Конструирование вакцинных штаммов Francisella tularensis, экспрессирующих протективные антигены Ag85B и ESAT-6 Mycobacterium tuberculosis, и изучение их иммунобиологических свойств тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Кравченко, Татьяна Борисовна

• Кравченко, Татьяна Борисовна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кравченко, Татьяна Борисовна

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ,

СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. ТУБЕРКУЛЕЗНЫЕ ВАКЦИНЫ - 16 ПРИОРИТЕТНОЕ НАПРАВЛЕНИЕ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

1.2. ОСОБЕННОСТИ ИММУНИТЕТА ПРИ 20 ТУБЕРКУЛЕЗНОЙ ИНФЕКЦИИ

1.3. ХАРАКТЕРИСТИКА БЕЛКОВ - КАНДИДАТОВ 31 ДЛЯ РАЗРАБОТКИ НОВЫХ ВАКЦИН

1.3.1. БЕЛКИ КОМПЛЕКСА AG

1.3.2. БЕЛКИ СЕМЕЙСТВА ESAT

1.3.3. SOD И ДРУГИЕ БЕЛКИ

1.4. ОСНОВНЫЕ ФОРМЫ РАЗРАБАТЫВАЕМЫХ 3 8 ВАКЦИН

1.4.1. АТТЕНУИРОВАННЫЕ И 40 РЕКОМБИНАНТНЫЕ ВАКЦИНЫ

1.4.2. СУБЪЕДИНИЧНЫЕ, 45 КОНЪЮГИРОВАННЫЕ, ДНК-ВАКЦИНЫ

1.5. ОСОБЕННОСТИ ИММУНИТЕТА ПРИ 53 ВАКЦИНАЦИИ ТУЛЯРЕМИЙНОЙ ВАКЦИНОЙ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Конструирование вакцинных штаммов Francisella tularensis, экспрессирующих протективные антигены Ag85B и ESAT-6 Mycobacterium tuberculosis, и изучение их иммунобиологических свойств»

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

Повышенное внимание к проблеме туберкулеза в последние годы обусловлено увеличением заболеваемости этой инфекцией не только в развивающихся странах, но и в благополучных государствах. При условии сохранения современных тенденций социально-экономических условий жизни и организации противотуберкулезной помощи населению в России прогнозируется продолжение ухудшения эпидемической обстановки и увеличение заболеваемости к 2010 г. более чем в 2 раза (Шилова, 2001).

Для специфической профилактики туберкулеза в России и за рубежом используются препараты единственной живой вакцины BCG, приготовленной на основе аттенуированного штамма Mycobacterium bovis (Митинская, 2001). Эффективность вакцинации препаратами BCG варьирует от 0 % до 80 % и в среднем составляет 50% (Colditz etaL, 1994; Roche et al., 1995). Создание новой улучшенной туберкулезной вакцины становится приоритетом национальных исследований (Castro, 1998). Работы последних лет позволили определить последовательность генома Mycobacterium tuberculosis, а также определить детерминанты протективного иммунитета (Horwitz et al., 1995; Kariyoneetal., 1999). Использование технологии рекомбинантных ДНК, синтетических пептидов, антиген-специфических антител, Т-клеток и т.д. позволило идентифицировать несколько основных антигенов М. tuberculosis, таких, как белки теплового шока hsp 60 и hsp 70 (Huygen, 2003; Карягина и др., 2004), белки комплекса Ag85 (Wiker, Harboe, 1992), ESAT-6 (Sorensen et al., 1995), CFP-10 (Skjot et al., 2000) и др. Экспрессия этих белков в гетерологичных векторах и их иммунологическая оценка обеспечила бы возможность идентификации антигенов М. tuberculosis, наиболее важных для разработки новых вакцин и специфических диагностических препаратов.

Поскольку активация клеточного иммунитета является основой для формирования противотуберкулезного иммунитета (Cooper, Flynn, 1995; Воробьев, Медуницын, 1995; Ярилин, 1999; Lazarevic, Flynn, 2002; Flynn, 2004), соответствующим образом подобранные адьюванты и системы доставки антигенов способствовали бы решению проблем, связанных с недостатками, присущими вакцине BCG. Одним из наиболее перспективных подходов является генетическое конструирование вакцин для защиты от нескольких инфекций одновременно на основе штаммов, полученных путем встраивания в их геном чужеродных антигенов, важных для активации клеточного иммунитета. В качестве вакцинных векторов используют живые аттенуированные штаммы М. tuberculosis (Ellner, 1998; Senaratneetal., 2007; Henao-Tamayo et al., 2007) и сальмонелл (Mollenkopf et al., 2001), а также близкородственные микобактерии (Abou-Zeid et al., 1997), ряд вирусов (Malin et al., 2000; McShane et al., 2005; Fattorini, 2007) и некоторые другие микроорганизмы (Miki et al., 2004).

Известно, что живая туляремийная вакцина, созданная на основе штамма Francisella tularensis 15/10, способна вызывать интенсивную перестройку гуморального и клеточного звеньев иммунной системы, обеспечивая создание длительного напряженного иммунитета при умеренной реактогенности вакцины (Олсуфьев и др., 1975). Кроме специфического иммунитета, этот штамм индуцирует кратковременную неспецифическую защиту против других внутриклеточных патогенов, таких как листерии и легионеллы (Belyi et al.,1996). Важно отметить, что клетки вакцинного штамма туляремийного микроба способны размножаться в организме экспериментального животного, иммунизированного живой вакциной BCG, что дает принципиальную возможность повысить иммунный ответ на экспрессируемые протективные антигены М. tuberculosis.

Вышеперечисленные характеристики штамма F. tularensis 15/10 позволяют считать оптимальным использование его в качестве бактериального вектора для конструирования живых противотуберкулезных вакцин.

Вопрос о выборе антигенов для конструирования противотуберкулезной вакцины достаточно сложен. Уже изучены иммунологические свойства широкого спектра белков М. tuberculosis. Одним из наиболее иммуногенных белков является секретируемый активно размножающимися микобактериями белок Ag85B - белок трехкомпонентного комплекса Ag85 (Kariyone et al, 1999). Белки этого комплекса являются ферментами миколил-трансферазами, играющими существенную роль в процессе синтеза клеточной стенки бактерии, однако функция комплекса и его роль в патогенезе туберкулеза до конца не выяснены. Другой белок - ESAT-6, секретируемый М. tuberculosis на ранней стадии роста (Sorensen et al., 1995), представляет собой важный Т-клеточный антиген, распознаваемый протективными Т-клетками на моделях экспериментального туберкулеза. Данные антигены были выбраны в качестве модельных антигенов для изучения возможности их экспрессии в клетках F. tularensis 15/10 и изучения перспектив использования туляремийной вакцины в качестве бактериального вектора для создания вакцинных штаммов для профилактики туберкулеза. ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Конструирование вакцинных штаммов Francisella tularensis с экспрессией протективных антигенов Ag85B и ESAT-6 Mycobacterium tuberculosis и изучение их иммунобиологических свойств. ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

• Создание штаммов Е. coli, экспрессирующих рекомбинантные белки Ag85B-(His)6 и ESAT-6-(His)6.

• Выделение и очистка антигенов Ag85B-(His)6 и ESAT-6-(His)6 из рекомбинантных штаммов Е. coli, получение антисывороток к рекомбинантным белкам и оценка их иммунологической специфичности.

• Создание на основе вакцинного штамма F. tularensis 15/10 рекомбинантных штаммов RVpl7 и RVpl8, кодирующих гены слитных белков FL-Ag85B и FL -Ag85B-ESAT-6, и определение уровня их экспрессии.

• Оценка стабильности рекомбинантных штаммов F. tularensis RVpl7 и RVp 18 in vivo.

• Оценка уровня активации гуморального и клеточного звеньев иммунитета мышей, иммунизированных штаммами F, tularensis RVp 17 и RVp 18.

• Изучение протективности полученных штаммов F. tularensis RVp 17 и RVp 18 на модели легочной формы экспериментальной туберкулезной инфекции мышей.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Получены впервые вакцинные штаммы F tularensis 15/10, экспрессирующие протективные микобактериальные антигены Ag85B и ESAT-6.

