Механизмы влияния гиперосмотических растворов препарата "Рапан" на процессы пролиферации и дифференцирования кератиноцитов in vitro" тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, кандидат наук Зайцева, Наталья Сергеевна

• Зайцева, Наталья Сергеевна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Зайцева, Наталья Сергеевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Применение гиперосмотических растворов для лечения хронических воспалительных заболеваний кожи

1.2. Клеточные модели и модели живого эквивалента кожи для изучения кератиноцитов in vitro

1.3. Клеточный цикл

1.3.1. Сигналинг клеточного цикла

1.3.2. Влияние гиперосмотического воздействия на клеточный

цикл

1.4. Апоптотическая гибель клеток при гиперосмотическом воздействии

1.5. Процесс дифференцирования кератиноцитов

1.5.1. Маркеры дифференцирования кератиноцитов

1.5.2. Процесс аутофагии в кератиноцитах

1.6. Цитоскелет клетки и его роль в реализации ответа на гиперосмотическое воздействие

1.7. Адаптация клеток к гиперосмотическому воздействию

1.8. Активные формы кислорода в клетке в физиологическом состоянии и при стрессе

1.9. Внутриклеточная сигнальная система Nrf2/Keap 1 /ARE. Участие в стресс-опосредованном ответе и дифференцировании

клеток

1.10. Роль транскрипционного фактора NF-кВ в клетке

1.11. Роль цитокинов в формировании эпидермиса 48 Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ 50 Глава 3. СОБСТВЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Исследование жизнеспособности клеток 5

3.2. Исследование апоптотической и некротической гибели клеток

после гиперосмотического воздействия

3.3. Исследование пролиферативной активности и клеточного

цикла кератиноцитов в ответ на гиперосмотическое воздействие

3.4. Исследование процессов дифференцирования кератиноцитов

3.5. Исследование особенностей продукции активных форм

кислорода кератиноцитами при гиперосмотическом воздействии

3.6. Исследование активации сигнальной системы 1\ГН2/Кеар 1 /АЛЕ

в кератиноцитах при гиперосмотическом воздействии

3.7. Характеристика актинового и тубулинового цитоскелета кератиноцитов при гиперосмотическом воздействии

3.8. Исследование продукции цитокинов ИЛ-1 (3, ИЛ-6, ФНО-а, ИЛ-10 и активности транскрипционного фактора ИР-кВ в ответ

на гиперосмотическое воздействие

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы влияния гиперосмотических растворов препарата "Рапан" на процессы пролиферации и дифференцирования кератиноцитов in vitro"»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы

Кожа образует внешний покров организма, обеспечивая защиту от негативного влияния окружающей среды: дегидратации, механического повреждения, попадания инфекционных агентов, Кроме выполнения защитных функций кожа депонирует кровь, обеспечивает терморегуляцию и газообмен, - т.е. является одним из важнейших факторов поддержания гомеостаза. Кожа состоит из эпидермиса, дермы и гиподермы, образующих единую морфофункциональную систему. Фиб-робласты дермы и антигенпрезентирующие клетки эпидермиса - клетки Лангер-ганса - участвуют в процессе пролиферации и дифференцирования кератиноцитов, посредством цитокинов, в первую очередь — факторов роста, а кератиноциты, в свою очередь, способны изменять пролиферативную активность клеток соединительной ткани дермы [Maas-Szabowski N. et al., 1999; Lim C.P. et al., 2009]. В результате обеспечивается сбалансированность структуры и функций эпидермиса и дермы при физиологической и репаративной регенерации.

В норме сбалансированные по времени и масштабам процессы пролиферации и последующего дифференцирования кератиноцитов направлены от базально-го к роговому слою, что обеспечивает формирование эпидермального барьера, главная функция которого состоит в защите внутренней среды организма от нежелательных влияний факторов внешней среды.

Ряд распространенных хронических заболеваний кожи, таких как псориаз и атопический дерматит, проявляется формированием стойких очагов патологических высыпаний (локальных воспалительных проявлений). Это приводит к нарушению эпидермального барьера, что связано с чрезмерной активацией пролиферации кератиноцитов, наряду с угнетением их дифференцирования в результате хронического воспаления в дерме [Tschachler Е., 2007; Bieber Т., Novak N., 2009].

Лечение хронических заболеваний кожи высокоминерализованными природными водами (бальнеотерапия) приводит к уменьшению проявление воспаления, улучшению гидратации рогового слоя и снижению шероховатости эпидермиса [Harari М, et al., 2000; Proksch Е., et al., 2005].

В клинике ФГБУ «НЦКЭМ» СО РАМН показана высокая эффективность высокоминерализованных растворов при лечении больных атопическим дерматитом. Применение препарата «Рапан», полученного из рапы озера Малое Островное Краснозерского района Новосибирской области, приводит к снижению интенсивности острых проявлений заболевания и его пролиферативной фазы - акантозов, наряду с активацией дифференцировочных процессов, что приводит к нормализации барьерной функции эпидермиса [Лузгина Н.Г. и др., 2006; Новиков А.И. и др., 2006; Лузгина Н.Г. и др., 2009]. Однако эти исследования носят описательный характер и не затрагивают механизмов, детерминирующих получаемые эффекты.

Есть основания полагать, что терапевтические эффекты высокоминерализованных растворов реализуются в результате развития гиперосмотического стресса кератиноцитов. Однако этому явлению посвящены лишь отдельные исследования. Известно, что гиперосмотическое воздействие вызывает резкое повышение концентрации внутриклеточных ионов Са2+, что сопряжено с торможением пролиферации кератиноцитов [Dascalu A. et al., 2000]. Кроме того, гиперосмотическое воздействие может вызывать дегидратацию клетки, что моделирует процесс обезвоживания эпидермиса на воздухе, и может являться одним из механизмов, запускающих процессы дифференцирования кератиноцитов. В работах in vitro показано, что при обезвоживании клеток под воздействием сорбитола в различных концентрациях усиливается экспрессия ряда кератинов (К1, К10) и других маркеров дифференцирования кератиноцитов, таких как трансглутаминаза-1, инволюкрин и фи-лаггрин [Mammone T. et al., 2007], что свидетельствует о стимулирующем влиянии гиперосмотического воздействия на процессы дифференцирования кератиноцитов. Кроме того, показано, что дифференцирование кератиноцитов может быть связано с активацией процессов генерации активных форм кислорода (АФК) [Chamulitrat W. et al., 2004]. Экзогенное воздействие стрессора может нарушать физиологический окислительно-восстановительный баланс клеток и запускать активацию ре-докс-чувствительных сигнальных систем, в частности фактора транскрипции Nrf2, обладающего не только гомеостатической, но и дифференцировочной функцией. Так, установлено, что Nrf2, действуя в синергизме с фактором Notchl [Wakabayashi N. et al., 2010a; Wakabayashi N. et al., 2010b], индуцирует дифференцирование в клетках [Lin H.Y. et al., 2011]. Однако прямая связь редокс-чувствительных сиг-

нальных систем в инициации и реализации гиперосмотического стресса не описана в литературе. Другой потенциальной мишенью гиперосмолярных воздействий на клетку являются белки цитоскелета, которые должны подвергаться структурной реорганизации во время гипертонического «сжатия» и приводить к изменению клеточного сигналинга с активацией адаптивного ответа клетки. К примеру, в клетках эндотелия изменение структуры цитоскелета, вызванное механическим давлением на клетки, ассоциирована с продукцией провоспалительных цитокинов и связано с развитием воспалительного ответа клетками [Zampetaki A. et al., 2005].

Реализация позитивных эффектов гиперосмотических растворов может осуществляться различными механизмами, обеспечивающими адаптацию клетки к обезвоживанию и гиперосмотическому стрессированию. Поскольку в естественных условиях утрата воды клетками может колебаться в различных пределах, представляет интерес выяснение механизмов клеточного ответа как в процессах гомеоста-зирования в норме, так и при патологических состояниях. Понимание этих механизмов, наряду с получением новых фундаментальных данных, в дальнейшем позволит разрабатывать методы направленной модуляции структурно-функционального состояния эпидермального барьера человека.

Цель и задачи исследования

Целью работы было исследование механизмов гиперосмотического воздействия препарата «Рапан» на кератиноциты и их роль в модуляции процессов пролиферации и дифференцирования в условиях in vitro.

В соответствии с этим были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать влияние гиперосмотического воздействия растворов препарата «Рапан» различных концентраций на жизнеспособность кератиноцитов линии НаСаТ и их пролиферативную активность.

2. Исследовать индукцию дифференцирования кератиноцитов, различных вариантов клеточной гибели и процессов аутофагии в ответ на гиперосмотическое воздействие.

3. Исследовать продукцию активных форм кислорода и изменение трансмембранного митохондриального потенциала в кератиноцитах при гиперосмотическом воздействии.

4. Исследовать активацию редокс-чувствительной сигнальной системы Nrf2/Keapl/ARE в кератиноцитах при гиперосмотическом воздействии.

5. Исследовать влияние гиперосмотического воздействия на реорганизацию цитоскелета кератиноцитов.

6. Исследовать in vitro продукцию цитокинов ИЛ-ip, ИЛ-6, ФНО-а, ИЛ-10 и активность транскрипционного фактора NF-кВ в кератиноцитах в ответ на гиперосмотическое воздействие.

Научная новизна работы

Впервые установлено, что элиминация кератиноцитов в ответ на гиперосмотическое воздействие растворами препарата «Рапан» осуществляется процессом аутофагии, но не апоптозом.

Получены данные о торможении клеточного цикла кератиноцитов в стадии G1/G0 после гиперосмотического воздействия растворами препарата «Рапан», в отличие от классического торможения клеточного цикла в стадиях G2/M в условиях гиперосмотического воздействия.

Установлено, что воздействие гиперосмотических растворов препарата «Рапан» на кератиноциты приводит к быстрому усилению продукции АФК и падению трансмембранного митохондриального потенциала, что впервые указывает на прямую связь гиперосмотического и окислительного стресса в кератиноцитах и приводит к активации редокс-чувствительной системы Nrf2/Keapl/ARE в ответ на гиперосмотическое воздействие.

Впервые показано, что гиперосмотическое воздействие сопряжено с ингиби-рованием транскрипционного фактора NF-кВ. Кроме того, воздействие гиперосмотическими растворами влияет на продукцию ИЛ-6 в кератиноцитах, в зависимости от сроков воздействия на клетки, не оказывая при этом влияния на продукцию ИЛ-1Р, ФНО-а, ИЛ-10.

Научно-практическая значимость работы

Полученные результаты могут быть полезны в практике научных исследований, касающихся понимания механизмов влияния гиперосмотических растворов на основные функции жизненного цикла клеток, в частности кератиноцитов: пролиферации (регенерации), дифференцирования и видов клеточной гибели некрозом, апоптозом и, возможно, через механизмы аутофагии.

Данные, полученные в проведенных экспериментах, могут быть полезны при преподавании патологической физиологии, по разделам физиология кожи, процессы пролиферации и воспаления, патофизиологии стресса (окислительный стресс, как составляющий элемент ответной реакции организма на стрессирующее воздействие), а также для преподавания в области клеточной биологии в разделе: влияние осмотических воздействий на процессы пролиферации и дифференцирования.

