Молекулярно-генетическая идентификация антибиотикорезистентных штаммов Histophilus Somni и лечебные мероприятия при гистофилёзе крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Рудняев Данил Александрович

• Рудняев Данил Александрович
• кандидат наук
• 2022

Оглавление диссертации кандидат наук Рудняев Данил Александрович

ВВЕДЕНИЕ

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА I. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ И ВЫБОР НАПРАВЛЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

1.1. Характеристика Histophilus somni

1.2. Заболевания, вызываемые Histophilus somni

1.3. Распространение гистофилёза крупного рогатого скота

1.4. Методы лечения и профилактики

1.4.1. Вакцинация крупного рогатого скота против гистофилёза

1.4.2. Лечение

1.4.3. Принципы терапии гинекологических патологий у коров,

вызванных Н Ботш

1.4.4. Антибиотики, используемые для лечения и профилактики заболеваний крупного рогатого скота

1.4.5. Диагностика гистофилеза

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Описание использованных методов исследований, материалов и оборудования

2.2. Разработка методики молекулярно-генетической

идентификации бактерии Histophilus somni

2.2.1. Биологический материал, использованный в работе

2.2.2. Подготовка исследуемого материала

2.2.3. Культуральные признаки возбудителя

2.2.4 Методы экстракции ДНК

2.2.5. Проведение реакции амплификации

2.2.6. Микробиологические исследования патологического материала

2.2.7. Разработка тест-системы для идентификации Histophilus somni

2.2.8. Тестирование разработанной тест-системы на биологическом материале

2.2.9. Сравнение разработанной тест-системы с зарубежным аналогом

2.2.10. Идентификация антибиотикорезистентности Н. Ботш

2.2.11. Тестирование культур на наличие генов антибиотикорезистентности с использованием разработанных систем праймеров и зондов

2.2.12. Сравнение результатов ПЦР для выявления генов

антибиотикорезистентности с результатом анализа штаммов

диско-диффузионным методом

2.2.13. Тестирование биологических образцов на наличие генов антибиотикорезистентности с использованием разработанных методик

2.2.14. Результаты исследования распространения акушерско-гинекологических патологий в ООО «МИРОВЕТ»

2.2.15. Лечебно-профилактические мероприятия - «Программа комплексного подхода к оздоровлению скотоводческих хозяйств, неблагополучных по инфекционным болезням, вызванных антибиотикотолирантными изолятами гистофилеза»

ГЛАВА III. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ РЕУЛЬТАТОВ

СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

Список сокращений

Приложения:

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-генетическая идентификация антибиотикорезистентных штаммов Histophilus Somni и лечебные мероприятия при гистофилёзе крупного рогатого скота»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы

Histophilus somni — микроорганизм, вызывающий мультисистемное заболевание — гистофилёз (гемофилёз) крупного рогатого скота (КРС). H. somni — грамотрицательные, не образующие спор, некапсулированные, неподвижные, плеоморфные бактерии семейства Pasteurellaceae. Ранее возбудитель был известен как Haemophilus somnus [64].

До недавнего времени заболевания, ассоциированные с H. somni, часто регистрировали в странах с интенсивным

животноводством — в Северной и Южной Америке, странах Европы, Африки, а также в Японии, Австралии, Новой Зеландии [95, 112, 115, 152, 161, 163, 170].

В исследованиях, проведенных в западной части Канады, было показано, что гистофилез является одной из важных причин смертности крупного рогатого скота на откормочных площадках с конца 1980-х годов [156, 185]. Его связывали с половиной от общего числа смертельных случаев у КРС, а смертность, по некоторым оценкам, могла достигать до 2% поголовья. В последних исследованиях, изучающих случаи респираторных болезней КРС в США и Канаде, было показано, что H. somni является вторым по распространенности (57% случаев) бактериальным возбудителем после Mannheimia haemolytica (91%) [157].

На территории Российской Федерации гистофилёзы официально фиксируют редко, что в свою очередь можно объяснить отсутствием нормативной документации, регламентирующей необходимость проведения лабораторной диагностики [12].

Для лечения гистофилёза, как и других бактериальных инфекций КРС, применяют различные антимикробные препараты [91, 92]. Однако появление и распространение антибиотикорезистентных штаммов возбудителя существенно снижает эффективность такой терапии.

За последние 10 лет в разных странах показано увеличение числа изолятов Н. 8вшт, устойчивых к тетрациклинам, аминогликозидам (неомицину, гентамицину) и фениколам (хлорамфениколу, флорфениколу), а также сообщается о появлении изолятов с множественной резистентностью к антибиотикам.

В течение многих десятилетий своевременная диагностика и терапия акушерско-гинекологических патологий у крупного рогатого скота остается открытым и сложнорешаемым вопросом, несмотря на высокие достижения в биотехнике репродукции животных. Современные подходы клинической диагностики и терапии не успевают совершенствоваться и восполнять те экономические потери, которые несут отечественные скотоводческие хозяйства от акушерско-гинекологических заболеваний, характеризующихся снижением удоев, затрат на лечебно-терапевтические манипуляции, недополучения приплода, гибели животного, затрат на работу квалифицированных сотрудников. Причем невосполнимые экономические потери не зависят от пород крупного рогатого скота и представителя микробного возбудителя [51, 80, 87, 107, 183].

Ежегодно в ведущих молочных холдингах, комплексах, оснащенных даже робототехнической доильной системой, в том числе и на традиционных молочных фермах нашей страны, диагностируют заболевания органов размножения и молочной железы, тем самым подвергается выбраковке из основного стада до 30% коров, непригодных для использования их в дальнейшем воспроизводстве [114, 118].

Главным краеугольным камнем в возникновении акушерско-гинекологических заболеваний, а именно метритов, эндометритов, маститов, а также патологии яичников (гипофункция, фолликулярные кисты, персистентное желтое тело) считают условно-патогенную и патогенную микрофлору. Так, по данным [112,118], попадание микрофлоры различной этиологии в органы размножения животных происходит чаще всего гематогенным, лимфогенным и галактогенным способами, и именно поэтому все традиционные лечебно-профилактические мероприятия основаны на применении традиционных антибиотиков и химиотерапевтических препаратах.

Грибов К.П. (2013 г.) отмечал, что применение антимикробных средств сопряжено с целым рядом негативных сторон - низким эффектом лечебного воздействия, возникновением у микроорганизмов к ним толерантности, отрицательным влиянием на морфологические показатели самих органов воспроизводства. Автор также в своих научных трудах указывал на то, что заболевания органов размножения, а именно послеродовые эндометриты, вызываются специфическими возбудителями, и у 30% коров был зафиксирован возбудитель Haemophilus somnus [56, 133, 158]. В этой связи необходимо усовершенствовать комплекс лечебно-профилактических мероприятий по оздоровлению отечественных скотоводческих хозяйств.

Одновременное поражение различных систем органов и большая вариативность клинических проявлений заболевания усложняют диагностику гистофилёза. Использование серологических методов для диагностики гистофиллеза недостаточно эффективно как из-за наличия антител к H. somni, так и к родственным представителям Pasteurellaceae: Pasteurella multocida, Mannheimia haemolytica и Bibersteinia trehalosi [157]. Обнаружение бактерии H. somni во внутренних органах, особенно легких, микробиологическими методами в присутствии других патогенных микроорганизмов затруднено из-за медленного роста и высоких требований к условиям культивирования данного микроорганизма. Поэтому точная идентификация H. somni является сложной задачей, и необходим надежный тест для выявления H. somni в клинических образцах. В этой связи разработка быстрого и эффективного метода выявления H. somni и идентификации генов антибиотикорезистентности для разработки рекомендаций по своевременной профилактике является актуальной.

Степень разработанности проблемы

Болезни сельскохозяйственных животных, вызванные микроорганизмами семейства Pasteurellaceae, широко распространены на территории Российской Федерации. Однако при наличии большого количества научных работ, посвященных изучению распространенности и идентификации Pasteurella multocida и Mannheimia haemolytica [21; 26, 27, 32, 40, 41], вопросу изучения

гистофилеза отечественными исследователями было уделено значительно меньше внимания.

При этом проблема распространенности гистофилеза и лечения заболеваний, ассоциированных с Н. 8вшт, широко изучается в научном сообществе стран Северной Америки уже на протяжении 20 лет [65, 99, 101, 144, 154, 157]. Последние работы зарубежных ученых все больше уделяют внимания проблемам распространения устойчивости микроорганизмов к антибиотикам [43, 47, 70, 83, 120, 121, 143].

Значимость заболевания и проблемы диагностики заболевания в России, вызванных Ш^^орИНш 8вшт рассматривались в работах Сидорова и Скородумова [37, 38], а также в работе Капустина и соавторов в 2017 году [12], а эпизоотологические и клинико-морфологические аспекты эндометритов у крупного рогатого скота, вызванных Н. 8ошт, и вопросы антибиотикотерапии, были ранее рассмотрены в работах Грибова и соавторов [14, 15]. Однако до настоящего времени на территории Российской Федерации гистофилёзы все еще фиксируют редко, а научной информации о распространенности и антибиотикорезистентности данного микроорганизма недостаточно.

Цель и задачи исследования

Целью работы является разработка методологических подходов для оценки распространенности гистофилеза крупного рогатого скота и идентификации антибиотикорезистентных изолятов Ш^^орИНш яошт.

Для достижения цели необходимо решить следующие задачи:

• провести сбор биологического материала от крупного рогатого скота, направленный на выявление Ш^^орИНш 8ошт и оценить распространенность данного возбудителя в хозяйствах Российской Федерации с использованием микробиологических и молекулярно-генетических методов;

• сравнить микробиологические и молекулярно-генетические методы выявления и оценки устойчивости к антибиотикам Ш^^орИНш 8ошт;

• разработать метод выявления и идентификации резистентных к аминогликозидам штаммов Histophilus somni на основе ПЦР в режиме «реального времени»;

• разработать методические рекомендации по оздоровлению скотоводческих хозяйств, неблагополучных по инфекционным заболеваниям, вызванным антибиотикорезистентными штаммами бактерий Histophilus somni.

Научная новизна исследования

В результате проведенных исследований подобраны оригинальные олигонуклеотидные праймеры и зонды, на основе которых разработан метод выявления ДНК Histophilus somni на основе ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме «реального времени».

Разработан метод выявления генетических детерминант устойчивости Histophilus somni к аминогликозидам.

Впервые изучены акушерско-гинекологические особенности заболеваний половых органов коров, вызванных антибиотикорезистентными штаммами бактерий Histophilus somni.

Установлены клинические аспекты локализации микроба в половых органах при проведении диагностических мероприятий. Разработаны эффективный способ и схемы лечения коров, больных акушерско-гинекологическими заболеваниями, вызванными антибиотикорезистентными штаммами бактерий Histophilus somni.

