Определение следовых концентраций аминокислот, различных органических кислот и сахаров при их совместном присутствии методом реакционной хромато-масс-спектрометрии в водных и органических растворах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат химических наук Соболевский, Тимофей Геннадьевич

  • Соболевский, Тимофей Геннадьевич
  • кандидат химических науккандидат химических наук
  • 2004, Москва
  • Специальность ВАК РФ02.00.02
  • Количество страниц 178
Соболевский, Тимофей Геннадьевич. Определение следовых концентраций аминокислот, различных органических кислот и сахаров при их совместном присутствии методом реакционной хромато-масс-спектрометрии в водных и органических растворах: дис. кандидат химических наук: 02.00.02 - Аналитическая химия. Москва. 2004. 178 с.

Оглавление диссертации кандидат химических наук Соболевский, Тимофей Геннадьевич

список сокращений. введение.

глава 1. методы полумения летучих производных аминокислот, различных органических кислот и сахаров (литературный обзор).

1.1. Газохроматографический анализ аминокислот.

1.2. Газохроматографический анализ жирных, дикарбоновых, гидрокси-, оксокислот, спиртов, сахаров и родственных соединений.

глава 2. оборудование, исходные вещества и методика эксперимента.

2.1. Оборудование.

2.2. Исходные вещества и материалы.

2.3. Методика эксперимента.

2.3.1. Приготовление растворов модельных соединений.

2.3.2. Дериватизация аминокислот с использованием гексаметилдисилазана

2.3.3. Дериватизация модельных соединений с использованием N.O-бис(триметилсилил)трифторацетамида и Ь/-метил-Ь/третбутилдиметилсилилтрифторацетамида.

2.3.4. Дериватизация аминокислот с использованием изобутилхлорформиата

2.3.5. Дериватизация жирных и дикарбоновых кислот с использованием изобутилхлорформиата.

2.3.6. Приготовление лиофилизированных препаратов культуральной жидкости с клетками бактерий Escherichia Coli.

2.3.7. Приготовление клеточных культур фибробластов и аденокарциномы прямой кишки человека.

2.3.8. Экстракция из лиофилизата Escherichia Coli.

2.3.9. Дериватизация экстрактов из реальных образцов.

2.3.10. Газохроматографическое определение продуктов дериватизации.

2.3.11. Масс-спектрометрическая идентификация продуктов дериватизации

глава 3. дериватизация модельных соединений и оптимизация условий гх-мс определения летучих производных.

3.1. Оптимизация условий газохроматографического определения.

3.2. Силилировлние жирных, дикарбоновых, гидрокси-, okco- и аминокислот. сахаров, спиртов и стеролов.

3.2.1. Дериватизация гексаметилдисилазаном.

3.2.2. Дериватизация МО-бис(триметилсилил)трифторацетамидом.

3.2.3. Дериватизация аминокислот М-метил-Nтретбув 1лдиметилсилилтрифторацетамидом.

3.3. э1ерификация и ацилирование жирных, дикарбоновых и аминокислот.

3.3.1. Дериватизация изобутилхлорформиатом.

глава 4. хромато-масс-спектрометрическая идентификация продуктов дериватизации изучаемых соединений.

4.1. Электронная ионизация.

4.1.1. Изучение масс-спектров силильных эфиров жирных, дикарбоновых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, Сахаров, спиртов и стеролов и оценка пределов детектирования.

4.1.2. Изучение масс-спектров изобутоксикарбонильных эфиров аминокислот и алкиловых эфиров жирных и дикарбоновых кислот и оценка пределов детектирования.

4.2. Химическая ионизация.

4.2.1. Изучение масс-спектров силильных эфиров гидрокси-, оксокислот, Сахаров, спиртов и стеролов и оценка пределов детектирования.

4.2.2. Изучение масс-спектров изобутоксикарбонильных эфиров аминокислот и алкиловых эфиров жирных и дикарбоновых кислот и оценка пределов детектирования.

глава 5. изучение состава соединений, выделенных из клеточных культур

5.1. Определение состава соединений, выделенных из аиофиаизированной культуры Escherichia Сои.

5.2. Определение состава жирных, дикарбоновых и аминокислот в клетках аденокарциномы и фибробллстов человека.

глава 6. определение следовых содержаний аминокислот в водных растворах.

6.1. Изучение возможности сорбционного концентрирования следовых количеств изобутоксикарбонильных производных аминокислот из органического раствора и ГХмс анализа всего концентрата.

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Аналитическая химия», 02.00.02 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Определение следовых концентраций аминокислот, различных органических кислот и сахаров при их совместном присутствии методом реакционной хромато-масс-спектрометрии в водных и органических растворах»

Актуальность темы. В настоящее время dcc чаще возникает необходимость высокоселектпвного и высокочувствительного определения состава таких биологически важных соединении, как ампиокислоты, органические кислоты и сахара, в различных объектах. Подобные исследования проводятся при диагностике различных заболеваний, в том числе врожденных. Состав органических кислот и Сахаров - один из показателен качества пищевой продукции и различных напитков. Микробиологические исследования также требуют определения состава этих классов соединении па ультрапизком уровне.

При определении таких соединении в ряде случаев используется жидкостная хроматография и капиллярный электрофорез, поскольку эти методы позволяют проводить определение указанных соединений напрямую (после предварительной очистки пробы). Однако пределы обнаружения (за исключением ВЭЖХ с амперометричеекпм детектированием), достигаемые в этом случае, сравнительно высоки, а в качестве элюепта необходимо использование органических растворителей высокой степени чистоты. Следует отметить также, что сочетание этих методов с масс-спектрометрией до сих пор находит лишь ограниченное применение, при этом пределы обнаружения существенно выше, чем в случае использования реакционной хромато-масс-спсктрометрнн. Кроме этого, жидкостная хроматография и капиллярный электрофорез не позволяют проводить определение соединений различных классов при их совместном присутствии в смеси.

