Клинико-экспериментальное обоснование применения аллогенных фибробластов для лечения рубцов и атрофий кожи тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.11, кандидат медицинских наук Щеголев, Виталий Владимирович

• Щеголев, Виталий Владимирович
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Щеголев, Виталий Владимирович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. АТРОФИЧЕСКИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ, СОСТОЯНИЯ И РУБЦЫ КОЖИ. ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОДХОД К ИХ ЛЕЧЕНИЮ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Современная классификация атрофий и рубцов кожи.

1.2. Традиционные терапевтические подходы к коррекции атрофий и рубцов кожи

1.3. Применение клеточных биотехнологий для коррекции атрофий и рубцов кожи 1.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Экспериментальные исследования.33д „

2.1.1. Группы и этапы исследований.

2.1.2. Получение культуры аллогенных крысиных фибробластов.

2.1.3. Изучение выживаемости аллогенных фибробластов после внутрикожной инокуляции методом прижизненной окраски

2.1.4. Изучение морфологии и пролиферативной активности аллогенных фибробластов после внутрикожной инокуляцию.

2.2. Материалы и методы клинических исследований.

2.2.1. Получение культуры аллогенных человеческих фибробластов.

2.2.2. Выращивание культуры фибробластов на различных подложках.

2.2.3. Мезотерапия

2.2.4. Дермабразия

2.2.5. Группа клинического наблюдения.

2.3. Статистическая обработка данных.

Глава.З. ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ВЫЖИВАНИЯ ТРАНСПЛАНТИРОВАННЫХ АЛЛОГЕННЫХ ФИБРОБЛАСТОВ В КОЖЕ И ИХ ВЛИЯНИЯ НА ДЕРМУ.

3.1. Исследование выживаемости культуры аллогенных фибробластов в тканях реципиента.

3.2. Изменение клинико-морфологических характеристик кожи крыс под влиянием интродермально инокулированной суспензии аллогенных фибробластов.

Глава 4. ЛЕЧЕНИЕ АТРОФИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И

РУБЦОВ КОЖИ С ПОМОЩЬЮ АЛЛОГЕННЫХ ФИБРОБЛАСТОВ.

4.1. Возрастная атрофия кожи. Варианты применения культуры аллогенных фибробластов.

4.2. Применение культуры аллогенных фибробластов в коррекции стрий.

4.3. Гемиатрофия Ромберга. Комплексный подход к терапии. Применение клеточных технологий с фибробластами.

4.4. Гипо- и атрофические рубцы. Комплексный подход к лечению. Возможность коррекции с помощью культуры фибробластов.

4.5. Применение аллогенных фибробластов для улучшения результатов лечения доброкачественных новообразований кожи и очагов возрастной гиперпигментации.

4.6. Применение аллогенных фибробластов для коррекции нормо- и гипертрофических рубцов кожи

4.7. Интегральная оценка клинической эффективности и безопасности применения клеточных технологий в лечении атрофий и рубцов кожи

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-экспериментальное обоснование применения аллогенных фибробластов для лечения рубцов и атрофий кожи»

Кожа человека подвержена различным неблагоприятным воздействиям внешней среды и заболеваниям. Это приводит к нарушению трофики кожи, влекущее истончение ее слоев за счет уменьшения или исчезновения составляющих колеи - клеток и волокон, желез, волосяных фолликулов с замещением их менее дифференцированной фиброзной тканью. Группу заболеваний, возникающих в результате нарушения питания кожи, называют атрофиями кожи (Романенко И.М., 2007).

Атрофии кожи являются достаточно разнообразной по клинической картине, этиологии и патогенезу группе дерматозов. Приобретенные атрофии кожи могут быть следствием эндогенных или экзогенных факторов, таких как интоксикации, лучевые воздействия, голодание, тяжелые соматические заболевания, эндокринопатии, механическое давление, травмы, возрастные дегенеративные изменения и др.

Клинически атрофии кожи проявляются ее истончением, той или иной степенью выраженности сухости, выпадением волос, дистрофическими изменениями ногтевых пластинок, нарушением потоотделения и всех видов кожной чувствительности, снижением сосудистых реакций. Пораженная кожа имеет дряблый, морщинистый вид.

Отдельно стоит группа дистрофических состояний кожи, возникших после перенесенного дерматоза с деструктивным процессом в дерме — туберкулез кожи, глубокие микозы, глубокие пиодермии, васкулиты, склеродермия, саркоидоз и др. (Павлов С.Т. и др. 1975; Самцов A.B., Барбинов В.В., 2008). После излечения от вышеперечисленных дерматозов на коже у пациентов остаются рубцовые очаги атрофического, гипотрофического или нормотрофического вида (Озерская О.С., 2007). Подобные же изменения могут возникнуть на коже после перенесенных травм и различных оперативных вмешательств.

Патогистологически в коже при атрофиях обнаруживается уменьшение, а у некоторых пациентов и исчезновение клеточных и волокнистых элементов, межуточного вещества, придатков кожи с замещением их менее дифференцированной соединительной тканью.

