Критерии функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов, основанные на компьютерном анализе изображения и люминесценции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.29, доктор биологических наук Славинский, Александр Александрович

• Славинский, Александр Александрович
• доктор биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации доктор биологических наук Славинский, Александр Александрович

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Структурно-функциональная характеристика нейтрофильных лейкоцитов.

1.1.1. Цитоплазматическая зернистость.

1.1.2. Антибактериальные системы.

1.1.2.1. Миелопероксидаза.

1.1.2.2. Нафтол-АЗ-Б-хлорацетат эстераза.

1.1.2.3. Катионные белки.

1.1.2.4. Щелочная фосфатаза.

1.1.2.5. Окислительно-восстановительная активность.

1.1.3. Функциональные свойства нейтрофилов.

1.2. Основы компьютерного анализа изображения клеток крови.

Глава 2 Материал и методы исследования.

2.1. Характеристика объекта исследования.

2.2. Цитохимические методы.

2.2.1. Определение катионных белков.

2.2.2. Определение активности нафтол-АЗ-Б-хлорацетат эстеразы.

2.2.3. Определение активности миелопероксидазы.

2.2.4. Определение активности щелочной фосфатазы.

2.2.5. Визуальная оценка цитохимических реакций.

2.3. Цитофизиологические методы.

2.3.1. Определение активированных нейтрофилов и их функционального резерва (НСТ-тест).

2.3.2. Тестирование фагоцитарной функции.

2.4. Измерение интенсивности люминесценции активированных фагоцитов.

2.5. Компьютерный анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов.

2.5.1. Система анализа клеточного изображения.

2.5.2. Алгоритм анализа изображения нейтрофилов.

2.5.3. Определяемые параметры и показатели.

2.6. Статистические методы.

Глава 3. Люминесценция активированных нейтрофильных лейкоцитов. Метаболические аспекты функциональной активации.

3.1. Выявление люминесценции активированных нейтрофилов.

3.2 Локализация люминесценции в клетках (визуальная картина).

3.3. Спектральный анализ люминесценции.

3.4. Анализ компонентов клетки, вызывающих люминесценцию.

3.5. Люминесценция активированных нейтрофильных лейкоцитов в норме и при заболеваниях различной этиологии.

Глава 4. Цитофизиологические и цитохимические признаки функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов у здоровых и больных людей.

4.1. Тестирование функционального состояния нейтрофилов.

4.1.1. Активация и функциональный резерв.

4.1.2. Фагоцитарная функция.

4.2. Компьютерный анализ клеточного изображения.

4.3. Визуальная оценка цитохимических реакций.

4.4. Резюме.

Глава 5. Сравнительная цитохимическая и морфофункциональная характеристика нейтрофильных лейкоцитов в норме и эксперименте

5.1. Компьютерный анализ изображения нейтрофилов здоровых лабораторных животных.

5.2. Обобщение результатов сравнительного анализа изображения нейтрофилов.

5.3. Критерии функциональной активности нейтрофилов при экспериментальном сепсисе.

5.3.1. Тестирование функционального состояния нейтрофилов.

5.3.1.1. Активация и функциональный резерв.

5.3.1.2. Фагоцитарная функция.

5.3.2. Компьютерный анализ изображения нейтрофилов больных животных.

5.4. Резюме.

Глава 6. Обсуждение результатов исследования.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Критерии функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов, основанные на компьютерном анализе изображения и люминесценции»

Актуальность темы

Роль нейтрофильных лейкоцитов в организме многообразна и включает в себя широкий спектр функций. Фагоцитоз, цитотоксичность, секреция факторов, влияющих на развитие физиологических и патологических процессов в организме, - вот тесно взаимосвязанные проявления функциональной активности нейтрофилов крови (Gallin J. I. et al., 1992; Козинец Г.И., Макаров B.A., 1997; Bainton D.F., 1999; Sengelov H., Borregaard N., 1999; Wenisch C. et al, 2000). Нейтрофильные гранулоциты не только участвуют в реакциях иммунной системы, но также оказывают регуляторные воздействия на функции других клеток, играют роль универсальных эффекторов гомеостаза (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1983), тканевых клеточных посредников между соединительной тканью и нервной системой (Бахов Н.И. и соавт., 1988). Тем не менее, физиология нейтрофильных лейкоцитов как единой, саморегулирующейся и в то же время иерархически детерминированной в организме клеточной системы (Терещенко И.П., Кашулина А.П., 1993) остается недостаточно изученной.

В нормальных условиях нейтрофилы обладают небольшой функциональной активностью. При воспалении взаимодействие стимулирующих факторов с плазматической мембраной или цитозольными компонентами фагоцитов приводит к их активации и значительному увеличению функционального потенциала (Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А., 1999). В связи с участием активированных нейтрофильных гранулоцитов в патогенезе целого ряда заболеваний (Williams F.M. et al., 1994; Forrat R. et al., 1996; Kassirer M. et al., 1999) особое значение приобретает исследование физиологических и метаболических механизмов активации, выявление сопутствующих этому процессу морфологических изменений в клетках.

Функциональный статус нейтрофильного лейкоцита неразрывно связан с его структурными особенностями. Д.С. Саркисов (1994) считает, что нет чисто функциональных адаптивных реакций - все они, даже самые тонкие и незаметные, всегда сопровождаются соответствующими морфологическими изменениями. В связи с детализацией сведений о физиологическом назначении и особенностях метаболизма отдельных внутриклеточных структур особую значимость приобрели микроскопические и цитохимические признаки функциональной активности лейкоцитов (Алмазов В.А. и соавт., 1979). Современные диахромные и люминесцентные цитохимические методы в сочетании с цитофлуориметрией и компьютерным анализом изображения - источник ценной информации для исследования функций живых лейкоцитов. По мнению В.О. Самойлова (1994), изучение реакции клеток на те или иные воздействия с последующей фиксацией и цитохимическим исследованием на разных стадиях физиологического процесса позволяет получить как бы серию моментальных снимков, анализ которых дает представление о динамическом явлении.

Световой микроскоп составляет основу клинической лабораторной диагностики, поэтому необходимость объективной количественной светооп-тической характеристики распределения антибактериальных веществ в цитоплазме нейтрофилов сохраняет свою актуальность. Распространенная в настоящее время визуальная оценка лейкоцитов в мазках крови не может привести к адекватному решению задачи. Даже при максимальном увеличении с применением прецизионных методов обычная световая микроскопия не позволяет производить в клетках точный подсчет количества гранул и, безусловно, не дает возможности учитывать их размеры, что снижает диагностическую ценность исследования.

Применение современных компьютеров в гематологических цитологических исследованиях впервые обосновал Г.И. Козинец с соавторами (1990). Телевизионный компьютерный анализ клеточного изображения существенно расширяет возможности светового микроскопа (Козинец Г.И. и соавт, 1990; Автандилов Г.Г., 1993, 1996; Погорелов В.М. и соавт, 1995, 1997; Tafas Т. et al., 1996; Медовый B.C. и соавт., 1997; Takubo Т., Tatsumi N., 1997). Переход от визуального наблюдения к измерению характеристик объекта по его изображению позволяет получить принципиально новые данные о клетке (Левин Г.Г., Козинец Г.И., 1997), создать математические аналоги морфологических признаков (Автандилов Г.Г. и соавт., 1997), надежно регистрировать незначительные различия в структуре цитоплазмы лейкоцитов (Воробьев И.А. и соавт., 1998).

Цитоплазматическая зернистость - зеркало функциональной активности нейтрофильного лейкоцита. После классических работ И.И. Мечникова, П. Эрлиха, Д.Л. Романовского она неизменно привлекает внимание многочисленных исследователей. Несмотря на это, даже во второй половине 20-го столетия функциональное значение нейтрофильных гранул оставалось неясным (Стражеско Н.Д., Яновский Д.Н., 1963). Известно, что при интоксикации гранулы нейтрофилов становятся более крупными, чем в норме, а септический процесс может сопровождаться вакуолизацией цитоплазмы (Воробьев А.И. и соавт., 1985). Развитие воспалительно-гнойных заболеваний и сепсиса сопровождается возрастанием в крови больных количества нейтрофилов с незначительным содержанием гранул или даже с гомогенной цитоплазмой, что является признаком глубокой депрессии функциональных возможностей системы нейтрофильных гранулоцитов (Конюхова Л.В. и соавт., 1991; Галанкин В.Н. и соавт., 1994; Сапрыкин В.П., Галанкин В.Н., 1998; Dahlgren A.N.A. et al., 1999).

Электронная микроскопия в сочетании с цитохимией и субклеточным фракционированием привели к открытию гетерогенности зернистости нейтрофилов. Она состоит из азурофильных, специфических и желатиназных гранул, а также секреторных пузырьков (Bainton D.F. et al., 1971; Sengelov H. et al.,1992; Bainton D.F., 1993; Borregaard N., 1997). Данные электронной и световой цитохимии не всегда совпадают. Так, миелопероксидаза - признанный в электронной микроскопии маркер азурофштьных гранул при светооптической визуализации обнаруживает в нейтрофилах диффузно-гранулярное распределение. В интергранулярной цитоплазме содержатся и другие компоненты нейтрофильной зернистости. Остается неясным, соответствует ли при световой микроскопии локализация основных антибактериальных факторов нейтрофильных лейкоцитов тем гранулам, которые выявляет электронная микроскопия, или существует иная закономерность их распределения в цитоплазме.

Большинством исследователей уделяется недостаточно внимания мор-фометрии лейкоцитарных гранул в норме и при различных заболеваниях. Нейтрофилы людей и лабораторных животных не имеют количественных характеристик такого важного критерия функциональной активности, как гранулированность цитоплазмы, что определяет значимость подобных исследований. Отсутствуют данные о том, насколько изменяется при патологических процессах количество гранул и их размеры, какую часть клетки занимает гранулярная и интергранулярная цитоплазма.

Тестирование функционального потенциала внутриклеточных структур циркулирующих лейкоцитов in vivo связано со значительными сложностями. Поэтому динамическое параллельное исследование iv vitro живых и фиксированных нейтрофилов крови, разработка отражающих состояние зернистости и интергранулярной цитоплазмы цитохимических и структурных критериев функциональной активности этих клеток представляется актуальным для более глубокого понимания деятельности защитных систем организма, для диагностики и прогнозирования исхода патологических процессов.

Цель и задачи исследования

Цель. Разработать новые критерии функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов, основанные на люминесценции и компьютерном анализе распределения в цитоплазме цитохимических маркеров антибактериальных систем в норме и при реактивных изменениях, связанных с повреждением тканей и с бактериальной агрессией.

Задачи:

1. Определить с помощью компьютерного анализа клеточного изображения основные морфометрические признаки цитоплазматической зернистости нейтрофильных лейкоцитов (количество, форма и размеры гранул, степень заполнения ими цитоплазмы, оптическая плотность, площадь, отношение к общей площади клетки). Найти количественные закономерности распределения и накопления компонентов зернистости в интергранулярной цитоплазме.

2. Выявить зависимость между функциональным состоянием нейтро-филов и содержанием в их гранулах и интергранулярной цитоплазме цитохимических маркеров антибактериальных систем: миелопероксидазы, ка-тионных белков, нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы, щелочной фосфатазы.

3. Установить количественные параметры активации кислородзависи-мых антибактериальных систем при инкубации живых нейтрофилов in vitro (спонтанный и стимулированный бактериальным антигеном НСТ-тест) с оценкой результатов при помощи компьютерного анализа клеточного изображения. Определить посредством функционального зондирования эффекторные ресурсы нейтрофильных лейкоцитов при их взаимодействии с бактериями.

4. Определить функциональные возможности нейтрофильных лейкоцитов, характерные для термического повреждения тканей, гнойного процесса и асептического некроза. Оценить изменения параметров структурных критериев функциональной активности нейтрофилов у больных с ожоговой травмой, с эмпиемой плевры и с инфарктом миокарда.

5. Выявить у лабораторных животных видовые особенности зернистости нейтрофильных лейкоцитов и распределения в цитоплазме цитохимических маркеров антибактериальных систем. Дать характеристику функционально-метаболических сдвигов в нейтрофилах при экспериментальном сепсисе.

6. Охарактеризовать способность активированных нейтрофильных лейкоцитов излучать люминесценцию, выяснить условия её возбуждения, определить обусловленность свечения компонентами цитоплазмы.

