Молекулярная радиобиология сложного гена vestigial Drosophila melanogaster тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.01, кандидат наук Афанасьева, Кристина Петровна

• Афанасьева, Кристина Петровна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Афанасьева, Кристина Петровна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Радиационный мутагенез отдельных генов у животных и человека

1.1.1.Радиационный мутагенез в генеративных клетках высших животных

1.1.1.1.Молекулярная природа радиационно-индуцированных «точковых» мутаций гена

1.1.1.2.Молекулярная природа радиационно-индуцированных мутаций гена аберрационного класса

1.1.2.Радиационный мутагенез отдельных генов в соматических клетках млекопитающих

1.2. Структура трека ионизирующих излучений и первичные повреждения ДНК

1.3. Механизмы ошибочной репарации первичных повреждений ДНК

1.4. Структурная организация хроматина зрелых генеративных клеток у высших животных

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Выделение геномной ДНК

2.2. Полимеразная цепная реакция

2.3. Анализ гетеродуплексов

2.4. Секвенирование

3. РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. ПЦР-анализ спонтанных мутаций

3.2. ПЦР-анализ радиационно-индуцированных «точковых» мутантов гена О. melanogaster

3.3. ПЦР-анализ радиационных мутантов vg с хромосомными обменами

3.4. Сравнительный анализ действия трех видов облучения на молекулярном уровне

3.5. Распределение на карте гена vg ПЦР-выявляемых повреждений

3.6. Сочетание хромосомного обмена с делецией в области аберрационного разрыва

3.7. Результаты секвенирования 3-го и 4-го экзонов у аллеля vg1 и радиационных мутантов без ампликона 9 (интрон 3)

3.8. Гетеродуплексный анализ и секвенирование экзонов 3 и 4 радиационных мутантов гена vg, изученных методом ПНР

3.9. Кластерный характер действия радиации на геном

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярная радиобиология сложного гена vestigial Drosophila melanogaster»

ВВЕДЕНИЕ

Одним из концептуальных заключений классический радиационной генетики и цитогенетики явилось утверждение (Muller, 1954 а, б), что обязательными компонентами спектра изменений любого гена в генеративных клетках, индуцируемых ионизирующим излучением, являются два главных класса мутаций - «точковые» (внутригенные изменения) и аберрационные (делеционного и обменного типа).

Однако, природа «точковых» мутаций оставалась неизвестной в этот, домолекулярный, период радиационной генетики. В отношении хромосомных перестроек с местами разрыва в области гена также оставался невыясненным вопрос, локализован ли разрыв внутри гена или рядом, за его пределами и какова в таком случае природа мутантного фенотипа. При цитологической локализации аберрационного разрыва вне гена мутантный фенотип связывали с «эффектом положения», а предположение о наличии сразу двух независимых повреждений в виде «точковой» мутации гена и независимой хромосомной перестройки не подтверждалось линейной зависимостью индукции такого рода мутаций наблюдаемой в экспериментах (Дубинин, 1934).

Разделение радиационно-индуцированных мутаций гена на два класса «точковой» и аберрационной природы является актуальным и в настоящее время, что подтверждается более поздними работами, выполненными как на генеративных (Александров, 1987; Rüssel, 1971), так и на соматических клетках (Howard et al., 1987).

Новые молекулярные методы позволили установить достаточно широкий спектр мутационных изменений гена после действия главным образом редкоионизирующего излучения, как в генеративных, так и в соматических клетках, варьирующие от изменений на уровне отдельных

оснований ДНК до полной потери гена. При этом большинство таких данных получено на соматических клетках in vitro, модельные системы которых позволяют более легко и быстро проводить такой анализ. В этой связи вопрос возможности экстраполяции получаемых на соматических клетках данных на генеративные, в отношении которых соответствующие данные пока крайне ограничены, а их получение весьма трудоемко и длительно по времени, пока остается открытым. Более того, многие данные в отношении соматических клетках получены для экзонов, а не всего гена в целом. Важно также отметить, что имеющиеся в литературе данные о действии плотноионизирующих излучений на молекулярном уровне индивидуальных генов в соматических, а тем более в генеративных клетках остаются крайне ограниченными.

В этой связи важным и актуальным является проведение сравнительных исследований по изучению молекулярной картины радиомутабильности гена в генеративных клетках после действия на него различных по ЛПЭ видов излучений в одних и тех же условиях генетического эксперимента с целью выяснения молекулярной основы его «точковых» и аберрационных мутаций.

Знание по возможности более широкого спектра этих молекулярных изменений на ряду с фундаментальным представляет и большой практический интерес, учитывая наличие в этом спектре такого класса изменений, как замены отдельных оснований ДНК, увеличивающие однонуклеотидный полиморфизм (SNP) с его большим вкладом в генетически детерминированные соматические болезни животных и человека.

Проведение такого рода масштабных исследований в относительно короткий период времени, возможно лишь на немногих генетически хорошо изученных объектах, среди которых в первую очередь следует

рассматривать Drosophila melanogaster. В качестве гена-репортера перспективным является использование гена vestigial (vg), как наиболее близкого по размерам и организации к генам млекопитающих, и в спектре радиационно-индуцированных изменений которого регулярно наблюдаются мутации обоих классов, частота индукции которых линейно зависит от дозы редко- и плотноионизирующего излучения (Александров и др., 2001).

Цели и задачи работы

Целью работы является сравнительное изучение природы молекулярных изменений крупного гена vestigial Drosophila melanogaster у мутантов «точковой» и аберрационной природы, индуцированных разными дозами у-квантов 60Со, моноэнергетических нейтронов (Еср=0,85МэВ) и их комбинированного воздействия, с оценкой спектра этих изменений и их распределения по карте гена.

Для достижение вышеназванной целей в работе были поставлены следующие задачи:

1. Систематизировать генетическую коллекцию спонтанных и радиационных мутантов по гену vg по таким параметрам, как «точковая» и аберрационная природа, вид излучения и доза.

2. Провести молекулярный анализ структуры гена vg методом ПЦР у спонтанных, у-, нейтрон- и нейтроны+у-индуцированных мутантов «точковой» и аберрационной природы.

3. Сравнить выявленные молекулярные изменения у «точковых» и аберрационных мутантов гена vg, оценить зависимость этих изменений от вида и дозы излучения и определить характер распределения молекулярных изменений на карте гена.

4. Изучить на молекулярном уровне генетические эффекты комбинированного действия нейтронов и у-излучения по сравнению с эффектами этих видов радиации в отдельности.

5. Провести гетеродуплексный анализ и секвенирование не выявляемых методом ПЦР изменений ДНК 3-го и 4-го экзонов гена у «точковых» и аберрационных мутантов vg спонтанного и радиационного происхождения.

