Механизмы нейротоксичности, вызванной активацией рецепторов глутамата в центральных и периферических нейронах крыс тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.01, кандидат наук Абушик, Полина Александровна

• Абушик, Полина Александровна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Абушик, Полина Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ...................................................................5

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ .................................................6

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ...........................................................12

1.1 Строение и функции глутаматергического синапса..............................12

1.2 Структурно-молекулярная организация рецепторов глутамата..............14

1.2.1 АМПА/КА-ионотропные рецепторы глутамата.........................17

1.2.2 ЫМОА-чувствительные ионотропные рецепторы глутамата..........20

1.2.3 Метаботропные рецепторы глутамата....................................25

1.3 Нейротоксическое действие глутамата...............................................28

1.4 Глутамат-индуцированная дисрегуляция кальциевого баланса клетки......30

1.5 Рецепторы глутамата в периферической нервной системе.....................34

1.6 Гомоцистеин, как эндогенный агонист рецепторов глутамата.................36

Глава 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДИКИ........................................................39

2.1. Приготовление первичных культур нейронов.....................................39

2.1.1. Первичная культура нейронов коры головного мозга крыс...............40

2.1.2. Первичная культура нейронов тригеминального ганглия крыс.........42

2.2. Идентификация нейронов и глиальных клеток в культурах....................43

2.2.1. Идентификация клеток в первичной культуре коры головного мозга крыс..........................................................................................43

2.2.2. Идентификация клеток в первичной культуре тригеминального ганглия крыс..............................................................................45

2.3. Флуориметрическая регистрация внутриклеточного Са" ......................46

2.4. Флуориметрическое определение митохондриального мембранного потенциала......................................................................................48

2.5. Регистрация токов нейронов методом локальной фиксации потенциала...49

2.6. Определение апоптотических и некротических клеток путем последовательного окрашивания акридиновым оранжевым и бромистым этидием.........................................................................................50

2.7. Порядок проведения экспериментов.................................................51

2.8. Обработка данных......................................................................53

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ......................................................................55

3.1. Исследование состава рецепторов глутамата, обеспечивающих вход Са2+ при действии агонистов рецепторов глутамата в нейронах первичной культуры коры мозга крыс...............................................................................55

3.1.1 Внутриклеточные Са" ответы и токи в нейронах при действии агонистов рецепторов глутамата МУГОА и АМПА/КА типа........................55

3.1.2. Зависимость внутриклеточных Са2+ ответов нейронов от Са2+ внеклеточного раствора..................................................................57

3.1.3. Вклад ЫМОА рецепторов различного субъединичного состава в генерацию внутриклеточного Са2+ сигнала.........................................58

3.1.4. Вклад АМПА рецепторов различного субъединичного состава в генерацию внутриклеточного Са2+ сигнала и интегральных токов.............60

3.2. Исследование нейротоксического эффекта гомоцистеина на нейроны первичной культуры коры мозга крыс...................................................63

3.2.1. Нейротоксический эффект долговременного действия гомоцистеина..............................................................................63

3.2.2. Внутрикелеточные Са~ ответы при кратковременном и долговременном действии гомоцистеина...................................................65

3.2.3. Интегральные токи, вызванные гомоцистеином....................................67

3.3. Исследование нейротоксического эффекта гомоцистеина на нейроны первичной культуры тригеминального ганглия крыс.................................69

3.3.1. Внутриклеточные Са2+ ответы при действии гомоцистеина............69

3.3.2. Интегральные токи, вызванные гомоцистеином............................72

3.3.3. Нейротоксический эффект долговременного действия гомоцистеина..............................................................................73

3.4. Сравнительная характеристика ответов нейронов коры и тригеминального ганглия крыс на гомоцистеин, МУЮА и глутамат................75

3.4.1. Внутриклеточные Са2+ ответы.................................................75

3.4.2. Митохондриальный мембранный потенциал................................78

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ....................................................................83

ВЫВОДЫ.......................................................................................93

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ..................................................................95

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АО акридиновый оранжевый

БЭ бромистый этидий

AM ПА а-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовая кислота

GPCR G-белок-связанный рецептор (G-protein coupled receptor)

[Ca2+]¡ концентрация внутриклеточного Са2+

Гли глицин

Глу глутамат

ГЦ гомоцистеин

1Р3 инозитол-трифосфат

КА каинат

Афт* мембранный митохондриальный потенциал

мГлуР5 метаботропный рецептор глутамата 5 типа

МД митохондриальная деполяризация

NMDA TV-мети л-О-аспартат

окд отсроченная кальциевая дисрегуляция

РКС протеинкиназа С

Rhol23 родамин 123

ЭПР эндоплазматический ретикулум

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы нейротоксичности, вызванной активацией рецепторов глутамата в центральных и периферических нейронах крыс»

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. L-глутамат (Глу) является основным возбуждающим медиатором центральной нервной системы (ЦНС) млекопитающих (Curtis et al., 1959), который обеспечивает проведение возбуждения от нейрона к нейрону в глутаматергических синапсах. Благодаря участию постсинаптических рецепторов Глу в синаптической пластичности, сам Глу вовлечен в такие когнитивные функции, как обучение и память. Однако в условиях гиперактивации различных типов рецепторов Глу, в нейронах могут развиваться нейродегенеративные процессы, связанные с нарушением Са2+ регуляции, которые запускают внутриклеточные сигнальные каскады, приводящие к гибели нейронов (Khodorov, 2004). Известно, что нейротоксичность Глу участвует в патогенезе таких социально значимых неврологических заболеваний как эпилепсия, ишемический инсульт, мигрень, боковой амилотрофический склероз, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона. В связи с этим, изучение механизмов нейротоксического действия Глу и агонистов его рецепторов является одним из наиболее актуальных направлений в современной нейробиолгии.

Известно, что в первую очередь, нейротоксическое действие Глу реализуется в глутамат-чувствительных нейронах ЦНС. Однако часть нейродегенеративных заболеваний, сопряженных с гиперакивацией рецепторов Глу развивается на периферии, в нейронах неглутаматергической природы. Тем не менее, вопрос экспрессии рецепторов Глу и механизмов нейротоксического действия Глу в тканях периферической нервной системы (ПНС) остается мало изученным.

Исследование механизмов развития патологических процессов на целом мозге и ПНС, затруднено из-за их сложной структурной организации и ограничений в применимости современных методов исследований. Большой прогресс в изучении многих аспектов нейродегенерации был достигнут в экспериментах на первичных культурах ткани различных отделов мозга (Bading et al., 1995; Kim, Рае, 1996; Kim et al., 1999), так как данный экспериментальный

подход позволяет контролировать внеклеточную среду и рост клеток, дает возможность для исследования внутриклеточных механизмов и межнейронных взаимодействий в нейронной сети. Тем не менее, остается открытым вопрос о сохранности структурно-функциональной специализации нейронов, выделенных из эмбриональной ткани и подверженных культивированию в течение нескольких дней. Являются ли нейроны, выращенные в искусственных условиях гомогенными по своим функциональным свойствам? - Исследование данного вопроса представляется весьма актуальным для правильной интерпретации результатов, полученных на первичной культуре нейронов, и их сопоставления с процессами, происходящими в нейронах мозга взрослых животных.

На сегодняшний день известно, что патогенез многих нейродегенеративных заболеваний сопряжен с увеличением концентрации гомоцистеина (ГЦ) в кровотоке и цереброспинальной жидкости (Kruman et al., 2002; Sachdev, 2005). Данная аминокислота может накапливаться в результате нарушения синтеза метионина и цистеина, вызванного недостатком фолиевой кислоты и витаминов группы В, или вследствие, генетически обусловленного полиморфизма — точечной мутации, заключающейся в замене с цитозина (С) на тимин (Т) в нуклеотиде (С677Т) гена 5'-10'-метилентетрагидрофолат редуктазы (Rozen 1997; Sachdev, 2005; Isobe, Terayama, 2010). Исследования последних лет показали, что ГЦ может взаимодействовать с сайтом связывания Глу или глицина NMDA рецептора (Poddar, Paul, 2013), а значит может быть рассмотрен как новый эндогенный активатор рецепторов Глу (Lipton et al., 1997). Известно, что чрезмерная активация NMDA рецепторов вызывает сильный окислительный стресс, и как следствие, сильную деполяризацию митохондрий (Reyes et al., 2012). Наряду с этим было показано, что в одних экспериментальных моделях, например в эпителиальных клетках, ГЦ вызывал окислительный эффект (Outinen et al., 1998), а в других, таких как нейроны и астроциты, оказывал восстанавливающий эффект (Loureiro et al., 2010). В связи с этим, вопрос вовлеченности ГЦ в индукцию окислительного стресса пока остается открытым.

Несмотря на то, что из-за актуальности для практической медицины изучение цитотоксического действия ГЦ является активно развивающимся направлением нейробиологии, нейротоксическое действие ГЦ, его вовлеченность в окислительный стресс и роль ГЦ в Са2+ сигнализации в центральных и периферических нейронах остаются мало изученными.

Цель исследования. В центральных и периферических нейронах крыс исследовать рецепторные механизмы нейротоксического действия агонистов рецепторов глутамата, вызывающие накопление Са2+ и изменение митохондриального мембранного потенциала.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие конкретные задачи исследования.

1. Изучить динамику увеличения концентрации кальция, вызванного активацией NMDA и АМПА рецепторов в нейронах коры мозга крыс in vitro.