Впервые охарактеризован иммунный ответ у мышей, иммунизированных вакцинными штаммами F. tularensis 15/10, экспрессирующими антигены Ag85B и Ag85B-ESAT-6.

Впервые показана протективность сконструированных рекомбинантных штаммов F. tularensis 15/10, экспрессирующих антигены микобактерий Ag85B и Ag85B-ESAT-6, на модели легочной формы экспериментальной туберкулезной инфекции мышей. ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Создана модельная система для изучения вакцинных свойств протективных антигенов с использованием в качестве живого бактериального вектора вакцинного штамма F. tularensis 15/10,

Созданные рекомбинантные штаммы на основе вакцинного штамма F. tularensis 15/10, экспрессирующие протективные антигены микобактерий, дают возможность получить новую информацию, необходимую для создания живых противотуберкулезных рекомбинантных вакцин.

Микобактериальные рекомбинантные антигены Ag85B-(His)6 и ESAT6-(His)6, экспрессируемые бактериальными клетками Е. coli, и полученные к ним специфические антитела могут быть использованы для совершенствования систем диагностики туберкулеза. ВНЕДРЕНИЕ

В коллекции живых культур ФГУН "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии" депонированы два авторских штамма Е. coli, использованные для получения рекомбинантных микобактериальных белков Ag85B-(His)6 и ESAT6-(His)6, и два авторских штамма F. tularensis RVpl7 и F. tularensis RVpl8, использованные для изучения перспективности использования туляремийной вакцины в качестве бактериального вектора при создании живых противотуберкулезных вакцин (федеральный уровень внедрения).

Материалы диссертации используются в лекциях для магистрантов факультета биологической и экологической безопасности Пущинского государственного университета.

Депонированы в GenBank нуклеотидные последовательности двух генов, кодирующих слитные белки FL-Ag85B и FL-Ag85B-ESAT6, которые экспрессируются вакцинными штаммами F. tularensis RVpl7 и F. tularensis RVpl8 [http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez].

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

Антитела к рекомбинантным белкам Ag85B-(His)6 и ESAT-6-(His)6 распознают иммунологические эпитопы в природных микобактериальных белках Ag85B и ESAT-6.

Созданы рекомбинантные плазмиды для эффективной экспрессии микобактериальных протективных антигенов Ag85B и ESAT-6 в клетках туляремийного микроба.

Иммунизация мышей вакцинными штаммами F. tularensis RVpl7 и RVpl8, экспрессирующими микобактериальные белки Ag85B и ESAT-6, приводит к индукции специфического клеточного иммунного ответа как к туляремийным, так и к микобактериальным антигенам. Штаммы F. tularensis RVpl7 и RVpl8 защищают мышей от легочной формы экспериментальной туберкулезной инфекции с эффективностью, сопоставимой с эффективностью вакцины BCG.

Вакцинные штаммы F. tularensis RVp 17 и RVpl8 можно рассматривать в качестве прототипов для создания живой противотуберкулезной вакцины РАБОТА ВЫПОЛНЕНА в отделе ООИ ГНЦ ПМБ по планам НИР в рамках следующих бюджетных тем: "Изучение молекулярных основ патогенности возбудителей особо опасных и социально значимых инфекций" (2003 г.)(руководитель темы д.м.н. Анисимов А.П); "Разработка новых бактериальных векторов на основе вакцинных или аттенуированных штаммов F. tularensis для конструирования живых вакцин» (2004 г.)(руководитель темы к.ф.-.м.н. Павлов В.М.) Данная работа получила финансовую поддержку Международного научно-технического центра (проект МНТЦ #2237(2002-2005г.г., научный руководитель проекта к.ф-.м.н. Павлов В.М.), а также проекта ВТЕР#7. АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.

Апробация диссертации состоялась на заседании межлабораторного семинара ФГУН ГНЦ ПМБ 2 апреля 2008 г. Материалы диссертации th доложены и представлены на 6 научных конференциях: 4 Intern Conference onTularemia, City of Bath,UK, 2003; 1st Internatiomal Conference on Environmental, Industrial and Applied Microbiology (BioMicroWorld-2005), Badajoz (Spain), March 15-18, 2005; 3-й Московский международный конгресс

Биотехнология: состояние и перспективы развития», Москва, 2005 г.; VII-й Межгосударственная научно-практическая конференция государств-участников СНГ (3-5 октября 2006 г., Оболенск, Московская обл.; NIAID Research Conference (Opatia, Croatia, June 24-30, 2006); 5th International Conference on Tularemia Marine Biological Labs, Woods Hole, MA, USA, November 1-4, 2006.

ПУБЛИКАЦИИ. Материалы диссертации опубликованы в 7 научных работах

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Кравченко, Татьяна Борисовна

ВЫВОДЫ

• Созданные рекомбинантные штаммы Е. coli экспрессируют гены микобактериальных белков Ag85B-(His)6 и ESAT-6-(His)6, клонированные в составе плазмид рЕТ23Ь(+) и рЕТ24Ь(+), соответственно.

• Иммунизация мышей рекомбинантными микобактерильными белками Ag85B-(His)6 и ESAT-6-(His)6 индуцирует образование антител, реагирующих с соответствующими антигенами М. tuberculosis.

• Клетки вакцинного штамма F. tularensis 15/10 при трансформации в них рекомбинантных плазмид pPMCl-FL-85B и pPMCl-FL-Ag85B-ESAT-6 приобретают способность стабильно экспрессировать антигены Ag85B и ESAT-6 М. tuberculosis.

• Полученные рекомбинантные вакцинные штаммы F. tularensis RVpl7 и RVpl8, экспрессирующие микобактериальные антигены Ag85B и ESAT-6, при введении мышам индуцируют специфический противотуберкулезный Т-клеточный иммунный ответ.

• Однократная подкожная иммунизация мышей рекомбинантными вакцинными штаммами F. tularensis RVpl7 и RVpl8 в дозе 20 КОЕ /мышь обеспечивает эффективную защиту мышей от аэрозольного заражения вирулентным штаммом М. tuberculosis Н37 Rv. .

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Туберкулез является «возрождающейся» инфекцией, сохраняющей лидирующее положение в мире по заболеваемости и смерности людей и по-прежнему представляющей собой основную проблему здравоохранения во многих странах (Anon., 2002). И, хотя к настоящему моменту уже более 3 млрд. человек провакцинировано вакциной BCG, тем не менее, эта вакцина обладает рядом недостатков, ограничивающих ее применение. Поэтому необходимость создания эффективной профилактической противотуберкулезной вацины второго поколения очевидна.

К настоящему моменту уже определен основной спектр наиболее перспективных протективных микобактериальных антигенов и создан целый ряд вакцин-кандидатов, которые находятся на разных стадиях клинических испытаний.

На первом этапе из наиболее часто используемых при конструировании новых вакцин антигенов нами были выбраны два протективных микобактериальных антигена - Ag85B и ESAT-6. В качестве системы доставки антигенов был использован вакцинный штамм туляремийного микроба, способный индуцировать длительный и напряженный иммунитет. Для клонирования и экспрессии микобактериальных белков в клетках F. tularensis на базе криптической плазмиды pFNLlO был создан вектор pPMCl, включающий все необходимые элементы для стабильной репликации в клетках F. tularensis 15/10.

Использование лидерной последовательности FL белка внешних мембран FopA в качестве стартового полипептида позволило преодолеть проблему, связанную с экспрессией гетерогенных белков в клетках F. tularensis, и обеспечить стабильную экспрессию микобактериальных антигенов, клонированных в составе слитных белков FL-Ag85B и FL-Ag85B-ESAT-6 и экспрессируемых созданными нами рекомбинантными штаммами F. tularensis RVp 17 и RVp 18. Уровень экспрессии клонированных белков был достаточно высоким. Основная часть микобактериальных белков выявлялась в мембранной фракции клеток.

Изучение иммунобиологических характеристик созданных рекомбинантных штаммов F. tularensis RVp 17 и RVp 18 было начато с определения остаточной вирулентности и способности бактериальных клеток преодолевать фагоцитарный барьер по параметру размножения в макрофагоподобных клетках линии J774 А.1. Введение вектора pPMCl, кодирующего дополнительный генетический материал, в клетки вакцинного штамма F. tularensis 15/10 не привело к существенному изменению их биологических свойств, поскольку созданные рекомбинантные штаммы были способны так же эффективно размножаться в эукариотических макрофагоподобных клетках.