Теоретическая и практическая значимость работы

Разработана тест-система для идентификации и типирования изолятов возбудителя гемофилеза крупного рогатого скота Histophilus somni методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации, разработан и утвержден комплект технической документации на тест-систему (СТО и инструкция по применению).

Разработана и утверждена в ФГБУ ВГНКИ методика идентификации и типирования изолятов возбудителя гемофилеза крупного рогатого скота Ш^^орИНш 8ошт методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации.

С помощью разработанной методики в период с 2019 по 2021 годы исследовано 484 пробы биологического материала из разных регионов Российской Федерации, из которых ДНК Ш^^орИНш 8ошт выявлена в 111 образцах.

Получены научные данные, подтверждающие циркуляцию на территории Российской Федерации штаммов Н. 8ошт, устойчивых к препаратам группы аминогликозидов.

Выявлены различные клинические формы заболеваний органов дыхания и акушерско-гинекологических патологий у коров и на основании этого были сформированы и разработаны методические рекомедации по оздоровлению скотоводческих хозяйств, неблагополучных по инфекционным заболеваниям, вызванным антибиотикорезистентными штаммами бактерий Ш^^орИНш яошт.

Методология и методы исследования

Методологическим подходом в достижении цели и решении поставленных задач является системное изучение объектов исследования, анализ и обобщение полученных результатов. В работе использованы молекулярно-генетические (выделение нуклеиновых кислот, ПЦР с электрофоретической детекцией и в режиме рельного времени, очистка продуктов ПЦР, секвенирование по Сенгеру), микробиологические и клинические методы исследования, а также статистические методы обработки данных.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

Подбор олигонуклеотидных праймеров для идентификации и детекции методом полимеразной цепной реакции в режиме «реального времени» ДНК Н. 8ошт, позволяющей выявлять генетический материал возбудителя гистофилеза

крупного рогатого скота в разном биологическом материале (суспензии органов, сперма, смывы, молоко).

Разработка метода выявления генов strA и strB H. somni, позволяющего выявлять устойчивые к аминогликозидам штаммы возбудителя гистофилеза крупного рогатого скота.

Подтверждение циркуляции штаммов возбудителя гистофилеза Histophilus somni, устойчивых к аминогликозидам, путем тестирования молуекулярно-генетическим методом.

Раскрытие механизмов устойчивости бактерий к антимикробным препаратам с использованием генотипического и микробиологического методов определения антибиотикорезистентности, позволяющего повысить эффективность мониторинга устойчивости микроорганизмов, выделяемых от продуктивных животных.

Разработка методических рекомендаций по оздоровлению скотоводческих хозяйств, неблагополучных по инфекционным заболеваниям, вызванным антибиотикорезистентными штаммами бактерий Histophilus somni, как эффективный метод этиотропного лечения акушерско-гинекологических и респираторных патологий крупного рогатого скота.

Степень достоверности и апробации результатов работы

Результаты работы были получены при использовании сертифицированного лабораторного оборудования, прошедшего поверку средств измерений согласно ГОСТ 8.513-84 и определяются достаточным количеством проведенных исследований. Разработанные методические рекомендации по оздоровлению скотоводческих хозяйств, неблагополучных по инфекционным заболеваниям, вызванным антибиотикорезистентными штаммами бактерий Histophilus somni (молекулярно-генетический метод выявления гистофилеза корупного рогатого скота и способы его лечения) утвержден секцией зоотехнии и ветеринарии Отделения сельскохозяйственных наук РАН и реализуется в повседневной работе скотоводческих хозяйств Московской области, а также в учебном процессе при

чтении лекций в ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина и ФГБУ «ВГНКИ».

Результаты исследований были представлены и обсуждены: на Х Международном ветеринарном конгрессе (Москва, 2021), Национальной научно-практической конференции «Актуальные вопросы биологии, биотехнологии, ветеринарии, зоотехнии, товароведения и переработки сырья животного и растительного происхождения» (ФГБОУ ВО МГАВМиБ, Москва, 2021), X Юбилейной Международной научно-практической конференции «Молекулярная диагностика» (Москва, 2021) и 3-й Международной научно-практической конференции «Молекулярно-гентические технологии анализа экспрессии генов продуктивности и устойчмвости к заболеваниям животных» (ФГБОУ ВО МГАВМиБ, Москва, 2021).

Соответствие паспорту специальности

Представленная диссертационная работа соответствует паспорту специальности с шифром 06.02.02. - Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология и раскрывает основные критерии формулы специальности. При осуществлении исследовательской работы изучены структура, физиология, биохимия, генетика патогенного микроорганизма Н.Ботш, имеющего актуальное ветеринарное назначение, раскрыты эпизоотологические закономерности возникновения, распространения инфекционных болезней у продуктивных сельскохозяйственных животных (крупный рогатый скот), а также, изучены и разработаны современные методы диагностики, лечения, профилактики и ликвидации болезней, вызванных Н1Б1:орЫ1ш Ботш, в отечественных скотоводческих хозяйствах. Диссертационная работа базируется на следующих областях исследований:

1. Природа и происхождение, структура, химический состав, морфологические, биологические, физико-химические свойства патогенных бактерий, вирусов и токсигенных грибов. Классификация возбудителей и вызываемых ими инфекционных болезней животных.

2. Теоретические и прикладные проблемы экологии микроорганизмов и вирусов.

3. Генетика, селекция и культивирование бактерий, вирусов, грибов.

4. Инфекционный процесс. Природа патогенности, процессы и механизмы взаимодействия микро- и макроорганизмов на всех уровнях (молекулярно-генетическом, клеточном, тканевом, организменном, популяционном) в условиях воздействия экзогенных и эндогенных факторов.

5. Методы выделения микроорганизмов и вирусов из патологического материала, средства и методы диагностики инфекционных болезней животных, индентификация патогенных микроорганизмов.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 8 работ, 5 статей — в изданиях, рекомендованных ВАК РФ. Разработаны и утвержденны в ФГБУ «ВГНКИ» методика и тест-система для идентификации и типирования изолятов возбудителя гемофилеза крупного рогатого скота Ш^^орИНш 8ошт методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации, разработан и утвержден комплект технической документации на тест-систему (СТО и инструкция по применению), получен патент № 2752893 на набор олигонуклеотидов и способ идентификации и детекции ДНК бактерии Ш^^орИНш 8ошш1 методом ПЦР в режиме реального времени.

Личный вклад

Все этапы работы: подготовка проб биоматериала, проведение молекулярно-генетических, микробиологических и клинических исследований; сбор и анализ полученных результатов; формулирование выносимых на защиту основных положений, заключений и выводов; подготовка к публикациям результатов исследований и апробация их на научно-практических конференциях были выполнены при непосредственном участии автора диссертационной работы. Разработку методики и тест-системы для выявления Histophilus somni методом

полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме «реального времени», а также подготовку технической документации на тест-систему осуществляли в ФГБУ «ВГНКИ» совместно с к.б.н. Яцентюк С.П., к.х.н. Поболеловой Ю. И. и к.б.н. Козловой А. Д. Лабораторное выделение и идентификацию возбудителя Histophilus somni микробиологическими методами осуществляли в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина» совместно с д.б.н., профессором Грязневой Т. Н. В выполнении отдельных фрагментов работы принимали участие сотрудники ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН д.б.н. Капустин А.В., к.б.н. Лаишевцев А.И. и сотрудники ФГБУ «ВГНКИ» к.б.н. Брюсова М.Б. и к.б.н. Красникова М.С. Их участие отражено в совместных публикациях. Всем соавторам выражаю глубокую благодарность за помощь и поддержку.

Объем и структура диссертационной работы

Диссертация изложена на 157 страницах машинописного текста и включает разделы: введение, обзор литературы, основное содержание работы, заключение, рекомендации и перспективы дальнейшей разработки темы. Библиографический список включает в себя 194 источника научной литературы, из которых 152 иностранных. Работа содержит 40 таблиц и 38 рисунков.

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА I. АНАЛИТИЧЕСКИЙ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ И ВЫБОР НАПРАВЛЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

1.1. Характеристика Histophilus somni

Histophilus somni — грамотрицательные, не образующие спор, некапсулированные, неподвижные, плеоморфные бактерии [64]. Возбудитель относится к типу Proteobacteria, классу Gammaproteobacteria. Ранее возбудитель был известен как Haemophilus somnus, Haemophilus agni и Histophilus ovis [68, 84]. Таксономическая принадлежность к Pasteurellaceae была впервые обозначена Angen и соавт. в публикации 2003 года, когда для этих организмов было предложено название Histophilus somni. Таксономическое положение этого вида было дополнительно изучено путем секвенирования генов 16S рДНК и rpoB, результаты которого явно подтверждают отнесение этого вида к новому роду Histophilus и виду H. somni в семействе Pasteurellaceae.

Фенотипическая характеристика H. somni

Histophilus somni — это привередливый микроорганизм, который растет только в обогащенных питательных средах, дополненных специальными питательными веществами, и для роста требует углекислый газ [108]. Бактерия растет медленно, колонии достигают размера 1-2 мм после 48 ч инкубации при 37°C. Изоляты H. somni могут иметь различный вид на кровяном агаре, поскольку они могут быть бета-гемолитическими, альфа-гемолитическими или негемолитическими.

'I. »оппи.а А в Ьоигз р.есси! Тво1а1и

Рис. 1. Рост 48-часовой культуры Histophilus somni на кровяном агаре (http://people.upei.ca/jlewis/html/7 demo.html)

Было показано, что рост недавно выделенных штаммов Н. 8отт зависит от CO2, они, по-видимому, могут постепенно адаптироваться к росту в полностью аэробных условиях [119]. Также сообщалось об изменении [37] Продукция индола наблюдается у большинства штаммов [39]. Однако некоторые штаммы не производят индола, существуют различия при описании штаммов, выделенных в разных лабораториях, особенно в отношении углеводного брожения. Так есть сведения о получении кислоты из D-фруктозы, D-ксилозы, D-маннозы, D-маннита, D-сорбита, ларабинозы, мальтозы и трегалозы [56]. Придирчивый характер Н. 8отт, вероятно, способствует их изменчивому фенотипическому виду, что затрудняет изоляцию и идентификацию микроорганизма. Наблюдаемая фенотипическая изменчивость (например, углеводное брожение) также может быть связана с различиями в составе ферментационных сред. Монофосфат тиамина также необходим для роста в отсутствие свежей сыворотки [39], а его недостаточный уровень подавляет рост и метаболические процессы.

