Новый подход к синтезу 21-азотсодержащих стероидных производных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат наук Стулов, Сергей Владимирович

• Стулов, Сергей Владимирович
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Стулов, Сергей Владимирович

ОГЛАВЛЕНИЕ

стр.

ВВЕДЕНИЕ

Используемые сокращения и обозначения

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

СИНТЕЗ СТЕРОИДОВ С АЗОТСОДЕРЖАЩИМИ 12 ЗАМЕСТИТЕЛЯМИ В КОЛЬЦЕ В

1.1. Синтез азотсодержащих производных из 17-кетостероидов

1.2. Синтез азотсодержащих производных из 20-кетостероидов

1.3. Прочие методы синтеза стероидов с азотсодержащими заместителями в кольце Б

2.2.2. 17(20)2-и 17(20)£-прегна-5,17(20)-диен-21-оиламиды с полярными заместителями в амидном фрагменте

2.3.1. Циклизация прегна-5,17(20)-диен-21 -оил-(2'-гидроксиэтил)-амидов в 2'-{[(Е)-андрост-5-ен-17-илиден]-метил}оксазолины

41

2. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

2.1. Перегруппировка 17а-бром-21-иод-Зр-ацетокси-прегн-5-ен-20-она в 55 Зр-ацетоксипрегна-5,17(20)-диеи-21-оиламиды

2.1.1. Механизм перегруппировки ^

2.1.2. Синтез 3(3-ацетоксипрегна-5,17(20)-диен-21-оиламидов 58 2.2.17(20^- и 17(20)£'-прегна-5,17(20)-диен-21-оиламиды

2.2.1. Разделение и характеристика 17(20)2- и 17(20)£'-изомеров

70

2.3. 2'-{[(£)-андрост-5-ен-17-илиден]-метил}оксазолины

77

2.3.2. (4'/?)- и (4'5)- 4'-замещенные 2'-{[(£)-андрост-5-ен-17-илиден]- ^ метил} оксазолины

2.4. Результаты первичного тестирования биологической активности

синтезированных соединений.

2.4.1. Влияние синтезированных соединений на пролиферацию и ^

жизнеспособность клеток MCF-7, LNCaP и Hep G2.

2.4.2. Влияние 17(20)2- и 17(20)£- прегна-5,17(20)-диен-21-

оиламидов на биосинтез триглицеридов и холестерина в клетках ^ Нер в2

2.4.3. Молекулярный докинг синтезированных соединений в центр

У о

связывания оксистеринов ядерного рецептора ЬХГф.

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1. Реактивы

3.2. Инструментальные методы

3.3. Хроматографические методы

3.4. Синтез исходных соединений и необходимых стандартов

3.4.1. Зр-Ацетоксипрегн-5-ен-20-он

3.4.2. ЗР-Ацетокси-5а,6р,17а,21-тетрабром-20-кетопрегнан

3.4.3. Зр-Ацетокси-17а-бром-21-иодпрегн-5-ен-20-он

3.4.4. 3{3-Ацетокси-17а-бромпрегн-5-ен-20-он

3.4.5. Циклогексанонциангидрин

3.4.6. 1,3-Диазаспиро[4,5]декан-2,4-дион

3.4.7. 1-Аминоциклокексилкарбоновая кислота

3.4.8. Метиловый эфир 1-аминоциклокексилкарбоновой кислоты

3.4.9. (1-Аминоциклогексил)метанол

3.5. Синтез прегна-5,17(20)-диен-21-оиламидов

3.5.1. 3(3-Ацетокси-21-(амино)-21-оксопрегна-5Д7(20)-диен

3.5.2. Общая методика синтеза 3(3-ацетоксипрегна-5Д7(20)-диен-21- . по

1ОУ

оиламидов

3.5.3.3 З-Ацетокси-21 - {[2-(бис-2,2-диацетоксиметил)-2-иропил]-1 -амино}-21-оксопрегна-5,17(20)-диен и 3(3-Ацетокси-21-{[(трис-

2,2,2-триацетоксиметил)метил]-1 -амино} -21 -оксопрегна- \ 09 5,17(20)-диен

3.5.4. Разделение 17(20)2- и 17(20)Я-Зр-ацетоксипрегна-5,17(20)-диен-21 -оиламидов

3.5.5. Общая методика удаления ацетатных защит [синтез 17(20)2- и 17(20)£-3 (З-гидроксипрегна-5,17(20)-диен-21 -оиламидов]

3.5.6. Метиловый эфир К-[ЗР-гидрокси-21-оксопрегна-5,17(20)-диен-21-й л] глицина

3.5.7. Диметиламид 14-{[ 17(20)£]-3р-ги дрокси-21 -оксопрегна-5,17(20)-диен-21 -ил} глицина

3.6.1. Общая методика синтеза 2'-{[(£)-ЗР-ацетоксиандрост-5-ен-17-илиден]метил} -оксазолинов

3.6.2. 2' - {[(£)-3 (З-гидроксиандрост-5-ен-17-и ли ден] метил } -оксазолины

3.6.3. 17- {[(4 '/?)-4' -(ги дроксиметил)-4' ,5' -дигидро-1' ,3' -оксазол-2' -ил]метилен}-андрост-5-ен-3(3-ол и 17-{[(4'£)-4'-(гидроксиметил)-4' ,5' -дигидро-1' ,3' -оксазол-2' -ил]метилен}андрост-5-ен-Зр-ол

3.6.4. Метил (4'5)-2'-{[(£)-Зр-гидроксиметиландрост-5-ен-17-илиден]метил}-4',5'-дигидро-1 ',3'-оксазол-4'-карбоксилат и метил (4'Я)-2'-{[(£)-Зр-гидроксиметил-андрост-5-ен-17-илиден]метил} -4' ,5 '-дигидро-1 ',3 '-оксазол-4'-карбоксилат

115

3.6. Синтез 2'-{[(£)-андрост-5-ен-17-илиден]- метил}оксазолинов

117

119

120

120

3.6.5. Метил (4'/?5)-2'-{[^-3(3-гидроксиметиландрост-5-ен-17- ^ илиден]метил} -4' ,5' -дигидро-1' ,3 '-оксазол-4' -карбокси лат

3.6.6.(4'Л5)-2'-{[(£)-3(3-гидроксиметиландрост-5-ен-17-илиден]метил}-^М-диметил-4',5'-дигидро-1 ',3'-оксазол-4'- 122 карбоксамид.

3.7. Молекулярное моделирование

3.8. Биологическая активность синтезированных соединений

3.8.1. Культуры клеток

3.8.2. Влияние соединений на жизнеспособность клеток

3.8.3. Влияние соединений на уровень биосинтеза холестерина и триглицеридов

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Новый подход к синтезу 21-азотсодержащих стероидных производных»

ВВЕДЕНИЕ

Стероиды - важнейший класс регуляторных молекул, возникший в процессе эволюции живых организмов. В течение многих десятилетий стероиды приковывают к себе внимание биохимиков, эндокринологов, медиков, химиков и фармакологов. Направленная химическая модификация стероидной молекулы является одним из наиболее эффективных и плодотворных подходов к созданию новых биологически активных соединений. Синтетические стероидные производные были и остаются в настоящее время важнейшим инструментом для фундаментальных исследований в различных областях биохимии, медицинской химии, эндокринологии, клеточной и молекулярной биологии, а также основой для разработки новых лекарственных препаратов.

Среди синтетических биологически активных стероидов важное место занимают азотсодержащие производные (азастероиды). В настоящее время разработаны общие подходы к синтезу производных стероидов, содержащих атомы азота в различных положениях цикла и в периферических заместителях, а также к синтезу аналогов стеринов и желчных кислот с азотсодержащей боковой цепью. Синтетические схемы постоянно совершенствуются, развиваются и дополняются новыми, что обеспечивает возможность получения множества новых биологически активных азастероидов. Работы по синтезу и структурному исследованию азастероидов ежегодно цитируются в тематических обзорах "Steroids: reactions and partial synthesis", публикуемых в журнале "Natural Products Reports".

Успехи в рациональном дизайне азастероидов и результаты биологических испытаний свидетельствуют, что для новых соединений этого ряда можно предсказать наиболее вероятные биологические мишени, а успешный поиск новых азастероидов с заданной биологической активностью целесообразно проводить среди соединений, обладающих определенными структурными особенностями. В частности, стероидные производные, модифицированные азотсодержащими заместителями в кольце D являются эффективными и специфичными ингибиторами важнейших ферментов из семейства цитохромов Р450 [1,2], агонистами или антагонистами стероидных рецепторов [3,4], регуляторами сигнальных процессов в клетке [5]. Соединения этого ряда обладают высоким фармакологическим потенциалом, некоторые уже используются в практической

медицине, как средства для лечения андроген-зависимых онкологических заболеваний [6-9], а также как лекарственные препараты с противовирусной, противогрибковой, анти-бактериальной и анти-паразитарной активностью [10,11].

Дизайн, синтез и изучение новых стероидных производных с азотсодержащими заместителями в кольце Б, обладающих разной структурой и различной ориентацией азотсодержащего фрагмента относительно стероидного цикла, привлекают пристальное внимание химиков в течение двух последних десятилетий. В настоящее время химический синтез этих соединений представляет собой обширную и хорошо разработанную область (см. обзор литературы настоящей диссертации). Тем не менее, прогресс в этой области во многом сдерживается сложностью, трудоемкостью и высокой стоимостью существующих методов. Очевидно, что поиск новых синтетических схем, разработка эффективных экспериментальных методик и получение новых стероидных производных с азотсодержащими заместителями в кольце Б являются важной и актуальной задачей.

Настоящая диссертационная работа является составной частью исследований, проводимых в лаборатории Синтеза физиологически активных соединений ФГБУ "ИБМХ" РАМН в рамках направления "Поиск молекулярных мишеней, компьютерное конструирование и получение биологически активных веществ, исследование их фармакологического действия и безопасности. Создание систем транспорта лекарств"

Цель настоящей работы - создание оригинальной схемы синтеза 21-азотсодержащих стероидных производных на основе перегруппировки 20-кетостероидных 17,21-дигалогенидов под действием аминов.

По этой схеме в данной работе осуществлен синтез двух серий новых азотсодержащих стероидных производных - изомерных 17(20)2- и 17(20)£-прегна-5,17(20)-диен-21-оил амидов и 2'-{[(£)-андрост-5-ен-17-илиден]-

метил}оксазолинов с различными функциональными заместителями в азотсодержащем фрагменте.

Наличие в синтезированных соединениях сопряженной 17(20)-двойной связи приводит к конформационно жестким структурам с различной ориентацией боковых заместителей по отношению к стероидному фрагменту. Эти структурные особенности, очевидно, должны влиять на свойства синтезированных соединений в биологических системах.

В ходе выполнения данной работы были поставлены и успешно решены следующие задачи:

1) Изучение перегруппировки 17а-бром-21-иод-Зр-ацетоксипрегн-5-ен-20-она в Зр-ацетоксипрегна-5,17(20)-диен-21 -оиламиды.

2) Получение, характеристика, структурное исследование и молекулярное моделирование изомерных 17(20)2- и 17(20)£-прегна-5,17(20)-диен-21-оил амидов.

3) Разработка метода циклизации 17(20)2-и 17(20)£-прегна-5,17(20)-диен-21 -оил-(2'-гидроксиэтил)-амидов; синтез, структурное исследование и молекулярное моделирование 2'- {[(£)-андрост-5-ен-17-илиден]- метил} оксазолинов.

