Маннозосвязывающий лектин и факторы активности нейтрофильного фагоцитоза у больных с ОКС. Влияние на течение и прогноз по данным двухлетнего проспективного наблюдения тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.05, кандидат наук Лосин, Илья Евгеньевич

• Лосин, Илья Евгеньевич
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Лосин, Илья Евгеньевич

Оглавление

1 Список сокращений

2 Введение

3 Цель исследования

4 Задачи исследования

5 Научная новизна

6 Практическая значимость

7 Обзор литературы

7.1 Патофизиология ОКС

7.2 Иммунная система и атеросклероз

7.3 Врожденный иммунитет и сердечно-сосудистые заболевания

7.4 Маннозо-связывающий лектин

7.4.1 Факторы, определяющие уровень МВЬ в сыворотке крови

7.4.2 Роль МВЬ при неинфекционных заболеваниях

7.4.3 МВЬ и сердечно-сосудистые заболевания

7.5 Фагоцитарные факторы и сердечно-сосудистые заболевания

7.6 Заключение

8 Материалы и методы

8.1 Диагностические критерии ОКС

8.2 Критерии исключения из исследования:

8.3 Лечение больных с ОКС

8.4 Исходные характеристики групп:

8.5 Методы исследования

8.6 Иммунологические методы

8.7 Статистический анализ

9 Результаты

9.1 Сравнительный анализ уровня МВЬ у больных с ОКС

9.1.1 Уровень МВЬ у больных с ОКС, ОКСпЗТ и ОКСбп8Т и в контроле

9.1.2 Уровень МВЬ в зависимости от размера и локализации инфаркта миокарда

9.1.3 Уровень МВЬ у больных с ОКС в зависимости от пола и возраста больных

9.1.4 Уровень МВЬ в зависимости от наличия факторов риска ИБС

9.2 Сравнительный анализ уровня фагоцитарных факторов у больных с ОКС

9.2.1 Уровень фагоцитарных факторов у больных с ОКС и в контроле

9.2.2 Уровень фагоцитарных факторов в зависимости от пола и возраста

больных

9.2.3 Уровень фагоцитарных факторов в зависимости от размера и локализации инфаркта миокарда

9.2.4 Уровень фагоцитарных факторов в зависимости от наличия факторов риска ИБС

9.3 Корреляционный анализ

9.4 Влияние уровня МВЬ и фагоцитарных факторов на прогноз по данным двухлетнего проспективного наблюдения

9.5 Анализ влияния МВЬ на прогноз по данным двухлетнего проспективного наблюдения. Первичная конечная точка

9.5.1 Уровень МВЬ у больных с неблагоприятными исходами и неосложненным течением. Первичная конечная точка

9.5.2 Анализ влияния уровня МВЬ на прогноз по методу Каплан-Мейера

9.5.3 Сравнительный анализ влияния МВЬ и Т1М1 индекса на прогноз

9.5.4 Уровень МВЬ у больных с ОКСпБТ неблагоприятными исходами и неосложненным течением

9.5.5 Уровень МВЬ у больных с ОКСбпБТ с неблагоприятными исходами и неосложненным течением

9.6 Анализ влияния МВЬ на прогноз по данным двухлетнего проспективного наблюдения. Вторичная конечная точка

9.6.1 Уровень МВЬ у больных с неблагоприятными исходами и неосложненным течением. Вторичная конечная точка

9.6.2 Анализ влияния уровня МВЬ на прогноз по методу Каплан-Мейера

9.6.3 Уровень МВЬ у больных с ОКСп8Т с неблагоприятными исходами и неосложненным течением. Вторичная конечная точка

9.6.4 Уровень МВЬ у больных с ОКСбп8Т с неблагоприятными исходами и неосложненным течением. Вторичная конечная точка

9.7 Анализ влияния МВЬ на прогноз по данным двухлетнего проспективного наблюдения. Сердечно-сосудистая смертность

9.7.1 Уровень МВЬ у больных с неблагоприятными исходами и неосложненным течением. Конечная точка сердечно-сосудистая смертность

9.7.2 Анализ влияния МВЬ на сердечно-сосудистую смертность у больных с ОКС

9.8 Влияние фагоцитарных факторов на прогноз по данным двухлетнего проспективного наблюдения. Первичная конечная точка

9.8.1 Уровень фагоцитарных факторов у больных с неблагоприятными исходами и неосложненным течением. Первичная конечная точка

9.8.1 Анализ влияния ФАН на прогноз по методу Каплан-Мейера

9.8.1 Анализ влияния ФЧ на прогноз по методу Каплан-Мейера

9.8.1 Анализ влияния ФР на прогноз по методу Каплан-Мейера

9.8.1 Сравнительный анализ влияния МВЬ и фагоцитарных факторов на прогноз. Первичная конечная точка

9.8.2 Сравнительный анализ влияния фагоцитарных факторов и Т1М1 на прогноз. Первичная конечная точка

9.8.3 Уровень факторов активности нейтрофильного фагоцитоза у больных с ОКСп8Т с неблагоприятными исходами и неосложненным течением

9.8.4 Анализ влияния факторов активности нейтрофильного фагоцитоза на прогноз у больных с ОКСп8Т по методу Каплан-Мейера

9.8.5 Уровень факторов активности нейтрофильного фагоцитоза у больных с ОКСбпБТ с неблагоприятными исходами и неосложненным течением

9.9 Анализ влияния факторов активности нейтрофильного фагоцитоза на прогноз по данным двухлетнего проспективного наблюдения. Вторичная конечная точка

9.9.1 Уровень факторов активности нейтрофильного фагоцитоза у больных с неблагоприятными исходами и неосложненным течением. Вторичная конечная точка

9.9.1 Анализ влияния ФАН на прогноз по методу Каплан-Мейера

9.9.1 Анализ влияния ФЧ на прогноз по методу Каплан-Мейера

9.9.1 Анализ влияния ФР на прогноз по методу Каплан-Мейера

9.9.2 Уровень факторов активности нейтрофильного фагоцитоза у больных с ОКСп8Т у больных с неблагоприятными исходами и неосложненным течением. Вторичная конечная точка

9.9.3 Анализ влияния ФАН на прогноз у больных с ОКСпБТ по методу Каплан-Мейера

9.9.4 Анализ влияния ФЧ на прогноз у больных с ОКСпБТ по методу Каплан-Мейера

9.9.5 Анализ влияния ФР на прогноз у больных с ОКСпБТ по методу Каплан-Мейера

9.9.6 Уровень факторов активности нейтрофильного фагоцитоза у больных с ОКСбпЗТ с неблагоприятными исходами и неосложненным течением. Вторичная конечная точка

9.10 Анализ влияния факторов активности нейтрофильного фагоцитоза на прогноз по данным двухлетнего проспективного наблюдения. Конечная точка сердечно-сосудистая смертность

9.10.1 Уровень факторов активности нейтрофильного фагоцитоза у выживших и умерших за время наблюдения больных

9.10.2 ЯОС-анализ для факторов активности нейтрофильного фагоцитоза. Сердечно-сосудистая смертность

9.10.3 Анализ влияния факторов активности нейтрофильного фагоциттоза на прогноз по методу Каплан-Мейера

10 Обсуждение

10.1 Уровень факторов активности нейтрофильного фагоцитоза у больных с ОКС

10.2 Влияние уровня факторов активности нейтрофильного фагоцитоза на прогноз у больных с ОКС

10.3 Уровень МВЬ у больных с ОКС и в контроле

10.4 Прогностическая значимость уровня МВЬ у больных с ОКС по данным двухлетнего проспективного наблюдения

11 Выводы

12 Практические рекомендации

13 Список литературы

1 Список сокращений

ИБС - Ишемическая болезнь сердца

ОКС — острый коронарный синдром

OKCnST - острый коронарный синдром с подъемом сегмента ST

OKC6nST - острый коронарный синдром без подъема сегмента ST

ЧКВ - чрескожное коронарное вмешательство

ИМ - инфаркт миокарда

ССС — сердечно-сосудистая смертность

НК - недостаточность кровообращения

ЧСС — частота сердечных сокращений

MBL — маннозо-связывающий лектин

MASP - маннозо-связывающий лектин- ассоциированная сериновая протеаза

ФАН — фагоцитарная активность нейтрофилов

ФЧ - фагоцитарное число

ФР - фагоцитарный резерв

РП - реперфузионное повреждение

СРБ - С-реактивный белок

BNP - натрийуретический пептид

АСБ — атеросклеротическая бляшка

ГМК — гладкомышечная клетка

ФВ - фракция выброса

ЛПНП - липопротеиды низкой плотности

ОШ - отношение шансов

ОР - относительный риск

ДИ - доверительный интервал

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Маннозосвязывающий лектин и факторы активности нейтрофильного фагоцитоза у больных с ОКС. Влияние на течение и прогноз по данным двухлетнего проспективного наблюдения»

2 Введение.

