Нестин в клетках головного мозга крыс (иммуногистохимическое исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат медицинских наук Гиляров, Александр Владимирович

• Гиляров, Александр Владимирович
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Гиляров, Александр Владимирович

Список использованных сокращении

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Экспрессия нестина в конечном мозге крыс в ранний постнатальный период онтогенеза

1.1. Первый день постнатального развития

1.2. Пятый день постнатального развития

1.3. Десятый день постнатального развития

1.4. Четырнадцатый день постнатального развития

2. Экспрессия нестина в конечном мозге половозрелых животных

3. Экспрессия нестина в конечном мозге половозрелых животных после ишемии

3.1 Характеристика ишемического поражения

3.2 Экспрессия белков промежуточных филаментов (нестин, виментин, GFAP) в клетках головного мозга после ишемии

3.2.1 Нестин

3.2.2 Виментин и GFAP

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ

1. Нестин в раннем постнатальном периоде онтогенеза

2. Нестин в конечном мозге половозрелых животных

3. Экспрессия нестина клетками конечного мозга после ишемии

4. Нестин как маркер нейральных стволовых клеток

5. Взаимодействие нестина с другими белками промежуточных филаментов 120 Заключение

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Нестин в клетках головного мозга крыс (иммуногистохимическое исследование)»

Актуальность темы

Цитоскелет принимает непосредственное участие во всех внутриклеточных процессах. Одним из важнейших компонентов цитоскелета являются промежуточные филаменты (ПФ). Они создают внутриклеточный каркас, обеспечивают упругость клетки, поддерживают упорядоченность I расположения компонентов цитоплазмы, координируют связи между внеклеточным матриксом, цитоплазмой и ядром [Улумбеков, Челышев, 2007]. Несмотря на обширный литературный материал, посвященный ПФ [Herrmann, Aebi, 2000; Strelkov et al., 2003; Herrmann, Aebi, 2004; Goldman et al., 2008 и др.], они остаются крайне малоизученными. В настоящее время известно более 50 белков промежуточных филаментов, которые разделяют на шесть классов, основываясь на сходстве в их аминокислотной последовательности [Cooper, 1997; Lendahl et al., 1990]. Одним из самых загадочных и малоизученных белков ПФ является нестин.

На нестин возлагаются большие надежды в качестве иммуноморфологического маркера нейральных стволовых/прогениторных клеток (НСПК). Исследования в области стволовых клеток требуют наличия специфических маркеров, выявление которых необходимо не только для более глубокого понимания нейрогенеза, но и может быть полезным для разработки подходов к лечению различных заболеваний и состояний центральной нервной системы. До настоящего времени не существует маркеров, которые бы были специфичны для НСПК. На роль такого маркера предполагается нестин. Однако противоречивый характер данных разных авторов не дает возможности однозначно считать нестин маркером НСПК.

Нестин был открыт в 1985 г. [Hockfield, McKay, 1985]. Ген нестина был охарактеризован в 1990 г. [Lendahl et al., 1990].

Известно, что нестин активно экспрессируется в клетках головного мозга млекопитающих в эмбриональный период онтогенеза [Hockfield, McKay, 1985; Dahlstrand et al., 1995]. В мозге взрослых животных нестин, напортив, почти не обнаруживается. Показано, что по мере дифференцировки нервной ткани синтез нестина подавляется [Zimmerman etal., 1994; Lothian, Lendahl, 1997], а в дифференцирующихся астроцитах и нейронах начинают экспрессироваться глиальный фибриллярный кислый белок (GFAP) и белки нейрофиламентов, соответственно. Важно отметить, что при этом недостаточно разработанными остались вопросы о том когда и где происходит смена ПФ. Изучению экспрессии нестина в раннем постнатальном периоде онтогенеза посвящено малое количество работ [Wie et al., 2002]. Между тем, ранний постнатальный период является очень важным этапом онтогенеза. В этот период происходит адаптация к условиям внеутробной жизни. У человека он длится 28 дней после рождения, у крыс — 14 дней. В этот период в головном мозге млекопитающих происходит ряд процессов (пролиферация, дифференцировка, миграция и др.), обуславливающих окончательное созревание нервной системы.

В центральной нервной системе (ЦНС) взрослых млекопитающих нестин в норме обнаруживается только в субвентрикулярной зоне боковых желудочков и зубчатой фасции гиппокампа [Cameron, McKay, 2001; Fukuda et al., 2003; Ernst, Christie, 2005; Ogita et al., 2005; Zecevic et al., 2005].

Однако при ряде патологических состояний наблюдается повышение экспрессии нестина. Одним из таких состояний является ишемия головного мозга. Ишемия — одно из наиболее распространенных и тяжелых поражений центральной нервной системы, характеризующихся острым развитием очаговой и общемозговой неврологической симптоматики. Появление нестина после ишемии ассоциируют с нейральными стволовыми клетками, предполагая, что при этом происходит замена погибших клеток новообразованными [Sharp et al., 2002; Не et al., 2005]. Тем не менее на настоящее время в литературе нет однозначных данных, подтверждающих эту гипотезу.

