Количественный анализ культуральных жидкостей штаммов-продуцентов промышленных антибиотиков различных классов методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.11.11, кандидат химических наук Антонова, Светлана Владимировна

• Антонова, Светлана Владимировна
• кандидат химических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат химических наук Антонова, Светлана Владимировна

1. Введение.

2. Литературный обзор.

2.1. Обоснование выбора метода для анализа антибиотиков.

2.2. Стационарные фазы в ТСХ.

2.3. Подвижные фазы в ТСХ.

2.4. Стратегия выбора и оптимизации подвижных фаз в ТСХ.

2.5. Обнаружение соединений на хроматограммах.

2.6. Количественная обработка результатов методом денситометрии.

2.7. Инструментальные способы измерения.

2.8. Электроосмотическая ТСХ (ЭО-ТСХ).

2.9. Анализ погрешности определения в ТСХ.

3. Техника и методика проведения эксперимента.

3.1. Приборы и материалы.

3.2. Реактивы.

3.3. Приготовление стандартных образцов антибиотиков и проб КЖ.

3.3.1. Тилозин.

3.3.1.1. Экстракция тилозина бутилацетатом.".

3.3.1.2. Экстракция тилозина бутилацетатом с добавлением неорганических солей.

3.3.2. Вирджиниомицин.

3.3.3. Моеномицин.

3.3.4. Биалафос.

3.3.5. Фосфомицин.

3.4. Подготовка хроматографических пластинок.

3.5. Хроматографические системы, используемые в работе и их приготовление.

3.6. Подготовка хроматографической камеры.

3.7. Приготовление обнаруживающего реагента.

3.7.1. Раствор нингидринового реактива.

3.7.2. смесь хлорсульфоновой и уксусной кислот (2+1, v/v).

3.7.3. Растворы для визуализации фосфомицина.

3.8. Нанесение стандартных образцов и проб КЖ на хроматографическую пластинку.

3.9. Нанесение стандартных образцов и проб КЖ на хроматографическую пластинку для ЭО-ТСХ.

3.10. Элюирование хроматограмм.'.

3.11. Электроосмотическая - ТСХ.

3.12. Обработка хроматограммы обнаруживающим реагентом.

3.12.1. Нингидриновым реактивом.

3.12.2. Смесью хлорсульфоновой и уксусной кислот.

3.12.3. Обработка хроматограммы растворами I и II для визуализации фосфомицина.

3.13. Количественная обработка хроматограмм.

3.14. Исследование степени экскретирования антибиотика клетками.

3.15. Определение содержания антибиотиков методом диффузии в агар.

3.16. Проведение биоавтографии.

3.17. Определение содержания тилозина методом ВЭЖХ.

3.18. Определение содержания вирджиниомицинов методом ВЭЖХ.

3.19. Определение содержания моеномицинов методом ВЭЖХ.

3.20. Определение биалафоса и сопутствующих ему в КЖ веществ методом ВЭЖХ.

3.21. Очистка культуральной жидкости штамма-продуцента фосфомицина в препаративных количествах.

3.21.1. Центрифугирование культуральной жидкости.

3.21.2. Депигментирование культуральной жидкости.

3.21.3. Мембранные методы очистки КЖ штамма-продуцента фосфомицина.

3.21.3.1. Микрофильтрация.

3.21.3.2. Ультрафильтрация.

3.22. Количественное определение фосфомицина методом капиллярного электрофореза.

4. Результаты и обсуждение.

4.1. Количественное определение тилозина и сопутствующих ему макролидов в КЖ.

4.1.1. Изучение влияния процесса культивирования продуцента тилозина на распределение антибиотика при экстракции бутилацетатом из КЖ.

4.1.2. Изучение распределения антибиотика тилозина между нативной КЖ и бутилацетатом в присутствии неорганических солей.

4.2. Анализ вирджиниомицинов в промышленных образцах КЖ.

4.3. Хроматографическое определение моеномицинов в образцах КЖ из различных промышленных партий.

4.4. Анализ биалафоса и сопутствующих ему предшественников в КЖ.

4.4.1. Выбор оптимальных условий проведения цветной реакции для визуализации пятен ВА и FT на хроматограммах.

4.5. Фосфомицин.

4.5.1. Количественное определение фосфомицина в ЮК методом ТСХ.

4.5.1.1. Визуализация пятен фосфомицина на хроматограмме.

4.5.1.2. Количественная обработка хроматограмм.

4.5.1.3. Изучение влияния аэрации на уровень биосинтеза фосфомицина.

4.5.2. Очистка КЖ штамма-продуцента фосфомицина в препаративных количествах.

4.5.3. Определение содержания фосфомицина в КЖ методом капиллярного электрофореза.

4.5.3.1. Подготовка пробы КЖ для проведения анализа методом КЭ.

4.5.3.2. Оптимизация пробоподготовки образцов КЖ.

4.5.3.3. Изучение кислотного гидролиза фосфомицина методом КЭ.

4.6. Исследование полноты экскретирования антибиотиков из клетки.

4.7. Электроосмотическая ТСХ.

4.8. Предвалидационные тесты.

4.9. Валидация методик количественного определения антибиотиков методом хроматоденситометрии.

4.10. Валидация метода КЭ.

5. Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Количественный анализ культуральных жидкостей штаммов-продуцентов промышленных антибиотиков различных классов методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии»

Актуальность работы

Современная биотехнологическая. промышленность — наиболее перспективный, а зачастую и единственный способ получения целого ряда веществ, используемых в качестве пищевых лекарственных препаратов, сырья для, химической и фармацевтической промышленности, а также и кормовых добавок. Основная доля продукции биотехнологического производства, как в количественном, так и в стоимостном выражении приходится на синтезируемые микроорганизмами низкомолекулярные соединения: аминокислоты, антибиотики, нуклеотиды, нуклеозиды и витамины. Неотъемлемой частью создания новых, более эффективных и экономичных биотехнологических процессов является разработка соответствующих аналитических методов, обеспечивающих контроль протекания этих процессов и качество получаемой продукции.

Так при отборе перспективных штаммов - продуцентов биологически t активных веществ и экспресс - анализа при оптимизации условий ферментации и контроле промышленных биотехнологических процессов необходимо решать задачи массового' анализа получаемой продукции. Основные требования1 к аналитическим методикам контроля в биотехнологии, учитывая объем и характер' выполняемой работы -экспрессность анализа, - простота подготовки проб, и дешевизна, и возможность получения точных количественных результатов с погрешностью измерения не более 5%.

