Клинико-диагностическое значение определения карбоновых кислот в сыворотке крови при неалкогольной жировой болезни печени тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.04, кандидат наук Абациева Мадина Петровна

• Абациева Мадина Петровна
• кандидат наук
• 2021

Оглавление диссертации кандидат наук Абациева Мадина Петровна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЙ ВЗГЛЯД НА ПРОБЛЕМУ НЕАЛКОГОЛЬНОЙ

ЖИРОВОЙ БОЛЕЗНИ ПЕЧЕНИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Эпидемиология и этиопатогенез неалкогольной жировой болезни, роль

жирных кислот патогенезе неалкогольной жировой болезни печени

1.2. Диагностические маркёры и предикторы прогрессирования неалкогольной жировой болезни печени

1.3. Роль омиксных технологий в гастроэнтерологии. Метаболомика - новый подход в диагностике и прогнозе неалкогольной жировой болезни печени

1.4. Применение метаболомного исследования при разных формах неалкогольной жировой болезни печени

ГЛАВА 2. ПЕРСПЕКТИВНЫЕ ПОДХОДЫ К ДИАГНОСТИКЕ НЕАЛКОГОЛЬНОЙ ЖИРОВОЙ БОЛЕЗНИ ПЕЧЕНИ (МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ)

2.1. Материалы исследования

2.2. Исследование биохимических показателей

2.3. Инструментальные методы исследования

2.4. Неинвазивные методы исследования

2.5. Протокол сбора и пробоподготовка образцов сыворотки крови для определения карбоновых кислот

2.6. Морфологическая диагностика неалкогольной жировой болезни печени

2.7. Методы статистического анализа

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Клинико-лабораторная характеристика обследованных пациентов с

неалкогольной жировой болезнью печени и группы контроля

3.2. Результаты морфологического исследования у пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени

3.3. Метаболомный профиль у пациентов с неалкогольной жировой болезнью

печени

3.3.1. Сравнение метаболомного профиля контрольной группы и группы

стеатоза

3.3.2. Сравнение метаболомного профиля в группах стеатоза и

неалкогольного стеатогепатита

3.4. Анализ результатов метаболомного профиля при различных формах

неалкогольной жировой болезни печени

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-диагностическое значение определения карбоновых кислот в сыворотке крови при неалкогольной жировой болезни печени»

Актуальность темы

Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП) - одно из самых распространённых заболеваний печени во всём мире. НАЖБП представляет собой различные варианты клинико-лабораторных и морфологических изменений печени, представленных стеатозом, неалкогольным стеатогепатитом (НАСГ), фиброзом и циррозом печени, развивающиеся у пациентов, не употребляющих алкоголь в гепатотоксичных дозах. По мнению ряда авторов, доля НАЖБП среди заболеваний печени в России составляет 30-37%, частота которой увеличилась на 10% за 7 лет [17, 18, 32]. По клинико-морфологическим данным на стеатоз печени приходится около 70% случаев, до 25% случаев представлено НАСГ и примерно 5% составляет цирроз [18, 32, 33, 36]. Ряд исследований содержит прогноз распространенности НАЖБП к 2030 г. в соответствии с моделью Марка: прогнозируется увеличение распространенности стеатоза печени на 21%, НАСГ -на 63%, что увеличит заболеваемость декомпенсированным циррозом печени и повысит общую смертность [76].

Увеличение случаев НАЖБП склонных к прогрессированию, в эпидемиологической структуре хронических заболеваний печени, определяет актуальность изучаемого вопроса. В 2015 г. ведущими экспертами в разных странах были сформированы клинические рекомендации по НАЖБП для врачей гастроэнтерологов и терапевтов, однако единый системный подход еще не сформирован. Это говорит о том, что НАЖБП является сложным многофакторным процессом. По данным Всемирной гастроэнтерологической организации (WGO), у пациентов с НАЖБП показатели смертности намного выше, чем в общей популяции, в первую очередь, из-за сердечно-сосудистых осложнений, а также, цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы, которые могут являться следствием НАЖБП [23, 32].

Диагностика неалкогольной жировой болезни печени является одной из актуальных проблем современной медицины, и гастроэнтерологии в частности. За последние 20-25 лет в диагностический алгоритм активно внедряются неинвазивные методы исследования [3, 34, 55, 82].

С развитием омиксных технологий, в частности хроматографических методов исследования, позволяющих определять одномоментно различные метаболиты в одной пробе биологической жидкости, улучшилось выявление заболеваний на ранних стадиях [27, 28, 61, 94, 109]. Использование данных методов позволяет выявлять нарушения метаболизма жирных кислот у пациентов на ранних стадиях заболеваний при отсутствии клинических проявлений [1, 29].

Сведения о содержании карбоновых кислот и их метаболитов при НАЖБП встречаются в единичных работах [99, 109, 120, 136]. В связи с выше изложенным представляется перспективным определение карбоновых кислот и их производных с применением методов хроматографии, как для ранней диагностики НАЖБП, так и для дифференциальной диагностики различных форм данной патологии.

Степень разработанности темы исследования

Несмотря на то, что НАЖБП относится к наиболее распространенным хроническим заболеваниям печени, в качестве основного метода для дифференциальной диагностики стеатоза и НАСГ используется только биопсия печени с последующей морфологической оценкой.

НАЖБП характеризуется нарушением различных звеньев метаболизма. Однако омиксные технологии не изучались для диагностики и дифференциальной диагностики различных форм НАЖБП. Кроме того, в литературе имеется явно недостаточное количество исследований, посвященных ранней диагностике, в первую очередь, прогрессирующих форм заболевания с помощью методов, выявляющих интимные механизмы патогенеза. Следует также указать, что в настоящее время нет эффективных фармакоагентов для патогенетической

терапии, позволяющих адресно действовать на различные звенья патогенеза при НАЖБП. Указанные факты определяют необходимость проведения исследований, посвященных данной проблеме.

Цель исследования

Оценить клиническое и диагностическое значение карбоновых кислот при различных формах неалкогольной жировой болезни печени

Задачи исследования

1. Провести сравнительный анализ клинико-лабораторных, морфологических данных, а также наличие сопутствующей патологии у пациентов с НАЖБП в зависимости от формы заболевания (стеатоз и стеатогепатит).

2. Определить наиболее характерные диагностические критерии у пациентов с различными формами НАЖБП (стеатоз и стеатогепатит).

3. Провести сравнительный анализ содержания карбоновых кислот и их производных в сыворотке крови у пациентов со стеатозом и стеатогепатитом.

4. Оценить возможность использования карбоновых кислот и их производных в качестве дифференциально-диагностических критериев различных форм НАЖБП.

Научная новизна исследования

У пациентов с НАЖБП в сыворотке крови впервые выявлены ранее неизвестные метаболиты-биомаркеры, являющиеся представителями индолкарбоновых, гидроксикарбоновых, фенилкарбоновых кислот, гипоксантина, которые стоит расценивать как факторы риска развития неалкогольной жировой болезни печени.

Впервые в России было проведено качественное определение представителей карбоновых кислот и их метаболитов в сыворотке крови методом газовой хромато-масс-спектрометрии у пациентов с различными формами НАЖБП.

Впервые выявлены гендерные особенности в содержании карбоновых кислот и их метаболитов при различных формах НАЖБП.

Теоретическая и практическая значимость исследования

На основании результатов клинико-лабораторного, антропометрического, морфологического обследования, данных расчетных калькуляторов, а также результатов метаболомного профиля с применением газовой хромато-масс-спектрометрии, составлен «портрет» пациента в зависимости от формы НАЖБП (стеатоз и стеатогепатит).

Было показано, что вариант коморбидной патологии, наличие цитолитического синдрома, инсулинорезистентность, некровоспалительная активность, баллонная дистрофия и фиброз (по данным биопсии и расчетных калькуляторов) встречаются как при стеатозе, так и при стеатогепатите, что не позволяет использовать их в качестве дифференциально-диагностических критериев указанных форм НАЖБП.

Предложены метаболомные критерии НАЖБП: у пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени при проведении метода газовой хромато-масс-спектрометрии выявлены отклонения в содержании карбоновых кислот и их метаболитов сыворотки крови по сравнению с группой контроля, что может использоваться в диагностических целях.

Предложены метаболомные критерии стеатоза и стеатогепатита, что позволяет использовать их для дифференциальной диагностики различных форм НАЖБП.

Методология и методы исследования

Методологической основой диссертационного исследования явились принципы и правила доказательной медицины. Работа проведена по типу сравнительного когортного «случай-контроль» исследования, в ходе выполнения которого применялись инновационные методы обследования пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени. Для изучения метаболомного статуса и решения поставленных задач были обследованы 40 пациентов с различными формами неалкогольной жировой болезни печени, находившиеся на лечении в гастроэнтерологическом и эндокринологическом отделениях клиники имени Петра Великого федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования "Северо-Западный государственный медицинский университет имени И.И. Мечникова" Министерства здравоохранения Российской Федерации. Теоретической основой послужили публикации отечественных и зарубежных авторов. Диссертационное исследование одобрено этическим комитетом ФГБОУ ВО СЗГМУ им. И.И. Мечникова Минздрава России.