Таким образом, изучение экспрессии нестина в клетках конечного мозга млекопитающих актуально и имеет не только фундаментальное, но практическое значение.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось изучение экспрессии нестина в клетках конечного мозга крыс на отдельных этапах онтогенеза и после ишемического воздействия с помощью одного из наиболее совершенного из существующих методов — иммуногистохимии. В соответствие с целью исследования были сформированы следующие задачи:

1. Изучение пространственно-временного распределения клеток, содержащих нестин, в ранний постнатальный период онтогенеза.

2. Характеристика нестин-иммунопозитивных клеток у взрослых интактных животных.

3. Определение морфологических типов и локализации нестин-иммунопозитивных клеток после ишемического повреждения ЦНС.

Научная новизна

В настоящем исследовании впервые показаны изменения профиля белков ПФ в клетках конечного мозга крыс в ранний постнатальный период онтогенеза. Продемонстрирована зависимость экспрессии нестина от фазы развития формаций мозга, степени зрелости структур. Проведен сравнительный анализ изменения профиля белков ПФ в клетках конечного мозга крыс в постишемический период с изменениями, имеющими место в ранний постнатальный период.

Основные положения, выносимые на защиту

1. В пределах мозга существуют региональные различия в экспрессии нестина. Нестин-иммунопозитивные клетки в коре головного мозга и в гиппокампе экспрессируются на разных стадиях развития нервной ткани.

2. Транзиторная общая ишемия головного мозга приводит к индукции синтеза нестина преимущественно в астроцитах.

3. Нестин является неспецифическим маркером нейтральных стволовых/прогениторных клеток. Использование нестина, как маркера НСПК, возможно только с учетом морфологии и локализации нестин-иммунопозитивных клеток, сочетания методов световой и конфокальной микроскопии и использования других маркеров.

Теоретическое и практическое значение исследования

Настоящая работа относится к числу фундаментальных исследований в области нейрогистологии. Полученные данные наглядно демонстрируют, что использование нестина как маркера нейральных стволовых клеток in situ возможно только при соблюдении ряда условий: обязательный учет морфологии и локализации нестин-иммунопозитивных клеток, сочетание методов световой и конфокальной микроскопии, использование других маркеров. Нестин не следует считать специфическим маркером нейральных стволовых клеток. Полученные данные могут быть использованы как при проведении научных экспериментов с применением иммуногистохимических методов, так и в качестве учебных материалов в курсах по нейроморфологии и молекулярной биологии для студентов медицинских и биологических ВУЗов.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Гиляров, Александр Владимирович

Выводы:

1. В ранний постнатальный период онтогенеза нестин экспрессируется в коре головного мозга, гиппокампе, субвентрикулярной зоне боковых желудочков в радиальных глиоцитах, астроцитах, низкодифференцированных делящихся клетках, мигрирующих клетках, эпендимоцитах и эндотелиоцитах. По мере созревания нервной ткани в конечном мозге крыс происходит снижение экспрессии нестина.

2. У взрослых интактных животных нестин экспрессируется в клетках субэпендимной области субвентрикулярной зоны боковых желудочков мозга, менингоцитах, эндотелиоцитах.

3. После транзиторной общей ишемии головного мозга нестин экспрессируется в астроцитах в очаге поражения, клетках субэпендимного слоя субвентрикулярной зоны боковых желудочков мозга, эпендимоцитах, неидентифицируемых нестин-иммунопозитивных/ GFAP-иммунонегативных клетках, эндотелиоцитах, менингоцитах.

4. В центральной нервной системе популяция нестин-иммунопозитивных клеток гетерогенна как в раннем постнатальном периоде онтогенеза, так и у взрослых животных.

5. Нестин не следует рассматривать в качестве специфического маркера пролиферирующих клеток нейральной дифференцировки, поскольку, наряду с различными популяциями нейральных клеток, нестин экспрессируется в клетках стенки капилляров мозга и других органах и тканях.

6. С помощью маркирования нестина, учета морфологии и локализации нестин-иммунопозитивных клеток, а также сочетания методов световой и конфокальной микроскопии и использования других маркеров возможно определение популяции нейральных стволовых клетках in situ. Таким образом, нестин можно использовать как маркер нейральных стволовых клеток в комбинации с другими методами.

Заключение

Таким образом, в настоящей работе нами получены новые данные об экспрессии белка промежуточных филаментов нестина клетками конечного мозга на отдельных этапах онтогенеза и после ишемического воздействия.

Изучено пространственно-временное распределение клеток, содержащих нестин, s в ранний постнатальный период онтогенеза, и показано, что существует зависимость экспрессии нестина от фазы развития формаций мозга, степени зрелости структур. Кроме того, продемонстрированы изменения профиля белков ПФ в клетках конечного мозга крыс в ранний постнатальный период онтогенеза.

Определены морфологические типы и локализация нестин-иммунопозитивных клеток после ишемического повреждения ЦНС и установлено, что транзиторная общая ишемия головного мозга приводит к индукции синтеза нестина преимущественно в астроцитах в очаге поражения и вне его. Проведен сравнительный анализ изменения профиля белков ПФ в клетках конечного мозга крыс в постишемический период с изменениями, имеющими место в ранний постнатальный период и установлен факт, что эти изменения носят сходный характер.

