Метаболический контроль старения дрожжей Saccharomyces cerevisiae тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Самохвалов, Виктор Александрович

• Самохвалов, Виктор Александрович
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Самохвалов, Виктор Александрович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. S. cerevisiae как возможная модель для исследования процессов старения на клеточном уровне.

1.2. Регуляция гликолиза и метаболизма запасных углеводов в дрожжах S. cerevisiae.

1.3. Регуляция ключевых ферментов цикла Кребса в клетках дрожжей S. cerevisiae.

1.4. Полифосфаты. Строение, локализация, функции в клетках дрожжей S. cerevisiae.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объект исследования и условия его культивирования.

2.2. Методы контроля роста и определение интенсивности дыхания.

2.3. Определение жизнеспособности клеток и моделирование хронологического старения.

2.4. Разрушение клеток и получение грубого гомогената.

2.5. Определение потребления глюкозы.

2.6. Определение активности ферментов.

2.7. Определение ТБК-активных продуктов.

2.8. Определение гликогена и трегалозы.

2.9. Определение полифосфатов.

2.9.1. Определение аккумуляции в клетках ВХКД.

2.9.2. Определение карбонильных групп белков.

2.9.3. Статистическая обработка данных.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Исследование влияния замены среды на исследуемые параметры.

3.2. Определение маркеров старения в клетках дрожжей S. cerevisiae.

3.3. Исследование метаболических изменений в стареющих дрожжах S. cerevisiae с анаэробным типом метаболизма.

3.4. Исследование метаболических изменений в стареющих дрожжах S. cerevisiae с аэробным типом метаболизма.

3.5. Динамика содержания неорганических полифосфатов в клетках стареющей культуры S. cerevisiae.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Метаболический контроль старения дрожжей Saccharomyces cerevisiae»

Актуальность проблемы

Стремительное развитие геронтологии в последнее время, привлекает к себе внимание все большего количества специалистов из разных областей науки. Долгое время геронтология была сугубо физиологической наукой, не использующей весь арсенал биохимических и молекулярно-биологических методов. Основным затруднением здесь является тот факт, что в большей части исследований эксперименты ставились, в основном, либо на животных, либо на культуре животных клеток in vitro (Adams, 1997). Использование животных и линии клеток создает ряд затруднений, поскольку жизненный цикл животных очень продолжителен, а для линии клеток млекопитающих также свойственны трудности в их культивировании и невозможности моделирования ряда физиологических ситуаций. Наиболее важным препятствием для использования в качестве модели животных и культуры клеток in vitro является крайне ограниченное применение методов молекулярной биологии, невозможность получения мутантов клеточных линий по определенному признаку.

В последнее время в качестве модели для исследования биохимических аспектов старения, экспериментаторы всего мира интенсивно используют дрожжи Saccharomyces cerevisiae (Austriaco and Guarente, 1999). Было показано, что старение дрожжей S. cerevisiae на клеточном уровне очень сходно с таковым для клеток высших эукариот (Gershon and Gershon, 2000). Арсенал средств молекулярный биологии, применимый к исследованию дрожжей, очень обширен. Достаточно сказать, что весь геном этих дрожжей не только расшифрован, но и частично функционально охарактеризован (Austriaco and Guarente, 1999). Получены мутанты этих клеток, как долгожителей, так и наоборот, живущих ограниченное количество генераций (Bonhivers et al., 1989). Помимо этого, благодаря пластичности своего метаболизма, возможности четкого контроля условий культивирования, дрожжевые клетки являются удобным и функциональным объектом для решения многих задач биохимической геронтологии.

Последние годы ознаменовали собой развитие нового направления в геронтологии - концепции метаболического контроля старения (Jazwinski, 1999). Основу этой концепции составляет исследование роли метаболических реакций, их регуляции в развитии молекулярных основ старения. Был выявлен и охарактеризован ряд генов, принимающих участие в регуляции процессов старения. Тот факт, что эти гены также участвуют в регуляции некоторых биохимических реакций, дает основания полагать, что метаболический контроль старения является комплексным процессом, вовлекающим многие стороны клеточной физиологии. Вместе с тем негативной является тенденция исследования молекулярно-генетических основ старения в полном отрыве от клеточной физиологии, в частности биоэнергетики.

Немногочисленные физиологические исследования процессов старения на клеточном уровне позволили выявить некоторые интересные закономерности. Так, открытие эффекта «ограничения калорий», согласно которому продолжительность жизни индивидуума зависит от количества потребляемых им калорий, является важным экспериментальным подтверждением роли метаболического контроля в старении клеток (Black et al., 2001). Дальнейшие исследования в этой области позволили выявить, что эффект «ограничения калорий» характерен не только для клеток высших эукариот, но также для дрожжей (Jazwinski, 1999).

Было обнаружено, что продукция митохондриями эукариотических клеток активных форм кислорода является важным условием инициации старения клеток (Наппап, 1999). Усиленная экспрессия в клетках дрожжей ферментов, участвующих в антиоксидантной защите, позволила значительно продлить их жизнь (Jakubowski et al., 2000). Результатом продолжения этих работ является обнаружение важной роли АФК-зависимого апоптоза в регуляции старения клеток дрожжей. Было показано, что старение дрожжей сопровождается усилением образования в них АФК, которые, в свою очередь, активируют апоптические пути, приводящие к гибели старых клеток.

Вместе с этим полученные экспериментальные данные о роли метаболического контроля в реализации процессов старения являются ничтожно малыми по сравнению с еще невыясненными. Так, например, совершенно неисследованными остаются изменения в цикле Кребса и гликолизе, хотя эти метаболические пути являются основными энергетическими и биосинтетическими путями во всех эукариотических клетках. Нарушения в функционировании этих метаболических путей могут приводить к значительному изменению метаболического профиля клеток, в общем, и развитию многих клеточных болезней, в частности.

Благодаря работам Кулаева, была показана важнейшая роль неорганических полифосфатов в функционировании эукариотических клеток (Kulacv ct а/., 1999). Недавно обнаружена важная роль полифосфатов в поддержании жизнеспособности клеток S. cerevisiae в условиях стационарной фазы, что дает основание предполагать их участие в процессах старения (Kulaev and Vagabov, 1983). В связи с этим возникает необходимость разностороннего исследования изменений в метаболизме стареющих эукариотических клеток с использованием S. cerevisiae как модели.

Целью настоящей работы было выяснение роли некоторых метаболических путей в регуляции процессов хронологического старения дрожжей S. cerevisiae. В соответствии с этим в данной работе были сформулированы следующие задачи:

1. Разработать экспериментальную модель для исследования хронологического старения дрожжей S. cerevisiae.

2. Исследовать функциональные изменения стареющих клеток, а также обнаружить в них маркеры старения, таких, как размер клеток и аккумуляция в них ВХД.

3. Изучить роль ключевых ферментов гликолиза, а также гликогена и трегалозы в поддержании жизнеспособности дрожжей S. cerevisiae в процессе хронологического старения.

4. Исследовать изменения в функциональной активности митохондрий, а также основных окислительных метаболических путей (цикл Кребса, глиоксалатный цикл) в хронологически стареющих дрожжах S. cerevisiae.

5. Изучить изменения в полифосфатном метаболизме хронологически стареющих дрожжей S. cerevisiae.

