Молекулярно-генетическое исследование различных форм спинальной амиотрофии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат медицинских наук Шагина, Ирина Александровна

• Шагина, Ирина Александровна
• кандидат медицинских наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Шагина, Ирина Александровна

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Общая характеристика спинальных амиотрофий. IО

2. Картирование некоторых форм САМ.

3. Наиболее часто встречающаяся группа САМ - проксимальная спинальная амиотрофия I-1II типа.

3.1. Общая характеристика заболевания.

3.2. Картирование гена, ответственного за возникновение

CAM1-III.

3.3. Идентификация и характеристика гена, ответственного за возникновение САМ I—III.

3.4. Мутации и полиморфизмы в гене SMN.

3.5. Экспрессия гена SMN.

3.6. Гипотезы клинического полиморфизма САМ I—Ж11 и вклад генов, расположенных в САМ-области, в патогенез заболевания.

4. ДНК-диагностика САМ 1-Ш.

4.1. Методологические основы ДНК-диагностики

4.2. ДНК-диагностика САМ НИ. 35 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. 40 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

1. Изучение полиморфизма ДНК-маркеров D5S435, D5S557,

D5S629 в выборке жителей российского региона.

2. Анализ делеций в гене SMNt.

2.1. Разработка и оптимизация метода регистрации делеций

7-8 экзонов гена SMNt.

2.2. Анализ делеций 7-8 экзонов гена SMNt у пациентов с

САМ 1-Ш.

3. ДНК-диагностика САМ 1-Ш типа.

4. Исследование химерного гена SMN в выборке пациентов с

САМ 1-111.

5. Молекулярно-генетическое исследование локуса 5ql3 при редких и атипичных формах САМ.

5.1. Поиск делеций 7-8 экзонов гена SMNt у пациентов с редкими и атипичными формами САМ.

5.2. Исключение сцепления особого варианта аутосомно-рецессивной проксимальной САМ с локусом, ответственным за возникновение САМ 1-Ш.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-генетическое исследование различных форм спинальной амиотрофии»

Данная работа посвящена молекулярно-генетическому исследованию различных форм спинальной амиотрофии

Актуальность темы. Спинальные амиотрофии (САМ) • большая группа тяжелых наследственных заболеваний периферической нервной системы, характеризующихся выраженным клиническим полиморфизмом Основной механизм развития клинических признаков связан с прогрессирующей дегенерацией мотонейронов передних рогов спинного мозга, что выражается в атрофии различных групп мышц Описано существование аутосомно-доминантного, аутосомно-рецессивного и Х-сцепленного типов наследования отдельных клинических вариантов, а также наличие генетической гетерогенности в рамках одного фенотипа На сегодняшний день картирована меньшая часть генов САМ, и только для трех форм идентифицированы гены, повреждения в которых приводят к заболеванию В связи с этим одной из важных задач молекулярной генетики наследственных нервно-мышечных заболеваний является картирование и идентификация генов ответственных за возникновение других САМ Первый шаг для решения этой проблемы - анализ сцепления с локусами, известными для данной группы заболеваний, и поиск мутаций в генах, повреждения в которых приводят к сходной патологии

Наиболее распространенной и изученной группой САМ является проксимальная спинальная амиотрофия I, II III типа (САМ МП) Это одно из наиболее частых наследственных заболеваний с аутосомно-рецессивным типом наследования, с частотой встречаемости 1 на 6000-10000 новорожденных (Реагп 1973, 1980, Czeizel and Hamula, 1989) Ген, ответственный за возникновение САМ I-III, названный SMN (survival motor neuron gene), расположен в районе 5qI3 и представлен двумя высокогомологичными копиями (теломерной • SMNt и центромерной - SMNc). У 94-98% пациентов с различными типами САМ МП регистрируется полная делеция гена SMNt или его части (Lefebvre et al., 1995; Hahnen et al., 1995; Rodrigues et al., 1995; Velasco et al., 1996; Simard et al., 1997; Wirth et al., 1999). Тяжелое прогрессирующее течение заболевания, ранняя смерть пациентов и высокий повторный риск в семьях обусловливают актуальность проведения пренатальной ДНК-диагностики САМ I-III. Кроме того, наличие одной и той же мутации, обнаруживаемой у пациентов с различными типами САМ I-III, ставит вопрос о причинах клинического полиморфизма заболевания. Для решения данной проблемы необходимо изучение молекулярно-генетических механизмов возникновения заболевания, что в конечном итоге служит основой для его точной дифференциальной диагностики и создает предпосылки для поиска возможных путей генноинженерной коррекции.

