Молекулярно-генетическая оценка эффективности противотуберкулезной химиотерапии (экспериментальные исследования) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат медицинских наук Смирнова, Татьяна Геннадьевна

• Смирнова, Татьяна Геннадьевна
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Смирнова, Татьяна Геннадьевна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ «Экспериментальные модели туберкулезной инфекции».

1.1. Экспериментальные животные в моделях туберкулезной инфекции.

1.2. Дозы M.tuberculosis, использующиеся для создания моделей и способы введения патогена.

1.3. Экспериментальные модели эндогенно-реактивированной туберкулезной инфекции.

1.4. Экспериментальные модели туберкулезной инфекции для тестирования новых противотуберкулезных препаратов и разработки курсов лечения.

1.5. Молекулярно-генетические методы типирования M.tuberculosis, использованные в работе.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Схема эксперимента.

3.2. Характеристика течения хронического туберкулезного процесса при заражении мышей линии BALB/C штаммом M.tuberculosis H37Rv в дозе 2,5x104 КОЕ/мышь.

3.3. Течение экспериментального туберкулеза у зараженных M.tuberculosis H37Rv в дозе 2,5x10 КОЕ мышеи при лечении двумя препаратами (изониазидом и пиразинамидом).

3.4. Характеристика штаммов M.tuberculosis H37Rv, полученных в модели эндогенно-реактивированного туберкулеза.

3.4.1. Молекулярно-генетическое типирование штаммов M.tuberculosis H37Rv.

3.4.2. Определение чувствительности штаммов M.tuberculosis H37Rv к противотуберкулезным препаратам.

3.5. Течение экспериментального туберкулеза у зараженных M.tuberculosis H37Rv в дозе 2,5x104 КОЕ мышеи при лечении тремя препаратами (рифампицином, изониазидом и пиразинамидом).g

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Глава 5. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-генетическая оценка эффективности противотуберкулезной химиотерапии (экспериментальные исследования)»

Актуальность проблемы

До настоящего времени туберкулез остается важной медико-биологической и социальной проблемой. К началу 60-х годов сложилось ошибочное мнение о туберкулезе как об исчезающей болезни. Однако этот прогноз не оправдался. За последние 20 лет в мире не произошло существенного снижения заболеваемости ни в России, ни во всем мире [20, 143].

В 1992 году по данным ВОЗ в мире было зарегистрировано более 8 млн. новых случаев заболевания туберкулезом [16, 75]. В 1993 году Всемирная организация здравоохранения провозгласила "возрождение" туберкулеза глобальным, чрезвычайным положением, поскольку если не будет преодолено пренебрежение самой проблемой, то от него погибнет в ближайшее десятилетие более 30 миллионов человек, а по некоторым данным, до 90 млн. человек [159]. Основной задачей ученых и врачей всего мира на данный момент является разработка новых подходов к диагностике и лечению туберкулеза.

Эффективность противотуберкулезной химиотерапии оценивается по клинической динамике и прекращению выделения возбудителя туберкулеза по данным бактериоскопии и культурального посева.

Данные научных исследований, полученных на группе больных туберкулезом легких, находившихся на лечении ЦНИИТ РАМН и подвергнутых стандартной химиотерапии продемонстрировали, что через 6 месяцев лечения при отрицательных результатах бактериоскопии и отсутствие культурального роста МБТ у части больных выявлялась ДНК микобактерии туберкулеза [19, 18]. Выявление ДНК микобактерий в диагностическом материале больных после окончания курса химиотерапии отражает недостаточную эффективность лечения, приводящую к рецидивам V заболевания. Длительное наблюдение за такими больными позволило бы определить прогностическую ■ значимость обнаружения в диагностическом материале ДНК микобактерий туберкулеза.

Цель исследования

--ЦедБго настоящего—исследования—явилабь молекулярно-генетическая оценка эффективности противотуберкулезной химиотерапии при экспериментальном туберкулезе.

ДКзадачи исследования ■входило

1. На экспериментальной модели хронической туберкулезной инфекции при внутривенном заражении M.tuberculosis H37Rv в дозе 2,5x104

J |/ КОЕ мышей линии BALB/C провести ПНР на выявление ДНК M.tuberculosis в паренхиматозных органах и крови.

2. Пррвёсти „бактериологические, цитологические и молекулярно-генетические исследования экспериментального туберкулеза при лечении двумя препаратами (изониазидом и пиразинамидом) и возникновении реактивации туберкулезного процесса.