Схожесть патогистологической картины многих видов атрофий диктует и сходное патогенетически обоснованное лечение, основанное на улучшении питания и трофики кожи. В связи с этим, таким пациентам назначаются ангиопротекторы, средства специфической и неспецифической иммунотерапии; витамины С, А, Е, группы В; тепловые процедуры, органопрепараты (Скрипкин Ю.К. 2001). В процессе лечения клиническая картина очагов атрофии несколько улучшается, однако лечение не приносит пациентам желаемого удовлетворения. Лечение же сформировавшихся атрофических изменений вообще малоэффективно (Романенко И.М., 2007).

Тканевая терапия уже более 100 лет привлекает внимание ученых и врачей. Интерес к применению клеточных технологий в дерматокосметологии связан с тем, что клетки несут в себе мощный биоэнергетический и информационный потенциал, благодаря которому возможно получение качественно новых результатов лечения. Особый интерес у ученых вызывает основная клетка дермы — фибробласт. Комбустиологи уже не одно десятилетие применяют пересадку аутологичных и аллогенных фибробластов на ожоговые раны. Пересаженные на кожу клетки закрывают раневой дефект и стимулируют дерму, выделяемыми аутокинами (факторами роста, цитокинами, окисью азота и др.) (Туманов В.П. 1996; Хавинсон В.Х., Калинин В.В. 2002). Кроме того, они действует на собственные фибробласты, повышая их синтетическую и пролиферативную активность (Липшиц Р.У., Звягинцева Т.В. 1999; Эрнандес Е., 2001.). Фибробласты вырабатывают коллаген, эластин, ферменты, гликозаминогликаны, факторы роста и другие биологически активные молекулы. Новообразование сосудов, снятие гипоксии, улучшение трофики, утолщение дермы - вот морфологическая основа действия фибробластов на кожу (Сухих Г.Т, Алиханова З.М. 2001; Каг^еБи Т.Н.е! а1., 1998). Биостимуляция и увеличение толщины дермы — желаемый результат лечения атрофий кожи. Таким образом, низкая эффективность существующих методов лечения атрофических заболеваний, приводит к необходимости поиска новых средств и методов, основанных на стимуляции дермы, синтетической и пролиферативной активности собственных фибробластов.

Цель исследования.

На основе экспериментальных цитоморфологических исследований изучить приживаемость имплантированных в дерму аллогенных фибробластов и научно обосновать методы комплексного лечения рубцов и атрофий кожи с помощью культуры аллогенных фибробластов.

Задачи исследования:

1. С помощью гистологических и цитоморфологических методов исследования изучить в эксперименте процесс выживания и сохранения жизнеспособности аллогенных фибробластов в коже крыс после их инокуляции в дерму.

2. Оценить эффективность применения трансплантации аллогенных фибробластов при коррекции рубцов кожи методом дермабразии.

3. Изучить эффективность мезотерапевтического введения культуры аллогенных фибробластов при лечении атрофических заболеваний кожи.

4. Провести сравнительный анализ эффективности использования культуры аллогенных фибробластов в терапии базалиом, стрий, возрастных изменений кожи, атрофических, гипотрофических, нормотрофических, гипертофических рубцов.

Научная новизна. В эксперименте установлено, что 39,9% аллогенных фибробластов, инокулированных в дерму крыс, сохраняет синтетическую и пролиферативную активность и улучшают трофику кожи.

Мезотерапевтическое введение суспензии живой культуры аллогенных фибробластов приводит к улучшению клинической картины очагов атрофии: увеличивает тургора кожи, выравнивает рельеф, уменьшает площадь очагов, снижает сухость кожи.

Выявлено, что введение суспензии аллогенных фибробластов в очаги поражения кожи пациентов при гипотрофических, атрофических рубцах и атрофиях кожи усиливают регенерацию изучаемых заболеваний.

Установлено, что эффективность лечения рубцов и атрофий кожи выше при использовании культуры аллогенных фибробластов, чем традиционной терапии (дермабразия, мезотерапия).

Практическая значимость работы. Значительная доля сохранившихся инокулированных аллогенных фибробластов в дерме (39,9 %) позволяет рассматривать их как потенциально эффективные клетки для лечения рубцов и атрофий кожи.

Разработанная технология микроинъекционного применения суспензии аллогенных фибробластов человека в концентрации (1,5 - 2,0) х 10бкл/мл может быть успешно использована в дерматокосметологии для лечения пациентов со стрией, возрастной атрофией кожи, гипотрофическим и атрофическим рубцов.

Высокая эффективность применения культур аллогенных фибробластов на стерильном батисте позволяет успешно использовать их для лечения гипертрофических рубцов с помощью лазерной дермабразии.

Личное участие автора в получении результатов.

Автором выполнен весь объем клинических исследований, организованы лабораторные и инструментальные исследования, отбор и курация пациентов, проведены процедуры мезотерапии, лазерной дермабразии, обобщение и анализ полученных данных, разработана формализированная карта, произведена статистическая обработка полученного материала.

