«Методологические основы фармакогностического изучения, стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений на примере рода Euphrasia» тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, доктор наук Бомбела Татьяна Владимировна

• Бомбела Татьяна Владимировна
• доктор наук
• 2017

Оглавление диссертации доктор наук Бомбела Татьяна Владимировна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение 7 Методологические основы фармакогностического изучения, стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений на

примере рода Euphrasia

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. СОВРЕМЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ И ПЕРСПЕКТИВЫ

ИСПОЛЬЗОВАНИЯ РАСТЕНИЙ РОДА EUPHRASIA

1.1. БОТАНИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ, СИСТЕМАТИЧЕСКОЕ ПОЛОЖЕНИЕ И РАСПРОСТРАНЕНИЕ

1.2. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И ХАРАКТЕРИСТИКА ПОЛИМОРФИЗМА

1.3. ИССЛЕДОВАНИЯ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА

1.4. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ И ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В МЕДИЦИНЕ

1.4.1. Данные о доклинических и клинических исследованиях

1.4.2. Растения рода Euphrasia - перспективные объекты для использования в фармации 56 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.2. МАРШРУТЫ ЭКСПЕДИЦИЙ И МЕТОДЫ РЕСУРСОВЕДЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

2.3. МЕТОДЫ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.3.1. Изучение острой токсичности

2.3.2. Изучение противовоспалительной активности

2.3.3. Изучение гипотензивной активности

2.3.4. Изучение антикоагулянтной активности

2.3.5. Изучение антирадикальной активности

2.3.6. Изучение антимикробной активности

2.3.7. Статистическая обработка результатов фармакологического эксперимента

2.4. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ МОРФОЛОГО -АНАТОМИЧЕСКОГО СТОРЕНИЯ

2.5. МЕТОДЫ ХИМИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.5.1. Исследование веществ первичного обмена

2.5.1.1. Методы изучения углеводного состава

2.5.1.2. Методы изучения аминокислотного состава

2.5.1.3. Методы изучения состава липофильных веществ

2.5.2. Исследование веществ вторичного обмена

2.5.2.1. Методы фитохимического анализа

2.5.2.2. Изучение фенольных соединений методом ВЭЖХ

2.5.3. Исследование макро - и микроэлементного состава

2.6. МЕТОДИКИ СТАНДАРТИЗАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

2.6.1. Методы отбора проб для анализа

2.6.2. Определение числовых показателей качества сырья

2.6.3. Определение микробиологической чистоты сырья

2.6.4. Определение содержания радионуклидов

2.6.5. Определение сроков хранения сырья

2.6.6. Валидация методик количественного определения

2.6.7. Статистическая обработка данных 88 ГЛАВА 3. РЕСУРСОВЕДЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ РОДА

EUPHRASIA НА ТЕРРИТОРИИ ПЕРМСКОГО КРАЯ

3.1. РАСПРОСТРАНЕНИЕ РОДА EUPHRASIA НА ТЕРРИТОРИИ ПЕРМСКОГО КРАЯ

3.2. ЭКСПЕДИЦИОННОЕ ОБСЛЕДОВАНИЕ И ЗАПАСЫ СЫРЬЯ ТРАВЫ EUPHRASIA В ПЕРМСКОМ КРАЕ 90 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ И

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ У ВИДОВ РОДА

EUPHRASIA

4.1. ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ

4.2. ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ

4.3. ИЗУЧЕНИЕ ГИПОТЕНЗИВНОЙ АКТИВНОСТИ

4.4. ИЗУЧЕНИЕ АНТИКОАГУЛЯНТНОЙ АКТИВНОСТИ

4.5. ИЗУЧЕНИЕ АНТИРАДИКАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ

4.6. ИЗУЧЕНИЕ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ 119 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

ГЛАВА 5. МОРФОЛОГО-АНАТОМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩЕГОСЯ ПОЛИМОРФИЗМОМ НА ПРИМЕРЕ РОДА EUPHRASIA

5.1. ИССЛЕДОВАНИЕ МОРФОЛОГИЧЕСКОГО СТРОЕНИЯ 123 5.1.1. Установление отличительных признаков морфологического

строения растений рода Euphrasia и Odontites serotina

5.2. ИССЛЕДОВАНИЕ АНАТОМИЧЕСКОГО СТРОЕНИЯ 138 5.2.1. Установление отличительных признаков анатомического

строения растений рода Euphrasia и Odontites serotina

5.3. ПРОЯВЛЯЕНИЕ АНАТОМО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ ИЗМЕЛЬЧЕННОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ 175 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

ГЛАВА 6. ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩЕГОСЯ ПОЛИМОРФИЗМОМ НА ПРИМЕРЕ РОДА EUPHRASIA

6.1. ИССЛЕДОВАНИЕ ВЕЩЕСТВ ПЕРВИЧНОГО ОБМЕНА И

ЭЛЕМЕНТНОГО СОСТАВА

6.1.1. Изучение углеводного состава

6.1.1.1. Компонентный состав свободных и связанных углеводов

6.1.1.2. Выделение углеводных фракций из травы E. brevipila

6.1.1.3. Изучение компонентного состава углеводных фракций

6.1.1.3.1. Исследование методом хроматографии на бумаге

6.1.1.3.2. Исследование методом газожидкостной хроматографии

6.1.1.4. Изучение количественного содержания углеводов в растениях рода Euphrasia

6.1.2. Изучение аминокислотного состава 195 6.1.2.1. Исследование методом жидкостной хроматографии на

аминокислотном анализаторе

6.1.2.2. Исследование компонентного состава методом тонкослойной

хроматографии

6.1.3. Изучение состава липофильных веществ 201 6.1.3.1. Содержание жирного масла и состав жирных кислот масла семян,

растений рода Euphrasia

6.1.4. Исследование макро - и микроэлементного состава 205 6.1.4.1. Элементный состав видов рода Euphrasia 206 6.2. ИССЛЕДОВАНИЕ ВЕЩЕСТВ ВТОРИЧНОГО ОБМЕНА

6.2.1. Предварительная оценка компонентного состава БАВ перспективных видов рода Euphrasia

6.2.2. Изучение соединений фенольной природы 212 6.2.2.1. Исследование компонентного состава фенольных соединений

методом ВЭЖХ

6.2.3. Изучение иридоидных соединений

6.2.4. Изучение изменчивости компонентного состава веществ вторичного обмена в растениях рода Euphrasia

6.2.4.1. Межвидовая изменчивость фенольного комплекса

6.2.4.2. Межвидовая изменчивость иридоидного комплекса

6.2.4.3. Внутривидовая изменчивость комплекса БАВ

6.2.5. Изучение изменчивости количественного содержания биологически активных веществ в растениях рода Euphrasia

6.2.5.1. Межвидовая изменчивость количественного содержания БАВ в

траве и органах в пределах рода Euphrasia

6.2.5.2. Межпопуляционная изменчивость комплекса БАВ

6.2.5.3. Накопление БАВ, в зависимости от биологической особенности рода Euphrasia 248 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

ГЛАВА 7. СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО

РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩЕГОСЯ ПОЛИМОРФИЗМОМ НА ПРИМЕРЕ РОДА EUPHRASIA

7.1. РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КАЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСНОВНЫХ ГРУПП БАВ

7.2. РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСНОВНЫХ ГРУПП БАВ

7.2.1. Изучение возможности стандартизации растений рода Euphrasia по содержанию суммы гидрооксикоричных кислот

7.2.2. Валидация методик количественного определения БАВ, определяющих фармакологическую активность

7.3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОВАРОВЕДЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ

7.3.1. Показатели доброкачественности ЛРС производящих растений

7.3.2. Показатели доброкачественности ЛРС, характеризующегося полиморфизмом, на примере растений рода Euphrasia, с использованием модельных образцов

7.3.3. Показатели доброкачественности природных образцов ЛРС, содержащих смесь различных видов рода Euphrasia 294 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

ГЛАВА 8. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ФИТОПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ РАСТЕНИЙ РОДА EUPHRASIA

8.1. ВЫБОР ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСТРАКТОВ

8.2. ВЫБОР ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ПОЛУЧЕНИЯ НАСТОЙКИ

8.3. СТАНДАРТИЗАЦИЯ ФИТОПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ РАСТЕНИЙ РОДА EUPHRASIA

8.4. РАЗРАБОТКА СОСТАВА И ТЕХНОЛОГИИ КОСМЕТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА 318 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Приложение А.

Информационные данные по сравнительному анализу 367 морфолого-анатомических признаков видов рода Euphrasia L.

