Клинико-диагностическая значимость определения показателей системного и местного иммунитета слизистой влагалища после антихеликобактерной терпии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.10, кандидат медицинских наук Суровцева, Татьяна Викторовна

• Суровцева, Татьяна Викторовна
• кандидат медицинских наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Суровцева, Татьяна Викторовна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Влияние антибиотиков на показатели местного и системного иммунитета

1.2. Влияние антибиотиков на функциональную активность нейтрофилов

1.3. Врожденный (местный) иммунитет женского генитального

тракта

1.4. Антибиотикотерапия (антихеликобактерная терапия) и кандидозы слизистых желудочно-кишечного и

генитального трактов

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Характеристика обследованных лиц

и объем проведенных исследований

2.2. Методы клинико-лабораторного исследования

2.2.1. Цитологические (ПАП-тест) и бактериоскопические

исследования

2.2.2 Определение секреторного иммуноглобулина А (э^А) во влагалищных секретах твердофазным иммуноферментным методом

2.2.3. Определение фактора некроза опухоли (ТЫБ-а)

во влагалищных секретах твердофазным иммуноферментным методом

2.2.4. Определение интерлейкина - 8 (1Ь-8) во влагалищных секретах твердофазным иммуноферментным методом

2.2.5. Фагоцитарная активность нейтрофильных гранулоцитов

2.2.6. Метод восстановления нитросинего тетразолия

(НСТ тест)

2.2.7. Метод люминолзависимой хемилюминесценции

нейтрофилов

41

2.3. Иммуноцитохимические исследования

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Кандидозы вульвы и влагалища у пациенток после проведения курсов антихеликобактерной терапии

3.1.1. Частота обнаружения элементов гриба рода Candida

в слизистой генитального тракта у женщин контрольной группы

3.1.2. Частота обнаружения элементов гриба рода Candida

в слизистой генитального тракта у пациенток после первого курса антихеликобактерной антибиотикотерапии

3.1.3. Частота обнаружения элементов гриба рода Candida в слизистой генитального тракта у пациенток после

повторного курса антихеликобактерной антибиотикотерапии

3.2. Функциональная активность нейтрофилов у пациенток

после антихеликобактерной антибиотикотерапии

3.2.1. Фагоцитарная активность нейтрофилов

3.2.2. Тест восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест)

3.2.3. Хемилюминесценция нейтрофилов

3.3. Интерлейкин-8 (IL-8), фактор некроза опухолей -альфа (TNF-a)

и иммуноглобуллин A (slgA) в секрете влагалища у пациенток

после антихеликобактерной терапии

3.3.1. Интерлейкин -8 (IL-8) во влагалищном секрете

3.3.2 Фактор некроза опухолей -альфа (TNF-a)

во влагалищном секрете

3.3.3. Секреторный иммуноглобулин A (slgA)

во влагалищном секрете

3.4. Продукция интерлейкина-8 (IL-8) и фактора некроза опухолей - альфа (TNF-a) клетками периферической крови у пациенток после

антихел икобактерной терапии

3.4.1 .Продукция интерлейкина (1Ь-8)

клетками периферической крови

3.4.2. Продукция фактора некроза опухолей -альфа (ТОТ-а) клетками периферической крови

3.5. Корреляционный анализ между содержанием цитокинов

(1Ь-8 и ТЫР-а) в секрете влагалища и их уровнями в сыворотке крови у женщин с хеликобактер ассоциированными кислото -зависимыми заболеваниями

3.6. Иммуноцитохимические исследования хеликобактера

в слизистых прямой кишки и влагалища

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АХБТ - антихеликобактерная терапия

ДАБ — диаминобензидин

ДНК — дезоксирибонуклеиновая кислота

ГЭРБ — гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь

ЖГТ - женский генитальный тракт

ЖКТ - желудочно-кишечный тракт

ИЛ (IL) - интерлейкин

ИПП - ингибиторы протонной помпы

ИППП - инфекции передаваемые половым путем

HOH(IFN) - интерферон

ИЦХ — иммуноцитохимический метод

ИФА - иммуноферментный анализ

КЗЗ - кислотозависимые заболевания

МКБ 10 - международная классификация болезней

НК (]МК)-клетки - натуральные (естественные) киллерные клетки

НСТ - нитросиний тетразолий

ПЦР — полимеразная цепная реакция

РНК — рибонуклеиновая кислота

СОЖ — слизистая оболочка желудка

ФНО (TNF) - фактор некроза опухолей

CD - кластеры дифференцировки лимфоцитов

CIN - дисплазия шейки матки

HLA - главный комплекс гистосовместимости

HP — Helicobacter pylori

HGF - фактор роста гепатоцитов

GM-CSF - гранулоцито-моноцитарный колониестимулирующий фактор

PRRs- паттерн распознающие рецепторы SEM — сканирующая электронная микроскопия ELISA — иммуноферментный анализ Ig - иммуноглобулин

