Клинико-патогенетический анализ значения повреждений структуры ДНК и апоптоза лейкоцитов периферической крови у больных острыми кишечными инфекциями в динамике заболевания тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.10, кандидат медицинских наук Красавина, Эмилия Николаевна

• Красавина, Эмилия Николаевна
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Красавина, Эмилия Николаевна

страницы

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

В В Е Д Б Н И Е.

ГЛАВА I - ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Современные представления о патогенезе синдрома интоксикации у больных острыми кишечными инфекциями.

1.2 Алоптоз как общебнологичсски й феномен.

1.2.3 Молекулярные основы программированной клеточкой гибели.

1.2.2 Основные пути индукции апоптоза.

1.3 Рать апоптоза в регуляции инфекционного процесса.

1.3.1 Апотоз нсГггрофнлов и лимфоцитов в патогенезе ннфекцнои ного процесса.

1.3.2 Феномен апоптоза при заболеваниях, вызванных энтсробакгсрнями.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

СОБСТВЕННЫЕ ДАННЫЕ

ГЛАВА 3. КЛИНИКО'ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ И ЛАБОРАТОРНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ ОСТРЫ МИ КИШЕЧНЫ МИ ИНФЕКЦИЯ МИ

ГЛАВА 4, ПОКАЗАТЕЛИ ОДНОНИТЕВЫХ РАЗРЫВОВ ДНК И АПОПТОЗА НЕЙТРОФИЛОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ К1ЮВИ У БОЛЬНЫХ ОКИ РАЗЛИЧНОЙ этиологии

4.] Динамика показателей ОР ДНК и апоптоза нейтрофилов периферической крови у больных ОКИ в зависимости от тяжести и варианта течения заболевания.

4.2 Динамика показателей ОР ДНК н апоптоза некрофилов периферической крови у больных гэетроинтсстннальной формой сальмонеллсза.

4.3 Динамика показателей ОР ДНК н апоптоза нейтрофилов периферической крови у больных пншевой токенконнфекиией неуточненной этнологии.

4.4 Дннамитга пскатлгслсП ОР ДНК ч агкмттоза неАтрофилов периферической фовй У больны* острой лнзенлернеЛ,.-.

ГЛАВА J. ПОКАЗАТЕЛИ ОДПОНИТЕВЫХ РАЗРЫВОВ ДНК И АПОПТОЗА ЛИМФОЕ1ИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЫ ILIX ОКИ РАЗЛИЧНОЙ ЭТИОЛОГИИ

5.1 Дшюмнка П.К.1.'I: кЯ ОР ДНК ■ лныфОШПОВ периферической крови у больных ОКИ б зависимости от тяжести н варианта течении заболевания-. в]

5.2 Динамика показателей ОР ДНК и ,г:■::■::тл кнфоютн периферической кроен у шмы|Ы\ гастрон нтссеннальной фермой САПШИПЛеа!.». Р.

5.3 Дн I I.L4 нк.1 I :virti ОР ДИК н . П01ТТО 1.1 лимфоцитов периферической КрОИН у ООЛЬПЫЧ пищевой ГОКСНКОИНфСКННСЙ нс> шчненнои этнологии.№

5.4 Динамика показателей ОР ЛНК н агтоптоза III' :;: . '»-.: .1 периферической крили у больных острой дизентерией.

ГЛАВА 6. КОРРЕЛЯЦИОННЫЙ АНАЛИЗ ПОКАЗАТЕЛЕЙ АПОПТОЗА И СТЕПЕНИ ПОВРЕЖДЕНИЯ ДНК ЛЕЙКОЦИТОВ V БОЛЬНЫХ ОКИ РАЗЛИЧНОЙ ЭТИОЛОГИИ В ЗАВИСИМОСТИ от ОСОБЕННОСТЕЙ КЛИНИЧЕСКОГО ТЕЧЕНИЯ

ЗАБОЛЕВАНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-патогенетический анализ значения повреждений структуры ДНК и апоптоза лейкоцитов периферической крови у больных острыми кишечными инфекциями в динамике заболевания»

Актуальность работы. Острые кишечные инфекции (ОКИ) в течение длительного времени продолжают оставаться одной из самых актуальных проблем практического здравоохранения во всех без исключения странах мира [20, 62, 80).

Несмотря на достигнутые успехи в изучении ряда практических аспектов этиолатогеиеэа ОКИ» многие ключевые вопросы пока остаются малоизученными. В частности, общеизвестно, что несмотря на различия а этиологии ОКИ, клинические проявления и тяжесть развивающегося инфекционного процесса обусловливаются совокупностью проявлений интоксикационного и днарейного синдромов [9, 16, 22,28» 29, 31),

Синдром интоксикации (СИ) в клинике инфекционных болезней имеет уникальное значение, поскольку с одной стороны представляет универсальный клинический снндромокомплскс, развитие которого типично дня большинства инфекционных заболеваний, независимо от этнологического фактора» а с другой, степень его выраженности определяет тяжесть н исход конкретного заболевания [27]. На сегодняшний день не вызывает сомнения ведущее значение цигокинов в индукции и регуляции ответной реакции организма на бактериальную инвазию, однако механизмы, определяющие жизненный цикл регулиторных и ->ффекторных клеток организма пока остаются не достаточно ясными,

Регуляция процесса клеточной гибели в норме и при патологии является одной нз центральных проблем медико-биологической науки и интенсивно изучается в настоящее время но веси мире [1,3, 35, 83J. Подобный интерес обусловлен появлением новых методических возможностей регистрации различных проявлений данного феномена н анализа его молекулярных механизмов, тесно связанных с активацией клеток и биологической передачей сигнала (25,26, 55,40, 76,93,120].

