin inhibitors. 1. Fragmentation of soybean trypsin inhibitor (Kunitz) by limited proteolysis and by chemical cleavage. // Eur. J. Biochem., 1973. N 3. p. 401-407

84. Kortt A.A.,1979, // Biochim. Et Biophys. Acta, 577(2), 371-382;

85. Kortt A.A., Jermyn M.,A. Acacia proteinase inhibitors. Purification and properties of the trypsin inhibitors from Acacia elata seed. // Eur. J. Biochem. 1981. 115. N 3. p. 551-557

86. Kunitz M. // J. Gen. Physiol., 1946. 29. N 3. p. 149-154.

87. Macek P., Belmonte G., Pederzolli C., Menestrina G. Mechanism of action of equinatoxin II, a cytolysin from the sea anemone Actinia equina L. belonging to the family of actinoporins//Toxicology, 1994. V. 87. P. 205-227.

88. Macek P. Polypeptide cytolytic toxins from sea-anemones (Actiniaria) // FEMS Microbiol. Immunol., 1992. V. 105. P. 121-130.

89. Maeda K. // Biochem. et Biophys. Acta, 1986. 271. N3. p. 250-256

90. Mancheno J.M., Martin-Benito J., Gavilanes J.G., Hermoso J.A. Crystal and electron microscopy structures of Sticholysin II actinoporin reveal insights into the mechanism of membrane pore formation. // Structure, 2003. V. 11. p. 1-20.

91. Mancera, R.L. II in Proc. of 3rd International Conference on Molecular Structural Biology (Eds. A.J. Kungl and P.J.Andrew), Vienna, Austria . 1999, p. 92.

92. Marcus RA, Sutin N. Electron transfer in chemistry and biology // Bioph Biochim Acta 1985. 811: p. 265-322.

93. Margolius H.S. Tissue kallikreins and kinins: regulation and roles in hypertensive and diabetic diseases // Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol., 1989, 29, p. 343 364.

94. Mignatti P., Rifkin D.B. Biology and biochemistry of proteinases in tumor invasion // Physiol. Rev., 1993, 73, p. 161 -195.

95. Miles L.A, Greengard J.S, Griffin J.H. A comparison of the abilities of plasma kallikrein, beta-Factor XIla, Factor Xla and urokinase to activate plasminogen // Thromb. Res., 1983, 29, p. 407-417.

96. Murray S.R., Chao J., Chao L. //Agent Action. Supl., 1983, 38(1), p. 26 33.

97. Myszka D.G., Rich R.L. Implementing surface plasmon biosensors in drug discovery // Pharm. Sci. Technol. Today, 2000, v. 3(9), p. 310-317.N

98. Nagase H., Salveseu G. // Innovation in Proteases and their Inhibitors., New York; Walter de Gruyter, 1993 p. 315 - 332.

99. Narat. The humoral and cellular immune response to a lipid attenuated pore-forming toxin from the sea anemone Actinia equina L. // Toxicon, 1994 Jan;32(1):65-71.

100. Natsume Т., Nakayama H., Jansson O., Isobe Т., Takio K., Mikoshiba K. Combination of biomolecular interaction analysis and mass spectrometric amino acid sequencing //Anal.Chem., 2000, v. 72(17), p. 4193-4198.

101. Nedelkov D., Rasooly A., Nelson R.W. Multitoxin biosensor-mass spectrometry analysis: a new approach for rapid, real-time, sensitive analysis of staphylococcal toxins in food // Int. J. Food Microbiol., 2000, v. 60, p. 1-13.

102. Negreiros A.N., Carvalho M.M., Filho J.X., Blanco-Labra A., Shewry P.R., Richardson M. The complete amino acid sequence of the major Kunitz trypsin inhibitor from the seeds of Prosopsis juliflora. // Phytochemistry, 1991. 30. N 9. p. 2829-2833

103. Nelson D.R., Strobel H.W. On the membrane topology of vertebrate cytochrome P450 proteins//J. Biol. Chem., 1988. 263. p. 6038-6050

104. Nelson R.W., Nedelkov D., Tubbs K.A. Biosensor chip mass spectrometry: a chip-based proteomics approach // Electrophoresis, 2000, v. 21(6), p. 1155-1163.

