Нематоды рода Bursaphelenchus и их взаимосвязь с бактериями-симбионтами на хвойных породах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.11, кандидат наук Арбузова, Елена Николаевна

• Арбузова, Елена Николаевна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Арбузова, Елена Николаевна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общая характеристика сосновой стволовой нематоды Виг8арке1епс11Ш ху1орЫ1и8 и близкородственных видов

1.2. Краткая характеристика нематод рода ВигзарИеЫпскиз

1.3. Географическое распространение

1.4. Биология нематод В. ху1орЫ1т и В. тисгопаШх

1.5. Патогенез заболевания «вилт хвойных пород»

1.6. Растения - хозяева сосновой стволовой нематоды В. ху1орШ1ш

1.7. Влияние абиотических факторов на проявление болезни «вилт хвойных пород»

1.8. Экономический ущерб

1.9. Методы защиты хвойных насаждений от сосновой стволовой нематоды В. хуЬркИш

1.10. Нематодо-бактериальный комплекс, как причина увядания

хвойных пород

1.10.1. Краткая история исследования бактерий, ассоциированных с сосновой стволовой нематодой

В. ху1орЫ1т

1.10.2. Роль бактерий в развитии вилта хвойных пород

1.10.3. Токсины, выделяемые бактериями

ГЛАВА И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Обследование лесонасаждений и складированной древесины хвойных пород

2.2. Отбор древесных проб и выделение нематод

2.3. Культивирование нематод

2.4. Идентификация нематод и бактерий

2.4.1. Морфологическая идентификация нематод

2.4.2. Молекулярная диагностика нематод

2.4.3. Молекулярная диагностика бактерий

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Фауна нематод-ксилобионтов хвойных пород

3.2. Идентификация сосновой стволовой нематоды В. xylophilus и древесной хвойной нематоды В. mucronatus с применением молекулярных методов диагностики

3.3. Разработка методов выявления и идентификации нематод В. xylophilus и В. mucronatus методом ПЦР в «реальном времени»

3.4. Видовой состав бактерий, ассоциированных с исследуемыми изолятами нематод В. mucronatus и В. xylophilus

3.4.1. Бактерии-симбионты, ассоциированные с нематодами

В. mucronatus

3.4.2. Бактерии-симбионты, ассоциированные с нематодами

В. xylophilus

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Нематоды рода Bursaphelenchus и их взаимосвязь с бактериями-симбионтами на хвойных породах»

ВВЕДЕНИЕ

Россия по запасу и площади лесов - крупнейшая лесная держава мира. На ее долю приходится четверть мирового лесного покрова. По обеспеченности лесами Россия занимает первое место в мире, обладая примерно 1/5 мировых запасов древесины.

Основные лесообразугощие породы в лесном фонде России - лиственница, сосна, ель, кедр, дуб, бук, береза, осина и др. Они занимают более 90% земель, покрытых лесной растительностью (рисунок 1).

Наибольшую площадь и запас в лесном хозяйстве составляют хвойные насаждения с преобладанием лиственницы (более 50% хвойных насаждений), произрастающие преимущественно в районах Сибири и Дальнего Востока. Сосновые древостой занимают 23%, еловые - 15% площади хозяйства.

Объектом пристального внимания лесных и карантинных служб многих стран мира в последние 25-30 лет стал опасный паразит хвойных пород -сосновая стволовая нематода (pine wood nematode) Bursaphelenchus xylophilus. Этот патоген относится к числу лесных карантинных организмов, представляющих наибольшую опасность для хвойных древостоев в Европе и Азии. Нематоды питаются на клетках смоляных каналов, вызывая их быструю гибель. В итоге, уже к концу летнего сезона, дерево полностью гибнет (рисунок 2). Увядание хвойных древостоев - вилт хвойных пород («Pine Wilt Disease»), вызываемое нематодами В. xylophilus, можно отиссти к числу наиболее опасных заболеваний хвойных насаждений в мире (Кулинич, 2009; Mamiya, 1999; Abelleira et al., 2011; Mota et al., 1999; Wang, 2009).

Рисунок 1. Схема распространения древесных пород на территории России

Рисунок 2. Участок соснового леса, пораженный сосновой стволовой нематодой В. xylophilus (Португалия, о. Мадейра) (фото О.А.Кулинича)

Сосновая стволовая нематода В. xylophilus впервые обнаружена в 1934 году на лесопилке в США в штате Луизиана в древесине сосны болотной Pinus palustris. Согласно гипотезе, этот вид нематоды был завезен из США в юго-восточную Азию и впервые выявлен в Японии в 60-х годах в погибших соснах (Mamiya, 1984). В настоящее время нематода В. xylophilus широко распространена в Японии, Китае, Тайване, Южной Корее. В 1999 году патоген обнаружен в

Португалии, куда он был занесен с деревянной упаковочной тарой, а в 2008 году паразит уже был зарегистрирован в Испании. Ущерб, наносимый В. xylophilus лесным насаждениям в вышеуказанных странах оценивается в миллиардах долларов (Кулинич и др., 2010; Wang, 2009; Mota et al., 1999; Shin Sang-Chul, 2009; Rodrigues et al, 2009).

Учитывая ограниченное распространение сосновой стволовой нематоды в мире и существенную угрозу со стороны В. xylophilus хвойным древостоям, большинство стран Европы, включая Россию, начиная с середины 1980-х годов, согласно рекомендациям Европейской и Средиземноморской организации по карантину и защите растений (ЕОКЗР), ввели жесткие ограничения на импорт древесных материалов из тех регионов мира, где распространен этот патогенный организм (Bergdahl, 1988). Территория пашей страны официально считается свободной от сосновой стволовой нематоды В. xylophilus, в то же время Россия, как крупнейший экспортер лесопродукции, уделяет особое внимание этому патогену и регулярно проводит мониторинг хвойных лесонасаждений на наличие этого объекта. Согласно анализу фитосанитарного риска, значительная часть территории России благоприятна для адаптации В. xylophilus. Подсчитано, что в случае проникновения и акклиматизации этого патогена на территории Российской Федерации возможный ущерб, по разным оценкам, может составить от 47 до 112 миллиардов рублей в год (Кулинич и др., 2010, 2012).

Актуальность темы диссертационной работы:

Вилт хвойных пород, возбудителем которого является сосновая стволовая нематода Bursaphelenchus xylophilus, относится к числу наиболее экономически значимых заболеваний хвойных лесонасаждений в мире. Большинство стран, включая Россию, внесли В. xylophilus в перечень карантинных организмов. Изучение этиологии этого заболевания в последние годы позволило сделать предположение о том, что болезнь вызывается не одним организмом - нематодой, а комплексом патогенов: нематодой В. xylophilus и связанными с ней бактериями-симбионтами, продуцирующими фитотоксины. Эта гипотеза принята рядом ученых, работающих по проблеме вилта хвойных пород (Han et al, 2003; Zhao et

а1, 2003, 2005; Тап а а1, 2004; вио е1 а!., 2006, 2007а, 2007Ь; Ут а а1, 2007), однако окончательной ясности о роли микробиоты в развитии заболевания на сегодняшний день нет.

В связи с широким распространением В. ху1орИИш в соседних с Россией странах (Китае и Японии), возможностью естественного заноса этого патогена, (как с жуками-переносчиками, так и с древесными материалами при импорте товаров), а также возможным риском адаптации этой нематоды в условиях нашей страны, актуальной проблемой является мониторинг В. хуЬрИНт и близкородственных видов на хвойных породах на территории Российской Федерации и исследование симбиотических организмов ассоциированных с нематодой, играющих определенную роль в развитии вилта хвойных пород.

Сосновая стволовая нематода В. ху1орМ1т считается видом, официально отсутствующим на территории РФ, но выявлено широкое распространение близкородственного вида В. тисгопаШБ. Древесная хвойная нематода В.тисгопаШя считается непатогенным или слабопатогенным видом, однако в результате наблюдений и опытов показано, что некоторые изоляты этого вида могут вызывать в ряде случаев гибель хвойных насаждений. В связи с этим основной целью нашей работы стало изучение бактериальной биоты древесной хвойной нематоды В. тисгопа1т распространенной на территории РФ, а также зарубежных изолятов нематод В. ху1орЫ1т.

Для достижения этой цели планировалось решение следующих задач:

1. Обследование территории РФ на наличие нематод рода ВигяарИекпсИия.

2. Изучение фауны нематод-ксилофагов в особенности видов группы «ху1ор1й1ш».

3. Изучение микробиоты ассоциированной с нематодами рода Вигб ар к е1епск т.

4. Изучение взаимосвязи нематод рода Виг5арИе1епсИш с патогенными бактериями - потенциальными возбудителями вилта хвойных пород.

Основные научные результаты и их новизна:

1. Впервые проведены широкомасштабные обследования лесонасаждений и складированных лесоматериалов в 14 административных субъектах РФ от Московской области до острова Кунашир на наличие опасного патогена - сосновой стволовой нематоды Bursaphelenchus xylophilus. Выявлено широкое распространение древесной хвойной нематоды B.mucronatus на территории России и подтверждено отсутствие В. xylophilus. Изучена фауна нематод-ксилобионтов, обитающих в стволовой части хвойных деревьев на территории Российской Федерации. Обнаруженные нематоды относятся к представителям 18 родов, 12 семейств, 3 отрядов, 2 классов. Видовой состав нематод-ксилофагов рода Bursaphelenchus был представлен видом В. mucroncitus, который зарегистрирован фактически во всех обследованных регионах страны.