Актуальность проблемы. Ишемическая болезнь сердца (ИБС), прежде всего, острый коронарный синдром (ОКС) - инфаркт миокарда и нестабильная стенокардия, являются ведущей причиной смертности и инвалидизации населения развитых стран. Так, в Европе на долю ОКС и ишемических инсультов приходится около половины всех случаев смерти и 23% случаев утраты трудоспособности [1]. Морфологическим субстратом ОКС в большинстве случаев является внутрикоронарный тромб, формирующийся на поверхности поврежденной атеросклеротической бляшки. Процессы повреждения, или «дестабилизации», атеросклеротической бляшки сложны и обусловлены взаимодействием ряда факторов: преобладанием в бляшке липидного ядра, истончением фиброзной капсулы и снижением синтеза в ней коллагена гладкомышечными клетками, изменением активности металлопротеиназ и т.д. Согласно результатам многочисленных исследований последних лет, возникновение ОКС в значительной степени связано с воспалительными процессами в атеросклеротической бляшке. Гипотеза воспалительной природы атеросклероза впервые была предложена Вирховым более 100 лет назад [2]. Однако, только в последние два десятилетия получены доказательства, что воспаление играет ключевую роль в развитии и прогрессировании атеросклероза и его клинических проявлений [3]. Подтверждением этого является обнаружение в «нестабильных» бляшках активированного комплемента, моноцитов, макрофагов, дендритных клеток и активированных Т-лимфоцитов, приводящих к повреждению эндотелия и внутрисосудистому тромбообразованию. Как следствие, у больных с ОКС в периферической крови обнаруживаются признаки системной воспалительной реакции: повышение уровня маркеров воспаления (С-реактивного белка) и цитокинов (интерлейкинов и т.д.), лейкоцитоз, нейтрофилия. В настоящее время в литературе опубликованы результаты целого ряда исследований, в которых

выявлена четкая связь между уровнем различных маркеров воспаления и риском развития неблагоприятных осложнений у больных с ОКС.

Последние годы проведено большое количество исследований по изучению маркеров воспаления, цитокинов при ИБС и ОКС. В тоже время факторы врожденного клеточного и гуморального иммунитета в этой области изучены недостаточно.

Факт лейкоцитоза и нейтрофилии в раннем сроке ИМ показан давно. Есть данные о важной прогностической роли лейкоцитоза у больных с ОКС. Одной из основных функций нейтрофилов является фагоцитоз. Фагоцитоз, открытый Мечниковым И. в 1882 г., является одной из важнейшей составляющей иммунного ответа. Фагоцитоз традиционно делят на 8 стадий: 1. приближение к объекту фагоцитоза в результате хемотаксиса; 2. адгезия; 3. активация мембраны; 4. погружение; 5. образование фагосомы; 6.слияние фагосомы и лизосомы; 7. киллинг и расщепление объектов фагоцитоза; 8. выброс продуктов деградации. Нейтрофилы, наряду с моноцитами, являются основными фагоцитами крови. В клинической практике для оценки фагоцитоза используют несколько параметров: фагоцитарная активность нейтрофилов, фагоцитарное число, фагоцитарный резерв и др. Данные о фагоцитарной функции нейтрофилов у больных с ОКС малочисленны. Представляет интерес влияние функциональной активности нейтрофилов на развитие и прогноз ОКС.

Роль факторов гуморального звена врожденного иммунитета при ОКС

также активно изучается в последние десятилетия. Одной из наиболее

важных реакций неспецифического иммунного ответа является активация

комплемента. Существует 3 основных способа активации комплемента:

классический, альтернативный и лектиновый. Триггером для активации

лектинового пути активации комплемента является маннозо-связывающий

лектин (mannose-binding lectin, MBL). Если роль MBL в антиинфекционном

иммунитете хорошо изучена( дефицит MBL приводит к одному из самых

часто встречающихся иммунтодефицитов и как следствие частых

8

инфекционных поражениях у детей), то при сердечно-сосудистых заболеваниях роль МВЬ остается непонятной.

3 Цель исследования

Изучить уровень MBL и факторов фагоцитарной активности

нейтрофилов у больных с ОКС, оценить связь этих показателей с прогнозом заболевания по данным двухлетнего проспективного наблюдения.

4 Задачи исследования

1. Сравнить уровень MBL у больных с ОКС и в контроле.

2. Сравнить уровень факторов активности нейтрофильного фагоцитоза (фагоцитарная активность нейтрофилов, фагоцитарное число, фагоцитарный резерв) у больных с ОКС и в контроле.

3. Оценить влияние на уровень MBL и факторов активности нейтрофильного фагоцитоза демографических показателей, факторов риска ИБС.

4. Оценить корреляцию между уровнем MBL и факторами активности нейтрофильного фагоцитоза с уровнем СРБ и BNP у больных с ОКС.

5. Оценить прогностическое значение MBL у больных с ОКС по данным двухлетнего проспективного наблюдения.

6. Оценить прогностическое значение факторов активности нейтрофильного фагоцитоза (фагоцитарная активность нейтрофилов, фагоцитарное число, фагоцитарный резерв) у больных с ОКС по данным двухлетнего проспективного наблюдения.

5 Научная новизна

Впервые в рамках проспективного исследования с двухлетним периодом наблюдения проведена оценка прогностической значимости уровня MBL и факторов фагоцитарной активности нейтрофилов у больных с ОКС. Определены разделяющие значения, позволяющие использовать изучаемые параметры для стратификации риска больных с ОКС.

Показано, что MBL и факторы фагоцитарной активности нейтрофилов обладают предсказательной способностью у больных с ОКС.

6 Практическая значимость

МВЬ и факторы нейтрофильного фагоцитоза (ФАН, ФЧ, ФР) могут быть использованы в клинической практике как предикторы двухлетнего прогноза у больных с ОКС наряду с общепринятыми показателями.

7 Обзор литературы

7.1 Патофизиология ОКС.

Процессы атерогенеза дестабилизации АСБ не рассматриваются как

нарушение отложения липопротеинов в артериальной стенке. В настоящее время доказано, что рост и прогрессированием АСБ происходит под воздействием воспалительных механизмов, которые запускаются системами и врожденного, и приобретенного иммунитета.

Надрыв и разрыв фиброзной капсулы АСБ с последующим тромбозом

признан наиболее частой причиной ОКС [4]. Морфологической

особенностью «нестабильной» АБ является богатое липидами ядро,

включающее в значительном количестве пенистые клетки, макрофаги и

лимфоциты; покрыта такая бляшка источенной фиброзной капсулой [5].

Процесс дестабилизации АБ можно отнести к классической воспалительной

реакции, в которой непосредственное участие принимают эндотелиальные

клетки, макрофаги, Т-лимфоциты, нейтрофилы и гладкомышечные клетки

(ГМК) [6]. Взаимодействие и активация клеточных механизмов воспаления

при ОКС происходит благодаря участию многочисленных активных молекул,

в основном, белковой природы. Часть этих соединений, попадая в

периферическую кровь, отражают активность локального воспалительного

процесса. В таком случае их принято называть маркерами воспаления. К

маркерам воспаления относят цитокины, молекулы клеточной адгезии

(МКА), белки острой фазы. Существуют экспериментальные и клинические

данные, подтверждающие ключевую роль воспаления в атерогенезе и

механизмах, приводящих к тромбозу. Показано, что мутации гена,

ответственного за синтез белка клеточной поверхности, активирующего

иммунные клетки, приводит к увеличению риска атеросклероза и ИБС [7]. В

целом ряде исследований в качестве одной из причин рассматривалось

влияние инфекции, в частности Chlamydia pneumoniae [8], хотя применение

антибактериальных препаратов не показало каких-либо преимуществ [9].

Ключевые воспалительные реакции, а также дисфункция эндотелия

12

усиливаются, или могут быть индуцированы гиперлипидемией, артериальной гипертонией, при диабете или курении и других «классических» факторах риска ИБС [10].

Иногда к тромбозу приводит поверхностная эрозия интимы без разрыва фиброзной капсулы. В этом случае повреждение также имеет воспалительный механизм. Под влиянием медиаторов воспаления эндотелиоциты, как и ГМК, подвержены апоптозу. Гибель клеток эндотелия приводит к обнажению тромбогенного субэндотелиального матрикса. Под влиянием воспалительных стимулов и окисленных липопротеинов эндотелиоциты также способны продуцировать протеиназы.

Данные экспериментальных работ указывают на важную роль иммунной системы в атерогенезе [11].

