Клинико-патогенетическое значение полиморфизма генов цитокинов и индуцибельной синтазы оксида азота у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом в Республике Башкортостан тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.10, кандидат медицинских наук Хабелова, Тамара Александровна

• Хабелова, Тамара Александровна
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Хабелова, Тамара Александровна

введение.

Глада 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ i. i современные аспекты изучения патогенеза глпс,,.,,— ii

1.2. Роль иммунных il иммунопатологических реакций в патогенезе

1,3 Молекулярно-геиетнчсскне аспекты ГЛПС. u.i поиггне генетического полиморфизма.

1 -3.2- гены гилиного комплекса гистосоичеетимостк (мнс).

1.3.3, гены шгпжинсм.,.,„„„,,,

1.3.4, Ген нидуцибслыюй синтезы окенла атотл.,.

глава материалы и методы исследования

2.1 объем исследований.-.

2-3. методы исследования.—

2,3.f. Выделение геномной ДНК—„„„.„.„.-.,.—

2.3.2. поличераэная цепиая реакция синтеза дик.

2j.3. рсетрикинонный анализ.,.».

2-3-4- метод зляегрофореза а палиакриламнднон геле.

2.3.5, стимспгкспм обрвбоги получении* результатов.

глава 3. k'jiiíhhko-эпидемиологическая характеристика глпс в рб<.,„„.

3.1, отшемно.тогнческие особенности глпс и республике башкортостан.

3.2. клшнко-лабораторная характеристика больных глпс.

глава 4. исследование полиморфизма генов цнтокинов у больных глпс и сбронегативных доноров из рб 76 4.1. клнкнко-генетическнй аналш ассоциаций полиморфного io-vycj

SlfSÇ -A гена фактора искрой опухоли ( гш) у больных глпс.

4.2 клнмнко-гакпгчсскил анализ ассоциаций полиморфного лок>сд -si /с* г гена нитсрлсйкина 1 ß [/lib} у больных глпс.

4.3. клкннко-гнктцческий «нолю ксмшаикЯ полиморфного локус* 3953£>г гена и нтерл ейкшга l^flij)y больных глпс. %

4.4. кяиннко-псистичмкий анализ жспцнямнн сочетали»! полиморфных докусоиSHOTи jwjorreih ILIBy бальных глпс.

4.5- клннико-генетический анализ ассоциаций vntr полиморфизма i ска a» i мониста рецептора нитержяжннй iß ili.!R.-H у больных глпс.„.

4.6. клинико-геиетачсский анализ комбинаций полиморфных до кус о-в паю» //, fß и iL IRA у больных глпс.

глава 5 исследовании STR-Íюлиморфизма гена индуциьелы юн синтазы оксида азота (NOS2A) у больных глпс и серонегатиэ1üix доноров из рб.—

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-патогенетическое значение полиморфизма генов цитокинов и индуцибельной синтазы оксида азота у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом в Республике Башкортостан»

Актуальное! к проблемы геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (глпс) представляет серьезную проблему a связи с широким распространением природных очагов, тяжестью болезни, недостаточностью ршрабоштшс методов специфической терапии и профилактики. в мире ежегодно с диагнозом «глпс» roe питали j нрустся около 200 тыс. человек, легальность составляет q.s~i5% (и, 36. 37). на территории республики башкортостан (рб) расположен одни in самих крупных к активных очагов глпс. ежстодно в рб заболевает глпс от 1,5 до тысячи человек, чго сосга&ляег 40-60% заболеваемости по российской федерации (14. за, 73], ьолекут преимущественно ли un молодого, тру дос i ioc c>6jk> го возраста, что наносит значительный социальный и экономический ущерб. несмотра на длительную историю тучеин* глпс, патогенетические механизмы »болеезди* остаются до конца неясными, что »нипями затрудняет разработку системы профилактических мер. поиск эффективных tptwti эпютрошюи терапии и затрудняет прогноз течения и исход заболевания. в литературе имеются работы, посвященные изучению системы гемостаза (17. w]. жйроаидокриннол регуляции 16. 7,у больных глпс, накоплен обширный фактический материал п области нммунмипогепеза заболевания, исследовалось состояние клеточного [45,46,49], гуморального звеньев иммунитета (2, 21, 70) в яйнепюп от периода и тяжести заболевания содержание т-лнмфацнтов, плазмопитов и в'лимфашггов. а также их субпопу ляний (cdj. cd4, cd8, cdi6, cd22, cd25. cd95) [i, 7,21. 25]; иммуноглобулинов а, м, g. е |1, 20,]; циркулирующих иммунных комплексов (11,67|, показателей комплемента |$й, 71). центральная роль в ауторегудяшш иммунного ответа и его интеграции с функциями всех систем организма принадлежит цигокннам главной питофнтиолопгчбскол характеристикой глпс является поражение зндотелия сосудом С распитием «льтсриатнню-лсструктнвного нанваекулнга. 'Экспрессию цитаюлюв в марециинш клетках считают основной причиной нарушении микрониркуллиии, центральной гемодинамики, плазморрег, Д ВС-синдрома |2Ъ. 81. 127. 138|. Игученню статуса шгтокинов у больных ГЛПС посвяики ряд исследований. в которых отражена динамика уровней про- н прол 1 вовоспалнтелъиых цитокннов (П.-1(1,IL-2. IL-4. IL-6. IL-H, 11-10, П.-13. CFN-o. TFN-Y.TNF-O) [7,23.46.138.145].

Большое значение в ранних иммунных реакциях у больных ГЛПС занимает секреция эндотелием оксида atora (NO) молекулы с противовирусной «СТМИОСТМО. Иссяедоюлси уровень оксида а то та н его метаболитов а сыворотке кропи (30|, супсрнатантах мочи, конденсатах выдыхаемого воздуха [2i[ у больных ГЛПС Покатана роль оксида озота в генсэе инфекииоимо-токеического шока, актипанин чеханишоп сосудието-тромбоинтэрного звена гемостпн и пршмпа МЩСЯШЫНЙ ШСфдщиШН сосудов при ГЛПС 114|.

ГЛПС - мнлгофоторнм мбсломиме, характер ратмтш которого ЗОВНСИ1 от даты, патогсиности. вирулентности возбудителя и окружающей среды Многочисленные исследования, проводимые во всем чире, покатывают, что восприимчивость к инфекционным агентам гснетнчсскн детерминирована (142.150,151J.

Одним из наиболее доступных подходов, q«H»K»a в молекудярно-гснстнчесхич исследованиях чнотофякторных заболеваний, является изучение ассоннаиий заболевания с полиморфными вариантами генов, белхсчые продукты которых участвуют в питотаюте бодеги»- Выявлены aCccHtttnuHH ГЛПС с генами главного «телекса гнсто»вмести м«т« (HLA). генами цитокннов и их рецепторов {TNFA. ILl, ILRN) 1142, ИЗ. t50|, Однако результаты исследований разных аггоров неоднозначны. кроме того, имеют место этнические различия в чувстии гыыюсти к инфскодюНИнм органюма во взаимоотношении с условиями заболеваниям. Данные по Изучению nccoiinaiuift гена иидуцибельиой еинтазы оксида азота (АШ4) с ГЛПС в мировой литературе отсутствуют^

Поскольку в РФ малскуллрно-геиетнчеекое исследование ГЛПС до сих пор ne провалялось. ■плястс* актуарным изучение имиыорфиых вариантов iciioH. ассоциированных с данным заболеванием

В рамках рассматриваемой проблемы идентификация ivhöjl вовлеченных ■ патогенез ГЛПС. чвляетсн важной медкко-пенетическоД чМйчей, решение которой способствует формированию фуцшшппшш представлений о патогенезе этого «яжелого. социально значимого заболевания. я также пошали i прогнозировать риск развитии и тяжестз. течения ГЛПС.

Цель работы выявить ассоциацию полиморфных вариантов генов цнтожимов и нндуцибелыюЛ еннтазы оксида пота с лрсфюшккииикпн к заболеванию и характером течения ГЛПС.

I Окармлецотадять эпидемиологическую ситуяцию по ГЛПС » РБ и проанализировать клинические особенности течения ГЛПС

2. Пронести исследование ассоциаций полиморфного до кус о -MtSG -А гена TUFA с предосположеНЕЮСТыа к заболеванию и тяжестью течения глпе.