-3. Провести типирование по RFLP IS6110 штамма M.tuberculosis

H37Rv, использованного для заражения мышей и штаммов микобактерий,

9 ДсВ^^ полученных на разные сроки лечения и реактивации туберкулезного ' iu( --—-процесса. V

4. Провести сравнение результатов бактериологических, цитологических и молекулярно-генетических исследований, полученных при лечении экспериментального туберкулезного процесса изониазидом^ пиразинамидом и при включении в схему химиотерапии рифампицина. ^ 5. Изучить спектр лекарственной чувствительности штаммов

M.tuberculosis на все сроки эксперимента бактериологическим и молекулярно-генетическим методами.

Новизна исследования

Показано, что при экспериментальной туберкулезной инфекции ДНК

V . , . ^С^-гдассЯ:-- '--, v M.tuberculosis выявляется не-толь-ко-в паренхиматозных органах, -но-шв крови. зараженных животных.

В Корнелловской модели реактивированного туберкулеза доказан эндогенный характер реактивации процесса.

Экспериментально доказано, что предотвращение реактивации экспериментального туберкулезного процесса связано^, (/не с

1>-~ ---------"- ' и продолжительностью химиотерапии,/а'/с комбинацией противотуберкулезных

I — - I препаратов, использующихся для лечения.

Показано, что штаммы микобактерий туберкулеза, полученные в результате эндогенной реактивации, сохраняй^ чувствительность к противотуберкулезным препаратам исходного штамма M.tuberculosis H37Rv, использованного для заражения мышей.

Научно-практическая значимость:

Показано, что выявление ДНК микобактерий при отсутствии роста микобактерий на питательных средах является свидетельством сохранения некультивируемых форм М. tuberculosis в организме хозяина.

Выявление ДНК M.tuberculosis при туберкулезном процессе является фундаментальной основой для оценки эффективности противотуберкулезной химиотерапии с включением результатов ПЦР.

Охарактеризованная модель эндогенной реактивации туберкулеза может быть использована для поиска новых противотуберкулезных препаратов, направленных на элиминацию из организма некультивируемых форм микобактерий.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Смирнова, Татьяна Геннадьевна

ВЫВОДЫ f 1. При внутривенном заражении M.tuberculosis H37Rv в дозе 2,5x104

V &ICJ

КОЕ мышей линии BALB/C ДНК М. tuberculosis выявлялась в q ----^ паренхиматозных органах и крови мышей -на-BGe-GpOK» в течение 260 дней эксперимента. ^

2. При лечении неполной схемой химиотерапии (изониазидом и rfy.\0 пиразинамидом) создаются условия для появления некультивируемых

V/ форм М. tuberculosis, так как при отрицательных результатах посевов паренхиматозных органов ^бьши выявлены ДНК М. tuberculosis в jv^^Ti паренхиматозных органах и крови, специфические клеточные реакции туберкулезного воспаления и была"** получена реактивация туберкулезного процесса. 3. Реактивация туберкулезного процесса носила"эндогенный характер, s f что бьшб^доказано идентичностью результатов типирования по RFLP IS6110 культуры штамма M.tuberculosis H37Rv, использованного для заражения мышей и культур микобактерий, полученных в процессе лечения изониазидом и пиразинамидом и реактивации.

Л.

4. Использование полной схемы противотуберкулезной химиотерапии (рифампицин, изониазид, пиразинамид) предотвратило реактивацию V^ ^ ^ туберкулезного процесса ^ по данным культуральных и Рбактериоскопических исследований, однако^ выявление ДНК M.tuberculosis в органах^-и- крови и специфическая цитологическая картина мазков-отпечатков паренхиматозных органов указывала^на сохранение в организме хозяина некультивируемых форм M.tuberculosis.

Uyl

5. Возникновение реактивации туберкулезного процесса» зависело от схемы лечения (двумя или тремя препаратами с рифампицином) и не б^ю связано с длительностью химиотерапии (4 или 6 месяцев).

6. .Культуры М. tuberculosis H37Rv, полученные в результате реактивации туберкулезного процесса, сохраня)н^чувствительность к основным противотуберкулезным препаратам и не имелц^ мутаций в генах гроВ,-katG, inhA и ahpC. ДНК М. tuberculosis H37Rv, выделенная из органов и крови животных, леченных тремя препаратами, также не нёеда мутаций в генах гроВ, katG, inhA и ahpC.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Модель эндогенно-реактивированной туберкулезной инфекции может быть использована для поиска новых противотуберкулезных препаратов воздействие которых направлено на некультивируемые формы микобактерий.

Выявление ДНК M.tuberculosis методом полимеразной цепной реакции может быть применено как лабораторный критерий при диагностике туберкулеза и для оценки эффективности противотуберкулезной терапии.

