Комплексный анализ транскрипционного ответа, индуцированного лигандами Толл-подобных рецепторов 2,4,5, в различных органах грызунов (Mus Musculus) и приматов (Macaca Mulatta) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат наук Артемичева, Наталья Михайловна

• Артемичева, Наталья Михайловна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Артемичева, Наталья Михайловна

Содержание

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Классификация, структура и функции Толл-подобных рецепторов

1.2 Сигнальные пути, ассоциированные с Толл-подобными рецепторами

1.3 Участие То11-подобных рецепторов в формировании реакций врожденного и приобретенного иммунитета

1.4 Экспрессия Толл-подобных рецепторов различными типами клеток

1.5 Участие Толл-подобных рецепторов в формировании резистентности организма в отношении различных патогенов

1.6 Использование лигандов Толл-подобных рецепторов в медицинской практике

1.7 Заключение

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Материалы

2.1.1 Бактериальные штаммы

2.1.2 Лиганды Толл-подобных рецепторов 2,4,5

2.1.3 Лабораторные животные

2.1.4 Ферменты и другие реактивы

2.1.5 Лабораторное оборудование

2.2 Методы

2.2.1 Измерение интенсивности биолюминесценции в организме трансгенных мышей ВАЬВ/с в режиме реального времени

2.2.2 Определение интенсивности биолюминесценции в органах трансгенных

мышей

2.2.3 Выделение тотальной РНК из мочевого пузыря мыши

2.2.4 Реакция обратной транскрипции

2.2.5. Получение гистологических срезов

2.2.6. Иммуногистохимическое окрашивание гистологических срезов

2.2.7 Окраска гистологических срезов гематоксилином и эозином

2.2.8 Постановка полимеразной цепной реакции

2.2.9. Определение экспрессии белков методом иммуноблотинга

2.2.10. Измерение концентрации цитокинов

2.2.11. Культивирование S. typhimurium

2.2.12. Модель инфекции S. typhimurium на лабораторных животных

2.2.13 Культивирование E.coli

2.2.14 Модель урологической инфекции, вызванной E.coli, на лабораторных животных

2.2.15 Определение количества бактерий методом высева

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Анализ способности лигандов Толл-подобных рецепторов 2,4,5 активировать транскрипционный фактор NF-kB in vivo

3.2 Анализ влияния дозы лигандов TLR на активацию NF-kB в мочевом пузыре

3.3 Определение типа клеток в печени, в которых происходит активация NF-kB в ответ на стимуляцию Толл-подобного рецептора 5

3.4 Полногеномный анализ изменения экспрессии генов в печени после введения лигандов Толл-подобных рецепторов 2,4,5

3.5 Определение влияния стимуляции Толл-подобных рецепторов на уровень

секреции цитокинов в гомогенате печени

3.6 Определение влияния стимуляции Толл-подобных рецепторов на выживаемость мышей при инфекции & typhimurium

3.7 Определение типа клеток в мочевом пузыре мыши, в котором происходит активация МР-кВ в ответ на стимуляцию Т1Л15

3.8 Определение типа клеток в мочевом пузыре макаки резус, в котором происходит активация МЧсВ в ответ на стимуляцию ТЫ15

3.9 Полногеномный анализ изменения экспрессии генов в мочевом пузыре мыши после введения лигандов Толл-подобных рецепторов 2,4,5

3.10 Полногеномный анализ изменения экспрессии генов в мочевом пузыре макаки резус после введения лигандов Толл-подобных рецепторов 2,4,5

3.11 Проверка данных полногеномного анализа транскриптома мыши

3.12 Изменение цитокинового/хемокинового статуса в мочевом пузыре мыши

3.13 Определение влияния лиганда Толл-подобного рецептора 5 на резистентность мышей к урологической инфекции

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

дцРНК - двухцепочечная РНК

ИЛ - интерлейкин

ИФН - интерферон

КОЕ - колониеобразующая единица

оцРНК - одноцепочечная РНК

РНК — рибонуклеиновая кислота

ФНО-а - фактор некроза опухоли альфа

АР-1- активаторный белок

CD - кластер дифференцировки

GAPDH - глицеральдегидфосфатдегидрогеназа

IFN - интерферон

IgG - иммуноглобулин

IkB - ингибитор ядерного фактора «каппа-би» IKK-IkB киназа

IL-1R - рецептор к интерлейкину

IRAK - киназа, ассоциированная с рецептором ИЛ-1

IRF - интерферон регулирующий фактор

JNK - c-Jun N-концевая киназа

MAL - МуБ88-подобный адаптерный белок

MAP — митоген активируемая киназа

МСР-1 - моноцитарный хемоатрактантный белок 1 MD2 - лимфоцитарный антиген 96, МНС - главный комплекс гистосовместимости MIP-1 - макрофагальный воспалительный белок 1 МКК = МЕК - киназы MAP киназ

MyD88 - белок 88 первичного ответа миелоидной дифференциации

NF-kB - ядерный фактор «каппа-би»

РАМР - патоген-ассоциированный молекулярный паттерн

PRR - паттерн-распознающий рецептор

р38 - митоген-активируемая киназа с молекулярной массой 38кДа

RIG - белковый продукт гена, индуцибельного ретиноевой кислотой

RIP- киназа, взаимодействующая с рецептором

ТАВ1 - ТАК 1-связывающий белок

ТАК - transforming growth factor-b-activated protein kinase

TIR -домен гомологичный Toll/интерлейкин 1 рецепторам

TLR- То11-подобный рецептор

TNFa - фактор некроза опухоли альфа

TRADD - белок, ассоциированный с «доменом смерти» рецептора ФНОа TRAF - фактор, ассоциированный с рецептором к фактору некроза опухоли TIRAP - toll-interleukin 1 receptor (TIR) domain containing adaptor protein

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Комплексный анализ транскрипционного ответа, индуцированного лигандами Толл-подобных рецепторов 2,4,5, в различных органах грызунов (Mus Musculus) и приматов (Macaca Mulatta)»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования.

В течение жизни организм человека сталкивается с огромным количеством микроорганизмов, однако лишь некоторые из них вызывают заболевания. Первой линией защиты организма от патогенных агентов является врожденная иммунная система. Рецепторы врожденной иммунной системы, в отличие от адаптивной, распознают не специфические антигены патогенов, а высококонсервативные структуры (молекулярные паттерны), общие для нескольких видов микроорганизмов.

Функцию обнаружения патогенов выполняют паттерн-распознающие рецепторы (pattern-recognition receptor, PRR). Одними из ключевых PRR являются Толл-подобные рецепторы [R.Medzhitov, CJ Janeway, 1997], которые способны распознавать широкий спектр различных структур бактерий, вирусов и грибов (компоненты клеточной стенки, жгутика, бактериальную и вирусную ДНК и т.д.).

Основными рецепторами, которые распознают структуры бактериальной природы, являются Толл-подобные рецепторы 2,4,5. На нокаутных животных было продемонстрировано важное значение TLR2 и TLR4 в формировании иммунного ответа против многих бактерий (S. pneumoniae, В. subtilis, L. monocytogenes, Ch. trachomatis и др). На сегодняшний день получено множество данных, объясняющих роль этих рецепторов в защите организма от различных патогенов. Показано участие TLR в развитии целого спектра иммунных реакций, таких как активация макрофагов, стимуляция фагоцитоза, секреция антимикробных пептидов, активация и созревание дендритных клеток, активация зрелых Т-клеток, пролиферация и созревание В-клеток и других [T.Kawai, S.Akira, 2006, L.C. Parker et al, 2007].

Благодаря вышеперечисленным свойствам Толл-подобных рецепторов, лиганды этих рецепторов активно исследуются в качестве компонентов вакцин (адъюванты) и самостоятельных лекарственных препаратов. Так, на сегодня проводятся около 400 клинических испытаний профилактических и

терапевтических препаратов. Два лигапда разрешены к применению для лечения базальноклеточного рака кожи (лиганд TLR7 -имиквимод) и в составе вакцины против папилломавируса человека (лиганд TLR4 - монофосфорил липид А).

Несмотря на значительный интерес к Толл-подобным рецепторам, в научной литературе имеются ограниченные данные, характеризующие органо- и тканеспецифические реакции, вызываемые лигандами TLR. При этом, орган является цельной системой, в которой клетки различных типов находятся в тесном контакте друг с другом. Предсказать какие реакции будут развиваться в том или ином органе в ответ на введение лигандов различных TLR очень тяжело. Это зависит от биораспределения лигандов, которые отличаются по химической структуре, клеточного состава органа, и спектра экспрессии TLR различными клетками.

Изучение и сравнение органо- и тканеспецифических свойств агонистов TLR является в перспективе позволит выявить органы, которые являются специфической мишенью для того или иного лиганда (в которых происходит наиболее сильная индукция иммунных реакций), открывая новые возможности применения лигандов TLR.

Степень разработанности проблемы.

В 1989 году Ч.Дженуэй предположил, что существуют рецепторы, которые распознают определенные структуры (молекулярные паттерны), характерные для патогенов и отсутствующие в организме хозяина. Согласно его гипотезе, которая затем полностью подтвердилась, активация данных рецепторов являлась необходимым событием для активации антиген-презентирующих клеток (АПК) и индукции иммунного ответа.

В 1996 году Ж.Хоффман обнаружил, что ген Toll отвечающий у дрозофил за дорзо-вентральную поляризацию при эмбриональном развитии, также обеспечивает устойчивость данных насекомых к грибковой инфекции. В 1997 году Ч.Дженуей (вместе с Р.Меджитовым) обнаружил у млекопитающих ген гомологичный гену Toll дрозофил (сейчас он носит название TLR4). В 1998 году

Б.Бётлер и его коллеги также независимо определили, что отсутствие иммунного ответа у мышей на бактериальный липополисахарид связано с мутацией в гене (ТЬЯ4), гомологичном гену То11 дрозофилы. За эти открытия Ж.Хоффман и Б.Бетлер в 2011 году были удостоены Нобелевской премии. Огромный вклад в изучение сигнальных каскадов, инициируемых активацией Толл-подобных рецепторов, внесли С. Акира и Р. Меджитов.

На протяжении последних лет было получено огромное количество новых данных об экспрессии Толл-подобных рецепторов различными клетками млекопитающих, их участии в иммунных реакциях как врожденной, так и адаптивной иммунной системы.

Среди отечественных исследователей, можно выделить А.Н.Полтарака, Р.И.Атауллаханова, С.А.Недоспасова, Л.В.Ковальчука, Б.С.Народицкого, Г.А.Севостьянову, О.Р.Катунину, которые внесли вклад в понимание механизмов функционирования врожденной иммунной системы, роли активации ТЫ1 при различных патологических состояниях и систематизацию данных об экспрессии ТЫ1 различными типами клеток.

Однако, несмотря на то, что Толл-подобные рецепторы довольно хорошо изучены, к настоящему моменту получено сравнительно мало данных о событиях, которые происходят в различных органах при системном введении лигандов различных Толл-подобных рецепторов (не известно в каких типах клеток происходит активация данных рецепторов, как изменяются профили экспрессии генов, как влияют ТЫ1-зависимые реакции в различных органах на резистентность организма к разным инфекциям). Изучение всех этих процессов, возникающих при системном введении лигандов ТЬЯ является актуальной научной задачей.

Цели и задачи.

Целью работы являлась характеристика реакций врожденного иммунитета, их интенсивности и длительности в различных органах и тканях в ответ на

активацию Толл-подобного рецептора 5, в сравнении с Толл-подобными рецепторами 2,4.

В процессе выполнения работы предстояло решить следующие задачи.

1) Провести характеристику активации транскрипционного фактора М7-кВ в различных органах в ответ на стимуляцию Толл-подобного рецептора 5 в сравнении с Толл-подобными рецепторами 2,4.

2) Определить типы клеток, в которых происходит активация №-кВ в ответ на стимуляцию Толл-подобного рецептора 5.

3) Провести полногеномный анализ изменения экспрессии генов в органах, в которых наблюдалась наиболее высокая активация Ж-кВ.

4) Изучить влияние стимуляции Толл-подобных рецепторов 2,4,5 на экспрессию цитокинов и хемокинов в органах, в которых наблюдалась наиболее высокая активация МЧсВ.

5) Изучить влияние активации Толл-подобных рецепторов 2,4,5 на резистентность к бактериальным инфекциям

Научная новизна.