Основные положения, выносимые на защиту:

Инокулированные в дерму аллогенные фибробласты сохраняют свою жизнеспособность и пролиферативную активность и могут быть использованы как клеточные технологии для лечения рубцов и атрофий кожи.

Применение аллогенных фибробластов человека на батистовой подложке позволяет повысить на 25% эффективность лечения гипертрофических рубцов кожи при помощи дермабразии.

Эффективность мезотерапевтического введения аллогенных фибробластов у пациентов с атрофическими и и гипотрофическими рубцами кожи составляет 21%.

Реализация и внедрение полученных результатов работы.

Использованная в работе новая технология мезотерапии аллогенными фибробластами, лазерная дермабразия очагов различных дерматозов с пересадкой аллогенных фибробластов применяется в учебном процессе, а также в комплексе лечебных мероприятий на кафедре кожных и венерических болезней BMA им. СМ. Кирова и в клинике «Лекарь» (Санкт - Петербург).

Апробация и публикации материалов исследования. Основные положения диссертации доложены на конгрессе: «Новые технологии восстановительной медицины и концепции развития аппаратного обеспечения» (Москва, 2008); на заседании Дерматовенерологического общества (Санкт- Петербург, 2008).

По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе одна в журнале по перечню ВАК Минобразования России.

Заключение диссертации по теме «Кожные и венерические болезни», Щеголев, Виталий Владимирович

104 ВЫВОДЫ

1. В эксперименте на животных с помощью гистологических и цитоморфологических методов исследования доказано, что аллогенные фибробласты, инокулированные в дерму крыс в 39,9% сохраняют жизнеспособность, синтетическую и пролиферативную активность и улучшают трофику кожи.

2. Клиническая эффективность применения дермабразии с последующей трансплантацией культуры аллогенных фибробластов на тканевой подложке при коррекции рубцов кожи на 25 % эффективнее, чем при использовании традиционной дермабразии (р<0,05).

3. Мезотерапевтическое введения культуры аллогенных фибробластов при коррекции атрофий кожи на 21% эффективнее мезотерапевтического введения с использованием витаминов, микроэлементов, сосудистых препаратов (р<0,05).

4. Введение аллогенных фибробластов оказалась эффективнее у пациентов со стриями (50%), нормо- и гипертрофическими рубцами (31%), базалиомами и гипо-атрофическими рубцами (29%) и малоэффективно у пациентов с возрастными изменениями кожи (10%).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. При лечении рубцов кожи с помощью лазерной дермабразии целесообразно использовать аллогенные фибробласты на стерильном многослойном батисте в концентрации (1,5 - 2,0) х 10 кл. на 1 см поверхности подложке.

2. В лечении атрофий кожи целесообразно применять мезотерапевтическое введение суспензии аллогенных фибробластов в концентрации (1,5 — 2,0) х 106кл. в 1 мл.

3. Мезотерапевтические коктейли №1,2,3 могут применяться в качестве подготовительного курса перед лечением аллогенными фибробластами при рубцах и атрофиях кожи. Коктейль№1 : витамин С 5%-2мл, никотиновая кислота -1 мл, новокаин 2%-1 мл. Коктейль № 2: витамин В 12 0,01 % -0,5 мл, пентоксифиллина-3 мл, новокаин 2%- 2 мл. Коктейль № 3: рибоксин-1 мл, витамин С- 3 мл, новокаин-2 %-2 мл. Коктейли используются 1 раз в 3-4 дня, чередуя инъекции, курс - 8-10 инъекций.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Щеголев, Виталий Владимирович, 2009 год

1. Алейник Д.Я. и др. Использование культур аллофибробластов для лечения ожоговых ран у детей / Д.Я.Алейник, В.А. Куприянов, В.М. Левин и др. // Новые методы лечения ожогов с использованием культивируемых клеток кожи / Междунар. симп. — Тула, 1996. — С. 1.

2. Алексеев A.A., Попов C.B. Современные методы трансплантации культивированных клеток кожи и ее эквивалентов при лечении ожогов // Комбустиология- 1999.- №1 — С.1-12.

3. Андреев С.М. Коллаген: структура и функции (Часть 2) // Косметика и медицина. -2001.- Т.4, № 23.- С.14-23.

4. Андреев С.М. Коллаген: структура и функции // Косметика и медицина— 2001 -Т.З, № 22 — С. 41-46.

5. Арсений И.А. и др. Сравнительная характеристика методов выделения эпидермоцитов из кожи человека / И.А. Арсений, Е.В. Маркелов, Т. А. Назаренко и др. // Актуальные вопросы теоретической и практической медицины. Харьков, 1976. — С. 7.

6. Баутин Е.А. Эволюция кожного покрова, восстановленного дермальными аутотрансплантантами: Автореф. дис. . канд. мед. наук.— Л., 1978.- 18 с.