Научная новизна работы

Впервые проведено разностороннее исследование изменений в основных метаболических путях дрожжей S. cerevisiae в условиях их старения. Было показано, что в условиях роста на глюкозе старение клеток приводит к снижению активности ключевых ферментов гликолиза, потребления глюкозы и неспособности аккумулировать гликоген и трегалозу. Исследование экспрессии ГС и ТС в стареющих клетках показало, что именно снижение экспрессии этих ферментов и являлось непосредственной причиной неспособности стареющих клеток аккумулировать запасные углеводы. Потеря способности стареющих клеток накапливать запасные углеводы, приводило к снижению их жизнесопособности.

Нами впервые было выяснено, что старение клеток в аэробных условиях приводит к резкому снижению функциональной активности митохондрий и основных дегидрогеназ цикла Кребса. На этом фоне для клеток стареющей культуры было характерно резкое усиление сукцинат-зависимых путей метаболизма. Резкое усиление окисления сукцината было возможно, поскольку в клетках стареющей культуры происходило усиленное образование этого метаболита в ГЛЦ. Предполагается, что усиление функциональной значимости этого метаболического пути является адаптационной мерой, направленной на поддержание жизнеспособности стареющих клеток. Вероятно, этот механизм развился в клетках в результате внутрипопуляционного отбора. Эксперименты, проведенные на стареющих клетках S. cerevisiae в присутствии 1 мМ сукцината, позволили выявить мощный геропротекторный потенциал у этого метаболита.

Исследование полифосфатного обмена показало, что процесс старения клеток сопровождается усиленным потреблением третьей фракции полиР, биогенез которой сопряжен с синтезом ДНК и аккумуляцией пятой фракции, функции которой остаются неизвестными до настоящего времени. На основании этих данных можно предполагать, что старение клеток приводит к переходу запасания макроэргических связей с АТФ на полиР. Подобный механизм является эволюционно очень древним, и его активация характерна для продолжительного действия мощных стресс-факторов (Kulaev et al., 1999).

Научно-практическая значимость

Полученные в работе новые данные о механизмах метаболического контроля старения S. cerevisiae расширяют представления о развитии процессов старения, их связи с определенными метаболическими реакциями не только для этого организма, но и для клеток высших эукариот.

Данная работа является фундаментальным исследованием, однако, полученные результаты могут использоваться для метаболической коррекции старения эукариотических клеток и соотвественно, иметь практическое значение для клинической геронтологии и биотехнологии.

Апробация работы

Материалы исследований, изложенные в диссертации, были представлены на 5-м симпозиуме «Свободные радикалы в биологии и медицине» (Лодзь, Польша, 2000), конференции «Окислительный стресс: биохимия и патофизиология» (Валенсия, Испания, 2000), 1-й Конгресс ФЕМО (Любляна,. Словения), 5-й съезд биохимиков Испании (Мадрид, Испания, 2002), 12-й съезд биохимиков Франции (Париж, Франция, 2003).

Диссертация представлялась и получила одобрение на заседании лаборатории метаболической биофизики Института теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино.

Диссертация обсуждена и одобрена на расширенном заседании кафедры биохимии и биофизики Саратовского госуниверситета 9 октября 2003 года.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 9 работ в зарубежных и отечественных изданиях.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Запасным углеводам принадлежит основная роль в поддержании жизнеспособности хронологически стареющих клеток в анаэробных условиях.

2. В хронологически стареющих клетках в аэробных условиях происходит усиление сукцинатной ветви окисления. Экзогенный сукцинат в концентрации 1 мМ обладает геропротекторным потенциалом

3. Разработанная модель хронологического старения позволяет исследовать изменения в метаболизме, специфически сопряженные со старением.

Работа выполнена на кафедре биохимии и биофизики Саратовского государственного университета; лаборатории биохимии микроорганизмов Университета Комплутенсиа (Мадрид, Испания); лаборатории «Молекулярной биохимии» (Тулуза, Франция); лаборатории «Регуляции биохимических процессов» ИБФМ РАН (Пущино, Россия); лаборатории «Метаболической биофизики» (ИТЭБ РАН, Пущино, Россия).

Объем и структура диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, описывающей материалы и методы исследования, полученные результаты и их обсуждение, заключения и выводов. Список цитируемой литературы содержит 191 источников, в том числе 183 зарубежных. Работа изложена на 126 листах машинописного текста, содержит 20 рисунков и 10 таблиц.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Самохвалов, Виктор Александрович

ВЫВОДЫ

1. Показано, что хронологическое старение дрожжей Saccharomyces cerevisiae сопровождается значительным перераспределением между фракциями полифосфатов. Наиболее важным является установление эффекта асинхронной динамики между третьей и пятой фракциями. Это доказывает, что в стареющих клетках функциональная значимость пятой фракции увеличивается.

2. Разработана экспериментальная модель для исследования метаболических изменений в хронологически стареющих дрожжах S. cerevisiae.

3. Установлено, что в условиях анаэробного роста снижение жизнеспособности стареющих клеток связано с потерей их способности накапливать запасные углеводы.

4. Доказано, что в условиях аэробного роста в стареющих клетках дрожжей происходит усиление сукцинатной ветви окисления. Увеличение образования сукцината в клетках стареющей культуры происходило за счет увеличения функциональной значимости глиоксилатного цикла.

5. Впервые было показано, что сукцинат в концентрации 1 мМ обладает геропротекторным эффектом.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Хронологическое старение представляет собой способность эукариотических клеток какое-то время поддерживать свою жизнеспособность в постмитотическом состоянии. Примером этого являются фибробласты в многоклеточном организме, находящиеся в постмитотическом состоянии. Для одноклеточных эукариотических организмов, например Saccharomyces cerevisiae, также характерно развитие хронологического старения, к примеру, в условиях достижения критической плотности популяции или при действии факторов окружающей среды. Интенсивное исследование механизмов хронологического старения началось с 1959 года с появлением работ (Mortimer and Jonhson, 1959). С этого времени сложилось представление, что хронологическое старение представляет собой комплексный процесс, вовлекающий множество метаболических процессов. Вместе с тем успех, достигнутый в установлении некоторых генов, ответственных за определение продолжительности клеточной жизни, с одной стороны, сопутствует значительному отставанию в понимании метаболических основ хронологического старения с другой стороны. Неясными остаются изменения в метаболическом профиле стареющих клеток, а также вклад отдельных метаболических реакций в развитие процессов старения.

Дрожжи S. cerevisiae представляют собой одноклеточный организм, чей геном является полностью расшифрованным, а метаболизм хорошо изученным. Многие гены S. cerevisiae имеют гомологи в клетках высших эукариот, например человека. Все это позволяет использовать эти дрожжи как удобный объект для исследования метаболического контроля хронологического старения.

Краеугольным камнем для адекватного исследования хронологического старения является грамотный выбор экспериментальной модели. В настоящее время в лаборатории Longo предложены две модели для исследования хронологического старения. Одна из них основана на выживаемости клеток в условиях постоянно истощающейся среды. Согласно другой, клетки, выросшие до середины экспоненциальной фазы, переносили в дистиллированную воду. Обе модели имеют ряд существенных недостатков: в первом случае клетки испытывают перекрестное влияние фактора истощения среды и воздействия токсическими продуктами метаболизма, во втором они переходят в покоящееся состояние, что не равноценно старению. В данной работе мы описали экспериментальную модель для исследования хронологического старения, впервые разработанную нами.