Материал настоящего исследования может быть использован в цикле лекций для студентов, аспирантов учреждений микробиологического и фтизиатрического профиля.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Смирнова, Татьяна Геннадьевна, 2005 год

1. Ерохин В.В. Морфологические реакции в легких при химиотерапии экспериментального туберкулеза // Проблемы туберкулеза.- 2000.- №5.-с. 15-19.

2. Желткова Е.К. Молекулярно-генетическая характеристика штаммов Mycobacterium tuberculosis с множественной лекарственной устойчивостью // Автореф. канд. дисс. канд. мед. наук.- 2004.- 25 с.

3. Косарева М.В. Клинико-диагностическое значение микобактериемии при туберкулезе у подростков // Автореф. дисс. канд. мед. наук.- 1999.24 с.

4. Лемешко М.В., Овсянкина Е.С., Голышевская В.И. Роль микобактериемии в диагностике абациллярных форм туберкулеза у подростков // Материалы VII Национального конгресса по болезням органов дыхания. Сборник резюме.- 1997.- №411,- с. 114.

5. Лепеха Л.Н, Бурцева С.А., Ерохин В.В. Морфологическая диагностика туберкулеза и некоторых диссеминированных заболеваний легких // Проблемы туберкулеза.- 2001.- №3.- с. 45-50.

6. МакМаррей Д.Н. Модель туберкулеза у морских свинок. Туберкулез. Патогенез, защита, контроль // Под ред. Барри Блума.- 2002.- М.-"Медицина".

7. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование // 1984.- М.- "Мир"

8. Методы экспериментальной химиотерапии (Практическое руководство).// Под ред. Г.Н. Першина.- 1971.- М.- "Медицина".

9. Приказ МЗ РФ № 109 «О проведении микробиологических исследований при туберкулезе».- 2003.

10. Пузанов В.А., Косарева М.В. Бактериемия при туберкулезе и других микобактериальных инфекциях // Проблемы туберкулеза.- 1999.- №1.-с. 54-59.

11. Радаева Т.В. Сравнительная характеристика иммунологических параметров мышей инбредных линий с генетически детерминированной чувствительностью к туберкулезу и ихсверхрезистентных гибридов // Автореф. дисс. канд. мед. наук.- 2002.25 с.

12. Снайдер Д.Е., Равигльоне М., Кочи А. Глобальное бремя туберкулеза. Туберкулез. Патогенез, защита, контроль // Под ред. Барри Блума.-2002,- М.- "Медицина".

13. Черноусова Л.Н., Ларионова E.E., Севастьянова Э.В., Голышевская В.И. Роль ПЦР анализа в комплексных бактериологических исследованиях во фтизиатрии // Проблемы туберкулеза.- 2001.- №3, с. 58-60.

14. Черноусова Л.Н., Ларионова Е.Е., Севастьянова Э.В., Масленникова Ю.В. Обнаружение M.tuberculosis в мокроте больных с ограниченными формами туберкулеза легких методом ПЦР // Мат. конф. "Туберкулез сегодня: проблемы и перспективы".- 2000.- М.- с. 89-90.

15. Шилова М.В. Туберкулез в России в 2000 году // 2001.- С.-П.-"Дыхание и здоровье".

16. Alcaide F., Telenti A. Molecular techniques in the diagnosis of drug-resistant tuberculosis // Ann Acad Med Singapore.- 1997.- Vol. 26.- P.647-650.

17. Alland D., Kakut G. E., Moss A. R., McAdam R. A., Hahn J. A., Bosworth W., Drucker E., and Bloom B. R. Transmission of tuberculosis in New York

18. City. An analysis by DNA fingerprinting and conventional epidemiologic methods//N Engl. J. Med.- 1994, Vol. 330.-P. 1710-1716.

19. Amrami K.K, Sundaram M, Shin A.Y., Bishop A.T. Mycobacterium marinum infections of the distal upper extremities: clinical course and imaging findings in two cases with delayed diagnosis // Skeletal Radiol.-2003.- Vol. 32(9).- P. 546-549.

20. Apt A., Avdienko V., Nikonenko B. et al. Distinct H-2 complex control of mortality, and immune responses to tuberculosis infection in virgin and BCG-vaccinated mice // Clin. Exp. Immunol.- 1993.- Vol. 94.- P. 322-329.

21. Aronson J.D. Spontaneous tuberculosis in salt water fish // J. Infect. Dis.-1926.- Vol. 39.-P. 315-320.

22. Aubry A, Chosidow O, Caumes E, Robert J, Cambau E. Sixty-three cases of Mycobacterium marinum infection: clinical features, treatment, and antibiotic susceptibility of causative isolates // Arch Intern Med.- 2002.-Vol. 162(15).-P. 1746-52

23. Barclay W.R., Anacker R.L., Brehmer W., Leif W., Ribi E. Aerosol-induced tuberculosis in subhuman primates and the course of the disease after intravenous BCG vaccination // Infect Immun.- 1970.- Vol. 2.- P. 574-82

24. Barclay W.R., Busey W.M., Dalgard D.W. Protection of monkeys against airborne tuberculosis by aerosol vaccination with bacille Calmette-Guerin // Am. Rev. Respir. Dis.- 1973- Vol. 107.- P. 351-358.

