Клинико-морфологические и молекулярно-генетические факторы риска метастатического поражения регионарных лимфатических узлов у больных раком молочной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат наук Карабанова Юлия Анатольевна

• Карабанова Юлия Анатольевна
• кандидат наук
• 2021

Оглавление диссертации кандидат наук Карабанова Юлия Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные представления о механизмах лимфогенного метастазирования. Опухолевый лимфангиогенез

1.2. Клинико-морфологические предикторы метастатического поражения лимфатических узлов

1.3. Лимфангиогенные цитокины, лимфоваскулярная инвазия и белки межклеточных взаимодействий в метастазировании рака молочной железы

1.4. Биологические подтипы рака молочной железы как предикторы метастатического поражения лимфатических узлов

1.5. Генетические предикторы лимфогенного метастазирования рака молочной железы

1.6. Сопоставление иммунопрофиля первичной опухоли и синхронного метастаза в подмышечном лимфатическом узле

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Клиническая характеристика пациенток

2.2. Морфологическое исследование опухолевой ткани молочной железы

2.3. Иммуногистохимическое исследование опухолевой ткани молочной железы и опухолевой ткани метастатического лимфатического узла

2.4. Генетическое исследование опухолевой ткани молочной железы и опухолевой ткани метастатического лимфатического узла

2.5. Статистическая обработка полученных данных

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Взаимосвязь регионарного метастазирования с клиническими данными и морфологическими характеристиками первичной опухоли

3.2. Взаимосвязь регионарного метастазирования с молекулярно-биологическими характеристиками первичной опухоли

3.2.1. Корреляция между клинико-морфологическими параметрами опухоли и ее молекулярно-биологическими свойствами

3.2.2. Сопряженность молекулярно-биологических свойств первичной опухоли с риском регионарного метастазирования

3.3. Взаимосвязь регионарного метастазирования с генетическими характеристиками первичной опухоли

3.4. Прогностическая модель определения риска метастатического поражения регионарных лимфатических узлов у пациенток с РМЖ

3.5. Изучение дискордантности молекулярно-биологических и генетических свойств первичной опухоли и синхронного метастаза в лимфатическом узле

3.5.1. Различие молекулярно-биологических характеристик первичной и метастатической опухолей

3.5.2. Влияние смены молекулярно-биологического подтипа опухоли на выживаемость пациенток

3.5.3. Различие генетических характеристик первичной и метастатической опухолей

ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-морфологические и молекулярно-генетические факторы риска метастатического поражения регионарных лимфатических узлов у больных раком молочной железы»

Актуальность проблемы

Рак молочной железы (РМЖ) является наиболее актуальной проблемой современной онкологии, что в первую очередь обусловлено высокой заболеваемостью. Заболеваемость РМЖ (стандартизованный показатель) в РФ в 2018 г. достигла 51,63 случаев на 100 000 женского населения. Неуклонно растет число вновь зарегистрированных случаев, среднегодовой темп прироста составляет 1,97%, а прирост заболеваемости за последние 10 лет - 22,15% [8]. Несмотря на рост заболеваемости, за последние годы чаще стали выявляться ранние формы рака. В 2019 г. РМЖ на 1-11 стадиях был диагностирован у 71,8% пациенток, тогда как десять лет назад этот показатель составлял 63,0% [9].

Хирургический метод, который является основным в лечении РМЖ, на протяжении своей истории претерпел множество модификаций. В настоящее время хирурги-онкологи отдают предпочтение методикам с максимально возможным сохранением объема органа (секторальная резекция, лампэктомия). Сокращение объемов оперативного вмешательства касается не только удаляемой ткани молочной железы, но и уменьшения объемов аксиллярной лимфодиссекции. Последнее, вероятно, имеет даже более принципиальное значение в отношении клинически значимых осложнений. Отек верхней конечности, парестезии, хронический болевой синдром, ограничение движений встречаются у 5-50% пациентов, которым выполнялась аксиллярная лимфаденэктомия [2, 3, 48, 50, 82, 99, 103, 161].

Одновременно можно констатировать, что у 1/3-1/2 пациенток, страдающих РМЖ, удаление регионарных лимфатических узлов выполняется необоснованно, так как после гистологического исследования операционного материала у них не обнаруживаются метастазы в аксиллярных лимфатических узлах. Не случайно биопсия сигнального лимфатического узла стала достойной альтернативой традиционной хирургии на лимфатическом аппарате при раннем РМЖ и активно внедряется в практику.

Данная методика позволила значительно снизить количество послеоперационных осложнений, вызванных лимфодиссекцией, но не исключила их полностью. Частота осложнений после применения биопсии сигнального лимфатического узла по данным разных авторов колеблется от 4% до 15% [10, 11, 131, 149, 156, 161]. К тому же она имеет существенное ограничение в применении, ввиду необходимости специального материально-технического оснащения. Поэтому, в последние годы среди онкологов начинают активно дискутироваться вопросы полного отказа от хирургического вмешательства на регионарных лимфоузлах у больных РМЖ при отсутствии клинических данных, свидетельствующих об их поражении.

Таким образом, становится очевидной необходимость поиска новых предикторов метастатического поражения регионарных лимфоузлов в первую очередь на основании биологической характеристики первичной опухоли.

На данный момент в литературе накоплен достаточно большой опыт по изучению механизмов и факторов, способствующих лимфогенному метастазированию РМЖ. Во многих исследованиях продемонстрирована взаимосвязь тех или иных характеристик первичной опухоли с ее метастатическим потенциалом. Вместе с тем данное направление требует активной, углублённой работы, так как пока не выделены надёжные маркёры, при анализе которых можно было бы с высокой степенью достоверности утверждать о статусе лимфатических узлов каждой конкретной пациентки и максимально индивидуализировать объем хирургического лечения.

Таким образом, представляется крайне актуальным изучение клинико-морфологических и молекулярно-генетических факторов, способствующих метастазированию рака молочной железы в регионарные лимфатические узлы. А также весьма перспективным является исследование взаимосвязи биологических свойств первичной опухоли и свойств ее метастаза в лимфатическом узле.

Цель исследования:

Разработать оптимальный набор фенотипических и генетических признаков первичной опухоли, являющихся факторами риска метастатического поражения регионарных лимфатических узлов у больных раком молочной железы.

Задачи:

1. Выявить клинико-морфологические и молекулярно-биологические параметры первичной опухоли, определяющие высокий риск регионарного метастазирования.

2. Исследовать экспрессионный профиль рака молочной железы и выделить гены-предикторы регионарного метастазирования.

3. Разработать прогностическую модель метастатического поражения регионарных лимфатических узлов, основанную на генетических параметрах первичной опухоли молочной железы.

4. Оценить взаимосвязь молекулярно-биологических и генетических характеристик первичной опухоли с характеристиками ее синхронного метастаза в регионарных лимфатических узлах.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Существует достоверная корреляция метастатического поражения лимфатических узлов с некоторыми клинико-морфологическими и молекулярно-биологическими характеристиками первичной опухоли.

2. Наличие метастазов в регионарных лимфатических узлах зависит от генетического профиля первичной опухоли молочной железы.

3. Разработанная модель метастатического поражения регионарных лимфатических узлов, основанная на генетических параметрах первичной опухоли молочной железы, способна повысить эффективность прогнозирования метастатического поражения регионарных лимфатических узлов.

4. Первичная опухоль молочной железы и синхронный метастаз в подмышечном лимфатическом узле имеют схожие молекулярно-биологические

характеристики, однако имеющиеся изменения отдельных параметров могут приводить к смене молекулярно-биологического подтипа опухоли.

5. Генетический профиль метастаза в подмышечном лимфатическом узле, в целом, схож с генетическим профилем первичной опухоли молочной железы.

Научная новизна

На статистически репрезентативном материале (200 случаев) проанализировано влияние клинико-морфологических и молекулярно-биологических характеристик первичной опухоли на статус подмышечных лимфатических узлов. Впервые методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) исследована экспрессия 28 генов - ключевых регуляторов канцерогенеза, и выделены гены-предикторы метастатического поражения лимфоузлов. Построена модель прогнозирования наличия или отсутствия метастатического поражения лимфоузлов на основании экспрессии 7 генов (РТЕЫ, СБб8, ССЫБ1, МОБ1, МУС, БСЬ2, ЕБШ) в первичной опухоли молочной железы, демонстрирующая высокую точность отнесения пациенток к той или иной группе.

Проведено сопоставление уровней экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона, уровня НЕЕ2 и Кь67 в первичной и метастатической опухолях. Выявлено, что дискордантная экспрессия отдельных параметров влияет на смену молекулярно-биологического подтипа в опухолевой ткани метастаза, кроме того, нами продемонстрировано влияние данного феномена на выживаемость пациенток с РМЖ.

Включение результатов данного исследования в диагностический комплекс способно повысить его эффективность и индивидуализировать подходы к лечению пациенток с РМЖ.