Газовая хроматография находит более широкое применение в анализе указанных соединений, и, как правило, определение проводят с использованием пламеппо-ионизационного детектора. Поскольку рассматриваемые соединения, как правило, не подлежат прямому газохроматографическому анализу, необходимо проведение иредколопочиой дериватизации для переведения таких соединений в соответствующие летучие производные. В существующих публикациях, посвященных газохроматографическому определению соединений этих классов, уропепь рабочих концентраций составляет обычно 10"' - KTVo, и в подавляющем болыиннстис случаен не проводится определение всех рассматриваемых соединений при их совместном присутствии в смеси (или же определяют лишь несколько представителей каждого класса). Кроме того, наблюдается значительная противоречивость данных по условиям получения различных производных рассматриваемых классов соединений.

В настоящее время панболее часто используется два основных метода получения летучих производных вышеуказанных соединений: силилироваиие мреже - этернфикацпя (ацплироваинс) различными реагентами, в том числе ал-килхлорформиатами. Данные но условиям проведения реакции силилирования зачастую противоречивы - разные авторы предлагают различные температурные режимы проведения реакции, время дериватизацнп и используют разные растворители. Результаты, полученные разными авторами в эквивалентных условиях, также отличаются. Второй тип реагентов (различные алкилхлорфор-мнаты) сравнительно недавно получил применение для дериватизацни аминокислот и жирных кислот. Основным достоинством данного тина реагентов является то, что реакция протекает практически мгновенно в водно-оргаиичсской среде при комнатной температуре, хотя выход (степень конверсии) очень сильно зависит от выбранного алкнлхлорформната и вспомогательного реагента (спирта). Эта реакция все еще мало изучена в анализе жирных, дикарбо-иовых и гидроксикислот. Нет публикаций, и которых происходило бы одновременное определение амнио-, жирных, дикарбоповых и гидроксикислот и Сахаров в одной пробе.

Применимость некоторых описанных в литературе методов получения летучих производных показана только на модельных смесях соединений, а не на реальных объектах, хотя ясно, что матрица может оказывать настолько сильное мешающее влияние, что ни о каком не только количественном, но и качественном установлении состава не может быть и речи. Также в литературе совершенно не рассматривается применение концентрирования при определении изучаемых соединений. Как правило, только малая часть реакционной смеси, полученной после дериватизацни, подвергается анализу (1-2 мкл из 0.5-1 avi копечного экстракта), что приводит к значительному повышению пределов обнаружения, н не позволяет в полной мере раскрыть возможности, предоставляемые современным аналитическим оборудованием.

Необходимо отметить псмиогочпсленность работ но использованию реакционной хромато-масс-спектрометрии для анализа отдельных групп соединений, относящихся к рассматриваемым классам, хотя она является более высокочувствительным и, в большинстве случаев - высокоселективиым методом. Кроме того, масс-снектры летучих производных регистрируют для относительно больших количеств веществ, хотя известно, что общий вид масс-спектра зависит от концентрации, н чем ниже концентрация, тем больше масс-спектр может отличаться от библиотечного.

Цели и задачи исследования. Цслыо данной работы являлась разработка способа определения жирных, дикарбоповых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, а также Сахаров, спиртов и стеролов в водных и органических растворах (экстрактах) при их совместном присутствии в смеси на уровне следовых концентраций методом реакционной хромато-масс-спсктрометрип и снижения пределов обнаружения за счет использования сорбциоиного концентрирования из органического раствора (экстракта) с последующим анализом всего концентрата.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить закономерности силнлнровапия различных жирных, дикарбоповых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, Сахаров, спиртов и стеролов в органических растворах с использованием гексаметилдисилазапа (ГМДС), N,0-бнс(триметилсилил)грифторацетамида (БСТФА), УУ-метил-ТУ-третбутил-димстилсилилтрифторацетамнда (МТБСТФА) и различных растворителей, и выбрать условия ГХ-МС определения соответствующих тримс-тилсилильпых (ТМС) и третбугилдиметилсилильиых (ТБДМС) производных;

- изучить масс-спектры электронной (ЭИ) и химической (ХИ) ионизации для различных количеств этих производных и пронести оценку пределов детектирования в режиме регистрации полного ионного тока и селективного ионного детектирования;

- разработать методологию определения жирных, днкарбоиовых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, Сахаров, спиртов п стеролов при их одновременном присутствии в смеси на уровне следов методом реакционной ГХ-МС;

- изучить условия дериватизации в водпо-оргаппчсском растворе для аминокислот, жирных, дикарбоновых и других органических кислот с помощью реакции этерифпкации - ацилирования (реагент - нзобутилхлорформиат, ИБХФ) и разработать условия ГХ-МС определения получающихся производных;

- изучить масс-спектры ЭИ н ХИ для различных количеств соответствующих изобутоксикарбонильных производных и алкиловых эфиров и оценить пределы детектирования;

- изучить состав жирных, дикарбоновых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, а также Сахаров, выделенных экстракцией из лиофнлизнрованпой культуры Е. Coli (после дериватизации);

- изучить состав жирных, дикарбоновых и аминокислот, выделенных из клеточных культур адснокарципомы прямой кишки человека и фиброб-ластов (после дериватизации), и возможность дифференциации этих типов клеток;

- разработать способ определения следовых количеств аминокислот в водном растворе, основанный на получении //-изобутоксикарбопил-О-гептаф-торбутиловых (ИБОК-ГФБ) производных, их экстракции хлороформом, сорбциоппом концентрировании этих производных из органического раствора (экстракта) и ГХ-МС анализе всего концентрата.