25. Barker L.P., George K.M., Falkow S., Small P.L.S. Differential Trafficking of Live and Dead Mycobacterium marinum Organisms in Macrophages // J. Infection and Immunity.- 1997.- Vol. 65.- P. 1497-1504.

26. Bonato V.L., Goncalves E.D., Santos R.R., Silva C.L. Genetic aspects and microenvironment affect expression of CD 18 and VLA-4 in experimental tuberculosis // Scand. J Immunol.- 2002.- Vol. 56(2).- P. 185-194.

27. Boom R., Sol C.J.A., Salimans M.M.H. Rapid and simple method for purification of nucleic acid // J.Clin.Microb.- 1990.- Vol. 28.- №2. P. 495503.

28. Browning C.N., Gulbransen R. Studies on experimental tuberculosis in mice. The susceptibility of mice to inoculation with tubercle bacilli // J. Hyg.- 1926.- Vol. 25.- P. 323-332.

29. Cardona P.J., Llatjos R., Gordillo S. Evolution of granulomas in lungs of mice infected aerogeniclly with Mycobcterium tuberculosis // Scand. J. Immunol.- 2000.- Vol. 52.- P. 156-163.

30. Caws M., Drobniewski F.A. Molecular Techniques in the Diagnosis of Mycobacterium tuberculosis and the Detection of Drug Resistance // Annals New York Academy of Sciens.-2001.- 139-145

31. Chapuis L., Ji В., Truffot-Pernot C., O'Brien R. J., Raviglione M. C., and Grosset J. H. Preventive therapy of tuberculosis with rifapentine inimmunocompetent and nude mice // Am. J. Respir. Crit. Care Med.- 1994.-Vol. 150.- P. 1355-1362.

32. Collins F.M. Protection against Mycobacterial disease by means of live vaccines tested in experimental animals // In G.P. Kubica and L.G. Wayne (ed.) The Mycobacteria: a Sourcebook.- 1984.- New York.- P. 787-839.

33. Colorni A. A systemic mycobacteriosis in the European sea bass Dicentrarchus labrax cultured in Eilat (Red Sea) // Isr. J. Aquacult. Bamidgeh.- 1992.- Vol. 44,- P.75-81.

34. Cooper A.M., Callahan J.E., Griffin J.P., Roberts A.D., Orme I.M. Old mice are able to control low-dose aerogenic infections with Mycobacterium tuberculosis //J. Infect. Immun.- 1995.- Vol. 63.- P. 3259-65.

35. Dannenberg A.J. Roles of cytotoxic delayed-type hypersensitivity and macrophage-activating cells-mediaeted immunity in the pathogenesis of tuberculosis // J. Immunobiology.- 1994.- Vol. 191.- P. 461-473.

36. Dannenberg A.M. Jr. Immunopathogenesis of pulmonary tuberculosis // J. Hosp. Pract.- 1993.- Vol. 28.- P. 33-40.

37. Dannenberg A.J. Pathogenesis of pulmonary tuberculosis // Am. Rev. Respir. Dis.- 1982.- Vol. 125.- P.25-29.

38. Dannenberg A.M. Jr. Delayed-type hypersensitivity and cell-mediated immunity in the pathogenesis of tuberculosis // J. Immunol. Today.- 1991.-Vol. 12.-P. 228-233.

39. Diamant A.A., Banet M.U, Colorni A., Knibb W., Kvitt H. Mycobacteriosis in wild rabbitfish Siganus rivulatus associated with cage farming in the Gulf of Eilat, Red Sea//Dis. Aquat. Org.- 2000.- Vol. 39.- P. 211-219.

40. Dubos R.J., Pierce C.H. Differential characteristics in vitro and in vivo of several substrains of BCG. IV Immunizing effectiveness // Am. Rev. Tuberc.- 1956.- Vol. 74.- P. 699-717.

41. Eisenach К. D., Sifford M. D., Cave M. D., Bates J.H., Crawford J. Т. Detection of Mycobacterium tuberculosis in Sputum Samples Using a polymerase Chain Reaction // Am. Rev. respire Dis.- 1991.- Vol. 144.- P. 1160-1163.