Практическая и теоретическая значимость работы

Разработан оптимальный набор фенотипических и генетических характеристик первичной опухоли, являющихся независимыми факторами риска

метастатического поражения регионарных лимфатических узлов у больных раком молочной железы. Такие параметры, как размер, гистологический вариант, степень злокачественности, Суммарный Балл Злокачественности (СБЗ), лимфоваскулярная инвазия и HER2-статус первичной опухоли, могут быть использованы клиницистами как предикторы метастатического поражения подмышечных лимфатических узлов. По результатам ROC-анализа, основываясь на значении СБЗ, предположить наличие метастатического поражения лимфатических узлов можно с точностью до 72,2%, а отсутствие метастазов - с точностью до 80%.

Предложенный вариант генетического исследования с включением генов РТЕЫ, СБб8, ССЫБ1, МОБ1, МУС, БСЬ2, ББШ может стать дополнительным диагностическим инструментом для прогнозирования риска метастатического поражения лимфатических узлов. По данным дискриминантного анализа чувствительность метода составила 91,9%, специфичность - 78,8%.

Разработанная на основании вышеперечисленных параметров компьютерная программа «Риск метастатического поражения регионарных лимфатических узлов у больных раком молочной железы» позволяет максимально точно и удобно оценить риск метастатического поражения лимфатических узлов у пациенток с РМЖ.

Результаты проведенного анализа по сопоставлению иммунопрофиля первичной опухоли и метастаза свидетельствуют о целесообразности в ряде случаев определения экспрессии стероидных гормонов, HER2-статуса и уровня пролиферативной активности в метастатическом лимфатическом узле при выборе тактики адъювантного лечения.

В данной работе продемонстрировано, что генетический профиль первичной опухоли молочной железы, в целом, схож с генетическим профилем метастатической опухоли, обнаружена корреляция между экспрессией в первичной и метастатической опухолях генов, отвечающих за схожие механизмы, контролирующие канцерогенез.

Внедрение результатов исследования

Результаты исследования внедрены в работу ГУЗ Областной клинический онкологический диспансер г. Ульяновска, в учебный процесс кафедры онкологии и лучевой диагностики Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Ульяновский государственный университет».

Апробация работы

Апробация диссертации состоялась 07.09.2020 г. на расширенном заседании кафедр онкологии и лучевой диагностики, общей и оперативной хирургии с топографической анатомией и курсом стоматологии, морфологии, биологии и биоэкологии, физиологии и патофизиологии, последипломного образования и семейной медицины Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Ульяновский государственный университет». Протокол № 1.

Результаты исследования представлены и обсуждены на 54-ой межрегиональной научно-практической медицинской конференции «Национальные проекты - приоритет развития здравоохранения регионов» (Ульяновск, май 2019 г.), на II Национальном научно-образовательном Конгрессе «Онкологические проблемы от менархе до постменопаузы» (Москва, февраль

2018 г.), на III Национальном научно-образовательном Конгрессе «Онкологические проблемы от менархе до постменопаузы» (Москва, февраль

2019 г.), на VII Московском форуме Российского общества онкомаммологов (Москва, апрель 2020 г.).

Личный вклад автора

Личный вклад автора состоит в непосредственном участии на всех этапах исследования: формулирование цели и задач исследования, разработка плана и методики исследования, набор исследуемого материала (отбор пациентов раком молочной железы согласно критериям включения, анализ клинико-

морфологических, молекулярно-биологических и генетических данных, фотографирование макро- и микропрепаратов), проведение морфологического и иммуногистохимического исследований, обработка результатов исследования и подготовка публикаций по материалам работы.

Публикации по теме диссертации

По результатам диссертационного исследования опубликовано 11 научных работ, из них 3 - в научных рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки России.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 128 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, состоящего из 186 источников, в том числе 19 - отечественных и 167 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 29 таблицами и 27 рисунками.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные представления о механизмах лимфогенного метастазирования. Опухолевый лимфангиогенез

Первые сведения о существовании лимфатических сосудов появились еще в XVII веке. В 1627 г. была опубликована книга известного итальянского хирурга Гаспаро Азелли, в которой среди других анатомических данных были впервые описаны лимфатические («молочные») сосуды брыжейки тонкой кишки у собаки. У человека лимфатические сосуды и лимфатические узлы возникают из мезенхимы по ходу крупных вен в виде лимфатических мешков на 6-7-й неделе внутриутробного периода (позже образования кровеносных сосудов). В конце 3 -го месяца из этих мешков, вначале в яремной и подвздошно-паховых областях образуются лимфатические узлы. Во взрослом организме временная инициация лимфангиогенеза наблюдается при воспалении, регенерации тканей и заживлении ран [19].

Феномен диссеминации опухолевых клеток по лимфатическим сосудам является одним из ключевых этапов опухолевой прогрессии, а опухолевый лимфангиогенез имеет решающее значение для инициации лимфогенного метастазирования.

Традиционно лимфогенное метастазирование описывается как каскад последовательных этапов (рисунок 1): 1) секреция растущей опухолью лимфангиогенных цитокинов; 2) опухолевый лимфангиогенез; 3) проникновение опухолевых клеток из первичного очага в лимфатические капилляры (интравазация); 4) распространение опухолевых клеток с током лимфы по направлению к лимфатическому узлу; 5) экстравазация в области краевого синуса лимфатического узла; 6) пролиферация опухолевых клеток и колонизация лимфоидной ткани [107].

Рисунок 1 - Схема лимфогенного метастазирования эпителиальных опухолей [112]

В действительности процесс лимфогенного метастазирования намного сложнее и представляет собой сложнейшую комбинацию уникальных механизмов.

Существует ряд предпосылок, обуславливающих склонность злокачественных клеток к лимфогенной диссеминации. Одной из основополагающих причин является структурная организация стенки лимфатических капилляров.

Стенка лимфатического сосуда образована эндотелиальными клетками листовидной формы, перекрывающими друг друга [119]. Отсутствие перицитов, гладкомышечных клеток и базальной мембраны также являются характерным признаком лимфатических капилляров и обуславливают повышенную проницаемость их стенки [90]. Когда интерстициальное давление в тканях увеличивается, пространство между эндотелиальными клетками расширяется, что создает образование просветов, через которые в норме происходит отток интерстициальной жидкости [159]. Подобная дренажная система способствует одностороннему движению тканевой жидкости. А также создает условия для

интравазации опухолевых клеток. Кстати, ранее подобное «перфорированное» строение стенки лимфатического капилляра рассматривалось как дефект межклеточных взаимодействий эндотелиоцитов. Эта теория не оправдалась, когда данные генетических исследований продемонстрировали экспрессию молекул адгезии эндотелиальных клеток, таких, как молекула адгезии тромбоцитов 1 (РЕСАМ-1), молекула адгезии JAM-A и окклюдин [105].

Кроме этого, миграция по сосудистому руслу одиночных клеток опухоли и их кластеров осуществляется намного эффективнее благодаря большему диаметру лимфатических капилляров по сравнению с кровеносными (20-120 уб 7-9 мкм). И, наконец, в лимфатических сосудах практически отсутствуют стрессовые эффекты так называемой силы гидродинамического сдвига, которая действует в системе циркуляции крови. Благодаря этому значительно повышается выживание клеток с метастатическим фенотипом в условиях их субстрат-независимой диссеминации.

Возможны 2 пути лимфогенной диссеминации опухолевых клеток: либо через лимфатические капилляры, предсуществующие в окружении опухолевого узла, либо через вновь сформированные внутри него.

Процесс опухоль-ассоциированного лимфангиогенеза обусловлен взаимодействием огромного количества лимфангиогенных цитокинов, рецепторов эндотелиальных клеток лимфатических сосудов, факторов транскрипции, вовлекает широкий спектр генов и сигнальных путей.

Начало изучению механизмов лимфангиогенеза было положено установлением факта, что специфическим рецептором для УЕОБ С-типа является белок УЕОБК-З, который у взрослого человека экспрессируется преимущественно в эндотелиальных клетках лимфатических сосудов. Семейство VEGF включает VEGF-A, УЕОБ-Б, УЕОБ-С, УЕОБ-О, УЕОБ-Е и плацентарный фактор роста (PlGF) [12, 16, 180]. Реализация эффектов белков семейства VEGF опосредована взаимодействием с тремя тирозин-киназными рецепторами, представленными на эндотелиальных клетках: VEGFR-1, УЕОБК-2 и VEGFR-3. УЕОБ-А связывается с VEGFR-1 и VEGFR-2, тогда как УЕОБ-С и VEGF-D связываются с VEGFR-2 и являются единственными известными лигандами для

VEGFR-3. Оба фактора VEGF-C и VEGF-D способны инициировать лимфангиогенез in vivo [182]. Причем, для реализации их лимфангиогенных эффектов необходим двухэтапный процессинг про-VEGF-C и про-VEGF-D с участием плазмина и протеинконвертаз.

Некоторые VEGF, а именно VEGF-C, также связываются с некиназными корецепторами - нейропилином-1 и a9ß1-интегрином, которые присутствуют на поверхности эндотелиальных клеток [114]. Установлено, что нейропилин-2 может поддерживать миграцию эндотелиальных клеток, образуя комплексы с рецепторами VEGFR-3 и VEGFR-2. Роль интегринов, в частности гетеродимера a9ß1, в регуляции лимфангиогенеза связывают с адгезией, миграцией и выживанием эндотелиальных клеток лимфатических сосудов. В отличие от рецепторов факторов роста, интегрины лишены собственной киназной активности, но способны активировать регуляторные сигналы, образуя комплексы фокальной адгезии с внутриклеточными киназами и адаптерными белками. Как оказалось, белки внеклеточного матрикса, такие, как коллаген и фибронектин, способны через активацию ßl-интегрина существенно усиливать фосфорилирование киназы VEGFR-3.