Способность созданных рекомбинантных штаммов индуцировать специфический иммунный ответ была оценена по активации В- и Т-клеточного звеньев иммунитета. Рекомбинантные штаммы индуцировали выработку специфических антител только к туляремийным антигенам. Активация Т-клеточного звена иммунного ответа была более эффективной. Иммунизация рекомбинантными штаммами стимулировала выработку эффекторных Т-клеток, специфичных как к антигенам туляремийного микроба, так и к микобактериальному антигену Ag85B, обладающему собственной высокой иммуногенностью. Использование дополнительного теста для оценки активации опосредованного Т-клетками иммунного ответа по уровню синтеза IFN-y спленоцитами иммунных животных позволило не только подтвердить специфическую активацию IFN-у-синтезирующих Т-клеток белком Ag85B, но и выявить специфический иммунный ответ и на белок ESAT-6.

Основным параметром оценки эффективности вакцин является их способность ограничивать рост бактерий в органах после инфицирования, выражающаяся в снижении их обсемененности. Для оценки эффективности созданных нами вакцинных штаммов была использована мышиная модель туберкулезной инфекции при аэрозольном заражении вирулентным штаммом микобактерий. Оба штамма показали сходный уровень протективности, достоверно отличавшийся не только от неиммунных контрольных животных, но и от контрольного векторного штамма. Протективность обоих штаммов при использованной нами схеме иммунизации с учетом разницы в дозах иммунизации была сопоставима с протективностью стандартной туберкулезной вакцины BCG.

Следовательно, созданные нами рекомбинантные штаммы на основе вакцинного туляремийного штамма способны индуцировать протективный иммунный ответ против инфицирования вирулентным штаммом М. tuberculosis и их можно рассматривать в качестве перспективных прототипов живой туберкулезной вакцины.

Очевидно, что данные рекомбинантные штаммы можно рассматривать только в качестве прототипов вакцины, поскольку экспрессируемые микобактериальные антигены кодированы на плазмидном векторе и, следовательно, созданные нами рекомбинантные штаммы несут маркер антибиотикоустойчивости. Следующим этапом исследований, направленных на создание бивалентной живой вакцины, будет перенос генов клонированных микобактериальных белков в хромосомную ДНК туляремийного микроба для стабилизации их экспрессии, что позволит, соответственно, удалить маркер антибиотикоустойчивости.

Безусловно, без глубокого понимания иммунных механизмов, ответственных за создание протективного иммунитета, проблему создания нового поколения вакцин не решить. Кроме того, существуют определенные трудности в идентификации защитных механизмов макроорганизма при туберкулезе, которые пока являются большим тормозом в достижении прогресса в области создания эффективной противотуберкулезной вакцины. Поэтому данная работа является только первым этапом на сложном пути поиска и создания эффективных живых противотуберкулезных вакцин с использованием в качестве «живого» вектора бактериальных клеток F. tularensis.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кравченко, Татьяна Борисовна, 2008 год

1. Азаев М.Ш., Лебедев Л. Р., Туманов Ю. В., Смирнова О. Ю., Кузмичева Г. А., Боднев С. А., Донченко Н. А., Татьков С. И. Получение искусственных микобактериальных частиц и исследование их иммуногенных свойств// Биотехнология — 2004. № 4. — С. 34-40.

2. Волкова К. И., Кокосов А. Н., Браженко Н. А. Туберкулез в период ВИЧ/СПИДа и наркомании// Проблемы туберкулеза. 2001. -№ 2. -С. 61-65.

3. Воробьев А. А., Медуницын Н. В. Клеточная теория иммунитета И.И. Мечникова и концепция антиинфекционной резистентности// Журн. микробиол. 1995. - № 3. - С. 36-42.

4. Еремеев В. В. Новая противотуберкулезная вакцина: мечта или реальность?// Пробл. туб.-2001.-№ 1.-С. 53-55.

5. Карачунский М. А. Туберкулез при ВИЧ-инфекции// Проблемы туберкулеза. 2000. - № 1. - С. 47-52

6. Карягина А. С. Капрягин А. С., Народицкий Б. С., Апт А. С., Гинцбург А. Л .Геномика и генная инженерия: рациональные подходы для разработки новых средств борьбы с туберкулезом// Ж. микробиол. -2004.-№4.-С. 94-101.

7. Лазаренко В. Н., Махлай А. А., Хоменко А. Г. Перспективы разработки рекомбинантных вакцин на основе микобактерий// Вестн. РАМН. -1993.-№2.-С. 37-39.

8. Леви Д. Т., Аксенова В. А., Закирова Н. Р., Александрова Н. В. Вакцинация БЦЖ: характеристика препаратов и причины поствакцинальых осложнений.// Пробл.туб. 1999. - № 4. - С. 4-7.

9. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. -М.: Мир, 1984-479 с.

10. Маянский А. Н. Туберкулез (микробиологические и иммунопатогенетические аспекты)// Иммунология. 2001. - № 2. — С. 53-63

11. Медуницын Н. В. Вакцинология. М.: «Триада-Х», 1999. - 272 с.

12. Медуницын Н. В. Вакцины календаря, зарегистрированные в Российской Федерации// Бюлл. «Вакцинация» Электрон, ресурс. -2002. Том 2 № 20 (март-апр.): http://medi.ru/doc/15b2002.htm

13. Митинская Л. А. 80 лет применения вакцины БЦЖ// Пробл.туб. 2001. -№3.-С. 51-53.

14. Мишин В., Чуканов В., Наумов В. Лекарственно-устойчивый туберкулез легких// Медицинская газета. 2000. - № 58. - С. 8-9.

15. Олсуфьев, Н. Г. 1958. Современное состояние изученияпрофилактических свойств туляремийной вакцины. Вестн. Акад. Наук СССР. № 11 - С. 63-72. 18.0нищенко Г. Г.// Проблемы туберкулеза. - 2003. - № 11. - С. 4-9.

16. Павлов В. М., Родионова И. В., Мокриевич А. Н., Мещерякова И. С. Выделение и молекулярная-генетическая характеристика криптической плазмиды из Francisella novicida like F6168// Мол. Генет. Микробиол. Вирусол. 1994.-№3.-С. 39-40.

17. Петровская С. Н., Рубакова Э. И., Апт А. С., Кондратьева Т. К. Индукция иммунного ответа к микобактериальным антигенам с помощью дентритных клеток// Проблемы туберкулеза и болезней легких. 2004. - № 8.-С. 61-63

18. Померанцев А. П., Домарадский И. В., Доронин И. П. Фурсов В. В. Изучение экспрессии cat гена плазмид Sa и рС194 в клетках Escherichia coli, Francisella tularensis и Bacillus subtilisll Мол. Генет. Микробиол. Вирусол. 1991. -№ 9. - С. 21-24.

19. Приймак А. А. Размышления о туберкулезе // Пульмонология. 2005. -N5.-С. 35-38.

20. Семенов Б. Ф. Новые вакцины XXI века// Провизор Электрон.ресурс. 1998. -7 декабря:http://provisor.kharkov.ua/archive/N23/new va.htm?rated

21. Спирин А.С., Белозерский А.Н., Шугаева И.В., Ванюшин Б.Ф.// Биохимия. 1957. - № 22. - С. 774-753.

22. Чернушенко Е. Ф., Кадан Л. П., Круглова И. Ф., Подгайная Е. А. Поиск путей повышения эффективности противотуберкулезной ревакцинации детей с иммунологической недостаточностью// Проблемы туберкулеза. — 1996. — № 1. С. 29-32.

23. Шевченко Ю. Л., Онищенко Г. Г. Микроорганизмы и человек, некоторые особенности их взаимосуществования на современном этапе// Ж. Микробиол. -2001. -№ 2. С. 94-104.

24. Шилова М. В. Туберкулез в России в конце XX века// Пробл. туб. -2001.-№5.-С. 8-13.

25. Ярилин А.А. Основы иммунологии. М.: Медгиз, 1999. - 608 с.

