Компьютерная морфометрия клеток крови при физиологическом и патологическом течении беременности в ранние сроки тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.01, кандидат медицинских наук Виноградская, Юлия Борисовна

• Виноградская, Юлия Борисовна
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Виноградская, Юлия Борисовна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. Обзор литературы. Адаптационные изменения иммунитета и гемостаза на ранних этапах гестации

1.1. Иммунологические аспекты физиологической беременности

1.2. Современные представления об этиологии и патогенезе невынашивания беременности

1.3.Состояние системы иммунитета при невынашивании беременности в ранние сроки

1.4. Структура и функциональные свойства лимфоцитов

1.5. Гемостазиологические изменения при физиологической беременности и невынашивании в ранние сроки

1.6. Структура и функциональные свойства тромбоцитов

ГЛАВА П. Материал и методы исследования

2.1. Общая характеристика клинических наблюдений

2.2. Клинические методы

2.3. Лабораторные методы

2.3.1. Методика забора крови и получения обогащенной тромбоцитами плазмы

2.3.2. Методы исследования тромбоцитарного звена гемостаза

2.3.3. Методы исследования коагуляционного звена гемостаза

2.3.4. Тест с антитромбоцитарными антителами

2.3.5. Определение количества лимфоцитов в периферической крови

2.3.6. Выделение мононуклеаров

2.3.7. Разделение мононуклеаров по степени адгезивности к пластику

2.3.8. Определение маркеров СО методом проточной цитофлуорометрии

2.4. Прижизненная компьютерная фазометрия биообъектов

2.5. Методы статистической обработки результатов

ГЛАВА Ш. Клиническая характеристика обследованных больных

ГЛАВА IV. Оценка морфофункционального состояния клеток периферической крови здоровых небеременных женщин фертильного возраста методом витальной компьютерной фазометрии

4.1. Оценка морфофункционального состояния тромбоцитов периферической крови женщин контрольной группы

4.2. Оценка морфофункционального состояния лимфоцитов периферической крови женщин контрольной группы

ГЛАВА V. Изменения витального морфофункционального состояния клеток периферической крови женщин на ранних этапах гестащш при физиологическом течении беременности и угрозе ее 71 прерывания

5.1. Характеристика витального морфофункционального состояния тромбоцитов при физиологической беременности и угрозе 71 ее прерывания в I триместре

5.2. Характеристика витального морфофункционального состояния лимфоцитов при физиологической и осложненной угрозой прерывания беременности в I триместре

5.3. Клинические примеры использования компьютерной фазометр ии клеток крови для уточняющей диагностики угрозы прерывания беременности

ГЛАВА VI. Обсуждение полученных результатов

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Компьютерная морфометрия клеток крови при физиологическом и патологическом течении беременности в ранние сроки»

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Беременность как физиологическое явление представляет сложный и недостаточно изученный феномен. Способность плода избегать иммунного отторжения, регуляторно-адаптивные механизмы организма беременных женщин остаются загадочным парадоксом. В настоящее время частота невынашивания составляет 15-20% от всех беременностей, а в первом триместре - до 78% [ИЗ]. В настоящее время нет точного объяснения патогенетических механизмов невынашивания. Известно, что во время беременности происходит перестройка всех систем, особенно, начиная с ранних сроков беременности, системы гемостаза и иммунитета. В связи с этим очень важным является оценка именно клеточного уровня формирования патологических изменений, что позволит нам выявить новые аспекты и лучше понять патогенез невынашивания беременности в ранние сроки.

Одной из актуальных проблем акушерства и гинекологии остаются неблагоприятные исходы беременности: привычное невынашивание, внутриутробная гибель плода, пороки развития и др.

Вынашиванию беременности содействуют все органы и системы, но в последнее время особое значение в медицинском мире придается роли иммунной системы в реакциях отторжения плода. Поэтому исследование компонентов иммунитета женщин является одной из основных тенденций изучения причин невынашивания беременности. Однако, проводимые многочисленные исследования не являются однозначными. Нет единого мнения относительно субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток в ранние сроки беременности, механизмов взаимодействия между ними, уровней их функциональной активности [20; 54; 76; 112].

Не менее важное значение для нормального течения процесса гестации имеет адаптационная перестройка системы гемостаза. В то же время относительно изменений морфологии и функциональной активности тромбоцитов на рашшх этапах гестации данные литературы практически единичны [73; 93].

Используемые в настоящее время в клинике рутинные лабораторные методы не являются достаточно информативными для диагностики и подтверждения такого патологического состояния, как угроза самопроизвольного выкидыша в I триместре беременности. Нет четких диагностических критериев оценки происходящих изменений на клеточном уровне, а имеющиеся методики сложны и объемны [31; 56; 79].