В соответствии с полученными данными можно заключить, что необходимо дальнейшее изучение нестина. Остается недоказанным предположение о том, что нестин-иммунопозитивные клетки в гиппокампе являются глиобластами, а в коре головного мозга — клетками-предшественниками нейронов. Специального исследования требует изучение путей миграции в гиппокампе. Также необходимо уточнить направление дифференцировки выявленных нестин-иммунопозитивных-GFAP-иммунонегативных клеток после ишемии головного мозга. Кроме того, еще предстоит выяснить, действительно ли в эпендимном слое боковых желудочков располагаются столовые клетки, а в субэпендимном — пролиферирующие клетки-предшественники.

Изучение экспрессии нестина имеет большое как фундаментальное, так и прикладное значение для понимания процессов онтогенеза, дифференцировки стволовых клеток, адаптации и восстановления нервной ткани, и должно носить комплексный характер с использованием методов генетики, морфологии, молекулярной биологии и физиологии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Гиляров, Александр Владимирович, 2009 год

1. Викторов, И. В. Стволовые клетки мозга млекопитающих: биология стволовых клеток in vivo и in vitro / И. В. Викторов // Известия АН. Серия биологическая. — 2001. — № 6. — С. 646-655.

2. Гиляров, А. В. Изменение состава промежуточных филаментов в клетках конечного мозга крыс в ранний постнатальный период онтогенеза / А. В. Гиляров, Д. Э. Коржевский, В. А. Отеллин // Ж. эволюц. биохимии и физиол. — В печати.

3. Гиляров, А. В. Нестин в клетках центральной нервной системы /

4. A. В. Гиляров // Морфология. — 2007. — Т. 131. — №1. — С. 85-90.

5. Гистология: учеб. пособие / под ред. Э. Г. Улумбекова, Ю. А. Челышева. -~М. :ГЭОТАР, 2007.

6. Дыбан, А. П. Стволовые клетки в экспериментальной и клинической медицине / А. П. Дыбан, П. А. Дыбан // Мед. акад. журн. — 2002. — Т. 2. — №3. — С. 3-24.

7. Коржевский, Д. Э. Краткое изложение основ гистологической техники для врачей и лаборантов гистологов / Д. Э. Коржевский. — СПб. : Кроф, 2005.

8. Коржевский, Д. Э. Иммуноцитохимическое выявление нейронов головного мозга помощью селективного маркера NeuN / Д. Э. Коржевский, Е. Г. Гилерович, Н. Н. Зинькова, И. П. Григорьев,

9. B. А. Отеллин // Морфология. — 2005. — Т. 128. — №5. — С. 76-78.

10. Коржевский, Д. Э. Оптимизация метода иммуноцитохимического выявления нестина для парафиновых срезов головного мозга крысы /

11. Д. Э. Коржевский, А. В. Гиляров // Морфология. — 2006. — Т. 130. — №6. — С. 78-80.

12. Коржевский, Д. Э. Применение обезвоживающих фиксаторов, содержащих соли цинка, в нейрогистологических исследованиях / Д. Э. Коржевский, И. П. Григорьев, В. А. Отеллин // Морфология. — 2006. — Т. 129. — №1. — С. 85-86.

13. Коржевский, Д. Э. Индукция синтеза нестина в части клеток головного мозга крысы под влиянием ишемического повреждения / Д. Э. Коржевский, О. В. Кирик, А. В. Гиляров, М. В. Ленцман, Т. Д. Власов // Морфология. — 2007. — Т. 131. — №1. — С. 23-26.

14. Коржевский, Д. Э. Реверсия эмбрионального фенотипа глиальных клеток под влиянием кратковременной общей ишемии головного мозга / Д. Э. Коржевский, О. В. Кирик, А. В. Гиляров, М. В. Ленцман, Т. Д. Власов // Морфология. —- 2006. — Т. 129. — №2. — С. 48.

15. Коржевский, Д. Э. Иммуноцитохимическое выявление астроцитов в срезах головного мозга в сочетании с окраской по Нисслю / Д. Э. Коржевский, В. А. Отеллин // Морфология. — 2004. — Т. 125. — №3. — С. 100-102.

16. Коржевский, Д. Э. Индукция синтеза нестина в части клеток головного мозга крысы под влиянием ишемического повреждения / Д. Э. Коржевский, М. В. Ленцман, А. В. Гиляров, О. В. Кирик, Т. Д. Власов // Морфология. — 2007. — Т. 131. — №1. — С. 23-26.

17. Коржевский, Д. Э. Использование моноклональных антител к ядерному белку PCNA для выявления пролиферирующих клеток в развивающемся головном мозге эмбриона человека / Д. Э. Коржевский // Морфология. — 2000. — Т. 118. — №5. — С. 68-70.

18. Круглякова, Е. П. Нестин-экспрессирующие клетки в гиппокампе человека / Е. П. Круглякова, А. В. Хорвяков, Н. П. Шиханов, Г. М. МакКхан II, И. Ваэль, П. П. Кругляков, А. А. Сосунов // Морфология. — 2004. — Т. 126. — № 6. — С. 19-25.