2. С использованием избирательных блокаторов, изучить субъединичный состав NMDA и АМПА рецепторов, вовлеченных в генерацию кальциевых ответов в нейронах коры мозга крыс in vifro.

3. В нейронах коры мозга и тригеминального ганглия крыс в первичной культуре ткани исследовать нейротоксический эффект долговременного действия гомоцистеина.

4. В нейронах коры мозга и тригеминального ганглия крыс в первичной культуре сопоставить амплитудно-временные характеристики внутриклеточных кальциевых ответов на гомоцистеин, NMDA и глутамат.

5. Изучить изменения митохондриального мембранного потенциала (A<pniit)5 вызванные кратковременным действием гомоцистеина, NMDA и глутамата в нейронах первичной культуры коры мозга и тригеминального ганглия крыс.

Научная новизна. Исследованы Са ответы нейронов коры мозга крыс на каинат, который является сильным нейротоксическим агентом и избирательным агонистом рецепторов АМПА типа. Впервые обнаружено, что Са ответы при

действии каината развивались гораздо медленнее, чем при активации ЫМЕ)А рецепторов в нейронах коры мозга. Это обусловлено наличием АМПА рецепторов, которые обладают различной проводимостью для Са~ в зависимости от экспрессии в1иА2 субъединицы, что отражает функциональные характеристики нейрона. Таким образом, было впервые показано, что нейроны в первичной культуре являются гетерогенными и обладают морфофунциональной специализацией, характерной для нейронов коры мозга крыс.

Впервые показано, что нейротоксический эффект ГЦ определяется синергизмом активации ТчПУЮА рецепторов и метаботропных рецепторов глутамата, так как избирательные антагонисты каждого из этих рецепторов предотвращали гибель глутамат-чувствительных центральных нейронов, а также пуринергических и пептидергических периферических нейронов. Были впервые зарегистрированы интегральные трансмембранные токи, вызванные ГЦ в нейронах коры мозга и тригеминального ганглия крыс, и продемонстрировано, что они генерируются в результате активации ММ1)А рецепторов. Впервые было показано, что в отличие от Глу и МУПЭА, ГЦ индуцирует кратковременные быстрые кальциевые ответы осцилляторного типа и не вызывает деполяризацию мембраны митохондрий на начальных этапах нейротоксического действия в нейронах коры мозга и тригеминального ганглия крыс в первичной культуре ткани.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Нейроны коры мозга крыс в первичной культуре ткани, по экспрессии рецепторов Глу различного субъединичного состава, являются гетерогенными и обладают морфофункциональной специализацией, характерной для нейронов коры мозга крыс.

2. Несмотря на различную медиаторную природу синаптических сигналов нейронов коры мозга и тригеминального ганглия крыс, нейротоксический эффект гомоцистеина в обоих типах нейронов развивается через активацию ионотропных ЫМЕ)А рецепторов и метаботропных рецепторов глутамата 5 типа.

3. Гомоцистеин, в отличие от NMDA и глутамата, вызывает кратковременные быстрые кальциевые ответы осцилляторного типа и не вызывает падения митохондриального мембранного потенциала в нейронах коры мозга и тригеминального ганглия крыс в первичной культуре, а следовательно, не вызывает окислительный стресс на начальных этапах нейротоксического действия.

Теоретическая и практическая значимость. Работа имеет значение для фундаментальной науки в области исследования нейродегенеративных процессов, участвующих в патогенезе таких социально значимых заболеваний, как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона. Теоретическое значение работы состоит в расширении представлений о механизмах нейродегенерации, вызванной чрезмерной активацией рецепторов Глу. Результаты исследования могут быть полезны для понимания механизмов возникновения и развития нейродегенеративных состояний, неврологических расстройств в ЦНС и ПНС, а также для выявления возможных механизмов защиты нейронов от гибели.

Результаты работы могут быть использованы в курсах лекций для студентов биологических и медицинских факультетов университетов и медицинских институтов.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 14 печатных работ, 4 из которых статьи в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ для размещения материалов кандидатских диссертаций (в том числе 3 статьи в международных журналах), 10 тезисов докладов.

Апробация работы. Результаты исследования представлены на XXI и XII съезде физиологического общества им. И.М. Павлова (Калуга, 2010; Волгоград, 2013), на XVIII международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов-2011» (Москва, 2011), на четырнадцатом международном совещание и седьмой школе по эволюционной физиологии (Санкт-Петербург, 2011) на III Съезде Физиологов СНГ «Физиология и здоровье человека» (Украина, Ялта, 2011), на восьмом форуме европейской федерации нейробиологов 8th FENS Forum of Neuroscience 2012 (Испания, Барселона, 2012), на седьмом и восьмом

ежегодном симпозиуме Университета восточной Финляндии The Annual PostGraduate Symposium of the Doctoral Program in Molecular Medicine: Winter School (Финляндия, Нильсия, 2013, 2014) и на ежегодной встрече общества нейробиологов Neuroscience 2013 (США, Сан-Диего, 2013).

Структура и объём диссертации. Диссертация изложена на 113 страницах машинописного текста и состоит из общей характеристики работы, обзора литературы по исследуемой проблеме - глава 1, описания методики экспериментов - глава 2, результатов исследования - глава 3, обсуждения результатов экспериментов - глава 4, выводов и списка литературы, включающего 184 источника (из них 164 иностранных). Работа иллюстрирована 26 рисунками и 1 таблицей.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Строение и функции глутаматергического синапса В 1893 году появились первые сообщения о способе взаимодействия нервных клеток через специфические контакты или синапсы. Термин синапс был введен в 1897 году Чарльзом Шеррингтоном. А открытие синаптических контактов принадлежит испанскому ученому Рамон-и-Кахалю, который, благодоря использованию метода Гольджи (насыщение серебром нейронов), обнаружил у большинства нейронов два функционально разных отростка: дендрит и аксон. Он впервые обосновал морфологическую самостоятельность нейронов и глиальных клеток, а также показал, что в нервной системе отсутствуют синцитиальные отношения (Cheah, Watkins, 1965). Спустя 50 лет после открытий Кахаля стало очевидным, что передача нервного импульса осуществляется через синапсы, а ключевым компонентом такой передачи является наличие в мембране окончаний нейрона синаптических рецепторов.

Позже, при изучении влияния различных веществ на электрическую активность нейронов изолированного спинного мозга Куртис и Ваткинс сформировали гипотезу о медиаторной роли дикарбоновых аминокислот (Cheah, Watkins, 1965; Curtis, Johnston, 1974). В результате этих экспериментов было установлено, что Глу является основным возбуждающим медиатором в синапсах ЦНС позвоночных, и он удовлетворяет основные требования, необходимые для признания вещества медиатором. Открытие специфических рецепторов Глу стало определяющим феноменологическим признаком его медиаторной роли.

Глу является заменимой аминокислотой, которая не способна проникать через гематоэнцифалический барьер, т.е. не поступающей в мозг через кровь. Молекула глутаминовой кислоты имеет достаточно простую структуру НООС-CH2-CH2-CH(NH2)-COOH (Curtis, Johnston, 1974; Антонов и др., 1988; Калинина и др., 1989; Collingridge, Singer 1990). Её синтез происходит в основном внутри нейронов мозга, хотя небольшая часть Глу находится в глиальных клетках -астроцитах. Глу может быть синтезирован несколькими путями: из а-кетоглутарата с помощью прямого восстановительного аминирования или

трансаминирования, из глутамина ферментом глутаминазой, а также из орнитина ферментом орнитинаминотрансферазой (Петров и др., 1997). Известно, что глутаматергические синапсы широко распространены в большинстве отделов ЦНС, в частности, в коре больших полушарий мозга, в гиппокампе, черной субстанции, мозжечке, стриатуме, среднем мозге, гипоталамусе и в спинном мозге.

Переносчики Глу, которые являются интегральными белками плазматической мембраны, осуществляют транспорт-захват Глу из синаптической щели и его перенос внутрь глиальных клеток и нейронов (МаББОп е1 а1., 1999; Тапака 2000; Антонов, 2001). За счет функционирования данных переносчиков в синаптической щели поддерживается низкая концентрация медиатора (Ноздрачев и др., 2001; Никколс и др., 2003). В цитозоле нейронов и глиальных клеток концентрация Глу достигает 10 мМ. Известно, что благодаря энергии трансмембранных ионных градиентов происходит захват Глу против его химического градиента. Так как для и К+ (примерно 140 мМ во внеклеточной среде и около 10 мМ внутри клеток; и наоборот 130 мМ К+ внутри клеток и порядка 3 мМ снаружи) поддерживается самый большой электрохимический градиент между внеклеточной и внутриклеточной средой, молекулы Глу транспортируются в клетку совместно с ионами при этом происходит выход ионов К+. Доказательством этого служит опыт по замене ионов Ыа+ на ионы 1л+ в наружной среде, что приводило к блокированию транспорта Глу (Антонов 1989). Попав в нейроны, Глу накапливается в синаптических везикулах с помощью протонзависимых везикулярных транспортеров (рис. 1.1). Из глиальных клеток в нейроны Глу транспортируется с небольшими метаболическими превращениями. В астроцитах Глу превращается в глутамин за счет фермента глутаминсинтазы. Важно, что глутамин способен проходить через билипидные мембраны, неактивируя рецепторы Глу. Таким образом, глутамин захватывается нейронами из внеклеточного пространства. Митохондриальный фермент нейронов глутаминаза превращает глутамин обратно в Глу, кторорый снова попадает в синаптическую везикулу (МаэБоп е1 а!., 1999).

