Клинико-лабораторная оценка биологически активных соединений лекарственного средства чистотела большого тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.10, кандидат медицинских наук Чомаев, Хаджи-Мурат Пахарбиевич

• Чомаев, Хаджи-Мурат Пахарбиевич
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Чомаев, Хаджи-Мурат Пахарбиевич

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Ботанические особенности чистотела большого (СЬеНёопшш та^).

1.2. Алкалоиды чистотела большого СЬеНёопшш ггшзш.

1.3. Влияние различных факторов на содержания алкалоидов в чистотеле большом.

1.4. Методы определения алкалоидов.

1.5. Фармакологическое действие алкалоидов чистотела большого.

1.6. Лекарственные формы чистотела большого и их применение в народной и научной медицине.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Объект исследования.

2.2. Методы хроматографии и спектрофотометрического анализа для идентификации алкалоидов чистотела большого.

2.3. Проточная цитометрия для определения цитотоксического и противоопухолевого действия экстракта чистотела большого.

2.4. Методы исследований биохимических показателей сыворотки крови

2.5. Статистические методы исследования.

Глава 3. Хроматографические и спектральные характеристики соединений, содержащихся в экстракте чистотела большого.

3.1. Гель-хроматография - основной метод разделения компонентов из экстракта чистотела большого.

3.2. Спектральные характеристики соединений выделяемых экстракцией из чистотела большого.

Глава 4. Исследование антибактериального, противоопухолевого и цитотоксического действия экстракта чистотела большого.

4.1. Антибактериальное действие алкалоидов чистотела большого на клетки штамма Е. соИ.

4.2. Цитотоксическое действие экстракта чистотела большого.

4.3. Противоопухолевое действие экстракта чистотела большого.

Глава 5. Взаимодействие экстракта чистотела большого с нуклеиновыми кислотами.

5.1. Изучение взаимодействия экстракта чистотела большого с нуклеосомной ДНК, выделенной из клинических штаммов.

5.2. Взаимодействие экстракта чистотела с плазмидной ДНК, выделенной из клинических штаммов.

Глава 6. Исследование влияния экстракта чистотела большого на биохимические показатели.

6.1. Действие экстракта чистотела большого на основные биохимические показатели белых беспородных мышей-самцов.

6.2. Изучение активности диагностического фермента крови - ЛДГ плазмы крови доноров в присутствии экстракта чистотела.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-лабораторная оценка биологически активных соединений лекарственного средства чистотела большого»

Актуальность проблемы

Одной из основных причин смертности в большинстве стран мира являются злокачественные новообразования. В общей структуре летальности они составляют до 15-20 %. По данным ВОЗ заболеваемость различными опухолями колеблется от 150 до 400 случаев на 100 тыс. населения. В настоящее время достигнуты существенные успехи в химиотерапевтическом лечении опухолей.

Однако применение лекарственных средств синтетического происхождения нередко приводит к побочным реакциям, вызывает интоксикацию организма. Лекарственные средства растительного происхождения имеют широкий спектр действия, менее токсичны, экономически более доступны для больных. Растительные лекарственные средства можно применять длительно, т.к. не наступает эффекта их кумуляции в организме или привыкания больных к подобным лекарственным препаратам (Kimura Y., 2002 г.).

В настоящее время известно о 72 лекарственных растениях обладающих противоопухолевой активностью, например: аконит, календула, полынь, настой крапивы и другие.

Как правило такие растения содержат в своем составе смесь алкалоидов, способных взаимодействовать с нуклеиновыми кислотами (Гудима С.О. 1994г.). Несомненный интерес представляет Чистотел большой, экстракт которого обладает противоопухолевой активностью.

Одним из перспективных источников таких средств является надземная часть чистотела большого Chelidonium majus L. Сем. Papaveraceae. Лекарственное сырье (трава) этого вида обладает многосторонней фармакологической активностью и применяется в научной и народной медицине как в России, так и за рубежом (Соколов С.Я., Замотаев И.П., 1993). Трава чистотела применяется при лечении многих кожных заболеваний, обладает противозудным, противовоспалительным, эпителизирующим, антимикробным, фунгистатическим, болеутоляющим действием (Крылов A.A., Марченко В.А., Максютина Н.П., Мамчур Ф.И., 1991; Турова А.Д., Сапожникова Э.Н., 1983; Жоголев Д.Т., Галин Л.Л., Добросердова И.И., 1994). Заслуживает внимания опыт использования травы чистотела в качестве противоопухолевого средства (Балицкий К.П., Воронцова А.Л., 1976; Балицкий К.П., 1976). Экспериментально доказано, что препараты чистотела задерживают рост злокачественных опухолей и могут использоваться также в дополнительной терапии злокачественных заболеваний, оказывая противометастатическое действие (Амосова E.H., Зуева Е.П., Исаков В.Г. и др., 1991). Это действие очень актуально, так как одной из основных причин смертности в большинстве стран мира являются злокачественные новообразования. В общей структуре летальности они составляют до 15-20%. По данным ВОЗ заболеваемость различными опухолями колеблется от 150 до 400 случаев на 100 тыс. населения.