7.2 Иммунная система и атеросклероз.

В последние годы развитие атеросклероза рассматривают с позиций иммунного воспаления.

Факторы врожденного и приобретенного иммунитета находятся в постоянном тесном взаимодействии как при уничтожении чужеродных организмов, борьбе с инфекционными агентами, так и в уничтожении клеток, вступивших в апоптоз и воспалительных реакциях (рис. 1).

Рисунок 1 Взаимодействие факторов врожденного и приобретенного иммунитета врожденный иммунитет адаптивный иммунитет

В лимфоцит (большой)

ТШ 4 5

ч 4:

с

с

с

антитело

плазматическая клетка

цитотоксический Т-лимфоцит

Моноцитарно-макрофагальная система участвует в системе фагоцитоза, лизируя поврежденные клетки или чужеродные микроорганизмы, параллельно проводит презентацию антигена для системы приобретенного иммунитета, запуская процессы выработки антител и иммуноглобулинов

Адаптивный ответ при атеросклерозе представлен клеточным и гуморальным звеньями ответа [12]. Клеточный иммунитет при атерогенезе осуществляется Т-хелперами-лимфоцитами (СЭ4+), а также цитотоксическими Т-лимфоцитам (СЭ8+). В гуморальном ответе участвуют В-клетки, которые, трансформируются в плазматические клетки, продуцирующие иммуноглобулины [13].

Аутоиммунный механизм атеросклероза изучался в 70-е годы прошлого столетия под руководством академика А.Н. Климова [14].

С учетом последних данных аутоиммунная теория атерогенеза предполагает следующие ключевые процессы: 1) появление или образование в плазме крови и в артериальной стенке модифицированных липопротеинов низкой плотности (мЛПНП) с аутоантигенными свойствами; 2) иммунный ответ на появление этих антигенов и формирование аутоиммунного комплекса т эки; 3) нерегулируемый захват иммунного комплекса мЛПНП-

антитело макрофагами артериальной стенки, накопление в макрофагах холестерина и их трансформация в пенистые клетки; 4) образование атеросклеротического поражения по схеме: аутоиммунный комплекс мЛПНП-антитело - пенистая клетка - атеросклеротическая бляшка с развитием хронически протекающего иммунного воспаления. В пользу аутоиммунной теории патогенеза атеросклероза свидетельствует прежде всего высокая атерогенность комплексов липопротеин-антитело (ЛП-АТ), как полученных in vitro, так и выделенных из плазмы крови и интимы артериальной стенки больных ишемической болезнью сердца (ИБС), а также высокая цитотоксичность этих комплексов, в том числе и в отношении эндотелия. Есть основания полагать, что повышенная концентрация аутоиммунных комплексов ЛП-АТ в крови может быть одной из причин нарушений, которые принято характеризовать как дисфункцию эндотелия [15].

При атеросклерозе период полураспада ЛПНП увеличивается у больных со II типом гиперлипопротеидемии (ГЛП) с 3 до 4,5 дней. В результате более длительной циркуляции ЛПНП в крови происходит их перекисное окисление с образованием модифицированных м-ЛПНП, приобретающих чужеродные свойства. После переработки их макрофагами передается сигнал как Т-хелперам, которые в свою очередь дают сигнал плазматическим клеткам к продукции более специфических аутоантител класса IgG и IgA [16].

Другой механизм аутоиммунной реакции связан с белками теплового

шока.

Все здоровые люди имеют иммунитет как против микробного белка теплового шока 60, так и против модифицированного собственного (аутологичного) HSP60, продуцируемого и высвобождаемого поврежденными и/или подвергающимися стрессу клетками.

Воздействие факторов риска развития атеросклероза приводит к экспрессии эндотелиальными клетками HSP60 и молекул адгезии (ICAM-1,

УСАМ-1, ЕЬАМ-1) на своей поверхности, делая себя мишенями для предсуществующего анти-НБРбО иммунитета. Н8Р60-реактивные Т-клетки мигрируют в интиму артерии и инициируют первую воспалительную стадию атеросклероза. В очаг воспаления следуют моноциты/макрофаги и сосудистые ГМК. Анти-ЬНБРбО аутоантитела ускоряют и поддерживают процесс. Эта первая воспалительная стадия атеросклероза еще обратима. При дальнейшем воздействии факторов риска развиваются уже необратимые изменения и. как следствие, атеросклеротическая бляшка [17].

Рисунок 2 Аутоиммунная концепция развития атеросклероза.

Стрессовые факторы

Воспаление н атеросклероз

^^ Эндотелиальная клетка сосуда ^ Белки теплового шока

44

Макрофаги Т-лимфоциты

Молекллы адгезии

Концепция аутоиммунной реакции к белкам теплового шока с последующим развитием атеросклероза. В нормальных условиях, белок теплового шока расположен внутри клетки и не экспрессируется на поверхности эндотелиальных клеток сосудов. Под действием стрессовых факторов, белок теплового шока и различные молекулы адгезии активируются и экспрессируются на поверхности клеток Это приводит к воспалению и развитию атеросклероза [ 18].

7.3 Врожденный иммунитет и сердечно-сосудистые заболевания.

К факторам врожденного иммунитета относят гуморальный и

клеточный иммунитет. Обе системы играют важную роль в патогенезе ИБС и ИМ.

К основным клеточным факторам иммунитета относят разные формы

лейкоцитов. Нейтрофилы — первые из лейкоцитов мигрируют в очаг некроза

при ИМ под влиянием хемоаттрактантов. Они являются основным

источником свободных радикалов, которые приводят к оксидативному

17

стрессу. Имеется большое количество данных о непосредственном участии нейтрофилов в повреждении миокарда при ишемии [19, 20]. Срок жизни нейтрофилов 1-2 дня, после чего они вступают в апоптоз.

Моноциты-макрофаги - одни из наиболее широко представленных клеточных популяций в структуре АСБ. Когда в макрофагах накапливается холестерол-эстераза, они превращаются в пенистые клетки, также играющие важную роль в патогенезе ИБС. Активированные макрофаги и пенистые клетки вырабатывают провоспалительные цитокины, хемокины, протеазы, запуская каскад воспалительной реакции и активации адаптивного иммунитета.

В атерогенез вовлечены различные семейства молекул воспаления, включая цитокины, интегрины, селектины, клеточные рецепторы, белки острой фазы воспаления. Сложность иммунного ответа при атеросклерозе состоит в том, что цитокины, секретируемые при атеросклерозе, могут оказывать прямо противоположные эффекты - либо проатерогенный, либо атеропротекторный. Баланс между провоспалительными и противовоспалительными факторами является решающим для прогрессирования атеросклероза. Провоспалительными и, следовательно, проатерогенными, являются С-реактивный белок, Е-селектин, эндотоксин, фактор некроза опухоли, интерлейкины (IL-lß, IL-8, IL-12, IL-18), макрофагальный хемоаттрактантный протеин, лейкотриены, продукты деградации липоксигеназы и другие. Противовоспалительными и, соответственно атеропротекторными, являются в частности IL-4, IL-10, TGFb (transforming growth factor) и PDGF (platelet-derived growth factor).

Более 40 лет изучается роль активации комплемента в развитии

реперфузионного повреждения (РП) миокарда у больных ОКС. В 1970 г. Hill

и Ward опубликовали данные исследования, в котором продемонстрировано,

что при развитии экспериментального ИМ ингибирование комплемента

приводило к уменьшению хемотаксиса и аккумуляции нейтрофилов в зоне

повреждения [21]. Комплемент является одним из участников

18

воспалительной реакции. Его мембранно-атакующие комплексы были обнаружены в клетках инфарктного миокарда животных и человека [22]. Активация комплемента повышает сердечно-сосудистый риск у больных с распространенным атеросклерозом. Отложение iC3b комплемента в нестабильных бляшках приводит к увеличению риска развития ОКС, по-видимому, за счет усиления воспалительной реакции и увеличения риска тромбообразования. Кроме того, оксидативный стресс, играющий ключевую роль в патогенезе ОКС, активирует комплемент через лектиновый путь в культуре клеток. Ингибирование комплемента представлялось перспективным и обоснованным патогенетическим лечением ИМ. В отдельных небольших исследованиях ингибирование отдельных компонентов комплемента приводило к уменьшению размеров ИМ [23]. Однако 3 крупных рандомизированных исследования (СОММА, COMPLY, APEX-AMI) по изучению влияния ингибитора С5 компонента комплемента пекселизумаба на течение и прогноз у больных с ОКС не показали никаких преимуществ этого препарата [24,25,26].

Схематичное взаимодействие разных звеньев иммунной системы в патогенезе атеросклероза представлено на рис. 3.