Приложение Б. Таблицы аналитических данных

Приложение В. Проекты нормативной документации

Приложение Г. Монография. Методическое пособие. Акты внедрения. Патенты

Введение диссертации (часть автореферата) на тему ««Методологические основы фармакогностического изучения, стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений на примере рода Euphrasia»»

ВВЕДЕНИЕ

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ. Терапевтическая ценность лекарственных растений признана научной медициной, они тщательно изучаются с целью создания на их основе лекарственных препаратов. Критерием перспективности растительных объектов для изучения и введения в медицинскую практику является опыт народной медицины. Однако внедрение может быть затруднено в связи с полиморфизмом, широко распространенным в растительном мире.

Полиморфизм отмечен во многих родах, в том числе и лекарственных растений, с разнообразным видовым составом. Особые затруднения связаны с идентификацией видов при заготовке сырья, возникает необходимость изучения глубины изменчивости морфолого-анатомических и биохимических параметров в зависимости от климатических, географических и прочих факторов внешней среды [19].

Сложность и многообразие процессов, приводящих к возникновению полиморфизма, а также его широкое распространение среди лекарственных растений требует разработки научно-методологических подходов к фармакогностическому изучению и стандартизации полиморфных видов, при этом использование рода Очанка (О.) - Euphrasia (E.) L. семейства Норичниковые - Scrophulariaceae Juss. в качестве примера, является целесообразным.

Род Euphrasia наиболее сложный в систематическом отношении. Причины обусловлены большим количеством видов, полиморфизмом большинства из них, широким развитием процессов гибридизации, приводящих к возникновению многочисленных промежуточных форм.

Региональная флора Пермского края насчитывает одиннадцать видов рода Euphrasia, которые встречаются во всех ботанико-географических зонах края, что позволяет провести их изучение на популяционном уровне с привлечением сравнительного материала из различных точек ареала вида, анализируя взаимоотношения между видами.

Растения рода Очанка содержат высокоактивные природные соединения, издавна используются в народной медицине для лечения заболеваний глаз,

верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта.

Euphrasiae Herba - Очанки трава давно и эффективно применяется в научной медицине стран Западной Европы и является фармакопейным лекарственным средством в Англии, Польше и Германии [192, 280]. В качестве лекарственного сырья используется трава различных видов. Так, в Англии применяется E. officinalis, в Польше E. Rostkoviana и E. stricta, а в Германии дополнительно к последним двум видам разрешены и гибридные формы очанок [240].

Государственным Регистром лекарственных средств России [193] разрешены к использованию более 20 наименований одно - и многокомпонентных биологически активных добавок (БАД) к пище отечественного и импортного производства. В качестве растительных компонентов в этих препаратах используются E. brevipila Burn. et Gremli, E. parviflora Schag., E. officinalis L., E. stricta D. Wolff ex. J.F. Lehm., E. tatarica Fisch. ex Spreng. При этом, основными показаниями к применению травы очанки являются: ухудшение зрения, аллергические реакции различного генеза, снижение иммунитета и другие.

Несмотря на повышенный интерес к растениям рода Очанка, до настоящего времени ни один вид не имеет официнального статуса в России. По этой же причине сырье различных видов очанок не используется для выпуска брикетированной и таблетированной продукции, а также для производства экстракционных (настойки, экстракты) и комбинированных лекарственных препаратов.

Все вышесказанное определяет необходимость и актуальность настоящего исследования.

СТЕПЕНЬ РАЗРАБОТАННОСТИ ТЕМЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Необходимо отметить, что род Euphrasia постоянно вызывает интерес ученых, как перспективный для внедрения в научную медицину (Сухинина, 2002; Кроткова, 2012), а также как представитель группы паразитических растений семейства Норичниковые (Петриченко, 2006; Киселева, 2013). В ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России на кафедре фармакогнозии с курсом ботаники изучена

фармакогностическая характеристика растений семейства Scrophulariaceae, имеющих различный тип питания (Петриченко, 2006). Одним из восьми объектов сравнительного исследования являлся род Euphrasia, характеризующийся полупаразитическим типом существования. Очанка коротковолосистая (E. brevipila Burnat et Gremli) являлась одним из пяти объектов ботанических исследований, выполненных в ФГБУ «Ботанический сад» Уральского отделения Российской академии наук, как однолетний представитель гемипаразитических Норичниковых (Киселева, 2013).

Однако комплексные научные исследования, направленные на решение проблем таксономии, видоидентификации и стандартизации лекарственных растений, характеризующихся полиморфизмом, на примере рода Euphrasia семейства Scrophulariaceae, проведены впервые.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью настоящей работы является формирование новых методологических подходов к фармакогностическому изучению и стандартизации лекарственных растений, характеризующихся полиморфизмом, на основании сравнительного анализа фармакологических свойств, анатомо-морфологических, биохимических признаков и глубины их изменчивости на примере растений рода Euphrasia.

Для решения поставленной цели были обозначены следующие задачи:

- провести анализ литературных данных о современном состоянии систематических, биологических, фитохимических и фармакологических исследований рода Euphrasia и дать теоретическое обоснование необходимости и возможности их применения в медицинской практике;

- изучить ресурсный потенциал растений рода Euphrasia на территории Пермского края, для анализа обеспеченности сырьевой базы;

- исследовать токсичность и биологические свойства растений рода Euphrasia, с оценкой потенциала их фармакологической перспективности;

- изучить морфолого-анатомическое строение растений рода Euphrasia для установления показателей подлинности лекарственного растительного сырья;

- провести сравнительный фитохимический анализ продуктов первичного и

вторичного метаболизма, а также элементного состава у перспективных видов рода Euphrasia и установить диагностически значимые компоненты и возможность их использования в хемосистематике, а также в аналитических целях;

- исследовать закономерности накопления и распределения фенольных соединений и иридоидов под влиянием географических факторов и биологических особенностей рода Euphrasia, с оценкой глубины их изменчивости;

- провести стандартизацию сырья полиморфных видов лекарственных растений на примере рода Euphrasia, с учетом вариантов гипотетически возможных в природе (методом математического планирования);

- разработать методики качественного и количественного анализа сырья очанки, для включения в нормативную документацию на лекарственное растительное сырье и фитопрепараты на их основе;

- разработать, состав и технологические параметры получения фитопрепаратов на основе растений рода Euphrasia и провести их стандартизацию;

- разработать нормативную документацию на ЛРС «Очанки трава» и фитопрепараты на её основе.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Комплексное исследование представителей рода Очанка позволило сформулировать научно -методологические принципы фармакогностического изучения лекарственных растений, характеризующихся полиморфизмом, и обосновать возможность их использования в медицинской практике.

На основании ботанического анализа флоры России, сопредельных государств, региональной флоры Пермского края выделены перспективные виды растений рода очанка для углубленных исследований.

Изучен ресурсный потенциал растений рода очанка на территории Пермского края. Составлена карта-схема распространения данного рода на территории края, для проведения мероприятий по заготовке сырья.

Впервые проведены скрининговые фармакологические исследования полиморфных видов рода очанка. Выявлено, что все изученные виды обладают низкой токсичностью и одинаковым уровнем биологической активности и являются перспективными для внедрения в медицинскую практику, в качестве источников сырья - очанки трава. Полученные результаты позволяют рекомендовать растения рода очанка в качестве объектов для получения на их основе фитопрепаратов, обладающих противовоспалительным, гипотензивным, антикоагулянтным, антирадикальным и антимикробным действием. С использованием коэффициентов корреляции установлены группы БАВ, оказывающих наибольший вклад в биологическую активность.

В результате сравнительного морфолого-анатомического исследования, с использованием методов цифровой макро- и микроскопии вегетативных органов рода очанка, выявлен комплекс морфолого-анатомических признаков, характеризующий исследуемый род, а также позволяющий проводить дифференциальную диагностику морфологически близких, полиморфных видов.

Впервые с помощью современных физико-химических методов (ВЭЖХ, ГЖХ МС и др.) проведено сравнительное фитохимическое изучение БАВ у перспективных видов рода очанка. Данные исследования позволили установить значение продуктов первичного и вторичного обмена, элементного состава для видоидентификации и таксономии.

Определен качественный состав и количественное содержание углеводов и аминокислот у перспективных видов рода очанка. Впервые из травы очанки коротковолосистой выделены углеводные фракции и установлена структура углеводного комплекса: водорастворимые полисахариды (ВРПС) относятся к галактоарабанам; пектиновые вещества (ПВ) - галактоксиланам; Гемицеллюлоза (ГЦ) А и В относятся к ксилоарабанам и ксилоглюканам, соответственно.

Постоянными компонентами аминокислотного комплекса рода Euphrasia являются гистидин в свободном и связанном состоянии, треонин и аланин в связанном, а аргинин в свободном виде. По количественному содержанию

доминирующим является аланин в свободном (2,42 - 2,93 мкг/мг) и связанном (6,10 - 10,93 мкг/мг) состоянии.

