Микрометастазы рака яичников в костный мозг (клинико-иммунологические особенности) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат медицинских наук Бокин, Иван Игоревич

• Бокин, Иван Игоревич
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Бокин, Иван Игоревич

Введение

Глава I. Обзор литературы

Глава II. Общая характеристика материала

Глава III. Клиническая оценка больных раком яичников 1-1У стадий с микрометастазами в костный мозг

Глава IV. Клиническая оценка больных раком яичников 1-1У стадий с исследованием иммунологического статуса

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Микрометастазы рака яичников в костный мозг (клинико-иммунологические особенности)»

Актуальность темы исследования

Злокачественные опухоли репродуктивной системы являются наиболее частыми в структуре онкологической заболеваемости женщин, их суммарная доля превышает 35%. Рак яичников составляет 4-6% среди злокачественных опухолей у женщин и занимает седьмое место по частоте (Жорданиа К.И., 2000). Однако в структуре причин смерти больных опухолями репродуктивной системы ему принадлежит 1-е место (Козаченко В.П., 1999). Каждый год в России рак яичников выявляется более чем у 11000 женщин и его ежегодный прирост составляет 0,85% (Урманчеева А.Ф. и соавт., 2001).

Основными причинами низкой выживаемости больных злокачественными опухолями яичников являются: бессимптомное течение заболевания на ранних стадиях, отсутствие полноценной диагностики, малоэффективное лечение, особенно при рецидивах заболевания. Необходимо подчеркнуть, что значительное число больных раком яичников изначально попадают в неспециализированные медицинские учреждения, где получают неадекватное лечение. Все это приводит к серьёзному ухудшению результатов последующего лечения.

В связи с многочисленными трудностями в оценке прогноза и выборе адекватной тактики лечения злокачественных новообразований яичников, одной из актуальных проблем в современной онкологии стал поиск новых методов диагностики и стадирования опухолей, изучение прогностически значимых молекулярно-биологических маркёров, а также оценка противоопухолевого иммунитета.

В настоящее время стал очевидным тот факт что, злокачественные эпителиальные опухоли уже на ранних стадиях развития способны к метастазированию, одной из мишеней которого является костный мозг. Это является актуальным даже для таких локализаций опухоли, как рак прямой кишки и рак яичников, при которых клинически выявляемые метастазы в кости скелета редки, а современными методами диагностики удаётся выявить микрометастазы в костный мозг. Полученные в исследованиях данные, позволяют говорить о микрометастазах, как о группе неактивных раковых клеток с различной степенью дифференцировки. Большинством исследователей гематогенная диссеминация опухолевых клеток и обнаружение микрометастазов в костный мозг расценивается как признак неблагоприятного прогноза, свидетельствующий о высоком риске прогрессирования заболевания.

Таким образом, комплексное исследование метастазирования в костный мозг откроет новые возможности в понимании метастатического процесса в целом (развитие, рост и раннее прогрессирование). Кроме того, исследование микрометастатических клеток и выявление устойчивых к проводимому лечению групп больных, позволит разработать более эффективные подходы к лечению.

С другой стороны индивидуализация прогнозирования течения заболевания может быть определена только при сопоставлении биологических особенностей опухоли и собственной иммунологической реактивности организма больного. Состояние иммунной системы является одним из основных факторов, определяющих динамику развития злокачественного новообразования. Иммунологическая активность, в том числе и противоопухолевая, складывается из сложного взаимодействия различных звеньев клеточных и гуморальных факторов, часть из которых способствует противоопухолевой защитной функции, другие же препятствуют её осуществлению. Оценка иммунологического статуса больных раком яичников на различных этапах лечения позволит выявить нарушения в звеньях противоопухолевой защиты.

Цель работы

Целью исследования явилось определение клинического значения наличия микрометастазов в костном мозге, изучение изменений клеточного звена иммунитета больных раком яичников 1-1У стадий.

Задачи исследования

В соответствии с целью работы были поставлены следующие задачи:

1. Установить частоту выявления микрометастазов в костный мозг больных раком яичников 1-1У стадий.

2. Определить клинико-морфологические особенности заболевания у больных раком яичников I—IV стадий с микрометастазами в костный мозг.

3. Изучить непосредственные результаты лечения больных раком яичников I—IV стадий с микрометастазами в костный мозг.

4. Изучить взаимосвязь клинического течения заболевания с исходным уровнем иммунофенотипа лимфоцитов.

5. Оценить параметры клеточного звена иммунитета больных раком яичников 1-ГУ стадий до и после операции.

Научная новизна

Впервые оценена клиническая роль поражения костного мозга (выявление микрометастазов) иммуно-биологическим методом с применением моноклональных антител к цитокератинам 7 и 20 у больных раком яичников.

Проведено сопоставление микрометастатического поражения с морфологической характеристикой костномозгового пунктата больных раком яичников.

Представлены данные по сопоставлению микрометастатического поражения костного мозга (как интегрального показателя степени распространенности опухолевого процесса) с морфологической характеристикой опухоли и особенностью клинического течения заболевания.

Оценено состояния линейных маркеров клеточного звена иммунитета и выявлены структурные нарушения лимфоцитов первичных больных раком яичников 1-ТУ стадий.

Научно-практическая значимость

С учетом поражения костного мозга, полученные данные позволили оценить истинную распространенность опухолевого процесса, а исследование иммунологического статуса больных, на различных этапах лечения, выявило нарушения в звеньях противоопухолевой защиты организма, что даст возможность скорректировать лечение и определить дополнительные факторы прогноза при раке яичников.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Бокин, Иван Игоревич

ВЫВОДЫ

1. У больных раком яичников микрометастазы в костном мозге в исследованной группе выявлены в 22,2% наблюдений. При I—II стадии заболевания микрометастазы обнаружены не были. У больных IIIA стадией заболевания микрометастазы выявлены в 11,1%, IIIC 55,6%, с IV стадией заболевания в 33,3% наблюдений.

2. У больных с микрометастазами рака яичников наиболее часто встречались следующие клинические признаки: IIIC стадия заболевания (55,6%), серозная аденокарциномы яичников (77,8%), недифференцированные опухоли (55,6%), генетически обусловленная онкологическая патология у кровных родственников выявлена в 33,3%.