Научная иоптпа. В работе изучены условия дериватизации широкого круга веществ (всего 60 соединении), принадлежащим к классам аминокислот, жирных, дикарбоновых, гидрокси- и оксокпслот, а также Сахаров, спиртов и стеролов с использованием следующих реагентов: ГМДС, БСТФА, МТБСТФА, ИБХФ. Показаны преимущества и недостатки каждого способа получения летучих производных п установлены оптимальные условия дериватизации и определения изученных веществ при их совместном присутствии.

Для всех производных изучены масс-спектры ЭИ для различных количеств веществ. Получены масс-спектры ЭИ ТМС производных ряда органических кислот, Сахаров и стеролов, отсутствующие в библиотеке масс-спектральных данных NIST98. Впервые представлены масс-спектры ЭИ TV-изобуток-сикарбоиил-О-нзобутиловых и Л^-нзобутокснкарбоиил-О-гептафторбутиловых эфиров аминокислот, а также гептафгорбутиловых эфнров жирных и дикарбоновых кислот. Установлены пределы детектирования всех соответствующих производных в режиме регистрации полного ионного тока (по масс-хроматограмме) и селективного ионного детектирования, которые

Q п о м составили 2.5x10" -2.0x10 г и 1.4x10 - 1.0x10 г в пробе (в зависимости от соединения и типа производных).

В режиме ХИ положительных ионов изучены масс-спектры ТМС производных гидрокси- и оксокислот, стеролов и Сахаров; TV-изобутоксикарбонил-О-нзобутнловых н //-изобутокснкарбоиил-О-гептафторбутиловых эфиров аминокислот, а также изобутиловых и гепгафторбутиловых эфиров жирных и дикарбоновых кислот. Показано, что пределы детектирования всех изученных производных составляли 3.4х10'9 - 5.0х10"12г в режиме регистрации полного

Q п ионного тока (по масс-хроматограмме) и 1.0x10 - 1.0x10 г в случае селективного ионного детектирования (в зависимости от соединения и типа производных).

Предложена методология определения жирных, дикарбоновых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, а также спиртов, Сахаров и стеролов при их одновременном присутствии в смеси па уровне следов, основанная на обработке одной части образца смесыо БСТФА с пиридином (после высушивания), а другой - смесыо ИБХФ с гептафторбутаполом в водно-органическом растворе. При этом в первом случае в виде ТМС производных определяются все классы соединений, кроме аминокислот, а во втором - аминокислоты, жирные, дикарбоиовыс и короткоцеиные гидрокси- и оксокислоты.

Па основании проведенных исследовании установлен состав свободных аминокислот, а также других органических кислот и Сахаров в лиофилизи-рованпой культуре клеток Е. Coli (штамм К-12 HfrH thi).

Проведено исследование состава жирных, дпкарбоиовых и аминокислот в суспензии клеток адснокарципомы прямой кишки человека и фибробластов и показана возможность дифференциации этих типов клеток на основании различия в составе аминокислот.

Предложен способ определения аминокислот в водных растворах, основанный па получении ИБОК-ГФБ производных, их экстракции хлороформом, сорбциониом концентрировании этих производных из органического раствора (экстракта) и ГХ-МС анализе всего концентрата, позволяющий снизить пределы обнаружения по крайней мерс на 2 порядка.

Практическая значимость. Предложенная методология позволяет решать задачи определения следовых концентрации широкого круга веществ в водных н органических растворах при их совместном присутствии. Изученные закономерности дернватпзацпп соединений различных классов позволяют выбрать наиболее подходящий реагент и условия проведения реакции в зависимости от цели и задач исследования, а также предполагаемого состава смеси.

Масс-спектры ЭИ и ХИ, полученные для различных производных всех изученных соединений, позволяют увеличить селективность определения и дополнительно снизить пределы детектирования при использовании селективного ионного детектирования.

Масс-спектры ЭИ соединений, отсутствующих в библиотеке масс-спек-тральных данных NIST 98, позволяют увеличить достоверность идентификации, что особенно важно в анализе аминокислот в виде изобутоксикар-бопильпых производных.

Разработанная методология анализа микробиологических образцов позволяет проводить высокочувствительное и селективное определение широкого круга соединений в указанных объектах.

Предложенный способ определения аминокислот в раковых клетках и фнбробластах позволяет увеличить достоверность дифференциации раковых и здоровых клеток.

Разработанный способ сорбциониого концентрирования из органических растворов обеспечивает возможность снижения пределов обнаружения по крайней мере на 2 порядка благодаря ГХ-МС анализу всего концентрата. На защиту выносятся:

- оптимизированные условия дерпватпзацнн соединений, принадлежащих к классам жирных, дикарбоиовых, гидроксн-, оксо- и аминокислот, спиртов, Сахаров и стеролов с использованием таких реагентов, как ГМДС, БСТФА, МТБСТФА, ИБХФ;

- масс-спектры ЭИ ТМС производных различных органических кислот, Сахаров, спиртов и стеролов, а также Л'-изобутоксикарбонил-О-изобутиловых, Л^изобутоксикарбоипл-О-гснтафторбутнловых эфиров аминокислот, пзобутиловых и гептафторбутиловых эфиров жирных и дикарбоиовых кислот, и соответствующие пределы детектирования;