Целью данной работы являлось исследование мутаций в гене SMNt и анализ сцепленных с ним полиморфных локусов в семьях пациентов с различными формами САМ.

При этом ставились следующие задачи:

• разработка оптимизированных методов прямой ДНК-диагностики САМ I-1II,

• поиск мутаций в гене SMNt у пациентов с САМ I-1II,

• анализ частот аллелей полиморфных маркеров, тесно сцепленных с локусом 5q 13, в выборках нормальных и поврежденных хромосом жителей российского региона, разработка оптимизированных методов косвенной ДНК-диагностики САМ I-III;

• анализ сцепления и поиск мутаций в гене SMNt у пациентов с редкими и атипичными формами САМ.

Научная новизна и практическая значимость работы.

Разработана и оптимизирована схема проведения ДНК-диагностики САМ I-III, включающая регистрацию делеции 7-8 экзонов гена SMNt, химерного гена SMNc/SMNt. Проведен анализ образцов ДНК 369 неродственных пациентов и членов их семей. Данные, полученные в результате работы, позволяют проводить пресимптоматичесфкЛ пренатальную ДНК-диагностику в обследованных семьях.

Впервые в российской популяции на большом клиническом материале проведена оценка частот аллелей полиморфных ДНК-маркеров, тесно сцепленных с локусом 5ql3. Определена частота мажорной мутации при различных типах САМ I-Ш. Показано отсутствие существенных различий полученных данных с аналогичными показателями в других популяциях.

При изучении семей со скапулоперонеальной САМ с ранним началом, проксимальной спинальной САМ с артрогрипозом обнаружена мутация, характерная для САМ I-III (делеция 7-8 экзонов гена SMNt), что свидетельствует об отсутствии нозологической самостоятельности данных форм САМ

Исключено сцепление особого варианта проксимальной аутосомно-рецессивной САМ, характеризующегося атипичным доброкачественным течением, с локусом, ответственным за возникновение САМ I-III

Положения, выносимые на защиту.

1 На основе разработанной методики проведения прямой ДНК-диагносжки САМ 1-Ш определена частота мажорной мутации у пациентов с САМ I-JII в российской популяции.

2. Определены частоты аллелей трех полиморфных ДНК-маркеров, тесно сцепленных с локусом 5ql3, ответственным за возникновение САМ 1-Ш, в российской популяции.

3 Исключено сцепление аугосомно-рецессивной САМ, характеризующейся атипичным доброкачественным течением, с локусом 5ql3, ответственным за возникновение САМ 1-III

4 Зарегистрирована делеция 7-8 экзонов гена SMNt у трех неродственных пациентов со скапулоперонеальной САМ с ранним началом в 5 из 6 пораженных хромосом, а также у двух пациентов с проксимальной САМ с артрогрипозом Полученные результаты свидетельствуют о вовлечении SMNt гена в патологический процесс, приводящий к возникновению данных форм САМ

5 На основе разработанной методики проведения ДНК-диагностики в 118 случаях проведена пренатальная ДНК-диагностика в обратившихся семьях полученное распределение генотипов плодов соответствует значениям для аутосомно-рецессивного типа наследования

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Шагина, Ирина Александровна

выводы.

1. Разработан простой метод, позволяющий надежно регистрировать делеции 78 экзонов гена SMNt как в гомо- так и в гетерозиготном состоянии В результате анализа образцов ДНК 369 неродственных пациентов с САМ 1-Ш делеции 8 и/или 7 экзонов гена SMNt в гомозиготном состоянии обнаружены у 96,2 % пациентов (99,96 и 90 % для I, II и III типов соответственно)

2. Разработан метод регистрации химерного гена SMNc/SMNt У 44 пациентов с диагнозом САМ МП зарегистрировано наличие химерного гена SMNc/SMNt Наблюдается ассоциация между наличием химерного гена и более мягким течением заболевания у пациентов с САМ 1-Ш