Результаты, полученные в диссертационном исследовании, уточняют механизмы позитивных эффектов гиперосмотических растворов, в частности препарата «Рапан», на процессы воспаления в коже, что в значительной степени позволяет отойти от эмпирических подходов в лечении целого ряда заболеваний кожи, характеризующихся хроническим воспалением с выраженным отечным и гиперрегенераторными компонентами в период их обострений.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Гиперосмотические растворы, в зависимости от их концентраций, продолжительности воздействия, а также физиологического состояния кератино-цитов на момент воздействия (стадия клеточного цикла), способны модулировать основные биологические процессы: пролиферацию, дифференцирование и клеточную гибель, - через механизмы гомеостазирования, включающие процессы окислительного стресса и сигнальные функции АФК, а также активацию редокс-чувствительной сигнальной системы №£2/Кеар1/А11Е.

2. Гиперосмотические растворы способны модулировать состояние ци-тоскелета кератиноцитов (актина и тубулина) через активацию малой ГТФазы Лас1, что сопряжено с изменением активности транскрипционного фактора ОТ-кВ, не изменяя продукции цитокинов ИЛ-1р и ФНО-а, ИЛ-10, однако индуцируя изменение продукции ИЛ-6 в зависимости от времени экспозиции гиперосмотического воздействия.

Апробация работы

Результаты работы представлены и обсуждены на Пятой Всероссийской научно-практической конференции «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов» 12-14 апреля 2011, г.Новосибирск; на Шестой Всероссийской научно-практической конференции «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов» 16-17 апреля 2013, г. Новосибирск.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 4 печатные работы, в том числе 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки России для публикации материалов диссертационных исследований.

Структура и объем работы

Диссертация состоит из введения, 3 глав, включающих обзор литературы, описание материала и методов исследования, изложения собственных результатов и их обсуждения, заключения; выводов и списка цитируемой литературы, содержащего 272 источника (15 отечественных и 257 зарубежных). Материалы диссертации изложены на 122 страницах машинописного текста и иллюстрированы 28 рисунками.

Работа выполнена при поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации (Соглашение № 8788), с использованием оборудования ЦКП «Современные оптические системы».

Благодарности.

Автор благодарит своего научного руководителя д.м.н., академика РАН Шкурупия В.А. за помощь в написании работы и ценные советы. Кроме того, автор выражает свою глубочайшую благодарность всему коллективу лаборатории молекулярных механизмов физиологии и патологии клетки, в особенности Чечушкову A.B. и Кожину П.М. за помощь на всех этапах работы и моральную поддержку.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Применение гиперосмотических растворов для лечения хронических

воспалительных заболеваний кожи

Лечение хронических воспалительных заболеваний кожи с использованием стероидов, антигистаминных препаратов, иммуносупрессантов хорошо исследовано. Однако такая терапия имеет множество побочных эффектов и ограниченную терапевтическую эффективность при продолжительном лечении [Fisher D.A., 1995; Abramovits W., Perlmutter A., 2006]. При этом эффективность бальнеотерапии с применением высокоминерализированных вод при ряде воспалительных заболеваний кожи продемонстрирована во многих работах [Boer J. et al., 1982; Denda M., et al., 1999; Denda M. et al., 2003; Goldman M.P. et al., 2007].

Результаты бальнеотерапии с использованием гиперосмотических растворов солей Мертвого моря демонстрируют высокую эффективность при лечении больных атопическим дерматитом [Harari М. et al., 2000]. В результате бальнеотерапии улучшались барьерные функции эпидермиса, увеличивалась гидратация рогового слоя, уменьшалась шероховатость эпидермиса и проявления воспаления [Proksch Е. et al., 2005]. Выраженность положительных эффектов увеличивалась при одновременном воздействии растворов различных солей [Denda М. et al., 1999; Matz Н. et al., 2003].

Разбавленный солевой концентрат из воды Мертвого моря и растворы солей (хлориды и бромиды натрия, калия, магния) обратимо ингибировали клеточную пролиферацию в культуре кератиноцитов [Shani J. et al., 1987]. Бромиды оказывали более выраженный ингибирующий эффект, чем хлориды, а соли калия были более эффективными, чем соли натрия и магния, но эффект бромида и хлорида магния был более продолжительным [Levi-Schaffer F. et al., 1996].

При воздействии водных высокоминерализованных растворов наблюдали снижение количества активированных Т-лимфоцитов в эпидермисе и дерме, снижение экспрессии кератиноцитами комплексов гистосовместимости второго типа, уменьшение количества клеток Лангерганса [Gruner S. et al., 1990]. В экспериментальных моделях in vitro, моделирующих воспалительные заболевания в коже, показано снижение продукции провоспалительных цитокинов кератиноцитами в ответ на действие высокоминерализованными водами [Lee Н.Р. et al., 2012].

Гистологические изменения в коже под воздействием высокоминерализованных вод включали снижение толщины мальпигиева слоя, уменьшение гиперплазии кератиноцитов. Клеточная пролиферация сохранялась только в базальном слое, нормализовалась экспрессия кератина-16 [Hodak Е. et al., 2003]. Схожими эффектами обладало воздействие глубоководной морской воды [Bak J.P. et al., 2012].

Близкой по составу к воде Мертвого моря является высокоминерализованная рапа озера Малое Островное, Краснозерского района Новосибирской области, применяемая в виде стандартизованного продукта «Рапан» (производство СИБ-ТЕХВАС, г. Новосибирск). По ионно-солевому составу рапа этого озера - сульфат-но-хлоридная, натриево-магниевая с минерализацией 182,8 г/дмЗ и щелочной реакцией среды (рН 7,9-8,5). Согласно бальнеологическому заключению Томского НИИ курортологии, она отнесена к 8 бальнеологической группе минеральных вод, предназначенных для наружного применения.

После курса лечения препаратом «Рапан» в течение 6 недель у больных ато-пическим дерматитом наблюдали полный или значительный регресс кожных высыпаний. При гистологическом исследовании биоптатов, взятых у больных после лечения, морфологическая картина соответствовала стадии затухающего обострения или ремиссии. Участки спонгиоза были единичными или вовсе отсутствовали, явлений отека почти не наблюдали. Количество инфильтратов значительно снижалось, они присутствовали преимущественно в сосочковом слое дермы. Состав инфильтратов соответствовал продуктивной стадии воспаления. Наблюдали снижение количества лимфоцитов и увеличение количества фибробластов. Тучные клетки были единичными и без признаков дегрануляции. Очаги фиброза присутствовали чаще в сосочковом слое, ближе к базальной пластинке эпидермиса. Акантоз соответствовал слабой степени выраженности с единичными митозами в базальном слое [Лузгина Н.Г. и др., 2006; Новиков А.И. и др., 2006]

Обсуждая позитивные эффекты природных вод на организм человека, выделяют общие и местные реакции, развивающиеся в коже. Полагают, что воздействие гиперосмотических растворов оказывает влияние на экстерорецепторы кожи, что влечет за собой активацию каскада нейрорефлекторных, эндокринных, иммунных реакций, которые и формируют, в конечном счете, противовоспалительные мест-

ные и системные эффекты бальнеопроцедур [Зеленецкая B.C., Андреев C.B., 1992; Давыдова О.Б. и др., 2002; Matz H. et al., 2003].

Выделяют два основных фактора модуляции функционального статуса клеток кожи, определяющих позитивные эффекты применения высокоминерализованных растворов: фактор осмолярности и фактор качественного минерального состава воды. Так, положительные эффекты воды Мертвого моря связывают с высокой осмолярностью и повышенным содержанием солей магния [Greiner J., Diezel W., 1990; Levi-Schaffer F. et al., 1996], а позитивные эффекты йодобромных вод - с высоким содержанием ионов йода и брома, способных проникать в организм человека и оказывать гуморальные эффекты [Дацковский Я. С., 2002].

Вместе с тем, сопоставимые клинические эффекты (в виде преимущественного влияния на продуктивную фазу воспалительного процесса в коже) различных по минеральному составу высококонцентрированных природных вод предполагают и единые (сопоставимые, вероятно, неспецифические) механизмы их формирования. Единственным параметром, объединяющим высокоминерализованные воды различных природных источников по достигаемым результатам лечения, является высокая осмолярность растворов, по-видимому, играющая ключевую роль в формировании позитивных эффектов у больных с хроническими заболеваниями кожи и, в частности, больных атопическим дерматитом. Однако патогенетические механизмы развития этих эффектов требуют дальнейшего изучения. Для исследования различных клеточных процессов и механизмов их реализации удобным является использование клеточных моделей in vitro, поскольку in vivo исследования такого рода позволяют судить о них только опосредованно, что не дает корректных выводов с учетом центральных системных механизмов регуляции ответной реакции (воспаления) на нетравматическое повреждение кожи и её клеток при ряде заболеваний.

1.2 Клеточные модели и модели живого эквивалента кожи для изучения кератиноцитов in vitro

Эпидермис - самый верхний, наружный слой кожи представлен многослойным плоским ороговевающим эпителием, состоящим из кератиноцитов. Кератино-циты плотно связаны между собой десмосомами и содержат кератиновые фила-менты. В эпидермисе в более глубоком слое находятся немногочисленные мелано-

циты, внутриэпидермальные макрофаги - клетки Лангерганса, а также нейроэн-докринные клетки кожи - Клетки Меркеля [Быков В.Л., 1999; Кузнецов С.Л. и др., 2012].

Дерма - средний, соединительнотканный слой, лежащий под эпидермисом, отграничен от него базальной мембраной. Дерма представлена двумя слоями - со-сочковым и сетчатым. Сосочковый слой содержит коллагеновые и эластические волокна, между которыми расположены кровеносные сосуды, нервные окончания и клеточные элементы: фибробласты, гистиоциты, тканевые базофилы (в основном вокруг капилляров). Сетчатый слой представлен грубыми коллагеновыми волокнами, фиброцитами, а также клеточными элементами сосочкового слоя, но в меньшем количестве. Нижний слой - гиподерма, или подкожная жировая клетчатка, содержит кровеносные сосуды, нервные окончания, потовые железы и волосяные фолликулы. Она образована соединительнотканными рыхлыми волокнами, между которыми залегают дольки жировой ткани, образованной крупными адипоцитами [Быков В.Л., 1999].

Первые сообщения о культивировании клеток кожи появились еще в 40-х годах. Однако до середины 70-х годов фибробласты соединительной ткани были единственными диплоидными клетками человека, культивируемыми на протяжении многих пассажей. Возможность культивирования эпителиальных клеток, в частности кератиноцитов, появилась в 1975 году, благодаря методике Рейнвальда и Грина [Rheinwald J.G., Green Н., 1975а; Rheinwald J.G., Green Н., 1975Ь]. В дальнейшем данная методика заложила основы практического использования клеток кожи в медицинских исследованиях, в частности для моделирования отдельных слоев кожи и для создания цельных живых ее эквивалентов, что нашло применение в трансплантологии [Kirsner R.S., 1998].