Хорошо известно, что дрожжи S. cerevisiae имеют два принципиально различных типа метаболизма - аэробный и анаэробный, которые зависят, прежде всего, от источника углерода в среде роста. Присутствие глюкозы обеспечивает типичный анаэробный обмен, тогда как этанол, напротив, аэробный.

Мы провели исследования метаболического контроля хронологически стареющих клеток S. cerevisiae в условиях как анаэробного, так и аэробного метаболизма.

Поскольку основным метаболическим путем в клетках, находящихся в анаэробных условиях, является гликолиз и метаболизм запасных углеводов -гликогена и трегалозы, необходимо было выяснить изменения в гликолизе и метаболизме запасных углеводов и то, каким образом они сопряжены со старением.

В ходе выполнения данной работы, используя метод ферментативного определения гликогена и трегалозы, нами было впервые показано, что старение клеток приводит к резкому падению в них уровня запасных углеводов и параллельно с этим их жизнеспособности. Используя штаммы, где опероны ГС иди ТС слиты с lacZ-опероном, мы выяснили, что именно нарушения в экспрессии этих ферментов являются основной причиной потери способности стареющих клеток накапливать гликоген и трегалозу.

Хорошо известно, что гликоген и трегалоза выполняют множество важных функций в клетках, в частности участвуют в поддержании жизнеспособности клеток в ответ на действие стресс-факторов. Таким образом, мы выяснили, что аккумуляция запасных углеводов является важным механизмом, поддерживающим жизнеспособность клеток в процессе их старения.

Исследован метаболизм хронологически стареющих клеток в аэробных условиях. Для выполнения этой серии экспериментов мы использовали в качестве источника углерода 2 % этанол.

Для определения дыхательной активности клеток и ингибиторного анализа использовали метод полярографии по Кондрашовой. Для определения активности ферментов цикла Кребса и глиоксилатного цикла были использованы спектрофотометрические методы, основанные на измерении экстинкции НАДН. Для определения СДГ нами был разработан метод, позволяющий определять ее активность в интактных клетках, после их предварительной пермеабилизации дигитонином.

Используя эти методы, мы выяснили, что хронологическое старение клеток, приводит к резкому снижению функциональной активности митохондрий. Так, используя специфический ингибитор FIFO АТФ-азы, мы обнаружили, что старение сопровождается значительным снижением потребления доли кислорода, сопряженного с синтезом АТФ, т.е. сопряженное дыхание снижается в процессе старения. Такая же картина наблюдалась для разобщающего действия FCCP. Вместе с тем чувствительность клеток к ингибирующему действию малоната -специфического ингибитора СДГ - росла на всем протяжении старения. Это прямо показывает на увеличение вклада окисления сукцината в энергообразование.

Поскольку мы обнаружили мощное увеличение окисления сукцината в стареющих клетках, необходимо выяснить пути его образования. В нормальных условиях сукцинат образуется преимущественно в цикле

Кребса. Определение активности ферментов цикла Кребса показало нам, что практически все ферменты цикла Кребса резко снижают свою активность в процессе старения. Это ставит под сомнение возможность образования сукцината в цикле Кребса. Нам представлялось интересным выяснить возможность образования сукцината через глиоксилатный цикл, который шунтирует цикл Кребса на уровне изоцитратдегидрогеназы.

Действительно, наша гипотеза подтвердилась. В стареющих клетках глиоксалатный цикл является основным экспортером сукцината, выполняя, таким образом, часть функций цикла Кребса. Увеличивающаяся на всем протяжении старения активность СДГ и доля малонат-чувствительного дыхания позволяют максимально эффективно использовать энергию сукцината.

Таким образом, мы впервые показали, что усиление метаболизма сукцината является метаболическим путем, характерным для стареющих клеток.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Самохвалов, Виктор Александрович, 2004 год

1. Вагабов В.М., Трилисенко Л.В., Щипанова И.Н. и др. Изменение длины цепи неорганических полифосфатов в зависимости от стадии роста

2. Saccharomyces cerevisiae II Микробиология. 1998. - № 2. - С. 188-193.

3. Герхард Ф. Методы общей бактериологии. Изд-во «Мир», Москва, 1983. с 512.

4. Котельникова А.В., Звягильская Р.А. Биохимия дрожжевых митохондрий. Изд-во «Наука», Москва, 1973. с.233.

5. Кулаев И.С., Вагабов В.М., Кулаковская Т.В. Развитие идей А.Н. Белозерского по биохимии полифосфатов // Биохимия. 2000. - №. 3. - С. 325-333.

6. Лущак В.И. Окислительный стресс и механизмы защиты от него у бактерий // Биохимия. 2001. - № 5. - С. 592-609.

7. Оловников A.M. Принцип маргинотомии в синтезе полинуклеотидов// * Докл. Акад. Наук. СССР.-1971 .-№ 6. С. 1496-1499.

8. Самохвалов В.А., Мусейкина Н.Ю., Мельников Г.В., Игнатов В.В. Арсенит как индуктор процессов перекисного окисления липидов в клетках дрожжей Saccharomyces cerevisiae II Микробиология. 2003. - Т. 72, № 3. - С. 308-311.

9. Чернышева Е.К., Крицкий М.С., Кулаев И.С. Определение степени полимерности различных фракций неорганических полифосфатов мицелия Neurospora crassall Биохимия. 1971. - № 1. - С. 138-146.

10. Adams A., Gottschling D.E., Kaiser С.A., Stearns Т. Methods in yeast genetics: A laboratory course manual. NY: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1997.

11. Afshar G., Murnane J.P. Characterization of a human gene with sequence homology to Saccharomyces cerevisiae SIR2 // Gene. 1999. - Vol. 234. - P. 161-168.

12. Akhmerov R.N. Qualitative difference in mitochondria of endothermic and ectothermic animals // FEBS Lett. 1986. - Vol. 198. - P. 251 -255.

13. Ashrafi K., Sinclair D., Gordon J.I., Guarente L. Passage through stationary phase advances replicative aging in Saccharomyces cerevisiae II PNAS. 1999. - Vol. 96. - P. 9100-9105.

14. Attfield P.V. Stress tolerance: the key to effective strains of industrial baker's yeast // Nature Biotechnol. 1997. - Vol. 15. - P. 1351 -1357.

15. Austriaco N.R., Guarente L.P. Changes of telomere length cause reciprocal changes in the lifespan of mother cells in Saccharomyces cerevisiae II PNAS. 1997. - Vol. 94. - P. 9768-9772.

16. Barker M.G., Walmsley R.M. Replicative aging in the fission yeast Schizosaccharomycespombe // Yeast. 1999. - Vol. 15. - P. 1511-1518.

17. Barnes L.D., McGuire J., Atkinson K. Yeast diphosphopyridine nucleotide specific isocitrate dehydrogenase. Regulation activity and unidirectional catalysis // Biochemistry. 1972. - Vol. 11. - P. 4322-4329.