В представленной работе впервые:

- проведена характеристика активации провоспалительного транскрипционного фактора КПР-кВ в большом спектре органов в ответ на подкожное введение лигандов Толл-подобных рецепторов 2,4,5.

- показано, что подкожное введение лиганда ТЫ15 приводит к наиболее высокому уровню активации ЫР-кВ в печени и мочевом пузыре по сравнению с лигандами ТЬИ2 и ТЫ14.

- было обнаружено, что в ответ на подкожное введение лигандов различных ТЬЯ активация ЫБ-кВ происходит в разных клетках печени (в ответ на стимуляцию ТЫ15 - в гепатоцитах, а в ответ на стимуляцию Т1Л14 - в клетках Купфера).

- показано, что в мочевом пузыре активация NF-kB в ответ на подкожное введение флагеллина и ЛПС происходит в уротелии, а в ответ на липопептид в уротелии и клетках соединительной ткани.

- показано, что активация TLR5 повышает резистентность организма по отношению к урологической инфекции, вызванной E.coli.

Теоретическая и практическая значимость работы;

Работа представляет не только научный интерес, заключающийся в более глубоком понимании механизмов работы врожденной иммунной системы, но и в перспективе может иметь практическое применение, поскольку в результате работы были выявлены органы, в которых индуцируется наиболее мощный иммунный ответ при введении лигандов различных TLR. Также, было показано, что введение агониста TLR5 повышает резистентность организма к S. typhimurium и урологической инфекции, вызванной E.coli. Полученные данные могут быть использованы при создании адъювантов и средств немедленной защиты от патогенных микроорганизмов.

Методология и методы исследования;

В диссертации использованы современные иммунологические (мультиплексный иммуноферментный анализ на магнитных частицах, иммуногистохимический анализ, иммуноблотинг, иммуноферментный анализ), молекулярно-генетические (ОТ-ПЦР), гистологические (получение и окрашивание срезов печени и мочевого пузыря), биохимические (исследование активности люциферазы) и микробиологические (работа с культурами S. typhimurium и E.coli) методы.

Положения, выносимые на защиту.

1) При подкожном введении лигандов Толл-подобных рецепторов 2,4,5 иммунные реакции в различных органах индуцируются не одинаково. При анализе активации провоспалительного фактора NF-kB в ответ на введение лигандов TLR2,4,5 было обнаружено, что наиболее сильная активация происходит в печени и мочевом пузыре в ответ на флагеллин (лиганд TLR5).

2) Как в печени, так и в мочевом пузыре лиганды Толл-подобных рецепторов 2, 4 и 5 приводят к активации NF-kB в различных клетках в составе органа.

3) Подкожное введение лигандов TLR2,4,5 приводит к различным изменениям в профиле экспрессируемых генов. В печени мыши увеличивается экспрессия более 8000 генов, из них от 3872 до 4620 являются уникальными для каждого лиганда; в мочевом пузыре мыши увеличивается экспрессия более 5000 генов, при этом 4043 и 4194 генов являются уникальными для флагеллина и ЛПС, соответственно.

4) Флагеллин приводит к увеличению резистентности мышей к инфекциям S. typhimurium и уропатогенной E.coli

Степень достоверности и апробация результатов.

Для решения поставленных задач в работе использовались современные инструментальные методы. Обсуждение результатов проведено с учетом современных данных медицинской и биологической науки. Научные положения и выводы, изложенные в диссертации обоснованы и подтверждены фактическим материалом.

Результаты работы доложены на четвертой Международной школе молодых ученых по молекулярной генетике «Геномика и биология клетки» (Звенигород, 2010).

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Классификация, структура и функции Толл-подобных рецепторов

Паттерн-распознающие рецепторы (англ. pattern-recognition receptors, PRRs) являются важным звеном врожденной иммунной системы. Они распознают структурно-консервативные фрагменты патогенов (англ. pathogen-associated molecular patterns, РАМР) и запускают целый каскад иммунных реакций. Одними из ключевых трансмембранных паттерн-распознающих рецепторов являются

Толл-подобные рецепторы (англ. Toll-like receptors, TLRs) (Iwasaki A., Medzhitov R. 2004; Лебедева О., Калуцкий П. и др,2010).

Все известные Толл-подобные рецепторы представляют собой одноцепочечные трансмембранные полипептиды с похожим строением (рисунок 1) (Armant М., Fenton М., 2002)

Лейцин богатый повтор

Мембрана

TIR-домен

TLR1 TLR2 TLR3 TLR4 TLR5 TLR6 TLR7 TLR8 TLR9 TLR10

Рисунок 1 - Доменная организация Толл-подобных рецепторов.

Внеклеточная N-концевая область аминокислотной последовательности содержит от 19 до 25 тандемных повторяющихся участков с повышенным содержанием лейцина (leucine rich repeat, LRR), различающихся по длине у разных Толл-подобных рецепторов и ответственных за связывание лигандов (Shin Н., Jung Y., 2013). За ними следует участок богатый цистеином, переходящий в трансмембранную зону. Внутриклеточная часть представлена TIR-доменом, названным так в следствие одинакового строения этих плазматических доменов у Толл-подобных рецепторов и у рецепторов цитокинов семейства интерлейкина-1 (Botos I., Segal D., 2011).

Внутриклеточный TIR-домен представляет собой С-концевой консервативный участок, который состоит примерно из 200 аминокислотных остатков (Akira S., Takeda К., 2004). В TIR-домене всех рецепторов есть три

участка, критичных для взаимодействия с адаптерными молекулами участка, где степень гомологии более 20%. Всего существует 5 адаптерных белков, способных связываться с TIR-доменом: MyD88 (англ. Myeloid differentiation primary response gene (88)), MAL (англ. MyD88-adapter-like), TRIF (англ. TIR domain-containing adaptor molecule 1), TRAM (англ. Toll-like receptor adaptor protein) и S ARM (англ. Sterile alpha and HEAT/Armadillo motif) (Lin Z., Lu J., 2012). Различные рецепторы имеют свой набор этих адаптерных белков необходимых для передачи сигнала. Только рецептор TLR4 способен связывать все 5 белков (O'Neill L., Bowie А, 2007.).

Сравнение аминокислотных последовательностей Толл-подобных рецепторов человека показало, что все рецепторы этого семейства можно разделить на 5 подсемейств: TLR3, TLR4, TLR5, TLR2 и TLR9 (рисунок 2). TLR2 подсемейство состоит из TLR1, TLR2, TLR6 и TLR10; при этом TLR1 и TLR6 являются близкими по структуре белками и демонстрируют 69,3% гомологии, однако TIR-домен обоих рецепторов высоко консервативен, с более чем 90 % гомологии. TLR9 подсемейство состоит из TLR7 и TLR8 (Takeda К., Akira S., 2007).

Толл-подобные рецепторы распознают широкий спектр молекулярных структур различной природы: белки, жирные кислоты, липиды, липопептиды, липосахариды, и др. (Uematsu S., Akira S 2008). На сегодняшний день у человека идентифицировано 10 типов функционально-активных Толл-подобных рецепторов, каждый из которых способен распознавать свой спектр лигандов (Симбирцев A.C., 2005). Однако, в распознавании некоторых лигандов могут участвовать несколько типов рецепторов (TLR1, TLR2, TLR6), которые образуют гетеродимерные комплексы со смешанной лиганд-распознающей поверхностью (таблица 1) (Jin M., Kim S., 2007; Kang J., Nan X., 2009).

Рисунок 2 - Филогенетическое дерево Толл-подобных рецепторов человека (Takeda К., Akira S., 2007).

Таблица 1 - Лиганды Толл-подобных рецепторов.

Рецептор Лиганд Источник лиганда

TLR1, TLR2, Триациллипопептид (Bauer S., Различные бактерии

TLR6 Hartmann G., 2008)

Растворимые факторы (Wyllie D., Neisseria meningitidis

Kiss-Toth E.,2000)

Белок теплового шока 70 (Asea А., Человек

Rehli М., 2002; Vabulas R.M., Ahmad-

Nejad P., 2002)

Липопротеин/липопептиды

(Hirschfeld M., Kirschning С., 1999; Грамположительные

Lien E., Sellati Т.J., 1999; Shimizu Т., бактерии

Kida Y, 2005; Hashimoto M.,

Tawaratsumida K. 2006; Hasebe A., Mu

H.2007)

HCV core and nonstructural 3 protein Вирус гепатита С

(Dolganiuca A., Oaka S., 2004)

Зимозан (Dillon S., Agrawal S., 2006) Грибы

Липотейхоевая кислота (Schroder Грамотрицательные

N.W., Morath S„ 2003) бактерии

Диациллипопептиды (Spohna R., Mycoplasma spp.

Buwitt-Beckmannd U., 2004)

Липоарабидоманнан (Means Т., Jones Mycobacterium spp.

В., 2001, Quesniaux V.J., Nicolle D.,

2004; Wang Т., Lafuse W., 2000)

гликоинозитолфосфолипиды (Bafica Trypanosoma Cruzi

A., Costa Santiago H.., 2006; Gazzinelli

R.T., Denkers E.Y, 2006)

фенол-растворимый модулин (Hajjar Staphylococcus epidermis

A., O'Mahony D., 2001)

Гликолипиды (Gazzinelli R.T., and Treponema maltophilum

Denkers E.Y, 2000)

Порины (Ouaissi A., Guilvard E., 2002) Neisseria

TLR3 Двухцепочечная РНК (Alexopoulou L., Различные вирусы, человек

Holt A., 2001)

Малая ядерная РНК (E. Vercammen, J. Человек

Staal, 2008)

Poly I:C (Zhou Y., Guo M., 2013) Синтетическое соединение

TLR4 Липополисахарид Грамотрицательные

(Chow J., Young D. ,1999) бактерии

Белок оболочки Вирус рака молочной

(Rassa J.C., Meyers J., 2002) железы мыши

Таксол (Kawasaki K., Akashi S., 2001) Растения

Пневмолизин (Malley R., Henneke P., Streptococcus pneumoniae

2003)

липоолигосахарид (Zughaier S., Tzeng Neisseria meningitidis

Y„ 2004)

Белок теплового шока 60 (Ohashi К., Chlamydia pneumoniae

Burkart V, 2000)

гликолипиды (Schroder N., Opitz В., Treponema brennaborense

2000)

протеин F (Kurt-Jones E.A., Popova L., респираторно-

2000) синцитиального вируса

TLR5 Флагеллин (Andersen-Nissen Е., Smith К, 2005) Бактерии

TLR7 Одноцепочечная РНК (Diebold S.S., Kaisho Т, 2004; Heil F., Hemmi H,2004) Имидазоквинолин (Kauffman Е., Liu Н., 2012) Бромопиридин (S. Akira, Н. Hemmi, 2003) Аналоги гуанозина (Hemmi Н., Kaisho Т., 2002; Lee J., Chuang Т.Н, 2003) R837 (F. Hassan, S. Islam, 2009) R-848 (Nian H., Geng W„ 2012) Вирусы Синтетическое соединение Синтетическое соединение Синтетическое соединение Синтетическое соединение Синтетическое соединение

TLR8 Одноцепочечная РНК (Heil F., Hemmi H,2004) Имидазоквинолин (Kauffman E., Liu H., 2012) R-848 (Jurk M., Heil F., 2008) Вирусы Синтетическое соединение Синтетическое соединение

TLR9 CpG-содержащая ДНК (Latz E., Schoenemeyer A., 2004) Бактерии и вирусы

TLR10 Не определен (С. Chaffois, С. Gaillard, 2005) Не определен

Из всех Толл-подобных рецепторов наиболее широким спектром специфичности обладает TLR2. Лиганды этого рецептора включают липопротеины от таких патогенов как грамотрицательные бактерии, микоплазма, спирохеты; пептидогликан и липотейховые кислоты от грамположительных бактерий; липоарабидоманнан от микобактерий; гликоинозитолфосфолипиды от Trypanosoma Cruzi; фенол-растворимый модулин от Staphylococcus epidermis; зимозан грибов, гликолипиды Treponema maltophilum и порины, которые находятся на внешней мембране Neisseria.