3. Провести исследование ассоциаций полиморфных локусов -5ПОТ. 39S30T гена iLtB с предрасположенностью к заболеванию и тяжестью течения ГЛПС.

4. Провести анализ ассоциаций VNTR полиморфизма гена HJRN с прелрасположеимостью к заболеванию и тяжестью течения ГЛПС

S Пронести исследование ассоциаций сочетании генотипов модиморфны* локусов -SHOT. 39530Т№и* ¡LIB и У,VFB гена IURN с предрасположенностью к заболеванию н тяжестью течения ГЛПС.

Ь Провести анализ ассоциаций 5ГЯ-иолнморфитмц гена NOS2A с предрасположенностью к заболеванию и тяжестью течения ГЛПС.

Илу-тли нови i ни ИССЖЯвКНПт»

Bncpítue у больных ГЛГЮ прокдеио исследование полиморфных «кусов 1С пои цитокииов и индугиибельиой сиитлзы оксида азота. Воершс охарактеризовано распределение частот аллелей и генотипов исследуемых ДНК-локуеоа у больных ГЛПС м мрсикгвТивних доноров, Ил OCHOWKHM стйтистичоского анализа выявлены существенные различия в распределении полиморфных вариантов генов нитокннов и нндуцнбсльноЛ синтаты оксида »юта у больных ГЛПС с рачюй формой тяжести и ссронепгтнвных доноров. I IoKirmna ассоциация полиморфных вариантов генов цитокннов и нндуинбельной сшгтазы оксида азота с основными клиниш-дайораторными пошпеини, хфялсрядошими тяжесть течения ГЛПС, Установлены маркерные аллели и генотипы РСНОВ нитокннов и нндуиибельноА сиитвзы оксида атота. укатывающие на повышенную предрасположенность к тяжелому течению ГЛПС с риском развития такт специфических осложнения, как »мфекининю-токснчсскнй шок. острая почечная недостаточность, /ИК'-сиидрои

IlpjK'i ычеекяп значимость работы.

Результаты работы «носят вклад в limitan не механизмов патогенен ГЛПС. формирование представления о генетических основах шбсисаання.

Гпютипнртйнне болты* ГЛПС по генам нитокииов н нндуцибелыюй сип газы оксида азота позволяет определить индивидуальную предрасположенность к тяжелому течению бодегни, с целью разработки комплекса лечебно-профнляггнческих мероприятий, ппртемш ня предотвращение неблагоприятного исхода ГЛПС.

Данные диссертационной работы могут послужить основой для последующих ИКИИМПНЙ по определен!по генетических факторов, влияющих ил Ы»левоеи ост h. характер течения и исход ГЛПС

Результат исследования могут быть 1коолт.жиыны при чтении курсов медицинской генетики на биологических факультетах университетов, в медицинских ВУЗах и на курсах повышения квалификации медицинских работников.

Ости

I. Ассоциация полиморфны v вариантов rcnoii фактора некроза опухоли иидуимбедыюй chhtbjh оксид» лэота с предрасположенностью и

3ft6o,KBaniiw ГЛПС.

2, Ассоциации полиморфных вариантов генов TNFA, ингерлепкнна 10 УШ), ¡ИМ, N0S2A с тяжестыо течений ГЛПС,

Генетические маркеры повышенного риска развития специфических осложнений (ИТШ. ОПН, ЛВС-синдрома ) но опенке рояиморфиых вариантов генов TNFA, 1L1B, NQS2A.

ЛйрпйвЦШ

Осшншыс положении диссертации представлены на V съезде Российского общества мевицннсккк генетиков (г. Уфа. 2005). научно-практической конференции, посвященной 110-летию кафелры инфекционных болезней Воеино-.иедипинской акалемнн им. С.М Киром (г Санкт-Петербург, 2006), VII Российском cvrue врачей'инфекционистов (г Н Новгород, 2006), Вееросснйсхой научно- практической конференции «Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом: истории юучеиин и современное состояние эпидемиологии, патогенеза, диагностики, лечен и* и профилактики» (г. Уфа, 2006), 69-ой. 7!-ой итоговых Республиканских научных конферсииних молодик ученых с международным участием (г. Уфа. 2006). ученом совете ИЕГ УНЦ РАН. совместном иседиш кафедры инфекционных, болезней БГМУ н кафедры инфекционных болезней с курсом дерматовенерологии НЛО БГМУ.

По теме диссертаций опубликовано 17 научных работ. а том числе 3 в по upan иной печати, антагониста ипфМЬйн fp <¡!JRW

Заключение диссертации по теме «Инфекционные болезни», Хабелова, Тамара Александровна

ВЫВОДЫ

I. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом в Республике Башкортостан, m данным настоящего исследования, характеризуется, выраженной сезонной заболеваемостью, преимущественным поражением лиц среднего aoipocra. мужского поля, протекающей я основном в среднетяжеяой форме, с умеренно выраженным геморрагическим и почечным спнлромом н развитием осложнении < инфекционно-токсический шок. острая почечная недостаточность, ДВС-СШЦрОМ) в 14,4% случаев

2 I ей опт TNF*A/*A полиморфизм 308<3>А гена фактора некроза опухоли a [TNFA). аллели NOS2A4I. SOS2A42. генотип NOS2Aat2f)4 STR-пал аморфизма гена индуинбельной синтезы оксида а Юта (NOS2А) у жителей Республики Башкортостан ассоциированы с повышенной предрасположенностью к ГЛПС. Генотипы TNF*Gf*A, iLIRN*l/*JI гена реценториого антагониста IL! (iURN). комбинация генотипов ¡/И-СТ-ОС н t/t/GT-GT (ILIRX+VNTR - lUB*-SHOT - lLIB*JfSSC-l\ иалели SOS2A45. NOS2A*ió it генотип NOS2A*13 *¡4 ассоциированы со сниженной вероятностью развития заболевания.

3. Генетическими маркерами повышенного риска тяжело™ течения ГЛПС являются генотипы TNF9A/*At ILIB'C/'T полиморфизма -5НОТ гена шгтерлеИкина lfl (IL1B), комбинация генотипов CT-VI (fLI8'-5ilOT-1LÍR\4NTR), аллеян NOS2A41. NOS2A42. тенотнп NOS2A*tt/*t2. Генотип ILIB*C *С ifLIB*'5IIOT) ассоциирован со сниженным риском развития тяжелых форм болезни.

4. Генетическими маркерами повышенного риска развития ннфекииоино-токснчсского пиши у больных ГЛПС являются. алдель TNF*A, генотип IUB*C'*T комбинат« генотипов ОТ-Ш (IUB*. 5ЧС-Т - iURS'VNTRw острой почечной недостаточности - аллель SOS2A*!ДВС-синдрома - сочетание генотипов ТТ-С/Т полиморфных докусов -5ПОТ, 3953С -Г гена IUB. Генотип T\'F*G/'G онмипфсми со сниженным риском развития инфосщюнно-токсического ыюка

5, Генотипы TNF*C 'G, iLIRN'fl 'li, NOS2A*i2/*H. аллель NOS2A*!2 y больных ГЛПС ассоциированы е повышенной, а генотипы TSF'G'*A. //./AV•//•//, №S2A43"t4. аллель SOS2Aêl6. комбинации i/H-CST-C C и ШШТ-С/Т (/URS*VNTR . IUB'-ЗИОТ IUB*395iOT) - со сниженной вероятностью развнпм срсдиетокелых форм болезни.

П РАКТИ Ч ЕСКН К РЕ КО M F. Il ДА ЦПИ

Установлены генетические маркеры, пссоиинромнные с тяжелым течением ГЛПС: генотип TXF*A*A гена TNFA (-3WG>Al 1ЦВ*0*Т гена IUB (-J//0 д комбинации генотипе» ОТ-/// OU В'5 ПОТ -ILIRS*VNTR), аллели NOS2A4I, NOS2A42 и генотип NQS2Aallf*l2 STR-полнморфитма гена SOS2A.

