Молекулярные механизмы иммуносупрессии Т-лимфоцитов, индуцируемые ганглиозидами разного строения тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Зеленова, Надежда Алексеевна

• Зеленова, Надежда Алексеевна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Зеленова, Надежда Алексеевна

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Введение

Биосинтез ганглиозидов

Ганглиозиды и онкология

Ганглиозиды в иммунологии 20 Влияние ганглиозидов на IL-2-зависимую пролиферацию

Строение IL-2R

Семейство цитокиновых рецепторов

IL-2 рецептор а-субъединица IL-2R fi-субъединица IL-2R у-субъединица IL-2R

Перенос сигнала через рецептор к IL-2 31 Методы, используемые для изучения конкурентного и смешанного ингибирования 35 Подходы к изучению взаимодействия цитокинов и их рецепторов с ганглиозидов

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ

Влияние ганглиозидов на IL-2-зависимую пролиферацию CTLL-2 59 Определение типа ингибирования пролиферации индивидуальными ганглиозидами 64 Изучение взаимодействия rIL-2 с ганглиозидами, встроенными в липосомы

Влияние ганглиозидов на пролиферацию клеток CT.4R 77 Изучение взаимодействия rIL-4 с ганглиозидами, встроенными в липосомы 83 Влияние ганглиозидов на экспрессию рецептора к IL

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярные механизмы иммуносупрессии Т-лимфоцитов, индуцируемые ганглиозидами разного строения»

Актуальность. В регулировании иммунного ответа организма основными передатчиками сигналов для иммунокомпетентных клеток служат интерлейкины (цитокины крови), имеющие на поверхности лимфоцитов специфические рецепторы. Все стороны функционирования интерлейкинов, в частности, их рецептирование и модуляция этого процесса, являются объектами интенсивного изучения иммунологами, однако здесь остается много неясного. В этом процессе принимают активное участие сиалированные гликосфинголипиды - ганглиозиды.

Ганглиозиды - универсальные составляющие мембран эукариотических клеток, которые участвуют в процессах клеточного узнавания, рецепции вирусов, в клеточной адгезии и контроле клеточного роста [59]. При злокачественной трансформации изменяется состав и локализация ганглиозидов, в результате чего происходит их активное сбрасывание с поверхности клеток [43]. Способность ганглиозидов, сбрасываемых в кровь, модулировать противоопухолевый иммунитет и вызывать иммуносупрессию является предметом изучения многих современных исследований. Показана способность ганглиозидов супрессировать цитотоксичность NK-клеток, тем самым ослабляя противоопухолевый иммунитет [47], подавлять пролиферацию Т-лимфоцитов [37]. Механизмы этих воздействий на клетки иммунной системы до сих пор не ясны. Один из механизмов подавления пролиферации лимфоцитов ганглиозидами связывают с их непосредственным взаимодействием с молекулой интерлейкина-2 (IL-2), хотя прямых доказательств такого взаимодействия в литературе пока нет. В то же время ингибирующий эффект некоторых ганглиозидов не удаётся отменить повышенными концентрациями интерлейкина [69], что свидетельствует о наличии и других молекулярных механизмов ингибирования.

Понимание механизма процесса иммуносупрессии должно привести к способам коррекции иммунной системы при наличии онкологического процесса.

Цель исследования: характеристика влияния ганглиозидов на взаимодействие интерлейкина 2 (IL-2) и интерлейкина 4 (IL-4) с их рецепторами на поверхности клеток и на функционирование Т-лимфоцитов.

Задачи исследования:

• Охарактеризовать влияние опухолеспецифичных ганглиозидов на цитотоксические лимфоциты (используя мышиные клеточные линии CTLL-2 и CT.4R).

• Определить типы ингибирования пролиферации лимфоцитов при их инкубации с индивидуальными ганглиозидами.

• Охарактеризовать взаимодействие ганглиозидов GM1 и GM3 с рецептором для IL-2 на поверхности лимфоцитов линии CTLL-2.

• С помощью флуоресцентно-меченых ганглиозидов определить аффинитет комплексов ганглиозидов с IL-2 и с IL-4.