2. Изучен нематодо-бактериальный комплекс, вызывающий наиболее экономически значимое заболевание хвойных лесонасаждений в мире - вилт хвойных пород:

а) С использованием методов молекулярной диагностики выявлены бактерии-симбионты различных географических изолятов нематод Bursaphelenchus mucronatus из различных регионов РФ;

б) Впервые на изолятах нематод В. mucronatus выявлены бактерии Pseudomonas fluorescens - потенциально опасные бактерии патогенного комплекса, вызывающего вилт хвойных пород; ранее этот вид бактерий регистрировался только у нематод В. xylophilus в Китае;

в) Впервые отмечено, что бактерии Pseudomonas fluorescens находятся не только у нематод В. mucronatus, обитающих в древесине, но и в трансмиссивных личинках L1V (dauer larva), переносимых насекомыми;

г) Впервые при изучении изолятов нематод В. xylophilus были обнаружены бактерии Agrobaclerium tumefaciens, вызывающие корневой рак плодовых и лесных древесных пород.

3. Создан банк живых культур нематод Bursaphelenchus miicroncitiis, включающий 25 географических изолятов, выделенных из древесины хвойных пород различных регионов Российской Федерации.

4. На основе подобранных праймеров и зондов разработана диагностика сосновой стволовой нематоды В. xylophilus и древесной хвойной нематоды B.mucronatus, которая позволяет в короткие сроки проводить точную их идентификацию методом ПЦР «в реальном времени».

Практическая значимость результатов исследований. По материалам проведенных исследований разработан стандарт организации ФГБУ «ВНИИКР» «Сосновая стволовая нематода Bursaphelenchus xylophilus (Steiner & Buhrer) Nickle. Методы выявления и идентификации», а также методические рекомендации по досмотру древесных упаковочных материалов на наличие сосновой стволовой нематоды В. xylophilus, которые могут быть использованы в практике научных исследований и при проведении досмотра и экспертиз подкарантинной продукции на наличие карантинных вредных организмов.

Для оценки распространенности в России нематод В. xylophilus и В. mucronatus рекомендуется использовать:

- идентификацию видов методом ПЦР «в реальном времени» с подобранными нами универсальными праймерами и меченными флуоресцентными красителями (FAM, HEX) зондами, который позволяет в несколько раз по времени ускорить проведение фитосанитарной экспертизы, в сравнении с используемым методом классической ПЦР;

- секвенирование популяций нематод по митохондриальному гену цитохромоксидазы COI, которое показало наиболее точные результаты по идентичности последовательностей ДНК.

Созданный банк живых культур нематод рода Bursaphelenchus является учебным пособием при обучении диагностике нематод сотрудников Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору.

Апробация работы. Материалы исследований по теме диссертации были представлены на научных конференциях: на Международной конференции «Теоретические и практические проблемы паразитологии», Москва, 2010 г.; на IX симпозиуме Российского общества нематологов с международным участием «Нематоды естественных и трансформированных экосистем», Петрозаводск, 2011 г.; на Всероссийской конференции с международным участием «Экологические и экономические последствия инвазий дендрофильных насекомых», Красноярск, 2012 г.; на Международной научной конференции «Современные проблемы общей паразитологии», Москва, 2012 г.; на Международной научной конференции «Pine Wilt Disease», Германия, Брауншвейг, 2013.

Данные исследования были поддержаны грантом РФФИ № 10-04-01644а.

Публикация результатов исследований. В основу работы положены оригинальные материалы автора, полученные в результате исследований нематод рода Bursaphelenchus и их взаимосвязи с бактериями-симбионтами на хвойных породах. По теме диссертации опубликовано 14 печатных работ на русском (11) и английском (3) языках в отечественных и зарубежных изданиях. 4 публикации в изданиях, рекомендованных ВАК Министерства науки и образования РФ.

По материалам проведенных исследований разработан стандарт организации ФГБУ «ВНИИКР» «Сосновая стволовая нематода Bursaphelenchus xylophilus (Steiner & Buhrer) Nickle. Методы выявления и идентификации», а также методические рекомендации по досмотру древесных упаковочных материалов на наличие сосновой стволовой нематоды В. xylophilus, которые могут быть использованы в практике научных исследований и при проведении досмотра и экспертиз подкарантипной продукции на наличие карантинных вредных организмов.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общая характеристика сосновой стволовой нематоды Bursaphelenchus xylophiliis и близкородственных видов

Впервые массовое увядание местных видов сосен Pinns densißora и Pinns thunbergii отмечено в Японии еще в 1913 году (Mamiya, 1984), однако причина гибели деревьев была выявлена только в 70-х годах XX столетия. В результате многолетних исследований было установлено, что причиной эпифитотий является сосновая стволовая нематода Bursaphelenchus xylophilus, а вызываемое ею заболевание получило название «pine wilt disease» («вилт хвойных пород»).

Во многих странах мира вид В. xylophilus включен в перечень карантинных объектов, и импорт необработанных соответствующим образом лесоматериалов из районов распространения этого опасного паразита запрещен. Этот фактор послужил толчком для тщательного исследования фауны, систематики, диагностики, биологии нематод рода Bursaphelenchus и особенно видов, родственных В. xylophilus. Существует предположение, что не только вид В. xylophilus, но, возможно, и другие нематоды этого рода также могут наносить ощутимый вред и вызывать заболевания деревьев (Han et al., 2003; Zhao et al, 2003, 2005; Tan et al, 2004; Guo et al, 2006, 2007a, 2007b; Yin et al, 2007). Как уже указывалось во «Введении», вид В. xylophilus не обнаруживался в лесонасаждениях России. Тем не менее, исследование биологических особенностей В. xylophilus показало, что преобладающая часть территории Российской Федерации благоприятна для адаптации этого патогена (Кулинич, Козырева, 2004; Kulinich, Kolosova, 1995; Kulinich, Orlinski, 1998).

1.2. Краткая характеристика рода ВигъаркеЬепскиь

Род ВигБарИекпскт включает в себя более 80 видов нематод (КуэБ е1 а1., 2005; ВгаавсЬ, 8с1юг^е1(1, 2013), некоторые из них связаны с хвойными породами.

Рисунок 3. Сосновая стволовая нематода ВигзарНеЫпсЪт ху\орЫ1т (самец О)

(фото А.Ю. Рысса)

Возбудитель вилта хвойных пород - нематода В. xylophilus является карантинным организмом (рисунок 3). В настоящее время известны четырнадцать близкородственных видов нематод и два подвида, входящих в группу «xylophilus»: В. xylophilus, В. populi, В. mucronatus kolymensis, В. mucronalus mucronatus, В. fraudulentus, В. gillanii, В. macromucronatus, В. conicaudatus, В. doui, В. baujardi, B.firmae, В. koreanus, В. paraluxiiriosae, В. luxuriosae, В. singaporensis (Braasch, Schonfeld, 2013), Эти виды различаются по ряду морфологических признаков и могут быть идентифицированы (таблица 1). Однако существуют близкородственные виды, дифференциация которых по морфологическим признакам крайне затруднительна. К их числу относятся: В. xylophilus, который встречается в двух формах: «М» (с мукровидным хвостом) и «R» (с округлым терминусом хвоста), В. mucronatus kolymensis, В. mucronatus mucronatus и В. fraudulentus (Vieira et al, 2009; Braasch, Schonfeld, 2013). Точная идентификация этих нематод возможна только на основе молекулярной диагностики.

Таблица 1. Ключ для морфологической идентификации видов нематод группы «хуЬрЬИия» (по ВгаазсЬ & ЯсЬопГеМ, 2013)

1 Хвост самки конический, с1 =/ 4 (в среднем), с или без мукро 2

Хвост самки цилиндрический или субцилиндрический, с1 < 4 (в среднем), с или без мукро 8

2 Хвост самки с мукро 3

Хвост самки без мукро 5

3 Хвост самки с маленьким заостренным мукро, спикулы длиной менее 30 мкм (в среднем) В.conicaudatus

Хвост самки с длинным мукро (до 7 мкм) 4

4 Мукро волосовидное или заостренное, длиной 2.5-6.5 мкм; длина спикул по дуге, 23-38 мкм В. macromucronatus

Мукро пальцевидное с широким основанием, 5-7 мкм; длина спикул по дуге 31 -37 мкм В.gillanii

5 Длина спикул по дуге 41,2-48 мкм, спикулы вытянуты в средней части, стилет 14-17 мкм, хвост самки на конце закругленный В.singaporensis

Длина спикул менее 40 мкм (в среднем), хвост самки вентрально изогнут с неправильным или округлым терминусом 6

6 Длина спикул менее 35 мкм 7

Длина спикул 35- 44 мкм, стилет 15 мкм, кондилюм В.koreanus

отсутствует, с'= 4.1

7 Длина спикул 27-30 мкм, стилет 11-16 мкм, кукулюс обособлен ВАихигюяае

Длина спикул 31-35 мкм, стилет 16-18 мк, кукулюс не обособлен В.рагаЫхиповае

8 Хвост самки цилиндрический, с мукро или без него 9

Хвост самки субцилиндрический, теринус с мукро 10

9 Терминус хвоста самки широко закругленный, без мукро, некоторые особи популяции могут иметь короткое волосовидное мукро менее 2 мкм длиной, а=33-47 мкм, экскреторная пора на уровне нервного кольца В.ху1ор1и1и$

