Механизмы взаимодействия тритерпеновых и стероидных гликозидов с липидными мембранами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, кандидат физико-математических наук Лихацкая, Галина Николаевна

• Лихацкая, Галина Николаевна
• кандидат физико-математических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат физико-математических наук Лихацкая, Галина Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ И МЕХАНИЗМ

МЕМБРАНОТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ ТРИТЕРПЕНОВЫХ И СТЕРОИДНЫХ ГЛИКОЗИДОВ.

1.1. Строение и биологическая активность тритерпеновых и стероидных гликозидов.

1.2. Взаимодействие тритерпеновых и стероидных гликозидов с мембранами.

1.3. Комплексообразование гликозидов со стеринами.

1.4. Влияние гликозидов на свойства бислойных липидных мембран.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Материалы.

2.2. Получение бислойных липидных мембран и измерение их электрических характеристик.

2.3. Получение липосом и калориметрические измерения.

2.4. Определение проницаемости липосомальных мембран.

2.5. Определение пролиферации опухолевых клеток.

2.6. Измерение выхода ионов К+ и гемоглобина из эритроцитов.

ГЛАВА 3. МЕХАНИЗМЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ТРИТЕРПЕНОВЫХ И

СТЕРОИДНЫХ ГЛИКОЗИДОВ С ЛИПИДНЫМИ

МЕМБРАНАМИ.

3.1. Исследование механизмов мембранотропного действия гликозидов голотурий.

3.1.1. Влияние голотуринов на ионную проницаемость модельных и клеточных мембран.

3.1.2. Влияние голотуринов и их генинов на термотропный фазовых переход липосомальных мембран из дипальмитоилфосфотидилхолина.

3.1.3. Калориметрическое изучение комплексообразования тритерпенового гликозида голотурина А2 и его свободного агликона с мембранным холестерином.

3.1.4. Влияние кукумариозидов и их производных на ионную проницаемость мембран и термотропный фазовый переход дипальмитоилфосфотидилходина.

3.2. Изучение механизма мембранотопного действия гликозилированных и свободных тритерпеноидов растительного происхождения р-амиринового, даммаранового и лупанового рядов.

3.2.1. Влияние гликозидов хедерагенина на ионную проницаемость и термотропное поведение мембран.

3.2.2. Изучение механизма мембранотропного действия гликозидов женьшеня.

3.2.3. Изучение механизма мембранотропного действия тритерпеноидов лупанового ряда.

3.2.4. Влияние свободных тритерпеноидов на свойства модельных мембран.

3.3. Действие стероидного гликозида полигонатозида С1 и его агликона пенногенина на опухолевые клетки, липосомы и бислойные липидные мембраны.

3.4. Мембранный механизм регуляции клеточной активности тритерпеновыми и стероидными гликозидами.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы взаимодействия тритерпеновых и стероидных гликозидов с липидными мембранами»

Проблема проницаемости биологических мембран принадлежит к числу фундаментальных проблем физико-химической биологии. Решение ее необходимо для понимания функциональной роли биомембран и биологии клетки в целом. Проблема клеточной проницаемости очень многогранна и степень изученности ряда вопросов еще недостаточна. К числу таких вопросов относятся и молекулярные механизмы изменения проницаемости мембран при действии природных биорегуляторов на клетки.

Тритерпеновые и стероидные гликозиды относятся к классу низкомолекулярных биорегуляторов и обладают широким спектром медико-биологического действия [1-6]. Достигнуты значительные успехи в выделении индивидуальных гликозидов и установлении их полной структуры [5-19]. Накоплен обширный материал по связи между химическим строением и биологической активностью этих природных соединений [12-21]. Анализируются причины различной биологической активности тритерпеновых и стероидных гликозидов [12-15, 18-21]. Но детальный молекулярный механизм их действия на мембраны не ясен.

Многие виды биологической активности гликозидов обусловлены прямым взаимодействием их со свободными или мембраносвязанными стеринами. В результате такого взаимодействия происходит нарушение структуры и избирательной проницаемости клеточных мембран [22-24]. Для объяснения механизма действия гликозидов была предложена «стериновая» гипотеза [25, 26]. В рамки "стериновой" гипотезы фактов не укладываются данные о биологической активности некоторых сапонинов [27]. В литературе имеются противоречивые данные по вопросу комплексообразования гликозидов с мембранным холестерином. В работе [26] предполагалось, что в мембране образуется комплекс холестерина с агликонной частью молекулы гликозида. В работе японских ученых [28] показано, что решающую роль в образовании комплекса играет размер углеводной цепи молекулы гликозида.

С использованием техники бислойных липидных мембран (БЛМ) в работах отечественных ученых впервые показано, что механизм изменения проницаемости стеринсодержащих мембран в присутствии тритерпеновых и стероидных гликозидов связан с образованием в мембранах ионных каналов и пор [29-33]. Предложены гипотетические молекулярные модели пор, образованных тритерпеновыми гликозидами [26, 32, 34]. Параметры одиночных каналов, образованных гликозидами, изучены недостаточно. Поэтому необходимо было продолжить исследования взаимодействия тритерпеновых и стероидных гликозидов с мембранами в двух направлениях: во-первых, по изучению свойств ионных каналов, образованных гликозидами различного химического строения; во-вторых, по изучению взаимодействия гликозидов с липидным бислоем и с мембранным холестерином. К началу нашей работы зависимость параметров каналов от структуры гликозидов и стеринов была не изучена. Структура комплексов гликозидов со стеринами и роль углеводной части и агликона молекулы гликозида в образовании комплекса не ясна. Молекулярные механизмы взаимодействия гликозидов с мембранами были изучены недостаточно. Понимание механизма мембранотропного действия тритерпеновых и стероидных гликозидов необходимо для целенаправленного поиска и синтеза новых высокоактивных соединений, для успешного применения их в научных исследованиях, биотехнологии, медицине и сельском хозяйстве. Поэтому выяснение механизма мембранотропного действия природных низкомолекулярных биорегуляторов актуально как в теоретическом, так и в практическом отношении. Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы является изучение физико-химических механизмов взаимодействия тритерпеновых и стероидных гликозидов с мембранами, установление общих закономерностей и индивидуальных особенностей действия гликозидов, выяснение различий в мембранотропном действии свободных и гликозилированных тритерпеноидов и стероидов. В задачи нашего исследования входило:

1) изучение механизма действия тритерпеновых гликозидов голотурий на ионную проницаемость и термотропное поведение модельных мембран; установление связи структура - активность и калориметрическое изучение комплексообразования тритерпенового гликозида голотурина А2 и его свободного агликона с мембранным холестерином;

2) изучение механизма мембранотропного действия гликозилированных и свободных тритерпеноидов растительного происхождения Р-амиринового, даммаранового и лупанового рядов

3) изучение механизма действия стероидного гликозида и его агликона на клеточные и модельные мембраны;

Научная новизна.

Впервые изучены ион-селективные каналы и неселективные поры, образованные гликозидами различного строения в стеринсодержащих мембранах. Установлена связь между химическим строением гликозидов, их каналообразующей активностью. Установлено, что каналообразующая активность и устойчивость мембран к действию гликозидов определяются липидным составом мембран, структурой и количественным содержанием стеринов в мембранах.

Впервые изучено влияние тритерпеновых гликозидов различного строения на термотропный фазовый переход липидных мембран и калориметрически показано образование комплексов одинаковой стехиометрии для тритерпенового гликозида и его свободного агликона с мембранным холестерином. Показана роль углеводного компонента и агликона в проявлении мембранотропного действия гликозидов.

Впервые показано, что тритерпеновые гликозиды из высших растений (гликозиды хедерагенина, бетулиновая кислота и ее гликозиды, цитотоксические гликозиды женьшеня) образуют ионные каналы в модельных и клеточных мембранах и влияют на физическое состояние липидного бислоя и термотропное поведение мембран. Показано обратимое регулирование проницаемости мембран с помощью рН-управляемых каналов, образованных тритерпеновым гликозидом.

Впервые изучен механизм мембранотропного действия стероидного гликозида и его свободного агликона на клеточные и модельные мембраны. Показано образование ионных каналов, и изменение физического состояния мембран в присутствии стероидного гликозида и отсутствие ионных каналов и стериноподобные эффекты при действии на мембраны его свободного агликона.

Впервые проведено сравнительное изучение мембранотропного действия свободных и гликозилированных тритерпеноидов животного и растительного происхождения и показаны различия в механизмах их действия. Предложены молекулярная модель действия гликозидов на мембраны и мембранный механизм регуляции клеточной активности биорегуляторами тритерпеновой и стероидной природы.

Практическая значимость работы. Полученные результаты вносят вклад в понимание физико-химических механизмов действия тритерпеновых и стероидных гликозидов на клетки, углубляют существующие представления о влиянии низкомолекулярных биорегуляторов на проницаемость мембран.

Установленные закономерности служат основой для прогноза мембранной активности новых соединений или модификации структуры известных соединений для получения заданных свойств.

Предложен новый биохимический инструмент для научных исследований на основе гликозида хедерагенина для регулируемого изменения проницаемости мембран.

Полученные данные по свойствам ионных каналов, образованных тритерпеновыми гликозидами, и по влиянию гликозидов и их генинов на термотропное поведение мембран могут найти применение в научно-исследовательских лабораториях. Результаты диссертационного исследования используются при чтении спецкурса для студентов, а также при выполнении курсовых и дипломных работ.

Обоснованность и достоверность результатов подтверждается использованием современных биофизических методов исследования мембран и способов обработки полученных экспериментальных данных.

Апробация работы. Результаты работы были представлены на I Всесоюзном биофизическом съезде (Москва, 1982); на II Съезде биофизиков России (Москва, 1999). Сделаны доклады на симпозиуме «Сапонины: Структура и биологическая активность» Американского химического общества (Чикаго, США, 1995); на международных конференциях по сапонинам (Пилава, Польша, 1999 и 2004): на XIII Всемирном конгрессе по токсинам (Париж, 2000); на IX Азиатско-тихоокеанском конгрессе (Тайбей, Тайвань, 1998); на региональных научных конференциях ТИБОХ ДВО РАН Владивосток. Публикации. По теме диссертации опубликовано 16 работ.

Личный вклад автора состоит в том, что им самостоятельно получены экспериментальные данные по влиянию исследуемых соединений на ионную проницаемость и термотропное поведение мембран, проведена обработка и интерпретация полученных данных и написаны соответствующие разделы статей. Эксперименты на опухолевых клетках и по проницаемости липосом проводились совместно с сотрудниками лаборатории биоиспытаний и изучения механизма действия БАВ ТИБОХ ДВО РАН д.б.н. Анисимовым М.М., д.б.н. Поповым A.M., к.б.н. Амининым Д.Л., к.б.н. Прокофьевой Н.Г., к.б.н. Агафоновой И.Г., и Шенцовой Е.Б.

Структура и объем работы Работа состоит из введения, литературного обзора, материалов и методов исследования, полученных экспериментальных результатов и их обсуждения, выводов и списка литературы, включающего 157 цитируемых работ. Работа изложена на 120 страницах, содержит 10 таблиц и 37 рисунков.