Обнаружены генетические маркеры повышенною риска развития инфскппоиио-токсического шо*а аллель TSF*А. Генотип ILIBaC/*T гена lit В l-J/ZOn. комбинация СТ-1,'1 (ILIB'-SHOT - IURN4NTR), ДВС-сицдроыа - сочегание генотипов ТТ-С/Т полиморфных локусоа НОТ. 39НОТгена //.IB, острой почечной недостаточности - аллель NOS2Aêii

Результаты прокцпшоп исследования могут быть нснольтованы для своевременной опенки протном заболевания, что позволит выработать правильную тактику по ведению больных с целью профилактики осложнений (ИТШ, ОПН, ДВС-снндром) и предотвращения неблагоприятного исхода ГЛПС.

ГЛАВА 6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В последние годы вопросы патогенеза ршМШК инфекционных болезней раеем.ттр1Пныотся с позиций клинической иммунологии. (Сак известно. взаимодействие воэбудн1еля и микроорганизма не во всех случаях приводит к заболеванию. В случае разлития инфекционного процесса он может протекать а разных формах: латентней (субклнннческой), стертой, манифестной. Активность иммунного ответа организма человека и особенности реакций на одни и тот же антиген разных индивидуумов определяется их иммунорсаюзгвиостыо. Уровень иммунной прослойки носелення PI» к вирусу ГЛГ1С по отдельным районам составляет от 6,0 до 40,0% |73|.

Нами были изучены полиморфные доку с ы генои шгтоишо» TNFA {'30HG---A). IL Г В {-Я ¡ОТ, 395SOT) и IL IRA (ИШ) у больных ГЛПС из РБ, а также проанализированы все возможные комбинации этих локусов с выявлением разнообразных ассоциаций, что позволяет обобщить полученные данные с учетом функциональной значимости исследованных полиморфизмов

Роить TNF-о. IL- Iß н ILIRa достаток! to хорошо изучена на модельных животных при различных инфекционных заболеваниях. Исследованию TNF-а. ИЛ-Iß у больных ГЛПС посвящено большое количество работ, демонстрирующих высокую активность данных шггокинов в раннюю фазу инфекции |25, 46. 81]. Повышение уровней TNF-н, IL-1(1 в разгар болезни способствует формированию эффективной противовирусной защиты, обеспечивая воспалительную и именные реакции |48). У больных ГЛПС показана прямая зависимость тяжести клинических проявлений от активное m ВрОНСйимшта ц шпию1(М4, ЕЫ$)(7, Я у

-Í08G>A полиморфном гена TNFA является фуикинонапыто значимым, влияющим как на базарную, так it на индуцированную зкспрсссию гена J188|. Установлено, что аллель TNF*А является более мошным активатором транскрипции, чем аллель TNF'G. Ha линиях B-oeioK человека показано, что полиморфизм -30SG>A связан с повышенной экспрессией пяи TNFA ¡и vitro; присутствие ОЛЛСЛЯ TNF*A ассоциировало с вдвое повышенной продукцией шттокнна но сравнению с аллслем T\FA*G [J9l|. Проведенные нами исследования -3G8G~=~A полныорфикма lena TNFA продемонстрировали, что у больных ГЛПС достоверно чище был прелствштен генотип TNF*A/*A JÏ связи с этим, можно предположить, >па лица с генотипом TNF*A/*A имеют более высокую степень предрасположенности к развитию манифестной формы ГЛПС с реализацией всего комплекса патологических реакций. Кроме того, значительное увеличение частоты генотипа T~NF*Ar*A наблюдалось у пациентов с тяжелым течением болезни. Л у носителей муттттноп» мяеля TNF*A повышен риск развита вифекционно-токсического шока, тогда как гомозиготы по TNF*Q ил л ел ю оказались более устойчивы к возникновению 1ТТШ, что согласуется с результатами исследований, пронесенными v Сольных ГЛПС финской популяции (142], Согласно литературным данным. TNF-n играет ключевую роль в увеличении проницаемости сосудистой стенки, плазморреи. птпотензнн и готовности к шоковым реакциям [27. 81, 134). 8 зкепериментах на животных покапано, что мри внутривенном введении определенной дозы микробных «раздражителей» у животных развивайся смертельный шок. причиной которого был одновременный выброс активированными тканевыми макрофагами огромного количества TNF-O- [18TJ. Таким образом, можно предположить. что высокие концентрации TNF-«, ассоциированные с ыутшгтным штлелсы 77VFM, у обеледованиых нами больных могут способствовать тяжелому течению ГЛПС. осложненному развитием И ГШ

Гетерознгопсый генотип TNF*Gf*A у обследованных нами больных встречался значительно реже, чем и серонсгзгтитом контроле Кроме тот отмечено снижение частоты генотипа TSF*G'*A у больных срелнетяжелой формой ГЛГ1С Таким образом, по данным ihuuhx исследований можно предположить* что гепрООНГОТЫ более устойчивы к заболеванию ГЛПС, что согласуется с представлениями о благоприятном влиянии «етеротиготностн я эволюции человека,

У лии со срелнетяжслым течением болечии наблюдалось достоверное увеличение частоты гомотиготного генотипа TSF'G'G, что, по-видимому, свякпю с широким распрострмгеинсм общего аллели TNF*G в популяции, а также количественным преобладанием сред нетяжелых форм ГЛПС среди обследованных больных.

Сравнительный милю основных клннико-лабораторных показателей у больных с ратными генотипами полиморфною локуел -3ÙSG>A гена TNFA выявил статистически значимые отличия в уровнях креатинина в крови н содержании бедка в моче у больных срслнетяжсдой формой ГЛПС. Покатателн креатииниау индивидов с гетеротнгогным генотипом TNF*Gf*A были достоверно выше, чем у носителей гомозиготных генотипов T\'F*G/*G и T.\F*A/mA. [[ротсииурия была менее выражена у обладателей гемогип* TNF*A/*A как по сравнению с гомозиготами по TNF*G алледю, так и с гетерозигошмн,

Необходимо отметить комплексный подход к оценке тяжести у больных ГЛПС, с учетом выраженности ведущих синдромов' интоксикационного, геморрагического, почечного, а также динамики течения болезни. По результатам нашего исследования тяжесть течения ГЛПС у носителей генотипа TNF*A/*A определялась выраженностью интоксикации к развитием шоковых реакций. Также, следует отметить, иго выборки больных с генотипами TNF*G/*G, lttF*Gf*A превышают но численности выборку больных гомозиготных по редкому аллслю TNF*A

Анализ полиморфных локусов -5! 1С>Т н 3933С&*Т гена ILIB и VNTR полиморфизма гена IL1RN выявил ассошишио полиморфных вариантов данных ге^юь с ГЛПС ti популяции PU Нами установлено достоверное повышение частоты генотипа !Lt*C'*T гена ILIB l-SUC^T) у пациентов с тяткелой формой заболевания, ки* по сравнению с ссронегатнвнымн донорами. taK и болы«ычн с легким и срсдиегяжслым течением ГЛПС кроме того, у носителей гетерозиготного генотипа JLI'Cf*T гсзга IL!В (-51 IOT) охазался повышен риск развития НТШ Бналлельный полиморфизм raía 1L1B в положении JJJOT, точнее, аллельный вариант •51 IT этого гена характеризуется, но литературным данным. повышенной продукцией ИЯ-ip 1112]. Значительный подъем уровней провоспа-нгтслызых шпокииов в разгар болезни выполняет протектианузо функции с реализацией всего комплекса воспалительных н иммунных реакций, На многих экс пере ментальных моделях продемонстрировано, что введение экзогенного 1L-J способствует усилению зашитых мехазппмов н позволяет эффективно противодеЛетвовагь развитию инфекционного процесса, f Ipir введении дайоразориым животным, зараженным летальными дозами патогенных микроорганизмом. IL-1 о&вадвет ярко выраженными протектнвными свойствами, защищая от гибели до 100% животных [61] Однако чрезмерное повышение уровня синтеза провоепшнттельных иитокннов (TNF-o. lL-lp}. вызывающих запредельную активацию не i гроз н док р и н muí системы, избыточную продукцию оксида лзоти, повышение проницаемости сосудов, плазморрею. усиление коагухязенн, способно оказывать и повреждающее действие с развитием клиники ннфекшюнно-токснческого шока. В свяли с чем можно предположить, что постоянная выработка достаточно высоких концентраций lLlfk ассоциированная с -SHC>T полиморфизмом гена ILIB неблагоприятно сказывается на течении ГЛПС.