Для распознавания некоторых лигандов TLR2 необходимо образование гетеродимеров с TLR1 или TLR6 (Ozinsky A., Underbill D, 2000; Takeuchi О., Kawai Т., 2001; Takeuchi О., Sato S, 2002; Morr M., Takeuchi О. 2002). Так, комплекс TLR2/TLR1 распознает бактериальные триацилированные липопротеины (Jin М, Kim S, 2009), а комплекс TLR2/TLR6 — диацилированные липопротеины (Kang J, Nan X, 2007). Взаимодействия между мономерами различных Толл-подобных рецепторов расширяют спектр их лигандов. Так, в гетеродимерном состоянии они приобретают возможность взаимодействовать со структурами, которые не могут быть распознаны гомодимерами этих рецепторов. Гетеродимер TLR2/TLR1 распознает бактериальные триацильные липопептиды грамотрицательных бактерий. При этом TLR2 взаимодействует с двумя ацильными цепями, a TLR1— с одной ацильной цепью липопептида. Гетеродимер TLR2/TLR6 взаимодействует с диацильными, но не с триацильными липопептидами грамположительных бактерий. Лигандами гетеродимера TLR2/TLR6 также являются липотейхоевая кислота грамположительных бактерий. TLR2 может формировать димеры не только с Толл-подобными рецепторами, но и с другими молекулами, такими как CD36, CD 14 и дектин-1 (Hoebe, К., P. Georgel,, 2005; Janot L, Secher Т. ,2008; Ferwerda G, Meyer-Wentrup F, 2008).

Толл-подобный рецептор 3 распознает вирусную дцРНК, которая синтезируется во время инфекции, как промежуточное звено цикла репликации вируса, или является частью вирусного генома (Alexopoulou L, Holt А., 2001) Распознавание TLR3 собственного лиганда происходит вовремя эндоцитоза, или во время фагоцитоза инфицированной вирусом клетки фагоцитирующей клеткой. Также, показано, что TLR3 взаимодействует с дцРНК, высвобождаемой при гибели собственных клеток (Karikó К, Ni Н, 2004), и с микроРНК (Chen X, Liang Н.; 2013). Синтетическим лигандом TLR3 является аналог дцРНК — поли (Р.С) (Alexopoulou L, Holt А., 2001). Было показано, что полимер с высокой

молекулярной массой (более 5 kb) лучше активирует рецептор, чем полимер с меньшей молекулярной массой (l,5kb) (Zhou Y, Guo M, 2013).

Эктодомен TLR3 состоит из 23 лейцин богатых повторов (leucine rich repeat, LRR). Основным регионом, принимающим участие в распознавании дцРНК, является 20 LRR. В силу своей симметричной природы дцРНК обеспечивает связывание двух молекул TLR3, повёрнутых навстречу друг другу. Такая димеризация является сигналом, активирующим каскад последующих внутриклеточных процессов этого сигнального пути (Liu L, Botos I, 2008).

TLR4 является самым первым представителем семейства Толл-подобных рецепторов, открытым у млекопитающих. Он участвует в распознавании широкого спектра лигандов: пневмолизина пневмококка, липоолигосахарида менингокока, шаперона 60 Chlamydia pneumoniae, гликолипидов Treponema brennaborense, протеина F респираторно-синцитиального вируса, таксола растений и др. Однако, наиболее важной функцией TLR4 считается распознавание липополисахарида (ЛПС) - основного компонента внешней мембраны грамотрицательных бактерий, который является мощным экзогенньш провоспалительным фактором. Для распознавания ЛПС необходимо участие адаптерных молекул (LBP, CD 14, MD-2). Первоначально, во внеклеточном пространстве ЛПС связывается с растворимым липополисахарид-связывающим белком (LBP), который функционирует как опсонин для гликозилфосфатидилинозитол-связанного белка CD 14. Белок CD 14 может существовать в двух формах — растворимой и мембраносвязанной. Взаимодействие комплекса ЛПС/LBP с растворимой формой CD 14 предопределяет его связывание и передачу сывороточным липопротеинам высокой плотности (ЛПВП). Показано, что связывание ЛПС с ЛПВП нейтрализует его иммуностимулирующую активность как in vitro, так и in vivo. Взаимодействие комплекса ЛПС/LBP с мембраносвязанной формой CD 14 катализирует связывание ЛПС с мембрано-ассоциированным протеином MD-2. Далее комплекс ЛПС/МО-2 взаимодействует с TLR4, вызывая его димеризацию и

активацию последующего сигнального каскада (Fujihara М, Muroi М, 2003; Miyake К.2003).

TLR5 распознает основной белок бактериальных жгутиков - флагеллин, молекула которого в зависимости от происхождения состоит из 259-1250 аминокислотных остатков. Согласно современным данным, эктодомен TLR5 на участке связывающего сайта (386-407 аминокислотных остатков LRR14) распознает флагеллиновый мотив, который образован последовательностью, гомологичной сегменту 89-96 аминокислотных остатков флагеллина S. typhimurium (Andersen-Nissen Е., Smith К., 2005, Yoon S., Kurnasov О., 2012).

TLR7 и TLR8 являются филогенетическими гомологами и относятся к подсемейству TLR9 (Takeda К., Akira S., 2007). Оба рецептора локализуются в эндосомах. Hemmi и соавторы показали, что TLR7 человека и мыши способны распознавать синтетические лиганды - производные имидазоквинолинов: Imiquimod (R837, Invitrogen) и Resiquimod (R848, Invitrogen) (Hemmi H, Kaisho T, 2002). Естественным лигандом TLR7 является одноцепочечная вирусная РНК. TLR8 человека также способен распознавать одноцепочечную вирусную РНК и R848, но не R837, тогда как TLR8 мыши не распознает ни один из данных лиганов. Долгое время считалось что данный рецептор у мыши функционально неактивен. Однако, Görden и соавторы показали, что TLR8 мыши активируется при совместной стимуляции производными имидазоквинолинов и олигодеоксинуклеотидами (Görden К., Gorski К., 2005).

TLR9 также локализован в эндосоме и активируется характерными для бактерий, грибов и вирусов неметилированными последовательностями CpG ДНК, которые не встречаются у млекопитающих. Интернализация CpG-ДНК вызывает транслокацию TLR9 от эндоплазматического ретикулума непосредственно к фаголизосомам и последующую активацию рецептора. Локализация TLR9 на внутренней поверхности мембраны эндолизосомы предотвращает его взаимодействие с собственной ДНК. В эксперименте было продемонстрировано, что TLR9 взаимодействует с CpG-ДНК в кислой среде,

созданной в экзолизосоме (Latz Е, Schoenemeyer А, 2004). Предпосылкой для эффективного распознавания лиганда и активации рецептора является предварительное протеолитическое катепсин-обусловленное расщепление эктодомена TLR9 (Ewald S., Lee В., 2008). В группу протеаз, которые участвуют в расщеплении эктодомена TLR9, входят катепсин-В, -S, -L, -Н, -К и аспарагиновая эндопептидаза (Ewald S., Engel А., 2011). TLR9 существует как предсформированный гомодимер. Его связывание с лигандом приводит к изменению конформационного состояния молекулы рецептора, которое обеспечивает сближение цитоплазматических TIR-доменов разных мономеров и, как следствие, активацию внутриклеточных сигнальных путей.

Лиганд TLR10 в настоящее время не определен.

1.2 Сигнальные пути, ассоциированные с Толл-подобными рецепторами

После распознавания Толл-подобными рецепторами собственных лигандов, рецепторы димеризуются. Далее происходит гетерофильное взаимодействие цитоплазматических TIR доменов рецепторов с TIR доменами адаптерных молекул, таких как MyD88, MAL, TRIF, TRAM (недавно была открыта пятая адаптерная молекула SARM, однако ее функции пока недостаточно хорошо изучены) (Akira S., Takeda К., 2004; Belinda L., Wei W., 2008; Тухватулин А.И., Логунов Д.Ю.2010).

При этом TLR1/2 и TLR2/6 используют MyD88 и Mal; TLR3 - TRIF. TLR5,7,8,9 используют только MyD88. И только TLR4 способен связывать все адаптерные молекулы (рисунок 3).

TLR1/2,2/6 TLR3 TLR4 TLR5,7,8,9

Толл-

подобные _ рецепторы

Адаптерные молекулы

Рисунок 3. Адаптерные молекулы Толл-подобных рецепторов (Kawai Т., Akira S., 2006.).

Условно сигнальные пути Толл-подобных рецепторов разделяют на Му088-зависимые (общие для всех ТЬИ.) и Му088-независимые (специфичные для некоторых представителей ТЬИ.) (Ахматова Н., Киселевский М., 2008).

Му088-зависимый сигнальный каскад

Му088-независимый сигнальный каскад TLR 4 H TLR 3

ШЁЪ Р50АМРА5 ''"Ml SB

Рисунок 4. Схема сигнальных путей Толл-подобных рецепторов (Patel H., Shaw S., 2012).

Му088-зависимый сигнальный путь.

Молекула MyD88 используется большинством TLR для передачи активационного сигнала. Она содержит TIR домен в С-концевой части и домен смерти (Death domain) в N-концевой части. После взаимодействия с TLR, MyD88

рекрутирует представителей семейства IL-1R ассоциированных киназ (IRAK) посредством взаимодействия доменов смерти обоих молекул.

К семейству IRAK относятся четыре киназы: IRAKI, IRAK2, IRAK4, IRAK-M. IRAKI и IRAK4 обладают серин/треонин киназной активностью, тогда как IRAK2 и IRAK-M ее не имеют. В литературе описано несколько экспериментов, которые позволяют предполагать, что молекулы IRAK2 и IRAK-М выполняют функции негативных регуляторов TLR-опосредованного сигналирования (Kobayashi К., Hernandez L., 2002).

На следующем этапе сигнального каскада происходит ассоциация с сигнальной молекулой фактора 6, ассоциированного с фактором некроза опухоли (tumor necrosis factor receptor-associated factor 6, TRAF6). TRAF6 состоит из двух С-концевых доменов TRAF (TRAF-N и TRAF-C), и N-концевых доменов типа «цинковые пальцы» и RING (Really Interesting New Gene) домен типа «цинковые пальцы» (Chen Z., 2005). Активация TRAF6 происходит за счет связывания IRAKI с доменом TRAF.

Далее происходит образование комплекса IRAKI /TRAF6 с TGF-ß- 1 активированной киназой 1 (ТАК1) и ТАК1-связывающими белками, ТАВ1 и ТАВ2 (Yamaguchi К., Shirakabe К., 1995; Shibuya H., Yamaguchi К., 1996; Takaesu G., Kishida S., 2000; Takaesu G., Surabhi R., 2003). Далее IRAKI отщепляется и в последующем убиквитинируется и деградирует в протеосоме, а TRAF6/TAK1/TAB1/TAB2 комплекс перемещается в цитоплазму, где связывается с другими белками, такими как Е2-лигазы Übe 13 и UevlA. Übe 13 и UevlA комплекс катализирует синтез полиубиквитиновой цепи в позиции Lys 63 молекулы TRAF6 и тем самым индуцирует TRAF-6-опосредованную активацию ТАК1 (Deng LI, Wang С, 2000).

TAKl взаимодействует с IKK комплексом, что приводит к активации транскрипционного факторы NF-kB (Wang С., Deng L., 2001). Кроме того, TAKl фосфорилирует две киназы семейства MAP киназ - МККЗ и МКК6, которые в свою очередь активируют JNK и р38. ERK также может быть активирована в ходе

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Артемичева, Наталья Михайловна, 2015 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Ахматова П. Врожденный иммунитет: противоопухолевый и противоинфекционный/ Н. К. Ахматова, М. В. Киселевский//Практическая медицина, М.-2008.

2. Дьяченко А. Факторы вирулентности сальмонелл и патогенез сальмонеллезной инфекции/ А.Г. Дьяченко, A.A. Демьянова, И.М. Балута, И.Ю. Кучма, В.В. Леизин, А.Ю. Волянский// Микробиология и биотехнология — 2010. -4-С. 26-43

3. Жабченко И. Уропатогенные штаммы Esherichia coli: особенности функционирования, факторы вирулентности, значение в клинической практике. /И. Жабченко// Таврический медико-биологический вестник - 2013 - 16(2) - С.62.

4. Ивашкин В. Основные понятия и положения фундаментальной иммунологии/ В.Т. Ивашкин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии-2008. - 4, С.4-13

5. Лабинская А. Руководство по медицинской микробиологии./ A.C. Лабинская, H.H. Костюкова, С.М. Иванова// БИНОМ, М - 2010.

6. Лебедева О. Толл-подобные рецепторы женского репродуктивного тракта и их лиганды/ О. Лебедева, П. Калуцкий, С. Пахомов// Научные ведомости БелГУ - 2010. 12, № 22. - С. 31-35.