Хвост самки цилиндрический, широко суживающийся, терминус с толстым и тупым мукро, которое менее 3-5 мкм длиной, а=27-36 мкм, экскреторная пора на уровне или ниже нервного бульбуса В./и'тае

10 Длина спикул менее 34 мкм 11

Длина спикул менее 34 - 44 мкм, с продолжающейся и всегда ровной средней частью; экскреторная пора на уровне медиального бульбуса В.рориИ

11 Хвост самки у особей из древесины широко закруглен, как у В.хуЬрИИт, иногда с маленьким неправильным выступом; в пробирке редкие самки имеют конический хвост, заканчивающийся отчетливо округлым терминусом; иногда с выступом длинной 1-2 мкм; а=36-52, Бульварная крышечка отчетливо согнута и но форме приплюснута за ним 12

Хвост самки всегда с мукро, вульварная крышечка другой формы

12 Длина мукро 4-7 мкм, часто заостренное, обычно как продолжение слегка конического по форме хвоста; кондилюс спикул обычно дорсально не отделен, капитулюм отчетливо вогнутый В.тисгопаШя тисгопаШз

Мукро менее 5 мкм; кондилюм спикул дорсально отделен, капитулюм отчетливо не выгнут 13

13 Экскреторная пора на уровне или впереди медиального бульбуса 14

Экскреторная пора на уровне или сзади медиального бульбуса; мукро маленькое волосовидное, размером 2,6-4 (в среднем менее 3) мкм; обычно обособлено от хвоста В.хуЬркНия (тисгопа{е Рэпл)

14 Мукро короткое (2 мкм длиной) и широкое у основания, обычно представляет собой но форме продолжение хвоста, кондилюс спикул отчетливо отделяется от дорсальной части В./гашШкпШя

15 Мукро обычно не является продолжением хвоста и форма его варьирует, часто пальцеобразное, в среднем более 4 мкм; кондилюс спикул часто отделен в дорсальной части, но капитулюм приплюснут В. т исгопаШэ Шут ем ¡я

Присутствие вида В. frauclulenlus, морфологически не отличимого от В. mucronatus, неоднократно регистрировалось на территории Германии и Австрии на лиственных породах. Дифференциация этих видов осуществлялась только по признаку гостальпой специфичности - считалось, что вид В. mucronatus связан только с хвойными породами, а В. fraudulentus - только с лиственными. Однако, проведенный молекулярно-генетический анализ, выявил определенные отличия в геноме этих близкородственных видов и, благодаря этому, в 2001 году вид В, fraudulentus был зарегистрирован и на хвойных породах (Braasch et al, 2001). В условиях развития современной науки невозможно достоверное определение видов нематод группы «xylophilus», основанное только на морфологических параметрах, необходимо проведение молекулярной диагностики.

1.3. Географическое распространение

Впервые сосновая стволовая нематода В. xylophilus и вызываемое ею заболевание «вилт хвойных пород» («Pine Wilt Disease») были обнаружены в Японии (Mamiya, Kiyohara, 1972; Mamiya, 1988); позднее этот патоген также был выявлен в Китае (Cheng et al, 1986), Южной Корее (Shin Sang-Chul, 2009). В 1980 годах интенсивные исследования по изучению В. xylophilus инициировались в Северной Америке (Dropkin et al, 1981; Wingfield et al, 1982; Yang, 2001). В Европе появление

I

В. xylophilus связывают с Португалией (Mota et al, 1999), куда нематода попала, по-видимому, с упаковочными древесными материалами. В 2008 году этот вид нематоды был выявлен уже в Испании, куда она была занесена усачами-переносчиками рода Monochamus (Abelleira et al, 2011; Robertson et al, 2011).

Азия. Увядание хвойных пород, первоначально выявленное в южной части Японии, в конце XX века, стремительно распространилось на большую часть страны, и нанесло существенный ущерб сосновым лесам (Mamiya, 1983, 1984; Yang,

2004). Сосновая стволовая нематода поражает экзотические и местные виды сосен в юго-восточной части Китая, на Тайване и в Южной Корее (Кулинич и др., 2010; Wang, 2009; Shin Sang-Chul, 2009).

Северная Америка. Вид В. xylophilus является эндемиком этого континента и широко распространен в лесах США и южных провинциях Канады; имеются данные об обнаружении его в Мексике (Dropkin et al., 1981; Bergdahl, 1988; Forge, Sutherland, 1996).

Европа. Первая информация об обнаружении В. xylophilus появилась в 1984 году, когда в древесной щепе, завезенной из США в Финляндию, была обнаружена сосновая стволовая нематода. Это обстоятельство вынудило правительство Финляндии и другие страны Европы ввести эмбарго на импорт древесины из США (Rautapaa, 1986).

В 1999 году в Португалии, в припортовой зоне Лиссабона, при изучении причины увядания сосен был выявлен вид В. xylophilus (Mota et al., 1999). В 2008 году новые вспышки были отмечены уже в центре Португалии, а в скором времени после этого, в 2009 году, и на острове Мадейра (Mota, Paulo, 2009; Fonseca et al., 2012).

В Испании, провинции Эстремадура, на сосне Pinus pinaster в 2008 году были зафиксированы единичные случаи обнаружения В. xylophilus. Несмотря на принятые фитосанитарные меры, в 2010 году патоген был выявлен уже в испанской провинции Понтеведра, на 7 деревьях в Галисии (Abelleira et al., 2011; Robertson et al., 2011).

Обследования хвойных лесонасаждений, проведенные в большинстве стран Европы (Италии, Швеции, Германии, Франции, Норвегии, Великобритании, Польше и др.), показали отсутствие вида В. xylophilus, однако повсеместно встречался близкородственный вид В. mucronatus (Bowers et al., 1992; Mota et al., 1999; Braasch, Enzian, 2003; Vicente et al., 2012).

Патоген расарос«ранен повсеместно Патоген распространен ограничено Новые обнаружения

Рисунок 4. Распространение сосновой стволовой нематоды Bursaphelenchus xylophilus (EPPO Plant Quarantine Data Retrieval System PQR, 2011)

Россия. Исследования по изучению возможного распространения нематоды В. xylophilus на территории Российской Федерации были начаты в 1991-1992 гг. с обследования Приморского края как района наиболее вероятного распространения вида В. xylophilus (Kulinich et al., 1994, Kulinich, Orlinskii, 1998; Kulinich, 2004). Далее были обследованы хвойные древостой и складированная древесина в ряде районов Урала и Европейской части РФ. В результате был обнаружен только близкородственный вид В. mucronatus. Дополнительной информацией по обнаружению лесных вредителей и возбудителей болезней могут служить данные экспертиз, проводимых службами карантина и защиты растений стран, импортирующих лесоматериалы из Российской Федерации (Кулинич и др., 2012). Например, Агентством продовольственной безопасности Финляндии (Evira) ежегодно досматриваются более 2000 древесных проб из России на наличие нематоды В. xylophilus (Кулинич и др., 2013). При анализе древесных проб различных хвойных пород из азиатской и европейской частей РФ зарубежными экспертами были обнаружены только нематоды, относящиеся к виду В. mucronatus.

1.4. Биология нематод В. xylophilus и В. mucronatus

Цикл развития нематод В. xylophilus и В. mucronatus сходен и связан с циклом развития черных усачей рода Monochamus (сем. Cerambycidae), которые переносят нематод с одного дерева на другое. Основными переносчиками В. xylophilus являются усачи рода Monochamus: в США - это М. carolinensis, в Японии -М. alternates, Южной Корее - М. saltuarius, Португалии - М. galloprovincialis. Нематод В. xylophilus обнаруживали также в других насекомых (златках сем. Buprestidae, долгоносиках сем. Curculionidae), однако эти насекомые являются случайными переносчиками (Linit, 1988, 1990). В свою очередь и насекомые, и нематоды тесно связаны с хвойными породами, которые являются растениями-хозяевами этих организмов.

В связи с тем, что жизненные циклы нематод видов В. xylophilus и В. mucronatus сходны, считается, что усачи, переносящие нематод В. mucronatus, могут являться векторами нематод В. xylophilus.

В результате проведенных исследований в большинстве европейских стран (Magnusson, Schroeder, 1989; Tomminen et al, 1989; McNamara, Stoen; 1988) выявлены жуки-переносчики нематод. Нематоды В. mucronatus обнаружены в жуках Monochamus sutor, М. galloprovincialis, М. urussovi. Все эти три вида жука широко распространены на территории России и европейских государств. Заслуживает внимания усач М. nitens, входящий в перечень карантинных организмов РФ. Вид является переносчиком нематоды в Японии и также распространен на территории России, на Сахалине (Кулинич и др, 1996, 2004; Kulinich et al, 1996, 1997). Еще большего внимания заслуживает усач М. saltuarius, который имеет больший ареал распространения, чем М. nitens, и является переносчиком нематод в Южной Корее (Shin Sang-Chul, 2009).