Впервые изучен липофильный комплекс семян у растений рода Euphrasia. Установлено, что в маслах семян доминируют непредельные кислоты С:18 -линоленовая, линолевая, олеиновая. Основу пула насыщенных жирных кислот составляют пальмитиновая и стеариновая кислоты. Среднее значение концентраций высших жирных кислот исследованных видов можно рассматривать в качестве жирнокислотного профиля масел семян рода Euphrasia и использовать в хемотаксономических целях.

Установлен элементный состав исследуемых видов рода очанка, который представлен 24 элементами, учитывая их содержание они отнесены к микро- и ультрамикроэлементам. В траве изученных видов содержатся жизненно важные элементы - кобальт, медь, молибден, хром, цинк. Установлено, что исследуемые виды накапливают свинец, при этом его концентрация не превышает ПДК, принятые для биологически активных добавок. Повышенное содержание минеральных веществ отмечается в органах, осуществляющих активную фотосинтетическую деятельность (листья), а также принимающих участие в процессах размножения (цветки, плоды, семена).

Впервые проведено изучение, с использованием метода ВЭЖХ, фенольных соединений у перспективных видов рода Euphrasia. Всего обнаружено от 15 до 28 компонентов, из которых идентифицировано 13 веществ, относящихся к различным классам природных соединений: фенолкарбоновые (ФКК) и гидроксикоричные кислоты (ГКК), флавоноиды, кумариновые производные. Доминирующими компонентами фенольного комплекса у всех видов являются фенолкарбоновые и гидроксикоричные кислоты.

Установлено, что растения рода Euphrasia характеризуются незначительной вариабельностью флавоноидного и иридоидного пула. Общими для исследуемого рода являются девять флавоноидных и пять иридоидных веществ, в том числе лютеолин-7Ю-глюкозид (цинарозид) и аукубин. Накопление гидроксикоричных и фенолкарбоновых кислот значительно варьирует внутри рода, типичным

компонентом является хлорогеновая кислота. Идентифицированные вещества являются химическими маркерами рода Euphrasia, и использованы при стандартизации сырья.

Впервые изучена межпопуляционная (географическая) изменчивость накопления биологически активных веществ (БАВ) в траве, а также по органам исследуемых видов рода Очанка. Географический фактор не оказывает существенного влияния на накопление БАВ, поэтому заготовку сырья можно вести по всему ареалу данного растения. Исследуемые виды рода Euphrasia, характеризуются средней вариабельностью межпопуляционной изменчивости по содержанию флавоноидов и окисляемых веществ, что позволяет говорить о стабильности данных показателей внутри ценопопуляции. Содержание иридоидов характеризуется высокой вариабельностью, и не позволяют использовать данный показатель для характеристики качества лекарственного сырья. Определены предпочтительные фитоценозы для сбора растительного сырья в природе, позволяющие накапливать максимальную фитомассу и наибольшее количество БАВ.

Результаты анатомо-морфологических и фитохимических исследований послужили основой для разработки единых подходов к стандартизации сырья и фитопрепаратов на основании установленных групп БАВ, отвечающих за фармакологический эффект, в соответствии с современными требованиями.

Впервые предложено для морфологически близких, полиморфных видов, произрастающих совместно, при разработке числовых показателей учитывать результаты товароведческого анализа модельной смеси, составленной и проанализированной с использованием метода математического планирования.

Приоритет проведенных исследований защищен 4 патентами РФ на изобретение: «Способ получения средства, обладающего противовоспалительной и гипотензивной активностью» (патент № 2220735), «Унифицированный способ количественного определения флавоноидов в траве и экстракционных препаратах очанки» (патент № 2266544), «Фармацевтическое средство для лечения заболеваний суставов и способ его получения» (патент № 2342946) и «Средство,

обладающее антимикробным, противовоспалительным и анестезирующим действием, и способ его получения» (патент № 239671).

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Проведенные комплексные исследования по сравнительному изучению фармакологических свойств, анатомо-морфологических и биохимических признаков, а также глубины их изменчивости у представителей рода Euphrasia семейства Scrophulariaceae, позволили сформулировать ряд правил, способствующих рациональному внедрению в научную медицину полиморфных видов лекарственных растений. На основании этого предложена концепция фармакогностического изучения, стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений, которая может быть взята за основу при исследовании полиморфных видов из других родов, семейств и дополнена с учетом биологических особенностей исследуемого таксона и механизма возникновения полиморфизма.

Результаты проведенного сравнительного фитохимического анализа продуктов первичного и вторичного обмена расширят сведения о химическом составе растений рода Euphrasia.

Разработана и апробирована спектрофотометрическая методика количественного определения суммы гидроксикоричных кислот в перерасчете на хлорогеновую кислоту. Установлены валидационные характеристики данной методики, а также ранее разработанной методики количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на лютеолин-7Ю-глюкозид, включенной в НД «Очанки трава».

Научно обоснованы технологические параметры получения фитопрепаратов (настойка, экстракт сухой, экстракт жидкий), косметического средства (фитокрем) на основе травы очанки коротковолосистой, определены показатели качества и методики стандартизации.

МЕТОДОЛОГИЯ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Методология исследования построена на трех этапах: I - основан на информационном поиске и анализе литературных данных, оценке степени разработанности и актуальности темы, постановке цели и задач исследования по экспериментальному

обоснованию возможности внедрения в медицинскую практику сырья полиморфных видов лекарственных растений; II этап - базируется на сравнительном изучении фармакологических свойств, а также анатомо-морфологических и биохимических признаков и глубины их изменчивости на примере растений рода Euphrasia, биологической особенностью которого является полиморфизм; III этап - заключается в разработке НД на ЛРС; разработке составов и способов получения фитопрепаратов и методик их стандартизации; формулировании выводов, определяющих теоретические и практические рекомендации материалов диссертационной работы.

Объектами исследования служили представители рода Euphrasia, собранные на территории Европейской части России, в том числе и в различных ботанико -географических районах Пермского края, что позволило провести изучение глубины изменчивости признаков на популяционном уровне, анализируя взаимоотношения между видами.

В ходе исследования были использованы современные методы физико-химического анализа: хроматография в тонком слое сорбента и на бумаге, высокоэффективная жидкостная хроматография, газовая хроматография, газовая хромато-масс-спектрометрия, спектрофотометрия, титриметрия, а также метод математического планирования. Изучение микропрепаратов проводили с помощью микроскопа «Motic» (Германия) используя цифровую насадку. Фотографию микропрепаратов проводили с использованием цифрового фотоаппарата марки Canon A 720 I. Оценку фармакологической активности и острой токсичности проводили по общепринятым методикам.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

- экспериментально-теоретическое обоснование возможности и рациональности внедрения в научную медицину сырья полиморфных видов лекарственных растений на примере рода Euphrasia;

- результаты изучения ресурсного потенциала растений рода Euphrasia на территории Пермского края;

- результаты исследования токсичности и фармакологической активности перспективных видов рода Euphrasia;

- Результаты морфолого-анатомического исследования растений рода

Euphrasia;

- результаты сравнительного фитохимического изучения веществ первичного и вторичного метаболизма, элементного состава исследуемых видов рода Euphrasia их значения для таксономии и видоидентификации;

- результаты изучения внутри- и межвидовой изменчивости фенольных соединений и иридоидов в растениях рода Euphrasia, в зависимости от географических факторов и биологических особенностей рода;

- результаты исследований по стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений на примере рода Euphrasia.

СТЕПЕНЬ ДОСТОВЕРНОНОСТИ РАБОТЫ. Научные положения, выводы и рекомендации базируются на достаточном количестве экспериментальных исследований, использованы современные физико -химические методы анализа, математическое планирование, исследования подтверждаются большим табличным материалом, микрофотографиями и рисунками. Статистическую обработку результатов проводили согласно требованиям ГФ XII с помощью программы «Microsoft Excel 2010» и «STAT».

АПРОБАЦИЯ. Основные положения работы доложены и обсуждены на: ежегодных научно-практических конференциях Пермской государственной фармацевтической академии (Пермь, 1994 - 2014); областных межвузовских конференциях «Экология: проблемы и пути решения» (Пермь, 1996 - 2002); научно-практических конференциях «Современные тенденции развития фармации» (Самара, 1999) и «Фармацевтическая наука и практика» (Кемерово, 1999); 2-м съезде Российского научного общества фармакологов (Москва, 2003); научной конференции, посвященной 20-летию кафедры фармакогнозии ЯГМА (Ярославль, 2004); Российско-Китайской научной конференции (Пермь, 2006); Российской научно-практической конференции «Создание лекарственных средств на основе продуктов природного происхождения» (Пермь, 2010); Всероссийской

научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежная наука и современность» (Курск, 2011); Конкурсе «Молодежная инновационная медицина XXI века», проходившем в рамках конгресса «Здравоохранение Российской Федерации, стран СНГ и Европы» (Москва, 2011); Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005, 2012, 2013).