МСР-1 - моноцитарный хемоаттрактирующий белок MIP-lß - макрофагальный ингибиторный белок lß slgA -секреторный иммуноглобулин А

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-диагностическая значимость определения показателей системного и местного иммунитета слизистой влагалища после антихеликобактерной терпии»

ВВЕДЕНИЕ

Активно назначаемые пациентам курсы антибиотиков врачами практически всех специальностей неуклонно приводят к возникновению вторичных транзиторных иммунодефицитных состояний, клиническими проявлениями которых, в том числе, являются дисбиозы слизистой кишечника, а у женщин - дисбиозы влагалища. В результате антибиотикотерапии в слизистых наряду с количественными и качественными изменениями облигатной микрофлоры и изменением среды её обитания отмечаются выраженные иммунологические нарушения (Хорошилова Н.В., Маркова Т.П, 2008 ).

По данным ежегодных статистических отчетов городской клинической больницы №20 г Санкт-Петербурга за последние 10 лет частота заболевания «кандидоз вульвы и вагины» (В.37.3 - по МКБ 10) увеличилась на 12%, причем возникновению этих заболеваний предшествовали повторные курсы антибиотикотерапии.

К настоящему времени установлено, что кандидозы слизистых возникают на фоне снижения иммунной резистентности организма. Известно, что антибиотикотерапия может оказывать влияние на функциональные способности клеток иммунной системы, на регуляцию иммунного ответа как на местном, так и системном уровнях. По мнению ряда авторов одним из патогенетических механизмов возникновения кандидозов после антибиотикотерапии следует рассматривать прямое супрессорное действие антибиотиков на клетки-эффекторы иммунной системы (АНат М. & а1., 2010; КасНг <А а1., 2000).

Высказанные рядом авторов представления о супрессорном влиянии антибиотикотерапии на функции клеток иммунной системы, тем не менее, требуют обоснования и подкрепления фактическими данными. Накопление данных, позволяющих охарактеризовать механизмы действия антибиотиков на конкретные клетки-мишени иммунной системы, будут способствовать

выбору рациональных схем антибиотикотерапии во избежание возникновения у пациентов ятрогенных иммунодефицитных состояний .

Изучение влияния антибиотиков на иммунную систему проводилось на клетках ex vivo и in vitro (Reato G et al., 1999; Lima C., et al., 2001)., а также с использованием экспериментальных моделей линейных животных (Melhus А& Ryan А, 2004; Lee С. et al., 2009). Показано, что антибиотики могут оказывать прямое действие как на клетки иммунной системы, так и на другие клетки, в частности на клетки слизистых, способные продуцировать в свою очередь факторы межклеточного взаимодействия - цитокины. Для изучения влияния антибиотиков на иммунную систему проводились также исследования на добровольцах, правда группы добровольцев были немногочисленные и принимали они короткие курсы антибиотиков (Wenisch С. et al. 1996; Dufour, et al, 2005).

При сравнении вклада отдельных групп антибиотиков в индукцию кандидоза слизистых генитального тракта у женщин выявлено, что значительному увеличению риска развития кандидоза способствует прием ципрофлоксацина, офлоксацина, норфлоксацина, цефиксима, азитромицина и фосфомицина (Wilton L. et al., 2003). Перорально принимаемые рифампицин, моксифлоксацин и метронидазол в 35% случаев вызывали кандидозы влагалища, наряду с кандидозом желудочно-кишечного тракта (64%) в качестве побочных эффектов (Join-Lambert О. et al., 2011).

Лечение бактериальных вагинозов противомикробным препаратом метронидазол часто сопровождается возникновением локальных иммунодефицитных состояний, клиническими проявлениями которых являются кандидозные вульвовагиниты. (Sobel J. et al., 2006). В связи с этим с целью снижения риска возникновения кандидозов генитального тракта в последние годы для лечения бактериальных вагинозов рекомендуются схемы терапии без перорального приема метронидозола (Chen J et al., 2009).

С целью изучения влияния антибиотиков на возникновение вторичных иммунодефицитных состояний, клиническими проявлениями которых

8

являются кандидозные вульвовагиниты, информативным могло бы быть обследование пациенток с хроническим гастритом, которые прошли курсы антибиотикотерапии - анитхеликобактерной терапии (АХБТ), после того, как у них был выявлен Helicobacter pylori. Такие пациенты получают стандартные 7-10 дневные курсы антихеликобактерной терапии, в которую входит не один, а два антибиотика, а в повторные - даже три. АХБТ может представлять интерес для изучения влияния антибиотиков на иммунную систему пациентов по следующим соображениям:

Во-первых, АХБТ проводится стандартно по схемам, строго регламентированным Маахстрихтсткими соглашениями, а в Российской Федерации - Московскими (Стандарты, 2009).