Ранее были опубликованы данные [2. 5, 13, 36) об обнаружении высокой степени повреждения ДИК лимфоингов и гранулоцитов периферической крови при ряде заболеваний, в том числе и бактериальной природы» в которых авторы предположили взаимосвязь между повреждением структуры ДИК и развитием апонтоза.

Очевидно, что аггоптоз может играть ключевую роль прн инфекции в исходе системной восшшсльной реакции, поскольку посредством апоптоза угнетается локальная тканевая деструкция, уменьшаются дальнейшие воспалительные реакции н рекрутирование иммунных клеток, а также облегчается терминальная стадия врожденного иммунного ответа, обусловленная ограничением провоспалнтельиого ответа. Регулирование продолжительности жизни нейтрофнлор путем апоптоза улавшшюг тонкий баланс между их эффективным функционированием в качестве одного in звеньев врожденного иммунитета и своевременным н безопасным удалением »тих потенциально опасных клеток [64,70, 74, 89, 114].

Целью настоящего исследования явился комплексный клннико-п иго генетический анализ значенид повреждений структуры ДНК, првдрпшкшпа в виде однонитсвых разрывов (ОР), и а пои год! лейкоцитов периферической крови в развитии синдрома интоксикации у больных ОКИ в динамике инфекционного процесса.

В соответствии с поставленной целью были сформулированы следующие задачи исследовании

1. Изучить динамик)' показа гелей ОР ДНК н анопгоза полиморфно-ядерных лейкоцитов (ПМЯЛ) и лимфоцитов периферической крови н зависимости от тяжести и варианта течения ОКИ

2. Исследовать состояние показатели ОР ДНК и алопгоза ПМЯЛ, лимфоцитов периферической крови у больных гаетроиитестинальной формой сальмонелле» в динамике заболевания.

3. Изучить динамику показателей ОР ДНК и аионтозл ПМЯЛ и лимфоцитов периферической крови у большак пищевой юкенконнфекцией неуточненной этиологии,

4. Оценить динамику состояния показателей ОР ДИК и апонтоза ПМЯЛ. лимфоцитов периферической крови у больных осгрой дизентерией.

5. Провести корреляционный анализ значений ОР ДНК н алоптоза лейкоцитов с клннико-лабораторныын параметрами синдрома интоксикации в динамике ОКИ.

Научная пони ]ни

Впервые проведено комплексное исследование показателей апашоза н степени повреждения ДНК лимфоцитов н некрофилов периферической кроен у больных ОКИ различной этиологии а динамике развит» инфекционного происсса.

Впервые у больных ОКИ обнаружены закономерные изменения показателей повреждения ДНК, представленных в виде ОР, и алоптоза лейкоцитов периферической крови в зависимости от тяжсстн течения Н периода заболевания,

Впервые показано, что у больных ОКИ различной этнологии во все периоды заболевания наблюдаются достоверно более высокие показатели повреждения структуры ДНК ПМЯЛ нернферн'геской кровн по сравнению с контрольной грушюй

Впервые выяаяено. что у больных ОКИ нейтрофнлы периферической кровн в острый период заболевания в больнзей степени, чем лимфоциты подвержены апоптозу,

Установлено, что у пациентов выявляются однотипные изменения а показателях программированной гибели лейкоцитов периферической кровн независимо от этиологии ОКИ.

У больных ОКИ в еталии реконвалееценцни установлена достоверная корреляций между параметрами начальных и завершающих проявлений программированной гибели лейкоцитов периферической крови. что свидетельствует о наличии в цнркулаториом русле как клеток в состоянии алопгоэа, так и коммигированных к нему.

Впервые отмечено, что у больных ОКИ на высоте клинических проявлений интоксикация получена достоверная корреляция между начальными проявлениями программированной гибели (ОР ДНК) иейтрофнлов н лейкоцитарным индексом интоксикации (ЛИИ).

Практическая ценность работы.

На основании проведенных исследований выявлена взаимосвязь между показателями начальных проявлений апоптоза лейкоцитов периферической крови больных СЖИ различной этнологии в виде ОР ДНК и объективным критерием выраженности интоксикационного синдрома, представленным в виде интегрального показателя - ЛИИ.

Результаты исследования ОР ДНК и апоптоза лейкоцитов периферической крови Сольных ОКИ определили возможность их использования в качестве дополнительного критерия при оценке тяжести и длительности течения инфекционного процесса.

Полученные результаты позволяют расценивать регистрацию повреждений ДНК, представленных а виде ОР, в качестве доступного н адекватного теста для выявления клеток на ранних стадиях апоптоза у больных ОКИ.

Применение используемых нами методик может бьпь рекомендовано При изучении особенностей патогенеза СИ и при других инфекционных нозология«, в качестве дополнительного инструмента, в том числе для определения роли и значения функциональной активности ПМЯЛ, как важнейшего показателя системы неспецнфического иммунитета.

Положения, выноенчые на »пилу,

У большинства больных независимо от этнологии ОКИ отмечалось возрастание показателей ОР ДНК нейтрофилов периферической крови в зависимости от периода заболевания.

У больных ОКИ отмечено снижение показателей апоптоза ПМЯЛ в период разгара заболевания но сравнению с показателями группы контроля. В период ранней реконвалесценцни у пациентов ОКИ выявлено повышение показателей ОР ДНК и апоптоза ПМЯЛ не только по сравнению с показателями в группе контроля но, также в сопоставлении с начальными величинами.

Отмечено различие в регистрируемых показателя* СОР ДНК н апоптоза) ПМЛЛ в зависимости от тяжести инфекционного процесса у больных ОКИ.