19. Подгорный, О. В. Дифференцировка и поведение нейральных стволовых клеток человека в культуре ткани и при трансплантации в головной мозг крыс: автореф. дис. канд. биол. : защищена 07.06.2006 / О. В. Подгорный. — М., 2006.

20. Неврология / под ред. Самуэльс М. — М.; Практика, 1997.

21. Стадников, А. А. Стволовые клетки и репаративная регенерация в постнатальном онтогенезе млекопитающих / А. А. Стадников, Н. Н. Шевелюк // Морфология. — 2006. — Т. 30. — №6. — С. 84-88.

22. About, I. Nestin expression in embryonic and adult human teeth under normal and pathological conditions / I. About, D. Laurent-Maquin, U. Lendahl, T. A. Mitsiadis // American J. of Pathology. — 2000. — V. 157. —- №1. — P. 287-295.

23. Almqvist, P. M. Immunohistochemical detection of nestin in pediatric brain tumors / P. M. Almqvist, R. Mah, U. Lendahl, B. Jacobsson, G. Hendson // J. Histochem. Cytochem. — 2002. — V. 50. — №2. — P. 147-158.

24. Altman, J. Autoradiographic and histological evidence of postnatal hippocampal neurogenesis in rats / J. Altman, G. D. Das // J. Сотр. Neurol. — 1965. —V. 124.—№3. —P. 319-335.

25. Alvarez-Buylla, A. Identification of neural stem cells in the adult vertebrate brain / A. Alvarez-Buylla, B. Seri, F. Doetsch // Brain Res. Bull. — 2002. — V. 57. — №6. — P. 751-758.

26. Bohlen und Halbach, von O. Immunohistological markers for staging neurogenesis in adult hippocampus / vonO. Bohlen und Halbach // Cell Tissue Res. — 2007. — V. 329. — №3. — P. 409-420.

27. Bystron, I. The first neurons of the human cerebral cortex / I. Bystron, P. Rakic, Z. Molnar, C. Blakemore // Nature neuroscience. — 2006. — V. 9.7. —P. 880-886.

28. Cameron, H. A. Adult neurogenesis produces a large pool of new granule cells in the dentate gyrus / H. A. Cameron, R. D. McKay // J. Сотр. Neurol.2001.—V. 435. —№4. —P. 406-417.

29. Cattaneo, E. Proliferation and differentiation of neuronal stem cells regulated by nerve growth factor / E. Cattaneo, R. McKay // Nature. — 1990. — V. 347. — №6295. — P. 762-765.

30. Choi, В. H. Radial glia in the human fetal cerebrum: a combined Golgi, immunofluorescent and electron microscopic study / В. H. Choi, L. W. Lapham//Brain Res. 1978. — V. 148. — №2. —P. 295-311.

31. Chou, Y.-H. Nestin promotes the phosphorylation-dependent disassembly of vimentin intermediate filaments during mitosis / Y.-H. Chou, S. Khuon, H. Herrmann, R. Goldman // Mol. Biol. Cell. — 2003. — V. 14. — №4. — P. 1468-1478.

32. Clarke, S. R. Reactive astrocytes express the embryonic intermediate neurofilament nestin / S. R. Clarke, A. K. Shetty, J. L. Bradley, D. A. Turner // Neuroreport. — 1994. — V. 5. — №15. — P. 1885-1888.

33. Cooper, G. M. The cell: a molecular approach / G. M. Cooper // Washington, D.C.: ASM Press. —1997.

34. Craig, C. G. Migrational analysis of the constitutively proliferating subependymal population in adult mouse forebrain / C. G. Craig, R. D'sa, С. M. Morshead, A. Roach, D. vanderKooy // Neuroscience. — 1999. — V. 93. —№3. —P. 1197-1206.

35. Dahlstrand, J. Expression of the class VI intermediate filament nestin in human central nervous system tumors / J. Dahlstrand, V. P. Collins, U. Lendahl // Cancer Res. — 1992. — V. 52. — №19. — P. 5334-41.

36. Dahlstrand, J. Characterization of the human nestin gene reveals a close evolutionary relationship to neurofilaments / J. Dahlstrand, L. Zimmerman, R. McKay, U. Lendahl // J. Cell Sci. — 1992. — V. 103. — P. 589-597.

37. Deshpande, M. Role of activated astrocytes in neuronal damage: potential links to HIV-1-associated dementia / M. Deshpande, J. Zheng, K. Borgmann, R. Persidsky, L. Wu, C. Schellpeper, A. Ghorpade // Neurotox. Res. — 2005.1. V. 7. — №3. — P. 183-92.

38. Doetsch, F. Subventricular zone astrocytes are neural stem cells in the adult mammalian brain / F. Doetsch, I. Caille, D. A. Lim, J. M. Garcia-Verdugo, A. Alvarez-Buylla // Cell. — 1999. — V. 97. — №6. — P. 703-716.

39. Duggal, N. Nestin expression in reactive astrocytes following focal cerebral ischemia in rats / N. Duggal, R, Schmidt-Kastner, A. M. Hakim // Brain Res.1997. — V. 768. -№1-2. — P. 1-9.

40. Duprey, P. What can be learned from intermediate filament gene regulation in the mouse embryo / P. Duprey, D. Paulin // Int. J. Dev. Biol. — 1995. — V. 39. — №3. — P. 443-457.