Положения, выносимые на защиту

1. Качественная картина молекулярных изменений гена, выявляемая методом ПЦР, одинакова для двух изученных видов радиации, однако в индукции частичных делеций гена нейтроны более эффективны, чем у-излучение.

2. Наличие кластеров повреждений на разных уровнях организации генома после действия обоих изученных видов радиации свидетельствует о гораздо более высокой степени пораженности генома клетки, чем это следует из анализа традиционных радиобиологических эффектов (генные мутации, аберрации хромосом).

3. Потери ДНК варьирующей величины, наблюдаемые в области аберрационного разрыва при обменных перестройках хромосом, ожидаемы в рамках современной теории структуры трека и моделей организации хроматина зрелых генеративных клеток.

4. Систематические замены оснований ДНК в облученном гене ведущие к повышению уровня однонуклиотидного полиморфизма (БЫР) свидетельствуют о необходимости нового подхода к оценке риска радиации, основанного на анализе БИР.

Научная новизна работы

Впервые в одинаковых условиях эксперимента на одном гене сложной организации в зародышевых клетках выявлен спектр молекулярных повреждений после действия ионизирующих излучений с разной ЛПЭ.

Впервые показана кластерность повреждающего действия радиации на генетический аппарат зародышевой клетки, проявляющаяся в

наличии нескольких независимых мутационных повреждений разной сложности как у «точковых» мутантов так и у мутантов аберрационной природы.

Впервые представлена схема механизма формирования аберраций обменного типа с делегированием последовательностей ДНК разной величины в области аберрационного разрыва.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Радиационный мутагенез отдельных генов у животных и человека

Начало изучения радиационного мутагенеза связано с зародышевыми клетками и с Drosophila melanogaster, как классическим генетическим тест-объектом. Впоследствии изучение проводили и на других объектах, таких как Neurospora crassa и Mus Musculus. Одновременно появились исследования и на культурах соматических клеток in vitro, что делает возможным сравнение мутагенеза этих двух принципиально разных типов клеток.

Классический период в изучении радиационного мутагенеза отдельных генов эукариот всецело связан с анализом мутационного процесса в генеративных клетках сначала классического генетического тест-объекта Drosophila melanogaster, а позже и других лабораторных организмов, включая Bombix mori, Neurospora crassa и Mus musculis. Если хорошее знание генетики и цитогенетики (анализ политенных хромосом) позволял детально изучать на генетическом и хромосомном уровне каждую радиационно-индуцированную мутацию данного гена-репортера, то в отношении остальных тест-организмов использовались в основном, генетически и гибридологический анализ. В совокупности полученные результаты позволили сделать концептуальное для высших эукариот обобщение (Muller, 1954 а; б), о наличии в спектре наследуемых изменений гена 2 основных классов мутаций - «точковые» (внутригенные изменения, не выявляемые цитологически) и аберрационные (цитологически видимые делеции, инверсии и транслокации).

С развитием генетики соматических клеток in vitro были созданы новые модели для изучения радиационного мутагенеза в соматических

клетках на отдельных генах-репортерах (HPRT, APRT и др.). При этом следует отметить, что изучение радиационного мутагенеза на этих клеточных тест-системах совпало со становлением и развитием молекулярной биологии и ее методов, которые стали основным подходом для анализа природы генных мутаций в соматических клетках. В этой связи классическое подразделения генных мутаций на «точковые» и аберрационные для этих тест-систем оказалось не характерным, но остается в силе для генеративных клеток.

Учитывая сказанное, ниже будут рассмотрены литературные данные по радиационному мутагенезу для генеративных и соматических клеток в отдельности.

1.1.1. Радиационный мутагенез в генеративных клетках высших животных

Общие радиобиологические закономерности индукции генных мутаций в генеративных клетках главным образом у Drosophila, а в частности, линейная зависимость частоты индукции мутаций от дозы редкоионизирующего излучения была показана уже в ранний период радиационной генетики (Гептнер и Демидова, 1936; Глембоцкий, 1936; и др.). Эти результаты были подтверждены более поздними работами на этом же тест-объекте с разделением генных мутаций «точковой» и аберрационной природы (Ives, 1959; Alexandrov, 1984; Александров 1987) а так же на Neurospora (de Serres, 1989; 1991) и Mus musculus (Russell, 1971; Rinchik, 1987).

Работы по оценке эффективности плотноионизирующего излучения в индукции генных мутаций в генеративных клетках не многочисленны. Наиболее полный анализ индукции мутаций одновременно в нескольких генах Drosophila нейтронами разной энергии показал, что по тесту «точковые» мутации нейтроны с Еср=0,85 МэВ так же, как и у-излучение

б0Со более эффективны, чем нейтроны с Еср=0,35 МэВ. Однако, в индукции мутаций генов аберрационной природы наиболее эффективными оказались нейтроны с Еср=0,35 МэВ (Александров, 1984).

Дальнейший более детальный анализ зависимости частоты индукции мутаций «точковой» и аберрационной природы от дозы у-излучения и нейтронов (0,85 МэВ) для гена vestigial показал, что частота мутаций обоих классов линейно растет с дозой и в индукции мутантов «точковой» (без молекулярного анализа) и аберрационной природы нейтроны более эффективны, чем у-кванты б0Со (рис.1) (Александров и др., 2001).

Более высокая эффективность быстрых нейтронов в индукции генных мутаций изучаемых локусов была так же показана на Drosophila (Pastink et al., 1987) и на Bombix morí (Murakami, 1971).

Рис. 1. Зависимость доза-эффект для у- (о) и нейтрон-индуцированных (•) мутаций гена vg О. melanogaster хромосомной (а) и «точковой» (б) природы (Александров и др., 2001).

Таким образом, наличие данных об общих радиобиологических закономерностях индукции генных мутаций «точковой» и

аберрационной природы в генеративных клетках животных открывало перспективу изучения молекулярной природы мутаций этих классов и выяснения особенностей действия плотноионизирующих видов излучений по сравнению с редкоионизирующими.

1.1.1.1.Молекулярная природа радиационно-индуцированных «точковых» мутаций гена

Выяснение истинной природы «точковых» изменений гена стало возможным с развитием таких молекулярных методов, как блот-гибридизация по Саузерну, полимеразная цепная реакция (ПЦР) и секвенирование.