А. Вовлечение лейкоцитов в начальные этапы образования АСБ. Лейкоциты в норме плохо адгезируются к эндотелию. При дисфункции эндотелия происходит экспрессия молекул адгезии (Е-селектин, VCAM, ICAM, интегрины), стимулирующих прилипание клеток к внутренней поверхности сосуда. Это приводит к миграции, адгезии и активации лейкоцитов и моноцитов на участке внутренней стенки сосуда. Лейкоциты продуцируют воспалительные медиаторы и хемоаттрактанты, под действием которых моноциты проникают внутрь интимы, на их рецепторах оседают липопротеины, что ведет к образованию пенистых клеток. В образовавшейся бляшке накапливаются Т-лимфоциты, вырабатывающие макрофаг-колоний-стимулирущие факторы, приводящие к прогрессирующей дифференцировке моноцитов в пенистые клетки. В. Т-лимфоциты также ответственны за синтез большинства провоспалительных маркеров: ИЛ-2, ФНОа, интерферон у, факторов роста, приводящих к миграции и пролиферации гладкомышечных клеток. В случае прогрессирования процесса происходит дальнейшее накопление липопротеинов, увеличивается количество гладкомышечных и воспалительных клеток, из соединительной ткани происходит образование проатерогенного, протромботического экстрацеллюлярного матрикса. Под влиянием цитокинов и факторов роста коллаген и гладкомышечные клетки образуют фиброзную капсулу, отграничивающая растущее липидное ядро от просвета сосуда. С. В дальнейшем противоспалительные медиаторы угнетают синтез коллагена и стимулируют высвобождение коллагеназ пенистыми клетками. Эти изменения в экстрацеллюлярном матриксе приводят к истончению фиброзной капсулы и облегчают ее повреждение или разрыв. Взаимодействие между Т-лимфоцитами и макрофагами инициирует высвобождение тканевого фактора, обладающего мощными прокоагулянтными свойствами. Таким образом, после разрыва АСБ, тканевой фактор запускает процесс тромбообразования, что приводит к серьезным осложнениям атеросклероза, (адаптировало из Libby P., Ridker Р и соавт., Circulation. 2002;105:1135-1142)

7.4 Маннозо-связывающий лектин.

В последнее время внимание исследователей привлекает один из

факторов активации комплемента, маннозо-связывающий лектин (таппоБе-ЫгкИ^есйп, МВЬ).

МВЬ относится к классу коллектинов суперсемейства Са-зависимых (типа С) коллектинов, которые являются рецепторами опознавания антигена в системе врожденного иммунитета.

Коллектины - семейство гликопротеинов, представляющих собой поливалентные полимерные комплексы, обладающие сродством к углеводам микробов. Коллектины распознают широкий спектр инфекционных агентов и функционируют как паттерн-распознающие молекулы. К семейству коллектинов относят МВЬ, СЦ компонент комплемента и сурфактантные протеины легких (8Р-А и БР-О). В молекуле коллектинов различают коллагеновую часть и концевой лектиновый домен. С помощью коллагеновой области они связываются с белками крови или рецепторами фагоцитов (сСЦИ., кальретикулин), а с помощью лектиновых доменов — с определенными углеводами микробной поверхности (грамотрицательных бактерий, микобактерий, грибов, дрожжей, некоторых паразитов и вирусов), содержащих остатки маннозы, фруктозы и Ы-ацетилглюкоз-аминогликаны, отсутствующими у млекопитающих. Связав микробы, коллектины способствуют опсонизации (прикреплению и поглощению фагоцитами). Другой важной функцией коллектинов является активация системы комплемента [27].

МВЬ - белок острой фазы, синтезируемый печенью под воздействием цитокинов воспаления. Структурно и функционально МВЬ подобен СЦ компоненту комплемента. МВЬ - гликопротеин, состоящий из 228 аминокислот, в котором можно выделить ТчГ-концевой домен, коллагеноподобный гликозилированный домен, образующий длинный соединительный участок, короткий шеечный домен, представленный спиралью и С-терминальный домен, взаимодействующий с углеводом на мембране микроорганизма. Три пептидные цепи, образующие базовую субъединицу, в свою очередь, составляют четвертичную структуру белка МВЬ-олигомер, состоящий из 26 базовых субъединиц, рис. 4 [28]. Молекулярный вес белка составляет 400-700 кД, молекулярный вес каждой пептидной цепи - 30 кД.

(из Prorein Data Bank, 2006)

В 1987 г. была доказана роль MBL в антитело-независимой активации комплемента [29]. MBL образует комплекс со специфичными сериновыми протеазами (MASP-1, -2, -3), из которых только MASP-2 обладает ферментативной активностью в отношении компонентов С2 и С4 комплемента.

Активация лектинового пути комплемента происходит только при условии, что MBL, образовав комплекс с сериновой протеазой MASP-2, связывается со структурой, содержащей маннозу или N-ацетилглюкозоамин, например, с клеточной стенкой бактерий. Комплекс MBL-MASP-2 запускает лектиновый путь активации комплемента [30,31]. MASP-2 расщепляет С2 и С4, образуя СЗ-конвертазу - С4Ь2а. По функциональной активности MASP-2 похожа на протеазу С Is. С1-ингибитор и а2-макроглобулин в физиологической концентрации полностью блокируют ферментативную активность комплекса MBL-MASP-2. В отсутствие ингибитора этот комплекс опсонизирует бактерии, резко ускоряя их гибель (рис. 5).

Лектиновый путь активации комплемента

Мембранно-атакующие комплексы

Лизис патогена

МВЬ образует комплекс с сериновой протеазой МА8Р2 Этот комплекс расщепляет С2 и С4 компоненты комплемента, образуя СЗ-конвертазу (С4ЬС2а) СЗ компонент комплемента активирует С5, С6, С7, С8, С9 компоненты Активированный комплемент является мембранно-атакующим комплексом, участвует в лизисе патогенных микроорганизмов

Нормальный уровень МА8Р-2 в сыворотке составляет 170-1200 нг/мл. Низкая концентрация МА8Р-2 говорит о повышенном риске развития инфекционных заболеваний. Активность МА8Р-1 схожа с активностью тромбина, что позволяет предположить участие МА8Р-1 в системе гемостаза. МАБР-З не участвует в активации комплемента. Биологическая роль МА8Р-3 остается невыясненной [32].

Лектиновый путь активации комплемента является антителонезависимым, что важно для формирования быстрого иммунного ответа в случае, когда организм ещё не выработал антител против возбудителя.

Помимо участия в активации системы комплемента, МВЬ действует как опсонин [33]. Также МВЬ распознает собственные поврежденные клетки и участвует в их удалении, играя важную роль в процессах апоптоза [34].

7.4.1 Факторы, определяющие уровень МВЬ в сыворотке крови.

Уровень МВЬ в крови определяется генетическими и негенетическими факторами.

Егекошкг и соавт. клонировали ДНК, кодирующую МВЬ, в конце 80-х годов прошлого века. Ген МВЬ локализован в области qll.2-q2l хромосомы 10 и включает четыре экзона. Экзон 1 кодирует сигнальный пептид, область, богатую цистеином и часть коллагеновой области. Экзон 2 кодирует остаток коллагеноговой области, экзон 3 кодирует шею, экзон 4 кодирует домен узнавания карбангидрата (рис. 6).

Рисунок 6 Структура гена MBL2, полипептида и структурной субъсдиницы

550 g>c

H/L

221 G>C

Y/X

D Arg52Cys

♦ 4 c>t

P/Q

' \

В G!y 54A-,p

\

A/D/B/C

С

?

j а

С Gly 57Glu

I

полипептид

Структурная субъединица

Нетранслируемый участок

Сигнальный пептид Ш'^Ш n

ш' 4

Область сшивания Коллагеновая область Перешеек ■

Домен узнавания карбангидрата 3'

Ген MBL2

К настоящему времени в гене МВЬ обнаружено семь полиморфных участков. В промоуторной области в позиции Н/Ь вариант, У/Х вариант, Р/С) вариант в 5'-нетранслируемом регионе. В результате замены аминокислот в 1 экзоне формируются 4 аллеля гена МВЬ, в кодоне 54 (глицин с аспарагиновой кислоты, аллель В), в кодоне 57 (глицин с глутаминовой кислотой, аллель С), и, наконец, в кодоне 52 (аргинин с цистеином, аллель Э). Обычно наличие любого из этих аллелей обозначают «О», а нормальный аллель А называется «диким типом». Замена глицина в 54 и 57 кодонах нарушает структуру а-спирали, и препятствует образованию олигомера [35,36]. Эти конформационные изменения нарушают маннозный путь активации комплемента и вызывают иммунодефицитное состояние.