Простота и экспрессность метода обеспечивают его массовое использование, особенно при клинических и лабораторных исследованиях, а также в условиях производства; неточность и ненадежность метода, вообще не должны подлежать рассмотрению, а дороговизна метода сильно ограничивает возможности. Возвращаясь к вопросу о достоверности и надежности метода, следует отметить, что требования, предъявляемые к аналитической хроматографии, например, в биохимии и биотехнологии существенно различаются. Так, в биохимии приемлемым считается метод, обеспечивающий погрешность измерения не более 15% и воспроизводимость 90% [1] . Аналогичные требования предъявляются к хроматографическим методам на стадии создания штаммов-продуцентов антибиотиков. Однако, на этапе оптимизации процесса ферментации необходима более высокая точность анализа — погрешность измерения не должна превышать 5%. То же самое требование предъявляется к аналитической хроматографии при разработке стадии выделения и очистки антибиотика, поскольку 10-15 процентная погрешность измерения может привести к выпуску препарата недостаточной чистоты или к чрезмерно высоким потерям, что неприемлемо в условиях крупнотоннажного производства. Так, например, на Степногорском Химическом заводе для производства антибиотика тилозина использовались ферментеры емкостью 10м3.

Хроматографические методы, которые мы собираемся использовать для разделения и количественного определения антибиотиков, будут рассмотрены в литературном обзоре.

Биотехнологические образцы, которые являются объектами анализа, представляют собой сложные смеси, содержащие компоненты исходной питательной среды и продукты их превращений. Анализ дополнительно усложняется тем, что основой образца, является/ водная матрица, общее содержание органических веществ может достигать 20-30%.

Вследствие этого, непосредственное определение, даже одного компонента в биотехнологическом образце каким-либо спектральным аналитическим методом (спектрофотометрией, флуоресцентной спектроскопией и т.д.) в большинстве случаев, не позволяет получить достоверных результатов. Хроматографические методы, так или иначе, обеспечивают частичное фракционирование образца непосредственно в процессе анализа. Кроме того, при использовании хроматографических методов, как правило, удается добиться разделения и количественного определения компонентов со схожими характеристиками.

Биосинтез антибиотиков является вариантом метаболических процессов, которые протекают в клетке, однако небольшие изменения этих процессов приводят к весьма широкому набору полученных продуктов. Необходимо отметить, что благодаря сравнительно высокой молекулярной массе антибиотиков субстратная специфичность ферментов, участвующих в их биосинтезе, по-видимому, менее строгая, чем в случае других биохимических реакциях. Так, определенный фермент может катализировать одну и ту же реакцию, протекающую на неодинаковых субстратах. При этом один и тот же промежуточный продукт биосинтеза (предшественник) может служить субстратом для нескольких ферментов. Подобное снижение субстратной специфичности приводит к синтезу продуктов, имеющих одинаковую структуру, но различающихся степенью окисления или насыщения определенных фрагментов молекулы. По этой причине антибиотики, как правило, образуются семействами, т.е. один и тот же штамм продуцирует два или несколько антибиотиков, близких друг к другу по структуре и свойствам [2-4].

В настоящее время для анализа антибиотиков используется планарная хроматография - современная тонкослойная хроматография (ТСХ) или высокоэффективная тонкослойная хроматография (ВЭТСХ), высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) и капиллярный электрофорез (КЭ). Выбор того или иного метода определяется конкретной задачей, стоящей перед исследователем [5-8].

Количество научных статей обзорного характера, посвященных непосредственно определению антибиотиков в культуральных жидкостях (КЖ) штаммов-продуцентов, оказалось незначительным. Так, хорошо известный журнал "Analytical Chemistry" выпускает специальные обзорные номера, посвященные аналитической химии, в том числе и хроматографии в конкретных областях исследования (вода, пищевые продукты и т.д.), однако этот перечень не включает биотехнологию. Журнал "Biotechnology. Bioscience and Bioengineering", издаваемый в Японии, в разделе "Analytical

Chemistry" практически не публикует статьи, связанные с определением антибиотиков, а основная масса публикаций по прикладной хроматографии посвящена биомедицинским исследованиям. В частности эту тему охватывает журнал "Journal of Chromatography. Biomedical Applications". В монографии "High Performance Liquid Chromatography in Biotechnology" антибиотикам, аминокислотам, витаминам и нуклеозидам, являющимися основными продуктами биотехнологических производств, уделено мало внимания [9]. Таким образом, возникает некий парадокс - бурно развивающаяся и экономически эффективная отрасль промышленности -микробиологический синтез антибиотиков, аминокислот, нуклеозидов и т.п. -лишена аналитического обеспечения. Возможно, все это обусловлено тем, что основная^ часть биотехнологических разработок выполняется в исследовательских центрах крупных фирм, и применяемые при этом аналитические методы являются "know-how" этих фирм.

Для решения поставленной в работе задачи г - прямого разделения и количественного определения-антибиотиков различных классов - в качестве базового метода нами был выбран метод ВЭТСХ, а ВЭЖХ и КЭ использовали как сравнительные.

На сегодняшний день (согласно публикациям) разработаны методы определения самых разнообразных веществ, в так называемых биомедицинских образцах, однако, при этом не уделялось внимания биотехнологическим образцам' и разработке хроматографических методов анализа, учитывающих их специфику. Особенно это относится к анализу в биотехнологических образцах низкомолекулярных соединений, что и определяет актуальность данной работы.

Цель и задачи исследования: Целью данной работы являлась разработка количественных методов анализа КЖ штаммов - продуцентов антибиотиков разных классов, таких как: тилозин, вирджиниомицин, моеномицин, биалафос и фосфомицин с использованием количественной высокоэффективной тонкослойной хроматографии.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. На основе проведенных исследований подобрать условия для разделения КЖ изучаемых антибиотиков на ВЭТСХ пластинках «Сорбфил»

2. На основе проведенных исследований выбрать оптимальные условия визуализации и параметров детектирования изучаемых антибиотиков

3. Разработать условия для экспресс - анализа КЖ вирджиниомицина, моеномицина и биалафоса методом электроосмотической тонкослойной хроматографии (ЭО-ТСХ)

4. Проверить устойчивость антибиотиков на слое силикагеля в процессе анализа.

5. Определить полноту экскретирования тилозина, вирджиниомицина, биалафоса и фосфомицина из клетки.

6. Обеспечить высокую точность результатов анализа (с погрешностью измерения менее 5,0%, что согласуется с нормативно-технической документацией (HTD), принятой на предприятиях микробиологической промышленности РФ)

Научная новизна

1. Предложены условия анализа для разделения компонентов КЖ штаммов-продуцентов исследованных антибиотиков на отечественных пластинках «Сорбфил». Показана селективность выбранных подвижных фаз для ч

разделения исследуемых аналитов в КЖ.

2. Определены оптимальные условия нанесения обнаруживающих реагентов и проведения цветных реакций на хроматограммах для количественного определения моеномицина, биалафоса и фосфомицина. Показана устойчивость полученных комплексов визуализирующих агентов и антибиотиков во времени.

