Носители противоопухолевых препаратов на основе синтетических полипептидов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, доктор химических наук Буров, Сергей Владимирович

• Буров, Сергей Владимирович
• доктор химических наук
• 2009

Оглавление диссертации доктор химических наук Буров, Сергей Владимирович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.•

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. АНАЛОГИ ЛЮЛИБЕРИНА В КАЧЕСТВЕ НОСИТЕЛЕЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ.

1.1.1. Проблема избирательности действия противоопухолевых препаратов.

1.1.2. Изучение взаимосвязи структура — активность в ряду аналогов люлиберина.

1.1.3. Молекулярно-биологические основы противоопухолевого действия агонистов и антагонистов люлиберина.

1.1.4. Применение 'аналогов люлиберина в качестве носителей противоопухолевых препаратов.

1.2. ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ НА ОСНОВЕ RGD-ПЕПТИДОВ.

ГЛАВА 2. СИНТЕЗ АНАЛОГОВ ЛЮЛИБЕРИНА, ОБЛАДАЮЩИХ

ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ.

2.1. Носители цитотоксических агентов на основе аналогов люлиберина с укороченной аминокислотной последовательностью.

2.2. Получение конъюгатов цитотоксических агентов и аналогов люлиберина с полной аминокислотной последовательностью

2.3. Синтез полипептидных носителей, обладающих собственной цитотоксической активностью.

2.4. Синтез полипептидных носителей, содержащих сигнал ядерной локализации.

ГЛАВА 3. НОСИТЕЛИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ НА

ОСНОВЕ RGD-ПЕПТИДОВ.

ГЛАВА 4. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛИПЕПТИДНЫХ НОСИТЕЛЕЙ

ДЛЯ ДОСТАВКИ «СУИЦИДНОГО» ГЕНА В ОПУХОЛЕВЫЕ

КЛЕТКИ.

ГЛАВА 5. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

5.1. Качественные реакции.

5.2. Определение стабильности аналогов GnRH в плазме крови.

5.3. Синтез вспомогательных реагентов.

5.4. Твердофазный синтез пептидов.

5.5. Синтез аналогов люлиберина с укороченной аминокислотной последовательностью.

5.6. Синтез аналогов люлиберина, содержащих 9-12 аминокислотных остатков.

5.7. Синтез пептидов, содержащих сигнал ядерной локализации

5.8. Синтез носителей на основе RGD-пептидов.

5.9. Синтез пептидов, использованных в составе систем доставки генов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Носители противоопухолевых препаратов на основе синтетических полипептидов»

Актуальность темы. Различные по структуре синтетические полимеры широко используются для увеличения растворимости, биологической активности, длительности и избирательности действия низкомолекулярных лекарственных веществ. Одним из наиболее актуальных направлений исследований является создание новых полимерных носителей противоопухолевых препаратов. Благодаря особенностям строения и физико-химических свойств макромолекул, происходит их постепенное накопление в опухолевой ткани, что позволяет многократно повысить локальную концентрацию присоединенного химиотерапевтического агента.

Тем не менее, общим недостатком существующих подходов остается недостаточная избирательность действия медико-биологических полимеров, что приводит к возникновению значительных побочных эффектов. Кроме того, разработка действенных систем адресной доставки противоопухолевых соединений осложняется рядом факторов таких, как неоднородность состава полимерных носителей и отсутствие четкого контроля за процессом иммобилизации лекарственных веществ, которые могут быть ковалентно связаны с функциональными группами полимера или присутствовать в виде ассоциатов.

К числу перспективных направлений, позволяющих повысить эффективность воздействия и уменьшить побочные эффекты, относится применение природных полимеров и их аналогов в качестве носителей химиотерапевтических агентов. Особенный интерес представляет разработка систем адресной доставки на основе синтетических полипептидов, специфически связывающихся с рецепторами, расположенными на поверхности клеток злокачественных опухолей. Существенным преимуществом при этом является возможность дополнительного влияния на опухолевые клетки благодаря наличию у полипептидного носителя собственной биологической активности.

Эффективность такого действия особенно высока в случае так называемых гормонозависимых опухолей, рост которых ускоряется в присутствии тех или иных гормонов. В настоящее время установлено что, в отличие от нормальной ткани, на поверхности многих злокачественных клеток расположены рецепторы биологически активных полипептидов, что может послужить основой при разработке систем направленного транспорта лекарственных препаратов. Так, например, аналоги некоторых регуляторных пептидов гипоталамуса, широко применяющиеся при терапии гормонозависимых опухолей [1, 2], могут быть использованы в качестве носителей химиотерапевтических агентов.

Существующие в настоящее время подходы позволяют получить аналоги природных полипептидов, обладающие высокой устойчивостью к энзиматическому расщеплению и обеспечивающие эффективный перенос лекарственных соединений к пораженным органам и тканям. Вместе с тем, в случае противоопухолевых препаратов роль полипептидного носителя обычно ограничена специфическим взаимодействием с рецептором, в то время как вопросы его собственного влияния на злокачественные клетки и внутриклеточный транспорт цитотоксического агента изучены недостаточно.

Другим перспективным направлением является разработка методов генной терапии опухолевых заболеваний в том числе с применением систем адресной доставки на основе синтетических полипептидов. Хорошо известным примером является использование так называемых «суицидных» генов, приводящих клетки к самоуничтожению. Так, в случае гена тимидинкиназы вируса простого герпеса [3], злокачественные клетки приобретают способность фосфорилировать противовирусный препарат ганцикловир, что приводит к прекращению синтеза ДНК. Наличие эффекта гибели соседних опухолевых клеток позволяет многократно усилить терапевтическое действие.

Основными причинами, ограничивающими возможности использования синтетических полипептидов в составе систем доставки генов, являются недостаточная избирательность действия и, как правило, неудовлетворительные результаты в экспериментах in vivo. Вместе с тем, несмотря на меньшую эффективность по сравнению с вирусными средствами переноса генов, полипептидные носители свободны от таких недостатков как токсичность и иммуногенность и могут быть использованы при продолжительном лечении. Особенный интерес при этом представляет применение аналогов пептидных гормонов, обеспечивающих специфическое связывание с рецепторами, расположенными на поверхности опухолевых клеток.

Таким образом, при разработке систем адресной доставки противоопухолевых препаратов особенную актуальность приобретает рациональный выбор структуры полипептидного носителя, основанный на изучении особенностей его биологического действия.

Благодаря наличию на поверхности многих опухолевых клеток специфических рецепторов, отсутствующих в большинстве нормальных тканей, к числу наиболее перспективных вариантов полипептидных носителей можно отнести аналоги регуляторного пептида гипоталамуса — люлиберина и фрагментов белков, обеспечивающих межклеточные контакты (RGD-пептидов).

Цель работы. Разработка принципов создания полимерных носителей противоопухолевых препаратов, на основе синтетических полипептидов, обладающих собственной цитотоксической активностью.

Для достижения этой цели было необходимо решить следующие задачи: 1) Синтезировать ряд аналогов люлиберина и исследовать особенности их противоопухолевого действия, включая прямое влияние на злокачественные клетки.

2) Разработать методы модификации структуры полипептидного носителя, с целью повышения его цитотоксической активности.

3) Синтезировать аналоги люлиберина, обеспечивающие направленный транспорт цитотоксических агентов к опухолевым клеткам, их перенос через клеточную мембрану и доставку в ядро.

4) Исследовать возможности применения фрагментов ос-цепи фибриногена и их аналогов в составе систем адресной доставки противоопухолевых препаратов.

5) Разработать системы доставки в опухолевые клетки «суицидных» генов, основанные на использовании полипептидных носителей, обладающих цитотоксическим действием.

Положения, выносимые на защиту. Применение синтетических полипептидов, обладающих цитотоксической активностью, в качестве носителей противоопухолевых соединений повышает эффективность воздействия на опухолевые клетки.

Модификация полипептидов остатком пальмитиновой кислоты, является перспективным подходом при разработке систем адресной доставки цитотоксических агентов.

Преимуществом противоопухолевых соединений на основе аналогов люлиберина, по сравнению с другими природными полипептидами, является комплексное воздействие на клетки ряда аденокарцином в результате подавления секреции стероидных гормонов, направленной доставки цитотоксического агента и стимуляции иммунной системы.