7. Разработать метаболический показатель функциональной активации нейтрофильных лейкоцитов, основанный на их люминесценции. Установить параметры этого показателя в норме и при изменениях функционального состояния нейтрофилов у пациентов с заболеваниями различной этиологии.

8. Разработать алгоритмы компьютерного анализа изображений нейтрофильных лейкоцитов для оценки их функционального состояния. Определить исследовательские возможности этого метода для его применения в клинической лабораторной диагностике.

Научная новизна

1. Обнаружено неизвестное ранее свойство активированных нейтрофильных лейкоцитов излучать два типа собственной люминесценции под действием возбуждающего света после взаимодействия с нитросиним тет-разолием. Выявлена обусловленность свечения восстановленными пири-диннуклеотидами (1-й тип) и окисленными флавопротеинами (2-й тип).

2. Изобретен способ определения активированных нейтрофильных лейкоцитов по их люминесценции (авторское свидетельство на изобретение № 1394128).

3. Разработан новый метаболический показатель функциональной активации нейтрофила, основанный на соотношении интенсивности люминесценции восстановленных пиридиннуклеотидов и окисленных флаво-протеинов. Выявлены патологические состояния, при которых возрастает величина этого показателя.

4. В цитоплазме нейтрофилов человека и животных с помощью компьютерного анализа изображения впервые выделены две зоны локализации цитохимических маркеров антибактериальных систем: гранулярная и диффузная. Установлено, что в процессе активации нейтрофилов изменение количества и суммарной площади гранул сопровождается адекватным изменением площади зоны диффузного распределения вещества.

5. Получены новые сведения об изменениях содержания ферментов и неферментных катионных белков в гранулярной и диффузной зоне цитоплазмы активированных нейтрофильных лейкоцитов при ожоговой травме, эмпиеме плевры, инфаркте миокарда и экспериментальном сепсисе.

6. Выявлены неизвестные ранее видовые особенности распределения компонентов антибактериальных систем в цитоплазме нейтрофильных лейкоцитов лабораторных животных.

7. Разработан оригинальный алгоритм компьютерного анализа цифрового изображения нейтрофильных лейкоцитов. Предложены новые расчетные признаки, вычисляемые по измеренным параметрам клеточного изображения: интегральный цитохимический показатель, показатель заполнения клетки, показатель конгломерации гранул и показатель диффузии.

8. Разработан новый способ цитохимического выявления катионных белков в гранулоцитах крови амидо черным 10Б для визуальной оценки и компьютерного анализа изображения.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Активированные нейтрофильные лейкоциты обладают способностью излучать люминесценцию, обусловленную восстановленными пири-диннуклеотидами и окисленными флавопротеинами. Люминесценция отражает метаболические изменения в процессе функциональной активации нейтрофила.

2. Цитохимические маркеры антибактериальных систем при световой микроскопии образуют в цитоплазме нейтрофильных лейкоцитов человека и лабораторных животных наряду с гранулами зону диффузного распределения. В процессе активации нейтрофилов изменение количества и суммарной площади гранул сопровождается адекватным изменением площади зоны диффузного распределения вещества.

3. Активация нейтрофильных лейкоцитов в крови больных с ожоговой травмой и эмпиемой плевры сопровождается уменьшением количества гранул миелопероксидазы и нафтол-АЗ-Э-хлорацетат эстеразы с одновременным уменьшением зоны диффузного распределения этих ферментов и угнетением фагоцитарной функции. При остром инфаркте миокарда резкое уменьшение количества гранул нафтол-АЯ-О-хлорацетат эстеразы и сокращение её диффузной зоны сочетается с сохранением нормального потенциала миелопероксидазной системы нейтрофилов и их высокой фагоцитарной активностью.

4. При экспериментальном сепсисе в цитоплазме активированных нейтрофильных лейкоцитов наряду с характерными для локального гнойного процесса метаболическими сдвигами резко снижается содержание катион-ных белков как в гранулах, так и в зоне их диффузного распределения.

5. Морфометрические, оптические и расчетные параметры гранулярной и диффузной областей цитоплазмы, определяемые при компьютерном анализе изображения, адекватно отражают изменения функционального состояния нейтрофилов и могут быть структурными критериями их функциональной активности.

Научно-практическая значимость

Новые данные о функционально-метаболических изменениях в процессе активации, о люминесценции активированных фагоцитов и распределении цитохимических маркеров антибактериальных систем в гранулах и диффузной зоне цитоплазмы углубляют представления о структуре и физиологии нейтрофильных лейкоцитов человека и животных. Эти сведения, а также алгоритм компьютерного анализа клеточного изображения и расчетные показатели, характеризующие функциональное состояние нейтро-филов, могут применяться в дальнейшей научно-исследовательской работе и в учебном процессе со студентами медицинских и биологических специальностей.

Выявленные изменения активности ферментов в цитоплазме нейтро-филов при ожоговой травме, эмпиеме плевры и инфаркте миокарда могут быть использованы в клинической лабораторной диагностике при оценке тяжести патологического процесса.

Разработанные способы определения активированных нейтрофильных лейкоцитов и цитохимического выявления катионных белков можно использовать как в научно-исследовательской работе, так и в практике клинико-диагностических лабораторий.

Внедрение результатов исследования

По материалам исследований опубликовано 30 печатных работ, получено авторское свидетельство на изобретение "Способ определения активированных нейтрофильных лейкоцитов" (приложение 1).

Основные положения диссертации представлены на Всесоюзной конференции "Стресс и иммунитет" (Ленинград, 1989), 1-м Всесоюзном иммунологическом съезде (Дагомыс, 1989), Всесоюзной школе "Молекуляр-но-клеточные механизмы иммунной регуляции гомеостаза и проблемы математического моделирования" (Красноярск, 1990), 20-м съезде БЕББ (Будапешт, 1990), 2-м международном симпозиуме "Реабилитация иммунной системы" (Дагомыс, 1990), 1-й международной конференции "Реабилитация иммунной системы" (Дагомыс, 1992), 3-м конгрессе ассоциации морфологов России (Тверь, 1996), республиканской конференции, посвящен

14 ной 100-летию профессора A.M. Рейнуса (Алушта, 1997), конгрессе "Паллиативная медицина" (Москва, 1998), 4-м конгрессе международной ассоциации морфологов (Нижний Новгород, 1998), 3-м международном конгрессе патофизиологов (Лахти, 1998), 4-м съезде российских морфологов (Ижевск, 1999).

Для освоения люминесцентного цитохимического способа количественного определения активированных нейтрофильных лейкоцитов проведено обучение адъюнкта кафедры гематологии и клинической иммунологии Военно-медицинской академии в Санкт-Петербурге (приложение 3) и научного сотрудника центральной научно-исследовательской лаборатории Казанского государственного института усовершенствования врачей (приложение 4). Способ внедрен в практику научных исследований в центральной научно-исследовательской лаборатории Кубанской государственной медицинской академии (приложение 5), а в качестве лабораторно-диагностического теста - в Институте аллергии и астмы г. Краснодара (приложение 6) и лаборатории клинической иммунологии Краснодарского муниципального лечебно-диагностического объединения (приложение 7).

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Славинский, Александр Александрович

ВЫВОДЫ

1. Активированные нейтрофильные лейкоциты обладают способностью излучать два типа собственной люминесценции под влиянием возбуждающего света после взаимодействия с нитросиним тетразолием (авторское свидетельство). Сине-голубая люминесценция, имеющая максимум на 450 - 470 нм, обусловлена восстановленными пиридиннуклеотидами, а желто-зеленая с максимумом на 535 нм -окисленными флавопротеинами. Люминесценция восстановленных пиридиннуклеотидов является маркером НАДФН-оксидазы нейтрофилов, связанной с пентозофосфатным циклом, а люминесценция окисленных флавопротеинов отражает их участие в генерировании активных форм кислорода во время респираторного взрыва. Свечение локализуется в цитоплазме.

2. Люминесценция активированных нейтрофильных лейкоцитов дает количественную характеристику их эффекторного потенциала. Отношение интенсивности люминесценции восстановленных пиридиннуклеотидов к интенсивности люминесценции окисленных флавопротеинов является метаболическим показателем функциональной активации нейтрофила. Величина показателя возрастает при ожоговой травме, аллергии, иммунокомплексной патологии (ревматоидный артрит) и остается в пределах нормы при хроническом бронхите и хроническом гастрите.

3. При световой микроскопии цитохимические маркеры антибактериальных систем - миелопероксидаза, нафтол-АБ-Б-хлорацетат эстераза, катионные белки, щелочная фосфатаза и НАДФН-оксидаза образуют в цитоплазме нейтрофильных лейкоцитов человека и лабораторных животных наряду с гранулами зону диффузного распределения. Изменение функционального статуса нейтрофилов сопровождается изменением количества и суммарной площади гранул, а также адекватным изменением площади зоны диффузного распределения вещества.

4. Гиперактивация циркулирующих нейтрофильных лейкоцитов с уменьшением функционального резерва, выявляемого при стимуляции бактериальным антигеном, наблюдается у больных с гнойным процессом (эмпиема плевры), а также с обширным повреждением тканей в первые дни после ожоговой травмы. При этом снижается количество и суммарная площадь гранул миелопероксидазы и нафтол-А8-0-хлорацетат эстеразы с одновременным уменьшением зоны диффузной локализации в цитоплазме, что свидетельствует о дегрануляции азурофильной зернистости активированных нейтрофилов и является причиной угнетения их способности осуществлять киллинг фагоцитированных бактерий.

5. Острый инфаркт миокарда характеризуется гиперактивацией циркулирующих нейтрофилов крови с уменьшением функционального резерва, однако фагоцитарная функция сохраняется на нормальном уровне. Сопутствующее развитию очага асептического некроза резкое уменьшение количества и суммарной площади гранул нафтол-А8-0-хлорацетат эстеразы, а также соответствующее сокращение зоны её диффузной локализации сочетается с увеличением числа гранул миелопероксидазы при нормальной величине диффузной зоны этого фермента в цитоплазме нейтрофильных лейкоцитов.

6. Нейтрофильные лейкоциты имеют видовые особенности распределения компонентов антибактериальных систем в цитоплазме.

Активность нафтол-А8-Б-хлорацетат эстеразы в нейтрофилах человека намного выше, чем у животных. Наиболее высоким содержанием катионных белков обладают псевдоэозинофилы кролика. Нейтрофилы млекопитающих имеют сходный уровень активности миелопероксидазы в гранулах и в диффузной зоне, в то время как у лягушки активность этого фермента значительно выше главным образом за счет зоны диффузной локализации.

7. При экспериментальном сепсисе в цитоплазме активированных нейтрофильных лейкоцитов наряду с уменьшением количества гранул миелопероксидазы и нафтол-А8-Б-хлорацетат эстеразы, увеличением количества гранул щелочной фосфатазы резко снижается содержание катионных белков как в гранулах, так и в зоне их диффузного распределения. Это изменение, отсутствующее у больных эмпиемой плевры, обусловлено непосредственным взаимодействием нейтрофилов с микроорганизмами в кровотоке.

8. По данным компьютерного анализа клеточного изображения, цитоплазматическая зернистость, наблюдаемая при световой микроскопии в нейтрофильных лейкоцитах человека и животных, не тождественна гранулам различных типов, которые определяются при электронной микроскопии. Однако скопления азурофильных и специфических гранул, а также секреторных пузырьков могут лежать в основе выявляемых цитохимическими реакциями гранул вещества.

9. Определяемые в процессе компьютерного анализа изображения параметры гранулярного и интергранулярного распределения цитохимических маркеров антибактериальных систем (количество, размеры, суммарная площадь гранул, площадь зоны диффузной

246 локализации вещества) отражают функциональный статус нейтрофилов крови. Эти параметры, а также разработанные расчетные признаки -интегральный цитохимический показатель, показатель заполнения клетки, показатель конгломерации гранул и показатель диффузии являются критериями функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Компьютерный анализ цифрового изображения, созданного микроскопом и видеосистемой, открыл новые перспективы структурно-функционального исследования нейтрофильных лейкоцитов. Приходится констатировать, что возможности наиболее распространенных рутинных методов световой микроскопии в изучении клеток крови практически исчерпаны. Субъективная визуальная оценка интенсивности цитохимических реакций стала анахронизмом. Однако световой микроскоп был, остается и, по-видимому, еще долго будет главным орудием труда в клинико-диагностических лабораториях. К тому же существуют неоспоримые преимущества применения в медицине современного светового микроскопа: возможность видеть целую клетку крови, а не её срез, простота и быстрота анализа, широкий арсенал цитохимических реакций, из которых далеко не каждая имеет свой аналог в электронно-микроскопической цитохимии. Вот почему чрезвычайно важным и перспективным представляется использование тех сравнительно несложных телевизионных и компьютерных средств, которые позволяют существенно расширить возможности световой микроскопии в исследовании лейкоцитов и придать новый импульс развитию методов клинической лабораторной диагностики.