7. Вялов С.Л. и др. Современные представления о регуляции процесса заживления ран (обзор литературы) / С.Л. Вялов, К.П. Пшениснов, П. Куиндоз и др. // Анналы пласт., реконстр., эстет, хирург 1999 - № 1-С.49-56.

8. Г.Степанова, С.Б.Алексеев, A.A. Згурский, Г.А.Ломанова, Н.В.Шалу нова. Получение и характеристика нового штамма диплоидных клеток из фетальной ткани легкого человека // Цитология. 1986. - Т.28, №12.-С.1373-1376.

9. Г.Т. Сухих, З.М. Алиханова. Коррекция синдрома постовариоэктомии фетальными тканями / В кн.: Руководство по климактерию. Под редакцией В.И.Кулакова и В.П.Сметник. Москва, 2001. - С.641-662.

10. П.Глущенко Е.В., Заец Т.Д., Серов Г.Г. Выбор оптимальных сроков трансплантации культивированных фибробластов на ожоговую рану // Пластическая хирургия при ожогах и ранах / Междунар. симп. — М., 1994.-С. 21-22.

11. Домасева Т.В., Бабкин A.B. Подходы к диагностике и лечению различных атрофий кожи при Лайм-бррелиозе. // Актуальные вопросы косметологии/ Материалы научно-практической конференции. СПб.,2000.-С.17-18.

12. Жигульцова Т.И., Пархаева Л.В. Дермабразия в коррекции косметических недостатков // Рос. Журн. кожн. вен. болезней. 2000. -№ 1. - С. 63-69.

13. Жилина Н. М., Иванов В. Б., Корень Н. Н. Сравнительный анализ кожной аутопластики традиционными методами и с использованием клеточной культуры фибробластов // Вестник новых медицинских технологий. 1997. -Т. IV, №1.- С. 88.

14. Заец Т.Л., Лавров В.А. Фибронектин в культурах фибробластов и в биологических средах организма // Новые методы лечения ожогов с использованием культивируемых клеток кожи // Междунар.симп. — Тула, 1996.-С. 5.

15. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Основы общей патологии. Часть 1. Основы общей патофизиологии. СПб.: ЭЛБИ, 1999.- 624с.

16. Иващев-Мусатов О.С. Тебория вероятности и математическая статистика.- 2000.-№5-6.- С.9-93.

17. Kumagai N., Fukushi S., Matsuzaki К. et al. Treatment of nevus Ota with autologous-cultured epithelium grafting combined with dermabrasion // Ann. Plast. Surg. 1995.-Vol. 34, N2.-P. 180-197.

18. Калайджан К. Эрбиевые лазеры в эстетической дерматологии // Nouv. Esthet. 1999. - N 1. - P. 26-28.

19. Келлер Г., Себастиан Дж., Лакомбе Ю., Тофт К., Ласк Г., Ревазова Е. Сохранность инъецируемых аутологичных человеческих фибробластов // Бюл. эксп. биол. мед. 2000. - Т. 130, №'8. - С. 203-206.

20. Лапутин Е. Современное представление.о дермабразии //Nouv. Esthet. -1999.-N 1. P. 18-20.

21. Малахов С.Ф. и др. Перспективы биотехнологических методов восстановления кожных покровов / С.Ф. Малахов, A.B. Васильев,

22. B.В.Терских и др. // Новые методы лечения ожогов с использованием культивированных клеток кожи / Междунар. симп. — Тула, 1996 — С .6-7.

23. Малахов С.Ф., Парамонов Б.А., Емельянов A.B. Новые подходы к лечению тяжелых ожогов: трансплантация выращенных в культуре кератиноцитов // Военно-медицинский журнал. 1997. - Т 318., N 9.1. C.16-19.

24. Мельцова А.Ж., Гриценко В.В., Орловский П.И. и соавт. Применение дермальных фибробластов в комплексном лечении больных с трофическими язвами венозной этиологии // Вестн. Хир. им. И.И. Грекова. 2007. - Т. 166, №1. - С.72-77.

25. ЗЗ.Озерская О.С. Рубцы кожи и их дерматокосметологическая коррекция. СПб.: Из-во «Искусство России». 2007. - С.223.34.0зерская О.С. Способ дермато-хирургического лечения гипотрофических рубцов. Патент на изобретение №.2184492, -Москва,2002.

26. Павлов С. Т., Шапошников О. К., Самцов В. И., Ильин И. И. Кожные и венерические болезни. -М., 1975. С.352

27. Пальцев М.А., Иванов A.A. Межклеточные взаимодействия- М.: Медицина, 1995.-224 с.

28. Парамонов Б.А., Современные возможности и переспективы развития методов восстановления кожного покрова у тяжелообожженных. Дисс. д-ра мед.наук. СПб, - 1996.

29. Романенко И.М., Кулага В.В., Афонин C.JL. Лечение кожных и венерических болезней. Руководство для врачей, Том 2, Медицинское информационное агенство Москва, 2006.- С.885.