Статистическая обработка результатов осуществлялась с применением пакета программ для статистического анализа STATISTICA for WINDOWS версия 7 и GraphPad Prism 6. При проведении статистического анализа критический уровень значимости нулевой статистической гипотезы принимался равным 0,05.

Положения, выносимые на защиту

1. Заболевания, представляющие коморбидную патологию при НАЖБП (ишемическая болезнь сердца (ИБС), сахарный диабет 2 типа (СД2), артериальная гипертензия (АГ), дислипидемия, ожирение и избыточная масса тела), цитолитический синдром, наличие некровоспалительной активности и баллонной дистрофии (по морфологическим данным) встречаются как при стеатозе, так и

при стеатогепатите, что не позволяет использовать их в качестве дифференциально-диагностических критериев указанных форм НАЖБП.

2. Клинико-лабораторный и морфологический «портрет» пациента со стеатозом печени отличается от такового при стеатогепатите. Наиболее надежными дифференциально-диагностическими критериями НАСГ следует считать умеренный цитолитический синдром, наличие умеренного или выраженного фиброза (как по данным биопсии, так и по расчетным калькуляторам), наличие выраженной некровоспалительной активности и выраженной степени баллонной дистрофии (по морфологическим данным).

3. У пациентов с НАЖБП определяются значимые отклонения по сравнению с контрольной группой следующих метаболитов: глицериновой кислоты, 3-гидргидроксимасляной кислоты, оксаниловой кислоты, метил-альфа-Д-глюкофуранозида, гептадекановой кислоты, циклогексанкарбоновой кислоты, 3-метил-2-оксовалериановой кислоты, молочной кислоты.

4. У пациентов с НАЖБП имеют место гендерные различия в содержании карбоновых кислот и их производных в сыворотке крови, которые выявляются как при стеатозе, так и при стеатогепатите.

5. Карбоновые кислоты и их производные могут быть использованы в качестве дифференциально-диагностических маркеров различных форм НАЖБП. При этом набор метаболитов-биомаркеров отличается при стеатозе и стеатогепатите и зависит от пола пациента.

Степень достоверности и апробация результатов работы

Достоверность полученных результатов определяется достаточным объемом данных и репрезентативностью выборок обследуемых с учётом критериев включения и исключения, высокой информативностью использованных методик обследования. Методы статистической обработки полученных данных адекватны поставленным задачам. Дизайн исследования и

задачи, поставленные в работе, соответствуют намеченной цели. Выводы и практические рекомендации следуют из полученных в работе результатов.

Апробация и внедрение результатов работы в практику

Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены: на Всероссийской научно-практической студенческой конференции с международным участием - «Мечниковские чтения» (г. Санкт-Петербург 25-25 апреля 2018 г.); на международной конференции «Liver-Gut-Microbiome interactions», Falk Simposium, Hamburg (Германия 25-26.01.2018 г.); на международной конференции «Target-oriented approach to diagnosis and pharmacotherapy of NASH, a dialogue between academia and industry» Rome, Italy (Италия 09-11 ноября 2017 г.), на XII Международном конкурсе научных работ имени профессора Е. С. Рысса «Современные технологии в медицинской диагностике» (г. Санкт-Петербург 2017 г.), на VIII Конференции молодых ученых российской медицинской академии непрерывного профессионального образования, с международным участием «Горизонты медицинской науки (г. Москва, 2017 г.), на научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Трансляционная медицина: от теории к практике» (г. Санкт-Петербург 25 апреля 2017 г.).

Результаты работы внедрены и используются в лечебном процессе гастроэнтерологического и терапевтического отделений клиники имени Петра Великого ФГБОУ ВО СЗГМУ им. И.И. Мечникова Минздрава России и Санкт-Петербургского государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Госпиталь для ветеранов войн», а также используются в учебном процессе кафедры пропедевтики внутренних болезней, гастроэнтерологии и диетологии имени С.М. Рысса.

По теме диссертации опубликовано 14 печатных работ, в том числе 5 статьей в журналах, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией при Министерстве науки и высшего образования Российской Федерации для

публикации основных результатов диссертационных исследований. Получен 1 патент № 2020131429/14(056991) от 16.12.2020. Подана заявка на изобретение № 2020140934 от 11.12.2020.

Личный вклад автора

Автор лично участвовал в разработке дизайна исследования, осуществлял анализ отечественных и зарубежных источников литературы по теме диссертации, сбор первичного материала и выборку пациентов по теме исследования, участвовал в получении научных результатов, изложенных в диссертации, на всех этапах работы: организация исследования, курация и проведение осмотра пациентов, сбор первичного материала, анализ результатов хроматографических исследований с их статистической обработкой, анализом и обобщением.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 130 листах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, глав, посвященных результатам исследования и их обсуждению, выводов, практических рекомендаций, перспектив дальнейшей разработки темы, списка литературы, включающего 158 источников, из них 48 отечественных и 110 зарубежных. Работа иллюстрирована 11 таблицами и 40 рисунками. Приведены два клинических примера.

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЙ ВЗГЛЯД НА ПРОБЛЕМУ НЕАЛКОГОЛЬНОЙ ЖИРОВОЙ БОЛЕЗНИ ПЕЧЕНИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Эпидемиология и этиопатогенез неалкогольной жировой болезни, роль жирных кислот патогенезе неалкогольной жировой болезни печени

Неалкогольная жировая болезнь печени - одно из наиболее распространённых заболеваний печени. НАЖБП объединяет такие клинико-морфологические изменения печени, как стеатоз, неалкогольный стеатогепатит, фиброз и цирроз, развивающиеся у пациентов, не злоупотребляющих алкоголем в гепатотоксичных дозах [17, 32, 95, 139]. Частота распространенности среди взрослого населения составляет от 17 до 46%, что соответствует распространенности метаболического синдрома (МС) [83]. В Российской Федерации признаки стеатоза печени встречаются примерно у трети взрослого населения. Стремительное распространение случаев ожирения, приобретшее характер пандемии у взрослых и детей во всем мире, способствует увеличению фундаментальных и клинических исследований данной патологии [23, 49]. Заболеваемость составляет 20-86 случаев на 1000 человеко-лет по уровню печеночных ферментов и/или данным ультразвукового исследования (УЗИ) и 34 на 1000 случаев в год по данным протонной магнитно-резонансной спектроскопии (ПМРС) [22, 26, 36, 97].

Younossi Z.M. и соавт. (2016г.) оценили глобальную распространенность, заболеваемость и прогрессирование НАЖБП и НАСГ. Были проанализированы данные PubMed / MEDLINE ретроспективно с 1989 по 2015 гг. Из 729 исследований 86 были включены с размером выборки 8 515 431 из 22 стран. Глобальная распространенность НАЖБП составила 25,24% (95% ДИ: 22.10-28.65) с самым высоким уровнем распространенности на Ближнем Востоке и в Южной Америке и самой низкой в Африке. Сопутствующие заболевания, связанные с НАЖБП включали ожирение (51,34%, 95% ДИ: 41,38-61,20), сахарный диабет 2 типа (22,51%, 95% ДИ: 17,92-27,89), гиперлипидемию (69,16%, 95% ДИ: 49,91-

83,46%), гипертонию (39,34%, 95% ДИ: 33,15-45,88) и метаболический синдром (42,54%, 95% ДИ: 30,06-56,05). Доля прогрессирования фиброза и среднегодовая скорость прогрессирования в НАСГ составляли 40,76% (95% ДИ: 34,69-47,13) и 0,09 (95% ДИ: 0,06-0,12). Частота гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК) среди пациентов с НАЖБП составила 0,44 на 1000 человеко-лет (диапазон 0,29-0,66). Смертность среди НАЖБП и НАСГ составляли 0,77 на 1000 (диапазон 0,33-1,77) и 11,77 на 1000 человеко-лет (диапазон 7,10-19,53) и 15,44 на 1000 (диапазон, 11,72-20,34) и 25,56 на 1000 человеко-лет (диапазон, 6.29-103.80). Коэффициенты риска заболеваемости печени и общая смертность для НАЖБП составила 1,94 (диапазон 1,28-2,92) и 1,05 (диапазон 0,70-1,56) [84].

Прогрессирование НАЖБП также было оценено Estes C. и соавт. (2018г.) с помощью модели Марка до 2030г. Прогнозируется, что случаи НАЖБП увеличатся на 21%, с 83,1 млн.(2015г.) до 100,9 млн. (2030 г.), в то время как случаи НАСГ увеличатся на 63%, с 16,52 млн. до 27,00 млн. Общая распространенность НАЖБП среди взрослого населения (в возрасте >15 лет) прогнозируется на уровне 33,5% к 2030 году, а средний возраст населения НАЖБП увеличится с 50 до 55 лет в период с 2015-2030 годов. Заболеваемость декомпенсированным циррозом увеличится на 168%, а случаи ГЦК увеличатся на 137%. Общая смертность от заболевания к 2030г. увеличится на 178%, что составит около 78300 летальных случаев к 2030г. [76].

