Микроорганизмы озера Байкал как индикаторы антропогенного влияния и перспектива их использования в биотехнологии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Верхозина, Елена Владимировна

• Верхозина, Елена Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Верхозина, Елена Владимировна

Введение.

Глава 1. Современное состояние проблемы, микроорганизмы как индикаторы антропогенных воздействий на экосистемы водоемов.

1.1. Современная классификация источников водоснабжения по микробиологическим показателям.

1.2. Влияние антропогенного фактора на качество питьевой воды.

1.3. Изменчивость численности микроорганизмов и трофности озер при антропогенных нагрузках.

1.4. Микробиологические исследования на Байкале.

1.5. Принцип организации мониторинга за состоянием экосистемы озер.

Глава 2. Штаммы- продуценты ферментов рестрикции для биотехнологии.

2.1. Ферменты рестрикции, их номенклатура и классификация

2.2. Распространение рестриктаз

2.3. Характеристика субстратной специфичности рестриктаз 36 ^ 2.4. Ферментативные свойства рестриктаз

2.5. Ферменты рестрикции их поиск и применение

Глава 3. Объекты, методы и объем выполненных исследований.

3.1. Объем и объем выполненных исследований.

3.2. Микробиологические методы.

3.3. Методы определения ферментов рестрикции.

Глава 4. Влияние антропогенного фактора в районе Южного Байкала

4.1. Количественная характеристика микробных сообществ в воде Южного Байкала.

4.2. Чувствительность бактериальных штаммов к антибиотикам.

Глава 5 Выявление таксономической принадлежности и некоторых биохимических свойств микроорганизмов.

Глава 6. Микроорганизмы воды и донных осадков оз. Байкал как потенциальные источники получения ферментов рестрикции

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Микроорганизмы озера Байкал как индикаторы антропогенного влияния и перспектива их использования в биотехнологии»

Рациональное использование природных ресурсов, таких как экосистема оз. Байкал, а также разработка водо-охранных мероприятий невозможна без выявления роли микроорганизмов и их изменчивости в процессах превращения веществ и микрофлоры антропогенной природы, поступающих в озеро. Оценка антропогенного воздействия на качество воды на начальной, наиболее быстро релаксирующей части трофической цепи -микроорганизмах. Это перспективно и общественно значимо, поскольку позволяет оперативно выявить нарушения и принимать управленческие решения по регулированию интенсивности всех видов человеческой деятельности на экосистемы. Антропогенное вмешательство в экосистемы крупнейших поверхностных водоемов, таких как оз. Байкал, связано с возможностью необратимых последствий для ныне живущих и будущих поколений, что находится в противоречии с устойчивым экономическим развитием.

Многие исследователи всего мира давно пытаются найти способ выявления влияния человека на экосистемы, в частности, на водные объекты. В данной работе, мы попытались объединить традиционные методы микробиологических исследований с методами физико-химической биологии. При помощи внутриклеточных ферментов рестриктаз определить характеристику бактерий, которые являются продуцентом этого фермента.

Поиск штаммов новых продуцентов эндонуклеаз рестрикции (рестриктаз) обусловлен в первую очередь той ролью, которую эти ферменты сыграли и продолжают играть в молекулярно-генетических исследованиях вообще и генной инженерии в частности. Дальнейшее развитие этих ведущих направлений современной биологической науки и их прикладных значений, имеют самое непосредственное отношение к решению биотехнологических проблем. Во многом это зависит от доступности широкого ассортимента рестриктаз различной субстратной специфичности. Все это стимулировало интенсивный поиск продуцентов новых специфических эндонуклеаз и организацию их промышленного выпуска.

Эндонуклеазы рестрикции II типа (рестриктазы), благодаря способности фрагментировать ДНК по строго определенным последовательностям нуклеотидов, нашли широкое применение в решении научных и прикладных задач (Smith Н. С. Nathans D., 1973; Murrey К., Hughes S., G., 1976; Акулин и др., 1988; Roberts R.J., 1990). Анализ специфичности рестриктаз предполагает существование неоткрытых прототипов этих ферментов (Янулайтис А.А., 1989). Водные микроорганизмы относительно плохо изучены как возможные продуценты рестриктаз, хотя среди них были выявлены ферменты с новой специфичностью (Дегтярев и др., 1987). Поиск эндонуклеаз рестрикции обусловлен тем, что выявленные новые штаммы бактерий, продуцирующие эти ферменты новые, редкие или более технологичны, чем известные. Таким образом, все вышеуказанное определило актуальность темы диссертационной работы.

Цель работы - поиск и идентификация новых наиболее перспективных штаммов, выделенных из различных экологических ниш озера Байкал, исследование влияния антропогенного фактора на распределение и биологические свойства бактерий, а также отбор наиболее технологичных штаммов-продуцентов.

Основные задачи:

1. Выделение бактериальных штаммов из различных экологических ниш оз. Байкал и исследование их биологических свойств: ферментов эндонуклеаз рестрикции и антибиотикорезистентности.

2. Поиск культур микроорганизмов, продуцентов новых эндонуклеаз рестрикции как потенциальных источников получения промышленных ферментов.