4) Первичное тестирование биологической активности синтезированных соединений в культуре клеток млекопитающих.

Основные положения, выносимые на защиту.

1) Перегруппировка 20-кетостероидных 17,21-дигалогенидов под действием аммиака, первичных и вторичных аминов, приводящая к смеси соответствующих 17(20)2- и 17(20)£-прегна-5,17(20)-диен-21 -оиламидов.

2) Синтез 17(20)2- и 17(20)£'-прегна-5,17(20)-диен-21-оиламидов, различающихся структурой амидного фрагмента, разделение 17(20)2- и 17(20)£-изомеров; определение конфигурации заместителей при двойной связи 17(20) и структурное изучение синтезированных соединений.

3) Циклизация 17(20)2- и 17(20)£'-прегна-5,17(20)-диен-21-оил-(2'-гидроксиэтил)-амидов в 2'-{[(£)-андрост-5-ен-17-илиден]-метил}оксазолины; синтез,

структурное изучение и молекулярное моделирование синтезированных соединений, в том числе (4'/?)- и (4',5)- 4'-замещенных 2'-{[(£)-андрост-5-ен-17-илиден]- метил} оксазолинов.

4) Обнаружение способности 17(20)£'-прегна-5,17(20)-диен-21 -оиламидов и 2'-[ (-£)-андрост-5-ен-17-илиден]-метил }оксазолинов регулировать биосинтез холестерина и триглицеридов в клетках Нер 02, а также моделировать биологическую активность эндогенных стеринов, оксигенированных в боковой цепи.

ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ СОКРАЩЕНИЯ И ОБОЗНАЧЕНИЯ

Ас20 - ангидрид уксусной кислоты;

АсОН - уксусная кислота;

AIBN - динитрил азобисизомасляной кислоты;

BINAP - 2,2'-бис(дифенилфосфино)-1 Д'-бинафтил;

BzCl - бензоил хлорид;

DCM - метилен хлористый;

DDQ - 2,3-Дихлор-5,6-дициан-1,4-бензохинон;

DEAD - диэтилазодикарбоксилат;

DHP - дигидропиран;

DIAD - диизопропилазодикарбоксилат;

DibaH - диизобутилалгоминийгидрид;

DIC - (диметиламино)изопропилхлорид хлоргидрат;

DIPEA - диизопропилэтиламин;

DMAP - 4-диметиламинопиридин;

DMCA - 1\[,]\[-диметиламид Зр-гидроксихол-5-еновой кислоты;

DMF - 1Ч,М-диметилформамид;

DMSO - диметилсульфоксид;

EDC - 1,2-дихлорэтан

Et3N - триэтиламин;

ЕЮ Ас - этиловый эфир уксусной кислоты ЕЮН - этиловый спирт

FmocOSu - 9-флуоренилметил N-сукцинимидил карбонат;

HepG2 - линия клеток гепатобластомы человека;

HFIP - гексафтороизопропиловый спирт;

НМРА - гексаметилфосфотриамид;

HOBt - N-гидроксибензотриазол;

КО Ас - ацетат калия;

LDA - литий диизопропилами;

LNCaP - линия клеток карциномы простаты человека;

LXRa и LXR(3 (liver X receptors) - активируемый (248)-24,25-эпоксихолестерином

ядерный рецептор, контролирующий экспрессию многих генов, учавствующих в

метаболизме липидов и липопротеинов; существуют альфа- и бета- изоформы;

MCF-7 - линия клеток карциномы молочной железы человека;

шСРВА - м-хлоропероксибензойная кислота;

MeCN - ацетонтрил;

Mel - иодистый метил;

МеОН - метиловый спирт;

MsCl - метансульфонилхлорид;

МТТ - 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий бромид;

MW - микроволновое излучение;

NaOAc - ацетат натрия;

NaOEt - этилат натрия;

NBS - N-бромсукцинимид;

n-BuOH - н-бутиловый спирт;

NH4OAC - ацетат аммония;

PBS (phosphate buffered saline) - фосфатсодержащий физиологический раствор; РСС-А1203 - пиридиний хлорхромат на оксиде алюминия; PhMe - толуол;

PPTS - пиридиний-4-толуолсульфонат;

PS-TrCl - трифенилхлорметан на полистирольной подложке;

p-TSA - п-толуолсульфокислота;

Ру- пиридин;

РуВОР - бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинофосфоний гексафторофосфат;

SREBP (sterol regulatory element-binding protein) - регуляторный белок, протеолиз

которого контролирует экспрессию важнейших генов стероидогенеза;

TBAF - тетрабутиламмоний фторид;

TBSC1 - трет-бутилдиметилсилил хлорид;

t-BuOK - трет-бутилат калия;

THF - тетрагидрофуран;

TMG- 1,1,3,3-тетраметилгуанидин;

TMSC1 - триметилхлорсилан;

ТвС1 - п-толуолсульфохлорид.

В разделе "1. Обзор литературы" для обозначения обсуждаемых соединений использована нумерация арабскими цифрами; в разделах "2. Результаты и обсуждение" и "3. Экспериментальная часть" для обозначения исследованных в работе соединений использована нумерация арабскими цифрами в круглых скобках.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ СИНТЕЗ СТЕРОИДОВ С АЗОТСОДЕРЖАЩИМИ ЗАМЕСТИТЕЛЯМИ В КОЛЬЦЕ Э

В настоящее время во многих научных центрах и в исследовательских отделах фармацевтических компаний активно проводятся работы по химическому синтезу азотсодержащих стероидных производных, подавляющих активность некоторых ферментов из семейства цитохромов Р450 (в первую очередь ингибиторов 17сс-гидроксилазы-17/20-лиазы СУР 17, ароматазы СУР19) и 24-стерол метилтрансферазы (8МТ) - соединений с противораковой и противоинфекционной активностью). Значительное количество современных публикаций посвящено синтезу новых азотсодержащих регуляторов сигнальных процессов - агонистов и антагонистов стероидных рецепторов.

Работы по химическому синтезу азотсодержащих стероидных производных ранее неоднократно обсуждались в обзорной литературе [12-18]. В настоящем обзоре, состоящем из трех глав, собрана информация о работах по химическому синтезу биологически активных стероидов с различными азотсодержащими заместителями в кольце Б, опубликованных за последние 15 лет. В обзоре цитируются работы посвященные синтезу целевых азастероидов исходя из 17-кетостероидов (глава 1), из 20-кетостероидов (глава 2), а также прочим синтетическим подходам (глава 3). Вопросы структурного изучения полученных соединений, их взаимодействия с биологическими мишенями и установления корреляции "структура-активность" в данном обзоре не рассматриваются.

1.1. СИНТЕЗ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ ПРОИЗВОДНЫХ ИЗ 17-КЕТОСТЕРОИДОВ

Соединения, способные избирательно блокировать биосинтез андрогенов и активность 17а-гидроксилазы-17/20-лиазы (СУР 17) в клетках простаты, широко применяются в терапии андроген-зависимых онкологических заболеваний и являются наиболее эффективными препаратами для лечения рака простаты [19-23]. В рамках программы по поиску и химическому синтезу ингибиторов СУР 17 был осуществлен синтез нескольких тысяч стероидных производных с азотсодержащими заместителями в кольце Б и разработаны оригинальные синтетические схемы, включающие превращение 17-кетостероида в

)

активированное производное и последующую реакцию с подходящим нуклеофилом.

Поттер и соавторы [24] провели синтез серии ингибиторов СУР 17 - 17-пиридилзамещенных А16-стероидов 3 - 6 из 3[3-ацетоксиандрост-5-ен-17-она 1 (схема 1).

Рс1(РРИ)2С12 Ме Ртг тнг, н2о

^СЛ Ка?СО,

2. N004, МеОН/ Н20

НО

"И2пС1

СП 2

^-Рс1(РРИ3)2Вг

'К^гпа

Рс1(РРН3)2С12

2. ЖаОЯ, МеОН/

н2о

[4-Ру(МеО)3В] и Рс1(РРИ3)2С12

4(55%) 5 (53%)

Схема 1

Кетон 1 был превращен в 17-енолтрифлат 2 обработкой ангидридом трифторметансульфокислоты в присутствии 2,6-дитретбутил-4-метилпиридина, и полученный продукт 2 вводился в реакцию с пиридилсодержащими нуклеофилами в присутствии палладиевых катализаторов Целевые продукты получали после удаления ацетатной защиты. В синтезе 17-(3-пиридил)-андроста-5,16-диена 3 в качестве реагента и катализатора использовались: диэтил(3-пиридил)боран и бис-(трифенилфосфин)палладий(П) хлорид; в синтезе 17-(2-пиридил)-андроста-5,16-диена 4 использовались (2-пиридил)цинк хлорид и (изопропенил)-бис-(трифенилфосфин)палладий(П) бромид; в синтезе 17-(2-пиридилметил)-андроста-5,16-диена 6 использовались (2-пиколил)цинк хлорид и (изопропенил)-бис-(трифенилфосфин)палладий(П)-бромид. Из-за нестабильности 4-пиридил-

металлоорганических реагентов в синтезе 17-(4-пиридил)-андроста-5,16-диена 5 был использован полученный in situ триметокси-(4-пиридил)боронат лития в присутствии бис-(трифенилфосфин)палладий(П) хлорида.

Хартман и соавторы [25] использовали тот же 17-енолтрифлат 2 для получения серии стероидных оксимов 11-14, ингибирующих СУР 17 (схема 2).

2

Схема 2

Реакция 17-енолтрифлата 2 с этилвиниловым эфиром в присутствии каталитических количеств тетракис-(трифенилфосфин)палладия, с последующим (3-элиминированием и кислотным гидролизом приводила к смеси двух продуктов -непредельного альдегида 7 и непредельного кетона 8. Обработка этих соединений гидроксиламином давала оксимы 11 и 12, соответственно. Получение 14,16-диен-20-она 9 из 16-ен-20-она 8 проводили по методу [26], включающему последовательно: бромирование л5 бромом, аллильное бромирование в положение 15 Ы-бромсукцинимидом, и исчерпывающее дегидробромирование интермедиата иодидом натрия. Реакция 14,16-диен-20-она 9 с трибутилоловогидридом приводила к восстановлению А16 и образованию кетона 10 в виде смеси изомеров. Обработка кетонов 9 и 10 гидроксиламином давало оксимы 13 и 14, соответственно.

В работах [27,28] был использован Л16,17-иодид 17 (схема 3). Дегидроэпиандростерон 15 превращали в гидразон 16, который давал целевой иодид 17 под действием иода в присутствии 1,1,3,3-тетраметилгуанидина. В синтезе пиримидиновых производных 18 и 19 Хандратта и соавторы [27] использовали реакцию иодпроизводного 17 с (2-трибутилстаннил)пиразином или (5-трибутилстаннил)пиразином в присутствии катализатора тетракис(трифенилфосфин)палладий, но выход соединений 18 и 19 составил лишь 10 и 15 %. Акс и соавторы [28], проводя в Рё(П)-катализируемое аминокарбонилирование иодпроизводного 17 получили карбоксамидопроизводные 20 с высоким выходом.