105. Norton R.S. Structure and function of peptide and protein toxins from marine organisms. //J. Toxicol.-Toxin Rev., 1998. V. 17. p. 99-130.

106. Novotny L.A., Jurcisek J.A., Pichichero M.E., Bakaletz L.O. Epitop mapping of the outer membrane protein P5-homologous fimbrin adhesin of nontypeable Haemophilus influenzae // Infect Immun., 2000, v. 68(4), p.2119-2128.

107. Odani S., Koide Т., Ono Т., Wheat germ trypsin inhibitors. Isolation and structural characterization of single-headed and double-headed inhibitors of the Bowman-Birk type. // J. Biochem., 1986. 100. N4. p.975-983

108. Odani S., Ono T. Chemical substitutions of the reactive site leucine residue in soybean Bowman-Birk proteinase inhibitor with other amino acids. // J. Biochem., 1980. 88. N5. p. 1555-1558

109. Odani S., Ono Т., Ikenaka T. Proteinase inhibitors from a mimosoideae legume, Albizzia julibrissin. Homologues of soybean trypsin inhibitor (Kunitz). // J Biochem (Tokyo), 1979. 86. N6. p. 1795-1805

110. Omura, Т., and Takesue, S. A new method for simultaneous purification of cytochrome b5 and NADH-cytochrome b5 reductase from rat liver microsomes // J. Biochem., 1970, 67, p. 249-257.

111. Onesti S, Matthews D.J., Aducci P., Amiconi G., Bolognesi M., Menegatti E., Ascenzi P. //J. Mol. Recognit., 1992, 5(3), 105-114.

112. Osawa K„ Laskowski M., Jr. //J. Biol. Chem., 1966. 241. N 17. p. 3955-3961P

113. Page J.D., Colman R.W. Localization of distinct functional domains on prekallikrein for interaction with both high molecular weight kininogen and activated factor XII in a 28-kDa fragment (amino acids 141-371)//J.Biol.Chem., 1991, 266, p. 8143-8148.

114. Page J.D., Yen J.L., Harris R.B., Colman R.W. Localization of the binding site on plasma kallikrein for high-molecular-weight kininogen to both apple 1 and apple 4 domains of the heavy chain // Arch Biochem Biophys., 1994, 314, p. 159 -164.

115. Pederzolli. Biochemical and cytotoxic properties of conjugates of transferrin with equinatoxin II, a cytolysin from a sea anemone // Bioconjug Chem., 1995;6(2):166-73.

116. Pochapsky T.C., Lyons T.A., Kazanis S., Arakaki T. Ratnaswamy. A structure-bassed model for cytochrome P450cam-putidaredoxin interactions // Biochemistry, 1996. 78. p. 723-733

117. Polanowski A., Wilusz Т., Nienartowioz В., Cielar E., Slominska A., Nowak K. Isolation and partial amino acid sequence of the trypsin inhibitor from the seeds of Cucurbita maxima //Acta Biochim. Polonica, 1980. 27. N 3. p. 37-382

118. Poulos T.L. The crystal structure of cytochrome P450cam.// In Cytochrome P450cam: Structure, Mechanism and Biochemistry, edited by P.R.Ortiz de Montellano. New York, London, Plenum Press, 1986. p. 505-523.

119. Poulos T.L., Finzel B.C., Howard A. High-resolution crystal structure of cytochrome P450cam //J. Mol. Biol., 1987.195. p. 687-700.

120. Prado E.S., Juliano L., Araujo-Viel M.S., Juliano M.A. Tissue kallikreins and related enzymes: characterization by model oligopeptides //Adv.Exp.Med.Biol., 1986, 198, Part B, p. 241-247.

121. Pub Med http://www.ncbi.nlm.nih.gov/R

122. Read R.J., James M.N.G. In: Proteinase ingibitors // Eds A.J.,Barret, G. Salvesen -Amsterdam: Elsevier, 1986. p. 301-336

123. Retxios A.D., Rosenfeld R., Schiffman S. Effects of chemical modifications on the surface- and protein-binding properties of the light chain of human high molecular weight kininogen // J. Biol. Chem., 1987, 262, p. 3074 3081.