Современные «живые эквиваленты кожи» представляют собой тканеинже-нерные конструкции на основе кератиноцитов, фибробластов и коллагеновой матрицы [Ehrlich Н.Р., 2004]. Такие модели используют как для изучения морфологических процессов в коже, так и для исследования патологических состояний, например при вирусном инфицировании [Andrei G. et al., 2010].

Одна из первых таких конструкций была предложена в 1983 году: кератино-циты выращивали на поверхности гелеобразного «дермального эквивалента», со-

стоявшего из смеси коллагена, плазмы, ростовой среды и фибробластов кожи [Bell Е. et al., 1983]. Преимуществом дермального эквивалента является то, что клетки в нем находятся в активном функциональном состоянии, близком к таковому в коже [Bernerd F., 2005].

В США был лицензирован и разрешен к применению в клинической практике первый коммерческий тканевой продукт, состоящий из коллагеновой матрицы и донорских аллогенных фибробластов и кератиноцитов, - Apligraf [Kirsner R.S., 1998; Trent J.F., Kirsner R.S., 1998].

Другой одобренный двуслойный живой эквивалент кожи HSE (кератиноци-ты на коллагеновом матриксе с живыми фибробластами) с успехом использовался для лечения язв «диабетической стопы» — во всех случаях в течение 12-32 дней была получена 100% эпителизация. Эффект определялся синтезом и выделением живыми клетками импланта 15 различных факторов роста/цитокинов, запускающих процесс регенерации, что было установлено в предварительном лабораторном эксперименте [Brem Н. et al., 2003].

Культивирование сложных трехмерных клеточных композиций позволяет изучать процессы репарации и не заменимо в случае трансплантологии. Однако выращивание живых эквивалентов кожи имеет свои особенности и сопряжено с множеством сложностей. Для моделирования эпидермального слоя кератиноциты выделяют из фрагментов донорской кожи, полученных в ходе хирургических кос-метологических операций. Кератиноциты получают ферментативной обработкой кожи диспазой по методу Рейнвальда и Грина [Rheinwald J.G., Green Н., 1975а]. В целом, выделение и культивирование кератиноцитов весьма затратный по времени процесс, кроме того, возникает проблема стандартизации получаемых результатов из-за использования клеток различных доноров (кожа пациентов разного пола, возраста и с различных участков тела). Поэтому для моделирования эпидермального пласта с целью изучения морфофункционального состояния клеток, а также проницаемости эпидермального барьера удобным материалом служат перевиваемые клеточные линии кератиноцитов [Garach-Jehoshua О. et al., 1998; Schoop V.M. et al., 1999].

В качестве моделей кератиноцитов человека in vitro часто используют клеточную линию НаСаТ, полученную из спонтанно трансформированных эпители-

альных клеток кожи взрослого человека [Воикшар Р. Й а1., 1988]. Клетки линии НаСаТ используют для изучения процессов, происходящих в эпидермисе как в физиологическом, так и в патологическом состоянии. Кератиноциты НаСаТ сохраняют дифференцировочный потенциал в культуре и в определенных условиях экс-прессируют классические маркеры дифференцирования кератиноцитов, такие как цитокератины-1 и -10, инволюкрин и филаггрин [Воикшар Р. еХ а1., 1988; М1са11еГ Ь. е1 а1., 2009]. Клеточная линия НаСаТ является удобной моделью для изучения не только дифференцирования кератиноцитов, но и пролиферативных процессов, а также апоптотической гибели клеток [МюаПеГЬ. е1 а1., 2009; Yang Н.В. еХ а1., 2014]. Клетки данной линии способны полноценно дифференцироваться и образовывать многорядные упорядоченные пласты. Это свойство делает их удобной модельной системой для изучения процессов формирования эпидермального пласта [БсИоор У.М. е1 а1., 1999] и даже для формирования эпидермиса при пересадке [ВгеЬкгеЩг Б. & а1., 1998]. Кроме того, кератиноциты НаСаТ используют и в качестве модели воспалительных заболеваний в коже, изучая особенности продукции цитокинов [Ьее Н.Р.е1а1., 2012].

После формирования плотного монослоя в кератиноцитах линии НаСаТ усиливается экспрессия белков, характерных для верхних слоев эпидермиса [11у1е С.М. е1 а1„ 1989; КаШ М. е1 а1., 1995; ОагасЬ-ТеЬоэЬиа О. ег а1., 1998].

Так, если принять во внимание распространенную теорию возникновения жизни в водных бассейнах различной осмотической концентрации в условиях жесткого воздействия ультрафиолетовых лучей, образования активных форм кислорода и прочих стрессоров, то можно полагать, что важнейшими факторами естественного отбора были механизмы поддержания внутриклеточного гомеостаза, предполагающие приспособление к средам различной осмотической концентрации. Эти механизмы закреплены в геноме клеток современных организмов в большей или меньшей степени в функции регулирования внутриклеточных сигнальных систем. На наш взгляд, в наибольшей степени «близость» к «праклеткам» сохранили макрофаги и кератиноциты. Для понимания механизмов действия гиперосмотических растворов, в частности растворов препарата «Рапан», на кератиноциты человека необходим многосторонний взгляд на проблему, с исследованием фундаментальных клеточных процессов и работы различных сигнальных систем клетки.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Зайцева, Наталья Сергеевна, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Быков B.JT. Частная гистология человека: краткий обзорный курс. 2-е изд. -Санкт-Петербург: СОТИС, 1999. - 301стр.

2. Гордеева A.B., Лабас Ю. А., Звягильская Р. А. Апоптоз одноклеточных организмов: механизмы и эволюция // Биохимия. - 2004 г. - №10: Т. 69. - стр. 1301-1313.

3. Давыдова О.Б., Тупицина Ю.Ю., Анисимкина А.Н., Крикорова С.А. Лечебное действие хлоридных натриевых ванн // Российский медицинский журнал. - 2002 г. № 7. - стр. 34-38.

4. Данлыбаева Г.А, Жылкибаев A.A., Рыков В.А, Тритек B.C. , Силаев Д.В, Гуляев А.Е. Цитотоксичность карбонилсодержащих соединений // Биотехнология. Теория и практика. - 2012 г. - Т. 3. - стр. 49-54.

5. Дацковский Я.С. Лечение псориаза высокоминерализованным бромйодным раствором // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2002 г. -Т. 2. - стр. 35-39.

6. Еронина Т.Б., Чеботарева H.A., Курганов Б.И. Влияние осмолитов на активацию и агрегацию мышечной гликогенфосфорилазы b под действием гуанидингидрохло-рида. Ускорение агрегации белка в условиях краудинга // Биохимия. - 2005 г. -№ 9: Т. 70. -стр. 1237-1244.

7. Зеленецкая B.C., Андреев C.B. О механизмах биологического и лечебного действия бальнеопроцедур // Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры. - 1992 г. — №1. - стр. 46-50.

8. Калинина Е.В., Чернов H. Н., Саприн А.Н. Участие тио -, перокси- и глута-тион редоксинов в клеточных редокс-зависимых процессах // Успехи биологической химии. - 2008 г. - Т. 48. - стр. 319-358.

9. Кузнецов С.Л, Горячкина В .Л, Иванова М.Ю., Цомартова Д.А. Гистофи-зиология эпидермиса // Морфология. - 2012 г. - Т. 5. - стр. 76-85.

10. Лезвинская Е. М, Молочков В.А, Молочков A.B. Цитокины в генезе опухолей кожи И Иммуноонкология. - 2003г. -№ 3. -стр.92-100

11. Лузгина Н.Г, Потапова О.В, Гонцова A.A., Шкурупий В.А. Структурные особенности эпидермального барьера у лиц с синдромом недифференцированной диспла-зии соединительной ткани // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2009 г. - № 12. - стр. 690-692.

12. Лузгина Н.Г, Потапова О.В, Шкурупий В.А, Новиков А.И, Ермакова О.Б, Эффективность лечения атопического дерматита природными высокоминерализованными

водами в сочетании с УФО // Экспериментальная и клиническая дермато - косметология. -2006 г. - Т. 4. - стр. 59-62.

13. Новиков А.И., Шкурупий В.А., Лузгина Н.Г., Ермакова О.Б., Тырышкина JI.B. Эффективность восстановительного лечения больных атопическим дерматитом с разными вариантами бальнеологической реакции // Экспериментальная и клиническая дерматокосметология. - 2006 г. - Т. 5. - стр. 59-62.

14. Ткачев В.О., Меныцикова Е.Б., Зенков Н.К. Механизмы работы сигнальной системы Nrf2/Keap 1 /ARE // Биохимия. - 2011 г. -№ 4: Т. 76. - стр. 502-519.

15. Баринов Э.Ф., Айзулятов Р.Ф., Баринова М.Э., Сулаева О.Н. Функциональная морфология кожи: от основ гистологии // Клиническая дерматология и венерология. -2012 г.№ - 1.-стр 48-52.

16. Abdou A.G., Maraee А.Н., Eltahmoudy М., El-Aziz R.A. Immunohistochemical expres-sion of GLUT-1 and Ki-67 in chronic plaque psoriasis // Am J Dermatopathol.. - 2013 . -№7: V. 35.-P. 731-737.

17. Abramovits W., Perlmutter A. Steroids versus other immune modulators in the manage-ment of allergic dermatoses // Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol. - 2006 . -№ 5: V. 6. -P. 345-354.

18. Adam-Vizia V., Starkov A.A. Calcium and Mitochondrial Reactive Oxygen Species Generation: How to Read the Facts // Journal of Alzheimer's disease. - 2010 . - V. 20. - P. 413-426.

19. Adragna N.C., White R.E., Orlov S.N., Lauf P.K. K-Cl cotransport in vascular smooth muscle and erythrocytes: possible implication in vasodilation // Am J Physiol Cell Physiol. - 2000 . -V. 278 (2). - P. 381-390.

20. Andrei G., Duraffour S., Van den Oord J., Snoeck R. Epithelial raft cultures for investiga-tions of virus growth, pathogenesis and efficacy of antiviral agents // Res. Antiviral. -2010. - №3: V. 85. - P. 431-449.

21. Atzeni F., Ventura D., Batticciotto A., Boccassini L., Sarzi-Puttini P. Interleukin 6 block-ade: tocilizumab in psoriatic arthritis // J Rheumatol Suppl. - 2012. - 89. - P. 97-99.

22. Aymard E., Barruche V., Naves Т., Bordes S. Autophagy in human keratinocytes: an early step of the differentiation? // Experimantal Dermatology. - 2011. - V. 20. - P. 263-268.

23. Bachelor M., Binder R.L., Cambron R.T., Kaczvinsky J.R., Spruell R., Wehmeyer K.R., Reilman R., Adams R., Tiesman J.P., Wang Y., Bascom C.C., Isfort R.J., Dicolandrea T. Transcriptional profiling of epidermal barrier formation in vitro // J Dermatol Sci. - 2014 . - №3: V. 73.-P. 187- 197.

24. Bak J.P., Kim Y.M, Son J, Kim C.J, Kim E.H. Application of concentrated deep sea water inhibits the development of atopic dermatitis-like skin lesions in NC/Nga mice II BMC Complement Altern Med. - 2012 . - V. 12. - P. 1-10.