Распространенность НАЖБП в Российской Федерации описана в результатах популяционных исследований DIREG 1, DIREG_L_01903 и DIREG 2. В исследование были включены 30754 человека, их них женщины составили 56% (17208), средний возраст составил 47,8±16,4 года. Распространенность НАЖБП среди лиц, обратившихся за амбулаторной терапевтической помощью, составила 27,0%, при этом у 2,9% пациентов выявлена цирротическая стадия заболевания, у 80,3% диагностирована стеатоз, у 16,8% — стеатогепатит [21, 45, 32, 49].

Повышенная заболеваемость и смертность, расходы на здравоохранение и ухудшение качества жизни, связанного со здоровьем пациентов страдающих

НАЖБП и приводящих к увеличению случаев трансплантации печени, делают его серьезным заболеванием и требуют более глубокого анализа.

Современные представления о механизмах развития НАЖБП основываются на том, что НАЖБП имеет сложный мультифакториальный характер.

В качестве главного звена патогенеза рассматривают избыточное потребление высококалорийной пищи, малоподвижный образ жизни и инсулинорезистентность (ИР), что коррелирует с избыточной массой тела или ожирением, повышающие риск развития НАЖБП [54, 73, 105]. Наличие ИР приводит к гиперинсулинемии и активации симпатико-адреналовой системы, что повышает липолиз в жировой ткани с освобождением избыточного количества свободных жирных кислот (СЖК), в то время как в печени снижается скорость их окисления [121, 96, 21]. Усиленный приток СЖК в печень и снижение их окисления приводит к избыточному накоплению триглицеридов (ТГ) в гепатоцитах и избыточной секреции липопротеидов очень низкой плотности (ЛПОНП).

Важную роль в патогенезе уделяют вариациям генов TM6SF2, PNPLA3, NCAN и PPP1R3B или PNP1R3B, которые увеличивают наследуемость до 27% в семьях. Ген PNPLA3 (Patatin-Like Phospholipase Domain Containing 3), известный как адипонутрин, располагается в 22-й хромосоме и кодирует белок, состоящий из 481 аминокислоты и выделяющийся в звездчатых клетках печени, гепатоцитах и клетках сетчатки. Белок относится к семейству папатиноподобных фосфолипаз с гидролазной активностью в отношении ТГ, ацилтрансферазной активностью к лизофосфатидной кислоте, а также эстеразной активностью к ретинола пальмитату. Смена изолейцина на метионин в 148-й позиции аминокислотной последовательности приводит к исчезновению этих функций и кумуляции ТГ и ретинола пальмитата [138, 86, 32, 14]. Проведено немало исследований с выявлением гена TM6SF2 (2-й член 6-го трансмембранного суперсемейства) (E167K), которые выявили, что уровень экспрессии у пациентов с НАЖБП на разных стадиях заболевания значительно снижается. Иммунореактивность печени была снижена в Т-аллели TM6SF2 (Lys167) -что повышал риск НАЖБП и НАСГ.

Аллель C (Glu167) ассоциируется с повышенным сердечно-сосудистым риском за счет увеличения циркулирующих ЛПОНП [145, 137, 82].

Генетический компонент НАЖБП изучен множеством исследований, в которых использовались различные подходы. Для выявления семейных случаев заболевания, проводят идентификацию генетического компонента, целью этой стратегии является оценка кластеризации заболевания в семьях. GWAS (Полногеномный поиск ассоциаций, Genome-Wide Association Studies) и EWAS (широко-экспозомные ассоциативные исследования, exposome-wide association studies), которые включают исследования разных вариантов последовательности во всем геноме или в кодирующих областях, пролили свет на генетический компонент НАЖБП. Исследования ассоциации генов-кандидатов сосредоточены на локусах, выбранных на основе их известной или предполагаемой функции или их биологической правдоподобности в патофизиологии болезни. Наконец, функциональные и экспериментальные исследования направлены на то, чтобы дать механистическое представление о роли варианта или локуса, представляющего интерес для исследованного фенотипа [93, 134].

Микробиом кишечника человека представляет собой уникальную совокупность микроорганизмов. Кишечная флора состоит из более 1014 микроорганизмов, которые образуют отдельный внутренний орган со своим геномом или метагеномом [90, 123, 143, 79, 59]. В кишечном микробиоме человека обитают следующие виды филов бактерий: Bacteroidetes, Actinobacteria, Firmicutes, Tenericutes, Deferribacteres, Proteobacteria, Cyanobacteria, TM7 и Verrucomicrobia. Из них основную роль играют 4 вида, способные производить короткоцепочечные жирные кислоты (КЦЖК) - Firmicutes, Bacteroidetes, Actinobacteria и Proteobacteria [5, 9, 10, 11, 12, 103].

Результаты различных исследований предполагают несколько механизмов влияния кишечной микробиоты на патогенез НАЖБП: повышенная проницаемость кишечника, избыточный бактериальный рост и повышенный уровень эндотоксинов в сыворотке, такие как липополисахариды (ЛПС). Содержание ЛПС увеличивается при синдроме избыточного бактериального

роста (СИБР), что даёт гепатотоксические эффекты за счёт активации Toll-подобных рецепторов 4-типа и запуска воспалительных иммунных реакций [144, 74, 127, 142, 126, 59, 10, 11].

В проспективном кросс-секционном исследовании у пациентов с НАЖБП было выявлено увеличение бактерий рода Bacteroidetes (p = 0,005) и снижение Firmicutes (p = 0,002) по сравнению с контрольной группой. Уменьшение представителей Lachnospiraceae и Ruminococcaceae при НАЖБП, с наибольшим снижением родов Blautia и Faecalibacterium приводит к дефициту Firmicutes. Кроме того, увеличение количества Proteobacteria у пациентов с НАЖБП объясняется увеличением количества Enterobacteriaceae, которое прогрессивно увеличивалось со стадии стеатоза до НАСГ [59].

В патогенезе НАЖБП важную роль играют бактерии продуцирующие этанол, прежде всего Escherichia coli. Эндогенно вырабатываемый алкоголь способствует нарушению целостности кишечного барьера, активируя воспалительные реакции и гепатотоксическое действие [71, 116, 59].

Короткоцепочечные жирные кислоты - монокарбоновые кислоты с длиной цепи до 6 атомов углерода, первоначально их называли «летучими жирными кислотами» из-за их неприятного и специфического запаха. Наиболее важными КЦЖК являются уксусная, пропионовая, масляная, валериановая, капроновая кислоты. Синтез КЦЖК осуществляется анаэробными бактериями, которые преобладают в составе кишечной микрофлоры и являются продуктом микробной ферментации углеводов, жиров и белков. Кишечные бактерии вырабатывают большое количество различных гликозидгидролаз, способных ферментировать сложные макромолекулы непереваренных в вышележащих отделах желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) полисахаридов, а также пищевых и эндогенных белков. Тип ферментируемого в толстой кишке субстрата определяет спектр и количество КЦЖК. Большая часть КЦЖК внедряется в локальные кишечные капилляры и по воротной вене проникает в печень, где в дальнейшем происходит трансформация с образованием глюкозы (около 50% поступивших КЦЖК). Пропионат в гепатоцитах участвует в глюконеогенезе, а также в регуляции метаболических

процессов и липидном обмене. Ацетат участвует в липогенезе, являясь важным энергетическим субстратом для сердца, мозга, почек, мышц и других периферических тканей. КЦЖК запускают физиологические и клинические эффекты на разном удалении от места синтеза жирных кислот. Многообразное действие КЦЖК позволяют относить их молекулы к классу универсальных сигнальных химических носителей передачи информации в организме человека [1, 2, 5, 9, 12, 48]. Также КЦЖК участвуют в регуляции аппетита, путём воздействия на сигнальные молекулы, и также подавляют стимуляцию моторики кишечника. Повышенное количество КЦЖК также приводит к избыточному высвобождению ТГ, которые участвуют в патогенезе жировой дистрофии печени [125, 100].

1.2 Диагностические маркёры и предикторы прогрессирования неалкогольной

жировой болезни печени

При верификации диагноза НАЖБП обязателен сбор анамнеза, оценка антропометрических параметров, метаболических факторов и наличие или отсутствие сопутствующей патологии. Проведение скрининга показано всем пациентам с наличием доказанных ассоциированных состояний:

• сахарный диабет 2 типа

• ожирение

• метаболический синдром

• дислипидемия

Риск развития НАЖБП также повышают:

• гипотиреоз

• синдром поликистозных яичников

• гипогонадизм

• синдром обструктивного апноэ сна (СОАС)

• гипопитуитаризм

• приём гепатотоксичных препаратов

• панкреато-дуоденальная резекция [24, 141].