3. Предложены условия для экспресс - разделения компонентов КЖ штаммов-продуцентов моеномицина, вирджиниомицина и биалафоса методом ЭО-ТСХ. Показано, что, используя метод ЭО-ТСХ и денситометрию можно получить информацию о содержании антибиотика в пробе КЖ в течение 15-35 мин. . 4. Для доказательства устойчивости антибиотиков на слое: силикагеля в процессе: анализа были проведены предвалидационные тесты. Показано, что исследуемые антибиотики, не подвергаются деструкции: в условиях проведения эксперимента, и только моеномицины: устойчивы на? тонких слоях силикагеля в течение 60 мин:

Практическая значимость Разработанные методы были использованы для идентификации и анализа, антибиотиков: тилозина, вирджиниомйцина, моеномицина, биалафоса и фосфомицина.в КЖ промышленных штаммов-продуцентов.

Полученные сведения- о накоплении сопутствующих антибиотикам метаболитов способствуют пониманию путей биосинтеза этих соединений в генетически модифицированных микроорганизмах и позволяют снизить и, сузить уровень накопления этих примесей.

На основе полученных данных о составе и содержании сопутствующих метаболитов могут быть сделаны, прогнозы об «активации» путей биосинтеза целевых продуктов, что позволит оптимизировать процессы селекции и<ферментации соответствующих штаммов-продуцентов.

На защиту выносятся следующие результаты и положения: Г. Разработка методов хроматографического разделения; антибиотиков: тилозина, вирджиниомицина, моеномицина^ биалафоса и, фосфомицина в КЖ (пластинки «еорбфил»). 2: Выбор оптимальных условий проведения цветных реакций при обработке хроматограмм: обнаруживающими реагентами для последующего количественного определения моеномицинов;, биалафоса.и фосфомицина . с помощью денситометрии. 3. Результаты изучения стабильности окрашенных комплексов образованных моеномицином, биалафосом и фосфомицином: (на хр оматогр аммах).

4. Разработка экспресс - методов анализа КЖ вирджиниомицина, моеномицина и биалафоса с помощью ЭО-ТСХ.

5. Результаты количественного определения антибиотиков и сопутствующих им в КЖ примесей промышленных штаммов-продуцентов, полученные с помощью валидированных методик.

Апробация результатов работы Основные результаты работы были представлены на:

- Всероссийском симпозиуме «Хроматография и хроматографические приборы» Научный совет по адсорбции и хроматографии РАН. Москва-Клязьма 14-18 марта 2005 г.;

- Международной школе-конференции посвященной 100-летию со дня рождения С.И. Алиханяна «Генетика микроорганизмов и биотехнология» Москва-Пущино, 15-19 октября 2006 г.;

- Всероссийском симпозиуме «Хроматография в химическом анализе и физикохимических исследованиях» Научный совет по адсорбции и хроматографии РАН. Москва-Клязьма 23-27 апреля 2007 г.;

- Всероссийском симпозиуме «Хроматография и хромато-масс-спектрометрия» Научный совет по адсорбции и хроматографии РАН. Москва-Клязьма 14-18 апреля 2008 г.;

- Международной школе-конференции посвященной 40-летию создания ГосНИИгенетика 21-24 октября 2008 г.

Публикации

Материалы диссертации опубликованы в 2-х статьях и 7-ми тезисах докладов на конференциях и симпозиумах.

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

Заключение диссертации по теме «Хроматография и хроматографические приборы», Антонова, Светлана Владимировна

5. ВЫВОДЫ.

1. Предложены методики количественного определения тилозина, вирджиниомицина, моеномицина, биалафоса и фосфомицина в КЖ штаммов-продуцентов методом количественной ТСХ на пластинках «Сорбфил». Показана возможность их использования для массового анализа этих соединений в КЖ и контроля промышленных процессов.

2. Изучены условия для проведения количественного определения исследованных антибиотиков. Найдены оптимальные условия проведения цветных реакций на хроматограммах и определено время устойчивости интенсивности окраски пятен моеномицина, биалафоса и фосфомицина. Выбраны условия денситометрирования исследованных антибиотиков.

3. Изучена устойчивость антибиотиков на слое силикагеля в процессе анализа. Показано, что исследуемые антибиотики не подвергаются деструкции в условиях проведения эксперимента. Однако отмечено, что моеномицины устойчивы на тонких слоях силикагеля только в течение 60 мин.

4. Предложены методики количественного экспресс - анализа вирджиниомицина, моеномицина и биалафоса в КЖ методом ЭО-ТСХ. Показана возможность анализа этих антибиотиков в КЖ в течение 15-35 мин.

5. Изучена полнота экскретирования макролидов, вирджиниомицинов, биалафоса и фосфинотрицина а также фосфомицина из клетки. Установлено, что исследуемые антибиотики по окончании ферментации полностью экскретируются из клетки в среду.

6. Проведена валидация предложенных нами методик количественного определения исследуемых антибиотиков в КЖ методом количественной ТСХ. Полученные результаты свидетельствуют о пригодности методик для количественного определения исследуемых антибиотиков в КЖ. Показано, что погрешности измерений составляют менее 5,0%

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Антонова, Светлана Владимировна, 2009 год

1. Гейл И. Молекулярные основы действия антибиотиков. // М.: Мир. 1975. 465 с.

2. Овчинников Ю. А., Иванов В. Т., Шкроб А. М. Мембранноактивные комплексоны. //М.: Наука. 1974. 328 с.

3. Франклин Т., Сноу Д. Биохимия антимикробного действия. // М.: Мир. 1984. 432 с.

4. Количественный анализ хроматографическими методами. / Под ред. Кац Э.//М.: Мир. 1990. 313 с.

5. Шаршунова М., Шварц В., Михалец Ч. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии. / Под ред. Березкина В.Г. // М.: Мир. 1980. ч.1. ч.2. 621 с.

6. Hand book on Thin-Layer Chromatography / Ed. Sherma J., Fried. B. // Marcel Dekker Inc. N-Y. 1991. V. 55. 1170 p.

7. Красиков В. Д. Основы планарной хроматографии. // Химиздат. СПб. 2005. 231 с.

8. High Performance Liquid Chromatography- in Biotechnology / Ed. W.S. Hancock. // John Willey and Sons Inc. N-Y. 1990. 564 p.

9. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии. / Под ред. Хенмена. А. // М.: Мир. 1988. с. 649.

10. Hand Book of Thin Layer Chromatography. / ed. by Sherma. J. // Chromatographic Sci. Series. 1996. V. 60. 990 p.

11. Tyihak E., Minksovics E. Trend in overpressured Thin layer chromatography. // J. Planar. Chromatogr. 1991. V. 4. P. 288-294.

12. Fenimore D. C., Davis С. M. HPTLC. // Anal. Chem. 1998. V. 53. P. 253260.

13. Planar Chromatography. Modern Thin-Layer Chromatography. // Camag. Muttenz. 2008. 56 p.

14. Grinberg N. G. Modern Thin-Layer Chromatography. // Marcel Dekker. London. N-Y. 1990.490 р.15. FDA. Bull.//1994. 546 р.