26. Aldwell F. E, Dicker B. L., Da Silva Tatley F. M., Cross M. F., Liggett S., Mackintosh C. G., Griffin F. T. Mycobacterium &ovw-infected cervine alveolar macrophages secrete lymphoreactive lipid antigens //Infect Immun. 2000. - V. 68. - P. 7003-7009.

27. Andersen P., Askgaard D., Ljungqvist L., Bentzon M.W., Heron I. T-cell proliferative response to antigens secreted by Mycobacterium tuberculosis!I Infect Immun. 1991.-V. 59.-N.4.-P. 1558-1563.

28. Andersen P. Effective vaccination of mice against Mycobacterium tuberculosis infection with a solublie mixture of secreted mycobacterial proteins// Infect, immune. 1994. - V. 62. - P. 2536-2544.

29. Andersen P. Host responses and antigens involved in protective immunity to Mycobacterium tuberculosis!I Scand. J. Immunol. — 1997. V. 45. - N. 2. -P. 115-131.

30. Anon., 2002. Global Tuberculosis Control. WHO Report 2002 ( Geneva, Switzerland, World Health Organization), p. 181.

31. Anthony L. D., Burke R. D., and F. E. Nano. Growth of Francisella spp. in rodent macrophages// Infect. Immun. 1991. - V.59: - P.3291-3296.

32. Armstrong J. A., and P. D. A. Hart. Phagosome-lysosome Interactions in cultured macrophages infected with virulent tubercle bacilli// J. Exp. Med. -1975.-V.142.-P. 1-16.

33. Barletta R. G., Snapper В., Cirillo J. D., Connell N. D., Kim D. D., Jacobs W. R., Bloom B. R. Recombinant BCG as a candidate oral vaccine vector//Res. Microbiol. 1990.-V. 141.-P. 931-939.

34. Barnes P. F., Modlin R. L., EllnerJ. J. T-cell responses and cytokines. In: Bloom В R. , editor. Tuberculosis: pathogenesis, protection, and control. Washington, D.C.: American Society for Microbiology; 1994. P. 417-435.

35. Barnes P. F., Abrams J. S., Lu S., Sieling P. A., Rea Т. H., and R. L. Modlin. Patterns of cytokine production by mycobacterium-reactive human T-cell clones// Infect. Immun. 1993. - V. 61. - P. 197-203.

36. Baulard A., KremerL., Supply P., Vidaud D., BidartJ.-M., BelletD., Locht C.A new series of mycobacterial expression vectors for the development of live recombinant vaccines// Gene. 1996. - V. 176 - N.l-2. -P. 149-154.

37. Baumler A. J., Heffron F. //Virulence mechanisms of bacterial Pathogens/Eds.J.A.Roth et al Washington, 1997. - P. 115-131.

38. Beatty W. L., Rhoades E. R., Ullrich H. J., Chatterjee D., Heuser J. E., Russell D. G. Trafficking and release of mycobacterial lipids from infected macrophages. //Traffic. 2000. - V. 1. - P. 235-247.

39. Behar S. M., Dascher С. C., Grusby D. G., Wang C. R., and Brenner M. B. Suseptibility of mice deficient in CD ID or TAP1 to infection with Mycobacterium tuberculosis.// J. Exp. Med. 1999. - V. 189. - P. 19731980.

40. Beyer W., J. Imlay, and I. Fridovich. Superoxide dismutases// Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 1991. - V. 40.-P. 221-253.

41. BermudezL. E., and J. Goodman. Mycobacterium tuberculosis invades and replicates within type II alveolar cells/Anfect. Immun. 1996. - V. 64. -P. 1400-1406.

42. Berthet F. X., P. B. Rasmussen, I. Rosenkrands, P. Andersen, and B. Gicquel. A Mycobacterium tuberculosis operon encoding ESAT-6 and a novel low-molecular-mass culture filtrate protein (CFP-10)// Microbiology. 1998.-V. 144.-P. 3195-3203.

43. Bhatnagar N., E. Getachew, S. Straley, J.Williams, M. Meltzer, and A. Fortier. Reduced virulence of rifampicin-resistant mutants of Francisella tularensis. //J. Infect. Dis. -1994. V. 170. - P. 841-847.

44. Bloom В. R., and С. J. Murray. Tuberculosis: commentary on a reemergent killer// Science. 1992. - V. 257. - P. 1055-1064.

45. Brandt L, T. Oettinger, A. Holm, A.B.Andersen and P.Andersen. Key epitopes on the ESAT-6 antigen recognized in mice during the recall of protective immunity to Mycobacterium tuberculosis/'/ The Journal of Immunology. 1996.-V. 157.-N. 8.-P. 3527-3533.

46. Brandt L., Elhay M., Rosenkrands I., Lindblad E. В., Andersen P. ESAT-6 subunit vaccination against with Mycobacterium tuberculosis Жп&сИттпп. 2000. - V. 68. - N. 2. - P. 791-795.

47. Bodnar K. A., N. V. Serbina, and J. L. Flynn. Fate of Mycobacterium tuberculosis within murine dendritic cells// Infect. Immun. 2001. — V. 69. -P. 800-809.

48. Braunstein M., and J. Belisle. 2000. Genetics of protein secretion /In G. F. Hatfull and J. W. R. Jacobs (ed.), Molecular genetics of mycobacteria. American Society for Microbiology, Washington, D.C., P. 203-220.

49. Braunstein M., B. J. Espinosa, J. Chan, J. T. Belisle, and W. R. Jacobs, Jr. SecA2 functions in the secretion of superoxide dismutase A and in the virulence of Mycobacterium tuberculosisII Mol. Microbiol. 2003. - V. 48. -P. 453-464.

50. Brennan P. J., and H. Nikaido. The envelope of mycobacteria// Annu. Rev. Biochem. 1995. - V. 64. - P. 29-63.

51. Bretsher P. A. A strategy to improve the efficacy of vaccination against tuberculosis and leprosy// Immunol.Today. 1992. - V. 13. - P. 342-345.

52. Bosio С. M., Gardner D., and Elkins K. L. Infection of В cell-deficient mice with CDC 1551, a clinical isolate of Mycobacterium tuberculosis: delay in dissemination and development of lung pathology// J.Immunol. 2000. -V. 164. - P. 6417-6425.

53. Burke D. S. Immunization against tularemia: analysis of the effectiveness of live Francisella tularensis vaccine in prevention of laboratory acquired tularemia//J. Infect. Dis. 1977. - V. 135.-P. 55-60.

54. Castanon-Arreola M., and Y. Lopez-Vidal. A second-generation anti ТВ vaccine is long overdue// Ann. Clin. Microbiol. Antimicrob. 2004. - V. 3.-P. 10.

55. Castro K. G. Global tuberculosis challenges// Emerg.Infect.Dis. 1998. -V. 4. - N. 3. - P. 408-409.

56. Caruso A. M., SerbinaN., Klein E., TrieboldK., Bloom B. R., and Flynn J. L. Mice deficient in CD4 T cells have only transiently diminished levels of IFN-y, yet succumb to tuberculosis// J. Immunol. 1999. - V. 162. -P. 5407-5416.

57. Carlsson H. E., A. A. Lindberg, G. Lindberg, B. Hederstedt, K.-A. Karisson, and B. Agell. Enzyme-linked immuno-sorbent assay for immunological diagnosis of human tularemia// J. Clin. Microbiol. -1979. -V. 10. P. 615621.

58. Centers for Disease Control and Prevention. (1991). Nosocomial transmission of multidrug-resistant tuberculosis among HIV infected persons: Florida and New York, 1988-1991. Morb. Mortal. Wkly Rep. -V. 40.-P. 585-591.

59. Colditz G. A., Brewer T. F., Berkey C. S., Wilson M. E., BurdickE., Fineberg H. V, Mosteller F. Efficacy of BCG vaccine in the prevention of tuberculosis. Meta-analysis of the published literature// JAMA. 1994. -V. 271.-P. 698-702.

60. Collins D. M., Gicquel B. Genetics of mycobacterial virulence. /In: Hafful G.F., Jacobs Jr.W.R., editors. Molecular genetics of mycobacteria. Washington DC: ASM Press; 2000. - P. 265-78.