Проведенное исследование показало, что в цитоплазме нейтрофильных лейкоцитов человека и животных присутствует зона диффузной интергранулярной локализации антибактериальных компонентов гранул. Эта зона не выявляется при электронной микроскопии, что может быть связано со спецификой подготовки материала для исследования. При световой микроскопии диффузно-гранулярное распределение многих веществ в цитоплазме нейтрофилов очевидно, однако значение диффузной зоны до настоящего времени не рассматривалось. С помощью компьютерного анализа изображения нам удалось выявить закономерный характер изменения величины этой зоны при изменении функционального состояния нейтрофилов и зависимость её размеров от количества гранул в цитоплазме. Это дает основание рассматривать интергранулярную локализацию компонентов гранул как продукт их секреторной деятельности.

Наши наблюдения позволяют утверждать, что определяемые при световой микроскопии гранулы цветного продукта цитохимических реакций не тождественны тем гранулам, которые выявляет электронная микроскопия. Даже наиболее крупные из них - азурофильные не обнаруживают полного соответствия в размерах гранулам своих компонентов - миелопероксидазы и нафтол-AS-D-хлорацетат эстеразы. Вероятно, в основе тех гранул, которые мы видим при световой микроскопии, лежат более или менее крупные скопления азурофильных, специфических и желатиназных гранул, а также секреторных пузырьков.

Компьютерный анализ изображения нейтрофилов больных позволил выявить корреляцию между изменением функционального состояния клеток и структурно-цитохимическими сдвигами в их цитоплазме (Славинский A.A., Никитина Г.В., 1999 а, 1999 б, 2000 а, 2000 б). Увеличение количества циркулирующих активированных нейтрофилов у больных эмпиемой плевры и у больных в первые дни после ожоговой травмы сопровождается однотипным снижением количества гранул миелопероксидазы и нафтол-А8-0-хлорацетат эстеразы при одновременном уменьшении зоны их диффузной локализации. Это может быть следствием дегрануляции азурофильной зернистости нейтрофилов, которая происходит в кровотоке до выхода нейтрофилов в очаг воспаления, приводит к потере антибактериальных компонентов гранул и является причиной угнетения способности клеток осуществлять киллинг фагоцитированных бактерий.

При остром инфаркте миокарда установлено повышенное содержание в крови больных активированных нейтрофильных лейкоцитов с нормальным уровнем фагоцитарной активности. Значительное уменьшение количества гранул протеолитического фермента нафтол-АБ-О-хлорацетат эстеразы и соответствующее сокращение зоны её диффузной локализации сочетается с увеличением числа гранул миелопероксидазы при нормальной величине диффузной зоны этого фермента в цитоплазме нейтрофилов. Высокий потенциал миелопероксидазной системы циркулирующих нейтрофилов отражает патогенетическую роль этих клеток при инфаркте миокарда и может быть неблагоприятным фактором развития очага некроза в сердечной мышце.

Сравнительное исследование позволило найти видовые особенности распределения компонентов антибактериальных систем в цитоплазме нейтрофильных лейкоцитов человека и лабораторных животных. При экспериментальном сепсисе у мышей найдено снижение содержания катионных белков в гранулах и в диффузной зоне цитоплазмы нейтрофилов. Такие изменения не удалось обнаружить в нейтрофилах периферической крови у больных людей с локальным гнойным процессом. Это обстоятельство позволяет думать, что содержание катионных белков уменьшается только при непосредственном контакте нейтрофилов с микроорганизмами в крови или в очаге воспаления.

Нами обнаружено неизвестное ранее явление - люминесценция активированных фагоцитов, возникающая в цитоплазме нейтрофильных грану-лоцитов после их инкубации с нитросиним тетразолием. Установлено, что свечение обусловлено восстановленными пиридиннуклеотидами и окисленными флавопротеинами. Разработан основанный на этом феномене показатель, количественно характеризующий функциональную активацию метаболизма нейтрофилов, произведена его лабораторно-клиническая апробация. Метод информативен при оценке функционального состояния нейтрофилов и может найти применение в клинической лабораторной ди

242 агностике.

Считаю своей приятной обязанностью выразить глубокую признательность моему учителю профессору М.Г. Шубичу и профессору В.М. Покровскому за постоянный интерес к исследованию и ценные советы. Большое спасибо за сотрудничество и помощь в выполнении работы Г.В. Никитиной. Благодарю заведующего ожоговым отделением Краснодарской краевой больницы кандидата медицинских наук Н.А. Куринного, заведующего курсом анестезиологии и реаниматологии Кубанской государственной медицинской академии доцента Г.В. Соколенко, заведующего кардиологическим отделением Краснодарской больницы скорой медицинской помощи К.Б. Зингелевского, а также всех коллег, которые делом и добрым словом способствовали выполнению этой работы.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Славинский, Александр Александрович, 2000 год

1. Авдеева М.Г., Евглевский A.A., Лебедев В.В., Шубич М.Г. Современные лабораторно-диагностические критерии оценки течения инфекционного процесса (на примере лептоспироза). // Клин. лаб. диагностика. 1999. - № 10. - С. 24.

2. Автандилов Г. Г. Перспективы развития компьютерной цито-гистопатологии. // Арх. патологии. 1993. - № 2. - С. 3-5.

3. Автандилов Г.Г. Компьютерная микротелефотометрия в диагностической гистоцитопатологии. М. - 1996.

4. Автандилов Г.Г., Червонная Л.В., Симакина Е.П. Компьютерное микротелефотометрическое исследование дисплазий и аденокарци-номы толстой кишки у больных хроническим неспецифическим колитом. // Клин. лаб. диагностика. 1997. - № 10. - С. 34-35.

5. Алмазов В.А., Афанасьев Б.В., Зарицкий А.Ю., Мамаев H.H., Рудакова Т.Л., Фрейдлин И.С., Цвейбах A.C., Шишков А.Л. Физиология лейкоцитов человека. Ленинград. - 1979.

6. Анишин A.B., Арустамян Ю.С., Сарычева Т.Г., Новодержкина Ю.К., Карпухин C.B., Ашуров Г.Д. Принципы построения программно-аппаратных средств автоматизированного рабочего места врача-лаборанта. // Клин. лаб. диагностика. 1997. - № 10. - С. 20-23.

7. Атанасов К.К., Цветкова Т.З. О цитохимическом определении активности нафтол-АБ-О-хлорацетатэстеразы в бластных клетках у больных острым миелобластным лейкозом. // Гематология и транс-фузиология. 1983. - № 4. - С. 56-59.

8. Бахов Н.И., Александрова Л.З., Титов В.Н. Роль нейтрофилов в регуляции метаболизма тканей (обзор литературы). // Лаб. дело. 1988.6.-С. 3-12.

9. Бережная Н.М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз. Киев.- 1988.

10. Березная И.Я., Гуревич Е.Я., Мацко Д.Е., Михальченко А.И. Теория и практика в создании автоматизированной интеллектуальной системы распознавания гистологических препаратов. // Арх. патологии.- 1993. -№4.-С. 40-43.

11. Бочоришвили В.Г., Бочоришвили Т.В. Новая иммунологическая концепция сепсиса и ее клиническое значение. // Int. J. on Immunorehabilitation. 1997. - № 6. - С. 20-26.

12. Бышевский А.Ш., Терсенов O.A. Биохимия для врача. Екатеринбург. - 1994.

13. Верденская Н.В., Виноградов А.Г., Иванова И.А., Погорелов В.М., Сазонов В.В., Козинец Г.И. Сегментация изображений в системе автоматического анализа клеточного состава периферической крови. // Клин. лаб. диагностика. 1999. - № 10. - С. 25-26.

14. Владимиров Ю.А. Фотохимия и люминесценция белков. М. - 1965.

15. Воробьев А.И. (ред.). Руководство по гематологии. М. - 1985.

16. Воробьев И.А., Захарова А.И., Атауллаханов Ф.И., Вотчал М.С., Ло-рие Ю.Ю., Воробьев А.И. Определение условий компьютерной записи микроскопического изображения на примере кариоцитов периферической крови. // Пробл. гематологии. 1998. -№3. - С. 14-20.

17. Галанкин В.Н. Тесей-феномен: новое явление. // Арх. патологии. -1994. № 1. - С. 22-29.

18. Галанкин В.Н., Сапрыкин В.П. Ультраструктурная характеристика нейтрофильных лейкоцитов крови больных с сепсисом. // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1996. - № 3. - С. 13-18.

19. Галанкин В.Н., Сапрыкин В.П. Невоспалительная форма антибактериального реагирования нейтрофильных лейкоцитов. // Арх. патологии. 1997.-№ 4. - С. 8-13.

20. Галанкин В.Н., Сапрыкин В.П., Светухин A.M., Втюрин Б.В., Жуков А.О. О состоянии нейтрофильных лейкоцитов крови больных гнойно-септическими заболеваниями. // Арх. патологии. 1994. - № 5. -С. 20-25.

21. Галанкин В.Н., Токмаков A.M., Юнусходжаев Э.Х. Ультраструктурные проявления мембранной активности нейтрофильных лейкоцитов. // Арх. патологии. 1988. - № 7. - С. 23-30.

22. Галкин A.A. Локомоторные свойства нейтрофилов и механизмы регуляции их движения. // Успехи современной биологии. 1997. - № 6. - С. 690-703.

23. Губанов Н.И., Утепбергенов A.A. Медицинская биофизика. М. -1978.

24. Демидов A.A., Орлова Н.П., Вишневецкий Ф.Е. Эстеразная активность нейтрофилов и моноцитов крови у больных стенокардией и инфарктом миокарда // Клин, медицина. 1991. - № 1. - С. 66-67.

25. Долгушин И.И., Зурочка A.B., Чукичев A.B. Регуляторные пептиды нейтрофилов (нейтрофилокины). // Иммунология. 1995. - № 4. - С. 34-40.

26. Зайцев К.Т. Соотношение активности тканевых базофилов, лейкоцитов и проницаемости венул брыжейки крысы при моделировании перитонита. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1993. - № 1. - С. 29-30.

27. Земсков В.М., Субботин С.М. Молекулярные механизмы влияния адгезии на активацию и дифференцировку иммунокомпетентных клеток. // Иммунология. 1990. - № 2. - С. 9-12.

28. Казначеев К. С. Механизмы развития цитокининдуцированного апоптоза. // Гематол. и трансфузиол. 1999. - № 1. - С. 40-43.

29. Каргина И.Б., Семочкин C.B., Бекман Э.М., Арион В.Я. Развитие иммунодефицита после ожоговой травмы: механизмы и биологической значение. // Int. J. on Immunorehabilitation. 1999. - № 11. С. 164-167.

30. Карнаухов В.H. Люминесцентный спектральный анализ клетки. М. - 1978.

31. Клебанов Г.И., Владимиров Ю.А. Клеточные механизмы прайминга и активации фагоцитов. // Успехи современной биологии. 1999. -т. 119. -№ 5. - С. 462-475.

32. Клименко H.A., Дыгай A.M., Абрамова Е.В., Симанина Е.В., Гуми-левский Б.Ю., Болдышев Д.А., Гольдберг Е.Д. Роль тучных клеток в реакциях системы крови при воспалении. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1991. -№ 9. - С. 305-307.

33. Клименко H.A., Пышнов Г.Ю. Механизмы модулирующего влияния тучных клеток на лейкоцитарную реакцию при воспалении. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1993. - № 1. - С. 29-30.

34. Козинец Г.И., Котельников В.М., Погорелов В.М. Применение компьютеров в гематологических цитологических исследованиях. // Лаб. дело. 1990. - № 3. - С. 21-25.

35. Козинец Г.И., Макаров В.А. (ред.). Исследование системы крови в клинической практике. М. - 1997.

36. Козинец Г.И., Погорелов В.М., Сарычева Т.Г., Дягилева O.A., Шиш-канова З.Г., Наумова И.Н., Иванова И.А. Морфологические признаки апоптоза новый критерий эффективности терапии гемобластозов. // Клин. лаб. диагностика. - 1998. -№ 8. - С. 21.