18. Barnes L., Kuchn G., Atkinson D. Yeast diphosphopyridine nucleotide specific isocitrate dehydrogenase. Purification and some properties // Biochemistry. 1971.-Vol. 10. - P. 3939-3944.

19. Bartrons R., Van Schaftingen E., Vissers S., Hers H.-G. The stimulation of yeast phosphofructokinase by fructose-2,6- bisphosphate // FEBS Lett. 1982. -Vol. 143.-P. 137-140.

20. Bartels P.D., Jensen P.K. Role of AMP in regulation of the citric acid cycle in mitochondria from bakers yeast // Biochim. Biophys. Acta. 1954. - Vol. 582.-P. 246-259.

21. Bell W., Sun W., Hohmann S., Wera S., Reinders A., De Virgilio C., Wiemken A., Thevelein J.M. Composition and functional analysis of the Saccharomyces cerevisiae trehalose synthase complex // J. Biol. Chem. 1998. -Vol. 273.-P. 33311-33319.

22. Beauvoit В., Rigoulet M., Guerin B. Polyphosphates as a source of high energy phosphates in yeast mitochondria: a P-NMR study // FEBS Lett. 1989. -Vol. 252.-P. 17-22.

23. Blomberg A. Metabolic surprises in Saccharomyces cerevisiae during adaptation to saline conditions: questions, some answers and a model // FEMS Microbiol. Lett. 2000. - Vol. 182. - P. 1-8.

24. Boles E., Gohlmann H. W., Zimmermann F. K. Cloning of a second gene encoding 6-phosphofructo-2-kinase in yeast, and characterization of mutant strains without fructose-2,6-bisphosphate // Mol. Microbiol. 1996. - Vol. 20. - P. 65-76.

25. Bonhivers M., Carbrey J.M., Gould S.J., Agre P. Aquaporins in Saccharomyces cerevisiae. Genetic and functional distinctions between laboratory and wild-type strains // J. Biol. Chem. 1998. - Vol. 273. - P. 27565-27572.

26. Bowes I., Mattey M. The effect of manganese and magnesium ions on mitochondrial NADP dependent isocitrate dehydrogenase // Biochemie. 1979. -Vol. 6.-P. 219-227.

27. Bruinenberg P., Van Dijken A., Scheffers W. A theoretical analysis of NADPH production and consumption in yeast // J. Gen. Microbiol. 1093. - Vol. 129.-P. 953-964.

28. Busturia A., Lagunas R. Catabolite inactivation of the glucose transport system in Saccharomyces cerevisiae // J. Gen. Microbiol. 1986. - Vol. 132. - P. 379-385.

29. Cabib E., Leloir L.F. The biosynthesis of trehalose phosphate // J. Biol. Chem. 1958. - Vol. 231. - P. 259-275.

30. Camhi S. L., Lee P., Choi A.M. The oxidative stress response // New Horizons. 1995. - Vol. 3. - P. 170-182.

31. Castrillo J.I., Ugalde U.O. A general model of yeast energy metabolism in aerobic chemostat culture // Yeast. 1994. - Vol. 10. - P. 185-197.

32. Chan Y., Stachow C., Sanwal B. The allosteric nature of NAD-specific isocitrate dehydrogenase // Can. J. Biochem. 1985. - Vol. 43. - P. 111-118.

33. Chance В., Hollunger, G. The interaction of energy and electron transferreactions in mitochondria. I. General properties and nature of the products of succinate-linked reduction of pyridine nucleotide// J.Biol.Chem. 1961a. -Vol. 236. -P. 1534- 1543.

34. Chance В., Hollunger G. The interaction of energy and electron transfer reactions in mitochondria. II. Substrate requirements for pyridine nucleotide reduction in mitochondria. J. Biol. Chem.- 1961b. Vol. 236. -P. 15551561.

35. Cinti D., Moldeus P., Schenkman J. The role of the mitochondria in rat lover mixed function oxidation reactions // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1972.-Vol. 47.-P. 1028-1033.

36. Clark J.E., Wood H.G. Preparation of standards and determination of sizes of long-chain polyphosphates by gel electrophoresis // Anal. Biochem. 1987. -Vol. 161.-P. 280-290.

37. Cleland W., Johnson N. Tracer experiments on the mechanism of citric acid formation //J. Biol. Chem. 1989. - Vol. 208. - P. 679-705.

38. Cristofalo V.J., Allen R.G., Pignolo R.J., Martin B.G., Beck J.C. Relationship between donor age and the replicative lifespan of human cells in culture: a reevaluation // PNAS. 1998. - Vol. 95. - P. 10614-10619.

39. Cupp J.R., McAlister-Henn L. Cloning and characterization of the gene encoding the IDH1 subunit of NAD-dependent isocitrate dehydrogenase from Saccharomyces cerevisiae II J. Biol. Chem. 1992. - Vol. 267. - P. 16417-16423.

40. Davies S., Brindle K.M. Effects of overexpression of phosphofructokinase on glycolys is in the yeast Saccharomyces cerevisiae И Biochemistry. — 1992. — Vol. 31.-P. 4729-4735.

41. Ernandes J.R., de Meirsman C., Rolland F. During the initiation of fermentation overexpression of hexokinase PII in yeast transiently causes a similar deregulation of glycolysis as deletion of Tpsl // Yeast. 1998. - Vol. 14. - P. 255-269.

42. Danielson, L., Ernster, L., 1963. Demonstration of a mitochondrial energy-dependent pyridine nucleotide transhydrogenase reaction. Biochem and Biophys. Res. Commun. 10, 91-96

43. Defossez P.A., Park P.U., Guarente L. Vicious circles: a mechanism for yeast aging // Curr. Opin. Microbiol. 1998. - Vol. 1. - P. 707-711.

44. Dejean L., Beauvoit В., Guerin В., Rigoulet M. Growth of yeast Saccharomyces cerevisiae on a non-fermentable substrate: control of energetic yield by the amount of mitochondria // Biochim. Biophys. Acta. 2000. - Vol. 1457.-P. 45-56.

45. Diesel W., Bohme H.J., Nissler C., Freyer R., Heilmann W. A new purification procedure for yeast phosphofructokinase minimizing proteolytic degradation./ Eur. J. Biochem., 1973.38. 479-488.

46. Duffy P.H., Feuers R.J., Leaky J.A., Nakamura K.D., Turturro A., Hart R.W. Effect of chronic caloric restriction on physiological variables related to energy metabolism in the male Fischer 344 rat // Mech. Ageing Dev. 1989. -Vol. 48.-P. 117-133.

47. Egilmez N.K., Jazwinski S.M. Evidence for the involvement of a cytoplasmic factor in the aging of the yeast Saccharomyces cerevisiae // J. Bactcriol. 1989. - Vol. 171. - P. 37-42.

48. Evans С., Scragg A., Ratedge C. Regulation of citrate efflux from mitochondria of oleaginous and non-oleaginous yeast by adenine nucleotides // Eur. J. Biochem. 1981. - Vol. 130. - P. 195-204.

49. Farkas I., Hardy Т., Goebl D. Two glycogen synthase isoforms in Saccharomyces cerevisiae are coded by distinct genes that are differentially controlled//J. Biol. Chem.- 1991.-Vol. 266.-P. 15602-15607.