7. Симбирцев A.C. Толл-белки: специфические рецепторы неспецифического иммунитета/ А.С.Симбирцев// Иммунология - 2005. - Vol. 26, №6-С. 368-376.

8. Тухватулин А.И., Логунов Д.Ю., Щербинин Д.Н., Шмаров М.М., Народицкий Б.С., Гудков A.B., Гинцбург А.Л.ТоН-подобные рецепторы и их адаптерные молекулы.//Биохимия - 2010. - 75(9) - С.1098-114.

9. Agrawal S. TLR1/2, TLR7, and TLR9 signals directly activate human peripheral blood naive and memory В cell subsets to produce cytokines, chemokines, and hematopoietic growth factors. / S Agrawal, S.Gupta // J Clin Immunol - 2010 - 31 -C. 89-98.

10. Akira S. Mammalian toll-like receptors./ S.Akira //Curr Opin Immunol, -2003- 15C.5-11.

11. Akira S. Recognition of pathogen-associated molecular patterns by TLR family/ S.Akira, H. Hemmi //Immunol. Lett. -2003. - 85(2) - C.85-95.

12. Akira S. Toll-like receptor signaling// S.Akira, K. Takeda.// Nature immunology - 2004, Vol. 4, №7 - P. 499-511

13. Alexopoulou L. Recognition of double-stranded RNA and activation of NF-kappaB by Toll-like receptor 3./ L Alexopoulou, A Holt, R Medzhitov, R.Flavell // Nature - 2001 - 18 - 413 - C.732-738.

14. Andersen-Nissen E. Cutting edge: Tlr5-/- mice are more susceptible to Escherichia coli urinary tract infection./ E.Andersen-Nissen, T. Hawn, K. Smith, A. Nachman, A. Lampano, S. Uematsu, S. Akira, A. Aderem // J Immunol. - 2007 - 178(8) -4717-4720.

15. Andersen-Nissen E. Evasion of Toll-like receptor 5 by flagellated bacteria/ E.Andersen-Nissen, K.Smith, K.Strobe, S.Barrett, B.Cookson, S.Logan, A.Aderem//Proc. Natl. Acad. Sei. USA, - 2005. - 102(26) - C.9247-52.

16. Andoniou C. Interaction between conventional dendritic cells and natural killer cells is integral to the activation of effective antiviral immunity./ C.Andoniou, S. van Dommelen, V. Voigt, D. Andrews, G. Brizard, C. Asselin-Paturel, T. Delale, K. Stacey, G. Trinchieri, M. Degli-Esposti //Nat Immunol. - 2005 - 6(10) - 1011-1019.

17. Andrews D. Cross-talk between dendritic cells and natural killer cells in viral infection./ D. Andrews, C. Andoniou, A. Scalzo, S. van Dommelen, M. Wallace, M. Smyth, M. Degli-Esposti // Mol Immunol. - 2005 - 42(4) - C.547-555.

18. Armant M. Toll-like receptors: a family of pattern-recognition receptors in mammals/ M. Armant, M. Fenton// Genome Biol. - 2002. - Vol.3, №8.

19. Asea A. Novel signal transduction pathway utilized by extracellular HSP70: role of toll-like receptor (TLR) 2 and TLR4/ A. Asea, M. Rehli, E. Kabingu, J. Boch, O. Bare, P. Auron, M. Stevenson, S. Calderwood//J. Biol. Chem. - 2002. -277(17)-C. 15028-34

20. Ayari C. Toll-like receptors in normal and malignant human bladders./ C. Ayari, A. Bergeron, H. LaRue, C. Menard, Y. Fradet // J Urol. - 2011 - 185(5) -

C.1915-1921.

21. Babu S Cutting edge: diminished T cell TLR expression and function modulates the immune response in human filarial infection./ S. Babu, C. Blauvelt, V. Kumaraswami, T. Nutman // J Immunol - 2006 - 176 - C.3885-3889.

22. Bafica A. Cutting edge: TLR9 and TLR2 signaling together account for MyD88-dependent control of parasitemia in Trypanosoma cruzi infection/ A. Bafica, H. Costa Santiago, R. Goldzmind, C. Ropert, R. Gazzinelli, T. Sher //J. Immunol. - 2006. -177(6)-C.3515-9.

23. Bayram M. TLR-4 polymorphisms and leukocyte TLR-4 expression in febrile UTI and renal scarring. M.Bayram, A.Soylu, Halil Ate§, Sefa Kizildag, Salih Kavuk<?u. Pediatric Nephrology-2013 - 28(9) - 1827-1835.

24. Belinda L. SARM: a novel Toll-like receptor adaptor, is functionally conserved from arthropod to human./ L. Belinda, W. Wei, B. Hanh, L. Lei, H. Bow, D. Ling // Mol Immunol. 2008 - 45(6) - C.1732-42.

25. Bieback K. Hemagglutinin protein of wild-type measles virus activates tolllike receptor 2 signaling/ K. Bieback, E. Lien, I. Klagge, E. Avota, J. Schneider-Schaulies, W. Duprex, H. Wagner, C. Kirschning, V. Ter Meulen, S. Schneider-Schaulies // J Virol - 2002 - 76 - C.8729-8736.

26. Botos I. The Structural Biology of Toll-Like Receptors/1. Botos, D. Segal,

D. Davies// Structure - 2011. - Vol.19, №4. - P. 447-459.

27. Bourke E. The toll-like receptor repertoire of human B lymphocytes: inducible and selective expression of TLR9 and TLR10 in normal and transformed cells./ E. Bourke, D. Bosisio, J. Golay, N. Polentarutti, A. Mantovani // Blood - 2003 -102-C.956-963.

28. Boyd J. Toll-like receptor stimulation in cardiomyoctes decreases contractility and initiates an NF-kappaB dependent inflammatory response./ J. Boyd, S.

Mathur, Y. Wang, R. Bateman, K.Walley // Cardiovasc Res. - 2006 - 72(3) - C.384-393.

29. Bulut Y. Chlamydial heat shock protein 60 induces acute pulmonary inflammation in mice via the Toll-like receptor 4- and MyD88-dependent pathway/ Y. Bulut, K. Shimada, M. Wong, S. Chen, P. Gray, R. Alsabeh, T. Doherty, T. Crother, M. Arditi.// Infect Immun. - 2009. - Vol.77, №7. - P.2683-90.

30. Capolunghi F. CpG drives human transitional B cells to terminal differentiation and production of natural antibodies./ F. Capolunghi, S. Cascioli, E. Giorda // J Immunol - 2008- 180 C.800-808.

31. Caron G. Direct stimulation of human T cells via TLR5 and TLR7/8: flagellin and R-848 up-regulate proliferation and IFN-gamma production by memory CD4+ T cells./ G. Caron, D. Duluc, I. Fremaux, P. Jeannin, C. David, H. Gascan, Y. Delneste // J Immunol. - 2005 - 175(3) - C. 1551-1557.

32. Cella M. Inflammatory stimuli induce accumulation of MHC class II complexes on dendritic cells./ M. Cella, A. Engering, V. Pinet, J. Pieters, A. Lanzavecchia// Nature - 1997 - 388 - C.782-7.

33. Cervantes J. Human TLR8 is activated upon recognition of Borrelia burgdorferi RNA in the phagosome of human monocytes/ J. Cervantes, C. La Vake, B. Weinerman, S. Luu, C. O'Connell, P. Verardi, J. Salazar// Journal of Leukocyte Biology.-2013.-Vol. 94.-P. 1-11

34. Chalifour A. Direct bacterial protein PAMP recognition by human NK cells involves TLRs and triggers alpha-defensin production./ A. Chalifour, P. Jeannin, J. Gauchat, A. Blaecke, M. Malissard, T. N'Guyen // Blood - 2004 - 104 - C. 1778-1783.

35. Chang W. Influenza virus infection causes global respiratory tract B cell response modulation via innate immune signals./ W. Chang, E. Coro, F. Rau, Y. Xiao, D. Erie, N. Baumgarth // J Immunol 2007 - 178 - C. 1457-1467.

36. Chen X. MicroRNAs are ligands of Toll-like receptors./ X. Chen, H. Liang, J. Zhang, K. Zen, C. Zhang II RNA - 2013 -19(6) - C.737-739.

37. Chen Z. Ubiquitin signalling in the NF-kappaB pathway. / Z Chen. //Nat. Cell Biol. - 2005 - 7(8) - C.758-65.

38. Chow J. Toll-like receptor-4 mediates lipopolysaccharide-induced signal transduction/ J.Chow, D.Young, D. Golenbock, W. Christ, F.Gusovsky //J. Biol. Chem. - 1999 - 274(16) - C. 10689-92

39. Clement C. Stimulation of lung innate immunity protects against lethal pneumococcal pneumonia in mice./ C. Clement, S. Evans, C. Evans, D. Hawke, R. Kobayashi //Am. J. Respir. Crit. CareMed. -2008 - 177 - C.1322-1330.

40. Collart M. Regulation of tumor necrosis factor alpha transcription in macrophages: involvement of four kappa B-like motifs and of constitutive and inducible forms of NF-kappa B./ M. Collart, P. Baeuerle, P.Vassalli // Mol Cell Biol. - 1990 -10(4)-C.1498-1506.

41. Colonna M. TLR pathways and IFN-regulatory factors: to each its own./ M. Colonna // Eur J Immunol. - 2007 - 37(2) - 306-309.

42. Cooper M Human natural killer cells: a unique innate immunoregulatory role for the CD56 (bright) subset./ M. Cooper, T. Fehniger, S. Turner // Blood - 2001 -97(10) - C.3146-3151.

43. Cottalorda A. TLR2 engagement on CD8 T cells lowers the threshold for optimal antigen-induced T cell activation./ A. Cottalorda, C. Verschelde, A. Margais// European J Immunol - 2006 - 36(7) - C.1684-1693.

44. Datta S. A subset of Toll-like receptor ligands induces cross-presentation by bone marrow-derived dendritic cells./ S. Datta, V. Redecke, K. Prilliman, K. Takabayashi, M. Corr, T. Tallant// J Immunol - 2003 - 170 - C.4102-4110.

45. Deng J. CpG oligodeoxynucleotides stimulate protective innate immunity against pulmonary Klebsiella infection./ J. Deng, T. Moore, M Newstead, X Zeng, A Krieg, T. Standiford // J. Immunol. - 2004 - 173 - C.5148-5155

46. Deng L. Activation of the IkB kinase complex by TRAF6 requires a dimeric ubiquitin-conjugating enzyme complex and a unique polyubiquitin chain./ L.

Deng, C. Wang, E. Spencer, L. Yang, A. Braun, J. You, C. Slaughter, C. Pickart, Z. Chen // Cell - 2000 - 103 - C.351-361.

47. Deshmane S. Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1): an overview./ S. Deshmane, S. Kremlev, S. Amini, B. Sawaya // J Interferon Cytokine Res. - 2009 Jun;- 29(6)-C.313-326.

48. Diamond G. Inducible expression of an antibiotic peptide gene in lipopolysaccharide-challenged tracheal epithelial cells./ G. Diamond, J. Russell, C. Bevins.// Proc. Natl. Acad. Sci. - 1996 - C.935156-5160.

49. Diebold S. Innate antiviral responses by means of TLR7-mediated recognition of single-stranded RNA/ S. Diebold, T. Kaisho, H. Hemmi, S. Akira, E. Reis, C. Sousa.//Science - 2004. - 303(5663) - C. 1529-31

50. Dillon S. Yeast zymosan, a stimulus for TLR2 and dectin-1, induces regulatory antigen-presenting cells and immunological tolerance/ S. Dillon, S. Agrawal, K. Banerjee, J. Letterio, T. Denning., K. Oswald-Richter, D. Kasprowicz, K. Kellar, J. Pare, T. van Dyke, S. Ziegler, D. Unutmaz, B. Pulendran// J Clin Invest. - 2006. - Vol. 116, №4. -P.916-928. <

51. Dolganiuca A. Hepatitis C core and nonstructural 3 proteins trigger toll-like receptor 2-mediated pathways and inflammatory activation/ A. Dolganiuca, S. Oaka, K. Kodysa, D. Golenbocka, R. Finberga, E. Kurt-Jonesa, G. Szabo// Gastroenterology -2—4. - Vol. 127, №5.-P. 1513-1524.