I* И, Н, (СН2)5, н, н, и

Я1 = 1-Ви, РИ, (СН2)5, СН2С02Ме, СН(СН3)2С02Ме, С(С02Ме)21-Рг

Схема 3

Прогресс в синтезе 17-азолсодержащих ингибиторов СУР 17 был, достигнут Ньяром и соавторами [29]. Обработка 3[3-ацетоксиэпиандростерона 1 РОС13 в условиях реакции Вильсмейера приводила к 3(3-ацетокси-17-хлор-16-формиландроста-5,16-диену 21 - важному интермедиату в синтезе 17-азолсодержащих стероидов. Наличие 16-формильной группы способствовало возможности прямого замещения 17-хлора на азотистый гетероцикл. В работе [29]

описано взаимодействие соединения 21 с азотистыми гетероциклами, приводящее к ингибиторам СУР 17: 23, 25, 28, 29 и 33 (схема 4).

Реакция соединения 21 с натриевым производным 1,2,4-триазола приводила с высоким выходом к 1'-замещенному триазолиду 22, который под действием катализатора [Rh(dppp)2+CT], полученного in situ из

бис(трифенилфосфин)родий(1)карбонилхорида и 1,3-

бис(дифенилфосфино)пропана, отщеплял 16-карбонильную группу, давая соединение 23. Обработка соединения 21 натриевыми производыми имидазола давала сложную смесь продуктов, однако реакция соединения 21 с имидазолом в присутствии К2С03 дала 16-формилзамещенный имидазолид 24 с высоким выходом, который после нагревания в бензонитриле в присутствии 10% Pd/C давал продукт деформилирования 25 с выходом 76%. Реакция соединения 21 с тетразолом в присутствии Li2C03 приводила к смеси изомеров 26 и 27 (выход 28 % и 45 %, соответственно), которые после деформилирования обработкой (трис-трифенилфосфин)родийхлоридом в кипящем толуоле давали продукты 28 и 29, соответственно. Реакция соединения 21 с пиразолом в присутствии К2С03 давала сложную смесь продуктов, в которой были идентифицированы пиразолиды 30, 31 и

32. Деформилирование соединения 32 (трис-трифенилфосфин)родийхлоридом в кипящем толуоле приводило к пиразолиду 33.

3[3-Ацетокси-17-хлор-16-формиландроста-5,16-диен 21 был использован Хандраттой и соавторами [27] в синтезе новых ингибиторов СУР 17 - стероидных производных содержащих остатки бензимидазола и бензотриазола 34 и 37 (схема 5).

(9%)

Схема 5

Продукт 21 реагировал с бензимидазолом при нагревании в присутствии оснований, давая с количественным выходом производное 34, деформилирование которого 10% Р<1/С приводило к целевому продукту 35. Аналогичное взаимодействие соединения 21 с бензотриазолом давало основной продукт 36 (и незначительное количество изомера 36а); деформилирование соединения 36 приводило к бензотриазолу 37 с высоким выходом.

Серия статей из лаборатории Винклера [30-33] посвящена синтезу новых ингибиторов НЬ-сигналинга исходя из эстрона 38 (схема 6).

шл

Схема получения производных 41 и 45 с пиридилсодержащими циклами Б включала образование силильного производного енол-эфира 39, его взаимодействие с литиевым производным З-бром-2-метилпиридина, что приводило к 17-а-пиколил-производному 40, циклизация которого в присутствии палладиевого катализатора (с последующим удалением защитных групп) давала целевой продукт 41 [30]. Для получения 17-эпимера 45 17а-пиколил-производное 40 сначала подвергали дегидратации нагреванием с уксусным ангидридом и

полученный с выходом 51% 17(20)Е-алкен 42 эпоксидировали мСРВА, что приводило к а-эпоксиду 43. Разрыв эпоксида под действием $т12 давал 17(3-пиколил-производное 44, которое после циклизации в присутствии Рс1(ОАс)2 и удаления ТВБ-защиты с 3|3-гидроксильной группы превращалось в целевой продукт 45 (суммарный выход на стадиях 40 —> 45 составлял около 7%).

Для синтеза соединений 49 и 52, содержащих пиперидиновый или пирролидиновый цикл Б была разработана оригинальная схема, основанная на новой реакции бициклизации [34]. Полученный по методу [35] 17а-эпоксид 46 обрабатывали третбутилсилильным эфиром пентинола-4 в присутствии бутиллития, что давало ацетиленид 47. Избирательное восстановление тройной связи приводило или к Е'-олефину 48 или 2-олефину 50. После превращения концевой гидроксильной группы £-олефина 48 в тозилат, продукт подвегали иодциклизации [34], что приводило к стереоспецифичному замыканию иодтетрагидрофуранового цикла, а реакция последнего с жидким аммиаком давала целевой продукт 49 [33]. В отличии от £-олефина, обработка иодом 2-олефина 50 приводила к образованию оксетанового иодпроизводного 51, последующая реакция с жидким аммиаком давала целевой продукт 52 [33].

Синтез многих азастероидных гетероциклов был осуществлен с использованием в качестве исходного соединения 17-гидразона 54, получаемого из Зр-ацетоксидигидроэпиандростерона 53 обработкой гидразингидратом. В работах Абдельхалима и соавторов осуществлен синтез ряда стероидных производных, в которых пиридазиновый или пиридазоловый цикл конденсирован с кольцом Э [36,37] (схема 7). Реакция гидразона 54 с ароматическими гидразоноилгалогенидами приводила к 16-замещенному производному 55, который в присутствии оснований циклизовался в пиридазиновое производное 56 (где Я = метил, фенил или аминофенил; Аг = п-толуил, п-хлорфенил). Реакция гидразона 54 с бензоилхлоридом приводила к нецилическому бис-бензоильному производному 57, а реакция с хлоруксусным эфиром или бромацетофеноном - к пиридазиновым производным 58 или 59 и 60, соответственно. Конденсация гидразона 54 с бензальдегидом давала азопроизводное 61, которое при обработке тиоуксусной кислотой циклизовалось в тиазоловое производное 62. Реакция 54 с

фенилизотиоцианатом давала произодное 63, которое в присутствии тиогликолевой кислоты превращалось в пиридазоловое производное 64, а в присутствии хлоруксусной кислоты - в пиридазоловое производное 65.

Ме <9 ¡\-1ЧН2 Мем-ГШ2« Ме

меГп А^.чЧ 1 т"

Г^г^г^ х = вг(С1) * Л^Т к ЕЮИ

I I I „ / 54 \ « ~]\НАг 56

АсО^4^4^ М / (99%) \ (64-73%)

57

(64%)

■ЯГ

(72%)

(99%)

РИКСЬ РкСОСН;Вг\ Оиоксан

Ме М-МН

ЯГ

+ (78%)

Ме

¿И

NHAr

56

(64-73%)

РЬ НХСНоСООН Ме /Г I,

.. —¿5

62

в (70%) 8

А 11

Ме N-14 N Ме М-м^м'1 Ь

Ме // Н Н НБСН 2СООН - ■ >

Ж5

63 \ 8

С1СН2СООИ Ме К^-^.РЬ

64 ЯН

(69%)

65 С1

(70%)

Схема 7

Фишер и соавторы [38] превращали эстрон 38 в оксиминопроизводное 66 взаимодействием с О-аллилгидроксиламином, а затем полученный продукт циклизовали в пиридилзамещенный стероид 67 нагреванием.

НО

Ме

25' 66

Ме ^

НО

Схема 8

Недавно Тэйлор и Харрис [39] разработали эффективный метод получения 17(3-аминостероидов 69 и 70 восстановительным аминированием эстрона 38 и эпиандростерона 68 с использованием бензиламина и триацетоксиборгидрида с последующим дебензилированием продуктов каталитическим гидрированием. Попытка проведения той же реакции на дегидроэпиандростероне 15

сопровождалась частичным восстановлением Л5 и для получения 17(3-амино-3(3-гидроксиандрост-5-ена 71 дегидроэпиандростерон 15 обрабатывали аллиламином и триацетоксиборгидридом, а аллильную группу удаляли диметилбарбитуровой кислотой в присутствии тетракис-трифенилпалладия (схема 9). Аминопроизводное эстрона 69 было использовано Мустафой и Тэйлором [40] в качестве исходного соединения в новом синтезе арилсульфонамидов - ингибиторов стероид сульфатазы.

но

но

/. РкСН2ЫНъ ИаВН(ОАс,), 2. Рй/С. Н2. ЕЮН

Ме

НО

НО

Ме

О

Ме

68

/. РкСН2МНъ ИаВН(ОАс)3 2. Рй/С. Н2. ЕЮН

Ме Г<Н2

Схема 9

но

О

ЛА

ъ РсКРРИ3)4

ВГ ЫаВН(ОАс)3

Ме

Франк и соавторы [41] разработали общий метод синтеза 1,4-дизамещенных триазоловых производных эстрона 76 и андростена 81 (схема 10). 17-Кетостероиды 72 и 77 восстанавливали до 17[3-гидроксипроизводных 73 и 78, продукты тозилировали и превращали в 17а-азиды 75 и 80. Реакция последних с замещенными алкинами в присутствии Си1 и трифенилфосфина приводила к целевым триазолидам 76 и 81 с высоким выходом.

КВН4, МеУ" Ме 0Т5 Ме N3

МеОН/РСМ^ Тиа/Ру^Лу

78 79 80

(75 - 86%)

К - РИ; 4-МеОСцН4; 4-Г-С6Н4; 4-МеС<Р4; 4-Е/С6Н4; 4-РгС^14; с-Нех; с-Р; с-С5Н0

Схема 10

Хартман и соавторы [25] в синтезе ингибиторов СУР 17 - оксимов 87 и 88 конденсировали тетрагидропиранильное производноге андростенона 82 с натриевой солью цианэтилфосфоната, что приводило к непредельному нитрилу 83. Продукт 83 гидрировали (взаимодействие метанола с магнием) в предельный нитрил 84, а затем полученный продукт превращали в альдегид 85 под действием диизобутилгидрида. Кетон 86 получали взаимодействием альдегида 85 с иодистым метилом в условиях реакции Гриньяра с последующим окислением. Оксимы 87 и 88 были получены обработкой альдегида 85 и кетона 86 гидроксиламином (схема 11).

(ЕЮ)2РОСИ2СИ КаН

(62%) (97%)

Схема 11

МеОН"

0\ЬаН

Конденсация 3[3-ацетокси-5а-андростан-17-она 53 с бензоилацетонитрилом была использована Эльмеджидом и соавторами [42] для получения 17-пиразол- и 17-пиримидил-содержащих стероидов 90 и 91 (схема 12).

Продукт конденсации Кневенагеля - 3(3-ацетокси-17(2'-бензоилацетонитрил-2'-илидено)андростан 89 при взаимодействии с гидразином или фенилгидразином давал продукты 90, а при взаимодействии с мочевиной, тиомочевиной и гуанидин гидрохлоридом давал продукты 91.

Сербскими химиками был разработан синтез 17-пиколил- и 17-пиколиниден-содержащих ингибиторов ароматазы 92 - 99 (схема 13) [43-45]. Реакция дегидроепиандростерона 15 с а-пиколиллитием в ТГФ приводила к 17а-пиколилсодержащему стероиду 92, дегидратация которого кипящим уксусным ангидридом давала пиколиниденовое производное 93. Окисление соединений 92 и 93 по Опенауэру приводило к 4-ен-З-онам 94 и 95, соответственно, обработка соединения 92 давала 1,4,6-триен-З-он 96; обработка 3|3-ацетокси-17-

пиколиниден-прегн-5-ена 93 м-хлорнадбензойной кислотой в зависимости от условий реакции приводила к соединениям 97,98 и 99.