Носители на основе фрагментов а-цепи фибриногена и их аналогов позволяют осуществлять направленный транспорт лекарственных препаратов непосредственно к пораженным органам и тканям.

Эффективность генной терапии опухолевых заболеваний может быть повышена с помощью систем доставки, основанных на использовании пептидов, обладающих противоопухолевой активностью.

Научная новизна. Предложен новый подход к выбору структуры носителей для адресной доставки противоопухолевых препаратов, основанный на использовании синтетических полипептидов, обладающих собственной цитотоксической активностью.

Проведен синтез серии аналогов люлиберина, обладающих комплексным действием на клетки гормонозависимых опухолей в результате подавления секреции стероидных гормонов, направленного транспорта цитотоксического агента, собственной цитотоксической активности и стимуляции иммунной системы.

Показано, что включение остатка пальмитиновой кислоты в структуру полипептидного носителя приводит к повышению его противоопухолевой активности как in vitro, так и in vivo. Впервые установлено непосредственное взаимодействие аналогов люлиберина с регуляторными участками последовательности гена интерлейкина-2, приводящее к усилению синтеза соответствующей мРНК.

На примере 5-фторурацила разработаны новые методы синтеза гибридных соединений, представляющих собой конъюгаты полипептидных носителей с химиотерапевтическими препаратами.

Впервые разработаны методы химического синтеза, позволяющие получать аналоги люлиберина содержащие фрагменты природных белков, которые обеспечивают направленный транспорт в ядро клетки (сигналы ядерной локализации; NLS). Показано, что включение NLS в последовательность пальмитоилсодержащих аналогов способствует значительному повышению их цитотоксической активности in vitro.

При использовании флуоресцентно меченых пептидов, содержащих остаток пальмитиновой кислоты, исследованы особенности их взаимодействия с клеточной мембраной и проникновения в клетки гепатомы человека, содержащие рецепторы люлиберина.

Показана возможность эффективного использования фрагментов а-цепи фибриногена и их аналогов в системах адресной доставки противоопухолевых и сосудорасширяющих препаратов.

Разработан новый подход к синтезу полипептидных носителей, обеспечивающих адресный перенос генов в опухолевые клетки. Впервые показано, что в качестве таких носителей могут быть использованы аналоги люлиберина, содержащих NLS или доксорубицин.

Практическая ценность и использование работы. Разработан простой и эффективный метод включения 5-фторурацила в структуру полимерного носителя. На основе аналогов люлиберина синтезированы новые носители цитотоксических агентов, обладающие высокой противоопухолевой активности в экспериментах in vitro и in vivo. Разработаны методы синтеза полипептидов, способных осуществлять транспорт химиотерапевтических препаратов непосредственно в ядро клетки. В результате исследования взаимосвязи структура - активность получены конъюгаты аналогов люлиберина с цитотоксическими агентами, перспективные для проведения доклинических испытаний. Разработаны системы направленной доставки генов в опухолевые клетки, основанные на применении в качестве носителей аналогов люлиберина, содержащих NLS и конъюгатов полипептидов с доксорубицином.

Показана возможность применения фрагментов a-цепи фибриногена и их аналогов в качестве носителей для адресной доставки противоопухолевых и сосудорасширяющих препаратов.

Личный вклад автора заключается в постановке цели исследования, разработке теоретических и методологических подходов к решению поставленных задач, участии в их экспериментальном выполнении, а также в анализе, интерпретации и обобщении полученных результатов.

Апробация работы. Основные результаты работы докладывались на 4-м международном симпозиуме по применению аналогов люлиберина при терапии опухолевых заболеваний и нарушений репродуктивной функции (Женева, 1996 г.), 27-м Европейском пептидном симпозиуме (Сорренто 2002 г.), международной конференции «СПИД, рак и родственные проблемы» (С.-Петербург 2001 г.), Восточно-Азиатском симпозиуме по применению полимеров для передовых технологий (Самара 2005), 29-м Европейском пептидном симпозиуме (Гданьск 2006 г.), 1-м Индийском пептидном симпозиуме (Хайдарабад, 2007 г.), III Российском симпозиуме «Белки и пептиды» (Пущино 2007 г.), 30-м Европейском пептидном симпозиуме (Хельсинки 2008 г.)

Публикации. По теме диссертации опубликовано 53 работы, из них 21 статья в отечественных и зарубежных журналах, 27 тезисов докладов, 2 авторских,свидетельства, 2 патента РФ и 1 международный патент.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 217 стр., включает 7 таблиц, 48 рисунков и состоит из введения, пяти глав, заключения, выводов и списка цитируемой литературы, включающего 268 наименований.

Заключение диссертации по теме «Высокомолекулярные соединения», Буров, Сергей Владимирович

ВЫВОДЫ

1. Предложен новый подход к решению проблемы адресной доставки противоопухолевых препаратов, основанный на использовании в качестве носителей синтетических полипептидов, обладающих собственной цитотоксической активностью. Возможности практического применения таких соединений исследованы на примере люлиберина и фрагментов ос-цепи фибриногена.

2. С целью установления взаимосвязи структура - активность проведен синтез серии аналогов люлиберина, содержащих N-концевую гидрофобную группировку. Впервые показано, что включение остатка пальмитиновой кислоты в структуру полипептидного носителя приводит к повышению противоопухолевой активности как in vitro, так и in vivo.

3. Разработана новая стратегия получения противоопухолевых соединений на основе аналогов люлиберина, принципиальной особенностью которой является введение цитотоксических группировок в положения 1 или 6 природной последовательности в сочетании с заменой отдельных аминокислотных остатков в N-концевой части молекулы.

4. Предложен простой и эффективный метод синтеза конъюгатов полипептидных носителей с 5-фторурацилом, основанный на применении активированных производных 1-карбоксиметил-5-фторурацила. На примере аналогов люлиберина впервые показано, что такой подход может быть использован для повышения противоопухолевой активности пептидов in vivo.

5. Синтезированы новые аналоги люлиберина, обладающие комплексным воздействием на опухолевые клетки благодаря направленной доставке химиотерапевтического агента, гормональной, иммуностимулирующей и собственной цитотоксической активности. Впервые установлено, что стимуляция иммунной системы происходит в результате непосредственного взаимодействия аналогов люлиберина с регуляторным участком последовательности гена интерлейкина-2.

6. Установлено, что включение в структуру полипептидного носителя последовательности, обеспечивающей его направленный транспорт в ядро клетки (сигнала ядерной локализации) приводит к существенному повышению противоопухолевой активности in vitro.

7. На примере использования 5-фторурацила и группировки N0 в качестве биологически активных соединений показано, что аналоги фрагментов а-цепи фибриногена являются перспективными носителями для направленного транспорта лекарственных препаратов к пораженным органам и тканям.

8. Впервые установлено, что аналоги люлиберина, содержащие последовательность ядерной локализации или интеркалирующие агенты, в отличие от немодифицированных соединений, способны к образованию стабильных комплексов пептид/ДНК. В экспериментах in vitro показано, что применение полипептидных носителей, обладающих противоопухолевой активностью, в составе систем доставки «суицидных» генов позволяет повысить эффективность воздействия на опухолевые клетки.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Применение биологически активных полимеров в составе систем адресной доставки фармакологических препаратов ограничено по причине сложного характера взаимосвязи структура - активность и сильной зависимости биологических свойств полимерного носителя от его молекулярного веса. Кроме того, для природных макромолекул характерно наличие иммуногенности и короткое время полужизни в кровяном русле [12]. Вместе с тем, в случае сравнительно небольших олигопептидов, состоящих из 10-20 аминокислотных остатков, иммуногенность не составляет проблемы, а время полужизни, определяющееся устойчивостью к энзиматическому расщеплению, может быть значительно увеличено в результате синтеза аналогов, содержащих неприродные аминокислоты. Возможность сохранения биологической активности как полипептидного носителя, так и присоединенного к нему фармакологического агента определяется рациональным выбором метода конъюгации.

Основой при проведении такого выбора является учет особенностей биологического действия исследуемых соединений, включая их связывание с соответствующими рецепторами, проникновение в клетку и последующее взаимодействие с внутриклеточными мишенями.

В настоящей работе исследованы возможности адресной доставки противоопухолевых препаратов на примере двух типов полипептидных носителей: аналогов регуляторного пептида гипоталамуса - люлиберина и фрагментов белков, принимающих участие в процессах межклеточного взаимодействия - так называемых КХШ-пептидов. Использование рассматриваемых соединений позволяет расчитывать на высокую избирательность действия благодаря наличию на поверхности опухолевых клеток большого количества специфических рецепторов, практически полностью отсутствующих в большинстве нормальных тканей.