Научная новизна

Ганглиозиды ингибируют пролиферацию клеток IL-2-зависимой цитотоксической мышиной Т-клеточной линии CTLL-2. Ингибирующая активность ганглиозидов убывает в ряду: GTlb > GDI а > GM1 > GM2 > GD3 > GM3. Разные по строению ганглиозиды различаются и по механизмам воздействия на пролиферацию клеток этой линии. Кинетический анализ выявил, что GTlb, GD3, GM2 и GM3 проявляют конкурентный тип ингибирования пролиферации, a GM1 и GDI а подавляют пролиферацию одновременно по конкурентному и неконкурентному типу.

На клетках полученной автором IL-4-отвечающей мышиной цитотоксической клеточной линии CT.4R показано наличие супрессии пролиферации клеток. Для индивидуальных ганглиозидов определен тип ингибирования пролиферации клеток этой линии

На модели искусственных липидных слоев (липосом), содержащих в своем составе флуоресцентно-меченые производные исследуемых ганглиозидов (AGM1 и AGM3) и лактозилцерамида, были определены константы диссоциации комплексов этих ганглиозидов с rIL-2 и с rIL-4. Величина Кd для комплекса rIL-2 с GM1 равна 0,38 мкМ, а с GM3 - 12 нМ. Величина К& для комплекса rIL-4 с этими ганглиозидами равна 0,28 мкМ и 5 нМ соответственно.

Инкубация ганглиозидов с клетками линии CTLL-2 приводит к значительному снижению доступности рецепторов к IL-2 для антител к рецептору. Маскирование рецепторов означает, что инкубация клеток с экзогенными ганглиозидами приводит к формированию комплекса состава ганглиозид/рецептор для IL-2.

Практическая ценность.

Полученные результаты позволяют расширить существующие представления о механизмах иммуносупрессии, вызываемой опухолью, что даёт возможность для разработки новых подходов к коррекции иммунной системы и противоопухолевой иммунотерапии. Полученные доказательства о наличии специфического взаимодействия между ганглиозидами и rIL-2 и rIL-4 дают подход для определения тех участков молекулы интерлейкина, которые непосредственно связываются с ганглиозидом. Зная структуру этих участков, мы получаем подход для синтеза соответствующих пептидов, обладающих иммунорегуляторными свойствами для использования в цитокинотерапии. Кроме того, такие синтетические пептиды можно использовать как основу для получения диагностикума, определяющего наличие онко-ассоциированных ганглиозидов в сыворотке пациентов.

Таким образом, результаты диссертации целесообразно использовать для создания систем диагностики и цитокинотерапии онкологических заболеваний.

Апробация работы

Диссертация апробирована на заседании научного коллоквиума отдела иммунологии ИБХ РАН 15 мая 2001 и рекомендована к защите. Материалы диссертации доложены: на X международном иммунологическом конгрессе (Нью-Дели, 1998), на 2-ом национальном конгрессе РААКИ "Современные проблемы аллергологии и клинической иммунофармакологии" (Москва, 1998), на международной иммунологической школе "Molecular mechanisms of development and disease", организованной FEBS (Спицаи, 2000).

Структура и объем работы

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов и библиографического указателя. Работа изложена на 118 страницах машинописного текста, включая 3 таблицы и 15 рисунков. Список литературы содержит 108 работ отечественных и иностранных авторов.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Зеленова, Надежда Алексеевна

выводы

1. Опухолеспецифические ганглиозиды способны подавлять пролиферацию цитотоксических лимфоцитов (показано при использовании мышиных клеточных линий CTLL-2 и CT.4R).

2. Определены ганглиозиды (GTlb, GD3, GM2 и GM3), ингибирующие пролиферацию лимфоцитов за счёт перехвата интерлейкина 2 и интерлейкина 4 (конкурентный тип ингибирования).

3. Ганглиозиды GM1 и GDI а ингибируют пролиферацию лимфоцитов как за счёт взаимодействия с IL-2 (IL-4), так и неконкурентным способом.