3. При сравнительном анализе непосредственных результатов лечения больных раком яичников I-IV стадий с и без микрометастазов в костный мозг, с проележенностью в 36 месяцев, установлено, что общая трёхлетняя выживаемость в группе больных без микрометастазов в костный мозг составила 66,8%, а в группе больных с микрометастазами только 44%. Полученные нами данные достоверны.

4. Установлено, что содержание CD3+ Т-лимфоцитов до начала лечения соответствовало норме у 42,9% больных, у 35,7% — было снижено, и повышено у 21,4%.

5. Выполнение хирургического этапа лечения не оказало влияния на уровень основных популяций лимфоцитов при анализе общей группы больных. Однако, дифференцированный анализ больных в зависимости от исходного уровня CD3+ Т-лимфоцитов показал, что хирургическое лечение привело к нормализации показателей как в Т-клеточном, так и NK-клеточном звеньях иммунитета.

6. У первичных больных раком яичников со сниженным содержанием СОЗ+, С04+ Т-лимфоцитов, количество активированных Т-лимфоцитов (СБЗ +НЬ А-Вг+) и уровень Ж клеток (СЭЗ'СО 16+56+) повышен по сравнению с группой практически здоровых доноров.

7. Выявлена взаимосвязь между клиническим течением заболевания и исходным уровнем СЭЗ+ Т-лимфоцитов: активированный Т-клеточный фенотип наиболее выражен у пациенток с нормальным содержанием СИЗ клеток. У больных с исходно сниженным содержанием СЭЗ клеток, уже через 2 недели после удаления опухолевого субстрата статистически достоверно повысилось число Т-клеток, причем как за счет С03+/С04+, так и за счет С03+/С08+ субпопуляций.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Основными причинами низкой выживаемости больных злокачественными опухолями яичников являются: бессимптомное течении заболевания на ранних стадиях, отсутствие строго специфических методов диагностики, малоэффективное лечение, особенно при рецидивах заболевания.

В связи с многочисленными трудностями в оценке прогноза и выборе адекватной тактики лечения злокачественных новообразований яичников, одной из актуальных проблем в современной онкологии стал поиск новых методов диагностики и стадирования опухолей, изучение прогностически значимых молекулярно-биологических маркёров, а также оценка противоопухолевого иммунитета.

В настоящее время стал очевидным тот факт что, злокачественные эпителиальные опухоли уже на ранних стадиях развития способны к метастазированию, в том числе одной из мишеней которого является костный мозг.

Комплексное исследование метастазирования в костный мозг откроет новые возможности в понимании метастатического процесса в целом (развитие, рост и раннее прогрессирование).

Индивидуализация прогнозирования течения заболевания может быть рассчитана только при сопоставлении биологических особенностей опухоли и собственной иммунологической реактивности организма больного. Состояние иммунной системы является одним из основных факторов, определяющих динамику развития злокачественного новообразования. Иммунологическая активность, в том числе и противоопухолевая, складывается из сложного взаимодействия различных звеньев клеточных и гуморальных факторов, часть из которых способствует противоопухолевой защитной функции, другие же препятствуют их осуществлению. Оценка иммунологического статуса больных раком яичников на различных этапах лечения позволит выявить нарушения в звеньях противоопухолевой защиты.

Целью настоящего исследования явилось определение клинического значения наличия микрометастазов в костный мозг, а так же изучение состояния линейных маркеров клеточного звена иммунитета и выявление структурных нарушений лимфоцитов первичных больных раком яичников I— IV стадий. Решая поставленные перед нами задачи, мы изучили клинические характеристики 73 больных раком яичников 1-1V стадий. Полученные нами данные обобщили следующим образом.

Больные разделились на 2 группы. 1 группа — у 41 пациентки раком яичников 1-ГУ стадий произведено исследование костного мозга. 2 группа — у 32 пациенток изучено состояние линейных маркеров клеточного звена иммунитета и выявлены структурные нарушения лимфоцитов. Все больные находились на обследовании и лечении в отделении гинекологическом РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН с 2005 по 2009 год.

Возраст больных колебался от 26 до 75 лет, средний возраст пациенток из 1 группы — 50,2 лет, второй группы — 54 года. Почти 2/3 больных принадлежало к возрастному интервалу старше 50 лет.

В соответствии с классификацией БЮО/ТММ у 61% больных раком яичников I—IV стадий с микрометатстазами в костный мозг и у 40,6% с исследованием иммунологического статуса установлена ТЗсМ)МО(ШС) стадия заболевания. Ранние стадии заболевания составили 24,4% и 43,8% соответственно.

При гистологическом исследовании послеопреционного материала преобладала серозная аденокарцинома (70,7% и 62,5% соответственно в каждой группе) и недифференцированные опухоли (43,9% и 31,3% соответственно в каждой группе).

При изучении семейного анамнеза нами установлено, что наследственная онкологическая патология была высокой и составила 34,1% в 1 группе и 31,2% во 2 группе, т.е. у близких родственников каждой 3 больной выявлено наличие опухолевых заболеваний (патология ЖКТ, рак молочной железы, рак яичников, рак лёгкого).

При анализе наличия сочетания рака яичников с другими онкологическими заболеваниями (синхронными и метахронными раками) выявлено, что у 9,8% пациенток в 1 группе и у 12,5% во второй группе имело место данное сочетание.

Наиболее стандартным тестом в диагностике рака яичников, является определение уровня сывороточного гликопротеида СА-125. У подавляющего большинства больных (58,5% и 53,1% соответственно в каждой группе) отмечено повышение уровня СА-125 в интервале от 100 до 1000 МЕ/мл, при норме 35 МЕ/мл.

Известно, что для лечения рака яичников используется 3 основных подхода: хирургическое вмешательство, химиотерапия и облучение.