Бандай и соавторы [46] разработали общую схему синтеза изоксалиновых производных 17-оксоандростана 104 (схема 14). Схема включала конденсацию кетона 1 с циануксусным эфиром; восстановление полученного продукта 100 натрийборгидридом в метаноле; защиту гидроксильной группы тетрагидропираниловым эфиром; восстановление соединения 102 DIBAL с получением непредельного альдегида 103; и реакцию последнего с ароматическими нитрилоксидами (получающимися in situ из соответствующих хлороксимов и оснований). Последняя реакция проходит как диполярное циклоприсоединение к активированному олефину и характеризуется высокой региоселективностью; выход изоксалиновых производных 104 составил 75 - 85 %.

АсО

АсО

NCCH-COOEt, АсОН, AcÓNH4, РИМе

104 X = Н, Me, Hal, (75-85%) Ы02, ОМе

ArCNO THF

.. V-COOEt \¿-v

NaBH+MeOH^*.рЛН

DHP, TsOH

100

(90%)

101

(98%)

DCM

102

(95%)

OTHP

D1BAL, Phhie

103

(50%)

Схема 14

Бруттомессо и соавторы недавно предложили новый синтез N-замещенных 2,5-дикетопиперазинов 108 [47] (схема 15). Трет-бутилдиметилсилильное производное дегидроандростерона 105 превращали в альдегид 106 по методу [48], и полученный продукт вводили в 4-компонентную реакцию Уги с аминами, хлоруксусной кислотой и изоцианидами с последующей обработкой аддукта 107 щелочью при микроволновом облучении, что приводило к дикетопиперазинам 108.

TBDMSO

1. KCN, АсОН, МеОН

2. TMSC1, DMAP, Et3N

3. DIBAL, THF, CH2Cl2

сно

S-VOTMS R,NHi RfNC

106

(85%)

ЕЮН или МеОН

--OTMS

TBDMSO

108

(57-83%)

R1 = Bn, Me, Ph, n-Bu, Bn R2 = c-Hex, c-Hex, c-Hex, c-Hex, Bn

Схема 15

16-Арилметиленовые производные дигидроэпиандростерона 109, вступая в реакцию с циануксусным эфиром, циантиоацетамидом или динитрилом малоновой

кислоты давали пиридоновые, тиопиридоновые или пиридиновые производные 110 - 112, обладающие противовоспалительной активностью [49,50] (схема 16).

Схема 16

В работе [51] был проведен синтез большой серии новых 16-арилиденандростановых производных (в том числе азотсодержащих) исходя из соединения 109.

В синтезе новых потенциальных блокаторов нервного импульса (соединений 115 и 116) Дьюби и соавторы [52] использовали 3ß-rHflpOKCH-16-(2 и 3-пиридилметилен)-17-оксо-5-андрост-3-ены 113 и 112, полученные конденсацией дегидроэпиандростанона 15 с 2- и 4- пиридинкарбоксиальдегидами (схема 17).

Фишер и соавторы [38] получили серию N-замещенных пиразолов, эффективно ингибирующих активность 17ß-rHÄpOKCHCTepoHfl-ÄeraÄporeHa3bi. 3-Замещенный эстрон 117 в присутствии t-BuOK реагировал со сложными эфирами с образованием 16-этилиденовых производных 118. Обработка последних гидразином давала пиразолсодержащие стероиды 119. Алкилирование соединений 119 иодистым метилом в присутствии гидрида натрия или акрилонитрилом в

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Стулов, Сергей Владимирович, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Swanson H.J., Njar V.C.O., Yu Z., Castro D.J., Gonzalez F.J., Williams D.E., Huang Y., Kong A.-N.T., Doloff J.C., Ma J., Waxman D J., Scott E.E. Targeting drug-metabolizing enzymes for effective chemoprevention and chemotherapy. // Drug Met. Disp. - 2010. - V. 38. - P. 539-544.

2. Azzouni F., Mohler J. Role of 5a-reductase inhibitors in benign prostatic diseases. // Prostate Cancer Prostatic Dis. - 2012. - V. 15. - P. 222-230.

3. Sadar M.D. Advances in small molecule inhibitors of androgen receptor for the treatment of advanced prostate cancer. // World J. Urol. - 2012. - V. 30. - P. 311-318.

4. Bluemn E.G., Nelson P.S. The androgen/androgen receptor axis in prostate cancer. // Curr. Opin. Oncol. - 2012. - V. 24. - P. 251-257.

5. Heretsch P., Tzagkaroulaki L., Giannis A. Cyclopamine and hedgehog signaling: chemistry, biology, medical perspectives. // Angew. Chem., Int. Ed. Engl. - 2010. - V. 49.-P. 3418-3427.

6. Bruno R.D., Vasaitis T.S., Gediya L.K., Purushottamachar P., Godbole A.M., Ates-Alagoz Z., Brodie A.M.H., Njar V.C.O. Synthesis and biological evaluations of putative metabolically stable analogs of VN/124-1 (TOK-OOl): Head to head antitumor efficacy evaluation of VN/124-1 (TOK-OOl) and abiraterone in LAPC-4 human prostate cancer xenograft model. // Steroids. - 2011. - V. 76. - P. 1268-1279.

7. Stein M.N., Goodin S., Dipaola R.S. Abiraterone in prostate cancer: A new angle to an old problem. // Clin. Cancer Res. - 2012. - V. 18. - P. 1848-1854.

8. Scott L.J., Yang L.P.H., Lyseng-Williamson K.A. Abiraterone acetate: A guide to its use in metastatic castration-resistant prostate cancer. // Drugs & Aging. - 2012. - V. 29. - P. 243-248.

9. Bedoya D.J., Mitsiades N. Abiraterone acetate, a first-in-class CYP17 inhibitor, establishes a new treatment paradigm in castration-resistant prostate cancer. // Expert Rev. Anticancer Ther. - 2012. - V. 12. - P. 1-3.

10. Nes W.D., Zhou W., Ganapathy K., Liu J.-L., Vatsyayan R., Chamala S., Hernandez K., Miranda M. Sterol 24-C-methyltransferase: An enzymatic target for the disruption of ergosterol biosynthesis and homeostasis in Cryptococcus neoformans. // Arch. Biochem. Biophys. - 2009. - V. 481. - P. 210-218.

11. Gros L., Castillo-Acosta V.M., Jimenez C.J., Sealey-Cardona M., Vargas S., Estevez A.M., Yardley V., Rattray L., Croft S.L., Ruiz-Perez L.M., Urbina J.A., Gilbert I.H., Gonzalez-Pacanowska D. New azasterols against Trypanosoma brucei: Role of 24-Sterol methyltransferase in inhibitor action. // Antimicrob. Agents Chemother. - 2006. -V. 50. - P. 2595-2601.

12. Singh H., Parashar V.V., Padmanabhan S., Mathur R.B. Azasteroids: syntheses and significance. // Indian. J. Pharm. Educ. - 1970. - V. 4. - P. 2-20.

13. Ninomiya I. Azasteroids. Their syntheses and biological activities. // Yuki. Gosei. Kagaku. Kyokaishi. - 1972. - V. 30. - P. 318-342.

14. Huisman H.O. Approaches to total synthesis of heterocyclic steroidal systems. // Angew. Chem., Int. Ed. Engl. - 1971. - V. 10. - P. 450-459.

15. Huisman H.O. Total synthesis of heterocyclic steroidal systems. // Int. Rev. Sci. Org. Chem., Ser. One. - 1973. - V. 8. - P. 235-267.

16. Huisman H.O., Speckamp W.N. Synthesis of heterocyclic steroidal systems. // Int. Rev. Sci. Org. Chem., Ser. Two. - 1976. - V. 8. - P. 207-236.

17. Morzycki J.W. Partial synthesis of azasteroids. // Polish. J. Chem. - 1995. - V. 69. -P. 321-340.

18. Ibrahim-Ouali M., Rocheblave L. Recent advances in azasteroids chemistry. // Steroids. - 2008. - V. 73. - P. 375-407.

19. Njar V.C.O., Brodie A.M. Inhibitors of 17a-hydroxylase/17,20-lyase (CYP17) potential agents for the treatment of prostate cancer. // Curr. Pharm. Des. - 1999. -V. 5. - P. 163-180.

20. Hartmann R.W., Ehmer P.B., Haidar S., Hector M., Jose J., Klein C.D.P., Seidel S.B., Sergejew T.F., Wachall B.G., Wachter G.A., Zhuang Y. Inhibition of CYP 17, a new strategy for the treatment of prostate cancer. // Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. - 2002. - V. 4. - P. 119-128.

21. Hakki T., Bernhardt R. CYP 17- and CYP1 IB-dependent steroid hydroxylases as drug development targets. // Pharmacol. Ther. - 2006. - V. 111. - P. 27-52.

22. Bruno R.D., Njar V.C.O. Targeting cytochrome P450 enzymes: A new approach in anti-cancer drug development. // Bioorg. Med. Chem. - 2007. - V. 15. - P. 5047-5060.

23. Clement O.O., Freeman C.M., Hartmann R.W., Handratta V.D., Vasaitis T.S., Brodie A.M.H., Njar V.C.O. Three dimensional pharmacophore modeling of human CYP17 inhibitors. Potential agents for prostate cancer therapy. // J. Med. Chem. - 2003. - V. 46. - P. 2351 - 2351.

24. Potter G.A., Barrie S.E., Jarman M., Rowlands M.G. Novel steroidal inhibitors of human cytochrome P450 (17R) (17R-hydroxylase-C17,20-lyase): potential agents for the treatment of prostate cancer. // J. Med. Chem. - 1995. - V. 38. - P. 2463 -2471.

25. Hartmann R.W., Hector M., Haidar S., Ehmer P.B., Reichert W., Jose J. Synthesis and evaluation of novel steroidal oxime inhibitors of P450 17 (17a-Hydroxylase/C17-20-Lyase) and 5a-reductase types 1 and 2. // J. Med. Chem. -2000.-V. 43.-P. 4266-4277.

26. Solo A.J., Singh B. A facile synthesis of 3a-acetoxy-20-keto-5,14,16-pregnatriene. //J. Org. Chem. - 1965. - V. 30. - P. 1658-1659.

27. Handratta V.D., Vasaitis T.S., Njar V.C.O., Gediya L.K., Kataria R., Chopra P., Newman D. Jr., Farquhar R., Guo Z., Qiu Y., Brodie A.M.H. Synthesis, in vitro biological activity, pharmacokinetics, and antitumor activity in the LAPC4 human prostate cancer xenograft model. // J. Med. Chem. - 2005. - V. 48. - P. 2972-2984.

28. Acs P., Takacs A., Szilagyi A., Wollfling J., Schneider G., Kollar L. The synthesis of 13a-androsta-5,16-diene derivatives with carboxylic acid, ester and carboxamido functionalities at position-17 via palladium-catalyzed carbonylation. // Steroids. - 2009. - V. 74. - P. 419-423.

29. Njar V.C.O., Kato K., Nnane I.P., Grigoryev D.N., Long B.J., Brodie A.M.H. Novel 17-azolyl steroids, potent inhibitors of human cytochrome 17(R) -Hydroxylase-C17,20-lyase (P450noc): Potential agents for the treatment of prostate cancer. // J. Med. Chem. - 1998. - V. 41. - P, 902-912.