- масс-спектры ХИ положительных ионов ТМС производных гидрокси- и оксокислот, спиртов, Сахаров и стеролов, TV-изобутоксикарбопил-О-изо-бутиловых и TV-изобутоксикарбонил-О-гсптафторбутиловых эфиров аминокислот, изобутиловых и гептафторбутиловых эфиров жирных и дикарбоиовых кислот, и соответствующие пределы детектирования;

- методология определения жирных, дикарбоиовых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, а также спиртов, Сахаров и стеролов при их одновременном присутствии в смссн, основанная на обработке одной части образца смссыо БСТФА с пиридином (после высушивания), а другой - смссыо ИБХФ с геитафторбутанолом в водпо-оргаиичсском растворе;

- результаты определения состава соединении изученных классов, выделенных экстракцией из лиофилнзироваиной клеточной культуры Е. Coli;

- способ дифференциации клеток аденокарциномы и фибробластов, основанный па определении различия в составе аминокислот методом реакционной ГХ-МС;

- способ определения аминокислот в водном растворе, основанный на получении ИБОК-ГФБ производных, их экстракции хлороформом, сорбционном концентрировании производных и ГХ-МС анализе всего концентрата, позволяющий снизить пределы обнаружения по крайней мере па 2 порядка. Апробация работы. Основные результаты работы были представлены па

Питтсбургскон копфереицмп по аналитической химии и прикладной спектроскопии (12-17 марта 2000 г., Новый Орлеан, Луизиана, США), 24-м Международном симпозиуме но хроматографии (15-20 сентября 2002 г., Лейпциг, Германия), и 8-м Международном симпозиуме по гибридным методам в хроматографии (4-6 февраля 2004 г., Брюгге, Бельгия).

Публикации. По материалам работы опубликовано 8 работ в виде статей и тезисов докладов.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, шести глав, заключения, выводов и списка использованных литературных источников.

Похожие диссертационные работы по специальности «Аналитическая химия», 02.00.02 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Аналитическая химия», Соболевский, Тимофей Геннадьевич

Выводы

1. Изучены условия силилнрования следовых количеств 60 различных жирных, дикарбоновых, гндрокси-, оксо- и аминокислот, спиртов, Сахаров и стеролов в органических растворах с использованием гсксаметилдисилазана, N,0-бис(триметилсилил)трифторацетамида и уУ-метил-уУ-третбутилдиметилси-лилтрифторацетамида и различных растворителей; показаны преимущества и ограничения каждого из способов дериватизацни, установлены оптимальные условия дериватизацни и определения изученных соединений при их совместном присутствии в смеси.

2. Изучены условия этерификации / ацилирования аминокислот, жирных, дикарбоновых и ряда других органических кислот в водно-органических растворах с использованием изобутнлхлорформната в сочетании с изобута-полом и гептафторбутаполом, и выбраны оптимальные условия проведения этой реакции.

3. Изучены масс-спектры электронной и химической ионизации ТМС, ТБДМС, ИБОК-ИБ, ИБОК-ГФБ, ИБ и ГФБ производных, и оценены пределы детектирования в режиме регистрации полного ионного тока (по масс-хроматограмме) и селективного ионного детектирования, которые составили 2.0x10'12- 3.4x10'9г и 1.0x10'12- 1.4x10"9г в пробе, соответственно (в зависимости от соединения и способа ионизации); впервые представлены Macc-cneicipbi электронной ионизации ИБОК-ИБ и ИБОК-ГФБ производных аминокислот, а также ГФБ эфиров жирных и дикарбоновых кислот.

4. Предложена методология определения следовых содержаний жирных, дикарбоновых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, а также спиртов, Сахаров и стеролов при их одновременном присутствии в смеси, основанная на обработке одной части образца смесыо БСТФА с пиридином (после высушивания), а другой - смесыо ИБХФ с гептафторбутаполом в водио-органическом растворе.

5. При использовании разработанной методологии определен состав жирных, дикарбоновых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, а также Сахаров, выделенных экстракцией ннрндпном н водой нз лнофнлизнропанной культуры Е. Coli, и проведена оценка их содержания.

6. В экспериментально выбранных условиях определен состав жирных, дикарбоновых и аминокислот в культурах клеток адепокарциномы прямой кишки человека и фибробластов, и показана возможность увеличения достоверности дифференциации этих клеток, основанной на установленном различии в составе аминокислот.

7. Предложен способ определения аминокислот в водных растворах, основанный па получении ИБОК-ГФБ производных, их экстракции хлороформом, сорбцнопном концентрировании этих производных из органического раствора (экстракта) и ГХ-МС анализе всего концентрата, позволяющий снизить пределы обнаружения по меньшей мере на 2 порядка.

Заключение

В результате проведенного исследования изучены условия получения летучих производных широкого круга соединений, принадлежащих к классам жирных, дикарбоновых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, а также Сахаров, стеролов и спиртов (всего 60 веществ) с использованием таких реагентов как гексаметилднсилазаи, //,0-бис(триметилсилнл)трифторацетамид, //-метнл-//-третбутилднметиленлилтрифторацетамид и изобутилхлорформиат (в сочетании с изобутанолом и гептафторбутанолом). Показаны достоинства и недостатки каждого реагента, области их применения в газохроматографическом анализе, и приведены рекомендации по выбору того или иного реагента в зависимости от поставленной задачи.