К индукторам лимфангиогенеза также относятся VEGF-A, щелочной фактор роста фибробластов (bFGF), инсулиноподобные факторы роста (IGF-I и IGF-II), фактор роста гепатоцитов (HGF), тромбоцитарный фактор роста (PDGF).

PDGF, как известно, высвобождается тромбоцитами и регулирует пролиферацию и миграцию клеток мезенхимального происхождения. Кроме того, этот фактор роста повышает проницаемость сосудов. Приводятся следующие доказательства прямого участия PDGF в лимфангиогенезе: 1) на поверхности эндотелиальных клеток выявляются рецепторы PDGF (a- и ß-PDGFR); 2) PDGF способствует миграции эндотелиоцитов; 3) антагонисты VEGF-C/D или VEGFR-3 не могут блокировать образование новых лимфатических сосудов, индуцированное PDGF-BB; 4) PDGF-BB стимулирует фосфорилирование киназ Akt, Src, Erk в эндотелиальных клетках; 5) лимфатические капилляры, формирующиеся при действии PDGF, также экспрессируют PDGFR.

Поскольку лимфатические капилляры фактически не содержат перицитов или гладкомышечных клеток, главной мишенью для лимфангиогенных факторов служат, безусловно, эндотелиальные клетки, но в процессе лимфангиогенеза, помимо эндотелиоцитов, участвуют и клетки стромы, которые продуцируют VEGF-C/D, а также ассоциированные с опухолью макрофаги [30]. Кстати, макрофаги, с одной стороны, могут стимулировать пролиферацию клеток эндотелия, а с другой - способны к трансдифференцировке и последующему встраиванию в стенку образующегося лимфатического капилляра [86].

Обсуждая вопрос о клеточных механизмах формирования новых капилляров лимфатического русла, следует отметить участие в этом процессе предшественников эндотелиоцитов, которые могут с периферической кровью поступать в опухолевые очаги из костного мозга.

Впервые о существовании таких клеток-предшественников сообщили P. Salven et al. [183]. Они показали, что субпопуляция CD34+- клеток содержит клетки, которые коэкспрессируют маркер стволовых клеток CD133 и рецептор VEGFR-3. В присутствии лимфангиогенных факторов происходит дифференцировка предшественников эндотелиоцитов в зрелые VEGFR-3+CD133-эндотелиальные клетки. Субпопуляцию СD14+-моноцитов также можно рассматривать в качестве клеток-предшественников, поскольку после стимуляции in vitro на них появляются маркеры клеток эндотелия лимфатических сосудов.

Для «удачного» процесса метастазирования в опухоли должен быть определенный пул опухолевых клеток, обладающий ярко выраженными миграционными свойствами и инвазивным потенциалом. Ряд недавних исследований в данной области рассматривает приобретение клетками опухоли подобных свойств как результат их эпителиально-мезенхимального перехода (ЭМП). ЭМП является процессом, при котором эпителиальные клетки трансдифференцируются в мезенхимальные клетки [47].

Эпителиальные клетки, подвергающиеся ЭМП, теряют эпителиальные характеристики, такие, как плотные межклеточные соединения, апико-базальную ориентация клетки, а клеточный цитоскелет реорганизуется для поддержания

более «подвижного» состояния. В клетках опухоли происходит снижение экспрессии E-кадгерина, что ведет к приобретению ими более выраженных инвазивных свойств. Регуляция E-кадгерина широко изучается, и выделены различные транскрипционные факторы, известные также как индукторы ЭМТ. К ним относятся Snail 1/2, ZEB 1/2, и Twist 1/2, функционирующие как прямые или косвенные репрессоры E-кадгерина [96, 115]. Экспрессия этих факторов ЭМП регулируется сигнальными путями Ras, Notch и WNT [71]. В процессе ЭМП раковыми клетками утрачиваются соединительные белки, включая рецептор CXADR и окклюдин [56], и повышается экспрессия мезенхимальных белков, таких, как виментин [96].

В последнее время большое внимание уделяется изучению воспалительной среды в опухолях, и было установлено, что иммунные клетки играют как анти-, так и протуморогенную роль. Подтипы опухоль-ассоциированных макрофагов, регуляторные Т-клетки и супрессорные клетки миелоидного происхождения (MDSC) были идентифицированы как промоторы прогрессирования и метастазирования опухолей. Эти клетки продуцируют и секретируют цитокины, такие, как трансформирующий фактор роста- в (TGF-в), который может индуцировать ЭМП и способствовать иммуносупрессивному микроокружению опухоли [78].

В эксперименте было показано, что раковые клетки, подвергающиеся TGF-в-индуцированному ЭМП, обладают повышенной склонностью к лимфогенному метастазированию [102]. Mikael C. Karlsson et al. в 2017 году, используя трехмерную систему совместного культивирования клеточных линий, проанализировали способность клеток, подвергшихся эпителиально-мезенхимальному переходу, выращенных на полимерных гранулах, мигрировать либо к эндотелиальным клеткам кровеносных сосудов, либо к лимфатическим эндотелиальным клеткам. Авторы обнаружили, что клетки преимущественно мигрируют к лимфатическим эндотелиоцитам по сравнению с эндотелиальными клетками кровеносных капилляров. Эти данные, в свою очередь, свидетельствуют о том, что лимфатические эндотелиальные клетки могут продуцировать

хемотаксические факторы, которые способствуют привлечению клеток, подвергшихся ЭМП [91].

Как известно, хемокины представляют собой семейство секретируемых цитокинов, необходимых для активации нейтрофилов и моноцитов и их привлечения в очаг воспаления. Учитывая известную роль хемокинового рецептора CCR7 и его лиганда ССЬ21 в распространении дендритных клеток через лимфатическую систему, была исследована способность CСR7/CCL21-опосредованного хемотаксиса влиять на тропность опухолевых клеток к лимфатическим эндотелиоцитам. Было показано, что CCR7 опосредует лимфогенную диссеминацию опухолевых клеток.

Таким образом, TGF-P-индуцированный ЭМП в раковых клетках, по-видимому, активирует механизм, используемый иммунной системой для прямой миграции дендритных клеток через лимфатическую систему (рисунок 2).

Рисунок 2 - TGF-P-индуцированный ЭМП

Важные аспекты механизма, связанного с хемотаксической активностью данных хемокинов, были недавно раскрыты J.D. Shields et al. Авторами продемонстрировано, что хемокины CCL19 и CCL21 способствуют привлечению

клеток опухоли к эндотелию лимфатических сосудов. Такая направленная миграция обеспечивается за счет распознавания градиента концентрации хемокинов их рецептором CCR7, имеющимся на опухолевых клетках перевиваемых линий (рисунок 3) [30].

Рисунок 3 - Схема микроокружения опухоли, в которой лимфатические сосуды, дренирующие тканевую жидкость, создают тем самым поток, направленный от опухоли к лимфатическому капилляру, способствующему однонаправленному движению сигналов и взаимодействию лиганда и рецептора

Эндотелиальные клетки лимфатических капилляров способны экспрессировать и другие хемокины, используемые опухолевыми клетками для метастазирования в лимфатические узлы.

Установлено, что клетки РМЖ экспрессируют рецептор хемокинов CXCR4, тогда как его специфический лиганд CXCL12 продуцируется клетками тканей (костный мозг, легкое и лимфатические узлы), в которых чаще всего выявляют метастазы РМЖ [88]. При этом в системе in vitro клетки РМЖ способны мигрировать по направлению к CXCL12, а антитела, нейтрализующие CXCR4,

[30]

ингибируют образование метастазов в лимфатических узлах у экспериментальных животных.

Взаимодействие рецептора CXCR5 и его лиганда СХСЬ13 описано при лимфогенном метастазировании РМЖ [55]. СХСЬ12 активируется в эндотелии лимфатических капилляров и связывается с мигрирующими опухолевыми клетками, экспрессирующими рецептор CXCR4 [116]. В литературе также имеются данные, что хемокин ССЬ1 способствует лимфогенному метастазированию меланомы, клетки которой экспрессируют рецептор CCR8, тогда как блокирование функции CCR8 приводит к снижению частоты метастатического поражения лимфатических узлов [173].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Карабанова Юлия Анатольевна, 2021 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Бабиченко, И.И. Новые методы иммуногистохимической диагностики опухолевого роста: учеб. пособие / И.И. Бабиченко, В.А. Ковязин. - М.: РУДН, 2008. - 109 с.

2. Биопсия сигнальных лимфатических узлов при раннем раке молочной железы: опыт НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова / П. В. Криворотько, Т. Т. Табагуа, А. В. Комяхов [и др.] // Вопр. онкологии. - 2017. - Т.63, №2. - С. 267273.

3. Биопсия сигнальных лимфоузлов у больных раком молочной железы: собственный опыт / В. В. Родионов, В. В. Кометова, А. Н. Сенча [и др.] // Акушерство и гинекология. - 2018. - №12. - С. 111-116.