Цикл развития В. xylophilus. В начале июня молодые имаго усача рода Monochamus, несущие трансмиссивные личинки (L!V) нематод В. xylophilus, выходят из погибшего дерева и в течение двух-трех недель питаются корой на молодых веточках здоровых деревьев. В этот период (период дополнительного питания жуков) происходит выход нематод из насекомого и проникновение их в древесину здорового дерева через повреждения нанесенные жуками. Питаясь на эпителиальных клетках смоляных каналов, нематоды быстро размножаются и постепенно расселяются по всему дереву. В результате ветки, пораженные нематодами, быстро усыхают. Самки жуков после дополнительного питания откладывают яйца на пораженные или погибшие деревья. В это время, также происходит выход нематод (LjV) из жуков. Личинки жуков, отродившиеся из яиц, проникают под кору дерева, где и питаются. В конце своего развития (весной) они делают колыбельку, в которой осуществляется их окукливание. Заселение

насекомых нематодами (Ь1У) происходит перед выходом имаго из куколки. Нематоды заселяют как наружные, так и внутренние органы насекомого, проникая через дыхальца, и концентрируются в большей степени в трахеях жуков. Далее цикл развития повторяется (Маппуа, 1975, 1984; Wingfleld е! а1., 1982; и др.).

В своем развитии от яйца до имаго В. ху1орИИт проходит четыре личиночных стадии (рисунок 5). Развитие осуществляется двумя путями, существенно отличающимися друг от друга: с участием жуков рода МопосИатт - дисперсионный путь и без участия насекомых - пропагативный путь (Магшуа, 1975: \Vingfield е1 а1., 1982).

В» н|м'мк мнкынннмымио ни пиши иасгкпмши ни ШИК'ШЧ \И11|||||,|\. 1ИМН11К11 Г\' 11» »рас I к кьпо IIII н I МП о н

ИГ|К>\и.1Я1 II ИМИ1 111111.11.11} И) Па 1НН)

• • 1% М«1|НМ1|<

Л1Н Н« |Н IIIIIIIIЫГ . IIIЧ11ИКII

IV н»ф*н'1а(1)Ь IV) нгрсжчи ни натюмич ни 1 шрокмс irpi-Ki.il

ни 1И-(к 1мшм;1Н . ш'шнк-а ||»Г1МГ| и К«1|МН Ы

Рисунок 5. Жизненный цикл сосновой стволовой нематоды ВигьаркекпсИиз ху1орЫ1и& (journal.ppat.100219.g002)

Пропагативиый путь. Начинается весной и продолжается в течение всего периода вегетации растений. Развитие сосновой стволовой нематоды от яйца до имаго при наступлении благоприятных условий длится 5 дней. Пропагативный путь развития происходит после выхода личинок нематод (LiV) из жуков-моногамусов во время их дополнительного питания на молодых веточках здоровых деревьев. В результате фитофагии, а затем микофагии (на грибах Botrytis, Ceratocystis и др, содержащихся в мертвой древесине) нематоды быстро размножаются и их численность резко возрастает.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Арбузова, Елена Николаевна, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абасов М.М., Арбузова E.H., Гниненко Ю.И., Кулинич O.A., Тузов В.К. Лесопатологический мониторинг карантинных и инвазивных лесных организмов в Российской Федерации // Защита и карантин растений. - 2011. - N 9. - С. 36-37.

2. Арбузова E.H., Кулинич O.A., Мазурин Е.С., Магомедов У.Ш., Рысс А.Ю., Козырева Н.И. Нематоды-ксилофаги и бактерии-симбиотны как возможные возбудители «вилта хвойных пород» на территории России // Экологические и экономические последствия инвазий дендрофильных насекомых. Матер. Всерос. конф. Красноярск. - 2012. - С. 129-132.

3. Арбузова E.H., Кулинич О.А, Мазурин Е.С., Рысс А.Ю., Козырева Н.И. Бактерии - симбионты нематод-ксилофагов Bursaphelenchas mucronatus на территории России // Современные проблемы общей паразитологии. Матер, междунар. науч. конф. М. - 2012. - С. 25-31.

4. Круглик И.А. Патогенность дальневосточного изолята стволовой нематоды Bursaphelenchus mucronatus II Вестник ДВО РАН. - 2001. -N 1. - С. 7276.

5. Круглик И.А. Нематоды-ксилобионты сосен коренных лесов и посадок юга Дальнего Востока России // Вестник ДВО РАН. - 2001. - N 4. - С. 5963.

6. Круглик И.А. Фауна нематод-ксилобионтов сосен Приморского края // Тез. докл. IV междунар. симпоз. поев. 110-летию А.А.Парамонова. М. - 2001. С. 91-92.

7. Кулинич O.A. Нематоды древесины сосны // Нематодные болезни растений. / Тез. докл. 9 Всес. конф. Кишинев. - 1991. - С. 16-17.

8. Кулинич O.A. Сосновая древесная нематода — опасный паразит хвойных пород // Лесное хозяйство. - 1993. - N 4. - С. 46-48.

9. Кулинич O.A. Сосновая стволовая нематода // Вредные организмы, имеющие карантинное фитосанитарное значение для Российской Федерации / Научная книга; под редакцией Данкверта С.А. и др. Воронеж. - 2009. - С. 345-351.

10. Кулинич O.A., Арбузова E.H., Мазурин Е.С., Рысс А.Ю., Егорова М.С., Козырева Н.И. Бактериальная микробиота древесных нематод-ксилофагов рода Bursaphelenchus //Труды ЦПИПЭЭ РАН. - 2012. - С. 120-128.

11. Кулинич O.A., Арбузова E.H., Мазурин Е.С., Рысс А.Ю., Магомедов У.Ш., Козырева Н.И. Бактериальная микробиота древесной нематоды Bursaphelenchns mucronatus II Нематоды естественных и трансформированных экосистем. Петрозаводск. - 2011. - С.74-76.

12. Кулинич O.A., Арбузова E.H., Магомедов У.Ш., Козырева Н.И., Рысс А.Ю. Сосновая стволовая нематода Bursaphelenchus xylophilus -потенциальная угроза хвойным лесам России // Экологические и экономические последствия инвазий дендрофильных насекомых. Матер. Всерос. конф. Красноярск. - 2012. - С. 164-168.

13. Кулинич O.A., Богуан 3., Рысс А.Ю., Козырева Н.И. Сосновая стволовая нематода // Защита и карантин растений. - 2010. - N 7. - С. 36-39.

14. Кулинич O.A., Козырева Н.И. Сосновая древесная нематода Bursaphelenchus xylophilus: исследование в России и за рубежом // Паразитические нематоды растений и насекомых. М.: Наука. - 2004. - С. 100-119.

15. Кулинич O.A., Козырева Н.И., Арбузова E.H. Изучение увядания хвойных пород, вызываемого нематодами-ксилофагами в России // Теоретические и практические проблемы паразитологии. Матер. Междунар. Науч. Конф. М. -2010. - С. 195-198.

16. Кулинич O.A., Магомедов У.Ш., Арбузова E.H., Козырева Н.И. Инвазивпые лесные организмы - кандидаты в перечень карантинных объектов Таможенного союза // Экологические и экономические последствия инвазий дендрофильных насекомых. Матер. Всерос. конф. Красноярск. - 2012. - С. 16-22.

17. Кулинич О.А., Магомедов У.Ш., Арбузова Е.Н., Й. Раутапяя (JormaRautapaa), О. Хукка (OttoHukka) (Evira) Упаковочные материалы как источник возможного заноса карантинных организмов // Агробезопаснось. -2012.-N4(10). - С. 47-50.

18. Кулинич О.А., Орлинский П.Д., Колосова Н.В. Потенциальные переносчики сосновой древесной нематоды // Защита растений. - 1996. - N 6. - С. 35-36.

19. Кулинич О.А., Рысс А.Ю. Древесные нематоды рода Bursaphelenchus на территории России // Прикладная нематология; ред. С.В. Зиновьева, В.Н. Чижов. М.: Наука. -2006. - С. 162- 183.

20. Орлинский П.Д., Кулинич О.А. Методические указания по выявлению и диагностике сосновой древесной нематоды Bursaphelenchus xylophilus и инструкции по предотвращению ее заноса и распространения на территории Российской Федерации. М. - 1999. - С. 23.

21. Ребриков Д.В., Саматов Г.А., Трофимов Д.Ю., Семёнов П.А., Савилова А.М., Кофиади И.А., Абрамов Д.Д. ПЦР "в реальном времени". М.: БИНОМ. Лаборатория знаний. - 2009. - С. 1 - 225.

22. Рысс А.Ю. Энтомофильные личинки нематод Bursaphelenchus mucronatus (Nematoda, Aphelenchida, Parasitaphelenchidae), полученные при экспериментальном заражении переносчика Monochamus urussovi (Coleóptera, Cerambycidae) // Энтомологическое обозрение. - 2008. -N LXXXVII, l.-C. 277-285.

23. Рысс А.Ю., Кулинич О.А., Турицин В.С., Мазурин Е.С. Мутуалистические комплексы нематод и бактерий, ассоциированные с насекомыми // Энтомологическое обозрение. - 2011. -N 90 (3). - С. 662-671.

24. Спиридонов С.Э., Элерс Р.У. Энтомопатогенные нематоды как агенты биометода - где это получается? // Краткий спецкурс по нематологии. Петрозаводск. - 2011. - С. 48-55.

25. Турицин В.С. Экологические особенности реализации биологической активности энтомопатогенных нематод (Nematoda: Steinernematidae) для контроля

численности вредных насекомых: дис.канд.биол.наук. Санкт-Петербург. - 2010. — С. 133.