Глутаматергический синапс, подобно другим химическим синапсам, представляет собой сложное структурное образование, состоящее из пресинаптической мембраны (пресинапс, чаще всего это концевое разветвление аксона), постсинаптической мембраны (постсинапс, чаще всего это участок мембраны тела или дендрита другого нейрона), а также синаптической щели. Важным участником синаптической передачи являются глиальные клетки, поддерживающие локальный гомеостаз в синаптической щели.

Еще до того, как были выяснены многие существенные особенности процесса высвобождения медиатора, было установлено, что пресинаптические окончания проявляют спонтанную секреторную активность. Постоянно выделяемые небольшие порции медиатора вызывают в постсинаптической клетке токи, называемые спонтанными миниатюрными постсинаптическими токами. При исследовании нервно-мышечного синапса лягушки было обнаружено, что в мышце в области постсинаптической мембраны сами по себе, без всякого воздействия на нерв, через случайные промежутки времени возникают небольшие колебания потенциала (Рай, 1950). Высвобождение медиатора, несвязанное с нервным импульсом помогло установить его квантовый характер - в покое в химическом синапсе медиатор выделяется небольшими порциями (Зефиров, 2000).

1.2 Структурно-молекулярная организация рецепторов глутамата

о

В ЦНС находится порядка 10 глутаматергических нейронов. С помощью методов электрофизиологии и молекулярной биологии, было выявлено существование 4 типов глутаматных рецепторов. Среди 4 типов глутаматных рецепторов 3 типа являются ионотропными рецепторами и 1 тип метаботропным рецептором. К ионотропным рецепторам глутамата относятся: (уУ-метил-Э-аспартатные (ЫМЕ)А) рецептры, каинатные (КА) рецепторы и рецепторы 2-амино-3(3-гидрокси-5-метилизоксазол-4-ил) пропионовой (АМПА) кислоты. Эти

рецепторы являются лиганд-управляемыми ионными каналами. Современная классификация ионотропных рецепторов основана на их разной чувствительности к действию А^метил-Б-аспарагиновой кислоты, 2-амино-3(3-гидрокси-5-метилизоксазол-4-ил) пропионовой кислоты и каината. Все ионотропные рецепторы Глу являются тетрамерами. В соответствии с классификацией международной организации по изучению генома человека (HUGO, URL: http://www.genenames.org/) по фармакологии и структурной гомологии субъединицы ионотропных рецепторов Глу разделяют на: субъединицы GluAl — GluA4 (АМПА рецепторы), субъединицы GluKl - GluK5 (КА рецепторы), субъединицы GluNl,GluN2A-2D, NR3A-3B (NMDA рецепторы) и субъединицы GluDl, GluD2 (delta-глутаматнью рецепторы) (Sobolevsky et al., 2009). Метаботропные рецепторы глутамата разделяют на три группы (рис. 1.1): I группа, в основном экспрессируются на постсинапсе (mGluRl и mGluR5 подтипы), II группа (mGluR2, mGluR3 подтипы) и III группа (mGluR4, mGluR6-mGluR8 подтипы) метаботропных рецепторов глутамата, представлены на пресинаптическом окончании и участвуют в регуляции выброса Глу (Grueter, Winder, 2009).

Известно, что в нормальных условиях у млекопитающих все типы рецепторов Глу активируются самим Глу и, возможно, L-аспартатом (McBain, Mayer, 1994; Dingledine et al., 1999). В отличие от ЦНС позвоночных, у беспозвоночных рецепторы Глу могут формировать катионный или анионный канал, и при этом возможна регистрация как деполяризующего, так и гиперполяризующего ответа клеток при аппликации агонистов (Shinozaki 1988).

Данные о клонировании субъединиц рецепторов Глу (Hollmann et al., 1989) позволили узнать аминокислотные последовательности рецепторных субъединиц и их топологию в мембране. На данное время клонированно 18 субъединиц рецепторов Глу, для которых возможено редактирование, приводящие к изменению аминокислотной последовательности (Sobolevsky 2003; Traynelis et al., 2010). Известно, что субъединицы всех известных рецепторов Глу, включая

АМПА, каинатные, МУГОА и скЬа-глутаматные рецепторы, имеют подобную архитектуру (ТгаупеНз е1 а!., 2010).

Каинатный

рецептор

пресинапс

ь

-д. I

N3»

Каинатный А

[ рецептор .

мГлуР2/3

мГлУР4,6/8

О ©

Ф

К"

N3*- Са2+ Са2+ Иа^

СДКаинлтнь,и

рецептор

Глутамат

постсинапс

Рисунок 1.1. Схематическое представление глутаматергического синапса, с указанием возможного положения различных рецепторов глутамата. ЭПР - эндоплазматический ретикулюм, ЕААТ - транспортер глутамата. Объяснения в тексте.

Все ионотропные рецепторы Глу имеют одинаковую топологию строения, и являются мембранными протеинами, которые состоят из четырёх частей, образующих ионный канал. Субъединицы включают в себя четыре домена (рис. 1.2.а): внеклеточный Ы-терминальный домен, внеклеточный лиганд-связывающий домен, С-терминальный домен и трансмембранный домен, включающий в себя три сегмента и одну возвратную петлю (8оЬо1еузку е1 а1., 2009). Различные типы рецепторов Глу сформированы различными сочетаниями субъединиц. Так АМПА рецепторы состоят из четырех видов субъединиц, КА рецепторы и ИМОА рецепторы - из пяти (ОкщксНпе е! а1.,1999).

1.2.1 АМПА/КА-ионотропные рецепторы глутамата АМПА/КА рецепторы обладают гораздо более быстрой кинетикой активации, они вовлечены в генерацию быстрых возбуждающих постсинаптических потенциалов. При этом открывание ионных каналов АМПА/КА рецепторов не зависит от величины мембранного потенциала. Такие каналы относятся к потенциал-независимому типу и опосредуют потенциал-независимое возбуждение в нейрональных синапсах. АМПА рецепторный ионный канал может состоять из четырех различных субъединиц (С1иА1-С1иА4), в то время как КА рецептор может состоять из пяти различных типов субъединиц (01иК1-01иК5).

(а) (б)

С-терминальный домен

Рисунок. 1.2. Структура АМПА рецептора, (а) Структура субъединицы АМПА рецептора, (б) АМПА рецептор как тетрамерный комплекс, состоящий из четырех субъединиц GluRI,3,4 и GluR2.

Природный канал АМПА рецептора представляет собой тетрамерную структуру, состоящую из четырех субъединиц GluAl - GluA4, каждая из которых состоит из N-терминального домена, формирующего конструкцию рецептора, лиганд-связывающего домена. Этот домен закрывает канал, трех трансмембранных доменов (Ml, МЗ и М4), возвратной петли (М2), соединяющей

пору канала с цитоплазматическим С-терминальным доменом, который влияет на транспорт канала (рис. 1.2.а). Считается, что гетеромерный рецептор состоит из двух GluA2 субъединиц и двух других GluAl, GluA3 или GIuA4 (рис. 1.2.6) (Mansour et al., 2001; Greger et al., 2003; 2007; Isaac et al., 2007). Q/R-сайт, локализованный в поре канала над М2 доменом, оказывает сильное влияние на биофизические свойства АМПА рецептора, изменяя проводимость канала для двухвалентных катионов и его чувствительность к полиаминам (Jonas , Burnashev, 1995, Hume et al., 1991; Blaschke et al., 1993; Washburn, Dingledine, 1996). Q-сайт представлен глутамином и находится в GluAl, GluA3 и GluA4 субъединицах, R-сайт представлен аргинином только в GluA2 субъединице (рис. 1.2.6). АМПА рецепторы, не включающие в свой состав GluA2, обладают проводимостью для Са2+ и легко блокируются эндогенными внутриклеточными полиаминами (например, спермином). Каналы рецепторов, имеющих GluA2 субъединицу, пропускают только Na+ и К+, и нечувствительны к полиаминам. Таким образом, чувствительность к полиаминам, с последующим блокированием рецептора, определяется отсутствием или наличием GluA2 субъединицы (Washburn et al., 1997; Fleming, England, 2010).

KA рецепторы имеют пять типов субъединиц GluKl - GluK5, кодируемых генами GRIK1-GRIK5 соответственно (Dingledine et al., 1999). Структурно KA рецептор представляет собой комплекс, состоящий из четырех субъединиц. Важно, что субъединицы GluK4 и GluK5 могут формировать функциональный рецептор лишь в присутствии одной из GluKl-GluK3 субъединиц (Dingledine et al.,1999). Рецепторы KA, подобно АМПА рецепторам, имеют N-терминальный домен, лиганд-связывающий домен, сегменты М1-М4, включая возвратную петлю (М2). Ионный канал, сформированный КА рецептором, проницаем только для Na+ и К+. Открывание канала КА рецептора происходит быстрее, чем канала АМПА рецептора (Huettner 2003). В отличие от АМПА рецепторов, КА рецепторы играют второстепенную роль в передаче сигнала. Скорее, рецепторы КА принимают большее участие в синаптической пластичности (Contractor et al., 2000; Trussell, Fischbach, 1989).