4. Владимирова, А.В. Эффективность цитологической диагностики метастазов рака молочной железы в регионарные лимфатические узлы / А.В. Владимирова, В.И. Новик // Вопр. онкологии. - 2016. - Т.62, №3. - С. 465-469.

5. Волченко, Н.Н. Морфологические факторы прогноза при раке молочной железы / Н.Н. Волченко // Российский онкологический журнал. - 2000. - № 3. -С. 49-53.

6. Гистологическая степень злокачественности эпителиальных опухолей как фактор прогноза их рецидивирования и метастазирования после радикального лечения (взгляд патоморфолога на клинические проблемы) / В.В. Занкин, В.В. Родионов, Р. М. Хайруллин [и др.] // Материалы VI Российской научно-практической конференции «Модниковские чтения». - Ульяновск, 2009. - С. 48-50.

7. Засадкевич, Ю.М. Роль кадгеринов в норме и при развитии рака молочной железы / Ю.М. Засадкевич, А.А. Бриллиант, С.В. Сазонов // Арх. патологии. - 2015. - Т.77, №3. - С. 57-64.

8. Каприн, А.Д. Злокачественные заболевания в России в 2018 году (заболеваемость и смертность) / А.Д. Каприн, В.В. Старинский, Г.В. Петрова. -

М.: МНИОИ им. П.А.Герцена, филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России, 2019. - 250 с.

9. Каприн, А.Д. Состояние онкологической помощи населению России в 2019 году / А.Д. Каприн, В.В. Старинский, А.О. Шахзадова. - М.: МНИОИ им. П.А.Герцена, филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России, 2020. - 23 с.

10. Методические вопросы биопсии сигнальных лимфоузлов у больных раком молочной железы / С.В. Канаев, С.Н. Новиков, П.В. Криворотько [и др.] // Вопр. онкологии. - 2013. - Т.59, №2. - С. 90-94.

11. Методологические проблемы биопсии сигнальных лимфатических узлов у больных раком молочной железы / П.В. Криворотько, С.В. Канаев, С.Н. Новиков [и др.] // Вопр. онкологии. - 2015. - Т.61, №3. - С. 418-423.

12. Мнихович, М.В. Межклеточные взаимодействия, значение сосудистого фактора и экстрацеллюлярного матрикса в развитии опухолевой патологии молочной железы / М.В. Мнихович // Наука молодых - ЕгиёШо 1иуешиш. - 2014. - №2. - С. 117-132.

13. Номограмма для прогнозирования вероятности метастатического поражения регионарных лимфатических узлов у больных раком молочной железы / В. В. Родионов, С. В. Панченко, С. Р. Идрисова [и др.] // Вопр. онкологии. - 2015. - Т.61, №3. - С. 435-438.

14. Петров, А.В. Амплификация и коамплификации генов при раке молочной железы: частота встречаемости и прогностическое значение / А.В. Петров, И.А. Павленко, М.З. Горелик // Арх. патологии. - 2013. - Т.75, №1. - С. 54-57.

15. Петров, С.В. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / С.В. Петров; под ред. С.В. Петрова, Н.Т. Райхлина. -Казань, 2012.

16. Полиморфизм регуляторных регионов гена фактора роста эндотелия сосудов VEGFA у пациенток, больных раком молочной железы с наследственной отягощенностью / А. В. Шевченко, В. И. Коненков, Е. Ю. Гарбуков, М. Н. Стахеева // Вопр. онкологии. - 2012. - Т.58, №6. - С. 773-776.

17. Родионов, В.В. Номограмма для прогнозирования вероятности метастатического поражения регионарных лимфатических узлов у больных раком молочной железы / В.В. Родионов, С.В. Панченко, С.Р. Идрисова // Вопросы онкологии. - 2015. - Т. 61, №3. - С. 435-438.

18. Роль биопсии сигнальных ("сторожевых") лимфатических узлов в определении состояния регионарных лимфатических коллекторов у больных раком молочной железы / В. Ф. Семиглазов, С. В. Канаев, В. В. Семиглазов [и др.] // Вопр. онкологии. - 2002. - Т.48, №1. - С.106-109.

19. Фильченков, А.А. Лимфоангиогенез и метастазирование опухолей / А.А. Фильченков // Онкология. - 2009. - № 2 (11). - C. 94-103.

20. A new nomogram to predict axillary metastasis in breast cancer patients without axillary surgery / V. Rodionov, V. Cometova, S. Panchenko [et al.] // Сancer research. - 2015. - Vol. 75, № 9. -P. P2-01-30.

21. A nomogram to predict the probability of axillary lymph node metastasis in early breast cancer patients with positive axillary ultrasound / Si-Qi Qiu, Huan-Cheng Zeng, Fan Zhang [et al.] // Sci Rep. - 2016. - Vol. 6. -P. 21196.

22. Absent progesterone receptor expression in the lymph node metastases of ER-positive, HER2-negative breast cancer is associated with relapse on tamoxifen / C.E. Snell, M. Gough, K. Middleton [et al.] // J Clin Pathol. - 2017. - P. 1-7.

23. Adams, R.H. Molecular regulation of angiogenesis and lymphangiogenesis / R.H. Adams, K. Ali // Nat Rev Mol Cell Biol. - 2007. - Vol. 8, № 6. -P. 464-478.

24. ALDH1 is a marker of normal and malignant human mammary stem cells and a predictor of poor clinical outcome / C. Ginestier, M.H. Hur, E. Charafe-Jauffret [et al.] // Cell Stem. - 2007. - Vol. 1, № 5. -P. 555-67.

25. American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists guideline recommendations for human epidermal growth factor receptor 2 testing in breast cancer / A.C. Wolff, M.E. Hammond, J.N. Schwartz [et al.] // Arch Pathol Lab Med. - 2007. - Vol. 131, № 1. -P. 18-43.

26. Angiogenic and lymphangiogenic microvessel density in breast carcinoma: correlation with clinicopathologic parameters and VEGF-family gene expression /

W.W. Choi, M.M. Lewis, D. Lawson [et al.] // Mod Pathol. - 2005. - Vol. 18, № 1. -P. 143-152.

27. Apoptosis gene signature of Survivin and its splice variant expression in breast carcinoma / F. Vegran, R. Boidot, F. Bonnetain [et al.] // Endocr Relat Cancer. -2011. - Vol. 18. -P. 783-792.

28. Are breast cancer subtypes prognostic for nodal involvement and associated with clinicopathologic features at presentation in early-stage breast cancer? / T. Jones, H. Neboori, H. Wu [et al.] // Ann SurgOncol. - 2013. - Vol. 20. -P. 2866-2872.

29. Ashturkar, Amrut V. Factors Predicting the Axillary Lymph Node Metastasis in Breast Cancer: Is Axillary Node Clearance Indicated in Every Breast Cancer Patient? / Amrut V. Ashturkar, Gayatri S. Pathak, D. Sanjay // Indian J Surg. - 2011. -Vol. 73, № 5. -P. 331-335.

30. Autologous chemotaxis as a mechanism of tumor cell homing to lymphatics via interstitial flow and autocrine CCR7 signaling / J.D. Shields, M.E. Fleury, C. Yong [et al.] // Cancer Cell. - 2007. - Vol. 11. -P. 526-38.

31. Axillary Dissection vs No Axillary Dissection in Women With Invasive Breast Cancer and Sentinel Node Metastasis / A.E. Giuliano, Kelly K. Hunt, Karla V. Ballman [et al.] // JAMA. - 2011. - Vol. 305, № 6. -P. 569-575.

32. Axillary lymph node metastases associated with small invasive breast carcinomas / D.C. Maibenco, L.K. Weiss, K.S. Pawlish, R.K. Severson // Cancer. -1999. - Vol. 85. -P. 1530-1536.

33. Axillary lymph node metastases in patients with small carcinomas of the breast: Is accurate prediction possible? / K. Anan, S. Mitsuyama, K. Tamae [et al.] // Eur J Surg. - 2000. - Vol. 166, № 8. - P. 610-5.

34. Badve, S. Oestrogen-receptor-positive breast cancer: towards bridging histopathological and molecular classifications / S. Badve, H. Nakshatri // J Clin Pathol. - 2009. - Vol. 62. -P. 6-12.

35. Barth, A. Predictors of axillary lymph node metastases in patients with T1 breast carcinoma / A. Barth, P.H. Craig, M.J. Silverstein // Cancer. -1997. - Vol. 79. -P. 1918-1922.

36. Basal breast cancer molecular subtype predicts for lower incidence of axillary lymph node metastases in primary breast cancer / S.J. Crabb, M.C. Cheang, S. Leung [et al.] // Clin Breast Cancer. - 2008. - Vol. 8. -P. 249-256.

37. Breast cancer molecular subtypes respond differently to preoperative chemotherapy / R. Rouzier, C.M. Perou, W.F. Symmans [et al.] // Clin Cancer Res. -2005. - Vol. 11. -P. 5678-5685.

38. Breast cancer subtypes and response to docetaxel in node-positive breast cancer: use of an immunohistochemical definition in the BCIRG 001 trial / J. Hugh, J. Hanson, M.C. Cheang [et al.] // J ClinOncol. - 2009. - Vol. 27. -P. 1168-1176.