37. Колесникова Н.В., Нестерова И.В., Чудилова Г.А., Слынько Л.И. Создание экспериментальной модели иммунодефицитного состояния по системе нейтрофильных гранулоцитов с помощью гепарина. // Иммунология. 1994. - № 2. - С. 53-55.

38. Конюхова Л.В., Галанкин ВН., Харченко Н.М., Муравьев С.М., Гос-тищев В.К. Особенности реакции нейтрофильных лейкоцитов на этапах развития разлитого гнойного перитонита. // Арх. патологии. -1991.-№ 10.-С. 18-24.

39. Костюченок Б.М. (ред.). Раны и раневая инфекция. Научный обзор. -М. 1977.

40. Крейнина М.В., Клебанов Г.И., Кузнецов С.В., Ваколюк P.M., Владимиров Ю.А. Функциональная гетерогенность циркулирующих по-лиморфноядерных лейкоцитов при остром инфаркте миокарда. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1989. -№ 12. - С. 673-675.

41. Крю Ж. Биохимия. Медицинские и биологические аспекты. М., 1979.

42. Кузина В.А., Токаревич Н.К., Мазинг Ю.А. Антимикробные катион-ные белки нейтрофильных гранулоцитов при экспериментальном ку-риккетсиозе. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1992. - № 10. - С. 391-392.

43. Кулаков В.В., Воробьева Н.В., Пинегин Б.В. Изучение цитостатиче-ской и цитотоксической активности нейтрофилов периферической крови человека. // Иммунология. 1997. - № 4. - С. 19-20.

44. Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита. // Соросовский образовательный журнал. 1999. - №1. - С. 2-7.

45. Лебедев В.В. Цитохимические исследования нейтрофильных лейкоцитов у больных лептоспирозом. // Кубанский научный мед. вестник. 1999. -№ 12. - С. 27-30.

46. Левин Г.Г., Козинец Г.И. Новые возможности оптической микроскопии при исследовании клеток системы крови. // Клин. лаб. диагностика. 1997. - № 10.-С. 14-16.

47. Ленинджер А. Л. Биохимия. Молекулярные основы структуры и функций клетки. М. - Мир. - 1974.

48. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. -М. 1969.

49. Луговская С.А. Структура и функции моноцитов и макрофагов (обзор литературы). // Клин. лаб. диагностика. 1997. - № 9. - С. 10-16.

50. Луговская С.А., Фролова O.E., Погорелов В.М., Козинец Г.И. Анализ изображения моноцитов. // Клин. лаб. диагностика. 1997. - № 5. -С. 17.

51. Лукьянова Л. Д., Балмуханов Б. С., Уголев А. Т. Кислородзависимые процессы в клетке и ее функциональное состояние. М. - Наука. -1982.

52. Львов С.Г., Дульцина С.М., Голубев А.М., Козинец Г.И. Эстеразная активность клеток миелоидного происхождения периферический крови здоровых людей. // Лаб. дело. 1983. -№ 6. - С. 10-12.

53. Ляпина Л.А., Кондашевская М.В., Кокряков В.Н., Шамова О.В. Взаимодействие гепарина с неферментным катионным белком из нейтрофилов дефенсином. // Вопр. мед. химии. 1992. - № 1. - С. 39-42.

54. Мазинг Ю.А. Нейтрофильные гранулоциты и системы защиты организма. // Арх. патологии. 1991. - № 9. - С. 70-73.

55. Макулова Т.Г. Анализ активности пероксидазы сегментоядерных нейтрофилов крови на ЭВМ с цифровой обработкой изображения. // Клин. лаб. диагностика. 1994. - № 4. - С. 22-25.

56. Маянская H.H., Николаев Ю.А., Шургая A.M., Гефарова З.М. Цитохимическое определение лизосомальных катионных белков в нейтрофилах крови при гипертрофической кардиомиопатии. // Лаб. дело. 1991. -№ 5. - С. 15-18.

57. Маянский А.Н. Механизмы рекогносцировочных реакций нейтрофи-ла. // Успехи современной биологии. 1986. - № 3(6). - С. 690-703.

58. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. -Новосибирск. 1983.

59. Маянский А.Н., Пикуза Ш.И. Клинические аспекты фагоцитоза. -Казань. 1993.

60. Мичова М., Факан Ф. Цитохимическое и гистохимическое определение нафтол-АБ-О-хлорацетатэстеразы и его использование в диагностике. //Лаб. дело. 1980. -№ 7. - С. 393-395.

61. Набокина С.М., Ревин В.В. Аннексин-1-индуцируемая агрегация желатиназных гранул нейтрофилов человека. // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1999. - № 4. - С. 403-405.

62. Нестерова И. В. Клинико-диагностическое значение NBT-теста при стафилококковых пневмониях у детей. // Педиатрия. 1980. - № 5. -С. 50.

63. Пермяков Н.К., Аниховская И.А., Крупник А.Н., Лиходед Н.В., Ли-ходед В.Г., Яковлев М.Ю. Иммуноморфологическая оценка резервов связывания эндотоксина полиморфноядерными лейкоцитами. // Арх. патологии. 1995. - № 2. - С. 4-7.

64. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства. М. - 1978.

65. Пигаревский В.Е. Гипотеза о резорбтивной клеточной резистентности как особой форме антимикробной защиты организма. // Арх. патологии. 1992. -№ 8. - С. 40-45.

66. Пинегин Б.В., Андронова Т.М., Юдина Т.И. Иммунодиагностика и иммунотерапия хирургических инфекций. // Int. J. on Immunorehabilitation. 1998. -№ 10. - С. 86-99.

67. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная. М. - 1962.

68. Погорелов В.М., Медовый B.C., Балабуткин В.А., Соколинский Б.З.,

69. Пятницкий A.M., Козинец Г.И. Методы компьютерной цитологии в гематологических исследованиях. // Клин. лаб. диагностика. 1997. -№ 11.-С. 40-44.

70. Погорелов В.М., Медовый B.C., Хазем Г.М., Козинец Г.И. Анализ клеточного изображения. // Клин. лаб. диагностика. 1995. - № 3. -С.40-43.

71. Покровский A.A., Тутельян В.А. Лизосомы. М. - 1976.

72. Потапнев М.П. Цитокиновая сеть нейтрофилов при воспалении. // Иммунология. 1995. - № 4. - С. 34-40.

73. Потапнев М.П., Печковский Д.В. Иммунорегуляция антимикробной активности нейтрофилов человека. // Иммунология. 1994. - № 5. -С. 4-6.

74. Потапова С. Г., Демидова Н, В., Козинец Г. И. Тест восстановления нитросинсго тетразолия в норме и при остром лейкозе. // Пробл. ге-матол. 1978. - № 9. - С. 41-44.

75. Пятницкий A.M., Соколинский Б.З., Бетрозова М.В., Медовый B.C., Козинец Г.И. Анализ эритроцитов в системе "Мекос-Ц". // Клин, лаб. диагностика. 1997. - № 10. - С. 8-9.

76. Роговин В.В., Пирузян Л.А., Муравьев P.A. Пероксидазосомы. М. - 1977.

77. Самойлов В.О. Общая физиология и физиология клетки. // Успехи физиологических наук. 1994. - т. 25. - № 2. - С. 15-22.

78. Саркисов Д.С. Структурные основы надежности биологических систем. // Арх. патологии. 1994. - № 5. - С. 4-7.

79. Саркисов Д.С., Колокольчикова Е.Г., Каем Р.И., Гришина И.А., Панова Ю.М. Электронно-радиоавтографическое изучение бактериальной инвазии у тяжелообожженных. // Арх. патологии. 1987. - № 8. - С. 35-41.

80. Саркисов Д.С., Пальцын A.A. Новые данные о функциональной морфологии лейкоцитов при гнойно-септических процессах. // Арх. патологии. 1992. - № 1. - С. 3-8.

81. Саркисов Д.С., Пальцын A.A., Червонская Н.В., Бадикова А.К., Устинова Т.С., Победина В.Г. Влияние сыворотки на внутри- и внеклеточную бактерицидную способность нейтрофилов. // Арх. патологии. 1988. -№ 7.с. 17-23.

82. Сахарова И.Я. Неспецифическая резистентность по показателям катионных белков нейтрофильных гранулоцитов при развитии туберкулезного процесса. // Пробл. туберкулеза. 1994. - № 4. - С. 51-53.

83. Сейц И.Ф. Взаимодействие дыхания и гликолиза в клетке и сопряженное фосфорилирование. Ленинград. - 1961.

84. Сейц И.Ф., Луганова И.С. Биохимия клеток крови и костного мозга в норме и при лейкозах. Ленинград. - 1967.

85. Сидельникова В.И., Лифшиц В.М. Значение индивидуальной оценки реактивности гранулоцитарной системы в эксперименте и клинике. // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1996. - № 4. - С. 6-9.

86. Сидоркин В.Г., Старикова М.А., Пылаева С.П., Гординская H.A., Сидоркина А.Н. Свободнорадикальный потенциал нейтрофилов у больных с термической травмой. // Деп. в ВИНИТИ 96.09.96. № 2805-В96.

87. Славинский A.A. Количественное люминесцентно-цитохимическое изучение лейкоцитов. Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 1979.

88. Славинский A.A. Способ определения активированных нейтрофильных лейкоцитов. Авторское свидетельство № 1394128 на изобретение. // Бюлл. изобретений. 1988. - № 17. - С. 175.

89. Славинский A.A. Люминесценция активированных фагоцитов. // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1989 а. - № 10. - С. 5356.

90. Славинский A.A. Люминесцентный цитохимический метод количественного определения активированных фагоцитов. // Лабор. дело. -1989 6. -№ 4. -С. 32-34.

91. Славинский A.A. Фотолюминесценция фагоцитов. Возможность тестирования энергопроизводящих систем. // Иммунология. 1990. - № 6.-С. 75-76.

92. Славинский A.A. Люминесценция активированных фагоцитов, её цитологическое и лабораторно-клиническое значение. Материалы респ. конф., поев. 100-летию проф. A.M. Рейнуса. Алушта. - 1997. - С. 238-240.

93. Славинский A.A., Никитина Г.В. Цитохимическое выявление кати-онных белков в гранулоцитах крови амидо черным 10Б для визуальной оценки и компьютерного анализа изображения. // Клин. лаб. диагностика. 1999 а. - № 2. - С. 35-37.

94. Славинский A.A., Никитина Г.В. Щелочная фосфатаза в нейтрофи-лах крови. Компьютерный анализ изображения. // Кубанский научный мед. вестник. 1999 б. - № 12. - С. 45-47.

95. Славинский A.A., Никитина Г.В. Компьютерный анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов: миелопероксидаза. // Клин. лаб. диагностика. 2000 а. - № 1. - С. 21-24.

96. Славинский A.A., Никитина Г.В. Компьютерный анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов: нафтол-А8-0-хлорацетат эстераза. // Клин. лаб. диагностика. 2000 б. - № 5. - С. 34-37.

97. Стасенко A.A., Чернышов В.П. Особенности функциональной активности нейтрофилов крови и желчи у больных гнойным холангитом. // Клин. лаб. диагностика. 1997. - № 12. - С. 22-33.

98. Сторожук П.Г., Сторожук А.П., Быков И.М. Антибактериальные препараты как модуляторы ферментов антирадикальной защиты форменных элементов крови. // Int. J. on Immunorehabilitation. 1999. -№ 11. - С. 191-196.

99. Стражеско Н.Д., Яновский Д.Н. Атлас клинической гематологии. -М. 1963.

100. Терещенко И.П., Кашулина А.П. Роль системы нейтрофильных гра-нулоцитов в формировании особенностей развития патологического процесса. // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1993. - № 4, -С. 56-60.

101. Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э., Хилл Р., Леман И. Основы биохимии. -М. 1981.

102. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Современные подходы к оценке основных этапов фагоцитарного процесса // Иммунология. 1995. - № 4. -С. 3-8.

103. Хейхоу Ф.Г.Д., Кваглино Д. Гематологическая цитохимия. М. -1983.

104. Хомерики С.Г., Морозов И.А. Ультраструктурные изменения нейтрофильных гранулоцитов при дилатационной кардиомиопатии и их динамика после облучения крови гелий-неоновым лазером in vitro. // Арх. патологии. 1998 а. - № 3. - С. 28-31.

105. Хомерики С.Г., Морозов И А. Количественный анализ ультраструктур полиморфноядерных нейтрофилов крови у больных ишемиче-ской болезнью сердца после сеанса внутривенной лазертерапии. // Арх. патологии. 1998 б. - № 6. - С, 24-26.