В лечении больных раком яичников, с учётом распространённости опухолевого процесса, в 1 группе больных на первом этапе хирургическое лечение с последующей адъювантной химиотерапией проведено 75,6% пациенток. Во 2 группе больных, на первом этапе хирургическое лечение выполнено всем 32 пациенткам. Неоадъювантная химиотерапия с последующим хирургическим лечением проведена 19,5% пациенток и комплексное лечение, включающее в себя операцию, адъювантную химиотерапию и лучевую терапию использовано 4,9% больным.

На сегодняшний день хирургическое лечение, как компонент комбинированного или комплексного лечения больных раком яичников, является основным. Так, подавляющему большинству больных обеих групп, включенным в наше исследование, на различных этапах лечения была выполнена операция адекватного объёме (87,8% и 81,3% соответственно в каждой группе) и являлась радикальной у 58,5% в 1 группе больных и 50,0% во второй группе.

Новизной, использованного в данной работе подхода является оценка клинической роли поражения костного мозга (выявление микрометастазов в костный мозг), как интегрального показателя степени распространенности опухолевого процесса, иммуно-биологическим методом с применением моноклональных антител к цитокератинам 7 и 20 у больных раком яичников. Так в нашем исследовании микрометастазы рака яичников в костный мозг выявлены в 22,2% наблюдениях, что соответствует данным современной зарубежной литературы.

А так же проведено сопоставления микрометастатического поражения костного мозга с клинико-морфологическими характеристиками первичной опухоли, течением, лечением и прогнозом основного заболевания.

Средний возраст больных с микрометастазами рака, яичников в костный мозг составил 53,7 года.

У большинства пациенток после гистологической верификации диагноза была выставлена IIIC (FIGO) стадия заболевания (55,6%), и преобладала серозная аденокарцинома яичников (77,8%).

В группе больных с мирометастазами в костный мозг, рак яичников сочетался в 11% наблюдений с другой онкологической патологией.

Генетически обусловленная онкологическая патология у кровных родственников выявлена в 33,3%, т.е. каждой третьей больной родственники страдали опухолевыми заболеваниями (рак ЖКТ, рак молочной железы, рак тела матки).

В исследованной группе, уровень сывороточного гликопротеида CA 125 колебался в диапазоне от 100 до 1000 ME/мл у 77,8% пациенток.

При анализе лечения, на первом этапе 66,7% больным, вошедшим в наше исследование, была выполнена операция с последующим проведением адъювантной химиотерапии, 33,3% пациенток сначала проведена неоадъювантная химиотерапия с последующим хирургическим лечением.

Операция носила радикальный и циторедуктивный характер в 88,8% наблюдений.

При сравнительном анализе непосредственных результатов лечения, с проележенностью в 36 месяцев, больных раком яичников 1-1У стадий с и без микрометастазов в костный мозг, установлено, что общая трёхлетняя выживаемость в группе больных без микрометастазов в костный мозг составила 66,8%, а в группе больных с микрометастазами только 44%. Полученные нами данные достоверны.

Вторым этапом нашей работы явилось изучение состояния линейных маркеров клеточного звена иммунитета и выявление структурных нарушений лимфоцитов первичных больных раком яичников I—IV стадий.

Проанализированы результаты иммунофенотипирования лимфоцитов периферической крови 32 первичных больных раком яичников I—IV стадий, до и после оперативного лечения. Было выявлено нарушение линейной структуры лимфоцитов периферической крови больных по сравнению с донорской группой. Проведенное хирургическое лечение не оказало влияния на динамику распределения основных популяций лимфоцитов при анализе общей группы больных. Разделение больных на подгруппы и анализ результатов в зависимости от исходного уровня СОЗ показал, что только у 42,9% пациенток содержится исходно нормальное количество СБЗ+ Т-клеток (1 группа), исходно сниженное у 35,7% (2 группа) и исходно повышенное у 21,4% (3 группа). Показано, что после проведенного хирургического лечения у больных 2-й и 3-й подгрупп была статистически достоверная положительная динамика, ведущая к нормализации показателей как в Т-клеточном, так и №С-клеточном звеньях иммунитета, что, однако, не было выявлено при анализе структурных особенностей лимфоидных клеток в целом по группе. Кроме того, 78,5% первичных больных раком яичников имеют нарушения CD4/CD8 баланса еще до начала специфического лечения.

Анализ субпопуляционной структуры Т-клеточного звена иммунитета в зависимости от исходного уровня CD3 Т-лимфоцитов выявил разнонаправленную динамику параметров у больных во 2-й (|CD3) и в 3-ей (! CD3) подгруппах до и после хирургического лечения в зависимости от исходных субпопуляционных нарушений. Активированный (CD3+HLA-Dr+) Т-клеточный фенотип имеют больные во всех подгруппах, однако он наиболее выражен у пациенток с нормальным содержанием CD3 клеток, а у больных с исходно повышенным уровнем CD3 данные оказались лишь незначительно выше донорских показателей.

Таким образом, комплексное исследование метастазирования в костный мозг и индивидуальной иммунологической реактивности организма больного позволяют судить об особенностях биологического поведения рака яичников и выделить группы больных с высоким риском прогрессирования нуждающихся в более интенсивном лечении.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Бокин, Иван Игоревич, 2010 год

1. Бохман, Я.В. Лекции по онкогинекологии. / Я.В. Бохман. — Ташкент, 1985, —304с.

2. Жорданиа, К.И. Злокачественные эпителиальные опухоли яичников/ К.И. Жорданиа // Современная онкология. — 2000. — Т.2, №2. — С.51-55.

3. Карселадзе, А.И. Морфология эпителиальных опухолей яичников: Дисс. докт.мед.наук. /Карселадзе А.И. — 1989.

4. Козаченко В.П. Диагностика и лечение рака яичников // Гинекология. — 1999. —N2. — С.39-42.

5. Козаченко, В.П. Современное состояние проблемы рака яичников /В.П. Козаченко // Опухоли яичников. Постовариэктомический синдром. Заместительная гормональная терапия: Сб. научн. тр. — Иркутск, 1998. — С.41-46.

6. Краевская, И.С. Рак яичника./ И.С. Краевская — М.: Медицина, 1978. — 158с.