61. Corbett E. L., Watt С J., Walker N., MaherD., Williams B. G., Raviglione M. C., Dye C. The growing burden of tuberculosis: Global trends and interactions with the HIV epidemic// Arch. Intern. Med. 2003. -V. 163.-P. 1009-1021.

62. Crowle A. J., R. Dahl, E.Ross, and M.H.May. Evidence that vesicles containing living, virulent Mycobacterium tuberculosis or Mycobacterium avium in cultured human macrophages are not acidic// Infect. Immun. -1991.-V. 59. P. 1823-1831.

63. Cooper A. M., Flynn J. L. The protective immune response to Mycobacterium tuberculosis// Curr. Opinion Immunol. 1995. - V. 7. — N. 4.-P. 512-516.

64. Curtiss R3rd. Bacterial infectious disease control by vaccine development// J. Clin. Invest. -2002.-V. 110-N. 8.-P. 1061-1066.

65. Daffe M, Draper P. The envelope layers of mycobacteria with reference to their pathogenicity// Adv. Microb. Physiol. 1998. - V. 39. - P. 131-203.

66. Dale J. W., and A. Patki. (1990) in Molecular biology of the mycobacteria, (McFadden, J., ed.), Surrey University Press, London, United Kingdom, P. 173-198.

67. Davis M. M., and Bjorkman P. J. T-cell antigen receptor gene and T-cell recognition//Nature. 1988. -V. 334. - P. 395-402.

68. Dennehy M., Williamson A.-M. Factors influencing the immune response to foreign antigen expressed in recombinant BCG vaccines// Vaccine. — 2005. -V. 23.-N. 10.-P. 1209-1224.

69. Derrick S. C., Yang A. L., Morris S. L. Vaccination with a Sindbis virus-based DNA vaccine expressing antigen 85B induces protective immunity against mycobacterium tuberculosis//Inf. Immun. — 2005. V. 73. - N. 11.— P. 7727-7735.

70. DharN., Rao V., Tyagi A. K. Recombinant BCG approach for development of vaccines:cloning and expression of immunodominant antigens of M. tuberculosis//FEMS Microbiol Lett. 2000. - V. 190.-N. 2.-P. 309-316.

71. Doherty Т. M., Andersen P. Vaccines for tuberculosis: novel concepts and recent progress// Clinical Microbiology Rewiews, 2005. - V. 18. — N. 4. — P. 687-702.

72. Dussurget 0., G. Stewart, О. Neyrolles, P. Pescher, D. Young, and

73. G. Marchal. Role of Mycobacterium tuberculosis copper-zinc superoxide dismutase// Infect Immun. 2001. - V. 69. - P. 529-533.

74. Eigelsbach H. Т., and С. M. Downs. Prophylactic effectiveness of live and killed tularemia vaccines. I. Production of vaccine and evaluation in the white mouse and guinea pig// J. Immunol. 1961. - V. 87. - P. 415-425.

75. Eigelsbach H. Т., and V. G. McGann. Genus Francisella Dorofe'ev 1947, 1 76al. P. 394-399. In N. R. Krieg and J. G. Holt (ed.), Bergey's manual of systematic bacteriology, 1984. - V. 1. The Williams and Wilkins Co., Baltimore, Md.

76. EllnerJ. J. Необходимость новых научных достижений для контроля за туберкулезом. // The International Journal of Tuberculosis and Lung Disease. 1998. - V. 2. - N. 9, -suppl. 1. - P. 124-126. (Реф.: Проблемытубер. - 1999.-№ 5.-С. 55-56.)

77. Enzyme-mediated immunoassay. 1988. Ed. by Т. T. Ngo and

78. H. M. Lenhoff. Plenum Press, New York and London, 444 p.

79. Engelberg-Kulka H., and G. Glaser. Addiction modules and programmed cell death and antideath in bacterial cultures// Annu. Rev. Microbiol. 1999,-V. 53.-P. 4370.

80. Espinal M. A. The global situation of MDR-TB// Tuberculosis. -2003.-V. 83.-N. 1-3.-P. 44-51.

81. Fattorini L. Strategies for the development of new tuberculosis vaccines// Minerva Med. 2007. - V. 98 - N. 2. - P. 109-119.

82. FentonM. J., and M. W. Vermeulen. Immunopathology of tuberculosis: roles of macrophages and monocytes// Infect. Immun. 1996. V. 64. -P. 683-690.

83. Feng C. G., Bean A. G. D., Hooi H., Briscoe H„ Britton W J. Increase in gamma interferon-secreting CD8+, as well as CD4+, T cells in lungsfollowing aerosol infection with Mycobacterium tuberculosis// Infect Immun. 1999. - V. 67. - P. 3242-3247.

84. Flynn J. L. Immunology of tuberculosis and implications in vaccine development//Tuberculosis. 2004. - V. 84.-N. 1-2.-P. 93-101.

85. Fournie J. F., Adams E., Mullins R J, Basten A. Inhibition of human lymphoproliferative responses by mycobacterial phenolic glycolipids// Infect Immun. 1989. - V. 57. - P. 3653-3659.

86. Fridovich I. Fundamental aspects of reactive oxygen species, or what's the matter with oxygen?//Ann. N. Y. Acad. Sci. 1999. - V. 893. -P. 13-18.

87. Gasser A., Most J. Generation of multinucleated giant cells in vitro by culture of human monocytes with Mycobacterium bovis BCG in combination with cytokine-containing supernatants// Infect. Immun. 1999. -V. 67.-P. 395-402.

88. Glatman-Freedman A. Advances in antibody-mediated immunity against Mycobacterium tuberculosis: implications for a novel vaccinestrategy// FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2003. - V. 39. - N. 1. - P. 916.

89. Golovliov I., G. Sandstrom, M. Ericsson, A. Sjostedt, and A. Tarnvik. Cytokine expression in the liver during the early phase of murine tularemia// Infect. Immun. 1995. -V. 63. - P. 534-538.

90. Golovliov I., V. Baranov, Z. Krocova, H. Kovarova, and A. Sjostedt. An attenuated strain of facultative intracellular bacterium Francisella tularensis can escape the phagosome of monocytic cells// Infect. Immun. -2003.-V. 71.-P. 5940-5950.

91. Gomes M.S., Paul S., MoreiraA. I. Appelberg R., Rabinovitch M., and Kaplan G. Survival of Mycobacterium avium and Mycobacterium tuberculosis in acidified vacuoles of murine macrophages// Infect. Immun. -1999.-V. 67.-P. 3199-3206.

92. Gonzalez-Juarrero M., and I. M. Orme. Characterization of murine lung dendritic cells infected with Mycobacterium tuberculosis// Infect. Immun.-2001.-V. 69.-P. 1127-1133.

93. Gu6rin N. BCG policies in Europe// Pediat. Pulmonol. 1995. -Suppl.N. ll.-P. 18-19.

94. HarboeM., Malin A. S., Dockrell H. S., Wiker H. G., Ulvund G., Holm A., Jorgensen M. C., Andersen P. B-cell epitopes and quantification of the ESAT-6 protein of Mycobacterium tuberculosis// Infect. Immun. 1998. -V. 66.-N. 2.-P. 717-23.

95. Hayes F. Toxins-antitoxins: plasmid maintenance, programmed cell death, and cell cycle arrest// Science 2003. - V. 301. - P. 1496-1499.

96. Hetzel C., Janssen R., Ely S. J., Kristensen N. M., Bunting K., Cooper J. В., Lamb J. R., Young D. В., Thole J. E. R. An epitope delivery system for use with recombinant mycobacteria// Infect. Immun. 1998. -V. 66.-N. 8. -P. 3643-3548.

97. Hondalus M. K., Bardarov S., Russell R., Chan J., Jacobs W. R. Jr., Bloom B. R. Attenuation of and protection induced by a leucine auxotroph of Mycobacterium tuberculosis/У Infect. Immun. 2000. - V. 68. — N. 5. — P. 2888-2898.

98. HorwitzM. A., LeeB. W., Dillon B. J., and G. Harth. Protective immunity against tuberculosis induced by vaccination with major extracellular proteins of Mycobacterium tuberculosis!7 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1995. - V. 92. - P. 1530-1534.

