Na, K-зависимая аденозинтрифосфатаза: Молекулярные механизмы регуляции активности тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, доктор биологических наук Лопина, Ольга Дмитриевна

• Лопина, Ольга Дмитриевна
• доктор биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации доктор биологических наук Лопина, Ольга Дмитриевна

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Введение

Общая характеристика ион-транспортирующих АТФаз Р-типа

Глава 1. Механизм гидролиза АТФ и транспорта катионов ЫаД-АТФазой

1. №-насос и ЫаД-АТФаза

2. Препараты, используемые для изучения ферментативных свойств КаД-АТФазы

3. Ферментативные свойства КаД-АТФазы

4. Частные реакции, обеспечиваемые №,К-АТФазой

5. Основные конформационные состояния ЫаД-АТФазы

6. Транспорт ионов, обеспечиваемый №,К-АТФазой

Глава 2. Структурная организация ИаД-АТФазы

1. Субъединичный состав

2. Структурная организация и топография а-субъединицы

3. Структурная организация и топография Р-субъединицы

4. Четвертичная структура Ыа,К-АТФ азы и методы, используемые при ее изучении

Глава 3. Модифицирующее действие АТФ на ШД-АТФазу и его объяснение в рамках схемы Поста-Олберса и других моделей

1. Связывание лигандов с ЫаД-АТФазой

2. Модифицирующее действие АТФ на ЫаД-АТФазу

Глава 4. Механизмы регуляция активности ЫаД-АТФазы

1. Участие № Д-АТФазы в осуществлении различных функций клеток животных

2. Изоферменты ИаД-АТФазы и их свойства

3. Регуляция активности КаД-АТФазы за счет взаимодействия с липидным бислоем мембраны

4. Долгосрочная регуляция активности №,К-АТФазы

5. Краткосрочная регуляция активности Ыа,К-АТФазы 73 ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ 80 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 1. Препаративные методы

Получение очищенного препарата ИаД-АТФазы из солевых желез утки 83 Получение частично очищенного препарата

Ыа,К-АТФазы из мозга крупного рогатого скота

Получение фракции микросом из аксолеммы мозга крыс 86 Получение фракции легкого саркоплазматического ретикулума из скелетных мышц кролика 86 Получение фракции микросом, обогащенной активностью

Н,К-АТФазы, из слизистой оболочки желудка кролика 87 Получение очищенной цАМФ-зависимой протеинкиназы из мозга крупного рогатого скота

Получение антител на мелиттин

Получение мелиттин-подобного белка

Глава 2. Аналитические методы

Определение белка

Определение белкового состава препаратов

Специфическая идентификация белков

Определение Ы-концевых последовательностей белков

Определение липидов в препарате №,К-АТФазы

Регистрация активности ион-транспортирующих АТФаз

Измерение активности Ыа,К-АТФазы

Определение фосфатазной активности

Измерение активности Са-АТФазы

Анализ ингибирующего действия мелиттина

Связывание мелиттина и мелиттин-подобного белка с

H,К- и Ка,К-АТФазой 98 Определение количества участков связывания уабаина с Ка,К-АТФазой

Определение количества центров ^-зависимого фосфорилирования

Связывание АТФ и других нуклеотидов с Ка,К-АТФазой

1. Метод проточного диализа

2. Флуоресцентный метод 103 Получение и идентификация протомерной формы №,К-АТФазы 103 Определение молекулярной массы №,К-АТФазы методом радиоинактивации

Определение размера а-субъединицы методом молекулярной мишени

Оценка состояния мембран после облучения

Регистрация анизотропии фосфоресценции эозинизотиоцианата, связанного с Ка,К-АТФазой

Изучение фосфорилирования Ка,К-АТФазы цАМФ-зависимой (ГЖА) и Са,фосфолипид-зависимой протеинкиназой (ПКС)

Определение стехиометрии фосфорилирования

Анализ фосфоаминокислот

Глава 3. Математическая обработка полученных результатов

Глава 4. Материалы, использованные в работе

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Глава 1. Общая характеристика препарата №,К-АТФазы из солевых желез утки, идентификация изоферментного состава

I. Общая характеристика препарата Ка,К-АТФазы из солевых желез утки 112 2. Идентификация изоферментного состава ЫаД-АТФазы из солевых желез уток

Глава 2. Зависимость активности Na,K-ATOa3bi от концентрации субстрата

Глава 3. Связывание АТФ и его аналогов с №,К-АТФазой

Глава 4. Четвертичная структура мембраносвязанной Ка,К-АТФазы

Глава 5. Фосфорилирование К-АТФ азы из солевых желез утки под действием цАМФ-зависимой и Са,фосфолипид-зависимой протеинкиназы. Влияние фосфорилирования на активность фермента

Глава 6. Ингибирование Na,К- и Са-АТФаз мелиттином, выделение мелиттин-подобного белка и изучение его взаимодействия с ион-транспортирующими АТФазами

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Лопина, Ольга Дмитриевна

ВЫВОДЫ

1. N-концевая последовательность аминокислот; иммунохимический анализ, а также чувствительность к уабаину и ионам Na+ свидетельствуют, что а-субъединица №,К-АТФазы из солевых желез утки относится к классу al-изоформ. N-концевая последовательность аминокислот (3-субъединицы Na,К-А ТФ азы из этой ткани характерна для класса pi-изоформ.

2. Зависимость активности №,К-АТФазы от концентрации АТФ описывается кривой с промежуточным плато. Она может быть представлена в виде суммы кривой с отрицательной кооперативностью и сигмоиды, которые насыщаются в области низких (0,2-200 мкМ) и высоких (0,2-2 мМ) концентраций АТФ соответственно. Для солюбилизированной протомерной формы №,К-АТФазы зависимость активности от концентрации АТФ имеет вид кривой с отрицательной кооперативностью.

3. Концентрационная зависимость связывания АТФ с №,К-АТФазой описывается кривой с промежуточным плато. Связывание АТФ в присутствии как Na+, так и К+ характеризуется отрицательной кооперативностью в области низких концентраций и положительной - в области высоких концентраций нуклеотида, свидетельствуя о возникновении обоих типов кооперативности на уровне связывания АТФ с №,К-АТФазой.

4. Связывание АТФ с центрами низкого сродства или взаимодействие между ними обусловлено следующими структурными особенностями молекулы: 1) наличием депротонированного при нейтральных рН атома азота в первом положении пуринового цикла; 2) присутствием атома кислорода между р и у атомами фосфора в терминальной части молекулы.

5. Данные по радиоинактивации №,К-АТФазы показывают, что молекулярная масса мембраносвязанного фермента, гидролизующего

ЦТФ или АТФ в насыщающих концентрациях, в 1,6 раза превышает молекулярную массу фермента, гидролизующего другие субстраты или АТФ в низких концентрациях.

6. Анализ кривой затухания фосфоресценции эозинизотиоцианата, связанного с а-субъединицей Ка,К-АТФазы, свидетельствует о наличии в мембране двух популяций вращающихся частиц с радиусом 2,2-2,5 и 7,7-12,2 нм. Оба типа частиц выявляются как в среде с 1Ма+, так и в среде сК+.

7. Полученные данные согласуются с гипотезой, согласно которой мембраносвязанная №,К-АТФаза представлена в виде совокупности протомерной и олигомерной форм. Гипотеза предполагает существование аллостерического центра для АТФ. Протомер характеризуется отрицательными кооперативными взаимодействиями между активным и аллостерическими центрами, а олигомер -положительными кооперативными взаимодействиями между АТФ-связывающими центрами.

8. Ма,К-АТФаза из солевых желез утки фосфорилируется цАМФ-зависимой и Са,фосфолипид-зависимой протеинкиназами с максимальной стехиометрией около 1 моль Ф/моль а-субъединицы. Фосфорилирование фермента любой из двух протеинкиназ приводит к ингибированию Ка,К-АТФазы.

9. Мелиттин (амфипатический пептид из яда пчелы) необратимо ингибирует ШД-АТФазу и Са-АТФазу саркоплазматического ретикулума. Анализ ингибирования свидетельствует о наличии двух типов мелиттин-связывающих центров. Действие мелиттина по одному из центров устраняется при насыщении нуклеотидом центров низкого сродства к АТФ.

10. Разработан метод очистки белка, содержащего мелиттин-подобную детерминанту. Из слизистой оболочки желудка кролика получен белок с молекулярной массой 68 кДа, взаимодействующий с антителами на мелиттин и с ион-транспортирующими АТФазами Р-типа.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящей работе установлено, что Ка,К-АТФаза из солевых желез утки по структурным и кинетическим особенностям является таким же изоферментом (а1 (31), что и хорошо исследованная в различных лабораториях мира ИаД-АТФаза из почек млекопитающих.

Полученные нами результаты показывают, что сложный характер зависимости №,К-АТФазы от концентрации АТФ (отрицательная кооперативность) характерен для протомерной формы фермента, тогда как для мембраносвязанного фермента субстратная кривая представляет собой сумму кривой с отрицательной кооперативностью и сигмоиды. Это дает основание полагать, что в мембране №,К-АТФаза представлена в виде совокупности протомеров, насыщаемых при низких концентрациях субстрата и демонстрирующих отрицательную кооперативность, и олигомеров, насыщаемых в области высоких концентраций АТФ и демонстрирующих положительную кооперативность.

Сопоставление двух экспериментальных фактов: 1) протомер, насыщаемый в области низких концентраций АТФ, характеризуется отрицательной кооперативностью по АТФ, 2) мембраносвязанный фермент в области низких концентраций АТФ, где функционирует, по-видимому, только протомерная форма, также демонстрирует отрицательную кооперативность по связыванию АТФ - позволяет полагать, что отрицательная кооперативность, характерная для протомера, есть результат взаимодействия двух центров связывания АТФ, расположенных на протомере. Эти рассуждения приводят к заключению, что на протомерной форме фермента должен существовать аллостерический центр связывания АТФ. Предположение о существовании аллостерического центра получило недавно подтверждение в работе Золотаревой и Аскари (2оЫагеуа, Азкап, 1995). Это позволяет по-новому посмотреть на данные о структуре АТФ-связывающего центра, которые свидетельствуют, что в связывании АТФ принимают участие два участка полипептидной цепи, достаточно удаленные друг от друга. Нельзя исключить, что они представляют собой два различных центра связывания АТФ.

Мы предполагаем, что лиганды, в присутствии которых происходит измерение активности, (АТФ в различных концентрациях, Mg2+, Na+ и К+ при их постоянном соотношении) не влияют на переход протомера в олигомер и обратно. Однако влияние других факторов, например, температуры, рН, а также изменение состояния липидного микроокружения может изменить соотношение между протомерной и олигомерной формой фермента, что приведет к изменению характера субстратной кривой. Высказанное нами предположение о том, что фермент присутствует в мембране в виде совокупности протомерной и олигомерной форм подтверждается данными по определению четвертичной структуры Ш,К-АТФазы.