26. Шесгеперов А.А., Савотников Ю.Ф. Карантинные фитогельминтозы. //Кн. 1. Колос. М.- 1995.- С. 463.

27. Abelleira A., Picoaga A., Mansilla J.P., Aguin О. Detection of Bursaphelenchus xylophihis, causal agent of pine wilt disease on Finns pinaster in Northwestern Spain // Plant Disease. - 2011. - N 95. - P. 776.

28. Aikawa Т., Kanzaki N., Kikuchi T. Simple diagnosis of the pine wilt disease using loop-mediated isothermal amplification. // Inter. Symposium on pine wilt disease. (Abst.) // IUFRO 20-23 July, 2009. Nanjing forestry university, China. - 2009. -P. 34.

29. Akhurst R.J., Dunphy G. Tripartite interactions between symbiotically assotiated entomopathogenic bacteria, nematodes, and their insect host // Beckage N., Thompson S., Federici B. Parasites and pathogens of insects. Academic press, New York. - 1993.-Vol 2.-P. 1-23.

30. Arbuzova E.N., Magomedov U.Sh., Abasov M.M., Ponomarev V.L., Kozyreva N.I., Ryss A.Yu., Kulinich O.A. Surveys for the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, in Russia // Nematodes of natural and transformed ecosystems, Petrozavodsk. - 2011. - P. 40-42.

31. Bergdahl D.R. Impact of pinewood nematode in North America: present and future // Journal of Nematology. - 1988. - Vol. 20. - N 2. - P. 260-265.

32. Bolla R.I., Boschert M. Pinewood nematode species complex: interbreeding potential and chromosome number // Journal of Nematology. - 1993. -Vol. 25. - P. 227-238.

33. Bolla R., Shaheen F., Winter R.E.K. Phytotoxin produced in Bursaphelenchus xylophilus infected Pinus sylvestris II Appleby JE, Malelc RB (eds) Proceedings of the 1982 national pine wilt disease workshop. - 1982a. - P. 17-31.

34. Bolla R.I., Shaheen F., Winter R.E.K. Phytotoxin produced in Bursaphelenchus xylophilus pine wilt // Journal of Nematology. - 1982b. - N 14. - P. 431.

35. Bovvers W.W., I-Iudak J., Raske A.G. Host and vector surveys for the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus (Steiner and Buhrer) Nickle (Nematoda: Aphelenchoididae) in Canada // Information Report N-X-285. - Forestry Canada, Newfoundland and Labrador Region. - 1992. - P. 55.

36. Braasch H., Burgermeister W., Metge K. Diagnostic protocols for regulated pests: Bursaphelenchus xylophilus II EPPO Bulletin. - 2001. - Vol. 31. - P. 6169.

37. Braasch H., Caroppo S., Ambrogioni L., Michalopoulos H., Skarmoutsos G. and Tomiczek C.H. Pathogenicity of various Bursaphelenchus species and implications to European forests // Proceedings of International Symposium, Tokyo, 2728, Oct. 1998. Sustainability of Pine Forests in Relation to Pine Wilt and Decline K.Futai, K. Togashi and T.Ikeda. Japan, Tokyo. - 1998. - P. 14-22.

38. Braasch H., Enzian S. The pinewood nematode problem in Europe: present situation and outlook // Nematology Monographs and Perspectives / Ed. by M.Mota, P.Vieira. Leiden: Koninklijke Brill. - 2003. - P. 77-91.

39. Braasch H., Metge K., Burgermeister W. Bursaphelenchus-Art&n (Nematoda, itaphelenchidae) in Nadelgeholzen in Deutschland und ihre ITS-RFLP-Muster. Richten Des Pflanzenschutzdienst. - 1999. -N 51. - P. 312-320.

40. Braasch H., Tomiczek Ch., Metge K., Hoyer U., Burgermeister W., Wulfert I., Schoneeid U.. Records of Bursaphelenchus spp. II Nematoda, Parasitaphelenchidae) in coniferous timber imported from the Asian part of Russia / Forest Pathology. - 2001. - Vol. 31. - P. 129-140.

41. Braasch H., Schonfeld U. Improved key to the species of the xylophilus group of the genus Bursaphelenchus Fuchs, 1937, Germany. - 2013. - P. 127-128.

42. Burgermeister W., Metge K., Braasch H., Buchhach E. ITS-RFLP patterns for differentiations of 26 Bursaphelenchus species (Nematoda: Parasitaphelenchidae) and observation on their distribution // Russian Journal of Nematology. - 2005. - Vol. 13.-N 1. - P. 29-42.

43. Cao Y., Han Z.M. and Li C.D. Studies on wilting toxic substances produced in pines infected by pine wood nematodes // Scientia Silvae Sinicae. - 1997. -N 37. - P. 75-79.

44. Cao Y., Shen B.K. Studies on toxicity of extraction of pine wood nematodes cultured inartificial media (in Chinese with English abstract) // Journal of Nanjing Agricultural University. - 1996. -N 20. - P. 13-16.

45. Cheng H.R., Lin M.S., Qian R.J. A study on morphological diagnosis and pathogenicity ofthe pine wood nematode // Journal of Nanjing Agricultural University. -1986.-N2.-P. 55-59.

46. Chi S.Y., Han Z.M., He Y.Q. Studies on the pathogenicity of 10 year-old black pine inoculatedwith aseptic pine wood nematode (in Chinese with English abstract) // Scientia Silvae Sinicae. - 2006. -N 42(10). - P. 71-73.

47. Dang Q.L., Son S.W., Cheon H.-M., Choi G.J., Choi Y.H., Jang K.S., Lim C.H., Kim J.C. Pyochelin isolated from Burkholderia arboris KRICTI carried by pine wood nematodes exhibits phytotoxicity in pine callus // Nematology. - 2011. - P. 3438.

48. De Ley P., Blaxter M.L., Systematic position and phylogeny // The Biology of Nematodes. / Lee D.L., London: Taylor and Francis. - 2002. - P. 1-30.

49. De Ley P., Blaxter M.L. A new system for Nematoda: combining morphological characters with molecular trees, and translating clades into ranks and taxa // Nematology Monographs and Perpectives. - 2004. - N 2. - P. 633-653.

50. Dorris M., Viney M.E., Blaxter M.L. Molecular phylogenetic analysis of the genus Strongyloides and related nematodes. // International Journal for Parasitology. - 2002. -N 32. - P. 1507-1517.

51. Dropkin V.H., Foudin A., Kondo E., Linit M., Smith M., Robbins K. Pinewood nematode: athreat to U. S. forests? // Plant Disease . - 1981. - 65. - P. 10221027.

52. Eroshenko A.S., Kruglik I.A. Korean pine pathogenic nematodes in the Russia Far East South // The Cedar and Deciduous Forest of the Far East, Khabarovsk. - 1996.-P. 196-197.

53. Evans H., Kulinich O., Magnusson C., Robinet C., Schroeder T. Pest risk analysis for: Bursaphelenchus xylophilus(SteinQr & Buhrer) Nickle // EPPO, Paris. -2009.-N09/15449.-P. 1-63.

54. Felsenstein J. Confidence limits on phylogenies: An approach using the bootstrap // Evolution. - 1985. -N 39. - P. 783-791.

55. Ferris V.R., Ferris J.M., Faghihi J. Variation in spacer ribosomal DNA in some cyst-forming species of plant parasitic nematodes // Journal of Fundamental and Applied Nematological Research. - 1993. -N 16. - P. 177184.

56. Fonseca L., Cardoso J.M.S., Lopes A., Pestana M., Abreu F. et al. The pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, in Madeira Island // Helminthologia. -2012.-N49.-P. 96-103.

57. Forge T.A., Sutherland J.R. Population dynamics of the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, in excised branch segments of western North American conifers // Journal of Fundamental and Applied Nematological Research. -1996.-N 19.-P. 349-356.

58. Forst S., Nealson K. Molecular biology of the symbiotic-pathogenic bacteria Xenorhabdus spp. and Photorharbdus spp. // The

. Annual Review of Microbiology. - 1996. -N 60. - P. 21-43.

59. Fukuda K. Physiological process of the symptom development and resistance mechanismin pine wilt disease // Journal of Forest Research. - 1997. - N 2. -P. 171-181.

60. Fukuda K., Hogetsu T., Suzuki K. Cavitation and cytological changes in xylem of pineseedlings inoculated with virulent and avirulent isolates of Bursaphelenchus xylophilus and B. mucronatus II Journal of the Japanese Forest Society. - 1992. -N 74. - P. 289-298.

61. Futai K., Sutherland J R. Pathogenicity and attraction to host extracts ofcanadian pinewood nematodes: studies with Scots pine, western larch, and black spruce seedlings// Canadian Journal of Forest Research. - 1989. - Vol. 9. - P. 12561261.

62. Fukuda K., Suzuki K. Electrical resistance of wood tissue and water relation parameters of leaves in «over-year wilt» of pines induced by pine wilt disease // Annals of the Phytopathological Society. Japan. - 1988. -N 4. - P. 625-628.

63. Guo D.S., Cong P.J., Li L., Zhao B.G. Determination of bacterial number carried by a pinewood nematode and culture of sterilized nematodes on calli of Pinus thunbergii (in Chinesewith English abstract) // Journal of Qingdao University. -2002.-N4. - P. 29-31.