7. Парханова, Н.В. Рецидивы серозного рака яичников (факторы прогноза и диагностика). Дисс. канд.мед.наук./ Н.В. Парханова. — 1999.

8. Урманчеева, А.Ф. Диагностика и лечение рака яичников./ А.Ф. Урманчеева, Г.Ф. Кутушева. — 2001. — Санкт-Петербург, — 48с.

9. Чиссов, В.И. Злокачественные новообразования в России в 2002 году (заболеваемость и смертность)./ В.И. Чиссов, В.В. Старинский, Г.В. Петрова. — М., 2004.

10. Albelda, S. Role of integrins and other cell adhesion molecules in tumor progression and metastasis./ S. Albelda. // Laboratory Investigation. — 1993. — 68: 4-17.

11. Allgayer, H. Urokinase plasminogen activator receptor (uPA-R): one potential characteristic of metastatic phenotypes in minimal residual tumor disease. / H. Allgayer, M.M. Heiss, R. Riesenberg et al. // Cancer Res. — 1997. — 57: 1394-1399.

12. Antila, R. Comparison of secondary and primary ovarian malignancies reveals differences in their pre- and perioperative characteristics. /R. Antila, J. Jalkanen, O. Heikinheimo //Gynecol Oncol. — 2006. — 101:97.

13. Ardini, F. Co-regulation and physical association of the 67-kDa monomelic laminin receptor and the alpha-6-beta-4 integrin. /F.Ardini, E. Tagliabue, A. Magnifico et al. // J Biol Chem. — 1997. — 272:23422345.

14. Aslam, N. Prospective evaluation of logistic regression models for the diagnosis of ovarian cancer. / N. Aslam, S. Banerjee, J.V. Carr et al.//Obstet Gynecol. — 2000. — 96:75.

15. Aslam, N. Prospective evaluation of three different models for the preoperative diagnosis of ovarian cancer. /N. Aslam, A. Tailor, F.Lawton, J. Carr//BJOG. — 2000. — 107:1347.

16. Behrens, J. Cell adhesion in invasion and metastasis. / J. Behrens, U.Frixen, J. Schipper et al.//Semin Cell Biol. — 1992. — 3: 169-178.

17. Berek, J.S. Staging and secondlook operations ovarian cancer. In: Alberts D.S., Survit A.E., eds. Ovarian cancer. / J.S. Berek, N.F. Hacher. — Boston: Martinus Nijhoff, 1985; 109-27.

18. Berger, M.S. Correlation of c-erbB-2 gene amplification and protein expression in human breast carcinoma with nodal status and nuclear grading. / M.S. Berger, G.W. Locher, S. Saurer et al. //Cancer Res. — 1988. —48: 1238-1243.

19. Bianchi, S. Prognostic significance of c-erbB-2 expression in node negative breast cancer. / S. Bianchi, M. Paglierani, G. Zampi et al. //Br J Cancer. — 1993. — 67: 625-629.

20. Birchmeier, C. Epithelial-mesenchymal transitions in cancer progression. / C. Birchmeier, W. Birchmeier, B. Brand-Saberi //Acta Anal. —1996. —156:217.

21. Boudreau, N. Suppression of ICE and apoptosis in mammary epithelial cells by extracellular matrix. / N. Boudreau, C J. Sympson, Z. Werb, MJ. Bissell //Science. — 1995. — 267: 891-893.

22. Brandt, B. Isolation of blood-borne epithelium derived c-erb-B2 oncoprotein-positive clustered cells from peripheral blood of breast cancer patients. / B. Brandt, A. Roetger, S. Heidi, et al. //Int J Cancer. — 1998. — 76: 824-828.

23. Braun, S. Prognostic significance of micrometastatic bone marrow involvement. / S. Braun, K. Pantel //Breast Cancer Res Treat. — 1998. —52: 201-216.

24. Braun, S. Reduction of micrometastatic tumor load by monoclonal antibody therapy: influence of tumor antigen heterogeneity. / S. Braun, F. Hepp, W. Janni et al. //Ann Oncol. — 1998. — 9: 129 (abs. 621).

25. Braun, S. Tumor antigen heterogeneity of disseminated breast cancer cells: Implications for immunotherapy of minimal residual disease. / S. Braun, F. Hepp, H.L. Sommer, K. Pantel // Int J Cancer (Pred Oncol). — 1999. — 84: 1-5.

26. Braun, S. Occult tumor cells immunocytochemically identified in bone marrow of patients with apparently localized ovarian cancer predict early distant metastatic relapse, submitted / S. Braun, F. Hepp, W. Janni, T. Blankenstein, K. Panlel. — 1999.

27. Braun, S. Cytokeratin-positive cells in the bone marrow and survival of patients with stage I, II, or III breast cancer. / S. Braun, K. Pantel, P.Muller et al. //N Engl J Med. — 2000. — 342:525-33.

28. Braun, S. Occult tumor cells in bone marrow of patients with locoregionally restricted ovarian cancer predict early distant metastatic relapse. / S. Braun, C. Schindlbeck, F. Hepp et al. //J Clin Oncol. — 2001. — 19(2):368-75.

29. Braun, S. A pooled analysis of bone marrow micrometastasis in breast cancer. / S. Braun, F.D. Vogl, B. Naume et al. IIN Engl J Med. — 2005. — 353(8):793-802.

30. Bright, R.K. Generation and genetic characterization of immortal human prostate epithelial cell lines derived from primary cancer specimens. / R.K. Bright, C.D. Vocke, M.R. Einmert-Buck et al. //Cancer Res. — 1997.— 57: 995-1002.

31. Brose, M.S. Cancer risk estimates for BRCA1 mutation carriers identified in a risk evaluation program. /M.S. Brose, T.R. Rebbeck, K.A. Calzone et al. // J Natl Cancer Inst. — 2002. — 94:1365.

32. Burghard, E. Pelvic Lymphadenectomy in operative treatment of ovarian cancer. / E. Burghard, P. Hellmuth, M. Lahousen, H. Stettner //Am J Obstet Gynecol. — 1986. — 155:3159.