Ранние работы с использованием метода болт-гибридизации по Саузерну на Drosophila при анализе небольших выборок рентген- и нейтрон-индуцированных мутаций ряда не крупных генов показали, что значительная их часть обусловлена внутригенными делениями варьирующие величины, а остальные несли, по-видимому, мелкие не выявляемые этим методом изменения (Ashburner et al., 1982; Kelley et al., 1985; Coté et. al., 1986; Pastink et al., 1987, 1990; Mahmoud et al., 1991; Eeken et al., 1994). Дальнейший их анализ методом секвенирования позволил установить, что в основе таких мутантов могут лежать изменения ДНК в виде небольших делеций, инверсий и замен отдельных оснований (Pastink et al., 1988; Eeken et al., 1994). Одновременно были получены первые данные о неслучайной локализации этих повреждений в одном из районов гена (Pastink et al., 1988). Анализ большой выборки «точковых» и аберрационных мутантов по крупному гену vestigial D. melanogaster, индуцированных у-излучением и реакторными нейтронами с Еср=0,85 МэВ с использованием метода ПЦР также показал, что значительная их часть обусловлена внутригенными делециями изученного района гена (Александров и др. 2001). В другой работе, по

изучению у- и нейтрон-индуцированных «точковых» мутаций небольшого гена black полученных в этих же экспериментах, методом ПЦР было установлено, что лишь небольшая часть таких мутантов была обусловлена небольшими внутригенными делециями, тогда как большая их часть имела молекулярные изменения, не выявляемые этим методом. Анализ таких мутантов методом секвенирования выявил более сложную картину молекулярных изменений, в которой для у-индуцированных мутантов преобладали замены отдельных оснований ДНК или микроделеции из нескольких пар нуклеотид, тогда как для нейтрон-индуцированных преобладали молекулярные изменения, характерные для материнского тестер-аллеля black1, на фоне которого выделялись радиационно-индуцированные мутации black. Важно отметить, что наличие этих молекулярных маркеров аллеля Ыаск1 на месте облученного дикого аллеля Ыаск+п, свидетельствует, как полагают авторы, о межаллельной рекомбинации по типу генной конверсии (Давковаи др., 2013).

Блот-гибридизация рентген-индуцированных мутаций в микрорайоне d-se (Rinchik et al., 1986) и гена albino (с) (Rinchik et al., 1993) у мышей, показала, что большая часть повреждений представлена потерей части или всего гена, включая протяженные делеции (1500-2000 т.п.н.), захватывающие фланговые гены-маркеры. Тем самым, данный молекулярный позволяет выявлять у мышей индуцируемые ионизирующим излучением мультилокусные делеции, включающие изучаемый ген-репортер, т.е. тот класс структурных мутаций гена, который широко представлен у Drosophila (Pastink et al., 1987; Александрова и др., 1996) и Neurospora (de Serres, 1989).

Таким образом, методы молекулярной радиобиологии позволили выявить наличие полных и частичных делеций гена, а так же изменений

на уровне отдельных нуклеотидов ДНК гена, без определенных зависимостей от вида излучений.

1.1.1.2.Молекулярная природа радиационно-индуцированных мутаций гена аберрационного класса

Уже первые работы на Drosophila по изучению радиомутабильности отдельных генов показали частое сочетание мутантного фенотипа гена-репортера с аберрационным разрывом, лежащим в основе внутрихромосомного (инверсии) или межхромосомного обмена (транслокации). В частности, многие рентген-индуцированные мутации гена squte оказались ассоциированы с аберрационным разрывом при инверсиях (Дубинин, 1934; Campuzano et al, 1985). Видимые цитологически аберрации обменного типа с фенотипом мутантного гена, такие как инверсии, транслокации, транспозиции, наблюдали в экспериментах на Drosophila на таких генах, как white (Pastink et al., 1987), white, yellow, vermilion, forked (Eeken et al., 1994) и на пяти генах yellow, white, black, cinnabar, vestigial (Александров, 1987).

Первый вопрос, который следовало решить для подобного рода мутантов, где находится точка разрыва, внутри самого гена или вне его. Последний вариант однозначно рассматривали как «эффект положения», поскольку предположение о том, что повреждение может представлять собой сочетание двух разных генетических изменений (разрыв хромосомы и «точковая» мутация гена) отвергалось как мало вероятное, поскольку частота индукции таких двухударных событий должна была возрастать квадратично с дозой, а не линейно, как это наблюдалось на самом деле в эксперименте (Дубинин, 1934).

Возможность локализации аберрационного разрыва-соединения непосредственно внутри гена классической генетикой также

отвергалась, поскольку все аберрации хромосом рассматривались как «intergenic mutations» с разрывами вне гена (Muller, 1954). Между тем уже первые результаты молекулярной гибридизации in situ показали, что инверсионные и транслокационные разрывы-соединения при обменах, индуцированных у-излучением и нейтронами в зародышевых клетках Drosophila melanogaster, могут локализоваться внутри изучаемого гена, являясь, таким образом, первопричиной его мутации (Александрова и др., 1997). В то же время у ряда хромосомных мутантов с локализацией аберрационного разрыва-соединения вне изучаемого гена его определенные участки были мутационно изменены, что регистрировалось как отсутствие соответствующих ампликонов при ПЦР-анализе гена (Alexandrova et al., 2002).

Независимые исследования так же показали, что рентген-индуцированные инверсионные разрывы-соединения локализуются внутри отдельных интронов крупного гена vestigial D. melanogaster (Williams et al., 1990). На другой тест-системе, комплекс achaete-scute в Х-хромосоме D. melanogaster более тонкий блот-анализ по Саузерну выявил наличие небольших внутригенных делеций (2-4 т.п.н.) в области инверсисионных разрывов-соединений (Campusano et al., 1985).

Таким образом, накопленные в литературе данные по радиомутабильности отдельных генов в генеративных клетках свидетельствуют о том, что мутационные изменения этих генов могут быть представлены либо внутригенными («точковые» мутации) либо ассоциированными с аберрационным разрывом повреждениями. Молекулярный анализ тех и других повреждений выявил тот факт, что в большинстве случаев эти повреждения представлены потерями (делеции) части или всего гена. Имеющиеся немногочисленные данные по секвенированию «точковых» мутантов дают общее представление о молекулярных изменениях ДНК в виде замен отдельных оснований,

делеций в несколько пар оснований, инсерций и др. мелких перестроек структуры ДНК гена. Важно отметить, что мутации гена аберрационной природы могут иметь инверсионные или транслокационные разрывы как вне так и внутри гена. В последнем случае такие аберрационные разрывы могут сопровождаться небольшими делециями соответствующего района гена. Более того, имеющиеся данные позволяют полагать, что внутригенные аберрационные разрывы локализуются в ряде случаев в интронах гена, которые могут представлять собой, таким образом, его горячие районы. Однако, целый ряд вопросов, касающихся характера распределения мутационных изменений разной природы по экзон-интронной карте гена облученного в генеративных клетках, а так же особенности спектра регистрируемых изменений после действия плотноионизирущего излучения, пока остаются открытыми.