Во-вторых, в этих соглашениях регламентируются также вторая и третья линии АХБТ (в случае неэффективности первой линии). Таким образом, после проведения второго курса АХБТ дозы применяемых антибиотиков становятся существенными для изучения их влияния.

В-третьих, все пациенты в одинаковом режиме времени принимают одинаковые антибиотики в одинаковых дозировках, т.е. выполняются стандартные условия для исследования.

В связи со всем вышесказанным была сформулирована цель диссертационного исследования: на основании изучения показателей системного иммунитета и местного иммунитета слизистой влагалища после проведения стандартных курсов антихеликобактерной терапии оценить риск возникновения вторичных иммунодефицитных состояний, клиническими проявлениями которых являются кандидозы вульвы и вагины.

Задачи исследования:

1. Оценить функциональную активность нейтрофилов (фагоцитоз, бактерицидность и люминол зависимую хемилюминисценцию) у пациенток, получавших и не получавших АХБТ.

2. Определить уровни содержания цитокинов фактора некроза опухоли альфа (ЮТ-а) и интерлейкина-8 (1Ь-8), а также секреторного иммуноглобулина А (б^А) во влагалищном секрете у пациенток, получивших и не получавших АХБТ.

3. Определить спонтанную, индуцированную продукцию цитокинов и уровни в сыворотке крови 1Ь-8 и ТЫБ-а у пациенток, прошедших АХБТ и у пациенток с кислотозависимыми заболеваниями, не принимавших антибиотики,

4. Сравнить показатели местного и системного иммунитета у женщин обследуемых групп для оценки влияния антибиотикотерапии.

5. Определить частоту встречаемости кандидозов вульвы и вагины у пациенток после проведения первого и повторного стандартных курсов антихеликобактерной терапии (АХБТ).

Научная новизна исследования.

Впервые показано, что повторные курсы антихеликобактерной терапии индуцируют иммунодефицитное состояние, с подавлением функциональной активности нейтрофилов и дисбалансом продукции цитокинов.

Продукция 1Ь-8 и ТЫБ-а эпителиальными клетками генитального тракта в меньшей степени зависит от половых гормонов женщины в репродуктивном возрасте и в постменопаузе не различаются по уровням содержания 1Ь-8 и ТЫБ-а во влагалищном секрете.

Выявлена достоверная положительная корреляции между уровнями содержания ЮТ-а во влагалищном секрете и в периферической крови.

Прямое действие патогенов, распознаваемых То11 подобными рецепторами, вызывает активацию эпителиоцитов слизистой влагалища и сопровождается повышением продукции 1Ь-8.

Частота возникновения кандидозных вульвовагинитов возрастает более чем в 5 раз при проведении повторных курсов антихеликобактерной антибиотикотерапии.

Теоретическая и практическая значимость исследования.

Выполненные исследования и полученные результаты расширяют научные представления о патогенетических механизмах возникновения кандидозов слизистых женского генитального тракта. Показано, что повышенный риск возникновения кандидозных вульвовагинитов может быть обусловлен с одной строны транзиторным локальным иммунодефицитным состоянием, развившимся на фоне длительного приема антибиотиков, а с другой стороны длительной активацией То11 подобных рецепторов эпителиоцитов бактериальными патогенами.

При проведении (назначении) повторных курсов АХБТ следует учитывать риск возникновения транзиторных иммунодефицитных состояний, которые клинически проявляются возникновением кандидозов слизистых.

Обоснована необходимость при проведении антихеликобактерной антибиотикотерапии учитывать исходное состояние иммунной системы для снижения риска возникновения транзиторных иммунодефицитных состояний, способствующих возникновению кандидозов слизистых генитального тракта.

Методология и методы исследования.

В работе использованы общенаучные методы: анализ (перспективный и ретроспективный), синтез (сравнитеьно-сопоставительный), частно-научные методы - клинический, лабораторный, инструментальный, статистический.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Повторные курсы антихеликобактерной антибиотикотерапии, вызывают транзиторное иммунодефицитное состояние, подавляя функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов.

2. Антихеликобактерная антибиотикотерапия оказывает влияние на показатели местного иммунитета женского генитального тракта, которое реализуется в достоверном повышении в секретах слизистой генитального тракта уровня провоспалительного цитокина IL-8, хематтрактанта для нейтрофильных гранулоцитов.

3. Повышение частоты возникновения кандидозов слизистых после проведения курсов антихеликобактерной антибиотикотерапии является отражением транзиторного иммунодефицитного состояния, обусловленного иммуносупрессирующим действием терапевтических доз антибиотиков.

Степень достоверности и апробация результатов исследования.

Достоверность полученных результатов исследования определяется достаточным и репрезентативным количеством данных, полученных впервые, с использованием арсенала современных методов исследования и подтверждена адекватными методами статистической обработки.