30. Салистый П.В., Панова О.В. Аллофибробласты в лечении глубоких ожогов у детей. / В сб. "Комбустиология на рубеже веков" Мат. Конгресса. - М, 2000. - С. 120.

31. Самцов A.B., Барбинов В.В. Дерматовенерология. СПб.,2008. - С. 320.

32. Саркисов Д.С., Алексеев A.A. Теоретические и практические аспекты использования культивированных фибробластов при восстановлении целостности кожного покрова // Вестн. РАМН — 1994 — № 7.- С. 6-11.

33. Серов В.В, Шехтер А.Б. Соединительная ткань. М.: Медицина, 1981. -312с.

34. Сешо Ж.Л. Выравнивание рельефа кожи при помощи лазера // Nouv. Esthet. 1997. - Present. N. - P. 36-39.

35. Скрипкин Ю. К. Кожные и венерические болезни. — М., 2001. С.642.

36. Смирнов C.B. и др. Банк клеток и тканей как основа для систематизации работ в области клеточной терапии / C.B. Смирнов, И.В. Киселев, A.B. Емельянов и др. // Онтогенез. 1998.- Т. 29, № 6. - С. 476.

37. Сологуб В.К., Донецкий Д. А., Борисов В .Я., Яковлев Г.Б., Лагвилава М.Г. Клиническое применение консервированных биопокрытий для ран и ожогов. Москва, 1990. - С. 8.

38. Тафришьян Н.Р. Применение культивированных кератиноцитов и фибробластов для восстановления кожного покрова после лазерной дермабразии. — автореферат дисс. канд. мед. наук. — СПб, 2007. 16 с.

39. Терехов С.М. Усовершенствованный метод клонирования диплоидных фибробластов человека // Цитология. 1981. - Т.23,№ 6. - С.717-718.

40. Ткаченко Б.И. Основы физиологии человека. Т.2. СПб, 1994. - С.218-262.

41. Туманов В.П. Способ получения трансплантанта из культивированных фибробластов человека для лечения обожженных / Новые методы лечения ожогов с использованием культивируемых клеток кожи. Междунар. симп. Тула, 1996. — С. 11.

42. Туманов В.П. Десятилетний опыт использования культуры клеток человеческой кожи для лечения термических ожогов // Арх. патол. — 1999.-№4.-С. 5-9.

43. Туманов В.П., Глущенко Е.В., Морозов С.С., Саркисов Д.С. Использование культивированных фибробластов при лечении ожоговых ран. Бюлл. экспер. биол. и мед. 1990. - №4. - С. 400-402.

44. Федоров В.Д. , Саркисов Д. С., Алексеев А. А., Туманов В. П., Серов Г. Г. Пластическое восстановление кожных покровов с использованием культивированных фибробластов // Анналы Хирургии. 1996. - №4. - С. 16-19.

45. Цветкова Г. М., Гетлинг 3. М. Ультраструктура основных компонентов дермы / В кн.: Морфология кожи человека. Под ред. И. Карасей, Г. М. Цветковой. Брно, 1980, - С. 69 - 109.

46. Цветкова Г. М., Мордовцев В. Н. Патоморфологическая диагностика заболеваний кожи. М., 1986. - С.245.

47. Чернух А. М., Фролов Е. П. Кожа (строение, функция, общая патология и терапия). — М., 1982.- С.335.

48. Ярыгин Н. Е., Серов В. В. Атлас патологической гистологии. М., 1977.

49. Acland К.М., Barlow R.J. Lasers for dermatologist // Br. J. Dermatol 2000. - Vol.143, № 2. - P.244 - 255.

50. Adzick N.S., Longaker M.N. Scarless fetal healing. Therapeutic implications // Ann. Surg.- 1992.- Vol. 21, № 1.- P.3 7.

51. Aggarwal S., Pittenger M.F. Human mesenchymal stem cells modulate allogeneic immune cell responces // Blood. 2005. - Vol.105, N4. - P.1815-1822.

52. Alvarez O.M., Merz P.M., Eaglstein W.H. The effect of occlusive dressings on collagen synthesis and re-epithelialization in superficial wounds // J. Surg. Res. 1983. - Vol. 35, N 2. - P.142 - 148.

53. Auger F.A. Tissue-engineered human skin substitutes developed from collagen-populated gels: clinical and fundamental applications / M. Rouabhia, F. Goulet, F. Berthod et al. // Med. Biol. Eng. Comput. 1998. - Vol.36, N 6.-P.801-812.

54. Aust L., Devlin B., Foster S.J. et al. Yield of human adipose-derived adult stem cells from liposuction aspirates // Cytotherapy. — 2004. Vol.6, N.l. -P.7-14.

55. Ballaun C. Weniger W., Uthman A. et al. Human kerotinocytes express the three major splice forms of vascular endothelial growth factor // J. Invest. Deramtol.- 1995.-Vol.104, N.l P. 7- 10.