Основные биохимические и фенотипические отличия Histophilus somni от других представителей Pasteurellaceae (родов Haemophilus, Actinobacillus, Pasteurella, Mannheimia) представлены в таблице 1.

Таблица 1

Сравнение свойств H. somni и других представителей Pasteurellaceae

Тест Histophilus Haemophilus Actinobacillus Pasteurella Mannheimia

Гемолиз +/- +/- +/- - +/-

Желтая пигментация + - - - -

Потребность в 10-15% СО2 + - - - -

Зависимость от фактора V - + +/- - -

Зависимость от фактора Х - + - - -

Каталаза - - + + +

Оксидаза + + +/- +/-

Уреаза - +/- + +/- -

Индол +/- - +

Орнитин декарбоксилаза - +/- - +/- +/-

Глюкоза - - + + +

Б-галактоза - +/- +/- + +

Б-фруктоза - +/- + + +

Мальтоза - + + +/- +/-

Трегалоза - - +/- +/- -

+ — наличие только положительных реакций;

--наличие только отрицательных реакций;

+/--наличие положительных или отрицательных реакций;

* — наличие штаммов с отличающимися реакциями (0ystein А^еп, 2016).

ГЕНОМ H. somni

Наибольшее сходство по последовательности гена 16S рРНК H. somni с другими представителями семейства Pasteurellaceae составляет 93,4%.

100

59

64

51

S3

Escherichia coli Phocoenobacter uteri NCTC 12872

Haemophilus influenzae ATCC 33391T Pasteurella muftocida NCTC 103221" Lonepinella koalarum ACM 3666 Actinobacillus lignieresii NCTC 4189T

68

Histophilus somni iqq

[Г

0.02

Mannheimia haemolytica NCTC 9380T

8025T = CCUG 361 57T = ATCC 43625T CCUG 18778 CCUG 46775 CCUG 12839 CCUG 18777 CCUG 46772 CCUG 18780 CCUG 36158 CCUG 47046 2336 = CCUG 46769 CCUG 18779 CCUG 47050 CCUG 47046 CCUG 46774 CCUG 46771 CCUG 46770 CCUG 47049 CCUG 47048 CCUG 46773

С

Рис. 2. Филогенетический анализ на основе последовательностей 16S рДНК изолятов Histophilus somni и типовые виды родов семейства Pasteurellaceae (Angen et al., 2003)

На рисунке 2 представлено филогенетическое дерево, построенное на основе анализа последовательностей 16Б рРНК Pasteurellaceae, демонстрирующее родство этого микроорганизма и других представителей семейства. Типовым штаммом H. somni является штамм 8025Т = АТСС 43625Т = ССиО 36157Т, выделенный в США из головного мозга крупного рогатого скота с поражениями тромботического менингоэнцефалита [68, 137]. Содержание G + С в типовом штамме составляет 37,5 мол.% [84].

В 2007 году была опубликована последовательность генома штамма H. somni 129Р^ выделенного из репродуктивного тракта КРС [116]. Вторая

последовательность генома H. somni штамма 2336, выделенного из легких больного пневмонией теленка, была опубликована в 2011 году [176]. Анализ этих последовательностей генома H. somni показал, что геномы несколько отличаются. Геном штамма 2336 содержит 1980 генов, кодирующих белок (2 263 857 п.н.), тогда как хромосома штамма 129Pt содержит только 1792 гена, кодирующего белок (2 007 700 п.н.). Сравнение геномов штаммов 2336 и 129Pt показало, что большинство генов и локусов, общих для этих двух штаммов, были расположены в разных регионах двух хромосом и имели противоположную ориентацию, что указывает на перестройки генома с момента их расхождения от общего предка. Их анализ также показал, что горизонтальный перенос генов, опосредованный бактериофагами и транспозонами, произошел в нескольких локусах в хромосомах двух штаммов. Следовательно, мобильные элементы, по-видимому, сыграли важную роль в создании геномного разнообразия и фенотипической изменчивости между двумя штаммами. У этих двух штаммов было 1586 общих генов, кодирующих белки. Было обнаружено, что штамм 2336 имеет большее количество уникальных генов (315/2012, 16%), чем штамм 129Pt (152/1844, 8%) [116]. Также следует отметить, что ряд генов, присутствующих в штамме 2336, но отсутствующих в штамме 129Pt, кодируют предполагаемые факторы вирулентности, такие как адгезины аутотранспортеров, гомологи нитчатого гемагглютинина (Fha), системы рестрикции-модификации, профагоподобные последовательности и некоторые белки биосинтеза липоолигосахаридов с переменной фазой (LOS) [169]. Однако широкие обобщения относительно генетических особенностей H. somni не могут быть применены ко всему виду, пока не будут секвенированы геномы дополнительных штаммов. Еще одно интересное наблюдение заключается в том, что H. somni и некоторые важные патогены человека (например, Bordetella, Neisseria и Haemophilus spp.) имеют несколько общих черт, включая образование биопленок, изменение фазы LOS, сиалирование и синтез гомологичных Fha и OMP [72, 100]. Таким образом, инфекции H. somni у крупного рогатого скота могут оказаться полезными моделями для изучения

специфических для хозяина патогенов, которые не могут быть изучены у человека-хозяина [169].

1.2. Заболевания, вызываемые Histophilus somni

H. somni является нормальным обитателем верхних дыхательных путей и нижних репродуктивных трактов крупного и мелкого рогатого скота и может вызывать мультисистемное заболевание у животных с ослабленным иммунитетом, известное как гистофилёз, поражая различные органы [124]. H. somni чаще всего вызывает респираторные заболевания, но может также вызывать миокардит, перикардит, плеврит, «тромботический менингоэнцефалит» (ТМЭ), полиартрит, конъюнктивит и отит у крупного рогатого скота на откорме [187]. Первоначально H. somni был выделен в 1956 году в США от быков с инфекционным менингоэнцефалитом и описан как «Haemophilus-подобный микроорганизм» [74, 189]. При этом H. somni поражает сосудистую ткань (кровеносные сосуды) и эндотелий органов, вызывая воспаление и тромбоз (образование сосудистой обструкции), который прерывает кровоснабжение и вызывает локальную клеточную гибель. При ТМЭ вовлечение в патологический процесс центральной нервной системы приводит к нарушению притока крови к спинному и головному мозгу, вызывая у крупного рогатого скота комплекс симптомов, включая лихорадку, депрессию, слепоту, кому и внезапную гибель животного [186].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Рудняев Данил Александрович, 2022 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

1. Алёшина Б. В. Руководство по эндокринологии / Б.В. Алёшина ; под ред. С.Г. Генеса, В. Г. Вогралика. - М. : Медицина, 1973. - 512 с. - Текст : непосредственный.

2. Асоев П. Эффективность применения антимикробных и гормональных препаратов при лечении послеродового эндометрита у коров в условиях Согдийской области республики Таджикистан / П. Асоев, К. Б. Махмудов, К. З. Мусаямова - Текст : непосредственный // Материалы Междунар. научно-практической конференции «Перспективы и актуальные проблемы развития высокопродуктивного молочного и мясного скотоводства». - Витебск, 2017. - С. 8-9.

3. Багманов М. А. Акушерско-гинекологическая патология коров (Диагностика, комплексная терапия и профилактика) / М. А. Багманов. - Ульяновск, 2005. -207 с. - Текст : непосредственный.

4. Баймишев М. Х. Морфофункциональный статус коров при послеродовой патологии / М. Х. Баймишев, О. Н. Пристяжнук. - Текст : непосредственный // Материалы Междунар. научно-практической конференции, посвященной 85-летию со дня рождения профессора Г. А. Черемисинова. - Воронеж, 2012. - С. 83-87.

5. Белкин Г. А. Эндометрит у коров - профилактика и комплексное лечение / Г. А. Белкин. - Текст : непосредственный // Молочное и мясное скотоводство. - 2014.

- №7. - С. 32.

6. Вакуленко С. Б. Бактериальные ферменты, инактивирующие аминогликозидные антибиотики и кодирующие их гены. - Текст : непосредственный / С. Б. Вакуленко // Антибиотики. - 1992. - № 4. - С. 49-54.

7. Васильев В. Д. Способы лечения острых послеродовых эндометритов : учебник / В. Д. Васильев. - Омск, 1993. - 304 с. - Текст : непосредственный.

8. Воронин В. В. Лечение коров при эндометрите : учебник / В. В. Воронин, 1977.

- 267 с. - Текст : непосредственный.

9. Выявление генетических детерминант устойчивости к антибиотикам возбудителя гистофилеза крупного рогатого скота НМорЫ1ш Ботш / Д. А. Рудняев, С. П. Яцентюк, А. В. Капустин, Т.Н. Грязнева. - Текст : непосредственный // Актуальные вопросы биологии, биотехнологии, ветеринарии, зоотехнии, товароведения и переработки сырья животного и растительного происхождения : сборник материалов национ. науч.-практ. конф.

- М., 2021. - Ч. 1. - С. 86-87.

10.Выявление ДНК Histophilus sommi в сперме крупного рогатого скота методом полимеразноцепной реакции в режиме реального времени / С. П. Яцентюк, Д. А. Рудняев, Ю. И. Поболелова, А. Д. Козлова. - Текст : непосредственный // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2020. - №2. -С. 58-59.

11. Выявление устойчивости к антибиотикам у возбудителя гистофилеза крупного рогатого скота Histophilus somni / С. П. Яцентюк, Ю. И. Поболелова, Д. А. Рудняев [и др.]. - Текст : непосредственный // Сельскохозяйственная биология.

- 2021. - Т. 56, №2. - С. 304-314.

12.Гистофилёз крупного рогатого скота / А. В. Капустин, Н. В. Моисеева, А. И. Лаишевцев [и др]. - Текст : непосредственный // RJOAS. - 2017. - №10(70).

13.Гистофилёз крупного рогатого скота и выявление ДНК Histophilus sommi методом ПЦР в режиме «реального времени» / С. П. Яцентюк, Д. А. Рудняев, Ю. И. Поболелова [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 2020. - №11.

- С. 28-33.

14.Грибов К. П. Диагностика и терапия послеродовых эндометритов у коров, вызванных Haemophilus somnus : автореф. дисс. ... канд. биол. наук. -Новочеркасск, 2011. - Текст : непосредственный.

15. Грибов К. П. Распространение послеродовых эндометритов у коров, вызванных Haemophilus somnus / К. П. Грибов, А. Г. Ключников, С. Н. Карташов. - Текст : непосредственный // Ветеринарная патология - 2011. - № 1-2. - С. 18-19.

16.Ельчанинов В. В. Проблемы физиологии и патологии репродуктивной функции коров. Ч. I. / В. В. Ельчанинов. - Быково : Щербинская типогр., 1997. - 291 с. -Текст : непосредственный.