Вследствие сцепления аллелей образуются семь гаплотипов HYP А, LYQA, LYPA, LXPA, LYPB, LYQC и HYPD. Гаплотип HY ассоциируется с высоким плазменным уровнем MBL, LY гаплотип со средним, гаплотип LX -со снижением концентрации белка MBL в плазме крови. Низкая концентрации MBL в сыворотке крови связана с присутствием мутантных аллелей, локализованных в первом экзоне. Вариант D, в противоположность аллелям В и С, не изменяет глициновую последовательность а-спирали и связан с повышенным уровнем циркулирующего белка [37].

Обследование семи пациентов с рецидивирующими инфекциями, представлявших четыре поколения одной семьи, показало наличие мутантных аллелей первого экзона гена MBL, сочетавшихся с уменьшением концентрации белка MBL в сыворотке крови и снижением возможности связывать С4Ь комплемента у шести из них [38]. Это свидетельствует о том, что наследование мутантных аллелей происходит по аутосомно-доминантному типу [39].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Лосин, Илья Евгеньевич, 2015 год

13 Список литературы

1 European guidelines on cardiovascular disease prevention in clinical practice: full text. Fourth Joint Task Force of the European Society of Cardiology and other societies on cardiovascular disease prevention in clinical practice. Eur. J. Cardiovasc. Prev. Rehabil. 2007 Sep;14 Suppl 2:S1-113.

2 Ross R. Atherosclerosis: an inflammatory disease. N. Engl. J. Med. 1999;340:115-126.

3 Kuller L., Tracy R. The role of inflammation in cardiovascular disease. Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2000;20:901

4 Davies M. The pathophysiology of acute coronary syndromes. Heart. 2000;83:361-366

5 Wal A, Becker A.E, Loos C.M. et al. Site of intimal rupture or erosion of thrombosed coronary atherosclerotic plaques is characterized by an inflammatory process irrespective of the dominant plaque morphology. Circulation 1994;89:36-44

6 Kaski J., Zouridakis E. Inflammation, infection and acute coronary plaque events. Eur. Heart J. Suppl. 2001;3:110-115

7Wang X., Ria M., Kelmenson P. et al. Positional identification of TNFSF4, encoding 0X40 ligand, as a gene that influences atherosclerosis susceptibility. Nat. Genet. 2005; 37: 365-312

8 Ватутин H.T., Чупина B.A. Инфекция как фактор развития атеросклероза и его осложнений. Кардиология 2000; 40(2): 14-18

9 de Winter R., Koch К., van Straalen J., et al. C-reactive protein and coronary events following percutaneous coronary angioplasty. American Journal of Medicine 2003; 115:85-90.

10 Карпов Ю.А. Воспаление и атеросклероз: состояние проблемы и нерешенные вопросы. Сердце 2003; 2: 190-192

1 lHansson G. Epidemiology Complements Immunology in the Heart. Editorial. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2006; 26: 2178-2180

12 Hansson G., Libby P. The immune response in atherosclerosis: A double-edged sword. Nat. Rev. Immunol. 2006; 6: 508-519

13 Cheng X., Yu X., Ding Y. et al. The Thl7/Treg imbalance in patients with acute coronary syndrome. Clin. Immunol. 2008; 127: 89-97

14 Иоффе В И, Зубжиикий Ю Н, Нагорнев В А, Климов А Н. Иммунологическое исследование экспериментального атеросклероза. Бюлл. экспер. биол. 1973; 6: 72-76

15 Климов А. Н. Аутоиммунная теория патогенеза атеросклероза и новые пути его лечения. Вестник Российской академии медицинских наук. 2003; 12: 29-34.

16 Хлюстов В.Н. Аутоиммунные механизмы в патогенезе атеросклероза. Успехи современного естествознания. 2007; 12: 66-68

17 Grundtman С. and Wick G. The autoimmune concept of atherosclerosis. Curr. Opin. Lipidol. 2011; 22: 327-334

18 Kilic A. and Mandal K. Heat Shock Proteins: Pathogenic Role in Atherosclerosis and Potential Therapeutic Implications. Autoimmune Dis. 2012; 2012:502813.

19 Lucchesi В., Werns S., Fantone J. The role of the neutrophil and free radicals in ischemic myocardial injury. J Mol Cell Cardiol. 1989; 21: 1241-1251

20 Engler R. Free radical and granulocyte-mediated injury during myocardial ischemia and reperfusion. Am. J. Cardiol. 1989; 63: 19-23.

21 Hill J., Ward P. The phlogistic role of C3 leukotactic fragments in myocardial infarct of rats. J. Exp. Med. 1971; 133: 885-900.

22Pinckard R., O'Rourke R., Crawford M. et al. Complement localization and mediation of ischemic injury in baboon myocardium. J Clin Invest. 1980;66: 10501056.

23deZwaan C., Kleine A., Diris J. et al. Continuous 48-h CI-inhibitor treatment, following reperfusion therapy, in patients with acute myocardial infarction. Eur Heart J. 2002; 23: 1670-1677

24Theroux P., Armstrong P., Mahaffey K. et al. Prognostic significance of blood markers of inflammation in patients with ST-segment elevation myocardial infarction undergoing primary angioplasty and effects of pexeluziumab, a C5 inhibitor: a substudy of the COMMA trial. Eur Heart J. 2005;26: 1964-1970

25Armstrong P., Adams P., Al-Khalidi H. et al. Assessment of Pexelizumab in Acute Myocardial Infarction (APEX AMI): a multicenter, randomized, doubleblind, parallel-group, placebo controlled study of pexelizumab in patients with acute myocardial infarction undergoing primary percutaneous coronary intervention. Am. Heart J. 2005;149:402-407

26 Mahaffey K., Granger C., Nicolau J. et al. Effect of pexelizumab, an anti-C5 complement antibody, as adjunctive therapy to fibrinolysis in acute myocardial infarction: the COMPlement inhibition in myocardial infarction treated with thromboLYtics (COMPLY) trial. Circulation 2003; 108:1176-1183.

27Thiel S., Frederiksen P., JenseniusJ..Clinical manifestations of mannan-binding lectin deficiency.MolImmunol 2006;43:86-89.

28 Larsen F., Madsen H.,Sim R. et al. Disease-associated mutations in human mannose-binding lectin compromise oligomerization and activity of the final protein.J. Biol. Chem.2004;14: 21302-21311.

29 Ikeda K., Sannoh T., Kawasaki N. et al. Serum lectin with known structure activates complement through the classical pathway. J. Biol. Chem. 1987; 262: 7451-7454.

30Super M., Levinsky, R., Turner, M. The level of mannan-binding protein regulates the binding of complement-derived opsonins to mannan and zymosan at low serum concentrations. Clin. Exp. Immunol. 1990:79: 144-150

31 Ikeda, K., SannohT., Kawasaki et al. Serum lectin with known structure activates complement through the classical pathway. J. Biol. Chem. 1987: 262: 7451.7454

32 Thiel S., Vorup-Jensen T., Stover C. et al. A second serine protease associated with mannan-binding lectin that activates complement. Nature. 1997: 386; 506510

33 Kuhlman M., Joiner K., Ezekowitz R. The human mannose-binding protein functions as an opsonin. J. Exp. Med. 1989: 169: 1733-1740

34 Ogden C., deCathelineau A., Hoffmann P. et al. C1 qandmannosebindinglectinengagementofcellsurfacecalreticulinandCD91 initiatesmacropinocytosisanduptakeofapoptoticcells. J Exp Med. 2001; 194: 781795.

35Kawasaki T. Structure and biology of mannan-binding protein, MBP, an important component of innate immunity.Biochim. Biophys. Acta. 1999; 1473: 186-195;

36 Larsen F, Madsen H., Sim R., et al. Disease-associated mutations in human mannose-binding lectin compromise oligomerization and activity of the final protein. J Biol Chem. 2004;279: 21302-11

37 Madsen H., Garred P., Thiel S. et al. Interplay between promoter and structural gene variants control basal serum level of mannan-binding protein. J Immunol. 1995; 155: 3013-20

38 Martin P., Lerner A., Johnson L. et al. Inherited mannose-binding lectin deficiency as evidenced by genetic and immunologic analyses: association with severe recurrent infections.Ann. Allergy Asthma Immunol.2003; 91: 386 - 392.