Медицинское применение травы чистотела обусловлено богатым набором биологически активных веществ, прежде всего алкалоидов, содержание которых в сырье достигает 2.0 % (Соколов С .Я., Замотаев И. П., 1993; Акопов И.Э., 1990; Беркало Л.А., 1990; Растительные ресурсы СССР., под ред. Федорова A.A., 1985), а также флавоноидов и аскорбиновой кислоты. На фоне большой популярности растения следует признать явно недостаточным использование в официальной российской медицине лишь одной лекарственной формы - настоя травы чистотела большого. Сырьевые запасы данного растения в Саратовской области представлены в большом объеме (Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений СССР, 1983; Забалуев А.П., 2000; Эколого-ресурсный атлас, 1996; Энциклопедия Саратовского края, 2002). Алкалоидный состав чистотела, произрастающего в вышеупомянутом регионе не изучался, тогда как существует достаточное количество литературы по исследованию качественного и количественного состава алкалоидов чистотела большого из различных мест произрастания (Базук Г.Н., Ловкова М.Я., Сабирова Н.С., Булатов A.A., 1991).

Между тем изучение влияния экстракта чистотела большого на центральные клетки мишени — нуклеиновые кислоты и плазмидные ДНК, а также исследования тонких биохимических процессов, инициируемых биологически активными соединениями, которые содержатся в экстракте Чистотела большого в настоящее время не производилось. Вышеизложенное позволило сформулировать цель и задачи настоящего исследования.

Целью настоящей работы явилось выделение алкалоидов из чистотела большого, произрастающего в Саратовской области и выяснение биохимического действия экстракта чистотела большого in vivo и in vitro.

Задачи исследования.

1. Разработать наиболее оптимальные методы экстрагирования биологически активных соединений из лекарственного растения чистотела большого.

2. Провести хроматографическое разделение биологически активных соединений, содержащихся в экстракте чистотела большого.

3. Изучить биохимические показатели плазмы крови белых беспородных мышей-самцов после введения им экстракта чистотела.

4. Исследовать противоопухолевую и цитотоксическую активность экстракта чистотела на культурах клеток.

5. Исследовать изменение активности диагностического фермента лактатдегидрогеназы in vitro в плазме крови доноров в присутствии различных концентраций чистотела.

6. Изучить антибактериальное действие чистотела на клетки Е. coli, выделенные от больных хроническим пиелонефритом.

7. Изучить взаимодействие биологически-активных соединений чистотела с нуклеиновыми кислотами и плазмидными ДНК, выделенными из бактериальных клеток Е. coli больных хроническим пиелонефритом.

Научная новизна.

1. Выявлено антибактериальное действие, цитотоксическая и противоопухолевая активность соединений экстракта чистотела большого.

2. Установлено взаимодействие биологически активных соединений экстракта чистотела с нуклеиновыми кислотами и ферментом лактатдегидрогеназой.

3. Обнаружено изменение основных биохимических показателей у белых беспородных мышей-самцов.

4. Разработаны наиболее оптимальные методы прямой экстракции биологически активных соединений из лекарственного растения чистотела большого.

Практическая ценность.

Обнаружена антибактериальная и антибластомная активность экстракта чистотела большого.

Разработан алгоритм возможного использования чистотела для лечения урологических больных.

Основные положения выносимые на защиту

1. Экстрагирование биологически активных соединений чистотела лучше осуществлять в водные растворы, по сравнению с органическими растворителями, тонкослойная хроматография является равноценным методом наряду с колоночной хроматографией для выделения биологически активных соединений чистотела.

2. Экстракт чистотела оказывает биологический эффект на прокариотические, эукариотические клетки и многоклеточные организмы, изменяет активность диагностического фермента лактатдегидрогеназы, алкалоиды чистотела взаимодействуют с нуклеиновыми кислотами и плазмидными ДНК.

Апробация работы

Основные результаты диссертационной работы были доложены и обсуждены на 65-й научно-практической конференции студентов и молодых специалистов СГМУ «Молодые ученые - здравоохранению региона» (Саратов, 2004), 70-й научно-практической конференции студентов и молодых ученых СГМУ «Молодые ученые - здравоохранению региона» (Саратов, 2009), 71-й межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодые ученые - здравоохранению» (Саратов, 2010), расширенном заседании кафедр клинической лабораторной диагностики, биохимии, фармакологии ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава» (Саратов, 2010).

Публикации

По результатам проведенных исследований опубликовано 8 работ в центральной и местной печати, в том числе 2 в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 135 страницах машинописного текста и состоит из введения и методов исследования; четырех глав, отражающих результаты собственных исследований; заключения, выводов и списка использованной литературы, включающего 97 отечественных и 79 зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Клиническая лабораторная диагностика», Чомаев, Хаджи-Мурат Пахарбиевич

Выводы

1. Наиболее оптимальным методом экстракции биологически активных соединений из чистотела является водная экстракция, по сравнению с использованием органических растворителей.

2. Биологически активные вещества, выделяемые из чистотела большого (СЬеИскишип та^), произрастающего в г. Саратове, относятся к алкалоидам, процентное содержание которых составляло примерно 1% от сухого остатка растения.

3. Присутствие алкалоида сангвинарина в экстракте чистотела большого подтверждено хроматографическими и спектральными методами исследования.

4. Экстракт чистотела большого в разведении 1:10 от исходной концентрации вызывает уменьшение числа клеток миеломы мышей линии 8р-2Х в 8-фазе митоза на 45 %, а в разведениях 1:100 и 1:1000 достоверного ингибирования роста клеток миеломы в Б-фазе митоза не выявлено. Изучаемый экстракт чистотела большого не оказывает токсического действия на спленоциты белых линейных мышей линии Ва1Ь-С во всех разведениях.