ВНЕДРЕНИЕ В ПРАКТИКУ. На основании проведенных исследований разработаны:

- проект фармакопейной статьи «Очанки трава» для включения в ГФ XIII издания (направлен в ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава России),

- проект «Инструкции по сбору и сушке травы очанки» (направлен в ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России),

- проект нормативного документа «Очанки настойка», согласован и апробирован ООО «НПК «Апифитогрупп»,

- проект нормативного документа «Очанки экстракт сухой», согласован и апробирован ООО «НПК «Апифитогрупп»,

- проект нормативного документа «Очанки экстракт жидкий», согласован и апробирован ООО «НПК «Апифитогрупп».

Результаты диссертационного исследования используются в учебном процессе кафедры фармакогнозии с курсом ботаники Пермской государственной фармацевтической академии, кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Самарского государственного медицинского университета, кафедры фармакогнозии и ботаники Новосибирского государственного медицинского университета, кафедры фармакогнозии и фармацевтической технологии Ярославской государственной медицинской академии.

Результаты исследования использованы для написания монографии В.М. Петриченко, Т.В. Сухинина «Очанки Западного Урала (фармакогностические и биологические аспекты)» и учебного пособия

Т.В. Бомбела, О.А. Кроткова «Микродиагностические признаки перспективных видов рода Очанка», утвержденные Ученым советом ПГФА.

ЛИЧНЫЙ ВКЛАД АВТОРА. Автору принадлежит ведущая роль в разработке методологических основ, научном обосновании и обобщении полученных результатов. Все приведенные в диссертации экспериментальные данные получены под руководством и при личном участии автора, оформлены статьи по материалам исследования, автореферат и диссертация.

СВЯЗЬ ТЕМЫ ДИССЕРТАЦИИ С ПЛАНОМ ОСНОВНЫХ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИХ РАБОТ АКАДЕМИИ. Диссертация выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Федерального государственного бюджетного образовательного учреждение высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации (государственная регистрация 01.9.50007426).

СООТВЕТСТВИЕ ДИССЕРТАЦИИ ПАСПОРТУ НАУЧНОЙ СПЕЦИАЛЬНОСТИ. Научные положения диссертации соответствуют формуле специальности 14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия. Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам 2, 3 и 6 паспорта специальности - фармацевтическая химия, фармакогнозия

ПУБЛИКАЦИИ. По теме диссертации опубликовано 65 научных работ, из них 20 статей в журналах, включенных ВАК Минобрнауки РФ в перечень рецензируемых научных изданий, монография «Очанки Западного Урала (фармакогностические и биологические аспекты)» и учебное пособие «Микродиагностические признаки перспективных видов рода Очанка». Получены 4 патента РФ на изобретение.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертационная работа изложена на 366 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (глава 1), объекты и методы (глава 2), шести глав экспериментальной части, общих выводов, заключения, списка литературы и приложения;

иллюстрирована 69 рисунками, 93 таблицами. Список литературы включает 324 источника, из них 56 на иностранных языках.

Во введении сформулированы актуальность выбранной темы, цели и задачи исследования, определены научная новизна и практическая значимость работы.

В разделе «методологические основы фармакогностического изучения, стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений на примере рода Euphrasia» приведена концептуальная схема, включающая шесть научно-исследовательских компонентов, а также обоснование представленной концепции.

Первая глава посвящена обзору литературы по современному состоянию и перспективам фармакогностического изучения растений рода Euphrasia. Рассмотрены и обобщены сведения по систематическому положению, биологическим особенностям рода (полиморфизм, гемипаразитизм), химическому составу, а также данным о доклинических и клинических исследованиях и перспективах внедрения исследуемого рода в медицинскую практику.

Во второй главе приведены характеристика объектов исследования, краткое описание методов анализа, приборов и реактивов, использованных в работе, а также статистической обработки результатов.

В третьей главе представлены результаты по распространению, встречаемости, а также ресурсоведческих исследований очанки коротковолосистой на территории Пермского края.

Четвертая глава отражает результаты исследования острой токсичности и фармакологической активности изученных видов рода Euphrasia.

Пятая глава содержит результаты сравнительного анатомо -морфологического исследования перспективных видов рода Euphrasia, а также морфологического аналога зубчатки обыкновенной, как возможной примеси к траве очанки. Кроме того, приведены данные по проявлению анатомо-диагностических признаков измельченного лекарственного растительного сырья.

Шестая глава посвящена исследованию качественного состава и количественного содержания продуктов первичного и вторичного метаболизма, и

элементного состава, а также закономерностей их накопления.

Список литературы диссертационного исследования доктор наук Бомбела Татьяна Владимировна, 2017 год

Литература:

Государственная фармакопея Российской Федерации: 13-е издание. Вып. 1.-М.: Изд-во «НЦЭСМП», 2008. - 704 с.

Инструкцию составили:

Зав. кафедрой фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России,

доктор фармацевтических наук В.Д. Белоногова

Доцент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России,

кандидат фармацевтических наук

Т.В. Бомбела

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Регистрационное удостоверение №_

Дата регистрации «_»_20_г.

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия, 614000, г Пермь, ул. Газеты Звезда 33

НОРМАТИВНЫЙ ДОКУМЕНТ

Очанки настойка EUPHRASIAE TINCTURE

ПРОИЗВОДИТЕЛЬ

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

ФАСОВЩИК (ПЕРВИЧНАЯ УПАКОВКА)

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

УПАКОВЩИК (ВТОРИЧНАЯ (ПОТРЕБИТЕЛЬСКАЯ) УПАКОВКА) Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

ВЫПУСКАЮЩИЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

СПЕЦИФИКАЦИЯ Очанки настойка ООО «НПК «Апифитогрупп», Россия

Показатели Методы Нормы

Описание Органолиптический Жидкость темно-коричневого цвета специфического запаха.

Подлинность Качественная реакция с магнием (металл.), кислота хлористоводородная (конц.) Оанжево-красное окрашивание (флавоноиды)

Качественная реакция с кислотой кислотой уксусной 50%, кислотой хлористоводородной (конц.) и раствором 2% меди сульфата Сине-зеленое окрашивание (иридоиды)

УФ спектрометрия ^тах = 328 ± 2 нм

Плотность ГФ XIII Не менее 1,1698 г/см3

Спирт этиловый ГФ XIII, Метод дистиляции Не менее 67%

Сухой остаток ГФ XIII Не менее 6%

Тяжелые металлы ГФ XIII, метод 1 Не более 0,001%

Микробиологическая чистота ГФ XIII Категория 3 Б

Количественное определение суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид Спектрофотометрия Не менее 0,4%

Упаковка ГФ XIII В соответствии с ОФС.1.4.1.0001.15 по 30 и 50 мл во флаконы из темного стекла закрытые полиэтиленовой пробкой и полиэтиленовой крышкой.

Маркировка ГФ XIII В соответствии с ОФС.1.4.1.0001.15

Хранение ГФ XIII В соответствии с ОФС.1.1.0010.15 В защищенном от света месте при температуре от 15 до 250С

Срок годности 2 года

НД с. 3.

Настоящий нормативный документ распространяется на Очанки настойку, получаемую из собранной в фазу цветения и начала плодоношения, высушенной травы с корнями дикорастущих, однолетних, травянистых растений: очанки коротковолосистой - Euphrasia brevipila Burn. et Gremli; очанки мелкоцветной - Euphrasia parviflora Schag.; очанки Рейтера - Euphrasia x reuteri Wettst.; очанки лекарственной - Euphrasia officinalis L.; очанки татарской - Euphrasia tatarica Fisch. ex. Spreng.; очанки Мурбека - Euphrasia x murbeckii Wettst.; очанки прямой - Euphrasia stricta D. Wolff ex. J.F. Lehm., сем. норичниковые - Scrophulariaceae (ФС_).

Для приготовления 1000 мл настойки используется:

Очанки трава - 200 г (ФС_)

Спирт этиловый (этанол) 70% - достаточное количество для

получения 1000 мл настойки

Примечание: Спирт этиловый 70% готовяи из спирта этилового 95% (ФС.2.1.0036.15) и воды очищенной (ФС.2.2.0020.15) по ГФ XIII.

ИСПЫТАНИЯ

Подлинность. Качественные реакции. 10 мл препарата взбалтывают с 10 мл спирта 70%, фильтруют через бумажный фильтр. К 2 мл фильтрата прибавляют 10 мг металлического магния и 5 капель концентрированной кислоты хлористоводородной, нагревают на кипящей водяной бане 3 мин, появляется темно-красное окрашивание (флавоноиды).