3. Выявление таксономической принадлежности и некоторых биохимических свойств микроорганизмов

4. Разработка алгоритма степени устойчивости экосистемы по микробиологическим показателям, позволяющим выявить риск воздействия на экосистему оз. Байкал.

Теоретической значение и научная новизна работы. Впервые разработан и реализован новый эколого-биотехнологический подход к оценке антропогенного влияния на олиготрофные водоемы. Проверено 650 штаммов микроорганизмов, выделенных из различных районов оз. Байкал, в 10% которых обнаружена рестриктазная активность. Проведена идентификация по морфологическим и физиолого-биохимическим признакам. Создан алгоритм степени устойчивости экосистемы оз. Байкал по микробиологическим показателям. Установлено, что в районах антропогенного влияния появляются бактериальные штаммы, устойчивые к широкому спектру антибиотиков и выявляются штаммы бактерий, с новыми ферментами рестриктазами, которые используются в биотехнологических разработках.

Практическая значимость. В работе показана целесообразность использования ферментов эндонуклеаз рестрикции, выделенных в бактериальных штаммах хемоорганоторофных бактерий как индикаторов антропогенного воздействия. Рекомендовано использование разработанного алгоритма устойчивости озера Байкал Ангаро-Байкальским Бассейновым Водным Управлением при рассмотрении «Норм допустимых воздействий на экосистему оз. Байкал» (приложение). Результаты будут необходимы при мониторинговых исследованиях за качеством воды, а также всей экосистемы Байкала - участка мирового природного наследия - с целью сохранения уникального озера.

Создана коллекция из 650 бактериальных штаммов, включающих 5 штаммов-продуцентов новых эндонуклеаз рестрикции. Байкальские штаммы-продуценты уникальных и редких ферментов, используются в НПО «Вектор» и ООО «СибЭнзим» (г. Новосибирск) при получении сайт-специфических эндонуклеаз рестрикции: Acal, Bsil, FanI, Sse9D, Cci N1. Штаммы микроорганизмов Acinetobacter calcoaceticus B-7 и Flavabacterium aquatil B-l зарегистрированы во всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов. Коллекционные штаммы микроорганизмов используются при изучении качества воды по бактериальным показателям.

Результаты исследований использованы при выполнении Гранта РФФИ-Байкал (№ 01-04-97209) и хоздоговорных работ с Администрацией Иркутской области (Влияние антропогенного фактора на качественный состав микроорганизмов и эколого-эпидемиологическую ситуацию в районе Южного Байкала, 2001-2003 гг.). Материалы диссертации использованы в учебных курсах Иркутского государственного технического университета по дисциплинам: "Биотехнология», "Техническая микробиология" и "Микробиология".

Апробация работы. Основные защищаемые положения диссертационной работы докладывались и обсуждались на международном семинаре "Гомеостатика живых, природных, технических и социальных систем" (Иркутск, 2001); на международном совещании проекта бурения Байкала и Хубсугула (Улан-Батор, 2001); на второй школе-семинаре молодых ученых России «Проблемы устойчивого развития региона» (Улан-Удэ, 2001); на Молодежной научной школе «Нефть и газ в современном мире: геолого-экономические и социально-культурные аспекты» (Иркутск, 2001); на научно- практической конференции «Оценка современного состояния микробиологических исследований в Восточно-Сибирском регионе» (Иркутск, 2002), на 2-ой международной научно- практической конференции «Энергосберегающие и природоохранные технологии» (Улан-Удэ, 2003); на третьей республиканской школе-конференции «Молодежь и пути России к устойчивому развитию» (Красноярск, 2003), На Всероссийской гидрогеохимической научной конференции «Проблемы поисковой и экологической геохимии Сибири» (Томск, 2003).

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Верхозина, Елена Владимировна

Выводы:

1. Выявлено, что в прибрежной части оз. Байкал появляются штаммы-продуценты новых ферментов эндоэндонуклеаз рестрикции. В пелагиали озера и в кернах донных осадков таких бактерий не найдено.

Возникновение новых рестриктаз в штаммах бактерий, выделенных из районов антропогенного влияния, является результатом бактериальных мутаций.

2. Биологические свойства выделенных штаммов в районах антропогенного влияния изменены и по другим показателям. Часть штаммов, выделенных из антропогенных районов, отличается устойчивостью к широкому спектру антибиотиков в отличие от микроорганизмов, выделенных из чистых фоновых районов и кернов осадков оз. Байкал.

3. Создана коллекция бактерий, обладающих новыми и редкими ферментами - эндонуклеазами рестрикции. Пять штаммов идентифицированы как Flavobacterium aquatil, Acinetobacter calcoaceticus, Curtobacterium citreum, Bacillus sphaericus, Sporosarcina sp 9D.

4. Штаммы - продуценты новых эндонуклеаз рестрикции используются при получении сайт-специфических эндонуклеаз рестрикции: Acal, Bsil, FanI, Sse9D, Cci N1 фирмой ООО «СибЭнзим» (г. Новосибирск).

5. Установлена таксономическая принадлежность 200-х бактериальных штаммов, выделенных из прибрежных районов вблизи поселений, 23 штамма определены до вида, остальные до рода.

6. На основе полученных результатов, разработан алгоритм степени устойчивости экосистемы озера Байкал по микробиологическим показателям, позволяющий выявить риск антропогенного воздействия на качество воды оз. Байкал.