Аллели 3953Т гена ¡UB, также как и аллель -51 IT. ассоциирован с высокой продукцией нитокина 1L-I|3. Хотя нами ие выяизеио влияния 3953 С> Г полиморфизма гена ILIB на заболеваемость и характер течения ГЛПС, однако сочетание аллелей 395ЗТ и -í/¡T, по-видимому, ofijtajiaer втаимоусилн воющим эффектом: комбинация Т Т-С Т полиморфных локусов гена ILIB (-51 ЮТ. 3953С>Т) достоверно чаще определялась у больных ГЛПС. осложзкной ДВС-снилромем Кроме этого, у носителей комбинации генотипов 1УТ-С/Г гена Ц.1Н (-51 ЮТ, 395ЗОТ) отмечено значительное повышенна уровня креатин инк в крови.

Проведенный нами анализ Г\ТЙ полиморфизма гена /IIЯМ выявит значительное уменьшение частоты тетсрспиготиого генотипа 1МЦМ*1/*!1 у больны* ГЛПС по сравнению с контролем. Кроме "»того, у носителей генотипа Ц,1№*1'ЯИ снижена вероятность среднетяжелого течения болезни, тогда как индивиды с генотипом *///•//. наоборот, предрасположены к раз в ил оо срсднетяжелих форм ГЛПС. Но данным литературы, аллель II, №N41 ассоциирован с повышенной продукцией секреторного ИЛЯа по сравнению с другими аллелями [164. 1Й7| Известно, что почти 50% европейской популяции является носителями аллеля 1Ш№И [95], По-видимому. широкая распространенность данного аллеля среди популяций позволяет гстерош готам быть более устойчивыми к заболеванию ГЛПС. Гомозиготы И1И\'*1141, согласно КалпНа 5. е! а), |95, 1»7|. намного чаи» подвергаются роиичным инфекционным н воспалитслы1Ым заболеваниям

При анализе комбинашгй полиморфных вариантов генов ШВ {-511 С>Т. 3953 ОТ) и ШЯМ (ГЛТД) установлена, что сочегшгня гсиотиибв С/Т* 1/11 ииВ*'5ПОТ- ШЮРШТН ) И1СТОС и Ш1-СТ-С/Т(УНшчжя - 1иВ9-5ПОТ ~ И1В*39530Т) чаще встрсчалзкь среди серсткгатнвных доноров, чем у больных ГЛПС Кроме этого, у носителей комбинаций ■сногииов Ш-СТ-СС и ШОТ-ОТ снижена «1ероятиость развития средиетяжедых форм боляин,

Являясь естественным специфическим ингибитором [1,-1, 1Ь1Ка, конкурируя за связывания с одними и теми же клеточными рецепторами, блокирует активирующее действие 1Ырт другие клетки, и, таким образом, «ослабляет» воспалительную реакцию (92| Макрофшн, стимулированные ОМ-СХР »О продуцируют избыточное количество реоептортго й1гтапнпкта II, Ша и сниженное количество 11.-1 р. если содержат аллель /£//№*// [91. ¡87], Нштпе е1. аЕ. [124| продемонстрировали, что аллель Й./ДЛ'*// также способствует повышению концентрации КЛКэ в плазме, но только в комбинации с шкяем Si IT rcns ILIB. & другом исследовании 1167[ выявлено, что моиоцнты '«носители» аллеля ¡L ¡RS*H продуцируют большое количество !L-lp iiv vílro, итмкимо от характера полиморфизма в гене ILIB. У мышей, дефицитных no ll-IRa. также как у мышей с повышенной продукцией реиеторного антагониста обнаружены высокие уровни (1-1 в период эндотоксемин |Ы| Возможно, ILtRa действует щ viso в качестве как позитивного. так и негативною рклулжтора экспрессии IL»i [líSJ, Обойти прицеленные выше данные литературы, моюю предположить, что сочетание С/ГШ ЦИВ'-ШОТ - !URN*VNTR). 1/Ц-СТ-С С и /7/-СТ-СТ {JLlR\4mR ■ HlR*-5HC>T - ILIB*3»S30T) у больных ГЛПС, способствует поддержшню баланса между провоепшигтельным иитокином 11-1(5 и его рецепторным антагонистом EL 1 Ra, обеспечивая адекватный иммуииый о гост на вирусную инфекцию, тем самым, выполняя про те ктн иную функцию

Комбинация С/Г-// генов ILIB {-5НОТ) и ILIRN по роулышам наших исследомнмй. способсгвоиялд тяжелому течению ГЛПС с риском развития ИТТ11. Аллель IL1R\*I гена ILIRN, согласно данным литературы, не оказывает существенною влияния на экспрессию гена. Можно думать, что сочетание ■ организме высокой кониентряцнй 11.-10, ассоциированной с аллелем -Í//7", с относительно ниткой продукцией его реценториого антагониста у гомозигот но аллелю ILIRN*! усугубляет течение инфекционного процесса.

Проведенный анализ подтверждает предположение о том, что |гзменснис прол>кш1 и питокииов оказывает значителыюс влияние на тяжесть воспалительного процесса у больных ГЛПС

Большое значение и pftHMKX иммунных ремсциах у больных ГЛПС занимает повышенная секреция эндотелием оксида азота (NO) - молекулы с противовирусной активностью. Изученный нами микросателлшный пе»ггаиуклеотидиый (ССТТТ). полиморфизм н промоторной области пена KOS24. покатал, что у больных ГЛПС аллели NOS2A4S, \OS2A*l6 и генотип NG62A*ISf*I4 встречались достоверно реже, чем среди офмкгетммшх доноров.

Предполагается, что увеличение числа (ССТТТ)„ повторов приводит к повышению транскрипционной активности гена NOS2A [394]. Повышенный синтез млкрофагвдьнымн клетками оксида айна, в результате активации NOS2 при ГЛПС направлен на ограничение распроорансиня хантавируса. Это реализуете« в «истности ингнбированием N4> (II) репликации вируса внутри клетки j (481 и вазолнллтацней на уровне сосудов срелнего калибра с последующим усилением притока крови к органам и тканям е целью увеличения поступлении в них факторов нсспецнфической и специфической защиты При невысокой вирулентности вируса в сочетании с достаточной степеныо зрелости иммунной системы, видимо, возможна локализация инфекционного процесса уже на згой стадии (14] Таким образом, можно предположить, что повышенная продукция оксида тозя. ассоциированная с аллелями HOS2A'/i и SOS2A46 и генотизюм \OS2A4i *U, способствует формирован ню протекпшюго иммунитета |фи ГЛПС

По данным нашего исследования, аллели NOS2A4I, MOS2A42 и генотип NQS2A*IJ/*i2 являются маркерами тяжелого течения ГЛПС. У носителей адледя SOS2A 42 также имеется предрасположенность к развитию срсд>1етяжелых форм болезни.

В }кс пресс ирующих векторах, содержащих ген NOS2A с разным числом ССПТ-повтороа. а также рспортериый »сн люиифераш, показано, что аллель (ССТТТ)» гена NOS2А при индукции TLlp увеличивает экспрессию рспорт^рного гена в 2Л раза, (CCI 11 )(j - в 3,4 pain. (ССТТТ)и и (CCTTl)ir* В 4,0 раза, (ССТТТ)|? - в 3,9 раза [284J. Таким обрдоч, средние формы (ССГТГЪ адлелсй тая KOS2A, к которым условно отзгосятся а-тлели SOS2A * J J и NOSi4*/2, также ассоциированы с лостаточзю высокой продукцией N0. характерной для тяжелых форм ГЛПС Помимо iNOS источником оксида азота (II) при хантавнрусном инфицировании также являются* синтез его зндокаиалынй ЗЧО-снитазой и З'нитрозотиолы и динитрозилыгыс комплексы NO с ионами железа в клетках щдотедия Все эти факторы и обеспечивают выброс в кровь больших количеств оксида азота (II). более характерных лля среднетяжелой и тяжелой форм ГЛПС и при появлении осложнении 114|.