Полученные нами результаты свидетельствуют, что характер положительных кооперативных взаимодействий зависит от структурных особенностей молекулы АТФ: для связывания АТФ или проявления положительных кооперативных взаимодействий между этими центрами необходимо наличие в молекуле субстрата непротонированного атома азота в первом положении пуринового цикла и атома кислорода, находящегося между у и р атомами фосфата в терминальной части молекулы. Возможно, этот атом азота пуринового цикла АТФ после связывания нуклеотида с ферментом облегчает диссоциацию БГ из активного центра фермента за счет образования водородной связи, влияя таким образом на переход фермента из калиевой конформации в натриевую.

Тот факт, что Na,K-ATOa3a является субстратом для двух протеинкиназ (А и С) и что фосфорилирование этими протеинкиназами ингибирует ферментативную активность, позволяет заключить, что активность этого фермента может находиться под контролем двух этих протеинкиназ ш vivo и изменяться в ответ на изменение внутриклеточной концентрации вторичных мессенджеров. Быстрое и кратковременное ингибирование Ка,К-АТФазы может быть необходимо в клетке на фоне увеличенной концентрации активатора фермента, концентрация которого возрастает за счет открывания Ыа-каналов.

Другая возможность регуляции активности открывается также за счет взаимодействия Ма,К-АТФазы и других ион-транспортирующих АТФаз с мелиттин-подобным белком, структура и свойства которого нуждаются в дальнейшем изучении. Полученные нами данные показывают, что мелиттин-связывающий центр, расположенный на олигомерной форме фермента, может связывать мелиттин (или, возможно, мелиттин-подобный белок) только в том случае, когда его АТФ-связывающие центры, имеющие низкое сродство к нуклеотиду, не насыщены АТФ. Таким образом, мелиттин-подобный белок может воздействовать только на протомерную форму фермента. Это означает, что переход протомерной формы фермента в олигомерную может существенно влиять на возможность воздействия на него со стороны регуляторов. Изложенные представления о механизмах регуляции активности Ка,К-АТФазы, возникшие на основе полученных нами экспериментальных данных, схематично изображены на рис. 44. микровязкость бислоя

Рисунок 44. Схема, описывающая механизмы регуляции Ка,К-АТФазы с использованием протеинкиназ А и С и мелиттин-подобного белка, в зависимости от олигомерного состояния фермента. Мелиттин-подобный белок регулирует только активность протомерной формы (слева), поскольку насыщение АТФ центров низкого сродства на олигомерной форме фермента приводит к экранированию мелиттин-связывающих центров. Олигомеризация белка регулируется состоянием липидного бислоя.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Лопина, Ольга Дмитриевна, 1998 год

1. Болдырев A.A. (1981) Na-К -зависимая АТФаза. Успехи физиологических наук. 12, 91-130.

2. Болдырев А., Лопина О., Прокопьева В. (1985) Мембранные липиды как регуляторы межбелковых взаимодействий. Нейрохимия 4, 80-95.

3. Владимиров Ю.А., Добрецов Г.Е. (1980) Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. М., "Наука".

4. Владимирова Н.М., Муравьева Т.Н., Овчинникова Т.В., Потапенко H.A., Ходова О.М. (1998) Биол. мембраны 15, 349-352.

5. Владимирова Н.М., Потапенко H.A., Модянов H.H. (1995) Структурный анализ изоформ ИаД-АТФазы в мозге теленка. Биоорганич. химия. 21, 483-491.

6. Демин В.В., Барнаков А.Н., Лунев A.B. Джанджугазян К.Н., Кузин А.П., Модянов H.H., Хофмеллер С., Фарратс Г. (1984) Биол. мембраны 1, SSI-SS?.

7. Диксон, М., Уэбб, Э. (1982) Ферменты, т. 2. изд. 3, М., "Мир", 570-642.

8. Кочетов Г.А., (1980) Практическое руководство по энзимологии. М., "Высшая школа".

9. Курганов Б.И. (1978) Аллостерические ферменты. М., "Наука".

10. Овчинников Ю.А., Арсенян С., Броуде Н., Петрухин К., Гришин А (1985) Последовательность нуклеотидов кДНК и первичная структура а-субъединицы №,К-АТФазы из почек свиньи. Докл. АН СССР 285, 1491-1495.

11. Ритов В.Б., Мельгунов В.И., Комаров П.Г., Алексеева О.М., Акимова Е.И. (1977) Интегральные белки мембран саркоплазматического ретикулума мышц кролика и карпа. Докл. АН СССР 233, 727-733.

12. Федосова, Р.У., Федосов С.Н., Болдырев A.A. (1991) Анализ кинетического механизма Na,К-АТФазы. Вестник МГУ 16, №2, 3-17.

13. Ahmad, M., Medford, R.M. (1995) Evidence for the regulation of Na,K-ATPase al gene through the interaction of aldosterone and cAMP-inducible transcriptional factors. Steroids 60, 147-152.

14. Ahmed, K., Rohrer, D.C., Fullerton, D.S., Kitatsuji, E., Deffo, T., From, A.H.L. (1983) Interaction of Na,K-ATPase and digitalis genins: a general model for inhibitor activity. J. Biol. Chem. 258, 8092-8097.

15. Albers, R.W. (1967) Biochemical aspects of active transport. Annu. Rev. Biochem. 36, 727-756.

16. Albers, R.W., Fahn, S., Koval, G.J. (1963) The role of sodium ions in the activation of Electrophorus electric organ adenosine triphosphatase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 50,474-481.

17. Allen, J.C., Navran, S.S. (1984) Role of Na-pump in smooth muscle contractile regulation. TIPS 18, 462-465.

18. Almeida, A., Charnock, J. (1977) An electron spin probe study of (Na+K)-ATPase-containing membranes. Biochim. Biophys. Acta, 467,19-28.

19. Altendorf, K., Epstein, W. (1994) Kdp ATPase of Escherichia coll Cell Physiol. Biochem. 4,160-168.

20. Andersen, J.P., Vilsen, B., Collins, J.H., Jorgensen P.L. (1986) Localization of Ei-E2 conformational transition of sarcoplasmic reticulum Ca-ATPase by tryptic cleavage and hydrophobic labeling. J. Membr. Biol. 93, 85-92.

21. Anner, B.M. (1985) The receptor function of the Na+,K+-activated adenosine triphosphatase system. Biochem. J. 227, 1-11.

22. Anner, B.M., Moosmayer, M. (1992) Mercury inhibits Na,K-ATPase primarily at the cytoplasmic site. Am. J. Physiol. 262, F843-F848.

23. Anner, B.M., Lane, L.K., Schwartz, A., Pitts, BJ.R. (1977) A reconstituted Na+ + K+ pump in liposomes containing purified (Na+K)-ATPase from kidney medulla. Biochim. Biophys. Acta 467, 340-345.

24. Aperia, A., Fukuda, Y., Lechene, C. (1988) Ontogenic increase of Na-K ATPase in rat proximal convoluted tubule (RPCT). Kidney Int. 33,415-419.

25. Aperia, A, Ibarra, F., Swensson, L.B., Klee, C., Grrengard, P. (1992) Calcineurin mediates alpha-adrenergic stimulation of Na, K-ATPase activity in renal tubule cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, 7394-7397.

26. Arguello, J.M., Peluffo, R.D., Feng, J., Lingrel, J.B., Berlin, J.R. (1996) Substitution of glutamic 779 with alanine in the Na,K-ATPase alpha subunit removes voltage dependence of ion transport. J. Biol. Chem. 271, 246124616.

27. Arystarkhova, E., Gibbons, D.L., Sweadner, KJ. (1995) Topology of the Na,K-ATPase. Evidence for externalization of a labile transmembrane structure during heating. J. Biol. Chem., 270, 8785-8796.

28. Askari, A. (1987) (Na+K)-ATPase: on the number of the ATP sites of the functional unit. J. Bioenerg. Biomembr. 19, 359-373.

29. Askari, A., Huang, W.-H. (1982) Na,K-ATPase: evidence for the binding of ATP to the phosphoenzyme. Biochem. Biophys. Res. Commun. 104, 14471453.

30. Askari, A., Huang, W.-H. (1984) Reaction of (Na+K)-dependent adenosine triphosphatase with inorganic phosphate: regulation by Na+, K+ , and nucleotides. J. Biol. Chem. 259, 4169-4176.

31. Baker, K.J., East, J.M., Lee, A.G. (1995) Mechanism of the inhibition of the Ca-ATPase by melittin. Biochemistry 34, 3596-3604.

32. Barlet-Bas, C., Arystarkhova, E., Chevall, E., Marsy, S., Sweadner, K., Modyanov, N., Doucet, A. (1993) Are there several isoforms of Na,K-ATPase alpha subunit in the rabbit kidney? J. Biol. Chem. 268,11512-11515.

33. Barnett, R., Palazzotto, J. (1974) Mechanism of the effects of lipid phase transitions of the Na,K-ATPase and the role of protein conformational changes. Ann. N.Y. Ac. Sci., 242, 69-76.

34. Beauge, L.A., Glynn, I. M. (1979a) Sodium ions acting in high affinity sites inhibit sodium ATPase activity of sodium pump by slowing dephosphorylation. J. Physiol. (London) 289, 17-31.

35. Beauge, L.A., Glynn, I.M. (1979b) Occlusion of K ions in the unphosphorylated sodium pump. Nature 280, 510-512.

36. Beggah, A.T., Beguin, P., Jaunin, P., Peitsch, M.C., Geering, K. (1993) Hydrophobic C-terminal amino acids in the beta-subunit are involved in assembly with the alpha-subunit of Na,K-ATPase. Biochemistry 32, 1411714124.

37. Berger, (1956) Crystallization of the sodium salt of adenosine triphosphate. Biochim. Biophys. Acta 29, 23-26.

38. Berman, M.C. (1982) Energy coupling and uncoupling of active calcium transport by sarcoplasmic reticulum membranes. Biochim. Biophys. Acta 694, 95-121.

39. Berrebi-Bertrand, I., Maixent, J.M. (1994) Immunodetection and enzymatic characterization of the a3-isoform of Na,K-ATPase in dog heart. FEBS Lett. 348, 55-60.

40. Bertorello, A., Aperia, A., Walaas, S.I., Nairn, A.C., Greengard, P. (1991) Phosphorylation of the catalytic subunit of Na,K-ATPase inhibits the activity of the enzyme. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88, 11359-11362.

41. Bidlack, W.R., Tappel, A.E. (1973) Fluorescent products of phospholipids during lipid peroxidation. Lipids, 8, №4,203-207.

42. Birmachu, W., Thomas, D. (1990) Rotational dinamics of the Ca-ATPase in sarcoplasmic reticulum studied by time resolved phosphorescence anisotropy. Biochemistry 29, 3904-3914.

43. Birmachu, W., Voss, J.C., Louis, C.F., Thomas, D.D. (1993) Protein and lipid rotational dynamics in cardiac and skeletal sarcoplasmic reticulum detected by EPR and phosphorescence anisotropy. Biochemistry 32, 9445-9453.