42. E1-Hajj H.H., Marras S.A.E., Tyagi S., Kramer F.R., Alland D. Detection of rifampin resistance in Mycobacterium tuberculosis in a single tube with molecular beacons // J. Clin Microbiol.- 2001.- Vol. 39.- P.4131-4137

43. Enzensberger R, Hunfeld K.P, Elshorst-Schmidt T, Boer A, Brade V. Disseminated cutaneous Mycobacterium marinum infection in a patient with non-Hodgkin's lymphoma// Infection.- 2002.- Vol. 30(6).- P. 393-395.

44. Fregnan G.B., Smith D.W. Immunogeneticy and allergenicity in guinea pigs of a deffated Mycobacterial vaccine and its fractions // Am. Rev. Respir. Dis.- 1963,- Vol. 87.- P. 877-888.

45. Friedman C. R., Stoeckle M. Y., Johnson Jr. W. D., Riley L. W. Double repetitive element PCR method for subtyping Mycobacterium tuberculosis clinical isolates // J. Clin Microbiol.- 1995,- Vol. 33.- P. 1064-1069.

46. Frothingham R., Meeker W. A. O'Connel. Genetic diversity in the Mycobacterium tuberculosis complex based on variable numbers of tandem DNA repeats//Microbiology. 1998. - 144. - P.l 189-1196.

47. Giavenni R. Alcuni aspetti zoonosici delle micobatteriosi di origine ittica // Riv. Ital. Piscicolt. Ittiopatol.- 1979,- Vol. 4,- P. 123-126.

48. Good R.C. Simian tuberculosis: immunologic aspects // Ann NY Acad Sci.-1968.-Vol. 154.-P.200 213

49. Greifinger R., Grabau J., Quinlan A., Loeder A., DiFerdinando Jr. G., and Morse D. L. Transmission of multidrug-resistant tuberculosis among immunocompromised persons in a correctional system // MMWR.- 1992.-Vol. 41.- P. 507-509.

50. Haas W. H., Butler W. R., Woodley C. L., and Crawford J. T. Mixed-linker polymerase chain reaction: a new method for rapid fingerprinting of isolates of the Mycobacterium tuberculosis complex // J. Clin Microbiol.- 1993.-Yol. 31.- P. 1293-1298.

51. Напсе A.J., Grandchamp В., Levy-Frebault V. Detection and identification of mycobacteria by amplification of Mycobacterial DNA // Mol. Microbiol.-1989,- Vol. 3.- P.843-849.

52. Hermans P. Characterization of a major polymorphic tandem repeat in M. tuberculosis//J. В acteriol.- 1992.- Vol. 174.-P.4157-4165.

53. Hermans P.W.M., Schuitema A.R.J., Van Sooligen D. Specific detection of Mycobacterium tuberculosis complex strains by polymerase chain reaction // J. Clin. Microbiol.- 1990.- Vol. 28,- P. 1204-1213.

54. H6ner zu Bentrup Kerstin, Russell G. David. Mycobacterial persistence: adaptation to a changing environment // Trends in Microbiology.- 2001.-Vol. 9.- P. 135-144

55. Janicki B.W., Good R.C., Minden P., Affronti L.F., Hymes W.F. Immune responses in rhesus monkeys after bacille Calmette-Guerin vaccination andaerosol challenge with Mycobacterium tuberculosis // Am Rev Respir Dis.-1973.- Vol. 107,- P.359-366.

56. Jespersen A. Studies on tuberculin sensitivity and immunity in guinea pigs induced by vaccination with varying doses ob BCG vaccine // Acta Pathol. Microbiol. Scand.- 1956.- Vol. 38.- P. 203-209.

57. Jespersen A. Bacteraemia in red mice (Clethrionomys g. glareolus Schreb.) after intraperitoneal injection of large doses of tubercle bacilli // Acta Pathol Microbiol Scand.- 1975,- Vol. 83(3).- P. 211-218.

58. Kochi A. The global tuberculosis situation and the new control strategy of the World Health Organization // Tubercle.- 1991.- Vol. 72.- P. 1-6.

59. Kolk A.H., Kox L.F., Kuijper S., Richter C. Detection of Mycobacterium tuberculosis in peripheral blood (letter, comment). / /Lancet.- 1994.- Vol.3. -P. 694.

60. Laboratory Services in Tuberculosis Control. Part II: Microscopy.// Geneva.- WHO.- 1998.- P. 27-44.

61. Laboratory Services in Tuberculosis Control. Part III: Culture // Geneva.-WHO.- 1998.-P. 37-55

62. Lee A.S., Lim I.H., Tang L.L., Telenti A., Wong S.Y. Contribution of kasA analysis to detection of isoniazid-resistant Mycobacterium tuberculosis in Singapore //Antimicrob Agents Chemother.- 1999.- Vol. 43.- P.2087-2089

63. Legranderie M., Ravisse P., Marchal G., Gheorghiu M., Balasubramanian V. Wiegeshaus E.H., Smith D.V. BCG-induced protection in guinea pigs vaccinated and challenged via the respiratory route // Tuberc. Lung Dis.-1993.- Vol. 74.-P. 38-46.