5. Антибактериальное действие экстракта чистотела проявляется в концентрации 10"3 М.

6. Биохимические показатели плазмы крови белых беспородных мышей-самцов изменялись в основном в сторону увеличения. Практически не изменялась концентрация альбуминов и общего белка плазмы крови у мышей. Экстракт чистотела большого вызывает дозозависимое нарушение функций печени (повышении активности АлАТ, АсАТ, ГГТ, ЩФ в плазме крови), почек (повышение содержания креатинина в плазме крови). Активность диагностического фермента лактатдегидрогеназы in vitro уменьшается в присутствии экстракта чистотела.

7. Алкалоиды чистотела взаимодействуют с нуклеиновыми кислотами и плазмидными ДНК, выделенными из бактериальных клеток Е. coli больного пиелонефритом.

Практические рекомендации

1. Обнаружено, что алкалоиды сангвинарин и хелеретрин, по всей видимости, обладают выраженной биологической активностью, присущей экстракту чистотела большого.

2. Экстракт чистотела большого обладает антибактериальным, анти-бластомным и в меньшей степени выраженным цитотоксическим действием.

3. Раствор экстракта чистотела может применяться для лечения гнойничковых поражений кожи, хронических приелонефритов или обструктивных циститов.

4. При опухолях мочевого пузыря, возможно, наряду с другими лечебными мероприятиями применение экстракта чистотела.

5. Экстракт чистотела целесообразно применять или наружно или вводить в организм с применением катетера для минимизации процессов повреждения активными соединениями экстракта чистотела здоровых тканей организма.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Чомаев, Хаджи-Мурат Пахарбиевич, 2010 год

1. Акопов И.Э. Важнейшие отечественные лекарственные растения и их применение: Справочник. Томск: Медицина, 1990. - 444 с.

2. Алиев Х.У. Влияние алкалоида протопина на сердечно-сосудистую систему // Фармакология алкалоидов и их производных. Ташкент, 1972. — С. 126-129.

3. Амосова E.H., Зуева Е.П., Исаков В.Г. и др. Сравнительное изучение влияния комплексного фитопрепарата и его составляющих на развитие перевиваемых опухолей. // Растительные ресурсы, 1991. Т. 27. - Вып.1. - С. 130-134.

4. Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений СССР. М., 1983. -340 с.

5. Багхи, Д. Антиангиогенные, антиоксидантные и антиканцерогенные свойства нового, богатого антоцианином препарата из экстракта ягод / Д. Багхи, К.к. Сен, М. Багхи, М. Аталай // Биохимия. 2004. - Т. 69, вып. 1.-С. 95-102.

6. Балицкий К.П. Лекарственные растения в терапии злокачественных опухолей. Изд-во Ростовского университета, 1976. — 293 с.

7. Балицкий К.П., Воронцова А. Л. Лекарственные растения и рак. — Киев, 1982.-235 с.

8. Басова, Е.В. Антимутагенные свойства экстрактов багульника болотного / Е.В. Басова, М.В. Белоусов, М.С. Юсубов и др. // Фармация. -2004.-№4.-С. 40-41.

9. Баторова С.М. Применение лекарственных растений в тибетской медицине // Новые леарст. препараты из раст. Сибири и Д. Востока: Тез. докл. ВСесоюз. конф. Томск, 1986. - С. 17-18.

10. Березов Т.Т. Метаболизм аминокислот и злокачественный рост // Вест. АМН СССР. 1982. - № 9. - С. 19-24.

11. Беркало JI.A. В поисках ключ травы: книга о лекарственных растениях. - Харьков: Прапор, 1990. - 270 с.

12. Битюцкий Н.П. Микроэлементы и растение. СПб: Изд-во СПб ун-та, 1999. 230 с.

13. Бузук Г.Н. Влияниетемпературы сушки на компонентный состав и количественное содержание алкалоидов в сырье некоторых видов лекарственных растений // Растит, ресурсы — 1991. Т. 27. № 3. - С. 106-107.

14. Бузук Г.Н., Ловкова М.Я., Булатов A.A. и др. Изменчивость качественного и количественного состава алкалоидов чистотела большого в течение вегетации // Химико-фармацевтический журнал. 1990. - Т.4, № 5. -С. 50-53.

15. Бузук Г.Н., Ловкова М.Я., Булатов A.A. и др. Определение четвертичных алкалоидов // Новые методы практической биохимии. 1985. — №15.-С. 137-140.

16. Бузук Г.Н., Ловкова М.Я., Сабирова Н.С., Булатов A.A. Изменчивость состава алкалоидов чистотела большого ( Chelidonium majus ) из различных мест произрастания. // Фармация. — 1991. № 5. - С. 37-40.

17. Вичканова С.А., Рубинчик М.А., Адгина В.В., Федорченко Т.С. Изучение химиотерапевтического действия сангвинарина // Фармакология и токсикология. 1969. - Т.32, № 3. - С. 325-328.

18. Волынский В.Г. и др. Растения в медицине. Изд во СГУ, 1988. - 517 с.

19. Генри Т.А. Химия растительных алкалоидов. М.: Гос. научно-техническое изд-во химической лит-ры,1956. — 913 с.

20. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комисаренко, СЕ. Дмитрук -Новосибирск: Наука, 1990. 330 с.

21. Государственная фармакопея СССР. 11-е издание. — М., 1989. Т.2. -630 с.