25. Barrientos S, Stojadinovich O, Golinko M.S., Brem H. Growth factors and cytokines in wound healing // Wound repair and regeneration. - 2008 . - V. 16. - P. 585-601.

26. Basham J.C, Chabrerie A, Kempson S.A. Hypertonic activation of the renal beta-ine/GABA transporter is microtubule dependent // Kidney International. - 2001. - V. 59. - P. 2182-2191.

27. Becker W. Emerging role of DYRK family protein kinases as regulators of protein stabil-ity in cell cycle control // Cell Cycle. - 2012. -№18: V, 11. - P. 3389-3394.

28. Bell E, Sher S, Hull B, Merrill C, Rosen S, Chamson A., Asselineau D„ Dubertret L, Coulomb B, Lapiere C, Nusgens B, Neveux Y. The reconstitution of living skin // J In-vest Dermatol. - 1983. - V.81. - P. 2-10.

29. Bell S.P, Dutta A. DNA replication in eukaryotic cells II Annual review of biochemistry. - 2002. - V. 71. - P. 333-374.

30. Bernard D, Gosselin K, Monte D. Involvement of Rel/Nuclear Factor-kB Transcription factors in Keratinocyte Senescence // Cancer Research. - 2004. - V. 64. - P. 472-481.

31. Bernardi P, Scorrano L, Colonna R, Petronilli V, Di Lisa F. Mitochondria and cell death. Mechanistic aspects and methodological issues // Eur J Biochem . - 1999. - №3: V. 264.-P. 687-701.

32. Bernerd F. Human skin reconstructed in vitro as a model to study the keratinocyte, the fi-broblast and their interactions: photodamage and repair processes // J Soc Biol. - 2005. -№4: V. 199.-P. 313-320.

33. Bieber T. Novak N. Pathogenesis of atopic dermatitis: new developments // Current Al-lergy and Asthma Reports. - 2009 . - V. 9. - P. 291-294.

34. Bienert G.P. Schjoerring J.K, Jahn T.P. membrane transport of hydrogen peroxide // Bi-ochemical et biophysica Acta. - 2006. - V. 1758. - P. 994-1003.

35. Blackwell T.S, Christman J.W. The role of Nuclear Factor-KB in Cytokine Gene regulation // American journal of respiratory cell and molecular biology. - 1997. - V. 17. - P. 1-9.

36. Boer J, Schothorst A.A, Boom B, Hermans J, Suurmond D. Influence of water and salt solutions on UVB irradiation of normal skin and psoriasis // Arch. Dermatol. Res.. -1982.-V. 273.-P. 247-259.

37. Bortner C.D, Cidlowski J.A. Absence of volume regulatory mechanisms contributes to the rapid activation of apoptosis in thymocytes // The American Journal of Physiology. -1996.-V. 271.-P. 950-961.

38. Bortner C.D., Cidlowski J.A. A necessary role for cell shrinkage in apoptosis // Biochemical pharmacology. - 1998 . - V. 56. - P. 1549-1559.

39. Boukmap P., Petrussevska R.T., Breitkreutz D., Hornung J., Markham A., Fusenig N.E. Normal keratinization in a sponta-neously immortalized human keratinocyte cell line//Journal of cellular biology. - 1988. - №3: V. 106. - P. 761-771.

40. Brand M.D. The sites and topology of mitochondrial superoxide // Experimental geron-tology. - 2010. - V. 45. - P. 466-472.

41. Breitkreutz D., Schoop V.M., Mirancea N., Baur M., Stark H.J., Fusenig N.E. Epidermal differentiation and basement membrane formation by HaCaT cells in surface transplants // European Journal of Biology. - 1998. - V. 75. - P. 273-286.

42. Brem H., Young J., Tomic-Canic M., Isaacs C., Ehrlich H.P. Clinical efficacy and mech-anism of bilayered living human skin equivalent (HSE) in treatment of diabetic foot ulcers // Surg Technol Int. - 2003 . - V. 11. - P. 23-31.

43. Bulavin D.V., Higashimoto Y., Popoff I.J., Gaarde W.A., Basrur V., Potapova O., Appella E., Fornace A.J.Jr. Initiation of a G2/M checkpoint after ultraviolet radiation requires p38 kinase. //Nature. - 2001. - V. 411. - P. 102-107.

44. Bustelo X.R., Sauzeau V., Berenjeno I.M. GTP-binding proteins of the Rho/Rac family regulation, effectors and functions in vivo // Bioassays. - 2007. -JM°4: V. 29. - P. 356-370.

45. Byun J.Y., Choin H.Y., Myung K.B., Choi Y.W. Expression of IL-10, TGF-pl and TNF-a in Cultured Keratinocytes (HaCaT Cells) after IPL Treatment or ALA-IPL Photody-namic Treatment //Annals of Dermatology. - 2009. - №1: V. 21. - P. 12-17.

46. Caamano J., Hunter C.A. NF-kappaB family of transcription factors: central regulators of innate and adaptive immune functions // Clinical Microbilogy reviews. - 2002. - V. 15. -P. 414-429.

47. Candi E., Schmidt R., Melino G. The cornified envelope: a model of cell death in the skin. // Nat Rev Mol Cell Biol. - 2005. - V. 6. - P. 328-340.

48. Cao S., Zhang X., Mosser D.M. NF-kBI (p50) Homodimers Differentially Regulate Pro- and Anti-inflammatory Cytokines in Macrophages // The journal of biological chemistry. - 2006. - №36: V. 281. - P. 26041-26050.

49. Carr W.J., Oberly-Deegan R.E. Antioxidant proteins and reactive oxygen species are de-creased in a murine epidermal side population with stem cell-like characteristics // Hys-tochemistry and Cell biology. - 2011. - V. 135. - P. 293-304.

50. Chakravarty D., Cai Q., Ferraris J.D., Michea L., Burg M.B., Kttltz D. Three GADD45 isoforms contribute to hypertonic stress phenotype of murine renal inner medullary cells. // Am J Physiol Renal Physiol. - 2002. - V. 283. - P. 1020-1029.

51. Chamulitrat W, Stremmel W, Kawahara T, Rokutan K, Fujii H. A constitutive NADPH oxidase-like system containing gp91phox homologs in human keratinocytes // Journal of investigative dermatology. - 2004. - V. 122. - P. 1000-1009.

52. Chandel N., Maltepe E, Goldwasser E, Mathieu C, Simon M, Schumacker P. Mito-chondrial reactive oxygen species trigger hypoxia-induced transcription // Proc Natl Acad Sci USA.- 1998. - V. 95. - P. 11715-11720.

53. Chandra J, Samali A, Orrenius S. Triggering and modulation of apoptosis by oxidative stress // Free radical biology and medicine. - 2000. - V. 29. - P. 323-333.

54. Chen X.L, Kunsch C. Induction of cytoprotective genes through Nrf2/antioxidant re-sponse element pathway: a new therapeutic approach for the treatment of inflammatory diseases // Curr Pharm Des. - 2004. - №10: V. 8. - P. 879 - 891.

55. Cho H.Y, Reddy S.P, Debiase A. Gene expression profiling of NRF2-mediated protec-tion against oxidative injury // Free radical biology and medicine. - 2005. - №3: V. 38. -P. 325-343.

56. Clanton T.L. Hypoxia-induced reactive oxygen species formation in skeletal muscle. // J Appl Physiol. - 2007. - №6: V. 102. - P. 2379-2388.

57. Collins J.M, Berry D.E, Bagwell C.B. Different rates of DNA synthesis during the S phase of log phase HeLa S3, WI-38, and 2RA cells. - 1980 . -№8: V. 288. - P. 3585-3590.

58. Crompton M. The mitochondrial permeability transition pore and its role in cell death // Biochem J. -1999. - V.341. - P. 233-249.

59. Cross A.R, Jones O.T. Enzymic mechanisms of superoxide production. - 1991 №3: V. 1057.-P. 281-298.

60. Dallaglio K, Petrachi T, Marconi A, Truzzi F, Lotti R, Saltari A, Morandi P, Puviani M., Maiorana A, Roop D. R, Pincelli C, Isolation and Characterization of Squamous Cell Carcinoma-Derived Stem-like Cells: Role in Tumor Formation // Int J Mol Sci.. - 2013 . -№10: V. 14. - P. 19540-19555.

61. Dascalu A, Matithyou A, Oron Y, Korenstein R. A hyperosmotic stimuls elevates intra-cellular calcium and inhibits proliferation of a human keratinocyte cell line // Journal of Investigative Dermatology. - 2000. - V. 115. - P. 714-.

62. Denda M, Katagiri C, Hirao T, Maruyama N, Takahashi M. Some magnesium salts and a mixture of magnesium and calcium salts accelerate skin barrier recovery. // Arch. Dermatol. Res. - 1999. - №10: V. 291. - P. 560-563.

63. Denda M, Fuziwara S, Inoue K. Influx of calcium and chloride ions into epidermal keratinocytes regulates exocytosis of epidermal lamellar bodies and skin permeability barrier homeostasis // J. Invest. Dermatol. - 2003. -№ 2: V. 121. - P. 362-367.

64. Deruy E., Gosselin K., Vercamer C., Martien S., Bouali F., Slomianny C., Bertout J., Bernard D., Pourtier A., Abbadie C. MnSOD Upregulation Induces Au-tophagic Programmed Cell Death in Senescent Keratinocytes // PLOS One. - 2010 . -V. 5. - P. 1-18.

65. Desai B.N., Myers B.R. and Schreiber S.L. FKBP12-rapamycin-associated protein asso-ciates with mitochondria and senses osmotic stress via mitochondrial dysfunction // PNAS.

- 2002 . - №7: V. 99. - P. 4319-4324.

66. Di Ciano C., Nie Z., Szaszi K., Lewis A, Uruno T, Zhan X, Rotstein OD, Mak A, Kapus A. Osmotic stress-induced remodeling of the cortical cytoskeleton // American journal of physiology. - 2002. - V. 283. - P. 850-865.

67. Diker-Cohen T., Koren R., Liberman U.A., Ravid A. Vitamin D protects keratinocytes from apoptosis induced by osmotic shock, oxidative stress and tumor necrosis factor // Annals of New York Academy of Science. - 2003 . - V. 1010. - P. 350-353.

68. Dmitrieva N., Michea L., Burg M. p53 tumor suppressor protein protects renal inner me-dullary cells from hypertonic stress by restricting DNA replication . - 2001 . - 3 : V. 281.

- P. 522-530.

69. Dmitrieva N., Kultz D., Michea L., Ferraris J, Burg M. Protection of renal inner medullary epithelial cells from apoptosis by hypertonic stress-induced p53 activation // The Journal of bio-logical chemistry. - 2000. - V. 275. - P. 18243-18247.

70. Dmitrieva N.I., Bulavin D.V., Fornace A.J. Rapid activation of G2/M checkpoint after hypertonic stress in renal innermedullary epithelial (IME) cells is protective and requires p38 kinase // Proctors of the national academy of sciences of the United States of Ameri-ca. -2002,- 1: V. 99.-P. 184-189.