4. Показано, что ганглиозиды могут взаимодействовать с рецептором для IL-2, формируя комплекс. Такое взаимодействие является одним из основных механизмов неконкурентного ингибирования пролиферации.

5. С использованием флуоресцентных зондов - антрилвинилмеченых ганглиозидов, доказана высокая специфичность взаимодействия молекул цитокинов с ганглиозидами и определены константы связывания комплексов, образованных ганглиозидами (GM1 и GM3) и IL-2/4: величина К& комплекса rIL-2 с GM1 равна 0,38 мкМ, а с GM3 - 12 нМ, величина К& комплекса rIL-4 с этими ганглиозидами равна 0,28 мкМ и 5 нМ соответственно.

6. Лактозилцерамид (LacCer) лишен сиалильной группировки; этот гликолипид не оказывает влияния на пролиферацию клеток мышиных цитотоксических линий CTLL-2 и CT.4R.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Зеленова, Надежда Алексеевна, 2001 год

1. Schengrund С. The role(s) of gangliosides in neural differentiation and repair: a perspective. // Brain Research Bulletin. 1990. V. 24. P. 131-141.

2. Bergelson L.D., Bukrinskaya A.G., Prokazova N.V., Shaposhnikova G.I., Kocharov S.L., Shevchenko V.P., Kornilaeva G.V., Fomina-Ageeva E.V. Role of gangliosides in reception of influenza virus. // Eur. J. Biochem. 1982. V. 128. P. 467-474.

3. Hidari KIPJ., Ichikawa S., Fujita Т., Sakiyama H., Hirabayashi Y. Complete removal of sphigolipids from the plasma membrane disrupts cell to substratum adhesion of mouse melanoma cells. // J. Biol. Chem. 1996. V. 271. N. 24. P. 1463614641.

4. Kotani ML, Kawashima I., Ozawa H., Ogura K., Ishizuka I., Terashima Т., Tai T. Immunohistochemical localization of minor gangliosides in the rat central nervous system. // Glycobiology. 1994. V. 4. N. 6. P. 855-865.

5. Sharom F.J, Grant C.W. A model for ganglioside behaviour in cell membranes. // Biochim. Biophys. Acta. 1978. V. 507. P. 280-293.

6. Sonnino S, Chigorno V. Ganglioside molecular species containing С18- and C20-sphingosine in mammalian nervous tissues and neuronal cell cultures. // Biochim. Biophys. Acta. 2000. V. 1469. N. 2. P. 63-77.

7. Дятловицкая Э.В. Зависимость биоэффекторных свойств сфинголипидов от строения их гидрофобного фрагмента. // Биохимия. 1998. Т. 63. № 1. С. 6774.

8. Frontczak-Baniewicz M., Gadamski R., Barskov I., Gajkowska B. Beneficial effects of GM1 ganglioside on photochemically-induced microvascular injury in cerebral cortex and hypophysis in rat. // Exp. Toxicol. Pathol. 2000 V. 52. N. 2. P. 111-118.

9. Yang L.J., Zeller C.B., Shaper N.L., Kiso M., Hasegawa A., Shapiro R.E., Schnaar R.L. Gangliosides are neuronal ligands for myelin-associated glycoprotein. // Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1996. V. 93. P. 814-818.

10. Ferrari G., Minozzi M.C., Zanellato A.M., Silvestrini B. GM1, like IGF-I and GDNF, prevents neuronal apoptosis. II Ann. N YAcad. Sci. 1998. V. 845. P. 408.

11. Ryu B.R., Choi D.W., Hartley D.M., Costa E., Jou I., Gwag B.J. Attenuation of cortical neuronal apoptosis by gangliosides. //J. Pharmacol. Exp. Ther. 1999. V. 290. N. 2. P. 811-816.

12. Karpiak S.E., Mahadik S.P. Reduction of cerebral edema with GM1 ganglioside. II J. ofNeurosc. Res. 1984. V. 12. P. 485-492.

13. Zeng G., Ariga Т., Gu X.-B., Yu R.K. Regulation of glycolipid synthesis in HL-60 cells by antisense oligodeoxynucleotides to glycosyltransferase sequenses:effect on cellular differentiation. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. V.92. P. 8670-8674.