64. Guo D.S., Zhao B.G., LI R.G. Effect of pine wood nematode on the propagation and pathogenicityof its carrying bacterial strain (in Chinese with English abstract) // Chinese Journal of Applied and Environmental Biology. - 2006. - N 12. - P. 523-527.

65. Guo D.S., Du G.C., Li L., Zhao B.G., Li R.G. Flagellin of Pseudomonasfluorescens GcM5-lA carried by pine wood nematodes is toxic to suspension cells and seedlings of Pinus thunbergii II Nematology. - 2007a. - N 24(2). -P. 147-153.

66. Guo Q.Q., Guo D.S., Zhao B.G., Jie X., Li R.G. Two cyclic dipeptides from Pseudomonas fluorescens GcM5-lA carried by pine wood nematode and their toxicities to Japanese black pinesuspension cells and seedlings in vitro // Nematology. -2007b.-N31(4).-P. 1-5.

67. Han Z.M., Hong Y.D. and Zhao B.G. A study on pathogenicity of bacteria carried by the pine wood nematode // Journal of Plant Pathology. - 2003. - N 151. - P. 683-689.

68. Hannunen S., Tomminen J., Pouttu A., KuklconenH.The Finnish contingency plan for the pine wood nematode // Symposium on pine wilt disease. (Abst.) IUFRO 20-23 July, 2009. Nanjing forestry university, China. - 2009. - P. 77.

69. Harmey J., Harmey M. Detection and identification of Bursaphelenchus species with DNA fingerprinting and polymerase chain reaction // Journal of Nematology. - 1993. - Vol. 25. - P. 406-416.

70. Hoyer U., Burgermeister W., Braasch H. Identification of Bursaphelenchus species (Nematoda: Aphelenchoididae) on the basis of amplified ribosomal DNA (ITS-RFLP) //Nachrichtenbl Deutsch Pflanzenschutzdienst. - 1998. -N 50. - P. 273-277.

71. Hu K.J., Wang Q.L., Yang B.J. A study on pathogenicity of different strains of both B. xylophilus and B. mucronatus II Yang BJ (ed) Epidemiology and treatment of the pinewood nematode in China. Forest Publishing Company of China. -Beijing. - 1995. - P. 50-53.

72. Hunt D.J. A checklist of the Aphelenchoidea (Nematoda: Tylenchina) // Journal of Nematode Morphology and Systematics. - 2008. - N 10(2). - P. 99-135.

73. Ishida K., Flogetsu T. Rile of resin canals in the early stages of pine wilt disease caused bythe pine wood nematode // Canadian Journal of Forest Research. -

1997.-N75.-P. 346-351.

74. Jiang J.H., Gao T.H., Chen F.M., Cao X.Y. Pathogenicity on the non-host plants and effects onthe lipoxygenase in the pine needle cells of Pinus thunbergii of toxins from a bacterium straincarried by pine wood nematode // Forest Pest and Disease. - 2005. - N4. - P. 1-3.

75. Kanzaki N., Futai K. A PCR primer set for determination of phylogenetic relationships of Bursaphelenchus species within the xylophilus group // Nematology. - 2002. -N4.-P. 35-41.

76. Kawazu K. Pathogenic toxins of pine wilt disease // Kagaku To Seibutsu -

1998.-N36.-P. 120-124.

77. Kawazu K., Kaneko N. Asepsis of the pine wood nematode isolate OKD-3 causes it to lose its pathogenicity // Japanese Journal of Nematology. - 1997. - N 27. -P. 76-80.

78. Kawazu K., Zhang H., Kanzaki H. Accumulation of benzoic acid in suspension cultured cells of Pinus thunbergii Pari in response to phenylacetic acid administration // Bioscience, Biotechnology and Biochemistry. - 1996a. - N 60. - P. 1410-1412.

79. Kawazu K., Zhang H., Yamashita H., Kanzaki H.. Relationship between the pathogenicity of the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus and

phenylacetic acid // Bioscience, Biotechnology and Biochemistry. - 1996b. - N 60. - P. 1413-1415.

80. Kikuchi Т., Cotton J.A., Dalzell J.J., Hasegawa K., Kanzaki N. et al. Genomic Insights into the Origin of Parasitism in the Emerging Plant Pathogen Bursaphelenchus xylophilus II PLOS Pathogens. - 2011. - N 7(9). - P. 65.

81. Kiyohara Т., Bolla R.I. Pathogenic variability among populations of the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus // Journal of the Japanese Forest Society. - 1990. - N 36. - P. 1061-1076.

82. Kojima K., Kamijyo A., Masumori M. Cellulase activities of pine-wood nematode isolateswith different virulences // Journal of the Japanese Forest Society. -

1994.-N76.-P. 258-262.

83. Kong L.Y., Guo D.S., Zhao B.G., Li R.G. Partial purification and caharacterization of extracellular lignin peroxidase from Pseudomonas fluorescens GcM5-lA // IUFRO International Symposium On Pine Wilt Desease (Abst.), 20-23 July, 2009. Nanjing Forestry University, Nanjing, China. - 2009. - P. 54.

84. Kulinich O. Surveys for the pinewood nematode in Russia // The pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus. Leiden, Boston. - 2004. - P. 65-75.

85. Kulinich O.A., Arbuzova E.N., Mazurin E.S., Ryss A.Yu., Magomedov U.Sh., Kozyreva N.I. Bacteria associates with wood-inhabiting Bursaphelenchus mucronatus nematodes // Nematodes of natural and transformed ecosystems. Petrozavodsk. - 2011. - P. 74-76.

86. Kulinich O.A., Kolosova N.V. On the possibility of establishment of the pinewood nematode Bursaphelenchus xylophilus in the countries of the former USSR and the potential threat for conifers of the area // Russian Journal of Nematology. -

1995.-Vol. l.-N l.-P. 35-48.

87. Kulinich O.A., Kolosova N.V., Orlinsky P.D. The pinewood nematode: a devastation parasite of conifers // Проблемы лесной фитопатологии и микологии. Тез. докл. IV Международной конференции 13-17 окт. 1997 г. М. - 1997. - Р. 43-45.

88. Kulinich O.A., Kruglik A., Eroshenko A., Kolosova N. Ocurrence and distribution of the nematode Bursaphelenchus mucronatus in the Russian Far East // Russian Journal ofNematology. - 1994. - N 2. - P. 113-119.

89. Kulinich O.A., Magnusson C., Kolossova N.V. Notes on the comparative morphology of the isolates of Bursaphelenchus mucronatus from Russia // Russian Journal ofNematology. - 1996. - Vol. 4. - N 1. - P. 87-88.

90. Kulinich O.A., Orlinskii P.D. Distribution of conifer beetles (Scolytidae, Curculionidae, Cerambycidae) and wood nematodes (Bursaphelenchus spp.) in European and Asian Russia // Bulletin OEPP/EPPO. - 1998. - Vol. 28. - N 1/2. - P. 3952.

91. Kulinich O.A., Orlinskii P.D., Kolosova N.V. Distribution of Russian species of long horn beetles (.Monochamus spp.) related to their potential as vectors of the pinewood nematode // Nematropica. - 1996. - Vol. 26. - N 3. - P. 283-284.

92. Kulinich O.A., Orlinskii P.D. Results of cross-hybridization of Bursaphelenchus mucronatus isolates from Russia and France and B. xylophilus isolates from Canada // Abstr. of Symposium on sustainability of pine forests in relation to pine wilt and decline, 26-30 Oct., Japan. - 1998. - P. 24-25.

93. Kulinich O.A., Orlinskii P.D., Garbuz D. Pathogenicity of the pinewood nematode, Bursaphelenchus spp. in Central European Russia // Russian Journal of Nematology. - 2001. - Vol. 9. - N 2. - P. 151.

94. Kulinich O.A., Tjurin A.A., Orlinski P.D. Surveys for the pinewood nematode and a review of the related research in Russia // Sustainability of pine forests in relation to pine wilt and decline. Tokyo. - 1998. - P. 47-51.

95. Kulinich O., Zhao B., Kozyreva N. Pathogenicity of Bursaphelenchus mucronatus in Russia // Journal of Nanjing Forestry University. -2010.-N34-P. 153-154.

96. Kuroda K. Inhibiting Factors of Symptom Development in Several Japanese Red Pine (Pinus densiflora) Families Selected as Resistant to Pine Wilt // Journal of Forest Research. - 2004. - Vol. 9. - N 3. - P. 217-224.

97. Kuroda K., Ito S. Migration speed of pine wood nematode and activities of other microbesduring the development of pine-wilt disease in Pinus thunbergii II Journal of the Japanese Forest Society. - 1992. - 74. - P. 383-389.

98. Kuroda K., Yamata T., Mimo K., Tamura H. Effects of cavitation on the development of pine wilt disease caused by Bwsaphelenchus xylophilus II Annals of the Phytopathological Society of Japan - 1988.-N 4. - P. 606-615.

99. Kuroda K., Ohira M., Okamura M. and Fujisawa Y. Migration and Population Growth of the Pine Wood Nematode (Bursaphelenchus xylophilus) Related to the Symptom Development in the Seedlings of Japanese Black Pine (Pinus thunbergii) Families Selected as Resistant to Pine Wilt // Journal of the Japanese Forest Society. - 2007. - Vol. 89. - N 4. - P. 241-248.