56. Bartholomew A., Sturgeon C., Siatskas M. et al. Mesenchymal stem cells suppress lymphocyte proliferation in vitro and prolong skin graft survival in vivo // Exp. Hematol. 2002. - Vol.30. - P.42-48.

57. Bâtisse D., Bazin R. Et al. Influence of age on the wrinkling capacilities of skin // Skin Res. Technol. 2002. - Vol.8, N3. - P. 148.

58. Baumann L. Cosmetic dermatology. New York: McGraw-Hill., 2002.

59. Bayram Y., Deveci M., Imirzalioglu N. et al. The cell based dressing with living allogenic lceratinocytes in the treatment of foot ulcers: a case study // Br. J. Plast. Surg. 2005. - Vol.58, N.7. - P.988-996.

60. Bell E., Sher S., Hull B. et al. The reconstitution of living skin // J. Invest. Dermatol. 1983.-Vol.81, N 1 Suppl. - P. 2 - 10.

61. Bergoglio V., Warrick E., Chevallier-Lagente O., Magnaldo T. Cutaneous gene therapy: the graft takes // Med. Sei. (Paris). 2008. - Vol.24, N.6-7. -P.607-614.

62. Beyth S., Borovsky Z., Mevorach D. et al. Human mesenchymal stem cells alter antigen-presenting cell maturation and induce T-cell unresponsiveness // Blood. 2005.-Vol. 105, N.5. —P.2214-2219.

63. Boese G., Trimpert C., Albrecht W. et al. Membranes from acrylonitrile-based polymers for selective cultivation of human lceratinocytes // Tissue Eng. -2007. Vol.13, N.12. - P.2995-3002.

64. Boisnic S., Branchet-Gumila M.C., Le Charpentier Y. et al. Repair of UVA-induce elastic fiber and collagen damage by 0,05% retinaldehyde cream in an ex vivo human skin model // Dermatology. 1999. - Vol.199, N1. P.43—48.

65. Bukvic Mokos Z., Lipozencic J. Corrective dermatology: yesterday today — tomorrow // Acta Dermatovenerol. Croat. - 2009. - Vol.17, N.l. - P.84.

66. Caissie R., Gingras M., Champigny M.F., Berthod F. In vivo enhancement of sensory perception recovery in a tissue-engineered skin enriched with laminin //Biomaterials. 2006. - Vol.27, N.l5. - P.2988-2993.

67. Carter D.M., Lin A., Varghese M.C. et al. Treatment of iunctional epidermolisis bullosa with epidermal autografts // J. Am. Acad. Dermatol. — 1987. Vol.17, N 2. - P. 248 - 250.

68. Chadially R., Brown B.E, Sequeira-Martin S.M. et al. The aged epidermal permeability barrier: Structurel, functional and lipid biochemical abnormalities in humans and a sensescent murine model // J. Clin. Invest. -1995. Vol. 95. - P. 2281-2286.

69. Chen X., Soejima K., Nozaki M. Accelerated angiogenesis in artificial dermis with allogenic cultured dermal fibroblasts transplantation // Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 2004. - Vol. 18, N.3. - P.205-208.

70. Cristofalo V.J., Allen R.G., Pignolo R.J. et al. Relationship between donor age and the replicative lifespan of human cells in culture: a réévaluation. Proc Natl Acad Sci USA.- 1998. Vol.95, N18. - P.10614-10619.

71. Di Nicola M., Carlo-Stella C., Magni M. et al. Human bone marrow stromal cells suppress T-lymphocyte proliferation induced by cellular or nonspecific mitogenic stimuli // Blood. 2002. - Vol.99. - P. 3838-3843.

72. Diridollou S., Vienne M.-P., Ailbert M. et al. Efficacy of topical 0,05% retinaldehyde in skin aging by ultrasound and theological techniques // Dermatology. 1999. - Vol.199, N1. P.37—41.

73. Duncan D., Rubin J.P., Golitz L. et al. Refinement of technique in injection lipolysis based on scientific studies and clinical evaluation // Clin. Plast. Surg. -2009. Vol.36, N.2. - P.195-209.

74. Edvard M. Proteoglycans and glycosaminoglycans. Chichester, England, 1993. - P. 89-110.

75. Falanga V. Apligraf treatment of venous ulcers and other chronic wounds // J. Dermatol. 1998.-Vol. 25, N 12.-P. 812-817.

76. Falanga V., Margolis D., Alvarez O. Rapid healing of venous ulcers and lack of clinical rejection with an allogeneic cultured human skin eguivalent // Arch. Dermatol. 1998.-Vol.134, N3.-P. 293 -300.

77. Fitzpatrick R.E. Dermatology in general medicine: Int.ed.v.1,2.- 1999.

78. Fohn M., Bannasch H. Artificial skin // Methods Mol. Med. 2007. - P. 140. - P.167-182.

79. Freedman B.M. Hydradermabrasion: an innovative modality for nonablative facial rejuvenation // J. Cosmet. Dermatol. 2008. - Vol.7, N.4. - P.275-280.