33. Cannistra, S.A. Cancer of the ovary. / S.A. Cannistra IIN Engl J Med. -2004.-351:2519.

34. Carlson, K.J. Screening for ovarian cancer. / K.J. Carlson, S.J. Skates, D.E. Singer //Ann Intern Med. — 1994. — 121:124.

35. Chen, S. Meta-analysis of BRCA1 and BRCA2 penetrance. / S. Chen, G. Pannigiani //J Clin Oncol. — 2007. — 25:1329.

36. Choy, A. Induction of tumor cell shedding into effluent venous blood during breast cancer surgery. / A. Choy, P. McCulloch //Br Jcancer. -1996.-73:79-82.

37. Cooper, B.C. Preoperative CA 125 levels: An independent prognostic factor for epithelial ovarian cancer. / B.C. Cooper, A.K. Sood, C.S. Davis et al. //Obstet Gynecol. — 2002. — 100:59.

38. Cote, R.J. Prediction of early relapse in patients with operable breast cancer by detection of occult bone marrow micrometastases. / R.J. Cote, P.P. Rosen, M.L. Lesser et al. // J Clin Oncolg. — 1991.1749-1756.

39. Damjanovich, L. Distribution of integrin cell adhesion receptors in normal and malignant lung tissue. / L. Damjanovich, S.M. Albelda, S.A. Mette, C.A. Buck //Am J Respir Cell Mol Biol. — 1992. — 6: 197-206.

40. De Plaen, F. Slruclure, chromosomal localization, and expression of 12 genes of the MAGE family. / F. De Plaen, K. Arden, C. Traversari et al. //Immunogenetics. —1994. — 40: 360-369.

41. Dearking, A.C. How relevant are ACOG and SGO guidelines for referral of adnexal mass? / A.C. Dearking, G.D. Aletti, M.E. McGree, et al. // Obstet Gynecol. — 2007. — 110:841.

42. Delsite, R. Anti-proliferative effect of the kinase inhibitor K252a on human prostatic carcinoma cell line. / R. Delsite, D. Djakiew //J Androl. — 1996. — 17: 481-490.

43. Diel, I J. Micrometastatic breast cancer cells in bone marrow at pri mary surgery: prognostic value in comparison with nodal status./ I.J. Diel, M. Kaufmann, S.O. Costa et al. // J Natl Cancer Inst. — 1996. —88: 1652-1664.

44. Dillman, R.O. Antibodies as cytotoxic therapy. / R.O. Dillman // J Clin Oncol. — 1994. — 12: 1497-1515.

45. Eadson, D.F. Breast and ovarian cancer incidence in BRCAlmutation carries. / D.F. Eadson, D. Ford, D.T. Bishop// Am J Genet. — 1995.56;265-71.

46. Eitan, R. The clinical significance of malignant pleural effusions in patients with optimally debulked ovarian carcinoma. / R. Eitan, D.A.Levine, N. Abu-Rustum et al. // Cancer. — 2005. — 103:1397.

47. Fidler, I J. Genetic control of cancer metastasis. / I J. Fidler, R.Radinsky //J Natl Cancer Inst. — 1990. — 82: 166-168.

48. Finch, A. Salpingo-oophorectomy and the risk of ovarian, fallopian tube, and peritoneal cancers in women with a BRCA1 or BRCA2 Mutation. / A. Finch, M. Beiner, J. Lubinski et al. // JAMA. — 2006. — 296:185.

49. Ford, D. Risk of cancer in BRCA1 mutation carriers. / D. Ford, D.F.Easton, D.T. Bishop et al. //Lancet. — 1994. — 343:692.

50. Ford, D. Estimates of the gene frequency of BRCA1 and its contribution to breast and ovarian cancer incidence. / D. Ford, D.F. Easton, J. Peto //Am J Hum Genet. — 1995. — 57:1457.

51. Fox, S.B. Association of tumor angiogenesis with bone marrow micrometastases in breast cancer. /S.B. Fox, R.D. Leek, J. Bliss et al. //J Natl Cancer Inst. — 1997. — 89: 1044-1049.

52. Franzen, B. Analysis of polypeptide expression in benign and malignant human breast lesions: down-regulation of cytokeratins. / B.Franzen, S. Lindner, A.A. Alaiya et al. // Br J Cancer. — 1996. -74:1632-1638.

53. Funke, I. Meta-analysis of studies on bone marrow micrometastases: an independent prognostic impact remains to be substantiated. / I. Funke, W. Schraut //J Clin Oncol. — 1998. — 16:557-566.

54. Gallee, M.P.W. Characterization of monoclonal antibodies raised against prostatic cell line PC-82. / M.P.W. Gallee, C.C.J. van Vroonhoven, H.A.G.M. van der Korpul et al.// Prostate. — 1986. — 9: 33 45.

55. Gatter, K.C. Clinical importance of analysing malignant rumours of uncertain origin with immunohistological techniques. / K.C. Gatter, C. Alcock, A. Heryet, D.Y. Mason // Lancet. — 1985. — 1: 1302-1305.

56. Gemer, O. Preoperative CA-125 level as a predictor of non optimal cytoreduction of advanced epithelial ovarian cancer. / O. Gemer, Segal S., A. Kopmar //Acta Obstet Gynecol Scand. — 2001. — 80:583.

57. Gerdes, J. Cell cycle analysis of a cell proliferation-associated human nuclear antigen, defined by the monoclonal antibody Ki-67. / J. Gerdes, H. Lemke, H. Baisch et al.// J Immunol. — 1984. — 133: 1710-1715.

58. Gogas, H. Can the presence of micrometastases in primary breast cancer predict outcome? Long-term (median 12.5 yrs) follow-up. / H. Gogas, J.L. Mansi, J. Blisset al. // Proc ASCO. — 1997. — 16: 153a (abs. #537).

59. Gong, J. Role of alpha 5 beta I integrin in determining malignant properties of colon carcinoma cells. / J. Gong, D. Wang, L. Sun et al. // Cell Growth Differ. — 1997. — 8: 83-90.

60. Grano, M. Adhesion properties and integrin expression of cultured human osteoclast-like cells. / M. Grano, P. Zigrino, S. Colucci et al.//Exp Cell Res. — 1994. — 212: 209-218.