50. Farkas I., Hardy T.A., DePaoli R.A., Roach, P.J. Isolation of the GSY1 gene encoding yeast glycogen synthase and evidence for the existence of a second gene // J. Biol. Chem. 1990. - Vol. 265. - P. 20879-20886.

51. Fedotcheva N.I., Sharyshev A.A., Mironova G.D, Kondrashova M.N. Inhibition of succinic acid oxidation and potassium ion transport in mitochondria under hybernation//Сотр. Biochem. Physiol. 1985.-Vol. 82.-P. 191-195.

52. Fell D. Understanding the control of metabolism. London: Portland Press, 1997.

53. Fraser A., James C. Fermenting debate: do yeast undergo apoptosis? // Trends Cell Biol. 1998. - Vol. 8. - P. 219-221.

54. Francois J., Van Schaftingen E., Hers H.-G. Characterization of phosphofructokinase 2 and of enzymes involved in the degradation of fructose-2,6-bisphosphate in yeast // Eur. J. Biochem. 1988. - Vol. 171. - P. 599-608.

55. Gadd G.M., Chalmers K., Reed R.H. The role of trehalose in dehydration resistance // FEMS Microbiol. Lett. 1987. - Vol. 48. - P. 249-254.

56. Gancedo C., Serrano R. Energy-yielding metabolism // The Yeasts / Rose A.H., Harrison J.S. (Eds). New York: Academic Press, 1989. - P. 206-259.

57. Gershon H., Gershon D. Paradigms in aging research: a critical review and assessment // Mech. Ageing Dev. 2000. - Vol. 117. - P. 21-28.

58. Glonek Т., Lundc M., Mudgett M. Studies of biological polyphosphate through the use of Phosphorus-31 nuclear magnetic resonance // Arch. Biochem. Biophys.- 1971.-Vol. 142.-P. 508-513.

59. Godon C., Lagniel G., Lee J., Buhler J.-M., Kieffer S., Perrot M„ Bouchcrie H., Toledano M.B., Labarre J. The H2O2 stimulon in Saccharomyces cerevisiae 11 J. Biol. Chem.- 1998. Vol. 273. - P. 22480- 22489.

60. Granot D., Snyder M. Glucose induces cAMP-independent growth-related changes in stationary- phase cells of Saccharomyces cerevisiae IIPNAS. 1991. -Vol. 88. - P. 5724-5728.

61. Griffits M., Bernofsky, C., 1972. Purification and properties of reduced diphosphopyridine nucleotide kinase from yeast mitochondria. J.Biol.Chem. 247, 1473-1478

62. Guarente L. Sir2 links chromatin silencing, metabolism, and aging // Genes Dev. 2000. - Vol. 14. - P. 1021-1026.

63. Hamel R., Appanna D. Modulation of TCA cycle enzymes and aluminum stress in Pseudomonas fluorescens И J. Inorg. Biochem. 2001. - Vol. 87. - P. 18.

64. Hardy T.A., Roach P.J. Control of yeast glycogen synthase-2 by COOH-terminal phosphorylation // J. Biol. Chem. 1993. - Vol. 268. - P. 23799-23805.

65. Hardy T.A., Huang D., Roach P.J. Interactions between cAMP-dependent and SNF1 protein kinases in the control of glycogen accumulation in Saccharomyces cerevisiae И J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 269. - P. 27907-27913.

66. Harman D. Aging and oxidative stress // J. Int. Fed. Clin. Chem. 1998. -Vol. 10.-P. 24-27.

67. Hartig A., Simon M.M., Schuster Т., Daugherty J.R., Yoo H.S., Cooper T.G. Differentially regulated malate synthase genes participate in carbon and nitrogen metabolism of S. cerevisiae 11 Nucl. Acids Res. 1992. - Vol. 20. - P. 5677-5686.

68. Hathway J., Atkinson D. The effect of adenylic acid on yeast nicotinamide dinucleotide isocitrate dehydrogehase, a possible metabolic control mechanism // J. Biol. Chem. 1963. - Vol. 238. - P. 2875-2881.

69. Hayflick L., Moorhead P. The serial cultivation of human diploid cell strains// Exp Cell Res. 1961.-Vol. 25.-P. 585-621.

70. Heinisch J., Boles E., Timpel C. A yeast phosphofructokinase insensitive to the allosteric activator fructose-2,6- bisphosphate // J. Biol. Chem. 1996. -Vol. 271.-P. 15928-15933.

71. Heinisch J. Isolation and characterization of the two structural genes coding for phosphofructokinase in yeast // Mol. Gen. Genet 1986. - Vol. 202. -P. 75-82.

72. Hers H., Van Schaftingen E. Fructose-2,6-biphisphate two years after its discovery// Biochem. J. 1982. - Vol. 206. - P. 1-12.

73. Hirai M., Shiotani Т., Tanaka A., Fukui S. Intracellular localization of several enzymes in Candida tropicalis grown on different carbon sources // Agr. Biol. Chem. 1976. - Vol. 40. - P. 1879-1985.

74. Hohmann S, Neves M.J., de Koning W. The growth and signalling defects of the ggsl (fdpl/bypl) deletion mutant on glucose are suppressed by a deletion of the gene encoding hexokinase PII // Curr. Genet. 1993. - Vol. 23. - P. 281-289.

75. Huang K.P., Cabib E. Yeast glycogen synthetase in the glucose-6-phosphate-dependent form. II. The effect of proteolysis // J. Biol. Chem. 1974. -Vol. 249.-P. 3858-3861.

76. Huang D., Wilson W.A., Roach P.J. Glucose-6-Р control of glycogen synthase phosphorylation in yeast // J. Biol. Chem. 1997. - Vol. 272. - P. 2249522501.

77. Humphries K., Szweda S. Selective inactivation of a-ketoglutarate dehydrogenas and pyruvate dehydrogenase: reaction of lipoic acid with 4-hydroxy-2-nonenal // Biochemistry. 1998. - Vol. 37. - P. 15835-15841.

78. Hunsley J. R., Suelter C.H. Yeast pyruvate kinase: kinetic properties // J. Biol. Chem. 1969. - Vol. 244. - P. 4819-4822.

79. Imai S., Armstrong C.M., Kaeberlein M., Guarente L. Transcriptional silencing and longevity protein Sir2 is an NAD-dependent histone deacetylase // Nature. 2000. - Vol. 403. - P. 795-800.

80. Inge K.J. Polyphosphates of the yeast cell vacuole // J. Gen. Microbiol. -1968.-Vol. 51.-P. 447-455

81. Jakubowski W., Bilinski Т., Bartosz G. Oxidative stress during aging of stationary cultures of the yeast Saccharomyces cerevisiae II Free Radic. Biol. Med.- 2000. Vol. 28. - P. 659-664.

82. Jamieson D.J. Oxidative stress responses of the yeast Saccharomyces cerevisiae И Yeast. 1998. - Vol. 14. - P. 1511-1527.

83. Jazwinski S.M. An experimental system for the molecular analysis of the aging process: the budding yeast Saccharomyces cerevisiae II J. Gerontol. 1990.- Vol. 45. P. 68-74.

84. Jazwinski S.M. Longevity-assurance genes and mitochondrial DNA alterations: yeast and filamentous fungi: Handbook of the biology of aging / Schneider E.L., Rowe J.W. (Eds). San Diego, CA: Academic Press, 1996. - P. 39-54.