К 2 мл фильтрата прибавляют 2 мл 50% кислоты уксусной и 0,5 мл реактива на иридоиды (кислота уксусная 50%, кислота хлористоводородная (конц.), меди сульфат 2% раствор), нагревают на кипящей водяной бане 15 мин, появляется сине-зеленое окрашивание (иридоиды).

НД с. 4.

Спетрофотометрия. Спектр поглощения испытуемого раствора (см. раздел «Количественное определение»), полученный на спектрофотометре в диапазоне длин волн от 260 до 450 нм, должен иметь максимум поглощения при Хтах = 328 ± 2 нм.

Плотность. Не менее 1,1698 г/см3 (ГФ XIII, т. 1).

Спирт этиловый. Не менее 67% (ГФ XIII, т. 1 метод дистиляции).

Тяжелые металлы. Не более 0,001% (ГФ XIII, т. 1).

Сухой остаток. Не менее 6 % (ГФ XIII, т. 1).

Микробиологическая чистота. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС.1.2.4.0002.15 (категория 3Б).

Количественное определение. 1,0 мл настойки, помещают в плоскодонную мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора спиртом 80% до метки. Полученное разведение фильтруют в плоскодонную колбу через бумажный фильтр (раствор А), первые 10 мл фильтрата отбрасывают. 1,0 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, добавляют 1 мл алюминия хлорида спиртового раствора 2% 1 мл натрия ацетата спиртового раствора 8%, доводят объем раствора до метки спиртом 80% и перемешивают (раствор Б). Спустя 30 мин. измеряют оптическую плотность раствора Б на спектрофотометре при длине волны 382 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 1,0 мл раствора А, доведенного спиртом 80% до метки в мерной колбе вместимостью 50 мл.

Суммарное содержание флавоноидных соединений в настойке в пересчете на цинарозид (Х) в процентах вычисляют по формуле:

D • 25•50

X =----------------------,

357•а • V

где Б - топтическая плотность раст вора А;

а - навеска, мл;

V - объем раствора А, взятого для разбавления, мл; 25 - объем раствора А, мл; 50 - объем раствора Б, мл;

357 - удельный показатель поглощения комплекса цинарозида с реактивами при длине волны 382 нм.

Суммарное содержание флавоноидных соединений должно быть не менее 0,4 %.

Упаковка. По 30 и 50 мл во флаконы из темного стекла закрытые полиэтиленовой пробкой и полиэтиленовой крышкой. 1 флакон вместе с инструкцией по применению помещают в пачку из картона. На флакон наклеивают самоклеющиеся этикетки.

Маркировка. На самоклеющейся этикетке указывают предприятие изготовитель и его товарный знак или логотип, название лекарственного средства на русском языке, назначение, информацию о составе, условия хранения, регистрационный номер, номер серии, дата выпуска, срок годности. Надпись «Передупотребление взбалтывать».

На пачке указывают предприятие изготовитель и его товарный знак или логотип, адрес, тел./факс, название лекарственного средства на русском языке, информацию о составе, фармакотерапевтическая группа, показания к применению, способ применения и дозы, условия хранения, регистрационный номер, номер серии, срок годности. Дополнительные надписи: «Передупотребление взбалтывать», «Хранить в недоступном для детей месте», «Отпускают без рецепта», «Возможный осадок не влияет на качество препарата».

Маркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 14192 - 96.

Транспортирование. В соответствии с ГОСТ 17768-90.

25 °С.

Хранение. В сухом защищенном от света месте, при температуре от 15 до

Срок годности. 2 года во флаконах темного стекла.

Противовоспалительное и гипотензивное средство.

Примечание. Реактивы и растворы, приведенные в настоящем нормативном документе, описаны в соответствующих разделах ГФ XIII, т. 1.

Зав. кафедрой фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России,

доктор фармацевтических наук В.Д. Белоногова

О/с/ъуи^Я 2016 г

Доцент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО III ФА Минздрава России,

кандидат фармацевтических наук

Т.В. Бомбела «3_» Ot/nJ^AZ. 2016 г

СОГЛАСОВАНО:

Генеральный директор ООО «НПК «Апифитогрупп»

Главный технолог

ООО «НПК «Апифитогрупп»

Т.А. Весел

кова

«j^» Ots>ijj2><Z 2016 г

7

АКТ ВНЕДРЕНИЯ

Предмет внедрении: Проект НД «Очанки настойка».

Автор (разработчик): доцент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России, кандидат фармацевтических наук Бомбела Татьяна Владимировна в соавторстве.

Источник информации: Проект НД «Очанки настойка» составлен по материалам докторской диссертации Бомбела Т.В. на тему: «Методологические основы фармакогностического изучения. стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений на примере рода Euphrasia».

Внедрено: ООО "Научно-производственная компания "Апифитогрупп".

Цель внедрении: Расширение ассортимента продукции выпускаемой ООО «НИК «Апифитогрупп», апробация показателей качества настойки очанки в условиях контрольно-аналитической лаборатории предприятия.

Ответственный за внедрение: главный технолог ООО «НПК «Апифитогрупп» Веселкова Татьяна Алексеевна.

Эффективность и значимость внедрении: Разработанный нормативный документ используется для оценки качества и стандартизации продукта «Очанки настойка» во всех критических точках промышленного производства.

Апробации внедренческой документации: В условиях контрольно-аналитической лаборатории ООО «НПК «Апифитогрупп» был изучен разработанный проект НД «Очанки настойка» и успешно апробированы рекомендованные подходы к стандартизации. Аналитические методики. представленные в проекте НД, воспроизводимы в условиях контрольно-аналитической лаборатории.

Главный технолог

ООО «НПК «Апифитогрупп»

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Регистрационное удостоверение №_

Дата регистрации «_»_20_г.

Общество с ограниченной ответственностью " Научно -произв одственная компания

"Апифитогрупп", Россия, 614000, г Пермь, ул. Газеты Звезда 33

НОРМАТИВНЫЙ ДОКУМЕНТ

Очанки экстракт жидкий ЕириялзтлЕ Ехтялстим Еьиюим

ПРОИЗВОДИТЕЛЬ

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

ФАСОВЩИК (ПЕРВИЧНАЯ УПАКОВКА)

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

УПАКОВЩИК (ВТОРИЧНАЯ (ПОТРЕБИТЕЛЬСКАЯ) УПАКОВКА) Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

ВЫПУСКАЮЩИЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

СПЕЦИФИКАЦИЯ

Очанки экстракт жидкий ООО «НПК «Апифитогрупп», Россия

Показатели Методы Нормы

Жидкость черно-зеленого

Описание Органолептический цвета специфического запаха. В процессе хранения допускается выпадение осадка

Подлинность Качественная реакция с Оанжево-красное

магнием (металл.), кислота окрашивание (флавоноиды)

хлористоводородная (конц.) Качественная реакция с Сине-зеленое окрашивание

кислотой кислотой уксусной (иридоиды)

50%, кислотой

хлористоводородной (конц.)

и раствором 2% меди сульфата Спектрофотометрия ^тах = 328 ± 2 нм

Количественное

определение

содержания суммы флавоноидов в Спектрофотометрия Не менее 25%

пересчете на

цинарозид

Спирт этиловый ГФ XIII, Метод дистиляции Не менее 67%

Тяжелые металлы ГФ XIII Не более 0,01%

Сухой остаток ГФ XIII Не менее 10%

Микробиологическая чистота ГФ XIII Категория 3 Б

В соответствии с

ОФС.1.4.1.0001.15

Упаковка ГФ XIII по 50 мл во флаконы из темного стекла закрытые полиэтиленовой пробкой и полиэтиленовой крышкой.

Маркировка ГФ XIII В соответствии с ОФС.1.4.1.0001.15

В соответствии с

ОФС.1.1.0010.15

Хранение ГФ XIII В защищенном от света месте при температуре не выше 250С

Срок годности 2 года

НД с. 3.

Настоящий нормативный документ распространяется на Очанки

экстракт жидкий, получаемый из собранной в фазу цветения и начала

плодоношения, высушенной трава с корнями дикорастущих, однолетних,

травянистых растений: очанки коротковолосистой - Euphrasia brevipila Burn. et

Gremli; очанки мелкоцветной - Euphrasia parviflora Schag.; очанки Рейтера -

Euphrasia x reuteri Wettst.; очанки лекарственной - Euphrasia officinalis L.;

очанки татарской - Euphrasia tatarica Fisch. ex. Spreng.; очанки Мурбека -

Euphrasia x murbeckii Wettst.; очанки прямой - Euphrasia stricta D. Wolff ex. J.F.

Lehm., сем. норичниковые - Scrophulariaceae (ФС_).