Основные результаты исследования доложены на Всероссийской конференции с международным участием «Современные проблемы клинической цитоморфологии» (Санкт-Петербург, 2007), на 10-м Юбилейном Славяно-Балтийском форуме «Гастро-2008» (С.-Петербург, 2008), на 2-м Международном экологическом форуме «Окружающая среда и здоровье человека» (С.-Петербург, 1-4 июля, 2009) и на 4th Medical Biotech Forum (International Experts Symposium (Dalian, China, 2009), на международной научно-практической конференции «Многопрофильная клиника XXI века: передовые медицинские технологии», посвященной 20-летию ФГБУ ВЦЭРМ им. A.M. Никифорова МЧС России (С.-Петербург,

2011), на научно-практической конференции «Обеспечение доступности современных клинических лабораторных исследований: аналитические возможности, клинические потребности, организационно-экономические условия» (Москва. 2011), на третьем съезде микологов России (Москва,

2012).

Полученные результаты исследования внедрены в научную, учебную и лечебно-диагностическую работу Федерального государственного бюджетного учреждения «Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины им. А.М.Никифорова» МЧС России и практическую работу Городской клинической больницы № 20.

Личный вклад автора. Личное участие соискателя в выполнении диссертационного исследования состоит в формулировании цели и задач исследования, отборе и клиническом обследовании пациентов, сборе анамнеза, написании литературного обзора и анализе полученных результатов клинико-лабораторного обследования пациентов, отягощенных повторными курсами антихеликобактерной антибиотикотерапии. Самостоятельно проведен статистический анализ полученных результатов, сделаны научные выводы.

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, из них 3 -публикации в изданиях, определенных перечнем рецензируемых научных журналов и изданий для опубликования основных научных результатов диссертации.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 104 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов и обсуждения собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа иллюстрирована 7 таблицами и 11 рисунками. Список литературы включает 104 источника, из них 9 - отечественных и 95 - зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Клиническая лабораторная диагностика», Суровцева, Татьяна Викторовна

выводы

1. Повторный курс антихеликобактерной антибиотикотерапии вызывает у пациентов нарушение параметров системного иммунитета с подавлением функциональной способности нейтрофильных гранулоцитов (отмечается достоверное снижение индекса стимуляции хемилюминесценции (р<0,01) и бактерицидности (р<0,05), оцененной НСТ-тестом).

2. Проведение курсов антихеликобактерной антибиотикотерапии вызывает повышение уровня содержания провоспалительного цитокина 1Ь-8 во влагалищном секрете, что обусловлено местной продукцией цитокина эпителиоцитами, активированными антигенами НР дегенеративных кокковых форм хеликобактера и подтверждается отсутствием корреляции между уровнем в сыворотке крови и во влагалищном секрете.

3. Выявлена высоко достоверная положительная корреляции между содержанием ЮТ-а во влагалищном секрете и повышенным уровнем ТЫБ-а в периферической крови, так как уровень ТЫБ-а во влагалищном секрете определяется уровнем ТЫБ-а, циркулирующим в периферической крови и отражает активацию продукции цитокина при хеликобактерной инфекции.

4. Повышение продукции 1Ь-8 активированными эпителиоцитами слизистой женского генитального тракта способствует привлечению нейтрофилов с нарушенными функциональными свойствами в ткани слизистой, что способствует еще более выраженной супрессии местного иммунитета.

5. Проведение курсов антихеликобактерной антибиотикотерапии вызывает нарушение иммунитета слизистых, в частности слизистых женского генитального тракта, следствием которого является возникновение кандидозов вульвы и вагины после первого курса антихеликобактерной антибиотикотерапии у 4.4% женщин, а после повторного курса у 22 %.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. При обследовании и лечении пациентов с гастритами хеликобактерной этиологии необходим дифференцированный подход к назначению повторных курсов антихеликобактерной антибиотикотерапии.

2. При назначении повторных курсов антибиотикотерапии следует учитывать риск снижения иммунной резистентности, которая может усугубиться возникновением кандидозов слизистых, в частности кандидозных вульвовагинитов у женщин.

3. Необходимо одновременно с повторными курсами антибиотикотерапии использовать профилактически местно пробиотики и иммунотропные препараты.

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ

Перспективы данных исследований заключаются в дальнейшем изучении влияния антибиотикотерапии, в частности АХБТ, на параметры местного и системного иммунитета с целью оптимизации проведения антибиотикотерапии и уменьшения побочных воздействий на параметры местного и системного иммунитета.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Суровцева, Татьяна Викторовна, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Ганковская О.А.ДСовальчук JI.B. , Ганковская JI.B., Лавров В. Ф. , Романовская В.В., Карташов Д. Д. , Фензелева В. А. Роль Toll-подобные рецепторы и дефенсины в антимикробной защите урогенитального тракта у женщин.//Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии 2008 январь-февраль: (1) :46-50.