1.1.2. Радиационный мутагенез отдельных генов в соматических клетках млекопитающих

Большое количество исследований действия радиации разного качества было проведено параллельно и на соматических клетках млекопитающих разных линий, с использованием таких генов-репортеров, как HPRT hAPRT.

Анализ литературы показывает, что число исследований по изучению радиационного мутагенеза в соматических клетках животных намного превышает число работ, выполненных на генеративных клетках. При этом в качестве модельных тест-систем для соматических клеток использовались как культуры клеток in vitro, так и клетки, облученные in vivo, в качестве генов-репортеров наиболее часто служили гены HPRT и APRT.

Уже в первых работах с использованием метода гибридизации по Саузерну, было показано, что в основе рентген-индуцированных мутантов HPRT лежат в основном полные и частичные потери гена и лишь небольшая часть изученных мутантов имела повреждения, не детектируемые этим методом, т.н. «точковые» мутанты (Brown and Thacker, 1984).

Открытие метода ПЦР и его внедрение в радиационно-генетический эксперимент позволило получить более детальную картину мутационных изменений облученного гена и на гораздо большем материале, поскольку позволяет вести быстрый скрининг при получении той же картины изменений, что и блот-гибридизация (Aghamohammadi et al., 1992).

Действительно, в целом ряде последующих исследований было показано, что около половины индуцируемых рентгеновским или у-излучением независимо от дозы (1-4 Гр) мутантов по гену гипоксанти-гуанин фосфорибозилтрансферазы (HPRT, 40 т.п.н., 9 экзонов, 8 интронов) выделенных из разных типов соматических клеток представлена полными или частичными потерями гена, тогда как остальные их изученных имели изменения, не детектируемые этим методом, т.е. являлись «точковыми» (Morgan et al., 1990; Whaley and Little 1990; Tachibana et al., 1990; Morris and Thacker, 1993; Phillips et al., 1995; Park et al.,1995). Аналогичный анализ гена HPRT в лимфоцитах человека, облученных in vitro у-квантами выявил сходный спектр мутационных изменений, в котором доля «точковых» мутантов возрастала с ростом дозы до 2 Гр, а делеционных - до ЗГр (Mognato et al., 2001). При этом важно отметить тот факт, что у одного из изученных мутантов HPRT после облучения в дозе 3 Гр было выявлено два независимых мутационных повреждений (делеции экзонов 2-5 и 7-8) разделенных нормальной последовательностью гена. Одновременно в

работе было так же установлено, что делеции преимущественно захватывали экзон 3 и 3'-район гена с его смежными геномными последовательностями.

Исследования еще одного гена аденинфосфорибозилтрансферазы (APTR, 2,8 т.п.н., 3 экзона, 2 интрона) из лимфобластоидной линии клеток человека показали, что после у-излучения 137Cs (доза 2 Гр) в 93% случаев наблюдается полная потеря гена и смежных районов от 8 до 12 т.п.н. выявляемая методом блот-гибридизации по Саузерну, в остальных случаях, когда ген оставался на месте, секвенированием были выявлены замены отдельных пар оснований, ведущие к нонсенс-мутациям (Fujimori et al., 1992). Еще одной в работе полная потеря гена у мутантов APRT после действия 137Cs выявлена у 100% в, а после действия 252Cf в 95% случаев наблюдали полную потерю гена, а в остальных - замены отдельных оснований (Turker et al., 1995).

В работах по сравнительному изучению мутагенного действия а-частиц и рентгеновского излучения на ген HPRT в лимфобластоидных клетках человека in vitro методом блот-гибридизации показано, что спектры выявляемых изменений качественно и количественно близки для двух изученных видов радиации, отличающихся по ЛПЭ, и доля в них полных потерь гена (55% для обоих видов излечений) и частичных потерь гена (31 и 26% для а- и рентгеновского излучении соответственно) преобладает над «точковыми», не детектируемыми этим методом изменениями (10 и 13% соответственно) (Bao et al., 1995). Секвенирование мутантов без выявляемых предыдущим методом изменений показало наличие в основном, замен, а так же в нескольких случаях делеций или инсерций одного нуклеотида, а в одном случае у рентген-индуцированного мутанта - одновременно делеции одного основания и инсерции из трех оснований, разделенных нормальной последовательностью из трех оснований ДНК (Boa et al., 1995).

Близкие результаты были получены на другой тест-системе - гене дигидрофолатредуктазы (DHFR, 25 т.п.н.), при облучении клеток яичника хомячка in vitro у-излучением и а-частицами 4Не (Jin, 1995). В частности, большинство изученных мутантов представляли собой делеции гена, тогда как доля мутантов с «точковыми» изменениями не превышала 10%. При этом, а-частицы вызывали более протяженные делеции (до 150 т.п.н.), чем у-кванты. Одновременно авторы обнаружили, что распределение концов делеций было не случайным, локализуясь у 50% частичных делеций в одном из интронов (9,4 т.п.н.). При этом у 10 из таких делеций их концы локализовались в пределах отрезка интрона из 2 т.п.н. Среди них три делеции оказались идентичными, а у остальных совпадал по положению лишь один конец. Исходя из полученных результатов, авторы полагают, что индуцированные а-частицами двунитевые разрывы ДНК могут быть локализованы в определенных, наиболее доступных районах хроматиновых петель (Jin et al., 1995).

Еще одна работа по сравнению действия редкоионизирующего рентгеновского излучения в дозе 6 Гр и плотноионизирующего а-излучения в дозе 1 Гр анализ экзонов гена HPRT методом ПЦР показала тот же спектр изменений, однако, с преобладанием после а-излучения полных потерь. Дальнейший рестриктный анализ показал, что как в случае делеций, так и в случае ПЦР+ мутантов, нормальная структура гена наблюдалась в 3-17% случаев, что объясняется авторами хромосомными перестройками с точками разрывов в интронах, не изучаемых предыдущим методом. Так же в работе было показано, что плотноионизирующее излучение вызывает более крупные перестройки, делеции, и комплексные мутации, такая разница объясняется различиями структур треков этих излучений (Rothkam, et al., 2008). Эффективность а-излучения в индукции крупных делеций, более 50%

показана независимо в еще одной работе (Singleton et al., 200), так же в работе отмечено, что все крупные делеции сопровождаются перестройками в области точки разрыва, причем, в одном случае сложная перестройка включает инсерцию, делецию и инверсию.