15. Camag Bibliogr. Service. // 1981. N. 2. P. 2-5.

16. Руководство по капиллярному электрофорезу. / Под ред. Волощука А. М. // М.: ЦНИИТЭИ полиграфия. 1996. 231 с.

17. Analytical Capillary Electrophoresis and HPLC in Biotechnology / ed. by Horvat C. // Marcel Dekker. N-Y. 1995. 474 p.

18. Capillary Electrophoresis: Theory and Practice. / ed. by P. Camillen // CRC Press. Boca Raton. Fl. 1993. 371 p.

19. David K. Lloyd. Capillary electrophoretic analyses of drugs. //J. Chromatogr.1. A. 735. 1996. P.29-42.21. ТУ 26-11-17-89.

20. Тяглов Б.В., Дегтерев E.B., Малахова И.И., Красиков В.Д., Помазанов

21. B.В. Способ, разделения аминокислот в биологических жидкостях // Патент РФ №2078342. 1997.

22. Camag Bibliography Service // Camag CD-ROM disk. Version 108. 2005.

23. Оборудование для ТСХ. // Каталог НТЦ «Ленхром». Санкт-Петербург. 2009. (http://www.lenchrom.spb.ru').27. «Merck». Catalog 2007-2008. // Merck. Darmstadt. 2008.

24. Baner К., Gros L., Saurev W. Thin-Layer Chromatography. // Merck. Huthig Buch. Verlag. Gmb. H. Haidelberg. 1991. 166 p.

25. Jost W., Michali H., Herbert H., Sorbent won DC und HPTLC chromatographia // GIT Fuchz. Lab. 30. 1991. P. 307-313.

26. Малахова И. И. Количественная высокоэффективная тонкослойная хроматография аминокислот. // Диссертация на соискание ученой степени кандидата химических наук. Санкт-Петербург. 2003. 165 с.

27. Frey H., Zeeloff К., Quantitative Dunnschicht-Chromatographie. // VCH. Weinheim. 1992. 420 p.

28. РФ Патент № 1736541. 1993.

29. Degterev E. V., Tyaglov В. V., Malakhova I. I., Krasikov V. D. Quantitative analysis of L-tryptophan in fermentation broth // J. Planar Chromatogr. V. 13. 2000. P. 194-199.

30. Degterev E. V., Tyaglov В. V., Malakhova I. I., Krasikov V. D. Quantitative analysis of L-lysine, L-threonine, L-homoserine and cobalamines in fermentation broth. // J. Planar. Chromatogr. V. 13. 2000. P. 217-220.

31. Degterev E. V., Tyaglov В. V., Malakhova I. I., Krasikov V. D. Quantitative analysis of L-serine in cultural fluids. // J. Planar. Chromatogr. V. 13. 2002. P. 197-204.

32. Chmel K. Einflub der geschichte des kieselgel in der D. C. // J. Chromatogr. V. 97. 1974. P. 131-140.

33. Toushstone J. C. Practice of Thin-Layer Chromatography. // John Willey and Sons. N-Y. 1992. 270 p.

34. Kowalik G., Rogosz K., Kowalska T. Separation of ethanolamine esters // J.Assoc. Off. Anal. Chem. V. 82. 1999. P. 297-305.

35. Hauclc H. E., Jost W. Packing and Stationary Phases in Chromatographic Techniques. // Marcel Dekker. N-Y. 1990. 251 p.

36. Hauck H. E., Jost W. RP-stationary phases // Chromatographic. V. 27. 1986. P. 3-12.41. «Macherey-Nagel». Catalog. //Macherey-Nagel. Duren. 1997. 105 p.

37. Хроматография в тонких слоях. / Под ред. Шталя Э. // М.: Мир. 1965. 508с.

38. Junchen D. Thin-Layer Chromatography. // Camag. Muttenz. 1988. 247 p.

39. Trappe W. // Biochem Z. V. 305. 1940. P. 150.

40. Snyder L. R. Classification of the solvent properties // J. Chromatogr. Sci. V. 16. 1978. P. 223.

41. Saunders D. L., Snyder L. R. // Anal. Chem. V. 46. 1984. P. 470-480.

42. Meger V. R. Praxis der Hochdruskflussigkeits-Chromatographie. // Frankfurt. 1988.360 s.48. «Camag» http://www.camag.com.

43. Nyiredy S. Z., Evdelmeier C. A., Meier B. TLC mobile phase optimization procedure using the "PRIZMA" model. // Planta Med. 1985. P. 241-252.

44. Chrom Book 2004. // Merck. Darmstadt. 2004. 187 p.

45. Treiber L. R. Quantitative TLC and its Industrial Application. // Marcel Dekker. N-Y. 1987. 370 p.

46. Jork H., Winner H. Quantitative Auswertung von Dunnschicht-Chromatographie. // GIT Verlag. Darmstadt. 1985. 140 s.

47. Государственная фармакопея СССР. XI-e изд. // M.: Медицина. 1987. Вып. 1. 334 с.

48. Jork Н., Funk W., Fisher W., Wimmer H. Thin-Layer Chromatography. Reagents and Detection Methods. // VCH. Verlag .Weinheim. 1990. 464 p.

49. Postaire E., Sarbuch C., Regnault C. New method of derivatization by overpressure derivatization system // J. Planar Chromatogr. V. 3. 1990. P. 247-252.

50. Материалы и оборудование для ТСХ. // Каталог ЗАО «Сорбполимер». Краснодар. 2009. 46 с. (http://www.sorbfil.com).

51. High Speed TLC-scanner «Shimadzu CS-920». // Shimadzu. Kioto. 1983. 48 P

52. Kreuzig F. // Chromatographia. V. 13. 1980. 238-246.

53. Kreuzig F. //J. Chromatogr. V. 142. 1977. P. 441-447.

54. Tyaglov В. V., Sizova I. A., Zvenigorodskii V. I., Quantitative chromatographic determination of moenomycin antibiotics. // J. Planar Chromatogr. V. 10. 1997. P. 200-204.

55. Pachaly P., Dunnschicht-Chromatographie inder Apotheke. // Wissenschaftlich Veriagsges. Gmb.H. Stuttgart. 1995. 450 s.

56. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография. // M.: Мир. Т. 1. 1981. 640 с.

57. Ахрем А. А., Кузнецова А. И. Тонкослойная хроматография. // М.:1. Наука. 1964. С. 71-124.

58. Instrumental Thin-Layer Chromatography / ed. By D. Janchen. // Camag. Muttenz. 1983. P. 54.

59. Jork H. // Dtsch. Apoth. Ztg. V. 102. 1967. P. 1263.

60. Jork H. // J. Pharmac. Belg. 1963. P. 213-219.

61. Camag Bibliogr. Service. // Camag. 1998. V. 81. P. 2-3.

62. Крешков А. П. Основы аналитической химии. // M.: Химия. 1965. 414 с.