85. Jazwinski S.M. Molecular mechanisms of yeast longevity // Trends Microbiol. 1999. - Vol. 7. - P. 247- 52.

86. Jazwinski S.M. Coordination of metabolic activity and stress resistance in yeast longevity // The molecular genetics of aging / Ed Hekimi S. Berlin: Springer, 2000.-P. 21-44.

87. Jazwinski S.M. Metabolic control and aging // Trends in Genetics. 2000. -Vol. 16.-P. 506-511.

88. Johnson F.B., Sinclair D.A., Guarente L. Molecular biology of aging // Cell. 1999. - Vol. 96. - P. 291-302.

89. Jona G., Choder M., Gileadi O. Glucose starvation induces a drastic reduction in the rates of both transcription and degradation of mRNA in yeast // Biochim. Biophys. Acta. 2000. - Vol. 1491. - P. 37-48.

90. Kaiser D., Losick R. How and why bacteria talk each other // Cell. 1993. -Vol. 79.-P. 873-885.

91. Kaeberlein M., McVey M., Guarente L. The SIR234 complex and SIR2 alone promote longevity in Saccharomyces cerevisiae by two different mechanisms // Genes Dev. 1999. - Vol. 13. - P. 2570-2580.

92. Kemnitz J.W., Roecker E.B., Weindruch R., Olson D.F., Baum S.T., Bergman R.N. Dietary restriction increases insulin sensitivity and lowers blood glucose in rhesus monkeys // Amer. J. Physiol. 1994. - Vol. 266. - P. 540-547.

93. Kennedy B.K., Austriaco N.R., Guarente L. Daughter cells of Saccharomyces cerevisiae from old mothers display a reduced life span // J. Cell Biol. 1994.-Vol. 127.-P. 1985-1993.

94. Kennedy B.K., Austriaco N.R., Zhang J., Guarente L. Mutation in the silencing gene SIR4 can delay aging in S. cerevisiae H Cell. 1995. - Vol. 80. - P. 485-496.

95. Kim S., Kirchman P.A., Benguria A., Jazwinski S.M. Experimentation with the yeast model // Methods in aging research / Ed. Yu B.P. Boca Raton, FL: CRC Press, 1999.-P. 191-213.

96. Kim S., Benguria A., Lai C.Y., Jazwinski S.M. Modulation of life-span by histone deacetylase genes in Saccharomyces cerevisiae II Mol. Biol. Cell. 1999. -Vol. 10.-P. 3125-3136.

97. Kispal G., Rosenkrantz M., Guarente L., Srere P.A. Metabolic changes in Saccharomyces cerevisiae strains lacking citrate synthases // J. Biol. Chem. -1988. Vol. 263. - P. 11145-11149.

98. Kondrashova M.N., Grigorenko E.V., Kosenko E.A. Rapid cycle of substrate oxidation under activation of energy metabolism // EBEC Reports V, Aberysthwyth, Ireland, 1988. P. 297.

99. Kondrashova M.N., Grigorenko E.V. Manifestation of stress at the level of mitochondria, their stimulation by hormones // J. Gen. Biol. (Moscow). 1984. -Vol. 46.-P. 516-526.

100. Kondrashova M.N. Biochemical cycle of excitation // Biological and biochemical oscillators / Ed. Chance B. New York; London: Academic Press, 1973.-P. 373-389.

101. Kondrashova M.N., Gogvadze V.G., Babsky A.M. Succinic acid oxidation as the only energy support of intensive Ca2+-uptake by mitochondria // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1982. - Vol. 109. - P. 376-381.

102. Kornberg A., Kornberg S., Simms E. Metaphosphate synthesis by an enzyme from Esherichia coli H Biochim. Biophys. Acta. 1956. - Vol. 20. - P. 215-221

103. Kuge S., Jones N. YAP1 dependent activation of TRX2 is essential for the response of Saccharomyces cerevisiae to oxidative stress // EMBO J. 1994. -Vol. 13.-P. 655-664.

104. Kulaev I.S., Vagabov V.M. Polyphosphate metabolism in microorganisms//Adv. Microbil. Physiol. 1983.-Vol. 24.-P. 83-171.

105. Kulaev I., Vagabov V., Kulakovskaya T. New aspects of polyphosphate metabolism and function // J. Bioassay Bioeng. 1999. - Vol. 88. - P. 111 -129.

106. Kulaev I.S., Vagabov V.M. Polyphosphate metabolism in microorganisms // Adv. Microbiol. Physiol. 1983. - Vol. 24. - P. 83-171.

107. Lagunas R., Dominguez C., Busturia A., Saez M.J. Mechanism of appearance of the Pasteur effect in Saccharomyces cerevisiae: inactivation of sugar transport systems//J. Bacteriol. 1982. - Vol. 152.-P. 19-25.

108. Langen P., Liss E. Uber bildung und um satz die polyphosphate der Hefe // Biochem. Z. 1958. - Vol. 330. - P. 455-466.

109. Larsson C., Pahlman I.-L., Gustafsson L. The importance of ATP as a regulator of glycolytic flux in Saccharomyces cerevisiae И Yeast. 2000. - Vol. 16.-P. 797-809.

110. Lemire В., Oyedotun К. The Saccharomyces cerevisiae mitochondrial succinate: ubiquinone oxidoreductase // Biochim. Biophys Acta. 2002. - Vol. 1553.-P. 102-116.

111. Li F., Flanary P.L., Altieri D.C., Dohlman H.G. Cell division regulation by BIR1, a member of the inhibitor of apoptosis family in yeast // J. Biol. Chem. -2000. Vol. 275. - P. 6707-6711.

112. Lillie S., Pringle J. Reserve carbohydrate metabolism in Saccharomyces cerevisiae: responses to nutrient limitation // J. Bacteriol. 1980. - Vol. 140. - P. 1384-1394.

113. Lin S., Kaeberlein M., Andalis A., Sturtz L., Defossez P., Culotta V., Fink G., Guarente L. Calorie restriction extends Saccharomyces cerevisiae lifespan by increasing respiration // Nature. 2002. - Vol. 418. - P. 344-348.

114. Lin S., Manchester K, Gordon J. Enhanced gluconeogenesis and increased energy storage as hallmarks of aging in Saccharomyces cerevisiae II J. Biol. Chem. 2001. - Vol. 276. - P. 36000-36007.

115. Liou L.-L., Fabrizio P., Moy V.N., Vaupel J.W., Valentine J.S., Gralla E.B. The importance of ATP as a regulator of glycolytic flux in Saccharomyces cerevisiae I/ Yeast. 2000. - Vol. 16. - P. 797-809.

116. Longo V.D. Mutations in signal transduction proteins increase stress resistance and longevity in yeast, nematodes, fruit flies, and mammalian neuronal cells // Neurobiol. Aging. 1999. - Vol. 20. - P. 479-486.

117. Longo V.D., Ellerby L.M., Bredesen D.E., Valentine J.S., Gralla E.B. Human Bcl-2 reverses survival defects in yeast lacking superoxide dismutase and delays death of wild-type yeast // J. Cell. Biol. 1997. - Vol. 137. - P. 1581 -1588.