44. Blanco, G., Koster, J., Sanchez, G., Mercer, R.W. (1995) Kinetic properties of the a2(3l and a2B2 isozymes of the Na,K-ATPase. Biochemistry 34, 319325.

45. Blood, B.E., Noble, D. (1977) Glycosides induced inotropism of the heart -more than one mechanisms? J. Physiol. (London) 266, 76P-78P.

46. Blostein, R. (1970) Sodium-activated adenosine triphosphatase activity of the erythrocyte membrane. J. Biol. Chem. 245, 270-275.

47. Blostein, R. (1979) Side specific effect of sodium on Na,K-ATPase. Studies with inside-out red cell membrane vesicles. J. Biol. Chem. 254, 6673-6677.

48. Blostein, R. (1988) Measurement of Na+ and K+ transport and Na,K-ATPase activity in inside-out vesicles from mammalian erythrocytes. Methods Enzymol. 156, 171-178.

49. Blostein, R., Chu, L. (1977) Sidedness of (sodium-potassium)-adenosine triphosphate of inside-out red cell membrane vesicles. Interaction with potassium. J. Biol. Chem. 252,3035-3043.

50. Boldyrev, A.A., Svinukhova, I.A. (1982) Na,K-dependent adenosine triphosphatase. Two types of kinetics. Biochim. Biophys. Acta, 707, 167-170.

51. Boldyrev, A.A., Ruuge, E ., Smirnova, I., Tabak, M. (1977) Na,K-ATPase: the role of state of lipids and Mg ions in activity regulation. FEBS Lett., 80, 303-307.

52. Boldyrev, A.A., Lopina, O.D., Prokopjeva,V., Stubbs, C., Quinn, P. (1983) The modulation of Ca-ATPase activity and protein-lipid interactions in the sarcoplasmic reticulum by ATP. Biochemistry Int. 6, 297-305.

53. Boyle, W.G., Van der Geer, P., Hunter, T. (1991) Phosphopeptide mapping and phosphoamino acid analysis by two dimentional separation on thin-layer cellulose plates. Methods Enzymol. 201. 110-149.

54. Brotherus, J.R., Moller, J.V., Jorgensen, P.L. (1981) Soluble and active renal Na,K-ATPase with maximum protein molecular mass 170,000±9,000 daltons, formation of larger units by secondary aggregation. Biochem. Biophys. Res. Commun. 100, 146-154.

55. Burkli A., Cherry R.J., (1981) Rotational motion and flexibility of Ca, Mg-dependent adenosine 5'-triphosphatase in sarcoplasmic reticulum membranes. Biochemistry 20, 138-145.

56. Burns, E.L., Price, E.M. (1993) Random mutagenesis of the sheep Na,K-ATPase alpha-1 subunit generates a novel T797N mutation that results in ouabain-resistant enzyme. J. Biol. Chem. 268, 25632-25635.

57. Campos, M., Beauge L. (1994) Na-ATPase activity of Na,K-ATPase. J. Biol. Chem. 269, 18028-18036.

58. Canessa, C.M., Horisberger, J.D., Louvard, D., Rossier, B.C. (1992) Mutation of the cysteine in the first transmembrane segment of Na,K-ATPase alpha subunit confers ouabain resistance. EMBO J. 11, 1681-1687.

59. Canfield, V.A., Levenson, R. (1993) Transmembrane organization of the Na,K-ATPase determined by epitope addition. Biochemistry 32, 1378213786.

60. Cantley, L.C.(1981) Structure and mechanism of the (Na,K)-ATPase. Curr. Top. Bioenerg. 11,201-237.

61. Cantley, L.C., Jr., Cantley, L.G., Josephson, L. (1978a) A characterization of vanadate interactions with the (Na,K)-ATPase. Mechanistic and regulatory implications. J. Biol. Chem. 253, 7361-7368.

62. Cantley, L.G., Gelles, K.J., Josephson, L. (1978b) Reaction of (Na-K)

63. ATPase with 7-chloro-4-nitrobenzo-2-oxa-l,3-diazole: evidence for an7essential tyrosine at the active site. Biochemistry 17,418-425.

64. Cantley, L.C., Josephson, L., Warner, R., Yanagisawa, M., Lechene, C., Guidotti, G. (1977) Vanadate is a potent (Na, K)-ATPase inhibitor found in ATP derived from muscle. J. Biol. Chem. 252 7421-7423.

65. Carafoli, E.(1991) Calcium pump of the plasma membrane. Physiol. Rev. 71, 121-153.

66. Cavieres, J.D. (1987) The molecular size required varies according to the reaction step round the sodium pump cycle. FEBS Lett. 225, 145-150.

67. Cavieres, J.D., Glynn, I.M. (1979) Sodium-sodium exchange through the sodium pump: the role of ATP and ADP. J. Physiol. (London) 297, 637-645.

68. Charnock, J.C., Cook, D.A., Opit, L.J. (1971a) Role of energized states of (Na+K)-ATPase in the sodium pump. Nature, 233,171-172.

69. Charnock, J.C., Doty, D.M., Russell, J.C. (1971b) The effect of temperature on the activity of (Na+K)-ATPase. Arch. Biochem. Biophys. 142, 633-637.

70. Charnock, J.C., Cook, D.A., Casey, R. (1971c) The role of cations and other factors on the apparent energy of activation of (Na+K)-ATPase. Arch. Biochem. Biophys. 147, 323-329.

71. Charnock, J.C., Cook, D.A., Almeida, A.F., To, R. (1973) Activation energy and phospholipid requirements of membrane-bound adenosine triphosphatases. Arch. Biochem. Biophys. 159, 393-399.

72. Cherry, RJ. (1978) Measurement of protein rotational diffusion in membranes by flash photolysis. Methods Enzymol. 54,47-61.

73. Chetverin, A.B. (1986) Evidence for a diprotomeric structure of Na,K-ATPase. Accurate determination of protein concentration and quantative end-group analysis. FEBS Lett. 196, 121-125.

74. Clague, M.J., Cherry, R.J. A comparative study of band 3 aggregation in erythrocyte membranes by melittin and other cationic agent (1989) Biochim. J. 252, 791-794.

75. Clark, M.A., Conway, T.M., Schore, R.G., Crooke, S.T. (1987) Identification and isolation of a mammalian protein which is antigenically and functionallyrelated to the phospholipase A2 stimulatory peptide melittin. J. Biol. Chem. 262, 4402-4406.

76. Collins, J.H., Leszyk, J. (1987) The «y-subunit» of Na,K-ATPase: small, amphiphilic protein with a unique amino acid sequence. Biochemistry 26, 8665-8668.

77. Collins, S.P., Forbush III, B., Lane, L.K., Ling, E., Schwartz, A., Zot, A. (1982) Purification and characterization an (Na+K)-ATPase proteolipid labeled with a photoaffinity derivative of ouabain. Biochim. Biophys. Acta 686, 7-12.

78. Colowick, S.P, Womack, F.C. (1969) Binding of diffusible molecules by macromolecules: rapid measurement by rate dialysis. J. Biol. Chem. 244, 774-777.

79. Cornelius, F., Skou, J.C. (1984) Reconstitution of Na,K-ATPase into phospholipid vesicles with full recovery of its specific activity. Biochim. Biophys. Acta 772, 357-373/

80. Cornelius, F., Skou, J.C. (1985) Na*Na+ exchange mediated by (Na+K)-ATPase reconstituted into liposomes. Evaluation of pump stoichiometry and response to ATP and ADP. Biochim. Biophys. Acta 818, 211-217.

81. Cornelius, F., Logvinenko, N. (1996) Functional regulation of reconstituted Na,K-ATPase by protein kinase A phosphorylation. FEBS Lett. 380, 277280.

82. Corthesy-Theulaz, I., Merillat, A.M., Honegger, P., Rossier., B.C. (1991) Differential regulation of Na,K-ATPase isoform gene expression by T3 during rat brain development. Am. J. Physiol. 261, C124-C131.

83. Cowin, P., Burke, B. (1996) Cytoskeleton-membrane interactions. Curr. Opinion Cell. Biol. 6, 56-65.

84. Craig, W.S., Kyte, J. (1980) Stoichiometry and molecular weight of the minimum asymmetric unit of canine renal sodium and potassium ion-activated adenosine triphosphatase. J. Biol. Chem. 255,6262-6269.

85. Cuppoletti, J. (1990) I.Azidosalicylil melittin binding domains: evidence for a polypeptide receptor on the gastric H,K-ATPase. Arch. Biochem. Biophys. 278, 405-415.

86. Cuppoletti, J., Abbot, A.J. (1990) Interaction of melittin with the (Na+K)-ATPase: Evidence for a melittin-induced conformational change. Arch. Biochem. Biophys. 283, 249-257.

87. Cuppoletti, J., Blumenthal, K.M., Malinowska, D.H. (1989) Melittin inhibition of the gastric (H+K) ATPase and photoaffmity labeling with 1251. azidosalicylyl melittin. Arch. Biochem. Biophys. 275, 263-270.

88. Cuppoletti, J., Huang, P., Kaetzel, M.A., Malinowska, D.H. (1993) Stimulus-associated protein in gastric parietal cell detected using antimelittin antibody. Am. J. Physiol. 264, G637-G644.

89. Dean, W.L., Suarez, C.P., (1981) Interactions between sarcoplasmic reticulum calcium adenosine triphosphatase and nonionic detergents. Biochemistry 20, 1743-1747.

90. Deguchi, N., Jorgensen, P.L., Maunsbach, A.B. (1977) Ultrastructure of the sodium pump. Comparison of thin sectioning, negative staining, and freeze-fracture of purified membrane-bound (Na,K)-ATPase. J. Cell. Biol. 619-634.

91. Dempsy, C.E. (1990) The action of melittin on membranes. Biochim. Biophys. Acta 1031,143-161.

92. DePont, J.J.H.H.M., Schoot, B.M., Van Prooijen A.V.E., Bonting, S.L. (1977) An essential arginine residue in the ATP-binding centre of (Na+K)-ATPase. Biochim. Biophys. Acta 482, 213-227.

93. Dzhandzugazyan, K.N., Jorgensen, P.L. (1985a) Asymmetric orientation of amino groups in the a-subunit and the B-subunit of (Na+K)-ATPase in tight right-side vesicles of basolateral membranes from outer medulla. Biochim. Biophys. Acta 817, 165-173.

94. Dzhandzugazyan, K.N., Modyanov, N.N. (1985b) Chemical and immunochemical approaches to structure of membrane-bound Na-K-ATPase. In: The Sodium pump, Eds. Glynn, I.M. and Elloiy, C. Cambrige, UK. The Company of Biologist. P. 129-134.

95. Eakle, K.A., Kabalin, M.A., Wang, S. G., Farley, R.A. (1994) The influence of beta-subunit structure on the stability of Na/K-ATPase complexes and interaction with K+. J. Biol. Chem. 269, 6550-6557.

96. Eichler, D.G., Solomonson, L.P., Barber, M.J., McCreery, M.J., Ness, G.C. (1987) Radiation inactivation analysis of enzymes. Effect of free radical scavengers on apparent target sizes. J. Biol. Chem., 262, 9433-9436.