Известно, что одним из наиболее информативных и объективных критериев оценки функционального статуса клеток являются их морфометрические показатели [1; 45]. Клетки периферической крови - это очень тонкие и лабильные структуры. Углубленное исследование их морфологического состояния позволяет, установить функциональную полноценность клеток, в частности, степень активации тромбоцитов, уровень пролиферации и дифференцировки лимфоцитов. Современные компьютерные технологии призваны объективизировать получаемые результаты, повысить точность измерений и гарантировать комплексный подход к решению поставленных дифференциально-диагностических задач на основе количественного анализа особенностей морфофункциональной перестройки клеток и тканей.

Все это послужило основанием к использованию витальной компьютерной фазометрии клеток периферической крови, а именно, субпопуляций лимфоцитов и тромбоцитов для выявления изменений, сопутствующих угрозе самопроизвольного выкидыша в I триместре беременности.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. "Разработать комплекс критериев оценки морфофункционального состояния клеток периферической крови г лимфоцитов и тромбоцитов) женщин в I триместре беременности; установить диагностическую и прогностическую значимость изменения интегральных морфометрических характеристик лимфоцитов и тромбоцитов при угрозе самопроизвольного выкидыша в ранние сроки.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1. Исследовать ^витальное морфофункционалыюе состояние лимфоцитов и тромбоцитов периферической крови практически здоровых женщин фертильного возраста методом компьютерной фазометрии.

2. Выявить изменения морф ©функционального статуса лимфоцитов и тромбоцитов периферической крови, характерные для адаптационной перестройки клеточного гомеостаза женщин с физиологическим течением беременности и беременных с угрозой самопроизвольного выкидыша в I триместре.

3. Провести сравнительный анализ данных компьютерной фазометрии лимфоцитов и тромбоцитов с результатами стандартных клинико-лабораторных методов обследования беременных в I триместре.

4. Оценить информативность результатов компьютерной фазометрии клеток крови в Диагностике угрозы невынашивания беременности на ранних этапах гестации.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. В данной работе реализован новый подход к изучению проблемы невынашивания беременности в ранние сроки. Впервые проведено исследование витального морфофункционального состояния клеточных компонентов периферической крови женщин при физиологической беременности и беременности, осложненной угрозой самопроизвольного выкидыша в I триместре.

Предложен комплекс критериев оценки . морфофункционального статуса лимфоцитов и тромбоцитов на основе оптико-геометрических показателей их фазово-интерференционных портретов для диагностики угрозы самопроизвольного выкидыша и прогнозирования исхода беременности в ранние сроки.

Анализ полученных данных позволяет предположить, что структурные и функциональные изменения тромбоцитов и лимфоцитов являются отражением адаптационных иммунологических и гемостазиологических реакций организма женщины в период гестации при физиологическом или осложненном течении беременности.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Полученные сведения о витальных морфофункциональных особенностях тромбоцитов и лимфоцитов представляются важными для теоретической и практической медицины, поскольку дают дополнительную ценную информацию об адаптационных механизмах перестройки организма женщины в условиях физиологического течения беременности или угрозе ее прерывания. С помощью предложенного метода изучают живые клетки крови, не подвергающиеся фиксированию и окрашиванию, что' позволяет избежать их возможной экзогенной деформации. Данный метод экономичен, проводится с использованием отечественного компьютерного фазового микроскопа „Цитоскан". Компьютерная фазометрия клеток крови может быть успешно применена в акушерской практике при обследовании женщин для уточняющей диагностики невынашивания беременности.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. Витальные оптико-геометрические показатели цитообъектов (диаметр, периметр, высота, площадь и объем), полученные методом компьютерной фазометрии, объективно характеризуют морфофункциональный статус клеток крови.

2. Состоянию физиологической беременности или беременности, осложненной угрозой самопроизвольного выкидыша, сопутствуют

• морфофункциональные изменения лимфоцитов и тромбоцитов, отражающие уровень перестройки иммунной системы и гемостаза.

3. Основными признаками угрозы прерывания беременности на уровне клеточного звена гемостаза являются: увеличение периметра и снижение высоты тромбоцитов, наряду с повышением количества активированных и дегенеративно-измененных форм клеток.

4. Основными признаками угрозы прерывания беременности на уровне клеточного звена иммунитета являются: увеличение диаметра и периметра Т-клеток (за счет субпопуляции больших лимфоцитов) при снижении их фазовой высоты и объема; снижение диаметра и периметра В-клеток (за счет роста субпопуляции малых В-лимфоцитов) при повышении значений их высоты и объема.