52. Dorner M. Plasma cell toll-like receptor (TLR) expression differs from that of B cells, and plasma cell TLR triggering enhances immunoglobulin production./ M. Dorner, S. Brandt, M. Tinguely // Immunology - 2009 - 128 - C.573-579.

53. Empey K. Exogenous heat-killed Escherichia coli improves alveolar macrophage activity and reduces Pneumocystis carinii lung burden in infant mice./ K. Empey, M. Hollifield, B. Garvy // Infect. Immun. - 2007 - 75 - C.3382-3393

54. Ewald S. Nucleic acid recognition by Toll-like receptors is coupled to stepwise processing by cathepsins and asparagine endopeptidase. /S. Ewald, A. Engel, J .Lee, M. Wang, M. Bogyo, G. Barton.// J Exp Med. - 2011 - 208(4) - C.643-651.

55. Ewald S. The ectodomain of Toll-like receptor 9 is cleaved to generate a functional receptor./ S. Ewald, B. Lee, L. Lau, K. Wickliffe, G. Shi, H. Chapman, G. Barton.// Nature. - 2008 - 456(7222) - C.658-662.

56. Ferwerda B. Functional consequences of toll-like receptor 4 polymorphisms./ B. Ferwerda, M. McCall, K.Verheijen, B. Kullberg, A. van der Ven, J. Van der Meer, M. Netea // Mol Med - 2008 - 14 -C.346-352.

57. Ferwerda G. Dectin-1 synergizes with TLR2 and TLR4 for cytokine production in human primary monocytes and macrophages./ G. Ferwerda, F.Meyer-Wentrup, B.Kullberg, M.Netea, G.Adema // Cell Microbiol. - 2008 - 10(10) - C. 20582066.

58. Feuillet V. Involvement of Toll-like receptor 5 in the recognition of flagellated bacteria./ V. Feuillet, S. Medjane, I. Mondor, O. Demaria, P. Pagni, J. Gala' n, R. Flavell, L.Alexopoulou // Proc. Natl. Acad. Sci. USA - 2006 - 103 - C. 1248712492

59. Fitzgerald K. LPS-TLR4 signaling to IRF-3/7 and NF-kappaB involves the toll adapters TRAM and TRIF./ K. Fitzgerald, D. Rowe, B. Barnes, D. Caffrey, A.Visintin, E. Latz, B. Monks, P. Pitha, D. Golenbock // J Exp Med. - 2003 - 198(7) -C. 1043-1055.

60. Fitzner N. Human Skin Endothelial Cells Can Express All 10 TLR Genes and Respond to Respective Ligands./ N. Fitzner, S. Clauberg, F. Essmann, J. Liebmann, V. Kolb-Bachofen.// Clin Vaccine Immunol. - 2008 - 15(1) - C.138-146. TLR signaling at the intestinal epithelial interface. Abreu M., Thomas L., Arnold ET, Lukasek K, Michelsen KS, Arditi M.

61. Fujihara M. Molecular mechanisms of macrophage activation and deactivation by lipopolysaccharide: roles of the receptor complex./ M. Fujihara, M. Muroi, K. Tanamoto, T. Suzuki, H. Azuma, H. Ikeda // Pharmacol Ther - 2003 — 100 — C.171-194.

62. Gao B Liver: An organ with predominant innate immunity./ B. Gao, W. Jeong, Z.Tian // Hepatology. - 2008 - 47(2) - 729-736.

63. Gatto D. The germinal center reaction./ D. Gatto, R. Brink // J Allergy Clin Immunol - 2010 - 126 - C.898- 907.

64. Gazzinelli R. Protozoan encounters with Toll-like receptor signalling pathways: implications for host parasitism/ R. Gazzinelli, E. Denkers //Nat. Rev. Immunol., - 2006. - 6(12) - C.895-906

65. Goodyear A. Protection from pneumonic infection with Burkholderia species by inhalational immunotherapy./ A. Goodyear, L. Kellihan, H. Bielefeldt-Ohmann, R. Troyer, K. Propst, S. Dow // Infect. Immun. - 2009 - 77 - C. 1579-1588.

66. Gorden K. Synthetic TLR agonists reveal functional differences between human TLR7 and TLR8./ K. Gorden, K Gorski, S. Gibson, R. Kedl, W. Kieper, X. Qiu, M. Tomai, S. Alkan, J. Vasilakos // J Immunol. - 2005 - 174(3) - C.1259-1268.

67. Gribar S. No longer an innocent bystander: epithelial toll-like receptor signaling in the development of mucosal inflammation./ S. Gribar, W. Richardson, C. Sodhi, D. Hackam // Mol. Med. - 2008 - 14 - C.645-59

68. Grimm T. EBV latent membrane protein-1 protects B cells from apoptosis by inhibition of BAX./ T. Grimm, S. Schneider, E. Naschberger, J. Huber, E. Guenzi, A. Kieser, P. Reitmeir, T. Schulz, C. Morris, M. Sturzl // Blood. - 2005 - 105(8), C.3263-3269.

69. Grumont R. Rel-dependent induction of A1 transcription is required to protect B cells from antigen receptor ligation-induced apoptosis./ R. Grumont, I. Rourke, S. Gerondakis // Genes Dev. - 1999 - 13(4) - C.400-411.

70. Gururajan M Toll-like receptor expression and responsiveness of distinct murine splenic and mucosal B-cell subsets./ M. Gururajan, J. Jacob, B. Pulendran // PLoS ONE - 2007 - 2 - 863.

71. Hadjifrangiskou M. Transposon Mutagenesis Identifies Uropathogenic Escherichia coli Biofilm Factors./ M. Hadji frangiskou, A. Gu, Jerome S. Pinkner,a,c Maria Kostakioti,a Ellisa W. Zhang,a Sarah E. Greene,a and Scott J.// J Bacteriol. -2012- 194 (22) - C.6195-6205.

72. Hagberg L. Difference in susceptibility to gram-negative urinary tract infection between C3H/HeJ and C3H/HeN mice./ L. Hagberg, R. Hull, S. Hull, J. McGhee, S. Michalek, E. Svanborg // Infect Immun - 1984 - 46(3) - C.839-844.

73. Hasan U. Human TLR10 is a functional receptor, expressed by B cells and plasmacytoid dendritic cells, which activates gene transcription through MyD88/ C. Chaffois, C. Gaillard, V. Saulnier, E. Merck, S. Tancredi, C. Guiet, F. Briere, J. Vlach, S. Lebecque, G. Trinchieri, E. Bates// J Immunol. - 2005. - Vol. 174, №5. - P. 294250.

74. Hasebe A. Inflammatory lipoproteins purified from a toxigenic and arthritogenic strain of Mycoplasma arthritidis are dependent on Toll-like receptor 2 and CD 14/ A. Hasebe, H. Mu, L. Washborn, F. Chan, N. Pennock, M. Taylor, B. Cole //Infect. Immun. - 2007. - 75(4) - C. 1820-6

75. Hashimoto M. Not lipoteichoic acid but lipoproteins appear to be the * dominant immunobiologically active compounds in Staphylococcus aureus/ M. Hashimoto, K. Tawaratsumida, H. Kariya, A. Kiyohara, Y. Suda, F. Kirikae, T.Kirikae, F.Gotz //J. Immunol., - 2006. - 177(5) - C.3162-9.

76. Hassan F. Involvement of interleukin-1 receptor-associated kinase (IRAK)-M in toll-like receptor (TLR) 7-mediated tolerance in RAW 264.7 macrophage-like cells/ F. Hassan, S. Islam, G. Tumurkhuu, J. Dagvadorj, Y. Naiki, T. Komatsu, N. Koide, T. Yoshida, T. Yokochi// Cell Immunol. - 2009. - Vol. 256, №1-2, P. 99-103.

77. Hayashi F. Toll-like receptors stimulate human neutrophil function./ F. Hayashi, T. Means, A. Luster//Blood. - 2003 - 102(7) - 2660-2669.

78. He B. CpG DNA induces IgG class switch DNA recombination by activating human B cells through an innate pathway that requires TLR9 and cooperates with IL-10./ B. He, X. Qiao, A.Cerutti // J Immunol - 2004 - 173 - C.4479-4491.

79. Heil F. Species-specific recognition of single-stranded RNA via toll-like receptor 7 and 8./ F.Heil, H.Hemmi, H.Hochrein, F.Ampenberger, C. Kirschning, S.Akira, G. Lipford, H.Wagner, S.Bauer// Science - 2004. 303(5663) - C. 1536-9

80. Heil F. Species-specific recognition of single-stranded RNA via toll-like receptor 7 and 8/ F. Heil, H. Hemmi, H. Hochrein, F. Ampenberger, C. Kirschning, S. Akira, G.Lipford, H.Wagner, S.Bauer.//Science-2004. 303(5663) - C. 1536-9

81. Hemmi H. Small anti-viral compounds activate immune cells via the TLR7 MyD88-dependent signaling pathway./ H. Hemmi, T. Kaisho, O. Takeuchi, S. Sato, H. Sanjo, K. Hoshino, T. Horiuchi, H. Tomizawa, K. Takeda, S. Akira // Nat Immunol. -2002-3(2)-C.196-200.

82. Hemmi H. Small anti-viral compounds activate immune cells via the TLR7 MyD88-dependent signaling pathway/ H. Hemmi, T. Kaisho, O. Takeuchi, S. Sato, H. Sanjo, K. Hoshino, T. Horiuchi, H. Tomizawa, K. Takeda, S. Akira //Nat. Immunol. -2002 - 3(2) - C. 196-20

83. Hirschfeld M. Cutting edge: inflammatory signaling by Borrelia burgdorferi lipoproteins is mediated by toll-like receptor 2. M. Hirschfeld, C. Kirschning, R. Schwandner, H. Wesche, J. Weis, R. Wooten, J. Weis.//J. Immunol. — 1999.- 163(5)-C.2382-6

84. Hiscott J. Characterization of a functional NF-kappa B site in the human interleukin 1 beta promoter: evidence for a positive autoregulatory loop. / J. Hiscott, J. Marois, J. Garoufalis, M. D'Addario, A. Roulston, I. Kwan, N. Pepin, J. Lacoste, H. Nguyen, G. Bensi// Mol Cell Biol. - 1993 - 13(10) - C.6231-40.

85. Hoebe K. CD36 is a sensor of diacylglycerides./ K. Hoebe, P. Georgel, S. Rutschmann, X. Du, S. Mudd, K. Crozat, S. Sovath, L. Shamel, T. Härtung, U. Zahringer, B. Beutler.// Nature - 2005 - 433 - C.523-527.

86. Hornung V. Quantitative expression of toll-like receptor 1-10 mRNA in cellular subsets of human peripheral blood mononuclear cells and sensitivity to CpG oligodeoxynucleotides./ V. Hornung, S. Rothenfusser, S. Britsch, A. Krug, B. Jahrsdorfer, T. Giese, S. Endres, G. Hartmann // J Immunol - 2002 - 168 - C.4531-4537.

87. Hou B. Toll-like receptors activate innate and adaptive immunity by using dendritic cell-intrinsic and -extrinsic mechanisms./ B. Hou, B. Reizis, A. DeFranco// Immunity. 2008 - 29(2) - C.272-82.

88. Hua Z. TLR signaling in B-cell development and activation./ Z. Hua, B. Hou // Cell Mol Immunol. - 2013 - 10(2) - C. 103-6.

89. Ichinohe T. Synthetic double-stranded RNA poly(I:C) combined with mucosal vaccine protects against influenza virus infection./ T. Ichinohe, I. Watanabe, S. Ito, H. Fujii, M. Moriyama, S. Tamura, H. Takahashi, H. Sawa, J. Chiba, T. Kurata, T. Sata, H. Hasegawa // J Virol. - 2005 - 79(5) - C.2910-2919.

90. Inaba K. The formation of immunogenic major histocompatibility complex class II- peptide ligands in lysosomal compartments of dendritic cells is regulated by inflammatory stimuli./ K. Inaba, S. Turley, T. Iyoda, F. Yamaide, S. Shimoyama, C. Reis e Sousa // J Exp Med - 2000 - 191 - C.927-936.

91. Ioannidis I. Toll-like receptor expression and induction of type I and type III interferons in primary airway epithelial cells./ I. Ioannidis, F. Ye, B. McNally, M. Willette, E. Flano // J Virol. - 2013 - 87(6) - C.3261-3270.