71. Dmitrieva N.I., Michea L.F., Rocha G.M., Burg M.B. Cell cycle delay and apoptosis in response to osmotic stress. // Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol. - 2001. -№3: V. 130.-P. 411-420.

72. Echtay K.S. Mitochondrial uncoupling proteins—what is their physiological role? -2007.- 10: V. 43.-P. 1351-1371.

73. Ehrlich H.P. Understanding experimental biology of skin equivalent: from laboratory to clinical use in patients with burns and chronic wounds // Am J Surg. - 2004 . - 187(5A). -P. 29-33.

74. Faruqi T.R., Gomez D., Bustelo X.R., Bar-Sagi D., Reich N.C. Racl mediates STAT3 activation by autocrine IL-6 // Proc Natl Acad Sci USA.. - 2001. - V.98(16). - P. 90149019.

75. Feingold K., Elias P. The important role of lipids in the epidermis and their role in the formation and maintenance of the cutaneous barrier // Biochim Biophys Acta.. - 2014 . - 3 : V.1841.

76. Finkel T. Oxygen radicals and signaling // Curr Opin Cell Biol. - 1998. - V. 10. -P. 248 - 253.

77. Finkel T. Reactive oxygen species and signal transduction // IUBMB Life. - 2001. -№1:V. 52.-P. 3-6.

78. Fischer C. P. Interleukin-6 in acute exercise and training: what is the biological rele-vance? //Exerc Immunol Rev.- 2006. - V. 12. - P. 6-33.

79. Fisher D., Krasinska L., Coudreuse D., Novak B. Phosphorylation network dynamics in the control of cell cycle transitions // J Cell Sci. - 2012 . - V. 125. - P. 4703-4711.

80. Fisher D.A. Adverse effects of topical corticosteroid use // West. J. Med. - 1995. -№2: V. 162.-P. 123-126.

81. Flock A., Flock B., Scarfone E. Laser scanning confocal microscopy of the hearing organ: fluorochrome-dependent cellular damage is seen after overexposure. // J Neurocytol.. - 1998. - №7: V.27. - P. 507 - 516.

82. Friis M.B., Friborg C.R., Schneider L. Cell shrinkage as a signal to apoptosis in NIH 3T3 fibroblasts // The Journal of Physiology. - 2005. - V. 567. - P. 427-443.

83. Fuchs E. Epidermal differentiation: the bare essentials // J Cell Biol. - 1990. -V.lll.-P. 2807-2814.

84. Fukata M., Nakagawa M., Kaibuchi K. Roles of Rho-family GTPases in cell polarisation and directional migration // Curr Opin Cell Biol. - 2003. - №5: V. 15. - P. 590- 597.

85. Galucci R.M., Simeonova P.P., Matheson J.M., Kommineni C. Impaired cutaneous wound healing in interleukin-6-deficient and immunosuppressed mice // The Journal of cancer research. - 2000. - V. 14. - P. 2525-2531.

86. Galvez A., Morales M.P., Eltit J.M., Ocaranza P., Carrasco L., Campos X., Sapag-Hagar M., Diaz-Araya G., Lavandero S. A rapid and strong apoptotic process is triggered by hyperosmotic stress in cultured rat cardiac myocytes // Cell and Tissue Research. - 2001. - №2: V. 304.-P. 279-285.

87. Gandarillas A., Davies D., Blanchard J.M. Normal and c-Myc-promoted human keratino-cyte differentiation both occur via a novel cell cycle involving cellular growth and en-doreplication. - 2000. -№ 29: V. 19. - P. 3278-3289.

88. Garach-Jehoshua O., Ravid A., Liberman U.A., Reichrath J. Upregulation of the calcium-dependent protease, calpain, during keratinocyte differentiation // British Journal of Dermatology. - 1998. - V. 139. - P. 950-957.

89. Garrington T.P, Johnson G.L. Organization and regulation of mitogen-activated protein kinase signaling pathways // Curr. Opin. Cell Biol. - 1999. -V. 11. - P. 211-218.

90. Genova M.L, Pich M.M, Bernacchia A., Bianchi C, Biondi A., Bovina C, Falasca A.I., Formiggini G, Castelli G.P, Lenaz G. The mitochondrial production of reactive oxygen species in relation to aging and pathology. - 2004 . - V. 1011. - P. 86-100.

91. Genova M.L, Ventura B, Giuliano G, Bovina C, Formiggini G, Parenti Castelli G, Lenaz G. The site of production of superoxide radical in mitochondrial Complex I is not a bound ubisemiquinone but presumably iron-sulfur cluster N2 // FEBS Lett. - 2001. -№ 3:V. 505. - P. 364-368.

92. Giono L.E, Manfredi J.J. The p53 tumor suppressor participates in multiple cell cycle checkpoints // Journal of cellular physilology. - 2006. -№1: V. 209. - P. 13-20.

93. Gloire G, Piette J. Redox regulation of nuclear post-translational modifications during NF-kappa activation // Antioxidants & redox signaling. - 2009 . - V. 11. - P. 2209-2222.

94. Gniadecki R, Hansen M, Wulf H.C. Two pathways for induction of apoptosis by ultra-violet radiation in cultured human keratinocytes // J Invest Dermatol. - 1997. -№2: V. 109. -P. 163-169.

95. Goldman M.P, Merial-Kieny C, Nocera T, Mery S. Comparative benefit of two thermal spring waters after photodynamic therapy procedure. - 2007. -№1: V. 6. - P. 31-35.

96. Goldsby R, Kindt T.J, Osborn B, Kubi J. Immunology. - . Freeman, 2003. -

551.

97. Gorczyca W. Cytometric analyses to distinguish death processes. // Endocr Relat Cancer. - 1999. - №1: V. 6. - P. 17-19.

98. Gosselin K, Deruy E, Martien S, Vercamer C. Senescent Keratinocytes Die by Au-tophagic Programmed Cell Death // The American Journal of Pathology. - 2009. -№2: V. 174.99. Gozuacik D, Kimchi A. Autophagy as a cell death and tumor suppressor mechanism. // Oncogene. - 2004. -V. 23 (16). - P. 2891-2906.

100. Grandjean-Laquerriere A, Gangloff S.C, Le Naour R, Trentesaux C, Hornebeck W, Guenounou M. Differential modulation of stress-inflammation responses by plant polyphenols in cultured normal human keratinocytes and immortalized HaCaT cells // Cytokine. -2002.-№3:V. 18.-P. 168-177.

101. Greiner J, Diezel W. Inflammation-inhibiting effect of magnesium ions in contact eczema reactions // Hautarzt. - 1990. - №11: V. 41. - P. 602-605.

102. Grone A. Keratinocytes and Cytokines // Veterinary immunology and immuno-pathology. - 2002. - V. 88. - P. 1-12.

103. Gruner S., Zwirner A., Boonen H., Sonnichsen M. Effect of treatment with salt from the Dead Sea (Tomesa therapy) on epidermal Langerhans cells—a clinical study // Z. Hautkr.. - 1990. - №12: V. 65. - P. 1146-1152.

104. Hamanaka R.B., Glasauer A., Hoover P., Yang S. Mitochondrial Reactive Oxygen Species Promote Epidermal Differentiation and Hair Follicle Development // Science Signaling. -2013.-6: V. 261.

105. Harari M., Shani J., Seidl V., Hristakieva E. Climatotherapy of atopic dermatitis at the Dead Sea: demographic evaluation and cost-effectiveness // Int. J. Dermatol. - 2000. - №1: V. 39.-P. 59-69.

106. Haussinger D. The role of cellular hydration in the regulation of cell function. // Biochemical Journal. - 1996. - V. 313. - P. 697-710.

107. Hayden M.S., Ghosh S. NF-kB in immunobiology // Cell Research. - 2011. - V. 21.-P. 223-244.

108. Hayden M.S., Ghosh S. Shared principles in NF-kB Signaling // Cell. - 2008. - V. 132.-P. 344-362.

109. Hayden M.S., Ghosh S.S. NF-kB, the first quarter-century: remarkable progress and outstanding questions // Genes and Development. - 2012. - V. 26. - P. 203-234.

110. Henseleit U., Rosenbach T., Kolde G. Induction of apoptosis in human HaCaT keratinocytes // Arch Dermatol Res. - 1996. - №11: V. 288. - P. 676-683.

111. Henson J.H. Relationships between the actin cytoskeleton and cell volume regulation // Microscopy research and technique. - 1999. - V. 47. - P. 155-162.

112. Hirata H., Takahashi A., Kobayashi S. Caspases are activated in a branched protease cascade and control distinct downstream processes in Fas-induced apoptosis // The Journal of Experimental medicine. - 1998. - №4: V. 187. - P. 587-600.

113. Hodak E., Gottlieb A.B., Segal T., Politi Y., Maron L., Sulkes J., David M. Climatotherapy at the Dead Sea is a remittive therapy for psoriasis: combined effects on ep-idermal and immunologic activation // J. Am. Acad. Dermatol. - 2003. - №3: V. 49. - P. 451-457.

114. Huang J., Klionsky D.J. Autophagy and human disease // Cell Cycle. - 2007. - V. 15.-P. 1837-1849.

115. Huet O., Dupic .L, Harrois A., Duranteau J. Oxidative stress and endothelial dysfunction during sepsis.. - 2011. - V. 16. - P. 1986-1995.

116. Ikeda M., Hirose Y., Miyoshi K. et al. Nuclear Factor kB (NF-kB) activation by hydrogen peroxide in human epidermal keratinocytes and the restorative effect of inter-luekin-10 // Journal of Dermatological Science. - 2002. - V. 28. - P. 159-170.

117. Irarrazabal C.E, Liu J.C, Burg M.B., Ferraris J.D. DNA damage-inducible kinase, con-tributes to activation by high NaCl of the transcription factor TonEBP/OREBP // Proctors of the National Academy of Science of the United States. - 2004. -№23: V. 101. - P. 88098814.

118. Jain A.K, Bloom D.A, Jaiswal A.K. Nuclear Import and Export Signals in Control ofNrf2 // The journal of biological chemistry. - 2005. -№ 32: V. 280. - P. 29158-29168.

119. Jensen J.M, Proksch E. The skin's barrier // G. Ital Dermatol Venereol. - 2009. -V. 144(6). - P. 689-700.

120. Jeong W.S, Kim I.W, Hu R, Kong A.N. Modulatory properties of various natural chemopreventive agents on the activation of NF-kappaB signaling pathway // Pharmaceutical Research. - 2004. - №4: V. 21. - P. 661-670.

121. Jin Z, El-Deiry W.S. Overview of cell death signaling pathways. // Cancer biology and therapy. - 2005 . -№ 2: V. 4. - P. 139-163.

122. Jordan M.A, Wilson L. Microtubules and actin filaments: dynamic targets for cancer chemotherapy // Current Opinion in cell biology. - 1998. - V. 10. - P. 123-130.

123. Joshi D.C, Bakowska J.C. Determination of mitochondrial membrane potential and reactive oxygen species in live rat cortical neurons. // J Vis Exp. - 2011. - V. 51.