97. Erdmann, E., Hasse, W. (1975) Quantitative aspects of ouabain binding to human erythrocyte and cardiac membranes. J. Physiol. (London) 251, 671682.

98. Esmann, M. (1991) Conformational transitions of detergent-solubilized Na,K-ATPase are conveniently monitored by the fluorescent probe 6-carboxy-eosin. Biochem. Biophys. Res. Commun. 174, 63-69.

99. Esmann, M., Skou, J.C. (1985) Occlusion of Na by the Na,K-ATPase in the presence of oligomicin. Biochem. Biophys. Res. Commun. 127, 857-863.

100. Esmann, M., Skou, J.C., Christiansen, C. (1979) Solubilization and molecular weight determination of the (Na+K)-ATPase from rectal glands of Squalus acanthias. Biochim. Biophys. Acta 567,410-420.

101. Esmann, M., Christiansen, C., Karlsson, K-A., Hansson, G.C., Skou, J.C. (1980) Hydrodynamic properties of solubilized (Na+K)-ATPase from rectal glands of Squalus acanthias. Biochim. Biophys. Acta 603, 1-18.

102. Ewarts, Y.S., Klip, A. (1995) Hormonal regulation of Na,K-ATPase: mechanism underlying rapid and sustained changes in pump activity. Am. J. Physiol. 269, C295-C313.

103. Fahn, S., Hurley, M.R., Koval, G.J., Albers, R.W. (1966) Sodium-potassium-activated adenosine triphospatase of Electrophorus electric organ. II. Effect ofN-ethylmaleimide and other sulfhydryl reagents. J. Biol. Chem. 241, 18901895.

104. Fahn, S., Koval, G.J., Albers, R.W. (1968) Sodium-potassium activated adenosine triphosphatase of Electrophorus electric organ. V. Phosphorylation by adenosine triphosphate-32?. J. Biol. Chem. 243, 1993-2002.

105. Faller, L., Diaz, R., Scheiner-Bobis, G., Farley, R.A. (1991) Temperature dependence of the rates of conformational changes reported by fluorescein 5'-isothiocyanate modification of H,K- and Na,K-ATPases. Biochemistry 30, 3503-3510.

106. Fambrough, D.M., Lemas, M.V., Hemrick, M., Emerick, M., Renaud, K.J., Inman, E.M., Hwang, B., Takeyasu, K. (1994) Analysis of subunit assembly of the Na,K-ATPase. Am. J. Physiol. 266, C579-C589.

107. Farias, R.N., Bloj, B., Morero, R.D., Sineriz, F., Trucco, R.E. (1975) Regulation of allosteric membrane-bound enzymes through changes in membrane lipid composition. Biochim. Biophys. Acta 415, 231-251.

108. Farley, R.A., Goldman, D.W., Bayley, H. (1986) Identification of regions of the catalytic subunit of (NaK)-ATPase embedded within the cell membrane. J. Biol. Chem. 255, 860-864.

109. Farley, R.A., Tran, C.M., Carilli, C.T., Hawke, D., Shively, J.E. (1984) Amino acid sequence of a fluorescein-labeled peptide from the acrive site of (Na,K)-ATPase. J. Biol. Chem. 259, 9532-9535.

110. Feng, J., Orlowski, J., Lingrel, J.B. (1993) Identification of a functional thyroid hormone response elements in upstream flanking region of the human Na,K-ATPase pi gen. Nucleic. Acids Res. 21,2619-2626.

111. Feschenko, M.S., Sweadner, K.J. (1995) Structural basis for species-specific difference in the phosphorylation of Na,K-ATPase by protein kinase C. J. Biol. Chem. 270, 14072-14077.

112. Flemming, W.W. (1980) The electrogenic Na,K-pump in smooth muscle: physiologic and pharmacological significance. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 20, 129-149.

113. Fletcher, J.E., Tripolitis, L., Beech, J. (1992) Bee venom melittin is a potent toxin for reducing the threshold for calcium-induced release in human and equine skeletal muscle. Life Sci. 51, 1731-1738.

114. Forbush, B. (1987a) Rapid release of 42K+ and 86Rb+ from an occluded state of the Na,K-pump in the presence of ATP or ADP. J. Biol. Chem. 262, 11104-11115.

115. Forbush, B. (1987b) Rapid release of 42K+ and 86Rb+ from two distinct transport sites on the Na,K-pump in the presence of Pi or V04. J. Biol. Chem. 262, 11116-11127.

116. Forbush, B., Kaplan, J.H., Hoffman, J.F. (1978) Characterization of a new photoaffinity derivative of ouabain: labeling of the large polypeptide and of a proteolipid component of the Na,K-ATPase. Biochemistry 17, 3667-3676.

117. Fortes, P.A.G., Han, M.K. (1985) Na,K-ATPase has a single functional ATP-site. Federetion Proc. 44, 1443 (Abstract).

118. Freytag, J.W. (1983) The (Na+, K+)-ATPase exhibits enzymatic activity in the absence of the glycoprotein subunits. FEBS Lett., 159,280-284.

119. From, A.H.L., Fullerton, D.S., Ahmed, K. (1990) Digitalis receptor sugar binding site characteristics a model based upon studies of Na,K-ATPasepreparations with different digitalis sensitivities. Mol. Cell. Biochem. 94, 157-165.

120. Gache, C., Rossi, B., Leone, F.A., Lazdunski, M. (1979) Pseudo-substrates to analyze the reaction mechanism of the Na,K-ATPase. In: Na,K-ATPase. Structure and kinetics. Eds. Skou, J.C., Norby, J.G. Acad. Press, London, 301-3314.

121. Gadsby, D.C., Rakowski, R.F., De Weer, P. (1993) Extracellular access to the Na,K-pump: pathway similar to ion channel. Science 260,100-103.

122. Garrahan, P J., Glynn, I.M. (1967a) The stoichiometry of the sodium pump. J. Physiol. (London) 192,217-235.

123. Garrahan, P.J., Glynn, I.M. (1967b) The incorporation of inorganic phosphate into adenosine triphosphate by reversal of the sodium pump. J. Physiol. 192. 237-256.

124. Garrahan, P.J., Glynn, I.M. (1967c) The sensitivity of sodium pump to external sodium. J. Physiol. 175-188.

125. Geering, K. (1990) Subunit assembly and functional maturation of Na,K-ATPase. J. Membr. Biol. 115,109-121.

126. Geering, K., Meyer, D.I., Paccolat, M. P., Kraehenbuhl, J. P, Rossier, B.C. (1985) Membrane insertion of alpha- and beta-subunits of Na,K-ATPase. J. Biol. Chem. 260, 5154-5160.

127. Gloor, S., Antonicek, H., Sweadner, K.J., Pagliusi, S., Frank, R., Moos, M., Schachner, M. (1990) The adhesion molecule on glia (FVOG) is a homologue of the P-subunit of the Na,K-ATPase. J. Cell. Biol. 110,165-174.

128. Glynn, I.M. (1985) The Na,K-transporting adenosine triphosphatase. The enzymes of biological membrane, ed. Martonosi A. N., Plenum Press, N-Y, v. 3,35-114.

129. Glynn, I.M., Hoffman, J.F. (1971) Nucleotide requirements for sodium-sodium exchange catalyzed by the sodium pump in human red cells. J. Physiol. (London) 218, 239-256.

130. Glynn, I.M., Karlish, SJ.D. (1976) ATP hydrolysis associated with uncoupled sodium flux through the sodium pump: evidence for allostericeffects of intracellular ATP and extracellular sodium. J. Physiol. (London) 256, 465-496.

131. Glynn, I.M., Richards, D.E. (1982) Occlusion of rubidium ions by the sodium-potassium pump: its implications for the mechanism of potassium transport. J. Physiol. (London) 330, 17-43.

132. Goldfraind, T., Ghysel-Burton, J. (1977) Binding sites related to ouabain-induced stimulation or inhibition of the sodium pump. Nature 265, 165-166.

133. Goldin, S.M., Tong, S.W. (1974) Reconstitution of active transport catalyzed by the purified sodium and potassium ion-stimulated adenosine triphosphatase from canine renal medulla. J. Biol. Chem. 249, 5907-5915.

134. Goldshleger, R., Tal, D.M., Karlish, S J. (1995) Topology of the alpha-subunit of Na,K-ATPase based on proteolysis. Lability of the topological organization. Biochemistry 34, 8668-8679.

135. Grimellec, C.L., Leblanc, G. (1980) Temperature-dependent relationship between K+ influx, Mg2+-ATPase activity, transmembrane potential and membrane lipid composition in mycoplasma. Biochim. Biophys. Acta 599, 639-651

136. Grisham, C.M. (1979) Characterization of essential arginyl residue in sheep kidney (Na+K) ATPase. Biochim. Biophys. Res. Commun. 88, 229-236.

137. Grisham, C.M., Barnett, R.E. (1973) The role of lipid-phase transition in the regulation of the (sodium + potassium) adenosine triphosphatase. Biochemistry 12, 2635-2637.

138. Grisham, C.M., Mildvan, A.S. (1974) Magnetic resonance and kinetic studies of the mechanism of sodium and potassium ion-activated adenosine triphosphatase. J. Biol. Chem. 249, 3187-3197.

139. Grishin, A.V., Sverdlov, V.E., Kostina, M.B., Modyanov, N.N. (1994) Cloning and characterization of the entire cDNA encoded by ATP1AL1- amember of the human Na,K/H,K-ATPase gene family. FEBS Lett. 349, 144150.

140. Grosse, R., Eckert, K., Malur, J., Repke, K.R. (1978) Analysis of function related interactions of ATP, sodium and potassium ions with Na- and K-transporting ATPase studied with thiol reagents as a tool. Acta Biol. Med. Germ. 37, 83-96.

141. Greene, D.A., Lattimer, S.A., Sima, A.A. (1987) Sorbitol, phosphoinositides, and sodium-potassium ATPase in the pathogenesis of diabetic complications. N. Engl. J. Med. 316, 599-606.

142. Hamrick, M., Renaud, K.J., Fambrough, D.M. (1993) Assembly of the extracellular domain of the Na,K-ATPase beta subunit with the alpha subunit. Analysis of beta subunit chimeras and carboxyl-terminal deletions. J. Biol. Chem. 268, 24367-24373.

143. Hansen, O., Jensen, J., Norby, J. G., Ottolenghi, P. (1979) A new proposal regarding the subunit composition of (Na+K)ATPase. Nature 4435, 411-412.

144. Hara, J., Nakao, N. (1986) ATP-dependent proton uptake by proteoliposomes reconstituted with purified Na+,K+-ATPase. J. Biol. Chem. 261, 1265512658.

145. Hara, Y., Urayama, O., Kawakami, K., Nojima, H., Nagamune, H., Kojima, T., Ohta. T., Nagano, K., Nakao, M. (1987) Primary structures of two types of alpha-subunit of rat brain Na+,K+-ATPase deduced from cDNA sequences. J. Biochem. (Tokyo) 102, 43-58.