Проведенные исследования показывают, что рациональный выбор структуры полипептидного носителя и способа присоединения цитотоксического агента позволяет добиться высокой эффективности противоопухолевого действия. Одним из перспективных направлений является использование пальмитоильной группировки для повышения цитотоксической активности синтетических полипептидов. При этом важно отметить, что такие соединения не оказывают влияния на клетки нормальных тканей, что позволяет синтезировать полипептидные носители, обладающие собственным, избирательным цитотоксическим действием.

Известно, что синтез полипептидов, содержащих один, а тем более два остатка пальмитиновой кислоты, сопряжен с определенными трудностями, связанными с их высокой гидрофобностью и склонностью к образования различного рода комплексов и ассоциатов. Тем не менее, подбор условий для проведения реакции конденсации и последующей очистки конечного продукта, позволяет получить такие соединения с удовлетворительным выходом и высокой степенью чистоты.

Другим перспективным направлением является включение в состав полипептидного носителя фрагментов некоторых природных белков, ответственных за их транспорт в ядро клетки (сигналов ядерной локализации). Такая модификация делает возможной доставку ряда химиотерапевтических агентов непосредственно к внутриклеточным мишеням действия, к числу которых, в первую очередь относится ДНК.

В ходе выполнения настоящего исследования разработаны методы твердофазного химического синтеза таких соединений, основанные на применении стратегии ортогональной защиты. Последующие эксперименты показали, что включение в структуру полипептидного носителя сигнала ядерной локализации позволяет не только добиться повышения эффективности действия цитотоксических агентов in vitro, но делает возможным образование стабильных комплексов пептид/ДНК, которые могут быть использованы в системах адресной доставки генов в опухолевые клетки.

Интересные возможности открываются в результате исследования конъюгатов полипептидных носителей с доксорубицином или другими интеркалирующими агентами. Такие соединения обладают высокой противоопухолевой активностью и, вместе с тем, могут применяться для доставки генов в злокачественные клетки, поскольку образуют прочные комплексы с ДНК за счет водородных связей. При этом, с одной стороны, уменьшается токсическое воздействие доксорубицина на клетки нормальных тканей, с другой стороны, образование комплекса не приводит к полному нарушению функциональной активности гена, что позволяет рассчитывать на проявление синергического противоопухолевого действия компонентов системы.

Таким образом, проведенные исследования показывают, что синтетические полипептиды являются перспективным типом носителей позволяющим значительно повысить эффективность действия лекарственных соединений за счет их направленной доставки к клеткам-мишеням и проявления собственной биологической активности.

Список литературы диссертационного исследования доктор химических наук Буров, Сергей Владимирович, 2009 год

1. Schally А. V., Nagy A. Cancer chemotherapy based on targeting of cytotoxic peptide conjugates to their receptors on tumors // Eur. J. Endocrinol. 1999. V. 141. N. l.P. 1-14.

2. Rigg A., Sikora K. Genetic prodrug activation therapy. Mol. Med. Today 1997. V. 3. N 8. P. 359-366.

3. Терминологический словарь по онкофармакологии. Стуков А.Н., Акимов А.А., Цырлина Е.В., и др. Под редакцией Филова В.А. и Гершановича М.Л. СПб.: «NIKA», 2005, 121 с.

4. Владимирская Е.Б. Биологические основы точечной терапии при онкогематологических заболеваниях // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2004. Т. 3. N4. С. 5-13.

5. Bonilla Е., del Mazo J. Deregulation of gene expression in fetal oocytes exposed to doxorubicin// Biochemical Pharmacology. 2003. V. 65. N 5. P. 1701-1707.

6. Крыжановская Т. С., Лавров Н.А. Применение полимеров в медицине // Пластические массы. 1995. N 2. С. 44-47.

7. Matsumura Y., Maeda Н. A new concept for macromolecular therapies in cancer chemotherapy: mechanism of tumouritropic accumulation of proteins and the antitumour agent SMANCS // Cancer Res. 1986. V. 46. N 12 (Part 2). P. 6387-6392.

8. Targeting Chemotherapy of Hepatocellular Carcinoma. Konno Т., Maeda H. II Neoplsma of the Liver. Okada K., Ishak K.G. (eds). New York: Springer, 1987. P. 343-352.

9. Duncan R. The dawning era of polymer therapeutics // Nat. Rev. Drug Discow. 2003. V. 2. N 5. P. 347-360.

10. Валуев Л. И., Валуева Т. А., Валуев И. Л., Платэ Н. А. Полимерные системы для контролируемого выделения биологически активных соединений // Усп. биол. хим. 2003. Т. 43. С. 307-328.

11. Polymer Conjugates with Anticancer Activity. Putnam D., Kopecek J. II Adv. Polym. Sci.; Biopolymers II. Peppas N.A., Langer R.S. (eds). Berlin: Springer, 1995. V. 122. P. 55-123.

12. Twaites В., Alarcon C. de las Heras, Alexander C. Synthetic polymers as drugs and therapeutics // J. Mater. Chem. 2005. V. 15. N 4. P. 441-455.

13. Malik N.,Duncan R. Method of treating cancerous tumors with a dendritic-platinate drug delivery system // United States Patent 6,790,437. 14.09.2004.

14. Aubree-Lecat A., Duban M.C., Demignot S., Domurado M., Fournie P., Domurado D. Influence of barrier-crossing limitations on the amount of macromolecular drug taken up by its target // J. Pharmacokinet. Biopharm. 1993. V. 21. N l.P. 75-98.

15. Vicent M.J. Polymer-Drug Conjugates as Modulators of Cellular Apoptosis // AAPS J. 2007. V. 9. N 2. P. E200-E207.

16. Коростелев С.А. Противоопухолевые вакцины // Современная онкология. 2003. Т. 5. N 4. С. 1-21.

17. Boon Т., Van der Bruggen P. Human tumor antigens recognized by T lymphocytes // J. Exp. Med. 1996. V. 183. N 3. P. 725-729.

18. Corman J.M., Sercars E.E., Nanda N.K. Recognition of prostate-specific antigenic peptide determinants by human CD4 and CD8 T cells 11 Clin. Exp. Immunol. 1998. V. 114. N 2. P. 166-172.

19. Houghton A.N. Cancer antigens: immune recognition of self and altered self //J. Exp. Med. 1994. V. 180. N 1. P. 1-4.

20. Nechushtan A., Yarkoni S., Marianovsky I., Lorberboum-Galski H. Adenocarcinoma Cells Are Targeted by the New GnRH-PE66 Chimeric Toxin through Specific Gonadotropin-releasing Hormone Binding Sites // J. Biol. Chem. 1997. V. 272. N. 17. P. 11597-11603.

21. Chien C.-H., Chen C.-H., Lee C.-Y. G„ Chang T.-C., Chen R.-J., Chow S.-N. Detection of gonadotropin-releasing hormone receptor and its mRNA in primary human epithelial ovarian cancers // Int. J. Gynecol. Cancer. 2004. V. 14. N. 3. P. 451-458.

22. Grimdker C., Huschmand N.A., Emons G. Gonadotropin-releasing hormone receptor-targeted gene therapy of gynecologic cancers // Mol. Cancer Ther. 2005. V. 4. N2. P. 225-231.

23. Schally A.V. Hypothalamic hormones from neuroendocrinology to cancer therapy // Anticancer Drugs. 1994. V. 5. N 2. P. 115-130.

24. Limonta P., Moretti R.M., Marelli M.M., Motta M. The biology of gonadotropin hormone-releasing hormone: role in the control of tumor growth and progression in humans // Front. Neuroendocrinol. 2003. V. 24. N4. P. 279-295.

25. Schally A.V., Baba Y, Arimura A., Redding T.W., White W.F. Evidence for peptide nature of LH and FSH-releasing hormones // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1971. V. 42. N 1. P. 50-56.

26. Arnold W, Flouret G, Morgan R, Rippel R, White W. Synthesis and biological activity of some analogs of the gonadotropin releasing hormone // J. Med. Chem. 1974. V. 17. N 3. P. 314-319.