99. Huygen K. DNA vaccines: application to tuberculosis// Int. J. Tuberc. Lung Dis.- 1998.-V. 2.-P. 893-898.

100. Huygen K. On the use of DNA vaccines for the prophylaxis of mycobacterial diseases// Infect. Immun. 2003. - V. 71. - N. 4. - P. 16131621.

101. Jackson M, Phalen S. W., Lagranderie M., Ensergueix D., Chavarot P., Marchal G.a McMurray D.N., Gicquel B. Persistence and protective efficacy of a Mycobacter.ium tuberculosis auxotroph vaccine// Infect. Immun. 1999. - V 7. - P. 2867-2873.

102. Jacobs G. G., Jonson J. L., Boom W. H., Wallis R. S., Whalen С. C., Ginsberg A. M. Tuberculosis vaccines: how close to human testing // Tuber. Lung Dis. 1997.-V. 78.-P. 159-169.

103. Johnson С. M., Cooper A. M., Frank A. A., Bonorino С. В., Wysoki L. J., and Orme I. M. Mycobacterium tuberculosis aerogenic rechallenge infections in В cell-deficient mice// Tuber. Lung Dis. 1997. -78.-P. 257-261.

104. KamathA. Т., Feng С. G., Macdonald M., Briscoe H., Britton W. J. Differential protective efficacy of DNA vaccines expressing secreted proteins of Mycobacterium tuberculosis// Infect. Immun. 1999. - V. 67. -N.4.-P. 1702-1707.

105. Kaplan G., Gandhi R. R., Weinstein D. E., Levis W. R., Patarroyo M. E., Brennan P. J., Cohn Z. A. Mycobacterium leprae antigen-induced suppression of T cell proliferation in vitro// J. Immunol. 1987. -V. 138.-P. 3028-3034.

106. Kaufmann S. H. E. Immune response to tuberculosis: experimental animal models// Tuberculosis (Edinb.) 2003. - V. 83. - P. 107-111.

107. Kaufmann S. H. E. Heat shock proteins and the immune response// Immunol. Today 1990.-V. 11.-P. 129-136.

108. Khatenever L. M. The allergic diagnosis, specific prophylaxis and vacci therapy of tularemia. In E. B. Balsky, I. G. Kochergin, and V. V. Porined.), Microbiology and epidemiology. Medical Publications Ltd., London, United Kingdom. 1943. - P. 62-79.

109. KindlerV., Sappino A P., Grau G. E., PiguetP. F., and Vassalli P. The inducing role of tumor necrosis factor in the development of bactericidal granulomas during BCG infection// Cell. 1989. - V. 56. -P. 731-740.

110. KoskelaP., and E. Herva. Cell-mediated and humoral immunity induced by a live Francisella tularensis vaccine// Infect. Immun. — 1982. — V. 36.-P. 983-989.

111. Krahenbuhl J. L. In'. Virulence mechanisms of bacterial pathogens/Eds.J.A. Roth et al. Washington, - 1995. - P. 97-114.

112. Kravchenko Т. В., Titareva G. M., Bachteeva I. V., Mironova R. I., Noskov A. N. Efficacy of Protection against Anthrax by the associative domain of the lethal factor// Abstracts of 4th Intern. Conference on Anthrax, Annapolis, USA-2001.-P. 40.

113. Kusunose E., IchiharaK., NodaY., and M. Kusunose. Superoxide dismutase from Mycobacterium tuberculosis/I J. Biochem. (Tokyo) 1976. -V.80.-P. 1343-1352.

114. Laemmli U. K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4// Nature (London). 1970. - V. 227. - P. 680685.

115. LazarevicV., Flynn J. CD8+ T cells in tuberculosis// Am. J. Respir. Crit. Care Med. -2002. V. 2002,-N. 8.-P. 1116-1121.

116. Leao S. C., Lopes J. D., Patarroyo M. E. Immunological and functional characterization of proteins of the Mycobacterium tuberculosis antigen 85 complex using synthetic peptides// J.General.Microbiol. 1993. -V. 139.-P. 1543-1549.

117. LiZ., Howard A., Kelley C., Delogu J., Collins F., Morris S. Immunogenicity of DNA vaccines expressiing tuberculosis proteins fused to tissue plasminogen activator signal sequences// Inf. Immun. 1999. - V. 67. -P. 4780-4786.

118. Lowry О. H., Rosenbrough N. R., Farr A. L. and Randall R J. Protein measurement with the folin phenol// J. Biol. Chem. 1951. - V. 193. -P. 115-119.

119. Mahairas G. G., P. J. Sabo, M. J. Hickey, D.C.Singh, and С. K. Stover. Molecular analysis of genetic differences between Mycobacterium bovis BCG and virulent M. bovis// J. Bacteriol. 1996. -V. 178.-P. 1274-1282.

120. MaierT. M., Havig A., Casey M., Nano F. E.,. Frank D. W, and Т. C. Zahrt. Construction and characterization of a highly efficient Francisella shuttle plasmid// Applied and Environmental Microbiology.2004. V. 70, - N. 12 - P. 7511-7519.

121. MancaC., Paul S., Barry С. E. Ill, Freedman V. H., Kaplan G. Mycobacterium tuberculosis catalase and peroxidase activities and resistance to oxidative killing in human monocytes in vitro// Infect. Immun. 1999.-V. 67.-P. 74-79.

122. Marei A., Ghaemmaghami A., RenshawP., WiselkaM., Barer M., Carr M., Ziegler-Heitbrock L. Superior T cell activation by ESAT-6 as compared with the ESAT-6-CFP-10 complex// International Immunology2005.-V. 17.-N. 11.-P. 1439-1446.

123. McShane H., Pathan A. A., Sander C. R., Goonetilleke N. P., Fletcher H. A., Hill A. V. Boosting BCG with MVA85A: the first candidate subunit vaccine for tuberculosis in clinical trials// Tuberculosis (Edinb). -2005. V. 85. - N. 1-2. - P. 47-52.

124. MehtaP. K., King С. H., White E. H., Murtagh J. J. Jr., and F. D. Quinn. Comparison of in vitro models for the study of Mycobacterium tuberculosis invasion and intracellular replication// Infect. Immun. 1996. -V. 64.-P. 2673-2679.

125. Menon S. A., Wannemuehler M. J., Mahairas G. G., Minion F. C. Mycobacterial ESAT-6 protein enhances mouse IFN-gamma responses to Mycoplasma hyopneumoniae P71 protein// J. Interferon Cytokine Res. — 2002.-V. 22.-N. 7.-P. 807-813.

126. Mishell В. B. & Shiigi S. M. (1980) In Selected Methods in Cellular Immunology, (Mishell, В. B. & Shiigi, S. M., eds.), W. H. Freeman, San Francisco, C. 486.

127. Molloy A, Gaudernack G, Levis W. R, Cohn Z. A., Kaplan G. Suppression of T-cell proliferation by Mycobacterium leprae and its products: the role of Lipopolysaccharide// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1990. V. 87. - N. 3. - P. 973-977.

128. Moreno C, Mehlert A, Lamb J. The inhibitory effects of mycobacterial lipoarabinomannan and polysaccharides upon polyclonal and monoclonal human T cell proliferation// Clin. Exp. Immunol. 1988. -V. 74.-P. 206-210.

129. Muller I., Cobbold S. P., Waldmann H., and Kaufmann S. H. Impaired resistance to Mycobacterium tuberculosis infection after selective in vivo depletion of L3T4+ and Lyt-2+ T cells// Infect. Immun. 1987. - V. 55. -P. 2037-2041.

130. Neurenberger E., Bishai W. R., Grosse J. H. Латентная туберкулезная инфекция/ Пер.иностран. публ. М.А.Карачунского// Проблемы туб. и болезни легких. 2005. - № 2. - С. 45-51.

131. NorN. М., MusaM. Approaches towards the development of a vaccine against tuberculosis: recombinant BCG and DNA vaccine// Tuberculosis. 2004. - V. 84.-N. 1-2.-P. 102-109.

132. North R.J. Nature of "memory" in T-cell-mediated antibacterial immunity: anamnestic production of mediator T cells// Infect. Immun. -1975.-V. 12.-P. 754-760.