В период ранней реконвалссцснцнн, при купировании основных проявлений заболевания показатели апоптоза нейтрофилов периферической кроен у больных ОКИ достигали своего пика, свидетельствуя о сохраняющихся патоморфологнческнх реакциях.

Отмечено достоверно значимое увеличение значении апоптоза лимфоцитов периферической крови у пациентов ОКИ при среднетяжелом течении в период р л i ара заболевания, с последующим достоверным снижением в период рекоивалссценцнн, но с сохраняющимся превышением лого показателя от группы контроля.

Определена шшощк объективного интегрального показателя СИ - ЛИИ с показателями повреждения структуры ДИК нейгрофилов, в виде ОР у больных ОКИ

Внедрение результатов работы.

Результаты настоящего исследования используются в работе ] I инфекционного отделения ГКБ К-: 4. Матери a.'i ы работы включены в учебный курс кафедры инфекционных болезней M МЛ uol И M Сеченова и используются в учебном процессе при преподавании данною раздела.

Апробации раЕклы.

Основные положен ид и результаты исследования представлены на юбилейной научно-практической конференции «Инфекционные и паразитарные болезни в современном обществе. Клинико-лабораторное обеспечение ннфекгалогнн», посвященной 80-легию образования кафедры инфекционных болезней ММА им. И.М. Сеченова (Москва 22-23 мая 2003г.Ш Конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 20-24 января 2004г.); 1-ой Международной конференции «Молекулярная медицина и биобсзоласность» (Москва 26-28 октября 2004г.); VU Российском съезде инфекционистов «Новые технологии в диагностике и лечении инфекционных болезней» (Нижний Новгород, 25-27 октября 2006г.); Российском Медицинском Форуме «Фундаментальная наука и практика» (Москва (8-20 октября 2006г.), В также неоднократно обсуждались на научно-практических конференциях кафедры инфекционных болезней, Диссертация япробкровино на совместном заседании кафедры инфекционных болезней, лаборатории по изучению токсических и септических состояний и кафелры биохимии ММА им. И М Сеченова 29 нюня 2006г.

Публикации, По теме лисссртаннн опубликовано 9 научных работ

Заключение диссертации по теме «Инфекционные болезни», Красавина, Эмилия Николаевна

ВЫВОДЫ

1. Комплексное применение в динамике заболевания у бальных ОКИ прямого флуоримсгрического метода и проточной цнтофлуорнметрнн с определением показателей одноннтевых разрывов ДИК н апоптоза позволяет регистрировать процесс программированной гибели клеток на разных стадиях развития.

2. Установлено, что показатели программированной гибели клеток у больных ОКИ зависят от тяжести заболевания, тогда как этнология н клинический вариант течения не оказывают существенного влияния на значения изучаемых парамстров

3. Изменения параметров программированной гибели полиморфно-ядерных лейкоцитов и лимфоцитов периферической крови в динамике ОКИ определяются типом клеток и зависят от тяжести инфекционного процессз

4. Изучение показателей программированной гибели полиморфно-ядерных лейкоцитов у больных ОКИ показало, что в острый период заболевания на высоте интоксикации регистрируется статистически значимое накопления одноннтсвых разрывов ДНК, тогда как показатели апоптоза определяются на значениях достоверно более низких, чем в контрольной группе

5. Изучение показателей про|раммированной гибели полиморфно-ядерных лейкоцитов в периоде ранней реконвалеспенцнн, показало, что на фоне продолжающегося накопления одноннтевых разрывов ДНК клеток происходит достоверно значимое увеличение количества клеток, подвергшихся алогпоэу.

6. На высоте клинических проявлений синдрома шггокенкацин н в периоде ранней рсконвалссиснцнн у больных ОКИ показатели одноннтевых разрывов ДНК лимфоцитов не отличались от контрольных значений, тогда как параметры апоптоза достоверно возрастали в острый период, имея лишь тенденцию к снижению на 5-7 дни болезни,

7. В периоде разгара ОКИ независимо от этологии больший процент одноннтсвых разрывов ДНК полиморфно-ядерных лейкоцитов определялся у пашнилов с высокими значениями лейкоцитарного индекса интоксикации,

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Определение одной итевых разрывов ДНК полиморфно-ядерных лейкоцитов периферической крови, может быть рекомендовано для использования в практическом здравоохранении. в качестве дополнительного критерия объективной оценки тяжести течения ОКИ различной этнологии.

Учитывая универсальность механизмов развития синдрома интоксикации у больных с бактериальными инфекциями. определение впоптоза нейтрофнлов и лимфоцитов периферической крови в стадии реконп&лесценцнн может использоваться для определения полноты кл и н и ко- па гоморфолошческого выздоровления пациентов,

Метод регистрации алоптоза нейтрофнлов с помощью проточной шпофлуориметрин может быть использован с целью выявления пациентов с латентно протекающей кишечной инфекцией.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Красавина, Эмилия Николаевна, 2007 год

1. Барышников А .Ю., Шишкин Ю.В. Иммунологические проблемы апоптоза, -М.: УРСС- 2002.' 320 с.

2. Бслушкнна Н.Н„ Хасан Хамад А,, Северин СЕ. Молекулярные основы апоггтаза. // Вопросы биологической медицинской и фармацсвзичеекой химии,- 1998, № 4. С- - 15-24.

3. Белушкнна Н.Н Контроль процесса апоптоза белками семейства Ве.-2. И Вопросы биологической медицинекоН и фармацевтической химии 2000, -№4-С,9-1б.