22. Гудима С.О., Мемелова Л.В., Бородулин В.Б. и др. Кинетический анализ взаимодействия обратной транскриптазы вируса иммунодефицита человека с алкалоидами // Молекулярная биология. — 1994. — Т.28. Вып. 6. -С. 260-263.

23. Дадали, В. А. Биохимические механизмы детоксицирующего и онкопротекторного действия микронутриентов, растительных индолов иизотиоцианатов / В. А. Дадали, Т.Т. Березов // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 1998. - № 4.-С.44-52.

24. Деви СР., Прасад M.H.B. Антиокислительная активность растений Brassica juncea, подвергнутых действию высоких концентраций меди // Физиология растений. 2005. Т. 52, № 2. С. 233-237.

25. Добровольский А.П., Доценко B.JL, Панченко Е.П. Клиническая биохимия. М.: ГЭОТАР - МЕД, 2002. - 360 с.

26. Жоголев Д.Т., Галин Л.Л., Добросердова И.И. Дикорастущие растения и грибы в медицине и кулинарии. М., Воениздат, 1994 - 448 с

27. Забалуев А.П. Ресурсы лекарственных растений Саратовской области. Саратов, 2000. - 688 с.

28. Зайцев В.М., Лифляндский В.Г., Маринкин В.И. Прикладная медицинская статистка. — М.: «Фолиант», 2003. — 432 с.

29. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения. Распространение, метаболизм и функции в растениях / М.Н. Запрометов. Москва: «Наука», 1993.-272 с.

30. Зенков, Н.К. Антиоксидантные и противовоспалительные свойства новых водорастворимых серосодержащих фенолъных соединений / Н.К. Зенков, Е.Б. Меньшикова, Н.В. Кандалинцева и др. // Биохимия. -2007. Т. 72, вып. 6. - С. 790-798.

31. Зимин, A.A. Биологические макромолекулы: структура, формы и функции / A.A. Зимин, В.Д. Лахно, H.H. Назипова- Ижевск, 2002. С. 35-54.

32. Ивахно С.Ю., Голованова C.B., Станиловская Е.В., Кулешова Л.Н. Выделение алкалоидов из чистотела большого // Современные аспектыизучения лекарственных растений: Научные труды НИИФ. М., 1995. - Т.34. -С. 184-189.

33. Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. М.: «МЕДпресс-информ», 2004-920 с.

34. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография. М.: Мир, 1981.-Т.1. -616 с.

35. Ковалева Н.Г. Чистотел // Лечение растениями. Очерки по фототерапии. -М.: Медицина, 1971. С. 260-263.

36. Корхов В.В., Мац М.Н., Хамидов М.Х. Растительные препараты в акушерстве и гинекологии. Ташкент, 1987. - С. 89-90.

37. Крепкова, Л.В. Доклиническое изучение безопасности комплексных лекарственных фитопрепаратов, разработанных на основе расторопши пятнистой / Л.В. Крепкова, Т. А. Сокольская // Химико-фармацевтический журнал. 2007.- Т. 41, № 10. - С. 26-29.

38. Крылов A.A., Марченко В.А., Максютина Н.П., Мамчур Ф.И. Фитотерапия в комплексном лечении заболеваний внутренних органов. — Киев: Здоровье, 1991.-240 с.

39. Кси, Л.-П. Ингибирующее влияние некоторых флавоноидов на активность грибной тирозиназы / Л.-П. Кси, К.-К. Чен, X. Хуан и др. // Биохимия. 2003., вып. 4. - С. 598-602.

40. Кудрина Г.П., Алтынбаева Р.Д., Буров Ю.В. и др. Методические рекомендации по оценке иммунотоксических свойств фармакологических средств. -М.: Фармакологический комитет, 1992. 385 с.

41. Левченко М.Ф. Жизненный цикл чистотела Chelidonium majus L. // Ботанический журнал. 1974. Т.59, № 1. - С. 82-96.

42. Лемецкая Т.И., Погожина А.П., Руднева В.Е. Изучение терапевтической активности сангвинарина при заболеваниях слизистой оболочки полости рта // Лекарственные растения. Фармакология и химиотерапия. М.: Колос, 1971. - Т.14. - С. 275-277.

43. Макаров, В.Г. Изучение механизма антиоксидантного действия витаминов и флавоноидов / В.Г. Макаров, М.Н. Макарова, А.И. Селезнева // Вопросы питания. 2005. - № 1. - С. 10-13.

44. Махлаюк В.П. Лекарственные растения в народной медицине. -Саратов: ПКИ, 1993. 543 с.

45. Машковский Н.Д. Лекарственные средства. Пособие для врачей-Харьков, 1998. Т.2. - 560 с.

46. Машурчак М.В., Свирикова М.В, Машурчак Н.В., Кашин А.С. Характеристика некоторых растительных сообществ с чистотелом большим и возрастная структура его популяций в различных условиях среды // Бюллетень ботанического сада СГУ. 2004. — Вып.З. - С. 37-48.

47. Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др. Лабораторные методы исследования в клинике. М.: Медицина, 1987. - 386 с.

48. Методические рекомендации по оценке токсического действия фармакологических средств. М, 1997. 267 с.

49. Мидлтон, М.Р. Анализ статистических данных с использованием Microsoft Excel для Office ХР / М.Р. Мидлтон- М., 2005. 296 с.

50. Минаева В.Г. Чистотел большой, бородавник, частуха — Chelidonium majus L. // Лекарственные растения Сибири. Новосибирск: Наука, 1991. - С. 207-209.