63. Kubelka P., Munk М., Techn Z. // Phys. 193l.V. 12. P. 539.

64. Kortum G. Reflectionsspectroschie. // Spinger Verlag. Berlin. 1969. P. 414.

65. Camag TLC-Scanner III. // Camag. Muttenz. 2000.

66. Тяглов Б. В., Тарасов А. П., Дегтерев Е. В., Крылов В. М., Новицкий А. П., Полубенцева М. И., Малахова- И. И., Красиков В. Д. Видеоденситометр "Денсискан-1" для количественной тонкослойной хроматографии. // Биотехнология. 1992. N. 5. С. 44-47.

67. Ford Т. S., Radin N. S., Quantitation of thin-layer chromatograms with an Apple II computer based video-densitometer.7/ Anal. Biochem. 1985. V. 150. P. 359-363.

68. Pongor S. Iligh-speed video-densitometry principles and applications. // J. Liquid Chromatogr. V. 5. 1982. P. 1583-1595.

69. Lenkeyi В., Csanyi J., Nanasi P. Rapid determination of sucrose and fructose in biological samples by video densitometry. // J. Liquid. Chromatogr. 1986. V. 9. P. 1869-1875.

70. Papp S., Toth E., Polak B. Polyamine analysis in series of samples by OPLC. // Proceedings of International Symposium on TLC with special Emphasis on OPLC. Szeged. Hungary. 1984. P. 67.L

71. Proceedings of 8 International Symposium on Instrumental Planar Chromatography. //Interlaken. Swizerland. Exibition Section. 5-7 April 1995.

72. Полубенцева M. И., Иванов К. В., Новицкий А. П. Особенности алгоритмов обмера, используемых в компьютерном видеоденситометре "ДенСкан-04". // Материалы 2ой школы-семинара "Количественная

73. ВЭТСХ. Проблемы и их решения". 25-26 февраля 2002. Санкт-Петербург. С. 9-17.79. http://www. i-m.de

74. Ebel S. The chromatographic uncertainly principles. // Chromatographia. 1987. V. 20. P. 123-134.

75. Руководство по современной тонкослойной хроматографии. / Под ред. Ларионова О. Г. // Москва. 1994. С. 180.

76. R.L.M Synge. Disc Faraday Soc. 1949. №7. P. 164.

77. Ролдугин В.И. Химическая энциклопедия. Т. 5. // Изд-во Большая Российская энциклопедия. М.: 1998. Под ред. Зефирова. Н.С. С.847.

78. Nurok D., Frost М.С., Chenoweth D.M. // J. Chromatographya. 2000. V. 903. P. 211.

79. KnoxJ.H, Grant J.H.// Chromatographia. 1987. V.24. P.135.

80. Melanson J.E., Baryla N.E., Lucy C.A. // Trends in analytical chemistry. 2001. V.20. P. 365.

81. Духин С.С. Электропроводность и электрокинетические свойства дисперсных систем. // 1975.

82. Дамаскин Б., Петрий О. Введение в электрохимическую кинетику. // М.: Высшая школа. 1983.

83. Stol R., Рорре II., Kok W.T. // Analytical Chemistry. 2003. V. 75. Р.5246.

84. Kaiser R. E. Simple and Instrumentalized High Perfomance Planar Chromatography. // HFC-Hyper Card Course-Paper Version. I.F.E.A.R. Bad Duerkheim. 1996. 157 p.

85. Ebel S., Glaser E. // J. High. Resolut. Chromatogr. Commun. 1979. V. 2. P. 36-48.

86. Kaiser R. E. Instrumental HPTLC. // Huthing. Heidelber. 1980. P. 179.

87. Либ Г., Шенигер В. Синтез органических препаратов из малых количеств веществ. // М.-Л.: Госхимиздат. 1957. 267 с.

88. Hamill R. L. //Antibiot. Chemotherapy. 1961. V.l 1. N 5. P. 328-340.

89. Whaley H. A., Patterson E. L., Dorubush A. C. // Antimicrobial Agents

90. Chemotherapy. 1963. V. 5. N 1. P. 45 48.

91. Аксенова И. А. Тилозин. Производство и применение продуктов микробиологических производств. Обзор. Информ. // М.: ВНИИСЭНТИ Минмедбиопрома СССР. 1988. Вып. 2. С. 8-17.

92. Тяглов Б. В., Жданов В. Г. // Биотехнология. 1988. №4.С. 548.98. ТУ СССР №59102-76.

93. US Patent N. 3 674 866. 1972.

94. ЮО.Моррисон Р., Бойд Р. Органическая химия. // М.: Мир. 1974. С.842-843.изменить

95. Балушкин А. О. Новые варианты электроосмотической тонкослойной хроматографии. // Дисс. канд. хим. наук. Москва. 2005. 139 с.

96. Мультихром. Система для сбора и обработки хроматографических данных. Руководство пользователя. // Амперсенд. 2007.

97. WinCats. Planar Chromatography Manager. // CD. Camag. Version 1.4.2.

98. Дмитриева B.C. Расчет биологической активности антибиотиков и концентрации витамина В12 с применением таблиц.//Центральное бюро технической информации. М. 1958.

99. Waters 2695. Separations Module. Quick Stared Guide. // Waters. 54 p.

100. Empower PDA Softweare. Getting Started Guide. // Waters. 136 p.

101. Aligent Capillary Electrophoresis System/ User Guide. // Aligent Technology. 2000. 270 p.

102. Aligent ChemStation. Understanding Your ChemStation. // Aligent Technology. 2003. 290 p.109. "Microcon". Centrifugal Filter Devices. Manual Instruction.

103. Baltz R.H., Seno E.T., Genetics of Streptomyces fradiae and tylosin biosynthesis.//Ann. Rev. Microbiol. 1988. V.42. P. 547-574.

104. Ш.Донев Д. Тилозин. // Изд-во Института по контролю ветеринарных препаратов. София. 2006.48 с.

105. Biot А. // Biotechnology of Industrial Antibiotics. /Ed.: E.J. VanDamme // Marcel Dekker. N-Y. 1984. 720 p.

106. Baltz R.H., Stonesifer J. Phenotypic changes associated with loss of expression of tylosin biosynthesis. // J. Antibiot. 1985. V. 38. P. 12261236.

107. Baltz R.H., Seno E.T., Wild G. M. Genetic and biochemistry of Tylosin production. // J. Antibiot. 1993. V. 46. P. 131-140.

108. Confino M., Varzharova M. Thin-layer chromatographic analysis of products containing tylosine. // Proc. 6th Int. Symp. Instrum. Planar Chromatogr. Interlaken., Inst. Chromatogr., Bad Dtirkheim, FRG, 1991. P. 57 -59.

109. Vega M., Geshe E., Garcia G., Saelzer R. Screening of antibiotic residues in poultry meat. // J. Planar Chromatogr. 1990. V.3 P. 437-438.

110. Markakis P.K., Microbiological method for determining macrolides in animal feeds in the presence of other drugs by thin-layer chromatography detection. // Assoc. Off. Anal. Chem. 1996. V.79. P. 1263-1268.