92. Israel A. Two purified factors bind to the same sequence in the enhancer of mouse MHC class I genes: one of them is a positive regulator induced upon differentiation of teratocarcinoma cells./ A. Israel, O. Yano, F. Logeat, M. Kieran, P. Kourilsky//Nucleic Acids Res. - 1989 - 17(13) - C.5245-5257.

93. Ittah M. Viruses induce high expression of BAFF by salivary gland epithelial cells through TLR- and type-I IFN-dependent and -independent pathways./ M. Ittah, C. Miceli-Richard, J.Gottenberg // Eur J Immunol - 2008 - 38 - C. 1058-64.

94. Iwasaki A. Toll-like receptor control of the adaptive immune responses/ A .Iwasaki, R. Medzhitov// Nature immunology - 2004. - Vol.5, №10. - P. 987 - 995.

95. Jagannathan M. TLR cross-talk specifically regulates cytokine production by B cells from chronic inflammatory disease patients. / M. Jagannathan, H. Hasturk, Y. Liang // J Immunol - 2009 - 183 C.7461-7470.

96. Jang S. The Expression of Toll-Like Receptors (TLRs) in Cultured Human Skin Fibroblast is Modulated by Histamine./ S. Jang, J. Park, Y. Won, S. Yun, S. Kim //Chonnam Med J. 2012 - 48(1) - C.7-14.

97. Janot L. CD 14 works with toll-like receptor 2 to contribute to recognition and control of Listeria monocytogenes infection./ L. Janot, T.Secher, D.Torres, I.Maillet, J.Pfeilschifter, V.Quesniaux, R.Landmann, B.Ryffel, F.Erard //J Infect Dis. -2008-11 - 198(l)-C.l 15-124.

98. Jean D. Protective effect of endotoxin instillation on subsequent bacteria-induced acute lung injury in rats./ D. Jean, S. Rezaiguia-Delclaux, C. Delacourt, R. Leclercq, C. Lafuma // Am. J. Respir. Crit. Care Med. - 1998 - 158 - C.1702-1708.

99. Jiang W. TLR9 stimulation drives naive B cells to proliferate and to attain enhanced antigen presenting function./ W. Jiang, M. Lederman, C. Harding, B. Rodriguez, R. Mohner, S. Sieg // Eur J Immunol - 2007 - 37 - C.2205-2213.

100. Jin M. Crystal structure of the TLR1-TLR2 heterodimer induced by binding of a tri-acylated lipopeptide./ M. Jin, S. Kim, J. Heo, M. Lee, H. Kim, S. Paik, H. Lee, J. Lee // Cell - 2007 - 130 - C.1071-1082.

101. Jin M. Crystal Structure of the TLR1-TLR2 Heterodimer Induced by Binding of a Tri-Acylated Lipopeptide/ M. Jin, S. Kim, J. Heo, M. Lee, H. Kim, S. Paik, H. Lee, J. Lee// Cell. - 2007. - Vol. 130. - P.1071-1082.

102. Jurk M. Human TLR7 or TLR8 independently confer responsiveness to the antiviral compound R-848/ M. Jurk, F. Heil, J. Vollmer, C. Schetter, A. Krieg, H. Wagner, G. Lipford, S. Bauer //Nat. Immunol., - 2002. - 3(6) - C.499.

103. Jurk M. Modulating responsiveness of human TLR7 and 8 to small molecule ligands with T-rich phosphorothiate oligodeoxynucleotides/ M. Jurk, A. Kritzler, B. Schulte, S. Tluk, C. Schetter, A. Krieg, J. Vollmer// Eur J Immunol. - 2006. -Vol.36, №7, P. 1815-1826.

104. Kalinski P T-cell priming by type-1 and type-2 polarized dendritic cells: the concept of a third signal/ P. Kalinski, C. Hilkens, E. Wierenga, M. Kapsenberg //Immunol Today - 1999 - 20 - C.561-567.

105. Kan Z. Liver Anatomy: Microcirculation of the Liver./ Z. Kan, D. Madoff// Semin Intervent Radiol. - Jun 2008 - 25(2) - C.77-85.

106. Kang J. Recognition of lipopeptide patterns by Toll-like receptor 2 - Tolllike receptor 6 heterodimer/ J. Kang, X. Nan, M. Jin, S. Youn, Y. Ryu, S. Mah, S. Han, H. Lee, S. Paik, J. Lee// Immunity. - 2009. - Vol. 31. - P. 873-884.

107. Kang J. Recognition of lipopeptide patterns by Toll-like receptor 2-Toll-like receptor 6 heterodimer./ Kang J, Nan X, Jin M, Youn S, Ryu Y, Mah S, Han S, Lee H, Paik S, Lee// J Immunity. - 2009 - 31 - C.873-884.

108. Kariko K. mRNA is an endogenous ligand for Toll-like receptor 3./ K. Kariko, H. Ni, J. Capodici, M. Lamphier, D.Weissman // J Biol Chem. - 2004 - 279(13) -C.12542-12550.

109. Kauffman E. Toll-like receptor 7 agonist therapy with imidazoquinoline enhances cancer cell death and increases lymphocytic infiltration and proinflammatory cytokine production in established tumors of a renal cell carcinoma mouse model/ E. Kauffman, H. Liu, M. Schwartz, D. Scherr// J Oncol. - 2012. - Vol.2012. - P. 1-11.

110. Kaur J. Selective recruitment of neutrophils and lymphocytes by thrombin: a role for NF-kappaB. / J. Kaur, R. Woodman, L. Ostrovsky, P. Kubes. J Am // Physiol Heart Circ Physiol. - 2001 - 281(2) - C. 784-95.

111. Kawai T. TLR signaling. /T.Kawai, S. Akira//Cell Death Differ. -2006. -13(5) - C.816-25.

112. Kawai T. Toll-like receptors and their crosstalk with other innate receptors in infection and immunity./ T. Kawai, S. Akira // Immunity. - 2011 - 34(5) - C.637-50.

113. Kawasaki K. Mouse toll-like receptor 4.MD-2 complex mediates lipopolysaccharide-mimetic signal transduction by Taxol/ K.Kawasaki, S.Akashi, R.Shimazu, T.Yoshida, K.Miyake, M. Nishijima.//J. Biol. Chem., - 2000. - 275(4) -C.2261-4.

114. Kmiec Z. Cooperation of liver cells in health and disease./ Z.Kmiec // Adv Anat Embryol Cell Biol.-2001 - 161 :III-XIII-C. 1-151.

115. Kobayashi K. IRAK-M is a negative regulator of Toll-like receptor signaling/ K.Kobayashi, L.Hernandez, J.Galan, C.Janeway, R.Medzhitov, R.Flavell.//Cell -2002. - 110(2) - C. 191-203.

116. Komai-Koma M TLR2 is expressed on activated T cells as a costimulatory receptor./ M. Komai-Koma, L.Jones, G.Ogg, D.Xu, F.Liew // Proc Natl Acad Sci -2004- 101 -C. 3029-3034.

117. Kress E. Distinct gene expression in human Vdl and Vd2 gd T cells following non-TCR agonist stimulation./ E. Kress, J.Hedges, M.Jutila // Mol Immunol -2006-43-C.2002-2011.

118. Kunsch C. NF-kappa B subunit-specific regulation of the interleukin-8 promoter/ C Kunsch, C.Rosen // Mol Cell Biol. - 1993 - 13(10) - C.6137-46.

119. Kurt-Jones E. Herpes simplex virus 1 interaction with Toll-like receptor 2 contributes to lethal encephalitis./ E. Kurt-Jones, M.Chan, S.Zhou, J.Wang, G.Reed, R;Bronson, M. Arnold, D.Knipe, R.Finberg // Proc Natl Acad Sci - 2004 - 101(5) -C.1315-20.

120. Kurt-Jones E. Pattern recognition receptors TLR4 and CD 14 mediate response to respiratory syncytial virus. E Kurt-Jones., L.Popova, L. Kwinn, L.Haynes, L.Jones, R.Tripp, E.Walsh, M.Freeman, D.Golenbock, L.Anderson, R.Finberg // Nat. Immunol., -2000. - 1(5) - C.398-401.

121.Lajarin F. Adhesion, invasion and intracellular replication of Salmonella typhimurium in a murine hepatocyte cell line. Effect of cytokines and LPS on antibacterial activity of hepatocytes./ F. Lajarin, G. Rubio, J. Galvez, P.Garcia-Penarrubia // Microb Pathog. - 1996 - 21(5) - 319-329.

122. Latz E. TLR9 signals after translocating from the ER to CpG DNA in the lysosome/ E. Latz, A.Schoenemeyer, A.Visintin, K.Fitzgerald, B.Monks, C.Knetter, E.Lien, N.Nilsen, T. Espevik, D.Golenbock.//Nat. Immunol., - 2004. - 5(2) - C, 190-8

123. Lauzon N. The direct effects of Toll-like receptor ligands on human NK cell cytokine production and cytotoxicity./ N.Lauzon, F. Mian, R. MacKenzie, A.Ashkar // Cell Immunol. - 2006 - 241(2) - C.102-112.

124. Le Goffic R. Detrimental contribution of the Toll-like receptor (TLR)3 to influenza A virus-induced acute pneumonia./ R. Le Goffic, V. Balloy, M. Lagranderie, L Alexopoulou, N Escriou // PLoS Pathog. - 2006 - 2 - C.53.

125. Lee J. Molecular basis for the immunostimulatory activity of guanine nucleoside analogs: activation of Toll-like receptor 7/ J.Lee, T.Chuang, V.Redecke, L.She, P.Pitha, D.Carson, E.Raz, H.Cottam // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, - 2003. -100(11) -C.6646-51

126. Libermann T. Activation of interleukin-6 gene expression through the NF-kappa B transcription factor./ T.Libermann, D.Baltimore //Mol Cell Biol. - 1990 - 10(5) - C.2327-2334.

127. Lien E. Toll-like receptor 2 functions as a pattern recognition receptor for diverse bacterial products. E.Lien, T.Sellati, A.Yoshimura, T.Flo, G.Rawadi, R.Finberg, J.Carroll, T.Espevik, R.Ingalls, J.Radolf, D.Golenbock.//J. Biol. Chem., - 1999. -274(47)-C.33419-25.

128. Lin L CpG DNA redirects class-switching towards "Thl-like" Ig isotype production via TLR9 and MyD88. / L. Lin, A. Gerth, S.Peng // Eur J Immunol - 2004 -34-C.1483-1487.

129. Liou H. c-Rel is crucial for lymphocyte proliferation but dispensable for T cell effector function./ H. Liou, Z. Jin, J. Tumang, S. Andjelic, K. Smith, M. Liou // Int Immunol. - 1999 - 11(3) - C.361-71.

130. Liu L. Structural basis of toll-like receptor 3 signaling with double-stranded RNA./ L. Liu, I. Botos, Y.Wang, J.Leonard, J.Shiloach, D.Segal, D.Davies.// Science -2008 -320(5874) -C.379-81.

131. Liu R Functional analysis of the proximal CCR5 promoter./ R Liu, X Zhao, T. Gurney, N.Landau.// AIDS Res Hum Retroviruses. - 1998 - 14(17) - C. 1509-19.

132. Lund J. Recognition of single-stranded RNA viruses by Toll-like receptor 7/ J. Lund, L. Alexopoulou, A. Sato, M. Karow, N. Adams, N. Gale, A. Iwasaki, R. Flavell// Proc Natl Acad Sci. - 2004, Vol.101, №15, P.5598-5603.

133. Lutzker S. Mitogen- and IL-4-regulated expression of germ-line Igc 2b transcripts: evidence for directed heavy chain class switching./ S Lutzker, P Rothman, R Pollock, R Coffman // Alt FW. Cell - 1988 - 53 - C. 177-184.

134. MacLeod H T cell activation by TLRs: a role for TLRs in the adaptive immune response./ H. MacLeod, L. Wetzler. // Sci STKE. - 2007 -2007- C402-448.

135. Malley R. Recognition of pneumolysin by Toll-like receptor 4 confers resistance to pneumococcal infection/ R. Malley, P. Henneke, S. Morse, M. Cieslewicz, M. Lipsitch, C. Thompson, E. Kurt-Jones, J. Paton, M. Wessels, D. Golenbock// Proc Natl Acad Sci. -2003, Vol.100, №4, P.1966-1971.

136. Mansson A. A distinct Toll-like receptor repertoire in human tonsillar B cells, directly activated by PamCSK, R-837 and CpG-2006 stimulation./ A. Mansson, M. Adner, U. Hockerfelt, L. Cardell.// Immunology - 2006 - 118 - C.539-548.