100. Kwon Hyeok Ran, Gyung Ja Choi, Yong Ho Choi, Kyoung Soo Jang, Nack-Do Sung, Mun Seong Kang, Yilseong Moon, Seung Kyu Lee and Jin-Cheol Kim. Suppression of pine wilt disease by an antibacterial agent, oxolinic acid // Pest Management Science. - 2010. - N 66. 6. - P. 634-639.

101. Leesch J. G., R. Davis R. A. Simonaitis In-transit shipboard fumigation of pine woodchips to control Bursaphelenchus xylophilus II Bulletin OEPP/EPPO. - 1989. -N9.-P. 173-181.

102. Li H., Trinh P.Q., Waeyenberge L., Moens M. Characterisation of Bursaphelenchus spp. isolated from packaging wood imported at Nanjing, China // Nematology. - 2009. - Vol. 11(3). - P. 375-408.

103. Li S.N., Guo D.S., Zhao B., Li R.G. Toxic secreted by Pseudomonas fruorescens GcM5-l A carries by pine wood nematode and their toxicities to Japanese black pine.// IUFRO Inter. SymP. On Pine Wilt Desease (Abst.), 20-23 July, 2009. Nanjing Forestry University. Nanjing, China. - 2009. - P. 49.

104. Linit M. J. Nematode-vector relationships in the pine wilt disease system // Nematology. - 1988. - Vol. 20. - P. 227-235.

105. Linit M. J. Transmission of pinewood nematode through feeding wounds of Monochamus carolinensis (Coleoptera: Cerambycidae) // Nematology. - 1990. -Vol. 22.-P. 231-236.

106. Magnusson C., Kulinich O.A. A taxonomic appraisal of the original description, morphology and status of Bursaphelenchus kolymensis Korentchenko, 1980 (Aphelenchida: Aphelenchoididae) // Russian Journal ofNematology. - 1996. -Vol. 4.-N2.-P. 155-161.

107. Magnusson C., Kulinich O.A. On the original description, morphology and taxonomic status of Bursaphelenchus kolymensis Korentchenko 1980 (Nematoda, Aphelenchoididae) // Russian Journal ofNematology. - 1996. - Vol. 4. - N 1. - P. 88-89.

108. Magnusson C., Schroeder M. L. First record of Bursaphelenchus species (Nematoda) in Monochamus beetles in Scandinavia // Anzeiger fur Schadlingskunde Pflanzenschutz Umweltschutz. - 1989. -N 2. - P. 53-54.

109. Mamiya Y. Behavior of pine wood nematodes in pine wood in early stages of the disease development (in Japanese) // Transactions Meeting Japanese Forest Society. - 1975. - N 86. - P. 285-286.

110. Mamiya Y. Pathology of the pine wilt disease caused by Bursaphelenchus xylophilus II Annual Review of Phytopathology. - 1983. - N 21. - P. 201-220.

111. Mamiya Y. The pine wood nematode // Plant and insect nematodes. New York; Basel: Dekker. - 1984. - P. 589-627.

112. Mamiya Y. History of pine wilt disease in Japan // Journal ofNematology. - 1988.-N20. -P. 219-226.

113. Mamiya Y. Review on the pathogenicity of Bursaphelenchus mucronatus // Sustainability of pine forests in relation to pine wilt and decline: Proc. of the Symp. Tokyo, Japan, 26-30 Oct., 1998. Kyoto: Shokado Shoten. - 1999. - P. 57-63.

114. Mamiya Y., Endo N. Bursaphelenchus mucronatus n. sp. (Nematoda: Aphelenchoididae) from pine wood and its biology and pathogenicity to pine trees // Nematologica. - 1979. - Vol. 25. - P. 353-361.

115. Mamiya Y., Furukawa M. Fecundity and reproductive rate of Bursaphelenchus lignicolus II Japanese Journal ofNematology. - 1977. - P. 6-9.

116. Mamiya Y., Kiyohara T. Description of Bnrsaphelenchus lignicolus n. sp. (Nematoda:Aphelenchoididae) from pine wood and histopathology of nematode-infested trees //Nematologica. - 1972. -N 18. - P. 120-124.

117. Myers R. F. Cambium destruction in conifers caused by pinewood nematodes // Journal of Nematology. - 1986. - Vol. 18. - P. 398-402.

118. McNamara D. G., Stoen M. A survey for Bnrsaphelenchus spp. in pine forests in Norway // Bulletin OEPP/EPPO. - 1988. - Vol. 18. - P. 353-363.

119. Mota M.M., Braasch H., Bravo M.A. et al. First report of Bnrsaphelenchus xylophilus in Portugal and in Europe // Nematology. - 1999. - N 1. -P. 727-734.

120. Mota M., Paulo C.V. Pine wilt disease in Portugal // Pine wilt disease. Springer, Japan. - 2009. - P. 33-39.

121. Nakamura K., Takehana M., Itagaki T., Tashiro H., Ohta K., Nakakita O. Detection of the pine wilt-damages trees using near-infrared color photograph // Inter. Symposium on pine wilt disease. (Abst.) IUFRO 20-23 July, 2009, Nanjing forestry university, China. - 2009. - P. 33.

122. Niclcle W.R. A taxonomic review of the genera of the Aphelenchoidea (Fuchs, 1937) Thome, 1949 (Nematoda: Tylenchida) // Journal of Nematology. - 1970. - Vol. 2. - P. 375-392.

123. Nickle W.R., Golden A.M., Mamiya Y., Wergin W.P. On the taxonomy and morphology of the pine wood nematode, Bnrsaphelenchus xylophilus (Steiner & Buhrer, 1934) Nickle 1970 //Journal of Nematology. - 1981. -N 13. - P. 385-392.

124. Nobuchi T., Tominaga T., Futai K., Harada H. Cytological study of pathological changes in Japanese black pine (Pinus thunbergii) seedlings after inoculation with pinewood nematode {Bnrsaphelenchus xylophilus) // Bulletin Kyoto University. - 1984. -N 56. - P. 224-233.

125. Nunn G.B. Nematode molecular evolution. An investigation of evolutionary patters among nematodes based upon DNA sequences // Doctor of Philosophy Dissertation. University of Nottingham. U.K. - 1992. - P. 1-146.

126. Odani K., Yamamoto N., Nishiyama Y., Sasaki S. Action of nematode on the developmentof pine wilt disease // Dropkin V (ed) The resisitance mechanism of pine against pine wiltdisease, proceedings of the US-Japan seminar. - 1984. - P. 128140.

127. Odani K., Sasaki S., Nishiyama Y., Yamamoto N. Early symptom development of the pinewilt disease by hydrolytic enzymes produced by the pine wood nematodes—cellulase as apossible candidate of the pathogen // Journal of the Japanese Forest Society. - 1985. -N 67. - P. 366-372.

128. Oku H. Role of phytotoxins in pine wilt disease // Journal ofNematology. -1988.-N20.-P. 245-251.

129. Oku II. Phytotoxins in pine wilt disease // Nippon Nogeikagaku Kaishi. -1990.-N64.-P. 1254-1257.

130. Oku H., Shiraishi T., Kurozumi S. Participation of toxin in wilting of Japanese pines caused by a nematode // Naturwissenschaften. - 1979. - N 66. - P. 210211.

131. Oku H., Shiraishi T., Ouchi S., Kurozumi S., Ohta H. Pine wilt toxin, the metabolite of abacterium associated with a nematode // Naturwissenschaften. - 1980. -N67.-P. 198-199.

132. Panesar T.S., Sutherland J.R. Pathogenicity of Canadian isolates of the Bursaphelenchus xylophihs (pinewood nematode) to provenances of Pinus sylvestris and Pinus contorta as grown in Finland : A greenhouse study // Scandinavian Journal of Forest Research. - 1989. - Vol. 4. - N 4. - P. 549-557.

133. Paracer S., and Ahmadjian V. Symbiosis: an introduction to biological associations // Oxford University Press, Oxford, United Kingdom. - 2000. - P. 1-291.

134. Penas A.C., Correia P., Bravo M.A. et al. Species of Bursaphelenchus Fuchs, 1937 (Nematoda: Parasitaphelenchidae) associated with maritime pine in Portugal // Nematology. - 2004. - N 6. - P. 437-453.

135. Proenca D. N., Francisco R., Santos C.V., Lopes A., Fonseca L., Abrantes I.M.O., Morais P.V. Diversity of bacteria associated with Bursaphelenchus xylophilus

and other nematodes isolated from Pinus pinaster trees with pine wilt disease // PlosOne. - 2010. - N 5. - P. 12-19.

136. Rautapaa J. Experiences with Bursaphelenchus xylophilus in Finland // Bulletin OEPP/EPPO. - 1986. - N 6. - P. 453-456.

137. Robertson L, Cobacho Arcos S, Escuer M, Santiago Merino R, Esparrago G, et al. Incidence of the pinewood nematode Bursaphelenchus xylophilus Steiner & Buhrer, 1934 (Nickle, 1970) in Spain. // Nematology. - 2011. - N 13. - P. 755-757.

138. Rodrigues J.M., SousaE. Portuguese national action plan for pinewood nematode control: strategy, action and results // International Symposium on Pine Wilt Disease. (Abst.) IUFRO 20-23 July, 2009, Nanjing Forestry University. China. - 2009. -P. 9-10.

139. Rutherford T.A., Mamiya Y., Webster J.M. Nematode-induced pine wilt disease: Factors influencing its occurrence and distribution // Forest Science. - 1990. -Vol. 36. - P. 145-155.