111. Gafner J.L. Identification and semiquantitative estimation of antibiotics added to complete feeds, premixes, and concentrates. // J. Assoc. Off. Anal. Chem. 1999. V. 82. P. 1 8.

112. Roets E., Quintens I., Kibaya R., Hoogmartens J. Quantitative determination of olaquindox in animal feed. // J. Planar Chromatogr. 2001. V.14. P. 347349.

113. Nowakowska J., Halkiewicz J., Lukasiak J. W. The retention behavior of selected macrocyclic antibiotics on polyamide TLC plates. // J. Planar Chromatogr. 2001. V.14 P. 350-354.

114. Nowakowska J. Analysis of selected macrocyclic antibiotics by HPTLC with non-aqueous binary mobile phases. // J. Planar Chromatogr. 2004. V.17. P. 200-206.

115. Nowalcowslca J. Normal and reversed-phase TLC separation of some macrcyclic antibiotics with non-aqueous mobile phases. // J. Planar Chromatogr. 2005. V.18. P. 455-459.

116. Gray P, P., Bhuwapathanapun S. The use of recombinant DNA techniques to study tylosin biosinthesis. // Biotechnol. Bioerig. 1980. V. 22. N 9. P.1785-1804.

117. Видеоденситометр «ДенСкан 2». Техническое описание. // Ленинград. НТЦ «Ленхром». 1991.471 с.

118. GDS 8000 System. Manual Instruction. // Polo Alto. California. USA. 2000. 120p.

119. Хроматография. Практическое приложение метода. / Под ред. Хефтмана Э.//М.: Мир. 1986. 350 с.

120. Тяглов Б. В., Антонова С.В., Чурбанов В. Г. Горизонты биотехнологии // Материалы Всесоюзной конференции. Степногорск. Изд-во ПО «Прогресс». 19-23 июня 1991. С. 220.

121. Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках // М.: Изд-во МГУ. 1994. 500 с.

122. Huber G. Antibiotics./ Ed. Hahn F.E. // Sprinder. Verlag. Berlin. 1989. 284 p.

123. Патент НРБ N. 20697. МКИ. С. 12. d. 9Л6. // Бюл. Открытия. Изобретения. 1975. №6.

124. US Patent N. 2137201. А. 1984.

125. Макухина А. М. Производство и применение тилозина для ветеринарных целей. Обзорн. информ. Cep.VI. //М.: Главмикробиопром. 1984. С. 19-26.

126. Коренман И. М. Экстракция в анализе органических веществ. // М.: Химия. 1977. С. 38-60.

127. Островский М. В., Этингов Е. Д. Изучение условий равновесия при экстракции олеандомицина. // Антибиотики. 1977. № 7. С. 588-589.

128. Медведева В. И., Жуковская С. А., Жарова Н. И. Изучение распределения олеандомицина между нативным раствором и бутилацетатом в зависимости от условий биосинтеза. // Антибиотики. 1978. № 12. С. 1073-1079.

129. Ныс П. С. Равновесное распределение слабых электролитов в системе органический растворитель вода. // Антибиотики. 1978. № 6. С. 493499.

130. Евр. Патент N. 0045157. МКИ. С. 07. Н. 17/08. 1982.

131. US Patent N. 4362881. МКИ С. 07. D. 313/00. 1984.

132. Васильева Луканова Б., Атанасова Т.//Химия и индустрия (НРБ). 1980. Т. 52. № 7. С. 290 - 291, 300 - 302.

133. А. С. СССР №1119343. 1982.

134. ЧССР. Патент. N. 214350. 1984.

135. Sommer. P. A premeimnary report of antibiotic N899 a streptogramin-like substance. //Antibiot. Chemother. 1955. V. 5. P. 632-639.

136. Crooy P., De Keys R. Preparation and properties of derivatives of virginiamycins. // J. Antibiotics. 1972. V. 25. P. 371-376.

137. Boon B.and Devart R. Metods for identification and assay of virginiomycin in animal feeds. //Analyst, 1974. V. 99. P. 19-27.

138. US Patent 3.325.359. 1967.

139. Deutshes Patentschrift. N 1.061.482. 1969.

140. Deutshes Patentschrift. N 1.066.706. 1970.

141. Nowakowska J., Lukasiak W., Hakiewicz J. Determination of' virdginiamycine in premixes. // J. Planar Chromatogr. 2005. V. 18. P. 350354.

142. Gossel F., Bline P., Biot. A. HPLC determination virdginiomycin in stafac, premixes and animal feeds. //Analyst. 1991. V. 116. P. 1373-1379.

143. Cocito C., Kaji A., Virdginiamycin Ml inhibitor of acceptor site of ribosoms. //Biochemie. 1971, V.33. P. 763-769.

144. Kingshan P., Kolpak M., Le Fevre J.J. Biosynthesis of antibiotics of virdginiomycin family. //Am. Chem. Soe. 1983. V.105, P. 5106-5114.

145. Sato K., Shida Y., Hakazawa H. Isolation of virdginiamycine Ml by dropletcounter-current chromatography. // J. Chromatogr. 1988. V.454, P. 387-394.

146. Van der Haeghe H., Parametiev G.J. Structure of factor S of staphylomycin. // Am. Chem. Soe. 1960. V. 82. P. 4414-4420.

147. Sharma N.K., Bogten N., Auteunis M.J. Izolation of factor M and factor S from acommerical feed additive formulation. // Bull. Soc. Chim. Belg. 1988. V.97. N3, P. 185-192.

148. US Patent. N.4.762.923. 1988.

149. Флавомицин. Временное наставление по применению. // Hoechst. B.R.D. 1995. 15 р.

150. Van Heijenoort J., Derrien M. Spaltung von Moenomycine A. // FEBS Lett. 1978. V. 89. P. 141-146.

151. Weizel P. Vevfahren zur herstellug von hydriertem moenomycin // Angew Chim. 1981. V. 93. P 130-141.

152. WeizelW.//Angew Chem. 1981. V. 93. P 130-141.

153. BDR Patentschrift N 1.235.726. 1977.164. НРБ Патент,N 31014. 1981.

154. Welzel P., Kunisch W., Shulbert Т., Muller'D. Moenomycin A. Structural studies and preparation of simple derivatius. // Tetrachedron. 1993. V. 39. P. 1583-1591.

155. US Patent N 3.439.597. 1975.

156. US Patent N3.563.497. 1977.

157. Welzel P., Witteler F., Muller D. Moenomycin A. Spaltung des antibiotikums mit trisluoressigasure -2-propanol. // Tetrachedron. 1992. V. 38. P. 97-104.

158. Welzel P., Muller D., Remer W. Structure of antibiotic Moenomycin A. // Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1981. V. 20. P. 121-123.