39Sumiya M, Super M, Tabona P, et al. Molecular basis of opsonic defect in immunodeficient children.Lancet. 1991; 337: 1569-1570

40Heitzeneder S., Seidel M., Förster-Waldl E. Mannan-binding lectin deficiency — Good news, bad news, doesn't matter? Review Clinicallmmunology. 2012; 143: 22-38

41Aittoniemi J., Miettinen A., Laippala P. et al.Age-dependent variation in the serum concentration of mannan-binding protein ActaPaediatr. 1996; 85: 906-909

42Sallenbach S., Thiel S., Aebi C. et al. Serum concentrations of lectin-pathway components in healthy neonates, children and adults: mannan-binding lectin (MBL), M-, L-, and H-ficolin, and MBL-associated serine protease-2 (MASP-2) Pediatr. Allergy Immunol. 2011; 22: 424-430

43Lau Y., Chan S., Turner M. et al. Mannose-binding protein in preterm infants: developmental profile and clinical significance Clin. Exp. Immunol. 1995; 102: 649-654

44Lee S., Yum J., Moon H. et al. Analysis of mannose-binding lectin2 (MBL2) genotype and the serum protein levels in the Korean population Mol. Immunol. 2005; 42: 969-977

45Романов A.O., Беляева T.B., Красилыцикова И.В. Частота встречаемости полиморфизма +230G/A гена MBL у жителей Санкт-Петербурга. Medline.ru. 2006; 7: 372 - 377

46Steffensen R, Thiel S, Varming К, et al. Detection of structural gene mutations and promoter polymorphisms in the mannan-binding lectin (MBL) gene by polymerase chain reaction with sequence-specific primers. J Immunol Methods. 2000; 241:33-42

47 Sorensen C., Hansen Т., Steffensen R. et al. Hormonal regulation of mannan-binding lectin synthesis in hepatocytes Clin. Exp. Immunol. 2006; 145: 173-182

48 Riis A., Hansen Т., Thiel S. et al. Thyroid hormone increases mannan-binding lectin levels Eur. J. Endocrinol. 2005; 153: 643-649

49Potlukova, E. Jiskra J., Freiberger Т., et al. The production of mannan-binding lectin is dependent upon thyroid hormones regardless of the genotype: a cohort study of 95 patients with autoimmune thyroid disorders. Clinlmmunol. 2010; 136: 123-129.

50 Hansen T., Thiel S., Dali R. et al. GH strongly affects serum concentrations of mannan-binding lectin: evidence for a new IGF-I independent immunomodulatory effect of GH. J. Clin. Endocrinol.Metab. 2001; 86: 5383-5388

51 Miller M., Seals J., Kaye R., et al. A familial, plasma-associated defect of phagocytosis: a new cause of recurrent bacterial infections. Lancet. 1968; II: 60-63

52Cedzynski M., Szemraj J., Swierzko A. et al. Mannan-binding lectin insufficiency in children with recurrent infections of the respiratory system. Clin. Exp. Immunol. 2004; 136: 304 - 311

53Garred P., Madsen H. Genetic Susceptibility to Sepsis: A Possible Role for mannose-binding Lectin. Curr. Infect Dis. Rep. 2004; 6: 367 - 373

54Peterslund N., Koch C., Jensenius J., et al. Association between deficiency of mannose-binding lectin and severe infections after chemotherapy.Lancet.2001; 358: 637-638.

55Kelly P., Jack D., Naeem A. et al. Mannose-binding lectin is a component of innate mucosal defense against Cryptosporidium parvum in AIDS. Gastroenterology.2000;l 19: 1236- 1242.

56Peterslund N.A., Koch C., Jensenius J.C., et al. Association between deficiency of mannose-binding lectin and severe infections after chemotherapy.Lancet.2001; 358: 637-638.

57 Summerfield J., Sumiya M., Levin M., et al. Association of mutations in mannose binding protein gene with childhood infection in consecutive hospital series. BMJ. 1997; 314: 1229 - 1232

58 Roy S., Knox K., Segal S. et al. MBL genotype and risk of invasive pneumococcal disease: a case-control study. Lancet.2002; 359: 1569 - 1573.

59Hibberd M., Sumiya M., Summerfield J. et al. Association of variants of the gene for mannose-binding lectin with susceptibility to meningococcal disease. Meningococcal Research Group.Lancet.1999; 353: 1049-1053.

60Cedzynski M., Szemraj J., Swierzko A. et al. Mannan-binding lectin insufficiency in children with recurrent infections of the respiratory system Clin. Exp. Immunol. 2004; 136: 304-311.

61 Chen J., Xu Z., Ou X. et al. Mannose-binding lectin polymorphisms and recurrent respiratory tract infection in Chinese children Eur. J. Pediatr. 2009; 168: 1305-1313

62Koch_A., Melbye M„ Sorensen P. et al. Acute respiratory tract infections and mannose-binding lectin insufficiency during early childhood JAMA. 2001; 285: 1316-1321

63K. Takahashi Mannose-binding lectin and the balance between immune protection and complication Expert Rev Anti Infect Ther. 2011; 9: 1179-1190.

64 Garred P., Madsen H., Halberg P. et al. Mannose-binding lectin polymorphism and suspeptibility to infection in systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum. 1999; 42: 2145-2152

65 Juarez M., Misischia R., Alarcon G. Infections in systemic connective tissue diseases: systemic lupus erythematosus, sclerodermia, and polymyositis/dermatomyositis. Rheum. Dis. Clon. N. Am. 2003; 29: 163-184

66 Mok M., Ip W., Lau C. et al. Mannose-binding lectin and susceptibility to infection in Chinese patients with systemic lupus eryrhematosus. J. Rheumatol. 2007; 34: 1270-1276

67 Kinder B., Freemer M., King-Jr. et al. Clinical and genetic risk factors for pneumonia in systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum., 2007; 8: 2679-2686

68 Castellano G., Melchiorre R.., Loverre A. et al. Therapeutic targeting of classical and lectin pathways of complement protects from ischemia-reperfusion-induced renal damage. The American Journal of Pathology. 2010; 4: 1648-1659.

69 Moller-Kristensen M., Ip W., Shi L. et al. Deficiency of mannose-binding lectin greatly increases susceptibility to postburn infection with Pseudomonas aeruginosa. The Journal of Immunology. 2006; 3: 1769-1775.

70 Van der Pol P., Schlagwein N., van Gijlswijk D. et al. Mannan-binding lectin mediates renal ischemia/reperfusion injury independent of complement activation. American Journal of Transplantation.2012; 4: 877-887.

71 de Vries B., Walter S., Peutz-Kootstra C. et al. The mannose-binding lectin-pathway is involved in complement activation in the course of renal ischemia-reperfusion injury. American Journal of Pathology. 2004; 5:1677-1688.

72 Berger S., Roos A., Mallat J. et al. Association between mannose-binding lectin levels and graft survival in kidney transplantation. American Journal of Transplantation. 2005; 6: 1361-1366.

73 Berger S., Roos A., Mallat J et al. Low pretransplantation mannose-binding lectin levels predict superior patient and graft survival after simultaneous pancreas-kidney transplantation. Journal of the American Society of Nephrology. 2007; 8: 2416-2422.

74 Bay J., Sorensen S., Hansen J. et al. Low mannose-binding lectin serum levels are associated with reduced kidney graft survival. Kidney International. 2013; 2: 264-271.

75 Gorgi Y., Sfar I., Aouadi H. et al. Mannose binding lectin (+54) exon 1 gene polymorphism in Tunisian kidney transplant patients. Transplantation Proceedings. 2009; 2: 660-662.

76 Damman J. and Seelen M. Mannan-binding lectin: a two-faced regulator of renal allograft injury? Kidney International. 2013; 83: 191-193.

77 Osthoff M., Piezzi V., Klima T. et al. Impact of mannose-binding lectin deficiency on radiocontrast-induced renal dysfunction: a post-hoc analysis of a multicenter randomized controlled trial. BMC Nephrology. 2012; 13:99.

78 de la Rosa X., Cervera A., Kristoffersen A. et al. Mannose-binding lectin promotes local microvascular thrombosis after transient brain ischemia in mice. Stroke. 2014; 45: 1453-1459

79 Ducruet A., Sosunov S., Zacharia B. et al. The neuroprotective effect of genetic mannose-binding lectin deficiency is not sustained in the sub-acute phase of stroke. Translational Stroke Research. 2011; 4: 588-599

80 Orsini F., Villa P., Parrella S. et al. Targeting mannose-binding lectin confers long-lastin protection with a surprisingly wide therapeutic window in cerebral ischemia. Circulation. 2012; 12: 1484-1494.

81 Cervera A. Planas M., Justicia C. et al. Genetically-defmed deficiency of mannose-binding lectin is associated with protection after experimental stroke in mice and outcome in human stroke. PLoS ONE. 2010; 2: e8433.

82 Osthoff M., Katan M., Fluri F. et al. Mannose-binding lectin deficiency is associated with smaller infarction size and favorable outcome in ischemic stroke patients. PLoS ONE. 2011; 6: e21338

83 Wang Z., Sun Z., Zhang L. The relationship between serum mannose-binding lectin levels and acute ischemic stroke risk. Neurochemical Research. 2014; 2: 248-253.