5. Значительная степень выраженности изменений показателей морфофункционального состояния лимфоцитов и тромбоцитов периферической крови беременных в I триместре является * прогностически неблагоприятным критерием исхода беременности в ранние сроки.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Работа проведена в рамках основного направления научной деятельности кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии Российского университета дружбы народов «Репродуктивное здоровье населения Московского мегаполиса и пути его улучшения в современных экологических и социально-экономических условиях».

Результата., исследования и разработанные на их основании рекомендации предложены для использования в учебном процессе кафедры акушерства и гинекологии с курсом перинатологии Российского университета дружбы народов, а также в практической работе городской клинической больницы №29 г. Москвы.

Клинические исследования, анализ и интерпретация данных проведены автором самостоятельно. Иммунологические и морфометрические исследования выполнены автором совместно с сотрудниками лаборатории клинической иммунологии РОНЦ им.Н.Н.Блохина РАМН, лаборатории иммуногематологии ГНЦ РАМН и академгруппы ГУ института ревматологии РАМН. По материалам исследования опубликовано 6 работ.

Основные положения диссертации доложены на кафедральных конференциях РУДН, ^на второй Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2001) РУДН, на третьем Российском форуме «Мать и дитя» (Москва, 2001), на третьей Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2002), на Международной конференции «Ранние сроки беременности» (Москва, 2002), на шестом Российском форуме «Мать и дитя» (Москва, 2004), второй Всероссийской конференции по клинической гемостазиологии и гемореологии (Москва, 2005).

Заключение диссертации по теме «Акушерство и гинекология», Виноградская, Юлия Борисовна

выводы

1. Получены и охарактеризованы витальные фазово-интерференционные портреты тромбоцитов и лимфоцитов периферической крови женщин фертильного возраста. Установлено, что морфометрические показатели (диаметр, периметр, высота, площадь, объем) отражают морфологические особенности и функциональную полноценность клеток крови, в частности, степень активации тромбоцитов, уровень пролиферации и дифференцировки лимфоцитов.

2. Выявлено, что адаптационные изменения клеточных звеньев гемостаза и иммунной системы в период гестации выражаются в трансформации размерных параметров лимфоцитов и тромбоцитов, модификации морфологических свойств этих клеток и перестройке их популяционного состава.

3. Анализ морфофункционального состояния тромбоцитарного звена гемостаза показал, что признаками угрозы прерывания беременности в I триместре являются: увеличение периметра более чем на 9%; снижение фазовой высоты тромбоцитов более чем на 17%; повышение количества активированных и дегенеративно-измененных форм клеток более чем 30% и 10%, соответственно.

4. Признаками угрозы прерывания беременности в I триместре при анализе морфофункционального состояния иммунокомпетентных клеток являются: активация Т-звена лимфоцитов, выражающаяся в увеличении среднего диаметра (за счет роста субпопуляции больших лимфоцитов) и периметра Т-клеток при снижении их фазовой высоты и объема. При этом выявлено подавление функциональной активности В-звена, выражающееся в снижении диаметра и периметра (за счет роста субпопуляции малых В-лимфоцитов) при повышении значений высоты и объема клеток.

5. Высокая степень выраженности изменений показателей морфофункционального состояния лимфоцитов и тромбоцитов периферической крови беременных в I триместре может служить прогностически неблагоприятными критериями исхода беременности в ранние сроки.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

В качестве диагностических критериев в оценке гемостазиологических и иммунологических нарушений при осложненном течении беременности на ранних сроках гестации могут быть использованы морфометрические параметры тромбоцитов и лимфоцитов.

Включение метода витальной компьютерной фазометрии клеток крови в комплексное клинико-лабораторное обследование женщин на ранних сроках гестации повысит эффективность своевременной диагностики угрозы самопроизвольного выкидыша.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Виноградская, Юлия Борисовна, 2005 год

1. Автандилов Г.Г. Компьютерная микротелефотометрия в диагностике гистоцитопатологии. М.: РМАПО, 1996.- 256с.

2. Айламазян Э.К., Павлов О.В., Сельков С.А. Роль иммунной системы фетоплацентарного комплекса в механизмах преждевременного прерывания беременности.//Акушерство и гинекология,- 2004.-№2.-С.9-11.

3. Анкирская A.C., Прилепская В.Н., Байрамова Г.Р., Муравьева Г.Г. Бактериальный вагиноз: особенности клинического течения, диагностика, лечение//Русский медицинский журнал.- 1998,- Т 6.-№5.-С.276-282.

4. Афанасьев Ю.И., Юрина H.A. Гистология.- М.:Медицина, 1999.-С.171-173.