159. BDRPatentschriftN 478.239. 1969.

160. Welzel P., Witteler F., Hermsdorf L. Die ringgrosse das Galacturosaure-bausteins im antibiotikum moenomycin A. // Tetrachedron. 1994. V. 40. P. 113-125.

161. USSR Patent N 193.518. 1982.

162. US Patent N3.674.866. 1979.

163. Postaire E., Sarbuch C., Regnault C. New method of derivatization by overpressure derivatization system. // J. Planar Chromatogr. 1990. V. 3. P. 247-252.

164. Kondo Y., Shamura Т., Ogawa J. // Science Reports of Meiji Seika Kaisha (Japan). 1973. V. 13. P. 34-41.

165. Ogawa Y., Tsuruka Т., Inouye S. // Science Reports of Meiji Seika Kaisha (Japan). 1973. V. 13. P. 42-48

166. Кабачник М.И., Шальнев Ю.Б., Промоненков B.K. и др. Методы получения и биологическая активность фосфинотрицина и его производных // Итоги науки и техники. Органическая химия. 1989. Т. 8. С. 110-142.

167. Anzai Н., Murakami Т., Imai S. Transcriptional regulation of bialaphos biosynthesis in Streptomyces hygroscopicus. // J. Bacteriol. 1987. V. 169. N. 8. P. 3482-3488.

168. Bayer E., Gugel K.N., Haegele K. et al. Metabolic products of microorganisms. Phosphinothricin and phosphinothricylalanyine // Helv. Chim. Acta. 1972. V. 55. P. 224-239.

169. Ogawa Y., Joshida H. New antibiotic SF-1293. IV. Total synthesis of antibiotic SF-1293 // Meiji Seika Kenkyu Nempo. 1973. V. 13. P. 54-59.

170. Suzuki A., Tsuruoka Т., Mizutani K. New synthesis of 2-amino-4-hydroxy-4-(methylphosphinoyl) butyric acid and some analogs // Meiji Seika Kenkyu Hempo. 1981. N. 20. P. 33-38.

171. Заявка 3544375 ФРГ. MICH A 0 I N 57/20.

172. Заявка 3544376 ФРГ. МКИ A 0 IN 57/20.

173. Natchev J. Total synthesis and enzyme substrate interaction of D-, DL-and L-phosphinotricine, "Bialophos" (SF-1293) and Its cyclic analogues // Soc. Perkin Trans I. 1989. V. 1. P. 125-131.

174. Заявка 2236599 ФРГ. МКИ С 07 F 9/30.

175. Пат. 3832394 США. МКИ С 07 F.

176. Sadaaki М.М. Herbiace (mw-801, BF-1293). Common name: bialaphos. A new herbicide // Jap. Pest. Inform. 1984. N 45.P. 27-30.

177. Masakadzu I. Meiji herbiace // Chem. and Chem. Ind. 1985. V. 38, N. 7. P. 562-564.

178. Murakami Т., Anzai H., Imai S. The bialaphos biosynthesis genes of Streptomyces hygroscopicus molekylar cloning and characterization of the gene chister. // Mol. Gen. Genet. 1966. V. 205. P. 42-50.

179. Промоненков В.К., Коваленко Л.В., Шальнев Ю.Б. Фосфинотрицин. // Обзор, инф. Сер. Химические средства защиты растений. М.: НИИТЭБШ. 1987.

180. Freund R.K., Croor S.L. Antagonist activity of Phosphorus-containing glutamate analogs in the perforant path. //Brain Herb. 1984. V.291. P. 150153.

181. Пат. 2147291 Франции. МКИ С 07F 9/00.

182. Пат. 1356723 Великобритании. НКИ С 2А'.

183. Пат. 975317 Канады. НКИ С 2А.

184. Camag Bibliogr. Service. 1993. V. 76. P. 11.

185. Sherma J. Thin-layer chromatography. // Anal. Chem. 1988.V.60. P.74R-98R.

186. Poole C.F. Recent advances in chromatography. // Anal. Chem. Acta. 1989. V. 216. P. 109-145.

187. Planar Chromatography 2002. Modern Thin-Layer Chromatography. // Camag. Muttenz. 2002. 40 p.

188. Lautie J.P., Stankovie V. Automated multiple development TLC of phenylurea herbicides in plant. // J. Planar Chromatogr. 1996. V.9. P.113-116.

189. Matysik G., Wojtasik E. Automated multiple development HPTLC analysis of Frantgula Authraguinones. // J. Planar Chromatogr. 1994. V. 7. P. 34-38.

190. Krasikov V. D., Malakhova I. I., Degterev E.V., Tyaglov B.V. Planar chromatography of indastrial amino acids. // J. Planar Chromatogr. 2004. V. 17. P. 113-121.

191. Bhushan R. Amino acids and their derivatives. Hand Book of Thin-Layer Chromatography. / Ed: Sherma J., Fried B. // Chromatographic Sci. Series. N-Y. 1991. V. 55. P. 353-387.

192. Dammertz W., Renger В. Validation and quality assurance in planar chromatography. // Proceedings of the International Symposium on Planar Chromatography Separation «Planar Chromatography 2002». May 11-13 2002. Heviz. Hungary. P. 11-16.

193. Ferencz-Fodor K., Vegh Z., Renger В., Zeller M. Validation and quality assurance of planar chromatographic procedures in pharmaceutical analysis. // J. Assoc. Off. Anal. Chem. 2001. V. 84. P. 1265-1276.

194. Ebel S. The chromatographic uncertainly principles. // Chromatographia. 1987. V. 20. P. 123-134.

195. Даванков B.A. , Наврашил Дж., Уолтон X., Лигандообменная хроматография. // М.: Мир. 1989. 427 с.

196. Gruska Е., Levin S., Gilon С. Separation of amino acids on reversed-phase columns as their cooper (II) complexes. // J. Chromatogr. 1982. V.235. P. 401-413.

197. Cande M., Foucault A. Ligand exchange chromatography of amino acids on cooper (II) modified silica gel with ultraviolet spectrophotometric detection at 210 nm. //Anal. Chem. 1979. V. 51. P. 459-467.

198. Foncault A., Roset R. Ligan exchange chromatography on cooper (II) modified silica gel- improvements and use for screening of protein hydrolyzates andquantitation of dipeptides and amino acids. // J. Chromatogr. 1984. V. 317. P. 41-49.

199. Федорова A. M., Музыченко Л. А. Селективное определение аминокислот методом обращенофазовой ВЭЖХ. // Сб. Микробиологическая промышленность. Отечественный передовой опыт. 1988. Вып. 10. С. 9-13.

200. Демина Н. Г., Румянцева Н. Ф., Полануер Б. М., Шолин А. Ф. Влияние температуры, рН и солевого состава на стабильность глутамина в модельных растворах.//Биотехнология. Г992. N. 1. С. 53-55.

201. Gunetileke K.G., Anwar R.A. Studies on the biosynthesis of fosfomycin. //J. Biol. Chem. 1968. V.243. P.5570-5576.

202. Машковский М.Д. Лекарственные вещества. // M.: Новая волна. 2008. 1206 с.