27. Fujino M., Fukuda T., Shinagawa S., Kobayashi S., Yamazaki I. Synthetic analogs of luteinizing hormone releasing hormone (LH-RH) substituted in position 6 and 10 // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1974. V. 60. N. 1. P. 406-413.

28. Coy D.H., Labrie F., Savary M., Coy E.J., Schally A.V. LH-releasing activity of potent LH-RH analogs in vitro // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1975. V. 67. N. 2. P. 576-582.

29. Hypothalamic and other peptide hormones. Schally A.V., Comaru-Schally A.M. II Cancer Medicine 5th edition. Ontario.: B.C. Dekker Publishers, 2000. Ch. 53. P. 715-729.

30. Ferland L., Labrie F., Savary M., Beaulieu M., Coy D.H., Coy E.J., Schally AV. Inhibitory activity of analogues of luteinizing hormone-releasing hormone (LH-RH) in vitro and in vivo // Clin. Endocrinol. (Oxford). 1976. N 5. Suppl. P. 279S-289S.

31. Momany F.A. Conformational energy analysis of the molecule, luteinizing hormone-releasing hormone. I. Native decapeptide // J. Am. Chem. Soc. 1976. V. 98. N 10. P. 2990-2996.

32. Momany F.A. Conformational energy analysis of the molecule, luteinizing hormone-releasing hormone. 2. Tetrapeptide and decapeptide analogues // J. Am. Chem. Soc. 1976. V. 98. N 10. P. 2996-3000.

33. Momany F.A. Conformational analysis of the molecule luteinizing hormone-releasing hormone. 3. Analogue inhibitors and antagonists // J. Med. Chem. 1978. V. 21. N 1. P. 63-68.

34. Koerber S.C., Rizo J., Struthers R.S., Rivier J.E. Consensus Bioactive Conformation of Cyclic GnRH Antagonists Defined by NMR and Molecular Modeling // J. Med. Chem. 2000. V. 43. N 5. P. 819-828.

35. Guarnieri F., Weinstein H. Conformational memories and the exploration of biologically relevant peptide conformations: an illustration for the gonadotropin-releasing hormone // J. Am. Chem. Soc. 1996. V. 118. N 24. P. 5580-5589.

36. Ахрем A.A., Голубович В.П., Кирнарский Л.И., Галактионов С.Г. Расчет стабильных конформаций молекулы люлиберина // Биоорг. химия. 1978. Т. 4. N6. С. 838-840.

37. Humphries J., Wan Y.-P., Folkers K., Bowers C.Y. Inhibitory analogues of the luteinizing hormone-releasing hormone having D-aromatic residues in positions 2 and 6 and variation in position 3 // J. Med. Chem. 1978. V. 21. Nl.P. 120-123.

38. Rivier E.J., Vale WW. D-pGhil JD-Phe2,D-Trp3,6.-LRF. A potent luteinizing hormone releasing factor antagonist in vitro and inhibitor of ovulation in the rat // Life Sci. 1978. V. 23. N 8. P. 869-876.

39. Humphries J., Wasiak T., Wan Y.-P., Folkers K., Bowers C.Y. An antiovulatory decapeptide of higher potency which has an L-amino acid (Ac-Pro) in position 1 // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1978. V. 85. N 2. P. 709-713.

40. Humphries J., Wan Y.-P., Wasiak T., Folkers K., Bowers C.Y. Structural Requirements in Positions 1, 2, 3, and 6 of the Luteinizing Hormone-Releasing Hormone (LH-RH) for Antiovulatory Activity // J. Med. Chem. 1979. V. 22. N7. P. 774-777.

41. Karten M.J., Rivier J.E. Gonadotropin-releasing hormone analog design. Structure-function studies toward the development of agonists and antagonists: rationale and perspective // Endocr. Rev. 1986. V. 7. N 1. P. 44-66.

42. Bajusz S., Csernus V.J., Janaky T., Bokser L., Fekete M., Schally A. V. New antagonists of LHRH. II. Inhibition and potentiation of LHRH by closely related analogues // Int. J. Pept. Protein Res. 1988. V. 32. N 6. P. 425-435.

43. Schally A. V. LHRH analogues: their impact on the control of tumorigenesis //Peptides. 1999. V. 20. N 10. P. 1247-1262.

44. Emons G., Schally A. V. The use of luteinizing hormone releasing hormone agonists and antagonists in gynecological cancers // Hum. Reprod. 1994. V. 9. N7. P. 1364-1379.

45. Eidne K.A., Flanagan C.A., Harris N.S., Millar R.P. Gonadotropin-releasing hormone (GnRH)-binding sites in human breast cancer cell lines and inhibitory effects of GnRH antagonists // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1987. V. 64. N3. P. 425-432.

46. Qayum A., Gullick W., Clayton R.C., Sikora K., Waxman J. The effects of gonadotrophin releasing hormone analogues in prostate cancer are mediated through specific tumour receptors // Br. J. Cancer. 1990. V. 62. N 1. P. 96-99.

47. Imai A., Ohno T., Lida K., Fuseya T., Furui T., Tamaya T. Presence of gonadotropin-releasing hormone receptor and its messenger ribonucleic acid in endometrial carcinoma and endometrium // Gynecol. Oncol. 1994. V. 55. N l.P. 144-148.

48. Limonta P., Dondi D., Moretti R.M., Maggi R., Motta M. Antiproliferative effects of luteinizing hormone-releasing hormone agonists on the human prostatic cancer cell line LNCaP // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1992. V. 75. N l.P. 207-212.

49. Emons G., Grundker C., Giinthert A.R., Westphalen S., Kavanagh J., Verschraegen C. GnRH antagonists in the treatment of gynecological and breast cancers // Endocr. Relat. Cancer. 2003. V. 10. N 2. P. 291-299.

50. Sugiyama M., Imai A., Takahashi S., Hirano S., Furui T., Tamaya T. Advanced indications for gonadotropin-releasing hormone (GnRH)analogues in gynecological oncology // Int. J. Oncol. 2003. V. 23. N 2. P. 445-452.

51. Grundker C., Gunthert A.R., Westphalen S., Emons G. Biology of the gonadotropin-releasing hormone system in gynecological cancers // Eur. J. Endocrinol. 2002. V. 146. N. 1. P. 1-4.

52. Fekete M., Zalatnai A., Schally A. V. Presence of membrane binding sites for D-Trp6.-luteinizing hormone-releasing hormone in experimental pancreatic cancer // Cancer Lett. 1989. V. 45. N 2. P. 87-91.

53. Fekete M., Zalatnai A., Comaru-Schally A. M., Schally A. V. Membrane receptors for peptides in experimental and human pancreatic cancers // Pancreas. 1989. V. 4. N 5. P. 521-528.

54. Zhao S., Saito H., Wang X., Saito T., Kaneko T., Hiroi M. Effects of gonadotropin-releasing hormone agonist on the incidence of apoptosis in porcine and human granulosa cells // Gynecol. Obstet. Invest. 2000. V. 49. N 1. P. 52-56.

55. Imai A., Takagi A., Horibe S., Takagi H., Tamaya T. Fas and Fas ligand system may mediate antiproliferative activity of gonadotropin-releasing hormone receptor in endometrial cancer cells // Int. J. Oncol. 1998. V. 13. N l.P. 97-100.

56. Higashijima T., Kataoka A., Nishida T., Yakushiji M. Gonadotropin-releasing hormone agonist therapy induces apoptosis in uterine leiomyoma // Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 1996. V. 68. N 1. P. 169-173.

57. Sarah K., Gal L. , Tamar H., Zvi N. , Rony S. Gonadotropin-releasing hormone induces apoptosis of prostate cancer cells: Role of c-Jun NH2.

58. Terminal kinase, protein kinase B, and extracellular signal-regulated kinase pathways // Cancer Res. 2004. V. 64. N 16. P. 5736-5744.

59. Molecular Cell Biology (5th edition) Lodish H.F., Berk A., Matsudaira P., Kaiser C„ Krieger M, Scott M., Zipursky L., Darnell J.E. New York: W. H. Freeman & Company, 2004. 973 P. Lodish H.F., (eds).

60. McArdle C. A., Franklin J., Green L., Hislop J. N. Signalling, cycling and desensitisation of gonadotrophin-releasing hormone receptors // J. Endocrinol. 2002. V. 173. N 1. P. 1-11.