В значительных коииситрашик окай anna способе« выполнять не только гротекгмную функцию, но и оказывать интотокснческий эф<}»евгт на собственные клетки организма. опосредованный обратовакиеч псроксиннтрита. инициируя апо<тл или некроз клеток, Некроз имеет место при ГЛПС в клетках коркового слоя почек. Нидуцнбсдьную еннтаэу оксидв азота способны синтезировать клетки эпителия канальцев ночек, мдеотелий афферентной артернолы и другие почечных артерий (411. Избыточная секреция оксида азота приводит к тяжелой ппютеизин, нарушению мнкроциркуляции, гипоксии и вызванным сю метаболическим нарушениям, с последующим некрозом клеток коркового слоя почек, что может послужить причиной развития острой почечной НвШКПТОЧИОПН. Также среди основных патохимичсскнх и п итофтгп гол о ш чес ккх причин развития ОНИ выделяют аутоиммунную реакцию к собственным белкам почечной ткани, изменившим свои антигенные свойства нз-зл нитрования под действием пероксниитрмта 1141 По-видимому, достаточно высокая продукция NO. связанная с аллелсм NOS2A*// по данным наших исследовании, неблагоприятно сказываются на почечной гемодинамике и способствуют тяжелому течению ГЛПС с риском развития ОПН. Неоднозначность подученных нами результатов по (CCTTTfc, полиморфизму гена NOS2A у больных ГЛПС можно объяснить наличием неравновесною сцепления с другими пенами, задействованными в патоге»гей данною заболевания, например генами HL1> провоспшпттельиых штчннов Кроме ЗТОП5, активность индуцибелыюй синтезы оксида азота регулируется цитокинами W-o, 1LIJ1 (резко повышенными в раиикио стадию ГЛПС) н может с) премироваться глюкокортнконламн. концентрация которых в крою« больных ГЛПС со сред нетяжел ой и тяжелой формами в однгурнческнй период повышена 114|.

Таким обрхюм, полученные »ими результаты по аесоЧИШЦИМ полиморфных маркеров генов ТУРА. ILIB. ILtRN. NOS2A с тяжестью течения I ЛИС. раскрывают молскулярно-генетические аспекты данного заболевания и свидетельствуют о необходимости проведения дальнейших исследований по поиску генов, вовлеченных в патогенез ГЛПС

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Хабелова, Тамара Александровна, 2007 год

1. Алексеев O.A., Срднми АА, Кфратова ЕС. Иммунные механизмы к патогенезе геморрагической лихорадки с почечным синдромом ffTcp. архив - 199В. - ЛЬ И. - С. 39-42,

2. Астахова Т.Н., Слоима РА. Павленко О. В н др. Результаты изучения гуморального иммунитет при геморрагической лихорадке с почечным синдромом в Приморской крае .'>'Ноир. внруеол. 1086. • Jft 2, - С. 183-186.

3. Бабич ПЛ., Чубсико A.B., Лаиач СЛ. Применение современных статистических методов в практике клинических исследования. Сообщение третье. Отношение ими сои: понятие, вычисление, интерпретация ЛУкр. мед. чосонис 2005,-Ä1-C. 113-119.

4. Баранов B.C., Баранова Е.В„ Иващсико Т.Э., Асеев М.В. Геном человека и гены «пред рас I юложе ююсти» (Введение в иредиктивную медицину), СПб., 2СКЮ- - 272 с.

5. Башкнреа ТА. Забусов Ю Г Современные аспекты морфогенеза геморрагической лихорадки с почечным синдромом Анализ летальных случаев '/Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом а Среднем Поводожье и Приуралье. Л,. 1980 -С. 84-ЮЗ.

6. Быстровекий ВФ Состояние гннотдачо-плпфизврыо-кадпочечинкоиой системы у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом //Клин, медицина. 1984. -ÄJ.-C 97-99.

7. Дзюба О.В., Маруиич II А, Снпьчуи Р.В. Показатели иммунного статуса при геморрагической лихорадке с почечным синдромом Л'Лктувдьн. мир ннфекц. пат Ьдагивешенск, 2001. - С. -49-52.

8. Еланская Л.Н.» Спектр иммуноглобулинов А, М, О н сыворотке крови Больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом

9. Клиническая иммунологи* тяжелых форм вирусных инфекций, -Куйбышев. 17-22.21, Нфратта НС. СД-субпонуляции лимфоцитов и тяжесть течения геморрагической лихорадки с полным енкдромом //Актуальные проблемы Прироллоочатояы* инфекций Ижевск 199Я. - С 99-100.

10. Животовсккй Л. А. Попу ляп ионная биометрия. М. Наука. 199127t с.

11. Камнлов Ф Х , Хунафнна ДХ., Годней А.Т. Оксид азота в механизмах развития гечорр»п01ескоЛ лихорадки с почечным синдромом /.'Дальневосточный мед. журнал Хабаровск, 2003. № 3. - С. 55-57.

12. Квчилов Ф.Х. Хунафнна Д.Х., Шайхуднна Л.Р. Состояние ироокемдантной и атиокемдотиой систем при геморрагической ямчорааке с почечный синдромом //Дальневосточный мед. журнал. Хабаровск, 2003. -A3.-С, 84-90.

13. Кашкин К.П, Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность //Клин, лаб. диагностика Í998 - ife 11. -С. 21-32.

14. Коваль чу к Л.В. Соболев Б.H , Ганховская Л,В. Юдин A.A. Аналнт молекулярного взаимодействия и системе: IL-lß . IL1-RA tL-IR //Иммунология. - 2001 . № I. - С. 6-9.

15. Ковальчук Л.В., Хариеп З.Ф, Роль оксида »юта в иммуионатогенезе стафилококковых инфекций /.Иммунология. Кв 3. - С 186-188.

16. Коненков В.И., Снолыыюп М.В. Структурные основы и функциональная значимость аллелыюго полиморфизма генов шгтокннов человека и их рецепторов //Мед. иммунология. 2003, - Т, 5, № 1-2- - С. 1128.

17. Коробов Л.И. и Др. О заболеваемости и профилактике геморрагической лихорадки с почечным синдромом в Республике Башкортостан //ЖМЭИ. 2001 - Не 4. - С 58-60.

18. Ли Х.В. Выявление хацтавируеных инфекций и контроль над ними /''Хлнтввнрусы и хоитэднфусние инфекции Владивосток, 2003 - С.42-55

19. Лукашевич НС, Тюмени» Е.А, Лсмешко H.H.

20. BHpycociдецифичоскнс белки и РНК вируса геморрагической лихорадки с почечным синдромом ЛВопр. Внрусол. 1990- - Т, 35, № 1- - С- ЗЯ-42,

21. Масда X. Акаике Т. Оксид азогв и кислородные радикалы при инфекции, посналении и раке ¿'Биохимия, 1998. - Т. 63. .4* 7, - С. 10071019.

22. Малкоч А,В„ МаЛданнн* В,Г., Курбянова Э.Г, Физиологическая роль оксида азота а организме (Часть I) //Нсфрололм и диализ.- 2000. Т.2., № - С. 69-75,

23. Марков УМ. Окись aoma в физиологии и иатологии почек //Вестник РАМН -1996. 7 С, 73-78.

24. Маянский Н А. Маянский А Н Номенклатура и функции главного комплекса i нстосокыесгимостн человека //Иммунология 2006. - íí- I • С 43-46

25. Мнрсаева Г.Х., Фазлыева Р.М , Камнлов Ф.Х. О роли перекисног о окисления лнпидов а патогенезе геморрагической лихорадки с почечным синдромом//Нефрологи*. 1998 -Т. 2,№4.-С.32-36.

26. Мирсаека ГХ . Фазлыева РМ., Камнлов Ф X , Хуиафнна Д X Патогене? и лечение геморрагической янхорпдки с почечным синдромом, -Уфа, 2000,-236 с.

27. МурэабоевЯ Р.Т. Состояние клеточных факторов иммунитета и промспшйпелышх цитокинов у больных ГЛПС //Актуальные проблемы инфекционной патологии. М., 2002. - С. 54-57.

28. Мурзабвем Р.Т. Состояние иммунной и интерфероновой систем у больных геморрагической дикоралкой с почечным синдромом //Эпндсм н инфекп бол 2003. - №5. - С. 40-43.