3. В результате анализа генотипов 386 неродственных хромосом определены частоты аллелей для полиморфных ДНК-маркеров D5S435, D5S557, D5S629, сцепленных с локусом 5ql3, в выборке жителей Российского региона Показано, что для всех исследованных маркеров частоты аллелей в изученной популяции близки к таковым в европейских популяциях При анализе 386 поврежденных хромосом неравновесия по сцеплению патологического гена SMNt с каким-либо аллелем или гаплотипом исследованных маркеров не выявлено

4. На основе разработанной процедуры ДНК-диагностики САМ МП в 118 случаях проведена пренатальная ДНК-диагностика в обратившихся семьях Полученное распределение генотипов плодов согласуется с аутосомно-рецессивным типом наследования

5. Анализ делений 7-8 экзонов гена SMNt у трех неродственных пациентов со скапуло-перонеальной САМ с ранним началом показал наличие данной мутации в 5 из 6 исследованных хромосом Делеция 7-8 экзонов гена SMNt зарегистрирована у двух пациентов с проксимальной САМ с артрогрипозом Таким образом, можно полагать, что мутации в гене SMNt играют решающую роль в этиологии более широкого класса САМ, чем предполагалось ранее

6. Исключено сцепление заболевания с локусом 5ql3, ответственным за возникновение САМ I-III, в семье с особым вариантом аутосомно-рецессивной проксимальной САМ, характеризующимся доброкачественным течением

Заключение.

Исследование мутаций в гене SMNt, а также изучение полиморфных ДНК-маркеров, тесно сцепленных с локусом заболевания, позволяет наиболее эффективно проводить ДНК-диагностику одного из самых тяжелых и частых наследственных нервно-мышечных заболеваний - проксимальной спинальной амиотрофии 1, II, III типа (САМ 1-III) Кроме того, большое значение имеет выявление причин клинической вариабельности данного заболевания, что создает предпосылки для поиска возможных путей его генетической коррекции В данной работе проведен анализ делеций 7-8 экзонов гена SMNt (мажорной мутации при САМ 1-Ш) и анализ частот аллелей полиморфных ДНК-маркеров, сцепленных с локусом 5q 13, ответственным за возникновение САМ 1-Ш, в российской выборке больных с диагнозом САМ I-UI Разработана и внедрена оптимизированная схема ДНК-диагностики САМ 1-Ш, позволяющая эффективно проводить дородовую, пресимптоматическую диагностику заболевания В результате исследования установлено, что в развитии атипичной проксимальной САМ с артрогрипозом и скапулоперонеальной САМ с ранним началом принимает участие ген SMNt На основе данных, полученных в ходе работы, исключено сцепление особого варианта аутосомно-рецессивной проксимальной САМ, характеризующегося доброкачественным течением, с локусом 5ql3 В группе больных с САМ I-III, имеющих делецию 7 экзона гена SMNt в гомозиготном состоянии при наличии 8 экзона данного гена, проведен поиск химерного гена SMNc/SMNt с помощью разработанного нами метода В результате исследования химерный ген зарегистрирован у 44 пациентов с САМ I-III, что составляет 75% пациентов данной выборки

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Шагина, Ирина Александровна, 2002 год

1. Дадали Е.Л., Мальмберг С.А., Шагина И.А., Ситников В.Ф., Евграфов. Диагностика н профилактика проксимальных спинальных амиотрофий. // Неврологический журнал.-1997-.№ 4.-C.14-I8.

2. Лакин Г.Ф. Биометрия. // Высшая школа М-1980.

3. Урбах В.Ю. Биометрические методы. // Наука.-М-1964.

4. Battaglia G., Princivalle A., Forti F., Lizier С., Zeviani M. Expression of the SMN gene, the spinal muscular atrophy determining gene, in the mammalian central nervous system. // Hum.Mol.Genet.-1997-v.6.-p. 1961 -1971.

5. Botstein D., White R.L., Skolnick M„ Davis R.W. Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphism. // Am.J.Genet.-l980-v.32.-p.314-33l.

6. Brahe C., Clermont O., Zappata S et al. Frameshift mutation in the survival motor neurone gene in a severe case of SMN type 1. II Hum. Mol.genet.- 1996.-V.5 .-p. 19711976.