80. Friedenstein A.J., Petrakova K.V., Kurolesova A.I., Frolova G.P. Heterotopic of bone marrow. Analysis of precursor cells for octeogenic and hematopoeietic tissue // Transplantation. 1968. - Vol. 6. - P.230-247.

81. Gilchrest B.A. A rewiew of skin aging // J. Investig Dermatol Symp Proc. -1998. Vol.135, N.6. - P. 867 - 875.

82. Gniadecka M. Effects of aging on dermal echogenicity // Skin Res. Technol. -2001.-Vol.7, N.3.- P. 204-207.

83. Gotkin R.H., Samoff D.S., Cannarozzo G. et al. Ablative skin resurfacing with a novel microablative CO2 laser // J. Drugs Dermatol. — 2009. — Vol.8, N.2.-P.138-144.

84. Griffiths M. et al. Survival of Apligraf in acute human wounds // Tissue Eng. 2004.- Vol.10, N.7-8. - P. 1180-1195.

85. Griffits C.E. Drug treatment of photoaged skin // Druggs Aging. 1999. -Vol.14, N4. - P. 289—301.

86. Gueugniaud P.Y., Fabreguette A., Oddou I. et al. Use of biological film as a cultured epidermal autografts support in the treatment of burns: preliminary report of a new technigue // Ann. Burns Fire Disasters. 1997. - Vol.10, N 1. -P.33 -39.

87. Hansbrough J.F. Boyce S.T. et al. Burn wound closure with CAE & fibroblasts attached on to a collagen-glycosaminoglycan substrate // JAMA. -1989. Vol.262, N.15. - P.2125-2130.

88. Hansbrough J.F. Dermagraft-TC for partial-thickness burns: A clinical evaluation //J. Burn Care Rehabil. 1997. - Vol.18.- P.S25-S28.

89. Hayflick L., Moorhead P.S. The serial cultivation of human diploid cell strains //Exp cell res. 1961. - Vol.25. -P.585-621.

90. Hotta T., Yokoo S., Terashi H., Komori T. Clinical and histopathological analysis of healing process of intraoral reconstruction with ex vivo produced oral mucosa equivalent // Kobe J. Med. Sci. 2007. - Vol.53, N1-2. - P. 1-14.

91. Iorizzo M., De Padova M.P., Tosti A. Biorejuvenation: theory and practice. Clin Dermatol. 2008. - Vol.26. - N.2. - PJ77-181.

92. Kachhawa D., Kalla G. Keratinocyte-melanocyte graft technique followed by PUVA therapy for stable vitiligo // Indian J. Dermatol. Venereol. Leprol. — 2008. Vol.74, N.6. - P.622-624.

93. Kallrot M., Edlund U., Albertsson A.C. Surface functionalization of degradable polymers by covalent grafting // Biomaterials. 2006. - Vol.;27, N.9. -P.1788-1796.

94. Karabudak O., Dogan B., Baloglu H. Histologic evidence of new collagen formation using a Q-switched Nd:YAG laser in periorbital rhytids // J. Dermatolog. Treat. 2008. - Vol.19, N.5. -P.3 00-304.

95. Karasek M. In vitro culture of human skin epithelial cell // Invest. Dermatol. 1966. - Vol. 47, N 6. - P. 533-540.

96. Karasek M., Charlton M. Growth of postembrionic skin epithelial cells on collagen gels // J. Invest. Dermatol. 1971. - Vol. 56, N 2. - P. 205-210.

97. Kempiak S.J., Uebelhoer N. Superficial chemical peels and microdermabrasion for acne vulgaris // Semin. Cutan Med. Surg. 2008. — Vol.27, N.3. -P.212-220.

98. Lam P.K., Chan E.S., To E.W. et al. Development and evaluation of a new composite Laserskin graft // J. Trauma. 19.99. - Vol.47, N.5. - P.918-922.

99. Lang E., Schaefer B.M., Eikhoff U. Rapid normalization of epidermal integrin expression after allografting of human keratinocytes // J. Invest. Dermatol. 1996. - Vol.107, N 3.-P. 423-427.

100. Langdon R., Guono C., Birchall N. et al. Reconstitution of structure and cell function in human skin grafts derived from cryopreserved allogeneic dermis and autologous cultured kerotinocytes // J. Invest. Dermatol. 1988. -Vol. 91, N 5. - P.478-485.

101. Lavker R.M. Cutaneous aging: Chronologic versus photoaging. / In: Gilchrest B.A., ed. Photodamage. Cambridge: Blackwell Science, 1995.

102. Madden M.R., Finkelstein J.L, Stuino-Coico L. et al. Grafting of cultured allogenic epidermis on second-third-degree burn wounds on 25 patients // J. Trauma. 1986.-Vol. 26, N 11.-P. 955-962.

103. Majumdar M.K., Banks V., Peluso D.P., Morris E.A. Isolation, characterization, and chondrogenic potential of human bone marrow-derived multipotential stromal cells//J. Cell Physiol. 2000.- Vol.185, N.l. - P. 98106.