Физиологическая роль рецепторов не-Щ/ЮА типа изучена не так хорошо, как ММЕ)А рецепторов, что объясняется отсутствием широкого набора специфических агонистов и антагонистов АМПА/КА типа рецепторов. КА является смешанным агонистом КА и АМПА рецепторов, при этом активируя, он не вызывает десенситизацию АМПА рецепторов (Ивкт е1 а1., 1986). Из наиболее известных конкурентных антагонистов АМПА/КА рецепторов можно назвать СЫС)Х (6-циано-7-нитрохиноксалин-2,3-дион), который селективно блокирует их в присутствии в среде глицина (Гли). Это происходит из-за большего сродства СЫС)Х к Гли-связывающему сайту в МуЮА рецепторно-ионофорном комплексе, чем в АМПА/КА рецепторе.

Впервые с использованием аргиотоксинабзб (НеНкге е! а1., 1996), он же -аргиопин (Гришин и др., 1986; Магазаник и др., 1986; Апктоу е1 а1., 1987), было показано, что эффективность блокады каналов АМПА рецепторов также, как и Са2+ проводимость, определяется отсутствием в структуре рецептора С1иА2 субъединицы. В частности, если в состав АМПА рецептора входит С1иА2, то канал непроницаем для Са2+ и все каналоблокаторы неэффективны. Эти закономерности справедливы для ИЭМ-1460 - блокатора Са" проницаемых АМПА рецепторов, не содержащих в1иА2 субъединицу (АпШпоу е1 а1., 1995; А^опоу е1 а1., 1998; Магазаник и др., 1984). Этот блокатор с ЕД50 около 1 мкМ блокирует канал Са2+-проницаемых АМПА рецепторов (Magazanik е1 а1., 1997). Для блокады каналов ЫМОА рецепторов и Са~ -непроницаемых АМПА рецепторов необходимы более чем на порядок большие концентрации ИЭМ-1460 (Ма§а2ашк е1 а1., 1997; Ап1:опоу, 1оЬп50п, 1996).

Известно, что разные типы нейронов коры и гиппокампа экспрессируют АМПА рецепторы различного субъединичного состава. В частности, пирамидные нейроны коры и гиппокампа экспрессируют АМПА рецепторы, содержащие С1иА2, а вставочные нейроны - АМПА рецепторы, не содержащие С1иА2 (ЗатоПоуа е1 а1., 1999). Использование избирательных блокаторов АМПА рецепторов позволяет соотнести типы действия ИЭМ-1460 на внутриклеточный Са2+ сигнал, вызванный гиперактивацией АМПА рецепторов с помощью КА, с

морфофункциональными типами нейронов коры (Angulo et al., 1997; Kondo et al., 1997; Kumar et al., 2002).

Для исследования нейротоксического действия Глу и агонистов широко применяются первичные культуры ткани. Однако вопрос гетерогенности в отношении эксспресии рецепторов Глу в нейронах первичной культуры коры мозга остается неясным и является одной из задач данной работы. Этот вопрос является принципиально важным с точки зрения нейробиологии, так как до сих пор не известно, сохраняют ли клетки в культуре ткани исходный субъединичный состав рецепторов Глу на плазматической мембране. К тому же мало изучена Са2+ регуляция при действии КА, как агониста АМПА/КА рецепторов. Этот вопрос также является предметом исследования данной работы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Абушик, Полина Александровна, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРЫТУРЫ

1. Абушик П. А., Большаков А. Е., Сибаров Д. А., Антонов С. М.

Гетерогенность механизмов кальциевого ответа на каинат и типы нейронов в первичной культуре коры мозга крыс // Биологические мембраны. 2011. Т. 28. № 1. С. 25 - 34.

2. Антонов С. М. Механизмы удаления глутамата как факторы,

ограничивающие его постсинаптическое действие / Физиология и биохимия глутаматергических синапсов. Ред. Мандельштам Ю. Е.. Л.: Наука. 1989. С. 110-121

3. Антонов С. М. Переносчики нейромедиаторов: рецепторная, транспортная и

канальная функция / Журн. эвол. биохим. и физиол. 2001. Т. 37. № 4. С. 248-252

4. Антонов С. М., Магазаник Л. Г. Неквантовое освобождение и активный

захват глутамата в нервных окончаниях насекомого СаШорЬога Уюта / ДАН СССР. 1989. Т. 304. № 2. С. 483 - 486

5. Антонов С. М., Шупляков О. В., Магазаник Л. Г., Веселкин Н. П., Волкова Т.

М., Гришин Е. В. Аргиопин как антагонист действия глутамата на спинальные мотонейроны лягушки / ДАН СССР. 1988. Т. 298. № 2. С. 505 -508

6. Гиниатуллин Р. А. Нейрофизиологические механизмы мигрени и новые

принципы патогенетического лечения / Казанский мед. ж. 2011. Т. 92. № 5. С. 728 - 735

7. Гришин Е. В., Волкова Т. М., Арсеньев А. С., Решетова О. С., Оноприенко В.

В., Магазаник Л. Г., Антонов С. М., Федорова И. М. Структурно-функциональная характеристика аргиопина - блокатора ионных каналов из яда паука Аг§юре 1оЬа1а / Биоорган, химия. 1986. Т. 12. № 12. С. 1121 -1124

8. Детлаф Т. А. Объекты биологии развития / М.: Наука. Под ред. Детлаф Т.А.

1975. С. 442-462

9. Евстратова А. А., Миронова Е. В., Дворецкова Е. А., Антонов С. М. Апоптоз

и рецепторная специфичность его механизмов при нейротоксическом действии глутамата / Росс, физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 2008, № 94, С. 380-393

10. Зефиров A. JI. Везикулярная гипотеза освобождения медиатора в синапсе /

Соросовский образовательный журн. 2000. Т. 6. № 9. С. 10-16

11. Кабак Я. М. Практикум по эндокринологии. Основные методики

экспериментально-эндокринологических исследований / М.: МГУ. 2-е изд. 1968.27 с.

12. Калинина Н. И., Курчавый Г. Г., Шупляков О. В., Веселкин Н. П., Антонов С.

М., Магазаник JT. Г. Гетерогенность возбуждающих синаптических входов в спинальных мотонейронах лягушки rana ridibunda / Журн. Эвол. Биохим. Физиол. 1989. Т. 25. № 6. С. 755 - 762

13. Магазаник Л.Г., Антонов С.М., Гмиро В.Е. Механизмы активации и

блокирования постсинаптической мембраны, чувствительной к глутамату / Биол. мембраны. 1984. Т. 1. № 2. С. 130 - 140

14. Магазаник Л.Г. Синаптические рецепторы - молекулярная основа

коммуникации нервных клеток / Вестник молодых ученых. 2004. Т. 2. Серия: науки о жизни. 2004. Т. 1. С. 100 - 112

15. Магазаник JL Г., Антонов С. М., Федорова И. М., Волкова Т. М., Гришин Е.

В. Действие яда паука Argiope lobata и его низкомолекулярного компонента - аргиопина на постсинаптические мембраны / Биол. мембраны 1986. № 3. С. 1204 - 1218

16. Николлс Дж. Г., Мартин А. Р., Валлас Б. Дж., Фукс П. А. От нейрона к мозгу

/М.: Едиториал УРСС, 2003. 671 с.

17. Ноздрачев А. Д., Баженов Ю. И., Баранникова И. А. Начала физиологии /

СПб: Лань, 2001. 1088 с.

18. Петров В.И., Пиотровский Л.Б., Григорьев И.А. Возбуждающие

аминокислоты / Волгоград: изд. Волг. мед. акад. 1997. 167 с

19. Сахаров П.П. Лабораторные мыши и крысы / М. Медгиз. 1933. 92 с.

20. Эскин И.А. Основы физиологии эндокринных желез / М.: «Высшая школа».

1968. 296 с.

21. Abushik P.A., Sibarov D.A., Eaton M.J., Skatchkov S.N., Antonov S.M. Kainate-

induced calcium overload of cortical neurons in vitro: Dependence on expression of AMPAR GluA2-subunit and down-regulation by subnanomolar ouabain // Cell Calcium. 2013. V. 54. № 2. P. 95 - 104.

22. Agnati L. F., Genedani S., Rasio G., Galantucci M., Saltini S., Filaferro M., Franco

R., Mora F., Ferré S., Fuxe K. Studies on homocysteine plasma levels in Alzheimer's patients. Relevance for neurodegeneration / J. Neural. Transm. 2005 V. 112№ l.P. 163-169

23. Alagarsamy S., Rouse S. Т., Junge C., Hubert G. W., Gutman D., Smith Y., Conn

P. J. NMDA-induced phosphorylation and regulation of mGluR5 / Pharmacol. Biochem. Behav. 2002. V.73. № 2. P. 299 - 306

24. Angulo M. C., Lambolez В., Audinant E., Hestrin S., Rossier J. Subunit

composition, kinetic, and permeation of AMPA receptors in single neocortical nonpyramidal cells / J. Neurosci. 1997. V. 17. № 17. P. 6685 - 6696

25. Antonov S. M., Gmiro V. E., Johnson J. W. Binding sites for permeant ions in the

channel of NMDA receptors and their effects on channel block / Nature Neurosci. 1998. V. 1. N. 6. P. 451 - 461

26. Antonov S. M., Grishin E. V., Magazanik L. G., Shupliakov О. V., Veselkin N. P.

Argiopine blocks glutamate responses and sensorimotor transmission in motoneurones of isolated frog spinal cord / Neurosci. Lett. 1987. V. 83. № 1-2. P. 179-184

27. Antonov S. M., Johnson J. W. Permeant ion regulation of N-methyl-D-aspartate

receptor channel block by Mg2+/ Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. V. 96. № 25. P.14571 - 14576

28. Antonov S. M., Johnson J. W. Voltage-dependent interaction of open-channel

blocking molecules with gating of NMDA receptors in rat cortical neurons / J. Physiol. 1996. V. 493. № Pt2. P. 425-445

29. Antonov S. M., Johnson J. W., Lukomskaya N. Y., Potapyeva N. N., Gmiro V. E.,

Magazanik L. G. Novel adamantane derivatives act as blockers of open ligand-gated channels and as anticonvulsants / Mol. Pharmacol. 1995. V. 47. № 3. P. 558-567

30. Antonov S. M., Magazanik L. G. Intense non-quantal release of glutamate in an

insect neuromuscular junction /Neurosci. Lett. 1988. V. 93. № 2-3. P. 204 - 208

31. Bading H., Segal M. M., Sucher N. J., Dudek H., Lipton S. A., Greenberg M. E. N-

methyl-D-aspartate receptors are critical for mediating the effects of glutamate on intracellular calcium concentration and immediate early gene expression in cultured hippocampal neurons / Neuroscience. 1995. V. 64. № 3. P. 653 - 664.