61. Gunthert, U. CD44 in malignant disorders. / U. Gunthert //Curr Top Microbiol Immunol. — 1996. — 213: 271-285.

62. Gusberg, S.B. Corscander's Gynecologic Cancer. / S.B. Gusberg, H.C. Frick. — Baltimore, 1978. — 317p.

63. Hall, P.A. p53 immununostaining as a marker of malignant disease in diagnostic cytopathology. / P.A. Hall, A. Ray, N.R. Lemoine et al.//Lancet. — 1991. —338: 531.

64. Harbeck, N. Tumour cell detection in the bone marrow of breast cancer patients at primary therapy: results of a 3-year median follow-up. / N. Harbeck, M. Untch, L. Pache, W. Eiermann //Br J Cancer. — 1994. — 69: 566-571.

65. Hart, I.R. Molecular aspects of the metastatic cascade. / I.R. Hart, N.T. Goode, R.E. Wilson //Biochem Biophys Acta. — 1989. — 989: 65-84.

66. Hartmann, L.C. Gene expression profiles predict early relapse in ovarian cancer after platinum-paclitaxel chemotherapy. / L.C. Hartmann, K.H. Lu, G.P. Linette et al. //Clin Cancer Res. — 2005.-11:2149.

67. Hartmann, L.C. Efficacy of bilateral prophylactic mastectomy in women with a family history of breast cancer see comments. / L.C. Hartmann, D.J. Schaid, J.E. Woods et al. // N Engl J Med. — 1999.-340:77.

68. Hay, E.D. An overview of epitheho-mesenchymal transformation. / E.D. Hay //Acta Anat. — 1996. — 154: 8-20.

69. Heiss, M.M. Individual development and uPA-receptor expression of disseminated tumour cells in bone marrow: a reference to early systemic disease in solid cancer. / M.M. Heiss, H. Allgayer, K.U. Gruetzner et al. //Nature Med. — 1995. — I: 1035-1039.

70. Hempel, D. Adoptive immunotherapy with monoclonal antibody 17-1A to reduce minimal residual disease in breast cancer patients after high-dose chemotherapy. / D. Hempel, P. Miiller, D. Oruzio et al. // Blood 90. — 1997. — Suppl I:379B, abs. 4454.

71. Hoffman, M. New clue found to oncogene's role in breast cancer. / M. Hofftnan //Science. — 1992. — 256: 1129.

72. Hohaus, S. Persistence of isolated tumor cells in patients with breast cancer after sequential high-dose therapy with peripheral blood stem cell transplantation. / S. Hohaus, L. Funk, M. Brehm et al.//Blood 88. — 1996. — Suppl 10-128A, abs. 501.

73. Iggo, R. Increased expression of mutant forms of p53 oncogene in primary lung cancer./ R. Iggo, K. Gatter, J. Bartek et al. // Lancet. — 1990. —335: 675-679.

74. Jain, R.K. Physiological barriers to delivery of monoclonal antibodies and other macromolecules in tumors. / R.K. Jain //Cancer Res. — 1990. —50: 8145-8195.

75. Janni, W. Patterns of disease recurrence influenced by hematogenous tumor cell dissemination in patients with cervical carcinoma of the uterus. / W. Janni, F. Hepp, B. Strobl et al. //Cancer. — 2003. — 97(2): 405-411.

76. Janovski, N.A. Ovarian Tumors / Major problems in Obstetrics and Gynecology./ N.A. Janovski, T.L. Paramanandhan — Philadelphia, London, Toronto: W.B. Saunders. — 1973. — Vol.4. — 245p.

77. Jemal, A. Cancer statistics, 2008. / A. Jemal, R. Siegel, E. Ward et al. HCA Cancer J Clin. — 2008. — 58:71.

78. Kirk, S.I. The prognostic significance of marrow micrometastases in women with early breast cancer. / S.I. Kirk, G.G. Cooper, M. Hopcret al. //Eur J SurgOncol. — 1990. — 16: 481-485.

79. Kogerman, P. Overexpressed human CD44s promotes lung colonization during micrometastasis of murine fibrosarcoma cells; facilitated retention in the lung vasculature. / P. Kogerman, M.S. Sy, L.A. Gulp //Proc Natl Acad Sci USA. — 1997. — 94:1323313238.

80. Korhone, M. Integrin distributions in renal cell carcinomas of various grades of malignancy. / M. Korhone, L. Laitinen, J. Yla'nne et al. // Am J Pathol.— 1992. — 141:1 161-1 171.

81. Kovarik, J. Keratin typing in screening bone marrows for carcinoma cells. / J. Kovarik, L. Lauerova, A. Rejthar, J. Bartek //Cytotechnology. — 1989. —S78: 79.

82. Lane, D.P. p53: oncogene or anti-oncogene? / D.P. Lane, S. Benchimol //Genes Develop. — 1990, 4.

83. Levine, AJ. The tumor suppressor genes. / A.J. Levine // Annu.Rev.Biochem. — 1993 — Vol. 62. — P.623-651.

84. Lewis, M.R. Metastatic colorectal adenocarcinoma involving the ovary with elevated serum CA125: A potential diagnostic pitfall. / M.R. Lewis, E.D. Euscher, M.T. Deavers et al. //Gynecol Oncol. — 2007.- 105:395.

85. Liapis, H. Integrin alpha V beta 3 expression by bone-residing breast cancer metastases. / H. Liapis, A. Flath, S. Kilazawa //Diagn Mo Pathol. — 1996. — 5: 127-135.

86. Lindemann, F. Prognostic significance of micrometastatic tumour cells in bone marrow of colorectal cancer patients. / F. Lindemann, G. Schlimok, P. Dirschedl et al. //Lancet. — 1992. — 340: 685-689.

87. Liotta, L.A. Cancer metastasis and angiogenesis: an imbalance of positive and negative regulation. / L.A. Liotta, P.S. Steeg, W.G. StetlerStevenson //Cell. — 1991. — 64: 327-336.

88. Liou, W.S. Outcomes of women with metachronous breast and ovarian carcinomas. / W.S. Liou, C.A. Hamilton, M.K. Cheung et al. //Gynecol Oncol. — 2006. — 103:190.