Для приготовления 1000 мл экстракта используется:

Очанки трава - 1000 г (ФС_)

Спирт этиловый 70% (этанол) - достаточное количество для

получения 1000 мл экстракта

Примечание: Спирт этиловый 70% готовяи из спирта этилового 95% (ФС.2.1.0036.15) и воды очищенной (ФС.2.2.0020.15) по ГФ XIII.

ИСПЫТАНИЯ

Описание. Жидкость черно-зеленого цвета специфического запаха. В процессе хранения допускается выпадение осадка.

Подлинность. Качественные реакции. 10 мл препарата взбалтывают с 10 мл спирта 70%, фильтруют через бумажный фильтр. К 2 мл фильтрата прибавляют 10 мг металлического магния и 5 капель концентрированной кислоты хлористоводородной, нагревают на кипящей водяной бане 3 мин, появляется темно-красное окрашивание (флавоноиды).

К 2 мл фильтрата прибавляют 2 мл 50% кислоты уксусной и 0,5 мл реактива на иридоиды (кислота уксусная 50%, кислота хлористоводородная (конц.), меди

НД с. 4.

сульфат 2% раствор), нагревают на кипящей водяной бане 15 мин, появляется

сине-зеленое окрашивание (иридоиды).

Спетрофотометрия. Спектр поглощения испытуемого раствора (см. раздел «Количественное определение»), полученный на спектрофотометре в диапазоне длин волн от 260 до 450 нм, должен иметь максимум поглощения при Атж = 328 ± 2 нм.

Спирт этиловый. Не менее 67% (ГФ XIII, т. 1 метод дистиляции).

Тяжелые металлы. Не более 0,01% (ГФ XIII, т. 1).

Сухой остаток. Не менее 10 % (ГФ XIII, т. 1).

Микробиологическая чистота. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС.1.2.4.0002.15 (категория 3 Б).

Количественное определение. 1,0 мл жидкого экстракта, помещают в плоскодонную мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора спиртом 80% до метки. Полученное разведение фильтруют в плоскодонную колбу через бумажный фильтр (раствор А), первые 10 мл фильтрата отбрасывают. 1,0 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, добавляют 1 мл алюминия хлорида спиртового раствора 2% 1 мл натрия ацетата спиртового раствора 8%, доводят объем раствора до метки спиртом 80% и перемешивают (раствор Б). Спустя 30 мин. измеряют оптическую плотность раствора Б на спектрофотометре при длине волны 382 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 1,0 мл раствора А, доведенного спиртом 80% до метки в мерной колбе вместимостью 50 мл.

Суммарное содержание флавоноидных соединений в экстракте жидком в пересчете на цинарозид (Х) в процентах вычисляют по формуле:

D • 25•50

X =----------------------,

357•а • V

где Б - топтическая плотность раст вора А; а - навеска, мл;

НД с. 5.

V - объем раствора А, взятого для разбавления, мл; 25 - объем раствора А, мл; 50 - объем раствора Б, мл;

357 - удельный показатель поглощения комплекса цинарозида с реактивами при длине волны 382 нм.

Суммарное содержание флавоноидных соединений должно быть не менее 2 %.

Упаковка. По 30 и 50 мл во флаконы из темного стекла закрытые полиэтиленовой пробкой и полиэтиленовой крышкой. 1 флакон вместе с инструкцией по применению помещают в пачку из картона. На флакон наклеивают самоклеющиеся этикетки.

Маркировка. На самоклеющейся этикетке указывают предприятие изготовитель и его товарный знак или логотип, название лекарственного средства на русском языке, назначение, информацию о составе, условия хранения, регистрационный номер, номер серии, дата выпуска, срок годности. Надпись «Передупотребление взбалтывать».

На пачке указывают предприятие изготовитель и его товарный знак или логотип, адрес, тел./факс, название лекарственного средства на русском языке, информацию о составе, фармакотерапевтическая группа, показания к применению, способ применения и дозы, условия хранения, регистрационный номер, номер серии, срок годности. Дополнительные надписи: «Передупотребление взбалтывать», «Хранить в недоступном для детей месте», «Отпускают без рецепта», «Возможный осадок не влияет на качество препарата».

Маркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 14192 - 96.

Транспортирование. В соответствии с ГОСТ 17768-90.

Хранение. В сухом защищенном от света месте, при температуре не выше 25 0С.

Срок годности. 2 года.

Противовоспалительное н гипотензивное средство.

Примечание. Реактивы и растворы, приведенные в настоящем нормативном документе, описаны в соответствующих разделах ГФ XIII, т. 1.

Зав. кафедрой фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России,

доктор фармацевтических наук В.Д. Белоногова

«3 » 2016 г

Доцент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России,

кандидат фармацевтических наук Т. В. Бомбея а

ОБЛАГАЯ. 2016 г

СОГЛАСОВАНО:

Генеральный директор ООО «НПК «Апифитогрупп»

Главный технолог

ООО «НПК «Апифитогрупп»

«

04 - Т.А. Веселкова

е>*/гъХЙ>л 2016 г

АКТ ВНЕДРЕНИЯ

Предмет »ne/ipeiiiisi: Проект НД «Очанки экстракт жидкий».

Автор (разработчик): доцент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России, кандидат фармацевтических наук Бомбела Татьяна Владимировна в соавторстве.

Источник информации: Проект НД «Очанки экстракт жидкий» составлен по материалам докторской диссертации Бомбела Т.В. на тему: «Методологические основы фармакогностического изучения, стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений на примере рода Euphrasia».

Внедрено: ООО "Научно-производственной компанией "Апифитогрупп".

Цель внедрения: Расширение ассортимента продукции выпускаемой ООО «НПК «Апифитогрупп», апробация показателей качества очанки экстракта жидкого в условиях контрольно-аналитической лаборатории предприятия.

Ответственный за внедрение: главный технолог ООО «НПК «Апифитогрупп» Веселкова Татьяна Алексеевна.

Эффективность и значимость внедрения: Разработанный нормативный документ используется для оценки качества и стандартизации продукта «Очанки экстракта жидкого» на всех этапах промышленного производства.

Апробация внедренческой документации: В условиях контрольно-аналитической лаборатории ООО «НПК «Апифитогрупп» изучен разработанный проект НД «Очанки экстракт жидкий» и успешно апробированы рекомендованные подходы к стандартизации. Аналитические методики, представленные в проекте НД, воспроизводимы в условиях контрольно-аналитической лаборатории.

Главный технолог

ООО «НПК «Апифитогрупп»

Т. А. Всселкова

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Номер реестровой записи_

Дата включения в государственный реестр лекарственных средств для медицинского применения « » 20 г.

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия, 614000, г Пермь, ул. Газеты Звезда 33

НОРМАТИВНЫЙ ДОКУМЕНТ

Очанки экстракт сухой EUPHRASIAE EXTRACTUM SICCA Субстанция

ПРОИЗВОДИТЕЛЬ

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

ФАСОВЩИК (ПЕРВИЧНАЯ УПАКОВКА)

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

УПАКОВЩИК (ВТОРИЧНАЯ (ПОТРЕБИТЕЛЬСКАЯ) УПАКОВКА) Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

ВЫПУСКАЮЩИЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "Апифитогрупп", Россия

НД с. 2.

СПЕЦИФИКАЦИЯ

Очанки экстракт сухой Субстанция ООО «НПК «Апифитогрупп», Россия

Показатели Методы Нормы

Описание Органолептический Порошок от коричневого до темно коричневого цвета с характерным запахом, гигроскопичный

Подлинность Качественная реакция с магнием (металл.), кислота хлористоводородная (конц.) Оанжево-красное окрашивание (флавоноиды)

Качественная реакция с кислотой кислотой уксусной 50%, кислотой хлористоводородной (конц.) и раствором 2% меди сульфата Сине-зеленое окрашивание (иридоиды)

Спектрофотометрия Хт^ = 328 ± 2 нм

Потеря в массе при высушивании ГФ XIII (Способ 1) Не более 5%

Тяжелые металлы ГФ XIII Не более 0,01%

Остаточные органические растворители - спирт этиловый ГФ XIII Не более 0,5%

Микробиологическая чистота ГФ XIII Категория 3 Б

Количественное определение суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид Спектрофотометрия Не менее 15%

Упаковка По 1, 3, 5 и 10 кг в двойные пакеты, изготовленные из пленки полиэтиленовой. Пакет вкладывают в мешок бумажный.