39. Cao, Y. Opinion: emerging mechanisms of tumour lymphangiogenesis and lymphatic metastasis / Y. Cao // Nat Rev Cancer. - 2005. - Vol. 5, № 9. -P. 735-743.

40. Changes in the Ki 67 labeling index between primary breast cancer and metachronous metastatic axillary lymph node: A retrospective observational study / Naoya Ishibashi, Haruna Nishimaki, Toshiya Maebayashi [et al.] // Thorac Cancer. -2019. - Vol. 10, № 1. -P. 96-102.

41. Clarijs, R. Lymphangiogenesis in malignant tumours: does it occur? / R. Clarijs, D.J. Ruiter, R.M. de Waal // J Pathol. - 2001. - Vol. 193. -P. 143-146.

42. Clayton, F. Pure mucinous carcinomas of the breast: morphological features and prognostic correlates / F. Clayton // Hum Pathol. - 1986. - Vol. 17. -P. 34-38.

43. Clinical and Biological Significance of ESR1 Gene Alteration and Estrogen Receptors Isoforms Expression in Breast Cancer Patients / A. Nagel, J. Szade, M. Iliszko [et al.] // Int. J. Mol. Sci. - 2019. - Vol. 20, № 8. -P. 1881.

44. Clinical significance of hormone receptor status detection in simultaneous axillary metastasis for hormone receptor-negative primary breast cancer patients / L.B. Jin, Z.X. Yao, L.Q. Kong [et al.] // Chin J Clin Oncol. - 2013. - Vol. 15. -P. 911-3.

45. Clinicopathologic factors predicting involvement of nonsentinel axillary lymphnodes in breast cancer patients: is axillary dissection always indicated? / S. Scomersi, F. Da Pozzo, L. Torelli [et al.] // Ann Ital Chir. - 2010. - Vol. 81, № 5. -P. 335-41.

46. Co-expression of vascular endothelial growth factor C (VEGF-C) and c-erbB2 in human breast carcinoma / F.J. Hoar, S. Chaudhri, M.S. Wadley [et al.] // Eur J Cancer. - 2003. - Vol. 39, № 12. -P. 1698-1703.

47. Combined inhibition of EGFR and c-ABL suppresses the growth of triple-negative breast cancer growth through inhibition of HOTAIR / M.A. Nieto, R.Y. Huang, R.A. Jackson [et al.] // Emt. Cell. - 2016. - Vol. 166. - P. 21-45.

48. Comparative morbidity of axillary lymph node dissection and the sentinel lymph node technique: Implications for patients with breast cancer / A.W. Silberman, C. McVay, J.S. Cohen [et al.] // Ann Surg. - 2004. - Vol. 240, № 1. -P.1-6.

49. Comparison of the expression of prognostic biomarkers between primary tumor and axillary lymph node metastases in breast cancer / Song Zhao, Lanwei Xu, Wenjun Liu [et al.] // Int J Clin Exp Pathol. - 2015. - Vol. 8, № 5. -P. 5744-5748.

50. Complications of axillary lymph node dissection for carcinoma of the breast: A report based on a patient survey / M. Warmuth, G. Bowen, L.R. Prosnitz [et al.] // Cancer. - 1998. - Vol. 83. -P. 1362-1368.

51. Correlation of hormone receptor status between circulating tumor cells, primary tumor, and metastasis in breast cancer patients / K. Kalinsky, J.A. Mayer, X. Xu [et al.] // Clin Transl Oncol. - 2015. - Vol. 17, № 7. -P. 539-46.

52. Correlation of tumor volume and surface area with lymph node status in patients with multifocal/multicentric breast carcinoma / A.A. Andea, D. Bouwman, T. Wallis, D.W. Visscher // Cancer. - 2004. - Vol. 100. -P. 20-27.

53. Correlations of survivin expression with clinicomorphological parameters and hormonal receptor status in breast ductal carcinoma / M. Adamkov, K. Kajo, D. Vybohova [et al.] // Neoplasma. - 2012. - Vol. 59, № 1. -P. 30-7.

54. Criteria derived from serum markers can precisely evaluate axillary status in breast cancer patients / H. Wan, Z. Du, Q. Long [et al.] // J Surg Res. - 2017. - Vol. 208. -P. 211-218.

55. Cxcl13 cxcr5 co expression regulates epithelial to mesenchymal transition of breast cancer cells during lymph node metastasis / S. Biswas, S. Sengupta, S. Roy Chowdhury [et al.] // Breast Cancer Res Treat. - 2014. - Vol. 143. -P. 265-276.

56. De Craene, B. Regulatory networks defining emt during cancer initiation and progression / B. De Craene, G. Berx // Nat Rev Cancer. - 2013. - Vol. 13. -P. 97-110.

57. Differential Expression of RAGE, EGFR and Ki-67 in Primary Tumors and Lymph Node Deposits of Breast Carcinoma / T. Aboushousha, O. Hammam, G. Safwat [et al.] // Asian Pac J Cancer Prev. - 2018. - Vol. 19, № 8. -P. 2269-2277.

58. Dihge, L. Nomograms for preoperative prediction of axillary nodal status in breast cancer / L. Dihge, P.O. Bendahl, L. Ryden // Br J Surg. - 2017. - Vol. 104, № 11. -P. 1494-1505.

59. Discordance between receptor status in primary and metastatic breast cancer: an exploratory study of bone and bone marrow biopsies / E. Amir, W.S. Ooi, C. Simmons [et al.] // Clin Oncol (R Coll Radiol). - 2008. - Vol. 20. -P. 763-768.

60. Discordance rate of HER2 status in primary breast carcinomas versus synchronous axillary lymph node metastases: a multicenter retrospective investigation / A. Leni, V. Barresi, R. Caltabiano [et al.] // OncoTargets and Therapy. - 2014. - Vol. 7. -P. 1267-1272.

61. Do the survivin (BIRC5) splice variants modulate or add to the prognostic value of total surviving in breast cancer? / P.N. Span, V.C. Tjan-Heijnen, J.J. Heuvel [et al.] // Clin Chem. - 2006. - Vol. 52. -P. 1693-1700.

62. ErbB2 overexpression correlates with increased expression of vascular endothelial growth factors A, C, and D in human breast carcinoma / W. Yang, K. Klos, Y. Yang [et al.] // Cancer. - 2002. - Vol. 94, № 11. -P. 2855-2861.

63. Estrogen receptor, progesterone receptor, and HER2 status predict lymphovascular invasion and lymph node involvement / S. Ugras, M. Stempel, S. Patil, M. Morrow // Ann SurgOncol. - 2014. - Vol. 21. - P. 3780-3786.

64. Expression of a CD44 variant and VEGF-C and the implications for lymphatic metastasis and long-term prognosis of human breast cancer / O. Watanabe, J. Kinoshita, T. Shimizu [et al.] // J Exp Clin Cancer Res. - 2005. - Vol. 24, № 1. -P. 75-82.

65. Expression of E-cadherin/catenin complex in breast cancer / L. Zhen, C. Dongxu, L. Baolin [et al.] // Chinese Journal of Cancer Research. - 2006. - Vol. 18. N 4. -P. 299-305.

66. Expression of oncogene c-erbB-2 and its relationship with clinicopathologic factors in infiltrating ductal breast cancer and metastatic axillary lymph nodes / Y. Wang, K.Y. Song, J.F. Wang [et al.] // Chin J Curr Adv Gen Surg. - 2009. - Vol. 12. -P. 123-6.

67. Expression of proliferation markers Ki67, cyclin A, geminin and aurora-kinase A in primary breast carcinomas and corresponding distant metastases / A.M. Tokes, A.M. Szasz, F. Geszti [et al.] // J Clin Pathol. - 2015. - Vol. 68. -P. 274-82.

68. Expression of SIRT1 and apoptosis-related proteins is predictive for lymph node metastasis and disease-free survival in luminal A breast cancer / H. Kim, K.H. Lee, I.A. Park [et al.] // Virchows Archiv. - 2015. - Vol. 467, № 5. -P. 563-70.

69. Expression of survivin and its clinicopathological correlations in invasive ductal carcinoma of the breast / F.S. AI-Joudi, Z.A. Iskandar, J. Hasnan [et al.] // Singapore Med. - 2007. - Vol. 48, №7. -P. 607.

70. Expression of the apoptosis-related genes BCL-2 and BAD in human breast carcinoma and their associated relationship with chemosensitivity / B. Yu, X. Sun, H.Y. Shen [et al.] J Exp Clin Cancer Res. - 2010. - Vol. 29, № 1. -P. 107.

71. Expression of the transcription factors snail, slug, and twist and their clinical significance in human breast cancer / T.A. Martin, A. Goyal, G. Watkins [et al.] // Ann Surg Oncol. - 2005. - Vol. 12. -P. 488-496.

72. Factors correlating with lymph node metastases in patients with T1 breast cancer / D.R. Brenin, D.M. Manasseh M., El Tamer [et al.] Ann Surg Oncol. - 2001. -Vol. 8, № 5. -P. 432-437.

73. Fisher, B. Cancer of the breast: size of neoplasm and prognosis / B. Fisher, N.H. Slack, I.D. Bross // Cancer. - 1969. - Vol. 24, № 5. - P. 1071-80.