41. Eklof, B. The effect of bilateral carotid artery ligation upon acid-base parameters and substrate levels in the rat brain / B. Eklof, В. K. Siesjo // Acta. Physiol. Scand. — 1972a. —V. 86. — №4. — P. 528-538.

42. Eklof, В. The effect of bilateral carotid artery ligation upon the blood flow and the energy state of the rat brain / B. Eklof, В. K. Siesjo // Acta. Physiol. Scand. — 1972b. — V. 86. — №2. — P. 155-165.

43. Eng, L. F. Glial fibrillary acidic protein (GFAP): the major protein of glial intermediate filaments in differentiated astrocytes / L. F. Eng // J. Neuroimmunol. — 1985. — V. 8. — №4-6, P. 203-214.

44. Engel, A. K. Postnatal development of vimentin-immunoreactive radial glial cells in the primary visual cortex of the cat / A. K. Engel, С. M. Mtiller // J. Neurocytol. — 1989. — V. 18. — №4. — P. 437-450.

45. Eriksson, J. Cytoskeletal integrity in interphase cells requires protein phosphatase activity / J. Eriksson, D. Brautigan, R. Vallee, S. Olmstedt, H. Fujiki, R. Goldman // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. — 1992. — V. 89. — №22. —P. 11093-11097.

46. Ernst, C. Nestin-expressing cells and their relationship to mitotically active cells in the subventricular zones of the adult rat / C. Ernst, B. R. Christie // Eur. J. Neurosci. — 2005. — V. 22. — №12. — P. 3059-3066.

47. Frielingsdorf, H. No evidence for new dopaminergic neurons in the adult mammalian substantia nigra / H. Frielingsdorf, K. Schwarz, P. Brundin, P. Mohapel // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 2004. — V. 101. — №27. — P. 10177-10182.

48. Frojdman, К. The intermediate filament protein nestin occurs transiently in differentiating testis of rat and mouse / K. Frojdman, L. Pelliniemi, U. Lendahl, I. Virtanen, J. Eriksson // Differentiation. — 1997. — V. 61. — №4.— P. 243-249.

49. Fukuda, S. Two distinct subpopulations of nestin-positive cells in adult mouse dentate gyrus / S. Fukuda, F. Kato, Y. Tozuka, M. Yamaguchi, Y. Miyamoto, T. Hisatsune // J. Neurosci. — 2003. — V. 23. — №28. — P. 9357-9366.

50. Gage, F. H. Neurogenesis in the adult brain / F. H. Gage // J. Neurosci. — 2002. — V. 22. — №2. — P. 612-613.

51. Gage, F. H. Multipotent progenitor cells in the adult dentate gyrus / F. H. Gage, G. Kempermann, T. D. Palmer, D. A. Peterson, J. Ray // J. Neurobiol. — 1988. — V. 36. — №2. — P. 249-266.

52. Galli, R. Neural Stem Cells / R. Galli, A. Gritti, L. Bonfanti, A. L. Vescovi // Circ. Res. — 2003. — V. 92. — №6. — P. 598-608.

53. Goldman, R. D. Intermediate filaments: versatile building blocks of cell structure / R. D. Goldman, B. Grin, M, G. Mendez, E. R. Kuczmarski // Curr. Opin. Cell Biol. — 2008. — №1. — P. 28-34.

54. Guerri, C. Alcohol, astroglia, and brain development / C. Guerri, Renau-J. Piqueras // Mol. Neurobiol. — 1997. — V. 15. — №1. — P. 65-81.

55. He, Z. Hippocampal progenitor cells express nestin following cerebral ischemia in rats / Z. He, L. Cui, J. F. Meschia, D. W. Dickson, T. G. Brott, J. W. Simpkins, A. L. Day, M. McKinney // Neuroreport. — 2005. — V. 16. — №14. P 1541-1544.

56. Herrmann, H. Intermediate filaments: molecular structure, assembly mechanism, and integration into functionally distinct intracellular scaffolds / H. Herrmann, U. Aebi // Annu. Rev. Biochem. — 2004. — V. 73. — P. 749-89.

57. Herrmann, H. Intermediate filaments and their associates: multi-talented structural elements specifying cytoarchitecture and cytodynamics / H. Herrmann, U. Aebi // Curr. Opin. Cell Biol. — 2000. — V. 12. — №1. — P. 19-90.

58. Hess, D. C. Bone Marrow as a source of endothelial cells and NeuN-expressing cells after stroke / D. C. Hess, W. D. Hill, A. Martin-Studdard, J. Carroll, J. Brailer, J. Carothers // Stroke. — 2002. — V. 33. — №5. — P. 1362-1368.

59. Hirokawa, N. Organization of mammalian neurofilament polypeptides within the neuronal cytoskeleton / N. Hirokawa, N. Glicksman, M. Willard // J. Cell Biol. — 1984. — V. 98. — №4. — P. 1523-1536.

60. Hisanaga, S. Structure of the peripheral domains of neurofilaments revealed by low angle rotary shadowing / S. Hisanaga, N. Hirokawa // J. Mol. Biol. — 1988. — V. 202. — №2. — P. 297-305.