17. Иммуногенные свойства возбудителя гистофилеза (стадного бесплодия)

крупного рогатого скота / А. В. Капустин, А. И. Лаишевцев, Е. В. Иванов [и др.].

- Текст : непосредственный // Ветеринария, Зоотехния и Биотехнология. - 2020.

- №7. - С. 31-41.

18.Казеев Г. Учение о половом цикле - теоретическое обоснование организации искусственного осеменения коров / Г. Казеев. - Текст : непосредственный // Животноводство. - 2002. - №7-8. - С.10-12; №9. - С. 8-10; №10. - С. 10-12.

19. Кирюткин Г. В. Справочник ветеринарных препаратов, химиотерапевтические препараты / Г. В. Кирюткин, Б. А. Тимофеев, В. А. Созинов. - Киров, 1997. - 597 с. - Текст : непосредственный.

20.Кодекс здоровья наземных животных / Всемирная организация здоровья животных. МЭБ. - Paris : World Organisation For Animal Health, 2019. - 566 с. -

URL: https://fsvps.gov.ru/fsvps-docs/ru/oie/oie terrestrial code g tl.pdf (дата обращения: 15.09.2021). - Текст : электронный.

21.Лаишевцев А. И. Клинико-эпизоотологическое обоснование вакцино-профилактики и разработка вакцины против манхеймиоза крупного и мелкого рогатого скота : специальность 06.02.02 «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология»; 03.01.06 «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)» : дисс. ... канд. биол. наук : защищена 2018 / А. И. Лаишевцев. - Москва, 2018. - 155 с. - Место защиты : ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН. - Текст : непосредственный.

22.Лечение гнойно-катарального эндометрита у коров / В. И. Великанов, С. П. Седов, А. В. Кляпнев [ и др.]. - Текст : непосредственный // Материалы Междунар. научно-практической конференции «Перспективы и актуальные проблемы развития высокопродуктивного молочного и мясного скотоводства».

- Витебск, 2017. - С. 10-12.

23.Макаров В. В. Сапронозы, факторные и оппортунистические инфекции (к истории этиологических воззрений в отечественной эпидемиологии и эпизоотологии) / В. В. Макаров. - Текст : непосредственный // Ветеринарная патология. - 2008. - 1(24). - 11-21.

24. Нежданов А. Г. Послеродовая инволюция и субинволюция матки у коров / А. Г. Нежданов, В. Д. Мисайлов. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1996.

- № 12. - С. 37-39.

25.Нежданов А. Г. Физиология и патология родов и послеродового периода у сельскохозяйственных животных / А. Г. Нежданов. - Воронеж, 1999. - 60 с. -Текст : непосредственный.

26.Нефедченко А. В. Комплексная система диагностики и генетического типирования ведущих возбудителей респираторных болезней крупного рогатого скота на основе методов молекулярной биологии в современных условиях ведения молочного животноводства : специальность 06.02.02 : дис. ... доктора ветеринарных наук / А. В. Нефедченко. - Краснодар, 2018. - 434 с. - Место защиты : Кубан. гос. аграр. ун-т. - Текст : непосредственный.

27.Пастереллез крупного рогатого скота на молочных комплексах: частота выделения и характеристика культур / Т. И. Глотова, А. Г. Глотов, Т.Е. Терентьева [и др.]. - Текст : непосредственный // Российский ветеринарный журнал. - 2012. - 3. - С. 32-35.

28.Полянцев А. Н. Акушерско-гинекологическая диспансеризация на молочных фермах / Н. И. Полянцев, А.Н. Синявин. - 2-е издание, перераб. и доп. - М. : Росагропромиздат, 1989. - С. 174. - Текст : непосредственный.

29. Практическое руководство по антиинфекционной химиотерапии / под ред. Л. С. Страчунского, Ю. Б. Белоусова, С. Н. Козлова. - Смоленск : НИИАХ СГМА, 2007. - Текст : непосредственный.

30.Применение индексов тяжести в диагностике септических метропатий: Методические рекомендации / С. Н. Карташов, Г. Б. Чулкова, А. И. Клименко [и др.]. - Новочеркасск: ЮРГТУ, 2005. - 29 с. - Текст : непосредственный.

31.Проблема резистентности к антибиотикам возбудителей болезней, общих для человека и животных / А. Н. Панин, А. А. Комаров, А. В. Куликовский, Д. А. Макаров. - Текст : непосредственный // Ветеринария и зоотехния. - 2017. -№ 5.

- С. 18-24.

32.Разработка метода идентификации и генотипирования бактерий Pasteurella multocida и МаппЬе^а Иаето1у:юа на основе полимеразной цепной реакции и филогенетический анализ культур бактерий, выделенных от крупного рогатого скота / А. В. Нефедченко, А. Н. Шиков А. Г. Глотов [и др.]. - Текст : непосредственный // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. -2016. - №2. - С. 62-66.

33.Распространенность бактерий семейства Рав1еиге11асеае у крупного рогатого

скота хозяйств Московской и Тверской областей / А. Д. Козлова, С. П. Яцентюк, Д. А. Рудняев [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария и кормление. -2021. - № 4. - С. 28-31.

34.Распространенность бактерий семейства Рав1еиге11аееае у крупного рогатого скота в различных регионах Российской Федерации / Ю. И. Поболелова, С. П. Яцентюк, А. Д. Козлова, Д. А. Рудняев. - Текст : непосредственный // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. - 2021. -№ 5. - С. 18-25.

35.Решедько Г. К. Значение ферментативной модификации аминогликозидов в развитии резистентности у бактерий / Г. К. Решедько. // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. -1999. - №1. - С. 40-50.

36. Сидоренко С В. Механизмы резистентности микроорганизмов / С. В. Сидоренко.

- Текст : непосредственный // БИО. - 2005. - № 5 (56). - С. 2-4.

37. Сидоров М. А. Гемофилезы животных / М. А. Сидоров, Д. И. Скородумов. - М. : Агропромиздат, 1986. - С. 104-127. - Текст : непосредственный.

38. Сидоров М. А. Роль гемофилюс сомнус в патологии крупного рогатого скота / М. А. Сидоров, Д. И. Скородумов. - Текст : непосредственный // Труды ВИЭВ, 1980. - Т. 52.

39. Скородумов Д. И. Потребность бактерий рода Гемофилюс в ростовых факторах / Д. И. Скородумов, Ю. К. Гумбатов. - Текст : непосредственный // Бюллетень ВИЭВ. - 1983. - Вып. 45.

40.Шибаев М. А. Выявление Pasteurella multocida у крупного рогатого скота в центральном федеральном округе: клинико-эпизоотологическая оценка / М. А. Шибаев, C. A. Дудников, Л. Б. Прохватилова. - Текст : непосредственный // Ветеринарная патология. - 2009. - №4. - С. 50-55.

41. Шибаев М. А. Разработка и применение методов молекулярной биологии для выявления возбудителей бактериальных респираторных инфекций крупного рогатого скота: специальность: 06.02.02 «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» : автореферат дис. ... кандидата ветеринарных наук: защищена 15.06.2010 / М. А. Шибаев. - Владимир, 2010. - 16 с. - Место защиты: ФГУ «ВНИИЗЖ». - Текст : непосредственный.

42. (https://www.who.int/campaigns/world-antimicrobial-awareness-week/2020)

43.A 4-year survey of antimicrobial susceptibility trends for isolates from cattle with bovine respiratory disease in North America / J. L. Watts, R. J. Yancey, S. A. Salmon,

C. A. Case // Journal of Clinical Microbiology. - 1994. - Vol. 32. - P. 725-731.

44.A new tetracycline resistance determinant, Tet H, from Pasteurella multocida specifying active efflux of tetracycline / L. M. Hansen, L. M. McMurry, S. B. Levy,

D. C. Hirsh // Antimicrob. Agents Chemother. - 1993. - Vol. 37, No. 12. - P. 26992705.

45.A review of alternative practices to antimicrobial use for disease control in the commercial feedlot - Executive summary / C. S. Ribble, T. Stitt, S. Iwasawa [et al.] // Can. J. Infect. Dis. Med. Microbiol. - 2010. - Vol. 21(3). - P. 128-129.

46.A ten-year (2000-2009) study of antimicrobial susceptibility of bacteria that cause bovine respiratory disease complex - Mannheimia haemolytica, Pasteurella multocida, and Histophilus somni - in the United States and Canada / E. Portis, C. Lindeman, L. Johansen, G. Stoltman // J. Vet. Diagnostic Investig. - 2012. - Vol. 24(5). - P. 932944.

47.Aarestrup F. M. Antimicrobial susceptibility of Haemophilus parasuis and Histophilus somni "Haemophilus somnus " from pigs and cattle in Denmark / F. M. Aarestrup, A. M. Seyfarth, O. Angen // Vet. Microbiol. Netherlands. - 2004. - Vol. 101(2). - P. 143146.

48.Aarts H. J. M. Molecular Methods for Detection of Antibiotic Resistance / Aarts H. J. M, B. Guerra, B. Malorny //Antimicrobial Resistance in Bacteria of Animal Origin. American Society of Microbiology. - 2006. - P. 37-48.

49.Aerosol infection of calves with Histophilus somni / K. Janosi, L. Stipkovits, R. Glavits [et al.] // Acta Vet Hung. - 2009. - Vol. 57. - P. 347-356.

50.Alberta Cattle Feeder's Association. Beef Cattle Facts and Stats [Internet]. 2016. -Available from: http://www.cattlefeeders.ca/industry-overview/alberta-cattle-feeding-facts-and-stats/.

51.Alfieri A. A. The effect of the herpes virus of bovine type 1 on the reproductive system of cattle / A. A. Alfieri, A. F. Alfieri, K. C. Medici // Semina Sienkas Agrarias. - 1998. - No.19. - P. 86-93.

52.Alvarez-Ortega C. RND multidrug efflux pumps: What are they good for? / C. Alvarez-Ortega, J. Olivares, J. L. Martinez // Front Microbiol. - 2013. - No.4(FEB). - P. 1-11.

53.Aminoglycoside susceptibility of Pasteurella multocida isolates from bovine respiratory infections in China and mutations in ribosomal protein S5 associated with high-level induced spectinomycin resistance / Z. Wang, L. C. Kong, B. Y. Jia [et al.] // J. Vet. Med. Sci. - 2017. - Vol. 79, No. 10. - P. 1678-1681.

54.Anderson M. L. Infectious causes of bovine abortion during midto late-gestation / M. L. Anderson M.L. // Theriogenology. - 2007. - Vol. 68. - P. 474-486.

55.Andrews J. J. Microscopic lesions associated with the isolation of Haemophilus somnus from pneumonic bovine lungs / J. J. Andrews, T. D. Anderson, L. N. Slife, G. W. Stevenson // Vet. Pathol. - 1985. - Vol. 22. - No. 2. - P. 131-136.