74. FOXA1 is a key determinant of estrogen receptor function and endocrine response / A. Hurtado, KA. Holmes, C.S. Ross-Innes [et al.] // Nat Genet. - 2011. -Vol. 43. -P. 27-33.

75. FOXA1 is an independent prognostic marker for ER-positive breast cancer / R.J. Mehta, R.K. Jain, S. Leung [et al.] // Breast Cancer Res Treat. - 2012. - Vol. 131. -P. 881-90.

76. Frequency and predictors of axillary lymph node metastases in invasive breast cancer / B. Chua, O. Ung, R. Taylor [et al.] // ANZ J Surg. - 2001. - Vol. 71. - P. 723-8.

77. Frequency of sentinel lymph node metastases in patients with favorable breast cancer histologic subtypes / S.L. Wong, C. Chao, M.J. Edwards [et al.] // The American Journal of Surgery. - 2002. - Vol. 184, № 6. -P. 492-8.

78. Fuxe, J. Tgf beta induced epithelial mesenchymal transition: a link between cancer and inflammation / J. Fuxe, M.C. Karlsson // Semin Cancer Biol. - 2012. - Vol. 22. -P. 455-461.

79. Gajdos, C. Lymphatic invasion, tumor size, and age are independent predictors of axillary lymph node metastases in women with T1 breast cancers / C. Gajdos, P.I. Tartter, I.J. Bleiweiss // Ann Surg. - 1999. - Vol. 230. -P. 692-696.

80. Gene expression patterns of breast carcinomas distinguish tumor subclasses with clinical implications / T. Sorlie, C.M. Perou, R. Tibshirani [et al.]. - Text : visual // Proc Natl Acad Sci USA. - 2001. - Vol. 98. -P. 10869-74.

81. Histopathological predictors of axillary lymph node metastases in patients with breast cancer / S. Mitsuyama, K. Anan, S. Toyoshima [et al.] Breast Cancer. -1999. - Vol. 6, № 3. -P. 237-41.

82. Holmberg, L. Arm morbidity after sector resection and axillary dissection with or without postoperative radiotherapy in breast cancer stage I. Results from a randomised trial - Uppsala-Orebro Breast Cancer Study Group / L. Holmberg, G. Liljegren // Eur J Cancer. - 1997. - Vol. 33. -P. 193-199.

83. Identification of GATA3 as a breast cancer prognostic marker by global gene expression meta-analysis / R. Mehra, S. Varambally, L. Ding [et al.] // Cancer Res. -2005. - Vol. 65. -P.11259-64.

84. Impact of Multicentricity on Clinical Outcome in Patients With T1-2, N0-1, M0 Breast Cancer / V. Georges, Isabel T. Rubio, Nadeem Q. Mirza [et al.] // Annals of Surgical Oncology. - 2000. - Vol. 7, № 8. -P. 581-587.

85. Impact of tumor chronology and tumor biology on lymph node metastasis in breast cancer / A. Smeets, A. Ryckx, A. Belmans, H. Wildiers [et al.] // Springerplus.

- 2013. - Vol. 2. -P. 480.

86. Inflammation induced lymphangiogenesis in the cornea arises from CD11bpositive macrophages / K. Maruyama, M. Ii, C. Cursiefen [et al.] // J Clin Invest. - 2005. - Vol. 115. -P. 2363-72.

87. Invasive lobular carcinoma of the breast: A special histological type compared with invasive ductal carcinoma / Z. Chen, J. Yang, S. Li [et al.] // PLoS One. - 2017. - Vol. 12, № 9. -P. e0182397.

88. Involvement of chemokine receptors in breast cancer metastasis / A. Muller, B. Homey, H. Soto [et al.] // Nature. - 2001. - Vol. 410. -P. 50-6.

89. Ji, R.C. Lymphatic endothelial cells, tumor lymphangiogenesis and metastasis: new insights into intratumoral and peritumoral lymphatics / R.C. Ji // Cancer Metastasis Rev. - 2006. - Vol. 25, № 4. -P. 677-694.

90. Ji, R.C. Lymphatic network and lymphangiogenesis in the gastric wall / R.C. Ji, S. Kato // J Histochem Cytochem. - 2003. - Vol. 51. -P. 331-8.

91. Karlsson, Mikael C. Epithelial mesenchymal transition in cancer metastasis through the lymphatic system / Mikael C. Karlsson, Santiago F. Gonzalez, Josefin Welin // Mol Oncol. - 2017. - Vol. 11, № 7. -P. 781-791.

92. Ki-67 expression in axillary lymph node metastases in breast cancer is prognostically significant / K. Tawfik, B.F. Kimler, M.K. Davis [et al.] // Hum Pathol.

- 2013. - Vol. 44. -P. 39-46.

93. Ki-67 expression in primary breast carcinomas and their axillary lymph node metastases: clinical implications / D. Park, R. Karesen, T. Noren, T. Sauer // Virchows Arch. - 2007. - Vol. 451. -P. 11-18.

94. Ki-67 immunostaining activity is higher in positive axillary lymph nodes than in the primary breast tumor / F. Buxant, V. Anaf, P. Simon [et al.] Breast Cancer Res Treat. - 2002. - Vol. 75. -P. 1-3.

95. Kowalski, P.J. E-cadherin expression in primary carcinomas of the breast and its distant metastases / P.J. Kowalski, M.A. Rubin, C.G. Kleer // Breast Cancer Res. -2003. - Vol. 5. -P. 217-222.

96. Lamouille, S. Molecular mechanisms of epithelial mesenchymal transition / S. Lamouille, J. Xu, R. Derynck // Nat Rev Mol Cell Biol. - 2014. - Vol. 15. -P. 178196.

97. LEF-1 regulates proliferation and MMP-7 transcription in breast cancer cells / V. Bucan, K. Mandel, C. Bertram [et al.] // Genes Cells. - 2012. - Vol. 17. -P. 559567.

98. Li, H. The relationship between MMP-2 and MMP-9 expression levels with breast cancer incidence and prognosis / H. Li, Z. Qiu, F. Li, C. Wang // Oncol Lett. -2017. - Vol. 14, № 5. -P. 5865-70.

99. Longterm morbidity following axillary dissection in breastcancer patients: Clinical assessment, significance for life quality and the impact of demographic, oncologic and therapeutic factors / T. Kuehn, W. Klauss, M. Darsow [et al.] // Breast CancerRes Treat. - 2000. - P. 275-286.

100. Low serum MMP-1 in breast cancer: a negative prognostic factor? / A. Kulic, N. Dedic Plavetic, J. Vrbanec [et al.] // Biomarkers. - 2012. - Vol. 17. -P. 416421.

101. Lymph vessel density correlates with nodal status, VEGF-C expression, and prognosis in breast cancer / Y. Nakamura, H. Yasuoka, M. Tsujimoto [et al.] // Breast Cancer Res Treat. - 2005. - Vol. 91, № 2. -P. 125-132.

102. Lymphatic metastasis in the absence of functional intratumor lymphatics / T.P. Padera, A. Kadambi, E. di Tomaso [et al.] Science. - 2002. - Vol. 296. -P. 18831886.

103. Lymphedema in a cohort of breast carcinoma survivors20 years after diagnosis / J.A. Petrek, R.T. Senie, M. Peters [et al.] // Cancer. - 2001. - Vol. 92. -P. 1368-77.

104. Medullary carcinoma of the breast: prevalence and prognostic importance of classical risk factors in breast cancer / L. Pedersen, K. Zedeler, S. Holck [et al.] // Eur J Cancer. - 1995. - Vol. 31A. -P. 2289-2295.

105. Molecular characterization of lymphatic endothelial cells / S. Podgrabinska, P. Braun, P. Velasco [et al.] // Proc Natl Acad Sci USA. - 2002. - Vol. 99. -P. 16069-16074.

106. Molecular classification and molecular forecasting of breast cancer: ready for clinical application? / J.D. Brenton, L.A. Carey, A.A. Ahmed, C. Caldas // J ClinOncol. - 2005. - Vol. 23. -P. 7350-7360.

107. Molecular interactions in cancer cell metastasis / S.A. Brooks, H.J. Lomax-Browne, T.M. Carter [et al.] // Acta Histochem. - 2010. - Vol. 112. -P. 3-25.

108. Molecular pathways for lymphangiogenesis and their role in human disease / S.A. Stacker, R.H. Farnsworth, T. Karnezis [et al.] // Novartis Found Symp. - 2007. -Vol. 281. -P. 38-43; 44-53; 208-209.

109. Molecular portraits of human breast tumours / C.M. Perou, T. Sorlie, M.B. Eisen [et al.] // Nature. - 2000. - Vol. 406. -P. 747-752.

110. Monitoring survivin expression in cancer: implications for prognosis and therapy / Santa Cruz, R. Guindalini, Mathias Machado, B. Garicochea // Mol Diagn Ther. - 2013. - Vol. 17, № 6. -P. 331-42.

111. Multigene prognostic tests in breast cancer: past, present, future / B. Gyorffy, C. Hatzis, T. Sanft [et al.] // Breast Cancer Res. - 2015. - Vol. 17. -P.11.