137. Mansson A. Toll-like receptors in cellular subsets of human tonsil T cells: altered expression during recurrent tonsillitis/ A.Mansson, M.Adner, L.Cardell // Respir Res. 2006 Feb 27;7:36.

138. Marr N. Role of human TLR4 in respiratory syncytial virus-induced NF-kB activation, viral entry and replication/ N. Marr, S. Turvey// Innate Immun. - 2012. -Vol.18, №6, P. 856-65.

139. Marra A. Streptococcus pneumoniae causes experimental meningitis following intranasal and otitis media infections via a nonhematogenous route./ A. Marra, D.Brigham // Infect Immun. - 2001 - 69(12) - C.7318-7325.

140. Means T. Differential effects of a Toll-like receptor antagonist on Mycobacterium tuberculosis-induced macrophage responses/ T.Means, B.Jones, A.Schromm, B.Shurtleff, J.Smith, J.Keane, D.Golenbock, S.Vogel, M. Fenton //J. Immunol. - 2001. - 166(6) - C.4074-82.

141. Medzhitov R. A human homologue of the Drosophila Toll protein signals activation of adaptive immunity/ R.Medzhitov, P. Preston-Hurlburt, C.Janeway//. Nature - 1997. - 388(6640) - C.394-397.

142. Medzhitov R. Innate immunity/ R.Medzhitov, C.Janeway //N Engl J Med. -2000.-343(5)-C.338-44.

143. Medzhitov R. Toll-like receptors and innate immunity/ R. Medzhitov //Nat. Rev. Immunol. -2001. - 1(2) - C.135-45.

144. Mendelson K. Independent regulation of JNKyp38 mitogen-activated protein kinases by metabolic oxidative stress in the liver. K. Mendelson, L. Contois, S. Tevosian, R. Davis, K. Paulson.// Proc. Natl. Acad. Sci. - 1996 - 93 - C. 12908-12913.

145. Mercier B. TLR2 engagement on CD8 T cells enables generation of functional memory cells in response to a suboptimal TCR signal/ B. Mercier, A. Cottalorda, C. Coupet, J. Marvel, N. Bonnefoy-Berard// Journal of Immunology - 2009 - 182(4)-C.1860-1867.

146. Meyer-Bahlburg A. Reduced c-myc xpression levels limit follicular mature B cell cycling in response to TLR signals./ A.Meyer-Bahlburg, A Bandaranayake, S Andrews, D.Rawlings // J Immunol - 2009 - 182 - C.4065-4075.

147. Meylan E. RIP1 is an essential mediator of Toll-like receptor 3-induced NF-kappa B activation./ E. Meylan, K. Burns, K. Hofmann, V. Blancheteau, F. Martinon, M. Kelliher, J. Tschopp.// Nat Immunol. - 2004 - 5(5) - C.503-507.

148. Miyake K. Innate recognition of lipopolysaccharide by CD14 and toll-like receptor 4-MD-2: unique roles for MD-2./ K.Miyake // Int Immunopharmacol - 2003 -3-C.l 19-128.

149. Moriuchi H. Nuclear factor-kappa B potently up-regulates the promoter activity of RANTES, a chemokine that blocks HIV infection./ H.Moriuchi, M.Moriuchi, A.Fauci // J Immunol. - 1997 - 158(7) - C.3483-91.

150. Morr M. Differential recognition of structural details of bacterial lipopeptides by Toll-like receptors/ M. Morr, O. Takeuchi, S. Akira, M. Simon, P. Muhlradt // Eur. J. Immunol -2002-32-C.3337-3347

151. Moynagh P. TLR signalling and activation of IRFs: revisiting old friends from the NF-kappaB pathway./ P. Moynagh.// Trends Immunol. 2005 - 26(9) - C.469-476.

152. Nagase H. Expression and function of Toll-like receptors in eosinophils: activation by Toll-like receptor 7 ligand./ H. Nagase, S.Okugawa, Y.Ota, M.Yamaguchi, H.Tomizawa, K.Matsushima, K.Ohta, K.Yamamoto, K.Hirai.// J Immunol. - 2003 - 171(8) - C.3977-3982.

153. Newton K. Signaling in innate immunity and inflammation/ K. Newton, V. Dixit. // Cold Spring Harb Perspect Biol. - 2012 - 4(3).

154. Nian H. R-848 triggers the expression of TLR7/8 and suppresses HIV replication in monocytes/ H. Nian, W. Geng, H. Cui, M. Bao, Z. Zhang, M. Zhang, Y. Pan, Q. Hu, H. Shang// BMC Infect Dis. - 2012. - Vol.12, №5.

155. O'Brien A. Genetic control of susceptibility to Salmonella typhimurium in mice: role of the LPS gene./ A O'Brien, D Rosenstreich, I Scher, G Campbell, R MacDermott, S Formal // J Immunol - 1980 - 124 - C.20-24.

156. Oeckinghaus A. The NF-kB Family of Transcription Factors and Its Regulation/ A. Oeckinghaus, S. Ghosh, Cold Spring Harb Perspect Biol - 2009 - 1(4).

157. Ohashi K. Cutting edge: heat shock protein 60 is a putative endogenous ligand;of the toll-like receptor-4 complex./ K.Ohashi, V.Burkart, S.Flohe, H.Kolb.//J. Immunol.,-2000. - 164(2) - C.558-61.

158. O'Neill L. The family of five: TIR-domain-containing adaptors in Toll-like receptor signaling/ L. O'Neill, A.Bowie// Nat Rev Immunol. - 2007. - Vol.7, №5. - P. 353-364.

159. Oshiumi H. TIR-containing adapter molecule (TICAM)-2, a bridging adapter recruiting to toll-like receptor 4 TICAM-1 that induces interferon-beta. / H. Oshiumi, M. Sasai, K. Shida, T. Fujita, M. Matsumoto, T. Seya // J Biol Chem. - 2003 -278(50)- C.49751-49762.

160. Ouaissi A. The Trypanosoma cruzi Tc52-released protein induces human dendritic cell maturation, signals via Toll-like receptor 2, and confers protection against lethal infection./ A.Ouaissi, E.Guilvard, Y.Delneste, G.Caron, G.Magistrelli, N.Herbault, N.Thieblemont, PJeannin // Immunol., - 2002. - 168(12) - C.6366-74.

161,Ozinsky A. The repertoire for pattern recognition of pathogens by the innate immune system is defined by cooperation between Toll-like receptors/ A.Ozinsky, D.Underhill, J.Fontenot, A.Hajjar, K.Smith, C.Wilson, L.Schroeder, A.Aderem // Proc. Natl. Acad. Sci., -2000.- 97 -C, 13766-13771

162. Parker L. Translational mini-review series on Toll-like receptors: networks regulated by Toll-like receptors mediate innate and adaptive immunity/ L.Parker, L.Prince, I.Sabroe// Clin Exp Immunol. - 2007 - 147(2) - C. 199-207

163. Pasare C. Toll pathway-dependent blockade of CD4+CD25+ T cellmediated suppression by dendritic cells./ C. Pasare, R. Medzhitov // Science - 2003 -299 - C.1033-1036

164. Pasare C. Toll-like receptors: linking innate and adaptive immunity/ C.Pasare, R.Medzhitov // Microbes Infect. - 2004. - 6(15) - C. 1382-7.

165.Patel H. Toll-like receptors in ischaemia and its potential role in the pathophysiology of muscle damage in critical limb ischaemia./ H. Patel, S. Shaw, X. Shi-Wen, D. Abraham, D. Baker, J.Tsui // Cardiol Res Pract. - 2012 - 2012 - C.121-237.

166. Quesniaux V. Toll-like receptor 2 (TLR2)-dependent-positive and TLR2-independent-negative regulation of proinflammatory cytokines by mycobacterial lipomannans/ V.Quesniaux, D. Nicolle, D.Torres, L.Kremer, Y. Guerardel, J.Nigou, G.Puzo, F.Erard, B.Ryffel.//J. Immunol., - 2004. - 172(7) - C.4425-34.

167. Rassa J. Murine retroviruses activate B cells via interaction with toll-like receptor 4 J J Rassa, J Meyers, Y Zhang, R Kudaravalli, S Ross // Proc Natl Acad Sci USA - 2002 - 99 - C.2281-2286.

168. Reppe K. Immunostimulation with macrophage-activating lipopeptide-2 increased survival in murine pneumonia. K Reppe, T Tschernig, A Luhrmann, V van Laak, K Grote, M. Zemlin. Am J Respir Cell Mol Biol. 2009; 40:474-481. doi: 10.1165/rcmb.2008-0071OC.

169. Ritzman A. The chemokine receptor CXCR2 ligand KC (CXCL1) mediates neutrophil recruitment and is critical for development of experimental Lyme arthritis

and carditis./ A Ritzman, J Hughes-Hanks, V Blaho, L Wax, W Mitchell, C Brown //. Infect Immun. - 2010 - 78(11) - C.4593-4600.

170. Rosenfeld M. Prevention of hepatic apoptosis and embryonic lethality in RelA/TNFR-1 double knockout mice. / M.Rosenfeld, L Prichard, N Shiojiri, N.Fausto // Am J Pathol. - 2000 -156(3) - C.997-1007.

171. Rutkowski R. CD80 and CD86 expression on LPS-stimulated monocytes and the effect of CD80 and CD86 blockade on IL-4 and IFN-gamma production in nonatopic bronchial asthma./ R Rutkowski, T Moniuszko, A Stasiak-Barmuta, B Kosztyla-Hojna, M Alifier, K Rutkowski, A Tatarczuk-Krawiel.// Arch Immunol Ther Exp (Warsz).- 2003 - 51(6) - C.421-428.

172. Sabroe I. Regulation of human neutrophil chemokine receptor expression and function by activation of Toll-like receptors 2 and 4./ I Sabroe, E Jones, M Whyte, S Dower.// Immunology. - 2005 - 115(1) - C.90-98.

173. Sabroe I. Toll-like receptor (TLR)2 and TLR4 in human peripheral blood granulocytes: a critical role for monocytes in leukocyte lipopolysaccharide responses./1 Sabroe, E Jones, L Usher, M Whyte, S Dower.// J Immunol. - 2002 - 168(9) - C.4701-10.

174. Sato S. Essential function for the kinase TAK1 in innate and adaptive immune responses./ S. Sato, H. Sanjo, K.Takeda // Nat Immunol - 2005 - 6 - C.1087-1095.

175. Schnare M. Toll-like receptors: sentinels of host defence against bacterial infection. M Schnare, M Rollinghoff, S Qureshi // Int Arch Allergy Immunol - 2006 -139-C.75-85.

176. Schroder N. Involvement of lipopolysaccharide binding protein, CD14, and Toll-like receptors in the initiation of innate immune responses by Treponema glycolipids./ N Schroder, B.Opitz, N.Lamping, K.Michelsen, U. Zahringer, U.Gobel, R.Schumann //J. Immunol., - 2000. - 165(5) - C.2683-93.

177. Schroder N. Involvement of lipopolysaccharide binding protein, CD14, and Toll-like receptors in the initiation of innate immune responses by Treponema

glycolipids./ N.Schroder, B. Opitz, N. Lamping, K.Michelsen, U.Zahringer, U.Gobel, R.Schumann //J. Immunol., - 2000. - 165(5) - C.2683-93.

178. Schroder N. Lipoteichoic acid (LTA) of Streptococcus pneumoniae and Staphylococcus aureus activates immune cells via Toll-like receptor (TLR)-2, lipopolysaccharide-binding protein (LBP), and CD 14, whereas TLR-4 and MD-2 are not involved/ N.Schroder, S.Morath, C.Alexander, L.Hamann, T.Hartung, U.Zahringer, U.Gobel, J.Weber, R.Schumann //J. Biol. Chem., - 2003. - 278(18) - C. 15587-94

179. Seki E. Toll-like receptors and adaptor molecules in liver disease: update./ E.Seki, D.Brenner // Hepatology - 2008 - 48 - C.322-335

180. Shibuya H. TAB1: an activator of the TAK1 MAPKKK in TGF-p signal transduction./ H Shibuya, K Yamaguchi, K Shirakabe, A Tonegawa, Y Gotoh, N Ueno, K Irie, E Nishida, K.Matsumoto // Science - 1996 - 272 - C.l 179-1182.