4. Бродов Л.Е„ Юшук И.Д. Малеев В. В. Диагностика н лечение острых кишечных инфекций, Н Эпидемиология и инфекционные болезни. 1997, №4.-С. 4-й.

5. Буевсров А,0-» Тихонииа Е.В., Москалева Е.Ю, и др. Апоптоз периферических лейкоцитов при хронических вирусных гепатитах. // Росс, жури, гастроэитерол., гепятол., колопроктол. 2000. - №6. - С 30-33.

6. Бухарин ОЛ„ ТуЙгуиоа М.М., Зурочка А.В- и др. Феномен апоптоза в выживании зитеробактерий в системе паразит-хозяин. Н Жури. Мнкробиол, 2002. - №1 - С. 79-84.

7. Вертев Ю.В. Бактериальные токсины. // М,г Медицина. Проблемы нифекгопогмм.' 1991 .-С.127-130.

8. Вертнев Ю.В. Токсин-опосредованная обусловленность инфекционных заболеваний //Жури. Микробиол -1987 -X* 11.-С.43-46.

9. Горобчсико А.Н. Оценка функциональной активности популяции полиморфно-ядерных лейкоцитов периферической крови у больных с острыми кишечными инфекциями. П Автореферат дне. к-та мед. наук.-М.,1999,

10. Ю.Желешнкоиа Г.Ф., Васякина Л. И.г. Монахова НЕ., Павленко М.А.,Новожнлова Е.В, Попова Н.А., Родионова О,В. Апоптоз и иммунный ответ у детей с острым инфекционным мононуклеозом.// Иммунология.2000.-^4- С. 87-94.

11. П.Жукова О,Б., Ряэанцсв Н,В» Нопшхнй ВВ., Ииконова М.Ф.м др. Модуляция апоптоза лимфоцитов как способ выживания вируса гепатита С Л Иммунология. 2005, - №2 -С .79-83.

12. Зигингнрова НА., Гннцбург A.JI. Роль апоптоза в регуляции инфекционного процесса, I! Жури. Мнкробиол. 2004. - №6. - С. 106-113.

13. Змыэгоиа A.B., Москалева Е.Ю. Максимов СЛ. н лр. Структура лейкоцитов периферической крови и показатели клеточного иммунитета больных вирусным гепатитом ВУ/ Вопросы биологической медицинской н фармацевтической химии. -1999. Ns 2, - С 16-19,

14. Кальф Калиф ЯЛ, К характеристике практической ценности и служебной роли лейкоцитарного индекса интоксикации в клинике острых и хронических инфекционных заболеваний. H Врачебное дело, — 194!. №5, -С. 339-344.

15. Кальф Калиф ЯЯ. О «лейкоцитарном индексе интоксикации» н его практическом значении, и Врачебное дело, — 1941- №1. - С. 31-36.

16. Капустин В.А., Малеев ВВ. Интоксикационный синдром при острой дизентерии. II Тер- архив.-1993.-Ns Ц.-С.12-13

17. Ковальчук Л.В., Хореева М.В., Варивода A.C. Врожденные компоненты иммунитета.-. TOLL подобные рецепторы в норме и при патологии. II Жури. Микробная.- 2005. - № 4, - С, 96-104,

18. Лиходея В.Г., Юшук Н.Д., Яковлев MIO. Роль эндотоксина |рам отрицательных бактерий в инфекционной и неннфе «тонной патологии, II Архив патологии,-1996 2.-С.8-13.

19. Ма.юь В.А., Пак CI Медико-биологические аспекты проблемы интоксикации в инфекционной патологии. //Тер. архив.-1992-№ 11.-С,7-11.

20. Новиков B.C. Программированная клеточная гибель. // Санкт-Петербург: Наука. -1996.-276 с.

21. Останин А Н., Пальцев АЛ,, Лебедев А.Г. и др. Характеристика шюпгоэа и функциональной активности лимфоцитов у больных язвенной болезнью.// Бюллетень СО РАМН. 2004.-.tel.-(Ill),27, Пак С,Г. Актовая речь М.; Русский врач - 2005,

22. Пак С,Г., Малое В.А, Проблема интоксикации в инфекционной патологии. 11 Патогенез, иммунология, клиника и диагностика инфекционных болезней.-М.: Медицина, 1992.-C.5S-62,

23. Пак С.Г., Пальцев М.А., Турьянов М.Х. Сальмонсллез. М-: Медицина-1986,- 304 с.

24. Петровская В Г., Бондаренко В.М. роль факторов гЕатогенносги бактерий на различных этапах инфекционного процесса и их генетический контроль. // М: Медицина. Проблемы иифсктологни,-1991,-С.106-И4,

25. Покровский ВЛ.( Бродов Л.И,, Малеев B.R. Клиническая характернсшка нитокенкаинониого синдрома при сальмонеллам;, II Тер. архив ,- 1983,- J& 4,-С. 138-141.

26. Покровский В.И., Юшук Н.Д. Бактериальная дизентерия. М.: Медицнна.-1994 -256 С,

27. Рябнчскко К В. Ветковд ДГ, Бонларенко В.М, Молекулярные аспекты повреждающего действии бактериальных липополлсахаридов, II Жури, микробная. 2004. С. 98 - 105

28. Северин С.Е., Пальцев М-А., Иванов A.A. Молекулярные механизмы регуляции активности клеток// Вестник Института молекулярной медицины. 2001.- Выпуск 1. - М: Русский врач,- С. 5-21.

29. Сслнашвилн Р.И., Шубин М.Г., Колесникова Н,В.Т Славянская Т.А., Лоитатндэс Л.В. Апоптоз в иммунологических процессах.// Аллергология н иммунология. 2000. -N L-C. 15-23.