Так же существует много работ по изучению гена RET, который является протоонкогеном, и где мутация этого гена, приводящая к запуску механизмов канцерогенеза, была представлена в виде перестроек, концы которых затрагивают последовательность самого гена (Klugbauer et al., 1995).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Афанасьева, Кристина Петровна, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Александров И.Д. разная для генных мутаций ОГЭ промежуточных (ЕсР=0.35МэВ) нейтронов при облучении спермиев Drosophila // Доклады академии наук СССР, 1984, т. 275, №2, с. 483-486

Александров И.Д. Сравнительный механизм радиационного микро- и макромутагенеза высших эукариот и общая теория мутаций. Радиационный мутагенез и его роль в эволюции и селекции // Наука, 1987, с. 18-42

Александров И.Д., Александрова М.В. Спектр и частота наследуемых мутаций при комбинированном действии нейтронов и у-излучения // Нейтроны и тяжелые заряженные частицы в биологии и медицине / Под ред. А.Ф. Цыб. Обнинск: НИИ медицинской радиологии АМН СССР, 1989, с. 6-17

Александров И.Д, Александрова М.В. Молекулярная цитогенетика аберрационных разрывов при мутациях структурнах генов// Докладу Академии Наук СССР, 1990, т. 315, №2, с. 484-487

Александров И.Д., Александрова М.В. Нестабильность генома при стабилизирующем отборе у Drosophila melanogaster // Докл. АН. 1994. Т. 337. №4. С. 550-552

Александров И.Д., Александрова М.В., Лапидус И.Л., Кораблинова C.B. ОГЭ нейтронов деления при индукции рецессивных мутаций разного типа у Drosophila melanogaster // Радиационная биология. Радиоэкология, 2001, т. 41, №3, с. 245-258

Александров И.Д., Александрова М.В., Заикин Н.С., Корольков В.В., Первушова О.В., Степаненко В.А. 3D моделирование макроархитектуры генома на основе его структурных изменений

после действия радиации // Физика элементарных частиц и атомного ядра, 2006, №6(135) с. 58-73

Александрова М.В., Лапидус И.Л., Александров И.Д., Филимонов A.C. Радиационная цитогенетика мультилокусных делеций и принципы надхромомерной организации эухроматина эукариот // Радиационная биология. Радиоэкология. 1996, т. 36, № 6, с. 805-814

Александрова М.В., Лапидус И.Л., Зинкевич Н.С., Александров И.Д. Радиационные разрывы гена кластеризуются в интронах // Докл. РАН. 1997, т. 354, №2, с. 256-258

Гептнер М.А., З.А. Демидова Зависимость между дозами рентгеновских лучей и мутациями отдельных генов у Drosophila melano gaster //Оттиск из Биологического журнала, 1936, т. 5, №3, с. 541-550

Глазков М.В. Организация ДНК в ядрах клеток печени // Докл. АН СССР, 1985, т. 285, с. 462-464

Глазков М.В. Организация ДНК в лишенных гистонов ядрах на некоторых стадиях сперматогенеза крысы // Молекулярная биология, 1987, т. 21, с. 1248-1257

Глазков М.В. Взгляд на структурно-функциональную организацию хромосом эукариот: еще раз о хромомерах // Генетика, 1999, т. 35, № 11, с. 1470-1479

Глембоцкий Я.Л. Сравнительная скорость прямого и обратного мутационного процесса в локусах yellow, achaete-scute, white и Forked у Drosophila melanogaster // Оттиск из Биологического журнала «Биомедгиз», Москва, 1936, т. 5, № 5, с. 813-832

Давкова Л.Н., Александрова М.В., Александров И. Д. Радиационная биология структурно разных генов Drosophila melanogaster. Сообщение 4: ген black: секвенирование «точковых» мутантов и

рекомбинационные механизмы их образования // Радиационная биология. Радиоэкология, 2013, т. 53 №4, с. 355-366

Дубинин Н.П., Сидоров Б.Н. Зависимость эффекта гена от его положения в системе // Биол. журн. 1934, т. 3, с. 304-331

Жимулев И.Ф. Хромомерная организация политенных хромосом / Новосибирск, ВО «Наука», 1994, 568 с.

Зацепина О.В., Поляков В.Ю., Лозовская Е.Р., Ченцов Ю.С. Изучение структуры хромомеров и дисков политенных хромосом Drosophila virilis в условиях искусственной деконденсации // Цитология, 1983, т. 25, с. 123-129

Ли Д.Е. Действие радиации на живые клетки // Москва, 1963, стр.108

Сойфер В.Т. Реперация генетических повреждений // Соровский образовательный журнал, 1997, №8, с. 4-13

Тимофеев-Ресовский Н.В., Иванов В.И., Корогодин В.И. Применение принципа попадания в радиобиологии // Москва, Атомиздат, 1968, с. 226

Adams M.D., McVey М., Sekelsky J.J. Drosophila BLM in double-strand-break repair by synthesis-dependent strand annealing // Science, 2003, V. 299, P. 265-267

Aghamohammadi S.Z., Morris T. Stevens D.L Thacker J. Rapid screening for deletion mutations in the HPRT gene using the polymerase chain reaction X-ray and a-particle mutant spectra // Mutat. Res., 1992, V. 269, p. 1-7

Albertini A.M., Hofer M., Calos M.P., Miller J.H// On the formation of spontaneous deletions: the importance of short sequence homologies in the generation of large deletions// Cell 1982, V. 29. P. 319-328

Alexandrov I.D. Quality and frequency patterns of y- and neutron-induced visible mutations in Drosophila spermatozoa// Mutat. Res., 1984, V. 127, P. 123-127

Alexanbrov I.D., Alexandrova M.V. Genetics and cytogenetics of the vestigial mutations induced by gamma-rays, 252Cf and fission neutrons // Drosophila inform. Serv., 1987, V. 66, p. 185-187

Alexandrov I.D., Zakharov I.A., Alexandrova M.V. The Moscow Regional Drosophila melanogaster Stock Center // Drosophila Inform. Serv., 2004, V 87, p. 1-22

Alexandrov I.D, Stepanenko V.A., Alexandrova M.V. Spatial arrangement of the animal male germ cell genome II: 2D-3D simulation and visualization of spatial configuration of major chromosome 2 in Drosophila sperm// Advances in Molec. Biol., 2007, V 1, №2, p. 71-77

Alexandrov I.D, Alexandrova M.V., Stepanenko V.A., Korablinova S.V., Korovina L.N., Stecenko S.G. Spatial arrangement of the animal male germ cell genome III: Anew experimental evidence supporting the megarosette-loop model of spatial organization of chromasomas in Drosophila sperm genome // Advances in Molec. Biol., 2008, V 2, №1, p. 23-30

Alexandrov I.D., Stepanenko V.A., Alexandrova M.V., Korablinova S.V., Korovina L.N. Spatial arrangement of the animal male germ cell genome: IV. Radiation-induced locus-specific translocations (2; 3) and large-scale organization of Drosophila sperm nucleus// Advances in Molec. Biol., 2009, V. 1-2, p. 17-26

Alexandrova M.V., Alexandrov I.D., Korablinova S.V., Levkovich N.V. Molecular genetics of radiation exchanges in Drosophila melanogaster: «Position effect» or gene mutation? // Proc. Int. Conf. «Genetic Conseq.