Высококалорийное питание, с избыточным потреблением жиров, углеводов, подслащенных напитков, а также высокое потребление фруктозы коррелируют с увеличением массы тела и развитием ожирения, что может привести к развитию НАЖБП. Избыточное потребление фруктозы повышает риск развития НАСГ и выраженного фиброза печени [54, 73, 105].

Показателями висцерального ожирения являются индекс массы тела (ИМТ) и окружность талии, которые позволяют прогнозировать развитие тяжелой формы

Л

заболевания. У пациентов с ИМТ <30 кг/м или с целевыми цифрами ИМТ, но с накоплением висцерального жира или дисфункциональной жировой тканью развивается НАЖБП с/без нарушения активности печеночных ферментов. При развитии ожирения, которое считается основным фенотипом и фактором риска НАЖБП, обусловленным ИР, показано динамическое наблюдение. У пациентов с НАЖБП и нормальной массой тела наблюдаются ИР и накопление висцерального жира, но, тем не менее, таким пациентам требуется наблюдение, поскольку заболевание может прогрессировать бессимптомно. Развитие НАЖБП с висцеральным ожирением объясняется повышенным выбросом СЖК к печени и снижением скорости их окисления. Впоследствии происходит нарушение связывания инсулина гепатоцитами и накопление их в цитоплазме липидов [118, 150, 88, 136].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Абациева Мадина Петровна, 2021 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Ардатская, М. Д. Масляная кислота и инулин в клинической практике. Теоретические аспекты и возможности клинического применения: пособие / М. Д. Ардатская; под ред. М. Д. Ардатской. - М.: Форте принт, 2014. - 64 с.

13

2. Бакулин, И. Г. С-метацетиновый дыхательный тест при оценке функционального резерва печени / И. Г. Бакулин, Ю. В. Медведев // Фарматека. - 2016. - № S5. - С. 71-80. - URL: https://pharmateca.ru/ru/archive/article/34013 (дата обращения: 15.03.2019).

3. Бакулин, И. Г. Оценка функционального резерва печени при циррозе с

13

помощью С-метацетинового дыхательного теста (обзор литературы и клинические наблюдения) / И. Г. Бакулин, Ю. В. Медведев // Анналы хирургической гепатологии. - 2017. - Т. 22, № 1. - С. 19-24.

4. Белобородова, Н. В. Интеграция метаболизма человека и его микробиома при критических состояниях / Н. В. Белобородова // Общая реаниматология. - 2012. - Т. 8, № 4. - С. 42-54.

5. Бакулин, И. Г. Неинвазивные методы в диагностике неалкогольной жировой болезни печени / И. Г. Бакулин, М. П. Абациева // Медико-социальная экспертиза и реабилитация. - 2017. - Т. 20, № 2. - С. 107112.

6. Бакулин, И. Г. Жирные кислоты сыворотки крови: возможности применения в диагностических целях при неалкогольной жировой болезни печени / И. Г. Бакулин, М. П. Абациева // Лечение и Профилактика. - 2017. - № 3 (23). - С. 84-93.

7. Бакулин, И. Г. Клиническое и медико-социальное значение НАЖБП через призму коморбидности / И. Г. Бакулин, М. П. Абациева, М. И. Скалинская, М. С. Журавлева // Терапия. - 2019. - № 6 (32). - С. 76-86.

8. Белобородова, Н. В. Микробный путь образования фенилкарбоновых кислот в организме человека / Н. В. Белобородова, А. С. Ходакова, А. Ю. Оленин // Биохимия. - 2009. - Т. 74, № 12. - С. 1657-1663.

9. Белобородова, Н. В. Экзометаболиты некоторых анаэробных микроорганизмов микрофлоры человека / Н. В. Белобородова, И. Т. Байрамов, А. Ю. Оленин, Н. И. Федотчева // Биомедицинская химия. -2011. - Т. 57, № 1. - С. - 95-105.

10. Белобородова, Н. В. Метаболиты анаэробных бактерий (летучие жирные кислоты) и реактивность макроорганизма / Н. В. Белобородова, С. М. Белобородов //Антибиотики и химиотерапия. - 2000. - Т. 45, № 2. - С. 28-36.

11. Безрукова, С. А. Карбоновые кислоты и их функциональные производные: практическое руководство / С. А. Безрукова - Северск.: Изд-во СТИ НИЯУМИФИ, 2011. - 34 с.

12. Боровиков, В. П. STATISTICA: искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов / В. П. Боровиков. - СПб.: Питер, 2001. - 656 с.

13. Богомолов, П.О. Генетические аспекты неалкогольной жировой болезни печени / П. О. Богомолов, К. Ю. Кокина, А. Ю. Майоров, Е. Е. Мишина // Вопросы современной педиатрии. - 2018. - Т. 17, № 6. - С. 442-448.

14. Генетический паспорт - основа индивидуальной и предиктивной медицины: [коллективная монография] / В. С. Баранов, А. С. Глотов, Т. Э. Иващенко [и др.]; под ред. В. С. Баранова ; НИИ АГ им. Д. О. Отта СЗО РАМН. - СПб.: Изд-во Н-Л, 2009. - 528 с.

15. Гладилович, В. Д. Возможности применения метода ГХ-МС (обзор) / В. Д. Гладилович, Е. П. Подольская // Научное приборостроение. - 2010. -Т. 20, № 4. - С. 36-49.

16. Голованова, Е. В. Обзор международных и отечественных клинических рекомендаций по диагностике и лечению неалкогольной жировой

болезни печени / Е. В. Голованова, Д. Б. Лазебник // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2016. - № 11 (135). - С. - 76-83.

17. Драпкина, О. М. Континуум неалкогольной жировой болезни печени: от стеатоза печени до сердечно-сосудистого риска / О. М. Драпкина, О. Н. Корнеева // Рациональная фармакотерапия в кардиологии. - 2016. -Т. 12, № 4. - С. 424-429.

18. Драпкина, О. М. Современные подходы к диагностике и лечению неалкогольной жировой болезни печени / О. М. Драпкина, Т. А. Деева, Н. П. Волкова, В. Т. Ивашкин // Терапевтический архив. - 2014. - Т. 86, № 10. - С. 116-123.

19. Драпкина, О. М. Оценка эндотелиальной функции и степени апоптоза у пациентов с метаболическим синдромом и неалкогольной жировой болезнью печени / О. М. Драпкина, Т. А. Деева, В. Т. Ивашкин // Терапевтический архив. - 2015. - Т. 87, № 5. - С. 76-83.

20. Драпкина, О. М. Эпидемиологические особенности неалкогольной жировой болезни печени в России (результаты открытого многоцентрового проспективного исследования-наблюдения DIREG Ь 01903) / О. М. Драпкина, В. Т. Ивашкин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2014. - Т. 24, № 4. - С. 32-38.

21. Ермолова, Т. В. Неалкогольная жировая болезнь печени: современный взгляд на проблему / Т. В. Ермолова, С. Ю. Ермолов, Е. Л. Беляева // Эффективная фармакотерапия. - 2016. - № 5. - С. - 26-35.

22. Звенигородская Л. А. Перекисное окисление липидов и активность липопротеин-ассоциированной фосфолипазы А2 в сыворотке крови у больных неалкогольной жировой болезнью печени / Л. А. Звенигородская, Т. В. Нилова, А. В. Петраков // Поликлиника. - 2015. -№ 5 (1). - С. - 48-52.

23. Ивашкин, В. Т. Распространенность неалкогольной жировой болезни печени у пациентов амбулаторно-поликлинической практики в российской федерации: результаты исследования DIREG 2 / В. Т. Ивашкин, О. М. Драпкина, И. В. Маев [и др.] // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2015. - Т. 25, № 6.

- С. - 31-41.

24. Ивашкин, В. Т. Клинические рекомендации по диагностике и лечению неалкогольной жировой болезни печени Российского общества по изучению печени и Российской гастроэнтерологической ассоциации /

B. Т. Ивашкин, М. В. Маевская, Ч. С. Павлов [и др.] // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2016. - Т. 26, № 2. - С. 24-42.

25. Корнеева, О. Н. Неалкогольная жировая болезнь печени у пациентов с метаболическим синдромом // О. Н. Корнеева, О. М. Драпкина, А. О. Буеверов, В. Т. Ивашкин // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. (приложение 29).- 2007. - Т. 1. - № 17. - С. 65.

26. Коморбидная патология в клинической практике. Клинические рекомендации / Р. Г. Оганов, И. Н. Денисов, В. И. Симаненков [и др.] // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2017. - Т. 16, № 6. - С. 556.

27. Лохов, П. Г. Метаболом плазмы крови для диагностики и оценки риска возникновения рака простаты, рака легкого и сахарного диабета 2-го типа : автореф... дис. д-ра биол. наук: спец. 03.01.04 / П. Г. Лохова; ФГБНУ Науч.-исслед. ин-т биомед. химии им. В. Н. Ореховича РАМН.