29. Новиков Д.К- Противовирусный иммунитет //Иммуз»онатолотия, аллергология и иифскшлопш. 2002. - St I. - С. 5-15.

30. Перекпчнкова Е.Э., Трифонов С.Ю., Кирьянов Н А , Мокрушин С.Э. Паголотсншатомическав характеристика геморрагической лихорадки с почечным синдромом Актуальные проблемы природно-очаговых инфекций -Ижевск. 1998-С. 148-149.

31. Путы рев В.П., Степанов В.А. Патологическая анатомия генома человека. Новосибирск, 1997. -224 с.

32. Ребром О.Ю. Стптисгаческнй анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. M , 2003. - 312 с.

33. Ройт А. Бростофф ДжМеЙл Д. Иммунология (Гкр. с англ.) М, 2000 - 592 с.

34. Роидункии 1)11, С'уэдальцсв A.A. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом, Самара, 1995. - 48 с.

35. Рязанцева ИВ, Новицкий В В., Зима А.П, и лр Фактор некроза опухоли альфа при хронических вирусных гепатитах //Вирусные тенвпгты -проблемы эпнддоюлогии, диагностики. Лечения и профИ-завтихн. М-. 2005. -С. 297-298

36. Сахно J1.В., Лсплина О.Ю, Норкни М.Н. и др Роль оксидд дзота ипроцессе активации Т-зимфошпов человека, индуцированной бактериальным суперяитигеном //Вюл, экснерим, биол. и мед. 2000. - Т, 130, Л 10--с. 402-410.

37. Сенников СЛ., Силков АН,, Конов В А. Аддедьныс варианты и нзоформы цитокинов и диагностике и патогенезе и ммунопато логических состояний.'/Иммунология.-2002 -Л*4,-С.243-249.

38. Снде.зьинхо® ЮН, Обухова Г.Г. Роль некоторых веществ в изменениях проницаемости кровеносных сосудов у больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом ЛТер. Архив. 1990, -№6.-С.66-6Й

39. Симбирцев A.C. Биология семейства ннтерлейкина-1 человека //Иммунология.- 199#. № 3 - С,9-17

40. Симбирцев A.C. Интерлейки и-1 г от эксперимента в клинику //Медицинская иммунология. 2001. - Т 3., № 3. - С. 431 -438.

41. Сиротин Б.З- Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом. Хабаровск, 1994. -300 с.

42. Сиротин Б.З,. Федорченко Ю.А-. Данилович ИМ, Вопроси патогенен геморрагической лихорадки с почечным синдромом н патогенетическая терапия геморрагической лихорадки с почечным синдромом //Тер. Архив. 1995, ■ № П. - С. 30-33.

43. Сиротин Б.З. Жаре кий СЛ., Ткачеико Е.А, Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (последствия, их диагностика и классификация, диспансеризация переболевших!. Хабаровск. 2002. - 128 с,

44. Сиротин Б.З. Литология гипофиза при геморрагической лихорадке с почечным синдромом //Нефрологи*. -2002.-ЛН.-С, 29-34,

45. Сосунов А,Л. Окснд азота как межклеточный посредник .'/Соросовскнй образовательный журнал- 2ООО. - Т.б. № 12. » С- 27-34.

46. Стоил* Ж.-К. Mbwuic Б„ Андрианинтохайнв Р., Кдеитсв А, Гиперпродукции оксида азота в патофизиологии кровеносных сосудах //Биохимия, 1998.-T.63.Jfe 7.-С. 976-983.

47. Суздальиеа A.A., Епнст Л.Н-, Ноаомдинием Л, И, ИммуТЮШП ологическив механизмы при геморрагической лихорадке с почечным синдромом //Актуальные вопросы нриродно-очаговык инфекций, Горький, 1988.-С. 110-114,

48. Суздалыкв А,Л, I емерршгическая лихорадка с почечным синдромом (современные критерии оценки тяжести течения, эффективности лечения и прогноза): Автореф. Дие локгт- мед. наук. Санкт-Петербург, 1992 -19 С.

49. Ткаченко Е.А. Эпидемиологические аспект изучения геморрагической лихорадки с почечным синдромом в России. //Инфекционные болезни на рубеже XXI века. М., 2000. - Ч. 2. - С. 58,

50. Туманов А.В., Недоеиаеов С. А., Турецкая РЛ. Организация хромвгвив в ложусе генов ФНО/лимфотоксинов: корреляция с ткансспецифической ткснрсссней /.'Молекулярная биология. 1498. - Т. 32, №1- С- 92-102

51. Турецкая РЛ. Полиморфизм генов фактора некроза опухолей: ассоциация с заболеваниями //Молекулярная биология. 1999. - Т. 33, № 3. -С, 408412.

52. Тзйлор Б.С, Аларсои ЛХ., Бнллнор Т, Р Инду иибельин снитлза оксида азота я печени; регуляция и функции /.'Биохимия 1998, Г.63, Ля 7 - С. 905-923,

53. Ющук Н.Д., Валншнн Д А,. Сахаутдииовя Г.В., и др. Динамика питокиноа у больных теморрашческой лихорадкой с почечным синдромом //"Эпидеынол, и ннфекц. бол . 1999. - № 4. - С- 36-3 7.

54. Фазлыева Р М . Хунафнна Д.Х. Квыилои Ф-Х. Гсморрагм'кекая лихорадка с почечным синдромом и Республике Башкортостан- Уфа, 1995.245 с.

55. S? ФрсЛдлин H C , Шейкнн Ю Л "Эндотелиодьные клетки о качестве мишеней и продуцентов питокииоа '/Медицинская иммунология. 2001. - Т. 3.Jfi¡4 -С.499-514.

56. Хаитявирусы и ^антивирусные инфекции 'Под ред. Р.Л Слоновой и В.АЛваиис. Владивосток. 2003. - 332 С.

57. Хаитов P.M., Алексее« Л.П Физиологическая роль главного комплекса гистосовмсетимоети человека //Иммунология ■ 2001. .'fe 3. - С.4* II.

58. Й8, Цврегороласва Т.М., Сером Т.И- Цнтокины ь гастроэнтерологии. М.2003,-96с.

59. Черешне» В А,. Гусе» ЕЮ Иммунология воспаления; роль цитокииоп //Медицинскаяиммунология. 200. - Т. 3.jís 3. - С. 361-368.

60. Abraham 1Г. Kroeger K.M. Impact of the -30S TNF promoter polymorphism on die transcriptional regulation of the TNF gene: relevance lo disease //Journal of Leukocyte Biology. 1999, - V. 66. № 4. - P. 562-566.

61. Andus T. Daig R„ Vog. et jI . Imbalance оГ the ¡nterleukin 1 system m colonic mucosa-association with intestinal inflammation and tnlericiikin 1 receptor antagonist genotype 2 //Cut. 1997. - V. 47. - P. 651-657

62. Arcnd W,p. The balance between II,-1 and iL-IRa in disease //Cytokine & Growth factor Reviews. 2002. - V.I3. - P. 323-340.

63. Alerid W.P. The role of intcrleukin-1 receptor antagonist in the prevention and treatment of disease //Mod. Rheumatol. 2003. - 4f. 13 - P. 1-6.

64. Bohr MJ„ el Mcnuawy M . Boeker KH W ct ft.- Cytokine gene polymorphisms and the susceptibility lo liver cin+iosis in patients with chronic hepatitis С //Liver International. 2003 - V. 23. - P. 420-425.

65. Bellamy R. Genetic susceptibility lo tuberculosis in human populations //Thorax. 1998. - V- 53 - P. 588-593.

66. Bellamy К Susceptibility to mycobacterial in fed ions: the importance of host genetics//Genes and Immunity. 2003- - V. 4 ■ P. 4-11,

67. Buriner O. Xu W, RockeU K. et al Inducïble mtric oxide synthase polymorplnsm and fatal cérébral malaria //LanceL 199® V. 352. - P. 11931194.

68. Cahnllero A-. Bravo MJ„ Nielo A, cl al. TNFA promoter polymorptrism and «Bceptibihty to bruccllosis //Clin. Exp. Immunol, 2000, - V. 121.-P. 480-483.