of Emergency Rad. Situations». M.: Publ. House of Russian Peoples Friendship, 2002

Arpanahi A., Brinkworth M., lies D., Krawetz S.a., Paradowska A., Platts A.E., Saida M., Steger K., Tedder P., Miller D. Endonuclease-sensitive region of human spermatozoal chromatin are highly enriched in promoter and CTCF binding sequences// Genome Res., 2009, 19, P.1338-1349

Ashburner M., Aaron C.S., Tsubota S. The genetic of a small autosomal region of Drosophila melanogaster including the structural geneforal coholdehydrogenase, Characterizationof X-ray-induced Adh null mutations // Genetics, 1982, V. 102, p. 421-435

Ayaki T., Fujikawa K., Ryo H. et all. Induced rates of mitotic crossing over and possible mitotic gene conversion per Wing Anlage cell in Drosophila melanogaster by X-rays and fission neutrons. // Genetic, 1990, V. 126, p. 157-166

Bao C.Y., Ma A.H., Evans H.H., Horng M.F., Mencl J., Hui T.E., Swdwick W.D. Molecular analysis of hypoxanthine-phosphoribosyltransferase gene deletions induced by a- and X- radiation in human lymphoblastoid cells // Mutat. Res. 1995, V. 326, P. 1-15

Balhora R. A model of the structure of chromatin in mammalian sperm // Cell Biol., 1982, V. 93, p. 298-305

Barendsen G.W. The relationships between RBE and LET for different types of lethal damage in mammalian cells: biophysical and molecular mechanisms //Radiat. Res., 1994, V. 139, № 3, p. 257-270

Becker H.J. Mitotic recombination in The Genetics and Biology of Drosophila II edited by M.ASHBURNE and E. NOVITSKIA / Academic Press, New York, 1976. V. IC, p. 1019-1087

Botchway S. W., Stevens D. L., Hill M. A., Jenner T. J., O'Neill P. Induction and Rejoining of DNA Double-Strand Breaks in Chinese Hamster V79-4 Cells Irradiated with Characteristic Aluminum K and Copper L Ultrasoft X Rays // Radiat. Res. 1997, V. 148, № 4, p. 317-324

Breimer L.H. et al. Structure and sequence of mutants induced by ionizing radiation at selectable loci in Chinese hamster ovary cells // Molecular biology, 1986, V. 192. 669-677

Brown R., and Thacker J The nature of mutants induced by ionizing radiation in cultured hamster cells, I. Isolation and initial characterization of spontaneous ionizing radiation-induced, and ethyl methanesulphonate-induced mutants resistant to 6-thioguanine. Mutat. Res., 1984, V. 129, p. 269-281

De Laat W.L., Jaspers N.G., Hoeijmakers J.H. Molecular mechanism of nucleotide excision repair// Genes Dev. 1999, V. 13. P. 768-785

Campusano S., Carramolino 1., Cabrera C.V., Ruiz-Gomez M., Villares R., Boronat A., Modolell J. Molecular genetics of the achaete-scute gene complex ofD. melanogaster// Cell, 1985, V. 40, p. 327-338

Chmuzh E.V., Shestakova L.A. , Volkova V.S., Zakharov I.K. Diversity of mechanisms and functions of enzyme systems of DNA repair in Drosophilamelanogaster// Genetika, 2006, V. 42 (4), p. 462-476

Churikov D., Siino J., Svetlova M., Zhang K., Gineitis A., Mortom B.E., Zalensky A. Novel human testis-specific histone H2B encoded by thq interrupted gene on the X chromosome // Genomics, 2004, V. 84, p.745-756

Coté B., Bender W., Curtis D., Chovnick A. Molecular mapping of the rosy locus in Drosophila melanogaster // Genetics, 1986, V. 112 (4), p.769-783

de Serres F.J. X-ray-induced specific locus mutations in the ad-3 region of two-component heterokaryons of Neurospora crassa. III. Genetic fine structure analysis of the ad-3 and immediately adjacent genetic regions by means of complementation tests // Mutat. Res. 1989, V. 211, p. 89102

de Serres F.J. X-ray-induced specific-locus mutations in the ad-3 region of two-component heterokaryons of Neurospora crassa. VIII. Dose-dependence of the over-all spectrum // Mutat. Res. 1991, V. 246, p. 1-13

Ducau J., Bregliano J-C., C. de La Roche Saint-Andre Gamma-irradiation stimulates homology-directed DNA double-strand break repair in Drosophila embryo// Mutat Res., 2000, V. 460 (1), p. 69-80

Eeken JC, de Jong AW, Loos M, Vreeken C, Romeyn R, Pastink A, Lohman PH. The nature of X-ray-induced mutations in mature sperm and spermatogonial cells of Drosophila melanogaster // Mutat Res., 1994, V. 307(1), p. 201-212

Fishman-Lobell, J., Rudin, N., and Haber, J.E., Two Alternative Pathways of Double-Strand Break Repair That Are Kinetically Separable and Independently Modulated // Mol. Cell Biol, 1992, vol. 12, no. 3, pp. 1292-1303.

Flores C.C. Repair of DNA Double-Strand Breaks and Mismatches in Drosophila, DNA Damage and Repair,vol. 3: Advances from Phage to Humans, Nickoloff, J.A.and Hoekstra, M.F., Eds., Totowa: Humana, 2001, pp. 173-206

Frankenberg-Schwager M., Gebauer A., Koppe C., Wolf H., Pralle E., Frankenberg D. Single strand anneling, conservative homologous recombination, nonhomologous DNA end joing, and the cell cycle-

dependent repair of DNA double strand breaks induced by sparsely or densely ionizing // Radiat. Res., 2009, V. 171 (3), p. 265-273

Friedberg, E. C., Walker, G. C., Siede, W., Wood, R. D., Schultz, R. A., and Ellenberger, T. DNA Repair and Mutagenesis, 2nd Washington, DC: ASM Press 2006

Fujimori A., Tachibana A., Tatsumi K. Allelic losses in mutarions at the aprt locus of human lymphoblastoid cells // Mutat Res. 1992, V. 269, P.55-62

Fugazzola L., Polotti S., pinchera A., Vorontsova T.V., Mondellini P., Bongarsone I., Greco A., Astakhova L., Butti M.G., Demidchik E.P. Pacini F., Pierotti M.A. Oncogenic rearrangements of the RET proto-oncogene in papillary thyroid carcinoma from children exposed tj the Chernobyl nuclear accident // Cancer Research, 1995, V. 55, p. 56175620

Goodhead, D. T. and Charlton, D. E. Analysis of high-LET radiation effects in terms of local energy deposition // Radiat. Prot. Dosim, 1985, V. 13, p. 253-258