2. Казимирова А.А., Волосников Д.К, Бахарева Л. И., Кандалова Е.Н. Микробиоценоз желудка у детей с хроническим гастритом.// Ж. Микробиологии эпидемиологии иммунологии. 2007, (2) :71-75.

3. Маев И.В., Самсонов А.А., Андреев Н.Г., Кочетов С.А. Что мы знаем о хроническом гастрите // Фарматека - 2011 - №10. С. 10-17.

4. Савичева A.M., Кисина В.И., Соколовский Е.В., Башмакова М.А. и др. Кандидозный вульвовагинит. Методические рекомендации для врачей. (Журнал акушерства и женских болезней), СПб, 2009. - 87 С.

5. Стандарты диагностики и лечения кислотозависимых и ассоциированных с Helicobacter pylori заболеваний (четвертое Московское соглашение). Методические рекомендации (№37). Москва 2010. 12С.

6. Хорошилова Н.В., Маркова Т.П. Клинико-иммунологические аспекты синдрома дисбактериоза. - 2008. (Москва). - 39 с.

7. Afifi МТ, Abd El-Aziz НК, Hamed NA, Barghash NA, Abdo A, Gamal M. Role of Helicobacter pylori in refractory iron deficiency anaemia.// Br J Biomed Sci. 2009; 66(3): 133-6.

8. Aihara M, Imagawa K, Funakoshi Y, Ohmoto Y, Kikuchi M. Effects of rebamipide on production of several cytokines by human peripheral blood mononuclear cells./Dig Dis Sci. 1998 Sep;43(9 Suppl):160S-166S.

9. Akamatsu H, Niwa Y, Kurokawa I, Masuda R, Nishijima S, Asada Y. Effects of subminimal inhibitory concentrations of minocycline on

neutrophil chemotactic factor production in comedonal bacteria, neutrophil phagocytosis and oxygen metabolism.// Arch Dermatol Res. 1991 ;283(8):524-8.

10. Akamatsu H, Sasaki H, Kurokawa I, Nishijima S, Asada Y, Niwa Y.Department of Dermatology, Kansai Medical University, Osaka, Japan. Effect of nadifloxacin on neutrophil functions.// J Int Med Res. 1995 Jan-Feb;23(l):19-26.

11. Allam MA, El-Shafie AM, Elwan AM, Soliman GM, Abu-Alfotuh A, Al Shabrawi H. Haematological side effect of Helicobacter pylori eradication. // J Egypt Soc Parasitol. 2010 Dec;40(3):583-90.

12. Anderson R, Joone G, van Rensburg CE. An in-vitro evaluation of the cellular uptake and intraphagocytic bioactivity of clarithromycin (A-56268, TE-031), a new macrolide antimicrobial agent.// J Antimicrob Chemother. 1988 Dec;22(6):923-33.

13. Ballesta S, Pascual A, Garcia I, Perea EJ. Effect of linezolid on the phagocytic functions of human polymorphonuclear leukocytes. //Chemotherapy. 2003 Jul;49(4): 163-6.

14. Bauhofer A, Torossian A, Lorenz W, Middeke M, Plaul U, Schütz P, Stinner B, Hattel M, Celik I. Dependence of positive effects of granulocyte colony-stimulating factor on the antibiotic regimen: evaluation in rats with polymicrobial peritonitis.// World J Surg. 2004 Aug;28(8):834-44. Epub 2004 Aug 3.

15. Blum A, Tamir S, Mualem K, Ben-Shushan RS, Keinan-Boker L, Paritsky M. Endothelial dysfunction is reversible in Helicobacter pylori-positive subjects.//Am J Med. 2011 Dec;124(12):l 171-4.

16. Buckner LR, Schust DJ, Ding J, Nagamatsu T, Beatty W, Chang TL, Greene SJ, Lewis ME, Ruiz B, Holman SL, Spagnuolo RA, Pyles RB, Quayle AJ. Innate immune mediator profiles and their regulation in a novel polarized immortalized epithelial cell model derived from human endocervix .// J Reprod Immunol. 2011 Dec;92(l-2):8-20. Epub 2011 Sep 22.

17.Capodicasa E, De Bellis F, Pelli MA. Effect of lansoprazole on human leukocyte function.// Immunopharmacol Immunotoxicol. 1999 May;21(2):357-77.

18.Capodicasa E, Cornacchione P, Natalini B, Bartoli A, Coaccioli S, Marconi P, Scaringi L. Omeprazole induces apoptosis in normal human polymorphonuclear leucocytes.// Int J Immunopathol Pharmacol. 2008 Jan-Mar;21(l):73-85.

19.Chen JY, Tian H, Beigi RH. Treatment considerations for bacterial vaginosis and the risk of recurrence.// J Womens Health (Larchmt). 2009 Dec; 18(12): 1997-2004.