64. Lenaerts A.M.J.A., Chase S.E., Chmielewski A.J., Cynamon M.H. Evaluation of Rifapentine in Long-Term Treatment Regimens for Tuberculosis in Mice // Antimicrob. Agents Chemother.- 1999.- Vol. 43.- N. 10.-P. 2356-2360.

65. Lima V.M., Bonato V.L., Lima K.M., Dos Santos S.A., Dos Santos R.R., Goncalves E.D., Faccioli L.H., Brandao I.T., Rodrigues-Junior J.M., Silva

66. C.L. Role of trehalose dimycolate in recruitment of cells and modulation of production of cytokines and NO in tuberculosis // Infect Immun.- 2001.-Vol. 69(9).-P. 5305-5312.

67. Lurie M.B. The correlation between the histological changes and the fate of living tubercle bacilli by rabbit pulmonary alveolar macrophages and its relation to native resistance to tuberculosis // J. Immunol.- 1932.- Vol. 91.-P. 553-556.

68. Lurie M.B. The fate of BCG and associated changes in the organs of rabbits // J. Exp. Med.- 1934,- Vol. 60.- P. 163-178.

69. Lurie M.B. Nature of inherited resistance to tuberculosis // Rroc. Soc. Exp. Biol. Med.- 1938,- Vol. 39,- P. 181-187.

70. Lurie M.B. Heredity, constitution and tuberculosis. An experimental study // Am. Rev. Tuberc.- 1941.- Vol. 44.- P. 1-125.

71. McCune R.M., Feldmann F.M., Lambert H.P., McDermott W. Microbial persistence I. The capacity of tubercle bacilli to survive sterilization in mouse tissues // J.Exp. Med.- 1966.- Vol.123.- P. 445-468.

72. McKee C.M., Rake G., Donovick R., Jambor W.P. The use of the mouse in a standardized test for antituberculous activity of compounds of natural or syntetic origin // Am. Rev.Tuberc.- 1949.- Vol. 60.- P. 90-108.

73. McKinney J. D. In vivo Veritas: The search for ТВ drug targets goes live // Nature Medicine .- 2000.- Vol.6 №12.- P. 1330-1331.

74. McMurray D.N. Disease model: pulmonary tuberculosis // Trends in Molecular Medicine.-2001.-Vol. 7.-N. 3.-P. 135-137.

75. McMurray D.N. A Nonhuman Primate Model for Preclinical Testing of New Tuberculosis Vaccines // Clin. Inf. Dis.- 2000.- Vol. 30.- P.210-212.

76. Miyazaki E., Chaisson R.E, Bishai W.R. Analysis of rifapentine for preventive therapy in the Cornell mouse model of latent tuberculosis // Antimicrob. Agents Chemother.- 1999.- Vol. 43.- P. 2126-2130.

77. Nigrelli R.F., Vogel H. Spontaneous tuberculosis in fishes and in other coldblooded vertebrates with special reference to Mycobacterium fortuitum Cruz from fish and human lesions // Zoologica.- 1963.- Vol. 48.- P. 131-144.

78. Nikonenko B.V., Averbakh M.M., Lavebratt C., Schurr E., Apt A.S. Comparative analysis of mycobacterial infections in susceptible I/St and resistant A/Sn inbred mice // Tuber. Lung. Dis.- 2000.- Vol. 80.- P. 15-25.

79. Nikonenko B.V., Hanrahan C. Murine model of tuberculosis. In vitro and in vivo study // Russian Journal of Immunology.- 2002.- Vol. 7.- №4.-P. 308-322.

80. North R.J. Importance of thymus-derived lymphocytes in cell-mediated immunity to infection // Cell. Immunol.- 1973.- Vol. 7.- P. 166-176.

81. Orme I.M. A mouse model of the recrudescence of latent tuberculosis in the elderly//Am. Rev. Respir. Dis.- 1988,- Vol. 137.- P. 716-718.

82. Orme I.M. Mechanisms underlying the increased susceptibility of aged mice to tuberculosis //Nutr. Rev.- 1995.- Vol. 53.- P. 535-540.

83. Orme I.M. The immunopathogenesis of tuberculosis: a new working hypothesis // Trends in microbiology.- 1998.- Vol. 6.- P. 94-97.