Маркировка В соответствии с НД

Транспортирование В соттветствии с ГОСТ 17768-90

Хранение ГФ XIII В защищенном от света месте при температуре не выше 250С

Срок годности 2 года

Настоящий нормативный документ распространяется на Очанки экстракт сухой, получаемый, экстракцией спиртом 40%, из собранной в фазу цветения и начала плодоношения, высушенной трава с корнями дикорастущих, однолетних, травянистых растений: очанки коротковолосистой - Euphrasia brevipila Burn. et Gremli; очанки мелкоцветной - Euphrasia parviflora Schag.; очанки Рейтера - Euphrasia x reuteri Wettst.; очанки лекарственной - Euphrasia officinalis L.; очанки татарской - Euphrasia tatarica Fisch. ex. Spreng.; очанки Мурбека - Euphrasia x murbeckii Wettst.; очанки прямой - Euphrasia stricta D. Wolff ex. J.F. Lehm., сем. норичниковые - Scrophulariaceae (ФС

_) и применяемый для производства нестерильных

лекарственных средств.

Примечание: Спирт этиловый 40% готовяи из спирта этилового 95% (ФС.2.1.0036.15) и воды очищенной (ФС.2.2.0020.15) по ГФ XIII.

ИСПЫТАНИЯ

Описание. Порошок от коричневого до темно коричневого цвета с характерным запахом, гигроскопичный.

Подлинность. Качественные реакции. 0,1 г препарата растворяют в 10 мл спирта 40%, фильтруют через бумажный фильтр. К 2 мл фильтрата прибавляют 10 мг металлического магния и 5 капель концентрированной кислоты хлористоводородной, нагревают на кипящей водяной бане 3 мин, появляется темно-красное окрашивание (флавоноиды).

К 2 мл фильтрата прибавляют 2 мл 50% кислоты уксусной и 0,5 мл реактива на иридоиды (кислота уксусная 50%, кислота хлористоводородная (конц.), меди

сульфат 2% раствор), нагревают на кипящей водяной бане 15 мин, появляется сине-зеленое окрашивание (иридоиды).

Спетрофотометрия. Спектр поглощения испытуемого раствора (см. раздел «Количественное определение»), полученный на спектрофотометре в диапазоне длин волн от 260 до 450 нм, должен иметь максимум поглощения при A™ax = 328 ± 2 нм.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5% (ГФ XIII, способ 1).

Тяжелые металлы. Не более 0,01% (ГФ XIII, т. 1).

Остаточные органические растворители. Содержание остаточного этанола в субстанции, установленное газохроматографическим методом Head Spase, должно быть не более 0,5 % (ГФ XIII, т. 1).

Микробиологическая чистота. Препарат должен соответствовать требованиям 0ФС.1.2.4.0002.15 (категория 3 Б).

Количественное определение. Около 0,1 г (точная навеска) экстракта, помещают в плоскодонную мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора спиртом 80% до метки. Полученное разведение фильтруют в плоскодонную колбу через бумажный фильтр (раствор А), первые 10 мл фильтрата отбрасывают. 1,0 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, добавляют 1 мл алюминия хлорида спиртового раствора 2% 1 мл натрия ацетата спиртового раствора 8%, доводят объем раствора до метки спиртом 80% и перемешивают (раствор Б). Спустя 30 мин. измеряют оптическую плотность раствора Б на спектрофотометре при длине волны 382 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 1,0 мл раствора А, доведенного спиртом 80% до метки в мерной колбе вместимостью 50 мл.

Суммарное содержание флавоноидных соединений в экстракте сухом в пересчете на цинарозид (Х) в процентах вычисляют по формуле:

D • 25 • 50 • 100

X =-------------------------------,

357 • а • V ■ (100 - W)

где Б - топтическая плотность раст вора А; а - навеска, мл;

V - объем раствора А, взятого для разбавления, мл; 25 - объем раствора А, мл; 50 - объем раствора Б, мл;

357 - удельный показатель поглощения комплекса цинарозида с реактивами при длине волны 382 нм; Ш - потеря в массе при высушивании, %.

Суммарное содержание флавоноидных соединений должно быть не менее 15%.

Упаковка. По 1, 3, 5 и 10 кг в двойные пакеты, изготовленные из пленки полиэтиленовой по ГОСТ 10354-82. Пакет запаивают сварным швом или завязывают вручную. Пакет вкладывают в мешок бумажный по ГОСТ Р 53361 -2009. Мешок прошивают машинным способом или завязывают вручную.

Маркировка. На этикетке указывают предприятие изготовитель, его адрес, тел./факс и товарный знак или логотип, название лекарственного средства на русском и латинском языках, количество субстанции в упаковке, назначение, информацию о составе, условия хранения, номер реестровой записи, номер серии, дата выпуска, срок годности, штриховой код.

При внутрипроизводственном использовании продукта штриховой код на этикетке не указывают.

Маркировка транспортной тары в соответствии с ГОСТ 14192 - 96.

Транспортирование. В соответствии с ГОСТ 17768-90.

Хранение. В сухом защищенном от света месте, при температуре не выше 25 0С.

Срок годности. 2 года.

Примечание. Реактивы и растворы, приведенные в настоущем нормативном документе, описаны в соответствующих разделах ГФ XIII, т. 1.

Зав. кафедрой фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России,

доктор фармацевтических наук /^'"7~ В.Д. Белоногова

«3_» 2016 г

Доцент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России,

кандидат фармацевтических наук " Т.В. Бомбела

«3_» 2016 г

СОГЛАСОВАНО:

Генеральный директор ООО «НПК «Апифитогрупп»

I лавныи технолог

ООО «НПК «Апифитогрупп»

^еселкова «/_» ¿р^^г^Р 2016 г

АКТ ВНЕДРЕНИЯ

Предмет внедрения: Проект НД «Очанки экстракт сухой. Субстанция».

Автор (разработчик): доцент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России, кандидат фармацевтических наук Бомбела Татьяна Владимировна в соавторстве.

Источник информации: Проект НД «Очанки экстракт сухой. Субстанция» составлен по материалам докторской диссертации Бомбела Т.В. на тему: «Методологические основы фармакогностического изучения, стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений на примере рода Euphrasia».

Внедрено: ООО "Научно-производственная компания "Апифитогрупп".

Цель внедрения: Расширение ассортимента продукции выпускаемой ООО «НПК «Апифитогрупп», апробация показателей качества очанки экстракта сухого в условиях контрольно-аналитической лаборатории предприятия.

Ответственный за внедрение: главный технолог ООО «НПК «Апифитогрупп» Веселкова Татьяна Алексеевна.

Эффективность и значимость внедрения: Разработанный нормативный документ используется для оценки качества и стандартизации продукта «Очанки экстракт сухой. Субстанция» на всех этапах промышленного производства.

Апробация внедренческой документации: В условиях контрольно-аналитической лаборатории ООО «НПК «Апифитогрупп» изучен разработанный проект НД «Очанки экстракт сухой. Субстанция» и успешно апробированы рекомендованные подходы к стандартизации. Аналитические методики, представленные в проекте НД. воспроизводимы в условиях контрольно-аналитической лаборатории.

Главный технолог

ООО «НПК «Апифитогрупп»

Т.А. Веселкова

ПРИЛОЖЕНИЕ Г

МОНОГРАФИЯ МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ АКТЫ ВНЕДРЕНИЯ ПАТЕНТЫ

НИ............ 11111 Н1И 11111 ................................

•............ .......и'п • к <н «к < н мми и Д|ГлЛкН()10

........ЦЯ1»Г»М1 !«)<>•> Н I ИНН* '1Ы«1 >мV ГМИН ТИК)«

II I III 1ГИЧ1НМ), I II ( УХИНННЛ

ОЧАНКИ 1А11ЛДНОГО УРАЛА й

| м М( I л,'/ //,шчи КШ II БИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ)

МОНОГРАФИЯ

ПЕРМЬ - 2006

ББК 42.143(235.55) УДК 615J2

Авторы:

Петриченко Василий Михайлович - заведующий кафедрой ботаники и общей биологии Пермской государственной фармацевтической академии, доктор фармацевтических наук, профессор;

Сухинина Татьяна Владимировна - доцент кафедры ботаники и общей биологии Пермской государственной фармацевтической академии, кандидат фармацевтических наук.

Петриченко В.М., Сухинина Т.В. Очанки Западного Урала (фармакогностические и биологические аспекты): Монография. - Пермь: ГОУ ВПО «ПГФА Росздрава», 2006. 145 е.; ил.

ISBN 5-988975-040-4

В настоящей монографии обобщены и систематизированы литературные данные, а также результаты собственных исследований растений рода Очанки сем. 5сгорИи1агшсеае. Описывается морфолого-анатомическое строение, химический состав и фармакологические свойства наиболее распространенных на Западном Урале видов В издании приведены сведения по биологическим свойствам семян, фитоценотической и ресурсоведческой характеристике очанки коротковолосистой. Рассмотрены технологические аспекты получения и стандартизация фитопрепаратов Очанки.

Монография предназначена для биологов, ботаников, врачей, провизоров, студентов, интернов и аспирантов.