56.Angen O. Development of a PCR test to identify Haemophilus somnus in pure and mixed cultures / O. Angen, P. Ahrens, C. Tegtmeier // Veterinary Microbiology. -1998. - Vol.63. - P. 39-48.

57.Antimicrobial Resistance Global Report on surveillance, World Health Organization. 2014. - Available from : http://www.who.int/ drugresistance/en/.

58.Antimicrobial Resistance in Members of the Family Pasteurellaceae / C. Kehrenberg, Stefan, R. D. Walker, C. C. Wu // Pub2Web. - 2006. - P. 167-86.

59.Antimicrobial use on 24 beef farms in Ontario / C. A. Carson, R. Reid-Smith, R. J. Irwin[et al.] // Can. J. Vet. Res. - 2008. - Vol.72(2 SPEC. ISS.). - P.110-118.

60.Appuhamy S. Genomic fingerprinting of Haemophilus somnus by a combination of PCR methods / S. Appuhamy, R. Parton, J. G. J. Coote, H. A. H. Gibbs // J. Clin. Microbiol. - 1997. - Vol. 35(1). - P. 288-291.

61.Appuhamy S. PCR methods and plasmid profile analysis for characterisation of Histophilus ovis strains / S. Appuhamy, J. C. Low, J. G. Coote, R. Parton // J. Med. Microbiol. - 1998. - Vol. 47(11). - P. 987-992.

62.Associations between antimicrobial use and the prevalence of antimicrobial resistance in fecal / S. L. Checkley, J. R. Campbell, M. Chirino-trejo [et al.] // Can. Vet. J. -2010. -Vol. 51(August).

63.Bacterial Multidrug Efflux Pumps: Much More Than Antibiotic Resistance Determinants / P. Blanco, S. Hernando-Amado, J. Reales-Calderon[et al.] // Microorganisms. - 2016. - Vol.4(1). - P.14.

64.Bailie W. E. Characterization of Haemophilus somnus, a new species, a microorganism isolated from infectious thromboembolic meningoencephalitis of cattle: PhD Dissertation (1969).

65.Bano L. Recurrent detection of Histophilus somni in the genital tract of dairy cattle with reproductive failures in Italy / L. Bano, M. Bonci, I. Drigo I. [et al.] // Large Anim. Review. - 2011. - Vol. 17. - P. 171-176.

66.Beaber J.W. SOS response promotes horizontal dissemination of antibiotic resistance genes / J. W. Beaber, B. Hochhut, M. K. Waldor // Nature. - 2004. - Vol.427(6969).-P. 72-74.

67.Benedict K. M. Antimicrobial resistance in Escherichia coli recovered from feedlot cattle and associations with antimicrobial use / K. M. Benedict, S. P. Gow, T. A. McAllister [et al.] // PLoS One. - 2015. - Vol.10(12). - P.21.

68.Brown W. W. Infectious embolic meningoencephalitis in cattle / W. W. Brown, L. A. Griner, R. Jensen // J. Am. Vet. Med. Assoc. - 1956. - Vol. 129. - No. 9. - P. 417-421.

69.Bryan L. E. General mechanisms of resistance to antibiotics / L. E. Bryan // J. Antimicrob. Chemother. - 1988. - Vol. 22. - P. 1-15.

70.Bush K. Carbapenemases: Partners in crime / R. Bush // Journal of Global Antimicrobial Resistance. - 2013. - Vol. 1. - P. 16-17.

71.Cattle fertility problems and Histophilus somni / G. Van der Burgt, W. Clark, R. Knight, K. Colles // Veterinary Record. - 2007. - Vol.160. - P.600.

72.Characterization and comparison of biofilm development by pathogenic and commensal isolates of Histophilus somni / I. Sandal, W. Hong, W. E. Swords, T. J. Inzana // J. Bacteriol. - 2007. - Vol.189, No.22. - P. 8179-8185.

73.Chopra I. Tetracycline Antibiotics: Mode of Action, Applications, Molecular Biology, and Epidemiology of Bacterial Resistance / I. Chopra, M. Roberts // Microbiology and Molecular Biology Reviews. - 2001. - Vol. 65. - P. 232-260.

74.Church T. L. A retrospective survey of diseases of feedlot cattle in Alberta / T. L. Church, O. M. Radostits // Can. Vet. J. - 1981. - 22(2). - P. 27-30.

75.Clinical disease and lung lesions in calves days after metaphylactic administration of tildipirosin. - 2016. - Vol. 77(4).

76.CLSI. Performance Standards for Antimicrobial Disk and Dilution Susceptibility Tests for Bacteria Isolated From Animals; Approved Standard. - Third Edition. CLSI document M31-A3. - Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, 2008.

77.CLSI. Performance Standards for Antimicrobial Disk and Dilution Susceptibility Tests for Bacteria Isolated From Animals; Approved Standard - Fourth Edition. CLSI document VET01-A4. - Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, 2013.

78.Comparative analyses of two cryptic plasmids from Haemophilus somnus (Histophilus somni) / S. Siddaramappa, A. J. Duncan, T. Brettin, T. J. Inzana / Plasmid, 2006. -Vol. 55(3). - P.227-234.

79.Co-occurrence of resistance genes to antibiotics, biocides and metals reveals novel insights into their co-selection potential / C. Pal, J. Bengtsson-Palme, E. Kristiansson, D. J. J. Larsson // BMC Genomics. - 2015. - Vol. 16(1). - P. 964.

80.Corbeil L.B. Histophilus somni host-parasite relationship / L. B. Corbeil // Animal Health Research Reviews. - 2007. - No.8. - P.151-160.

81.Co-selection of antibiotic and metal resistance / C. Baker-Austin, M. S. Wright, R. Stepanauskas, J. V. McArthur // Trends Microbiol. - 2006. - Vol.14(4). - P.176-182.

82.De Jong A. Antimicrobial susceptibility monitoring of respiratory tract pathogens isolated from diseased cattle and pigs across Europe: the VetPath study / A. De Jong, V. Thomas, S. Simjee // Veterinary Microbiology. - 2014. - Vol.172(1-2). - P. 202215 (doi: 10.1016/j.vetmic.2014.04.008).

83.DeDonder K. D. A literature review of antimicrobial resistance in Pathogens associated with bovine respiratory disease / K. D. DeDonder, M. D. Apley // Anim. Heal. Res. Rev. - 2015. - P. 1-10.

84.Deoxyribonucleic acid relationships of "Histophilus ovis / Haemophilus somnus", Haemophilus haemoglobinophilus, and "Actinobacillus seminis"/ K. Piechulla, R. Mutters, S. Burbach S. [et al.] // Int J. Syst. Bacteriol. - 1986. - Vol. 36. - P. 1-7.

85.Dewey K. J. Environmental survival of Haemophilus somnus and influence of secretions and excretions / K. J. Dewey, P. B. Little // Can. J. Comp. Med. - 1984. -Vol. 48(1). - P. 23-26.

86.Differentiation between bovine and ovine strains of Histophilus somni based on the sequences of 16S rDNA and rpoB gene / A. Tanaka, K. Hoshinoo, T. Hoshino, Y. Tagawa // J. of Veterinary Medical Science. - 2005. -Vol.67. - P.255-262.

87.Diseases and pathogens associated with mortality in Ontario beef feedlots / M. I. Gagea, K. G. Bateman, T. van Dreumel [et al.] // J. Vet. Diagn. Invest. - 2006. - Vol. 18(1). - P. 18-28.

88.Divers T. D. Respiratory diseases, Rebhun's diseases in dairy cattle. Saunders / T. D. Divers. - St. Louis, Missouri : Elsevier, 2008. - P. 79-96.

89.Does the use of antibiotics in food animals pose a risk to human health? A critical review of published data / I. Phillips, M. Casewell, T. Cox [et al.] // J. Antimicrob Chemother. - 2004. - Vol. 53(1). - P. 28-52.

90.Effect of Actinomyces pyogenes and gram-negative anaerobic bacteria on the development of bovine pyometra / P. W. Farin, L. Ball, J. D. Olson [et al.] // Theriogenology. - 1989. - No.31. - P. 979-989.

91. Efficacy of a treatment of retained placenta in diary cows with prostaglandin F2 alpha in addition to a local antibiotic treatment / M. Drillich, A. Schroder, B. A. Tenhagen, W. Heuwiser // Deutsche Tierarztliche Wochenschrift. - 2005. - No. 112 . - P.174-179.

92.Efficacy of parenteral antibiotics for disease prophylaxis in feedlot calves / R. J. Harland, G. Kee Jim, P. T. Guichon [et al.] // Can. Vet. J. - 1991. - Vol. 32(3). - P. 163-168.

93.Evaluation of health status of calves and the impact on feedlot performance: assessment of a retained ownership program for postweaning calves / R. W. Fulton, B. J. Cook, D. L. Step [et al.] // Can. J. Vet. Res. - 2002. - Vol. 66 (3). - P. 173-180.

94.Fekto G. Bacterial meningitis and encephalitis in ruminants / G. Fekto, L. V. George // Veterinary clinics in North America. Food Animal Practice. - 2004. - Vol. 20. P. -363-377.

95.Frederick W. The Haemophilus somnus disease complex (Hemophilosis): A review / W. Frederick, Harris, E. D. Janzen // Can. Vet. J. - 1989. - Vol. 30. - P. 816-822.

96.Frost L. S. Mobile genetic elements: the agents of open source evolution / L. S. Frost, R. Leplae, A. O. Summers, A. Toussaint // Nat. Rev. Microbiol. - 2005. - Vol.3(9). -P. 722-732.

97.Fussing V. Characterization of bovine Haemophilus somnus by biotyping, plasmid profiling, REA-patterns and ribotyping / V. Fussing, H. C. Wegener // Zentralbl Bakteriol. - 1993. - Vol. 279(1). - P. 60-74.

98.Gallo G. F. Efficacy of a feed-additive antibacterial combination for improving feedlot cattle performance and health / G. F. Gallo, J. L. Berg // Can. Vet. J. - 1995. - Vol. 36.

- No. 4. - P. 223-229.

99.Galyean M. L. The future of beef production in North America / M. L. Galyean, C. Ponce, J. Schutz // Anim. Front. - 2011. - No. 1. - P. 29-36.

100. Garcia-Delgado G. a. A comparison of various Haemophilus somnus strains / G. a Garcia-Delgado, P. B. Little, D. a. Barnum // Can. J. Comp. Med. -1977. - Vol. 41(4).

- P. 380-388.