Результаты исследований являются частью плановой работы, проводимой в лаборатории биоиспытаний и изучения механизма действия БАВ Тихоокеанского института биоорганической химии ДВО РАН по теме: «Изучение механизма действия и биологической активности новых природных и синтетических соединений» (№ Госрегистрации 01.200.109200. 2001-2005 гг.). Работа проводилась при поддержке грантов РФФИ: № 96-04-51016-а, № 99-04-48058-а, №03-04-49521-а.

Автор выражает глубокую признательность и благодарность своему учителю к.ф.-м.н.Ровину Ю.Г|. и научному руководителю [д.ф.-м.н Ермишкину Л.Н

Автор благодарит сотрудников ТИБОХ ДВО РАН за предоставление соединений для исследований: д.х.н Уварову Н.И, к.х.н. Л.Н. Атопкину, к.х.н. Самошину Н.Ф., к.х.н. [Стригину Л.И|., д.х.н. С.А. Авилова, д.б.н. Калинина В.И., к.х.н. Кузнецову

Т.А., Олейникову Г.К. благодарит за консультации и помощь в работе д.б.н.

Анисимова М.М., к.б.н. Аминина Д.Л., д.б.н. Калинина В.И., к.б.н. [Прокофьеву Н.Г д.б.н. Попова A.M., д.х.н Уварову Н.И., к.х.н. |Стригину Л.И.,| к.б.н. Агафонову И.Г. и Шенцову Е.Б. и сотрудников Института химии ДВО РАН д.х.н. Руднева B.C., Яровую Т.П., к.х.н. Недозорова П.М за помощь в работе .

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Лихацкая, Галина Николаевна

102 ВЫВОДЫ

1. Проведено систематическое исследование влияния гликозидов голотурий и их производных, природных и полусинтетических гликозидов женьшеня, гликозидов хедерагенина, бетулина и бетулиновой кислоты на термотропное поведение модельных мембран и ионную проницаемость клеточных и модельных мембран. Установлена связь между химическим строением и мембранной активностью исследуемых соединений. Показана роль структуры агликона (строения и степени окисленности боковой цепи, карбоксильной группы), роль размера и строения углеводного компонента (сульфатной, метальной и ацетатной групп в углеводной цепи) в проявлении мембранной активности морских и растительных тритерпеновых гликозидов.

2. Методом дифференциальной сканирующей микрокалориметрии показано, что взаимодействие гликозидов с мембранами, локализация и ориентация молекул в мембране определяются структурными особенностями агликона, строением углеводных цепей, их количеством и местом присоединения к агликону. Калориметрически показано образование комплексов одинаковой стехиометрии тритерпенового гликозида и его свободного агликона с мембранным холестерином. Показаны различия в механизмах действия гликозилированных и свободных тритерпеноидов и стероидов.

3. Показано, что механизм изменения проницаемости клеточных и модельных мембран состоит в образовании ион-селективных каналов при действии низких концентраций гликозидов и неселективных водонаполненных пор при действии высоких концентраций. Свойства ионных каналов и пор, образованных в мембранах тритерпеновыми и стероидным гликозидами, зависят от структуры гликозидов и структуры стеринов. Предложены молекулярные модели действия тритерпеновых гликозидов на мембраны и мембранные механизмы регуляции клеточной активности сапонинами. Предложен способ обратимого изменения проницаемости мембран и регуляции клеточной активности с использованием сапонина. Тритерпеновый гликозид предложен в качестве биохимического инструмента формирования в биомембранах рН-управляемых каналов и пор.

Список литературы диссертационного исследования кандидат физико-математических наук Лихацкая, Галина Николаевна, 2006 год

1. Saponins in Food, Feedstuffs and Medicinal Plants. / Eds. Oleszek W., Marston A. Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, 2000. 29lp.

2. Saponins Used in Food and Agriculture / Eds. Waller G.R., Yamasaki K. New York, Plenum Press, 1996. 441 p.

3. Saponins Used in Traditional and Modern Medicine / Eds. Waller G.R., Yamasaki K. New York, Plenum Press, 1996. 606 p.

4. Dzubak P., Hajduch M., Vydra D., Hustova A., Kvasnica M., Biedermann D., Markova L., Urban M., Sarek J. Pharmacological activities of natural triterpenoids and their therapeutic implications // Nat. Prod. Rep. 2006. V.23, N 3. P. 394-411.

5. Деканосидзе Г.Е., Чирва В.Я., Сергиенко T.B., Уварова Н.И. Исследование тритерпеновых гликозидов. Установление строения и синтез / Тбилиси: Издательство «Мецниераба», 1982. 152 с.

6. Еляков Г.Б., Стоник В.А. Терпеноиды морских организмов. М.: Наука, 1986. 270 с.

7. Еляков Г.Б., Стоник В.А. Стероиды морских организмов. М.: Наука, 1988. 206 с.

8. Stonik V.A., Kalinin V.I., Avilov S.A. Toxins from sea cucumbers (Holothuroids): chemical structures, properties, taxonomic distribution, biosynthesis and evolution // J. Nat. Toxins. 1999. V. 8, N 2. P. 235248.

9. Химия спиростанолов. / Камерницкий A.B., Абубакиров Н.К., Воллернер Ю.Е., Войшвилло Н.Е., Решетова И.Г., Пасешниченко

10. B.А. М.: Наука, 1986. 176 с.

11. Стоник В.А., Авилов С.А., Калинин В.И. Биологически активные вещества из голотурий (морских кубышек) // В кн.: «Успехи в изучении природных соединений». Владивосток: Дальнаука, 1999.1. C. 105-123.

12. Kalinin V.I, Silchenko A.S, Avilov S.A, Stonik V.F, Smirnov A.V. Sea cucumbers triterpene glycosides, the recent progress in structural elucidation and chemotaxonomy // Phytochemistry Reviews. 2005. V. 4. P. 221-236.