106. Шехтер А.Б., Серов В.В. Воспаление, адаптивная регенерация и дис-регенерация (анализ межклеточных взаимодействий). // Арх. патологии. 1991.-№ 7. - С. 7-14.

107. Штейн Г.И., Пантелеев В.Г., Поваркова A.B., Кудрявцев Б.Н. Возможности анализатора изображений "Видеотест" для проведения микрофотометрических исследований в цитологии. // Цитология. -1998. т. 40. - № 10. - С. 913-916.

108. Шубич М.Г. Цитохимическое определение щелочной фосфатазы. // Лабор. дело. 1965 а. - № 1. - С. 10-14.

109. Шубич М.Г. Об оценке результатов цитохимического определения активности щелочной фосфатазы нейтрофилов крови. // Цитология. -1965 б. -№6.-С. 773-775.

110. Шубич М.Г. Цитохимическое изучение активности щелочной фосфатазы лейкоцитов у лабораторных животных. // Цитология. 1966 а.-№3.-С. 420-422.

111. Шубич М.Г. Цитохимический анализ активности щелочной фосфатазы лейкоцитов и его клинико-диагностическое значение. // Лабор. дело. 1966 б. - № 6. - С. 323-327.

112. Шубич М.Г. Цитохимия нейтрофильных лейкоцитов в норме и при некоторых заболеваниях. Автореф. дис. . докт. мед. наук. М. -1967.

113. Шубич М.Г., Авдеева М.Г., Вакуленко А.Д. Адгезивные межклеточные взаимодействия. // Арх. патологии. 1997. - № 6. - С. 3-9.

114. Шубич М.Г., Нагоев Б.С. Щелочная фосфатаза лейкоцитов в норме и патологии. М. - 1980.

115. Шубич М.Г., Нестерова И.В. Метаболические аспекты фагоцитоза в нейтрофильных гранулоцитах у детей раннего возраста. // Педиатрия. 1978.-№ 10. - С. 22-28.

116. Шубич М.Г., Рыковская Г.И. Значение теста восстановления нитро-синего тетразолия. // Лабор. дело. 1980. - № 5. - С. 272-274.

117. Шубич M.Г., Славинский А.А. Цитохимическое изучение катионных белков лейкоцитов у человека и некоторых лабораторных животных. //Цитология. 1977. -№ 2. - С. 154-157.

118. Югай М.Т., Формазюк В.Е., Сергиенко В.И., Рябцева А.А., Ромашова М.П. Роль миелопероксидазы продукта полиморфноядерных лейкоцитов в патогенезе катаракты. // Бюл. эксперим. биол. и мед. -1992.-№ 10.-С. 364-366.

119. Юденфренд С. Флуоресцентный анализ в биологии и медицине. М.- Мир. 1965.

120. Ackerman G.A. Histochemical differentiation during neutrophil development and maturation. // Ann. NY acad. sci. 1964. - № 113. - P. 537555.

121. Arnljots K., Sorensen O., Lollike K., Borregaard N. Timing, targeting and sorting of azurophil granule proteins in human myeloid cells. // Leukemia. 1998.-v. 12. -№ 11. - P. 1789-1795.

122. Baechner R.L., Nathan D.G. Quantitative NBT test in chronic granulomatous disease. // Science. 1967. - v. 155. - P. 835-836.

123. Baggiolini M. Activation and recruitment of neutrophil leukocytes. // Clin. Exp. Immunol. 1995. - v. 101. - № 1. - P. 5-6.

124. Baggiolini M., Boulay F., Badwey J.A., Curnutte J.T. Activation of neutrophil leukocytes: chemoattractant receptors and respiratory burst. // FASEB J. 1993.-v. 7. - № ll.-P. 1004-1010.

125. Bainton D.F. Neutrophil granules. // Br. J. Haematol. 1975. - v. 29. -№ 1. - P. 17-22.

126. Bainton D.F. Neutrophil granules: A review. // Am. J. Med. Technol. -1976. v. 42. -№ 1. - P. 15-21.

127. Bainton D.F. Selective abnormalities of azurophil and specific granules of human neutrophilic leukocytes. // Fed. Proc. 1981. - v. 40. - № 5. - P. 1443-1450.

128. Bainton D.F. Neutrophilic leukocyte granules: from structure to function. //Adv. Exp. Med. Biol. 1993. - v. 336. - P. 17-33.

129. Bainton D.F. Distinct granule populations in human neutrophils and lysosomal organelles identified by immuno-electron microscopy. // J. Immunol. Methods. 1999. - v. 232. -№ 1-2. - P. 153-168.

130. Bainton D. F., Farquhar M.G. Differences in enzyme content of azurophil and specific granules of polymorphonuclear leukocytes. 2. Cytochemistry and electron microscopy of the bone marrow cells. // J. Cell Biol. 1968. -v. 39. - P. 299-317.

131. Bainton D.F., Miller L.J., Kishimoto T.K., Springer T.A. Leukocyte adhesion receptors are stored in peroxidase-negative granules of human neutrophils. // J. Exp. Med. 1987. - v. 166. - № 6. - P. 1641-1653.

132. Bainton D.F., Ullyot J.L., Farquhar M.G. The development of neutrophilic polymorphonuclear leukocytes in human bone marrow. // J.philic polymorphonuclear leukocytes in human bone marrow. // J. Exp. Med. 1971.-v. 134.-№4.-P. 907-934.

133. Baranova K., Stanulla M., Zeidler C., Welte K. Alkaline phosphatase activity in neutrophils from patients with severe congeni-tal neutropenia (Kostmann's syndrome). // Int. J. Hematol. 1999. - v. 70. - № 4. - P. 236-240.

134. Belaaouaj A., McCarthy R., Baumann M., Gao Z., Ley T.J., Abraham S.N., Shapiro S.D. Mice lacking neutrophil elastase reveal impaired host defense against gram negative bacterial sepsis. // Nat Med. 1998. - v. 4. - № 5. - P. 615-618.

135. Bjeirum O.W., Borregaard N. Dual granule localization of the dormant NADPH oxidase and cytochrome b559 in human neutrophils. // Eur. J. Haematol. 1989. - v. 43. - № 1. - P. 67-77.

136. Bjerrum O.W., Borregaard N. Mixed enzyme-lmked immunosorbent assay (MELISA) for HLA class I antigen: a plasma membrane marker. // Scand. J. Immunol. 1990.-v. 31. -№3. - P. 305-313.

137. Bjerrum O.W., Nissen M.H., Borregaard N. Neutrophil beta-2 microglobulin: an inflammatory mediator. // Scand. J. Immunol. 1990. - v. 32. -№3. - P. 233-242.

138. Borregaard N. Bactericidal mechanisms of the human neutrophil. An integrated biochemical and morphological model. // Scand. J. Haematol. -1984. v. 32. - № 3. - P. 225-230.

139. Borregaard N. The respiratory burst of phagocytosis: biochemistry and subcellular localization. // Immunol. Lett. 1985 a. - v. 11. - № 3-4.1. P. 165-171.

140. Borregaard N. Activation of phagocytes. // Eur. J. Clin. Invest. 1985 b. -v. 15,-№5.-P. 240-241.

141. Borregaard N. Subcellular localization and dynamics of components of the respiratory burst oxidase. // J. Bioenerg. Biomembr. 1988 a. - v. 20. -№ 6.-P. 637-651.

142. Borregaard N. The human neutrophil. Function and dysfunction. // Eur. J. Haematol. 1988 b. - v. 41. - № 5. - P. 401-413.

143. Borregaard N. Current concepts about neutrophil granule physiology. // Curr. Opm. Hematol. 1996. - № 3. - P. 11-18.

144. Borregaard N. Development of neutrophil granule diversity. // Ann. N Y Acad. Sci. 1997. - v. 832. - P. 62-68.

145. Borregaard N., Cowland J.B. Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte. // Blood. 1997. - v. 89. - № 10. - P. 35033521.

146. Borregaard N., Heiple J.M., Simons E.R., Clark R.A. Subcellular localization of the b-cytochrome component of the human neutrophil microbicidal oxidase: translocation during activation. // J. Cell Biol. -1983. v. 97. -№ 1. - P. 52-61.

147. Borregaard N., Herlin T. Energy metabolism of human neutrophils during phagocytosis. // J. Clin. Invest. 1982. - v. 70. - № 3. - P. 550-557.

148. Borregaard N., Jensen H.S., Bjerrum O.W. Prevention of tissue damage: inhibition of myeloperoxidase mediated inactivation of alpha 1-proteinase inhibitor by N-acetyl cysteine, glutathione, and methionine. //

149. Agents. Actions. 1987. - v. 22. - № 3-4. p. 255-260.

150. Borregaard N., Kjeldsen L., Lollike K., Sengelov H. Ca(2+)-dependent translocation of cytosolic proteins to isolated granule subpopulations and plasma membrane from human neutrophils. // FEBS Lett. 1992. - v. 304.-№2-3.-P. 195-197.

151. Borregaard N., Kjeldsen L., Lollike K., Sengelov H. Granules and vesicles of human neutrophils. The role of endomembranes as source of plasma membrane proteins. // Eur. J. Haematol. 1993. - v. 51. - № 5. -P. 318-322.

152. Borregaard N., Kjeldsen L., Lollike K., Sengelov H. Granules and secretory vesicles of the human neutrophil. // Clin. Exp. Immunol. 1995. - v. 101.-№ l.-P. 6-9.

153. Borregaard N., Kjeldsen L., Rygaard K., Bastholm L., Nielsen M.H., Sengelov H., Bjerram O.W., Johnsen A.H. Stimulus-dependent secretion of plasma proteins from human neutrophils. // J. Clin. Invest. 1992. - v. 90. -№ l.-P. 86-96.

154. Borregaard N., Kjeldsen L., Sengelov H. Mobilization of granules in neutrophils from patients with myeloproliferative disorders. // Eur. J. Haematol. 1993. - v. 50. - № 4. - P. 189-199.

155. Borregaard N., Lollike K., Kjeldsen L., Sengelov H., Bastholm L., Nielsen M.H., Bainton D.F. Human neutrophil granules and secretory vesicles. // Eur. J. Haematol. 1993. - v. 51. - № 4. - P. 187-198.

156. Borregaard N., Miller L.J., Springer T.A. Chemoattractant-regulated mobilization of a novel intracellular compartment in human neutrophils. // Science. 1987. - v. 237 (4819). - P. 1204-1206.

157. Borregaard N., Sehested M., Nielsen B.S., Sengelov H., Kjeldsen L. Biosynthesis of granule proteins in normal human bone marrow cells. Gelatinase is a marker of terminal neutrophil differentiation. // Blood. 1995. -v. 85. -№ 3. - P. 812-817.

158. Borregaard N., Simons E.R., Clark R.A. Involvement of cytochrome b-245 in the respiratory burst of human neutrophils. // Infect. Immun. -1982. v. 38. - № 3. - P. 1301-1303.

159. Borregaard N., Tauber A.I. Subcellular localization of the human neutrophil NADPH oxidase. b-Cytochrome and associated flavoprotein. // J. Biol. Chem. 1984. - v. 259. - № 1. - P. 47-52.

160. Bretz U, Baggiolini M. Biochemical and morphological characterization of azurophil and specific granules of human neutrophilic polymorphonuclear leukocytes. // J Cell Biol. 1974. - v. 63. - № 1. - P. 251-269.

161. Brooks C.J., Adu D., Savage C.0. ANCA stimulate neutrophils to produce IL-1 // Ctin. and Exp. Immunol. 1995. - v. 101. - № 1. - P. 39.

162. Bruehl R.E., Moore K.L., Lorant D.E., Borregaard N., Zimmerman G.A., McEver R.P., Bainton D.F. Leukocyte activation induces surface redistribution of P-selectin glycoprotein ligand-1. // J. Leukoc. Biol. 1997. -v. 61. -№4. - P. 489-499.

163. Bruehl R.E., Springer T.A., Bainton D.F. Quantitation of L-selectin distribution on human leukocyte microvilli by immunogold labeling and electron microscopy. // J. Histochem. Cytochem. 1996. - v. 44. - № 8. -P. 835-844.

164. Bundgaard J.R., Sengelov H., Borregaard N., Kjeldsen L. Molecular cloning and expression of a cDNA encoding NGAL: a lipocalin expressed in human neutrophils. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994. - v. 202.-№3. - P. 1468-1475.

165. Castle M., Nazarian A., Yi S.S., Tempst P. Lethal effects of apidaecin on escherichia coli involve sequential molecular interactions with diverse targets. // J. Biol. Chem. 1999. - v. 274. - P. 32555-32564.