14. Schaade L., Thomssen R., Ritter K. Differentiation in murine mastocytoma induced by macrophage gangliosides. // Z Naturforsch. 2000 V. 55. N. 11-12 P. 1004-1010.

15. Nojiri H., Manya H., Isono H., Yamana H., Nojima S. Induction of terminal differentiation and apoptosis in human colonic carcinoma cells by brefeldin A, a drug affecting ganglioside biosynthesis. // FEBS Lett. 1999 V. 453 N. 1-2 P. 140144.

16. Zheng M., Fang H., Tsuruoka Т., Tsuji T. Regulatore role of GM3 ganglioside in alpha 5 beta 1 itegrin receptor for fibronectin-mediated adhesion of FUA169 cells. // J. Biol. Chem. 1993. V. 286. N 3. P. 2217-2222.

17. Holmgren J. Receptors for cholera toxin and Esherichia coli heat-labile enterotoxin revisited. II Prog. Brain. Res. 1994. V. 101. P. 163-177.

18. Varki A. Sialic acids as ligands in recognition phenomena. // FASEB J. 1997. V. 11. P. 248-255.

19. Coste H., Martel M.B., Got R. Topology of glucosylceramide synthesis in Golgi membranes from porcine submaxillary glands. // Biochim. Biophys. Acta. 1986. V. 858. N. l.P. 6-12.

20. Schwarzmann G., Sandhoff K. Metabolism and intracellular transport of glycosphingolipids. II Biochemistry. 1990. V. 29. P. 10865-10871.

21. Sommers L.W., Hirschberg С.В. Transport of sugar nucleotides into rat liver Golgi. A new Golgi marker activity. // J. Biol. Chem. 1982. V. 257. N. 18. P. 10811-10817.

22. Schwarzmann G., Hinrichs U., Sonderfeld S. Gangliosides and modulation of neuronal functions. II NATO ASISeries. 1987. V. 7. N. 49. P. 217-229.

23. Steinman R.M., Mellman I.S., Muller W.A., Cohn Z.A. Endocytosis and the recycling of plasma membrane. II J. Cell. Biol. 1983. V. 96. N. 1. P. 1-27.

24. Brindley D.N., Abousalham A., Kikuchi Y., Wang C.N., Waggoner D.W. "Cross talk" between the bioactive glycerolipids and sphingolipids in signal transduction. // Biochem Cell Biol. 1996. V. 74. N. 4. P. 69 476.

25. Lambeth J., Sung HO Ryu. Glycerolipids in signal transduction. // In book:

26. Biochemistry of lipids, lipoproteins and membranes. Eds: Vance D.E., Vance J.E. Elsevier Sci. 1996. P. 237-254.

27. Дятловицкая Э.В., Бергельсон Л.Д. Гликосфинголипиды как опухолеспецифические иммуномодуляторы. // Успехи Современной Биологии. 1986. Т. 1 №.4. С. 51-64.

28. Рылова С.Н., Сомова О.Г., Дятловицкая Э.В. Сравнительное исследование состава сфингоидных оснований и жирных кислот в церамидах и сфингомиелинах злокачественных опухолей и нормальной ткани яичника человека. //Биохимия. 1998. Т. 63. № 9. С. 1238-1242.

29. Lu P., Sharom F. Gangliosides are potent immunosuppressors of IL-2-mediated T-cell proliferation in a low protein enviroment. // Immunology. 1995. V. 86. N. 3. P. 356-363.

30. Ladisch S., Kitada S., Hays E.F. Gangliosides shed by tumour cells enhance tumour formation in mice. II J. Clin. Invest. 1987. V. 79. N. 6. P. 1879-1882.

31. Rebbaa A., Bremer E.G., Portoukalian J. Shedding of gangliosides by tumor cells. // Trends Glicosci. Glicotechn. 1995. V. 7. N. 35. P. 223-234.

32. Hamilton W.B., Helling F., Lloyd K.O., Livingston P.O. Ganglioside expression on human malignant melanoma assessed by quantitative immune thin-layer chromatography. IIInt. J. Cancer. 1993. V. 53 N. 4. P. 556-573.