В работе получены масс-спектры различных летучих производных изученных соединений в режиме электронной и химической ионизации, причем для многих производных масс-спсктры были зарегистрированы и описаны впервые. Очевидно, что без знания характеристичных ионов и их интенсив-постей невозможна достоверная идентификация, а также высокочувствительное и высокоселектпвное определение того или иного соединения. Оценка пределов детектирования для производных соединений указанных классов была проведена в режиме регистрации полного ионного тока (но масс-хроматограмме) и селективного ионного детектирования. Показано, что пределы детектирования для изученных классов соединений составляют

19 q примерно от 1.0x10" до 1.0x10" г в зависимости от вещества, способа ионизации н детектирования. Эта информация является полезной при выборе реагента для дериватизации и способа ионизации, поскольку от этого во многом зависит чувствительность и селективность определения.

На основании проведенных исследований предложена комплексная методология анализа жирных, дикарбоновых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, спиртов, Сахаров и стеролов при их одновременном присутствии в смеси иа уровне следов. Она подразумевает обработку одной части образца смесью пиридина и БСТФА (после высушивания), а другой — смесыо ИБХФ с гептафторбутанолом в водно-органическом растворе с последующим ГХ-МС анализом соответствующих продуктов дериватизации. При этом в нервом случае в виде ТМС производных определяются все классы соединений, кроме аминокислот, а во втором - аминокислоты, жирные, дикарбоновые и короткоцениые гидрокси- и оксокислоты.

При использовании предложенной методологии был определен состав жирных, дикарбоиовых, гидрокси-, оксо- и аминокислот, а также Сахаров в лиофилизированпой культуре Escherichia Coli. Кроме этого, был изучен состав жирных, дикарбоиовых и аминокислот в клетках аденокарципомы прямой кишки человека и фибробластах. Показано, что физиологически активные клетки аденокарципомы существенно отличаются по аминокислотному составу от здоровых клеток. Это открывает перспективы более достоверного дифференцирования раковых и здоровых клеток в дополнение к существующим традиционным гистологическим методам исследования и определению высокомолекулярных веществ-признаков онкологических заболеваний.

Разработан способ определения аминокислот в водных растворах, основанный па получении ИБОК-ГФБ производных, их экстракции хлороформом, сорбцноппом концентрировании этих производных из органического раствора (экстракта) и ГХ-МС анализе всего концентрата. Этот способ позволяет снизить концентрационные пределы обнаружения соответствующих производных аминокислот (а также - потенциально - алкиловых эфиров жирных и дикарбоиовых кислот) по меньшей мере на 2 порядка. Кроме этого, было показано, что ввод пробы без растворителя существенно снижает фон от неподвижной фазы капиллярной колонки и обеспечивает в ряде случаев получение более узких и симметричных пиков.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Соболевский, Тимофей Геннадьевич, 2004 год

1. Т.М. Larson, М. Gawlitzek, II. Evans, U. Albcrs, J. Cacia. Chemometric Evaluation of On-Line High-Pressure Liquid Chromatography in Mammalian Cell Cultures: Analysis of Amino Acids and Glucose // Biotechnol. Bioeng. 2002. 77. 5. P. 553-563.

2. K. Blau, G. King. Handbook of Derivatives for Chromatography / Heyden: London, 1978.

3. R.W. Zumwalt, D. Roach, C.W. Gchrke. Gas-Liquid Chromatography of Amino Acids In Biological Substances//J. Chromatogr. 1970. 53. P. 171-193.

4. R.W. Zumwalt, K. Kuo, C.W. Gehrke. A Nanogram and Picogram Method for Amino Acid Analysis by Gas-Liquid Chromatography // J. Chromatogr. 1971. 57. P. 193-208.

5. C. Deng, C. Shang, Y. Ни, X. Zhang. Rapid Diagnosis of Phenylketonuria and Other Aminoacidemias by Quantitative Analysis of Amino Acids in Neonatal Blood Spots by Gas Chromatography Mass Spectrometry // J. Chromatogr. B. 2002. 775. P. 115-120.

6. P. Dallakian, II. Budzikievvicz. Gas Chromatography Chemical Ionization Mass Spectrometry in Amino Acid Analysis of Pyoverdins // J. Chromatogr. A. 1997. 787. P. 195-203.

7. C.W. Gehrke, II. Nakamoto, R.W. Zumwalt. Gas-Liquid Chromatography of Protein Amino Acid Trimethylsilyl Derivatives // J. Chromatogr. 1969. 45. P. 24-51.

8. C.W. Gehrke, K. Leimer. Trimethylsilylation of Amino Acids. Derivatization and Chromatography //J. Chromatogr. 1971. 57. P. 219-238.

9. C.W. Gehrkc, К. Lcimcr. Trimcthylsilylation of Amino Acids. Effect of Solvents on Derivatization Using Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide // J. Chromatogr. 1970. 53. P. 201-208.

10. I. Matsumoto, T. Kuhara. A New Chemical Diagnostic Method for Inborn Errors of Metabolism by Mass Spectrometry Rapid, Practical, and Simultaneous Urinary Metabolites Analysis // Mass. Spectrom. Rev. 1996. 15. P. 43-57.

11. S.L. MacKenzic, D. Tenaschuk, G. Fortier. Analysis of Amino Acids by Gas-Liquid Chromatography as /er/.-Butyldimcthylsilyl Derivatives. Preparation of Derivatives in a Single Reaction//J. Chromatogr. 1987. 387. P. 241-253.

12. I. Starke, E. Kleinpeter, B. Kamm. Separation, Identification, and Quantification of Amino Acids in L-Lysine Fermentation Potato Juices by Gas Chromatography Mass Spectrometry // Fresenius J. Anal. Chem. 2001. 371. P. 380-384.