7. Brook, M. A. Clinicians View of Neuromuscular Diseases.// Baltimore: Williams and Williams. 1986.

8. Buhler D., Raker V., Luhrmann R., Fischer U. Essential role for the tudir domain of SMN in splkeosomal U snRNP assembly: implications for spinal muscular atrophy. //

9. Hum.Mol.Genet.-1999-v.8.-p.2351-2357.

10. Burghes A.H.M. When is a deletion not a deletion? When it is converted.// AmJ.Hum.Genet.-1997-V.61 .-p.9-15.

11. Burglen, L., Lefebvre, S., Clermont, 0., Burlet, P, Viollet, L, Cruaud, С, Munnich, A., and Melki, J. Structure and organization of the human survival motor neuron (SMN) gene. // Genomics -1996a -v.32-p.479-482

12. Bussaglia В., Clermont 0., Tizzano E. et al A frame-shift deletion in the survival motor neuron gene in Spanish spinal muscular atrophy patients. // Nature genet.-1995.- v. 11 .-p.335-337.

13. Campbell L., Potter A., Ignatius J., Dubowitz V., Davies K. Genomics variation and gene conversion in spinal muscular atrophy: implications for disease process and clinical phenotypes. // Am.J.Hum.Genet.-l997-v,61.-p.40-50.

14. Clermont O., Burlet P., Buylen L. et al. Use locate the SMA locus between two new hightly polimorphic DNA marcers. // Amer. J.med. genet.-1994.-v.54,- p.687-694.

15. Cobben J.M., van der Steege G., Grootscholten P.M., Visser de M., Scheffer H„ Buys C.H.C.M. Deletions of the survival motor neuron gene in unaffected siblings of patients with spinal muscular atrophy. // Am.J.Hum.Genet.-1995-v.57.-p.805-808.

16. Cobben J.M.,Van der Steege G. Grootsholten P. Et al. Deletion of the survival motor neuron (SMN) gene in unaffected siblings of patients with spinal muscular atrophy (SMA).//AmerJ. Hum. Genet.-l995.-v.57.-p.805-808.

17. Collins F.S. Positional cloning moves from perditional to traditional. // Nat.Genet.-1995-v.9.-p.347-50.

18. Cooper D.N., Schmidtke J., Diagnosis of genetic disease using recombinant DNA. // Hum.Genet.-1986-V.71 .-p. 1-11.1. Bo

19. Coovert D.D., Le T.T., McAndrew P.E., Strasswimmer J., Crawford Т.О., Mendell J.R., Coulson S.E., Androphy E.J. , Prior T.W., Burghes A.H. The survival motor neuron protein in spinal muscular atrophy.// Hum.Mol.Genet.-l997-v.6.-p. 1205-1214.

20. De Long R., Siddique T. A large New England kindred with autosomal dominant neurogenic scapuloperoneal amyotrophy with unique features. // Arch. Neurol. 1992.-v.49.-p.905-908.

21. Devriendt K., Lammens M., Schollen E., Van Hole C., Dom R., Devlieger H., Cassiman J.J., Fryns J.P., Matthijs G. Clinical and molecular genetic features of congenital spinal muscular atrophy. //Ann.Neurol.-1996-v.40.-p.731-738.

22. Dubowitz V. Chaos in classification of the spinal muscular atrophies of childhood. //

23. Neuromuscular disor.-1991 .-v. 1 .-p.77-80.

24. Dubowitz, V. Muscle Disorders in Childhood. // 1978-Philadelphia: W.B. Saunders).

25. Emery A. E.H. The nosology of spinal muscular atrophies. // J. Med. Genet. 1971.- v. 8.-p.481-495.

26. Emery A. E.H., Fenichel G.M., Eng G. A spinal muscular atrophy with scapuloperoneal distribution. // Arch. Neurol.- 1968.-V. 18.-p. 129-133.

27. Feigenbaum J.,Munsat T.L. A nevromuscular syndrome of 9capuloperooeal distribution. // Bull Los Ang. Neurol. Soc. -I970.-V.35.-47-57.

28. Finkel N. A Forma pseudomiopatica tardia da atrofia muscular progressiva heredofamilial. // Arqu.neuropaiquiatr. -1962.-v.20.-p.307-322.

29. Fischer U., Liu Q., Dreyfuss G. The SMN-SIP1 complex has an essential role in spliceosomal snRNP biogenesis. // Cell.-1997-v.90.-p. 1023-1029.

30. Gilliam T.C., Brzustowicz L.M.,Castella L.H. et al. Genetic homogeneity between acute and chronic forms of spinal muscular atrophy. // Nature .-l990.-v.345.-p.823-825.