61. Yang W.-H., Wieczorck M., Allen M.C., Nett T.M. Cytotoxic Activity of Gonadotropin-Releasing Hormone (GnRH)-Pokeweed Antiviral Protein Conjugates in Cell Lines Expressing GnRH Receptors // Endocrinology. 2003. V. 144. N4. P. 1456-1463.

62. Suarez-Quian C.A., Wynn P.C., Catt K.J. Receptor-mediated endocytosis of GnRH analogs: differential processing of gold-labeled agonist and antagonist derivatives // J. Steroid. Biochem. 1986. V. 24. N 1. P. 183-192.

63. Jennes L., Stumpf W.E., Conn P.M. Receptor-mediated binding and uptake of GnRH agonist and antagonist by pituitary cells // Peptides. 1984. V. 5. Suppl. 1. P. 215-220.

64. The relationship existing between chemical constitution, distribution, and pharmacological action. Ehrlich P. II The Collected Papers of Paul Ehrlich.

65. Himmelweite F., Marquardt M., Dale H. (eds). Elmsford, New York: Pergamon, 1956. V. 1. P. 596-618.

66. Hertler A.A., Frankel A.E. Immunotoxins: A clinical review of their use in the treatment of malignancies // J. Clin. Oncol. 1989. V. 7. N 12. P. 19321942.

67. Channabasavaiah K., Stewart J.M. New analogs of luliberin which inhibit ovulation in the rat. Bioch. Bioph. Res. Commun. 1979. V. 86. N 4. P. 12661273.

68. Kovacs M., Schally A., Nagy A., Koppan M., Groot K. Recovery of pituitary function after treatment with a targeted cytotoxic analog of luteinizing hormone-releasing hormone // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. V. 94. N 4. P. 1420-1425.

69. Grundker C. Cytotoxic luteinizing hormone-releasing hormone conjugates and their use in gynecological cancer therapy // Eur. J. Endocrinol. 2000. V. 143. N5. P. 569-572

70. Liebow C., Lee M.T., Kamer A.R., Schally A.V. Regulation of luteinizing hormone releasing hormone receptor binding by heterologous and autologous receptorstimulated tyrosine phosphorylation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. V. 88. N 6. P. 2244-2248.

71. Rahimipour S., Weiner L., Shrestha-Dawadi P.B., Bittner S., Koch Y., Fridkin M. Cytotoxic peptides: naphthoquinonyl derivatives of luteinizing hormone-releasing hormone // Lett. Pept. Sci. 1998. V. 5. N 5-6. P. 421-427.

72. Lev-Goldman V., Mester B., Ben-Aroya N., Koch Y., Weiner L., Fridkin M. Synthesis and active oxygen generation by new emodin derivatives and their gonadotropin-releasing hormone conjugates // Bioconjug. Chem. 2006. V. 17. N4. P. 1008-1016.

73. Leuschner C., Enright F.M., Gawronska-Kozak B., Hansel W. Human prostate cancer cells and xenografts are targeted and destroyed through luteinizing hormone releasing hormone receptors // Prostate. 2003. V. 54. N 4. P. 239-249.

74. Leuschner C., Enright F.M., Gawronska B., Hansel W. Membrane disrupting lytic peptide conjugates destroy hormone dependent and independent breast cancer cells in vitro and in vivo // Breast Cancer Res. Treat. 2003. V. 78. N 1. P. 17-27.

75. Leuschner C., Hansel W. Targeting breast and prostate cancers through their hormone receptors // Biol. Reprod. 2005. V. 73. N 5. P. 860-865.

76. QiL., Nett T.M., Allen M.C., ShaX., Harrison G.S., FrederickB.A., Glode L.M. GnRH-PAP hormonotoxin targets cytotoxicity to prostate cancer cell lines //Urol. Res. 2003. V. 31. N 6. P. 374-377.

77. Harrison G.S., Wierman M.E., Nett T.M., Glode L.M. Gonadotropin-releasing hormone and its receptor in normal and malignant cells // Endocr. Relat. Cancer. 2004. V. 11. N 4. P. 725-748.

78. Harvie P., Paul R., Cudmore S., O'Mahony D.J. Lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production // European Patent Application EP 1383480. 04.30.2002.

79. GnRH analogues in ovarian, breast and endometrial cancers. Emons G., Ortmann O., Schulz K.-D. II GnRH analogues. The state of the art 1996. Lunenfeld B., Insler V. (eds). New York: The Parthenon Publishing Group, 1996. P. 95-120.

80. Zidan J., Zohar S., Mijiritzky I., Krai S., Bilenca B. Treating relapsed epithelial ovarian cancer with luteinizing hormonereleasing agonist (goserelin) after failure of chemotherapy // Isr. Med. Assoc. J. 2002. V. 4. N 8. P. 597-599.

81. Parmar H., Nicoll J., Stockdale A., Cassoni A., Phillips R., Lightman S., Schally A. Advanced ovarian carcinoma: response to the agonist D-Trp-6-LH-RH // Cancer Treat. Rep. 1985. V. 69. N 11. P. 1341-1342.

82. Jeyarajah A., Gallagher C., Blake P., Oram D., Dowsett M, Fisher C., Oliver R. Long-term follow-up of gonadotrophin-releasing hormone analog treatment for recurrent endometrial cancer // Gynecol. Oncol. 1996. V. 63. N l.P. 47-52.

83. Brawer M.K. The Evolution of Hormonal Therapy for Prostatic Carcinoma // Rev. Urol. 2001. V. 3. Suppl. 3. P. S1-S9.

84. Smith J.A. Jr., Glode L.M., Wetthaufer J.N., Stein B.S., Glass A.G., Max D.T., Anbar D., Jagst C.L., Murphy G.P. Clinical effects ofgonadotropin-releasing hormone analogue in metastatic carcinoma of the prostate //Urology. 1985. V. 25. N2. P. 106-114.

85. Rizzo M., Mazzei T., Mini E., Bartoletti R., Periti P. Leuprorelin acetate depot in advanced prostatic cancer: a phase II multicentre trial I I J. Int. Med. Res. 1990. V. 18. Suppl. l.P. 114-125.

86. Szepeshazi K., Lapis K., Schally A. V. Effect of combination treatment with analogs of luteinizing hormone-releasing hormone (LH-RH) or somatostatin and 5-fluorouracil on pancreatic cancer in hamsters // Int. J. Cancer. 1991. V. 49. N 2. P. 260-266.

87. Blumenfeld Z., Haim N. Prevention of gonadal damage during cytotoxic therapy // Ann. Med. 1997. V. 29. N 3. P. 199-206.

88. Recchia F., Sica G., De Filippis S., Saggio G., Ross ell i M., Rea S. Goserelin as ovarian protection in the adjuvant treatment of premenopausal breast cancer: a phase II pilot study // Anticancer Drugs. 2002. V. 13. N4. P. 417-424.

89. Griindker C., Schulz K., Gunthert A.R., Emons G. Luteinizing hormone-releasing hormone induces nuclear factor kb-activation and inhibits apoptosis in ovarian cancer cells // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2000. V. 85. N 10. P. 3815-3820.

90. Medl M., Peters-Engel C., Fuchs G., Leodolter S. Triptorelin (D-Trp-6-LHRH) in combination with carboplatin-containing polychemotherapy for advanced ovarian cancer: a pilot study 11 Anticancer Res. 1993. V. 13. N 6B. P. 2373-2376.

91. Rzepka-Gorska I., Chudecka-Glaz A., Kosmider M., Malecha J. GnRH analogues as an adjuvant therapy for ovarian cancer patients // Int. J. Gynaecol. Obstet. 2003. V. 81, N 2. P. 199-205.

92. Schally A., Comaru-Schally A., Plonowski A., Nagy A., Halmos G., Rekasi Z. Peptide analogs in the therapy of prostate cancer // Prostate. 2000. V. 45. N2. P. 158-166.121. http://www.cancercompass.com/cancer-news/1,11825,00.htm.

93. Ruoslahti E. Fibronectin in cell adhesion and invasion // Cancer Metastasis Rev. 1984. V. 3.N 1. P. 43-51.

94. Ruoslahti E. The Walter Herbert Lecture. Control of cell motility and tumour invasion by extracellular matrix interactions // Br. J. Cancer. 1992. V. 66. N 2. P. 239-242.