124. Jost M, Huggett T.M, Kari C, Rodeck U. Matrix-independent survival of human keratinocytes through an EGF receptor/MAPK-kinase-dependent pathway // Mol Biol Cell. -2001.-V.12.-P. 1519-1527.

125. Junankar P.R, Kirk K. Organic osmolyte channels: a comparative view // Cell Physiology and biochemistry. - 2000. - V. 10. - P. 355-360.

126. Kabe Y, Ando K, Yoshida M, Handa H. Redox regulation of NF-kappaB activation: distinct redox regulation between the cytoplasm and the nucleus // Antioxi-dants&redox signaling. - 2005. - V. 7. - P. 395-403.

127. Kaibuchi K, Takai Y, Nishizuka Y. Protein kinase C and calcium ion in mitogenic response of macrophage-depleted human peripheral lymphocytes // The Journal of biological chemistry. - 1985. -№3: V. 260. - P. 1366-1369.

128. Kang M, Kobayashi A, Wakabayashi N, Kim S. Scaffolding of Keapl to the actin cytoskeleton controls the function of Nrf2 as key regulator of cytoprotective phase 2 genes // PNAS. - 2004. -№7: V. 101. - P. 2046-2051.

129. Kang M.I, Kobayashi A, Wakabayashi N, Kim S.G, Yamamoto M. Scaffolding of Keapl to the actin cytoskeleton controls the function of №12 as key regulator of cytoprotective phase 2 genes // Proc Natl Acad Sci USA.- 2004. - V. 101(7). - P. 2046-2051.

130. Karin M. The beginning of the end: IkappaB kinase (IKK) and NF-kappaB activation. // J Biol Chem. - 1999 . -№39: V. 274. - P. 27339-27342.

131. Kaspar J.W., Niture S.K., Jaiswal A.K. Nrf2:INrf2 (Keapl) signaling in oxidative stress // Free raadical biology and medicine. - 2009. - V. 47. - P. 1304-1309.

132. Kato M., Ishizaki A., Hellman U., Wernstedt C., Kyogoku M., Miyazono K., Heldin C.H., Funa K. A human keratinocyte cell line produces two autocrine growth inhibitors, transforming growth factor-beta and insulin-like growth factor binding protein-6 in a calcium-adn cell dependent manner // Journal of Biological Chemistry. - 1995. - V. 270. - P. 1237312379.

133. Keller U., Huber M., Werner S. Nrf Transcription Factors in Keratinocytes Are Essential for Skin Tumor Prevention but Not for Wound Healing // Molecular Cell Biol-ogy. -2006.-V. 26.-P. 3773-3784.

134. Khan H., Cino E.A., Brickenden A. Fuzzy complex formation between the intrinsically disordered Prothymosin alpha and Kelch Domain of Keapl Involved in the Oxida-tive Stress Response // Journal of molecular biology. - 2013. - V. 425. - P. 1011-1027.

135. Kepp O., Galluzzi L, Lipinski M, Yuan J, Kroemer G. Cell death assays for drug discovery // Nat. Rev. Drug Discov. 2011. № 3:V. 10.-P. 221-37.

136. Kil I.S., Kim S.Y., Park J.W. Glutathionolation regulates IkappaB // Biochemical and biophysical research community. - 2008. - V. 373. - P. 169-173.

137. Kirsner R.S. The use of Apligraf in acute wounds. // J Dermatol. - 1998 . - V.25 (12).-P. 805-811.

138. Klionsky D.J. Autophagy. - 2004. - P. 1-303.

139. Kobayashi A., Kang M., Watai Y. et al. Oxidatve and electrophile stresses activate Nrf2 through inhibition of ubiquitination activity of keapl // Molecular and cellular biology. - 2006. -№1: V. 26. - P. 221-229.

140. Kondo Y., Kanzawa T., Sawaya R., Kondo S. The role of autophagy in cancer development and response to therapy // Nature reviews. Cancer. - 2005. - V. 9. - P. 726-734.

141. Lang F., Bush G.L. et al. The diversity of volume regulatory mechanisms // Cell Physiology and biochemistry. - 1998. - V. 8. - P. 1-45.

142. Lang F., Stehle T., Heussinger D. Water, K+, H+, lactate and glucose fluxes during cell volume regulation in perfused rat liver // Phlugers Archiv. - 1989. - V. 413. - P. 209-216.

143. Lanneau D., Wettstein G., Bonniaud P., Garrido C. Heat shock proteins: cell protection through protein triage. // Scientific World Journal. - 2010. - V. 10. - P. 1543-1552.

144. Lee H.P., Choi Y.J., Cho K.A, Woo S.Y., Yun S.T., Lee J.T., Kim H.J, Lee K.H, Kim J.W. Effect of Spa Spring Water on Cytokine Expression in Human Keratino-cyte HaCaT Cells and on Differentiation of CD4(+) T Cells. - 2012. - №3: V. 24. - P. 324-336.

145. Levi-Schaffer F, Shani J, Politi Y, Rubinchik E, Brenner S. Inhibition of proliferation of psoriatic and healthy fibroblasts in cell culture by selected Dead-sea salts. // Pharmacology. - 1996. -№5: V. 52. - P. 321-328.

146. Lewis D.A, Hengeltraub S.F, Gao F.C, Leivant MA, Spandau DF. Aberrant NF-kappaB Activity in HaCaT Cells Alters their Response to UVB Signaling // Journal of Investigative Derma-tology. - 2006. - V. 126. - P. 1885-1892.

147. Li N, Karin M. Is NF-kappaB the sensor of oxidative stress? // FASEB J. - 1999. -№10: V. 13.-P. 1137-1143.

148. Lim C.P, Phan T.T, Lim I.J, Cao X. Cytokine profiling and stat3 phosphorilation in epithelial-mesenchimal interactions between keloid keratinocytes and fibroblasts // J In-vest Dermatol. - 2009. - V. 129. - P. 815-861.

149. Lim S, Kaldis P. Cdks, cyclins and CKIs: roles beyond cell cycle regulation. // Development. - 2013. -№15: V. 140. - P. 3079-3093.

150. Lin H.Y, Kao C.H, Lin K.M. Notch signaling regulates late-stage epidermal differentiation and maintains postnatal hair cycle homeostasis // Plos One. - 2011. - 6. - P. 158.

151. Lin Z.Q, Kondo T, Ishida Y, Takayasu T, Essential involvement of 1L-6 in the skin wound-healing process as evidenced by delayed wound healing in IL-6-deficient mice // Journal of leukocyte biology. - 2003. -№6: V. 73. - P. 713-721.

152. Lustgarten M.S., Bhattacharya A, Muller F.L. Complex I generated, mitochondrial matrix-directed superoxide is released from the mitochondria through voltage depend-ent anion channels // Biochemical and biophisical research communications. - 2012. -№3: V. 422. - P. 515-521.

153. Lyons A.B. Analysing cell division in vivo and in vitro using flow cytometric measurement of CFSE dye dilution // J Immunol Methods. - 2000. -№(1-2): V. 243. - P. 147154.

154. Maas-Szabowski N, Shimotoyodome A, Fusenig N.E. Keratinocyte growth regulation in fibroblast cocultures via a double paracrine mechanism // Journal of cell science. - 1999. -Vol. 112.-P. 1843-1853.

155. Maeno E, Ishizaki Y, Kanaseki T, Hazama A, Okada Y. Normotonic cell shrinkage because of disordered volume regulation is an early prerequisite to apoptosis // PNAS. - 2000. - V. 97. - P. 9487-9492.

156. Maeno E., Takahashi N., Okada Y Dysfunction of regulatory volume increase is a key component of apoptosis // FEBS letters. - 2006. - V. 580. - P. 6513-6517.

157. Mailloux R.J., Harper M. Uncoupling proteins and the control of mitochondrial reactive oxygen species production // Free radical biology and medicine. - 2011. - №6: V. 51. -P. 1106-1115.

158. Mammone T., Ingrassia M., Goyarts E. Osmotic stress induces terminal differentiation in cultured // In vitro cell and developmental biology. Animal. - 2007. - V. 44. - P. 135139.

159. Mammucari C., Rizzuto R. Signaling pathways in mitochondrial dysfunction and aging. // Mech. Ageing Dev. 2010. -V. 131. -P. 536^3.

160. Manohar A., Shome S.G., Lamar J., Stirling L, Iyer V, Pumiglia K, et al. Alpha 3 beta 1 integrin promotes keratinocyte cell survival through activation of a MEK/ERK signaling pathway // J Cell Sci. - 2004 . - 117. - P. 4043-4054.

161. Marconi A., Vaschieri C., Zanoli S., Giannetti A., Pincelli C. Nerve growth factor protects human // J Invest Dermatol. - 1999. - V. 113. - P. 920-927.

162. Matsuhime H., Ewen M.E., Strom D.K., Kato J.Y., Hanks S.K., Roussel M.F., Sherr C.J. Identification and properties of an atypical catalytic subunit (p34PSK-J3/cdk4) for mammalian D type G1 cyclins // Cell. - 1992. -№2: V. 71. - P. 323-334.

163. Matsuyama S., Reed J.C. Mitochondria-dependent apoptosis and cellular pH regulation // Cell Death Differ. - 2000. -№12: V. 7. - P. 1155-1165.

164. Matz H., Orion E., Wolf R. Balneotherapy in dermatology // Dermatol Ther. -2003. -№2: V. 16. - P. 132-140.

165. Maunsbach A.B., Marples D., Chin E., Ning G., Bondy C., Agre P., Nielsen S. Aquaporin-1 water channel expression in human kidney. // J Am Soc Nephrol. - 1997. - №8 (1). -P. 1-14.

166. May M.J. Ghosh S. Signal transduction through NF-kappa B // Immunology today. - 1998. - №2: V. 19. - P. 80-88.

167. Micallef L., Belaubre F., Pinon A., Jayat-Vignoles C., Delage C., Charveron M., Simon A. Effects of extracellular calcium on the growth-differentiation switch in immor-talized keratinocyte HaCaT cells compared with normal human keratinocytes. // Exp Dermatol.- 2009. -№2: V. 18.-P. 143-151.

168. Micallef L. Effects of extracellular calcium on the growth differentiation switch in immortalized keratinocyte HaCaT cells compared with normal human keratinocytes // Experimental dermatology. - 2008. - №2: V. 18. - P.143-151.

169. Michea L, Combs C, Andrews P, Dmitrieva N, Burg M.B. Mitochondrial dysfunction is an early event in high-NaCl-induced apoptosis of mIMCD3 cells // American Journal of Physiol-ogy. Renal Physiology. - 2002. -№6: V. 282. - P. 981-990.

170. Michea L. ,Ferguson D.R, Peters E.M, Andrews P.M., Kirby M.R, Burg M.B.. Cell cycle delay and apoptosis are induced by high salt and urea in renal medullary cells // Am J Physiol Renal Physiol - 2000. -№2: V. 278. - P. 209-218.