61. Hockfield, S. Identification of major cell classes in the developing mammalian nervous system / S. Hockfield, R. D. G. McKay // J. Neurosci. — 1985. — V. 5. — №12. — P. 3310-3328.

62. Hoehn, B. D. Neurogenesis in rats after focal cerebral ischemia is enhanced by indomethacin / B. D. Hoehn, T. D. Palmer, G. K. Steinberg // Stroke. — 2005. — V. 36. — №12. — P. 2718-2724.

63. Hoffman, R. M. The pluripotency of hair follicle stem cells / R. M. Hoffman // Cancer Biol. Ther. — 2006. — V. 5. — №3. — P. 232-233.

64. Holmen, S. L. Essential role for Ras signaling in glioblastoma maintenance / S. L. Holmen, В. O. Williams // Cancer Res. — 2005. — V. 65. — №18. — P. 8250-8255.

65. Holmin, S. Adult nestin-expressing subependymal cells differentiate to astrocytes in response to brain injury / S. Holmin, P. Almqvist, U. Lendahl, T. Mathiesen // Eur. J. Neurosci. — 1997. — V. 9. — №1. — P. 65-75.

66. Holmin, S. Induction of astrocytic nestin expression by depolarization in rats / S. Holmin, C. von Gertten, A. C. Sandberg-Nordqvist, U. Lendahl, T. Mathiesen // Neurosci. Lett. — 2001. — V. 314. — №3. — P. 151-155.

67. Ни, X. S. Expression of nestin following focal cerebral ischemia-reperfusion in rats / X. S. Ни, D. M. Zhou, D. Zhou // Sichuan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. —2005. —V. 36. — №5. — P. 645-648.

68. Itoh, T. Isolation of neural stem cells from damaged rat cerebral cortex after traumatic brain injury / T. Itoh, T. Satou, S. Hashimoto, H. Ito // Neuroreport. — 2005. —V. 16. —№15. —P. 1687-1691.

69. Johansson, С. B. Identification of a neural stem cells in the adult mammalian central nervous system / С. B. Johansson, S. Momma, D. L. Clarke, M. Risling, U. Lendahl, J. Frisen // Cell. — 1999. — V. 96. — №1. — P. 25-34.

70. Kagstrom, E. Recirculation in the rat brain following incomplete ischemia /

71. E. Kagstrom, M. L. Smith, В. K. Siesjo // J. Cereb. Blood Flow Metab. — 1983. —V. 3. —№2. —P. 183-192.

72. Kaya, S. S. Expression of nestin after traumatic brain injury in rat brain / S. S. Kaya, A. Mahmood, Y. Li, E. Yavuz, M. Chopp // Brain Res. — 1999. — V. 840. -№1-2. — P. 153-157.

73. Kernie, S. G. Brain remodeling due to neuronal and astrocytic proliferation after controlled cortical injury in mice / S. G. Kernie, Т. M. Erwin, L. F. Parada // J. Neurosci. Res. — 2001. — V. 66. — №3. — P. 317-326.

74. Khelfaoui, M. Early neuronal and glial determination from mouse E10.5 telencephalon embryonic stem cells: an in vitro study / M. Khelfaoui,

75. F. Guimiot, M. Simonneau // Neuroreport. — 2002. — V. 13. — №9. — P. 1209-1214.

76. Kohno, H. Induction of nestin, Ki-67, and cyclin DI expression in Muller cells after laser injury in adult rat retina / H. Kohno, T. Sakai, K. Kitahara // Graefes. Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. — 2006. — V. 244. — №1. — P. 90-95.

77. Ku, N.-O. Implications of intermediate filament protein phosphorylation / N.-O. Ku, J. Liao, C.-F. Chou, B. Omary // Cancer Metastasis. — 1996. — V. 15. —№4. —P. 11093-11097.

78. Kuroda, T. Nestin immunoreactivity in local neurons of the adult rat striatum after remote cortical injury / T. Kuroda, H. Nakamura, K. Itoh, W. R. Le, S. Yoshimura, K. Takenaka, N. Sakai // J. Chem. Neuroanat. — 2002. — V. 24. — №2. — P. 137-146.

79. Lendahl, U. CNS stem cells express a new class of intermediate filament protein / U. Lendahl, L. Zimmerman, R. D. McKay // Cell. — 1990. — V. 60. — №4. — P. 585-595.

80. Li, Y. Temporal profile of nestin expression after focal cerebral ischemia in adult rat / Y. Li, M. Chopp // Brain Res. — 1999. — V. 838. — №1-2. — P. 1-10.

81. Lin, R. C. Re-expression of the intermediate filament nestin in reactive astrocytes / R. C. Lin, D. F. Matesic, M. Marvin, R. D. McKay, O. Brustle // Neurobiol. Dis. — 1995. — V. 2. — №2. — P. 79-85.

82. Lothian, С. An evolutionarily conserved region in the second intron of the human nestin gene directs gene expression to CNS progenitor cells and to early neural crest cells / C. Lothian, U. Lendahl // Eur. J. Neurosci. — 1997.1. V. 9. —P. 452-462.