32. Bahn S., Volk B., Wisden W. Kainate receptor gene expression in the developing

rat brain / J. Neurosci. 1994. V. 14. № 9. P. 5525 - 5547

33. Basbaum A. I., Bautista D. M., Scherrer G., Julius D. Cellular and molecular

mechanisms of pain / Cell. 2009. V. 139. № 2. P. 267 - 284

34. Bindokas V. P., Miller R. J. Excitotoxic degeneration is initiated at non-random

sites in cultured rat cerebellar neurons / J. Neurosci. 1995. V. 15, № 11. P. 6999 -7011

35. Blaschke M., Keller B. U., Rivosecchi R., Hollmann M., Heinemann S., Konnerth

A. A single amino acid determines the subunit-specific spider toxin block of alpha-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionate kainate receptor channels / Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. V. 90. № 4. P. 6528 - 6532

36. Boldyrev A.A., Johnson P. Homocysteine and its derivatives as possible

modulators of neuronal and non-neuronal cell glutamate receptors in Alzheimer's Disease // Journal of Alzheimer's Disease. 2007. V. 11. P: 219-228

37. Brattstrom L., Wilcken D. E. Homocysteine and cardiovascular disease: cause or

effect? / Am. J. Clin. Nutr. 2000 V. 72. № 2. P. 315 - 323

38. Brustovetsky N., Dubinsky J. M. Limitations of cyclosporin A inhibition of the

permeability transition in CNS mitochondria / J. Neurosci. 2000. V. 20. № 22. P. 8229 - 8237

39. Budd S. L., Nicholls D. G. Mitochondria, calcium regulation, and acute glutamate

excitotoxicity in cultured cerebellar granule cells / J. Neurochem. 1996. V. 67. №6. P. 2282-2291

40. Burnashev N., Monyer H., Seeburg P. H., Sakmann B. Divalent ion permeability

of AMPA receptor channels is dominated by the edited form of a single subunit / Neuron. 1992. V. 8. № 1. P. 189 - 198

41. Burnashev N., Zhou Z., Neher E., Sakmann B. Fractional calcium currents

throught recombinant GluR channels of the NMDA, AMPA and kainite receptor subtypes / J. Physiol. 1995. V. 485. № Pt2. P. 403-418

42. Carlton S. M., Hargett G. L. Colocalization of metabotropic glutamate receptors in

rat dorsal root ganglion cells / J. Comp. Neurol. 2007. V. 501. № 5. P. 780 - 789

43. Carozzi V, Marmiroli P, Cavaletti G. Focus on the role of Glutamate in the

pathology of the peripheral nervous system / CNS Neurol Disord Drug Targets. 2008. V. 7. №4. P. 348-360

44. Carpenter D.O. NMDA receptors and the molecular mechanisms of excitotoxicity

in Oxidative Stress at Molecular, Cellular and Organ Levels / Eds P. Johnson, A. Boldyrev. Research Signpost, Trivandrum. 2002. P:77 - 88

45. Chauvel V., Vamos E., Pardutz A., Vecsei L., Schoenen J., Multon S. Effect of

systemic kynurenine on cortical spreading depression and its modulation by sex hormones in rat / Exp. Neurol. 2012. V. 236. № 2. P. 207 - 214

46. Cheah K.S., Watkins J.C. Further syntheses in the study of structure-activity

relationships of neuropharmacologically active amino acids / J. Med. Chem. 1965. V. 8. №6. P. 821-824

47. Choi D.W. Glutamate neurotoxicity in cortical cell culture is calcium dependent /

Neurosci Lett. 1985. V. 58. N. 3. P. 293 - 297

48. Choi D.W. Calcium: still center-stage in hypoxic-ischemic neuronal death /

Trends Neurosci. 1995. V. 18. № 2. P. 58 - 60

49. Choi D.W. Excitotoxic cell death / J. Neurobiol. 1992. V. 23. № 9. P. 1261 - 1276

50. Choi D.W. Ionic dependence of glutamate neurotoxicity / J. Neurosci. 1987. V. 7.

№2. P. 369-379

51. Christine C.W., Choi D.W. Effects of zinc on NMDA receptor mediated channel

currents in cortical neurons / J. Neurosci. 1990. V.10. N. 1. P. 108 - 116

52. Collingridge G. L., Peineau S, Howland J. G., Wang Y. T. Long-term depression

in the CNS / Nat Rev Neurosci. 2010 V. 11 № 7. P. 459 - 473.

53. Collingridge G.L., Singer W. Excitatoiy amino acid receptors and synaptic

plasticity / Trends Pharmacol. Sci. 1990. V. 11. № 7. P. 290 - 296

54. Conn P. J., Pin J. P. Pharmacology and functions of metabotropic glutamate

receptors / Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 1997 V. 37. P. 205 - 237

55. Contractor A., Swanson G.T., Sailer A., O'Gorman S., Heinemann S.F.

Identification of the kainate receptor subunits underlying modulation of excitatory synaptic transmission in the CA3 region of the hippocampus / J. Neurosci. 2000. V. 20. № 22. P. 8269 - 8278

56. Curtis D. R., Johnston G. R. Amino acid transmitters in the mammalian central

nervous system / Ergebn. Physiol. 1974. V. 69. P. 97-188

57. Curtis D. R., Phillis J. W., Watkins J. C. Chemical excitation of spinal neurons /

Nature. 1959. V. 183. № 4661. P. 611 - 622

58. deGroot J., Zhou S., Carlton S. M. Peripheral glutamate release in the hindpaw

following low and high intensity sciatic stimulation / Neuroreport. 2000. V. 11. №3.P. 497-502

59. Dichter M. A. Rat cortical neurons in cell culture: culture methods, cell

morphology, electrophysiology, and synapse formation / Brain Research. 1978. V. 149. №2. P. 279-293

60. Dingledine R., Borges K., Bowie D., Traynelis S. The glutamate receptor ion

channels / Pharmacol. Rev. 1999. V. 51. № 1. P. 7 - 61

61. DiPolo R., Beauge L. An ATP-dependent Na+/Mg2+ countertransport is the only

mechanism for Mg extrusion in squid axons / Biochim. Biophys Acta. 1988. V. 946, № 2, P. 424 - 428

62. Duchen M. R. Mitochondria, calcium-dependent neuronal death and

neurodegenerative disease / Pflugers Arch. 2012. V. 464. № 1. P. Ill - 121

63. Eimerl S., Schramm M. The quantity of calcium that appears to induce neuronal

death / J. Neurochem. 1994. V. 62. № 3. P. 1223 - 1226

64. Fatt P., Katz B. Some observations on biological noise / Nature. 1950. V. 166. №

4223. P. 567-598

65. Fleming J. J., England P. M. AMPA receptors and synaptic plasticity: a chemist's

perspective / Nat Chem Biol. 2010. V. 6. № 2. P. 89 - 97

66. Ganapathy P. S., White R. E., Ha Y., Bozard B. R., McNeil P. L., Caldwell R. W.,

Kumar S., Black S. M., Smith S. B. The role of N-methyl-D-aspartate receptor activation in homocysteine-induced death of retinal ganglion cells / Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2011. V. 52. № 8. 5515-5524 67.. Greger I. H., Khatri L., Kong X., Ziff E. B. AMPA receptor tetramerization is mediated by Q/R editing / Neuron. 2003. V. 40. № 4. P. 763 - 774

68. Grueter B. A., Winder D. G. Metabotropic Glutamate Receptors (mGluRs):

Functions / Encyclopedia for Neuroscience. Elselvier. 2009. P. 795 - 800

69. Hamill O. P., Marty A., Neher E., Sakmann B., Sigworth F. J. Improved patch-

clamp techniques for high-resolution current recording from cells and cell-free membrane patches / Pflugers Arch. 1981. V. 391. № 2. P. 85-100

70. Han E. B., Stevens C. F. Development regulates a switch between post- and

presynaptic strengthening in response to activity deprivation / Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2009. V. 106. № 26. P. 10817 - 10822

71. Hartley D. M., Kurth M. C., Bjerkness L., Weiss J. H., Choi D. W. Glutamate

receptor-induced 45 Ca2+ accumulation in cortical cell culture correlates with subsequent neuronal degeneration / J. Neurosci. 1993. V. 13. № 5. P. 1993 — 2000