30. Winkler J.D., Isaacs A., Holderbaum L., Tatard V., Dahmane N. Design and synthesis of inhibitors of hedgehog signaling based on the alkaloid cyclopamine. // Org. Lett. - 2009. - V. 11. - P. 2824-2827.

31. Isaacs A.K., Xiang C., Baubet V., Dahmane N., Winkler J.D. Studies directed toward the elucidation of the pharmacophore of steroid-based sonic hedgehog signaling inhibitors. // Org. Lett. - 2011. - V. 13. - P. 5140-5143.

32. Winkler J.D., Isaacs A.K., Xiang C., Baubet V., Dahmane N. Design, synthesis, and biological evaluation of estrone-derived hedgehog signaling inhibitors. // Tetrahedron. - 2011. - V. 67. - P. 10261-10266.

33. Zhang Z., Baubet V., Ventocilla C., Xiang C., Dahmane N., Winkler J.D. Stereoselective synthesis of F-ring saturated estrone-derived inhibitors of hedgehog signaling based on cyclopamine. // Org. Lett. - 2011. - V. 13. - P. 46864689.

34. Wardrop D.J., Bowen E.G., Forslund R.E., Sussman A.D., Weerasekera S.L. Intramolecular oxamidation of unsaturated O-alkyl hydroxamates: A remarkably versatile entry to hydroxy lactams. // J. Am. Chem. Soc. - 2010. - V. 132. - P. 11881189.

35. Cook C.E., Corley R.C., Wall M.E. Synthesis and reactions of oxiranes obtained from 3- and 16-oxo steroids. // J. Org. Chem. - 1968. - V. 33. - P. 2789-2793.

36. Abdelhalim M.M., El-Saidi M.M., Rabie S.T., Elmegeed G.A. Synthesis of novel steroidal heterocyclic derivatives as anti-bacterial agents. // Steroids. - 2007. - V. 72. - P. 459-465.

37. Abdelhalim M.M., Kamel E.M., Rabie S.T., Mohamed N.R. Synthesis and biological evaluation of some nitrogen containing steroidal heterocycles. // Steroids. - 2011. - V. 76. - P. 78-84.

38. Fischer D.S., Allan G.M., Bubert C., Vicker N.. Smith A., Tutill H.J, Purohit A., Wood L., Packham G., Mahon M.F., Reed M.J., Potter B.V.L. E-Ring modified steroids as novel potent inhibitors of 17a-Hydroxysteroid dehydrogenase type 1. // J. Med. Chem. - 2005. - V. 48. - P. 5749-5770.

39. Taylor S.D., Harris J. Efficient syntheses of 17(3-Amino steroids. // Steroids. - 2010. -V. 76. - P. 1098-1102.

40. Mostafa Y.A., Taylor S.D. 17|3-Arylsulfonamides of 17p-aminoestra-1,3,5(10)-trien-3-ol as highly potent inhibitors of steroid sulfatase. // Bioorg. Med. Chem. -2012.-V. 20.-P. 1535-1544.

41. Frank E., Molnar J., Zupko I., Kadar Z., Wolfling J. Synthesis of novel steroidal 17a-triazolyl derivatives via Cu(I)-catalyzed azide-alkyne cycloaddition, and an evaluation of their cytotoxic activity in vitro. // Steroids. - 2011. - V. 76. - P. 11411148.

42. Elmegeed G.A., Ahmed H.H., Hussein J.S. Novel synthesized aminosteroidal heterocycles intervention for inhibiting iron-induced oxidative stress. // Eur. J. Med. Chem. - 2005. - V. 40. - P. 1283-1294.

43. Miljkovic D., Gasi K. A novel synthetic approach to 3p-acetoxy-17-picolinylidene-5-androstene-16-one. // Bull. Soc. Chim. Beograd. - 1982. - V. 47. -P. 173-181.

44. Gasi K.M., Brenesel M.Dj., Djurendic E.A., Sakac M.N., Canadi J.J., Daljev J.J., Armbruster T., Andric S„ Sladic D.M., Bozic T.T., Novakovic I.T., Juranic Z.D. Synthesis and biological evaluation of some 17-picolyl and 17-picolinylidene androst-5-ene derivatives. // Steroids. - 2007. - V. 72. - P. 31-40.

45. Djurendic E., Daljev J., Sakac M., Canadi J. Santa S.J., Andric S., Klisuric O., Kojic V., Bogdanovic G., Djurendic-Brenesel M., Novakovic S., Gasi K.P. Synthesis of some epoxy and/or N-oxy 17-picolyl and 17-picolinylideneandrost-5-ene derivatives and evaluation of their biological activity. // Steroids. - 2008. - V. 73.-P. 129-138.

46. Banday A.H., Singh S., Alam M.S., Reddy D.M., Gupta B.D., Kumar H.M.S. Synthesis of novel steroidal D-ring substituted isoxazoline derivatives of 17-oxoandrostanes. // Steroids. - 2008. - V. 73. - P. 370-374.

47. Bruttomesso A.C., Eiras J., Ramyrez J.A., Galagovsky L.R. Highly stereoselective synthesis of steroidal 2,5-diketopiperazines based on isocyanide chemistry. // Tetrah. Lett. - 2009. - V. 50. - P. 4022-4024.

48. Schor L., Gros E.G., Seldes A.M. Zn(II)-promoted D-homorearrangement of 17a-hydroxy-3p-methoxyandrost-5-ene-17|3-carbaldehyde. // J. Chem. Soc., Perkin Trans. I. - 1992. - V. 23. - P. 453-454.

49. Amr A.E., Hegab M.I., Ibrahiem A.A., Abdulla M.M. Synthesis and reactions of some fused oxazinone, pyrimidinone, thiopyrimidinone, and triazinone derivatives with a thiophene ring as analgesic, anticonvulsant, and antiparkinsonian agents. // Monatsh. Chem. - 2003. - V. 134. - P. 1395-1409.

50. Amr A.E., Abdulla M.M. Anti-inflammatory profile of some synthesized heterocyclic pyridone and pyridine derivatives fused with steroidal structure. // Bioorg. Med. Chem. - 2006. - V. 14. - P. 4341-4352.

51. Guo H., Wu H., Yang J., Xiao Y., Altenbach H-J., Qiu G., Hu H., Wu Z., He X., Zhou D., Hu X. Synthesis, characterization and biological evaluation of some 16^-arylidene androstane derivatives as potential anticancer agents. // Steroids. -2011.-V. 76.-P. 709-723.

52. Dubey S., Sharma A.K., Jindal D.P., Harvey A., Singh R., Bodhankar S.L. Synthesis and neuromuscular blocking activity of 16-(2- and 3-pyridylmethylene) dehydroepiandrosterone derivatives. // Steroids. - 2010. - V. 75. - P. 323-329.

53. Ling Y-Z., Li J-S., Liu Y., Kato K., Klus G.T., Brodie A.M.H. 17-Imidazolyl, pyrazolyl, and isoxazolyl androstene derivatives. Novel steroidal inhibitors of human cytochrome Ci7i20-Lyase (P45017a). // J. Med. Chem. - 1997. - V. 40. - P. 3297-3304.

54. Ivanyi Z., Wolfling J., Gorbe T., Szecsi M., Wittmann T, Schneider G. Synthesis of regioisomeric 17-N-phenylpyrazolyl steroid derivatives and their inhibitory effect on 17a-hydroxylase/17,20-lyase. // Steroids. - 2010. - V. 75. - P. 450^156.

55. Hartmann R.W., Hector M., Wachall B.G., Palusczak A., Palzer M., Huch V., Veith M. Synthesis and evaluation of 17-Aliphatic heterocycle-substituted steroidal inhibitors of 17a-Hydroxylase/C17-20-Lyase (P450 17). // J. Med. Chem. - 2000. - V. 43. - P. 4437-4445.

56. Wolfling J., Mernyak E., Sebok M., Schneider G. Synthesis of some steroidal oxazolines. // Collect. Czech. Chem. Commun. - 2001. - V. 66. - P. 1831-1840.

57. Wolfling J., Ilackler L., Mernyak E., Schneider G., Toth I., Szecsi M., Julesz J, Sohar P, Csampai A. Neighboring group participation. Part 15. Stereoselective synthesis of some steroidal tetrahydrooxazin-2-ones, as novel presumed inhibitors of human 5a-reductase. // Steroids. - 2004. - V. 69. - P. 451-460.

58. Wolfling J., Oravecz E.A., Ondre D., Mernyak E., Schneider G., Toth I., Szecsi M., Julesz J. Stcrcoselcctivc synthesis of some 17P-dihydrooxazinyl steroids, as novel presumed inhibitors of 17a-hydroxylase-C17<20-lyase. // Steroids. - 2006. - V. 71.-P. 809-816.

59. Ondre D., Wolfling J., Ivanyi Z., Schneider G., Toth I., Szecsi M., Julesz J. Neighboring group participation. Part 17. Stereoselective synthesis of some steroidal 2-oxazolidones, as novel potential inhibitors of 17a-hydroxylase-Cl 7,20-lyase. // Steroids. - 2008. - V. 73. - P. 1375-1384.

60. Ondre D., Wolfling J., Toth I., Szecsi M., Julesz J., Schneider G. Steroselective synthesis of some steroidal oxazolines, as novel potential inhibitors of 17a-hydroxylase-C17,20-lyase. // Sleroids. - 2009. - V. 74. - P. 1025-1032.

61. Magaraci F., Jimenez C.J., Rodrigues C., Rodrigues J.C.F., Braga M.V., Yardley V., de Luca-Fradley K., Croft S.L., de Souza W., Ruiz-Perez L.M., Urbina J., Pacanowska D.G., Gilbert J.H. Azasterols as inhibitors of sterol 24-Methyltransferase in Leishmania species and Trypanosoma cruzi. // J. Med. Chem. - 2003. - V. 46.-P. 4714-4727.

62. Banday A.H., Mir B.P., Lone l.IL, Khazir J., Suri K.A., Kumar S.M.II. Studies on novel D-ring substituted steroidal pyrazolines as potential anticancer agents. // Steroids. - 2010. - V. 75. - P. 805-809.

63. Choudhary M.I., Alam M.S. Atta-ur-Rahman., Yousuf S., Wu Y-C. Lin A-S., Shaheen F. Pregnenolone derivatives as potential anticancer agents. // Steroids. -2011.-V. 76.-P. 1554-1559.

64. Zavarzin I.V., Kamernitsky A.V., Chertkova V.V., Chernoburova E.I., Yarovenko V.N., Kraushkin M.M., Kachala V.V. Synthesis of l'-arylcarbamoylthiocarbonyl-3'-methyl-3-oxoandrost-4-eno[16a,17a-d]pyrazolines. // Arkivoc. - 2008. - (IV). -P. 62-70.

65. Мерлани М.И., Кемертелидзе Э.П., Пападопулос К., Меньшова Н.И. Синтез из тиогенина и протвотуберкулезная активность некоторых производных гидразонов 5а-с1ероидов. // Биоорг. Химия. - 2004. - №30. - С. 552-557.

66. Visbal G., San-Bias G., Maldonado A., Alvarez-Aular A., Capparelli M.V., Murgich J. Synthesis, in vitro antifungal activity and mechanism of action of four sterol hydrazone analogues against the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis. // Steroids. - 2011. - V. 76. - P. 1069-1081.

67. Wong F.F., Chen C.-Y., Chen T.-H., Iluang J.-J., Fang H.-P., Yeh M.-Y. Synthesis of 3oc-hydroxy-21-(l '-imidazolyl)-3(3-methoxylmethyl-5a-pregnan-20-one via lithium imidazole with 17a-acctylbromopregnanone. // Steroids. - 2006. -V. 71.-P. 77-82.