7. Показана целесообразность применения ферментов эндонуклеаз рестрикции бактериальных штаммов как тестов на антропогенное влияние на начальном этапе изменения экосистемы оз. Байкал, что необходимо для обоснования организации систематических наблюдений за микробиологическими показателями оз. Байкал на водохозяйственных участках поселений.

8. Новый биотехнологический подход оценки антропогенного влияния на качество природной воды оз. Байкал на наиболее быстро релаксирующей части трофической цепи - микроорганизмах, перспективен, поскольку позволит оперативно принимать управленческие решения по регулированию интенсивности всех видов деятельности в прибайкальских зонах.

Заключение

Проведенные исследования с использованием методов физико-химической биологии при решении экологических задач позволяют судить о качественном изменении микроорганизмов в прибрежной части Байкала, находящейся под антропогенным влиянием. Возможно, что результаты исследований будут способствовать решению проблемы надежности индикации антропогенного загрязнения в биологической части трофической цепи. С другой стороны, полученные результаты дают основание предположить, что прибрежная часть Байкала, находящаяся под антропогенным влиянием, может оказаться подходящей экологической нишей для возникновения продуцентов штаммов эндонуклеаз рестрикции, широко используемых в биотехнологии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Верхозина, Елена Владимировна, 2003 год

1. Амбразене Ж.П. Классификация речных вод по степени загрязненности на основании микробиологических показателей //Водные ресурсы 1974. № 5. С. 102-109.

2. Белькова Н.Л., Денисова Л.Я., Манакова Е.Н., Зайчиков Е.Ф., Грачев

3. М.А. Видовое разнообразие глубоководных микроорганизмов озера Байкал, выявленное по последовательностям 16 S рРНК //ДАН. 1996. т. 348. №5. С. 692-695.

4. Бухарин О.В., Литвин В.Ю. Патогенные бактерии в природных экосистемах. Екатеринбург: УрО РАН. 1997. С. 3-5.

5. Бухарин О.В., Усявцов Б.Я. Бактерионосительство (медико-экологический аспект). Екатеринбург: УрО РАН. 1996. 203 с.

6. Верхозина В.А. Микробиальные процессы круговорота азота в оз. Байкал. Автореф. на соиск. уч. ст. к.б.н. Алма-Ата. 1983. 16 с.

7. Верхозина В.А., Парфенова В.В. Микроорганизмы круговорота азота и фосфора//Экология Южного Байкала. Иркутск. 1983. С. 84-103.

8. Верхозина В.А. Микробиальные процессы круговорота азота в оз. Байкал //Микроорганизмы в экосистемах озер и водохранилищ. Наука. 1985. С. 33^2.

9. Верхозина В.А. Влияние антропогенного фактора на микробиальные процессы круговорота азота //Совершенствование регионального мониторинга состояния оз. Байкал. 1985. Л. С. 66-70.

10. Верхозина В.А., Верхозина Е.В. Микроорганизмы-индикаторы антропогенных изменений в экосистеме озера Байкал //Оценка современного состояния микробиологических исследований в ВосточноСибирском регионе. Иркутск. 2002. С. 132-137.

11. Верхозина Е.В., Верхозина В.А., Савилов Е.Д. Микроорганизмы оз. Байкал как индикаторы антропогенного влияния и перспектива ихиспользования в биотехнологии //Сибирь-Восток. Иркутск. 2003. № 8. С. 11-15.

12. Верхозина Е.В. Проблемы чистой воды и рационального использования водных ресурсов озера Байкал. //2-ая школа-семинар молодых ученых России «Проблемы устойчивого развития региона». Улан-Удэ, 2001, С. 144-148.

13. Верхозина В. А., Верхозина Е.В. Микроорганизмы-индикаторы антропогенных изменений в экосистеме озера Байкал. //Оценка современного состояния микробиологических исследований в ВосточноСибирском регионе. Иркутск, 2002, С. 132-137 С.

14. Верхозина Е.В., Верхозина В.А., Савилов Е.Д. Микроорганизмы озера Байкал как индикаторы антропогенного влияния и перспектива их использования в биотехнологии //Сибирь-Восток. 2003. № 8. С. 11-15.

15. Астафьев В.А., Мамонтова JT.M., Савилов Е.Д., Верхозина В.А., Верхозина Е.В., Максимова Э.А., Крайкивская О.В., Рубанович И.Я., Тимошенко АЛ. Загрязнение вод бассейна озера Байкал патогенными вирусами //Сибирь-Восток. 2003. С. 23-24.

16. Верхозина Е.В., Верхозина В.А., Савилов Е.Д., Мамонтова Л.М., Астафьев В.А. Оценка качества воды озера Байкал по микробиологическим показателям//Сибирь-Восток. 2003. (в печати).

17. Астафьев В.А. Мамонтова Л. М., Савилов Е.Д., Верхозина В.А.,. Максимова Э.А, Крайкивская О.В., Рубанович И.Я., Тимошенко АЛ. Загрязнение бассейна озера Байкал патогенными вирусами. //Сибирь-Восток. 2003.№ 8. С. 23-24.