72. Herlitze S., Raditsch M., Ruppersberg J.P., Jahn W., Monyer H., Schoepfer R.,

Witzemann V. Argiotoxin detects molecular differences in AMPA receptor channels/Neuron. 1996. V. 10. N. 12. P. 1131 - 1140

73. Hollmann M., O'Shea-Greenfield A., Rogers S.W., Heinemann S. Cloning by

functional expression of a member of the glutamate receptor family / Nature 1989. V. 342. № 6250 P. 643 - 648

74. Huettner J.E. Kainate receptors and synaptic transmission / Prog. Neurobiol. 2003.

V. 70. №. 5. P. 387-407

75. Hume R.I., Dingledine R., Heinemann S.F. Identification of a site in glutamate

receptor subunits that controls calcium permeability / Science. 1991. V. 253. № 5023. P. 1028-1031

76. Ichikawa M., Muramoto K., Kobayashi K., Kawahara M., Kuroda Y. Formation

and maturation of synapses in primary cultures of rat cerebral cortical cells: an electron microscopic study / Neurosci Res. 1993. V. 16. № 2. P. 95-103

77. Isaac J.T., Ashby M., McBain C J. The role of the GluR2 subunit in AMPA

receptor function and synaptic plasticity / Neuron. 2007. V. 54. № 6. P. 859 -871

78. Isobe C., Terayama Y. A remarkable increase in total homocysteine concentrations

in the CSF of migraine patients with aura / Headache. 2010. V. 50. № 10. P. 1561- 1569

79. Jara-Prado A., Ortega-Vazquez A., Martinez-Ruano L., Rios C., Santamaría A.

Homocysteine-induced brain lipid peroxidation: effects of NMDA receptor blockade, antioxidant treatment, and nitric oxide synthase inhibition / Neurotox. Res. 2003. V. 5. № 4. p. 237 - 243

80. Johnson J.W., Ascher P. Glycine potentiates the NMDA response in cultured

mouse brain neurons / Nature. 1987. V. 325. № 6104. P. 529 - 531

81. Jonas P., Burnashev N. Molecular mechanisms controlling calcium entry through

AMPA-type glutamate receptor channels / Neuron. 1995. V. 15.№ 5. P. 987 -990

82. Jones M.V., Westbrook G.L. The impact of receptor desensitization on fast

synaptic transmission / Trends Neurosci. 1996. V. 19. № 3. P. 96 - 101

83. Joosten E., van den Berg A., Riezler R., Naurath H. J., Lindenbaum J., Stabler S.

P., Allen R. H. Metabolic evidence that deficiencies of vitamin B-12 (cobalamin), folate, and vitamin B-6 occur commonly in elderly people / Am. J. Clin. Nutr. 1993. V. 58. № 4. P. 468 - 476

84. Keast J. R., Stephensen T. M. Glutamate and aspartate immunoreactivity in dorsal

root ganglion cells supplying visceral and somatic targets and evidence for peripheral axonal transport/ J. Comp. Neurol. 2000. V. 424. № 4. P. 577 - 587

85. Khodorov B. Glutamate-induced deregulation of calcium homeostasis and

mitochondrial dysfunction in mammalian central neurons / Progr. Biophys. Molec. Biol. 2004. V. 86. №. 2. P. 279 - 351

86. Khodorov B., Pinelis V., Storozhevykh T., Vergun O., Vinskaya N. Dominant role

of mitochondria in protection against a delayed neuronal Ca2+ overload induced by endogenous excitatory amino acids following a glutamate pulse / FEBS Lett. 1996. V. 393. № l. P. 135-138

87. Kim W. K., Choi Y. B., Rayudu P. V., Das P., Asaad W., Arnelle D. R., Stamler J.

S., Lipton S. A. Attenuation of NMDA receptor activity and neurotoxicity by nitroxyl anion, NO- /Neuron. 1999. V. 24. № 2. P.461 -469.

88. Kim W. K., Pae Y. S. Involvement of N-methyl-D-aspartate receptor and free

radical in homocysteine-mediated toxicity on rat cerebellar granule cells in culture /Neurosci. Lett. 1996 V. 216. № 2. P. 117-120

89. Kiskin N. I., Krishtal O. A., Tsyndrenko A. Ya. Excitatory amino acid receptors in

hippocampal neurons: kainate fails to desensitize them / Neurosci. Lett. 1986. V. 63. №3. P. 225-230

90. Kiss J. P., Szasz B. K., Fodor L., Mike A., Lenkey N., Kurko D., Nagy J., Vizi E.

S. GluN2B-containing NMDA receptors as possible targets for the neuroprotective and antidepressant effects of fluoxetine / Neurochem Int. 2012. V. 60. №2. P. 170-176

91. Kondo M., Sumino R., Okado H., Combinations of AMPA receptor subunit

expression in individual cortical neurons correlate with expression of specific calcium-binding proteins / J. Neurosci. 1997. V. 17. № 5. P 1570 - 1581

92. Kruman I. I., Kumaravel T. S., Lohani A., Pedersen W. A., Cutler R. G., Kruman

Y., Haughney N., Lee J., Evans M., Mattson M. P. Folic acid deficiency and homocysteine impair DNA repair in hippocampal neurons and sensitize them to

amyloid toxicity in animal models of Alzheimer's disease. J. Neurosci. 2002. V. 22. №5. P. 1752- 1762

93. Kuhn W., Hummel T., Woitalla D., Muller T., Plasma homocysteine and MTHFR

C677T genotype in levodopa-treated patients with PD / Neurology. 2001. V. 56. №2. P. 281 -282

94. Kumar S.S., Bacci A., Kharazia V., Huguenard J.R. A developmental switch of

AMPA receptor subunits in neocortical pyramidal neurons / J. Neurosci. 2002. V. 22. №8. P. 3005-3015

95. Kung L. H., Gong K., Adedoyin M., Ng J., Bhargava A., Ohara P. T., Jasmin L.

Evidence for glutamate as a neuroglial transmitter within sensory ganglia / PLoS One. 2013 V. 8. № 7. P. e68312

96. Kunishima N., Shimada Y., Tsuji Y., Sato T., Yamamoto M., Kumasaka T.,

Nakanishi S., Jingami H., Morikawa K. Structural basis of glutamate recognition by a dimeric metabotropic glutamate receptor / Nature. 2000 V. 407. N. 6807. P. 971-977

97. Lakhan S. E., Avramut M., Tepper S. J. Structural and functional neuroimaging in

migraine: insights from 3 decades of research / Headache. 2013. V. 53. № 1. P. 46-66

98. Lea P. M., Custer S. J., Vicini S., Faden A. I. Neuronal and glial mGluR5

modulation prevents stretch-induced enhancement of NMDA receptor current / Pharmacol Biochem Behav. 2002 V. 73. № 2. P. 287 - 298

99. Lea R., Colson N., Quinlan S., Macmillan J., Griffiths L. The effects of vitamin

supplementation and MTHFR (C677T) genotype on homocysteine-lowering and migraine disability / Pharmacogenet. Genomics. 2009 V. 19. № 6. P. 422 - 428

100. Lee J. S., Ro J. Y. Peripheral metabotropic glutamate receptor 5 mediates

mechanical hypersensitivity in craniofacial muscle via protein kinase C dependent mechanisms / Neuroscience. 2007. V. 146. № 1. P. 375 - 383

101. Lipton S. A. Ischemic cell death in brain neurons / Physiol. Rev. 1999. V. 79, № 4.

P. 1431 - 1537

102. Lipton S. A., Kim W. K., Choi Y. B., Kumar S., D'Emilia D. M., Rayuda P. V.,

Arnelle D. R., Stamler J. S. Neurotoxicity associated with dual actions of homocysteine at the N-methyl-D-aspartate receptor / Proc. Natl. Acad.. Sci. USA 1997. V. 94. № 11. P. 5923 - 5928

103. Li-Smerin Y., Johnson J. W. Kinetics of the block by intracellular Mg" of the

NMDA-activated channel in cultured rat neurons / Journal of Physiology. 1996. V. 491. № l.P. 121-135

104. Lo F. S., Zhao S. N-methyl-D-aspartate receptor subunit composition in the rat

trigeminal principal nucleus remains constant during postnatal development and following neonatal denervation / Neuroscience. 2011. № 178. P. 240 - 249

105. Loureiro S. O., Romao L., Alves T., Fonseca A., Heimfarth L., Moura Neto V.,

Wyse A. T., Pessoa-Pureur R. Homocysteine induces cytoskeletal remodeling and production of reactive oxygen species in cultured cortical astrocytes / Brain Res. 2010. № 1355. P. 151 - 164

106. Lu S. C. Regulation of glutathione synthesis / Mol. Aspects Med. 2009. V. 30. №

1-2. P. 42 - 59

107. Magazanik L.G., Buldakova S.L., Samoilova M.V., Gmiro V.E., Mellor I.R.,

Usherwood P.N. Block of open channels of recombinant AMPA receptors and native AMPA/kainite receptors by adamantine derivatives / J. Physiol. 1997. V. 505. № Pt3. P. 655-663

108. Malin S. A., Davis B. M., Molliver D. C. Production of dissociated sensory neuron

cultures and considerations for their use in studying neuronal function and plasticity / Nat. Protoc. 2007. V. 2. № 1. P. 152 - 160