51. Мироненко А.В. Методы определения алкалоидов. Минск: Наука и техника. - 1966. - 178 с.

52. Молекулярная клиническая диагностика. Методы. — М.: Мир, 1999. -558 с.

53. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. М., 1991. - 430 с.

54. Мушкамбаров, Н.Н. Молекулярная биология / Н.Н. Мушкамбаров, С.Л. Кузнецов. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2003.544 с.

55. Недосушва, Л. Антиоксидантные эффекты биофлавоноида диквертина / Л. Недосугова // Врач. 2006. - № 7. - С. 42-46.

56. Новикова Л.С., Денисова Л.Е., Швагер И.Г. и др. Изучение антимикробной активности суммы алкалоидов и препаратов чистотела большого // Фармация. 1979. - № 2. - С. 54-61.

57. Новицки Я.В. Биологические свойства украина в экспериментальных и клинических условиях // Международные медицинские обзоры. — 1993. — Т.1, № 1. С. 5-10.

58. Октябрьский О.Н., Смирнова Г.В. Редокс-регуляция клеточных функций 7 Биохимия. 2007. Т. 72, вып. 2. С. 158-174.

59. Онтогенетический атлас лекарственных растений. Иошкар-ола, 1977.-240 с.

60. Орехов А.П. Химия алкалоидов растений СССР. М.: Наука, 1965. -480 с.

61. Островский H.H., Максимова Р.Г. Обзор данных по изучению антимикробных свойств сангвинарина // Лекарственные растения. Фармакология и химиотерапия. М.: Колос, 1971. — С. 275-277.

62. Пастушенков Л.В., Лесцовская Е.Е. Лечение иммунодефицитных состояний. // Фармакотерапия с основами фитотерапии. СПб., 1995. С. 173189.

63. Первушкин C.B., Сохина A.A., Куркин В.А. Перспективы создания антимикробных и регенерирующих средств растительного происхождения // Современные аспекты изучения лекарственных растений: Научные труды НИИФ. М., 1995. - № 3. - С. 51-55.

64. Первушкин C.B., Сохина A.A., Куркин В.А. Создание новых лекарственных средств на основе травы чистотела большого // Самарский медицинский архив. 1996. - № 2. - С. 49-53.

65. Первушкин С.В., Сохина A.A., Куркин В.А., Алексеев К.В. Некоторые аналитические и технологические аспекты исследования лекарственного сырья Chelidonium majus L. Растительные ресурсы. 1988. -№ 1.-С. 97-103.

66. Петров, В.И. Российская энциклопедия биологически активных добавок / В.И. Петров, A.A. Спасов- М., 2007. С. 508-757.

67. Платонов, А.Е. статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы / А.Е. Платонов- М.: Изд-во РАМН, 2000. 52 с.

68. Поспелова, М.Л. Антигипоксантное и антиоксидантное действие лекарственных растений как обоснование их применения при деструктивных заболеваниях мозга / М.Л. Поспелова, О.Д. Барнаулов // Физиология человека. 2000. - Т. 26, № 1. - С. 100-106.

69. Потональский A.I., Акшшна Т.М., Шишка Г.В. Антимикробш и протипухлинш властивост1 алкалоццв чистотшу великого та их тюфосфамщшх похщних // Мшробиол. Журнал. 1975. - Т.З, № 6. - С. 755759.

70. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Magnoliaceae Limoniaceae. Под ред. Федорова A.A. - Л.: Наука, 1985. - 460 с.

71. Савчак В.И. Случай папилломатоза лица, успешно леченного соком чистотела // Вестник дерматологии и венерологии. 1976. - № 3. - С. 77

72. Садритдинов Ф.С., Курнуков А.Г. Фармакология растительных алкалоидов и их применение в медицине. Ташкент: Медицина, 1980. - 311 с.

73. Серегин И.В., Кожевникова А.Д. Физиологическая роль никеля и его токсическое действие на высшие растения // Физиология растений. 2006. Т. 53, №2. С. 285-308.

74. Скляревский Л.Я., Губанов И.А. Лекарственные растения. -Воронеж: Центрально-Черноземное книжное изд-во, 1973. — 247 с.

75. Скочилова Е.А., Пигулевская Т.К., Жукова JI.A. Морфологическая оценка онтогенеза Chelidonium majus (Papaveraceae) // Ботанический журнал. -2000. -Т.85, № 10.-С. 55-61.

76. Соколов С.Я., Замотаев И. П. Справочник по лекарственным растениям: Фитотерапия. М., 1993. — 464 с.

77. Турова А.Д., Сапожникова Э.Н. Лекарственные растения СССР и их применение. -М.: Медицина, 1983. 288 с.

78. Тутельян, В.А. Применение фитоэстрогенов в медицине / В.А. Тутельян, М.С. Павлючкова, A.B. Погожева, С.А. Дербенева // Вопросы питания. 2003. - № 2. - С. 48-51.

79. Фадеева М.Д., Беляева Т.Н. Сангвинарин и элли-. : цитотоксические алкалоиды, выделенные из известных противоопухолевых растений и внутренние мишени их действия // Цитология. — 1997. — Т.39, № 2. -С. 181-208.

80. Фомин К.Ф., Николаева В.Г. Опыт применения чистотела большого для лечения зудящих дерматозов // Вестник дерматологии и венерологии. -1975.-№6.-С. 60-62.