13. Васильева И.С, Пасешниченко B.A. Стероидные гликозиды растений и культуры клеток диоскореи, их метаболизм и биологическая активность // Успехи биологической химии. 2000. Т. 40, С. 153—204.

14. Кинтя П.К, Лазурьевский Г.В,Балашова Н.Н, Балашова И.Т,Структура А.И, Лях В. А. Строение и биологическая активность стероидных гликозидов ряда спиростана и фуростана. Кишинев:Штиинца. 1987. 142 с.

15. Кинтя П.К, Лазурьевский Г.В. Стероидные гликозиды ряда спиростана: строение и свойства. Кишинев: Штиинца, 1979. 146 с.

16. Piacente S, Pizza C, Oleszek W. Saponins and phenolics of Yucca schidigera Roezl: Chemistry and bioactivity // Phytochemistry Reviews. 2005. V. 4. P. 177-190.

17. Стригина Л.И, Лихацкая Г.Н, Горовой П.Г. Стероидные гликозиды видов рода Polygonatum Mill, и их биологическая активность // Раст. ресурсы. 2003. Т. 39, вып. 3. С. 1-29.

18. Panax ginseng С. A. Meyer, произрастающих в Приморском крае // Хим.-фарм. журн. 2000. Т. 34, N 3. С. 19-25.

19. Анисимов М.М. Тритерпеновые гликозиды и структурно-функциональные свойства мембран // Биол. науки. 1987, N 10. С. 49-63.

20. Калинин В.И., Левин B.C., Стоник В.А. Химическая морфология: тритерпеновые гликозиды голотурий (Holothurioidea, Echinodermata). Владивосток: Дальнаука, 1994. 284 с.

21. Dourmashkin R.R., Doucherty R.M., Harris R.J. Electron microscopic observations on Rous sarcoma virus and cell membranes // Nature. 1962. V. 194. P. 1116-1119.

22. Bangham A.D., Home R.W. Action of saponin on biological cell membrane //Nature. 1962. V. 196. P. 952-953.

23. Seeman P. Transient holes in the erythrocyte membrane during hypotonic hemolysis and stable holes in the membrane after lysis by saponin and lysolecithin // J. Cell Biol. 1967. V. 32. P. 55-70.

24. Shulman J.H., Rrideal E.K. Molecular interaction in monolayers. I. Complexes between large molecules // Proceed. Royal Soc. Londo, serB. 1937. V. 192. P. 29-45.

25. Glauert A.M., Dingle J.T., Lucy J.A. Action of saponin on biological cell membranes //Nature. 1962. V. 196. P. 953-955.

26. Nakamura Т., Inoue K., Nojima S., Sankawa U., Shoji J., Kawasaki Т., Shibata S. Interaction of saponins with red blood cells as well as with the phosphatidylcholine liposomal membranes // J. Pharm. Dyn. 1979. N2. P. 374-382.

27. Богатский A.B., Назарова Н.Ю., Назаров Е.И., Кинтя П.К., Бобейко В.А. Модификаторы бислойных липидных мембран среди стероидных гликозидов // Докл. АН СССР. 1980. Т. 252, № 1.С. 235-237.

28. Богатский А.В., Назарова Н.Ю., Кинтя П.К., Бобейко В.А. Дискретные флуктуации проводимости бислойных липидных мембран, вызванные стероидным гликозидом агавозидом Е // Докл. АН УССР. 1981, № 1. С. 79-81.

29. Корепанова Е.А., Попов A.M., Анисимов М.М., Сидоров Е.П., Мольнар А.А., Антонов В.Ф. Действие тритерпеновых гликозидов на ионную проницаемость холестеринсодержащих бислойных липидных мембран // Докл АН СССР. 1980. Т. 252, № 5. С. 12611263.

30. Антонов В.Ф. Липиды и ионная проницаемость мембран. М.: наука. 1982. 150с.

31. Li Х.Х., Davis В., Haridas V., Jordan U. Gutterman J.U., Colombini M. Proapoptotic Triterpene Electrophiles (Avicins) Form Channels in Membranes: Cholesterol Dependence // Biophys. J. 2005.V. 88, N 4. P. 2577-2584.

32. Kinjo J., Udayama M.Study of structure—hepatoprotective relationshipsof oleanene-type triterpenoidal glucuronides obtained from several fabaceous plants on rat primary hepatocyte cultures // Biol. Pharm. Bull. 1999. V. 22, N 2. P. 203-206.

33. Liu W. К., Ho J. C. Apoptotic activity of betulinic acid derivatives on murine melanoma В16 cell line // Eur. J. Pharmacol. 2004. V. 498, N (1-3). P. 71-78.

34. Abdel-Gawad, M. M., El-Amin S. M. Molluscicidal saponins from Anagallis arvensis against schistosome intermediate hosts // Jpn. J. Infect. Dis. 2000. V. 53, N 1. P. 17-19.

35. Giangiacomo К. M., Kamassah A. Mechanism of maxi-K channel activation by dehydrosoyasaponin-I // J. Gen. Physiol. 1998. V. 112, N 4. P. 485-501.

36. Sun H. X., F. Qin F. Relationship between hemolytic and adjuvant activity and structure of protopanaxadiol-type saponins from the roots of Panax notoginseng // Vaccine. 2005. V. 23, N 48-49. P. 5533-5542.

37. Wan Y. P., Li X. Y. Effect of astragaloside IV on T, В lymphocyte proliferation and peritoneal macrophage function in mice // Acta Pharmacol. Sin. 2002. V. 23, N 3. P. 263-266.