Рецензенты:

Н.С. Фурса - доктор фармацевтических наук, профессор, заведующий кафедрой фармакогнозии Ярославской государственной медицинской академии.

В.А. Куркин - доктор фармацевтических наук, профессор, заведующий кафедрой фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Самарского государственного медицинского университета.

Печатается по решению Ученого совета Пермской государственной фармацевтической академии (протокол Х° 6 от 2 марта 2006г.).

ВВЕДЕНИЕ

Лекарственные травы лесов и полей пользуются доверием миллионов людей во всем мире. Терапевтическая ценность лекарственных растений признана научной медициной, они тщательно изучаются в медицинских и фармацевтических учреждениях, а также фармацевтическими фирмами-производителями лекарственных препаратов. В последнее время, наряду с традиционным использованием лекарственных растений для производства медицинских препаратов, они широко применяются для получения биологически активных добавок к пище (БАД). БАДы - это концентраты натуральных биологически активных веществ, предназначенные для непосредственного приема или введения в состав пищевых продуктов. Интерес к БАД проявляют не только производители и врачи, но и население.

Одним из источников биологически активных веществ являются растения рода Очанка (сем. Scrophulariaceae). На основе травы Очанки разработано большое количество БАД - «Звездная очанка» (ЗАО «Эвалар», Россия), «Миртикам» (Hl LI 1 «Камелия», Россия), «Очанка+Черника» (ООО «Нарине», Россия), «Уральская Очанка» (НПО «Биомед», Россия), «Eyebright» («Nature's Way», США), «Ultra clear» («Royal body care International», Inc., США) и другие. Они применяются для профилактики и лечения заболеваний глаз, сердечно-сосудистой системы, желудочно-кишечного тракта, верхних дыхательных путей. Виды рода Очанка используются не только для производства БАД но и в научной медицине. Некоторые растения рода Очанка включены в фармакопеи стран Западной Европы (Польша, Германия, Франция), однако, до настоящего времени, ни один вид не имеет официнальиого статуса в России. Все выше изложенное показывает актуальность и практическую значимость научных исследований представителей рода Очанка.

В настоящей работе авторами изложены сведения о биологических, химических, фармакологических и технологических свойствах некоторых растений рода Очанка. При этом, основное внимание уделено видам, произрастающим в Уральском регионе.

Основанием для подготовки монографии послужили данные собственных исследований, проведенные авторами в течение 1995 - 2006 гг., а также литературы изданной как в России, так и за рубежом.

Научные сведения о химических и биологических свойствах растений рода Очанка востребованы медицинской и фармацевтической общественностью и послужат как более рациональному и осознанному использованию сырья этих растений, так и производству лекарственных препаратов и БАД на их основе.

Авторы, скромно оценивая свой личный вклад, считают, что настоящая работа будет полезным пособием для биологов, ботаников, врачей, провизоров, студентов, интернов и аспирантов.

3

ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО

ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «ПЕРМСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ АКАДЕМИЯ» МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Т.В. Бомбела, О.А. Кроткова

МИКРОДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ РАСТЕНИЙ РОДА ОЧАНКА, ВСТРЕЧАЮЩИХСЯ В ПЕРМСКОМ КРАЕ

Методическое пособие

Пермь - 2012

УДК 615.322:07

Авторы:

Бомбела Т.В., доцент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздравсоцразвития России, кандидат фармацевтических наук.

Кроткова О.А., аспирант кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздравсоцразвития России

Рецензент:

Блинова О.Л., ассистент кафедры фармакогнозии с курсом ботаники ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздравсоцразвития России, кандидат фармацевтических наук.

Бомбела Т.В., Кроткова О.А. Микродиагностические признаки растений рода Очанка, встречающихся в Пермском крае: методическое пособие / Т.В. Бомбела, О.А. Кроткова. - Пермь, ГБОУ ВПО ПГФА Минздравсоцразвития России, 2012. - 45 с.

В методическом пособии приведены цифровые фотографии и описано анатомическое строение долговегетирующих видов рода Очанка: о. лекарственной, о. татарской, о. прямой, о. Мурбека, о. Рейтера, о. коротковолосистой и о. мелкоцветной, встречающихся во флоре Пермского края. Для надежного определения вида и диагностики лекарственного растительного сырья предложен комплекс низковариабильных признаков, имеющих достоверные отличия.

Методическое пособие иллюстрирует микродиагностические признаки перспективных для внедрения в медицинскую практику видов очанок и рекомендуется студентам, интернам, аспирантам для учебного процесса, а так же биологам, провизорам для практической деятельности.

1 мула решенное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образовании

«ЯРОСЛАВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ» Министерства здравоохранения Российской Федерации

ГБОУ ВПОЯГМУ Минздрава России

150000, г, Ярославль, ул. Революционная, 5 Тел. [phone] I Тел./факс 72-91 -42

http://www.yma.ac.ru Е-гпаМ:гесюрд^ута.ac.ru

_______ №

Утверждаю

Пщщтор по научной работе ^ВОУ ВПОЯГМУ зссии

На Ns

А.А. Баранов

2015

г.

■

АКТ

внедрения в практику ГБОУ ВПО «Ярославский государственный медицинский университет» Минздрава России результатов диссертации Бомбела Т.В. на тему: «Методологические основы фармакогностического изучения, стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений».

Мы, нижеподписавшиеся, комиссия в составе председателя и членов комиссии удостоверяем, что результаты научно-исследовательской работы кандидата фармацевтических наук, доцента Бомбела Т.В.:

1. анатомо-морфологические исследования растений рода Очанка {Euphrasia L.), иллюстрированные фотографиями, которые наглядно отражают диагностические признаки и позволяют надежно идентифицировать сырье;

2. результаты фармакологических исследований видов рода Euphrasia L. на антикоагулянтную и антирадикальную активность, используемые в курсе практических занятий по фитотерапии,

внедрены в учебный процесс кафедры фармакогнозии и фармацевтической технологии ГБОУ ВПО «Ярославский государственный медицинский университет» Минздрава России с » g/yicuiL 2015 г.

Председатель комиссии:

Зам. декана фармацевтического факультета

ГБОУ ВПО ЯГМУ

доцент, к.биол.н {] X Ошмарина В.И.

Члены комиссии: Зав. кафедрой фармакогнозии и фармацевтической технологии ГБОУ ВПО ЯГМУ профессор, д. фарм. н. ^^^г-^г^

к. фарм. н., доцент кафедры фармакогнозии и фармацевтической технологии ГБОУ ВПО ЯГМУ

Фурса П.С.

Коротаева М.С,

»

d/vfi£UJL

2015 г.

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Новосибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО НГМУ Минздрава России)

NOVOSIBIRSK STATE MEDICAL UNIVERSITY

Красный проспект, 52, г. Новосибирск, 630091, тел./факс [phone], Krasny prospect, Novosibirsk 630091, RUSSIA, tel./fax [phone] e-mail:[e-mail]; http://www.ngmu.ru

"УТВЕРЖДАЮ"

Проректор по учебной работе ГБОУ ВПО НГМУ

Професс

2015 г.

АКТ О ВНЕДРЕНИИ

в учебный процесс кафедры фармакогнозии и ботаники ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава России результатов исследования Бомбела Т.В. на тему: «Методологические основы фармакогностического изучения, стандартизации сырья полиморфных видов лекарственных растений».

Мы, нижеподписавшиеся, комиссия в составе председателя и.о. зав. кафедрой фармакогнозии и ботаники, к.т.н., доцента Круглова Д.С. и членов комиссии: к.фарм.н., доцента Макаровой Д.Л., к.б.н., доцента Качкина К.В. удостоверяем, что разработанная к.фарм.н., доцентом Бомбела Т.В. в соавторстве методика количественного определения низкомолекулярных Сахаров и полисахаридов из одной навески в различных видах очанки, спектрофотометрическим методом, по реакции с антронсерным реактивом, внедрена в учебный процесс кафедры фармакогнозии и ботаники фармацевтического факультета ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет» Минздрава России с «28» сентября 2015 г.

Методика характеризуется простотой выполнения, хорошей воспроизводимостью, достаточно высокой чувствительностью и селективностью.

Председатель комиссии:

и.о. зав. кафедрой фармакогнозии и ботаники

к.т.н., доцент Круглое Д.С.

Члены комиссии:

доцент, к.фарм.н. Макарова Д.Л.

доцент, к.б.н. Качкин К.В.

-о

Утверждаю по научной и ной работе ГБОУ ВПО нздрава России

'ссор И.Л. Давыдкин

тября_2015 г.

государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Самарский государственный

медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СамГМУ Минздрава России)

ул. Чапаевская, 89, г. Самара, 443099 тел.: [phone], факс: [phone] E-mail: [e-mail] 0ГРН 1026301426348 ИНН 6317002858