5. Балуда В.П., Нестайко Г.В. Ультраструктура тромбоцитов как показатель их функционального состояния.// Проблемы гематологии и переливания крови.- 1972.- 9.- С.3-10.

6. Баркаган З.С. Геморрагические заболевания и синдромы.- М.: Медицина, 1998.- 528с.

7. Барышников А.Ю., Тоневицкий А.Г. Моноклональные антитела в лаборатории и клинике.- Москва, 1997.- 212с.

8. Васильева З.Ф., Шабалин В.Н. Иммунологические основы акушерской патологи и.//АМН СССР.- М.:Медицина, 1984.- 192с.

9. Ю.Вашкинель В.К., Петров М.Н. Ультраструктура и функции тромбоцитов человека,- Л.: Наука, 1982.- 88с.

10. П.Вихляева E.H., Кулаков В.И., Серов В.Н. под ред. Г.М. Савельевой. Справочник по акушерству и гинекологии.- М.¡Медицина, 1992.- 352с.

11. Гаврилов O.K., Козинец Г.И., Черняк Н.Б. Клетки костного мозга и периферической крови.- М.: Медицина, 1985.- 288с.

12. Гинекология: Практикум / Под ред. В.Е.Радзинского. Изд.1-е.-М.: Изд-во РУДН, 2003.-С. 109-116.

13. Говалло В.И. Иммунология репродукции.- М.: Медицина, 1987.- 304с.

14. Грищенко В.И., Щербина H.A. Этиологические и патогенетические аспекты невынашивания беременности. // Междунар. Мед. Журнал.-1997.-№4.- С. 17-20.

15. Гузов И.И. Иммунология репродукции. Электронный ресурс., 2003.-http://cironline.ru/articles/pregfail/156/

16. Гусейнов Ч.С. Физиология и патология тромбоцитов.- М.: Медицина, 1971.- 174с.

17. Демидова Е.М. Привычный выкидыш: патогенез, акушерская тактика: Автореф. дисс. .докт.мед.наук.- Москва, 1993.-42с.

18. Демина Т.Н., Майлян Э.А., Гюльмамедова И.Д., Гюльмамедов В.А. Современные взгляды на иммунологию гестационного процесса. // Репродуктивное здоровье женщины.- 2003.- №1(13).- С.43-48.

19. Драник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология.- Одесса: Астро Принт, 1999.- С.294-300.

20. Кассирская И.А., Алексеев Г.А. Клиническая гематология.- М.: Медицина, 1970, 780с.

21. Киселева Е.Ю. Коррекция нарушений морфофункционального состояния тромбоцитарного звена системы гемостаза гидроксиэтилированным крахмалом при гестозе: Автореф.дисс. .канд.мед.наук , М., 1999. 24с.

22. Козинец Г.И. Интерпретация анализов крови и мочи и их клиническое значение.-М.: «Триада-Х», 1998.- С.45-58.

23. Козинец Г.И., Гольдберг Е.Д. Кинетические аспекты гемопоэза.-Томск, 1982, С.35-70.

24. Козинец Г.И., Каюмова Д.Ф., Погорелов В.М. Клетки периферической крови и экологические факторы внешней среды.// Клиническая и лабораторная диагностика.- 1993.- №1.- С. 14-20.

25. Козинец Г.И., Котельникова В.М. Кинетика гемопоэза и ее клиническое значение. // Сов.Мед.- 1983.- №4.-С.73-75.

26. Козинец Г.И., Макаров В.А. Исследование системы крови в клинической практике.- М.: Триада-Х, 1997.-480 с.

27. Козинец Г.И., Погорелов В.М., Шмаров Д.А. и др. Клетки крови -современные технологии их анализа. М.: Триада-Фарм, 2002.-200с.

28. Кокашвили Х.Б. Прогнозирование и диагностика плацентарной недостаточности в ранние сроки беременности: Автореф. дис. .канд.мед.наук.- М., 2002.- 26с.

29. Коробова Ф.В. Компьютерная морфометрия тромбоцитов периферической крови здоровых людей: Автореф.дисс. .канд.мед.наук.- М.- 2001.- 24с.

30. Коробова Ф.В., Шмаров Д.А., Иванова Т.В., Гусев A.A., Козинец Г.И. Анализ тромбоцитов периферической крови компьютерная цитометрия. // Клиническая лабораторная диагностика.-2000.-№7.-С.36-39.

31. Космовский С.Ю., Васин СЛ., Розанова И.Б., Севастьянов В.И. Математическая обработка распределения тромбоцитов человека по размерам для выявления гетерогенности клеток. // Медицинская техника.-1999.-№6.-С.41 -43.