104. Matarasso A., Pfeifer T.M. Mesotherapy and injection lipolysis // Clin. Plast. Surg. 2009. - Vol.36, N.2. - P. 181-192.

105. Miller I.J., Gay S. Collagen structure and function / In: Wound Healing: biochemical and physical aspects. Philadelphia, Pa: W.B. Sanders. - 1992. -P. 130—151.

106. Moody B.R., McCarthy L.E., Hruza G.J. Collagen remodeling after 585-nm pulsed dye laser irradiation: an ultrasonographic analysis // Dermatol surgery. 2003. - Vol.29, N.10. - P.997.

107. Obagi Z.E. Obagi Skin Health. Restoration and rejuvenation. 1999. - P. 11—13.

108. O'Connor N. E., Mulliken J. B., Banks-Schlegel S., Kehinde 0., Green H. Grafting of burns with cultured epithelium prepared from autologousepidermal cells // Lancet. 1981. - N.l. - P. 75-78.

109. Oh Chang-Keun, Cha Jung-Hoon, Lim Jae—Young et al. Treatment of vitiligo with suction epidermal grafting by the use of an ultrapuls C02 laser with a computerized pattern generator // J. Dermatol. Surg. 2001. - Vol. 27, N6.-P. 565-568.

110. Pittenger M.F., Mackay A.M., Beck S.C., et. al. Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells // Science. 1999. - Vol.284. - P. 143147.

111. Price R.D., Das-Gupta V., Harris P.A. et al. The role of allogenic fibroblasts in an acute wound healing model // Plast. Reconstr. Surg. 2004. -Vol.113, N.6.-P.1719-1729.

112. Puizina-Ivic N. Skin aging // Acta Dermatovenerol. Alp. Panonica Adriat. -2008. Vol.17, N.2. - P.47-54.

113. Qiao J., Philips E., Teumer J. A graft model for hair development // Exp. Dermatol. 2008. - Vol. 17, N.6. - P.512-518.

114. Querleux B., Leveque J-L., de Rigal J. In vivo image of the skin by ultrasonic technique / American Academy of dermatology: 46th meeting. — San Antonio. — December, 1987.

115. Rasulov M.F., Vasilchenkov A.V., Onishchenko N.A. et al. First experience of the use bone marrow mesenchymal stem cells for the treatment of a patient with deep skin burns // Bull. Exp. Biol. Med. 2005. - Vol.139, N.l. - P. 141144.

116. Riva F., Casasco A., Nespoli E. et al. Generation of human epidermal constructs on a collagen layer alone // Tissue Eng. — 2007/ Vol. 13, N. 11. -P.2769-2779.

117. Salvatori G, Lattanzi L, Coletta M et al. Myogenic conversion of mammalian fibroblasts induced by differentiating muscle cells // J. Cell Sci. — 1995.-Vol.108.-P.2733-2739.

118. Sandby-Moler J., Wult H.Ch. Ultrasonographic subepidermal low — ecnogenic band, dependence of age and body site // Skin Res. Technol. -2004.-Vol.10, N.l. P.57.

119. Sandulache V.C., Zhou Z., Sherman A. et al. Impact of transplanted fibroblasts on rabbit skin wounds // Arch. Otolaryngol. Head Neck Surg. -2003. Vol.129, N.3. - P.345-350.

120. Seidenari S., Pagnonini A., Di Nardo A., Gianetti A. Echographic evaluation with image analysis of normal skin: variation according age and sex // Skin Pharmacol. 1994. - Vol.7, N.3. - P. 201-209.

121. Serup J. Ten years experience with high-frequency ultrasound exanination of scin: development and refinement of techique and equipment. / In: Ultrasound in dermatology. Berlin - Heidelberg: Springer-Verlag, 1992.

122. Seshi B., Kumar S. Sellers D. Human bone marrow stromal cell: coexpression of markers specific for multiple mesenchymal cell lineages // Blood Cells, Molecules and Diseases. 2000. - Vol.26, N.3. - P. 234-246.

123. Smith D.J. Jr. Use of Biobrane in wound management // J. Burn Care Rehabil. 1995. - Vol.16, N3Pt 1.-P317-320.

124. Van Scott E.J., Yu R.J. Alpha hydroxy acids: therapeutic potentials // J. Dermatol. 1989. - Vol.1, N.5. - P. 108-112.

125. Vedamurthy M. Mesotherapy // Indian J. Dermatol. Venereol. Leprol. -2007. Vol.73, N. 1. - P.60-62.

126. Xiao S., Zhu S., Ma B. et al. A new system for cultivation of human keratinocytes on acellular dermal matrix substitute with the use of human fibroblast feeder layer // Cells Tissues Organs. 2008. - Vol.187, N.2. -P.123-130.

127. Zuk P.A., Zhu M., Mizuno H. et al. Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies // Tissue Eng. 2001. - Vol.7. N.2.-P.211-228.