166. Cham B.P., Gerrard J.M., Bainton D.F. Granulophysin is located in the membrane of azurophilic granules in human neutrophils and mobilizes to the plasma membrane following cell stimulation. // Am. J. Pathol. -1994. v. 144.-№6.-P. 1369-1380.

167. Chen J.W., Murphy T.L., Willmgham M.C., Pastan I., August J.T. Identification of two lysosomal membrane glycoproteins. // J. Cell Biol. -1985. v. 101. - P. 85-95.

168. Clark R.A., Borregaard N. Neutrophils autoinactivate secretory products by myeloperoxidase-catalyzed oxidation. // Blood. 1985. - v. 65. - № 2. - P. 375-381.

169. Condliffe A.M., Chilvers E.R, Haslett C, Dransfield I. Priming differentially regulates neutrophil adhesion molecule expression/function // Immunology. 1996. - v. 89. - № 1. - P. 105-111.

170. Cowland J.B., Borregaard N. Molecular characterization and pattern oftissue expression of the gene for neutrophil gelatinase-associated lipo-calin from humans. // Genomics. 1997. - v. 45. - № 1. - P. 17-23.

171. Cowland J.B., Johnsen A.H., Borregaard N. hCAP-18, a cathelin/pro-bactenecin-like protein of human neutrophil specific granules. // FEBS Lett. 1995. - v. 368. -№ 1. - p. 173-176.

172. Cregar L., Elrod K.C., Putnam D., Moore W.R. Neutrophil myeloperoxidase is a potent and selective inhibitor of mast cell tryptase. // Arch. Bio-chem. Biophys. 1999. - v. 366. - № 1. - P. 125-130.

173. Cseraok E., Ernst M., Schmitt W., Bainton D.F., Gross W.L. Activated neutrophils express proteinase 3 on their plasma membrane in vitro and in vivo. // Clm. Exp. Immunol. 1994. - v. 95. - № 2. - P. 244-250.

174. Csernok E., Ludemann J., Gross W.L., Bainton D.F. Ultrastructural localization of proteinase 3, the target antigen of anti-cytoplasmic antibodies circulating in Wegener's granulomatosis. // Am. J. Pathol. 1990. - v. 137. -№5. - P. 1113-1120.

175. De Duve C., 1963 General properties of lysosomes.The lysosome concept. // Ciba Foundation Symposium: lysosome. Boston. - 1963. - P. 135.

176. Detmers P.A., Powell D.E., Walz A., Clark-Lewis I., Baggiohm M., Cohn Z.A. Differential effects of neutrophil-activatmg peptide l/IL-8 and its homologues on leukocyte adhesion and phagocytosis. // J. Immunol. 1991. - v. 147.-№12.-P. 4211-4217.

177. Dewald B., Moser B., Barella L., Schumacher C., Baggiolim M., Clark-Lewis I. IP—10, a gamma-interferon-inducible protein related to inter-leukin-8, lacks neutrophil activating properties. // Immunol. Lett. 1992. -v. 32.-№ l.-P. 81-84.

178. Doussiere J., Gaillard J., Vignais P.V. The heme component of the neutrophil NADPH oxidase complex is a target for aryliodonium compounds. // Biochemistry. 1999. - v. 38. - № 12. - P. 3694-3703.

179. Dusi S., Donmi M., Rossi F. Mechanisms of NADPH oxidase activation: translocation of p40phox, Racl and Rac2 from the cytosol to the membranes in human neutrophils lacking p47phox or p67phox. // Biochem J. -1996. v. 314. -№Pt2. - P. 409-412.

180. Ebenfelt A., Lundqvist H., Dahlgren C., Lundberg C. Neutrophils in mucosal secretion are functionally active // Clin, and Exp. Immunol. 1996. -v. 106,-№2.-P. 404-409.

181. Ehrengruber M.U., Deranleau D.A., Coates T.D. Shape oscillations of human neutrophil leukocytes: Characterization and relationship to cell motility//J. Exp. Biol. 1996. - v. 199. -№4. - P. 741-747.

182. Elsbach P. Antibiotics from within: antibacterials from human and animal sources. // Trends Biotechnol. 1990. - v. 8. - № 1. - P. 26-30.

183. Escriou V., Laporte F., Vignais P.V. Assessment of the flavoprotein nature of the redox core of neutrophil NADPH oxidase. // Biochem. Bio-phys. Res. Commun. 1996. - v. 219. - № 3. - P. 930-935.

184. Fadeel B., Ahlin A., Henter J.I., Orrenius S., Hampton M.B. Involvement of caspases in neutrophil apoptosis: regulation by reactive oxygen species. // Blood. 1998. - v. 92. - № 12. - P. 4808-4818.

185. Falla T.J., Karunaratne D.N., Hancock R.E.W. Mode of Action of the Antimicrobial Peptide Indolicidin. // J. Biol. Chem. 1996. - v. 271. - P. 19298-19303.

186. Fierro I.M., Barja-Fidalgo C., Cunha F.Q., Ferreira S.H. The involvement of nitric oxide in the anti-Candida albicans activity of rat neutrophils // Immunology. 1996. - v. 89. - № 2. - P. 295-300.

187. Finger E.B., Braehl R.E., Bainton D.F., Springer T.A. A differential role for cell shape in neutrophil tethering and rolling on endothelial selectins under flow. // J. Immunol. 1996. - v. 157. - № 11. - P. 5085-5096.

188. Frederix M., Baert J. Naphthol-AS-D-chloroacetate esterase activity in globule leucocytes in the tracheal epithelium of rats. // Acta Anat. (Basel). 1986. - v. 125. - № 2. - P. 93-95.

189. Fredholm B.B. Purines and neutrophil leukocytes. // Gen. Pharmacol.1997. v. 28. - № 3. - P. 345-350.

190. Fukuyama N., Ichimori K., Su Z., Ishida H., Nakazawa H. Peroxynitrite formation from activated human leukocytes // Biochem. and Biophys Res. Commun. 1996. - v. 224. - № 2. - P. 414-419.

191. Gabay J.E., Almeida R.P. Antibiotic peptides and serine protease homologs in human polymorphonuclear leukocytes: defensins and azuro-cidin. // Curr. Opm. Immunol. 1993. - v. 5. - № 1. - P. 97-102.

192. Gallin J.I., Goldstein I.M., Snyderman R. Inflammation. Basic principles and clinical correlates. Raven Press Ltd. - New York. - 1992.

193. Ganz T., Selsted M.E., Szklarek D., Harwig S.S., Daher K., Bainton D.F., Lehrer R.I. Defensins. Natural peptide antibiotics of human neutrophils. // J. Clm. Invest. 1985. - v. 76. - № 4. - P. 1427-1435.

194. Garcia R.C., Peterson C.G., Segal A.W., Venge P. Elastase in the different primary granules of the human neutrophil. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1985. - v. 132. -№3. - P. 1130-1136.

195. Geyer G. Zum eiweissfarbung mit amidoschwarz 10B. // Acta Histochem. 1960.-v. 10. -№58. -P. 286-292.

196. Gouni-Berthold I., Baumeister B., Wegel E., Berthold H.K., Vetter H., Schmidt C. Neutrophil-elastase in chronic inflammatory bowel disease: a marker of disease activity? // Hepatogastroenterology. 1999. - v. 46. -№28. - P. 2315-2320.

197. Hampton M.B., Chambers S.T., Vissers M.C., Winterbourn C.C. Bacterial killing by neutrophils in hypertonic environments. // J. Infect. Dis. -1994. v. 169. - № 4. - P. 839-846.

198. Hampton M.B., Kettle A.J., Winterbourn C.C. Involvement of superoxide and myeloperoxidase in oxygen-dependent killing of Staphylococcus aureus by neutrophils. // Infect. Immun. 1996. - v. 64. - № 9. - P. 3512-3517.

199. Hampton M.B., Kettle A.J., Winterbourn C.C. Inside the neutrophilphagosome: oxidants, myeloperoxidase, and bacterial killing. // Blood. -1998. v. 92. - № 9. - P. 3007-3017.

200. Hampton M.B., Orrenius S. Redox regulation of apoptotic cell death in the immune system. // Toxicol. Lett. 1998. - v. 102-103. - P. 355-358.

201. Hampton M.B., Vissers M.C., Winterbourn C.C. A single assay for measuring the rates of phagocytosis and bacterial killing by neutrophils. // J. Leukoc. Biol. 1994. - v. 55. - № 2. - P. 147-152.

202. Hampton M.B., Winterbourn C.C. Modification of neutrophil oxidant production with diphenyleneiodonium and its effect on bacterial killing. // Free Radic. Biol. Med. 1995. - v. 18. - № 4. - P. 633-639.

203. Hayhoe F.G. Alkaline phosphatase in haematology. // Cell. Biochem. Funct. 1983. — v. 1. — № 2. — P. 74-76.

204. Hebert M.-J., Takano T., Holthofer H., Brady H.R. Sequential mor-hologic events during apoptosis of human neutrophils: Modulation by li-poxygenase-denved eicosanoids // J. Immunol. 1996. - v. 157. - № 7. -P. 3105—3115.

205. Henderson W.R., Chi E.Y., Jong E.C., Klebanoff S.J. Mast cell-mediated toxicity to schistosomula of Schistosoma mansoni: potentiation by exogenous peroxidase. // J. Immunol. 1986. - v. 137. - № 8. - P. 2695-2699.

206. Henderson W.R., Klebanoff S.J. Leukotnene production and mactivationby normal, chronic granulomatous disease and myeloperoxidase-deficient neutrophils. // J. Biol. Chem. 1983. - v. 258. - № 22. - P. 1352213527.

207. Herlin T., Borregaard N., Kragballe K. On the mechanism of enhanced monocyte and neutrophil cytotoxicity in severe psoriasis. // J. Invest. Dermatol. 1982. - v. 79. - № 2. - P. 104-108.

208. Hibbs M.S., Bainton D.F. Human neutrophil gelatinase is a component of specific granules. // J. Clin. Invest. 1989. - v. 84. - № 5. - P. 13951402.

209. Higgy K.E., Burns G.F., Hayhoe F.G. Discrimination of B-, T- and null-limphocytes by esterase cytochemistry. // Scand. J. Haematol. 1977. -№ 18,- P. 437-448.

210. Hirano K., Iizumi Y., Mori Y., Toyoshi K., Sugiura M., lino S. Role of alkaline phosphatase in phosphate uptake into brush border membrane vesicles from human intestinal mucosa. // J. Biochem. 1985. - v. 97. -P. 1461-1466.

211. Hirsch J.G. Further studies on preparation and properties of phagocytic // J. Exp. Med. 1960. - v. 111. - P. 323-337.

212. Hurst J.K., Albrich J.M., Green T.R., Rosen H., Klebanoff S. Myeloper-oxidase-dependent fluorescein chlormation by stimulated neutrophils. // J. Biol. Chem. 1984. - v. 259. - № 8. - P. 4812-4821.

213. Imamura M., Mikami Y., Takahashi H., Yamauchi H. Effect of a specific synthetic inhibitor of neutrophil eiastase (uNu-5046) on the course of acute hemorrhagic pancreatitis in dogs. // J. Hepatobiliary Pancreat. Surg.- 1998. v. 5. - № 4. - P. 422-428.

214. Jain N.C., Kono C.S., Madewell B.R. Cytochemical studies of normal feline blood and bone marrow cells. // Blut. 1989. - v. 58. - № 4. - P. 195-199.

215. Jensen P., Kharazmi A. Computer-assisted image analysis assay of human neutrophil chemotaxis in vitro. // J. Immunol. Methods. 1991. - v. 144. -№ l.-P. 43-48.

216. Jiang.X., Kobayashi T., Nahirney P.C., Garcia-del-Saz E., Seguchi H. An ultracytochemical study on the dynamics of alkaline phosphatase-positive granules in rat neutrophils. // Histol-Histopathol. 1998. - v. 13. -№ 1. - P. 57-65.

217. Johnson R.J., Couser W.G., Alpers C.E., Vissers M., Schulze M., Klebanoff S.J. The human neutrophil serine proteinases, elastase and cathepsin G, can mediate glomerular injury in vivo. // J. Exp. Med. -1988. v. 168. -№3. - P. 1169-1174.

218. Johnson R.J., Couser W.G., Chi E.Y., Adler S., Klebanoff S.J. New mechanism for glomerular injury. Myeloperoxidase-hydrogen peroxide-halide system. // J. Clin. Invest. 1987. - v. 79. - № 5. - P. 1379-1387.