33. Hakomori S. Cancer-associated glycosphingolipid antigens: their structure, organization, and function. II Acta Anat. 1998. V. 161. N. 1-4. P. 79-90.

34. Ortaldo J.R., Mason A.T., Longo D.L., Beckwith M., Creekmore S.P., McVicar D.W. T cell activation via the disialoganglioside GD3: analysis of signal transduction. II J. Leukoc. Biol. 1996. V. 60. N. 4. P. 533-539.

35. Kramer K, Gerald WL, Kushner BH, Larson SM, Hameed M, Cheung NK. Disialoganglioside G(D2) loss following monoclonal antibody therapy is rare in neuroblastoma. // Clin. Cancer Res. 1998. V. 4. N. 9. P. 2135-2139.

36. Li R., Gage D., McKallip R., Ladisch S. Structural characterisation and in vivo immunosuppressive activity of neuroblastoma GD2. // Glycoconj. J., 1996. V. 13. N 3. P. 385-389.

37. Heitger A., Ladisch S. Gangliosides block antigen presentation by human monocytes. // Biochim. Biophys. Acta. 1996. V. 1303. N. 2. P. 161-168.

38. Grayson G., Ladisch S. Immunosuppression by human gangliosides. II. Carbohidrate structure and inhibition of human NK activity. // Cell Immunology. 1992. V. 139. N. l.P. 18-29.

39. Sharom F.J., Chu A.L.H., Ross Т.Е. Gangliosides and glycophorin inhibit T-lymphocyte activation. // Biochem. Cell. Biol. 1990. V. 68. P. 735-744.

40. Irani D.N., Lin K.I., Griffin D.E. Brain-derived gangliosides regulate the cytokine production and proliferation of activated T cells. // J. Immunol. 1996. V. 157. N. 10. P. 4333-4340.

41. Ragupathi G. Carbohydrate antigens as targets for active specific immunotherapy. // Cancer Immunol. Immunother. 1996. V. 43. N. 3. P. 152-157.

42. Robb R. J. The suppressive effect of gangliosides upon IL-2-dependent proliferation as a function of IL-2-receptor association. II J. Immunol. 1986. V. 136. P. 971-976.

43. Morrison W.J., Young K., Offner H., Vandenbark A.A. Ganglioside (GM1) distinguishes the effects of CD4 on signal transduction through the TCR/CD3 complex in human lymphocytes. // Cell. Mol. Biol. Res. 1993. V. 39. N. 2. P. 159165.

44. Meuillet E., Cremel G., Hicks D., Dreyfus H. Ganglioside effects on basic fibroblast and epidermal growth factor receptors in retinal glial cells. // J. Lipid Medial Cell. Signal. 1996. V. 14. N. 1-3. P. 277-288.

45. Lloyd K.O., Furukawa K. Biosynthesis and functions of gangliosides: recent advances. // Glycoconjugate J. 1998. V. 15. N. 7. P. 627-636.

46. Swain S.L. Helper T cell differentiation. // Curr. Opin. Immunol. 1999. V. 11. N. 2. P.180-185.

47. Jackson K.M., Yates A.J., Orosz C.G., Whitacre C.C. Gangliosides suppress the proliferation of autoreactive cells in experimental allergic encephalomyelitis: ganglioside effects on IL-2 activity. // Cell. Immunol. 1987. V. 104. N. 1. P. 169181.

48. Zanetta J.P., Alonso C., Michalski J.C. Interleukin 2 is a lectin that associates its receptor with the T-cell receptor complex. // Biochem. J. 1996. V. 318. P. 49-53.

49. Белки иммунной системы. Учебное пособие под ред. В.Т.Иванова. Москва. Институт биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова 1997. Стр. 93-95.

50. Minami Y., Копо Т., Miyazaki Т., Taniguchi Т. The IL-2 receptor complex: its structure, function, and target genes. // Ann. Rev. Immunol. 1993. V. 11. P. 245268.