112. Nathanson, S.D. Insights into the mechanisms of lymph node metastasis / S.D. Nathanson // Cancer. - 2003. - Vol. 98. -P. 413-23.

113. Negative control of p53 by Sir2alpha promotes cell survival under stress / A. J. Luo, A.Y. Nikolaev, S. Imai [et al.] // Cell. - 2001. - Vol. 107, № 2. -P. 137-48.

114. Neuropilin is expressed by endothelial and tumor cells as isoform-specific receptor for vascular endothelial growth factor / S. Soker, S. Takashima, H. Miao [et al.] // Cell. - 1998. - Vol. 92. -P. 735-745.

115. Nieto, M.A. The epithelial mesenchymal transition under control: Global programs to regulate epithelial plasticity / M.A. Nieto, A. Cano // Semin Cancer Biol.

- 2012. - Vol. 22. -P. 361-368.

116. Nodal lymphangiogenesis and metastasis role of tumor induced lymphatic vessel activation in extramammary Paget's disease / S. Hirakawa, M. Detmar, D. Kerjaschki [et al.] // Am J Pathol. - 2009. - Vol. 175. -P. 2235-2248.

117. NSABP-32: Phase III, randomized trial comparing axillary resection with sentinal lymph node dissection: a description of the trial / D.N. Krag, T.B. Julian, S.P. Harlow [et al.] // Ann Surg Oncol. - 2004. - Vol. 11(3 Suppl). -P. 208S-10S.

118. Nuclear cyclin B1 in human breast carcinoma as a potent factor / T. Suzuki, T. Urano, Y. Miki [et al.] // Cancer Sci. - 2007. - Vol. 98, № 5. -P. 644-51.

119. Oliver, G. The rediscovery of the lymphatic system: Old and new insights into the development and biological function of the lymphatic vasculature / G. Oliver, M. Detmar. // Genes Dev. - 2002. - Vol. 16. -P. 773-783.

120. Orr, R.K. The impact of prophylactic axillary node dissection on breast cancer survival: A Bayesian meta-analysis / R.K. Orr. // Ann Surg Oncol. - 1999. -Vol. 6109. -P. 116-27.

121. Osteopontin and p53 expression are associated with tumor progression in a case of synchronous, bilateral, invasive mammary carcinomas / A.B. Tuck, F.P. O'Malley, H. Singhal [et al.] // Arch Pathol Lab Med. - 1997. - Vol. 121. -P. 578584.

122. Osteopontin expression profiles predict pathological and clinical outcome in breast cancer / N. Patani, F. Jouhra, W. Jiang, K. Mokbel // Anticancer Res. - 2008.

- Vol. 28. -P. 4105-4110.

123. Osteopontin induces increased invasiveness and plasminogen activator expression of human mammary epithelial cells / A.B. Tuck, D.M. Arsenault, F.P. O'Malley [et al.] // Oncogene. - 1999. - Vol. 18. -P. 4237-4246.

124. Osteopontin-c is a selective marker of breast cancer / M. Mirza, E. Shaughnessy, J.K. Hurley [et al.] // Int J Cancer. - 2008. - Vol. 122. -P. 889-897.

125. Overexpression of E-cadherin Protein in Metastatic Breast Cancer Cells in Bone / B. Saha, B. Chaiwun, S.S. Imam [et al.] // Anticancer research. - 2007. - Vol. 27. -P. 3903-3908.

126. Pathak, A.P. Visualizing function in the tumor-associated lymphatic system / A.P. Pathak, Z.M. Bhujwalla, M.S. Pepper // Lymphat Res Biol. - 2004. - Vol. 2. -P. 165-172.

127. Pathological features of mucinous carcinoma of the breast are favourable for breast-conserving therapy / K. Anan, S. Mitsuyama, K. Tamae [et al.] // Eur J SurgOncol. - 2001. - Vol. 27. -P. 459-463.

128. Patterns of metastatic spread in early breast cancer / M.B. Klevesath, K. Pantel, O. Agbaje [et al.] // Breast. - 2013. - Vol. 22. -P. 449-54.

129. Patterns of metastatic spread in early breast cancer / Y. Hisamatsu, T. Tokunaga, N. Yamashita [et al.] // Breast Cancer. - 2015. - Vol. 22, № 5. -P. 520-8.

130. Pepper, M.S. Lymphangiogenesis and tumor metastasis: myth or reality? / M.S. Pepper // Clin Cancer Res. - 2001. - Vol. 7, № 3. -P. 462-468.

131. Post-operative arm morbidity and quality of life: Results of the ALMANAC randomised trial comparing sentinel node biopsy with standard axillary treatment in the management of patients with early breast cancer / A. Fleissig, L.J. Fallowfield, C.I. Langridge [et al.] // Breast Cancer Res Treat. - 2006. - Vol. 95. -P. 279-293.

132. Predicting axillary lymph node metastases in patients with T1 infiltrating ductal carcinoma of the breast / S.P. Harden, A.J. Neal, N. Al Nasiri [et al.] visual // Breast. - 2001. - Vol. 10. -P.155-159.

133. Predicting the status of axillary sentinel lymph nodes in 4351 patients with invasive breast carcinoma treated in a single institution / G. Viale, S. Zurrida, E. Maiorano [et al.] // Cancer. - 2005. - Vol. 103, № 3. -P. 492-500.

134. Predicting the survival of patients with breast carcinoma using tumor size / J.S. Michaelson, M. Silverstein, J. Wyatt [et al.] // Cancer. - 2002. - Vol. 95, № 4. -P. 713-23.

135. Prediction of axillary lymph node involvement of women with invasive breast carcinoma: a multivariate analysis / I.A. Olivotto, J.S. Jackson, D. Mates [et al.] // Cancer. - 1998. - Vol. 83, № 5. -P. 948-955.

136. Prediction of axillary lymph node metastases in a screened breast cancer population. South-east Sweden Breast Cancer Group / J. Ahlgren, O. Stal, G. Westman, L.G. Arnesson // ActaOncol. - 1994. - Vol. 33. -P. 603-608.

137. Predictors of Axillary Lymph Node Metastases in Breast Cancer: Is There a Role for Minimal Axillary Surgery? / C.H. Yip, N.A. Taib, G.H. Tan [et al.] // World J Surg. - 2009. - Vol. 33. -P. 54-57.

138. Predictors of axillary lymph node metastases in patients with T1 breast cancer. A multivariate analysis / M. Chadha, A.B. Chabon, P. Friedmann, B. Vikram // Cancer. - 1994. - Vol. 73. -P. 350-353.

139. Predictors of axillary lymph node metastases in women with early breast cancer in Singapore / L.G. Tan, Y.Y. Tan, D. Heng, M.Y. Chan // Singapore Med J. -2005. - Vol. 46. -P. 693-697.

140. Predictors of lymph node metastasis in T1 breast carcinoma, stratified by patient age / A. Orucevic, V.B. Reddy, K.J. Bloom [et al.] // Breast J. - 2002. - Vol. 8, № 6. -P. 349-55.

141. Preoperative serum levels of matrix metalloproteinase- 2 (MMP-2) and survival of breast cancer among Korean women / N. Song, H. Sung, J.Y. Choi [et al.] // Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. - 2012. - Vol. 21. -P. 1371-1380.

142. Presenting Features of Breast Cancer Differ by Molecular Subtype / L. Wiechmann, M. Sampson, M. Stempel [et al.] // Ann Surg Oncol. - 2009. - Vol. 16. -P. 2705-2710.

143. Probability of axillary node involvement in patients with tubular carcinoma of the breast / G. Papadatos, A.M. Rangan, T. Psarianos [et al.] // Br J Surg. - 2001. -Vol. 88. -P. 860-864.

144. Prognostic significance of vascular endothelial cell growth factors -A, -C and -D in breast cancer and their relationship with angio- and lymphangiogenesis / R.A. Mohammed, A. Green, S. El-Shikh [et al.] // Br J Cancer. - 2007. - Vol. 96, № 7. -P. 1092-1100.

145. Prognostic significance of vascular endothelial growth factor D in breast carcinoma with long-term follow-up / Y. Nakamura, H. Yasuoka, M. Tsujimoto [et al.] // Clin Cancer Res. - 2003. - Vol. 9, № 2. -P. 716-721.

146. Prognostic values of osteopontin-c, E-cadherin and b-catenin in breast cancer / Hui Pang, Hailing Lu, Hongtao Song [et al.] Cancer Epidemiology. - 2013. -Vol. 37, № 6. -P. 985-992.

147. Quantitative analysis of changes in ER, PR and HER2 expression in primary breast cancer and paired nodal metastases / S.J. Aitken, J.S. Thomas, S.P. Langdon [ et al.] // Ann Oncol. - 2010. - Vol. 21. -P. 1254-61.

148. Race, breast cancer subtypes, and survival in the Carolina Breast Cancer Study / L.A. Carey, C.M. Perou, C.A. Livasy [et al.] // JAMA. - 2006. - Vol. 295. -P. 2492-2502.

149. Randomized multicenter trial of sentinel node biopsy versus standard axillary treatment in operablebreast cancer: The ALMANAC Trial / R.E. Mansel, L. Fallowfield, M. Kissin [et al.] // J Natl Cancer Inst. - 2006. - Vol. 98. -P. 599-09.