- М., 2015. - 42 с.

28. Лохов, П. Г. Масс-спектрометрические методы в метаболомике / П. Г. Лохов, А. И. Арчаков // Биомедицинская химия. - 2008. - Т. 54, № 5. -

C. 497-511.

29. Метаболом сыворотки крови по данным газовой хроматографии -масс-спектрометрии (ГХ-МС) у пациентов с язвенным колитом и

больных целиакией / С. И. Ситкин, Е. И. Ткаченко, Т. Я. Вахитов [и др.] // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2013. - № 12. - С. 44-54.

30. Метаболомика - новый подход к диагностике заболеваний на молекулярном уровне / Е. А. Калинина, Т. А. Волкунович, Т. М. Зубарева [и др.] // Лечение и профилактика. - 2013. - № 2. - С. 117-124.

31. Неалкогольная жировая болезнь печени: возможности диагностики / П. В. Селивестров, С. Н. Джадхав, Д. Б. Цурцумия [и др.] // Русский медицинский журнал. - 2019. - Т. 27, № 5. - С. 36-40.

32. Неалкогольная жировая болезнь печени: клиника, диагностика, лечение (Рекомендации для терапевтов, 2-я версия) / Л. Б. Лазебник, В. Г. Радченко, Е. В. Голованова [и др.] // Терапия. - 2017. - № 3 (13). - С. -6-23.

33. Осипов, Г. А. Опыт применения масс-спектрометрии микробных маркеров в лабораторной диагностике / Г. А. Осипов, Н. Н. Зыбина, Г. Г. Родионов // Медицинский алфавит. - 2013. - Т. 1, № 3. - С. 64-67.

34. Оценка стеатоза печени с помощью неинвазивного метода: миф или реальность? / И. Г. Бакулин, Ю. Г. Сандлер, В. А. Кейян [и др.] // Доктор.ру. - 2015. - № 12 (113). С. 57-64.

35. Оценка метаболома сыворотки крови - перспективный метод диагностики неалкогольной жировой болезни печени у мужчин / М. П. Абациева, И. Г. Бакулин, С. И. Ситкин [и др.] // Вестник СевероЗападного государственного медицинского университета им. И.И. Мечникова. - 2018. - Т.10, № 4. - С. 5-14. ёо1: 10.17816/шееЬткоу20181045-14.

36. Особенности антиоксидантной системы и полиморфизмов некоторых генов-кандидатов у пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени / И. В. Лапинский, Е. Б. Авалуева, И. Г. Бакулин [и др.] // Фарматека. - 2018. - № 9 (362). - С. - 48-55.

37. Павлов, Ч. С. Неалкогольный стеатогепатит: клинические особенности и принципы лечения / Ч. С. Павлов, И. Г. Бакулин // Врач. - 2007. - № 10. - С. - 24-28.

38. Плавинский, С. Л. Введение в биостатистику для медиков / С. Л. Плавинский. - М.: Астрель, 2011. - 584 с.

39. Разработка и адаптация к условиям клинической лаборатории методик газохроматографического определения фенилкарбоновых кислот в сыворотке крови / В. В. Мороз, Н. В. Белобородова, А. Ю. Бедова [и др.] // Журнал аналитической химии. - 2015. - Т. 70, № 4. - С. 418-425.

40. Реброва, О.В. Статистический анализ медицинских данных с помощью пакета программ «Статистика» / О. В. Реброва. — М.: Медиа Сфера, 2002 — 380 а

41. Скальный, А. В. Биоэлементы в медицине : [Учеб. пособие для системы послевуз. проф. образования врачей] / А. В. Скальный, И. А. Рудаков. -М. : Оникс 21 в. : Мир, 2004. - 272 с.

42. Степанов, Ю. М. Неалкогольная жировая болезнь печени: особенности метаболических изменений на разных этапах развития болезни / Ю. М. Степанов, Н. В. Недзвецкая, В. Б. Ягмур, И. А. Кленина // Гастроэнтерология. - 2018. - Т. - 52, № 1. - С. - 13-18.

43. Терешина, Е. В. Роль жирных кислот в развитии возрастного окислительного стресса. Гипотеза. / Е. В. Терешина // Успехи геронтологии. - 2007. - Т. 20, № 1. - С. 59-65.

44. Тишковский, С. В. Неалкогольная жировая болезнь печени и сахарный диабет 2 типа - звенья одного процесса / С. В. Тишковский, Э. В. Давыдчик, Л. В. Никонова // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. - 2016. - № 1. - С 92-98.

45. Тихомирова, А. С. Клинико-морфологические параллели полиморфизма гена PNPLA3 у пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени / А. С. Тихомирова, В. А. Кисляков, И. Е. Байкова, И. Г. Никитин // Терапевтический архив. - 2018. - Т. 90, № 2. - С 85-88.

46. Фурина, Р. Р. Метаболомические исследования в онкологии / Р. Р. Фурина // Российский онкологический журнал. - 2014. - Т. 19, № 4. -С. 12-15.

47. Цуканов, В. В. Эпидемиологические особенности неалкогольной жировой болезни печени в Новосибирске (Сибирский федеральный округ): региональные данные открытого многоцентрового проспективного исследования Direg 2 / В. В. Цуканов, А. С. Юркина, Т. А. Ушакова, Д. В. Блинов // Фармакоэкономика. Современная фармакоэкономика и фармакоэпидемиология. - 2016. - Т. 9, № 2. -С.17-27.

48. Шиповская А. А. Клинические особенности неалкогольной жировой болезни печени в гендерном аспекте / А. А. Шиповская, Н. А. Ларина, О. П. Дуданова // Journal of biomedical technologies. - 2016. - № 1. - С. 35-40.

49. A human gut microbial gene catalogue established by metagenomic sequencing / J. Qin, R. Li, J. Raes [et al.] // Nature. - 2010. - Vol. 464, № 7285. - P. 59-65.

50. A randomized controlled trial of metformin versus vitamin e or prescriptive diet in nonalcoholic fatty liver disease / E. Bugianesi, E. Gentilcore, R. Manini [et al.] // The American journal of gastroenterology. - 2005. - Vol. 100, № 5. - P. 1082-1090.

51. Advances in epidemiology and serum markers for the noninvasive diagnosis of nonalcoholic fatty liver disease / G. Feng, N. He, J. N. Wang [et al.] // Chinese journal of hepatology. - 2018. - Vol. 26, № 6. - P. 476-480.

52. Altered fecal microbiota correlates with liver biochemistry in nonobese patients with non-alcoholic fatty liver disease / B. Wang, X. Jiang, M. Cao [et al.] // Scientific reports. - 2016. - Vol. 6, Article ID 32002. - 34 p.

53. Barrera, F. The role of diet and nutritional intervention for the management of patients with NAFLD / F. Barrera, J. George // Clinics in liver disease. -2014. - Vol. 18, № 1. - P. 91-112.

54. Bedossa, P. Current histological classification of NAFLD: strength and limitations / P. Bedossa // Hepatology international. - 2013. - Vol. 7, Suppl. 2. - P. 765-770.

55. Bedossa, P. Utility and appropriateness of the fatty liver inhibition of progression (FLIP) algorithm and steatosis, activity, and fibrosis (SAF) score in the evaluation of biopsies of nonalcoholic fatty liver disease / P. Bedossa // Hepatology. - 2014. - Vol. 60, № 2. - P. 565-575.

56. Behfet's syndrome patients exhibit specific microbiome signature / C. Consolandi, S. Turroni, G. Emmi [et al.] // Autoimmunity reviews. - 2015. -Vol. 14, № 4. - P. 269-276.

57. Biochemical markers of liver fibrosis in patients with hepatitis C virus infection: a prospective study / F. Imbert-Bismut, V. Ratziu, L. Pieroni [et al.] // Lancet. - 2001. - Vol. 357, № 9262. - P. 1069-1075.

58. Carriage of the PNPLA3 rs738409 C > G polymorphism confers an increased risk of non-alcoholic fatty liver disease associated hepatocellular carcinoma / Y. L. Liu, G. L. Patman, J. B. Leathart [et al.] // Journal of hepatology. - 2014. - Vol. 61, № 1. - P. 75-81.

59. Characterization of gut microbiomes in nonalcoholic steatohepatitis (NASH) patients: a connection between endogenous alcohol and NASH / L. Zhu, S. S. Baker, C. Gill [et al.] // Hepatology. - 2013. - Vol. 57, № 2. - P. 601609.

60. Circulating phospholipid patterns in NAFLD patients associated with a combination of metabolic risk factors / S. Tiwari-Heckler, H. Gan-Schreier, W. S. Stremmel [et al.] // Nutrients. - 2018. - Vol. 10, № 5. - P. E649.