95. Horton M.A. Arg-Gly-Asp (RGD) Peptides and Peptidomimetics as Therapeutics: Relevance for Renal Diseases // Exp. Nephrol. 1999. V. 7. N2. P. 178-184.

96. Nichols A.J., Ruffolo R.Jr., Huffman W.F., Poste G., Samanen J. Development of GP Ilb/IIIa antagonists as antithrombotic drugs // Trends Pharmacol. Sci. 1992. V. 13. N 11. P. 413-417.

97. Okroj M., Dobrzanska-Paprocka Z., Rolka K,, Bigda J. In vitro and in vivo analyses of the biological activity of RGD peptides towards Ab Bomirski melanoma // Cell Mol. Biol. Lett. 2003. V. 8. N 4. P. 873-884.

98. Vlakh E.G., Panarin E.F., Tennikova T.B., Suck K., Kasper C. Development of multifunctional polymer-mineral composite materials for bone tissue engineering // J. Biomed. Mater. Res. A. 2005. V. 75. N 2. P. 333-341.

99. Korzhikov V., Roeker S., Vlakh E., Kasper C., Tennikova T. Synthesis of multifunctional polyvinylsaccharide containing controllable amounts of biospecific ligands //Bioconjug. Chem. 2008. V. 19. N. 3. P. 617-625.

100. Karpatkin S., Pearlstein E. Role of platelets in tumor cell metastases // Ann. Intern. Med. 1981. V. 95. N 5. P. 636-641.

101. Humphries M.J., Olden K., Yamada KM. A synthetic peptide from fibronectin inhibits experimental metastasis of murine melanoma cells // Science. 1986. V. 233. N 4762. P. 467-470.

102. Ugen K.E., Mahalingan M, Klein P.A., Kao K.J. Inhibition of tumor cell-induced platelet aggregation and experimental tumor metastasis by synthetic Gly-Arg-Gly-Asp-Ser peptide // J. Natl. Cancer Inst. 1988. V. 80. N18. P. 1461-1466.

103. Komazawa H., Saiki I., Igarashi Y., Azuma I., KojimaM., OrikasaA., OnoM., ItohL Inhibition of tumor metastasis by synthetic polymer containing a cell-adhesive RGDS peptide // J. Bioact. Compat. Polymers. 1993. V. 8. N 3. P. 258-274.

104. Matsuoka T., Hirakawa K, Chung Y.S., Yashiro M, Nishimura S., Sawada T., Saiki I., Sowa M. Adhesion polypeptides are useful for the prevention of peritoneal dissemination of gastric cancer. Clin. Exp. Metastasis. 1998. V. 16. N 4. P. 381-388.

105. Koivunen E., Wang В., Ruoslahti E. Phage libraries displaying cyclic peptides with different ring sizes: ligand specificities of the RGD-directed integrins // Biotechnology. 1995. V. 13. N 3. P. 265-270.

106. Shannon K.E., Keene J.L., Settle S.L., Duffin T.D., Nickols M.A., Westlin M., Schroeter S., Ruminski P.G., Griggs D.W. Anti-metastatic properties of RGD-peptidomimetic agents SI37 and S247 // Clin. Exp. Metastasis. 2004. V. 21. N 2. P. 129-138.

107. Arap W., Pasqualini R., Ruoslahti E. Cancer Treatment by Targeted Drug Delivery to Tumor Vasculature in a Mouse Model // Science. 1998. V. 279. N5349. P. 377-380.

108. Гуревич B.C., Буров С.В., Попов Ю.Г., Семко Т.В., Власов Г.П. Способ направленного транспорта фармакологических препаратов путем их конъюгации с аргинил-глицил-аспартил (RGD) содержащими пептидами // Патент N 2119354. 05.01.1996.

109. Denekamp J. Review article: angiogenesis, neovascular proliferation and vascular pathophysiology as targets for cancer therapy // Br. J. Radiol. 1993. V. 66. N783. P. 181-196.

110. Balasubramanian S., Kuppuswamy D. RGD-containing peptides activate S6K1 through p3 integrin in adult cardiac muscle cells // J. Biol. Chem. 2003. V. 278. N 43. P. 42214-42224.

111. Ruoslahti E., Pasqualini R. Angiogenic homing molecules and conjugates derived therefrom // United States Patent 6,576,239. 10.09.1997.

112. D.J. Burkhart, B.T. Kalet, M.P. Coleman, G.C. Post, T.H. Koch. Doxorubicin-formaldehyde conjugates targeting av(33 integrin 11 Mol. Cancer Ther. 2004. V. 3. N 12. P. 1593-1604.

113. Koizumi N., Mizuguchi H., Hosono T., Ishii-Watabe A., Uchida E., Utoguchi N., Watanabe Y., Hayakawa T. Efficient gene transfer by fibermutant adenoviral vectors containing RGD peptide // Biochim. Biophys. Acta. 2001. V. 1568. N. 1. P. 13-20.

114. Davydova J., LeL.P., Gavrikova Т., WangM., Krasnykh V, Yamamoto M. Infectivity-enhanced cyclooxygenase-2-based conditionally replicative adenoviruses for esophageal adenocarcinoma treatment // Cancer Res. 2004. V. 64. N. 12. P. 4319-4327.

115. Freer R.J., Stewart J.M. Alkylating analogs of peptide hormones. 1. Synthesis and properties of p-N,N-Bis(2-chloroethyl)amino.-phenylbutyryl derivatives of bradykinin and bradykinin potentiating factor. // J. Med. Chem. 1972. V. 15. N 1. P. 1-5.

116. Paiva T.B., Paiva A.C.M., Freer R.J., Stewart J.M. Alkylating analogs of peptide hormones. 2. Synthesis and properties of p-N,N-Bis(2-chloroethyl)amino.phenylbutyryl derivatives of angiotensin II. J. Med. Chem. 1972. V. 15. N l.P. 6-8.

117. Varga J.M. Hormone-drug conjugates // Methods Enzymol. 1985. V. 112. P. 259-269.

118. Rivier J., Amoss M, Rivier C., Vale W. Synthetic luteinizing hormone releasing factor. Short chain analogs // J. Med. Chem. 1974. V. 17. N 2. P. 230-233.

119. Sandow J., König W. Studies with fragments of a highly active analogue of luteinizing hormone releasing hormone // J. Endocrinol. 1979. V. 81. N 2. P. 175-182.

120. Буров С.В., Николаев С.В., Смирнова М.П., Лупанова Г.Е., Бобров Ю.Ф., Неволин-Лопатин A.M., Китаев Е.М. Синтез биологически активных аналогов люлиберина с укороченнойаминокислотной последовательностью // Хим. прир. соедин. 1982. N 6. С. 768-773.

121. Буров С.В., Николаев С.В., Корхов В.В., Лупанова Г.Е., Макушева В.П. Синтез и исследование биологической активности укороченных аналогов люлиберина // Хим. прир. соедин. 1987. N 4. С. 590-595.

122. Буров С.В., Николаев С.В., Корхов В.В., Макушева В.П., Лупанова Г.Е. Новые направления синтеза биологически активных аналогов люлиберина // Хим. прир. соедин. 1983. N 3. С. 398-399.

123. Haviv F., Palabrica С.A., Bush E.N., Diaz G., Johnson E.S., Love S., Greer J. Active reduced-size hexapeptide analogues of luteinizing hormone-releasing hormone // J. Med. Chem. 1989. V. 32. N 10. P. 2340-2344.

124. Ozaki S., Ike Y., Mizuno H., Ishikawa K, Mori H. 5-Fluorouracil derivatives. The synthesis of l-carbamoyl-5-fluorouracils // Bull. Chem. Soc. Jpn. 1977. V. 50. N 9. P. 2406-2412.

125. Ozaki S., Watanabe Y., Hoshiko Т., Mizuno H., Ishikawa K, Mori H 5-Fluorouracil derivatives IV. Synthesis of antitumor-active acyloxyalkyl-5-fluorouracils // Chem. Pharm. Bull. 1984. V. 32. N . P. 733-738.

126. Ouchi Т., Yuyama H., Vogl O. Synthesis of poly(ethylene glycols)-capped with 5-fluorouracil units through ester bonds and their antitumor activities // J. Polym. Sci. Part C. 1987. V. 25. N 7. P. 279-285.

127. Jones A.S., Lewis P., Withers S.F. The synthesis of carboxymethyl derivates of purines and pyrimidines and their condensation with naturally occuring macromolecules // Tetrahedron. 1973. V. 29. N 15. P. 2293-2296.