124. Richardson M. //Phytochemestry, 1977. 16. N. 1. p. 159-169

125. Richardson M. // Food Vhem., 1981. 6. N 2. p. 235-253

126. Rojkar R., Schmaier A.H Proc. Activation of the plasma kallikrein/kinin system on endothelial cells. //Assoc. Am. Phys., 1999,111, p. 220-227.

127. Ryan C.A. //Ann. Rev. Plant Physiol., 1973. 24. N 2. p. 173-196S

128. Sato R. Distribution and physiological function. Cytochrome P450, edited by R. Sato and T. Ornura (Kodansha L.T.D.-Acad. Press, N.Y.- Tokyo), 1978. p. 23-35.

129. Schapira M. // Seminars in Thrombosis and Haemostasis, 1987, 13, p. 69 78.

130. Schmaier A.H., Silverberg M., Kaplan A.P., Colman R.W. Hemostasis and Trombosis. Basic principles and clinical practice // Philadelphia: J.B.Lippincott Company, 1987, p.18-37.

131. Scott C.F., Colman R.W. Function and immunochemistry of prekallikrein-high molecular weight kininogen complex in plasma. //J. Clin. Invest., 1980, 65, p. 413-421.

132. Scott C.F., Silver L.D., Purdon A.D., Colman R.W. Cleavage of human high molecular weight kininogen by factor Xla in vitro. Effect on structure and function. // J.Biol.Chem., 1985, 260, p. 10856 -10863.

133. Scott C.F., Silver L.D., Shapira M., Colman R.W. Cleavage of human high molecular weight kininogen markedly enhances its coagulant activity. Evidence that this molecule exists as a procofactor. // J.Clin.Invest., 1984, 73, p. 954 962

134. Shnirov, V.L., Monastyrnaya, M.M., Zhadan, G.G., Kuznetsova, S.M., Kozlovskaya, E.P., Calorimetric study of interaction of toxin from Radianthus macrodactylus with erythrocyte membrane. // Biochem. Intl. 1992. 26, p. 219-229.

135. Shurnko, R.M., Gill, R.,Wood, S., De Meyts, P.,0gawa, Y„ Heding, A. 4-th European BIAsymposium on Biomolecular Interaction Analysis: Abstracts.- Heidelberg (Germany), 1994. p. 24.

136. Sket D, K, Ferlan Draslar I, Lebez D. Equinatoxin, a lethal protein from Actinia equina. II. Pathophysiological action//Toxicon, 1974;12(1):63-8.

137. Sligar S.G., Debrunner P.G., Lipscomb I.D., Namtvett, M.J. Gunsalus I.C. Role of the putidaredoxin COOH-terminus in P-450cam hydroxylations. // Proc. Nat. Acad. Sci.( USA), 1974.21. p. 3906-3910.(a)

138. Song O., Chao J., Chao L. High level expression of human tissue kallikrein in the circulation induces hypotension in transgenic mice. // Immunopharmacology, 1996, 32, p. 105-107.

139. Song H. K. and Suh Se W„ 1998, // J. Mol. Biol., 275, 347-363.

140. Spatz, L., and Strittmatter, P. A form of cytochrome b5 that contains on additional hydrophobic sequence of 40 amino acid residues. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 1971, 68, p. 1042-1046

141. Stadnicki A., DeLa Cadena R., Sartor R.B., Kettner C.A., Colman R.W. The contact system in experimental enterocolitis. // Immunopharmacology, 1996, 33, p. 314 316.

142. Steinmann W.//Immunopharmacology, 1996, 32, p. 2-5.

143. Stayton P.S., Fisher M.T., Sliger S.G. Determination of cytochrome b5 association reactions. Characterization of metmyoglobin and cytochrome P-450cam binding to genetically engineered cytochromeb5. // J. Biol. Chem., 1988 263(27), p. 13544-13548.