31. Hahnen E , Schonling J., Rundik-Schoneborn S., Raschke H , Zerres K. Wirth В Missense mutations in exon 6 of the survival motor neuron gene in patients with spinal muscular atrophy (SMA). // Hum Mol.Genet -1997-v 6 -p.821-825

32. Hahnen E., Wirth B. Frequent DNA variant in exon 2a of the survival motor neuron gene (SMN): a further possibility for distinguishing the two copies of the gene. // Hum.Genet.- l996-v.98.-p. 122-123.

33. Harding A.E. In Dyck P.J., Thomas P.K. (eds), Peripheral Neuropathy. // W В Saunders & Co., Harcourt Brace Jovanivich, Inc., Pennsylvania- 1993-v 2-p 1051-1064

34. Jeffreys A.J., Royle N.J., Wilson V., Wong Z. Spontaneous mutation rates tonew length alleles at tandem-repetitive hypervariable loci in human DNA. // Nature.-1988-v.332.-p.278-281.

35. Jones K.W., Gorzynski K., Hales C.M., Fischer U., Badbanchi F., Terns R.M., Terns M.P. Direct interaction of the spinal muscular atrophy disease protein SMN with the small nucleolar RNA-associated protein fibrillar in. // J.Bioi.Chem.-200l -in print.

36. Kaeser H.E. Die familiare scapuloperoneale muskelatrophie. // Dt. Z. nervenheilk.-1964.-V. 186.-p.379-394.

37. Kennedy W.R., Alter M., Sung J.H. Progressive prodimal spinal and bulbar muscular atrophy of late onset: a seo -linked recessive trait.//Neurology.-1968.-v.l8.-p.677-680.

38. Kerr D.A., Nery J.P., Traystman R.J., Chau B.N., Hardwick J.M. Survival motor neuron protein modulates neuron-specific apoptosis. // Proc.Natl.Acad.Sci.USA-2000-v.97.-p. 13312-13317.

39. Korinthenberg R., Sauer M., Ketelsen U P., Haneman C O., Stoll G., Graf M., Baborie A., Volk V., Wirth В., Rudnik-Schoneborn S., Zerres K. Congenital axonal neurophathy caused by deletions in the SMA region. // Ann.Neurol.-1997-v.42.-p.364-368.

40. Lefebvre S., Burglen L., Frezal J., Munnich A., Melki J. The role of the SMN gene in proximal spinal muscular atrophy. // Hum. Mol.Genet.-1998-v.7.-p. 1531 • 1536.

41. Lefebvre S., Burglen L.,Reboullet S. et al. Identification and characterization of a spinal muscular atrophy-determining gene. // Cell.- 1995.-v.80.-p. 155-165.

42. Lefebvre S., Burlet P., Liu Q., Bertrandy S., Clermont O., Munnich A., Dreyfuss G., Melki J. Correlation between severity and SMN protein level in spinal muscular atrophy. // Nat.Genet.-1997-v. 16.-p.265-269.

43. Liston P., Roy N., Tamai K.,et al. Suppression of apoptosis in mammalian cells by NAIP and related family of IAP genes. // Nature.-l996-v.379.-p.349-353.

44. Litt M., Luty J.A. A hypervarianle microsatellite reveald by in vitro amplification of dinucieotide repeat within the cardiac muscule actin gene. // Am.J.Hum.Genet.-1989-v.44.-p.397-40l.

45. Liu Q., Dreyfuss G. A novel nuclear structure containing the survival motor neuron protein. // EMBO J.-1996-v.l5.-p.3555-3565.

46. Lorson C.L., Androphy E.J. The domain encoded by exon 2 of the survival motor neuron protein mediates nucleic acid binding. // Hum.Mol.Genet.-1998-v,7,-p. 12691275.

47. Lorson C.L., Strasswimmer J., Yao L-M., Baleja J., Hahnen E., Wirth В., Le Т., Burghes A., Androphy E.J. SMN oligomerization defect correlates with spinal muscular atrophy severity. // Nature Genet.-1998-v. 19.-p.63-67.

48. Mahadevan, M.S., Komeluk, R.G., Roy, N., McKenzie, A., and Ikeda, J.E. SMA genes: deleted and duplicated. //Nature Genet. -l995-v.9-p.l 12-113.

49. Mankoo B.S., Sherrington R., De La Concha A., Kalsi G., Curtis D., Melmer G., Gurling H.M.D. Two microsatellite polymorphisms at the D5S39 locus. // Nucl. Acids Res.-I99l-v.19-p.1963.