32. Красникова H.A., Порешина Л.П., Головкина Л.Л., Долгопольская Т.И., Зотиков Е.А. Антитела, реагирующие с тромбоцитами.// Клин.лаб.диагностика.- 2000.- №5.-С.40-43.

33. Кременецкая A.M., Воробьев И.А., Сидорова Ю.В., Захарова А.И., Шкловский-Корди Н.Е., Воробьев А.И. Морфология лимфоцитов. // Тер.архив., М.: Медицина,- 1998,- т.70,- №7.- С.37-39.

34. Кулаков В.И., Сидельникова В.М. К вопросу о патогенезе привычного выкидыша. //Акушерство и гинекология,- 1996.- №4.- С.3-5.

35. Ладный А.И., Кондаков И.К., Ермакович И.И. Экспресс-метод оценки морфофункционального состояния тромбоцитов. // Лабораторное дело.- 1988.-№2.-С.27-29.

36. Макацария АД.,Бицадзе В.О. Тромбофилические состояния в акушерской практике. M.:Russo, 2001.-С.219-285.

37. Маркосян A.A. Физиология тромбоцитов.- М., Медицина, 1975, с. 164, ил.

38. Маянский А.Н., Бурков А.Н., Астафьев Д.Г., Рассанов С.П. Персистенция вирусов: иммунологические и патогенетические аспекты: обзор.// Клин Мед, 1998.- 76.-№12.-С.19-25.

39. Мусаходжаева Д.А., Арипова Т.А. Регуляторные Т-лимфоциты при неосложнениой беременности.// Журнал теоретической и клинической медицины, 1999,- №2.- С.40-43.

40. Одесская Т.А. Тромбостенин сократительный белок кровяных пластинок - важнейший фактор динамических превращений тромбоцитов. // Пробл. Гематол. и перелив, крови.- 1976.- №2,- С.37-40.

41. Пальцев М.А., Волощук И.Н., Демидова Е.М., Мещерякова A.B., Носов

42. B.Б. Иммунологические аспекты материнско-плодовых взаимоотношений. // Вестник РАМН.-М.: "Медицина", 1999.- №5.1. C.32-36.

43. Погорелов В.М., Медовый B.C., Хазен Г.М., Козинец Г.И. Анализ клеточного изображения.//Клин лаб диагн.-1995.-№3.-С.40-43.

44. Прилепская В.Н., Абуд И.Ю. Хламидийная инфекция в акушерстве и гинекологии. // Русский медицинский журнал.- 1998.- Т.6.- №5.- С.284-287.

45. Прилепская В.Н., Байрамова Г.Р. Современные представления о бактериальном вагинозе. // Вестник Российской ассоциации акушеров-гинекологов.- 1996.- №3.- С.40-42.

46. Репина М.А., Корзо Л.П., Папаян Г.А., Красовская Г.А., Сумская Г.Ф. Коррекция нарушений гемостаза при беременности, осложненной гестозом.// Акуш. и гинекол.- 1998.- №5.- С.38-45.

47. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология.- М.: Мир, 2000.- 592с., ил.

48. Салов И.А. Неразвивающаяся беременность. // Автореф.дисс. .канд.мед.наук.- М., 1998.-48с.

49. Севостьянова О.Ю. Популяционные и субпопуляционные спектры лимфоцитов периферической крови при неосложненной беременности. // «Здоровье новорожденных: перинатальные проблемы и прогнозирование». Сборник научных трудов.- Екатеринбург, 2000.-С.69-72.

50. Сидельникова В.М. Актуальные проблемы невынашивания беременности. Цикл клинических лекций. М., 2000.-С. 11-23.

51. Сметанина A.A., Галин Н.П. Иммунологические аспекты невынашивания беременности,- Труды молодых ученых ИГМА,-Россия.- Ижевск, 27-29 апреля, 1999.- С.141-142.

52. Сотникова Н.Ю., Крошкина Н.В., Букина Е.А. Особенности активации периферических лимфоцитов при самопроизвольном выкидыше в 7-12 недель беременности. // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии. М.- 1998.- С.425.

53. Сохова З.М. Регуляция апоптоза в хорионе в ранние сроки беременности: Автореф.дисс. .канд.мед.наук.-Москва, 2004.-25с.

54. Сухих Г.Т., Ванько JI.B., Кулаков В.И. Иммунитет и генитальный герпес.- Н.Новгород. М., издательство НГМА, 1997, с.221, ил.

55. Теодореску-Эскарку М. Введение в иммунологию репродукции.Электронный ресурс.: www.Cir-msk.ru

56. Федорова Т.А., Серов В.IL, Сидельникова В.М. Применение плазмафереза в лечении патологических состояний в акушерстве. //

57. Вестник российской ассоциации акушеров-гинекологов.-1999.- №2.-С.33-35.