30. Черных ЕР-, Норкнн М.Н., Л сплина О.Ю, и др. Апоптоэ периферических Т-кисток н его роль в патогенезе генерализованной бактериальной инфекции. ü Rus. J. immun, -2001, Л*б: 131-146.

31. Шувалова Е.П., Беляева Т,В,, Осипов« Г.И, Клиника, диагностика и терапия дизентерии./.'Росси йс кий журнал гастроэнтерологии, гепаюлогнн, колопроктологин.-) 997- № 5.- С,60-66.

32. Яковлев М,10., Лкходед В. Г., Аниховская И,А., Конев Ю.В., Пермяков Н.К. Эидотоксининдуцнрованные повреждения эндотелия, Н Архив патологии.-1996-М гЛМ-45,

33. Ярилнн А-А, Апогтгоз, Природа феномена и ею роль в целостном организме. К Пятол. физнол. зкеперим- терапия, 1998. - № 2- - С, 38-48.

34. Abül-Milh М., Wu Y„ Lau В., Lingwood С. A., Foster, D,B. Induction of Epithelial Cell Death Including Apoptosis by Enteropathogenk Escherichia coli Expressing Bundle-Forming Pili If Infection and Immunity, 200) .- Vol. 69,- P. 7356-7364.

35. Aeehan D. et al. Three-dimensional structure of the apoptosome: implications for assembly, procaspase-9 binding, and activation. // Mol, Cell. -2002, Vol, 9,- P-423-432,

36. Akgul C. Moulding DA., Edwards S.W. Molecular control of neutrophil apoptosis. //FEBS Lett. 2001 - Vol. 487 - P.3J8-332.

37. Akira S. Toll-like Receptor Signaling. H I. Biol- Cheat- 2003 .- Vol. 278. Issue 40,38105-38108.

38. Alncmri ES., Livingston DJ„ Nicholson D.W. Salvcscn 0-, Thornbcrry N.A., Wong W W., Yuan J Human 1CE/CED-3 protease nomenclature. II Cell.- 1996,-Vol- 87, ^P. 171-189.

39. Anton sson B, Martinou J.C. The Be I-2 protein family. II Exp. Cell Res 2000-No. 256.-P. 50-57.

40. Aya!a A., Lomas, J.L„ Grutkoski P.S., Chung C.S. Pathological aspects of apoptosis in severe sepsis and shock? // Int. J. Biochem. Cell Biol. 2003,- Vol. 35.-P. 7-15.

41. Bannerman D.D., Eitrng KT, Winn R.K., Harlan J.M, FLICE-likc inhibitory protein (FLIP) protects against apoptosis and suppresses NF-kB activation induced by bacterial lipopolysaccharide. ff Am. J. Pathol. 2004. - Vol. 165. - p. 1423-143L

42. L Banz A., Pontoux C, Papiemik M, Modulation of Fas-dependent apoptosis: a dynamic process controlling both the persistence and death of regulatory T celts and effectorT cells. //). Immunol. 2002. - Vol. 169. - P. 750-757.

43. V Quitman» S.A., Krucger S. Kkchhoff P. Krammcr H. Regulation of T «11 apoptosis during (he immune response. // Curr. Mol. Med. 2002. - Vol. 2. - p. 257-272,

44. Bih. F., Safe/ L. Bcaubier M. Ovcrexprcssion of Toll-Like Receptor 4 Amplifies (he Host Response to Upopolysaccharide and Provides a Survival Advantage in Transgenic Mice. H J. Immunol 2003. ■ Vol, 170, - P. 6141 - 6150.

45. Bimbotm H.C., Jevcac J.J. Fluorimetrtc method for rapid detection of DNA strand breaks in human white blood cells produced by low doses of radiation, fl Cancer Res. 1981. - Vol.41. -No5. - P. 1889-1892.

46. Boatright, K.M., O S. Salvesen. Mechanisms of caspase activation- // Curr. Opin Cell Biol, 2003. - Vol. 15. - P 725-731.

47. Brannigan, A E., P,R O'Connell, H, Hurley, A. O'Neill. HJL Brady, J.M. Fnzpalrick. R.W Watson. Neutrophil apopiosis is delayed in patients with inflammatory bowel disease, U Shock, 2000- - Vol, 13, - P. 361-385.

48. Brennftn M.A-, B.T. Cookson. Salmonella induces macrophage death by caspase-1-dependent necrosis. // Mol. Microbiol. 2000. - Vol, 38. - P, 31-40.

49. Cheng A,C., Thiclman N.M. Update on traveler's dianhea, // Curr. Infect, 2002. -Vol. 4.-P. 70-79.

50. Colotta F., Re F., Polentarutti N. Sozzani S„ Mantovnm A- Modulation of granulocyte survival and programmed celt death by cytokines and bacterial products. // Blood. 1992. - Vol. 80, - P. 2012-2020,

51. Coo)tson B.T., MA. Brennan. Proinflammatory programmed cell death. II

52. Trends Microbiol. 2001 • Vol. 9. - P 113-114. 65-Cox 0. Glucocorticoid treatment inhibits apt'ptosis in human neutrophils Separation of survival and activation outcomes. // J. Immunol. - 1995 • Vol 154. -P. 4719-4725*

53. Fetriconi, R, Rossi, and P. Marconi- Group 8 Streptococcus Induces Apoptosis in Macrophages.-1/ J Immunol 2000 - Vol. 165(7). - P. 3923 - 3933.

54. Fink S.L. and Cookson B.T. Apopiosis, Pyroptosis, and Necrosis: Mechanistic Description of Dead and Dying Eukaryotic Cells. H Infection and Immunity, -2005 -Vol. 73<4). P. 1907-1916.