50. Mc Andrew P.E., Parson D.W., Simard L.R. et al. Identification of proximal spinal muscular atrophy carriers and patient by analisis of SMN t and SMN с gene copy number. // Amer. J. Hum genet.-1997.-v.60.-p. 1411-1422.

51. Meadous J.C., Marsden C.D. A distal form of chronic spinal muscular atrophy. // Neurol. (Minneap.)-1969-v. l9-p,53-58.

52. Melki J., Abdelhak S., Sheth P. et al. Gene for proximal spinal muscular atrophy to chromosome 5 q. // Nature.-1990a.- v. 344.-p.767-768.

53. Melki J., Sheth P., Abdelhak S. et al. Mapping of acute (type I) spinal muscular atrophies maps to chromosome 5 q 12-ql4. // Lancet.- 1990b.-v.336.-p.271-273.

54. Mercelis R., Demeester J., Martin J.J. Neurogenic scapuloperoneal syndrome in childhood. //J/ neuroi neurosurg. Psych. l980.-v.43.-p.888-896.

55. Mercuri E., Goodwin F., Sewry C., Dubowitz V., Muntoni F. Diaphragmatic spinal muscular atrophy with bulbar weakness. // Europ.J.Paediatr. Neurol.- 2000-v.4-p.69-72.

56. Moller P., Мое N., Saugstad 0. et al. Spinal nuscular atrophy type 1, combined with atrial septal defect in tree sibs. // Clin genet.-1990., v.38- p.81 -83.

57. Morrison K.E., Daniels R.J., Suthers G.K., Flyrin G.A., Francis M.J., Buckie V.J., Davies K.E. High resolution map around the spinal muscular atrophy (SMA) locus on chromosome 5. И Am. J. Hum. Genet.- 1992-v. 50-p.520-527.

58. Muller В., Melki J., Burlet P., Clerget-Darpoux F. Proximal spinal muscular atrophy (SMA) types II and III in the same sibship and not caused by different alleles at the SMA locus on 5q. // Am.J.Hum.Genet.-l992-v.50.-p.892-895.

59. Munsat T.L. Internation SMA collaboration workshop report. // Neuromuscular disorders .-I991.-v.l.-p.8t.

60. Mushegian A.R., Basset D.E.J., Boguski M, Bork S.P., Koonin E.V. Positionally cloned human disease genes: patterns of evolutionary conservation and functional motifs. //

61. Proc.Natl.Acad.Sci.US A-1997-v.94.-p.5831 -5836.

62. Omran H., Ketelsen U.P., Heinen F., Sauer M., Rudnik-Schoneborn S., Wirth В., Zerres K., Kratzer W., Korinthenberg R. Axonal neurophathy and predominance of type II myofibres in SMA I. H Child Neurol.-l 998-v. !3.-p.327-331.

63. Orita M., Suzuki Y., Hayashi K. Rapid and sensitive detection of point mutations and DNA polymorphisms using the polymerase chain reaction. // Genomics.-1989-v.5-p.874-879.

64. Ott J. Analysis of Human Genetic Linkage. // Johns Hopkins University Press -1991-Baltimore.

65. Peam J.H Classification of spinal muscular atrophies. // Lancet-1980-p 919-922

66. Pearn J.H., Walton J.N. A clinical and genetic study of adult-onset spinal muscular atrophy. The autosomal recessive form as a discrete disease entity. // Brain 1978 - v 101.- p.591-606.

67. Pearn J.K. Carter C.O., Welson J. The genetic identity of acute infantile spinal muscular atrophy. // Brain 1973.-v.96.-p.463-470.

68. Pellizzont L., Baccon J., Charroux В., Dreyfuss G. The survival motor neurons (SMN) protein interacts with the snoRNP proteins fibrillarin and Garl. // Curr.Biol.-2001-v.24.-p. 1079-1088.

69. Pellizzoni L.,Kataoka N., Charroux В., Dreyfuss G. A novel function for SMN, the spinal muscular atrophy desease gene product, in pre-mRNA splicing. // Cell.-1998-V.95.-P-615-624.

70. Ponting C. Tudor domains in proteins that interact with RNA. // Trends.Biochem.1997-v.22.-p.51-52.

71. Rodrigues N.R., Owen N., Talbot K., Ignatius J., Dubowitz V., Davies K.E. Gene deletions in spinal muscular atrophy. // J.Med.Genet.-l996-v.33.-p.93-96.