69. Cab№ M-, Sliaw M A,, Shwpl« C. et al Poiymorphwm in wmor necrosn factor genw associaled with mucooutancous leislunoninsis /fi. Exp, Med -1995 -V 182,-P 1259-1264.

70. Cancr MJ. di Giovtne F.S. Jonci S c< al Association of ihe tnterleukin I rcecplor antagonist gera with ulceretive eolitis in Northen European Cawcteians TOui.-2WH. V, 4». - P 461-467.

71. Chanrain N. A„ Celler D. A„ Koty, P P et al. Moleeulor cloning. structure, and chromosomal local i/ation of the human induciWe nitnc oxide synlhase geoeif). Hrol. Chem. -1904, V, 269, - P. 6765-6772

72. Chen L.D. Yang W,S. Abnormal оГ T cell inunun oregul ai io n in hemorrhagic fever with renal syndrome //J. Infecí. Di» I WO, - V-161, № $. - P. 1016-1019.

73. Cornell* L.Verwetj Тшпог necrosis factor gene polymorphisms as seventy markers in rheumatoid arthritis //Attn. Rheum. Dis. 1999. - V. 58, - J* (20-126.

74. Cotton R.G.H, Scrivcr CR. Pruff of "Disease causing" mutation* //Hum. Mut. 1998. - V, 2, № 3- - P, 149-152.

75. Cvctkovic J-T,. Wal Iberg-JonssOn S-, SlejijMyr Ö. Susceptibility for and clinical manifestations of rtteumatoid arthntis associated with polymorphism* of the TNF-alpha, IL-l bela, and II,-1 RA genes tfJ Rcumatol, 2Ш, V, 29. № 2,-P, 212-219.

76. Devis I.C., Zayac A.Y Nolte K.B et al. Elevated Generation of Reactive OxygcivNitrogcn Species In Hantavirus Cardiopulmonary Syndrome Hi Virol. 2000. - V, 76. - p. 8347-8359,

77. Jínnis F.A., Terajima M., Kilpatriek E, et al. Imnumopathology of hantavirus pulmón arc syndrome //5th Inf. Conf an HFRS, HPS and Hantaviruses.- Paris,200I.-P 117.

78. Oavnlovükaya I.N. Shepley M , Sha» R. étal, ß3 inlcjtrins mediate the cellular entry of hantaviruses that cause respiratory failure //Microbiology. 1998.- V. 95. Ä 12.-P. 7074-7079.

79. Gcimoncn E., Raymond T„ NrffS- et al Pathogenic and nonpathogenic hantaviruses differentially regulate endothelial cell responses /.'Microbiology. 2Û02. V, 99. Ä 21. - P. 13837' 13842.

80. Gonzalez-Gay M.A., Llorca J., Sand** E. et a|. inducible but not endothelial nitric oxide synthase polymorphism in associated wilh susceptibility to rheumatoid arthritis in northwest Spam //Rheumatology 2004 - V. 43. - P 1182-1185.

81. Hajeer A.H. Hulchinson LV. TNF-alphu gene polymorphism; clinical and biological implications //Minos. Res. Tech. 2000. - V. 50. - P. 216-228.

82. Hajeer ATI. HttfdiEmon l ,V, Influence of TNF alpha polymorphism on TNF alpha production and disease //Hum. Immunol 2001. - V. 62, № 11. P N91-1199,

83. Hill A. The immunogerelics of human infenious diseases //Ann. Rev. Immunolog- 1998, - V, 16, - P, 593-617.

84. I lurme M. Helminen M. Polymorphism of the II.-1 Gene Complex in Epsieiri-BaiT Virus Seronegative and Seropositive Adult Blood Donors //Seand. J. Immunol, 1998, V. 48, - P 219-222

85. Hurrne M, Santtila S. IL-l receptor antagonisl <IL-1 FtA) plasma levels areco-ordinaiely regulated by both II.-IRA and 1L-IB genes HEur J. Immunol.1998 -V 28. P 2598-2602,

86. Kaneno M., Mustoncn i. Pathogenesis of Puumala and other hantav irus infections //Rev. Med. Vtrol.- 1998,- V.8.-P. 67-S6.

87. Kim YJH Lee H.S., Yoon J.Y. ei al. Association of TNF-u promolcr polymoiphisms wilh the cteanuice of hepatitis B virus infeciion //Human Molecular Genética. 2003, - V, 12, Nt 19. - P. 2541-2546,

88. Klingstrom J , Ptyusnin A,. Valieti a., Lundkvist F Wild type Puumala hontavirus infectUm induce» eytokw«, C-rcactive protein. creaiinine and mtnc oxidie in cynontolgus macaques t/J. Virol. 2002- - V. 76.KH. - P 444-449,

89. Knight J.C-. MBChB, DPhil Polymorphtsins in Tumor Necrosis Factor and Other Cyiokines As Riski, l'or Infeciious Ciscases and (he Scptie Syndronie //Curram litfcclious Distases Rcporls. 2001. - V. - P. 427-439

90. Knuehel M,C„ Spira TJ-. Neuntann A.U., el al. Analysis of polymorphisin in the lumor necrosis factor ulpha prometer and Hl V type I dksease progressiofi y/AIDS Res. Hum. Retrovimses. 1998 - V, 14. - P 305-309,

91. Krakauer T , Loduc J.W., Krokaucr H. Serum levéis of tumor necrosis fucwr-alpha, interfeukin-l. and inlerleufcin-6 in hemorrhagic fevef wiih renal syndrome //Viral. Iramuivol. 1995. - V 8, № 2. - P. 75-79.

92. KwiaÜtowjJii D. Geneti uwepiilnlity to malaria gelling eomplex //Cwrew Opinión in Gnwtksand Ocveloprneni. 2000. -V. 10.-P. 320-324.

93. Liiuriiwova B. lnterleukin-1 fhmily: fram genes to humim distase //Acia Univ. Palacki. Olomuc. 2000. - V. 143. - P. 19-29,

94. Lee H.W., Lee P.M., Jonson KM. lsolation of the etiotogie ngent of K oreanHcmorragieFever//J.Infecí. Oii.- 197S V. I37,№3.-P 298-308.

95. Lowcnsein CJ„ Dmennnn J.V., Snyder S.H. Nitric wide: a physiologic messenger //Ann. Int. Nfcd -1994. V, 120. - P 227-23?,

96. Lundkvist A., Bjorslen S., Niklasson B. Immunoglobulin G subclass responses against the structural components of Puumala vims //J. Cliu.Microbiol. -1993. V, 31. № 2, - P, 368-372.

97. Luomala M , Lchtimaki Т., Elovaara I. el al A study of inlerieukin-t clusicr genes in susceptibility to and severity of multiple sclerosis It). Neurol, Sci, 2001. - V. 185,-P 123-127.

98. Mitfcela S , Ниппе M . Ala Houhala I, Mustonen J. ct al Polymorphism of cytokine genes in hospitalized patients with Puomaia hantavirus infection. //Nefrol. Dial. Transplant 2001, - V. 16. - P, 1368-1373.

99. Mflticovmi A,. Bussolino F,. Introna M. Cytokine regulation of endothelial cell function. .Immunol. Today. -1997- ■ V. I8.NV5,-P. 231-240.

100. MariuKte A. Anderson Schmaljohn C. The possible role of cytokines, chemokines and their receptors in ¡tnmunopathogencsis of HFRS and HPS ¿'5th Inf. Conf, on HFRS, HPS and Hantaviruses Paris, 2001 - P. 103.

101. Markotic A., Dasic G., Gargo A. Role of peripheral blood mononuclear cell U'BMSl phenotype changes In live pathogenesis of hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) //Clin, Exp, Immunol. 1999. - V. 115. № 2. - P. 329334,

102. Mc Guire W„ Hill A.V.S., Allsopp C.E.M, et al. Variation in the TNF promoter region associated with susceptibility to cerehml malaria .'/Nature. 1994. -V, 371, №6497 P 508-510

103. MtiMoncn J-. Pwtanen J., Kanerva M, el at Genetic susceptibility to severe course of nephropathia epidemica by Puumalo hantavirus //Kidney lnt, -1996 V. 49.-P.217-221.

104. Mum own J , Partane* J, Kanerva M. et al. Association of IILA B27 with benign clinical course of nephropathia epidemica caused by Puumala hantavirus // Stand. J. Immunol. 1998. - V. 47, № 3. - P. 277-279.