18. Верхозина Е.В, Верхозина В.А. Принятие решений и методы оценки состояния экосистемы озера Байкал. //Молодежь и пути России кустойчивому развитию. Третья республиканская школа-конференция. Институт физики СО РАН. 2003. С. 35-37.

19. Винберг Г.Г. Сравнительная оценка некоторых распространенных методов расчета продукции водных бактерий //Гидробиол. журн. 1971. Т. 7, № 4. С. 86-97.

20. Виноградова JI.A., Пархомчук Т.К. Комплексные санитарно-микробиологические критерии оценки качества водных объектов в условиях возрастающей антропогенной нагрузки //Гигиена и санитария. 1991. №1. С. 24-26.

21. Воейкова Т.А., Славинская Е.В. и др. Определение ферментов рестрикции биологическими методами //Генетика. 1979. т. 15. С. 17461755.

22. Галазий Г.И. Об общих основах охраны водоемов от загрязнения //Гидробиолог, журн. 1982. Т. 18. С. 102-109.

23. Гоман Г.А., Нечесов И.А. Некоторые вопросы микробиологического мониторинга на Байкале //Микроорганизмы в экосистемах озер и водохранилищ. Н.: Наука. 1985. С. 105-114.

24. Гончар Д.А., Дедков B.C., Верхозина В.А., Куснер Ю.С., Шевченко А.В., Дегтярев С.Х. Эндонуклеаза рестрикции Sse 91 из штамма Sporosarcina sp. 9D узнает последовательность ДНК-5-ААТТЗ' //Молекулярная генетика. 1998. № I.e. 32-34.

25. Горленко В.М., Дубинина Г.А., Кузнецов С.И. Экология водных микроорганизмов. М.: Наука. 1977. 287 с.

26. Государственный доклад "О состоянии здоровья населения Российской Федерации в 1991 году". М.: 1992. 74 с.

27. Государственный доклад о состоянии окружающей природной среды Иркутской области в 1998 году. Иркутск, Государственный комитет по охране окружающей среды Иркутской области Госкомэкологии России Администрации Иркутской области. 1999 г. 303 с.

28. Грачев М.И. О современном состоянии экологической системы озера Байкал. Иркутск. 1999. 117 с.

29. Даукшита А.С. Данные микробиологического обследования некоторых озер Латвийской СССР. 1967. № 1. С. 20-22.

30. Дегтярев С.Х., Репин В.Е., Речкунова Н.И. Определение субстратной специфичности рестрикционной эндонуклеазы Vspl //Биорганич. химия. 1987.T.13.N. 3. С. 420-421.

31. Дегтярев С.Х., Речкунова Н.И., Нетесова Н.А. и др. Установление специфичности эндонуклеазы рестрикции Vnel //Биорг. химия. 1987. т. 13. С. 422-423.

32. Дегтярев С.Х., Речкунова Н.И. Определение чистоты препаратов эндонуклеаз рестрикции //Изв. СО АН СССР. 1988. сер. биолог. Науки. В.2. № 14. С. 102-105.

33. Дедков B.C., Репин В.Е.,Речкунова Н.И., Дегтярев С.Х., Верхозина

34. B.А., Виноградова Т.П. Выявление штаммов-продуцентов эндонуклеаз рестрикции среди водных микроорганизмов озера Байкал. Изв. Сиб. Отдел. АН СССР. сер. биолог. 1990. № 1. С. 35-37.

35. Драчев С.С. Борьба с загрязнением рек, озер и водохранилищ промышленными и бытовыми стоками. М.: Наука. 1964. 326 с.

36. Жукинский В.Н., Оксиюк О.П., Олейник Г.Н., Кошелева С.И. Принципы и опыт построения экологической классификации качества поверхностных вод суши //Гидробиологический журнал. 1981. Т. 12. № 2.1. C.38-49.

37. Израэлъ Ю.А., Гасилина Н.К., Абакумов В.А., Цыбань А.В.

38. Гидробиологическая служба наблюдений и контроля водной среды //Научные основы контроля качества вод по гидробиологическим показателям. Л.: Гидрометиздат. 1981. 201 с.

39. Илялетдинов А.Н., Верхозина В.А. Микроорганизмы круговорота азота -индикаторы загрязнения водоема //Изв. АН Каз. СССР. сер. биолог. 1982а. №3. С. 44-49.

40. Илялетдинов А.Н., Верхозина В.А. Микроорганизмы круговорота азота -индикаторы загрязнения водоемов. //Проблемы экологии Прибайкалья. 1982 6. т.2. 36 с.

41. Иоргенсен С.Э. Управление озерными системами М.: Агропромиздат. 1985. 160 с.

42. Киселев И. А. Планктон морей и континентальных водоемов. Л.: Наука. 1969. т. 1. 563 с.

43. Кожова О.М. и Казанцева Э.А. О сезонных изменениях бактериопланктона в водах оз. Байкал. Микробиология. 1961. т. 30. № 1. С. 113-118.

44. Кожова О.М. Экологический мониторинг и проблемы здоровья населения //Тез. докл. науч.-практ. конф. Иркутск. 1991. 16 с.