84. Orme I.M. Virulence of recent notorious Mycobacterium tuberculosis isolates // Tuberc. Lung. Dis.- 1999.- Vol. 79(6).- P. 379-381.

85. Parish N.M., Dick J.D., Bishai W.R. Mechanism of latency in Mycobacterium tuberculosis // Trends, of Microbiol.- 2000.- Vol. 6.- P. 107112.

86. Planes A.M.,Gasser 1., Gonzales T. Bacteriemia caused by Mycobacterium tuberculosis and or Mycobacterium avium detected by the nonradiometric BACTEC system. //Enferm. Infect. Microbiol. Clin. 1993. - Vol. 11. - N 9.-P. 494-496.

87. Plikaytis В. В., Crawford J. Т., Woodley, C. L., Butler W. R., Eisenach K. D., Cave M. D., and Shinnick Т. M. Rapid, amplification-based fingerprinting of Mycobacterium tuberculosis // J. Clin Microbiol.- 1993.-Vol. 139.- P. 1537-1542.

88. Quinn D. Frederick., Birkness A. Kristin,. King J. Peter. Alpha-Crystallin as a Potential Marker of Mycobacterium tuberculosis Latency.- ASM News.- 2002.- Vol. 68.- №12,- P.-612-617.

89. Ramaswamy S., Musser J.M. Molecular genetic basis of antimicrobial agent resistance in Mycobacterium tuberculosis: 1998 update // Tuber Lung Dis.- 1998.- Vol.79.-P. 3-29.

90. Rastogi N. Emergence during unsuccessful chemotherapy of multiple drug resistance in a strain of M. tuberculosis // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis.- 1992.-Vol. 11.-P. 901-907.

91. Ravins M., Bercovier H., Chemtob D., Fishman Y., Rahav G. Molecular epidemiology of Mycobacterium tuberculosis infection in Israel // J. Clin. Microbiol.- 2001.- Vol.39.- №3.- P. 1175-1177.

92. Reddy V. M., Nadadhur G., Daneluzzi D., O'Sullivan J.F., Gangadharam P.R.J. Antituberculosis activities of clofazimine and its new analogs B4154 and B4157 // Antimicrob. Agents. Chemother.- 1996.- Vol. 40.- P. 633-636.

93. Ribi E., Anaclcer R.L., Barclay W.R. Efficacy of mycobacterial cell walls as a vaccine against airborne tuberculosis in the rhesus monkey // J Infect Dis.- 1971.-Vol. 123.-P. 527-538.

94. Richeldi L. Molecular diagnosis of tuberculosis // J. Eur Respir.- 1995 -Vol. 20.- P. 689-700.

95. Richter С., Kox L.F., Van-Leeuwen I.V. PCR detection of mycobacteriemia in Tanzanian patients with extrapulmonary tuberculosis. // Eur. J. Clin. Micribiol. Infect. Dis.- 1996. Vol. 15. -N 10. - P. 813-817.

96. Ringuet H., Akoua-Koffi С., Honore S., Varnerot A., Vincent V., Berche P., Gaillard J.L., Pierre-Audigier C. hsp65 sequencing for identification of rapidly growing mycobacteria // J Clin Microbiol.- 1999.- Vol. 37.- P.852-857.

97. Rolfs A., Beige L., Finckh U. Amplification of Mycobacterium tuberculosis from peripheral blood // J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol. 33.-N 12.-P. 3312-3314.

98. Sever J.L., Youmans G.P. Enumeration of viable tubercle bacilli from the organs of nonimmunized and immunized mice // Am. Rev. Tuberc. Pulm. Dis.- 1957.- Vol. 76.- 616-635.

99. Shoen C.M., DeStefano M.S., Sklaney M.R., Monica B.J., Slee A.M., Cynamon M.H. Short-course treatment regimen to identify potential antituberculous agents in a murine model of tuberculosis // J Antimicrob Chemother.- 2004.- №2.- P.535-543.

100. Smith D.W. Protective effect of BCG in experimental tuberculosis // Adv. Tuberc. Res.- 1985.- Vol. 22.- P. 1-93

101. Smith D.W., Harding G.E., Chan J.K. Potency of 10 BCG vaccines as evaluated by their influence on the bacillemic phase of experimental airborne tuberculosis in guinea pigs // J. Biol. Stand.- 1979.- Vol. 7.- P. 179197.

102. Smith D.W., Wiegeshaus E.H. What animal model can teach us about the pathogenesis of tuberculosis in humans // Rev. Infect. Dis.- 1989.- Vol. 11.-P. 385-393.