171. Mignotte B, Vayssiere J.L. Mitochondria and apoptosis // Eur J Biochem.. - 1998. -№1: V. 252.-P. 1-15.

172. Mildner M, Eckhart L, Lengauer B, Tschachler E. Hepatocyte growth factor/scatter factor inhibits UVB induced apoptosis of human keratinocytes but not of keratinocyte-derived cell lines via the phosphatidylinositol 3-kinase/AKT pathway // J Biol Chem. - 2002. -V. 277.-P. 14146-14152.

173. Militello R. Colombo M.I. Small GTPases as regulators of cell division // Commun Integr Biol. - 2013. - №5: V. 6. e25460

174. Mills J.W, Scwiebert E.M, Stanton B.A. Evidence for the role of actin filaments in regulating cell swelling // Journal of experimental zoology. - 1994. - V. 268. - P. 111-120.

175. Mills J.W, Scwiebert E.M, Stanton B.A. Evidence for the role of actin filaments in regulating cell swelling // Journal of experimental zoology. - 1994. - V. 246. - P. 111-120.

176. Mitchinson T.J, Cramer L.P. Actin-based cell motility and cell locomotion // Cell. - 1996.-V. 84.-P. 371-379.

177. Mitra R.S, Wrone-Smith T, Simonian P, Foreman K.E, Nunez G, Nickoloff B.J. Apoptosis in keratinocytes is not dependent on induction of differentiation, // Lab Invest. -1997. -№1: V. 76.-P. 99-107.

178. Morgan M.J, Liu Z. Crosstalk of reactive oxygen species and NF-kB signaling // Cell Research. - 2011. - V. 21. - P. 103-115.

179. Morito N, Yoh K, Itoh K. Nrf2 regulates the sensitivity of death receptor signals by affecting intracellular glutathione levels // Oncogene. - 2003. - V. 22. - P. 9275-9281.

180. Mosser D.D, Caron A.W, Bourget L, Denis-Larose C, Massie B. Role of the human heat shock protein hsp70 in protection against stress-induced apoptosis // Mol Cell Biol. -1997. -V.17(9). - P. 5317-5327.

181. Mossman T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survivakapplication to proliferation and cytotoxicity assays // Journal of immunological methods. - 1983. - V.65. - P. 55-63.

182. Motohashi H., Katsuoka F., Engel J.D., Yamamoto M. Small Maf proteins serve as transcriptional cofactors for keratinocyte differentiation in the Keapl-Nrf2 regulatory pathway. // Proc Natl Acad Sci USA.- 2004. - №17: V. 101. - P. 6379 - 6384.

183. Murphy M.P. How mitochondria produce reactive oxygen species // Biochemical Journal. - 2009. - V. 417. - P. 1-13.

184. Nauseef W.M. Assembly of the phagocyte NADPH oxidase. // Histochem Cell Biol. - 2004. -№ 4: V. 122. - P. 277 - 291.

185. Neidhart S., Antonsson B., Gillieron C., Vilbois F., Grenningloh G., Arkinstall S. c-Jun N-terminal kinase-3 (JNK3)/stress-activated protein kinase-beta (SAPKbeta) binds and phosphorylates the neuronal microtubule regulator SCG10 // FEBS letters. - 2001. - №2: V. 508. - P. 259-264.

186. Nickoloff B.J., Qin J.Z., Chaturvedi V., Bacon P., Panella J., Denning M.F. Life and death signaling pathways // J Investig Dermatol Symp Proc. - 2002. - V. 7. - P. 27-35.

187. Nishi T., Shimizu N., Hiramoto M., Sato I., Yamaguchi Y., Hasegawa M., Aizawa S., Tanaka H., Kataoka K., Watanabe H., Handa H. Spatial redox regulation of critical cyctein residues of NF-kappa B in vivo // The journal of biological chemistry. - 2002. - V. 277. -P. 44548-44556.

188. Niture S.K., Jaiswal A.K. Prothymosin-alpha mediates nuclear import of the INrf2/Cul3*Rbxl Complex to degrade nuclear Nrf2 // The journal of biological chemis-try. -2009. -№20: V. 284. - P. 13856-13868.

189. Nogales E. Structural insight into microtubule function // Annual reviw of biochemistry. - 2000. - V. 69. - P. 277-302.

190. Ohta T., Iijima K., Miyamoto M. Loss of Keapl function activates Nrf2 and provides advantages for lung cancer cell growth // Cancer Reserch. - 2008. - V. 68. - P. 1303-1309.

191. Okada Y., Maeno E., Shimizu T., Dezaki K;, Wang J., Morishima S. Receptor-mediated control of regulatory volume decrease (RVD) and apoptotic volume decrease (AVD) // The journal of physi-ology. - 2001. - V. 532. - P. 3-16.

192. Oleinick N.L., Morris R.L., Belichenko I. The role of apoptosis in response to photodynamic therapy: what, where, why, and how // Photochemical and photobiological sciences. - 2002.-№1: V. l.-P. 1-21.

193. O'Neill W.C. Physiological significance of volume-regulatory transporters // The Amercian journal of physiology. - 1999. - V. 276. - P. 995-1011.

194. Page S.M., Brownlee G.G. Differentiation-specific enhancer activity in transduced keratinocytes: a model for epidermal gene therapy // Gene Ther.. - 1998 . - 3 : V. 5. - P. 394 -402.

195. Pastor M.M, Proft M. and Pascual-Ahuir A. Mitochondrial Function Is an Inducible Determinant of Osmotic Stress Adaptation in Yeast // Journal of biological chemistry. - 2009. -V. 284.-P. 30307-30317.

196. Piao M.S., Choi J, Lee D, Yun S.J. Differentiation-dependent expression of NADP(H):quinone oxidoreductase-1 via NF-E2 related factor-2 activation in human epi-dermal keratinocytes // Journal of dermatological science. - 2011. - V. 62. - P. 147-153.

197. Piao M.S., Park J., Choi J., Lee D, Lee D.H, Yun S.J., Lee J.B., Lee S.C. Independent and Nrf2-independent induction of phase 2 detoxifying and antioxidant enzymes during keratinocyte differentiation // Archives of dermatological researches. - 2012. - V. 304. - P. 387-395.

198. Pines J. Protein kinases and cell cycle control // Seminars in Cell Biology. - 1994 . -№ 6: V. 5. - P. 399-408.

199. Polakowska R.R, Haake A.R. Apoptosis: the skin from a new perspective // Cell Death Differ. - 1994. -№ 1: V. 1. - P. 19-31.

200. Polakowska R.R, Haake A.R. Apoptosis: the skin from a new perspective. // Cell Death Differ.. - 1994. -№ 1: V. 1. - P. 19-31.

201. Pollak N, Dolle C, Ziegler M. The power to reduce: pyridine nucleotides - small molecules with a multitude of functions // Biochemical Journal. - 2007. - V. 402. - P. 205-218.

202. Polland T.D, Blanchoin L, Mullins R.D. Molecular mechanism contolling actin fdament dynamics in nonmuscle cell // Annual reviews of biophisics and biomolecular structures. - 2000. - V. 29. - P. 545-576.

203. Pollard T.D, Mooseker M.S. Direct measurement of actin polymerization rate constants by electron microscopy of actin filaments nucleated by isolated microvillus cores. // The journal of cell biology. - 1981. - P. 654-659.

204. Predersen S.F, Hoffman E.K, Mills J.W. The cytoskeleton and cell volume regulation // comparative biochemistry and physiology. - 2001. - V. 130. - P. 385-399.

205. Presland R.B, Dale B.A. Epithelial structural proteins of the skin and oral cavity: function in health and disease // Crit Rev Oral Biol Med. - 2000. - №4: V. 11. - P. 383-408.

206. Proksch E, Nissen H.P, Bremgartner M, Urquhart C. Bathing in a magnesium-rich Dead Sea salt solution improves skin barrier function, enhances skin hydration, and reduces inflammation in atopic dry skin // Int. J. Dermatol. - 2005. -№2: V. 44. - P. 151-157.

207. Raftopoulou M, Hall A. Cell migration: Rho GTPases lead the way // Developmental biology. - 2004. - V. 265. - P. 23-32.

208. Raj D, Brash D.E, Grossman D. Keratinocyte apoptosis in epidermal development and disease // J Invest Dermatol. - 2006. -№2: V. 126. - P. 243-257.

209. Rhee S.G., Bae Y.S., Lee S.R., Kwon J. Hydrogen peroxide: a key messenger that modulates protein phosphorylation through cysteine oxidation // Sei STKE. - 2000. -V. 53.

210. Rheinwald J.G., Green H. Serial cultivation of strains of human epidermal keratinocytes: the formation of keratinizing colonies from single cells // Cell. - 1975a . - V. 6. -P. 331-343.

211. Rheinwald J.G., Green H. Formation of a keratinizing epithelium in culture by a cloned cell line derived from a teratoma // Cell. - 1975b . -V. 6(3). - P. 317-330.

212. Rodriguez O.C., Schaefer A.W., Mandato C.A., Forscher P., Bement W.M., Wa-terman-Storer C.M. Conserved microtubule-actin interactions in cell movement and morphogenesis //Nat Cell Biol. - 2003. -V.5 (7). - P. 599-609.

213. Rosette C., Karin M. Ultraviolet light and osmotic stress: activation of the JNK cascade through multiple growth factor and cytokine receptors // Science. - 1996. - V. 274. - P. 1194-1197.

214. Ryle C.M., Breitkreutz D., Stark H.J., Leigh I.M., Steinert P.M., Roop D., Fusenig N.E. Density-dependent modulation of syn-thesis of keratins 1 and 10 in the human keratinocyte line HaCaT and in ras-transfected tumorigenic clones // Differentiation. - 1989. - V. 40. - P. 4254.

215. Sayers T.J. Targeting the extrinsic apoptosis signaling pathway for cancer therapy // Cancer Immunol. Immunother. 2011. -V. 60. -P. 1173-80.

216. Schäfer M., Farwanah H., Werner S. Nrf2 links epidermal barrier function with antioxidant defense // EMBO Molecular Medicine. - 2012. - V. 4. - P. 364-379.

217. Scholzen T., Gerdes J. The Ki-67 protein: from the known and the unknown // Journal of Cellular physiology. - 2000. - V. 182. - P. 311-322.

218. Schoop V.M., Mirancea N., Fusenig N.E. Epidermal organization end differentiation of HaCaT keratinocytes in organotypic coculture with human dermal fibroblasts // Journal of investigative dermatology. - 1999. - V. 112. - P. 343-353.

219. Segre J.A. Epidermal barrier formation and recovery in skin disorders // J Clin Invest. - 2006. - 116 (5). - P. 1150-1158.

220. Seitz C.S., Lin Q., Deng H., Khavati P.A. Alterations in NF-kB function in transgenic epithelial tissue demonstrate a growth inhibitory role for NF-kB // PNAS. - 1998. - V. 95. -P. 2307-2312.

221. Sena L.A., Chandel N.S. Physiological Roles of Mitochondrial Reactive Oxygen Species // Molecular cell. - 2012. - V. 48. - P. 158-167.

222. Shackelford R.E., Kaufmann W.K., Paules R.S. Cell cycle control, checkpoint mechanisms, and genotoxic stress // Environ Health Perspect. - 1999. -№1: V. 107. - P. 5-24.