58. Фермилен Ж., Ферстрате М. Гемостаз: Пер. с франц.- М.- 1984

59. Чернышов В.П., Теличкун С.В. Субпопуляции лимфоцитов, специфические белки беременности при физиологической ранней беременности и раннем спонтанном аборте неясного генеза. // Иммунологические аспекты репродуктивного здоровья.- М., 1995.-С.163-170.

60. Черняк Н.Б. Функция тромбоцитов и процессы обмена энергии.- В кн. Клетки костного мозга и периферической крови.- М.: Медицина, 1985.-С. 180-226.

61. Шевченко Ю.Л., Шабалин В.Н., Заривчацкий М.Ф. Руководство по общей и клинической трансфузиологии.-Спб.: Изд-во Фолиант, 2003.-С.128-129.

62. Шитикова А.С. Тромбоцитарный гемостаз.-СПб.: Изд-во СПб ГМУ, 2000.- 227с.

63. Aguilar J., Rosell-Perez M.R. Studies on glycogen metabolism in human platelet. //Rev. Esp. Fisiol., 1975, V.31, p.151-162.

64. Bar J., Zosmer A., Hod M., Lahav J., Elder M.G., Sullivan M.H. Changes in the effects of interleukin-lbeta and tumor necrosis factor-alpha on platelet activation in early pregnancy. // Platelets. 2001 Dec; 12(8), p.453-455.

65. Beer A.E., Kwak J.Y., Ruiz J.E. Immunophenotypic profiles of peripheral blood lymphocytes in women with recurrent pregnancy losses and in infertile women with multiple failed in vitro fertilization cycles. // Am J Reprod Immunol. 1996 Apr;35(4):376-82.

66. Bosmann H.B. Platelet adhesiveness and aggregation. // Biochem. Biophys. Acta, 1972, V.279, P. 456-474.

67. Boyer C.M., Knapp R.C., Bast R.C., Jr. Biology and immunology. In: J.S.Berek, N.F.Hacker (eds.), Practical Gynecologic Oncology (2nd ed.). Baltimore: Williams & Wilkins, 1994, p.75-115.

68. Brenner B. Inherited thrombophilia and pregnancy loss.//J Thromb Hemost, 1999.-v.92.-№2.-p.634-641.

69. Breton-Gorins J. The value of cytochemical peroxidase reactions at the ultrastructural level in haematology. // Histochem. J., 1980, v. 12, p. 127-137.

70. Burrows R.F. Platelet disorders in pregnancy. // Current Opinion in Obstetrics and Gynecology, 2001, v. 13, p. 115-119.

71. Caen J. Blood platelet function. // Nouv. Rev. Franc. Hematol., 1979, t.21(l), P.81-89.

72. D'Alfonso A., Picariello A., Maccarone D., Palumbo F., Casciani C.U., Moscarini M. Modification of immunologic parameters in physiologic pregnancy. // Minerva Ginecol., 1993, Apr;45(4), p.145-148.

73. Darmochwal-Koiarz D., Leszczynska-Gorzelak B., Oleszczuk J. The immunophenotype of patients with recurrent pregnancy loss. // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol.-2002 Jun.-10;103(l).-p.53-57.

74. Drohnt M. Recurrent miscarriage.// Curr Womens Health Rep.-2003 Oct.-3(5).-p.361-366.

75. Esteban M.A., Munoz J., Meseguer J. // Factors influencing phagocytic response of macrophages from the sea bass: an ultrastructural and quantitative study.- Anat Rec., 1997, 248:533-541.

76. Faure G.C., Bene M.C., Barbarino-Monnier P. Reccurent pregnancy loss: which immunological laboratory tests?//

77. Fraser E.J., Grines D.A., Schulz K.F. Immunizations as therapy for recurrent spontaneous abortion: a rewiew and meta-analysis. // Obstet.Gynecol.-1993.-v.9.-p.82-854.

78. Gerrard J.M., White J.G., Rao G. Localization of platelets prostaglandin production in the platelet deuse tubular system. // Amer. J. Pathol.- 1976.-v.83.- P.283-298.

79. Hill J.A. Sporadic and recurrent spontaneous abortion. Curr.Probl.Obstet.Gynecol.Fertil.- 1999.-v.l7.-p.l 13-164.

80. Hill J.A., Polgar K., Anderson D.J. T helper 1-type immunity to trophoblast antigens in women with recurrent spontaneous abortion. J. A.M. A.-1995.-237.-p.1933-1936.