83. Luskin, M. B. Neuroblasts of the postnatal mammalian forebrain: their phenotype and fate / M. B. Luskin // J Neurobiol. — 1998. — V. 36. — №2.1. P. 221-233.

84. Maga, G. DNA polymerase epsilon interacts with proliferating cell nuclear antigen in primer recognition and elongation / G. Maga, U. Hiibscher // Biochemistry. — 1995. —V. 34. —№3. —P. 891-901.

85. Marvin, M. A rod end deletion in the intermediate filament protein nestin alters its subcellular localization in neuroepithelial cells of transgenic mice / M. Marvin, J. Dahlstrand, U. Lendahl, R. McKay // J. Cell Sci. — 1998. — V. 111. —P. 1951-1961.

86. Medina, R. J. Isolation of epithelial stem cells from dermis by a three-dimensional culture system / R. J. Medina, K. Kataoka, M. Takaishi, M. Miyazaki, N. H. Huh // J. Cell. Biochem. — 2006. — V. 98. — №1. — P. 174-184.

87. Meletis, K. Spinal cord injury reveals multilineage differentiation of ependymal cells / K. Meletis, F. Barnabe-Heider, M. Carlen, E. Evergren, N. Tomilin, O. Shupliakov, J. Frisen // PLoS Biol. — 2008. — V. 6. — №7.1. P. 182.

88. Melvin, N. Differential neurogenesis in the adult rat dentate gyrus: an identifiable zone that consistently lacks neurogenesis / N. Melvin, S. C. Spanswick, H. Lehmann, R. J. Sutherland // Eur. J. Neurosci. 2007. — V. 25. — №4. — P. 1023-1029.

89. Merkle, F. T. Radial glia give rise to adult neural stem cells in the subventricular zone / F. T. Merkle, A. D. Tramontin, J .V. Garcia-Verdugo, A. Alvarez-Buylla // PNAS. — 2004. — V. 101. — №50. — P. 17528-17532.

90. Michalczyk, К. Nestin structure and predicted function in cellular cytoskeletal organization / K. Michalczyk, M. Ziman // Histol. Histopathol. — 2005. — V. 20. — №2. — P. 665-671.

91. Mokry, J. Cerebral angiogenesis shows nestin expression in endothelial cells / J. Mokry, S. Nemecek // Gen. Physiol. Biophys. — 1999. — V. 18. — №1.1. P. 25-29.

92. Mokry, J. Nestin expression by newly formed human blood vessels / J. Mokry, D. Cizkova, S. Filip, J. Ehrmann, J. Osterreicher, Z. Kolar, D. English // Stem Cells Dev. — 2004. — V. 13. — №6. — P. 658-664.

93. Mujtaba, T. A common neural progenitor for the CNS and PNS / T. Mujtaba, M. Mayer-Proschel, M. Rao // Dev. Biol. — 1998. — V. 200. — №1. — P. 1-15.

94. Nakagawa, T. Localization of nestin in amygdaloid kindled rat: an immunoelectron microscopic study / T. Nakagawa, O. Miyamoto, N. A. Janjua, R. N. Auer, S. Nagao, T. Itano // Can. J. Neurol. Sci. — 2004.

95. V. 31. — №4. — P. 514-519.

96. Nakamura, T. Nestin expression after experimental intracerebral hemorrhage / T. Nakamura, G. Xi, Y. Hua, J. T. Hoff, R. F. Keep // Brain Research. — 2003.— V. 981. №1-2.— P. 108-117.

97. Parker, K. Morphological, immunocytochemical and flow cytometric in vitro characterisation of a surface-adherent medulloblastoma / K. Parker,

98. G. J. Pilkington // Anticancer Res. — 2005. — V. 25. — №6B. — P. 38553863.

99. Paxinos, G. The rat brain in stereotaxic coordinates /4 ed. / G. Paxinos, C. Watson // San Diego: Academic Press. — 1998.

100. V. 145. — №3. — P. 503-514.

101. Prunell, G. F. Inflammation in the brain after experimental subarachnoid hemorrhage / G. F. Prunell, N. A. Svendgaard, K. Alkass, T. Mathiesen // Neurosurgery. — 2005. — V. 56. — №5. — P. 1082-1092.

102. Salman, H. Subventricular zone neural stem cells remodel the brain following traumatic injury in adult mice / H. Salman, P. Ghosh, S. G. Kernie // J. Neurotrauma. — 2004. — V. 21. — №3. — P. 283-292.

103. Sarnat, H. B. Regional differentiation of the human fetal ependyma: immunocytochemical markers / H. B. Sarnat // J. Neuropathol. Exp. Neurol. — 1992 V. 51. — №1. — P. 58-75.

104. Schlatt, S. Immunohistochemical localization of proliferating cell nuclear antigen as a tool to study cell proliferation in rodent and primate testes / S. Schlatt, G. F. Weinbauer // Int. J. AndroL — 1994. — V. 17. — №4. — P. 214—222.

105. Sharp, F. R. Neurogenesis following brain ischemia / F. R. Sharp, J. Liu, R. Bernabeu // Dev. Brain. Res. — 2002. — V. 134. — №1-2. — P. 23-30.