84 Budd S., Aris R., Medaiyese A. et al. Increased plasma mannose binding lectin levels are associated with bronchiolitis obliterans after lung transplantation. Respiratory Research. 2012; 13: art. 56

85 Hodge S., Dean M., Hodge G. Decreased efferocytosis and mannose binding lectin in the airway in bronchiolitis obliterans syndrome. Journal of Heart and Lung Transplantation. 2011; 5: 589-595.

86 Carroll K., Dean M., Heatley S. et al. High levels of mannose-binding lectin are associated with poor outcomes after lung transplantation. Transplantation. 2011; 9: 1044-1049.

87 Kwakkel-van Erp J., Paantjens A., van Kessel D. et al. Mannose-binding lectin deficiency linked to cytomegalovirus (CMV) reactivation and survival in lung transplantation. Clinical and Experimental Immunology. 2011; 3: 410^116.

88 Alipour A., van Oostrom A., van Wijk J. et al. Mannose binding lectin deficiency and triglyceride-rich lipoprotein metabolism in normolipidemic subjects. Atherosclerosis. 2009; 2: 444-450

89 Fiane A., Ueland T., Simonsen S. et al. Low mannose-binding lectin and increased complement activation correlate to allograft vasculopathy, ischaemia, and rejection after human heart transplantation. European Heart Journal. 2005; 16: 1660-1665.

90 Fildes J., Shaw S., Walker A. et al. Mannose binding lectin deficiency offers protection from acute graft rejection after heart transplantation. The Journal of Heart and Lung Transplantation. 2007; 11: 2605-2614.

91 Rugonfalvi-Kiss S., Endresz V., Madsen H. et al. Association of Chlamydia pneumoniae with coronary artery disease and its progression is dependent on the modifying effect of mannose-binding lectin. Circulation. 2002; 9: 1071-1076.

92 Troelsen L, Garred P., Jacobsen S. Mortality and predictors of mortality in rheumatoid arthritis—a role for mannose-binding lectin? Journal of Rheumatology. 2010; 3: 536-543.

93 Troelsen L., Garred P., Madsen H., Jacobsen S. Genetically determined high serum levels of mannose-binding lectin and agalactosyl IgG are associated with ischemic heart disease in rheumatoid arthritis. Arthritis and Rheumatism. 2007; 1: 21-29.

94 Biezeveld M., Geissler J., Weverling G. et al. Polymorphisms in the mannose-binding lectin gene as determinants of age-defined risk of coronary artery lesions in Kawasaki disease. Arthritis and Rheumatism. 2006; 1:369—376

95 Biezeveld M., Kuipers I., Geissler J. et al. Association of mannose-binding lectin genotype with cardiovascular abnormalities in Kawasaki disease. The Lancet. 2003; 9365: 1268-1270

96 P^gowska-Klimek I, Cedzynski M. Mannan-Binding Lectin in Cardiovascular Disease. Biomed Res Int. 2014; 2014: 616817.

97Saevarsdottir S., OskarssonO., AspelundT. Mannan binding lectin as an adjunct to risk assessment for myocardial infarction in individuals with enhanced risk. J. Exp. Med. 2005; 201: 117-125.

98 Mellbin L., Hamsten A., Malmberg K. et al. Mannose-Binding Lectin Genotype and Phenotype in Patients With Type 2 Diabetes and Myocardial Infarction. A report from the DIGAMI 2 trial. Diabetes Care. 2010; 11: 2451-2456

99 Lee T., Barbara V. Howard et al. Artery Disease in American Indians: The Strong Heart Study. Prospective Analysis of Mannose-Binding Lectin Genotypes and Coronary. Circulation 2004; 109:471-475.

100 Siezenga M., Shaw P., Daha M. et al. Low Mannose-Binding Lectin (MBL) genotype is associated with future cardiovascular events in type 2 diabetic South Asians. A prospective cohort study. Cardiovasc. Diabetol. 2011; 10: 60

lOlLimnell V., Aittoniemi J., Vaarala O., et al. Association of mannan-binding lectin deficiency with venous bypass graft occlusions in patients with coronary heart disease. Cardiology, 2002. 98:123-126.

1020hlenschlaeger T. Garred, H. Madsen H., et al. Mannose-binding lectin variant alleles and the risk of arterial thrombosis in systemic lupus erythematosus.N. Engl. J. Med. 2004; 351: 260-267.

103 Madsen H., Videm V., Svejgaard A. et al. Association of mannose-binding-lectin deficiency with severe atherosclerosis. Lancet. 1998: 352; 959-960.

104KellerT., vanLeuvenS., MeuweseM. Serum levels of mannose-binding lectin and the risk of future coronary artery disease in apparently healthy men and women. Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol. 2006; 26: 2345-2350.

105 Pesonen E., Hallman M., Sarna S. et al. Mannose-binding lectin as a risk factor for acute coronary syndromes. Annals of Medicine. 2009; 8: 591-598.

106 Holt C., Thiel S., Munk K. et al. Association between endogenous complement inhibitor and myocardial salvage in patients with myocardial infarction. EHJ: Acute Cardiovascular Care. 2014; 1: 3-9.

107 Schoos M., Munthe-Fog L., Skjoedt M. et al. Association between lectin pathway initiators, c-reactive protein and left ventricular remodeling in myocardial infarction—a magnetic resonance study. Molecular Immunology. 2013; 3: 408414.

108 Bilgin Y., Brand A., Berger S. et al. Mannose-binding lectin is involved in multiple organ dysfunction syndrome after cardiac surgery: effects of blood transfusions. Transfusion. 2008; 4: 601-608.

109 Lai L., Lee D., Ko W. et al. Deficiency of complement factor MBL in a patient required cardiac surgery after an acute myocardial infarction with

underlining chronic lymphocytic leukemia. International Journal of Cardiology. 2010; 2: 24-26.

110 Hansen T., Tarnow L., Thiel S. et al. Association between mannose-binding lectin and vascular complications in type 1 diabetes. Diabetes. 2004; 53:1570-1576

11 lRugonfalvi-Kiss, S., Dosa, E., Madsen, H. et al. High rate of early restenosis after carotid eversion endarterectomy in homozygous carriers of the normal mannose-binding lectin genotype.Stroke.2005; 36: 944-948.

112Troelsen L., Garred P., Madsen H. Genetically determined high serum levels of mannose-binding lectin and agaloctosyllgG are associated with ischemic heart disease in rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum.2007; 56: 21-29.

113CollardC.,Shernan S.,Fox A. et.al. The MBL2 'LYQA Secretor' Haplotype Is an Independent Predictor of Postoperative Myocardial Infarction in Whites Undergoing Coronary Artery Bypass Graft Surgery. Circulation. 2007; 116(11 Suppl): 1106-1112

114CollardC., LekowskiR., Jordan J. Complement activation following oxidative stress. Mollmmunol. 1999;36:941-948.

115 La Bonte L., Dokken B., Davis-Gorman G. The mannose-binding lectin pathway is a significant contributor to reperfusion injury in the type 2 diabetic heart. Diab.Vasc.Dis. Res. 2009; 6: 172-180.

116Busche M., Walsh M., McMullen M. Mannose-binding lectin plays a critical role in myocardial ischaemia and reperfusion injury in a mouse model of diabetes. Diabetologia. 2008;51:1544-1551.

117Haahr-Pedersen S., Bjerre M., Flyvbjerg A. et al. Level of complement activity predicts cardiac dysfunction after acute myocardial infarction treated with primary percutaneous coronary intervention. J Invasive Cardiol.2009; 21: 13-19.

118 Trendelenburg M., Theroux P., Stebbins A. et al. Influence of functional deficiency of complement mannose-binding lectin on outcome of patients with acute ST-elevation myocardial infarction undergoing primary percutaneous coronary intervention. Eur Heart J.2010;31:1181-1187

119Alipour A., Cabezgas M., Elte J. et al. Mannose binding lectin 2 haplotypes do not affect the progression of coronary atherosclerosis in men with proven coronary artery disease treated with pravastatin. Atherosclerosis, 2011; 215: 125-129.

120 Furman M., Becker R., Yarzebcki J. et al. Effect of elevated leycocyte count on in-hospital mortality following acute myocardial infarction. Am. J. Cardiol. 1996; 78: 945-948

121 Barron H., Harr S., Radford M. et al. The association between white blood cell count and acute myocardial infarction mortality in patients > or = 65 years of age: Findings from the cooperative cardiovascular project. J. Am. Cardiol. 2001; 38: 1654-1661

122 O'Donoghue M., Morrow D., Cannon C. et al. Association between baseline neutrophil count, clopidogrel therapy, and clinical and angiographic outcomes in patients with ST-elevation myocardial infarction receiving fibrinolytic therapy. Eur. Heart J. 2008;29:984-991.