133. OddoM., RennoT., AttingerA., BakkerT., MacDonald H. R., and Meylan P. R. Fas ligand induced apoptosis of infected human macrophages reduces the viability of intracellular Mycobacterium tuberculosis!/ J. Immunol. 1998. - V. 160 - P. 5448-5454.

134. OlsenA. W., van Pinxteren L. A., Okkels M. L., Rasmussen P. В., Andersen P. Protection of mice with a tuberculosis subunit vaccine based on a fusion protein of antigen 85B and esat-6// Infect. Immun. 2001. - V. 69. -N. 5.-P. 2773-2778.

135. OlsenA. W., Williams A., Okkels M. L., Hatch G., Andersen P. Protective effect of a tuberculosis subunit vaccine based on a fusion of antigen 85B and ESAT-6 in the aerosol guinea pig model// Inf. Immun. -2004.-V. 72.-N. 10. P.6148-6150.

136. OlsuijevN. G., and I. S. Meshcheryakova. Subspecific taxonomy of Francisella tularensis McCoy and Chapin 1912// Int. J. Syst. Bacteriol. -1983.-V. 33-P. 872-874.

137. Orme I. M., and Collins F. M. Adoptive protection of the mycobacterium tuberculosis-infected lung// Cell. Immunol. 1984. -V. 84.-P. 113-120.

138. Ormel.M. The kinetics of emergence and loss of mediator T lymphocytes acquired in response to infection with Mycobacterium tuberculosis//J. Immunol. 1987. - V. 138. - P. 293-298.

139. Ormel.M., Andersen P., Boom W. H. T cell response to Mycobacterium tuberculosis// J. Infect. Dis. 1993. - V. 167. - P. 14811497.

140. Ormel.M. Prospects for new vaccines against tuberculosis// Trends Microbiol. 1995. - V. 3. - P. 401-404.

141. Ormel.M., and Cooper A.M. Cytokine/chemokine cascades in immunity to tuberculosis// Immunol. Today 1999. - V. 20 - P. 307-312.

142. Ottenhof Т. H., Kumararatne D, and Casanova J. L. Novel human immunodeficiencies reveal the essential role of type-1 cytokines in immunity to intracellular bacteria// Immunol. Today 1998. - V. 19. -P. 491-494.

143. Palendira U., Spratt J. M., Britton W. J., Triccas J. A. Expanding the antigenic repertoire of BCG improves protective efficacy against aerosol

144. Mycobacterium tuberculosis infection// Vaccine. 2005. - V. 23. - N. 14. -P. 1680-1685.

145. PanY., CaiH., Li S. X., Tian X., Li Т., Zhu Y. X. Combined recombinant DNA vaccine results in significant protection against Mycobacterium tuberculosis I I Sheng Wu Hua XueYu Sheng Wu Li Xue Bao (Shanghai). -2003. -V. 35. N. 1. - P. 71-76.

146. Paterson R. Human trials start for new tuberculosis vaccine// The Lancet Infectious Diseases. 2001. - V. 1 - N. 5. - P. 291.

147. Pavlov V. M, Rodionova I. V, Mokrievich A. N, Meshcheriakova I. S. Isolation and molecular-genetic characteristic of a cryptic plasmid from the Francisella novicida like F6168 strain// Mol. Gen. Mikrobiol. Virusol. -1994.-V.3-P. 39-40.

148. Pavlov V. M., Mokrievich A. N., and K. Volkovoy. Cryptic plasmid pFNLlO from Francisella novicida-like F6168: the base of plasmid vectors for Francisella tularensis// FEMS Immunol. Med. Microbiol. — 1996. — V. 13.-P. 253-256.

149. Pavelka M. S. Jr., Chen В., Kelley C. L., Collins F. M., and Jacobs W. R. Jr. Vaccine efficacy of a lysine auxotroph of Mycobacterium tuberculosis// Infect Immun. 2003. - V. 71. -N. 7. - P. 4190^1192.

150. Pelicic V., Jackson M., Reyrat J.-M., Jacobs W. R., Gicquel В., Guilhot C. Efficient allelic exchange and transposon mutagenesis in Mycobacterium tuberculosis// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - V. 94. -P. 10955-10960.

151. Pollitzer R. History and incidence of tularemia in the Soviet Union. A review. The Institute of Contemporary Russian Studies, Fordham University, New York, N.Y., 1967.

152. Pollock J. M., Andersen P. Predominant recognition of the ESAT-6 protein in the first phase of interferon with Mycobacterium bovis in catle// Infect. Immun. 1997. - V. 65. - N. 7. - P. 2587-2592

153. Pomerantsev A. P., M. Obuchi, and Y. Ohara. Nucleotide sequence, structural organization, and functional characterization of the small recombinant plasmid pOMl that is specific for Francisella tularensis// Plasmid 2001. - V. 46. - P. 86-94.

154. Pomerantsev A. P., Golovliov I. R., OharaY., Mokrievich A. N., Obuchi M., Norqvist A., Kuoppa K., and V. M. Pavlov. Genetic organization of the Francisella plasmid pFNL 10.//Genetic Plasmid 2001a. -V. 46.-P. 210-222.

155. Powell K. DNA vaccines-back in the saddle again?// Nat. Biotechnol. — 2004. — V, 22.-P. 799-801.

156. PugsleyA. P. The complete general secretory pathway in gram-negative bacteria// Microbiol. Rev. 1993. - V. 57. - P. 50-108.

157. PymA. S., BrodinP., Majlessi L., Brosch R., Cemangel C., Williams A., Griffiths К. E., Marchal G., Leclerc C., Cole S. T. Recombinant BCG exporting ESAT-6 confers enhanced protection against tuberculosis//Nat. Med. 2003. - V. 9.-N. 5.-P. 533-539.

158. Rathman M., Sjaastad M. D., and Falkow S. Acidification of phagosomes containing Salmonella typhimirhim in murine macrophages// Infect. Immun. 1996. -V. 64. - P. 2765-2773.

159. Roche P. W., Peake P. W., Billman-Jacobe H., Doran Т., Britton W. J. T-cell determinants and antibody binding sites on the major mycobacterial secretory protein MPB 59 of Mycobacterium bovis// Infect. Immun. 1994. -V. 62.-P. 5319-5326.

160. Roche P. W., Triccas J. A., Winter N. BCG vaccintion against tuberculosis: past disappointments and future hopes// Trends in Microbiol.1995. VI. 3 -N. 10.-P. 397-401.

161. Roche P. W., Feng C. G., Britton W. J. Human T-cell epitopes on the Mycobacterium tuberculosis secreted protein MPT64// Scand. J. Immunol.1996.-V. 43.-P. 662-670

162. Ronning D. R., Vissa V., Besra G. S., Belisle J. Т., Sacchettini J. C. Mycobacterium tuberculosis antigen 85A and 85C structures confirm binding orientation and conserved substrate specificity// J. Biol. Chem.2004. V. 279. - N. 35. - P. 36771-36777.

163. Rosenkrands I., Agger E. M., Olsen A. W., Korsholm K. S., Andersen C. S. Jensen К. Т., P. Andersen. Cationic liposomes containing mycobacterial lipids: a new powerful Thl adjuvant system// Inf. Immun.2005.-V. 73.-N. 9. P. 5817-5826.

164. Sable S. В., Vermal., BeheraD., Khuller G. K. Human immune recognition-based multicomponent subunit vaccines against tuberculosis// Eur. Respir. J. 2005. - V. 25 - N. 5. - P. 902-910.

165. Sandstrom G., A. Tarnvik, and H. Wolf-Watz. Immunospecific T-lymphocyte stimulation by membrane proteins from Francisella tularensis!! J. Clin. Microbiol. 1987. - V. 25. - P. 641-644.

166. Sandstrom G. The tularemia vaccine// J. Chem. Tech. Biotech. 1994 -V. 59.-P. 315-320.

167. Sansonetti P. J., RyterA., ClercP., Maurelli А. Т., and MounierJ. Multiplication of Shigella flexneri within HeLa cells: lysis of the phagocyticvacuole and plamid-mediated contact hemolysis// Infect. Immun. 1986. -V.51-P. 461-469.

168. Saslaw S., Eigelsbach H. Т., Prior J. A., Wilson H. E., and S. Carhart. Tularemia vaccine study. II. Respiratory challenge// Arch. Intern. Med. -1961.-V. 107.-P. 702-714.