13. P. Simek, A. Hcydova, A. Jegorov. High Resolution Capillary Gas Chromatography Mass Spectrometry of Protein and Non-Protein Amino Acids, Amino Alcohols, and Hydroxycarboxylic Acids as their tert.

14. Butyldimethylsilyl Derivatives//J. High Resolut. Chromatogr. 1994. 17. P. 145152.

15. Zs.F. Katona, P. Sass, I. Molnar-Perl. Simultaneous Determination of Sugars, Acids and Amino Acids in Apricots by Gas Chromatography Mass Spectrometry//:. Chromatogr. A. 1999. 847. P. 91-102.

16. P. Ilusck. Simultaneous Profile Analysis of Plasma Amino and Organic Acids by Capillary Gas Chromatography //J. Chromatogr. B. 1995. 669. P. 352-357.

17. P. Ilusck. Chloroformates in Gas Chromatography as General Purpose Derivatizing Agents//J. Chromatogr. B. 1998. 717. P. 57-91.

18. P. Ilusck, P. Matucha, A. Vrankova, P. Simek. Simple Plasma Work-up for a Fast Chromatographic Analysis of Homocysteine, Cysteine, Methionine and Aromatic Amino Acids // J. Chromatogr. B. 2003. 789. P. 311-322.

19. P. Musek. Rapid Derivatization and Gas Chromatographic Determination of Amino Acids//J. Chromatogr. 1991. 552. P. 289-299.

20. S. Matsumura, II. Kataoka, M. Makita. Determination of Amino Acids in Human Scrum by Capillary Gas Chromatography // J. Chromatogr. B. 1996. 681. P. 375-380.

21. II. Kataoka, S. Matsumura, II. Koizumi, M. Makita. Rapid and Simultaneous Analysis of Protein and Non-Protein Amino Acids as N(0,S)-Isobutoxycarbonyl Methyl Ester Derivatives by Capillary Gas Chromatography // J. Chromatogr. A. 1997. 758. P. 167-173.

22. A.P. Vonderheide, M. Montcs-Bayon, J.A. Caruso. Solid-Phase Microextraction as a Sample Preparation Strategy for the Analysis of Seleno Amino Acids by Gas Chromatography Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry // Analyst. 2002. 127. P. 49-53.

23. S. Casal, M.B. Olivcira, М.Л. Fcrreira. Gas Chromatographic Quantification of Amino Acid Enantiomcrs in Food Matrices by their A^O.Sj-Ethoxycarbonyl Ileptafluorobutyl Ester Derivatives // J. Chromatogr. A. 2000. 866. P. 221-230.

24. I. Abe, N. Fujimoto, T. Nishiyama, K. Terada, T. Nakahara. Rapid Analysis of Amino Acid Enantiomers by Chiral-Phase Capillary Gas Chromatography 11 J. Chromatogr. A. 1996. 722. P. 221-227.

25. P. Cao, M. Moini. Quantitative Analysis of Fluorinatcd Ethylchloroformate Derivatives of Non-Protein Amino Acids Using Positive and Negative Chemical Ionization Gas Chromatography Mass Spectrometry // J. Chromatogr. A. 1995. 710. P. 303-308.

26. A. Namcra, M. Yashiki, M. Nishida, T. Kojima. Direct Extract Derivatization for Determination of Amino Acids in Human Urine by Gas Chromatography and Mass Spectrometry // J. Chromatogr. B. 2002. 776. P. 49-55.

27. K.-R. Kim, J.-H. Kim, C.-H. Oh, T.J. Mabry. Capillary Gas Chromatography of Protein Amino Acids as N(0,S)-isobutoxycarbonyl tert.-Butyldimethylsilyl Derivatives in Aqueous Samples // J. Chromatogr. 1992. 605. P. 241-249.

28. K.-R. Kim, J.-II. Kim, E. Cheong, C. Jcong. Gas Chromatographic Amino Acid Profiling of Wine Samples for Pattern Recognition // J. Chromatogr. A. 1996. 722. P. 303-309.

29. C. Rodicr, R. Sternberg, F. Raulin, C. Vidal-Madjar. Chemical Derivatization of Amino Acids for In Situ Analysis of Martian Samples by Gas Chromatography //J. Chromatogr. A. 2001. 915. P. 199-207.

30. M.W. Duncan, A. Poljak. Amino Acid Analysis of Peptides and Proteins on the Femtomole Scale by Gas Chromatography Mass Spectrometry // Anal. Chem. 1998. 70. 5. P. 890-896.

31. M. Murase, Y. Kimura, Y. Nagata. Determination of Portal Short-Chain Fatty Acids in Rats Fed Various Dietary Fibers by Capillary Gas Chromatography // J. Chromatogr. B. 1995. 664. P. 415-420.

32. G. Manni, F. Caron. Calibration and Determination of Volatile Fatty Acids in Waste Leachatcs by Gas Chromatography // J. Chromatogr. A. 1995. 690. P. 237-242.

33. L.K. Ng. Analysis by Gas Chromatography Mass Spectrometry of Fatty Acids and Esters in Alcoholic Beverages and Tobaccos // Anal. Chim. Acta. 2002. 465. P. 309-318.

34. T. Seppancn-Laakso, I. Laakso, R. Hiltunen. Analysis of Fatty Acids by Gas Chromatography, and its Relevance to Research on Health and Nutrition // Anal. Chim. Acta. 2002. 465. P. 39-62.

35. P. Husek, P. Simck, E. Tvrzicka. Simple and Rapid Procedure for the Determination of Individual Free Fatty Acids in Serum // Anal. Chim. Acta. 2002. 465. P. 433-439.