81. Hokama Y., Nogasawa L.S., Morita et al. 3718 study on platelet aggregation ingibitory factor from post partum pooled serum samples. // Fed. Proc.- 1979.- v.38.- №3.- pt.2.- P. 1409.

82. Holt P.G., Jones C.A. The development of the immune system during pregnancy and early life.// Allergy.- 2000:55:688-697. . *

83. Hornby E.J. Evidence that P.C. endoperoxides ceen indused platelet aggregation in the abcesuce of thromboxane A2 production. // Biochem. Pharmacol.- 1982.- v.31.- N6.- P. 1158.

84. Hsier C., Canchi M.N. Platelet and complement changes in preeclampsia. // Aus. J. Obstet. Gynecol.- 1983.- v.3.- N3.- P.165-169.

85. Jablonowska B., Palfi M., Matthiesen L., Selbing A., Kjellberg S., Ernerudh J. T and B lymphocyte subsets , in patients with unexplained recurrent spontaneous abortion: IVIG versus placebo treatment.// Am J reprod Immunol.- 2002 Nov.-48(5).-p.312-318.

86. Jagroop I.A., Clatworty I., Lewin J., Mikhalidis D.P. Shape change in human platelets: measurement with a channelyser and visualization by electron microscopy. // Platelets- 2000, 11, p.28-32.

87. Ju Z., Fan L., Lu L. Study on normal pregnancy and recurrent spontaneous abortions from helper T cell 1/ helper T cell 2 cytokines balance.//Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi.-2000 Aug; 35(8); p.473-475.

88. Korbut R., Moncada S. Prostacyclin PGI. and tromboxane interaction in vivo regulation by aspirin and relationship with antitrombotic therapy. // Tromb. Res.- 1978.- V.13.-N3.- P.489-500.

89. Kottke-Marchant K., Corcoran G. The laboratory diagnosis of platelet disorders.//Arch Pathol Lab Med.- 2001, v. 126, p. 133-146.

90. Kuhne T., Imbach P. Neonatal platelet physiology and pathophysiology.// Eur J Pediatr., 1998, 157, p.87-94.

91. Kuhnert M., Strohmeier R., Stegmuller M., Halberstadt E. Changes in lymphocyte subsets during normal pregnancy. // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol.- 1998,- v.76(2).- p.147-151.

92. Kutteh W.H., Park V.M., Deitcher S.R. Hypercoagulable state mutation analysis in white patients with early first-trimester recurrent pregnancy loss.// Fertil Steril 2000 Mar; 73(3).- p.652-654.

93. Kuwahara M., Sugimoto M., Tsuji S., Matsui H., Mizuno T., Miyata M., Yoshioka A. Platelet shape changes and adhesion under high shear flow.// Arterioskler Thromb Vase Biol.- 2002.-v.22.-p.329-334.

94. Kwak J.Y., Kwak F.M., Gilman-Sachs A., Beaman K.D., Cho D.D., Beer A.E. Immunoglobulin G infusion treatment for women with recurrentspontaneous abortions and elevated CD56+ natural killer cells. // Early Pregnancy.- 2000 Apr; 4(2): 154-64*

95. Laird S.M., Tuckerman E.M., Cork B.A., Linjawi S., Blakemore A.I., Li T.C. A review of immune cells and molecules in women with recurrent miscarriage.// Hum Reprod Update.-2003 Mar-Apr.-9(2).-p.l63-174.

96. Levin G.G., Kozinets G.I., Novoderzhkina J.K. Blood cells research using method of microinterferometry. // Proceeding SPIE.- V/2982.- 1997.-p.490-495.

97. Livengood C.H., Thomason J.L., Hill G.B. Bacterial vaginosis. Diagnostic and pathogenetic findings during topical clyndamycin therapy.// Amer. J Obstet Gynecol.- 1990; 163(2): 515-520.

98. McLean H.A., Wilson R., Thomson J.A. et al. Changes in immunologic parameters in normal pregnancy and spontaneous abortion. // Amer. J. Obstet. Gynec.- 1991.- Vol. 165.- P.890-895.

99. Maggi E. Reciprocal regulatory effects of IFN-alpha and IL-4 in in vitro development of human Thl and Th2 clones. // J Immunol.- 1992.-7.-p.148-2142.

100. Makhseed M, Raghupathy R, Azizieh F, Omu A, Al-Shamali E, Ashkanani L. Thl and Th2 cytokine profiles in recurrent aborters with successful pregnancy and with subsequent abortions. // Hum.Reprod.- 2002.-Jun.-17(6).-p. 1669-1670.

101. Makrydimas G., Plachouras N., Higueras M.T., Thilaganathan B., Nicolaides K. Maternal peripheral blood lymphocyte subpopulations innormal and pathological pregnancies. // Fetal Diagn Ther., 1994, Nov-Dec, 9(6), p.371-378.