109. Mansour M., Nagarajan N., Nehring R.B., Clements J.D., Rosenmund C.

Heteromeric AMPA receptors assemble with a preferred subunit stoichiometry and spatial arrangement / Neuron. 2001. V. 32. № 5. P. 841 - 853

110. Masson J., Sagne C., Hamon M., Mestikawy S. A. Neurotransmitter transporters in

the central nervous system / Pharmacol. Rev. 1999. V. 51. № 3. P.439 - 464

111. Matte C., Monteiro S. C., Calcagnotto T., Bavaresco C. S., Netto C. A., Wyse A.

T. In vivo and in vitro effects of homocysteine on Na+,K+-ATPase activity in

parietal, prefrontal and cingulate cortex of young rats / Int. J. Dev. Neurosci. 2004. V. 22. №4. P. 185- 190

112. Mayer M. L., Westbrook G. L., Guthrie P. B. Voltage-dependent block by Mg2+ of

NMDA response in spinal chord neurons / Nature, 1984. V. 309. № 5965. P. 261-263

113. Mayer M. L., Westbrook G. L. Permeation and block of N-methyl-D-aspartic acid

receptor channels by divalent cations in mouse cultured central neurons / J. Physiol. 1987. V. 394. P. 501 - 527

114. McBain C.J., Mayer M.L. N-methyl-D-aspartic acid receptor structure and

function / Physiol. Rev. 1994. V. 74. № 3. P. 723 - 760

115. Meldrum B. Amino acids as dietary excitotoxins: a contribution to understanding

neurodegenerative disorders / Brain Res. 1993. V. 18. № 3. P. 293 - 314

116. Messlinger K. Migraine: where and how does the pain originate? / Exp. Brain Res.

2009. V. 196. № l.P. 179-193

117. Miller K. E., Richards B. A., Kriebel R. M. Glutamine-, glutamine synthetase-,

glutamate dehydrogenase- and pyruvate carboxylase-immunoreactivities in the rat dorsal root ganglion and peripheral nerve / Brain Res. 2002. V. 945. № 2. P. 202-211

118. Mironova E. V., Evstratova A. A., Antonov S. M. A fluorescence vital assay for

the recognition and quantification of excitotoxic cell death by necrosis and apoptosis using the confocal microscopy on neurons in culture / J. Neurosci. Methods. 2007. V. 163. № 1. P. 1 - 8

119. Moskowitz M. A. Genes, proteases, cortical spreading depression and migraine:

impact on pathophysiology and treatment / Funct. Neurol. 2007. V. 22. № 3. P. 133-136

120. Moutin E., Raynaud F., Roger J., Pellegrino E., Homburger V., Bertaso F.,

Ollendorff V., Bockaert J., Fagni L., Perroy J. Dynamic remodeling of scaffold interactions in dendritic spines controls synaptic excitability / J. Cell Biol. 2012. V. 198. №2. P. 251 -263

121.Nanou E., Kyriakatos A., Kettunen P., El Manira A. Separate signalling mechanisms underlie mGluRl modulation of leak channels and NMDA receptors in the network underlying locomotion / J. Physiol. 2009 V. 587. № Ptl2. P. 3001-3008

122. Nicholls D. G., Scott I. D. The regulation of brain mitochondrial calcium-ion

transport. The role of ATP in the discrimination between kinetic and membrane-potential-dependent calcium-ion efflux mechanisms / Biochem J. 1980. V. 186, № 3, P. 833 - 839

123. Nicholls, D. G., Budd, S. L. Mitochondria and neuronal survival / Physiol. Rev.

2000. V. 80. № 1. P. 315-360

124. Nowak L., Bregestovski P., Ascher P., Herbet A., Prochiantz A. Magnesium gates

glutamate-activated channels in mouse central neurons / Nature, 1984. V. 307. № 5950. P.462 - 465

125. Ohara P. T., Vit J. P., Bhargava A., Romero M., Sundberg C., Charles A. C.,

Jasmin L. Gliopathic pain: when satellite glial cells go bad / Neuroscientist. 2009 V. 15. №5. P. 450-463

126. Oliveira A. L., Hydling F., Olsson E., Shi T., Edwards R. H., Fujiyama F., Kaneko

T., Hokfelt T., Cullheim S., Meister B. Cellular localization of three vesicular glutamate transporter mRNAs and proteins in rat spinal cord and dorsal root ganglia / Synapse. 2003 V. 50. № 2. P. 117 - 129

127. Oterino A., Toriello M., Valle N., Castillo J., Alonso-Arranz A., Bravo Y., Ruiz-

Alegria C., Quintela E., Pascual J. The relationship between homocysteine and genes of folate-related enzymes in migraine patients / Headache 2010. V. 50. № 1. P. 99-168

128. Outinen P. A., Sood S. K., Liaw P. C. Y., Sarge K. D., Maeda N., Hirsh J., Ribau

J., Podor T. J., Weitz J. I., Austin R. C. Characterization of the stress-inducing effects of homocysteine / Biochem. J. 1998. V. 332. № Ptl. P. 213-221

129. Pachernegg S., Strurz-Seebohm N., Hollmann M. GluN3 subunit-containing

NMDA receptors: not just one-trick ponies / Trends Neurosci. 2012. V. 35.№ 4.P. 240 - 249

130. Paoletti P., Neyton J., Ascher P. Glycine-independent and subunit-specific

potentiation of NMDA responses by extracellular Mg" / Neuron, 1995. V. 15. №5. P. 1109-1120

131.Parpura V., Verkhratsky A. Astroglial amino acid-based transmitter receptors / Amino Acids. 2013. V. 44. № 4. P. 1151 - 1158

132. Parsons C. G., Dunysz W., Quack G. Glutamate in CNS disoders as a target for

drug development: an uptake / Drug news perspect. 1998. V. 11. № 9. P. 523 -569

133. Perna A. F., Ingrosso D., De Santo N. G. Homocysteine and oxidative stress /

Amino Acids 2003. V. 25. № 3-4. P. 409 - 417

134. Pietrobon D. and Moskowitz M. A. Pathophysiology of migraine / Annu. Rev.

Physiol. 2013. № 75. P. 365 - 391 .

135. Poddar R., Paul S. Homocysteine-NMDA receptor-mediated activation of

extracellular signal-regulated kinase leads to neuronal cell death / J. Neurochem. 2009 V. 110. № 3. P. 1095 - 1106

136. Poddar R., Paul S. Novel crosstalk between ERK МАРК and p38 МАРК leads to

homocysteine-NMDA receptor-mediated neuronal cell death / J. Neurochem. 2013. V. 124. № 4. P. 558 - 570

137. Qian A., Antonov S. M., Johnson J. W. Modulation by permeant ions of Mg(2+)

inhibition of NMDA-activated whole-cell currents in rat cortical neurons / J. Physiol. 2002. V. 538. N. 1. P. 65 - 77

138. Rae M. G., Martin D. J., Collingridge G. L., Irving A. J. Role of Ca2+ stores in

metabotropic L-glutamate receptor-mediated supralinear Ca~ signaling in rat hippocampal neurons/ J. Neurosci. 2000 . V. 20. № 23. P. 8628 - 8636

139. Reyes R. C., Brennan A. M., Shen Y., Baldwin Y., Swanson R. A. Activation of

neuronal NMDA receptors induces superoxide-mediated oxidative stress in neighboring neurons and astrocytes. J. Neurosci. 2012. V. 32. № 37. P. 12973 -12978

140. Rossi D. J., Oshima Т., Attwell D. Glutamate release in severe brain ischemia is

mainly by reversed uptake / Nature. 2000. V. 403. № 6767. P. 316 - 325

141.Rozen R. Genetic predisposition to hyperhomocysteinemia: deficiency of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) / Thromb. Haemost. 1997 V. 78. № l.P. 523-526

142. Sachdev P. S. Homocysteine and brain atrophy / Prog. Neuropsychopharmacol.

Biol. Psychiatry. 2005. V. 29. № 7, 1152-1161

143. Samoilova M. V., Buldskova S. L., Vorobjev V. S., Sharonova I. N., Magazanik L.

G. The open channel blocking drug, IEM-1460, reveals functionally distinct alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate receptors in rat brain neurons /Neurosci. 1999. V. 94. P. 261 - 268

144. Sato K., Kiyama H., Park H. T., Tohyama M. AMPA, KA and NMDA receptors

are expressed in the rat DRG neurons / Neuroreport. 1993. V. 4. № 11. P. 1263 -1265

145. Shinozaki H. Pharmacology of the glutamate receptor / Prog. Neurobiol. 1988. V.

30. №5. P. 399-435

146. Shi Q., Savage J. E., Hufeisen S. J., Rauser L., Grajkowska E., Ernsberger P.,

Wroblewski J. T., Nadeau J. H., Roth B. L. L-homocysteine sulfinic acid and other acidic homocysteine derivatives are potent and selective metabotropic glutamate receptor agonists / J. Pharmacol. Exp. Ther. 2003 V. 305. № l.P. 131 - 142

147. Sibarov D. A., Bolshakov A. E., Abushik P. A., Krivoi I. I., Antonov S. M.

Na+,K+-ATPase functionally interacts with the plasma membrane Na+,Ca2+ exchanger to prevent Ca~ overload and neuronal apoptosis in excitotoxic stress / J. Pharmacol. Exp. Ther. 2012. V. 343. № 3. P. 596 - 607