103. Small P. M., Hopewell P. C.3 Singh S. P., Paz A., Parsonnet J., Ruston D. C., Schecter G. F., Daley M. P. H. C. L., and Schoolnik G. K. The epidemiology of tuberculosis in San Francisco // N. Eng. J. Med.- 1994.-Vol. 330.-P. 1703-1709.

104. Stead W.W. Pathogenesis if a first episode of chronic pulmonary tuberculosis in many recrudescence of residuals of the primary infection or exogenous reinfection? // Am. Rev. Respir. Dis.- 1967.- Vol. 95.- P. 721745.

105. Talaat A.M., Reimschuessel R., Wasserman S.S., Trucksis M. Goldfish, Carassius auratus, a Novel Animal Model for the Study of Mycobacterium Marinum Pathogenesis // J. Infect. Immun.- 1998.- Vol. 66.- P. 2938-2942.

106. Telenti A. Genetics and pulmonary medicine. 5. Genetics of drug resistant tuberculosis // J. Thorax.- 1998.- Vol.53.- P.793-797

107. Telenti A., Honore N., Cole S.T. Detection of mutations in mycobacteria by PCR-SSCP (single-strand conformation polymorphism) // Methods Mol Biol.- 1998.- Vol. 101.- P.423-430.

108. Telenti A, Iseman M. Drug-resistant tuberculosis: what do we do now? // J. Drugs.- 2000.- Vol. 59.- P.171-179.

109. Telenti A., Marchesi F., Balz M., Bally F., Bottger E.C., Bodmer T. Rapid identification of Mycobacteria to the species level by polymerase chane reaction and restriction enzyme analysis // J. Clin Microbiol.- 1997.- Vol. 31.-N2.- P.175-178.

110. Telenti A., Persing D.H. Novel strategies for the detection of drug resistance in Mycobacterium tuberculosis // Res Microbiol.- 1996.- Vol. 147(1-2).- P.73-79

111. Thoen C.O., Richards W.D., Jarnagin J.L. Mycobacteria isolated from exotic animals // J Am Vet Med Assoc.- 1977.- Vol. 170.- P. 987 990.

112. Treatment of tuberculosis. Recommendations for national programs // Geneva.- WHO.- 1998.- P. 25-70.

113. Uclco M., Colorni A., Kvitt H. Strain variation in Mycobacterium marinum fish isolates // Appl. and Envirommental Microbiology.- 2002.- №2.- P. 5281-5287.

114. Vandiviere H.M., Loring W.E., Melvin I., Willis S. The treated pulmonary lesion and its tubercle bacillus. The death and resurrection // Am. J. Med. Sci.- 1956.- Vol. 232.- P. 30-37.

115. Van Soolingen D., de Haas P. E. W., Hermans P. W. M., and van Embden J. D. A. DNA fingerprinting of Mycobacterium tuberculosis // Meth. Enzymol.- 1994.- Vol. 235.- P. 196-205.

116. Van Soolingen D., Kremer K., Vynycky E. New perspectives in the Molecular Epidemiology of tuberculosis. P. 17-45 In Kaufmann S.H.E., Hahn H.: Mycobacteria and ТВ. Issues Infect Dis. Basel., Karger., 2003.-Vol.2.- P. 155.

117. Walsh G.P., Tan E.V., de la Cruz E.C. The Phillipine cynomolgus monkey (Macaca fascicularis) provides a new nonhuman primate model of tuberculosis that resembles human disease // Nature Med.- 1996.- Vol. 2.- P. 430-436.

118. De Wit D., Wootton M., Dhillon J., Mitchison D.A. The bacterial DNA content of mouse organs in the Cornell model of dormant tuberculosis // Tuberc. Lung Dis.- 1995.- Vol. 76,- P. 555-562.

119. Yamamura Y, Walter A, Bloch H. Bacterial populations in experimental murine tuberculosis. I. Studies in normal mice // J. Infect. Dis.- I960.- Vol. 106.-P. 211-222.

120. Yamazaki Т., Haga S., Nakamura R.M., Ookubo H., Okazawa Y., Tanno K., Hayashi Т., Tamura Т., Fujino T. Detection of rifampicin-resistant strains of Mycobacterium tuberculosis by a non-radioactive PCR-SSCP method // Kekakku.- 1996.-Vol. 71.-P.465-471.

121. Yang Z. H., de Haas P. E. W., Wachman С. H., van Soolingen D., van Embden J. D. A., and Andersen A. B. Molecular epidemiology of tuberculosis in Denmark in 1992 // J. Clin. Microbiol.- 1995.- Vol. 33.2077-2081.

122. Zahrt C. Thomas Molecular mechanisms regulating persistent Mycobacterium tuberculosis infection // Microbes and Infection.- 2003.-Vol. 5.-P. 159-167.