38. Lee Т.К., JohnkeR.M., Allison R.R, O'Brien K.F., Dobbs L.J. Radioprotective potential of ginseng // Mutagenesis. 2005. V. 20, N 4. P. 237-243.

39. ConnollyJ.D., Hill R.A. Triterpenoids // Nat. Prod. Rep. 2005. V. 22. N 6. P. 230-248.

40. ConnollyJ.D., Hill R.A. Triterpenoids // Nat. Prod. Rep. 2003. V. 20. N 6. P. 640-659.

41. ConnollyJ.D., Hill R.A. Triterpenoids // Nat. Prod. Rep. 2002. V. 19. N 4. P. 494-513.

42. Andersson L., Bohlin L., Iorizzi M., Riccio R., Minale L., Moreno-Lopez W. Biological activity of saponins and saponin-like compounds from starfish and brittle-stars // Toxicon. 1989. V. 27, N2. P. 179-188.

43. Tschesche R., Wulff G. Konstitution und Eigenschaften der Saponine // Planta Med. 1964. V. 12. P.272-292.

44. Химическая энциклопедия / гл. ред. Зефиров Н.С. М.: Большая научная энциклопедия, 1995. Т. 4. С. 576-579.

45. Oaknfull D. Aggregetion of saponins and bile acids in aqueous solution //Aust. J. Chem. 1986. V. 39. P. 1671-1683

46. Gogelein H., Huby A Interaction of saponin and digitonine with black lipid membranes and lipid monolayers // Biochim. Biophys. Acta. 1984. V. 773, N1. P. 32-38.

47. Rao AV, Gurfmkel DM. The bioactivity of saponins: triterpenoid and steroidal glycosides //Drug. Metabol. Drug. Interact. 2000. V. 17, N 14. P. 211-235.

48. Verbist J.F. Pharmacological effects of compounds from echinoderms // In: Echinoderm studies / Eds: M. Jangoux, J.M. Lawrence. Rotterdam; Brookfield: A.A. Balkema, 1993.V. 4. P. 111-186.

49. Yogeeswari P., Sriram D. Betulinic acid and its derivatives: a review on their biological properties // Curr. Med. Chem. 2005. V. 12. P. 657666.

50. Gruiz K. Fungitoxic activity of saponins: practical use and fundamental principles //Adv. Exp. Med. Biol. 1996. V. 404. P. 527-534.

51. Atopkina L.N., Malinovskaya G.V., Elyakov G.B., Uvarova N.I., Woerdenbag H.J., Koulman A., Pras N., Potier P. Cytotoxicity of natural ginseng glycosides and semisynthetic analogues // Planta Medica. 1999. V. 65, N 1. P. 30-34

52. Пасешниченко В.А. Биосинтез и биологическая активность растительных терпеноидов и стероидов // Итоги науки и техники. Серия Биологическая химия. М.: ВИНИТИ. Т. 25. 196 с.

53. Толстиков Т.Г., Сорокина И.В., Толстиков Г.А., Толстиков А.Г., Флехтер О.Б. Биологическая активность и фармакологические перспективы лупановых тритерпеноидов: 1. Природные производные лупана // Биоорг. химия. 2006. Т. 32, № 1. С. 42-55.

54. Толстиков Т.Г., Сорокина И.В., Толстиков Г.А., Толстиков А.Г., Флехтер О.Б. Биологическая активность и фармакологические перспективы лупановых тритерпеноидов.2. Полу синтетические производные лапана // Биоорг. химия. 2006. Т. 32, № 3. С. 291-307.

55. Стехова С.И., Анисимов М.М., Атопкина JI.H., Самошина Н.Ф., Похило Н.Д., Уварова Н.И. Связь между химическим строением и антистафилококковой активностью полиолов даммаранового ряда и их глюкозидов // Раст. ресурсы. 1998. Т. 34, вып. 1. С. 51-56.

56. Попов A.M. Сравнительное изучение цитотоксического и гемолитического действия тритерпеноидов женьшеня и голотурий // Изв. РАН. Сер. биол. 2002. N 2. С. 155-164.

57. Agafonova I.G., Aminin D.L., Avilov S.A., Stonik V.A. Influence of cucumariosides upon intracellular Ca2+.i and lysosomal activity of macrophages // J. Agric. Food Chemistry. 2003. V. 51, N 24. P. 69826986.

58. Aiken C., Chen C.H. Betulinic acid derivatives as HIV-1 antivirals // Trends MoLMed. 2005. V. 11, N 1. P. 31-36.

59. Banno N, Akihisa T, Yasukawa K, Tokuda H, Tabata K, Nakamura Y, Nishimura R, Kimura Y, Suzuki T. Anti-inflammatory activities of thetriterpene acids from the resin of Boswellia carteri 11J Ethnopharmacol. 2006. V.107,N2.P. 249-253.

60. Ovesna Z, Vachalkova A, Horvathova K, Tothova D. Pentacyclic triterpenoic acids: new chemoprotective compounds. Minireview // Neoplasma. 2004. V. 51. P. 327-333.

61. Анисимов M.M, Чирва В.Я. О биологической роли тритерпеновых гликозидов // Успехи современной биологии. 1980. Т. 90.Вып. 3(6). С. 351-364.

62. Кожемяко В.Б, Ковальчук C.H, Рассказов В.А, Аминин Д.Л. Двугибридная дрожжевая тест система для изучения эстрогенной активности химических соединений // Докл. Биохим. Биофиз. 2005. Т. 401, №3-4. С. 111-114.

63. Tschesche R, Wulff G. Chemic and biologic der saponine // Fortschr. Chem. Organ. Naturstoffe. 1973. V. 30. P. 461—606.