81. Франковская С.И., Марченко А.И., Снурская H.H. О применении чистотела при лечении воспалительно-дистрофической формы пародонтоза // Проблемы стоматологии. 1962. - Т.6. - С. 103-105.

82. Цавкелова Е.А., Климова С.Ю., Чердынцева Е.А., Нетрусов А.И. Микроорганизмы стимуляторы роста растений и их практическое применение: обзор) // Прикладная биохимия и микробиология. 2006. Т. 42, №2. С. 133-143.

83. Ценопопуляция растений. Основные понятия и структура. Справочник. М., 1976. - 216 с.

84. Шульпекова, Е.И. Флавоноиды расторопши пятнистой в лечении заболеваний печени / Е.И. Шульпекова // Рус.мед.журн. Человек и лекарство.-2004.-№5.- С.248-250.

85. Эколого-ресурсный атлас. — Саратов, 1996. 260 с.

86. Энциклопедия народной медицины. Т. 6. Лекарственные растения. -М.: АНС, 1999.-610 с. .

87. Энциклопедия Саратовского края. Саратов, 2002. - 688 с.

88. Юркевич И.Д., Мишенин И.Д. Лекарственные растения и их применение. Минск, 1976. - 590 с.

89. Ян Мацку, Индржих Крейча. Атлас лекарственных растений. -Братислава: Изд-во Словацкой АН, 1962. — 463 с.

90. Яхонтова Л.Д., Толкачев О.Н., Кибальчич П.Н. Чистотел большой как сырье для получения лекарственного препарата сангвиритрина // Фармация. 1973. -№ 1. - С. 31-33.

91. Ahmed, В. Hepatoprotective activity of plants belonging to the Apiaceate and the Euphorbiaceae family / B.Ahmed, T. Alam, M. Varshney, S.A. Khan // J. Ethnopharmacol. 2002. - Vol. 79, N 3. - P. 313-316.

92. Alscher R.G. Biosynthesis and antioxidant function of glutathione in plants // Physiol. Plant. 1988. V. 77. P. 457-464.

93. Ander P.L., Eriksson K.E. Lignin degradation and utilization by microorganisms // Progress in industrial microbiology / Ed. MJ. Bull. Amsterdam: Elsevier, 1978. V. 14. P. 1-58.

94. Barczyk, K. Serum cytochrome с indicates in vivo apoptosis and can serve as a prognostic marker during cancer therapy / K. Barczyk, M. Kreuter, J. Pryjma et al. // Int J Cancer. 2005. - Vol. 116, N 2. -P. 167-173.

95. Boasen J., Chisholrn D., Lebet L., et al. House dust extracts elicit Tolllike receptor-dependent dendritic cell responces // J. Allergy Clin. Immunol. 2005. V. 116. P. 185-195.

96. Boulware R.T., Southard G.L., Yankell S.L. Sanguinaria extract, a new agent for the control of volatile sulfur compounds in the oral cavity // J. Soc. Cosmet. Chem. 1985. - Vol. 63. - P. 297-302.

97. Burtis C., Ashwood E., Bruns D. Tietz textbook of clinical chemistry and molecular diagnostics. — Elsevier Inc., 2006. 2412 p.

98. Cammue B.P., Peeters B., Peumans W.J. Isolation and partial characterization of an N-acetylgalactosamine-specific lectin from winter-aconite (Eranthis hyemalis) root tubers // Biochem. J. 1985. V. 227. P. 949-955.

99. Cazarolli, L.H. Flavonoids: prospective drug candidates / L.H. Cazarolli, L. Zanatta, E.H. Alberton // Mini Rev Med Chem. 2008. - Vol. 8, N 1. - P. 14291440.

100. Cerna H., Fiala B., Lenfeld J. et al. Isoqunoline alkaloids in local periodontal disease the rapy (Preliminary notice) // Acta Univ. palack Olumuc. Fac. med. 1984. - Vol. 107. - P. 159-162.

101. Chang Mingi. Anticancer medical herbs. — Human Science & Technology Publishing House. -1992.

102. Cheung W.M., Hui W.S., Chu P.W., Chiu S.W., Ip N.Y. Ganoderma extract activates MAP kinases and induces the neuronal differentiation of rat pheochromocytoma PC12 cells // FEBS Lett. 2000. V. 486. P. 291-296.

103. Cram L.G., Gomez E.R., Thoen C.O. et al. Flow microfluorometric qwantitation of the blastogenic response of lymphocytes // J: Histochem. Cytochem. 1976. - vol. 24. - P. 383-387.

104. Debray H., Dus D., Hueso P., Radzikowski C, Montreuil J. Lectin-resistant variants of mouse Lewis lung carcinoma cells. II. Altered glycosylation of membrane glycoproteins // Clin. Exp. Metastasis. 1990. V. 8. P. 287-298.

105. Debray H., Montreuil J. Aleuria aurantia agglutinin. A new isolation procedure and further study of its specificity towards various glycopeptides and oligosaccharides//Carbohydr. Res. 1989. V. 185. P. 15-26.

106. Dodalski T., Kantoch M., Rzadkowska H. Antibacterial and antibakteriophage action of alkaloids from Chelidonium majus L. // Piss, pharm. Pharmacol. PAN. 1985. - Vol.6. - P. 705- 708.

107. Dus D., Debray H., Strzadala L., Rak J., Kusnierczyk H., Montreuil J., Radzikowski C. Lectin-resistant variants of mouse lung carcinoma cells. I. Selection and in vivo properties // Clin. Exp. Metastasis. 1990. V. 8. P. 277-285.