102. Mao L, Yang P, Yan Y. Changes of T lymphocyte and CD4+ T helper subsets in peripheral blood from women with unexplained recurrent spontaneous abortion. // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi, 2000, Dec;35(12).-p.722-723.

103. Maurer-Spurej E., Dyker K., Gahl. A. W., Devine V.D. A novel immunocytochemical assay for the detection of serotonin in platelets.// British Journal of Haemotology, 2002, v.l 16, p.604-611.

104. Meseguer J., Esteban M.A., Rodrigues A. Are trombocytes and platelets true phagocytes? // Microscopy Research and Technique, 2002, 57, p.491-497.

105. Niswander K.R., Evans A.T. Manual of Obstetrics.- Little, Brown and company.- 1999.- P.348-363.

106. O'Brien J.R., Heywood J.B. Effects of aggregating agents and their inhibitors on the mean platelet shape. // J Clin Pathol.- 1996, 19, p. 148-153.

107. Ozenci C.C., Korgun E.T., Demir R. Immunohistochemical detection of CD45+, CD56+, Cdl4+ cells in human deciduas during early pregnancy. // Early Pregnancy.- 2001.-Jul;5(3).- p. 164-75.

108. Park Y., Schoene N., Harris W. Mean platelet volume as an indicator of platelet activation: methodological issues. // Platelets, 2002, 13, p.301-306.

109. Peueller S., Luscher E. The effect of immune complexes on blood platelets and their relationship to complement activation. // Immunochestry.-1972.- V.9.- P. 1151-1165.

110. Rebibou J.M., Chabod J., Dupont I., Chalopin J.M., Tiberghien P. The interest of flow cytometry for the detection of pregnancy-induced alloimmunization.//Elsevier Transplantation Proceedings, 2000, vol.32, p.2742.

111. Rezaei A, Dabbagh A. T-helper (1) cytokines increase during early pregnancy in women with a history of recurrent spontaneous abortion.// Med Sci Monit.- 2002.- Aug; 8(8).-p. 607-610.

112. Sacks G.P., Redman C.W., Sargent I.L. Monocytes are primed to produce the Thl type cytokine IL-12 in normal human pregnancy: an intracellular flow cytometric analysis of peripheral blood mononuclear cells. //Clin. Exp. Immunol., 2003 Mar;131(3):393-5.

113. Sarig G., Brenner B. Coagulation, inflammation, and pregnancy complications.//The Lancet.-2004 January 10,Vol.363.-p.96-97.

114. Star J., Rosene K., Ferland J., DiLeone G., Hogan J., Kestin A. Flow cytometric analysis of platelet activation throughout normal gestation. // Obstet Gynecol.- 1997.-0ct;90(4 Pt 1).- p.562-568.

115. Shakhar K., Ben-Eliyahu S., Loewenthal R., Rosenne E., Carp H. Differences in number and activity of peripheral natural killer cells in primary versus secondary reccurent miscarriage.// Fertil Steril.- 2003Aug.-80(2).-p.368-375.

116. Souza S.S., Ferriani R.A., Santos C.M., Voltarelli J.C. Immunological evaluation of patients with recurrent abortion.// J Reprod Immunol.-2002 Jul.-56(l-2).-p.l 11-121.

117. Szpakowski A., Malinowski A., Zeman K., Wilczynski J., Kolasa D.,

118. Tykocinski M.L., Xiong N., Morrow D.M. Platelet immunoregulatory factors. // Stem Cells, 1996, vol. 14, Suppl.l, p.240-245.

119. Watanabe M, Iwatani Y, Hidaka Y, Mitsuda N, Amino N. Changes in soluble CD4 and CD8 proteins in healthy pregnant and postpartum women. // Am J Reprod Immunol, 1998 Oct, 36(4), p.220-227.

120. White G. James. Giant electron-dense chains, clusters and granules in megakaryocytes and platelets with normal dense bodies: an inherited thromobocytopenic disorder// Ptatelets, 2003.- 14.- p. 109-121.

121. White G. James, de Alarcon A. Pedro. Platelet Spherocytosis: A new bleeding disorder//Am J of Hematology.- 2002, 70, p. 158-166. .

122. Yamada H., Polgar K., Hill J.A. Cell-mediated immunity to trophoblast antigens in women with recurrent spontaneous abortion. // Am.J.Obstet.Gynecol.- 1994.- 170.- p.138-142.

123. Zanai J., Kakkar V. p-Thromboglobulin- a specific marker in vivo of platelet release reaction//Thromb. Haemost., 1980, 44, 123-129.