128. Семко T.B., Буров C.B., Веселкина О.С., Власов Г.П. Синтез и исследование противоопухолевой активности укороченных аналогов люлиберина // Химия природ, соединений. 1994. N 5. С. 655-662.

129. Jacobson J.D., Ansari М.А., MansfieldМ.Е., МсArthur С.P., Clement L.T. Gonadotropin-releasing hormone increases CD4(+) T-lymphocyte numbers in an animal model of immunodeficiency // J. Allergy Clin. Immunol. 1999. V. 104. N3. P. 653-658.

130. Azad N., Agrawal С., Emmanuele N.V., Kelley M.R., Mohagheghpour N., Lawrence A.M. Amer. J. Reprod. Immunol. 1991. V. 26. P. 160-172.

131. Wright J.M., Wiersma P. A., Dixon G.H. Use of protein blotting to study the DNA-binding properties of histone HI and HI variants // Eur. J. Biochem. 1987. V. 168. N 2. P. 281-285.

132. Levite М., Koch Y. Methods and pharmaceutical compositions for GnRH-I and GnRH-II modulation of T-cell activity, adhesion, migration and extravasation // United States Patent 20050158309. 07.21.2005.

133. Власов Г.П., Буров C.B., Семко T.B. Декапептид, обладающий противоопухолевой активностью // Патент N 2084458. 27.05.1993.

134. Бурое С.В., Яблокова Т.В., Дорош М.Ю., Шкарубская З.П., Бланк М., Эпштейн Н., Фридкин М. Аналоги люлиберина, обладающие цитотоксическим действием на опухолевые клетки in vitro // Биоорг. химия. 2006. Т. 32. N 5. С. 1-7.

135. Keisari Y. A colorimetric microtiter assay for the quantitation of cytokine activity on adherent cells in tissue culture. // J. Immunol. Methods. 1992. V. 146. N2. P. 155-161.

136. Coy D.H., Labrie F., Savary M., Coy E.J., Schally A.V. Antagonistic activity of analogs of luteinizing hormone-releasing hormone (LHRH) in vitro // Mol. Cell Endocrinol. 1976. V. 5. N 4. P. 201-208.

137. Wasiak T., Humphries J., Folkers K., Bowers C.Y. A new category of ovulation inhibitors: linear LH-RH analogues having more than ten residues //Biochem. Biophys. Res. Commun. 1979. V. 86. N 3. P. 843-848.

138. Bowers C.Y., Humphries J., Wasiak T., Folkers K., Reynolds G.A., Reichert L.E. Jr. On the inhibitory effects of luteinizing hormone-releasing hormone analogs // Endocrinology. 1980. V. 106. N 3. P. 674-683.

139. De Pablo M.A., Susin S.A., Jacotot E., Larochette N., Costantini P., Ravagnan L., Zamzami N., Kroemer G. Palmitate induces apoptosis via a direct effect on mitochondria // Apoptosis. 1999. V. 4. N 2. P. 81-87.

140. Harada H., Yamashita U., Kurihara H., Fukushi E., Kawabata J., Kamei Y. Antitumor activity of palmitic acid found as a selective cytotoxic substance in a marine red alga // Anticancer Res. 2002. V. 22. N 5. P. 25872590.

141. Burov S., Epstein N. Peptides useful for treating GnRH associated diseases //WO 2005/116058 Al. 27.05.2004.

142. Pati D., Habibi H.R. Inhibition of human hepatocarcinoma cell proliferation by mammalian and fish gonadotropin-releasing hormones // Endocrinology. 1995. V. 136. N 1. P. 75-84.

143. LaCasse E.C., Lefebvre Y.A. Nuclear localization signals overlap DNA- or RNA-binding domains in nucleic acid-binding proteins // Nucleic Acids Research. 1995. V. 23. N 10. P. 1647-1656.

144. Conti E., Uy M., Leighton L.,. Blobel G., Kuriyan J. Crystallographic Analysis of the Recognition of a Nuclear Localization Signal by the Nuclear Import Factor Karyopherin a // Cell. 1998. V. 94. N 2. P. 193-204.

145. Ogris M., Carlisle R.C., Bettinger Т., Seymour L.W. Melittin Enables Efficient Vesicular Escape and Enhanced Nuclear Access of Nonviral Gene Delivery Vectors 11 J. Biol. Chem. 2001. V. 276. N 50. P. 47550-47555.

146. Standiford D.M., Richter J.D. Analysis of a developmentally regulated nuclear localization signal in Xenopus 11 J. Cell Biol. 1992. V. 118. N5. P. 991-1002.

147. Kalderon D., Richardson W.D., Markham A.F., Smith A.E. Sequence requirements for nuclear location of simian vims 40 large-T antigen // Nature. 1984. V. 311. N 5981. P. 33-38.

148. Nishio K, Nishiuchi Y., Ishimaru M., Kimura T. Chemical synthesis of kurtoxin, a T-type calcium channel blocker // Int. J. Pept. Res. Ther. 2003. V. 10. N5-6. P. 589-596.

149. Ginj M., Hinni K., Tschumi S., Schulz S., Maecke H. R. Trifunctional somatostatin-based derivatives designed for targeted radiotherapy using auger electron emitters 11 J. Nucl. Med. 2005. V. 46. N 12. P. 2097-2103.

150. Ross R. The pathogenesis of atherosclerosis: a perspective for the 1990s // Nature. 1993. V. 362. N 6423. P. 801-809.

151. Radomski M. W., Palmer R.M., Moncada S. Comparative pharmacology of endothelium-derived relaxing factor, nitric oxide and prostacyclin in platelets //Br. J. Pharmacol. 1987. V. 92. N 1. P. 181-187.

152. Thatcher G.R.J., Weldon H. NO problem for nitroglycerin: organic nitrate chemistry and therapy // Chem. Soc. Rev. 1998. V. 27. N 5. P. 331-337.

153. Singh R.J., Hogg N., Joseph J., Kalyanaraman B. Mechanism of Nitric Oxide Release from S-Nitrosothiols // J. Biol. Chem. 1996. V. 271. N 31. P. 18596-18603.

154. Tao L., English A.M. Protein S-glutathiolation triggered by decomposed S-nitrosoglutathione II Biochemistry. 2004. V. 43. N 13. P. 4028-4038.

155. Whiteside W.M., Sears D.N., Young P.R., Rubin D.B. Properties of Selected S-Nitrosothiols Compared to Nitrosylated WR-1065 II Radiat. Res. 2002. V. 157. N5. P. 578-588.

156. Soler M. N., Bobe P., Benihoud K., Lemaire G., Roos B. A., Lausson S. Gene therapy of rat medullary thyroid cancer (Mtc) by naked NO synthase II DNA injection // J. Gene Med. 2000. V. 2. N 5. P. 344-352.

157. Richardson G., Benjamin N. Potential therapeutic uses for S-nitrosothiols // Clin. Sci. 2002. V. 102. N 1. P. 99-105.

158. Janczuk A.J., Jia Q., Xian M., Wen Z., WangP.G., Cai T. NO donors with anticancer activity II Expert Opin. Ther. Patents. 2002. V. 12. N 6. P. 819826.

159. Clark S. New treatments for advanced and metastatic colorectal cancer -clinical applications II Austr. Prescriber. 2002. V. 25. N 5. P 111-113.

160. Wood M.J.A., Charlton H.M., Wood K.J., Kajiwara K, Byrnes A.P. Immune responses to adenovirus vectors in the nervous system // Trends in Neurosciences. 1996. V. 19. N 11. P. 497-501.

161. Thomas C.E., Ehrhardt A., Kay M.A. Progress and problems with the use of viral vectors for gene therapy // Nat. Rev. Genet. 2003. V. 4. N 5. P. 346-358.

162. Dorigo O., Berek J.S. Gene therapy for ovarian cancer: development of novel treatment strategies // Int. J. Gynecol. Cancer. 1997. V. 7. N1. P. 1-13.

163. Gottschalk S., Sparrow J. T., Hauer J., Mims M.P., Leland F.E., Woo S.L.C., Smith L.C. A novel DNA-peptide complex for efficient gene transfer and expression in mammalian cells // Gene Ther. 1996. V. 3. N 5. p. 448-457.