181.Shimizu T. A dipalmitoylated lipoprotein from Mycoplasma pneumoniae activates NF-kappa B through TLR1, TLR2, and TLR6/ T.Shimizu, Y. Kida, K. Kuwano //J. Immunol., - 2005. - 175(7) - C.4641-6.

182. Shin H. Toll-like Receptors/ Y. Jung, H. Rim// British Journal of Medicine & Medical Research - 2013. - Vol. 3, №1. - P. 58-68.

183. Signaling. Z. Structural Insights into TIR Domain Specificity of the Bridging Adaptor Mai in TLR4 Signaling/ Z. Signaling. Z. Lin, J. Lu, W. Zhou, Y. Shen//Plos One - 2012. Vol.7, №4.-P. 1-11.

184. Sindhava V. Interleukin-10 mediated autoregulation of murine B-l B-cells and its role in Borrelia hermsii infection./ V Sindhava, M Woodman, B Stevenson, S Bondada.// PLoS ONE - 2010 - 5 - C.l 14-145.

185. Sobek V. Direct Toll-like receptor 2 mediated co-stimulation of T cells in the mouse system as a basis for chronic inflammatory joint disease./ V. Sobek, N. Birkner, I. Falk// Arthritis Research and Therapy - 2004 - 6 (5) - C.433-446.

186. Song J. TLR4-mediated expulsion of bacteria from infected bladder epithelial cells./ J Song, B Bishop, G Li, R Grady, A Stapleton, S Abraham.// Proc Natl Acad Sci - 2009 - 106(35) - C.l4966-14971.

187. Standiford T. Immunomodulation for the prevention and treatment of lung infections./ T. Standiford, J. Deng // Semin. Respir. Crit. Care Med - 2004 - 25 - C.95-108.

188. Stavnezer J. Mechanism and regulation of class switch recombination./ J Stavnezer, J Guikema, C. Schrader // Annu Rev Immunol - 2008 - 26 - C.261-292.

189. Sun Y. Molecular cloning and expression analysis of the ASC gene from mandarin fish and its regulation of NF-kappaB activation./ Y. Sun, J. Wang, H. Lao, Z.

. Yin, W. He, S. Weng, X. Yu, S. Chan, J. He // Dev Comp Immunol. - 2008 - 32(4) -C.391-399.

190. Sun Z. NF-kappaB activation and inhibition: a review./ Z. Sun, Andersson R. // Shock- 2002 - 18(2), P.99-106.

191. Suzuki E. Inhibition of macrophage activation and phagocytosis by a novel NF-kappaB inhibitor, dehydroxymethylepoxyquinomicin./ E Suzuki, K.Umezawa //Biomed Pharmacother - 2006 - 60(9) - C.578-86.

192. Takaesu G TAK1 is critical for IkB kinase-mediated activation of the NF-kB pathway./ G Takaesu, R Surabhi, K Park, J Ninomiya-Tsuji, K Matsumoto, R '' Gaynor.// J. Mol. Biol. - 2003 - 326 - C. 105-115.

193. Takaesu G. TAB2, a novel adaptor protein, mediates activation of TAK1 MAPKKK by linking TAK1 to TRAF6 in the IL-1 signal transduction pathway/ G Takaesu, S Kishida, A Hiyama, K Yamaguchi, H Shibuya, K Irie, J Ninomiya-Tsuji, K Matsumoto.// Mol. Cell - 2000 - 5 - C.649-658.

194. Takeda K. Toll-like receptors/ K. Takeda, S. Akira// Curr Protoc Immunol. -2007 - t.14, tji 14.12.

195. Takeuchi O. Cutting edge: role of Toll-like receptor 1 in mediating immune response to microbial lipoproteins./ O.Takeuchi, S.Sato, T.Horiuchi, K.Hoshino, K.Takeda, Z.Dong, RModlin, S.Akira //J. Immunol. - 2002 - 169 - C. 10-14

196. Takeuchi O. Differential roles of TLR2 and TLR4 in recognition of gramnegative and gram-positive bacterial cell wall components./ O Takeuchi, K Hoshino, T

Kawai, H Sanjo, H Takada, T Ogawa, K Takeda, S.Akira.// Immunity. - 1999 - 11(4) — C.443-51.

197. Takeuchi O. Discrimination of bacterial lipoproteins by Toll-like receptor 6/ O.Takeuchi, T.Kawai, P.Muhlradt, M.Morr, J.Radolf, A.Zychlinsky, K.Takeda, S.Akira.// Int. Immunol. - 2001-13- C.933-940

198. Toll-like receptor polymorphisms and susceptibility to urinary tract infections in adult women./ T Hawn, D Scholes, S Li, H Wang, Y Yang, P Roberts, A Stapleton, M Janer, A Aderem, W Stamm, L Zhao, T Hooton.// PLoS One. - 2009 -;4 (6).

199. Toll-like receptor signaling inhibits hepatitis B virus replication in vivo./ M.Isogawa, M.Robek, Y. Furuichi, F.Chisari // J. Virol. - 2005 - 79 - C.7269-7272.

200. Triantafilou K. Coxsackievirus B4-induced cytokine production in pancreatic cells is mediated through toll-like receptor 4./ K. Triantafilou, M. Triantafilou.// J Virol - 2004 - 78 - C.l 1313-11320.

201. Tsujimoto H. Flagellin enhances NK cell proliferation and, activation directly and through dendritic cell-NK cell interactions./ H. Tsujimoto, T. Uchida, P Efron, P Scumia, A Verma, T Matsumoto.// J Leukoc Biol - 2005 - 78 - C.888-897.

202. Uematsu S. Toll-Like receptors (TLRs) and their ligands/ S. Uematsu, S. Akira// Handb Exp Pharmacol. - 2008 - №183. - P. 1-20.

203. Ullah M. The TLR signalling adaptor TRIF/TICAM-1 has an N-terminal helical domain with structural similarity to IFIT proteins/ M. Ullah, T. Ve, M. Mangan, M. Alaidarous, M. Sweet, A. Mansell, B.Kobe // Acta Crystallogr D Biol Crystallogr. -2013-69(12)-C.2420-30.

204. Umezawa K. Granulation in livers of mice infected with Salmonella typhimurium is caused by superoxide released from host phagocytes./ K. Umezawa, N. Ohnishi, K. Tanaka, S. Kamiya, Y. Koga, H. Nakazawa, A.Ozawa // Infect Immun. -1995-63(1 l)-C.4402-4408.

205. Vabulas R. HSP70 as endogenous stimulus of the Toll/interleukin-1 receptor signal pathway/ R.Vabulas, P.Ahmad-Nejad, S.Ghose, C.Kirschning, R.Issels, H. Wagner//Biol. Chem., - 2002. - 277(17) - C.15107-12

206. van de Stolpe A. 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate- and tumor necrosis factor alpha-mediated induction of intercellular adhesion molecule-1 is inhibited by dexamethasone. Functional analysis of the human intercellular adhesion molecular-1 promoter./ A van de Stolpe, E Caldenhoven, B Stade, L Koenderman, J Raaijmakers, J Johnson, P van der Saag.// J Biol Chem. - 1994 - 269(8) - 6185-6192.

207. Vercammen E. Sensing of Viral Infection and Activation of Innate Immunity by Toll-Like Receptor 3/ E. Vercammen, J. Staal, R. Beyaert// Clin. Microbiol. Rev. - 2008. - Vol. 21, № 1, P. 13-25.

208. Verstak B. MyD88 adapter-like (Mal)/TIRAP interaction with TRAF6 is critical for TLR2- and TLR4-mediated NF-kappaB proinflammatory responses./

B.Verstak, K.Nagpal, S Bottomley, D Golenbock, P Hertzog, A Mansell.// J Biol Chem. - 2009 - 284(36) - C.24192-24203.

209. Vijay-Kumar M. Flagellin treatment protects against chemicals, bacteria, -viruses, and radiation./ M Vijay-Kumar, J Aitken, C Sanders, A Frias, V Sloane, J Xu,

A Neish, M Rojas, A.Gewirtz // J Immunol. - 2008 - 180(12) - 8280-8285.

210. Volpes R. Can hepatocytes serve as 'activated' immunomodulating cells in the immune response?/ R Volpes, J van den Oord, V.Desmet // J Hepatol. - 1992 -16(1-2) -C.228-40.

211. Wang C. TAK1 is a ubiquitin-dependent kinase of MKK and IKK./

C.Wang, L Deng, M Hong, G.Akkaraju, J Inoue, Z. Chen // Nature - 2001 - 412(6844) -C.346-51.

212. Wang T. Regulation of toll-like receptor 2 expression by macrophages following Mycobacterium avium infection/ T.Wang, W.Lafuse, B.Zwilling //J. Immunol., - 2000. - 165(11) - C.6308-13.

213. Weiss D. Toll-like receptors are temporally involved in host defense./ D Weiss, B Raupach, K Takeda, S Akira, A Zychlinsky // J Immunol - 2004 - 172 -C.4463-4469.

214. Wesch D. Direct costimulatory effect of TLR3 ligand poly(I:C) on human gd T lymphocytes./ D Wesch, S Beetz, H Oberg, M Marget, K Krengel, D Kabelitz // J Immunol - 2006 - 176 - C.1348-1354.

215. Whelan J. An NF kappa B-like factor is essential but not sufficient for cytokine induction of endothelial leukocyte adhesion molecule 1 (ELAM-1) gene transcription./ J Whelan, P Ghersa, R Hooft van Huijsduijnen, J Gray, G Chandra, F Talabot, J DeLamarter.//Nucleic Acids Res. 1991 May 25;19(10):2645-53.

216. Wolfs T. In vivo expression of Toll-like receptor 2 and 4 by renal epithelial cells: IFN-gamma and TNF-alpha mediated up-regulation during inflammation./ T Wolfs, W Buurman, A van Schadewijk, B de Vries, M Daemen, P Hiemstra, C van't Veer// J Immunol. - 2002 - 168(3) - C. 1286-1293.

217. Wyllie D. Evidence for an accessory protein function for Toll-like receptor 1 in anti-bacterial responses./ D. Wyllie, E. Kiss-Toth, A. Visintin, C. Smith, S. Boussouf, D. Segal, G.Duff, Dower S. //J. Immunol. - 2000. - 165(12) - C.7125-32

218. Xu W. Viral double-stranded RNA triggers Ig class switching by activating upper respiratory mucosa B cells through an innate TLR3 pathway involving BAFF./ W Xu, P Santini, A Matthews, A Chiu, A Plebani, B He, K Chen, A Cerutti.// J Immunol -2008-181-C. 276-287.

219. Yamaguchi K. Identification of a member of the MAPKKK family as a potential mediator of TGF-|3 signal transduction./ K Yamaguchi, K Shirakabe, H Shibuya, K Irie, I Oishi, N Ueno, T Taniguchi, E Nishida, K Matsumoto.// Science -1995-270-C.2008-2011.

220. Yamamoto M. A novel Toll/IL-1 receptor domain-containing adapter that preferentially activates the IFN-beta promoter in the Toll-like receptor signaling/ M.Yamamoto, S.Sato, K.Mori, K.Hoshino, O.Takeuchi, K.Takeda, S.Akira.//J. Immunol. -2002. - 169(12) - C.6668-72.

221. Yamamoto M. Role of adaptor TRIF in the MyD88-independent toll-like receptor signaling pathway./ M. Yamamoto, S.Sato, H.Hemmi, K.Hoshino, T.Kaisho, H.Sanjo, O.Takeuchi, M.Sugiyama, M.Okabe, K.Takeda, S.Akira.//Science - 2003. -301(5633)-C.640-643.

222. Yoon S. Structural basis of TLR5-flagellin recognition and signaling./ S. Yoon, O. Kurnasov, V.Natarajan, M. Hong, A. Gudkov, A Osterman, I Wilson.// Science. - 2012 - 335(6070) - C.859-64.

223. Zhou Y. TLR3 activation efficiency by high or low molecular mass poly I:C. Y Zhou, M Guo, X Wang, J Li, Y Wang, L Ye, M Dai, L Zhou, Y Persidsky, W Ho. Innate Immun. - 2013 - 19(2) - C.184-192.

224. Zughaier S. Neisseria meningitidis lipooligosaccharide structure-dependent activation of the macrophage CD14/Toll-like receptor 4 pathway/ S. Zughaier, Y. Tzeng, S. Zimmer., A. Datta, R. Carlson, D. Stephens// Infect Immun. - 2004. - Vol.72, №1, P. 371-80.