146. Harris, R.C., Savin, V.J., Lechene, C. (1987) Rat renal proximal tubular cells (RPTC) increase net ionic content following return to isotonicity from hypotonisity. Kidney. Int. 31,435a.

147. Harris, R.C., Seifer, J.L., Lechene, C. (1986) Coupling of Na-H exchange and Na-K pump activity in cultured rat proximal tubular cells. Am. J. Physiol. 251, C815-C824.

148. Haseneuer, J., Huang. W.-H., Askari, A. (1993) Allosteric regulation of the access channel to the Rb+ occlusion sites of (Na+K)-ATPase. J. Biol. Chem. 268, 3289-3297/

149. Hasselbach, W., Makinose, M. (1961) Die Calcium Pumpe der "Erschlafungsgrana" des Muskels und ihre Abhängigkeit von der ATP-Spaltung. Biochem. Z. 333, 518-528.

150. Hastings, D.F., Reynolds, J.A. (1979) Molecular weight of Na,K-ATPase from shark rectal glands. Biochemistry 18, 817-821.

151. Hebert, H., Jorgensen, P.L., Skriver, E., Maunsbach, A.B. (1982) Crystallization patterns of membrane-bound (Na+K)-ATPase. Biochim. Biophys. Acta 689, 571-574.

152. Hebert, H., Skriver, E., Maunsbach, A.B. (1985) Three-dementional structure of renal Na,K-ATPase determined by electron microscopy of membrane crystals. FEBS Lett. 187,182-186.

153. Hegyvary, C., Post, R.L. (1971) Binding of adenosine triphosphate to sodium and potassium ion-stimulated adenosine triphosphatase. J. Biol. Chem. 246, 5234-5240.

154. Hegyvary, C., Chigurupati, R., Kang, K., Mahoney, D. (1980) Reversible alterations in the kinetics of cardiac sodium-and potassium-activated adenosine triphosphatase after partial removal of membrane lipids. J. Biol. Chem. 255, 3068-3074.

155. Herrera, V.L., Emanuel, J.R., Ruiz-Opazo, N., Levenson, R., Nadal-Ginard, B. (1987) Three differentially expressed Na,K-ATPase alpha subunit isoforms: structural and functional implications. J. Cell. Biol. 105, 18551865.

156. Hilden, S., Rhee, H.M., Hokin, L.E. (1974) Sodium transport by phospholipid vesicles containing purified sodium and potassium ion-activated adenosine triphosphatase. J. Biol. Chem. 249, 7432-7440.

157. Horisberger, J.D., Rossier, B.C. (1992) Aldosterone regulation of gene transcription leading to control of ion transport. Hypertension 19,221-227.

158. Horisberger, J.D., Jaunin, P., Reuben, M.A., Lasater, L.S., Chow, D.C., Forte, J.G., Sachs, G., Rossier, B.C., Geering, K. (1991) The H,K-ATPase beta-subunit can act as a surrogate for the beta-subunit of Na,K-ATPase. J. Biol. Chem. 266, 19131-19134.

159. Huang, W-H, Askari, A. (1981) Phosphorylation-dependent cross-linking of the a-subunits in the presence of Cu2+ and o-phenantroline. Biochim. Biophys. Acta 645, 54-58.

160. Huang, W-H, Askari, A. (1984) Simultaneous bindings of ATP and vanadate to (Na+K)-ATPase implication for the reaction mechanism of the enzyme. J. Biol. Chem. 259, 13287-13291.

161. Huang, W.-H., Kakar, S.S., Askari, A. (1985) Mechanisms of detergent effects on membrane-bound (Na++K+)-ATPase. J. Biol. Chem. 260, 73567361.

162. Ibarra, F., Aperia, A., Swensson, L.B., Eklof, A.C. (1993) Bidirectional regulation of Na,K-ATPase activity by dopamin and an a-adrenergic agonist. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90,21-24.

163. Inesi, G., Kirley, M.R. (1992) Structural features of cation transport ATPases. J. Bioenerg. Biomembr. 24, 271-283.

164. Inesi, G., Millman, M., Eletr, S.J. (1973) Temperature-induced transitions of function and structure in sarcoplasmic reticulum membranes. J. Mol. Biol., 81, 483-504.

165. Ishii, T., Takeyasu, K. (1993) The N-terminal 200 amino acids of the plasma membrane Na,K-ATPase subunit confer ouabain-sensitivity on the sarcoplasmic reticulum Ca-ATPase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90, 88818885.

166. Jackson, R.J., Mendlein, J., Sachs, G. (1983) Interaction of fluorescein isothiocyanate with the (H+K)-ATPase. Biochim. Biophys. Acta 731, 9-15.

167. Jensen, J. (1992) Heterogenity of pig kidney Na,K-ATPase as indicated by ADP- and ouabain-binding stoichiometry. Biochim. Biophys. Acta 1110, 8187.

168. Jensen, J., Norby, J.G. (1988) Membrane-bound Na,K-ATPase: target size and radiation inactivation size of some of its enzymatic reactions. J. Biol. Chem. 263, 18063-18070.

169. Jensen, J., Norby, J.G., Ottolenghi, P. (1984) Binding of sodium and potassium to the sodium pump of pig kidney evaluated from nucleotide-binding behaviour. J. Physiol. (London) 346,219-241.

170. Jorgensen, P.L. (1974) Purification and characterization of (Na++K+)-ATPase. III. Purification from the outer medulla of mammalian kidney after selective removal of membrane components by sodium dodecylsulphate. Biochim. Biophys. Acta 356, 36-52.

171. Jorgensen, P.L. (1975) Purification and characterization of (Na++K+)-ATPase. V. Conformational changes in the enzyme. Transitions between the Na-form and K-form studied with tryptic digestion as a tool. Biochim. Biophys. Acta 401, 399-415.

172. Jorgensen, P.L. (1977) Purification and characterization of (Na++K+)-ATPase. VI. Differential tryptic modification of catalytic functions of the purified enzyme in the presence of NaCl and KC1. Biochim. Biophys. Acta 597, 305-317.

173. Jorgensen, P.L. (1982) Mechanism of the (Na++K+)-ATPase. Protein structure and conformation of the pure (Na+K)-ATPase. Biochim. Biophys. Acta 694, 27-68.

174. Jorgensen, P.L. (1988) Purification of Na,K-ATPase: enzyme sources, preparative problems, and preparation from mammalian kidney. Methods Enzymol. 156, 29-43.

175. Jorgensen, P.L., Skou, J.C. (1971) Purification and characterization of (Na+K)-ATPase. I. The influence of detergents on the activity of (Na+K)-ATPase in preparations from the outer medulla of rabbit kidney. Biochim. Biophys. Acta. 233, 366-380.

176. Jorgensen, P.L., Petersen, J. (1985) Chymotryptic cleavage of the P-subunit in El form of renal (Na+K)ATPase: effect on enzymatic properties, ligand binding and cation exchange. Biochim. Biophys. Acta. 821, 319-333.

177. Jorgensen, P.L., Collins, J.H. (1986) Tryptic and chymotryptic cleavage sites in sequence of alpha-subunit of (Na+ +K+)-ATPase from outer medulla of mammalian kidney. Biochim. Biophys. Acta 860, 570-576.

178. Jorgensen, P.L., Andersen, J.P. (1988) Structural basis for E1-E2 conformational transition in Na,K-pump and Ca-pump protein. J. Membr. Biol. 103, 95-120.

179. Jorgensen, P.L., Skriver, E., Herbert, H., Maunsbach, A.D. (1982) Structure of the Na,K-pump, crystallization of pure membrane-bound Na,K-ATPase and identification of functional domains of the a-subunit. Ann. N.-Y. Acad. Sci. 402, 207-224.

180. Kakar, S.S., Huang, W.-H., Askari (1985) Coexistence of two ATP sites on the ouabain-complexed (Na+K)-ATPase. Biochem. Internal 11,611-616.

181. Kanazawa, T., Saito, M., Tonomura, Y. (1970) Formation and decomposition of a phosphorylated intermediate in the reaction of Na plus K plus dependent ATPase. J. Biochem. (Tokyo) 67, 693-711.

182. Kapakos, J.G., Steinberg, M. (1982) Fluorescent labeling of Na+,K+-ATPase by 5-iodacetamidofluorescein. Biochim. Biophys. Acta 693, 493-496.

183. Kapakos, J.G., Steinberg, M. (1986) Ligand binding to Na,K-ATPase labelled with 5-iodacetamidofluorescein. J. Biol. Chem. 261, 2084-2089.

184. Kaplan, J.H. (1982) Sodium pump mediated ATP-ADP exchange. J. Gen. Physiol. 80, 915-937.

185. Karlish, S.J.D. (1980) Characterization of conformational changes in Na,K-ATPase labeled with fluorescein in the active site. J. Bioenerg. Biomembr. 12, 11-136.

186. Karlish, S.J.D., Yates, D.W. (1978) Tryptophane fluorescence of (Na+K)-ATPase as a tool for study of the enzyme mechanism. Biochim. Biophys. Acta 527, 115-130.

187. Karlish, S.J.D., Stein, W. (1982) Passive rubidium fluxes mediated by Na,K-ATPase reconstituted into phospholipid vesicles when ATP and phosphatefree. J. Physiol. (London) 328, 295-316.

188. Karlish, S.J., Kempner, E.S. (1984) Minimal functional unit for transport and enzyme activities of (Na+K)-ATPase as determined by radiation inactivation. Biochim. Biophys. Acta 776, 288-298.

189. Karlish, S.J.D., Jorgensen, P.L, Gitler, C. (1977) Identification of a membrane embedded segment of a-subunit of Na,K-ATPase. Nature 269, 715-717.

190. Karlish, S.J.D., Yates, D.W., Glynn, I.M. (1978) Elementaiy steps of the (Na+K)-ATPase mechanism, studied with formycin nucleotides. Biochim. Biophys. Acta 525, 230-251.

191. Karlish, S.J., Goldshleger, R., Stein, W.D. (1990) A 19-kDa C-terminal tryptic fragment of the alpha chain of Na/K-ATPase is essential for occlusion and transport of cations. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87, 4566-4570.

192. Karlish, S.J.D., Goldschleger, R., Jorgensen, P.L. (1993) Location of Asn-831 of the a chain of Na/K-ATPase at the cytoplasmic surface. Implication for topological model. J. Biol. Chem. 268, 3471-3478.

193. Kataoka, M., Head, J.F., Seaton, B.A., Engelman, D.M. (1989) Melittin binding causes a large calcium-dependent conformational change in calmodulin. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86, 6944-6948.

194. Kempner, E.S., Haigler, H.T. (1982) The influence of the low temperature on the radiation sensitivity of enzymes. J. Biol. Chem. 257, 13297-13299.

195. Kempner, E.S., Fleisher, S. (1989) Radiation inactivation of membrane components and molecular mass determination by target analysis. Methods Enzymol. 172, 410-439.

196. Kimelberg, H.K. (1976) (Sodium plus potassium ion)-dependent adenosine triphosphatase activity in reconstituted systems and in cultured cells. Biochem. Soc. Trans.(London), 4, 755-757.