108. Dus D., Matuszyk J., Kusnierczyk H., Strzadala L., Radzikowski C. Tumorigenicity and metastatic ability of MmB16 mouse melanoma cell line and its two Aleuria aurantia agglutinin resistant variants // Arch. Immunol. Ther. Exp. 1992. V. 40. P. 263-269.

109. Elangoval V., Govindasamy S., Ramamoonthy N. et al. In vitro studies on the anticancer activity of Bacopa morrieri // Fitoterapia. 1995. - Vol. 66. - N. 3.-P. 211-215.

110. Feizi T. 'Glyco-epitope' assignments for the selectins: advances enabled by the neoglycolipid (NGL) technology in conjunction with synthetic carbohydrate chemistry //Adv. Exp. Med. Biol. 2001. V. 491. P. 65-78

111. Fernandes J.C., Henriques F.S. Biochemical, physiological and structural efects of excess copper in plants // Bot. Rev. 1991. V. 57. P. 246-273.

112. Ghose A.K., Pritchett A., Crippen G.M. Atomic physicochemical parameters for three dimensional structure directed quantitative structure activity relationships. III. Modelling hydrophobic interactions // J. Comput. Chem. 1988. V. 99, № 1. P. 80-90.

113. Greenwold P. Chemoprevention of cancer // Sci Amer. 1996. - Vol. 275.-N.3.-P. 64-67.

114. Hartwell J.L. Plants used against cancer // A Surrey Lloyda 1967. -Vol. 30.-P. 379-436.

115. Hartwell J.L. Plants used against cancer // A Surrey Lloyda 1971. -Vol. 32.-P. 204-255.

116. Hu H., Aim N.S., Yang X., Lee Y.S., Kang K.S. Ganoderma lucidum extract induces cell cycle arrest and apoptosis in MCF-7 human breast cancer cell //Intern. J. Cancer. 2002. V. 102. P. 250-253.

117. Jelski, W. Alcohol dehydrogenase (ADH) and aldehyde dehydrogenase (ALDH) in the cancer diseases / W. Jelski, M. Szmitkowski // Clin Chim Acta.-2008.-Vol. 395, N1-2.-P. 1-5.

118. Jiang, J. Ganoderma lucidum inhibits proliferation of human breast cancer cells by down-regulation of estrogen receptor and NF-kappaB signaling / J. Jiang, V. Slivova, D. Sliva // Int J Oncol. 2006. - Vol. 29, N 3. - P. 695-703.

119. Kandaswami, C. The antitumor activities of flavonoids / C. Kandaswami, L.T. Lee, P.P. Lee et al. // In Vivo. 2007. - Vol. 21, N 6. - P. 1172-1196.

120. Kanellos I. Progress in the treatment of colorectal cancer // Techniques in Colorectology. 2004. - Vol. 8. -N. 1. -P. 211-212.

121. Kimura Y., Taniguchi M., Baba K. Antitumor and antimetastatic effects on liver of triterpenoid fractions of Ganoderma lucidum: mechanism of action and isolation of an active substance // Anticancer Res. 2002. V. 22. P. 3309-3318.

122. Kleinberg G., Druml W. Nutritional support in acute organ failure // Bibliot. Nutr. et Dieta. 1985. -N. 35. - P. 71-84.

123. KleinrokZ., Jagiello W.E. et al. Basic central pharmacological properties of thiophosphoric acid alkaloid derivatives from Chelidonium majus L. Polish Journal of Pharmacology and Pharmacy. 1992. - Vol. 44, № 3. - p. 227-239.

124. Kodama N., Komuta K., Sakai N., Nanba H. Effects of D-fraction, a polysaccharide from Grifola frondosa on tumor growth involve activation of NK cells // Biol. Pharm. Bull. 2002a. V. 25. P. 1647-1650.

125. Kodama N., Harada N., Nanba H. A polysaccharide, extract from Grifola frondosa, induces Th-1 dominant responses in carcinoma-bearing BALB/c mice // Jpn. J. Pharmacol. 2002b. V. 90. P. 357-360.

126. Lenfeld J., Kroutil M., Marsalek E. et al. Antiinflammatory fctivity of quaternary benzophenanthridine alkaloids from Chelidonium majus L. // Planta med. 1981. Vol. 43. - P. 161-165.

127. Lewis D.E. and Rickman W.J. Methodology and quality control for flow cetometry // Immune cell phenotiping // Manual of clinical laboratory immunology. 1992. - P. 164- 173

128. Lu X., Guo J., Hsieh T.C. PC-SPES inhibits cell proliferation by modulating p21, cyclins D, E andB and multiple cell cycle-related genes in prostate cancer cells // Cell Cycle. 2003. V. 2. P. 59-63.

129. Mandi R., Maiti M., Chaudhuri K. Sensitivity of vibrios to sanguinarine // Experintia, 1983. Vol. 39. - P. 524-525.

130. McKena J.F., Taylor A., Albers C.C. Essential oils plant extracts and chemical from plants in cancer chemotherapy // Texas Rept. Biol, and Med. -1961. Vol. 19. -N. 2. - P. 321-326.

131. Middleton, E. The effects of plant flavonoids on mammalian cells: implication for inflammation, heart disease and cancer / E. Middleton C. Kandaswami T.C. Theoharides // Pharmacol. Rev. 2000. - Vol. 52. - P. 673-751.