89. Lupu, R. Characterization of a growth factor that binds exclusively to the erbB2 receptor and induces cellular responses. / R. Lupu, R. Colomer, B. Kannan, M.E. Lippman IIProc Nail Acad Sci USA. — 1992. — 89; 2287-2291.

90. Maehara, Y. Tumor angiogenesis and micrometastasis in bone marrow of patients with early gastric cancer. / Y. Maehara, S. Hasuda, T. Abe et al. //Clin Cancer Res. — 1998. — 4: 21292134.

91. Maehara, Y. Cytokeratin-positive tumor cells in bone marrow for identifying distant micrometastasis of gastric cancer. / Y. Maehara, M. Yamamoto, S. Oda et al. //Br J Cancer. — 1996. — 73: 83-87.

92. Mansi, J.L. Bone marrow micrometastases in primary breast cancer: prognostic significance after 6 years' follow-up. / J.L. Mansi, D. Easton, U. Berger et al.//Eur J Cancer. — 1991. — 27: 15521555.

93. Mansi, J.L. Micrometastases in bone marrow in patients with primary breast cancer: evaluation as an early predictor of bone metastases. / J.L. Mansi, U. Berger, D. Easton et al. // Br Med J. — 1987. — 295: 1093-1096.

94. Mathieu, M.C. Immunoliistochemical staining of bone marrow biopsies for detection of occult metastasis in breast cancer. / M.C. Mathieu, S. Friedman, J. Bosq et al.// Breast Cancer Res Treat. -1990.- 15:21-26.

95. McCulloch, P. Association between tumour angiogenesis and tumour cell shedding into effluent venous blood during breast cancer surgery. / P. McCulloch, A. Choy, L. Martin //Lancet. — 1995. —346: 1334-1335.

96. Metcalfe, K.A. The risk of ovarian cancer after breast cancer in BRCA1 and BRCA2 carriers. / K.A. Metcalfe, H.T. Lynch, P. Ghadirian et al. //Gynecol Oncol. — 2005. — 96:222.

97. Mork C. Regulation of vimentin expression in cultured human mammary epithelial cells. / C. Mork, B. van Deurs, O.W. Petersen //Differentiation. — 1990. — 43: 146-156.

98. National Institutes of Health Consensus Development Conference Statement. Ovarian cancer: screening, treatment, and follow-up. // Gynecol Oncol. — 1994. — 55:S4.

99. Noordzij, M.A. The prognostic value of CD44 isolbrms in prostate cancer patients treated by radical prostectomy. / M.A. Noordzij, G.J. Van Steenbrugge, N.S. Verkaik et al. //Clin Cancer Res. — 1997. — 3: 805-815.

100. O'Brien, V. Expression of the integrin alpha 5 subunit in HT29 colon carcinoma cells suppresses npoptosis triggered by scrum deprivation. / V. O'Brien, S.M. Frisch, R.L. Juliano //Exp Cell Res. — 1996. — 224: 208-213.

101. Osborn, M. Tumor diagnosis by intermediate filament typing: a novel tool for surgical pathology. / M. Osborn, K. Weber //Lab Invest. — 1983.-48:372-394.

102. Overgaard, M. Postoperative radiotherapy in high-risk premenopausal women with breast cancer who receive adjuvant chemotherapy. / M. Overgaard, P.S. Hansen, J. Overgaard et al. //N Engl J Med. — 1997. —337: 949-955.

103. Pallavicini, M.G. Chromosomal aneusomies in prostate cancer marrow micrometastases (abs.). / M.G. Pallavicini, M.L. Cher, E.E. Bowers et al.//Proc Am Assoc Cancer Res. — 1995. — 36: 69.

104. Pantel, K. Immunocytochmical monitoring of micrometastatic disease: reduction of prostate cancer cells in bone marrow by androgen deprivation. / K. Pantel, T. Enzmann, J. Koilermann et al. //Int J Cancer. — 1997. — 71: 521-525.

105. Pantel, K. Minimal residual epithelial cancer: Diagnostic approaches and prognostic relevance. / K. Pantel, S. Braun, B. Passlick, G. Schiimok // Prog Histochem Cytochem. — 1996. — 30: 1-60.

106. Pantel, K. Methodological analysis of immunocytochemical screening for disseminated epithelial tumor cells in bone marrow. / K. Pantel, G. Schiimok, M. Angstwurm et al. It J Hematother. — 1994. —3: 165-173.

107. Pantel, K. Frequent down-regulation of major histocompatibility class 1 antigen expression on individual micrometastatic carcinoma cells. / K. Pantel, G. Schiimok, D. Kutter et al. //Cancer Res. — 1991. —51: 4712-4715.

108. Pantel, K. Differential expression of proliferation-associated molecules in individual micromelastatic carcinoma cells. / K. Pantel, G. Schiimok, S. Braun et al. // J Natl Cancer Inst. — 1993. — 85:1419-1424.

109. Pantel, K. Detection of minimal disease in patients with solid tumors. / K. Pantel //J Hematother. — 1996. — 5: 359-367.

110. Peles, E. Isolation of the neu/HER-2 stimulatory ligand: a 44 kD glycoprotein that induces differentiation of mammary tumor cells. / E.Peles, S.S. Bacus, R.A. Koski et al.//Cell. — 1992. — 69: 205-216.

111. Pellegrini, R. Laminin receptor expression and function in small-cell lung carcinoma, hit / R. Pellegrini, S. Martignone, S. Menard, M.L. Colnaghi //J of Cancer. — 1994. — Suppl 8: 116-120.

112. Pfeifer, M. Cancer, catenins, and cuticle pattern: a complex connection. / M. Pfeifer //Science. — 1993. — 262: 667.

113. Plentl, F.V. Lymphatic system of the Female Genitalia. / F.V. Plentl, E.A. Friedman. —-Philadelphia: WB Saunders; 1971.