197. Kinosita, K., Kawato, H., Ikegami, A. (1984) Dynamic structure of biological and model membranes: analysis by optical anisotropy decay measurement. Adv. Biophys. 17, 147-203.

198. Kirley, T.L. (1989) Determination of three disulfide bonds and one free sulfhydryl in the |3-subunit of (Na,K)-ATPase. J. Biol. Chem. 264, 71857192.

199. Kirley T.L., Wallick, E.T., Lane L.K. (1984) The amino acid sequence of the fluorescein isothiocyanate reactive site of lamb and rat kidney Na- and K-dependent ATPase. Biochem. Biophys. Res. Commun. 125, 767-773.

200. Klodos, I., Norby J.G. (1987) (Na+K)-ATPase: confirmation of the three-pool model for the phosphointermediates of Na-ATPase activity. Estimation of theenzyme-ATP dissociation rate constant. Biochim. Biophys. Acta 897, 302314.

201. Klodos, I., Ottolenghi, P., Boldyrev, A. (1975) Large scale preparation of Na,K-ATPase from ox brain. Analyt. Biochem. 67, 397-403.

202. Klodos, I., Norby, J.G., Plesner, I.W. (1981) The steady-state kinetic mechanism of ATP hydrolysis catalyzed by membrane-bound Na,K-ATPase from ox brain. II Kinetic characterization of phosphointermediates. Biochim. Biophys. Acta 643, 463-482

203. Koepsell, Y., Hulla, F.W., Fritzsch, G. (1982) Different classes of nucleotide-binding sites in the (Na+K)-ATPase studied by affinity labeling and nucleotide-dependent SH-group modification. J. Biol. Chem. 257, 1073310741.

204. Koster, J.C., Blanco, G., Mercer, R.W. (1995) A cytoplasmic region of the Na,K-ATPase alpha-subunit is necessary for specific alpha/alpha association. J. Biol. Chem. 270, 14332-14339.

205. Kumamoto, J., Raison, J.K., Lyons, J.M. (1971) Temperature "breaks" in Arrhenius plots: a thermodynamic consequence of a phase change. J. Theor. Biol., 31, 47-51.

206. Laemmli, U.K. (1970) Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 227, 680-685.

207. Lane, L.K., Potter, J.D., Collins, J.H. (1979) Large scale purification of Na,K-ATPase and its protein subunits from lamb kidney medulla. Prep. Biochem. 9(2), 157-170.

208. Lane, L.K., Feldmann, J.M., Flarsheim, C.E., Rybczynski, C.L. (1993) Expression of rat alpha 1 Na,K-ATPase containing substitutions of "essential" amino acids in the catalytic center. J. Biol. Chem. 268, 1793017934.

209. Lauger, P. (1991) Electrogenic ion pumps. Sinauer Accociates, Inc. Sanderland, Massachusetts.

210. Lee K. H., Blostein, R. (1980) Red cell sodium fluxes catalyzed by the sodium pump in the absence of K+ and ATP. Nature 285, 338-339.

211. Liang, S.-M., Winter, C.G. (1977) Digitonin-induced changes in subunit arrangement in relation to some in vitro activities of the (Na+K)-ATPase. J. Biol. Chem. 252, 8278-8284.

212. Lingham, R. B., Stewart, D.J., Sen, A.K. (1980) The induction of (Na++K+)-ATPase in the salt gland of the duck. Biochim. Biophys. Acta 601,229-234.

213. Lingrel, J.B. (1992) Na,K-ATPase: isoform structure, function and expression. J. Bioenerg. Biomembr. 24, 263-270.

214. Lingrel, J.B., Orlowski, J., Shull, M.M., Price, E.M. (1990) Molecular genetics of Na,K-ATPase. Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 38, 37-89.

215. Lingrel, J.B., van Huysse, J., Drien, W., Jewell-Motz, E., Askew, R., Schultheis, P. (1994) Structure-function studies of the Na,K-ATPase. Kidney Int. 45, S32-S39.

216. Lo, C.S., Edelman, I.S. (1976) Effect of triiodothyronine on the synthesis and degradation of renal cortical (Na+ + K+)-adenosine triphosphatase. J. Biol. Chem. 251,7834-7840.

217. Lo, C.S., Lo, T.N. (1980) Effect of triiodothyronine on the synthesis and degradation of the small subunit of renal cortical (Na+ + K+)-adenosine triphosphatase. J. Biol. Chem. 255, 2131-2136.

218. Lowndes, J., Hokin-Neaverson, M., Bertics, P. (1990) Kinetics of phosphorylation of Na/K-ATPase by protein kinase C. Biochim. Biophys. Acta 1052, 143-151.

219. Lowry, O.H., Rosebrough, N.J., Farr, A.L., Randall, R.J. (1951) Protein measurement with Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 193, 265-275.

220. Lutsenko, S., Kaplan, J.H. (1993) An essential role for the extracellular domain of the Na,K-ATPase beta-subunit in cation occlusion. Biochemistry 32, 6737-6743.

221. Lutsenko, S., Kaplan, J.H. (1994) Molecular events in close proximity to the membrane associated with the binding of ligands to the Na,K-ATPase. J. Biol. Chem. 269, 4555-4564.

222. Lutsenko, S., Anderko, R., Kaplan, J.H. (1995) Membrane disposition of the M5-M6 hairpin of Na+,K(+)-ATPase alpha subunit is ligand dependent. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92, 7936-7940.

223. Lytton, J. (1985) The catalytic subunits of the (Na,K)-ATPase alpha and alpha(+) isozymes are the products of different genes. Biochem. Biophys. Res. Commun. 132, 764-769.

224. Mahaney, J. E., Thomas, D.D. (1991) Effects of melittin on molecular dynamics and Ca-ATPase activity in sarcoplasmic reticulum membranes; electron paramagnetic resonance. Biochemistry 30, 7171-7180.

225. Malencik, D.A., Anderson, S.R. (1988) Association of melittin with the isolated myosin light chains. Biochemistry 27,1941-1949.

226. Mardh, S. (1979) Phosphorylation of kidney preparation of Na,K-ATPase by the catalytic subunit of cAMP-dependent protein kinase. In: Na,K-ATPase: structure and kinetics. Eds. Skou, J.C., Norby, J.G., Acad Press, N.-Y., 359370.

227. Martin-Vasallo, P., Dackowski, W., Emanuel, J.R., Levenson, R. (1989) Identification of putative isoform of the Na,K-ATPase P-subunit. J. Biol. Chem. 264, 4613-4618.

228. Marver, D., Lear, S., Marver, L.T., Silva, P., Epstein, F.H. (1986) Cyclic AMP-dependent stimulation of Na,K-ATPase in shark rectal gland. J. Membrane Biol. 94,205-215.

229. Maunsbach, A.B., Skriver, E., Jorgensen, P.L. (1988) Analysis of Na,K-ATPase by electron microscopy. Methods Enzymol. 156,430-441.

230. Mayrand, R.R., Fullerton, D.S., Ahmed, K. (1982) A simple method for the purification of rat brain Na,K-adenosine triphosphatase (ATPase). J. Pharmacol. Method 7, 279-288

231. McDonough, A.A., Farley, R.A. (1993) Regulation of Na,K-ATPase activity. Curr. Opinion Nephrology & Hypertension 2, 725-734.

232. McDonough, A.A., Geering, K., Farley, R.A. (1990) The sodium pump needs its B-subunit. FASEB. J. 4, 1598-1605.

233. Mercer, R.W. (1993) The structure of Na,K-ATPase. Int. Rev. Cytol. 137C, 139-168.

234. Middleton, J.P. (1996) Direct regulation of the Na,K-pump by signal transduction mechanisms. Miner. Electrolyte Metab. 22,293-302.

235. Miller, R.P., Farley, R.A. (1990) Beta-subunit of (Na + K)-ATPase contains three disulfide bonds. Biochemistry 29, 1524-1532.

236. Mimura, K., Matsui, H., Takagi, T., Hayasi, Y. (1993) Change in oligomeric structure of solubilized Na,K-ATPase induced by octaethylene glycol dodecyl ether, phosphatidylserine and ATP. Biochim. Biophys. Acta 1145, 63-74.

237. Moller, J., Juul, D., le Maire, M. (1996) Structural organization, ion transport and energy transduction of P-type ATPases. Biochim. Biophys. Acta 1286, 151.

238. Moore, E.D., Etter, E.F., Philipson, K.D., Carrington, W. A., Fogarty, K.E., Lifshitz, L.M., Fay, F.S. (1993) Coupling of the Na/Ca+ exchanger, Na/K pump and sarcoplasmic reticulum in smooth muscle. Nature 365,657-660.

239. Morales, V.L.G., de Meis, L. (1983) ATP-synthesis by Na,K-ATPase in the absence of ion gradient. FEBS Lett. 222, 163-166.

240. Morohashi, M., Kawamura, M. (1984) Solubilization and purification of Artemia salina (Na, K)-activated ATPase and NH2 -terminal amino acid sequence of its larger subunit. J. Biol. Chem. 259, 14928-14934.

241. Munzer, J.S., Daly, S.E., Jewell-Morz, E.A., Lingrel, J.B., Blostein, R. (1994) Tissue and isoform-specific kinetic behavior of the Na,K-ATPase. J. Biol. Chem. 269, 16668-16676.

242. Nakao, T., Nakao, M., Nagai, F., Kawai, K., Fujihira, Y., Hara,Y., Fujita, M. (1973) Purification and some properties of Na,K-transport ATPase. II

243. Preparation with high specific activity obtained using aminoethyl cellulose chromatography. J. Biochem. 73, 781-791.

244. Nelson, W.J., Veshnock, P. (1987) Ankyrin binding to (Na+K)-ATPase and implications for the organization of membrane domains in polarized cells. Nature 328, 533-537.

245. Neufeld, A.H., Levy, H.M. (1969) A second ouabain-sensitive Na-ATPase in brain microsomes. J. Biol. Chem. 244, 6493-6497.

246. Norby, J.G. (1983) Ligand interactions with the substrate site of Na,K-ATPase: nucleotides, vanadate and phosphorylation. Curr. Top. Membr. Trans. 19, 281-314.

247. Norby, J.G., Jensen, J. (1989) A model for the stepwise radiation inactivation of the a2-dimer ofNa,K-ATPase. J. Biol. Chem. 264, 19548-19558.

248. Norby, J.G., Klodos, I., Christiansen, N.O. (1983) Kinetics of Na-ATPase activity by the Na,K-pump. Interaction of the phosphorylated intermediates with Na+, Tris+ andK+. J. Gen. Physiol. 82, 725-729.

249. O'Brian, C.A., Ward, N.E. (1989) ATP-sensitive binding of melittin to the catalytic domain of protein kinase C. Mol. Pharmacol. 36, 355-359.

250. Ohta, T., Nagano, K, Yoshida, M. (1986) The active site structure of Na/K-transporting ATPase: location of the 5-(p-fluorosulfonyl)benzoyladenosine binding site and soluble peptides released by trypsin. Proc. Natl. Acad. Sci USA 83, 2071-2075.