45. Кочу ров Б.И., Сарвайская Л.И., Денисова Т.Б. Экологическая ситуация в России в связи с состоянием здоровья населения //Региональные проблемы здоровья населения России. М.: ВИНИТИ. 1993. С. 43-45.

46. Крамаров В.М., Смолянинов В.В. "Биохимия". 1981. 46. 1526-1529.

47. Крисс А.Е., Мишустина И.Е., Мицкевич Н.Н., Земцова Э.В. Микробное население мирового океана. М.: Наука. 1964. 291 с.

48. Крылов В.Н., Карапетян А.Т. «Генетика». 1977. т. 13. С. 1079-1088.

49. Кузнецов С.И. Применение микробиологических методов и изучение органического вещества в водоемах. Микробиология. 1949. т. 18. в. 3. С. 203-215.

50. Кузнецов С.И. Сравнительная характеристика биомассы бактерий и фитопланктона в поверхностном слое воды Среднего Байкала. Тр. Байкал. Лимн. Ст. АН СССР. 1951. т. 13. С. 217-225.

51. Кузнецов С.И. Микробиологическая характеристика вод и грунтов Байкала. //В сб.: Тр. Байк. лимн. ст., М.: Л. 1957. т. 15 q 387-396

52. Кузнецов С.И. Микрофлора озер и ее геохимическая деятельность. Изд-во Наука. 1970. 439 с.

53. Лабинская А.С. Практикум по микробиологческим методам исследования. М.: Медицинская литература. 1963. 462 с.

54. Лабинская А.С., 1978. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М.: Медицина. С. 303-314.

55. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа. 1973. 343 с.

56. Лаптева Н.А. Видовая характеристика гетеротрофных бактерий в озере Байкал. //Микробиология. 1990. т. 59. в. 3. С. 499-506

57. Максимова Э.А., Максимов В.Н., Воробьева Е.И. О количестве гетеротрофных микроорганизмов в воде озера Байкал. Микробиология. 1974. т. 43. в. 1.С. 124-129.

58. Максимова Э.А., Максимов В.Н. Время генерации чистых культур гетеротрофных микроорганизмов Байкала. Микробиология. 1975. т. 44. в. 6. С. 1098-1102.

59. Максимова Э.А., Максимов В.Н. Характеристика водных масс литорали Байкала по микробиологическим показателям. Оценка и классификация качества поверхностных вод для водопользования. Всесоюзная конференция. 1979. Тез. сооб. Харьков. 1979. С. 59-61

60. Мамонтова Л.М., Савилов Е.Д., Протодьяконов А.П., Маркова Ю.А. Инфекционная "агрессивность" окружающей среды: Концепция микробиологического мониторинга. //Новосибирск: Наука. 2000. 240 с.

61. Мейнел Дж., Мейнел Э. Экспериментальная микробиология. М.: Мир. 1967. 347 с.

62. Младова Т.А. Влияние промстоков БЦЗ на микрофлору водной толщи и донных отложений Южного Байкала. //Круговорот вещества и энергии в водоемах. 1977. С. 143-145.

63. Нормативно-методические документы по гигиене, серия "Гигиена окружающей среды". Выпуск №2 "Гигиена воды". Министерство здравоохранения СССР НПО "Союзмединформ", Москва. 1991. С. 140.67.0дум Ю. Основы экологии. М.: Мир. 1975. 740 с.

64. Одум Ю. Экология. М.: Мир. 1986. т. 1. 328 с.69.0дум Ю. Экология. М.: Мир. 1986. т. 2. 740 с.70.0нищенко Г.Г. Анализ современной эпидемиологической обстановки //Мед. каф. 2002. № янв. С. 10-15, 113-127.

65. Панасюк Е.Ю., Дрюккер В.В., Парфенова В.В., Косторнова Т.Я.

66. Выделение потенциально-патогенных бактерий из озера Байкал //Сибирь -Восток. 2002. № 2. С. 12-15.

67. Парфенова В.В. Количественная характеристика и сезонная динамика микроорганизмов, мобилизующих фосфаты в воде Байкала. //Микроорганизмы в экосистемах озер и водохранилищ. Н.: Наука. 1985. С. 42-55.

68. Парфенова В.В. Количественная характеристика и сезонная динамика микроорганизмов, мобилизубщих фосфаты в воде Байкала.

69. Микроорганизмы в экосистемах озер и водохранилищ. Новосибирск. Наука. 1985. С. 55-64.

70. Плешков Б.П. Практикум по биохимии растений. М.: Наука. 1976. 255 с.

71. Покорны И., Талаева Ю.Г., Дмитриева Р.А. и др. Микробиологические критерии качества рекреационной воды в странах членах СЭВ //Гигиена и санитария. 1991. №4. С. 64-67.

72. Разумов А.С. Микробиальный планктон воды //Тр. Всес. гидробиолог, о-ва. 1962. т. 12. С. 60-190.

73. Рахманин Ю.А., Недачин А.Е., Доскина Т.В. и др. Индикаторная значимость коли-фагов в отношении загрязнения питьевой воды кишечными вирусами //Гигиена и санитария. 1990. № 6.-С. 21-23.

74. Родина А. Г., Кузьмицкая Н. К. Видовой состав гетеротрофных микроорганизмов водной толщи Ладожского озера //Микробиология. 1964. т. 33. в. 6. с. 1010-1017.