114. Rebbeck, T.R. Bilateral Prophylactic Mastectomy Reduces Breast Cancer Risk in BRCA1 and BRCA2 Mutation Carriers: The PROSE Study Group. / T.R. Rebbeck, T. Friebel, H.T. Lynch et al. //J Clin Oncol. — 2004. — 22:1055.

115. Riethmiiller, G. Monoclonal antibody therapy for resected Dukes' C colorectal cancer: seven-year outcome of a multicenter randomized trial. / G. Riethmiiller, E. Holz, G. Schlimok et al. //J Clin Oncol. — 1998. —16: 1788-1794.

116. Salvadori, B. Use of monoclonal antibody MBrl to delect micrometastases in bone marrow specimens of breast cancer patients. / B. Salvadori, P. Squicciarini, D. Rovini et al. //Eur J Cancer. — 1990. —26: 865-867.

117. Saygili, U. Can Serum CA-125 Levels Predict the Optimal Primary Cytoreduction in Patientswith Advanced Ovarian Carcinoma? / U. Saygili, S. Guclu, T. Uslu et al. // Gynecol Oncol. — 2002. — 86:57.

118. Schaller, G. Elevated keratin 18 protein expression indicates a favorable prognosis in patients with breast cancer. / G. Schaller, I. Fuchs, W. Pritze et al.//Clin Cancer Res. — 1996. — 2: 1879-1885.

119. Schlimok, G. Detection, characterization and tumorigenicity of tumor cells in human bone marrow. / G. Schlimok, G. Riethmuller //Semin Cancer Biol. — 1990. — 1:207-215.

120. Scholz, D. Biological activity in the human system of isotype variants of oligosaccharide Y-specific murine monoclonal antibodies. / D. Scholz, M. Lübeck, H. Loibner //Cancer Immunotherapy. — 1991. — 33: 153-157.

121. Schwarz, M.A. Desmosomes and hemidesmosomcs: Constitutive molecular components. / M.A. Schwarz, K. Owaribe, J. Kartenbeck, W.W. Franke //Annu Rev Cell Biol. — 1990. — 6: 461-491.

122. Scott, A.M. Antibody-based immunological therapies. / A.M. Scott, S. Welt //Curropin Immunol. — 1997. — 9: 717-722.

123. Sehouli, J. Prognostic significance of epithelial cells in the blood of patients with gynaecological malignancies. / J. Sehouli, D. Konsgen, R. Nimpsch et al. //Anticancer Res. — 2003. —3(5b):4133-40.

124. Sers, C. MUC18, a melanoma-progression associated molecule, and its potential role in tumor vascularization and hematogenous spread. / C. Sers, G. Riethmuller, J.P. Johnson //Cancer Res. — 1994. — 54: 5689-5694.

125. Singletary, S.E. Detection of micrometastatic tumor cells in bone marrow of breast carcinoma patients. / S.E. Singletary, L. Larry, S.L. Trucker, G. Spitzer //J Surg Oncol. — 1991. — 47: 32-36.

126. Skirnisdottir, I. Non-genital tract metastases to the ovaries presented as ovarian tumors in Sweden 1990-2003: Occurrence, origin and survival compared to ovarian cancer. / I. Skirnisdottir, H. Garmo, L.Holmberg, //Gynecol Oncol. — 2007. — 105:166.

127. Slamon, J.D. Studies of the HER-2/neu proto-oncogene in human breast cancer and ovarian cancer. / J.D. Slamon, W. Godolphin, L.A. Jones et al. //Science. — 1989. — 244: 707-712.

128. Soukka, K.T. Regulation of CD44v6-containing isoforms during proliferation of normal and malignant epithelial cells. / K.T. Soukka, M.Salmi, H. Joensuu et al. // Cancer Res. — 1997. — 57: 2281-2289.

129. Staging of early ovarian cancer and the impact of lymph node sampling. // Int J Gynecol Cancer. — 2000. — Jan;10(Sl):8-l 1.

130. Taylor-Papadimitriou, J. Oncogene signalling epithelial polarity and metastatic phenotype. The Lancet Conference, 1994. Brugge, Belgium, 1994: 7.

131. Tiwari, R.K. HER-2/neu amplification andoverexpression in primary human breast cancer is associated with early metastasis. / R.K. Tiwari, P.I. Borgen, G.Y. Wong et al. // Anticancer Res. — 1992. — 12:419425.

132. Tomic et al: c-erbB-2, p53, and nm23 in Ovarian Cancer // Croat Med J. —2003. —44:429-434.

133. Tuszynski, G.P. Adhesive proteins and the hematogenous spread of cancer. / G.P. Tuszynski, T.N. Wang, D. Berger // Acta Haemato. — 1997. — 97: 29-39.

134. Valles, A.M. Acidic fibroblast growth factor is a modulator of epithelial plasticity in a rat bladder carcinoma cell line. / A.M. Valles, B. Boyer, J. Badet et al. //Proc Natl Acad Sei USA. — 1990. —87: 1124-1 128.

135. Varley, J.M. Alterations to either c-erbB-2(neu) or c-mycproto-oncogenes in breast carcinomas correlate with poorshort-term prognosis. / J.M.Varley, J.E. Swallow, W.J. Brammar et al .//Oncogene. — 1987. — I: 423-430.

136. Venter, DJ. Overexpression of the c-erb-B-2 oncoprotein in human breast carcinomas: immunhistochemical assessment correlates with gene amplification. / D.J. Venter, N.L. Tuzi, S. Kumar, W.J. Gullick //Lancet July. — 1987. — II: 69-72.

137. Witkowski, C.M. Characterization of integrin subunits, cellular adhesion and tumorgenicity of four human prostate celllines. / C.M. Witkowski, I. Rabinovitz, R.B. Nagle et al. //J Cancer Res Clin Oncol. — 1993. — 119: 637-644.

138. Xie, K. Destruction of bystander cells by tumor cells transfected with inducible nitric oxide (NO) synthase gene. / K. Xie, S. Huang, Z. Dong et al. //J Natl Cancer Inst. — 1997. — 89: 421-427.

139. Young, R.S. Staging laparotomy in early ovarian cancer. I R.S. Young, D.G. Decker, J.T. Wharton et al. //JAMA. — 1983. — 250; 307-26.