20. Cheng KS, Tang HL, Chou FT. Serum IL-8 as a possible marker for determining the status of Helicobacter pylori infection in patients with untreated and treated peptic ulcer.// Adv Ther. 2004 Jan-Feb;21(l):39-46.

21.Cuffini AM, Tullio V, Giacchino F, Mandras N, Scalas D, Belardi P, Merlino C, Carlone NA. Impact of co-amoxiclav on polymorphonuclear granulocytes from chronic hemodialysis patients.// Am J Kidney Dis. 2001 Jun;37(6): 1253-9.

22.Cuffini AM, De Renzi G, Tullio V, Paizis G, Carlone NA.Potentiation of human polymorphonuclear leukocyte phagocytosis and intracellular bactericidal activity by amoxycillin/clavulanic acid.// Drugs Exp Clin Res. 1996;22(1):9-15.

23.Coleman KD, Wright JA, Ghosh M, Wira CR, Fahey JV. Estradiol modulation of hepatocyte growth factor by stromal fibroblasts in the female reproductive tract.// Fertil Steril. 2009 Sep;92(3):l 107-9. Epub 2009 May 6.

24.Colpaert S, Liu Z, De Greef B, Rutgeerts P, Ceuppens JL, Geboes K. Effects of anti-tumour necrosis factor, interleukin-10 and antibiotic therapy in the indometacin-induced bowel inflammation rat model.// Aliment Pharmacol Ther. 2001 Nov;15(ll): 1827-36.

25.Crane-Godreau MA, Wira CR. Effect of Escherichia coli and Lactobacillus rhamnosus on macrophage inflammatory protein 3 alpha, tumor necrosis

factor alpha, and transforming growth factor beta release by polarized rat uterine epithelial cells in culture.// Infect Immun. 2004 Apr;72(4): 1866-73.

26.De Simone C, Matteucci G, Meli D, Ricca D. Effect of antibiotics on spontaneous and direct migration of human leukocytes. Preliminary findings.//Minerva Med. 1980 May 19;71(20): 1453-8.

27.Donders GG, Vereecken A, Bosmans E, Spitz B. Vaginal cytokines in normal pregnancy.// Am J Obstet Gynecol. 2003 Nov; 189(5): 1433-8.

28.Dubicke A, Fransson E, Centini G, Andersson E, Bystr B, Malmstr A, Petraglia F, Sverremark-Ekstr E, Ekman-Ordeberg G. Pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines in human preterm and term cervical ripening.// J Reprod Immunol. 2010 Mar;84(2): 176-85. Epub 2010 Jan 21.

29.Dufour V, Millon L, Faucher JF, Bard E, Robinet E, Piarroux R, Vuitton DA, Meillet D. Effects of a short-course of amoxicillin/clavulanic acid on systemic and mucosal immunity in healthy adult humans.// Int Immunopharmacol. 2005 May;5(5):917-28.

30.E1-Din SS, Reynolds MT, Ashbee HR, Barton RC, Evans EG. An investigation into the pathogenesis of vulvo-vaginal candidosis.// Sex Transm Infect. 2001 Jun;77(3): 179-83.

31.Fichorova RN, Bajpai M, Chandra N, Hsiu JG, Spangler M, Ratnam V, Doncel GF. Interleukin (IL)-l, IL-6, and IL-8 predict mucosal toxicity of vaginal microbicidal contraceptives.// Biol Reprod. 2004 Sep;71(3):761-9. Epub 2004 May 5.

32.Fahey JV, Schaefer TM, Channon JY, Wira CR. Secretion of cytokines and chemokines by polarized human epithelial cells from the female reproductive tract.// Hum Reprod. 2005 Jun;20(6): 1439-46. Epub 2005 Feb 25.

33.Fahey JV, Wright JA, Shen L, Smith JM, Ghosh M, Rossoll RM, Wira CR. Estradiol selectively regulates innate immune function by polarized human uterine epithelial cells in culture.// Mucosal Immunol. 2008 Jul; 1(4):317-25. Epub 2008 May 14.

34.Fong IW. The rectal carriage of yeast in patients with vaginal candidiasis.// Clin Invest Med. 1994 Oct;17(5):426-31.

35.Franklin RD, Kutteh WH. Characterization of immunoglobulins and cytokines in human cervical mucus: influence of exogenous and endogenous hormones.// J Reprod Immunol. 1999 Mar;42(2):93-106.

36.Fukuda M, Shirasaka D, Aoyama N, Miki I, Kachi M, Morita Y, Tamura T, Kasuga M. No significant difference in neutrophil activation found among three H2RAs.// Dig Liver Dis. 2007 Feb;39(2): 130-5. Epub 2006 Dec 11.