144. Stayton P.S., Poulos T.L., Sliger S.G. 1989 Putidaredoxin competitively inhibits cytochrome b5-cytochrome P-450cam association: a proposed molecular model for a cytochrome P-450cam electron-transfer complex. // Biochemistry, 1987: p. 8201-8205.

145. Stayton P.S., Sligar S.G. The cytochrome P-450cam binding surface as defined by site-directed mutagenesis and electrostatic modeling//Biochemistry, 1990. 29. p. 73817386.

146. Suput D, Frangez R, Bunc M. Cardiovascular effects of equinatoxin III from the sea anemone Actinia equina (L.) //Toxicon, 2001; 39(9):1421-7.

147. Svendsen I., Boisen S., Hejgaard J. // Carlsberg Res. Commun., 1982. 47. N.1. p.4553

148. Sweet R.M., Wright H.T., Janin J., Chothia C.H., Blow D.M. Crystal structure of the complex of porcine trypsin with soybean trypsin inhibitor (Kunitz) at 2.6-A resolution. // Biochemestry, 1974.13. N. 20. p. 4212-4228т

149. Tamburini P.P., Schenkman J.В. Differences in the mechanism of functional interaction between NADPH-cytochrome P450 reductase and its redox partners. // Molecular Pharmacology, 1986. 30. p. 178-185.

150. Tans G., Rosing J. // Siminar in Thrombosis and Heostasis, 1987, 13, 25 35.

151. Tayeh M.A., Olson S.T., Shore J.D. //J. Biol. Chem., 1985, 260, p. 10856-10842.

152. Troll W., Wiesner R. Protease inhibitors: possible anticarcinogens in edible seeds // The Prostate, 1983. 4. N 3. p. 345-349

153. Turk, Т., Cytolytic toxins from sea anemones. // J. Toxicol.-Toxin Rev., 1991. 10, p. 223-262.U

154. User's Guide/Affinity Sensors Saxon Way, Bar Hill Cambridge, CB385L, EnglandV

155. Valcarcel. Coupling continuous separation techniques to capillary electrophoresis // J. Chromatogr., 2001, 27;924(1-2):3-30. Review.

156. Veselovsky A.V., Ivanov Yu.D., Ivanov A.S., Archakov A.I., Lewi P. and Janssen P.,

157. Protein-protein interactions: mechanisms and modification by drugs // J. Mol.

158. Recognit., 2002, 15, 405-422

159. Vincent J. P., Schweitz H., Lazdunski M„ 1972, 42. (3), 505-510

160. Vodkin L.O. // Plant Physiol., 1981. N3. p. 766-771W

161. Wang J., Xiong W., Yang Z., Davis Т., Deney M.J., Chao J., Chao L. // Hypertension, 1994, 23, p. 236-243.

162. Welschof M., Terness P., Kipriyanov S.M., Stanescu D., Breitling F., Dorsam H., Dubel S., Little M., Opelz G. The antigen-binding domain of a human lgG-anti-F(ab')2 autoantibody// Proc. Natl. Acad. Sci USA, 1997, v. 94, p. 1902-1907.

163. Wong J., Chao L„ Chao J. //J.CIin.lnvest., 1995, 95, p. 1710-1716.Y

164. Yamamoto M., Hara S., Ikenaka N. Amino acid sequences of two trypsin inhibitors from winged bean seeds (Psophocarpus tetragonolobus (L)DC.). II J. Biochem., 1983. 94. N3. p.849-861

165. Yarovaya G.A., Dotsenko V.L., Neshkova H.A. Intern.Conf.Kinin 91. Munich. Toward Understandig // The Molecular Basis of Kinin Action. Abs., 1991, p.188.

166. Zhou G.H., Chao L., Chao J., Zhou. Kallistatin: a novel human tissue kallikrein inhibitor. Purification, characterization, and reactive center sequence. // J.Biol.Chem., 1992, 267, p. 25873 25880.

167. Zorec R, Tester M, Macek P, Mason WT. Cytotoxicity of equinatoxin II from the sea anemone Actinia equina involves ion channel formation and an increase in intracellular calcium activity//J Membr. Biol. 1990;118(3):243-9.t