105. Mwainemfce (>. Ouillard M,C , BttTkhuisen M, cl al ElJmic diffcrcnco in allelic associations of the interleukin-1 gene cluster in South African patients with inflammatory bowel disease and in control individuals //Immunogeneties. -2001. V. P. 249-254

106. Nebcn D.W., Cardan MJ. Ecoflenctk*: from Uiology io health /Toxicol, Indust, Kith, 1997,-V. 13,- P, 163-192

107. Nedwin G. E. Naylor S. L., Sakaguchi A. Y et al Human lymphotoxin and tumor necrosis factor gene»: structure, homology and chromosomal tocaliauion //Nucleic Acids Res, ■ t98i, V,I3. - P, 6361-6373.

108. N'cmctz A., Toth M. Garcia-Gon/alcz ct al. Allelic variation at the interleukin 1(1 gene is associated with decreased bone mass in patients with inflammatory bowel diseases ffGut, 2001. - V. 49, - p. 644-649.

109. NiciJtn M, J„ Weith A , and Duff G. W A physical map of the region encompassing the human interleukin I alpha, interleukin - I beta, and interleukin- I receptor antagonist genes /.'Genomics. 1994.-V. 19.- P. 382-384.

110. Ohashi J., Naka I , Patarapotikul J., Hananantaehai H. ei al. Significant assoc iation of longer forms of CCTTT microsatellitc repeat in the inducible nitric oxide promoter with severe malaria in Thailand HI. Infect. Dis. 2002. - V. 186. -P. 578-581.

111. J 61. Read R.C, Camp N.J., di Giovinc F.S, ct al, An lnterieukin-1 Gcnotipc Is Associated with Fatal Outcome of meningococcal Disease HI. Infect. Dis -2000.-V- 182.-P. 1557-1560.

112. Rider L.G., Artlctt CM, Foster C.B, et al, Polymorphisms in the IL-I reccptor antagonist gene VT*JTR arc possible risk factor of juvenitc idiopathic inflammatory miopaiili« // Clin- Exp, Immunol. 2000. - V. 121. - P. 47-52.

113. RofTD.A,. Bentzen P, The statistical analysis of mitochondrial DNA: (2 and problem of small samples //Molecular Biology and Involution. 1989. - V. 6.1. P, 539-545.

114. Schmdwtg ll„ Wagner U . Peterson A., HomefT G. Tumor necrosis factor alpha promoter polymorphisms in patients with juvenile idiopathic arthritis //Clin. Exp. Rheumatol 2006. - V. 24, № I - P. 103-108,

115. Settergren B. Clinical aspects nephropatia epidcmica (Puumala virus in lection) in Europe: a review //Scafld. J. Infect- Dis. 2000. - V. 32, J6I.-P 125-132.

116. So«u Mi l , Najflfi L , Noon K.N et al. Tumor necrosis factor-alpha promoter polymorphism in Iranian patient» with chronic hepatitis B //Indian. J,

117. Gastroenterol. 2006. - V* 25, Aft t, - P. 14-15,

118. Stimadd H.A, Stockle M Fclger L. « Malaria infection Bind morbidity in infants in relation to genetic polymorphisms in Tanzania i/Trop. Med. tnL Health. 1999. V. 4. - P. L«7-t93.

119. Tamura M., Asada H , Kondo K Effects of human and murine interferons against hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) virus //Antiviral Res, 197«, -№8, P 171-17«.

120. Tang G.J., Huang S.L., Yicn H.W. et al- Tumor necrosis factor gene polymorphism and septic shock hi surgical infection //Cril Care Med. 2000. - V. 28, № S. - P. 3090-3091.

121. Tar tow JJ£„ Blakemore A-I-F-, l.ennaid A. et al. Polymorphism in human IL-I receptor amagonisi gene mtron 2 is caused by variable numbers of an 86-bp tandem repeat //Mum. Genetics. 1993. - V, 91 - P.403,

122. Tariow J.K-, Clay F-E-, Cork MJ. et al. Severity of alopecia areata is associated with a polymorphism in ihe inlerleukin-l receptor antagonist gene tf\ Invest. Dermatol. 1994 - V. 103 - P. 387-390,

123. Tarlow J.K., Cork MJ., Schmidt-Egenole M, et al Association between intcrieukin-l receptor antagonist gene polymorphism and early and late-onset psoriasis №t. J Dermatol. 1997. - V. 136. - P. 147-148

124. Tountas N.A., Casini-Raggi V., Yung H- et at. Functional and ethnic association of allele 2 of the inleiinikin-1 receptor antagonist gene in ulcerative coJitisGastroenterology. -1999, V, 117.-P. 806-813.

125. O.Tracey KJ., Cetarni A. Tumor necrosis factor: a pleiotropic cytokine aiul thctapflHic target //Ann, Rev, Med, 1994, - V, 45, ■ P 491-503.

126. Van Dcventcr SJ.H. Cytokine and cytokine receptor polymorphisms in infectious disease /.Intensive Care Med. 2000. - V. 2- - P. 98-102.

127. Warpela K. M„ Xu W , Uu L , Charles 1, G- et al Genotypes and functional analysis of the polymorphic (CCl 11 )n locus of NOS2A in diabetic retinopathy //FASEB- J.- 1999. V. 13-- P. I82S-IB32.

128. Wattavfimage J., Carter R, Pereta K.I.RJ. et al. TWu'l marks high risk of severe disease during Plasmodium falciparum malaria and other infections in Sri Lankan* //Clin. Exp. Immunol. 1999. - V. 115.- P. 350-355.

129. Wcstendorp R GJ-, I-aimermans J AM., HuLzinga T.W.J et al Genetic influence on cytokine production and fatal meningococcal disease 1/ 1-ancet 1997,-V. 349. P. 170-173.

130. Wilkinson R. J . Patcl P., Llewelyn M- ct al. Influence of polymorphism in the genes of intcrieukin -I receptor antagonist and IE.-1(3 on tuberculosis //J. Exp. Med. 1999.-V. 189, № 1. P. 1863-1873.

131. Wilson A.G., de Vries N.r van der Putte L B. DufTG.W. A tumorфб?necrosis factor alpha polymorphism i» no I associated with iheunUoid onhritis. //Ann. Rheum Dis. -1995. -V. S4. P. 601-603.

132. Wilson A.G-, di Giovtne F-S-. Poeioi F. An allclic polymorphism within die human necrosis £neior-a promoter rcgitm ш strongly associated with HLA-AI, m ¡md 1Ш alkies //J. Exp. Med. 1993. - V. 177. - P, SS7-SGÖ.

133. Wilson A .G., di Gi ovine F.S. Duff G.W. Genetics of tunwr necrosis factor-a in autoimmune, infections and neoplastic disease. //J. Inflamm. 1995. -V.45.-P. 1-12.

134. Wilson A.G, Symons J,A., McDowell T.L. et al Eflèei» of а polymorphism in Ihe human tumor necrosis factor alpha promoter on transcriphonnl activation i/Ptoc. Nal, Acad. Sel. USA. -1997. V. 94 . P. 31953199,

135. Witkin S.S., Gerber S., Ledger WJ. Influence of lntcrteukin-1 Receptor Antagonist Gene Polymorphism on Disease ' V C I i is Infect Dis. 2002. - V. 34, Jfe. 15. - P. 204-209.

136. Xu Wh Liu L. Emson P.C. Harrington C R,. Chartes LG. Evolution of a homopurinc-homopyrimidine pentanucleotMte repeat sequence upstream of the human inducible niuic oxide synthase цепе WGene. 1997. - V. 204 - P. 165-170.

137. V« L.J. Tang J., Herrera J. et al. Tunwr necrosis factor gene polymorphism in patients with cirrhosis from chronic hepatitis С virus infection //Genes and Immunity. 2000. V I - P. 386-390.

138. Zhang Ping-An. Li Van, Xu Pu, Wu Jlan-Mtn Polymorphisms оГ ijrterinikin -IB and imcrirukin -1 receplor anlngonisl genes in (Mícns wilft chronic hepatitis В /World J. Gastmemerol, 2004. - V. 10. 12. P 18261829.