61. Clinical and metabolic characterization of obese subjects without nonalcoholic fatty liver: A targeted metabolomics approach / A. Feldman, S. K. Eder, T. K. Felder [et al.] // Diabetes & metabolism. - 2019. - Vol. 45, № 2. - P. 132-139.

62. Comparison of noninvasive markers of fibrosis in patients with nonalcoholic fatty liver disease / A. G. Shah, A. Lydecker, K. Murray [et al.] // Clinical gastroenterology and hepatology. - 2009. - Vol. 7, № 10. - P. 1104-1112.

63. Controlled attenuation parameter (CAP): a novel VCTETM guided ultrasonic attenuation measurement for the evaluation of hepatic steatosis: preliminary study and validation in a cohort of patients with chronic liver disease from various causes / M. Sasso, M. Beaugrand, V. de Ledinghen [et al.] // Ultrasound in medicine & biology. - 2010. - Vol. 36, № 11. - P. 1825-1835.

64. Correlation between liver histology and novel magnetic resonance imaging in adult patients with non-alcoholic fatty liver disease - MRI accurately quantifies hepatic steatosis in NAFLD / Z. Permutt, T. A. Le, M. R. Peterson [et al.] // Alimentary pharmacology & therapeutics. - 2012. - Vol. 36, № 1. - P. 22-29.

1 -5

65. Critical appraisal of C breath tests for microsomal liver function: aminopyrine revisited / K. E. Pijls, H. de Vries, S. Nikkessen [et al.] // Liver international. - 2014. - Vol. 34, № 4. - P. 487-494.

66. Castro, A. V. Obesity, insulin resistance and comorbidities? Mechanisms of association / A. V. Castro, C. M. Kolka, S. P. Kim, R. N. Bergman // Arquivos brasileiros de endocrinologia e metabologia. - 2014. - Vol. 58, № 6. - P. 600-609.

67. Development and validation of a simple NAFLD clinical scoring system for identifying patients without advanced disease / S. A. Harrison, D. Oliver, H. L. Arnold [et al.] // Gut. - 2008. - Vol. 57, № 10. - P. 1441-1447.

68. Development of a simple noninvasive index to predict significant fibrosis in patients with HIV/HCV coinfection / R. K. Sterling, E. Lissen, N. Clumeck [et al.] // Hepatology. - 2006. - Vol. 43, № 6. - P. 1317-1325.

69. Diagnostic accuracy of FibroScan and comparison to liver fibrosis biomarkers in chronic viral hepatitis: a multicenter prospective study (the

FIBROSTIC study) / F. Degos, P. Perez, B. Roche [et al.] // Journal of hepatology. - 2010. - Vol. 53, № 6. - P. 1013-1021.

70. DuPont, A. W. The intestinal microbiota and chronic disorders of the gut /

A. W. DuPont, H. L. DuPont // Nature reviews. Gastroenterology & hepatology. - 2011. - Vol. 8, № 9. - P. 523-531.

71. Dysbiosis gut microbiota associated with inflammation and impaired mucosal immune function in intestine of humans with non-alcoholic fatty liver disease / W. Jiang, N. Wu, X. // Scientific reports. - 2015. - № 5. - P. 8096.

72. EASL-ALEH Clinical Practice Guidelines: Non-invasive tests for evaluation of liver disease severity and prognosis / European Association for Study of Liver, Asociacion Latinoamericana para el Estudio del Higado // Journal of hepatology. - 2015. - Vol. 63, № 1. - P. 237-264.

73. Effect of fructose on markers of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD): a systematic review and meta-analysis of controlled feeding trials / S. Chiu, J. L. Sievenpiper, R. J. de Souza [et al.] // European journal of clinical nutrition. - 2014. - Vol. 68, № 4. - P. 416-423.

74. Ethanol production by selected intestinal microorganisms and lactic acid bacteria growing under different nutritional conditions / F. M. F. Elshaghabee, W. Bockelmann, D. Meske [et al.] // Frontiers in microbiology. - 2016. - Vol. 7. - P. 47.

75. Ewaschuk, J. B. Metabolic acidosis: separation methods and biological relevance of organic acids and lactic acid enantiomers / Ewaschuk J.B., Zello G.A., Naylor J.M, Brocks. D. R. [et al] // Journal of Chromatography

B. - 2002. - Vol. 781, № 1-2. - P. 39-56.

76. Estes, C. Modeling the epidemic of nonalcoholic fatty liver disease demonstrates an exponential increase in burden of disease / C. Estes, H. Razavi, R. Loomba, Z. Younossi // Hepatology. - 2018. - Vol. 67, № 1. - P. 123-133.

77. Fatty Acids and Outcomes Research Consortium (FORCE). Fatty acid biomarkers of dairy fat consumption and incidence of type 2 diabetes: A pooled analysis of prospective cohort studies./ F. Imamura, A. frets, M. Marklund [et al] // PLoS Med. - 2018. - 15 (10): e1002670.

78. FibroMeters: a family of blood tests for liver fibrosis / P. Cales, J. Boursier, F. Oberti [et al.] // Gastroentérologie clinique et biologique. - 2008. - Vol. 32, № 6, Suppl. 1. - P. 40-51.

79. Fecal microbiome and volatile organic compound metabolome in obese humans with nonalcoholic fatty liver disease./ M. Raman, I. Ahmed, P.M. Gillevet [et al.] // Clin Gastroenterol Hepatol.. - 2013. - Vol. 11, № 7. - P. 868-875.

80. Gender-related metabolomics and lipidomics: From experimental animal models to clinical evidence / M. Audano, M. Maldini, E. De Fabiani [et al.] // Journal of proteomics. - 2018. - Vol. 178. - P. 82-91.

81. Gender-specific pathway differences in the human serum metabolome / J. Krumsiek, K. Mittelstrass, K. T. Do [et al.] // Metabolomics. - 2015. - Vol. 11, № 6. - P. 1815-1833.

82. Genetic variation in transmembrane 6 superfamily member 2 and the risk of nonalcoholic fatty liver disease and histological disease severity / S. Sookoian, G. O. Castaño, R. S. Scian [et al.] // Hepatology. - 2015. - Vol. 61, № 2. - P. 515-525.

83. Gutierrez-Buey J. Is HOMA-IR a potential screening test for non-alcoholic fatty liver disease in adults with type 2 diabetes? / J. Gutierrez-Buey, J. M. Núñez-Córdoba, M. Llavero-Valero, J. Gargallo // European Journal of Internal Medicine. 2017. P. 74-78. doi: 10.1016/j.ejim.2017.03.006.

84. Global epidemiology of nonalcoholic fatty liver disease-Meta-analytic assessment of prevalence, incidence, and outcomes / Z. M. Younossi, A. B. Koenig, D. Abdelatif [et al.] // Hepatology. - 2016. - Vol. 64, № 1. - P. 7384.

85. Gangarapu, V. Role of gut microbiota: obesity and NAFLD / V. Gangarapu, K. Yildiz, A. T. Ince, B. Baysal // The Turkish journal of gastroenterology. -2014. - Vol. 25, № 2. - P. 133-140.

86. High prevalence of nonalcoholic fatty liver disease in patients with type 2 diabetes mellitus and normal plasma aminotransferase levels / P. Portillo-Sanchez, F.M. Bril, M. Maximos [et al] //. J Clin Endocrinol Metab, 2015, vol. 100, pp. 2231-2238.

87. Homozygosity for the patatin-like phospholipase-3/adiponutrin I148M polymorphism influences liver fibrosis in patients with nonalcoholic fatty liver disease / L.Valenti, A. Al-Serri, A. K. Daly [et al.] // Hepatology. -2010. - Vol. 51, № 4. - P. 1209-1217.

88. Human Metabolome Database (HMDB) : carn\ - URL: http://www.hmdb.ca/ (дата обращения: 15.03.2019). - Electronic resource.

89. Increased cardiometabolic risk factors and inflammation in adipose tissue in obese subjects classified as metabolically healthy / J. Gómez-Ambrosi, V. Catalán, A. Rodríguez [et al.] // Diabetes care. - 2014. - Vol. 37, № 10. - P. 2813-2821.

90. Integrated tra9nscriptomics and metabolomics reveal signatures of lipid metabolism dysregulation in HepaRG liver cells exposed to PCB 126 / R. Mesnage, M. Biserni, S. Balu [et al.] // Archives of toxicology. - 2018. -Vol. 92, № 8. - P. 2533-2547.

91. Identification of pathognomonic purine synthesis biomarkers by metabolomic profiling of adolescents with obesity and type 2 diabetes / J. Concepcion, K. Chen, R. Saito [et al.] // PLoS One.. - 2020. - Jun 26;15(6):e0234970. doi: 10.1371/journal.pone.0234970.

92. Jenkins, B. A review of odd-chain fatty acid metabolism and the role of pentadecanoic Acid (c15:0) and heptadecanoic Acid (c17:0) in health and disease. / B. Jenkins, J. A West, A. Koulman A.// Molecules. - 2015. - Vol. 20, № 2. - P. 2425-24444.