64. Ekabo O. A, Farnsworth N. R, Henderson Т. О, Mao G, Mukherjee R. Antifungal and molluscicidal saponins from Serjania salzmanniana // J. Nat. Prod. V. 59, N 4. P. 431-435.

65. Анисимов M.M, Аминин Д.Л, Попов A.M., Лихацкая Г.Н, Калиновская Н.И, Еляков Г.Б. Об устойчивости клеток голотурии Stichopus japonicus S. к действию эндотоксина стихопозида А // Докл. АН СССР. 1983. Т. 270, № 4. С. 861-863.

66. Aminin D.L, Anisimov M.M. Biological function of holotoxins in the body of holothurian Stichopus japonicus // In: Recent advances in toxinology research / Eds: P. Gopalakrishnakone, C.K. Tan. Singapore, 1992. V. 2. P. 562-576.

67. Weiss H. P., Stitz L., Becht H. Immunogenic properties of ISCOM prepared with influenza virus nucleoprotein // Arch. Virol. 1990. V. 114, N 1-2. P. 109-120.

68. Mowat A. M., Maloy K. J., Donachie A. M. Immune-stimulating complexes as adjuvants for inducing local and systemic immunity after oral immunization with protein antigens // Immunology. 1993. V. 80, N 4. P. 527-534.

69. Morein B. Bengtsson K.L. Immunomodulation by iscoms, immune stimulating complexes // Methods. 1999. V. 19, N 1. P. 94-102.

70. Lenarczyk A., Le T.T., Drane D., Malliaros J., Pearse M., Hamilton R., Cox J., Luft Т., Gardner J., Suhrbier A. ISCOM based vaccines for cancer immunotherapy // Vaccine. 2004. V. 22, N 8. P. 963-974.

71. Copland M. J., Rades Т., et al. Hydration of lipid films with an aqueous solution of Quil A: a simple method for the preparation of immune-stimulating complexes // Int. J. Pharm. 2000. V. 196, N 2. p. 135-139.

72. Sanders M. Т., Brown L. E. et al. ISCOM-based vaccines: the second decade//Immunol. Cell Biol. 2005. V. 83, N2. P. 119-128.

73. Demana P. H.,. Davies N. M et al. A comparison of pseudo-ternary diagrams of aqueous mixtures of Quil A, cholesterol and phospholipid prepared by lipid-film hydration and dialysis // J. Pharm. Pharmacol. 2004. V. 56, N5. P. 573-580.

74. Pearse M. J., Drane D. ISCOMATRIX adjuvant for antigen delivery // Adv. Drug Deliv. Rev. 2005. V. 57, N 3. P. 465-474.

75. Aminin D. L., Agafonova I. G., Berdyshev E. V., Isachenko E. G., Avilov S. A., Stonik V. A. Immunomodulatory Properties of

76. Cucumariosides from the Edible Far-Eastern Holothurian Cucumaria japonica // J. Med. Food 2001. V. 4, N 3. P. 127-135.

77. Ben-Hur E, Fulder S. Effect of Panax ginseng saponins and Eleutherococcus senticosus on survival of cultured mammalian cells after ionizing radiation // Am. J. Chin. Med. 1981. V. 9, N 1. P. 48-56.

78. Lee H.J., Kim S.R., Kim J.C., Kang C.M., Lee Y.S., Jo S.K., Kim Т.Н., Jang J.S., Nah S.Y., Kim S.H. In Vivo radioprotective effect of Panax ginseng C.A. Meyer and identification of active ginsenosides // Phytother. Res. 2006. V. 20, N 5. P. 392-395.

79. Aminin D.L., Agafonova I.G., Gnedoi S.N., Strigina L.I., Anisimov M.M. The Effect of pH on biological activity of plant cytotoxin cauloside С // Сотр. Biochemistry and Physiology. 1999. V. 122A, N 1. P. 45-51.

80. Amico V., Barresi V., Condorelli D., Spatafora C., Tringali C. Antiproliferative terpenoids from almond hulls (Prunus dulcis): identification and structure-activity relationships // J. Agric. Food Chem. 2006. V. 54. P. 810-814.

81. Corea G., Iorizzi M., Lanzotti V., Cammareri M.,Conicella C., Laezza C., Bifulco M. Astersedifolioside A-C, three new oleane-type saponins with antiproliferative activity // Bioorg. Med. Chem. 2002. V. 12, N 18. P. 4909-4915.

82. Popovich D. G., Kitts D.D. Structure-function relationship exists for ginsenosides in reducing cell proliferation and inducing apoptosis in the human leukemia (THP-1) cell line // Arch. Biochem. Biophys. 2002. V. 406, N 1. P. 1-8.

83. Стригина Л.И., Ходаковская M.B., Булгаков В.П. Влияние некоторых тритерпеновых и стероидных соединений на рост каллусной культуры Panax ginseng С. А. Меу. // Раст. ресурсы. 1993. Т. 29, Вып. 4. С. 96-99

84. Стригина Л.И., Агафонова И.Г., Аминин Д.Л. Влияниеполигонатозидов CI, С2, ВЗ и (З-Б-глюкозида пенногенина на рост и развитие проростков Cucumis sativus L. // Раст. ресурсы. 1996. Т. 32, Вып. 4. С. 68-72.

85. Анисимов М.М., Логачев В.В., Сильченко А.С., Авилов С.А. Влияние тритерпеновых гликозидов голотурии Cucumaria japonica на рост корня проростков Cucumis sativus L. // Изв. РАН. Сер. биол. 2004, N4. С. 505-512

86. Lee Y., Jin Y., Lim W., Ji S., Choi S., Jang S., Lee S. A ginsenoside-Rhl, a component of ginseng saponin, activates estrogen receptor in human breast carcinoma MCF-7 cells // J. Steroid. Biochem. Mol. Biol. 2003. V. 84, N4. P. 463-468.