72. Rodriques N.R., Owen N., Talbot K. et al. Deletion in the survival motor neuron gene on 5 q 13 in autosomal recessive spinal muscular atrophy. // Hum. Mol. genet.-1995.-v.4.-p.631-634.

73. Roy N., Mahadwan M.S., Mc Lean M. et al. The gene for neuronal apoptosis inhibitory protein is partially deleted in individuals with spinal muscular atrophy. // Cell.-1995.-v.80.-p.l67-178.

74. Saiki R.K., Scharf S., Faloona F., Mullis K.B., Horn G.T., Erlich H.A., Arnheim N. // Science.- 1985-v.230.-p. 1350.

75. Sanger F., Nicklen S., Coulson A.R. DNA sequencingwith chain-terminating inhibitors. // Proc.Natl.Acad.Sci.USA.-l977-v.74.-p.5463-5467.

76. Sato К., Eguchi Y., Kodama T.S., Tsujimoto Y. Regions essenctial for the interaction between Bcl-2 aad SMN, the spinal muscular atrophy disease gene product. // Cell Death Differ-2000-v.7.-p.374-383.

77. Sato-Yoshitake, R., Shiomura, Y., Miyasaka, H. and Hirokuwa, N. Microtubule-associated protein IB: Molecular structure, localization, and phosphorylation-dependent expression in developing neurons. // Neuron -. 1989-v.3-p.229-238.

78. Savas S., Gokgoz N., Kayserili H., Ozkinay F., Yuksel-Apak M., Kirdar B. Screening of deletions in SMN, NAIP and BTF4p44 genes in Turkish spinal muscular atrophy patients. // Hum.Hered.-2000-v.50.-p. 162-165.

79. Scharf J.M., Endrizzi M.G., Wetter A., Huang S , Thompson T.G., Zerres K., Dietrich W.F., Wirth В., Kunkel L.M. Identification of a candidate modifying gene for spinal muscular atrophy by comparative genomics. //Nature Genet.- 1998-v 20.-p 83-86

80. Selenko P., Sprangers R., Stier G., Buhler D., Fischer U, Sattler M SMN tudor domain structure and its interaction with the Sm proteins. // Nat Struct.Biol -2001-v.8.-p.27-31.

81. Selig, S., Bruno, S., Scharf, J.M., Wang, C.H., Vitale, E., Gilliam, T.C. and Kunkel, L.M. Expressed cadherin pseudogenes are localized to the critical region of the spinal muscular atrophy gene. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA-1995-v. 92-p.3702-3706.

82. Sherrington, R., Melmer, G., Dixon,M., Curtis, D., Mankoo, В., Kalsi, G. and Gurling, H. Linkage disequilibrium between two highly polimorphic microsatellites. // Am. J. Hum. Genet. -1991 -v. 49-p.966-971.

83. Shin S„ Park S.S., Hwang Y.S., Lee K. W, ChungS.G., Lee Y.J., Park M.H. Deletion of SMN and NAIP genes in Korean patients with spinal muscular atrophy. // J .KoreanMed .Sci .-2000-v. 15.-p.93-98.

84. Simard L., Rochette C., Semionov A. et al. SMN t and NAIP mutations in Canadian families with spinal muscular atrophy (SMA): genotype/ phenotype correlations with diseseseverity.// Amer.J. med. Genet.- l997.-v.72.-p.5I-58.

85. Simard L.R., Rochette C., Semionov A., Morgan K., Vanasse M. SMN(T) and NAIP mutations in Canadian families with spinal muscular atrophy (SMA): genetype/phenotype correlation with disease severity. // Am.J.Med.Genet.-l997-v.6.-p.497-500.

86. Skre H. etal. Unusual type of neural muscular atrophy with a possible X-chromosomal inheritance pattern. //Acta Neurol Scand-1978-v.58.-p.249-260.

87. Soares V.M., Brzustowich L.M., Kleyn P.W., Knowles J.A., Palmer D.A., Penchaszaden G.K., Munsat T.L., Gilliam C. Refinement of the spinal muscularг

88. Staal A., Went L.N., Busch H.F. An unusual form of spinal muscular atrophy with mental retardation occurin in an inbred population. // J. Neuroi. Sci.-1975.-v.24.-p. 5767.