68. Chen C.-Y., Wong F.F., Lec Y.-H., Chou S.-Y., Huang J.-J., Yeh M.-Y. The mechanism investigation in substitution of 21-bromo-3a-hydroxy-3(3-

methoxymethyl-5a-pregnan-20-one with nucleophiles. // Steroids. - 2006. - V. 71. - P.942-948.

69. Banday A.H., Verma M., Srikakulam S., Gupta B.D., Kumar H.M.S. D-ring substituted 1,2,3-triazolyl 20-keto pregnenanes as potential anticancer agents: Synthesis and biological evaluation. // Steroids. - 2010. - V. 75. - P. 801-804.

70. Keana J.F.W., Schumaker R.R. A New method for the selective halogenation of the methyl group of the methyl ketones. // Tetrahedron. - 1970. - V. 26. - P. 51915194.

71. Shingate B.B., Hazra B.G., Salunke D.B., Pore V.S., Shirazi F., Deshpande M.V. Stereoselective synthesis and antimicrobial activity of steroidal C-20 tertiary alcohols with thiazole/pyridine side chain. // E. Eur. J. Med. Chem. - 2011. - V. 46.-P. 3681-3689.

72. Kumar M., Rawat P., Khan M.F., Rawat A.K., Srivastava A.K., Maurya R. Aza-annulation on the 16-dehydropregnenolone, via tandem intermolecular Aldol process and intramolecular Michael addition. // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2011. -V.21.-P. 2232-2237.

73. Fousteris M.A., Schubert U., Roell D., Roediger J., Bailis N., Nikolaropoulos S.S., Baniahmad A., Giannis A. 20-Aminosteroids as a novel class of selective and complete androgen receptor antagonists and inhibitors of prostate cancer cell growth. // Bioorg. Med. Chem. - 2010. - V. 18. - P. 6960-6969.

74. Mohareb R.M., Elmegeed G.A., Abdel-Salam O.M.E., Doss S.H., William M.G. Synthesis of modified steroids as a novel class of non-ulcerogenic, antiinflammatory and anti-nociceptive agents. // Steroids. - 2011. - V. 76. - P. 1190— 1203.

75. Gros L., Lorente S.O., Jimenez C.J., Yardley V., Rattray L., Wharton H., Little S., Croft S.L., Ruiz-Perez L.M., Gonzalez-Pacanowska D., Gilbert I.H. Evaluation of azasterols as anti-parasitics. // J. Med. Chem. - 2006. - V. 49. - P. 6094-6103.

76. Sharma R., Prichard D., Majer F., Byrne A.-M., Kelleher D., Long A., Gilmer J.F. Ursodeoxycholic acid amides as novel glucocorticoid receptor modulators. // J. Med. Chem.-2011,-V. 54.-P. 122-130.

77. Giera M., Renard D., Plossl F., Bracher F. Lathosterol side chain amides—A new class of human lathosterol oxidase inhibitors. // Steroids. - 2008. - V. 73. - P. 299308.

78. Renard D., Perruchon J., Giera M., Muller J., Bracher F. Side chain azasteroids and thiasteroids as sterol methyltransferase inhibitors in ergosterol biosynthesis. // Bioorg. Med. Chem. - 2009. - V. 17. - P. 8123-8137.

79. Ciobanu L.C., Poirier D. Synthesis of libraries of 16[3-Aminopropyl estradiol derivatives for targeting two key steroidogenic enzymes. // Chem. Med. Chem. -2006.-V. l.-P. 1249-1259.

80. Allan G.M., Lawrence H.R., Cornet J., Bubert C., Fischer D.F., Vicker N.. Smith A., Tutill H.J., Purohit A., Day J.M., Mahon M.F., Reed M.J., Potter B.V.L. Modification of estrone at the 6, 16 and 17 positions: Novel potent inhibitors of 17a-Hydroxysteroid dehydrogenase type 1. // J. Med. Chem. - 2006. - V. 49. - P. 13251345.

81. Labaree D.C., Reynolds T.Y., Hochberg R.B. Synthesis and evaluation of B-, C-, and D-Ring-substituted estradiol carboxylic acid esters as locally active estrogens. // J. Med. Chem. - 2001. - V. 44. - P. 1802-1814.

82. Frank E., Kardos Z., Wolfling J., Schneider G. Stereoselective synthesis of novel A5-androstenoarylpyrazoline derivatives by BF3OEt2-induced intramolecular 1,3-Dipolar cycloaddition. // Synlett. - 2007. - V. 8. - P. 1311-1313.

83. Mernyak E., Mark L., Frank E., Schneider G., Wolfling J. Electrophile-induced generation of cyclic azomethine imines from 5-steroidal-alkenyl hydrazones. // Steroids. - 2009. - V. 74. - P. 474-482.

84. Moreira V.M., Vasaitis T.S., Njar V.C.O., Salvador J.A.R. Synthesis and evaluation of novel 17-indazole androstene derivatives designed as CYP17 inhibitors. // Steroids. - 2007. - V. 72. - P. 939-948.

85. Mohameda N.R., Abdelhalimc M.M., Khadrawyd Y.A., Elmegeedc G.A., Abdel-Salam O.M.E. One-pot three-component synthesis of novel heterocyclic steroids as a central antioxidant and anti-inflammatory agents. // Steroids. - 2012. - V. 77. -P. 1469-1476.

86. Moreira V.M., Vasaitis T.S., Guo Z., Njar V.C.O., Salvador J.A.R. Synthesis of novel CI7 steroidal carbamates: Studies on CYP17 action, androgen receptor

binding and function, and prostate cancer cell growth. I I Steroids. - 2008. - V. 73.-P. 1217-1227.

87. Kadar Z., Molnar J., Schneider G., Zupko I., Frank E. A facile 'click' approach to novel 15p-triazolyl-5a-androstane derivatives and an evaluation of their antiproliferative activities in vitro. Bioorg. Med. Chem. // - 2012. - V. 20. - P. 1396-1402.

88. Kovacs D., Kadar Z., Motuan G., Schneider G., Wolfling J., Zupko I., Frank E. Synthesis, characterization and biological evaluation of some novel 17-isoxazoles in the estrone series. // Steroids. - 2012. - V. 77. P. 1075-1085.

89. Koag M., Lee S. Discovery of hypoiodite-mediated aminyl radical cyclization lacking a nitrogen radical-stabilizing group: Application to synthesis of an oxazaspiroketal-containing cephalostatin analog. // Org. Lett. - 2011. - V. 13. - P. 4766-4769.

90. Kou Y., Koag M.C., Cheun Y., Shin A., Lee S. Application of hypoiodite-mediated aminyl radical cyclization to synthesis of solasodine acetate. // Steroids.

- 2012. - V. 77.-P. 1069-1074.

91. Quan H-J., Koyanagi J., Hagiwara K., Cui X.-R., Isshiki Y, Kondo S., Komada F., Saito S. Reactions of 26-iodopseudodiosgenin and 26-iodopseudodiosgenone with various nucleophiles and pharmacological activities of the products. // Chem. Pharm. Bull. - 2006. - V. 54. - P. 72—79.

92. Barthakur M.G., Borthakur M., Devi P., Saikia C.J., Saikia A., Bora U., Chetia A., Boruah R.C. A novel and efficient lewis acid catalysed preparation of pyrimidines: Microwave-promoted reaction of urea and P-Formyl enamides. // Synlett. - 2007.

- V. 2. - P. 223-227.

93. Vidrna L., Cerny I., Pouzar V., Borovska J., Vyklick V., Vyklick L., Chodounska H. Azido analogs of neuroactive steroids. // Steroids. - 2011. - V. 76. - P. 10431050.

94. Mohareb R.M., Wardakhan W.W., Elmegeed G.A., Ashour R.M.S. Heterocyclizations of pregnenolone: Novel synthesis of thiosemicarbazone, thiophene, thiazole, thieno[2,3-b]pyridine derivatives and their cytotoxicity evaluations. // Steroids. - 2012. - V. 77. - P. 1560-1569.

95. Mohareb R.M., Al-Omran F. Reaction of pregnenolone with cyanoacetyl hydrazine: Novel synthesis of hydrazide-hydrazone, pyrazole, pyridine, thiazole, thiophene derivatives and their cytotoxicity evaluations. // Steroids. - 2012. - V. 77.-P. 1551-1559.

96. Press Release. U.S. Food and Drug Administration. -2011.

97. Julian P.L., Karpel W.J. Sterols IX. The selective halogenation and dehalogenation of certain steroids. // J. Am. Chem. Soc. - 1950. - V. 72. - P. 362-366.

98. Marker R.E., Crooks H.M., Jones E.M., Shabica A.C. Sterols. CXLIII. Conversion of 5-pregnen-3(p)-ol-20-one to dehydro-iso-androsterone. // J. Am. Chem. Soc. - 1942. -V. 64. - P. 1276-1280.

99. Julian P.L., Meyer E.W., Karpel W.J., Waller I.R. Sterols XI. 17oc-Hydroxy-l 1-deoxycortisone (Reichstin's substance S). // J. Am. Chem. Soc. - 1950. - V. 72. - P. 5145-5147.'

100. Fried J., Edwards J.A. Organic reactions in steroid chemistry. // Van Nostrand Reinhold Company. - 1972. V. - II. - P. 176-179.

101. Кенде Э.С. Перегруппировка галогенидов Фаворского. Органические реакции, сб. 11. М.: "Мир", 1965. с. - 267 - 326.

102. Сазерленд И.О. Сложные эфиры. Общая органическая химия, т. 4. М.: "Химия", 1983. с.-319-324.

103. Timofeev V.P., Samarianov В.A. About new universal approach to the EPR-spectra simulation of the spin-labeled macromolecules. // Appl. Magn. Reson. - 1993. - V. 4. -P. 523-539.

104. Schroepfer G. J. Oxysterols: modulators of cholesterol metabolism and other processes. // Physiol. Rev. - 2000. - V. 80. - P. 361-554.

105. Bjorkhem I. Rediscovery of cerebrosterol. // Lipids. - 2007. - V. 42. - P. 5-15.

106. Bjorkhem I. Are side-chain oxidized oxysterols regulators also in vivo? // J. Lipid Res. - 2009. - V. 50(Suppl.). - P. S213-218.

107. Olkkonen V. M. Oxysterols and oxysterol-binding proteins in cellular lipid metabolism. // Cell. Lipid Metab. - 2009. - P. 27-71.

108. Olsen B.A., Schlesinger P.H., Ory D.S., Baker N.A. Side-chain oxysterols: From cells to membranes to molecules. // Biochim. Biophys. Acta. - 2012. - V. 1818. - P. 330336.

109. Javitt N.B. Oxysterols: novel biologic roles for the 21st century. // Steroids. - 2008. -V. 73.-P. 149-157.

110. Gill S., Chow R., Brown A.J. Sterol regulators of cholesterol homeostasis and beyond: The oxysterol hypothesis revisited and revised. // Prog. Lipid Res. - 2008. -V. 47. - P. 391-404.

111. Vaya J., Schipper H.M. Oxysterols, cholesterol homeostasis, and Alzheimer disease. // J. Neurochem. - 2007. - V. 102. - P. 1727-1737.