223. Shani J, Sharon R, Koren R, Even-Paz Z. Effect of Dead-Sea brine and its main salts on cell growth in culture. // Pharmacology. - 1987. -№6: V. 35. - P. 339-347.

224. Sheikh-Hamad D, García-Pérez A, Ferraris J.D, Peters E.M, Burg M.B. Induction of gene expression by heat shock versus osmotic stress // Am J Physiol. - 1994. - V. 267. - P. 26-34.

225. Shekih M.S., Huang Y. Death receptor activation complexes: it takes two to activate TNF receptor 1 // Cell Cycle. - 2003. -№2: V. 6. - P. 550-552.

226. Shelton P, Jaiswal A. The transcription factor NF-E2-releted Factor 2 (Nrf2): a protooncogene? // The FASEB journal. - 2013. - V. 27. - P. 414-423.

227. Shimada N, Rios I, Moran H, Sayers B, Hubbard K. p38 MAP kinase-dependent regulation of the expression level and subcellular distribution of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein Al and its involvement in cellular senescence in normal human fibroblasts // RNA Biol. - 2009. -V. 6 (3). - P. 293-304.

228. Shimizu S, Kanaseki T, Mizushima N. et al. Role of Bcl-2 family proteins in a non-apoptotic programmed cell death dependent on autophagy genes // Nature Cell Bi-ology. -2004.-V.6. - P. 1221-1228.

229. Shintani T, Klionsky D.J. Autophagy in health and disease: a double-edged sword // Science. - 2004. - V. 306. - P. 990-995.

230. Simpson C.L, Patel D.M, Green K.J. Deconstructing the skin: cytoarchitectural determinants of epidermal morphogenesis // Nature Reviews Molecular Cell Biology. - 2011. -V. 12.-P. 565-580.

231. Sivamani R.K, Garcia M.S., Isseroff R.R. Wound re-epithelialization: modulating kerationcyte migration in wound healing // Frontiers in biosciences. - 2007. -V.12. - P. 28492868.

232. St^pkowski T.M, Kruszewski M.K. Molecular cross-talk between the NRF2/KEAP1 signaling pathway, autophagy and apoptosis // Free radical biology and medicine. -2011.-V. 50. - P. 1186-1195.

233. Sullivan K.D, Gallant-Behm C.L, Henry R.E, Fraikin J.L, Espinosa J.M. The p53 circuit board // Biochim Biophys Acta. - 2012. -№2: V. 1825. - P. 229-244.

234. Sun S.C. Non-canonical NF-kB signaling pathway // Cell Research. - 2011. - V. 21.-P. 71-85.

235. Susin S.A, Lorenzo H.K, Zamzami N. et al. Molecular characterization of mitochondrial apoptosis-inducing factor//Nature. - 1999. - V. 397. - P. 441-446.

236. Takada Y., Mukhopadhyay A., Kundu G. C. et al. Hydrogen Peroxide Activates NF-kB through Tyrosine Phosphorylation of IkBci and Serine Phosphorylation of p65 // The journal of biological chemistry. - 2003. - V. 278. - P. 24233-24241.

237. Takao J., Yudate T., Das A., Shikano S., Bonkobara M., Ariizumi K., Cruz P.D. Experssion of NF-kB in epidermis and the rela-tionship between NF-kB activation and inhibition of keratinocyte growth // British jour-nal of dermatology. - 2003. - V. 148. - P. 680-688.

238. Tamura R.E., de Vasconcellos J.F., Sarkar D., Libermann T.A., Fisher P.B., Zerbini L.F. GADD45 proteins: central players in tumorigenesis // Curr Mol Med.. - 2012. -№5: V. 12.-P. 634-651.

239. Tang A., Gilcherest B.A. Regulation of keratinocyte growth factor gene expression in human skin fibroblasts // Journal of dermatological Science. - 1996. - 11. - P. 41-50.

240. Tanida I., Ueno T., Kominami E. LC3 conjugation system in mammalian autoph-agy. // Int J Biochem Cell Biol. - 2004. -№12: V. 36. - P. 2503-2518.

241. Tian F.F., ZHang F.F., Lai X.D. et al. Nrf2-mediated protection against UVA radiation in human skin keratinocytes // Bioscience trends. - 2011. - V. 5. - P. 23-29.

242. Tonks N.K. Redox redux: revisiting PTPs and the control of cell // Cell. - 2005. -V. 121.-P. 667-670.

243. Trent J.F., Kirsner R.S. Tissue engineered skin: Apligraf, a bi-layered living skin equivalent // Int J Clin Pract. - 1998. -V.52 (6). - P. 408-413.

244. Tschachler E. Psoriasis: the epidermal component // Clinical Dermatology. - 2007. - V. 25. - P. 589-595.

245. Twentyman P.R., Luscombe M. A study of some variables in a tetrazolium dye (MTT) based assay for cell growth and chemosensitivity // Br J Cancer. - 1987. -№3: V. 56. - P. 279-285.

246. Uhlmann F., Bouchoux C., Lopez-Aviles S. A quantitative model for cyclin-dependent kinase control of the cell cycle: revisited // Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. -201 l.-V. 366. - P. 3572-3583.

247. Uruno A., Motohashi H. The Keapl-Nrf2 system as an in vivo sensor for electro-philes // Nitric Oxide. - 2011. - V. 25. - P. 153-160.

248. Vasiliev J.M., Gelfand I.M. Interactions of normal and neoplastic fibroblasts with the substratum // Ciba Found Symp. - 1973. -V.14. - P. 311-331.

249. Vermeulen K., Berneman Z.N., Van Bockstaele D.R. Cell cycle and apoptosis // Cell Pro 1 if. - 2003. -№3: V. 36. - P. 165-175.

250. Vousden K.H., Vande Woude G. F. The ins and outs of p53 // Nature Cell Biology. - 2000. -№ 2: V. 10. - P. 178-180.

251. Wakabayashi N, Shin S, Slocum S.L, Agoston E.S. Regulation of Notchl signaling by Nrf2: implications for tissue regeneration // Science signaling. - 2010a. -V.3. - P. 52.

252. Wakabayashi N, Itoh K, Wakabayashi J, Motohashi H, Noda S, Takahashi S, Imakado S, Kotsuji T, Otsuka F, Roop D. R, Harada T, Engel JD, Yamamoto M. Keapl-null mutation leads to postnatal lethality due to constitutive Nrf2 activation // Nature genetics. -2003.- V. 35.- P. 238-245.

253. Wakabayashi N, Slocum S.L, Skoko JJ. When Nrf2 talks, who's listening // AN-tioxidants and redox signaling. -2010b. - V. 13. - P. 1649-1663.

254. Waldegger S, Lang F. Cell volume and gene expression // The Journal of membrane biology. - 1998. - V. 162. - P. 95-100.

255. Wang K, Zhang T„ Dong Q, Nice E.C, Huang C„ Wei Y. Redox homeostasis: the linchpin in stem cell self-renewal and differentiation // Cell Death Dis. - 2013. - V. 4. - P. 110.

256. Wang L, Dai W, Lu L. Hyperosmotic stress-induced corneal epithelial cell death through activation of Polo-like kinase 3 and c-Jun // Invest Ophthalmol Vis Sci. - 2011. - 6: V. 52. - P. 3200 - 3206.

257. Wang P„ Huang S„ Wang F„ Ren Y„ Hehir M, Wang X, Cai J. Cyclic AMP-response element regulated cell cycle arrests in cancer cells // PLoS One. - 2013. -№6: V. 8. - P. 1-7.

258. Warskulat U, Reinen A, Grether-Beck S, Krutmann J, Haussinger D. The os-molyte strategy of normal human kertinocytes in maintaining cell homeostasis // Journal of investigative dermatology. - 2004. -№ 3: V. 123. - P. 516-521.

259. Watt F.M, Jones P.H. Expression and function of the keratinocyte integrins // Dev Suppl. - 1993. - P. 185-192.

260. Wehner F, Olsen H, Tinel H, Kinne-Saffran E„ Kinne R.K. Cell volume regulation: osmolytes, osmolyte transport, and signal transduction // Reviews of physiology, biochemistry and pharma-cology. - 2003. - V. 148. - P. 1-80.

261. Winterbourn C.C, Hampton M.B. Thiol chemistry and specificity in redox signaling // Free radical biology and medicine. - 2008. - V. 45. - P. 549-561.

262. Wittmann T, Waterman-Storer C.M. Cell motility: can Rho GTPases and microtubules point the way? // J Cell Sci. - 2004. -№ 21: V. 144. - P. 3795-3803.

263. Wu K.L, Khan S, Lakhe-Reddy S„ Wang L, Jarad G, Miller R.T, Konieczkowski M, Brown A.M., Sedor J.R, Schelling J.R. Renal tubular epithelial cell apopto-sis is associated with caspase cleavage of the NHE1 Na/H exchanger // American Journal of physiology. Renal physiology. - 2003. - V. 284. - P. 829-839.

264. Wu X., Quondamatteo F., Brakebusch C. Cdc42 expression in keratinocytes is required for the maintenance of the basement membrane in skin. // Matrix Biol. - 2006. - 8: V. 25. - P. 466-474.

265. Wullaert A., Bonnet M.C. NF-kB in the regulation of epithelial homeostasis and inflammation // Cell Research. - 2011. - V. 21. - P. 146-158.

266. Xia Z., Dickens M., Raingeaud J., Davis R.J., Greenberg M.E. Opposing effects of ERK and JNK-p38 MAP kinases on apoptosis // Science. - 1995. -№270: V. 5240. - P. 13261331.

267. Yan F.P., Chen Y.J., Huang X.H. Expression of beclinl and LC3 after rat's skin contusion // Fa Yi Xue Za Zhi. - 2007. - №1: V. 23. - P. 11-13.

268. Yang H.B., Song W., Chen L.Y., Li Q.F., Shi S.L., Kong H.Y., Chen P. Differential expression and regulation of prohibitin during curcumin-induced apoptosis of immor-talized human epidermal HaCaT cells // Int J Mol Med. - 2014 . - 3: V. 33. - P. 507-514.

269. Young A., Narita M., Ferreira M., Kirschner K., Sadaie M,. Darot J.F., Tavare S., Arakawa S., Shimizu S., Watt F.M., Narita M. Autophagy mediates the mitotic senes-cence transition // Genes and development. - 2009. - V. 23. - P. 798-803.

270. Yurchenco P. D. Basement membranes: cell scaffoldings and signaling platforms. // Cold Spring Harb Perspect Biol. - 2011. -№2: V. 3. - P. 1-27.

271. Zampetaki A., Zhang Z, Hu Y., Xu Q. Biomechanical stress induces IL-6 expression in smooth muscle cells via Ras/Racl-p38 MAPK-NF-kB signaling pathways // Am J Physiol Heart Circ Physiol. - 2005. - V. 288(6). - P. 2946-54.

272. Zuliani T., Denis V., Noblesse E., Schnebert S., Andre P., Dumas M., Ratinaud M.H. Hydrogen peroxide-induced cell death in normal human keratinocytes is differentiation dependent // Free radical biology and medicine. - 2005. - V. 38. - P. 307-316.