51. Nelson B.H., Willerford D.M. Biology of the interleukin-2 receptor. // Adv. Immunol. 1998. V.70. P. 1-81

52. Waldmann T.A. The interleukin-2 receptor. // J. Biol. Chem. 1991. V. 266. N. 5. P. 2681-2684.

53. Bamborough P., Hedgecock C.J., Richards W.G. The interleukin-2 and interleukin-4 receptors studied by molecular modelling. // Structure. 1994. V. 2. N. 9. P. 839-851.

54. O'Flaherty E., Wong W.K., Pettit S.J., Seymour K., Ali S., Kirby J.A. Regulation of T-cell apoptosis: a mixed lymphocyte reaction model. // Immunology. 2000. V. 100. N. 3. P. 289-299.

55. Chu J.W., Sharom F.J. Interleleukin-2 binds to gangliosides in micelles and lipidbilayers. // Biochim. Biophysic. Acta. 1990. Y. 1028. N. 3. P. 205-214.

56. Irani D.N., Lin K.I., Griffin D.E. Brain-derived gangliosides regulate the cytokine production and proliferation of activated T cells. // J. Immunol. 1996. V. 157. N. 10. P. 4333-4340.

57. Chu J.W., Sharom F.J. Gangliosides interact with interleukin-4 and inhibit interleukin-4-stimulated helper T-cell proliferation. // Immunology. 1995. V. 84. N. 3. P. 396-403.

58. Lengle E. E., Krishnaraj R., Kemp R.G. Inhibition of the lectin-induced mitogenic response of thymocytes by glycolipides. // Cancer Res. 1979. V. 39. N. 3. P. 817-822.

59. Krishnaraj R., Lin J., Kemp R.G. Lectin- and ionophore-stimulated Ca2+ -influx in murine lymphocytes: inhibition by disialogangliosides. // Cell. Immunol. 1983. V. 78. N. 1.Р. 152-160.

60. Rahmann H., Jonas U., Hildebrandt H. Gangliosides in thermal adaptation: towards a phisicochemical model of ganglioside function. // Trends Glycosc. Glycotechn. 1998. V. ION. 56. P.421-437.

61. Nahar Т.О., Williams N.A., Hirst T.R. Cross-linking of cell surface ganglioside GM1 induces the selective apoptosis of mature CD8+ T lymphocytes. // Int. Immunol. 1996. V. 8. N. 5. P. 731-736.

62. Kristal В., Brown A. Apoptogenic ganglioside GD3 directly induces the mitochondrial permeability transition. // J. Biol. Chem. 1999. V. 274. N. 33. P. 23169-23175.

63. De Maria R., Rippo M., Schuchman E., Testi R. Acidic sphingomyelinase (ASM) is necessary for Fas-induced GD3 ganglioside accumulation and efficient apoptosis of lympoid cells. II J. Exp. Med. 1998. V. 187. N.6. P. 897-902.

64. Bharti A.C., Singh S.M. Induction of apoptosis in bone marrow cells by gangliosides produced by a T cell lymphoma. // Immunol. Lett. 2000. V. 72. N. 1. P. 39-48.

65. Sandhoff K., Kolter Т., Van Echten-Deckert G. Sphingolipid metabolism. Sphingoid analogs, sphingolipid activator proteins, and the pathology of the cell. // Ann. NY Acad. Sci. 1998. V. 845. P. 139-151.

66. Hendrickson H.S. Fluorescence-based assays of lipases, phospholipases, and other lipolytic enzymes. II Anal Biochem. 1994. V. 219. N. 1. P. 1-8.

67. Lentz B.R. Use of fluorescent probes to monitor molecular order and motions within liposome bilayers. // Chem. Phys. Lipids. 1993. V. 64. P. 99-116.

68. Davenport L. Fluorescence probes for studying membrane heterogeneity. // Methods Enzymol. 1997. V. 278. P.487-512.

69. Молотковский Ю.Г. Флуоресцентные липидные зонды: свойства и применение. // Биоорг. Химия 1999. Т. 25. №. 11. С. 855-867.