251. Ottolenghi, P. (1979) The relipidation of delipidated Na,K-ATPase. An analysis of complex formation with dioleoylphosphatidylethanolamine. Eur. J. Biochem. 99, 113-131.

252. Ottolenghi, P., Jensen, J. (1983) The K-induced apparent heterogeneity of high affinity nucleotide-binding sites in (Na+K)ATPase can only be due to the oligomeric structure of the enzyme. Biochim. Biophys. Acta 727, 89-100.

253. Ovchinnikov Y.A. (1987) Trends Biochem. Sci. 12, 434-438.

254. Ovchinnikov, Yu.A., Monastyrskaya, G.S., Broude, N.E., Allikmets, R.L., Ushkaryov, Yu.A., Melkov, A.M., Smirnov, Yu.V., Malyshev, I.V., Dulubova, I.E., Petrukhin, K.E., Gryshin, A.V., Sverdlov, V.E., Kiyatkin,

255. N.I., Kostina, M.B., Modyanov, N.N., Sverdlov, E.D. (1987a) The family of human Na+,K+-ATPase genes. FEBS Lett., 213, 73-80.

256. Ovchinnikov, Y.A, Dzhandzugazyan, K.N., Lutsenko, A.A., Mustayev, A.A., Modyanov, N.N. (1987b) Affinity modification of El-form of Na-K-ATPase revealed Asp-710 in the catalytic site. FEBS Lett., 217,111-116.

257. Ovchinnikov, Y.A., Arzamazova, N.M., Arystarkhova, E.A., Gevondyan, N.M., Aldanova, N.A., Modyanov, N.N. (1987c) Detailed structural analysis of exposed domains of membrane-bound Na,K-ATPase. FEBS Lett., 217, 269-274.

258. Palatini, P., Dabbeni-Sala, F., Pitotti, A., Bruni, A., Mandersloot, J.C. (1977) Activation of (Na+ + K+)-dependent ATPase by lipid vesicles of negative phospholipids. Biochim. Biophys. Acta 466, 1-9.

259. Patzelt-Wenczler, R., Schoner, W. (1975) Evidence for sulfhydryl group in the ATP-binding site of (Na+K)-activated ATPase. Eur. J. Biochem., 53, 301311.

260. Patzelt-Wenczler, R., Schoner, W. (1981) Evidence for two different reactive sulfhydryl groups in the ATP-binding sites of (Na+K)-ATPase. Eur. J. Biochem., 114, 79-87.

261. Pauls H., Serpersu, E.H., Kirch, U., and Schoner, W. (1986) Chromium(III) ATP inactivating Na,K-ATPase supports Na-Na and Rb-Rb exchange in inverted red blood cells but not Na,K-transport. Eur. J. Biochem. 157, 585595.

262. Pawson, T. (1995) Protein modules and signalling networks. Nature 373, 57579.

263. Pedemonte, C.H., Beauge, L. (1983) Inhibition of (Na+K)-ATPase by magnesium ions and inorganic phosphate and release of these ligands in the cycles of ATP hydrolysis. Biochim. Biophys. Acta 748, 245-253.

264. Pedemonte, C.H., Kaplan, J. (1990) Chemical modification as an approach to elucidation of sodium pump structure-function relation. Am. J. Physiol. 258, C11-C23.

265. Periyasama, S.M., Huang, W.H., Askari, A. (1983) Subunit associations of (Na+K+)-dependent adenosine triphosphatase. Chemical cross-linking studies. J. Biol. Chem. 258, 9878-9885.

266. Peterson, G.L., Hokin, L.E. (1988) Preparation of Na,K-ATPase from brine shrimp. Methods Enzymol., 156, 48-65.

267. Petsch, M., Burner, C., Tschopp, J. (1993) Sequence similarity of phospholipase A2 activating protein and the G protein p-subunits: a new concept of effector protein activation in signal transduction? TIBS, 18, 292293.

268. Plesner, L., Plesner, I. (1981) The steady-state kinetic mechanism of ATP hydrolysis by membrane-bound (Na+K)-ATPase from ox brain. Substrate identity. Biochim. Biophys. Acta 643,449-462.

269. Post, R.L., Sen, A.K., Rosenthal, A.S. (1965) A phosphorylated intermediate in adenosine triphosphate dependent sodium and potassium transport across kidney membranes. J. Biol. Chem. 240,1437-1445.

270. Post, R. L., Hegyvary, C., Kume, S. (1972) Activation by adenosine triphosphate in the phosphorylation kinetics of sodium and potassium ion transport adenosine triphosphatase. J. Biol. Chem. 247, 6530-6540.

271. Post, R.L., Kume, S., Tobin, T., Orcutt, B., Sen, A.K. (1969) Flexibility of an active center in sodium-plus-potassium adenosine triphosphatase. J. Gen. Physiol. 54, 306-326S.

272. Post, R.L., Toda, G., Rogers, F.N. (1975) Phosphorylation by inorganic phosphate of sodium plus potassium ion-transport adenosine triphosphatase. J. Biol. Chem. 250, 691-701.

273. Pressley, T.A. (1988) Ion concentration-dependent regulation of Na,K-pump abundance. J. Membr. Biol. 105, 187-195.

274. Price, E.M., Rice, D. A., Lingrel, J.B. (1989) Site-directed mutagenesis of a conserved, extracellular aspartic acid residue affects the oubain sensitivity of sheep Na,K-ATPase. J. Biol. Chem. 264, 21902-21906.

275. Price, E.M., Rice, D. A., Lingrel, J.B. (1990) Structure-function studies of Na,K-ATPase. Site-directed mutagenesis of the border residues from the Hl-H2-extracellular domain of the alpha-subunit. J. Biol. Chem. 265, 6638-6641.

276. Rabon, E., Im, W.-B., Sachs, G. (1988) Preparation of gastric H,K-ATPase. Methods Enzymol. 157, 649-654.

277. Rathbun, W., Bethlach, V. (1969) Estimation of enzymatically produced orthophosphate in the presence of cysteine and adenosine triphosphate. Analyt. Biochem. 28,436-442.

278. Raynor, R.J., Zheng, B., Kuo, J.F.(1991) Membrane interaction of amphiphilic polypeptides mastoparan, melittin, polymixin B, and cardiotoxin. J. Biol. Chem. 266, 2753-2758.

279. Rempeters, G., Schoner, W. (1981) Evidence for Mg2+-induced conformational change at the ATP-binding site of (Na+K)-ATPase demonstrated with a photoreactive ATP-analogue. Eur. J. Biochem. 121, 131137.

280. Renaud, R.J., Inman, E.M., Fambrough, D.M. (1991) Cytoplasmic and transmembrane deletions of Na,K-ATPase ß-subunits: effect on subunit assembly and intracellular transport. J. Biol. Chem., 266, 20491-29497.

281. Rephaeli, A., Richards, D., Karlish, S.D. (1986) Conformational transitions in fluorescein-labeled (Na,K)ATPase reconstituted into phospholipids vesicles. J. Biol. Chem. 261,6248-6254.

282. Repke, K. R. H., Schon, R. (1973) Flip-flop model ofNa,K-ATPase function. Acta Biol. Med. Germ. 31, K19-K30.

283. Richards, D.E., Ellory, J.C., Glynn, I.M. (1981) Radiation inactivation of (Na+K)-ATPase. F small target size for the K-occluding mechanism. Biochim. Biophys. Acta 648,284-286.

284. Rivas ,E., Lew, V., de Robertis, E. (1972) (3H)-Ouabain binding to a hydrophobic protein from electroplax membranes. Biochim. Biophys. Acta 290, 419-423.

285. Robinson, J.D. (1975) Functionally distinct classes of K+ sites on the Na,independent ATPase. Biochim. Biophys. Acta 384, 250-264.

286. Robinson, J.D. (1976) Substrate sites of the (Na++K+)-dependent ATPase. Biochim. Biophys. Acta 429, 1006-1019.

287. Robinson, J.D. (1977) Na+ sites of the Na,K-dependent ATPase. Biochim. Biophys. Acta 482,427-437.

288. Robinson, J.D. (1978) Inhibition of the (Na+K)-dependent ATPase by inorganic phosphate. Biochim. Biophys. Acta 509,419-428.

289. Robinson, J.D., Flashner, M.S. (1979) Cation and nucleotide interaction with the Na,K-ATPase. In: Na,K-ATPase. Structure and kinetics. Eds. Skou, J.C., Norby, J.G. Acad. Press, London, p. 275-285.

290. Rossi, B., Vuilleumier, P., Gashe, C., Balerna, M., Lazdunski, M, (1980) Affinity labeling of the digitalis receptor with p-nitrophenyltriazene-ouabain, a highly specific alkylating agent. J. Biol. Chem. 255, 9936-9941.

291. Rost, B., Sander, C. (1994) Combining evolutionary information and neural networks to predict protein secondary structure. Proteins, 19, 55-72.

292. Sachs, J.R. (1980) The order of addition of sodium and release of potassium at the inside of the sodium pump of the human red cell. J. Physiol. (London) 302, 219-240.

293. Sachs, J.R. (1981) Mechanistic implication of the potassium-potassium exchange carried out by the sodium-potassium pump. J. Physiol. (London) 316, 263-277.

294. Sachs, G., Munson, K., Balaji, V.N., Aures-Fisher, D., Hersey, S.J., Hall., K. (1989) Functional domains of the gastric H,K-ATPase. J. Bioenerg. Biomembr. 21, 573-588.

295. Sahto, T., Cohen, H., Katz, A.I. (1992) Intracellular signalling in the regulation of renal Na,K-ATPase. J. Clin. Invest., 89, 1496-1500.

296. Sarvazyan, N.A., Modynov, N. N., Askari, A. (1995) Intersubunit and intrasubunit contact regions of Na+/K+-ATPase revealed by controlled proteolysis and chemical cross-linking. J. Biol. Chem. 270,26528-26532.

297. Scheiner-Bobis, G., Schoner, W.(1985) Demonstration of Mg2+-induced conformational change by photoaffinity labeling of the high-affinity ATP-binding site of (Na+K)-ATPase with 8-azido-ATP. Eur. J. Biochem. 152, 739-746.

298. Scheiner-Bobis, G., Esmann, M., Schoner, W. (1989) Shift to the Na+ form of Na+/K+-transporting ATPase due to modification of the low-affinity ATP-binding site by Co(NH3)4ATP. Eur. J. Biochem. 183, 173-178.

299. Schmalzing, G, Gloor, S., Omay, H., Kroner, S., Appelhans, H., Schwarz, W. (1991) Up-regulation of sodium pump activity in Xenopus laevis oocytes byexpression of heterologous beta 1 subunits of the sodium pump. Biochem. J. 279, 329-336.

300. Schmalzing, G., Gloor, S. (1994) Na/K pump p-subunit. Structure and function. Cell Physiol. Biochem., 14, 96-114.

301. Schultheis, P.J., Lingrel, J.B. (1993) Substitution of transmembrane residues with hydrogen-bonding potential in alpha subunit of Na,K-ATPase reveals alterations in ouabain sensitivity. Biochemistry 32, 544-550.