203. US Patent. N. 4.222.970.1980.

204. Jap Patent. N. 4148692. 1992.

205. Itoh N., Kusaka M., Hirota T. Microbial production of antibitic fosfomycin by a stereoselective epoxidation and its formation mechanism. // J. Appl. Microbiol. Biotechnol. 1995. V.43. P.394-401.

206. Aisaka К., Ohshiro Т., Uwajima Т. Optimum culture conditions of cis-propenylphosphonate to fosfomycin by Cellvibrio gilvus. // J. Appl. Microbiol. Biotechnol. 1992. V.36. P.431 -435.

207. Jap Patent. N. 01037296. 1989.

208. US Patent. N. 3.639.590. 1972.

209. US Patent. N. 3.914.231. 1975.

210. Rogers Т.О., Birnbaum J. Biosynthesis of fosfomycin by Streptomyces fradiae. //J. Antimicrob. Agents Chemother. 1974. V.5. P. 121 132.

211. Seto H., Hidaka Т., Kuzuyama T. Studies on the biosynthesis of fosfomycin. 2. Conversion of 2-hydroxypropyl-phosphonic acid to fosfomycin by blocked mutants of Streptomyces wedmorensis. // J. Antibiot. 1991. V.44. P.1286 -1288.

212. Kuzuyama Т., Hidaka Т., Kamigiri K. Studies on the biosynthesis of fosfomycin. 4. The biosynthetic origin of the methyl group of fosfomycin. // J. Antibiot. 1992. V.45. P.1812 1814.

213. Kuzuyama Т., Hidaka Т., Imai S. Studies on the biosynthesis of fosfomycin. 5. Cloning of genes for fosfomycin biosynthesis. // J. Antibiot. 1993. V.46. P.1478 —1480.

214. Hidaka Т., Goda M., Kuzuyama T. Cloning and nucleotide sequence of fosfomycin biosynthetic genes of Streptomyces wedmorensis. // J. Mol. Gen. Genet. 1995. V.249. P.274 280.

215. Hidaka Т., Kuzuyama Т., Seto H. Studies on the biosynthesis of fosfomycin. // J. Actinomycetol. 1994. V.8. P.41 46.

216. Seto H., Kuzuyama T. Bioactive natural products with carbon-phosphorus bonds and their biosynthesis. // J. Nat. Prod. Rep. 1999. V.16. P.589 586.

217. Kuzuyama T. Fosfomycin biosynthesis and self-resistance mechanism of theproducing organism Streptomyces wedmorensis.//J. Actinomycetol. 1998. V.12. P.71 -74.

218. Shafer H., Vandenheuvel W.J., Ormond A.R. Characterization of phosphonomycin by microchromatographic and related techniques. // J. Chromatogr. 1970. V.52. P.lll-117.

219. Junichi Shoji, Toshiyuki Kato, Hiroshi Hinoo. Production of fosfomycin (phosphonomycin) by Pseudomonas Syringae. // J. Antibiot. 1986. V.34. P.1011-1012.

220. Chromatography of antibiotics. / Ed. Wagman G.H., Weinstein M.J. // N-Y. Amsterdam. Oxford. Elsevier. 1984. 504 p.

221. European Pharmacopea. 2000. T.4. P.268.

222. Gazzani G., Stoppini G., Gandini C. Determination of fosfomycin in biological fluids by capillary electrophoresis. //J. Chromatogr. 1992. V.609. P.391-394.

223. Bilted A., Panneti G. Determination of fosfomycin in chicken plasma by liquid chromatography. // J. Chromatogr. 1993. V.36. P.311-316

224. Aisaka K., Ohshiro Т., Uwajima T. Optimum culture conditions of cis-propenylphosphonate to fosfomycin by Cellvibrio gilvus. // J. Appl. Microbiol. Biotechnol. 1992. V.36. P.431 -435.

225. Life Science Catalogue 2002-2003. Millipore. // Millipore Corporation. Bedford. USA. 2003.256 р.

226. Analytical Capillary Electrophoresis and HPLC in Biotechnology / Ed: C. Horvat. // M. Dekker N-Y. 1995. 474 p.

227. Arbige M.V., Bulthius B.A., Schults J. Bacillus subtilis and other gram-positive bacteria: biochemistry, physiology and molecular genetics. // American Society for Microbiology. Washington. D.C. 1993. P.871-895.

228. Baillet A., Pianetti G.A. Fosfomycin determination in serum by capillary zone electrophoresis with indirect UV detection. // J. Chromatogr. 1993. V.616. P.311-316.

229. Foret F., Fanali S., Ossicini L. Indirect photometric detection in capillary zoneelectrophoresis. // J. Chromatogr. 1989. V. 470. P.299-308.

230. Pianetti G.A. Determination of alkylphosphonic acids by capillaiy zone electrophoresis using indirect UV detection.// J. Chromatogr. 1993. V.630. P.371-377.

231. Mercier J. P., Morin Ph., Dreux M. Capillary electrophoresis separation of alkylphosphonic acid monoesters with indirect ultraviolet detection.// J. Chromatogr. A. 1997. V. 779. P.245-252.

232. Shihabi Z.K. Therapeutic drug monitoring by capillary electrophoresis.// J. Chromatogr. A. 1998. V. 807. P.27-36.

233. Min-Jie Xie, Yu-Qi Feng, Shi-Lu Da. Capillary electrophoresis and open tubular capillary electrochromatography using a magnesia zirconium coated capillary. // J. Analytica Chimica Acta. 2001. V. 428. P.255-263.

234. Leveque D., Gallion C., Tacral E. Determination of fosfomycin in biological fluids by capillary electrophoresis.// J. Chromatogr. B. 1994. V. 655. P.320-324.

235. Stewart G. H. Evaporation in TLC // J. Chromatogr. Sci. 1970. V. 8. P. 129141.

236. Krans L., Koch A. Dunncshicht-Chromatographie. //Springer. Verlag. N-Y. London. 1996. 205 s.

237. Sun S. W., Fabry H., Maillols H. Test procedure validation for the TLC assay of degradation products in pharmaceutical formulation // J. Liquid Chromatogr. 1994. V. 17. P. 2495-2509.

238. Lazaric К., Cucek В., Faus G. HPTLC method for determination of parabens. Stability test//J. Planar Chromatogr. 1999.V. 12. P. 86-89.

239. Renger B. Quantitative planar chromatography as a tool in pharmaceutical analysis // J. Assoc. Off. Anal. Chem. 1993.V, 76. P. 7-15.

240. Gunetileke K.G., Anwar R.A. Studies on the biosynthesis of fosfomycin. //J. Biol. Chem:; 1968. V.243. P.5570-5576.

241. Марков В. JI., Варшавский А. Е. Наука и высокие технологии в России на рубеже третьего тысячелетия. // М.: Наука. 2001. 635 с.