93. Kim, D. Association between noninvasive fibrosis markers and mortality among adults with nonalcoholic fatty liver disease in the United States / D. Kim, W. R. Kim, H. J. Kim, T. M. Therneau // Hepatology. - 2013. - Vol. 57, № 4. - P. 1357-1365.

94. Kandpal, R. P. The era of 'omics unlimited / R. Kandpal, B. Saviola, J. Felton // BioTechniques. - 2009. - Vol. 46, № 5. - P. 351-355.

95. Kleiner, D. E. Nonalcoholic fatty liver disease: pathologic patterns and biopsy evaluation in clinical research / D. E. Kleiner, E. M. Brunt // Seminars in liver disease. - 2012. - Vol. 32, № 1. - P. 3-13.

96. Kumar, R. Non-alcoholic fatty liver disease in lean subjects: characteristics and implications / R. Kumar, S. Mohan // Journal of clinical and translational hepatology. - 2017. - Vol. 5, № 3. - P. 216-223.

97. Liver fat deposition and mitochondrial dysfunction in morbid obesity: An approach combining metabolomics with liver imaging and histology / N. Calvo, R. Beltrán-Debón, E. Rodríguez-Gallego [et al.] // World journal of gastroenterology. - 2015. - Vol. 21, № 24. - P. 7529-7544.

98. Liver fat is increased in type 2 diabetic patients and underestimated by serum alanine aminotransferase compared with equally obese nondiabetic subjects / A. Kotronen, L. Juurinen, A. Hakkarainen [et al.] // Diabetes care.

- 2008. - Vol. 31, № 1. - P. 165-169.

99. Loomba, R. Polyunsaturated fatty acid metabolites as novel lipidomic biomarkers for noninvasive diagnosis of nonalcoholic steatohepatitis / R. Loomba, O. Quehenberger, A. Armando, E. A. Dennis // Journal of lipid research. - 2015. - Vol. 56, № 1. - P. 185-192.

100. Marchesini, G. NAFLD incidence and remission: only a matter of weight gain and weight loss? / G. Marchesini, A. Mazzotti // Journal of hepatology.

- 2015. - Vol. 62, № 1. - P. 15-17.

101. Mass spectrometry analysis of blood plasma lipidome as method of disease diagnostics, evuation of effectiveness and optimization of drug therapy / P.

G. Lokhov, D. L. Maslov, E. E. Balashova [et al.] // Biomeditsinskaia khimiia. -2015. - Vol. 61, № 1. - P. 7-18

102. Metabolomic analysis of human cirrhosis, hepatocellular carcinoma, nonalcoholic fatty liver disease and non-alcoholic steatohepatitis diseases / Safaei A. et al. // Gastroenterology and hepatology from bed to bench. -2016. - T. 9. - №. 3. - C. 158. PMC4947130.

103. Metabolomic-based noninvasive serum test to diagnose nonalcoholic steatohepatitis: Results from discovery and validation cohorts / R. Mayo, J. Crespo, I. Martinez-Arranz [et al.] // Hepatology communications. - 2018. -Vol. 2, № 7. - P. 807-820.

104. Miura, K. Role of gut microbiota and Toll-like receptors in nonalcoholic fatty liver disease / K. Miura, H. Ohnishi // World journal of gastroenterology. - 2014. - Vol. 20, № 23. - P. 7381-7391.

105. Musso, G. Gut microbiota as a regulator of energy homeostasis and ectopic fat deposition: mechanisms and implications for metabolic disorders / G. Musso, R. Gambino, M. Cassader // Current opinion in lipidology. - 2010. -Vol. 21, № 1. - P. 76-83.

106. Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) activity score and the histopathologic diagnosis in NAFLD: distinct clinicopathologic meanings / E. M. Brunt, D. E. Kleiner, L. A. Wilson [et al.] // Hepatology. - 2011. -Vol. 53, № 3. - P. 810-820.

107. Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) and its connection with insulin resistance, dyslipidemia, atherosclerosis and coronary heart disease / M. Gaggini, M. Morelli, E. Buzzigoli [et al.] // Nutrients. - 2013. - Vol. 5, № 5. - P. 1544-1560.

108. Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is associated with low level of physical activity: a population-based study / L. Gerber, M. Otgonsuren, A. Mishra [et al.] // Alimentary pharmacology & therapeutics. - 2012. - Vol. 36, № 8. - P. 772-781.

109. Nonalcoholic fatty liver disease in lean individuals in the United States / Z. M. Younossi, M. Stepanova, F. Negro [et al.] // Medicine. - 2012. - Vol. 91, № 6. - P. 319-327.

110. Nonalcoholic fatty liver disease is a novel predictor of cardiovascular disease / M. Hamaguchi, T. Kojima, N. Takeda [et al.] // World J Gastroenterol. - 2007. - Mar 14;13(10):1579-84. doi: 10.3748/wjg.v13.i10.1579. PMID: 17461452; PMCID: PMC4146902.

111. Nonalcoholic fatty liver disease is associated with blood pressure in hypertensive and nonhypertensive individuals from the general population with normal levels of alanine aminotransferase / A. López-Suárez, J. M. Guerrero, J. Elvira-González [et al.] // European journal of gastroenterology & hepatology. - 2011. - Vol. 23, № 11. - P. 1011-1017.

112. Noninvasive investigations for non alcoholic fatty liver disease and liver fibrosis / C. Fierbinteanu-Braticevici, I. Dina, F. Petrisor [et al.] // World journal of gastroenterology. - 2010. - Vol. 16, № 38. - P. 4784-4791

113. Novikova, S. E. Transcriptomics and proteomics in studies of induced differentiation of leukemia cells / S. E. Novikova, V. G. Zgoda // Biomeditsinskaia khimiia. - 2015. - Vol. 61, № 5. - P. 529-544.

114. Osipov, G. A. Study of human microecology by mass spectrometry of microbial markers / G. A. Osipov, N. V. Verkhovtseva // Beneficial microbes. - 2011. - Vol. 2, № 1. - P. 63-78.

115. Performance of noninvasive scores for the diagnosis of advanced liver fibrosis in morbidly obese with nonalcoholic fatty liver disease / M. A Carli, L. A. Carli, M. B. Correa [et al.] // European Journal of Gastroenterology & Hepatology. - 2019. Aug 27. doi: 10.1097/MEG.0000000000001519.

116. Parallel activation of de novo lipogenesis and stearoyl-CoA desaturase activity after 3 d of high-carbohydrate feeding / M. F. Chong, L. Hodson, A. S. Bickerton [et al.] // The American journal of clinical nutrition. - 2008. -Vol. 87, № 4. - P. 817-823.

117. Patti, G. J. Innovation: Metabolomics: the apogee of the omics trilogy / G. J. Patti, O. Yanes, G. Siuzdak // Nature reviews molecular cell biology. -

2012. - Vol. 13, № 4. - P. 263-269.

118. Pirola, C. J. Multiomics biomarkers for the prediction of nonalcoholic fatty liver disease severity / C. J. Pirola, S. Sookoian // World journal of gastroenterology. - 2018. - Vol. 24, № 15. - P. 1601-1615.

119. Plasma metabolomic profile in nonalcoholic fatty liver disease / S. C. Kalhan, L. Guo, J. Edmison [et al.] // Metabolism: clinical and experimental. - 2011. - Vol. 60, № 3. - P. 404-413.

120. Potential strategies to improve uptake of exercise interventions in nonalcoholic fatty liver disease / J. Frith, C. P. Day, L. Robinson [et al.] // Journal of hepatology. - 2010. - Vol. 52, № 1. - P. 112-116.

121. Proteomics as a fundamental tool for subclinical screening, tests verification and assessment of applied therapy / S. V. Suchkov, D. A. Gnatenko, D. S. Kostiushev [et al.] // Annals of the Russian academy of medical sciences. -

2013. - № 1. - P. 65-71.

122. Quantitative metabolomic profiling of serum, plasma, and urine by 1H NMR spectroscopy discriminates between patients with inflammatory bowel disease and healthy individuals / R. Schicho, R. Shaykhutdinov, J. Ngo [et al.] // Journal of proteome research. - 2012. - Vol. 11, № 6. - P. 3344-3357.

123. Ratziu, V. A position statement on NAFLD/NASH based on the EASL 2009 special conference / V. Ratziu, S. Bellentani, H. Cortez-Pinto, C. Day // Journal of hepatology. - 2010. - Vol. 53, № 2. - P. 372-384.

124. Ryan, C. K. One hundred consecutive hepatic biopsies in the workup of living donors for right lobe liver transplantation / C. K. Ryan, L. A. Johnson, B. I. Germin, A. Marcos // Liver transplantation. - 2002. - Vol. 8, № 12. -P. 1114-1122.

125. Rahimlou, M. Dietary supplements and pediatric non-alcoholic fatty liver disease: Present and the future / M. Rahimlou, H. Ahmadnia, A.