118. Longo V.D., Gralla E.B., Valentine J.S. Superoxide dismutase activity is essential for stationary phase survival in Saccharomyces cerevisiae II J. Biol. Chem.-1996.-Vol. 271.-P. 12275-12280.

119. Laun P., Pichova A., Madeo F., Fuchs J., Ellinger A., Kohlwein S., Dawes I., Breitcnbach M. Aged mother cells of Saccharomyces cerevisiae showmarkers of oxidative stress and apoptosis // Mol. Microbiol. 2001. - Vol. 39. - P. 1166-1173.

120. Londesborough J., Vuorio O. Trehalose-6-phosphate synthase /phosphotase complex from bakers' yeast: purification of a proteolytically activated form //J. Gen. Microbiol. 1991. Vol 237.- P. 323-330.

121. Lowry O.H., Rosebrough N.I., Farr A.L., Randell R.J Protein measurmentwith the Folin phenol reagent//J.Biol.Chem- 1951.-Vol.193.-P. 265-275.

122. Ma H., Kubicek C. Malate dehydrogenase isoenzymes in Saccharomyces cerevisia /I FEMS Lett. 1981. - Vol. 12. - P. 147-154.

123. Maevsky E.I, Guzar I.В., Rosenfeld A.S., Kondrashova M.N. Does not succinic acid mediate adrenaline stimulation in mitochondria? // EBEC Reports 2. Lyon: LBTM-CNRS, 1982. - P. 537-538.

124. Meixner-Minori В., Kubicek C., Habison A. Pyruvatkinase: a regulatory enzyme in glycolysis? // Can. J. Microbiol. 1984. - Vol. 30. - P. 16-22.

125. Mexiner-Minori В., Kubicek C., Habison A. Presence and regulation of the a- ketoglutaratedehydrogenase multyenzyme complex // J. Bacteriol. 1985. -Vol. 161.-P. 265-273.

126. McAlister-Henn L., Thompson L.M. Isolation and expression of the gene encoding yeast mitochondrial malate dehydrogenase // J. Bacteriol. 1987. - Vol. 169.-P. 5157-5166.

127. McCammon M.T., Veenhuis M., Trapp S.B., Goodman J.M. Association of glyoxylate and beta-oxidation enzymes with peroxisomes of Saccharomyces cerevisiae И J. Bacteriol. 1990. - Vol. 172. - P. 5816-5827.

128. McCarter R., Masoro E.J., Yu B.P. Does food restriction retard metabolic rate? // Amer. J. Physiol. 1985. - Vol. 248. - P. 488-490.

129. Maclean M., Harris N., Piper P.W. Chronological lifespan of stationary phase yeast cells; a model for investigating the factors that might influence the aging of postmitotic tissues in higher organisms // Yeast. 2001. - Vol. 18. - P. 499-509.

130. Minard K.I., Jennings G.T., Loftus T.M., Xuan D., McAlister-Henn L. Sources of NADPH and expression of mammalian NADP-specific isocitrate dehydrogenases in Saccharomyces cerevisiae I I J. Biol. Chem, 1998. - Vol. 273. -P. 31486-31493.

131. Mortimer R.K., Johnston J.R. Life span of individual yeast cells // Nature. 1959.-Vol. 183.-P. 1751-1752.

132. Mortimer R.K., Johnston J.R. Genealogy of principal strains of the yeast genetic stock center // Genetics. 1986. - Vol. 113. - P. 35-43.

133. Mukamolova GV, Kormer SS, Kell DB, Kaprelyants AS. Stimulation of the multiplication of Micrococcus luteus by an autocrine growth factor // Arch Microbiol.-1999.-Vol.172.-P.9-14.

134. Neilson N. The presence of aconitase and aconitic hydratase in Saccharomyces cerevisiae II J. Bacteriol. 1986. - Vol. 171. - P. 356-365.

135. Nichols D. Mitochondrial function and dysfunction in the cell: its relevance to aging and aging-related disease // J. Biochem. Cell Div. 2002. - Vol. 34.-P. 1372-1381.

136. Nilsson A., Larsson C., Gustafsson L. Catabolic capacity of Saccharomyces cerevisiae in relation to the physiological state and maintenance requirement // Thermochim. Acta. 1995. - Vol. 250. - P. 233-245.

137. Ogawa Y, Atkinson D. Interaction between citrate and nucleoside triphosphates in binding to phosphofructokinase // Biochemistry. 1985. - Vol. 24. - P. 954-958.

138. Paravicini G., Kretschmer M. The yeast FBP26 gene codes for a fructose-2,6-bisphosphatase // Biochemistry. 1992. - Vol. 31. - P. 7126-7133.

139. Park P.U., Defossez P.A., Guarente L. Effects of mutations in DNA repair genes on formation of ribosomal DNA circles and life span in Saccharomyces cerevisiae I/ Mol. Cell Biol. 1999. - Vol. 19. - P. 3848-3856.

140. Parrou J.L., Enjalbert В., Plourde L., Bauche A., Gonzalez В., Francois J. Dynamic response of reserve carbohydratemetabolism under carbon and nitrogen limitations in Saccharomyces cerevisiae II Yeast. 1999. - Vol. 15. - P. 191-203.

141. Parrou J.L., Francois J.M. A simplified procedure for a rapid and reliable assay of both glycogen and trehalose in whole yeast cells //Anal. Biochem. 1997. -Vol. 248.-P. 186-188.

142. Pick U., Weiss M. Polyphosphate hydrolysis within acidic vacuoles in response to amino-induced alkaline stress in the galotolerant alga Dunaliella salina /I Plant Physiol. 1991. - Vol. 97. - P. 1234-1240.

143. Pilatus U., Mayer A., Hildebrandt A. Nuclear polyphosphate as a possible source of energy during the sporulation of Physarum polycephaliim II Arch. Biochem. Biophys. 1989. - Vol. 275. - P. 215-223.

144. Plourde-Owobi L., Durner S., Goma G., Francois J. Trehalose reserve in Saccharomyces cerevisiae: phenomenon of transport, accumulation and role in cell viability // Int. J. Food Microbiol. 2000. - Vol. 55. - P. 33-40.

145. Priault M., Bessoule J.J., Grelaud-Coq A., Camougrand C., Manon S. Bax-induced cell death in yeast depends on mitochondrial lipid oxidation // Eur. J. Biochem. 2002. - Vol. 269. - P. 5440-5450.

146. Rodriguez R.J. Polyphosphate present in DNA preparation from filamentous fungal species of Colletotrichum inhibits restriction endonucleases and other enzymes // Anal. Biochem. 1993. - Vol. 209. - P. 291 -297.

147. Rosenzweig R.F. Regulation of fitness in yeast overexpressing glycolytic enzymes: parameters of growth and viability // Genet. Res. Camb. 1992. - Vol. 59. - P. 35-48.

148. Rothman-Denes L.B., Cabib E. Two forms of yeast glycogen synthetase and their role in glycogen accumulation // PNAS. 1970. - Vol. 66. - P. 967-974.

149. Roy N., Runge K.W. Two paradox involved in transcriptional silcncing that antagonistically control yeast life span // Curr. Biol. 2000. - Vol. 10. - P. 111-114.