148. Sibrian-Vazquez M., Escobedo J. O., Lim S., Samoei G. K., Strongin R. M.

Homocystamides promote free-radical and oxidative damage to proteins / Proc. Natl. Acad. Sci. USA .2010. V. 107. № 2. P. 551 - 554

149. Simonetti M., Fabbro A., D'Arco M., Zweyer M., Nistri A., Giniatullin R.,

Fabbretti E. Comparison of P2X and TRPV1 receptors in ganglia or primary culture of trigeminal neurons and their modulation by NGF or serotonin / Mol. Pain. 2006. №2. P. 1-15

150. Sinor J. D., Du S., Venneti S., Blitzblau R. C., Leszkiewicz D. N., Rosenberg P.

A., Aizenman E. NMDA and glutamate evoke excitotoxicity at distinct cellular locations in rat cortical neurons in vitro / J. Neurosci. 2000. V. 20. № 23. P. 8831 -8837

151. Sladeczek F., Pin J. P., Recasens M., Bockaert J., Weiss S. Glutamate stimulates

inositol phosphate formation in striatal neurons / Nature. 1985. V. 317. N. 6039. P. 717-719

152. Sobolevsky A. I., Rosconi M. P., Gouaux E. X-ray structure, symmetry and

mechanism of an AMPA-subtype glutamate receptor / Nature. 2009. V. 462. № 7274. P. 745 - 756

153. Sobolevsky A. K. Channel block of glutamate receptors. Recent. Research.

developments of physiology / Editor Pandalai S.G.. 2003. Kerala. India. Research signpost, P. 1-38

154. Stabler S. P., Marcell P. D., Podell E. R., Allen R. H., Savage D. G., Lindenbaum

J. Elevation of total homocysteine in the serum of patients with cobalamin or folate deficiency detected by capillary gas chromatography-mass spectrometry / J. Clin. Invest. 1988. V. 81. № 2. P. 466 - 474

155. Stout A. K., Raphael H. M., Kanterewicz B. I., Klann E., Reynolds I. J. Glutamate-

induced neuron death requires mitochondrial calcium uptake / Nat. Neurosci. 1998. V. 1. №. 5. P. 366-373

156. Sugiyama H., Ito I., Hirono C. A new type of glutamate receptor linked to inositol

phospholipid metabolism / Nature. 1987. V. 325. № 6104. P. 531 - 533

157. Surtees R., Bowron A., Leonard J. Cerebrospinal fluid and plasma total

homocysteine and related metabolites in children with cystathionine beta-synthase deficiency: the effect of treatment / Pediatr Res. 1997 V. 42. № 5. P. 577-582

158. Szatkowski M., Barbour B., Attwell D. Non-vesicular release of glutamate from

glial cells by reversed electrogenic glutamate uptake / Nature. 1990. V. 348. № 6300. P. 443 - 446

159. Sylantyev S., Savtchenko L. P., Ermolyuk Y., Michaluk P., Rusakov D. A. Spike-

driven glutamate electrodiffusion triggers synaptic potentiation via a homer-dependent mGluR-NMDAR link / Neuron 2013. V. 77. № 3. P. 528 - 541

160. Takano T., Tian G. F., Peng W., Lou N., Lovatt D., Hansen A. J., Kasischke K. A.,

Nedergaard M. Cortical spreading depression causes and coincides with tissue hypoxia / Nat. Neurosci. 2007. V. 10. № 6. P. 754 - 762

161.Tanaka K. Functions of glutamate transporters in the brain / Neuroscience. research. 2000. V. 37. № 1. P. 15 - 19

162. Tenneti L., D'Emilia D. M., Troy C. M., Lipton S. A. Role of caspases in N-

methyl-D-aspartate-induced apoptosis in cerebrocortical neurons / J. Neurochem. 1998. V. 71. № 3. P. 946 - 959

163. Tozzi A., de lure A., Di Filippo M., Costa C., Caproni S., Pisani A., Bonsi P.,

Picconi B., Cupini L. M. , Materazzi S., Geppetti P., Sarchielli P., Calabresi P. Critical role of calcitonin gene-related peptide receptors in cortical spreading depression. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2012. V. 109. № 46. P. 18985 - 18990

164. Traynelis S. F., Wollmuth L. P., McBain C. J., Menniti F. S., Vance K.M., Ogden

K.K., Hansen K.B., Yuan H., Myers S.J., Dingledine R. Glutamate Receptor Ion Channels: Structure, Regulation, and Function / Pharmacol. Rev. 2010. V. 62. № 3. P. 405-496

165. Trussell L. O., Fischbach G. D. Glutamate receptor desensitization and its role in

synaptic transmission / Neuron. 1989. V. 3. № 3. P. 209 - 218

166. Turman J. E. Jr., Lee O. K., Chandler S. H. Differential NR2A and NR2B

expression between trigeminal neurons during early postnatal development / Synapse. 2002. V. 44. № 2. P. 76 - 85

167. Ueland P. M., Refsum H., Beresford S. A., Vollset S. E. The controversy over

homocysteine and cardiovascular risk / Am. J. Clin. Nutr. 2000. V. 72. № 2. P. 324-332

168. Vergun, O., Han, Y. Y., Reynolds, I. J. Glucose deprivation produces a prolonged

increase in sensitivity to glutamate in cultured rat cortical neurons / Exper. Neurol. 2003. V. 183, № 2. P. 682 - 694

169. Vergun, O., Sobolevsky, A.I., Yelshansky, M.V., Keelan, J., Khodorov, B.I.,

Duchen, M.R. Exploration of the role of reactive oxygen species in glutamate neurotoxicity in rat hippocampal neurones in culture / J. Physiol. 2001. V. 531. № Ptl. P. 147-163

170. Wanaka A., Shiotani Y., Kiyama H., Matsuyama T., Kamada T., Shiosaka S.,

Tohyama M. Glutamate-like immunoreactive structures in primary sensory neurons in the rat detected by a specific antiserum against glutamate / Exp. Brain Res. 1987. V. 65. № 3. P. 691 - 694

171. Wang L.Y., MacDonald J.F. Modulation by magnesium of the affinity of NMD A

receptors for glycine in murine hippocampal neurons / J. Physiol. 1995. V. 486. № Ptl. P. 83-95

172. Washburn M.S., Dingledine R. Block of alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-

isoxazolepropionic acid (AMPA) receptors by polyamines and polyamine toxins / J. Pharmacol. Exp. Ther. 1996. V. 278. № 2. P. 669 - 678

173. Washburn M.S., Nürnberger M., Zhang S., Dingledine R. Differential dependence

on GluR2 expression of three characteristic features of AMPA receptors / J. Neurosci. 1997. V. 17. № 24. P. 9393 - 9406

174. White R. J., Reynolds I. J. Mitochondria and Na+/Ca2+ exchange buffer glutamate-

induced calcium loads in cultured cortical neurons / J. Neurosci. 1995. V. 15. № 2. P. 1318-1328

175. Whittemore E. R., Ilyin V. I., Woodward R. M. Antagonism of N-methyl-D-

aspartate receptors by sigma site ligands: potency, subtype-selectivity and mechanisms of inhibition / J. Pharmacol. Exp. Ther. 1997 V. 282. № 1. P. 326 -338

176. Willcockson H., Valtschanoff J. AMPA and NMDA glutamate receptors are found

in both peptidergic and non-peptidergic primary afferent neurons in the rat / Cell Tissue Res. 2008. V. 334. № 1. P. 17 - 23

177. Williams K. Ifenprodil discriminates subtypes of the N-methyl-D-aspartate

receptor: selectivity and mechanisms at recombinant heteromeric receptors / Mol. Pharmacol. 1993 V. 44. № 4. p. 851 - 859

178. Yang C. Q., Wei Y. Y., Leng Y. X., Zhong C. J., Zhang Y. S., Wan Y., Duan L. P.

Vesicular glutamate transporter-3 contributes to visceral hyperalgesia induced by Trichinella spiralis infection in rats / Dig. Dis. Sci. 2012. V. 57. № 4. P. 865 -872

179. Yeganeh F., Nikbakht F., Bahmanpour S., Rastegar K., Namavar R.

Neuroprotective Effects of NMDA and Group I Metabotropic Glutamate Receptor Antagonists Against Neurodegeneration Induced by Homocysteine in Rat Hippocampus: In Vivo Study / J. Mol. Neurosci. 2013. V. 50. № 3. P. 551 -557

180. Yu S. P., Sensi S. L., Canzoniero L. M., Buisson A., Choi D. W. Membrane-

delimited modulation of NMDA currents by metabotropic glutamate receptor subtypes 1/5 in cultured mouse cortical neurons / J. Physiol. 1997 V. 499. № Pt3.P. 721 -732

181.Zelenin A. V. Fluorescence microscopy of lysosomes and related structures in living cells / Nature. 1966 V. 212. № 5060. P. 425 - 426

182. Zhou Q., Sheng M. NMDA receptors in nervous system diseases /

Neuropharmacology. 2013. № 74. P. 69 - 74

183. Zhong J., Russell S. L., Pritchett D. B., Molinoff P. B., Williams K. Expression of

mRNAs encoding subunits of the N-methyl-D-aspartate receptor in cultured cortical neurons / Mol. Pharmacol. 1994. V. 45. № 5. P. 846 - 853

184. Zoccolella S., Bendotti C., Beghi E., Logroscino G. Homocysteine levels and

amyotrophic lateral sclerosis: A possible link /Amyotroph. Lateral. Scler. 2010. V. 11. № 1-2. P. 140-147