106. Smith, M. L. The density and distribution of ischemic brain injury in the rat following 2-10 min of forebrain ischemia / M. L. Smith, R. N. Auer, В. K. Siesjo // Acta Neuropathol. — 1984a. -— V. 64. — №4. — P. 319-332.

107. Song, H. J. Neural stem cells from adult hippocampus develop essential properties of functional ens neurons / H. J. Song, C. F. Stevens, F. H. Gage // Nat. Neurosci. — 2002. — V. 5. — №5. — P. 438-445.

108. Strelkov, S. V. Molecular architecture of intermediate filaments / S. V. Strelkov, H. Herrmann, U. Aebi // Bioessays. — 2003. — V. 25. — №3. — P. 243-251.

109. Taylor, J. P. Transcription of intermediate filament genes is enhanced in focal cortical dysplasia / J. P. Taylor, R. Sater, J. French, G. Baltuch, P. B. Crino // ActaNeuropathol. (Berl.). —2001. — V. 102. — №2. — P. 141-148.

110. Terling, C. Expression of the intermediate filament nestin during rodent tooth development / C. Terling, A. Rass, T. Midsiadis, K. Fried, U. Lendahl, J. Wroblewski // Int. J. Dev. Biol. — 1995. — V. 39. — №5. p. 947-956.

111. Tohyama, T. Nestin expression in embryonic human neuroepithelium and in human neuroepithelial tumor cells / T. Tohyama, V. M. Lee, L. B. Rorke, M.Marvin, R.D. McKay, J. Q. Trojanowski // Lab. Invest. — 1992. — V. 66. — №3. — P. 303-313.

112. Toti, P. Nestin expression in normal adrenal gland and adrenocortical tumors / P. Toti, M. Regoli, G. Nesi, R. Occhini, S. Bartolommei, L. Fonzi, E. Bertelli // Histol Histopathol. 2005. — V. 20. — №4, p. 1115-1120.

113. Veselska, R. Nestin expression in the cell lines derived from glioblastoma multiforme / R. Veselska, P. Kuglik, P. Cejpek, H. Svachova, J. Neradil, T. Loja, J. Relichova // BMC Cancer. — 2006. — V. 6. — №1. — P. 32.

114. Voigt, Т. Development of glial cells in the cerebral wall of ferrets: direct tracing of their transformation from radial glia into astrocytes / T. Voigt // J. Сотр. Neurol. — 1989. —V. 289. — №1. — P. 74-88.

115. Yagita, Y. Differential expression of Musashil and nestin in the adult rat hippocampus after ischemia / Y, Yagita, K. Kitagawa, T. Sasaki, T. Miyata, H. Okano, M. Hon, M. Matsumoto // J. Neurosci. Res. — 2002. — V. 69. — №6. — P. 750-756.

116. Yamada, T. Vimentin immunoreactivity in normal and pathological human brain tissue / T. Yamada, T. Kawamata, D. G. Walker, P. L. McGeer // Acta. Neuropathol. — 1992. V. 84. — №2. — P. 157-162.

117. Yang, P. Expression of nestin and glial fibrillary acidic protein in injured spinal cord of adult rats at different time / P. Yang, X. He, J. Qu, H. Li,

118. B. Lan, P. Yuan, G. Wang // Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. -— 2005. — V. 19. — №6. — P. 411-415.

119. Ying, Z. Expression of neural stem cell surface marker CD133 in balloon cells of human focal cortical dysplasia / Z. Ying, J. Gonzalez-Martinez,

120. C. Tilelli, W. Bingaman, I. Najm // Epilepsia. — 2005. — V. 46. — №11. — P. 1716-1723.

121. You, H. Immunohistochemical study of central neurocytoma, subependymoma, and subependymal giant cell astrocytoma / H. You, Y.I.Kim, S.Y.Im, H. Suh-Kim, S.H.Paek, S.H.Park, D.G.Kim, H. W. Jung // J. Neurooncol. — 2005. — V. 74. — №1. — P. 1-8.

122. Zecevic,N. Contributions of cortical subventricular zone to the development of the human cerebral cortex / N. Zecevic, Y. Chen , R. Filipovic // J. Сотр. Neurol. — 2005. — V. 491. —№2. — P. 109-1022.

123. Zhou, F. C. Moderate alcohol exposure compromises neural tube midline development in prenatal brain / F. C. Zhou, Y. Sari, T. Powrozek, C. R. Goodlett, Т. K. Li // Brain Res. Dev. Brain Res. — 2003. — V. 144. — №1.—- P. 43-55.

124. Zimmerman, L. Independent regulatory elements in the nestin gene direct trans gene expression to neural stem cells or muscle precursors / L. Zimmerman, B. Parr, U. Lendahl, M. Cunningham, R. McKay, B. Gavin, J. Mann,

125. G. Vassileva, A. McMahon // Neuron. —1994. — V. 12. — P. 11-24.

126. Zou, J. Upregulation of nestin, vimentin, and desmin in rat podocytes in response to injury / J. Zou, E. Yaoita, Y. Watanabe, Y. Yoshida, M. Nameta,

127. H. Li, Z. Qu, T. Yamamoto // Virchows Arch. — 2006. — V. 448. — №4. — P. 485-492.