132. Min, B.S. Antioxidative Flavonoids from Cleistocalyx operculatus Buds / B.S. Min, C.V. Thu, N.T. Dat et al. // Chem Pharm Bull (Tokyo). 2008. -Vol. 56, N12.-P. 1725-1728.

133. Mizuno T. The extraction and development of antitumor-active polysaccharides from medicinal mushrooms in Japan // Int. J. Med. Mushroom. 1999. V. l.P. 9-29.

134. Mori K., Toyomasu T., Nanba H., Kuroda H. Antitumor action of fruit bodies of mushrooms orally administrated to mice // Mushroom Sci. 1989. V. 12, part 1. P. 653-660.

135. Nagarajan, S. Biocatalytically oligomerized epicatechin with potent and specific anti-proliferative activity for human breast cancer cells / Nagarajan, R. Nagarajan, S.J. Braimhut et al. // Molecules. 2008. - Vol. 13, N 11. -P. 2704-2716.

136. Oehler R., Roth E. Regulative capacity of glutamine // Curr. Opin. Clin. Metab. Care. 2003. - Vol. 6. - N. 5. - P. 27-282.

137. Olsnes S., Pihl A. // The specificity and action of animal, bacterial and plant toxins (Receptors and Recognition, Ser. B.V.I.) / Ed. P. Cuatrecasas. London: Chapmand and Hill, 1977. P. 131-141.

138. Ooi V.E., Liu F. Immunomodulation and anticancer activity of polysaccharide-protein complexes // Curr. Med. Chem. 2000. V. 7. P. 715-729.

139. Panzer A., Joubert A.M. et al. The antimitotic effects of Ukrain TM, a Chelidonium majus alkaloid derivative, are reversible in vitro // Cancer Letters. -2000. Vol. 1. - № 3. - P. 85-92.

140. Reshetnikov S.V., Wasser S.P., Tan K.K. Higher Basidiomycota as a source of antitumor and immunostimulating polysaccharides // Int. J. Med. Mushrooms. 2001. V. 3. P. 361-394.

141. Ross,. J.A. Dietary flavonoids: bioavailability, metabolic effects, and safety / J.A. Ross, CM. Kasum //Annu Rev Nutr. 2002. - Vol. 22. - P. 19-34.

142. Sakai R. Herbs and malignant neoplasms // Dir. On.-Joins Res. Ancer Epidemiol. Lyon, 1989. - p. 224.

143. Sasaki T., Takasuka N. Further study of the structure of lentinan, an antitumor polysaccharide from Lentinus edodes an edible mushroom. // Carbohydr. Res. 1976. V. 47, № 1. P. 99-104.

144. Seelinger, G. Anti-carcinogenic effects of the flavonoid luteolin / G Seelinger, I. Merfort, U. Wolfle, CM. Schempp // Molecules. 2008. - Vol. 13 ,N10.-P.2628-2651.

145. Sjostrom V.A. Wood chemistry. Fundamentals and applications / 2nd ed. N.Y.; London: Acad. Press, 1993.

146. Slaninova I., Taborska E., Bochorakova M. Interaction of benzophenanthridine and protoberberin alkaloids with animal and yeast cells // Cell Biology and Toxicology. 2001. - № 1. - P. 51-63.

147. Sliva D. Ganoderma lucidum (reishi) in cancer treatment // Integr. Cancer Ther. 2003. V. 2. P. 358-364.

148. Sliva D., Labarrere C, Slivova V., Sedlak M., Lloyd F.P. Jr., Ho N.W. Ganoderma lucidum suppresses motility of highly invasive breast and prostate cancer cells // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 2002. V. 298. P. 603-612.

149. Spencer, J.P. Food for thought: the role of dietary flavonoids in enhancing human memory, learning and neuro-cognitive performance. / J.P. Spencer // Proc Nutr Soc. 2008. - Vol. 67, N 2. - P. 238-252;

150. Then M., Szentmihalyi et al. Effect of sample handling on alkaloid and mineral content of aqueous extracts of greater celadine (Chelidonium majus L.) // Journal of Chromatography.-2000.- № 1. -C. 69-74.

151. Tome F., Colombo M.L. Distribution of alkaloids in Chelidonium majus and factors affecting their accumulation // Phytochemistry. 1995. - № 1. — P. 3739.

152. Wang, T.Y. Preliminary study of total flavonoids from Litsea coreana Levi, on experimental adjuvant-induced arthritis in rats / T.Y. Wang, J. Li, J.F. Ge et al. //Am J Chin Med. 2008. - Vol. 36, N 5. - P. 899-912.

153. Yang Jaizhen. Immunology effect of traditional Chinese drugs // Chin. Med. J. 1996. - Vol. 109. -N. 1. - P. 59-60.

154. Yazawa S., Kochibe M., Asao T. A simple procedure for isolation of tumor-associated antigens by affinity chromatography using fucose-specific Aleuria aurantia lectin // Immunol Invest. 1990. V. 19. P. 319-327.

155. Zayachkivska, O.S. Influence of plant-originated gastroproteciive and antiulcer substances on gastric mucosal repair / O.S. Zayachkivska, S.J. Konturek , D. Drozdowicz et al. // Fiziol Zh. 2004. - Vol. 50, N 6. - P. 118-127.

156. Zemskov V., Prokopchuk O., Susak Y. Efficacy of Ukrain in the treatment of pancreatic cancer // Langenbecks Archives of Surgery. 2002. — № 2. -P. 84-89.