75. Родина А.Г. Методы водной микробиологии (практическое руководство). М.: Наука. 1965. 363 с.

76. Романов Г.А., Ванюшин Б.Ф. "Биол. науки", 1980, 11, 5-20.

77. Романова А.П. Интенсивность развития бактериальной флоры на литорали озера Байкал (по пластинам обрастания). //Микробиология. 1958а. т. 27(5). с. 634-640.

78. Романова А.П. Сезонная динамика бактерио планктона, его горизонтальная и вертикальное распределение в южной части Байкала. Изв. СО АН СССР. 19586. № 7. с. 114-124.

79. Романова А.П. К микробиологии озера Байкал, сезонная динамика численности бактерий и процессов круговорота азота в водной толще и грунтах Южного Байкала. Автореф. Дисс. . канд. биол. наук. Иркутск. 1961.-22 с.

80. Романова А.П. Сезонная динамика круговорота азота в водной толще и грунтах литорали оз. Байкал. Тр. 6 совещания по проблемам биологии вид. вод. ИБВВ и ЗИИ. М.: Л. 1959. с. 159-167.

81. Романова А.П. К микробиологии озера Байкал, сезонная динамика численности бактерий и прцессов круговорота азота в водной толще и грунтах Южного Байкала. Автореф. Дисс. . канд. биол. наук. Иркутск. 1961. 22 с.

82. Савилов Е.Д., Колесников С.И., Красовский Г.Н. Инфекция и техногенное загрязнение: Подходы к управлению эпидемическим процессом. Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние. 1996а. 192 с.

83. Таняшин В. И. В сб: " Итоги науки и техники". Сер. "Молекулярная биология", ВНИТИ, М., 1979, 36-98.

84. Черкасский Б.Л. Современные особенности эпидемиологии кишечных инфекций в Российской Федерации //Эпидемиология и инфекционные болезни. № 5.-С. 12-15.

85. Шлегель Г. Общая микробиология. Изд-во "Мир" М. 1972. 476 с.

86. Юрковская В.А. Микробиологические критерии загрязненности и кислородный режим в реке в зоне влияния сточных вод ЦБК //Материалы

87. VI Всесоюз. Симпозиума по современным проблемам самоочищения водоемов и регулирования качества воды. Таллин. 1979. Т. 2. С. 52-54.

88. Янулайтис А.А., Стакенас П.С. и др. «Мол. биол.», 1984, 115-129.

89. Ясницкий В.И., Бланков Б.А., Гортиков В.М. Отчет о работах Байкальской биологической станции. Известия Биолого-почвенного научно-исслед. Ин-та при Государственном Иркутском университете, 1927. т. З.в. 3.35 с.

90. Amann R.I., Ludwig W., Schleifer K.N. //Microbiol. Rew. 1995. v. 345. p. 60-63.

91. Barns S.M., Fundyga R.E., Jeffries M.W., Pace N.R. //Tbid. 1992. v. 356. p. 148-149.

92. Berdgey's manual of systematic Bacteriology. Baltimor; London. 1984. v.l, 2.

93. Bigger С. H., Murray K. et al. "Nature", 1973. v. 244. p. 7-10.

94. Boyer H.W. "Annu Rev. Microbiol.", 1971. v 25. p. 153-176.

95. Butkus V., Klimasauskas S. et al. "Nucl. Acids Res.",1985. v. 13. p. 57275746.

96. Clarke C.M., Hartley B.S. "Biochem. J.", 1979. v. 177. p. 49-62.

97. Daudner Y., Adamec R., Toht D., Yohnova V. Vplyv trofichych podmienoc na rozomozenic crevnvch bacterii vo vode //Bratisl. Lec. Listy. 1979. Vol. 72. № l.P. 58-64.

98. DeLong E.F., Franks R. E., Alldredge A.L. //Limnol. Oceanogr. 1993. v.38. p. 924-934.

99. Desmarchelier P., Lew A., Caique W. Et al. An evaluation on the hydrogen sulphide water screening test and coliform counts for water quality assesment in ryral Malaysia //Trans, roy. Soc. trop. Med. and Hyg. 1992. Vol. 86. № 4. p. 448-450.

100. Doerfler W. «J. Gen. Virol.», 1981. v. 57. p. 1-20.

101. Dufour Alfred P. Water microbiology //J. AO AC Int. 1992. Vol. 78. № i. p. 136.

102. Dussoix D., Arber W. "J. Mol. Biol", 1962. v. 5. p. 37-49.

103. Duyvesteyn M.G.C., Korsuize J. et al. "Arch. Microbiol.". 1983. p. 134, 276-281.

104. Ehrlich M., Wang R.Y.-H. "Science", 1981. v. 212. p. 1350-1357.

105. Ehrlich M., Gama-Sosa M. et al. "Nucl. Acids Res", 1985. v. 13. p. 1399-• 1412.

106. Ehrlich M., Wilson G.G. et al. "J. Bacterid", 1987. p. 169, 939-943.

107. Endow S.A., Roberts R.J. "J. Mol. Biol ", 1977. p. 112,521-529.

108. Fitzgerald G. F., Daly C. et al. "Nucl. Acids Res.", 1982. v. 10. p. 81718179.

109. Fuhrman J.A., McCallum K., Davis A.A. //Ibid. 1992. v. 345. p. 63-65.

110. Gauthier Michel J., Munro Patrick M., Flatau Gilles N. et al. Nouvelles perspectives sur Г adaptation des enterobakteries dans le milieu marin //Mar. Liffe. 1993. Vol. 3. № 1-2. p.l-18.