169. Schlesinger L. S. Macrophage phagocytosis of virulent but not attenuatedstrains of Mycobacterium tuberculosis is mediated by mannosereceptors in addition to complement receptors// J. Immunol. 1993 -V. 150-P. 2920-2930.

170. Senaratne R. H., Mougous J. D., Reader J. R., Williams S. J., Zhang Т., Bertozzi C. R,. Riley L. W. Vaccine efficacy of an attenuated but persistent Mycobacterium tuberculosis cysH mutant// J. Med. Microbiol. -2007. V. 56. - Pt 4. - P. 454-458.

171. Shi С. H., Xu Z. K., Zhu D. S., Li D. S., Bai Y. L., Xue Y. Screening and construction of recombinant BCG strains expressing the Ag85B-ESAT6 fusion protein// Chin J Tuberc Respir Dis (Chin). 2005. - V. 28. - P. 254257.

172. ShiC. H., XuZ. K., ZhuD. S., Li D. S., Bai Y. L.3 Xue Y. Mycobacterium tuberculosis secreting protein Ag85B-ESAT6 fused expression and purification// Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi (Chin). -2004.-V. 27.-N. 2. 89-92.

173. ShiC. H., WangX. W., ZhuD. S., Xu Z. K., Bai Y. L., Xue Y. Immunity characteristics induced by a genetic vaccine expressing Ag85B-ESAT6 fusion protein // Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi. (Chin). 2005. -V. 11. P. 777-780.

174. Sjostedt A., Sandstrom G., Tarnvik A., and B. Jaurin. Nucleotide sequence and T-cell epitopes of a membrane protein of Francisella tularensis!I J. Immunol. 1990. - V. 145. - P. 311-317.

175. Sjostedt A., Tarnvik A., and G. Sandstrom . Francisella tularensis: host-parasite interaction// FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1996. - V. 13 -P. 181-184.

176. Smith D. A., Parish Т., Stoker N. G., Bancroft G. J. Characterization of auxotrophic mutants of Mycobacterium tuberculosis and their potential as vaccine candidates/ Infect. Immun. 2001. - V. 69. - N. 2. - P. 1142-1150.

177. Smith S. M., and Dockrell H. M. Role of CD8 T cells in mycobacterial infections// Immunol. Cell Biol. 2000. - V. 78. - P. 325333.

178. Smith J. A., and R. D. Magnuson. Modular organization of the Phd repressor/antitoxin protein. //J. Bacteriol. 2004. - V. 186 - P. 2692-2698.

179. Sorensen A. L., Nagai S., Houen G., Andersen P., and A. B. Andersen. Purification and characterization of a low-molecular-mass T-cell antigen secreted by Mycobacterium tuberculosis!I Infect. Immun. —1995.-V. 63.-P. 1710-1717.

180. Stenger S., Mazzaccaro R., UyemuraK., Cho S., Barnes P., Rosat J., SetteA., Brenner M., Porcelli S., Bloom B, and Modlin R. Differential effects of cytolytic T cell subsets on intracellular infection// Science 1997. -V.276.-P. 1684-1687.

181. Sterne J. A., Rodrigues L. C., and Guedes I. N. Does the efficacy of BCG decline with time since vaccination was given?// Int. Tuberc. Lung Dis.- 1998.-V. 2. —N. 3.-P. 200-207.

182. SudreP., Hirschel B. J., Gatell J. M., Schwander S., VellaS., Katlama C. Tuberculosis among European patients with the acqured immune deficiency syndrome/ ТВ in the foreign born and migration// ТВ and HIV1996. -N. 10.-P. 11.

183. Surcel H.-M. Diversity of Francisella tularensis antigens recognized by human lymphocytes// Infect. Immun. 1990. - V. 58. - P. 2664-2668.

184. Tarnvik A. Nature of protective immunity to Francisella tularensis!'/ Rev. Infect. Dis. 1989. - V. 11. - P. 440-451.

185. Tarnvik A., Lofgren M.-L., Lofgren S., Sandstrom G. and H. Wolf-watz. Long-lasting cell-mediated immunity induced by a live francisella tularensis vaccine/J. Clin. Microb. 1985. - V. 22. - N. 4. - P. 527-530.

186. Tascon R. E., Colston M. J., Ragno S., Stavropoulos E., Gregor D., Lowrie D. B. Vaccination against tuberculosis by DNA injection// Nat. Med. 1996.-V. 2 .-P. 888-892.

187. Tascon R. E., Soares C. S., Ragno S., Stavropoulos E., Hirst E. M., and M. J. Colston. Mycobacterium tuberculosis-activated dendritic cellsinduce protective immunity in mice// Immunology. 2000. - V. 99. -P. 473-480.

188. TekaiaF., Gordon S. V., Gamier Т., BroschR., Barrell B. G., and S. T. Cole. Analysis of the proteome of Mycobacterium tuberculosis in silico// Tuberc. Lung Dis. 1999. - V. 79. - P. 329-342.

189. Tigertt W. D. Soviet viable Pasteurella tularensis vaccines: a review of selected articles// Bacteriol. Rev. 1962. - V. 26 - P. 354-373.

190. Towbin H., Staenelin N., Gordon J. Electroforetic transfer of proteins from polyacrilamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. - V. 76. - P. 4350-4354.

191. Tuberculogia// WHO Fact Sheet. 2000. - No. 104, April (по реф. в Пробл.туб. - 2002. - № 6. - С. 61.

192. Vanham G., Toossi Z., Hirsch C. S., Wallis R. S., Schwander S. K., Rich E. A., Ellner J. J. Examining a paradox in the pathogenesis of human pulmonary tuberculosis: immune activation and suppression/anergy// Tuberc. Lung Dis. 1997.-V. 78,-P. 145-158.

193. Vordermeier H. M., Venkataprasad N., Harris D. P., and Ivanyi J. Increase of tuberculosis infection in the organs of В cell-deficient mice// Clin. Exp. Immunol. 1996.-V. 106,-P. 312-316.

194. Waag D. M., G. Sandstrom, M. J. England, and J. C. Williams. Immunogenicity of a new lot of Francisella tularensis live vaccine strain in human volunteers// FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1996. - V. 13. -P. 205-209.

195. Wiker H. G., and M. Harboe. The antigen 85 complex: a major secretion product of Mycobacterium tuberculosis// Microbiol. Rev. — 1992. -V. 56.-P. 648-661.

196. Worsaae A., Ljungqvist L., Heron I. Monoclonal antibodies prodused in BALB.B10 mice define new antigenic determinants in culture filtrate preparations of Mycobacterium tuberculosis// J. Clin. Microbial. 1988. -V. 26.-P. 2608-2614.

197. WuC.H., Tsai-Wu J. J., Huang Y. Т., Lin С. Y., LiouaG. G., and F. J. Lee. Identification and subcellular localization of a novel Cu,Zn superoxide dismutase of Mycobacterium tubercidosisll FEBS Lett. 1998. — V. 439.-P. 192-196.

198. Zhang Y., Lathigra R., Garbe Т., Catty D., and D. Young. Genetic analysis of superoxide dismutase, the 23 kilodalton antigen of Mycobacterium tuberculosis!7 Mol. Microbiol. 1991. - V. 5. - P. 381-391.

199. ZhongmingL., Howard A., Kelley C., Delogu G., Collins F., and S. Morris. Immunogenicity of DNA Vaccines Expressing Tuberculosis Proteins Fused to Tissue Plasminogen Activator Signal Sequences.//Infect. Immun. 1999. -V. 67. -P. 4780-4786.

200. Zhu X., Venkataprasad N., Thangaraj H. S., Hill M., Singh M., Ivanyi J., Vordermeier H.M. Function ans specificity of T cells following nucleic acid vaccination of mice against Mycobacterium tuberculosis// J. Immunol. 1997. - V. 158. - P. 5921-5926.

201. Yee D., T.R. Rhinehart-Jones, and K.L. Elkins. Loss of either CD4+ or CD8+ T cells does not affect the magnitude of protective immunity to an intracellular pathogen, Francisella tularensis strain LVS// J. Immunol. -1996. V. 157. - P. 5042-5048.