101. Genetic diversity and tetracycline resistance genes of Histophilus somni / G. H. D'Amours, T. I. Ward, M. R. Mulvey [et al.] // Vet. Microbiol. - 2011. - Vol. 150, No. 3. - P. 362-372.

102. George L. V. Thrombosis meningioencephalitis (Histophilus somni [Haemophilus somuns] infection; sleeping calves) / L. V. George ; ed. B. P. Smith // Large Animal

Internal Medicine. - 4-th ed. Mosby. - St. Louis, Missouri : Elsevier, 2009. - P. 10481050.

103. Gilbert R. O. Uterine disease in the postpartum period Uterine disease in the postpartum period / R. O. Gilbert // 15th International Congress on Animal Reproduction, Workshop Communications, Porto Seguro. - 2004. - P. 66-73.

104. Godinho K. S. Efficacy of tulathromycin in the treatment and prevention of natural outbreaks of bovine respiratory disease in European cattle / K. S. Godinho, RM-LG Wolf, J. Sherington [et al.] // Vet. Ther. United States. - 2005. - Vol. 6(2). - P. 122135.

105. Guardabassi L. Modes of Antimicrobial Action and Mechanisms of Bacterial Resistance / L. Guardabassi, P. Courvalin // Antimicrobial Resistance in Bacteria of Animal Origin, 2006. - P. 1-16.

106. Guichon P. T. Haemophilus somnus myocarditis in a feedlot steer / P. T. Guichon, J. Pritchard, G. K. Jim // Can. Vet. J. - 1988. - Vol. 29(12). - P. 1012-1013.

107. Gunn, A.A., Naylor J.A., House J.K., 2009. Diarrhea, in: Smith, B.P. (Ed.), Large Animal Internal Medicine, 4th ed. Mosby/Elsevier, St. Louis, Missouri, pp. 340-362.

108. Haemophilus and Histophilus species / B. Markey, L. Finola, M. Archambault, D. M. Cullinane // Clinical Veterinary Microbiology. - 2013. - P. 349-354.

109. Haemophilus somnus: Bovine Reproductive and Respiratory Disease / L. B. Corbeil, P. R. Widders, R. Gogolewski [et al.] // Canadian Veterinary Journal. - 1986. - No. 27(2). - P.90-93.

110. Haines D. M. Immunohistochemical study of Hemophilus somnus, Mycoplasma bovis, Mannheimia hemolytica, and bovine viral diarrhea virus in death losses due to myocarditis in feedlot cattle / D. M. Haines // Can. Vet. J. - 2004. - Vol. 45. - P. 231234.

111. Hansen L.M. Distribution of tet(H) among Pasteurella isolates from the United States and Canada / L. M. Hansen, P. C. Blanchard, D. C. Hirsh // Antimicrob. Agents Chemother. - 1996. - Vol. 40, No. 6. - P. 1558-1560.

112. Harris F. W. The Haemophilus somnus disease complex (hemophilosis): Overview / F. W. Harris, E. D. Janzen // Canadian Vet. J. - 1989. - Vol. 30. - P. 816-822.

113. Hendriksen R. S. Prevalence of antimicrobial resistance among bacterial pathogens isolated from cattle in different European countries: 2002-2004 / R. S. Hendriksen, D. Mevius, A. Schroeter // Acta veterinaria Scandinavica. - 2008. - Vol. 50(1). - P. 28 (doi: 10.1186/1751-0147-50-28).

114. Histopathological evaluation of disseminated intravascular coagulation in Haemophilus somnus infection in cattle / E. Momotani, Y. Yabuki, H. Miho [et al.] // Journal of Comparative pathology. - 1985. - Vol. 95. - P.15-23.

115. Histophilus somni Survives in Bovine Macrophages by Interfering with Phagosome-Lysosome Fusion but Requires IbpA for Optimal Serum Resistance. Infect Immun / Y. Pan, Y. Tagawa, A. Champion [et al.]. - 2018. - Vol. 86(12). - P. 18-65 (doi: 10.1128/IAI.00365-18).

116. Horizontal gene transfer in Histophilus somni and its role in the evolution of pathogenic strain 2336, as determined by comparative genomic analyses / S. Siddaramappa, J. F. Challacombe, A. J. Duncan [et al.]. - BMC Genomics. BioMed Central Ltd, 2011. - Vol. 12(1). - P.570.

117. Identification of Histophilus somni by a nanomaterial optical fiber biosensor assay / A. B. Bandara, Z. Zuo, K. McCutcheon, S. Ramachandran [et al.] // Journal of Veterinary Diagnostic Investigation - 2018. - Vol. 30. - No. 6. - P. 821-829.

118. Improved detection of bovine coronavirus N gene in faeces of calves infected naturally by a semi-nested PCR assay and an internal control / E. Takiuchi, D. T. Stipp, A. F. Alfieri, A. A. Alfieri // Journal of Virological Methods, 2006. - P. 131, 148-154.

119. Infectious meningo-encephalitis in cattle, caused by a Haemophilus-like organism / P. C. Kennedy, E. L. Biberstein, J. A. Howarth [et al.] // Am. J. Vet. Res. - 1960. -Vol. 21. - P. 403-409.

120. Integrative Conjugative Element ICEHs1 Encodes for Antimicrobial Resistance and Metal Tolerance in Histophilus somni / K. Bhatt, E. Timsit, N. Rawlyk [et al.] // Frontiers in veterinary science. - 2018. - No.5. - P.153. (doi: 10.3389/fvets.2018.00153).

121. Isolation and antimicrobial susceptibilities of bacterial pathogens from bovine pneumonia: 1994-2002 / R. D. Welsh, L. B. Dye, M. E. Payton, A. W. Confer // Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. - 2004. - Vol. 16. - P. 426-431.

122. Isolation of Histophilus somni on sheep with endometritis the first case in Brazil / J. Rizzo, L. Gregory, A. F. Carvalho, E. S. Pinheiro // Revista Brasileira de Reprodu?ao Animal. - 2012. - Vol. 36. - P.136-138.

123. Ives S. E. Use of Antimicrobial Metaphylaxis for the Control of Bovine Respiratory Disease in High-Risk Cattle / S. E. Ives, J. T. Richeson // Vet. Clin. North Am. Food Anim. Pract. - 2015. - Vol. 31(3). - P. 341-350.

124. Janzen E. D. Overview of histophilosis / E. D. Janzen // The Merck Veterinary Manual. - 10th edition. - 2010.

125. Janzen E. D. Therapeutic and prophylactic effects of some a P.H. / E. D. Janzen, S. D. Acres, L. A. Babiuk // Can. Vet. J. - 1984. - Vol. 25. - P. 78-81.

126. Kehrenberg C. Tn5706, a transposon-like element from Pasteurela multocida mediating tetracycline resistance. Antimicrob / C. Kehrenberg, C. Werckenthin, S. Schwarz // Agents Chemother. - 1998. - Vol. 42(8). - P. 2116-2118.

127. Kesiter D. M. Haemophilus somnus infectionis in catte / D. M. Kesiter // Continuing Education for the Practicing Veterinarians 3 : Compendium, 2004. - P. 128260K264hna Datt Bhatt. «Characterization of Antimicrobial and Metal Resistance in Contemporary and Historical clinical isolates of Histophilus somni from Feedlot cattle in Alberta », September, 2016.

129. Kwiecien J. M. Haemophilus somnus and reproductive disease in the cow: A review / J. M. Kwiecien, P. B. Little // Can. Vet. J. - 1991. - V. 32. - P. 595-601.

130. Lamm C.G., Love B.C., Krehbiel C.R., Johnson N.J., Step D.L. Comparison of antemortem antimicrobial treatment regimens to antimicrobial susceptibility patterns of postmortem lung isolates from feedlot cattle with bronchopneumonia. 2012

131. Large Animal Internal Medicine / Ed. B. P. Smith. - 4th ed. Mosby/Elsevier, St. Louis, Missouri. - P. 340-362.

132. Last R. D. Isolation of Haemophilus somnus from dairy cattle in kwaZulu-Natal. An emerging cause of 'dirty cow syndrome' and infertility? / R. D. Last, M. D. Macfarlane, C. J. Jarvis // Journal of the South African Veterinary Association. - 2001.

- Vol. 72. - P. 95.

133. Lees V. W. Epidemiology of Haemophilus somnus in young rams / V. W. Lees, A. H. Meek, S. Rosendal // Canadian Journal of Veterinary Research. - 1990. - Vol. 54.

- P.331-336.

134. MacDonald D. W. Infectious thromboembolic meningoencephalitis: literature review and occurrence in Alberta, 1969-71 / D. W. MacDonald, R. G. Christian // Can. Vet. Journal. - 1973. - Vol. 14(3). - P. 57-61.

135. Madampage, C.A., Wilson D., Townsend H. et al. Cattle Immunized with a Recombinant Subunit Vaccine Formulation Exhibits a Trend towards Protection against Histophilus somni Bacterial Challenge. PLoS One. 2016;11(8):e0159070.

136. Mannheimia haemolytica in Feedlot Cattle: Prevalence of Recovery and Associations with Antimicrobial Use, Resistance, and Health Outcomes / N. R. Noyes, K. M. Benedict, S. P. Gow [et al.] // J. Vet. Intern. Med. - 2015. - Vol. 29(2). - P. 705-713.

137. Maria, B.G., Gogarten J.P., Olendzenski L. Horizontal Gene Transfer., 2009; 821383. Martin, S. W. Antimicrobial use in feedlot calves: its association with culture rates

and antimicrobial susceptibility / S. W. Martin, A. H. Meek, R. A. Curtis // Can. J. Comp. Med. CANADA. - 1983. - Vol. 47(1). - P.6-10.

139. Mathison G. W. Alberta Feedlot Management Guide. Alberta Agriculture Food and Rural Development / G. W. Mathison. - Edmonton, Alberta, 2000. - P. 110-111.

140. McEwen S. A. Antimicrobial use and resistance in animals / S. A. McEwen, P. J. Fedorka-Cray // Clin Infect Dis. - 2002. - Vol. 34. - P.93-106.

141. Mechor G. D. Comparison of penicillin, oxytetracycline, and trimethoprim-sulfadoxine in the treatment of acute undiferentiated bovine respiratory disease / G. D. Mechor, G. K. Jim, E. D. Janzen // Can Vet J. -1988. - Vol. 29(5). - P. 437-438.

142. Michael G. B. Antimicrobial Resistance in Pasteurellaceae of Veterinary Origin / G. B. Michael, J. T. Bossé, S. Schwarz // Microbiol. Spectr. - 2018. - Vol. 6, No. 3. -P. 1-82.

143. Microbiological and histopathological findings in cases of fatal bovine respiratory disease of feedlot cattle in Western Canada / C. W. Booker, S. M. Abutarbush, P. S. Morley [et al.] // Can. Vet. J. - 2008. - Vol.49(5). - P.473-481.