302. Schuurmans-Stekhoven, F.M.A.H., Swarts, H.G.P., de Pont, J.H.H.M., Bonting, S.L. (1983) Properties of the Mg -induced low-affinity nucleotide binding site of (Na+K)-activated ATPase. Biochim. Biophys. Acta 732, 607619.

303. Schuurmans-Stekhoven, F.M.A.H., Swarts, H.G.P., Zhao, R.S., de Pont, J.H.H.M. (1986) Nucleotide specificity of the E2K-EiK transition in (Na+K)-ATPase as probed with tryptic inactivation and fragmentation. Biochim. Biophys. Acta 861, 259-266.

304. Shamraj, O.I., Lingrel, J.B. (1994) A putative fourth Na,K-ATPase alpha-subunit gene is expressed in testis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91, 1295212956.

305. Shull, G.E., Schwarts A., Lingrel J.B. (1985) Amino-acid sequence of the catalytic subunit of the (Na++K+)ATPase deduced from a complementary DNA. Nature, 316, 691-695.

306. Shull, G.E., Greeb, J., Lingrel, J.B. (1986) Molecular cloning of three distinct forms of the (Na+K)-ATPase a-subunit from rat brain Biochemistry 25, 8125-8132.

307. Silver, S,. Nucifora, G., Phang, L.T. (1993) Human Menkes X-chromosome disease and the staphylococcal cadmium-resistance ATPase: a remarkable similarity in protein sequences. Mol. Microbiol. 10, 7-12.

308. Simons, T.J.B. (1974) Potassium: potassium exchange catalyzed by the sodium pump in human red cells. J. Physiol. (London) 244, 731-739.

309. Simons, T.J.B. (1975) The interaction of ATP analogues possessing a blocked y-phosphate group with the sodium pump in human red cells. J. Physiol., (London) 244, 731-739.

310. Skou, J. C (1957) The influence of some cations on an adenosine triphosphatase from periferal nerves. Biochim. Biophys Acta 23, 394-401.

311. Skou, J.C. (1960) Further investigations on a Mg+Na-activated adenosine triphosphatase, possibly related to the active, linked transport of Na+ and K+ across the nerve membrane. Biochim. Biophys Acta 42, 6-23.

312. Skou, J.C. (1974) Effect of ATP on the intermediary steps of the reaction of the (Na plus K)-dependent enzyme system. II. Effect of a variation in the ATP-Mg2+ ratio. Biochim. Biophys Acta 339, 246-257.

313. Skou, J.C. (1982) The effect of pH, of ATP and modification with pyridoxal phosphate on the conformational transition between the Na+-form and the K+-form of the (Na+K)-ATPase. Biochim. Biophys. Acta 688, 369-380.

314. Skou, J.C. (1992) The Na-K pump. News in Physiol. Sci. 7, 95-100.

315. Skou, E.C., Esmann, M. (1979) Preparation of membrane-bound and of solubilized (Na+K)-ATPase from rectal glands of Squalus acanthias. The effect of preparative procedures on purity, specific and molar activity. Biochim. Biophys. Acta 567, 436-444.

316. Skou, E.C., Esmann, M. (1983) The effects of Na and K on the conformational transitions of (Na+K)-ATPase. Biochim. Biophys. Acta 746, 101-113.

317. Skriver, E., Maunsbach, A.B., Jorgensen, P.L. (1981) Formation of two-dimensional crystals in pure membrane-bound Na, K-ATPase. FEBS Lett. 131,219-222.

318. Smith, P.A. (1984) Does the electrogenic Na/K pump play a role in the neuronal effects of catecholamines. NIPS, 422-425. (october).

319. Smith, R.L., Zinn, K., Cantley, L.C. (1980) A study of the vanadate-trapped state of the (Na,K)-ATPase. Evidence against interacting nucleotide site models. J. Biol. Chem. 255, 9852-9859.

320. Smith, D.L., Tao, T., Maguire, M.E. (1993) Membrane topology of a P-type ATPase. The Mgt B magnesium transport protein of Salmonella typhimurium. J. Biol. Chem. 268., 22469-22479.

321. Solioz, M., Odermatt, A., Krapf, R. (1994) Cupper pumping ATPases: common concept in bacteria and man. FEBS Lett. 346,44-47.

322. Stein, W.D., Lieb, W.R., Karlish, S.J.D., Eilam, Y. (1973) A model for the active transport of sodium and potassium as mediated by a tetrameric enzyme. Proc. Natl. Acad. Sci USA 70, 275-278.

323. Stewart, D.J., Semple, E.W., Swart, G.T., Sen, A.K. (1976) Induction of the catalytic protein of (Na+K)-ATPase in the salt gland of the duck. Biochim. Biophys. Acta 419, 150-163.

324. Stokes, D.L., Taylor, W.R., Green, N.M. (1994) Structure, transmembrane topology and helix packing of P-type ion pumps. FEBS Lett., 346, 32-38.

325. Sweadner, K. J. (1978) Purification from brain of an intrinsic membrane protein fraction enriched in (Na+ + K+)-ATPase. Biochim. Biophys. Acta 508, 486-499.

326. Sweadner, K. J. (1979) Two molecular forms of (Na+K)-stimulated ATPase in brain: separation and difference in affinity to strophantidin. J. Biol. Chem. 254, 6060-6067.

327. Sweadner, K. (1988) Preparation of a(+) isozyme of the Na,K-ATPase from mammalian axolemma. Methods Enzymol. 156,65-71.

328. Sweadner, K. (1989) Isozymes of the Na/K-ATPase. Biochim. Biophys. Acta 988, 185-220.

329. Tamkun, M.M., Fambrough, D.M. The (Na+K)-ATPase of chick sensory neurons. Studies on biosynthesis and intrcellular transport. (1986) J. Biol. Chem. 261,1009-1119.

330. Teipel, J., Koshland, D. E. Jr. (1969) The significance of intermediary plateau regions in enzyme saturation curves. Biochemistry 11,4656-4663.

331. Thomas, R.C. (1972) Electrogenic sodium pump in nerve and muscle cells. Physiol. Rev. 52, 563-594.

332. Tran, C.M., Huston, E.E., Farley, R.A. (1994) Photochemical labeling and inhibition of Na,K-ATPase by 2-Azido-ATP. Identification of an aminoacid located with the ATP binding site. J. Biol. Chem. 269, 6558-6565.

333. Treuheit, M.J., Costello, L.F., Kirley,T.L. (1993) Structure of the complex glycans found on the beta-subunit of (Na,K)-ATPase. J. Biol. Chem. 268, 13914-13919.

334. Turi, A., Somogyi, J. (1988) Possible regulation of the myometrial Na/K-ATPase activity by Ca and cAMP-dependent protein kinase. Biochim. Biophys. Acta 940, 77-84.

335. Vasiletz, L.A., Scwartz, W. (1992) Regulation of endogenous and expressed Na/K pumps in Xenopus oocytes by membrane potential and stimulation of protein kinases. J. Membr. Biol. 125,119-132.

336. Vasiletz, L.A., Schmalzing, G., Madefessel, K, Haase, W., Schwartz, W. (1990) Activation of protein kinase C by phorbol ester induces downregulation of the Na/K-ATPase in oocytes of Xenopus laevis. J. Membr. Biol. 118,131-142.

337. Vaskovsky, V.E., Kostetsky, E.Y., Vasendin, I.M. (1975) A universal reagent for phospholipid analysis. J. Chromatogr. 144. 129-141.

338. Vladimirova, N., Potapenko, N., Sachs, G., Modyanov, N. (1994) Determination of the sidedness of the carboxy-terminus of the Na/K-ATPase a-subunit using lactoperoxidase iodination. Biochim. Biophys. Acta 1233, 175-184.

339. Wallick, W.T, Schwartz, A. Interaction of cardiac glycosides with Na,K-ATPase. Methods Enzymol. 156, 201-213.

340. Ward, D.G., Cavieres, J. D. (1993) Solubilized ap Na,K-ATPase remains protomeric during turnover yet shows apparent negative cooperativity toward ATP. Proc. Natl. Sci. USA 90, 5332-5336.

341. Wess, I., Allen, A.V., Schwartz, H.A.(1955) Use of Fricke ferrous sulfate dosimeter for gamma-ray doses in the range 4 to40 Krad. Proc. 1st Internat. Conf. On the Peacefull Uses of atomic energy. Geneva, v. 14, p. 179.

342. Wheeler, K.P, and Whittam, R. (1970) The involvement of phosphatidylserine in adenosine triphosphatase activity of the sodium pump .J. Physiol (London) 207, 303-328.

343. Will, P.C., Longworth, J.W., Brake, E.T., Cook, J.S. (1977) Analysis of intracellular drug (ouabain) sequestration as a mechanism of detoxication. Mol. Pharmacol. 13, 161-171.

344. Wolitzky, B.A., Fambrough, D.M. (1986) Regulation of the (Na+K)-ATPase in cultured chick skeletal muscle. Modulation of expression by the demand for ion transport. J. Biol. Chem. 261, 9990-9999.

345. Wray, W., Boulikas, T., Wray, V.P., Hancock, R. (1981) Silver staining of proteins in polyacrylamide gels. Analyt. Biochem. 118, 197-203.

346. Xu, K-Y. (1989) Any of several lysines can react with 5-isothiocyanatofluorescein to inactivate sodium and potassium ion activated adenosine triphosphatase. Biochemistry 28, 5764-5772.

347. Yu., Y., Ischii, T., Pearson., W.R., Takeyasu, K. (1994) Primary structure of avian H+/K(+)-ATPase beta-subunit. Biochim. Biophys. Acta 1190,189-192.

348. Zolotarjova, N., Periyasama, S.M., Huang, W.H., Askari, A. (1995) Functional coupling of phosphorylation and nucleotide binding sites in the proteolytic fragments of Na/K-ATPase. J. Biol. Chem., 270, 3989-3995.

349. Я искренне благодарна уже ушедшему из жизни академику Сергею Евгеньевичу Северину, помощь и поддержку которого я ощущала на протяжении всех лет совместной работы.

350. Я очень признательна профессору Александру Александровичу Болдыреву, который на протяжении многих лет был моим научным руководителем, является соавтором многих моих публикаций и научным консультантом настоящей работы.

351. Я признательна профессору Амиру Аскари, профессору Питеру Джонсону и профессору Джону Купполетти, в лабораториях которых я работала в США.

352. Отдельное спасибо Наталье Владимировне Мает и Диляре Ахметалимовне Муртазиной за помощь в оформлении этой работы.

353. Я очень признательна профессорам Всеволоду Арсеньевичу Ткачуку, Николаю Борисовичу Гусеву и Дмитрию Ивановичу Левицкому, оказывавших мне моральную поддержку в трудные моменты.

354. Я благодарю всех членов моей семьи, которые терпеливо переносили все трудности и помогали мне на всех этапах создания этой работы.