140. Rutherford T.A., Webster J.M. Distribution of pine wilt disease with respect to temperature in North America, Japan and Europe // Canadian Journal of Forest Research. - 1987. - Vol. 17. - P. 1050-1059.

141. Ryss A. Express technique to prepare collection slides of nematodes // Zoosyst Rossica. - 2002. - Vol. 11. - N 2. - P. 257-260.

142. Ryss A.Yu., Kulinich O.A., Turitsin V.S., and Mazurin E.M. Mutualistic nematode-bacteria complexes associated with insects // Entomological review. - 2011.-Vol. 91. - N 7. - P. 908-914.

143. Ryss A.Yu., Kulinich O.A., Sutherland J. Pine wilt disease: a shot of worldwide research // Forestry Studies in China. - 2011. - N 13 (2). - P. 132-138.

144. Ryss A., Vieira P., Mota M., Kulinich O. A synopsis of the genus Bursaphelenchus Fuchs, 1937 (Aphelenchida: Parasitaphelenchidae) with keys to species // Nematology. - 2005. - Vol. 7. - N 3. - P. 393-458.

145. Saitou N. & Nei M. The neighbor-joining method: A new method for reconstructing phylogenetic trees // Molecular Biology and Evolution. -1987. - N 4. - P. 406-425.

146. Schauer-Blume M. Preliminary investigations on pathogenicity of European Bursaphelenchus species in comparison to Buraphelenchus xylophilus from Japan//Nematology.- 1990. -Vol. 13.-N 2. - P. 191-195.

147. Shin Sang-Chul. Pine wilt disease in Korea // Pine wilt disease. Springer. Japan. - 2009. - P. 26-32.

148. Sneath P. H. A. & Sokal R. R. Numerical Taxonomy: the Principles of Numerical Classification // San Francisco: Freeman. - 1973. - P. 263-268.

149. Sriwati R., Takemoto S., Futai K. Seasonal changes in the nematode fauna in pine trees killed by the pinewood nematode, Buraphelenchus xylophilus II Japanese Journal ofNematology. - 2006. - Vol. 36. - N 2. - P 87-100.

150. Taguchi F., Shimizu R., Nakajima R., Toyoda K., Shiraish T., Ichinose Y. Differential effects of flagellins from Pseudomonas syringae pv. tabaci, tomato and glycinea on plant defenseresponse // Plant Physiology and Biochemistry. - 2003. - N 41. -P. 165-174.

151. TakeshitaK., HagiharaY., Ogawa S. Environmental analysis no pine damage in Western Japan // Bulletin Fukuoka For Exporting Statistics. - 1975. - N 4. -P. 1-45.

152. Tamura H. Pathogenicity of aseptic Bursaphelenchus xylophilus and associated bacteria to pine seedlings // Japanese Journal ofNematology. - 1983. - N 13. -P. 1-5.

153. Tamura K., Dudley J., Nei M. & Kumar S., MEGA4: Molecular Evolutionary Genetics Analysis (MEGA) software version 4.0 // Molecular Biology and Evolution. - 2007. - N 24. - P. 1596-1599.

154. Tamura K., Nei M. & Kumar S. Prospects for inferring very large phylogenies by using the neighbor-joining method. PNAS. - 2004. - Vol. 101. - N 30. -P. 11030-11035.

155. Tan J.J., Feng Z.X. Population dynamics of pine wood nematode and its accompanying bacteriumin the host (in Chinese with English abstract) // Scientia Silvae Sinicae. - 2004. - N 40. - P. 110-114.

156. Tanaka K. Hypha-feeding behavior of the pine wood nematode (in Japanese) // Transactions Meeting Japanese Forest Society. - 1974. - N 85. - P. 247249.

157. Tanaka H. Possibility of infection to pine wilt disease though root system (in Japanese). Kyushu Journal of Forest Research. - 2003. - N 56. - P. 216-217.

158. Tares S., Lemontey Y.-M., De Guiran G., Abad P. Use of species-specific satellite DNA from Bursaphelenchus xylophilus as a diagnostic probe // Phytopathology. - 1994. - Vol. 84. - P. 294-298.

159. Tomminen J., Nuorteva M., Pulkkinen M., Vakeva J. Occurrence of the nematode Bursaphelenchus mucronatus Mamiya & Enda 1979 (Nematoda: Aphelenchoididae) in Finland // Silva Fennica. - 1989. - Vol. 23. - P. 271-277.

160. Ueda T., Oku H., Tomita K., Sato K., Shiraishi T. Isolation, identification, and bioassay oftoxic compounds from pine tree naturally infected by pine wood nematode // Annals of the Phytopathological Society of Japan. - 1984. - N 50. - P. 166175.

161. Vicente C., Espada M., Vieira P., Mota M. Pine wilt disease: a threat to European forestry // European Journal of Plant Pathology. Springer. - 2012. - N 133. -P. 89-99.

162. Vicente C., Espada F.N.M., Mota M., Oliveira S. Bacteria associated with the pinewood nematode Bursaphelenchus xylophilus collected in Portugal // Antonie van Leeuwenhoek Journal of Microbiology. - 2011. -N 100. - P. 477-481.

163. Vicente C., Neves Proenca D., Francisco R., Vieira Santos C., Lopes A., Fonseca L., Oliveira S., Mota M., Abrantes I., Morais P.V. Microbial community associated with Bursaphelenchus xylophilus in Pinus pinaster II 30th International Symposium of the European Society of Nematologists. Vienna. - 2010. - P. 179-180.

164. Vieira P., Ryss A., Santos A.R., Mota M. On the vulval morphology of some species of Bursaphelenchus (Nematoda: Parasitaphelenchinae) // Nematology. -2009.-Vol. 11(5).-P. 793-798.

165. Wang H.Y. The biogeography and economic geography of the pine wood nematode in China. Inter // Symposium on pine wilt disease. (Abst.) IUFRO 20-23 July, 2009, Nanjing forestry university. China. - 2009. - P. 45^46.

166. Wingfield M.J.. Blanchette R.A., Nicholis T.H., Robbins K. The pine wood nematode: a comparison of the situation in the United States and Japan // Canadian Journal of Forest Research. - 1982. - Vol. 12. -N 1. - P. 71-75.

167. Xie L.Q., Ju Y.W., Yang Z.D., Zhao B.G. Dynamics of densities of bacteria and nematode inthe branches of Pinus thunbergii inoculated with Bursaphelenchus xylophilus (in Chinesewith English abstract) // Journal ofZhejiang University-2005. -N 22. - P. 310-314.

168. Yang B.J. Advance in research of pathogenetic mechanism of pine wood nematode (in Chinese with English abstract) // Forest Pest and Disease. - 2002. - N 1. -P. 27-31.

169. Yang B.J. The history, dispersal and potential threat of pine wood nematode in China // Mota M., Vieira P. The pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus II Proceeding of an international workshop. University of Evora, Portugal, 20-22 August 2001. Brill, Leiden Boston. - 2004. - P. 21-24.

170. Yang B., Wang Q. Distribution of the pinewood nematode in China and susceptibility of some Chinese and exotic pines to the nematode // Canadian Journal of Forest Research. - 1989. -N 19. - P. 1527-1530.

171. Ye W., Giblin-Davis R.M., Braasch Ii., Morris K., Thomas W.K.. Phylogenetic relationships among Bursaphelenchus species (Nematoda: Parasitaphelenchidae) inferred from nuclear ribosomal and mitochondrial DNA sequence data // Molecular Phylogenetics and Evolution. - 2007. - P. 1-13.

172. Yin Y.H., Guo D.S., Zhao B.G., Du X.H., Zhao Z.T., Li R.G. Primary study on the toxins secretedby Pseudomonas fluoresceins GcM5-lA carried by pine

Botanical Society. - 2007. -N 24. - P. 147-153.

173. Zhang H., Kanzaki H., Kawazu K. Benzoic acid accumulation in the Finns thunbergii callusinoculated with the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus //Journal of Biosciences. - 1997. -N 52. - P. 329-332.

174. Zhang Z.Y. and Lin M.S. Pathogenicity of Bursaphelenchus mucronatus on the seedlings of black pine // Journal of Nanjing Agricultural University. - 2004. - N 27. - P. 46-50.

175. Zhao B.G. Bacteria carried by the pine wood nematode and their symbiotic relationship with nematode // Zhao B.G., Futai K., Sutherland J.R., Takeuchi Y., Pine Wilt Disease, Tokyo: Springer. - 2008. - P. 264-274.

176. Zhao B.G., Lin F. Mutualistic symbiosis between Bursaphelenchus xylophilus and bacteria of the genus Pseudomonas // Forest Pathology. - 2005. - N 25. -P. 2205-2214.

177. Zhao B.G., Lin F., Guo D., Li R.G., Li S.N., Kulinich O., Ryss A. Pathogenic roles the bacteria carried by Bursaphelenchus mucronatus II Journal of Nematology. - 2009. - N 41 (1). - P. 11-16.

178. Zhao B.G., Gao R., Ju Y.W., Guo D.S, Guo J. Effects of antibiotics on pine wilt disease // Journal Nanjing Forest University. - 2000. - N 24. - P. 75-77.

179. Zhao B.G., Wang H.L., Han S.F., Han Z.M. Distribution and pathogenicity of bacteria species carried by Bursaphelenchus xylophilus in China // Nematology. -2003.-Vol. 5(6).-P. 899-906.