219. Johnson R.J., Klebanoff S.J., Ochi R.F., Adler S„ Baker P., Sparks L.,

220. Couser W.G. Participation of the myeloperoxidase-H202-halide system in immune complex nephritis. // Kidney Int. 1987. - v. 32. - № 3. - P. 342-349.

221. Jong E.C., Chi E.Y., Klebanoff S.J. Human neutrophil-mediated killing of schistosomula of Schistosoma mansoni: augmentation by schistosomal binding of eosinophil peroxidase. // Am. J. Trop. Med. Hyg. 1984. - v. 33. -№ l.-P. 104-115.

222. Katayama I., Mochino T. Naphthol AS-D chloroacetate esterase reaction. Systematic modifications for optimization to smears and sections. // Acta

223. Pathol. Jpn. 1983. - v. 33. - № 2. - P. 381-393.

224. Keel M., Ungethum U., Steckholzer U., Niederer E., Hartung T., Trentz O., Ertel W. Interleukm 10 counterregulates proinflammatory cytokine-induced inhibition of neutrophil apoptosis during severe sepsis. // Blood. 1997. - v. 90. - № 9. - P. 3356-3363.

225. Kelemen E., Gulya E., Vass K. Ontogeny of human neutrophil granulocyte alkaline phosphatase. // J. Cell. Physiol. 1978. - v. 95. - № 3. - P. 353-354.

226. Kindzelskii A.L., Laska Z.O., Todd R.F., Petty H.R. Urokmase-type plasminogen activator receptor reversibly dissociates from complement receptor type 3 (CDllb/CD18) during neutrophil polarization. // J. Immunol. 1996. - v. 156. - № 1. - P. 297-309.

227. Kjeldsen L., Bainton D.F., Sengelov H., Borregaard N. Identification of neutrophil gelatinase-associated lipocalin as a novel matrix protein of specific granules in human neutrophils. // Blood. 1994. - v. 83. - № 3. - P. 799-807.

228. Kjeldsen L., Bjerrum O.W., Askaa J., Borregaard N. Subcellular localization and release of human neutrophil gelatinase, confirming the existence of separate gelatinase-containing granules. // Biochem. J. 1992. - v. 287,-№2.-P. 603-610.

229. Kjeldsen L., Calafat J., Borregaard N. Giant granules of neutrophils in Chediak-Higashi syndrome are derived from azurophil granules but not from specific and gelatinase granules. // J. Leukoc. Biol. 1998. - v. 64. -№ 1. - P. 72-77.

230. Kjeldsen L., Johnsen A.H., Sengelov H., Borregaard N. Isolation and primary structure of NGAL, a novel protein associated with human neutrophil gelatinase. // J. Biol. Chem. 1993. - v. 268. - № 14. - P. 1042510432.

231. Kjeldsen L., Koch C., Arnljots K., Borregaard N. Characterization of two ELISAs for NGAL, a newly described lipocalin in human neutrophils. // J. Immunol. Methods. 1996. - v. 198. -№ 2. - P. 155-164.

232. Kjeldsen L., Sengelov H., Borregaard N. Subcellular fractionation of human neutrophils on Percoll density gradients. // J. Immunol. Methods. -1999.-v. 232.-№ 1-2.-P. 131-143.

233. Kjeldsen L., Sengelov H., Lollike K., Borregaard N. Granules and secretory vesicles in human neonatal neutrophils. // Pediatr. Res. 1996. - v. 40. -№ 1. - P. 120-129.

234. Kjeldsen L., Sengelov H., Lollike K., Nielsen M.H., Borregaard N. Isolation and characterization of gelatinase granules from human neutrophils. // Blood. 1994. - v. 83. - № 6. - P. 1640-1649.

235. Klebanoff S.J. Oxygen metabolism and the toxic properties of phagocytes. // Ann. Intern. Med. 1980. - v. 93. - № 3. - P. 480-489.

236. Klebanoff S.J., Clark R.A. The neutrophil: functional and clinical disorders. Elsevier/North-Holland Biomedical Press. - Amsterdam. - 1978.

237. Klebanoff S.J., Coombs R.W. Viricidal effect of polymorphonuclear leukocytes on human immunodeficiency virus-1. Role of the myeloperoxidase system. // J. Clin. Invest. 1992. - v. 89. - № 6. - P. 2014-2017.

238. Klebanoff S.J., Headley C.M. Activation of the human immunodeficiency virus-1 long terminal repeat by respiratory burst oxidants of neutrophils. // Blood. 1999. - v. 93. - № 1. - P. 350-356.

239. Klebanoff S.J., Kmsella M.G., Wight T.N. Degradation of endothelial cell matrix heparan sulfate proteoglycan by elastase and the myeloperoxi-dase-H202-chloride system. // Am. J. Pathol. 1993. - v. 143. - № 3. -P.907-917.

240. Klebanoff S.J., Nathan C.F. Nitrite production by stimulated human polymorphonuclear leukocytes supplemented with azide and catalase. //

241. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993. - v. 197. - № 1. - P. 192196.

242. Klebanoff S.J., Olszowski S., Van Voorhis W.C., Ledbetter J.A., Wal-tersdorph A.M., Schlechte K.G. Effects of gamma-interferon on human neutrophils: protection from deterioration on storage. // Blood. 1992. -v. 80. -№ 1. - P. 225-234.

243. Klebanoff S.J., Schlechte K.G., Waltersdorph A.M. Stimulation of the bactericidal activity of polymorphonuclear leukocytes by manganese. // J. Leukoc. Biol. 1993. - v. 53. - № 6. - P. 666-672.

244. Klebanoff S.J., Vadas M.A., Harlan J.M., Sparks L.H., Gamble J.R., Agosti J.M., Waltersdorph A.M. Stimulation of neutrophils by tumor necrosis factor. // J. Immunol. 1986. - v. 136. - № 11. - P. 4220-4225.

245. Klebanoff S.J., Waltersdorph A.M. Inhibition of peroxidase-catalyzed reactions by deferoxamine. // Arch Biochem. Biophys. 1988. - v. 264. -№ 2. - P. 600-606.

246. Kobayashi T., Robinson J.M., Seguchi H. Identification of intracellular sites of superoxide production in stimulated neutrophils. // J. Cell Sci. -1998. v. 111. - №1. - P. 81-91.

247. Kobayashi T., Zinchuk V.S., Okada T., del-Saz E.G., Seguchi H. Intracellular dynamics of alkaline phosphatase-containing granules in electropermeabilized human neutrophils. // Histochem. Cell Biol. 1998. -v. 110. -№4. - P. 395-406.

248. Korafeld S., Mellman I. The biogenesis of lysosomes. // Annu. Rev. Cell

249. Biol. 1989. -№ 5. - P. 483-525.

250. Kupper R.W., Dewald B., Jakobs K.H., Baggiolmi M., Gierschik P. G-protein activation by interleukin 8 and related cytokines in human neutrophil plasma membranes. // Biochem. J. 1992. - v. 282. - № 2. - P. 429434.

251. Lawrence M.B., Bainton D.F., Springer T.A. Neutrophil tethering to and rolling on E-selectin are separable by requirement for L-selectin. // Immunity. 1994. - v. 1. -№ 2. - P. 137-145.

252. Le Cabec V., Calafat J., Borregaard N. Sorting of the specific granule protein, NGAL, during granulocytic maturation of HL-60 cells. // Blood. 1997. - v. 89. - № 6. - P. 2113-2121.

253. Leder L.D. Diagnostic experiences with the naphthol AS-D chloroacetate esterase reaction. // Blut. 1970. - v. 21. - № 1. - P. 1-8.

254. Levy R., Dana R., Hazan I., Levy I., Weber G., Smoliakov R., Pesach I., Riesenberg K., Schlaeffer F. Elevated cytosolic phospholipase A(2) expression and activity in human neutrophils during sepsis. // Blood. -2000. v. 95. - P. 660-665.

255. Li C.Y., Lam K.W., Yam L.T. Esterases in human leukocytes. // J. Histochem. Cytochem. 1973. - v. 21. -№ 1. - P. 1-12.

256. Liles W.C., Dale D.C., Klebanoff S.J. Glucocorticoids inhibit apoptosis of human neutrophils. // Blood. 1995. - v. 86. - № 8. - P. 3181-3188.

257. Liles W.C., Klebanoff S.J. Regulation of apoptosis in neutrophils—Fas track to death? // J. Immunol. 1995. - v. 155. - № 7. - P. 3289-3291.

258. Locksley R.M., Klebanoff S.J. Oxygen-dependent microbicidal systems of phagocytes and host defense against intracellular protozoa. // J. Cell Biochem. 1983. - v. 22. - № 3. - P. 173-185.

259. Lollike K., Borregaard N., Lindau M. Capacitance flickers and pseudof-lickers of small granules, measured in the cell-attached configuration. // Biophys. J. 1998. - v. 75. - № 1. - P. 53-59.

260. Lollike K., Kjeldsen L., Sengelov H., Borregaard N. Lysozyme in human neutrophils and plasma. A parameter of myelopoietic activity. // Leukemia. 1995. - v. 9. - № 1. - P. 159-164.

261. Lollike K., Sorensen O., Bundgaard J.R., Segal A.W., Boyhan A., Borregaard N. An ELISA for grancalcin, a novel cytosolic calcium-bmding protein present in leukocytes. // J. Immunol. Methods. 1995. - v. 185. -№ 1. - P. 1-8.

262. Lopez A.F., Williamson D.J., Gamble J.R., Begley C.G., Harlan J.M.,

263. Makiya R., Stigbrand T. Placental alkaline phosphatase is related to human IgG internalization on HEp2 cells. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. - v. 182. - P. 624-630.

264. Mane S.M., Marzella L., Bainton D.F., Holt V.K., Cha Y„ Hildreth J.E., August J.T. Purification and characterization of human lysosomal membrane glycoproteins. // Arch. Biochem. Biophys. 1989. - v. 268. - P. 360-378.

265. Marcinkiewicz J. Nitric oxide and antimicrobial activity of reactive oxygen intermediates. // Immunopharmacology. 1997. - v. 37. - № 1. - P. 35-41.

266. Markovic O.T., Young D.S., Markovic N.S. Quinidine-induced inhibition of leukocyte esterases. // Clin. Chem. 1988. - v. 34. - № 3. - P. 518524.

267. McCall C. E., Katayama I., Cotran R. S., Finland M. Lysosomal and ultrastructural changes in human "toxic" neutrophils during bacterial infection. // J. Exp. Med. 1969. - v. 129. - P. 267-293.

268. Meers P., Mealy T., Tauber A.I. Annexin I interactions with human neutrophil specific granules: fusogenicity and coaggregation with plasma membrane vesicles. // Biochim. Biophys. Acta. 1993. - v. 1147. - № 2. -P. 177-184.

269. Metcalfe D.D., Thompson H.L., Klebanoff S.J., Henderson W.R. Oxidative degradation of rat mast-cell heparin proteoglycan. // Biochem. J. -1990.-v. 272.-№ 1,- P. 51-57.

270. Meyer S. W., Sinha P., Kottgen E. Alkaline phosphatase. Laboratory and clinical implications. // J. Chromatogr. 1988. - v. 429. - P. 419-444.

271. Milicevic N.M., Milicevic Z. Relationship between naphthol AS-D chloroacetate esterase and prostaglandin synthase. // Acta Histochem. -1993.-v. 95. № 1. - P. 67-70.

272. Morel F., Dewald B., Berthier S., Zaoui P., Dianoux A.C., Vignais P.Y., Baggiolini M. Further characterization of the gelatmase-containing particles of human neutrophils. // Biochim. Biophys. Acta. 1994. - v. 1201.- № 3. P. 373-380.

273. Murphy G., Reynolds J.J., Bretz U., Baggiolini M. Collagenase is a component of the specific granules of human neutrophil leucocytes. // Biochem. J. 1977. - v. 62. -№ 1. - P. 195-197.

274. Mutasa H.C. Osmium tetroxide-potassium ferrocyanide intensification of a diaminobenzidine product obtained by hotoconversion of a fluorescent label: a study of human neutrophil granules. // Biotech. Histochem.1995. v. 70. -№4. - P. 194-201.

275. Nagaji J. The role of protein kinase C and Ca2+.i in superoxide anion synthesis and myeloperoxidase degranulation of human neutrophils. // Kurume Med. J. 1999.-v. 46. -№3-4. - P. 157-162.