123 Arruda-Olson A., Reeder G., Bell M. et al. Neutrophilia predicts death and heart failure after myocardial infarction: A community based study. Circ. Cardiovasc. Qual. Outcomes. 2009; 2: 656-662

124 Kirtane A., Bui A., Murphy S. et al. Association of peripheral neutrophilia with adverse angiographic outcomes in ST-elevation myocardial infarction. Am. J. Cardiol. 2004; 93: 532-536.

125 Kyne L, Hausdorff JM, Knight E, et al. Neutrophilia and congestive heart failure after acute myocardial infarction. Am Heart J. 2000;139:94-100

126Mehta J., Dinerman J., Mehta P., et al. Neutrophil function in ischemic heart disease. Circulation. 1989; 79: 549-556

127 Niccoli G., Burzotta F., Galiuto L., Crea F. Myocardial no-reflow in humans. J. Am. Coll. Cardiol. 2009; 54: 281-292

128 Yellon D., Hausenloy D. Myocardial reperfusion injury. N. Engl. J. Med. 2007; 357: 1121-1135.

129 Duilio C., Ambrosio G., Kuppusamy P. et al. Neutrophils are primary source of 02 radicals during reperfusion after prolonged myocardial ischemia. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2001; 280: H2649-H2657.

130 Romagnoli E., Burzotta F., Trani C. et al. Rationale for intracoronary administration of abciximab. J. Thromb. Thrombolysis. 2007; 23: 57-63.

131 Ярилин А. Иммунология: Учебник для ВПО. - Москва: ГЭОТАР-Медиа; 2010: 704

132 Dimitrijevic М., Vasiljevic Z., Vuckovic-Dekic L. et al. The involvement of immune reactions in cardiac damage during acute myocardial infarction: role of cell-mediated immune response. Panminerva Med. 1997; 39: 85-94.

133 Djurdjevic P., Arsenijevic N., Baskic et al. Systemic response of peripheral blood leukocytes and their phagocytic activity during acute myocardial infarction. Exp. Clin. Cardiol. 2001; 6: 159-166.

134 Лимарева Л. В. Системный подход к оценке иммунного гомеостаза при остром инфаркте миокарда. Автореферат к диссертации на соискание ученой степени дмн. Уфа, 2009 г.

135 Фиалковский В. Способ прогнозирования при инфаркте миокарда. Патент SU 876112. Москва 1980 г.

136 ESC Guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation. The Task Force for the management of acute coronary syndromes (ACS) in patients presenting without persistent ST-segment elevation of the European Society of Cardiology (ESC). European Heart Journal. 2011; 32: 2999-3054

137 Wiviott SD, Morrow DA, Frederick PD, Antman EM, Braunwald E; National Registry of Myocardial Infarction. Application of the Thrombolysis in Myocardial Infarction risk index in non-ST-segment elevation myocardial infarction: evaluation of patients in the National Registry of Myocardial Infarction. J Am Coll Cardiol. 2006 Apr 18;47(8): 1553-8

138 Bell D., Jackson M., Nicoll J. et al. Inflammatory response, neutrophil activation, and free radical production after acute myocardial infarction: effect of thrombolytic treatment. Br. Heart J. 1990; 63: 82-87.

139 Bidouard J., Duval N., Kapui Z. et al. SSR69071, an elastase inhibitor, reduces myocardial infarct size following ischemia-reperfusion injury. Eur. J. Pharmacol. 2003;461:49-52.

140 Zhang R., Brennan M., Fu X. et al. Association between myeloperoxidase levels and risk of coronary artery disease. JAMA. 2001; 286: 2136-2142.

141 Rudolph V., Goldmann В., Bos C. et al. Diagnostic value of MPO plasma levels in patients admitted for suspected myocardial infarction. Int. J. Cardiol. 2011; 153:267-271

142 Baldus S., Heeschen C., Meinertz T. et al. Myeloperoxidase serum levels predict risk in patients with acute coronary syndromes. Circulation. 2003; 108: 1440-1445.

143 Cavusoglu E., Ruwende C., Eng C. et al. Usefulness of baseline plasma myeloperoxidase levels as an independent predictor of myocardial infarction at two

years in patients presenting with acute coronary syndrome. Am. J. Cardiol. 2007; 99: 1364-1368.

144 Dimitrijevic M., Vasiljevic Z., Vuckovic-Dekic L. et al. The involvement of immune reactions in cardiac damage during acute myocardial infarction: role of cell-mediated immune response. Panminerva Med. 1997; 39: 85-94.

145 Славинский А. Активированные нейтрофилы при остром инфаркте миокарда. Международный журнал экспериментального образования. 2010; 7: 63-63

146 Космачёва Е.Д., Васильчева Ж.М., Чуприненко JI.M., Славинский А.А. Нейтроцитоз и метаболическая активность нейтрофильных лейкоцитов при остром коронарном синдроме. Современные наукоемкие технологии. 2012; 8: 27-29

147 White P.. The prognosis of angina pectoris and of coronary thrombosis. JAMA 1926; 87: 1525-1530.

148 Patel M. Prognostic usefulness of white blood cell count and temperature in acute myocardial infarction (from the CARDINAL Trial) J. Am. Coll. Cardiol. 2005; 95: 614—618.

149 O'Donoghue M., Morrow D., Cannon C. et al. Association between baseline neutrophil count, clopidogrel therapy, and clinical and angiographic outcomes in patients with ST-elevation myocardial infarction receiving fibrinolytic therapy. Eur. Heart J. 2008; 29: 984-991

150 Курданов X.A., Нагоев B.C., Хакунова Ж.Д. Функционально-метаболическая активность лейкоцитов у больных инфарктом миокарда. Тер. Архив. 1995; 12: 11 -13.

151 Drechsler М. et al. Neutrophilic granulocytes - promiscuous accelerators of atherosclerosis. Thromb. Haemost. 2011; 106: 839-848

152 Bournazou I. et al. Apoptotic human cells inhibit migration of granulocytes via release of lactoferrin. J. Clin. Invest. 2009; 119: 20-32.

153 Nahrendorf M, et al. The healing myocardium sequentially mobilizes two monocyte subsets with divergent and complementary functions. J. Exp. Med. 2007; 204: 3037-3047

154 Soehnlein O. Multiple roles for neutrophils in atherosclerosis. Circ Res. 2012;110: 875-888.

155 Ionita M. et al. High neutrophil numbers in human carotid atherosclerotic plaques are associated with characteristics of rupture-prone lesions. Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2010; 30: 1842-1848

156 Naruko T. et al. Neutrophil infiltration of culprit lesions in acute coronary syndromes. Circulation 2002; 106: 2894-2900.

157 Romson J., Hook В., Kunkel S. et al. Reduction of the extent of ischemic myocardial injury by neutrophil depletion in the dog. Circulation. 1983; 67: 1016— 1023.

158 Litt M., Jeremy R., Weisman H. et al. Neutrophil depletion limited to reperfusion reduces myocardial infarct size after 90 minutes of ischemia. Evidence for neutrophil-mediated reperfusion injury. Circulation. 1989; 80: 1816-1827

159 Jordan J., Zhao Z., Vinten-Johansen J. The role of neutrophils in myocardial ischemia-reperfusion injury. Cardiovasc Res. 1999; 43: 860-878

160 Маянский Д.Н., Маянская С.Д. Роль нейтрофилов в ишемическом и реперфузионном повреждении миокарда. Терапевтический архив. 2001; 12: 84-88.

161 Ito Н. No-reflow phenomenon and prognosis in patients with acute myocardial infarction // Nature Clinical Practice Cardiovascular Medicine. 2006; 3: 499-506

162 Vengen I., Madsen H., Garred P. et al. Mannose-binding lectin deficiency is associated with myocardial infarction: the HUNT2 study in Norway. Annals of Medicine. 2009; 8: 591-598.

163Haahr-Pedersen S., Bjerre M., Flyvbjerg A. et al. Level of complement activity predicts cardiac dysfunction after acute myocardial infarction treated with primary percutaneous coronary intervention. J Invasive Cardiol.2009; 21: 13-19.

164 Lennon P., Collard C., Morrissey M., Stahl G. Complement-induced endothelial dysfunction in rabbits: mechanisms, recovery, and gender differences. Am. J. Physiol. 1996; 270: 1924-1932.

165 Gabrielsson B., Johansson J., Lonn M. et al. High expression of complement components in omental adipose tissue in obese men. Obes. Res. 2003; 11: 699—708