Goodhead D.T., Thacker J., Cox R. Effects of radiations of different qualities on cells: molecular mechanisms of damages and repair // Radiation biology, 1993, V. 63 (5), p. 543-556

Goodhead D.T. Energy deposition stochastic and track structure: what about the target? // Radiat. Prot. Dosim., 2006. V. 122, p. 3-15

Grosovsky A.J., Drobetsky E.A., de Jong P.J., Glickman B.W. Southern analysis of genomic alterations in gamma ray induced APRT-hamster cell mutants // Genetics, 1986,113, p. 405-415

Grosovsky, A.J., J.G. de Boer, P.J. de Jong et al. Base substitutions, frame shifts and small deletions constitute ionizing radiation-induced point

mutations in mammalian cells // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 85: 1988, p. 185-188

Hammoud S.S., Nix D.A., Zhang H.,Purwar J., Carrell D.T., Cairns B.R. Distinctive chromatin in human sperm packages genes for embryo development // Nature, 2009, V. 460, p.473-478

Hill M.A. Radiation damage to DNA: the importance of track structure // Radiat Meas., 1999, V. 31 (1-6), p. 15-23

Hill M. Conformation-Sensitive gel electrophoresis // Medical Biomethods Handbook / Humana Press, Inc. Totowa, NJ, 2005, p. 147-153

Hud N.V., Downing K.H., Balhorn R. A constant radius of curvature model for the organization of DNA in toroidal condensates // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1995,92, p. 3581-3585

Ives P.T. the Relationship between radiation dose and dominant visible mutation rate in Drosophila melanogaster // Genetics, 1959, V. 44, № 5, part 2, p. 969-997

Jin Y,, Yie T.A., Carothers A.M. Non-random deletions at the dihydrofolate reductase locus of Chines hamster ovary cells induced by alpha-particles simulation radon//Carcinogenesis, 1995, V. 16, p. 1981-1991

Kelley M. R., Mims I. P., Farnet C. M., Dichany S. A., Lee W. R. Molecular Analysis of X-Ray-Induced Alcohol Dehydrogenase (Adh) Null Mutations in Drosophila melanogaster // Genetics 1985, V. 109 (2), p. 365-377

Kimmins S. and Sassone-Corci P. Chromatin remodeling end epigenetic features of germ cells// Nature, 2005, 434, P.583-589

Kimura H., Higuchi H., Iyehara-Ogawa H, Kato T. Sequence analysis of X-ray-induced mutations occurring in a cDNA of the human HPRT gene

integrated into mammalian chromosomal DNA // Rad. Res., 1993, V. 134, p. 202-208

Kinashi Y., Sakurai Y., Masunaga S., Suzuki M., Takagaki M., Akaboshi M., Ono K. Molecular structural analysis of HPRT mutations induced by thermal and epithermal neutrons in Chinese hamster ovary cells // Radiat. Res., 2000, V. 154 (3), p. 313-318

Klugbauer S., Lengfelder E., Demidchik E.P., Rabes H.M. High prevalence of RET rearrangement in thyroid tumors of children from Belarus after the Chernobyl reactor accident // Oncogene, 1995,11, p. 2459-2467

LaRocque J.R., JacKLevic B.Su. and Sekelsky J. Drosophila ATR in doublestrand break repair// Genetics, 2007, V. 175, p. 1023-1033

LaRocque J.R Dissertation "DNA damage response in Drosophila melanogaster: orchestrating repair with cell cycle checkpoints", University of North Carolina, Chapel Hill, 2007

Leenthouts H.P. and Chadwick K.H. The crucial role of DNA double-strand breaks in cellular radiobiological effects // Adv. Radiat. Biol. 1978, V. 7, p. 55-101

Lefevre G. Sterility, chromosome breakage, x-ray-induced mutation rates and detected mutation frequencies in Drosophila melanogaster // Genetics (US) 1967, V. 55. №2, p. 263-275

Liber H.L., Call K.M., Little J.B. Molecular and biochemical analyses of spontaneous and X-ray induced mutations in human lymphoblastoid cells//Mutation Research, 178,1987, P.143-153

Lindsley D.L., Grell E.H. Genetic variations of Drosophila melanogaster // Carnegie Inst. Wash. Publ., 1968, № 627, p. 473

Lindsley D.L., Zimm G. // Drosophila Inform. Service. 1990, V. 68, p. 321

Lindsley D.L., Zimm G. // The Genome of Dtosophila melanogaster. Part3: Rearrangements. Drosophila Inform. Service, 1987, V. 65, p. 224

Mahmoud J., Fossett N.G., Arbour-Reily P., McDaniel M., Tucker A., Chang S.H., Lee W.R. DNA sequence analysis of X-ray induced Adh null mutations in Drosophila melanogaster/7 Environ Mol. Mutagen., 1991, V. 18(3), p. 157-60

MacPhee D. G. Mismatch repair as an important source of new mutations in non-dividing cells //Experientia, 1996, V. 52 (4), p. 357-63

MartinsR.P., Ostermeier G.C., Krawetz S.A. Nuclear matrix interactions at the human protamine domain: a working model of potentiation // Biol. Chem., 2004, 279, p. 51862-51868

McVey M., Adams M.D., Staeva-Vieira E., Sekelsky J. Evidence for multiple cycles of strand invasion during repair of double-strand gaps in Drosophila II Genetics, 2004, V. 167, p. 699-705

Morris T. and Thacker J. Formation of large deletions by illegitimate recombination in the HPRT gene of primary human fibroblasts// Proc. Natl.Acad. Sci.U.S.A. 90: 1993, P. 1392-1396.

Michalik V. Model of DNA damages induced by radiations of various qualities // Radiation biology, V. 62 (1), p. 9-20

Miles, C. and M. Meuth. DNA sequence determination of gamma-radiation-induced mutations of the hamster aprt locus // Mutat. Res., 1989, V. 227, p. 97-102

Min S. Park, Hanks T., Jaberaboansari A. Molecular Analysis of Gamma-Ray Induced Mutations at the HPRT Locus in Primary Human Skin Fibroblasts by Multiplex Polymerase Chain Reaction // Radiation research, 1995, V. 141, p. 11-18

Mognato M., Ferraro P., Canova S., Sobri G., Russo A., Cherubini R. Analysis of mutational effect at the HPRT locus in human GO phase lymphocytes irradiated in vitro with y-ray // Mutation Research, 2001, p. 147-158

Morgan T.L., Feck Earl W., Poston K.A., Denovan B.A., Newman C.N., Rossiter J.F., Miller J.H. Molecular characterization of X-ray indeced mutations at the HPRT locus in plateau-phase Chinese hamster ovary cells//Mutation Research, 1990, V. 232, p. 171-182