Hekmatdoost // World journal of hepatology. - 2015. - Vol. 7, № 25. - P. 2597-2602.

126. Relationship between hepatic/visceral fat and hepatic insulin resistance in nondiabetic and type 2 diabetic subjects / A. Gastaldelli, K. Cusi, M. Pettiti [et al.] // Gastroenterology. - 2007. - Vol. 133, № 2. - P. 496-506.

127. Roden, M. Mechanisms of Disease: hepatic steatosis in type 2 diabetes-pathogenesis and clinical relevance / M. Roden // Nature clinical practice endocrinology & metabolism. - 2006. - Vol. 2, № 6. - P. 335-348.

128. Role of the normal gut microbiota / S. M. Jandhyala, R. Talukdar, C. Subramanyam [et al.] // World journal of gastroenterology. - 2015. - Vol. 21, № 29. - P. 8787-8803.

129. Sunny, N. E. Excessive hepatic mitochondrial TCA cycle and gluconeogenesis in humans with nonalcoholic fatty liver disease. / N. E. Sunny, E.J.Parks, J. D. Browning, S. C. Burgess [et al.] // Cell Metab. -2011. - Vol. 14. - P. 804-810.

130. Sung, K. C. Fatty liver, insulin resistance, and features of metabolic syndrome: relationships with coronary artery calcium in 10,153 people / K. C. Sung, S. H. Wild, H. J. Kwag, C. D. Byrne // Diabetes care. - 2012. -Vol. 35, № 11. - P. 2359-2364.

131. Screening for hepatitis B, C and non-alcoholic fatty liver disease: a survey of community-based physicians / J.B., Kallman, A. Arsalla, V. Park [et al.] // Aliment Pharmacol Ther. - 2009. - Vol. 29. № 9. P. 1019-1024. doi: 10.s1/j.1365-2036.2009.03961.x.].

132. Small, C. L. Persistent infection with Crohn's disease-associated adherent-invasive Escherichia coli leads to chronic inflammation and intestinal fibrosis / C. L. Small, S. A. Reid-Yu, J. B. McPhee, B. K. Coombes // Nature communications. - 2013. - Vol. 4, № 1957.

133. Sampling variability of liver biopsy in nonalcoholic fatty liver disease / V. Ratziu, F. Charlotte, A. Heurtier [et al.] // Gastroenterology. - 2005. - Vol. 128, № 7. - P. 1898-1906.

134. Serum metabolic signatures of primary biliary cirrhosis and primary sclerosing cholangitis / L. N. Bell, J. Wulff, M. Comerford [et al.] // Liver international. - 2015. - Vol. 35, № 1. - P. 263-274.

135. Serum metabolomic profile and potential biomarkers for severity of fibrosis in nonalcoholic fatty liver disease / K. Tokushige, E. Hashimoto, K. Kodama [et al.] // Journal of gastroenterology. -2013. - Vol. 48, № 12. - P. 13921400.

136. Simple noninvasive systems predict long-term outcomes of patients with nonalcoholic fatty liver disease / P. Angulo, E. Bugianesi, E. S. Bjornsson [et al.] // Gastroenterology. - 2013. - Vol. 145, № 4. - P. 782-789.e4.

137. Sookoian, S. Genetic predisposition in nonalcoholic fatty liver disease / S. Sookoian, C. J. Pirola // Clinical and molecular hepatology. - 2017. - Vol. 23, № 1. - P. 1-12.

138. Sung, K. C. Interrelationship between fatty liver and insulin resistance in the development of type 2 diabetes / K. C. Sung, S. H. Kim // The Journal of clinical endocrinology and metabolism. - 2011. - Vol. 96, № 4. - P. 10931097.

139. Systematic evaluation of coding variation identifies a candidate causal variant in TM6SF2 influencing total cholesterol and myocardial infarction risk / O. L. Holmen, H. Zhang, Y. Fan [et al.] // Nature genetics. - 2014. -Vol. 46, № 4. - P. 345-351.

140. Systematic review with meta-analysis: non-invasive assessment of nonalcoholic fatty liver disease - the role of transient elastography and plasma cytokeratin-18 fragments / R. Kwok, Y. K. Tse, G. L. Wong [et al.] // Alimentary pharmacology & therapeutics. - 2014. - Vol. 39, № 3. - P. 254269.

141. Soares, J. B. The role of lipopolysaccharide/toll-like receptor 4 signaling in chronic liver diseases / J. B. Soares, P. Pimentel-Nunes, R. Roncon-Albuquerque, A. Leite-Moreira // Hepatology international. - 2010. - Vol. 4, № 4. - P. 659-672.

142. Taurocholic acid is an active promoting factor, not just a biomarker of progression of liver cirrhosis: evidence from a human metabolomic study and in vitro experiments / Z. Liu, Z. Zhang, M. Huang [et al.] // BMC gastroenterology. - 2018. - Vol. 18, № 1. - P. 112.

143. The diagnosis and management of non-alcoholic fatty liver disease: practice Guideline by the American Association for the Study of Liver Diseases, American College of Gastroenterology, and the American Gastroenterological Association / N. Chalasani, Z. Younossi, J. E. Lavine [et al.] // Hepatology. - 2012. - Vol. 55, № 6. - P. 2005-2023.

144. The plasma lipidomic signature of nonalcoholic stea Obesity, insulin resistance and tohepatitis / P. Puri, M. M. Wiest, O. Cheung [et al.] // Hepatology. - 2009. - Vol. 50, № 6. - P. 1827-1838.

145. The role of small intestinal bacterial overgrowth, intestinal permeability, endotoxaemia, and tumour necrosis factor alpha in the pathogenesis of nonalcoholic steatohepatitis / A. J. Wigg, I. C. Roberts-Thomson, R. B. Dymock [et al.] // Gut. - 2001. - Vol. 48, № 2. - P. 206-211.

146. The role of tissue macrophage-mediated inflammation on NAFLD pathogenesis and its clinical implications / A. Alisi, G. Carpino, F. L. Oliveira [et al.] // Mediators of Inflammation. - 2017. - Vol. 2017, Article ID 8162421. - 15 p.

147. Thoma, C. Lifestyle interventions for the treatment of non-alcoholic fatty liver disease in adults: a systematic review / C. Thoma, C. P. Day, M. I. Trenell // Journal of hepatology. - 2012. - Vol. 56, № 1. - P. 255-266.

148. Transmembrane 6 superfamily member 2 gene variant disentangles nonalcoholic steatohepatitis from cardiovascular disease / P. Dongiovanni, S. Petta, C. Maglio [et al.] // Hepatology. - 2015. - Vol. 61, № 2. - P. 506514.

149. Tremaroli, V. Functional interactions between the gut microbiota and host metabolism / V. Tremaroli, F. Bâckhed // Nature. - 2012. - Vol. 489, № 7415. - P. 242-249.

150. Using non-invasive biomarkers to identify hepatic fibrosis in people with type 2 diabetes mellitus: the Edinburgh type 2 diabetes study / J. R. Kallman, J. A. Fallowfield, I. N. Guha [et al.] // J. Hepatology. - 2014/ -Vol. 60. № 2. P. 384-391.

151. Urine and serum metabolomic profiling reveals that bile acids and carnitine may be potential biomarkers of primary biliary cirrhosis / Y. M. Tang, J. P. Wang, W. M. Bao [et al.] // International journal of molecular medicine. -2015. - Vol. 36, № 2. - P. 377-385.

152. VanWagner, L. B. Lean NAFLD: A not so benign condition? / L. B. VanWagner, M. J. Armstrong // Hepatology communications. - 2018. - Vol. 2, № 1. - P. 5-8.

153. Vitamin E and vitamin C treatment improves fibrosis in patients with nonalcoholic steatohepatitis / S. A. Harrison, S. Torgerson, P. Hayashi [et al.] // The American journal of gastroenterology. - 2003. - Vol. 98, № 11. -P. 2485-2490.

154. Wan, X. Role of NLRP3 inflammasome in the progression of NAFLD to NASH / X. Wan, C. Xu, C. Yu, Y. Li // Canadian journal of gastroenterology and hepatology. - 2016. - Vol. 2016, Article ID 6489012. - 7 p.

155. World Health Organization. Obesity: preventing and managing the global epidemic. 1997, Geneva: WHO.

156. World Health Organization. WHO STEPS Instrument for Chronic Disease. -2009. - p. 12.

157. World Health Organization-International Society of Hypertension. Guidelines for the Management of Hypertension. Guidelines Subcommittee. / // Journal of Hypertension.- 1999. - Vol. 17, - № 2. - P. 151-183.

158. Zyatenkova, E. Characteristics of vessels wall, myocardium and epicardial fat in patients with heart failure with preserved ejection fraction with and without metabolic syndrome / E. Zyatenkova, O. Drapkina, V. Ivashkin // Endoscopic ultrasound. - 2014. - Vol. 3, Suppl. 1. - P. S1-2.