276. Nakatsuji T. Effects of splenectomy on rat polymorphonuclear neutrophil autoimmunity. // Acta med.et biol. 1995. - v. 43. - № 4. - P. 223-228.

277. Newman S.L., Gootee L., Gabay J.E. Human neutrophil-mediated fungis-tasis against Histoplasma capsulatum. Localization of fungistatic activity to the azurophil granules. // J. Clin. Invest. 1993. - v. 92. - № 2. - P. 624-631.

278. Nordstedt C., Naslund J., Thyberg J., Messamore E., Gandy S.E., Teren-ius L. Human neutrophil phagocytic granules contain a truncated soluble form of the Alzheimer beta/A4 amyloid precursor protein (APP). // J.

279. Biol. Chem. 1994. - v. 269. - № 13. - P. 9805-9810.

280. Oren A., Taylor J.M. The subcellular localization of defensins and myeloperoxidase in human neutrophils: immunocytochemical evidence for azurophil granule heterogeneity. // J. Lab. Clin. Med. 1995. - v. 125. -№ 3. - P. 340-347.

281. Padrines M., Wolf M., Walz A., Baggiolini M. Interleukin-8 processing by neutrophil elastase, cathepsin G and proteinase-3. // FEBS Lett. -1994. v. 352. - № 2. - P. 231-235.

282. Parent C., Eichacker P.Q. Neutrophil and endothelial cell interactions in sepsis. The role of adhesion molecules. // Infect. Dis. Clin. North. Am. -1999. v. 13. - № 2. - P. 427-447.

283. Park B. H., Fikrig S. M., Smith wick E. M. Infection and nitroblue-tetrazolium reduction by neutrophils. // Lancet. 1968. - v. 1. - P. 532534.

284. Parmley R.T. Heterogeneity of peroxidase positive granules in normal and pathologic human neutrophils. // J Nihon Univ Sch Dent. 1997. - v. 39. -№2. - P. 61-66.

285. Piette C., Piette M. Cytoenzymologic localization of an esterase active on naphthol AS-D chloracetate in primary granulations of neutrophilic granulocytes in human blood. // Ann. Pharm. Fr. 1976. - v. 34. - № 12. - P. 19-24.

286. Rademacher R., Sodomkova D., Vanasek J. Nonspecific esterase and naphthol-AS-D-chloroacetate esterase in monocytoid and myeloid cells of healthy cattle and cattle suffering from leukosis. // Vet. Med. (Praha).1977. v. 22. - № 4. - P. 207-215.

287. Rajarathnam K., Sykes B.D., Kay C.M., Dewald B., Geiser T., Baggiolmi M., Clark-Lewis I. Neutrophil activation by monomeric interleukin-8. // Science. 1994. - v. 264 (5155). - P. 90-92.

288. Riesenberg K., Levy R., Katz A., Galkop S., Schlaeffer F. Neutrophil superoxide release and interleukin 8 in acute myocardial infarction: Distinction between comnplicated and uncomplicated states. // Agr. teen. Mex. -1995.-v. 21.-№2.-P. 398-404.

289. Rosen H, Michel B.R. Redundant contribution of myeloperoxidase-dependent systems to neutrophil-mediated killing of Escherichia coli. // Infect. Immun. 1997. - v. 65. -№ 10. - P. 4173-4178.

290. Rosen H., Klebanoff S.J. Oxidation of Escherichia coli iron centers by the myeloperoxidase-mediated microbicidal system. // J. Biol. Chem. 1982. - v. 257. - № 22. - P. 13731-13735.

291. Rosen H., Klebanoff S.J. Oxidation of microbial iron-sulfur centers by the myeloperoxidase-H202-halide antimicrobial system. // Infect. Immun. 1985. - v. 47. - № 3. - P. 613-618.

292. Saito N, Sato F., Asaka M., Takemori N., Kohgo Y. Morphological heterogeneity of myeloperoxidase-positive granules in normal circulating neutrophils: an ultrastructural study by cryosection. // Histol. Histopathol.- 1998. v. 13. -№2. - P. 405-414.

293. Selsted M.E., Novotny M.J., Morris W.L., Tang Y.Q., Smith W., Cullor J.S. Indolicidin, a novel bactericidal tridecapeptide amide from neutrophils. // J. Biol. Chem. 1992. - v. 267. - № 7. - P. 4292-4295.

294. Sengelov H., Borregaard N. Free-flow electrophoresis in subcellular fractionation of human neutrophils. // J. Immunol. Methods. 1999. - v. 232.- № 1-2. P. 145-152.

295. Sengelov H., Boulay F., Kjeldsen L., Borregaard N. Subcellular localization and translocation of the receptor for N-formylmethionyl-leucyl-phenylalanine in human neutrophils. // Biochem. J. 1994. - v. 299. - № 2. - P. 473-479.

296. Sengelov H., Follin P., Kjeldsen L., Lollike K., Dahlgren C., Borregaard N. Mobilization of granules and secretory vesicles during in vivo exudation of human neutrophils. // J. Immunol. 1995. - v. 154. - № 8. - P.4157-4165.

297. Sengelov H., Kjeldsen L., Borregaard N. Control of exocytosis in early neutrophil activation. // J. Immunol. 1993. - v. 150. - № 4. - P. 15351543.

298. Sengelov H., Kjeldsen L., Diamond M.S., Springer T.A., Borregaard N. Subcellular localization and dynamics of Mac-1 (alpha m beta 2) in human neutrophils. // J. Clm. Invest. 1993. - v. 92. - № 3. - P. 14671476.

299. Sengelov H., Kjeldsen L., Kroeze W., Berger M., Borregaard N. Secretory vesicles are the intracellular reservoir of complement receptor 1 in human neutrophils. // J. Immunol. 1994. - v. 153. - № 2. - P. 804-810.

300. Sengelov H., Voldstedlund M., Vinten J., Borregaard N. Human neutrophils are devoid of the integral membrane protein caveolin. // J. Leukoc. Biol. 1998. - v. 63. - № 5. - P. 563-566.

301. Shih H.C., Su C.H., Lee C.H. Superoxide production of neutrophils after severe injury: impact of subsequent surgery and sepsis. // Am. J. Emerg. Med. 1999. - v. 17.-№1.-P. 15-18.

302. Skopek P., Koza V. Diagnostic use of neutrophil segments negative for peroxidase, chloroacetate es-terase and sudanophilia in peripheral blood in leukemia. // Vmtr. Lek. 1991. - v. 37. - № 5. - P. 488-492.

303. Skubitz K.M., Campbell K.D., lida J., Skubitz A.P.N. CD63 associates with tyrosine kinase activity and CD11/CD18, and transmits an activation signal in neutrophils. // J. Immunol. 1996. - v. 157. - № 8. - P. 36173626.

304. Slavinsky A.A. The index of the phagocyte activation based on the luminescence of dehydrogenase coenzymes. // Folia haematologica. -1990. v. 117. - № 3. - P. 365-368.

305. Slavinsky A.A., Nesterova I.V. Luminescence of acti-vated phagocytes dur-ing allergy and auto-immunal diseases // Pathophysiology. 1998. -v. 5. - P. 73.

306. Someya A., Nunoi H., Hasebe T., Nagaoka I. Phosphorylation of p40-phox during activation of neutrophil NADPH oxidase. // J. Leukoc. Biol. 1999. - v. 66. - № 5. - P. 851-857.

307. Sorensen O., Cowland J.B., Askaa J., Borregaard N. An ELISA for hCAP-18, the cathelicidin present in human neutrophils and plasma. // J. Immunol. Methods. 1997. - v. 206. - № 1-2. - P. 53-59.

308. Sramkova L. Alkaline phosphatase in neutrophil leucocytes in infectious diseases. Acta Univ. Carol. Med. Monogr. - 1970. - v. 43. - P. 1-111.

309. Stigbrand T., Fishman W. H. Human alkaline phosphatases. // Prog. Clin. Biol. Res. 1984. - v. 166. - P. 3-348.

310. Sturrock A., Franklin K.F., Wu S., Hoidal J.R. Characterization and localization of the genes for mouse proteinase-3 (Prtn3) and neutrophil elas-tase (Ela2). // Cytogenet. Cell Genet. 1998. - v. 83. - № 1-2. - P. 104108.

311. Takubo T., Tatsumi N. Dual image of myosin and actin in human neutrophils during movement by fluorescence microscopy. // Haematologia (Budap). 1997. - v. 28. - № 4. - P. 247-253.

312. Tauber A.I., Borregaard N., Simons E., Wright J. Chronic granulomatous disease: a syndrome of phagocyte oxidase deficiencies. // Medicine (Baltimore). v. 983. - № 5. - P. 286-309.

313. Terregino C.A., Lubkin C.L., Thom S.R. Impaired neutrophil adherence as an early marker of systemic inflammatory response syndrome and severe sepsis. //Ann. Emerg. Med. 1997. - v. 29. -№ 3. - P. 400-403.

314. Thelen M., Dewald B., Baggiolini M. Neutrophil signal transduction and activation of the respiratory burst. // Physiol. Rev. 1993. - v. 73. - № 4.-P. 797-821.

315. Thomas K.M., Taylor L., Prado G., Romero J., Moser B., Car B., Walz A., Baggiolini M., Navarro J. Functional and ligand binding specificity of the rabbit neutrophil IL-8 receptor. // J. Immunol. 1994. - v. 152. - № 5. - P. 2496-2500.

316. Turner J., Cho Y., Dinh N.-N., Waring A. J., Lehrer R. I. Activities of LL-37, a cathelin-associated antimicrobial peptide of human neutrophils. // Antimicrob. Agents Chemother. 1998. - v. 42. - P. 2206-2214.

317. Vaissiere C., Le Cabec V., Maridonneau-Parini I. NADPH oxidase is functionally assembled in specific granules during activation of human neutrophils. // J. Leukoc. Biol. 1999. - v. 65. - № 5. - P. 629-634.

318. Vollebregt M., Hampton M.B., Winterbourn C.C. Activation of NF-kappaB in human neutrophils during phagocytosis of bacteria independently of oxidant generation. // FEBS Lett. 1998. - v. 432. - № 1-2. - P. 40-44.

319. Wachstein ML, Middletown N. Y. Alkaline phosphatase activity in normal and abnormal human blood and bone marrow cells. // J. Lab. Clin. Med. -1946. v. 31. - P. 1-17.

320. Warburg O. Wasserstoffubertragende fermente. Berlin. - 1948.

321. Warnes T.W.Alkaline phosphatase. // Gut. 1972. - v. 13. - P. 926-937.

322. Webb L.M., Ehrengruber M.U., Clark-Lewis I., Baggiolmi M., Rot A. Binding to heparan sulfate or heparin enhances neutrophil responses to in-terleukin 8. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. - v. 90. - № 15. - P. 7158-7162.

323. Wenisch C., Patruta S., Daxbock F., Krause R., Horl W. Effect of age on human neutrophil function. // J. Leukoc. Biol. 2000. - v. 7. - № 1. - P. 40-45.

324. Wiedemann C.J., Schmalzl F., Braunsteiner H. Investigation of granulocytopoietic kinetics by microdensitometric evaluation of primary granule naphthol-AS-D-chloroacetate esterase activity. // Blut. 1983. -v. 47,-№5.-P. 271-277.

325. Wientjes F.B., Segal A.W., Hartwig J.H. Immunoelectron microscopy shows a clustered distribution of NADPH oxidase components in the human neutrophil plasma membrane. // J. Leukoc. Biol. 1997. - v. 61. -№3. - P. 303-312.

326. Wiik A., Stummann L., Kjeldsen L., Borregaard N., Ullman S., Jacobsen S., Halberg P. The diversity of perinuclear antineutrophil cytoplasmic antibodies (pANCA) antigens. // Clin. Exp. Immunol. 1995. - v. 101. - № l.-P. 15-17.

327. Wiley S.R., Goodwin R.G., Smith C.A. Reverse signaling via CD30 ligand // J. Immunol. 1996. - v. 157. - № 8. - P. 3635-3639.

328. Wong E.T., Jenne D.E., Zimmer M., Porter S.D., Gilks C.B. Changes in chromatin organization at the neutrophil elastase locus associated with myeloid cell differentiation. // Blood. 1999. - v. 94. - № 11. - P. 37303736.

329. Wu H., Zhang G., Ross C. R., Blecha F. Cathelicidin gene expression in porcine tissues: roles in ontogeny and tissue specificity. // Infect. Immun. 1999. - v. 67. - P. 439-442.