36. II.-J. dc Geus, I. Aidos, J. dc Boer, J.B. Luten, U.A.Th. Brinkman. Characterization of Fatty Acids in Biological Oil Samples Using Comprehensive

37. Multidimensional Gas Chromatography // J. Chromatogr. A. 2001. 910. P. 95103.

38. D.-S. Lee, B.-S. Noh, S.-Y. Bae, K. Kim. Characterization of Fatty Acids Composition in Vegetable Oils by Gas Chromatography and Chemometrics // Anal. Chim. Acta. 1998. 358. P. 163-175.

39. D.M. Hasselbaink, T.II.M. Roemen, G.J. Van der Vusse. Determination of Long-Chain Fatty Acids in Heart and Skeletal Muscle by Capillary Gas Chromatography // Anal. Chim. Acta. 2002. 465. P. 351-357.

40. E. Tvrzicka, M. Vccka, B. Stankova, A. Zak. Analysis of Fatty Acids in Plasma Lipoproteins by Gas Chromatography Mass Spectrometry. Quantitative Aspects // Anal. Chim. Acta. 2002. 465. P. 337-350.

41. T. Rezanka, I I. Rezankova. Characterization of Fatty Acids and Triacylglycerols in Vegetable Oils by Gas Chromatography and Statistical Analysis // Anal. Chim. Acta. 1999. 398. P. 253-261.

42. J.L. Guil, M.E. Torija, J.J. Gimenez, I. Rodriguez. Identification of Fatty Acids in Edible Wild Plants by Gas Chromatography // J. Chromatogr. A. 1996. 719. P. 229-235.

43. I. Brondz, I. Olsen. Determination of Bound Cellular Fatty Acids in Actinobacillus Actinomycetemcomitans and Haemophilus Aphrophilus by Gas Chromatography and Gas Chromatography Mass Spectrometry // J. Chromatogr. 1984. 308. P. 282-288.

44. О. Daglioglu, М. Tasan, В. Tunccl. Determination of Fatty Acid Composition and Total Trans Fatty Acids of Turkish Biscuits by Capillary Gas-Liquid Chromatography// Eur. Food Res. Technol. 2000. 211. P. 41-44.

45. I. Brondz, II. Nordbo, А.Л. Schcic. Detection of Microbial-Derived Fatty Acids in Carious Dentin by Gas Chromatography and Gas Chromatography Mass Spectrometry//J. Chromatogr. B. 1997. 700. P. 255-260.

46. A.G. Casado, E.J.A. Hernandez, P. Espinosa, J.L. Vilchcz. Determination of Total Fatty Acids (Cg С2г) in Sludges by Gas Chromatography - Mass Spectrometry//J. Chromatogr. A. 1998. 826. P. 49-56.

47. A.L. Henderson, W.-W. Cao, R.-F. Wang, M.-II. Lu, C.E. Cemiglia. The Effect of Food Restriction on the Composition of Intestinal Microflora in Rats // Exp. Gerontol. 1998. 33. 3. P. 239-247.

48. J. Vclasco, O. Berdeaux, G. Marquez-Ruiz, M.C. Dobarganes. Sensitive and Accurate Quantitation of Monocpoxy Fatty Acids in Thermoxidized Oils by Gas-Liquid Chromatography//J. Chromatogr. A. 2002. 982. P. 145-152.

49. H.G. Wahl, A. Chrzanowski, C. Muller, H.M. Liebich, A. Hoffmann. Identification of Furan Fatty Acids in Human Blood Cells and Plasma by Multidimensional Gas Chromatography Mass Spectrometry // J. Chromatogr. A. 1995. 697. P. 453-459.

50. M.-J. Paik, K.-O. Lee, II.-S. Shin. Determination of Very-Long-Chain Fatty Acids in Serum by Gas Chromatography Nitrogen-Phosphorous Detection Following Cyanomethylation //J. Chromatogr. B. 1999. 721. P. 3-11.

51. J. Giacometti, С. Milin, N. Wolf. Monitoring the Estcrification of Sorbitol and Fatty Acids by Gas Chromatography // J. Chromatogr. A. 1995. 704. P. 535-539.

52. T.P. McGinnis. Quantitative Determination of Fatty and Resin Acids in Kraft: Black Liquors as their Trimcthylsilyl Derivatives by Gas Chromatography // J. Chromatogr. A. 1998. 829. P. 235-249.

53. Y. Ghoos, B. Geypcns, M. Hide, P. Rutgeerts, G. Vantrappen. Analysis for Short-Chain Carboxylic Acids in Feces by Gas Chromatography with an Ion-Trap Detector//Anal. Chim. Acta. 1991. 247. P. 223-227.

54. Y.J. Yang, M.H. Choi, M.-J. Paik, II.-R. Yoon, B.C. Chung. Gas Chromatographic Mass Spcctromctric Determination of Plasma Saturated Fatty Acids Using Pentafluorophenyldimcthylsilyl Derivatization // J. Chromatogr. B. 2000. 742. P. 37-76.

55. K.S. Docherty, P.J. Ziemann. On-Line, Inlet-Based Trimethylsilyl Derivatization for Gas Chromatography of Mono- and Dicarboxylic Acids // J. Chromatogr. A. 2001. 921. P. 265-275.

56. J. Giacometti. Determination of Aliphatic Alcohols, Squalene, a-Tocopherol and Sterols in Olive Oils: Direct Method Involving Gas Chromatography of the Unsaponifiable Fraction Following Silylation//Analyst. 2001. 126. P. 472-475.