144. Miller R. B. Effects of Hemophilus somnus on the pregnant bovine reproductive tract and conceptus following cervical infusion / R. B. Miller, D. A. Barnum // Veterinary Pathology. - 1983. - Vol.20. - P. 584-589.

145. Mingeot-Leclercq M. P. Aminoglycosides: activity and resistance / M. P. Mingeot-Leclercq, Y. Glupczynski, P. M. Tulkens // Antimicrob. Agents Chemother. - 1999. -Vol. 43, No. 4. - P. 727-737.

146. Moisan P. G. Haemophilus somnus myocarditis in feedlot cattle / P. G. Moisan, S. D. Fitzgerald // Agri-Practice. - 1995. - Vol. 16. - P. 21-24.

147. Molecular basis of macrolide, triamilide, and lincosamide resistance in Pasteurella multocida from bovine respiratory disease / K. Kadlec, K. Brenner, G. Michael G. [et al.] // Antimicrob. Agents Chemother. - 2011. - Vol. 55(5). - P. 2475-2477.

148. Molecular mechanisms of antibiotic resistance / J.M.A. Blair, M.A. Webber, A. J. Baylay [et al.] // Nature Publishing Group. - 2014. - Vol. 13(13). - P.42-51.

149. Nagaraja T .G. Liver Abscesses in Feedlot Cattle / T. G. Nagaraja, K. F. Lechtenberg // Vet. Clin. North. Am Food Anim. Pract. - 2007. - Vol. 23(2). - P. 351369.

150. Nickell J. S. Metaphylactic antimicrobial therapy for bovine respiratory disease in stocker and feedlot cattle / J. S. Nickell, B. J. White // Vet. Clin. North Am. Food Anim. Pract. - 2010. - Vol. 26(2). - P. 285- 301.

151. Noakes D. E. Veterinary Reproduction and Obstetrics (Tenth Edition) / D. E. Noakes, T. J. Parkinson, G. C. England. - 2019. - Chapter 24. - P. 434-466.

152. Nomenclature for macrolide and macrolide-lincosamide-streptogramin B resistance determinants / M. Roberts, J. Sutcliffe, P. Courvalin [et al.] // Antimicrob. Agents Chemother. - 1999. - Vol. 43. - P. 2823-2830.

153. O'Toole D. Histophilosis as a Natural Disease / D. O'Tool,e D., K. S. Sondgeroth // Current topics in microbiology and immunology, 2015.

154. O'Toole D. Diagnostic exercise: Myocarditis due to Histophilus somni in feedlot and backgrounded cattle / D. O'Toole, T. Allen, R. Hunter, L. B. Corbeil // Vet. Pathol.

- 2009. - Vol. 46(5). - P.1015-1017.

155. Orr J. P. Haemophilus somnus infection: A retrospective analysis of cattle necropsied at the Western College of Veterinary Medicine from 1970 to 1990 / J. P. Orr // Can. Vet. J. - 1992. - Vol. 33(11). - P. 719-722.

156. Pathogens of bovine respiratory disease in North American feedlots conferring multidrug resistance via integrative conjugative elements / C. L. Klima, R. Zaheer, S. R. Cook [et al.] // J. Clin. Microbiol. - 2014. - Vol. 52, No. 2. - P. 438-448.

157. Pathological and microbiological studies on pneumonic lungs from Danish calves / C. Tegtmeier, A. Uttenthal, N. F. Friis [et al.] // Journal of Veterinary Medicine. Series B 46, 1999. - P.693-700.

158. Pérez D. S. Histophilus somni: pathogenecity in cattle an update / D. S. Pérez, F. A. Pérez, G. Bretschneider // Anales de Veterinaria de Murcia. - 2010. - Vol. 26. - P. 21-25.

159. Performance Standards for Antimicrobial Disk and Dilution Susceptibility Tests for Bacteria Isolated From Animals. - 4th Edition. CLSI, 2018.

160. Prescott J. F. In vitro susceptibility of selected veterinary bacterial pathogens to ciprofloxacin, enrofloxacin and norfloxacin / J. F. Prescott, K. M. Yielding // Can. J. Vet. Res. CANADA. - 1990. - Vol. 54(1). - P. 195-197.

161. Primer-BLAST: A tool to design target-specific primers for polymerase chain reaction / J. Ye, G. Coulouris, I. Zaretskaya [et al.] // BMC Bioinformatics. - 2012. -Vol. 13(1). - P.134.

162. Quantity and quality of runoff from a beef cattle feedlot in southern Alberta / J. J. Miller, B. P. Handerek, B. W. Beasley [et al.] // J. Environ. Qual. - 2005. - Vol. 33, No. 3. - P. 1088-1097.

163. Radostits O. M. Herd Health: Food Animal Production Medicine / O. M. Radostits.

- W.B. Saunders, 2001.

164. Rapid detection and differentiation of the glycoprotein C gene of household herpesvirus 1 and 5 in clinical samples by multiplex-PCR / M. P. Klaus, A. F. Alfieri, A. V. Folgeris-Flatshart [et al.] // Journal of Virological Methods. - 2005. - Vol. 128.

- P.183-188.

165. Reverse vaccinology as an approach for developing Histophilus somni vaccine candidates / C. A. Madampage, N. Rawlyk, G. Crockford [et al.] // Biologicals. Elsevier Ltd. - 2015. - P. 8-15.

166. Ribble C. S. Efficacy of immunization of feedlot calves with a commercial Haemophilus somnus bacterin / / C. S. Ribble, G. K. Jim, E. D. Janzen // Can. J. Vet. Res. - 1988. - Vol. 52(2). - P. 191-198.

167. Sambrook J. Molecular Cloning: A Laboratory Manual / J. Sambrook, E. F. Frisch, T. Maniatis. - Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989. - 626 p.

168. Sandal I. A genomic window into the virulence of Histophilus somni / I. Sandal, T. J. Inzana // Trends Microbiol. - 2010. - Vol. 18(2). - P. 90-99.

169. Saunders J. R. Haemophilus somnus infections I. A ten year (1969-1978) retrospective study of losses in cattle herds in Western Canada / J. R. Saunders, W. A. Thiessen, E. D. Janzen // Can. Vet. J. -1980. - Vol. 21, No. 4. - P. 119-123.

170. Schlafer D. H. Female genital system / D. H. Schlafer, R. B. Miller ; Ed. M. G. Maxie // Jubb, Kennedy, and Palmer's Pathology of domestic animals. - 5th edn. -Philadelphia: Elsevier, 2007. - Vol. 3 - P. 500-502.

171. Schuh, J. Saskatchewan. Haemophilus somnus myocarditis versus thrombotic meningoencephalitis in western Canada / J. Schuh, R. Harland // Can. Vet. J. - 1991. - Vol. 32(7). - P. 439.

172. Schumann F. J. Prophylactic tilmicosin medication of feedlot calves at arrival / E. J. Schumann, E. D. Janzen, J. J. McKinnon // Can. Vet. J. - 1990. - 31(4). - P. 285288.

173. Schwarz S. Mechanisms and Spread of Bacterial Resistance to Antimicrobial Agents / S. Schwarz, A. Cloeckaert, M. C. Roberts // asm Pub2Web. - 2006. - P. 7398.

174. Sharifzadeh A. Frequency of Haemophilus somnus in the semen of bulls in Iran as determined by polymerase chain reaction / A. Sharifzadeh, A. Doosti, P. G. Dehkordi // Scientific Research and Essays. - 2011. - Vol. 6., No. 6. - P. 1458-1460.

175. Siddaramappa S. Histophilus somni Genomics and Genetics / S. Siddaramappa // Current Topics in Microbiology and Immunology, 2016. - P. 49-70.

176. Single nucleotide polymorphisms in the bovine Histophilus somni genome ; a comparison of new and old isolates Resume / C. A. Madampage, N. Rawlyk, G. Crockford [et al.] // Biologicals. Elsevier Ltd. - 2015. - Vol.3. - P. 190-200.

177. Tenover F. C. Mechanisms of Antimicrobial Resistance in Bacteria / F. C. Tenover // Am. J. Med., 2006. - P. 119.

178. The first isolation of Histophilus somni from goats / K. Yanosi, I. Khaitos L. Makrai [et al.] // Veterinary Microbiology, 2009. - P. 133, 383-386.

179. The first report of Histophilus somni pneumonia in Nigerian dairy cattle / M. O. Odugbo, S. O. Ogunjumo, S. C. Chukwukere [et al.] // Veterinary Journal. - 2009. -Vol. 181. - P. 340-342.

180. The occurrence of Haemophilus somnus in feedlot calves and its control by postarrival prophylactic mass medication / J. Van Donkersgoed, E. D. Janzen, A. A. Potter, R. J. Harland // Can. Vet. J. - 1994. - Vol. 35(9). - P.573-580.

181. Thromboembolic meningoencephalitis due to Haemophilus somnus in cattle at a feedlot in Argentina / C. O. Decarga, H. G. Piscitelli, G. C. Zelinsky, A. L. Cipolla // Thromboembolic Veterinary record. - 2002. - No.150. - P. 817.

182. Thrombotic meningoencephalitis associated with Histophilus ovis infection in lambs in Europe / J. P. Cassidy, S. W. McDowell, G. A. Reilly [et al.] // Veterinary Record. - 1997. - Vol. 140. - P.193-195.

183. Use of Chlortetracycline for Treatment of New Feedlot Cattle / T. W. Perry, J. G. Riley, R. V. Pope R.V. 1986.

184. Vaccination of cattle against experimentally induced thrombembolic meningoencephalitis with a Haemophilus somnus bacterin / L. R. Stephens, P. B. Little, J. D. Humphrey [et al.] // Am. J. Vet. Res. - 1982. - Vol. 43(8). - P.1339-1342.

185. Van Donkersgoed J. Epidemiological features of calf mortality due to hemophilosis in a large feedlot / J. Van Donkersgoed, E. D. Janzen, R. J. Harland // Canadian Veterinary Journal. - 1990. - Vol. 31. - P. 821-825.

186. Van Donkersgoed, J. Haemophilosis / J. Van Donkersgoed // Alberta feedlot management guide. Edmonton Alta. ; Barrhead Alta.: Alberta Agriculture Food and Rural Development. - Feeder Associations of Alberta Ltd, 2000.

187. Van Donkersgoed, J. Meta-analysis of field trials of antimicrobial mass medication for prophylaxis of bovine respiratory disease in feedlot cattle / J. Van Donkersgoed // Can. Vet. J. - 1992. - Vol. 33(12). - P. 786- 795.