55. Finney S„ Evans T. Induction of apoptosis in sepsis: cell suicide may be beneficial^/Crit. Care Med -2002 Vol, 30(1}, - P . 261.

56. Frankenberger M„ H, Pechumer. H W Zicgler-Heitbrock. 1995. InterIeukin-10 is upregutaied in LPS tolerance.// J Inflamm- 1995. - Vol. 2- - P.45-56

57. Gavrilescu L.C, E.Y. Denkcrs. Apoptosis and the balance of homeostatic and pathologic responses to protozoan infection, // Infection and Immunity, 2003. -Vol. 71.-P. 6109-6115.

58. Gill C. Lau J , Gorbach S. Hamer Diagnostic accuracy of stool assays tor inflammatory bacterial gastroenteritis in developed and resource-poor countries.// Clin. Infect. Dis, 2003. - Vol. 37. ■ P. 365-75.

59. Green D.R., J.C. Reed. Mitochondria and apoptosis. //Science. 1998, • Vol. 281. -P. 1309-1312.

60. Hacker G.* S.F. Fischer. Bacterial anli-apoptotic activities-// FEMS. Microbiology Letters. 2002. -Vol. 211 (1), - P. 1-6.

61. Hasten C., Savill ) Why is apoptosis important to clinicians? t! BMJ. 2001. -Vol. 322. - P. 1499-1500,

62. Hay, S-, G- Kannourakis- A time to kill: viral manipulation of the cell death program Ji S. Gen. Virol. 2002. - Vol. 83. - P. 1547-1564.

63. Hernandez L.D., M- Pypaert. R.A. FJavell. J Si. Galan. A Salmonella protein causes macrophage cell death by inducing auk>phagy.// J. Cell Biol. 2003. - Vol, 163.-P. 1123-1131.

64. Hersh D., D M. Monack, M R. Smith, N. Ghori, S. Falkow. A. ZycWmsky. The Salmonella invasin SipB induces macrophage apoptosis by binding to caspase-I. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1999. - Vol. 96. - P. 2396-2401.

65. Heumann D-, T, Roger, Initial responses to endotoxins and Gram-negative bacteria.// Clin. Chtm, Acta. 2002. Vol. 4, - P. 323-359.

66. Hilhi H.« J.E. Moss. D. Hersh. Y. Chen, J. Arondel, S. Banerjee. R.A. Flavcll, J. Yuan and PJ. Sansonetti, Zychlinsky A. -Shigclla-induccd apoptosis isdependent on easpase-1 winch binds to IpaBJ/J. Biol, Chem. 1998,- Vol. 273. -P. 32895-32900.

67. Hochegger K, Efler P. and. Rosenkranz A.R. Granzyme A: an additional weapon of human polymorphonuclear neutrophils (PMNs) in innate immunity? // Blood. -2004 Vol. 103(3).-P. 1176 - 1176.

68. Israels L.G-. Israels E D, Apoptosis.// Oncologist. 1999. - Vol. 4(4). P, 332 -339.95Janssen O . R Sartzcnbacher, D. Kabehtz Regulation of activation-induced cell death of mature T-lymphocyte populations.// Cell Tissue Res. 2000. - Vol, 301 -P, 85-99,

69. Jiang X., Wang X. Cytochrome c promotes caspase-9 activation by inducing nucleotide binding to Apaf-lJ/ J. Biol, Chem, 2000. - Vol. 275. - P. 3119931203,

70. Ke N.A. Godzik, J.C Reed. Bcl-Br a Novel Bcl-2 Family Member Thai Differentially Binds and Regulates Bax and Bak,// J. Biol. Chem. 2001,- Vol. 276(16).-P, 12481 - 12484.

71. Keel M. Ungethum U, StecRholzcr U, et ai. Jntcrlcukin-10 counteircgulates proinflammatory cytokime-induced inhibition of neutrophil apoptosis during severe sepsis.tf Blood 1997 - Vol. 90. - P 3356-3363,

72. Kerr J.F., ct at. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kineticsJf Br. J. Cancer, 1972. - Vot. 26. - P, 239,

73. Kim J.M, L. Eekmann. T.C. Savidge, D.C. Lowe, T. WitihofL M.F Kagnoff. Apoptosis of human intestinal epithelial cells after bacterial invasion. It I Clin. Invest, 1998, - Vot. 102. - P 1815-1823

74. Kox WJ. T. Volk, S.N. Kox. HJ5. Volk. Immunomodulatory therapies in 5eps«7/ Intensive Care Med. 2000, ■ Vol. 26, - P. 124

75. Krammcr. P.H. CD95's deadly mission in the immune system.// Nature. -2000, Vol. 407. - P. 789-795.

76. Lavrik N. A. Golks, P.H. Krammcr, Caspases: pharmacological manipulation oicetl death. H J. Clin. Invest- 2005 Vol. 115(10), - P, 2665 -2672.

77. Lenardo M., Chan K.M., Homung F. Mc Farland H. Siege! R., Wang J., Zheng L. Mature T lymphocyte apoptosis—immune regulation in a dynamic and unpredictable antigenic environment // Annu. Rev. Immunol 1999. - Vol, 17. -P. 221-253,

78. Le Tulzo Y., Pangault C. Gacouin A. Guilloux V., Tribut O. AmioC L., TaJievin P., Thomas R.r Fauchet R., Drenou B. Early circulating lymphocytc apoptosis in human septic shock is associated with poor outcome.// Shock. -2002 Vol. 18.-P. 487-494.