57. D.L. Chance, K.O. Gerhardt, T.P. Mawhinney. Gas-Liquid Chromatography -Mass Spectrometry of Primary and Secondary Fatty Alcohols and Diols as their tert. -Butyldimethylsilyl Derivatives//J. Chromatogr. A. 1997. 771. P. 191-201.

58. К. Komarck, V. Pitthard, E. Kostrubani£ova, S. Skvarcnina, J. Hoffmann. Capillary Gas Chromatography Mass Spectrometry of Lower Oxycthylenated Aliphatic Alcohols//J. Chromatogr. A. 1997. 773. P. 219-226.

59. B.M. Matthew, C. Anastasio. Determination of Halogenatcd Mono-Alcohols and Diols in Water by Gas Chromatography with Electron Capture Detection // J. Chromatogr. A. 2000. 866. P. 65-77.

60. M. Morvai, I. Molnar-Perl. Simultaneous Determination of Organic Acids and Sugars in Apples by Gas-Liquid Chromatography // J. Chromatogr. 1990. 520. P. 201-207.

61. M. Morvai, I. Molnar-Perl, D. Knausz. Simultaneous Gas-Liquid Chromatographic Determination of Sugars and Organic Acids as Trimethylsilyl Derivatives in Vegetables and Strawberries // J. Chromatogr. 1991. 552. P. 337344.

62. M. Morvai, I. Molnar-Perl. Simultaneous Gas Chromatographic Quantitation of Sugars and Acids in Citrus Fruits, Pears, Bananas, Grapes, Apples and Tomatoes //Chromatographia. 1992. 34. 9/10. P. 502-504.

63. I. Boldizsar, K. Horvath, Gy. Szcdlay, I. Molnar-Perl. Simultaneous GS-MS Quantitation of Acids and Sugars in the Hydrolyzates of Immunostimulant, Watcr-Soluble Polysaccharides of Basidiomycetes // Chromatographia. 1998. 47. 7/8. P. 413-419.

64. I. Molnar-Perl. Role of Chromatography in the Analysis of Sugars, Carboxylic Acids and Amino Acids in Food // J. Chromatogr. A. 2000. 891. P. 1-32.

65. F. Bartolozzi, G. Bertazza, D. Bassi, G. Cristoferi. Simultaneous Determination of Soluble Sugars and Organic Acids as their Trimcthylsilyl Derivatives in Apricot Fruits by Gas-Liquid Chromatography // J. Chromatogr. A. 1997. 758. P. 99-107.

66. M.A. Adams, Z.-L. Chen, P. Landman, T.D. Colmer. Simultaneous Determination by Capillary Gas Chromatography of Organic Acids, Sugars and Sugar Alcohols in Plant Tissue Extracts as their Trimcthylsilyl Derivatives // Anal. Biochcm. 1999. 266. P. 77-84.

67. K.-R. Kim, J.-II. Kim, D.-II. Jeong, D.-J. Раек, H.M. Liebich. Gas Chromatographic Profiling Analysis of Urinary Organic Acids from Nonsmokers and Smokers //J. Chromatogr. B. 1997. 701. P. 1-8.

68. G.E. Black, A. Fox. Recent Progress in the Analysis of Sugar Monomers from Complex Matrices Using Chromatography in Conjunction with Mass Spectrometry or Stand-Alone Tandem Mass Spectrometry // J. Chromatogr. A. 1996. 720. P. 51-60.

69. J. Blcton, P. Mejanclle, J. Sansoulet, S. Goursaud, A. Tchapla. Characterization of Neutral Sugars and Uronic Acids after Methanolysis and Trimethylsilylation fro Recognition of Plant Gums //J. Chromatogr. A. 1996. 720. P. 27-49.

70. M. Tetsuo, C. Zhang, H. Matsumoto, I. Matsumoto. Gas Chromatographic -Mass Spectrometric Analysis of Urinary Sugar and Sugar Alcohols During Pregnancy//J. Chromatogr. B. 1999. 731. P. 111-120.

71. W. Amelung, M.V. Cheshire, G. Guggenberger. Determination of Neutral and Acidic Sugars in Soil by Capillary Gas-Liquid Chromatography after Trifluoroacctic Acid Hydrolysis // Soil Biol. Biochem. 1996. 28. 12. P. 16311639.

72. M.-C. Larrc-Larrouy, C. Feller. Determination of Carbohydrates in Two Fcrralitic Soils: Analysis by Capillary Gas Chromatography after Dcrivatization by Silylation// Soil Biol. Biochem. 1997. 29.9/10. P. 1585-1589.

73. H.J. Chaves das Neves, A.M.V. Riscado, H. Frank. Single Derivatives for GC-MS Assay of Reducing Sugars and Selective Detection by the Nitrogen-Phosphorous Detector (NPD) // J. High. Rcsolut. Chromatogr. & Chromatogr. Commun. 1986. 9. P. 662-666.

74. D.L. Chance, K.O. Gcrhardt, T.P. Mavvhinney. Gas-Liquid Chromatography -Mass Spectrometry of Hydroxy Fatty Acids as their Methyl Esters tert.-Butyldimcthylsilyl Ethers//J. Chromatogr. A. 1998. 793. P. 91-98.

75. P. Husek, P. Matucha. Simple Approach for Analysis of Plasma Oxo-, Hydroxy-and Dicarboxylic Acids//J. Chromatogr. B. 1997. 693. P. 499-502.

76. NIST/EPA/NIII Mass Spectral Library. 1998. Gaithersburg, MD, USA.

77. F.W. McLafferty. Interpretation of Mass Spectra / University Science Books: California, 1980.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.