87. Melzig M.F., Bader G., Loose R. Investigations of the mechanism of membrane activity of selected triterpenoid saponins // Planta Med. 2001. V. 67, N 1. P.43-48.

88. Ким Ю.А., Акоев B.P., Елемесов P.E. Гиперосмотический гемолиз и антигемолитическая активность сапониновой фракции и тритерпеновых гликозидов женьшеня Panax ginseng С. A. Meyer // Биол. мембраны. 2000. Т. 14, № 2. С. 237-251.

89. Abe Н., Sakaguchi М., Anno М., Arichi S. Erythrocyte membrane stabilization by plant saponins and sapogenins // Naunyn.

90. Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 1981.V. 316, N 3. P. 262-265.

91. Szydlowska H., Zaporowska E., Kuszlik-Jochym K., Korohoda W., Branny J. Membranolytic activity of detergents as studied with cell viability tests // Folia Histochem. Cytochem. (Krakow). 1978. V. 16, N 2. P. 69-78.

92. Bachran C, Sutherland M, Heisler I, Hebestreit P, Melzig MF, Fuchs H. The saponin-mediated enhanced uptake of targeted saporin-based drugs is strongly dependent on the saponin structure // Exp. Biol. Med. 2006. V. 231, N 4. P.412-420.

93. Heisler I, Sutherland M, Bachran C, Hebestreit P, Schnitger A, Melzig MF, Fuchs H. Combined application of saponin and chimeric toxins drastically enhances the targeted cytotoxicity on tumor cells // J. Control Release. 2005. V. 106, N 1-2. P.123-137.

94. Hebestreit P., Weng A., Bachran C., Fuchs H., Melzig M.F. Enhancement of cytotoxicity of lectins by Saponinum album // Toxicon. 2006. V. 47, N 3. P. 330-335.

95. Melzig M.F., Hebestreit P., Gaidi G., Lacaille-Dubois M.A. Structure-activity-relationship of saponins to enhance toxic effects of agrostin // Planta Med. 2005 V. 71, N 11. P.1088-1090.

96. Chan-Bacab M. J., Pena-Rodriguez L. M. Plant natural products withleishmanicidal activity //Nat. Prod. Rep. 2001. V. 18, N 6. P. 674-688.

97. Попов A.M., Лоенко Ю.Н., Анисимов M.M. Изменение чувствительности опухолевых клеток к действию тритерпеновых гликозидов липосомами // Антибиотики. 1981. Т. 26, №3. С.127-129.

98. Попов A.M. Изучение мембранотропной активности некоторых тритерпеновых гликозидов: автореф. дис.канд. биол. наук -Ленинград, 1984.

99. Oda К., Matsuda Н., Murakami Т., Katayama S., Ohgitani Т., Yoshikawa М, Adjuvant and haemolytic activities of 47 saponins derived from medicinal and food plants // Biol. Chem. 2000. Y. 381, N l.P. 67-74.

100. Thron C.D. Hemolysis by holothurin A, digitonin and quillaia saponin estimates of the required cellularlysin uptaes and free lysine consentrations // J. Pharmacol. 1964. V. 6. P. 182-196.

101. Schlosser E. Interaction of daponins with cholesterol, lecithin and albumin // Canad. J. Physiol. Pharm. 1069. V. 47, N 5. P.487-490.

102. Nakamura Т., Inoue K., Nojima S. Phosphatidylcholine liposomes containing the saponin aglicone diosgenin or tigogenin on place of cholesterol. Their properties and sensitivities to various saponins // Chem. Pharm. Bull. 1981. V. 29, N 6. P. 1681-1688

103. Hase J., Kobashi K., Mitsui K, Namba Т., Yoshisaki M., Tomimory T. The structure hemolysis relationship of oleanolic acid-derivatives and inhibition of the saponin-induced hemolysis with sapogenin // J Pharmacol. 1981. V. 4, N 11. P. 833-841.

104. Аминин Д.Л., Осипов А.Н., Корепанова Е.А., Анисимов М.М. Влияние голотоксина А. на микровязкость модельных и биологических мембран // Биофизика. 1989. Т. 34, Вып. 2. С. 318319

105. Mudd J.B., McManus Т.Т. Effect of steryl glycoside on the phase transition of dipalmitoyl lecithin // Plant Physiol. 1980. V. 65, N1. P. 78-80

106. Абдрасилов B.C., Елемисов P.E., Акоев B.P., Ким Ю.А., Пак Х.Д. Исследование влияния гинзенозидов на фазовые переходы мембран из дипальмитоилфосфатидилхолина // Антибиотики и химиотерапия. 1996. Т. 41, №2.С. 22-29.

107. Иоффе Д.В. Стерины как комплексообразователи // Успехи химии. 1986. Т. 60. Вып. 2. С. 333-349.

108. Takagi S., Otsuka Н., Akiyaraa Т., Sankawa U. Digitonin-cholesterol complex formation: effects of varying the length of the side-chain // Chem. Pharm. Bull. 1982. V. 30, N 10. P. 3485-3492.

109. Mudd J.B., McManus T.T. Effect of steryl glycoside on the phase transition of dipalmitoyl lecithin // Plant Physiol. 1980. V. 65, N 1. P. 78-80.

110. Gorshkova I. A., Gorshkov B. A., Stonik V. A. Inhibition of rat brain Na+-K+-ATPase by triterpene glycosides from holothurians // Toxicon. 1989. V. 27, N8. P. 927-936.

111. Прокофьева Н.Г., Лихацкая Г.Н., Волкова O.B., Анисимов М.М., Киселева М.И., Ильин С.Г., Будина Т.А., Похило Н.Д. Действие бетулафолиентетраола на эритроцитарные и модельные мембраны // Биол. мембраны. 1992. Т. 9, N 9. С. 954-960.