Morris T. and J. Thacker. Formation of large deletions by illegitimate recombination in the HPRT gene of primary human fibroblasts // Proc. Natl Acad. Sci.U.S.A. 1993, V. 90, p. 1392-1396

Muller H.J. The nature of the genetic effects produced by radiation / in A. Hollaender (Ed.) // Radiation Biology, Part 1, Chapter 7, McGraw-Hill, New York, 1954, p. 351-473

Muller H.J. The manner of production of mutations // Radiation Biology / Ed. A. Hollaender. N.Y.: McGrow-Hill, 1954, p. 475-626

Murakami A. The nature of specific locus mutations induced by fast neutrons in silkworm spermatocytes // Annual Report of National Institute of genetics (Japan), 1971, № 22, p. 62-63

Nalbantoglu J., Phear G., Meuth M. DNA sequence analysis of spontaneous mutations at the APRT locus of hamster cells // Molecular and cellular biology, 1987, V. 7 (4), p. 1445-1449

Nelson S.L., Jones I.M., Fuscoe J.C., Burkhart-Schultz K., Grosovsky A.J. Mapping the end point of large deletions affecting the HPRT locus in human peripheral blood cells and lines // Rad. Res., 1995, V. 141, p.2-10

Nikiforov Y.E., Rowland J.M., Bove K.E., Fagin J. A. Distinct of ret oncogene rearrangements in morphological variants of radiation-induced and

sporadic thyroid papillary Carcinomas in Children // Cancer research, 1997, V. 57, p. 1690-1694

Park M.S., Hanks T., Jaberaboansari A. Chen D.J. Molecular analysis of gamma-ray-induced mutations at the HPRT locus in primary human skin fibroblasts by multiplex polymerase chain reaction // Rad. Res., 1995, V. 141, p.11-18

Pastink A, Schalet A.P., Vreeken C., Paradi E., Eeken J.C. The nature of radiation-induced mutations at the white locus of Drosophila melanogaster // Mutat Res., 1987, V. 177 (1), p.101-115

Pastink A., Vreeken C., Schalet A.P., Eeken J.C. DNA sequence analysis of X-ray-induced deletions at the white locus of Drosophila melanogaster // Mutat Res., 1988, V. 207 (1), p. 23-28

Pastinc A., Vreeken C, Vogen E.W., Eeken J.C.J Mutations induced at the white and vermilion loci in Drosophila melanogaster // Mutat. Res., 1990, V. 231, p. 63-71

Phillips E.N., Xia F., Kelsey K.T., Liber H.L. Spectra of spontaneous and X-ray induced mutations at the HPRT locus in related human lymphoblast cell lines that express wild-type or mutant p53 // Rad.res., 1995, V. 143, p. 255-262

Preston C.R, Engels W., Flores C. Efficient Repair of DNA Breaks in Drosophila: Evidence for Single-Strand Annealing and Competition with Other Repair Pathways // Genetics 2002, V. 161 (2), p.711-720

Pierotti M.A., Santoro M., Jenkins R.B., Sozzi G., Borgansone I., Grieco M., Monzini N, Miozzo m., Herrmann., Fusco A., Hay I.D., Delia P.G., Vecchio G. Characterization of an invertion on the long arm of chromosome 10 juxtaposing D10S170 and ret and creating the oncogenic sequence ret/ptc //Natl. Acad. Sci. USA, 1992, V. 89, p. 1616-1620

Preston C. R., Flores C. C., Engels W. R. Differential Usage of Alternative Pathways of Double-Strand Break Repair in Drosophila // Genetics, 2006, V. 172 (2), p. 1055-1068

Rinchik E.M., Russell L.B., Copeland N.G., Jenkins NA. Molecular genetic analysis af the dulite-short ear (D-SE) region of the mouse // Genetics, 1986, V. 112, p. 321-342

Rinchik E.M. Molecular analysis of heritable mouse mutations // Environ. Health. Perspect., 1987, V. 74, p. 41-48

Rinchik E.M., Stoye J.P., Frankel W.N., Coffin J., Kwon B.S., Russell L.B Molecular analysis of viable spontaneous and radiation-induced albino (c)-locus mutations in the mouse // Mutat Res. 1993, V. 286 (2), p. 199207

Rothkamm K., Gunasekara K., Warda S.A. et al. Radiation-induced HPRT mutations resulting from misrejoined DNA double-strain breaks // Radiat. Res., 2008, V. 169, p. 639-648

Russell L.B. Definition of functional units in a small chromosome segment of the mouse and its use in interpreting the nature of radiation-induced mutations // Mutat. Res., 1971, V. 11, p. 107-123

Singleton B.K., Griffin C.S., Thacker J. Clustered DNA damages leads to complex genetic changes in irradiated human cells // Cancer. Res., 2002, V. 62, p.6263-6269

Sotolongo B., Lino E., Ward W.S. Ability of hamster spermatozoa to digest their own DNA // Biol. Repord., 2003, V. 69, p. 2029-2035

Tachibana A., Ohbayashi T., Takebe H., Tatsumi K. Molecular changes in UV-indused and y-ray-induced mutations in human lymphoblastoid cells // Mutation Research, 1990, V. 230, p. 159-166

Thacker J, Fleck E.W., Morris T., Rossiter B.J., Morgan T.L. Localization of deletion breakpoints in radiation-induced mutants of the hprt gene in hamster cells I I Mutat Res., 1990, V. 232 (2), p. 163-70

Turker M., Walker K.A., Jennings C.D., Mellon I., Yusufji A., Urano M. Spontaneous and ionizing radiation induced mutations involve large events when selecting for loss of an autosomal locus // Mur. Res., 1995, V. 329, p. 97-105

Yutaka W., Takahashi A., Itoh M., Takano-Shimizu T Molecular spectrum of spontaneous denovo mutations in male and female germline cells of Drosophila melanogaster//Genetics, 2009, V. 181, p. 1035-1043

Ward W.S and Coffey D.S. Minireview. DNA packaging and organization in mammalian spermatozoa: comparison with mammalian cells // Biology of reproduction, 1991, V. 44, p. 569-574

Ward W.S Minireview. Deoxyribonucleic Acid Loop Domain Tertiary structure in mammalian spermatozoa // Biology of reproduction, 1993, V. 48, p.l 193-1201

Ward W.S. Function of sperm chromatin structural elements in fertilization and development // Molec. Human Reproduction, 2010, V. 16, № 1, p.

Whaley J.M., Little J.B. Molecular characterization of hprt mutants induced by low- and high-LET radiations in human cells // Mutation Research, 1990, V. 243, p. 35-45

Wood R.D. DNA repair in eukaryotes // Annu. Rev. Biochem, 1996, V. 65, p. 135-167

30-36