37.Gabler WL, Smith J, Tsukuda N. Doxycycline reduction of F-actin content of human neutrophils and fibroblasts. //Inflammation. 1994 Feb;18(l):107-18.

38.Gialdroni Grassi G, Alesina R, Bersani C, Ferrara A, Fietta A, Peona V. In vitro activity of flurithromycin, a novel macrolide antibiotic.// Chemioterapia. 1986 Jun;5(3): 177-84.

39.Gisbert JP, Castro-Fernandez M, Perez-Aisa A, Cosme A, Molina-Infante J, Rodrigo L, Modolell I, Cabriada JL, Gisbert JL, Lamas E, Marcos E, Calvet X. Fourth-line rescue therapy with rifabutin in patients with three Helicobacter pylori eradication failures. // Aliment Pharmacol Ther. 2012 Feb 28. doi: 10.1111/j.l365-2036.2012.05053.x. [Epub ahead of print]

40.Glover DD, Larsen B. Relationship of fungal vaginitis therapy to prior antibiotic exposure.//Infect Dis Obstet Gynecol. 2003;ll(3):157-60.

41.Goscimski A, Matras J, Wallner G. Microflora of gastric juice in patients after eradication of Helicobacter pylori and treatment with a proton pump inhibitor.// Wiad Lek. 2002;55(l-2): 19-28.

42.Gupta S. M. Aranha C.C., Mohanty M.C., Reddy V.R.Toll-Like Receptors and Cytokines as Surrogate Biomarkers for Evaluating Vaginal Immune Response// Mediators of Inflammation. Volume 2008, Article ID 534532, 11 P-

43.Gurer US, Gofer P, Er?ag E, Erten N, Rayaman E, Giirbuz B, Uzer A, Karan A, Cevikba§ A. The effects of some antibiotics on polymorphonuclear

leukocyte functions of elderly patients in vitro before and after zinc supplementation.// Int Immunopharmacol. 2006 May;6(5):808-16. Epub 2005 Dec 27.

44.Hand WL, King-Thompson NL. Uptake of antibiotics by human polymorphonuclear leukocyte cytoplasts.// Antimicrob Agents Chemother. 1990 Jun;34(6): 1189-93.

45.Hart KM, Murphy AJ, Barrett KT, Wira CR, Guyre PM, Pioli PA. Functional expression of pattern recognition receptors in tissues of the human female reproductive tract.// J Reprod Immunol. 2009 Jun;80(l-2):33-40. Epub 2009 Apr 29.

46.Herbst-Kralovetz MM, Quayle AJ, Ficarra M, Greene S, Rose WA 2nd, Chesson R, Spagnuolo RA, Pyles RB. Quantification and comparison of toll-like receptor expression and responsiveness in primary and immortalized human female lower genital tract epithelia.// Am J Reprod Immunol. 2008 Mar;59(3):212-24. Epub 2008 Jan 12.

47.Hogaboam C.M., Smith R.E., Kunkel S.L. Dynamic interactions between lung fibroblasts and leukocytes: implications for fibrotic lung disease // Proc. Assoc. Am. Phys. — 1998. — Vol. 110. — P.313-320.

48.Horton RE, Kaefer N, Songok E, Guijon FB, Kettaf N, Boucher G, Sekaly RP, Ball TB, Plummer FA. A comparative analysis of gene expression patterns and cell phenotypes between cervical and peripheral blood mononuclear cells.// PLoS One. 2009 Dec 14;4(12):e8293.

49.Hu W. Detection and analysis of Helicobacter pylori in oral cavity and stomach from chronic gastritis patients / W. Hu, C. Cao, H. Meng, J. Zhang, D. Ma, L. Zhang // Zhonghua Yi Xue Za Zhi. - 2002. - Vol. 82. - N 15. - P. 1037-41.

50.Iser JH, Buttigieg RJ, Iseli A. Low dose, short duration therapy for the eradication of Helicobacter pylori in patients with duodenal ulcer//Med J Aust. 1994 Feb 21; 160(4): 192-6.

51.1skandar I, Walters JD. Clarithromycin accumulation by phagocytes and its effect on killing of Aggregatibacter actinomycetemcomitans.// J Periodontol. 2011 Mar;82(3):497-504. Epub 2010 Oct 8.

52.Ishiguro M, Koga H, Kohno S, Hayashi T, Yamaguchi K, Hirota M. Penetration of macrolides into human polymorphonuclear leucocytes.// J Antimicrob Chemother. 1989 Nov;24(5):719-29.

53.Join-Lambert O, Coignard H, Jais JP, Guet-Revillet H, Poiree S, Fraitag S, Jullien V, Ribadeau-Dumas F, Theze J, Le Guern AS, Behillil S, Lefleche A, Berche P, Consigny PH, Lortholary O, Nassif X, Nassif A. Efficacy of rifampin-moxifloxacin-metronidazole combination therapy in hidradenitis suppurativa.// Dermatology. 2011 Feb;222(l):49-58. Epub 2010 Nov 25.