112. Singer S. J., Nicolson G. L. The fluid mosaic model of the structure of cell membranes // Science. 1972. V. 175. P. 720-731.

113. Engelman D.M. Membranes are more mosaic than fluid // Nature. V. 438. P. 578-580.

114. Кругляков П.М., Ровин Ю.Г. Физико-химия углеводородных пленок М.: Наука. 1978. 183 с.

115. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Динамическая структура липидного бислоя. М.: Наука, 1981. 293 с.

116. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Липидный бислой биологических мембран. М.: Наука, 1982. 224 с.

117. Ермишкин Л.Н., Зильберштейн А .Я. Ионные каналы, образуемые антибиотиками. Структура и свойства // В кн.: Итоги науки и техники. Серия Биофизика мембран. М.: ВИНИТИ. 1982. Т. 2. С. 82-160.

118. Сухарев С.И., Черномордик Л.В. Обратимый электрический пробой холестеринсодержащих бислойных липидных мембран, модифицированных голотурином А // Биофизика. 1983. Т. 28, № 3. С. 423-426

119. Попов A.M., Калиновская Н.И., Кузнецова Т.А., Агафонова И.Г., Анисимов М.М. Роль стеринов в мембранной активности тритерпеновых гликозидов // Антибиотики. 1983. № 9. С. 656-659

120. Аминин Д.Л., Анисимов М.М. Влияние голотоксина А{ на транспорт Са2+ и мейотическое созревание ооцитов голотурии Stichopus japonicus // Журн. эволюц. биохимии и физиологии. 1990. Т. 26, N 1. С. 9-13.

121. Armah, С. N, Mackie A. R, Roy C, Price K, Osbourn A. E, Bowyer P, Ladha S. The membrane-permeabilizing effect of avenacin A-l involves the reorganization of bilayer cholesterol // Biophys. J. 1999. V. 76. P. 281-290.

122. Самошина Н.Ф, Денисенко M.B, Денисенко В.А, Уварова Н.И. Синтез гликозидов тритерпеновых кислот лупанового ряда // Химия природ, соедин. 2003. N 6. С. 475-481.

123. Malkin Т, Shyrbagy M.R. An X-Ray and thermal examination of the glycerides. Part II. The a-monoglycerides // J. Chem. Soc. 1936. V.20. P.1628-1637

124. Mueller P, Rudin D.O, Tien H.T,Wescott W.C.Reconstitution of cell membrane structure in vitro andits transformation into an exitable system //Nature. 1962.V. 194. P. 979-980

125. Адамсон А. Физическая химия поверхностей. M.: Мир, 1979. 568 с.

126. Bangham A.D, Hill M.W, Miller N.G.A. Preparation and use of liposomes as models of biological membranes // In: Methods in

127. Membrane Biology (E.D. Korn. Editor. Plenum New York) 1974. V. 11.P. 1-68.

128. Blume A. Applications of calorimetry to lipid model membranes // In: Physical properties of biological membranes and their functional implications (ed. C. Higalgo). 1988. New York, Plenum Press. P. 71121.

129. Mabrey-Gaud S. Didderential scanning calorimetry of liposomes // In: "Liposomes: From Physical Structure to Therapeutic Application / ed. Knight, 1981. P. 105-138.

130. Katsu Т., Ninomiya C., Kuroko M., Kobayashi H., Hirota Т., Fujita Y. Action mechanism of amphipathic peptides gramicidin S and melittin on erythrocyte membrane // Biochim. Biophys. Acta. 1988. V. 939. P. 57-63.

131. Vodyanoy I., Hall J.E., Balasubramanian T.M. Alamethicin-induced current-voltage curve asymmetry in lipid bilayers // Biophys. J. 1983. V. 42, N1. P. 71-82.

132. Yu B.S., Jo I.H. Interaction of sea cucumber saponins with multilamellar liposomes // Chem. Biol. Interactions. 1984. V.52. C. 185-202.

133. Lala A.K.,Lin H.K., Bloch K.The effect of some alkyl derivatives of cholesterol on the permeability properties and microviscosities ofmodel membranes //Bioorg. Chem. 1978.V. 7. P. 437-441.

134. Nes W.D., Heftmann S J. The comparision of the triterpenoid steroid as membrane components // J. Nat. Prod. 1981. V. 44, N 4. P. 377-383.

135. Zhang J.D., Xu Z., Cao Y.B., Chen H.S., Yan L., An M.M., Gao Р.П., Wang Y., Jia X.M., Jiang Y.Y. Antifungal activities and action mechanisms of compounds from Tribulus terrestris L. // J Ethnopharmacol. 2006. V. 103, N 1. P. 76-84

136. Geuns J.M.C. Steroid hormones and plant growth and development // Phytochemistry. 1978. V. 17, Is. 1. P. 1-14

137. Ward J.M., Schroedes J.I. Roles of ion channels in initiation of signal transduction in higher plants // In: Signal Transduction in Plants (ed. AducciP.). 1997. P. 1-22.

138. Tsien R.W., Tsien R.Y. Calcium channels, stores, and oscillations // Annu Rev Cell Biol. 1990. V. 6. P. 715-760.

139. Дедкова E.H., Сигова А.А., Зинченко В.П. О механизме активирующего действия Са -ионофоров на интактные клетки: Ионофор-резистентные клетки//Биол. Мембраны. 1999. Т. 16, №3. С. 292-300.

140. Coldren С. D., Hashim P. Gene expression changes in the human fibroblast induced by Centella asiatica triterpenoids // Planta Med. 2003. V. 69, N8. P. 725-732.