89. Stark P. Etude clinique et genetique d'une famielle atteinte d'atrophie musculaire progressive neuronale (amyotrophie de Charcot-Marie). // J. Genet. Hum.-l958.-v.7.p. I-32.

90. Stevens G., Yawitch Т., Rodda J., Verhaart S, Krause A. Different molecular basis for spinal muscular atrophy in South African black patients. // Am J Med.Genet -1999-v.86.-p.420-426.

91. Strasswimmer J., Lorson C.L., Breiding D.E., Chen J J., Burghes A.H , Androphy E J Identification of survival motor neuron as a transcriptional activator-binding protein. // Hum.Mol.Genet.-1999-v.8.-p 1219-1226

92. Talbot K., Miguel-Aliaga I., Mohaghegh P, Ponting C.P, Davies К E Characterization of a gene encoding Survival Motor Neuron (SMN)-related protein, a constituent of the spliceosome complex. // Hum.Moi.Genet.- 1998-v.7.-p 2149-2156

93. Taylor J.E., Thomas N.H., Lewis C.M., Abbs S.J., Rodrigues N.R., Davies K.E., Mathew C.G. Correlation of SMNt and SMNc gene copy number with age of onset and survival in spinal muscular atrophy. // Eur.J.Hum.Genet.-1998-v.6.-p.467-474.

94. Thomas N.H., Dubowitz V. The natiral history of type I (severe) spinal muscular atrophy. // Neuromusc.disord.-1994.-v.4.-p.497-502.

95. Tucker, R.P., Binder, L.l. and Matus, A.I. Neuronal microtubule-associated proteins in the embryonic avian spinal cord. // J. Сотр. Neurol. -1988-v.27l-p.44-55.

96. Urabe K., Kimura A., Harada F., Iwanaga Т., Sasazuki T. Gene conversion in steroid 21-hydroxylase genes. // AmJ.Hum.Genet.- l990-v.46.-p. 1178-1186.

97. Vandenplas S., Wiid I., Grobler-Rabie A., Brebner K., Ricketts M„ Wallis G., Bester A., Boyd C., Mathevv C. Blot hybridisation analysis of genomic DNA. // J Med Genet -1984-v.21.-p-l 64-72;

98. Velasco E.,Valero C., Valero A. et al. Molecular analysis of the SMN and NAIP genes in Spanish spinal muscular atrophy (SMA) families and correlation beyween number of copies of cBCD541 and SMA phcnotype. // Hum molec. Genet.- 1996 -v.5 -p.257-264.

99. Wang C.H., Xu J, Carter T.A. et a!. Characterization of survival motor neuron (SMN t) gene deletions in assymptomatic carriers of spinal muscular atrophy. // Hum Mol. genet.-l996.-v.5.-p.359-365.

100. Weber J.L. Informativeness of human (dC-Da)a, (dG-dT)„ polymorphisms. // Genomics -1990-v.7.-p.524-530.

101. Weber J.L., May P.E. Abundant class of human DNA polymorphisms which can be typed using the polymerase chain reaction. // Am.J.Hum.Genet.-1989-v. 44.-p.388-396

102. Williams B.Y., Hamilton S.L., Sarkar H.K The survival motor neuron protein interacts with the transactivator FUSE binding protein from human fetal brain. // FEBS-Lett-v.470.-p.207-210.

103. Wirth В An update of the mutation spectrum of the survival motor neuron gene (SMN1) in autosomal recessive spinal muscular atrophy (SMA) // Hum Mutation 2000-v 15-p 228 237

104. Writh В Schmidt T Hahnen E et al De novo rearrangements found in 2 % of inde patients with spinal muscular atrophy mutation mechanisms, parental orgin, mutation rate and implication for genetic counselling // Amer J hum Genet 1997 v61 -p 1102 1111

105. Young P.J., Man N.T., Lorson C.L., Le T.T., Androphy E.J., Burghes A.H., Morris G.E. The exon 2b region of the spinal muscular atrophy protein, SMN, is involved in self-association and SIP1 binding. // Hum.Mol.Qenet.-200l-v.IO.-p.88.

106. Zat'kova A., Hahnen E., Wirth В., Kadasi L. Analysis of the SMN and NAIP genes in Slovak spinal muscular atrophy patients. // Hum.Hered.-2000-v.50.-p.l7l-174.