70. Sonnino S., Chigorno V., Acquotti D., Pitto M., Kirschner G., Tettamanti G.

71. A photoreactive derivative of radiolabeled GM1 ganglioside: preparation and use to establish the involvement of specific proteins in GM1 uptake by human fibroblasts in culture. II Biochemistry. 1989. V. 28. N. 1. P.77-84.

72. Masserini M., Pitto ML, Ferraretto A., Brunne J., Palestini P. Glycolipid-protein interaction in the mechanism of signal transduction: studies with a photoactivable ganglioside analogue. 11 Acta Biochim. Pol 1998. V. 45. N. 2. P. 393-401.

73. Имбс А.Б., Молотковский Юл.Г., Бергельсон JI.Д. Синтез флуоресцентных гликосфинголипидов. // Биоорган. Химия. 1986. Т. 12. № 4. С. 527-532.

74. Polozov I.V., Molotkovsky J.G., Bergelson L.D. Anthrylvinyl-labeled phospholipids as membrane probes: the phosphatidylcholine-phosphatidylethanolamine system. // Chem. Phys. Lipids. 1994. V. 69. N. 3. P. 209-218.

75. Gillis S., Smith K.A. In vitro generation of tumor-specific cytotoxic lymphocytes. Secondary allogeneic mixed tumor lymphocyte culture of normal murine spleen cells. II J. Exp. Med. 1977. V. 146. N. 2. P. 468-82.

76. Hu-Li Jane, Ohara J., Watson C., Tsang W., Paul W.E. Derivation of T cell line that is higly resposive to IL-4 and IL-2 (CT.4r) and of an IL-2 hyporesposive mutant of that line. II J. Immunol. 1989. V. 142. N. 3. P. 800-807.

77. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular crowth and survival: application to proliferaton and cytotoxicity assays. // J. Immunol. Meth. 1983. V. 65. N. 1-2. P. 55-63.

78. Webb J.L. Enzyme and metabolic inhibitors. V.I.N.Y.: Acad. Press. 1963. P. 15-17.

79. Svirshchevskaya E.V., Sidorov I.A., Viskova N.Y., Dozmorov I.M. Quantitative analysis of interleukin-2-induced proliferation in the presence of inhibitors using a mathematical model. // J. Immunol Methods. 1993. V. 159. N. 12. P. 17-27.

80. Liposomes, a Practical Approach. Ed.R.R.C.New. N.Y.: Oxford University Press. 1990. P. 52-56.

81. Manevich E.M., Tonevitsky A.G., Bergelson L.D. The binding of the B-chain of ricin to Burkitt lymphoma cells. A new approach to ligand-receptor interaction studies. IIFEBSLetters. 1986. V. 194. N. 2. P. 313-316.

82. Михалёв И.И., Молотковский Юл.Г., Бергельсон Л.Д. // Биоорган. Химия. 1990. Т.16. С. 685-692.

83. Chu J.W.K., Sharom F.J. Effect of micellar and bilayer gangliosides on proliferation of Interleukin-2-dependent lymphocytes. // Cellular Immunology. 1991. V.132. P. 319-338.

84. Katagiri Y.U., Kiyokawa N., Fujimoto J. A role for lipid rafts in immune cell signaling. II Microbiol Immunol 2001. V. 45. N. 1. P. 1-8.

85. Masserini M., Pitto M., Ferraretto A., Brunne J., Palestini P. Glycolipid-protein interaction in the mechanism of signal transduction: studies with a photoactivable ganglioside analogue. I I Acta Biochim. Pol. 1998. V. 45. N. 2. P. 393-401.

86. Welti R., Glaser M. Lipid domains in model and biological membranes. // Chem. Phys. Lipids. 1994. V. 73. P. 121-137.

87. Offner H, Thieme T, Vandenbark AA. Gangliosides induce selective modulation of CD4 from helper T lymphocytes. // J Immunol 1987. V. 139. N. 10 P. 3295-3305.

88. Nakatsuji Y, Miller RH. Selective Cell-Cycle Arrest and Induction of Apoptosis in Proliferating Neural Cells by Ganglioside GM3. II Exp Neurol 2001. V. 168. N. 2. P. 290-299.