112. Smith L.L. Cholesterol autoxidation. Plenum Press, N.Y., -1981.

113. Smith L.L., Johnson B. Biological activity of oxysterols. // Free Radicals Biol. Med. -1989.-V. 7.-P. 285-331.

114. Smith L.L. Review of progress in sterol oxidation: 1987-1985. // Lipids. - 1996. - V. 31.-P. 453-487.

115. Taylor F.R., Saucier S.E., Shown E.P., Parish E.J., Kandutsch A.A. Correlation between oxysterol binding to a cytosolic binding protein and potency in the repression of hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase. // J. Biol. Chem. - 1984. - V. 259. -P. 12382-12387.

116. Janowski B., Grogan M.J., Jones S.A., Wisely G.B., Kliewer S.A., Corey E.J., Mangelsdorf D.J. Structural requirements of ligands for the oxysterol liver X receptors LXRa and LXR(3. // Proc. Natl. Acad. Sci. -1999. - V. 96. - P. 266-271.

117. Spencer T.A., Li D., Russel J.S., Collins J.L., Bledsoe R.K., Consler T.G., Moore L.B., Galardi C.M., McKee D.D., Moore J.T., Watson M.A., Parks D.J., Lambert M.H., Willson T.M. Pharmacophore analysis of the nuclear oxysterol receptor LXRa. // J. Med. Chem. - 2001. - V. 44. - P. 886-897.

118. Makishima M.J. Nuclear receptors as targets for drug development: Regulation of cholesterol and bile acid metabolism by nuclear receptors. // Pharmacol. Sci. - 2005. -V. 97.-P. 177-183.

119. Quinet E.M., Savio D.A., Halpern A.R., Chen L., Miller C.P., Nambi P. Gene-selective modulation by a synthetic oxysterol ligand of the liver X receptor LXRp. // J. Lipid Res. - 2004. - V. 45. - P. 1929-1942.

120. Guha R., Howard M.T., Hutchison G.R., Murray-Rust P., Rzepa H., Steinbeck C., Wegner J.K., Willighagen E. The blue obelisk - interoperability in chemical informatics. // J. Chem. Inf. Model. - 2006. - V. 46. - P. 991-998.

121. The Open Babel Package, version 2.0.1. URL: http://openbabel.sourceforge.net

122. Halgren T.A. Merck molecular force field. I. Basis, form, scope, parameterization, and performance of MMFF94. // J. Comput. Chem. - 1996. - V.17. - P. 490-519.

123. Halgren T.A. Merck molecular force field. II. MMFF94 van der Waals and electrostatic parameters for intermolecular interactions. // J. Comput. Chem. - 1996. -V.17.-P. 520-552.

124. Halgren T.A. Merck molecular force field. III. Molecular geometries and vibrational frequencies for MMFF94. // J. Comput. Chem. - 1996. - V. 17. - P. 553-586.

125. Halgren T.A., Nachbar R.B. Merck molecular force field. IV. Conformational energies and geometries for MMFF94. // J. Comput. Chem. - 1996. - V. 17. - P. 587615.

126. Halgren T.A. Merck molecular force field. V. Extension of MMFF94 using experimental data, additional computational data, and empirical rules. // J. Comput. Chem. - 1999. - V. 17. - P. 616-641.

127. Halgren T.A. MMFF VI. MMFF94s option for energy minimization studies. // J. Comput. Chem. - 1999. - V. 20. - P. 720-729.

128. Halgren T.A. MMFF VII. Characterization of MMFF94, MMFF94s, and other widely available force fields for conformational energies and for intermolecular-interaction energies and geometries. // J. Comput. Chem. - 1999. - V. 20. - P. 730-748.

129. Clark M., Cramer R.D., Van Opdenbosch N. Validation of the general purpose tripos 5.2 force field. // J. Comput. Chem. - 1989. - V. 10. - P. 982-1012.

130. Svensson S., Ostberg T., Jacobsson M., Norstrom C., Stefansson K., Hallen D., Johansson I.C., Zachrisson K., Ogg D., Jendeberg L. Crystal structure of the heterodimeric complex of LXRa and RXR|3 ligand-binding domains in a fully agonistic conformation. // EMBO J. - 2003. - V. 22. - P. 4625-4633.

131. Williams S., Bledsoe R.K., Collins J.L., Boggs S., Lambert M.H., Miller A.B., Moore J., McKee D.D., Moore L., Nichols J., Parks D., Watson M., Wisely B., Willson T.M. X-Ray crystal structure of the liver X receptor p ligand binding domain: Regulation by a histidine-tryptophan switch. // J. Biol. Chem. - 2003. - V. 278. - P. 27138-27143.

132. Mori K., Sasaki M. Synthesis of (±)-lineatin, the unique tricyclic pheromone of Trypodendron lineatum (oliver). // Tetrah. Lett. - 1979. - V. 20. - P. 1329-1332.

133. Vahouny G.V. and Treadwell C.R. Enzymatic synthesis and hydrolysis of cholesterol esters. // Methods of Biochemical Analysis. - 2006. - V. 16. John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, NJ, USA. doi: 10.1002/9780470110348.ch4

134. Magnus P., Gallagher T. Studies on the synthesis of the antitumour agent CC-1065. Synthesis of the cyclopropapyrroloindole portion. // J. Chem. Soc., Chem. Commun. -1984. - P. 389-390.

135. Kuklev D.V., Smith W.L. A procedure for preparing oxazolines of highly unsaturated fatty acids to determine double bond positions by mass spectrometry. // J. Lipid Res. -2003.-V. 44.-P. 1060-1066.

136. Yokokawa F., Hamada Y., Shioiri T. Synthesis of 2,4-Disubstituted Oxazoles. // Synlett - 1992. - V. 2. - P. 153-155.

137. Bretona P., Andre-Barresa C., Langloisa Y. Preparation of Functionalized Oxazolines. // Synth. Commun. - 1992. - V. 22. - P. 2543-2554.

138. Schmidt M.W., Baldridge K.K., Boatz J.A. The General Atomic and Molecular Electronic Structure System. // J. Comput. Chem. - 1993. - V. 14. - P. 1347-1363.

139. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. // J. Immunol. Meth. - 1983. - V. 65. - P. 55-63.

140. Benz C., Hollander C., Miller B. Endocrine-responsive pancreatic carcinoma: Steroid binding and cytotoxicity studies in human tumor cell lines. // Cancer Res. - 1986. - V. 46.-P. 2276-2281.

141. Baratta M., Grolli S., Poletti A., Ramoni R., Motta M., Tamanini C.J. Role of androgens in proliferation and differentiation of mouse mammary epithelial cell line HC11. // Endocrinol. - 2000. - V. 167. - P. 53-60.

142. Migliaccio A., Castoria G., Di Domenico M., de Falco A., Bilancio A., Lombardi M., Barone M.V., Ametrano D., Zanini M.S., Abbondanza C., Auricchio F. Steroid-induced androgen receptor-estradiol receptor p-Src complex triggers prostate cancer cell proliferation. // EMBO J. - 2000. - V. 19. - P. 5406-5417.

143. Hara T., Miyazaki J.-I., Araki H., Yamaoka M., Kanzaki N., Kusaka M., Miyamoto M. Novel mutations of androgen receptor: A possible mechanism of bicalutamide withdrawal syndrome. // Cancer Res. - 2003. - V. 63. - P. 149-153.

144. Brown M.S., Goldstein J.L. A proteolytic pathway that controls the cholesterol content of membranes, cells, and blood. // Proc. Natl. Acad. Sci. - 1999. - V. 96. -11041-11048.

145. Brown M.S., Goldstein J.L. Cholesterol feedback: from Schoenheimer's bottle to Scap's MELADL. // J. Lipid Res. - 2009. - V. 50(Suppl.). - P. S15-27.

146. Sun L.P., Li L., Goldstein J.L., Brown M.S. Insig required for sterol-mediated inhibition of Scap/SREBP binding to COPII proteins in vitro. // J Biol Chem. - 2005. -V. 280. - P. 26483-26490.

147. Horton J.D., Shah N.A., Warrington J.A., Anderson N.A., Park S.W., Brown M.S., Goldstein J.L. Combined analysis of oligonucleotide microarray data from transgenic and knockout mice. // Proc. Natl. Acad. Sci. - 2003. - V. 100. - P. 12027-12032.

148. Radhakrishnan A., Ikeda Y., Kwon H.J., Brown M.S., Goldstein J.L. From the Cover: Sterol-regulated transport of SREBPs from endoplasmic reticulum to Golgi: Oxysterols block transport by binding to Insig. // Proc. Natl. Acad. Sci. - 2007. - V. 104.-P. 6511-6518.

149. Gale S.E., Westover E.J., Dudley N., Krishnan K., Merlin S., Scherrer D.E., Han X., Zhai X., Brockman H.L., Brown R.E., Covey D.F., Schaffer J.E., Schlesinger P., Ory D.S. Side chain oxygenated cholesterol regulates cellular cholesterol homeostasis through direct sterol-membrane interactions. // J. Biol. Chem. - 2009. - V. 284. - P. 1755-1764.

150. Janowski B.A., Shan B., Russell D.W. The Hypocholesterolemic agent LY295427 reverses suppression of sterol regulatory element-binding protein processing mediated by oxysterols. // J. Biol. Chem. - 2001. - V. 276. - P. 45408-45416.

151. Sakai J., Rawson R.B., Espenshade P.J., Cheng D., Seegmiller A.C., Goldstein J.L., Brown M.S. Molecular identification of the sterol-regulated luminal protease that cleaves SREBPs and controls lipid composition of animal cells. // Molecular Cell. -1998.-V. 2.-P. 505-514.

152. Song B-L., DeBose-Boyd R.A. Insig-dependent ubiquitination and degradation of 3-Hydroxy-3-methylglutaryl Coenzyme A reductase stimulated by tocotrienols. // J. Biol. Chem. - 2006. - V. 281. - P. 25054-25061.

153. Lehmann J.M., Kliewer S.A., Moore L.B., Smith-Oliver T.A., Oliver B.B., Su J-L., Sundsethi S.S., Winegari D.A., Blanchard D.E., Spencer T.A., Willson T.M.

Activation of the nuclear receptor LXR by oxysterols defines a new hormone response pathway. // J. Biol. Chem. - 1997. - V. 272. - P. 3137-3140.

154. Javitt N.B. Hep G2 cells as a resource for metabolic studies of lipoprotein, cholesterol and bile acids. // FASEB J. - 1990. - V. 4. - P. 161-168.

155. Goldstein J.L., Basu S.K., Brown M.S. Receptor-mediated endocytosis of low-density lipoprotein in cultured cells. // Methods Enzymol. - 1983. - V. 98. - P. 241-260.

156. Barth C.A. Regulation and interaction of cholesterol, bile salt and lipoprotein synthesis in liver. // Klin Wochenschr - 1983. - V. 61. - P. 1163-1170.

157. Schultz J.R., Tu H., Luk A., Repa J.J., Medina J.C., Li L., Schwendner S., Wang S., Thoolen M.,. Mangelsdorf D.J., Lustig K.D., and Shan B. Role of LXRs in control of lipogenesis. // Genes & Dev. - 2000. - V. 14. - P. 2831-2838.

158. Bjorkhem I. Mechanism of degradation of the steroid side chain in the formation of bile acids. // J. Lipid Res. - 1992. - V. 33. - P. 455-471.

159. Gibbons G.F. The role of cytochrome P450 in the regulation of cholesterol biosynthesis // Lipids. - 2002. - V. 37. - P. 1163-1170.