150. Rasmussen, B.B. Prognostic factors in primary mucinous breast carcinoma / B.B. Rasmussen, R. Carsten, I.B. Christensen // Am J ClinPathol. - 1987. - Vol. 87. -P. 155-160.

151. Reis-Filho, J.S. Gene expression profiling in breast cancer: classification, prognostication, and prediction / J.S. Reis-Filho, L. Pusztai // Lancet. - 2011. - Vol. 378. -P. 1812-1823.

152. Rodionov, V. Predicting axillary metastasis in breast cancer patients without axillary surgery: a new nomogram / V. Rodionov, S. Panchenko, Y. Voronov // European Journal of Cancer. - 2014. - Vol. 50, № 2. -P. 140.

153. Role of primary breast cancer characteristics in predicting positive sentinel lymph node biopsy results: a multivariate analysis / M. Chen, S. Palleschi, A. Khoynezhad [et al.] // Arch Surg. - 2002. - Vol. 137, № 5. -P. 606-609.

154. Rosen, P.P. Colloid carcinoma of the breast. Analysis of 64 patients with long term follow up [abstract] / P.P. Rosen, T.Y. Wang // Am J ClinPathol. - 1980. -Vol. 73. -P. 304.

155. Schoppmann, S.F. Lymphangiogenesis, inflammation and metastasis / S.F. Schoppmann // Anticancer Res. - 2005. - Vol. 25, № 6. -P. 4503-4511.

156. Sensory morbidity after sentinel lymph node biopsy and axillary dissection: A prospective study of 233 women / L.K. Temple, R. Baron, H.S. Cody [et al.] // Ann SurgOncol. - 2002. - Vol. 9. -P. 654-662.

157. Silverstein, M.J. Predicting axillary nodal positivity in 2282 patients with breast carcinoma / M.J. Silverstein, K.A. Skinner, T.J. Lomis // World J Surg. - 2001.

- Vol. 25. -P. 767-772.

158. Sodek, J. Osteopontin / J. Sodek, B. Ganss, M.D. McKeeCrit Rev Oral Biol Med. - 2000. - Vol. 11. -P. 279-303.

159. Specific adhesion molecules bind anchoring filaments and endothelial cells in human skin initial lymphatics / R. Gerli, R. Solito, E. Weber [et al.] // Lymphology.

- 2000. - Vol. 33. -P. 148-157.

160. Stem cells, cancer, and cancer stem cells / T. Reya, S.J. Morrison, M.F. Clarke [et al.] // Nature. - 2001. - Vol. 414(6859). -P.105-11.

161. Surgical complications associated with sentinellymph node biopsy: Results from a prospective international cooperative group trial / L.G. Wilke, L.M. McCall, K.E. Posther [et al.] // Ann Surg Oncol. - 2006. - Vol. 13. -P. 491-500.

162. Survivin expression in breast lobular carcinoma: Correlations with normal breast tissue and clinicomorphological parameters / M. Adamkova, D. Vybohova, J. Horacekc [et al.] // Acta Histochemica. - 2013. - Vol. 115. -P. 412-417.

163. Tgf beta1 induced emt promotes targeted migration of breast cancer cells through the lymphatic system by the activation of ccr7/ccl21mediated chemotaxis /

M.F. Pang, A.M. Georgoudaki, L. Lambut [et al.] // Oncogene. - 2016. - Vol. 35. -P. 748-760.

164. Tgf p1 induced epithelial mesenchymal transition promotes monocyte/macrophage properties in breast cancer cells / J. Johansson, V. Tabor, A. Wikell [et al.] // Front Oncol. - 2015. - Vol. 5. -P. 3.

165. The association between the preoperative serum levels of lipocalin-2 and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and prognosis of breast cancer / H. Sung, J.Y. Choi, S.A. Lee [et al.] // BMC Cancer. - 2012. - Vol. 12. -P. 193.

166. The quotient of number of nodes and tumour size (N/T) from primary breast cancer predicts the clinical course after diagnosis of distant relapse / H.J. Dela, A. Gomez, R. Duenas [et al.] // Eur J Surg Oncol. - 2004. - Vol. 30, № 3. -P. 346-51.

167. The relationship of lymphatic vessel density, lymphovascular invasion, and lymph node metastasis in breast cancer: a systematic review and meta-analysis / S. Zhang, D. Zhang, S. Yi [et al.] // Oncotarget. - 2017. - Vol. 8, № 2. -P. 2863-2873.

168. The role of lymphatic and blood vessel invasion in predicting survival and methods of detection in patients with primary operable breast cancer / F.J. Gujam, J.J. Going, J. Edwards [et al.] // Crit Rev OncolHematol. - 2014. - Vol. 89. -P. 231-241.

169. The significance of Survivin and Nectin-4 expression in the prognosis of breast carcinoma / A.M. Athanassiadou, E. Patsouris, A. Tsipis [et al.]// Folia Histochem Cytobiol. - 2011. - Vol. 49. -P. 26-33.

170. The survivin isoform survivin-3B is cytoprotective and can function as a chromosomal passenger complex protein / S.K. Knauer, C. Bier, P. Schlag [et al.] // Cell Cycle. - 2007. - Vol. 6. -P. 1502-1509.

171. Tubular carcinoma of the breast: mode of presentation, mammographic appearance, and frequency of nodal metastases / B.C. Elson, M.A. Helvie, T.S. Frank [et al.] // AJR Am J Roentgenol. - 1993. - Vol. 161. -P. 1173-11766.

172. Tubular carcinoma of the breast: predicting axillary nodal metastases and recurrence / D.J. Winchester, A.A. Sahin, S.L. Tucker, S.E. Singletary // Ann Surg. -1996. - Vol. 223. -P. 342-3477.

173. Tumor cell entry into the lymph node is controlled by ccl1 chemokine expressed by lymph node lymphatic sinuses / S. Das, E. Sarrou, S. Podgrabinska [et al.] // J Exp Med. - 2013. - Vol. 210. -P. 1509-1528.

174. Tumorassociated macrophages express lymphatic endothelial growth factors and are related to peritumoral lymphangiogenesis / S.F. Schoppmann, P. Birner, J. Stockl [et al.] // Am J Pathol. - 2002. - Vol. 161. -P. 947-56.

175. Twenty-Five-Year Follow-up of a Randomized Trial Comparing Radical Mastectomy, Total Mastectomy, and Total Mastectomy Followed by Irradiation / B. Fisher, Jong-Hyeon Jeong, Stewart D. Anderson [et al.] // N. Engl. Med. - 2002. - Vol. 347, № 8. -P. 567-575.

176. Typical medullary carcinoma of the breast: a clinical and pathologic analysis of 52 cases / M. Reinfuss, A. Stelmach, J. Mitus [et al.] // J Surg Oncol. -1995. - Vol. 60. -P. 89-94.

177. Van Trappen, P.O. Lymphatic dissemination of tumour cells and the formation of micrometastases / P.O. Van Trappen, M.S. Pepper // Lancet Oncol. -2002. - Vol. 3, № 1. -P. 44-52.

178. Vascular endothelial growth factor receptor 3 is involved in tumor angiogenesis and growth / P. Laakkonen, M. Waltari, T. Holopainen [et al.] // Cancer Res. - 2007. - Vol. 67, № 2. -P. 593-599.

179. Vascular endothelial growth Factor-C and vascular endothelial growth factor-d messenger RNA expression in breast cancer: association with lymph node metastasis / Y. Koyama, K. Kaneko, K. Akazawa [et al.] // Clin Breast Cancer. - 2003. - Vol. 4, № 5. -P. 354-360.

180. Vascular-specific growth factors in blood vessel formation / G.D. Yancopoulos, S. Davis, N. Gale [et al.] // Nature. - 2000. - Vol. 407. -P. 242-248.

181. VEGF-C expression in breast cancer: clinical importance / S. Yavuz, S. Paydas, U. Disel [et al.] // Adv Ther. - 2005. - Vol. 22, № 4. -P. 368-380.

182. VEGF-D is the strongest angiogenic and lymphangiogenic effector among VEGFs delivered into skeletal muscle via adenoviruses / T.T. Rissanen, J.E. Markkanen, M. Gruchala [et al.] // Circ Res. - 2003. - Vol. 92. -P. 1098-106.

183. VEGFR-3 and CD133 identify a population of CD34+ lymphatic/vascular endothelial precursor cells / P. Salven, S. Mustjoki, R. Alitalo [et al.] // Blood. - 2003. - Vol. 101. -P. 168-72.

184. Wicha, M.S. Cancer stem cells and metastasis: lethal seeds / M.S. Wicha // Clin Cancer Res. - 2006. - Vol. 12, № 19. -P. 5606-7.

185. Williams, C.S. Absence of lymphangiogenesis and intratumoural lymph vessels in human metastatic breast cancer / C.S. Williams, R.D. Leek, A.M. Robson // J Pathol. - 2003. - Vol. 200. -P. 195-206.

186. Wilson, A.R.M. Over-diagnosis and breast cancer screening / A.R.M. Wilson // Eur. J. Cancer Suppl. - 2006. - Vol. 4, № 2. -P. 6.