111. George J., Blakesley W. et al. "J. Biol. Chem ", 1980. p. 255, 6521-6524.

112. George J., Chirikjian J. G. "Proc. Nat. Acad. Sci", Usa, 1982. v. 79. p. 2432-2436.

113. Giovannoni S.J., Britschgi T.V., Moyer C.L., Field K.G //Nature. 1990. v. 345. p. 60-63.

114. Halford S. E., Johnson N.P. "Biochem J.", 1981. v. 199. p. 767-777.

115. Harris G. Time series analysis of water quality data from Lake Ontario % implication for the measurement of water quality in larde and small lakes. //Freshwater Biology. 1987. v. 18. p. 389-405.

116. Heininger K., Horz W. et al. "Gene",1977, 5/6. p. 291-303.

117. Hsu M., Berg P. "Biochemistry", 1978. v. 17. p. 131-138.

118. Hulsse Ch., Thielebeule U. Epidemiologische Studien uber den Eintlub von Luftverunreinigungen auf den kindlichen Organismus //Gesundh. Umw. 1987. Bd 3. № l.-S. 2-28.

119. Hutchinson G.E. A triatise on Limnology, v. 1. 1957. Nev York: John Wiley and sons, Ins. 1015 p.

120. Janulaitis A., Klimasauskas S. et al. "FEBS Letters", 1983. v. 161. p. 131134.

121. Kaddu-Mulindwa D., Filip Z. Mikrobiologische Untersuchungen als ein Beltrag zum Grundwasserschutzkonzept //Schrifitenr.Ver.Wasser, Boden und Lufthyg. 1986. № 64. S. 203-214.

122. Kallen R.G., Simon M. et al. "Mol. Biol.", 1962. v. 5. p. 248-250.

123. Kauc L., Piekarowicz A. "Eur. J. Biochem", 1978. v. 92. p. 417-426.

124. Keith Jones. Factors controlling the distribution of thermophilic Campylobacters in surfaces waters 116 th Int. Symp. Microb. Ecjl. (ISME-6). Barcelona, 6-11 Sept., 1992. Barcelona, 1992. P.149.

125. Kruger D.H., Bickle T.A. "Microbiol. Rev.", 1983. v. 47. p. 345-360.

126. Lehman I.R., Pratt E.A. "J. Biol. Chem.", 1960. v. 235. p. 3254-3259.

127. Linn S., Arber W. "Proc. Natl. Acad. Sci. USA". 1968. v. 59. p. 13001306.

128. Loof M. Langzeituntersuchung zur Persistenz von E. coli in Wassern unterschidlicher Zusammensetzung //Zentralbl. Hyg. Und Umweltmed. 1992. Bd 193. №4. S. 379-394.

129. Malyquine E., Vannier P. et al. "Gene", 1980. v. 8. p. 163-177.

130. Mayer H. "FEBS Letters", 1978. v. 90. p. 341-344.

131. McClelland M. "Nucl. Acids Res.", 1981.v. 9. p. 5859-5866.

132. McClelland M., Nelson M. "Gene", 1988. v. 74. p. 291-304.

133. Modrich P., Zabel D. "J. Biol. Chem.". 1976. p. 251, 5866-5874.

134. Modrich P., Roberts R.J. In: Nucleases meet., Cold Spring Habrour, 1982. p. 109-154.

135. Morgan.R.D."Nucl. Acids Res", 1988. v. 16. p. 3104.

136. Naumann E. Zeil und Hauptprobleme der reginalen Limnolodi //Bot. Notiser. 1927. S. 81-103.

137. Naumann E. Uder den Begriff. Eisenogranismus- Ber. Dtsch. Bot. Ges. 1928.46 p.

138. Nelson M., Christ C. et al. "Nucl. Acids Res.", 1984. v. 12. p. 5165-5173.

139. New England Biolab. Catalog 1987-1988.

140. New England Biolab. Catalog 1995. NEB Inc. USA. P. 8.

141. Nikolskaya I.I., Tediashvili M.I. et al. "Biochim. Biophys, Acta", 1979. p. 561,232-239.

142. Polisky В., Greene P. et al. "Proc. Nat. Acad. Sci. USA", 1975. v. 72. p. 3310-3314.

143. Pommepuy M., Guillaud J.F. Devenir des bacteries entleriques reietees en mer //Techn., meth.1992. № 1. P. 49-53.

144. Pathak S.P., Bhattacherjee J.W. Effect of pollutants on survival of Escherichia coli in microcosms of river water //Bull. Environ. Contam. And Toxicol. 1994. Vol. 53. № 2. P. 198-203.