188. Van Dreumel A. A. Infectious thromboembolic meningoencephalitis in Ontario feedlot cattle / A. A.Van Dreumel, R. A. Curtis, H. L. Ruhnke // Can. Vet. J. Canada.

- 1970. - 11(7). - 125-130.

189. Van Dreumel A.A. Abortion associated with Hemophilus somnus infection in a bovine fetus / A. A.Van Dreumel, M. Kierstead // Can. Vet. Journal. -1975. - Vol. 16.

- P.367-370.

190. Widders, P.R. Experimental abortion and the systemic immune response to "Haemophilus somnus" in cattle / Widders, P.R. // Infect Immun. -1986. - Vol. 54. -P. 555-560.

191. Woolums A. R. The broncopneumonias (respiratory disease complex of cattle, sheep, and goats) / A. R. Woolums, T. R. Ames, J. C. Baker; Ed. B. P. Smith. - Large animal internal medicine. - 4th ed. Mosby/Elsevier, St. Louis, Missouri, 2009. - P. 602-643.

192. Wozniak R. a F. Integrative and conjugative elements: mosaic mobile genetic elements enabling dynamic lateral gene flow / R. a F. Wozniak, M. K. Waldor // Nat. Rev. Microbiol. - 2010. - Vol. 8(8). - P.552-563.

193. Yancey R. J. Recent advances in bovine vaccine technology / R. J. Yancey // Journal of Dairy Science. - 1993. - Vol. 76. - P. 2418-2436.

194. Yazdankhah, S. Zinc and copper in animal feed-development of resistance and co-resistance to antimicrobial agents in bacteria of animal origin / S. Yazdankhah, K. Rudi, A. Bernhoft // Microb. Ecol. Heal. Dis., Sweden. -2014. - Vol.1. - P. 1-7.

Список сокращений

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота;

КРС - крупный рогатый скот;

ПЦР - полимеразная цепная реакция;

Н.эотш - НМорИИш Ботш;

ТМЭ - тромботический менингоэнцефалит;

МЭБ - международное эпизоотическое бюро;

ВОЗ - Всемирная организация здравохранения;

ЕМА - Европейское медицинское агентства;

АТФ - аденозинтрифосфорная кислота;

СЬ81 - Института клинических и лабораторных стандартов (США); АБП - антибактериальные прпараты;

ЭДТА - натриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты; ВКО - внутренний контрольный образец; ПКО - положительный контрольный образец;

Приложения:

ЗОЛОТАЯ 120

21

XXIII ВСЕРОССИЙСКАЯ АГРОПРОМЫШЛЕННАЯ ВЫСТАВКА

диплом

НАГРАЖДАЕТСЯ ЗОЛОТОЙ МЕДАЛЬЮ Федеральное государственное бюджетное учреждение «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов»

(ФГБУ «ВГНКИ»), г. Москва

«За разработку методик:

идентификации и шинирования изолятов возбудителя гемофилеза крупного рогатого скота ШьЮркИия ¡опии методом НЦР с гибридюационно- флуоресцентной детекцией продуктов амплификации; выявления и идентификации возбудителей пастереллеза Рах(еиге11а тиИоси1а и МаппИеипш \iaemolylica методом ПЦР с гибридизационио- флуоресцентной детекцией в режиме реального времени»

МИНИСТР СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Д.Н. ПАТРУШЕВ

ю

я

та -

о

Г6

Н

Г6 £

ы

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ЕОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ «МОСКОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ И БИОТЕХНОЛОГИИ - МВА имени К.И. СКРЯБИНА»

РОСС ЕЛ ЬХО3НАДЗО Р ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ «ВСЕРОССИЙСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ЦЕНТР КАЧЕСТВА И СТАНДАРТИЗАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ И КОРМОВ» (ФГБУ «ВГНКИ»)

Методические рекоменлации по оздоровлению скотоводческих хозяйств неблагополучных по инфекционным заболеваниям, вызванным антибиотикорезистентными штаммами бактерий (молекулярно-генетический метод выявления гистофилеза крупного рогатого скота и способы его лечення)

Москва-2021

Киш Jl.К., Яцентюк С.П., Борунова С.М., Рудняев Д.А. Методические рекомендации по оздоровлению скотоводческих хозяйств, неблагополучных по инфекционным заболеваниям, вызванным антибнотикорезнстентными штаммами бактерий (молекулярно-генетический метод выявления гистофнлеза крупного рогатого скота и способы его лечения).

- М: ФГБОУ ВО МГЛВМиЬ- МВА имени К.И. Скрябина, 2021, 24 с.

Рецензенты: Белоусов В. И., доктор ветеринарных наук, профессор, главный научный сотрудник отдела координации научно-исследовательских работ Федерального государственного бюджетного учреждения «Центральная научно-методическая ветеринарная лаборатория» (ФГБУ ЦНМВЛ); Назимкина С. Ф., кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры диагностики болезней, терапии, акушерства и репродукции животных ФГБОУ ВО МГАВМиБ- МВА имени К.И. Скрябина

Методические рекомендации утверждены на заседании научно-методического совета Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина» (протокол № 2 .от 18.11.2021)

1

||миговп|| ИА Быканова

УТВЕРЖДАЮ

!!ежщальный директор

с ограниченной 4%^ответе^^ностъю «МИРОВЕТ»

Акт

по определению эффективности внутриматочной суспензии РАСТОЛИН и биостимулятора иммунной системы ТКАНОЛИН при лечении эндометритов и респираторных заболеваний у коров в ООО «МИРОВЕТ»

14 ] 201, Московская область, Пушкинский район, город Пушкин

ул. Соколовская, владение 13 стр. 1. 15.04.2021 г.

Мы, нижеподписавшиеся, ветеринарный врач ООО «МИРОВЕТ» Сорокин A.B., зоотехник ООО «МИРОВЕТ» Морозов Е.А, а также профессор кафедры эпизоотологии, микробиологии и организации ветеринарного дела ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина доктор биологических наук, профессор Грязнева Т.Н., соискатель кафедры эпизоотологии, микробиологии и организации ветеринарного дела ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА им. К.И. Скрябина и соискатель кафедры эпизоотологии, микробиологии и организации ветеринарного дела ФГБОУ ВО МГАВМиБ Рудняев Д.А. провели исследования по определению эффективности применения комплексной схемы лечения с использованием антибактериального препарата Гентамицина сульфат 4%, внутриматочной суспензии РАСТОЛИН и биостимулитора иммунной системы крупного рогатого скота ТКАНОЛИН при лечении эндометритов и респираторных заболеваний у коров

Препараты РАСТОЛИН и ТКАНОЛИН были предоставлены организацией-разработчиком ООО «Пробиотик-Плюс» в количестве:

- РАСТОЛИН - 160 флаконов по 100 см3;

- ТКАНОЛИН -12 флаконов по 100 см3.

Гентамицина сульфат 4% раствор для инъекций приобретен в ветеринарной аптеке - производитель АО «Мосагроген», г.Москва

В опытную группу были отобраны 50 коров с клиническими признаками эндометрита и ринита. По результатам микробиологических исследований на кафедре эпизоотологии, микробиологии и организации ветеринарного дела ФГБОУ ВО МГЛВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина и молекулярно-генетических исследований в ФГБУ «ВГНКИ» были получены следующие результаты (таблица 1).

Таблица 1.

Результаты бактериологического исследования слизистых истечений из влагалища коров с острым послеродовым эндометритом и смывов из носовых _____ходов.

Возбудитель Количество выделений

Истечения из носа маточные выделения

гол. % гол. %

Escherichia coli 14 28 32 64

Candida albicans 8 16 27 54

Arcanohacter pyogenes 0 0 20 40

Staphylococcus spp. 10 20 17 34

Pseudomonas aeruginosa 17 34 13 26

Histophilus somni 9 18 7 14

Streptococcus spp. 19 38 13 26

Для осуществления лечебных мероприятий были отобраны особи, в биологическом материале от которых были обнаружены №з1орЫ1ш вотш, всего 16 голов. Животных разделили на 4 группы по 4 головы в каждой. В каждой группе присутствовали особи с локализацией данного возбудителя и в дыхательных путях, и в урогенитальном тракте.

Применили следующие схемы лечения:

1. Группа 1 - только Гентамицина сульфат 4 % внутримышечно в дозе 0,7мл/10 кг живой массы в течение 7 дней.

2. Группа 2 -Гентамицина сульфат 4 % внутримышечно в дозе 0,7мл/10 кг живой массы в течение 7 дней и внутриматочное введение суспензии РАСТОЛИН по 100 см3 1 раз в день 3 дня подряд.

3. Группа 3 -Гентамицина сульфат 4 % внугримышечно в дозе 0,7мл/10 кг живой массы в течение 7 дней и применение тканевого биостимулятора ТКАНОЛИН подкожно 5 мл двукратно с интервалом 14 суток.

4. Группа 4 - Гентамицина сульфат 4 % внутримышечно в дозе 0,7мл/10 кг живой массы в течение 7 дней, внутриматочное введение суспензии РАСТОЛИН по 100 см3 1 раз в день 3 дня подряд и применение тканевого биостимулятора ТКАНОЛИН подкожно в дозе 5 мл двукратно с интервалом 14 суток.

Оценка эффективности различных схем терапии представлена в табл ице 2.

Результаты идентификации

Таблица 2.

Группы животных до начала терапии 3-й день терапии 7-й день терапии 14-й день терапии 28-й день терапии

гол % гол % гол % гол % гол %

Группа 1, п=4 4 100 4 100 2 50 1 25 0 0

Группа 2, п-4 4 100 2 50 1 25 0 0 0 0

Группа 3, п=4 4 100 4 100 2 50 1 25 0 0

Группа 4, п=4 4 100 2 50 0 0 0 0 0 0

Заключение.

1. Все схемы лечения оказались эффективны в отношении микроорганизмов вида ГПзЮрЬПиз вотш.

2. Применение комплексной терапии тремя препаратами: антибиотик гентамицина сульфат 4%, внутриматочная суспензия РАСТОЛИН и биостимулятор иммунной системы крупного рогатого скота ТКАНОЛИН показало значительно большую эффективность: уже на 7 день терапии ШвЮрЬПив вошш не обнаруживались в материале от всех животных группы №4, в то время как в группах 1 и 3 данный возбудитель не выявлен только на 28 день исследований, а в группе 2 - на 14 день.

Ветеринарный врач ООО «МИРОВЕТ»

Зоотехник ООО «МИРОВЕТ»

Профессор кафедры эпизоотологии, микробиологии и организации ветеринарного дела ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина доктор биологических наук, профессор

Соискатель кафедры эпизоотологии, микробиологии

и организации ветеринарного дела

ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина

А. В. Сорокин Е.А.Морозов

Т.Н.Грязнева

Д.А.Рудняев