160. Kisseleva A.F., Goryunova L.E., Medvedeva N.V., Alquier C., Morozkin A.D., Misharin A.Yu. Distribution of exogeneous 25-hydroxycholesterol in Hep G2 cells between two different pools. // FEBS Letters. - 1999. - V. 446. - P. 163-168.

161. Lang P.T., Brozell S.R., Mukherjee S., Pettersen E.F., Meng E.C., Thomas V., Rizzo R.C., Case D.A., James T.L., Kuntz I.D. DOCK 6: Combining techniques to model RNA-small molecule complexes. // RNA. - 2009. - V. 15. - P. 1219-1230.

162. Weygand-Hilgetag Organish-Chemishe Experimentierkunst. 3. Neubearbeitete auflage. Johann Ambrosius Barth Verlag: Leipzig; 1964.

163. Rivero I.A., Reynoso-Soto E.A., Ochoa-Teran A. Microwave-assisted synthesis of cycloalkanespirohydantoins and piperidylspirohydantoins as precursors of restricteda-amino acids. // Arkivoc. - 2011. - V. 2. - P. 260-271.

164. Connors T.A., Ross W.C.J. Some derivatives of 1-aminocyclopentanecarboxylic acid and related compounds. // J. Chem. Soc. - 1960. - P. 2119-2132.

165. Piatak D.M., Wicha J. Various approaches to the construction of aliphatic side chains of steroids and related compounds. // Chem. Rev. - 1978. - V. 78. - P. 199-241.

166. Tomkinson N.C.O., Willson T.M., Russel J.S., Spencer T.A. Efficient, stereoselective synthesis of 24(S),25-Epoxycholesterol. // J. Org. Chem. - 1998. - V. 63. - P. 99199923.

167. Khripach V., Zhabinskii V. Labeled brassinosteroids for biochemical studies. // Chem. Rec. - 2007. - V. 7. - P. 265-274.

168. Siless G.E., Knott M.E., Derita M.G., Zacchino S.A., Puricelli L., Palermo J.A. Synthesis of steroidal quinones and hydroquinones from bile acids by Barton radical decarboxylation and benzoquinone addition. Studies on their cytotoxic and antifungal activities. // Steroids. - 2012. - V. 77. - P. 45-51.

169. Lopez Y., Ruiz-Perez K.M., Pepez R., Santillan R., Flores-Alamo M., Iglesias-Arteaga M.A. Mechanistic insights and new products of the reaction of steroid sapogenins with NaN02 and BF3Et20 in acetic acid. // Steroids. - 2008. - V. 73. - P. 657-668.

170. Ruiz-Perez K.M., Romero-Vila M., Tinajero-Delgado V., Flores-Alamo M., Iglesias-Arteaga M.A. BF3/Et20-Induced stereoselective aldol reaction with benzaldehyde, and steroid sapogenins and its application to a convenient synthesis of dinorcholanic lactones. // Steroids. - 2012. - V. 77. - P. 819-828.

171. Perez-Diaz J.O.H., Vega-Baez J.L., Sandoval-Ramirez J.S., Meza-Reyes S., Montiel-Smith S., Farfon N., Santillan R. Novel steroidal penta- and hexacyclic compounds derived from 12-oxospirostan sapogenins. // Steroids. - 2010. - V. 75. - P. 1127-1136.

172. Lopez Y., Rodriguez L., del Rio R.E., Farfon N., Morzycki J.W., Santillan R. Regioselective cleavage of 22-oxo-23-spiroketals. Novel cholestanic frameworks with pyranone and cyclopentenone E rings on the side chain. // Steroids. - 2012. - V. 77. -P. 534-541.

173. Jiang C-S., Huang C-G., Feng B., Li J., Gong J-X., Kurt T., Guo Y-W. Synthesis and antitumor evaluation of methyl spongoate analogs. // Steroids. - 2010. - V. 75. - P. 1153-1163.

174. Matsuya Y., Yamakawa Y-I. Synthesis of sominone and its derivatives based on an RCM strategy: Discovery of a novel anti-Alzheimer's disease medicine candidate "Denosomin". // Org. Lett. - 2009. - V. 11. - P. 3970-3973.

i i

175. Kim S., Sutton S.C., Guo C., LaCour T.G., Fuchs P.L. Synthesis of the north 1 unit of the cephalostatin family from Hecogenin acetate. // J. Am. Chem. Soc. - 1999. - V. 121.-P. 2056-2070.

176. LaCour T.G., Guo C., Bhandaru S., Boyd M.R., Fuchs P.L. Interphylal product splicing: The first total syntheses of Cephalostatin 1, the North Hemisphere of Ritterazine G, and the highly active hybrid analogue, Ritterostatin G N1. // J. Am. Chem. Soc. - 1998. - V.120. - P. 692-707.

177. LaCour T.G., Guo C., Boyd M.R., Fuchs P.L. Outer-Ring stereochemical modulation of cytotoxicity in Cephalostatins. // Org. Lett. - 2000. - V. 2. - P. 33 - 36.

178. Lee S., LaCour T.G., Lantrip D., Fuchs P.L. Redox refunctionalization of steroid spiroketals. Structure correction of Ritterazine M. // Org. Lett. - 2002. - V. 4. - P. 313316.

179. Lee S., Fuchs P.L. The first total synthesis of (corrected) Ritterazine M. // Org. Lett. -2002.-V. 4.-P. 317-318.

180. Lee S., LaCour T.G., Fuchs P.L. Chemistry of trisdecacyclic pyrazine antineoplastics: The Cephalostatins and Ritterazines. // Chem. Rev. - 2009. - V. 109. - P. 2275-2314.

181.Moser B.R. Review of cytotoxic Cephalostatins and Ritterazines: Isolation and synthesis. // J. Nat. Prod. - 2008. - V. 71. - P. 487-491.

182. Taber D.F., Joerger J.-M. Synthesis of Bis-18,18'-desmethyl Ritterazine N. // J. Org. Chem. - 2008. - V. 73. - P. 4155-4159.

183.Morzycki J.W., Wojtkielewicz A. Synthesis of a highly potent antitumor saponin OSW-1 and its analogues. // Phytochem. Rev. - 2005. - V. 4. - P. 259-277.

184. Morzycki J.W. Application of olefin metathesis in the synthesis of steroids. // Steroids. - 2011. - V. 76. - P. 949- 966.

185. Williams J.R., Gong H. Biological activities and syntheses of steroidal Saponins: the Shark-Repelling Pavoninins. // Lipids. - 2007. - V. 42. - P. 77-86.

186. Glotter E. Withanolides and related Ergostane-type steroids. // Nat. Prod. Rep. - 1991. -V. 8. - P. 415-440.

187. Hanson R.N., Tongcharoensirikul P., Dilis R., Hughes A., DeSombre E.R. Synthesis and evaluation of isomeric (17/?,20£)-lla-Methoxy-21-(trifluoromethylphenyl)-19-norpregna-l,3,5(10),20-tetraene-3,17a-diols as ER-Hormone Binding Domain

Ligands: Effect of the methoxy group on receptor binding and uterotrophic growth. // J. Med. Chem. - 2007. - V. 50. - P. 472-479.

188. Yu W., Jin Z. A New strategy for the stereoselective introduction of steroid side chain via r-alkoxy vinyl cuprates: Total synthesis of a highly potent antitumor natural product OSW-1. // J. Am. Chem. Soc. - 2001. - V. 123. - P. 3369-3370.

189. Crestani M., De Fabiani E., Caruso D., Mitro N., Gilardi F., Vigil Chacon A.B., Patelli R., Godio C., G. Galli G. LXR (liver X receptor) and HNF-4 (hepatocyte nuclear factor-4): key regulators in reverse cholesterol transport. // Biochem. Soc. Trans. - 2004. - V. 32. - P. 92-96.

190. Fakheri R.J., Javitt N.B. Autoregulation of cholesterol synthesis: Physiologic and athophysiologic consequences. // Steroids. - 2011. - V. 76. - P. 211-215.

191. Davies J.D., Carpenter K.L.H., Challis I.R., Figg N.L., McNair R., Proudfoot D., Weissberg P.L., Shanahan C.M. Adipocytic differentiation and Liver X Receptor pathways regulate the accumulation of triacylglycerols in human vascular smooth muscle cells. // J. Biol. Chem. - 2005. - V. 280. - P. 3911-3919.

192. Ducheix S., Lobaccaro J.M.A., Martin P.G., Guillou H. Liver X Receptor: an oxysterol sensor and a major player in the control of lipogenesis. // Chem. Phys. Lipids. - 2011. - V. 164. - P. 500-514.

193. Wyjcicka G., Jamroz-Wisniewska A., Horoszewicz K., Beltowski J. Liver X receptors (LXRs). Part I: Structure, function, regulation of activity, and role in lipid metabolism. // Postepy Hig Med. Dosw. (online) - 2007. - V. 61. - P. 736-759.

194. Mitro N., Mak P.A., Vargas L., Godio C., Hampton E., Molteni V., Kreusch A., Saez E. The nuclear receptor LXR is a glucose sensor. // Nature. - 2007. - V. 445. - P. 219223.

195. Cha J-Y., Repa J. C. The Liver X Receptor and Hepatic Lipogenesis: The carbohydrate-response element binding protein is a target gene of LXR. // J. Biol. Chem. - 2007. - V. 282. - P. 743-751.

196. Faulds M.H., Zhao C., Dahlman-Wright K. Molecular biology and functional genomics of liver X receptors (LXR) in relationship to metabolic diseases. // Curr. Opin. Pharmacol. - 2010. - V. 10. - P. 692-697.

197. Viennois E., Mouzat K., Dufour J., Morel L., Lobaccaro J.-M., Baron S. Selective liver X receptor modulators (SLiMs): What use in human health? // Mol. Cell Endocrinol. - 2012. - V. 351. - P. 129-141.

198. R. Geyeregger R., Zeyda M., T. M. Stulnig T.M. Liver X receptors in cardiovascular and metabolic disease. // Cell. Mol. Life Sci. - 2006. - V. 63. - P. 524-539.

199. Jamroz-Wisniewska A., Wyjcicka G., Horoszewicz K., Beltowski J. Liver X receptors (LXRs). Part II: Non-lipid effects, role in pathology, and therapeutic implications. // Postepy Hig Med. Dosw. (online) - 2007. - V. 61. - P. 760-785.

200. Lazar M.A., Willson T.M., Sweet Dreams for LXR. // Cell Metab. - 2007. - V. 5. - P. 159-161.

Выражаю глубокую благодарность моему научному руководителю д.б.н., профессору Мишарину Александру Юрьевичу, за доброжелательное отношение и неоценимую помощь на всех этапах исследования и подготовки работы. Хочу выразить благодарность проф. В.П. Тимофееву и асп. P.A. Новикову за проведение ЯМР и ЭПР спектрометрических методов анализа; М.Г. Завьяловой за проведение исследований методом МСВР; д.б.н. A.B. Веселовскому, к.ф-м.н. Я.В. Ткачеву и И.В. Федюшкиной за проведение и предоставление результатов компьютерного моделирования; к.б.н. А.Р. Мехтиеву и к.б.н. Г.Е. Морозевич за предоставление клеточных культур и помощь в проведении биохимических исследований.

Выражаю искреннюю благодарность сотрудникам лаборатории Синтеза физиологически активных соединений за всестороннюю помощь и поддержку.