150. Salas M., Vinuela N. Citrate inhibition of phosphofructokinase and the Pasteur effect // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1989. - Vol. 19. - P. 371376.

151. Samokhvalov V.A., Ignatov V.V., Kondrashova M.N. Reserve 0 carbohydrates aintain the viability of Saccharomyces cerevisiae cells duringchronological aging// Mech. Ageing Dev. 2004. - Vol. 125. - P. 229-235.

152. Schaaff I., Heinisch J., Zimmermann F.K. Overproduction of glycolytic enzymes in yeast // Yeast. 1989. - Vol. 5. - P. 285-290.

153. Schatz, G., Racker, E., 1966. Stable phosphorylating submitochondrialparticles from baker's yeast. Biochem and Biophys. Res. Commun. 22, 579-584.

154. Schulze U., Elleskov N., Larssen M., Villadsen J. Determination of intracellular trehalose and glycogen in Saccharomyces cerevisiae И Anal. Biochem. 1995. - Vol. 228. - P. 143-149.

155. Shaham S., Shuman M.A., Herskowitz I. Death-defying yeast identify * novel apoptosis genes // Cell. 1998. - Vol. 92. - P. 425-427.

156. Shirahama K., Yazaki Y., Sakano K. Vacuolar function in the phosphate homeostasis of the yeast Saccharomyces cerevisiae II Plant Cell Physiol. 1996. -Vol. 37.-P. 1090-1093.

157. Semenza G.L. HIF-1: mediator of physiological and pathophysiological responses to hypoxia // J. Appl. Physiol. 2000. - Vol. 88. - P. 1474-1480.

158. Sinclair D.A. Yeast aging research: recent advances and medical relevance // Cell Mol. Life Sci. 1999. - Vol. 56. - P. 807-816.

159. Sinclair D.A., Guarente L. Extrachromosomal rDNA circles a cause ofaging in yeast//Cell. 1997.-Vol. 91.-P. 1033-1042.

160. Sinclair D.A., Mills K., Guarente L. Molecular mechanisms of yeast aging//Trends Biochem. Sci. 1998. - Vol. 23. - P. 131-134.

161. Silje H., Paalman J, ter Schure E.G. Function of trehalose and glycogen in cell cycle progression and cell viability in Saccharomyces cerevisiae II J. Bacteriol. 1999.-Vol. 181. P. 396-400.

162. Skorko R. Polyphosphate as a source of phosphoryl group in protein modification in archebacterium Sulfolohus acidocaldarius // Biochimie. 1989. -Vol. 71.-P. 9-10.

163. Srere P. Citrate enzymes: their structures, mechanisms and biological * functions // Curr.Topics Cell Regul. 1962. - Vol. 5. - P. 229-283.

164. Steels E.L, Lear-Month R.P., Watson K. Stress tolerance and membrane lipid unsaturation in Saccharomyces cerevisiae grown aerobically or anaerobically II Microbiology. 1994. - Vol. 140. - P. 569-576.

165. Supakar P.C., Roy A.K. Role of transcription factors in the age-dependent regulation of the androgen receptor gene in rat liver // Biol. Signals. -1996.-Vol. 5.-P. 170-179.

166. Teusink В., Passarge J., Reijenga CA. Can yeast glycolysis be understood in terms of in vitro kinetics of the constituent enzymes? Testing biochemistry II Eur. J. Biochem. 2000. - Vol. 267. - P. 5313-5329.

167. Thevelein J.M., Hohmann S. Trehalose synthase: guard to the gate of glycolysis in yeast // Trends Biochem. Sci. 1995. - Vol. 20. - P. 3-10.

168. Van Hoek P., van Dijken J.P., Pronk J.T. Regulation of fermentative capacity and levels of glycolytic enzymes in chemostat cultures of Saccharomyces cerevisiae II Enzyme Microbiol. Technol. 2000. - Vol. 26. - P. 724-736.

169. Van Dijck P., Colavizza D., Smet P., Thevclcin J.M. Differential importance of trehalose in stress resistance in fermenting and nonfermenting Saccharomyces cerevisiae cells // Appl. Environ. Microbiol. 1995. - Vol. 61. -P. 109-115.

170. Van Hoek P, van Dijken J.P, Pronk J.T. Regulation of fermentative capacity and levels of glycolytic enzymes in chemostat cultures of Saccharomyces cerevisiae И Enzyme Microbiol. Technol. 2000. - Vol. 26. - P. 724-736.

171. Van Hoek P., van Dijken J.P., Pronk J.T. Effect of specific growth rate on fermentative capacity of bakers' yeast // Appl. Environ. Microbiol. 1998. -Vol. 64. - P. 4226-4233.

172. Vandercammen A., Francois J., Hers H.G. Characterization of trehalose-6-phosphate synthase and trehalose-6-phosphate phosphotase of Saccharomyces cerevisiae // Eur. J. Biochem. 1989. - Vol. 182. - P. 613-620.

173. Weitzman P., Danson M. Citrate synthase // Curr. Topics Cell Regul.-1976.-Vol. 10.-P. 161-205.

174. Werner-Washburne M., Braun E., Johnston G.C., Singer R.A. Stationary phase in the yeast Saccharomyces cerevisiae 11 Microbiol. Rev. 1993. - Vol. 57. -P. 383-401.

175. Werner-Washburne M., Braun E.L., Crawford M.E., Peck V.M. Stationary phase in Saccharomyces cerevisiae II Mol. Microbiol. 1996. - Vol. 19.-P. 1159-1166.

176. Westenberg В., Boiler Th., Wiemken A. Lack of arginine and polyphosphate storage pools in a vacuole deficient mutant (end 1) of S. cerevisiae И FEBS Lett. - 1989. - Vol. 254. - P. 133-136.

177. Wiame J.M. Etude d'une substance polyphosphate basophile et metachromatique chez les levures // Biochim. Biophys. Acta. 1947. - Vol. 1. - P. 234-255.

178. Wiemken A., Durr, M. Characterization of amino asid pools in the vacuolar compartment of Saccharomyces cerevisiae II Arch. Microbiol. 1974. -Vol. 101.-P. 45-57.

179. Wiemken, A. Trehalose in yeast, stress protectant rather than reserve carbohydrate I I Antonie van Leeuwenhoek. 1990. - Vol. 58. - P. 209-217.

180. Wills C. Regulation of sugar and ethanol metabolism in Saccharomyces cerevisiae И Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 1990. - Vol. 25. - P. 245-280.

181. Urech K., Durr M., Boiler Th. Localization of polyphosphate in vacuoles of Saccharomyces cerevisiae I I Arch. Microbiol. 1978. - Vol. 116. - P. 275-278.

182. Xie Y., Varshavsky A. The N-end rule pathway is required for import of histidine in yeast lacking the kinesin-like protein Cin // Curr. Genet. 1999. - Vol. 36.-P. 113-123.

183. Zhao W.N., McAlister-Henn L. Expression and gene disruption analysis of the isocitrate dehydrogenase family in yeast // Biochemistry. 1996. - Vol. 35. - P. 7873-7878.1. БЛАГОДАРНОСТИ

184. Автор искренне благодарен за помощь в проведении экспериментальных работ, а также в обсуждении полученных данных профессорам И.С. Кулаеву и В.М. Вагабову (ИБФМ РАН, Пущино).