164. Harbottle R.P., Cooper R.G., Hart S.L., Ladhoff A., McKay T., Knight A.M., Wagner E., Miller A.D., Coutelle C. An RGD-oligolysine peptide: a prototype construct for integrin-mediated gene delivery // Hum. Gene Ther. 1998. V. 9. N 7. P. 1037-1047.

165. Foster M.R., Hornby E.J., Brown S., Kitchin J., Hann M., Ward P. Improved potency and specificity of Arg-Gly-Asp (RGD) containingpeptides as fibrinogen receptor blocking drugs // Thromb. Res. 1993. V. 72. N3.P. 231-245.

166. Melikov K., Chernomordik L.V. Arginine-rich cell penetrating peptides: from endosomal uptake to nuclear delivery // Cell. Mol. Life Sci. 2005. V. 62. N23. P. 2739-2749.

167. M. Silhol, M. Tyagi, M. Giacca, B. Lebleu, E. Vives. Different mechanisms for cellular internalization of the HTV-1 Tat-derived cell penetrating peptide and recombinant proteins fused to Tat // Eur. J. Biochem. 2002. V. 269. N 2. P. 494-501.

168. Richard J.P., Melikov K., Vives E., Ramos C., Verbeure B., Gait M.J., Chernomordik L. V., Lebleu B. Cell-penetrating peptides. A reevaluation of the mechanism of cellular uptake // J. Biol. Chem. 2003. V. 278. N 1. P. 585-590.

169. Rogers F.A., Manoharan M., Rabonovitch P., Ward D.C., Glazer P.M. Peptide conjugates for chromosomal gene targeting by triplex-forming oligonucleotides. Nucleic Acids Res. 2004. V. 32. N 22. P. 6595-6604.

170. Gait M.J. Peptide-mediated cellular delivery of antisense oligonucleotides and their analogues. Cell. Mol. Life Sci. 2003. V. 60. N 5. P. 844-853.

171. Messori L., Temperini C., Piccioli F., Animati F., Di Bugnob C., Orioli P. Solution chemistry and DNA binding properties of MEN 10755, a novel disaccharide analogue of doxorubicin // Bioorg. Med. Chem. 2001. V. 9. N7. P. 1815-1825.

172. Lee C.J., Kang J.S., Kim M.S., Lee K.P., Lee M.S. The study of doxorubicin and its complex with DNA by SERS and UV-resonance Raman spectroscopy // Bull. Korean Chem. Soc. 2004. V. 25, N 8. P. 1211-1216.

173. Hall S. W., Benjamin R.S., Burgess M.A., Bodey G.P., Luna M.A., Freireich E.J. Doxorubicin-DNA complex: a phase I clinical trial // Cancer Treat. Rep. 1982. V. 66. N 12. P. 2033-2037.

174. Paul C., Gahrton B.G., Gahrton G., Lockner D., Peterson C. Reducing the cardiotoxicity of anthracyclines by complex-binding to DNA // Cancer. 1981. V. 48. N7. P. 1531-1534.

175. Rinnova M. , Souv.ek M, Lebl M. Solid-phase peptide synthesis by fragment condensation: Coupling in swelling volume // Lett. Pept. Sci. 1999. V. 6. N 1. P. 15-22.

176. Weber P.J.A., BaderJ.E., Folkers G., Beck-Sickinger A.G. A fast and inexpensive method for N-terminal fluorescein-labeling of peptides // Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998. V. 8. N 6. P. 597-600.

177. Игнатович И.А. Катионные пептиды как средство переноса ДНК в клетки млекопитающих : Дис. . канд. биол. наук. СПб., 2005. 120 с.

178. Morphological and biochemical assays of apoptosis. Duke R.C., Cohen J.J. II Current Protocols in Immunology. Coligan I.S., Kruisbeek A.M., Margulies D.N., Shevach S.M., Strober W. (eds). New York: Wiley and Sons. Inc., 1992. V. 1. P. 3.17.1-3.17.16.

179. Futaki S., Ohashi W., Suzuki Т., Niwa M., Tanaka S., Ueda K., Harashima H., Sugiura Y. Stearylated arginine-rich peptides: A new class of transfection systems//Bioconjug. Chem. 2001. V. 12. N6. P. 1005-1011.

180. Rudolph C., Plank C., Lausier J., Schillinger U., Muller R.H., Rosenecker J. Oligomers of the arginine-rich motif of the HIV-1 TAT protein are capable of transferring plasmid DNA into cells // J. Biol. Chem. 2003. V. 278. N 13. P. 11411-11418.

181. Niidome T., Ohmori N., Ichinose A., Wada A., Mihara H., Hirayama T., Aoyagi H. Binding of cationic alpha-helical peptides to plasmid DNA and their gene transfer abilities into cells // J. Biol. Chem. 1997. V. 272. N 24. P. 15307-15312.

182. Cartier R., Reszka R. Utilization of synthetic peptides containing nuclear localization signals for nonviral gene transfer systems // Gene Therapy. 2002. V. 9.N3.P. 157-167.

183. Liu Q.Y., Dou K.F., Zhang J.S., Sun L., Huang L.Y., Zhang Y.Q. Gonadotropin hormone-releasing hormone analog induces apoptosis in human hepatocarcinoma cell in vitro // Shijie Huaren Xiaohua Zazhi. 2003. V. 11. N9. P. 1329-1332.

184. Collas P., Alestrom P. Preparation of DNA-NLS complexes for microinjection into fertilized zebrafish eggs // Zebrafish Sci. Monitor. 1996.1. V 4. N 1. P. 3.

185. Лазарев B.H., Говорун B.M., Александрова H.M., Лопухин Ю.М. Генная терапия хронических инфекционных заболеваний урогенитального тракта с использованием цитотоксических пептидов // Вопросы медицинской химии. 2000. Т. 46. N 3. С. 324-331.

186. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays // J. Immunol. Methods. 1983. V. 65. N 1-2. P. 55-63.

187. Berger A., Noguchi J., Katchalski E. Poly-L-cysteine // J. Am. Chem. Soc. 1956. V. 78. N 17. P. 4483-4488.

188. Дэвыни Т., ГергейЯ. Аминокислоты, пептиды и белки. Под редакцией Незлина Р.С. М.: «Мир», 1976, 364 с.

189. Synthetic peptides as antigens. Solid-Phase Peptide Synthesis. Plaue S., Briand J. P. II Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology. Burdon R.H., Knippenberg P.H. (eds). Amsterdam: Elsevier, 1988.1. V 19. P. 41-94.

190. Kaiser E., Bossinger C.D., Colescott R.L., Olsen O.B. Color test for terminal prolyl residues in the solid-phase synthesis of peptides // Anal. Chim. Acta. 1980. V. 118. P. 149-151.

191. Krchnark V., Vagner J., Safar P., Lebl M. Non-invasive continuous monitoring of solid phase peptide synthesis by acid-base indicator // Coll. Czech. Chem. Comm. 1988. V. 53. P. 2542-2548.

192. Pischel H., Holy A., Wagner G. Immunosupressant antigene conjugates XXI. Synthesis of conjugates of 5-halouracils with proteins using activated esters // Collect. Czech. Chem. Commun. 1979. V. 44. P. 1634-1641.

193. Applied Biosystems. Introduction to cleavage technique. 2nd edition. Foster City, 1995.

194. Dutta A.S., Barrington F. J. A., Giles M.B. Polypeptides. Part 15. Synthesis and biological activity of alpha-aza-analogues of luliberin modified in position 6 and 10 // J. Chem. Soc. Perkin 1. 1979. N 2. P. 379388.

195. Shinagawa S., Fujino M. Synthesis of a highly potent analog of luteinizing hormone-releasing hormone (LH-RH) des Gly-NH210, Pro-NHEt9.-LH-RH // Chem. Pharm. Bull. 1975. V. 23. N P. 229-232.

196. Guttmann S., Biossonnas R.A. Synthese d'analogues structuroux de la bradikinine //Helv. Chim. Acta. 1961. Bd. 44. S. 1713-1723.

197. Fisher R.F., Whetstone R.R. Peptide derivatives containing two trifunctional amino acids // J. Amer. Chem. Soc. 1954. V. 76. N 20. P. 50765080.

198. Gisin B.F. The preparation of Merrifield-resins through total esterification with cesium salts//Helv. Chim. Acta. 1973. Bd. 56. S. 1476-1482.