145. Qiang B.-Q., Schildkraut I. "Nucl. Acids. Res.", 1984. v. 12. p. 4507-4515.

146. Reaston J., Duyvesteyn M. G. C. et al. "Gene", 1982. p. 20, 103-110.

147. Roberts R.J. "CRC Crit. Rev. Biochem." 1976. p. 4, 123-164.

148. Roberts R.J."Gene", 1978. p. 4, 183-194.

149. Roberts R.J. " Nucl. Acids Res.", 1984, 12, rl67-r203.

150. Roberts R.J. " Nucl. Acids Res.", 1980, 8, r63-r80.

151. Roberts R.J. " Nucl. Acids Res.", 1982, 10, rl 17-rl44.

152. Roberts R.J. " Nucl. Acids Res.", 1985, 13, rl65-r200.

153. Roberts R.J. " Nucl. Acids Res.", 1987, 15, rl89-r217.

154. Roberts R.J. " Nucl. Acids Res.", 1988, 16, r271-r313.

155. Roberts R.J., Macelis D. //Restriction endonucleases and their isolshizomes. //Nucleic Acids Res. 1993. v. 21. p. 3125-3137.

156. Roberts R.J., Macelis D. //Nucleic Acids Res. 1994. v. 22. № 17. p. 36283639.

157. Rochelle P.A., Fry J.C., Parkers R.J., Weightman A.J. //FEMS Microbiol. Lett. 1992. v. 100. p. 59-66.

158. Rice Eugene W., Scaprino Pasquale V., Reasoner Donald J. Et al.

159. Correlation of coliform growth response with other water quality parameters //J. Amer /Water Works Assoc. 1991. Vol. 83. №7. p. 98-102.

160. Sanger F., Coulson A.R. //J. Molec. Biol. 1982. v. 162. p. 739-773.

161. Sharp P.A., Sugden B. et al. "Biochemistry", 1973. v. 12. p. 3055-3063.

162. Shibata Т., Irawa S. et al. "J. Bacteriol", 1976. p. 128, 473-476.

163. Shinomiya Т., Kobayashi M. "J. Biochem.", 1982. v. 92, p. 1823-1832.

164. Shirey James J., Bissonnette Gary K. Sheen formation and growth response of groundwater bacteria to reduced oxygen concentrations during incubation of M-Endo medium //Can. J. Microbiol. 1992. Vol. 38. № 3. p. 261266.

165. Smith И.О., Wilcox K.W. //J. Mol. Biol. 1970. v.51. p. 379-391.

166. Smith И.О., Nathans D. //J. Mol. Biol. 1973. v. 81. N. 3. p. 419-423.

167. Steele Jodn H. The Structure of Marine Ecosysyem. Printer in the United Stated of America. 1976. p. 130.

168. Takahashi I.,Marmur J. "Nature", 1963. p. 197, 794-795.

169. Terai Hisaycshi. Taxanomic study and distribution of denitrifying bacteria in lake Kisakii. «Jap. J. Limnol.», 1979.v. 40. № 2. p. 81-92.

170. Thienemann A. Die BinnengewAsser Mitteluropas //Eine Limnologische Finfhurung. 1925. Bd 11. 210 s.

171. Thienemann A. Der Sauerstoff im eutrophen und oligotrophen Seen //Die Binnengewasser. 1928. Bd 4. S. 1-215.

172. Tikchonenko T.I., Karamov E.V. et al. "Gene", 1978. v. 4. p. 195-212.

173. Van der Ploeg L. H. Т., Flavell R. A. "Cell", 1980. v. 19. p. 947-958.

174. Veenstra J., Rietra P.J.G.M., Coster J.M., Slaats E., Dircs-Go S. Seasonal variatios in the occurence of Vibrio vulnificus along the dutch coast //Epidemiol adn Infec. 1994. Vol. 112. № 2. p. 285-290.

175. Zack M. Air pollution and pediatric respiratory disease: croup //Lung. 1990. № 168. Suppl.p. 353-357.

176. Ward D.M., Weller R., Bateson M.M. //Nature. 1990. v . 345.

177. Water Quality Bulleten. //ISSN 07068158. 1992.

178. Whitehead P.R., Brown N.L. "FEBS Letters", 1982. v. 143. p. 296-300.

179. Wold drinking water standards //Water Quality Bulleten. 1985. v. 10. N. 4. p. 186-188.

180. Wold drinking water standards. Water Quality Bulleten. 1985. v. 10. №> 4. P. 186-188.

181. Woodbury C. P., Hagenbuchle O. et al. "J. Biol. Chem", 1980. v. 255. p. 11534-11546.

182. Wyatt G.R., Cohen S.S. "Nature" (London), 1952. v. 170. p. 1072-1073.

183. Xia Y., Burbank D. et al. "Nucl. Acids Res". 1986. v. 14. p. 6017-6030.

184. Yanish-Perron C., Vieira J., Messing J. //Gene. 1985. v. 33. N. 1. P. 103119.

185. Yoshimori R. Phd Thesis, University of California, San Francisco. 1971.

186. Youssoufian M., Mulder C. "J. Mol. Biol", 1981. p. 150, 133-136.

187. Yuan R., "Annu. Rev. Biochem.", 1981. p. 50, 285-315.

188. ZoBell J.G., Grant C.W. Bacterial utilization of low concentrations of organic matter. //J. Bacteriol. 1943. vol. 45. № 6. p. 555-564.