79. Levin S, Apoptosis, necrosis, or oncosis: what is your diagnosis? A report from the Cell Death Nomenclature Committee of the Society of Toxicologic Pathologists.» Toxicol, Sci, 1998, - Vol, 41. - P. 155-156.

80. Lfles, W.C. Apoptosis: role in infection and inflammation.''/ Curr. Optn, Infect. Dts. 1997. - Vol. 10. P. l65-t7Q.

81. Mcssmer U.K., J. Pfleischifter New insights into the mechanisms for clearance of apoptotic cells. // Bioessays. 2000. - Vol. 22- - P. 878-8« 1.

82. Mteheau O. et at. I Tie long form of FLIP is an activator of caspase-8 at the Fas death-inducing signaling complex.// J. Biol. Chem, 2002. - Vol. 277, - P-45162-45171.

83. Monack D.M., J, Mecsas, D, Bovlcy, S. Falkow. Yersinia-induced apoptosis in vjvo aids in the establishment of a systemic infection of mice. II }. Exp, Med 1998 - Vol. 1S8. P 2127-2137.

84. Monack D.M., WW Navarre and S. Falkow. Salmonella-induced macrophage death: the role of caspasc-t in death and inflammation,// Microbes Infect. -2001,- P. 1201-1212.

85. Moss J.E-. A.O. Aliprantis, A. Zvchtinsky. The regulation of apoptosis by microbial pathogens. H Int. Rev. Cytol. -1999 Vol. 187. - P, 203-259.

86. Moulding DA., Akgul C\, Derouet M., White M, R. Edwards, S.W. Bd-2 family expression in human neutrophils during delayed and accelerated apoptosis.//J. Leukoe. Biot. 2001. - Vol. 70. - P. 783*792.

87. Murray J., Barbara A.J., et al. Regulation of neutrophil apoptosis by tumor necrosis factor-o: requirement for TNFR-55 and TNFR-75 for induction of apoptosis in vitro. // Blood. -1997,- Vol. 90, P. 2772-2783.

88. Navarre W.W, A- Zychlinsky Pathogen-induced apoptosis of macrophages: a common end for different pathogenic strategiesV/ Cellular Microbiology. 2000. - Vol 2. * No. 4. - P. 265-273.

89. Nolan B.r Collette H. et. a!, Inhibition of neutrophil apoptosts after severe trauma is NFkappabrta dependent.'' J. Trauma. -2000. Vol. 48. - P. 599-604

90. Obregon C, D. Dreher, M. Kok. L. Cochand, G S. Kiama. LP. Ntcod. Human alveolar macrophages infected by virulent bacteria expressing SipB are amajor source of active uucrleukin-187/ Infection and Immunity. 2003. - Vol. 71 -P. 4382*4388.

91. Pitrak D.L., Tsai H.C., ct ul Accelerated Neutrophil Apoptosis in the Acquired Immunodeficiency Syndrom«-// J- Clin. Invest. 1996. - Vol, 98 (12). -P.27I4-27I9.

92. Piatt N. R-P- da Silva. S, Gordon. Recognizing death; the phagocytosis of apoptotic cells ¿Trends Cell Biol. 1998. P. 365-372.

93. Potten C.S., Booth C. The role of radiation-induced and spontaneous apoptosis in the homeostasis of the gastrointestinal epithelium: a brief review.// B. Biochem. Mol. Biol. 1997. - Vol. 118. P. 473-478.

94. Raete C.R., C. Whitfield Lipopoivsaccharide endotoxins,// Annu, Rev Biochem. 2002. - Vol. 7L - P. 635.

95. Rathman L. Barker. S. Falkow. Tbe unique trafficking pattern of Salmonella iyphimurium-comaining phagosomes in murine macrophages is independent of the mechanism of bacterial entry. // Infection and Immunity. -1997.- Vol. 65-P. 1475-1485

96. Reed J.C, Mechanisms of apoptosis. //Am. 1, Pathol, 2000. - Vol. 157. -P. 1415-1430.

97. Renehan A.G., Booth C., Potten C.S. What is apoptosis, and why is it important? U B.MJ, 2001. - Vol. 322. - P. 1536-1538.

98. Rogers H.W. Callcry M.P,. Deck B„ Unanue E.R. Listeria monocytogenes induces apoptosis of infected hepatocyxes. // J. Immunol. 1996. Vol. 156. - P. 679-684.

99. Salamonc G., Giordano A S. et.af Promotion of Neutrophil Apoptosi-s by TNF-alpha. ffi. Immunol. 2001. - Vol. 166(5). - P. 3476 - 34S3.

100. Sfltvcscn G.S., Dixit V.M. Caspascs: intracellular signaling by proteolysis Jt Cell. -1997. Vol. 91. P. 443-446.

101. Sansonctti PJ.+ A. Phatipon., J. Arondet, K. Thirumalai, S. Banerjec, S. Akira, K. Takcda, A. Zychlinsky. Caspase-1 activation of IL-lfl and IL-18 are essential for Shigella flcxncri-indueed inflammation,/'' Immunity. 2000.- Vol. 12, - P. 581-590.

102. Schroetler S r Lmdemann C. Decker D., ct. al. Increased susceptibility to apoptosis in circuSaSing lymphocytes of critically ill patients JI Langenbecks Arch. Surg. 2001.- Vol, 386. - P. 42.

103. Schwartz S.M„ M.R. Bennett. Death by any othcT name- Am. S, Pjflho\JI -1995. * Vol. 147.-P. 229-234.

104. Shi Y. Mechanisms of caspase activation and inhibition during apoploaisJ' Mol, Cell. 2002- - Vol. 9. - P 459-470.

105. Siebers A., B,B. Finiay, Models to study entcropathogenic bacteria: lessons learned from Shigella. ¿Trends Microbiol. 1995. - Vol. 3. - P. 207-209.

106. Siege! R.M., Chan M. Chun H J., Lcnardo M.J. The muhifaceted role of Fas signaling in immune cell homeostasis and autoimmunity J! Nat. Immunol. -2000. Vol. 1. - P. 469-474.

107. Simon H.U, Neutrophil apoptosis pathways and their modifications in inflammation Jt Immunol Rev 2003. Vol. 193. P. 101 -i 10.

108. Singhal P C-, P, Patel, N. Nahar, K, Reddy, A, Kapasi, l-E. Nwakoby. N. Frunki. Ethanol»induccd neutrophil apoptosis is mediated through nitric oxide. 11 I Leukoc. Biot. 1999. - Vol. 66, - P. 930-936,

109. Spcrandio S-, dc Belle 1., Bredesen D£ An alternative. nonapoptotic form of programmed cell death. if Proc- Nat. Acad. Sci. 2000. - Vot. 97- - P 1437614381.

110. Squid1 M.K., A.J. Sehert, J.J. Cohen, Apopiosis in leukocytes.// J- Leukoc. Biol. * 1995.- Vol. 57. P, 2-10.

111. Stenner-Liewen F., II. Licwen. J.M, Zapata, K. Pawfowski, A. Godzik, J.C. Reed. CADD, a Chlamydia protein that interacts with death receptors,// J. Biol. Chcro. -2002, Vol. 277. - P 9633-9636,

112. Stockbauer K.E., A.K. Fofcman-Wykcrt, IF, Millet, Bordctclla type III secretion induces easpase I-independent necrosis. //Cell Microbiol. 2003, • Vols'-P. 123-132.

113. Takcda IC, Katslto T., Akira S. Toll-like receptors. //Annu. Rev, Immunol.-2003.-Vol,21,-P. 335.

114. Takeuchi Horiuchi T , Hoshino K., Takcda K-, Dong Z , Modlin R-L. Akira, S. 2002, Role of TLR1 in mediating immune response to microbial lipoproteins«// J. Immunol 2002. • Vol. 169. P. 10.

115. Thompson C.B. Apopiosis in the pathogenesis and treatment of diseasesJl Science, 1995.- Vol. 267. - p. 1456.

116. Triantafilou M,, K. Triantafilou. Lipopolysaccharide recogniiion: CD14, TLRs and the LPS-activation cluster. //Trends Immunol. 2002. - Vol. 23. - P, 301.

117. Wdnmann P., K, ScharfTetter-Kochanek, S. Bardley-Foriow, T, Peters. B. Walzog, A role for apoptosis in the control of neutrophil homeostasis in the circulation: insights from CD I »-deficient mice J'/ Blood. 2003. - Vol. 101 P. 739-746.

118. Whytc M.K., L-C. Meagher. J. Mac Dcrmot, C. Haslctt Impairment or function in aging neutrophils is associated with apoptosis.// J. Immunol. 1993.-Vol. 150. -P. 5124-5134.

119. Wijburg O ,L., C P- Simmons, N. van Rooijen, BA. Strugnell. Dual role for macrophages in vivo in pathogenesis and control of murine Salmonella enterica var. Typhimurium infections. II Eur. i. Immunol. 2000- P. 944-953.

120. Williams G.T., C.A. Smith. E. Spooner, T.M. Dexter, DR. Taylor. Hematopoietic colony stimulating factors promote cell survival by suppressing apoptosis, // Nature, 1990, - Vol. 343. - P. 76-79.

121. Wyllie A.H. Glucoconicoid-mduced thymocyte apoptosis is associated with endogenous endonuclcasc activation// Nature. 1980, - Vol, 284. - P, 555556.

122. Xing Z„ J. Gauldic, G. Cox, H Baumann, M. Jordana, X.-F. Lei, M-K, Achong. IL-6 is an anti-inflammatory cytokine required for controlling local or systemic acute inflammatory responscsjV J. Clia, Investig -1998,- Vol 101. P 311-320,

123. Yuk MH-, Han-ill E.T., Cotter P-. Mlll«r J,F- Modulation of host immune responses, induction of apoptosis and inhibition of NF-kB activation by the Bordetella type III secretion system/' Mol.Microbiol.-2000. -Vol. 35,-P 9911004.

124. Zhang Y. J.B, Bliska. Role of Toll-Like Receptor Signaling in the Apoptotic Response of Macrophages to Yersinia Infection. U Infection and Immunity. 2003 -Vol.71. - P 1513-1519

125. Zheng L„ Fisher, G.t Miller, R.E., Peschon J., Lynch D.H., Lenardo. MJ, Induction of apoptosis in mature T celts by tumour necrosis factor. // Nature. -1995. Vol. 377. - P. 348-362.

126. Zychlinsky A , P.J. Sansonetti. Apoptosis as a proinflammatory event: what can we leam from bacterial-induced cell death? tt Trends Microbiol. 1997. -Vol. 5. -P. 201-204.

127. Zychlinsky A., P, Sansonetti. Perspectives series: host/pathogen interactions. Apoptosis in bacterial pathogenesis. // J. Clin. Investig. -1997, Vol, 100. -P. 493-495,9т

128. Считаю необходимым шршп, сердечную благодарность научным руководителям работы: профессору, доктору медицинских наук Валерию Анатольевичу Ма-шоу; профессору, доктору биологических наук Наталье Николаевне Белушкниой.

129. Искренне благодарна сотрудникам лаборатории молекулярной биологии И биохимии НИИ молекулярной медицины ММА им. И М. Сеченова за помощь в выполнении запланированных исследований.