54.Kadir T, Izzetin FV, Cevikba§ A, Johansson CB, Clark P. In vitro effects of clarithromycin on human polymorphonuclear leukocyte functions.// Chemotherapy. 2000 May-Jun;46(3): 198-203.

55.Kondo Y, Joh T, Sasaki M, Oshima T, Itoh K, Tanida S, Kataoka H, Ohara H, Nomura T, Itoh M. Helicobacter pylori eradication decreases blood neutrophil and monocyte counts.// Aliment Pharmacol Ther. 2004 Jul;20 Suppl 1:74-9.

56.Karczewska E, Wojtas I, Sito E, Trojanowska D, Budak A, Zwolinska-Wcislo M, Wilk A. Assessment of co-existence of Helicobacter pylori and Candida fungi in diseases of the upper gastrointestinal tract.// J Physiol Pharmacol. 2009 Dec;60 Suppl 6:33-9.

57.Kalinka J, Wasiela M, BrzeziE„ska-BE,aszczyk E. Impact of threatened preterm labor and lower genital tract biocenosis on the concentrations of selected proinflammatory cytokines in cervicovaginal fluid of pregnant women.// Ginekol Pol. 2003 0ct;74(10):l 118-25.

58.Kawana K, Kawana Y, Schust DJ. Female steroid hormones use signal transducers and activators of transcription protein-mediated pathways to modulate the expression of T-bet in epithelial cells: a mechanism for local

immune regulation in the human reproductive tract.// Mol Endocrinol. 2005 Aug;19(8):2047-59. Epub 2005 Apr 28.

59.Koopmann W., Krangel M.S. Identification of a glycosaminoglycan-binding site in chemokine macrophage inflammatory protein-la // J. Biol. Chem. — 1997. — Vol.272. —P.10103-10109.

öO.Koosirirat C, Linpisarn S, Changsom D, Chawansuntati K, Wipasa J. Investigation of the anti-inflammatory effect of Curcuma longa in Helicobacter pylori-infected patients//Int Immunopharmacol. 2010 Jul;10(7):815-8. Epub 2010 May 9.

61.Kowalski M. Helicobacter pylori (H. pylori) infection in coronary artery disease: influence of H. pylori eradication on coronary artery lumen after percutaneous transluminal coronary angioplasty. The detection of H. pylori specific DNA in human coronary atherosclerotic plaque.// J Physiol Pharmacol. 2001 Aug;52(l Suppl 1):3-31.

62.Lee DG, Park Y, Kim PI, Jeong HG, Woo ER, Hahm KS. Influence on the plasma membrane of Candida albicans by HP (2-9)-magainin 2 (1-12) hybrid peptide.// Biochem Biophys Res Commun. 2002 Oct 4;297(4):885-9.

63.Lesmeister MJ, Jorgenson RL, Young SL, Misfeldt ML. 17Beta-estradiol suppresses TLR3-induced cytokine and chemokine production in endometrial epithelial cells.//Reprod Biol Endocrinol. 2005 Dec 29;3:74.

64.Lopez MC, Stanley MA. Cytokine profile of mouse vaginal and uterus lymphocytes at estrus and diestrus.// Clin Dev Immunol. 2005 Jun; 12(2): 159-64.

65.Losikoff P, Fichorova R, Snyder B, Rodriguez I, Cu-Uvin S, Harwell J, Mayer KH. Genital tract interleukin-8 but not interleukin-lbeta or interleukin-6 concentration is associated with bacterial vaginosis and its clearance in HIV-infected and HIV-uninfected women.// Infect Dis Obstet Gynecol. 2007;2007: 92307.

66.Lee CH, Lo HC, Chou MC, Tsai HR. Oral antibiotics attenuate bowel segment reversal-induced systemic inflammatory response and body weight

loss in massively bowel-resected rats.// JPEN J Parenter Enteral Nutr. 2007 Sep-Oct;31(5):397-405.

67.Lima CM, Schroeder JT, Galvao CE, Castro FM, Kalil J, Adkinson NF Jr. Functional changes of dendritic cells in hypersensivity reactions to amoxicillin.// Braz J Med Biol Res. 2010 Oct;43(10):964-8. Epub 2010 Sep 24.

68.Maraki S, Mouzas IA, Kontoyiannis DP, Chatzinikolaou I, Tselentis Y, Samonis G. Prospective evaluation of the impact of amoxicillin, clarithromycin and their combination on human gastrointestinal colonization by Candida species.// Chemotherapy. 2001 May-Jun;47(3):215-8.

69.Marks E, Tam MA, Lycke NY. The female lower genital tract is a privileged compartment with IL-10 producing dendritic cells and poor Thl immunity following Chlamydia trachomatis infection.// PLoS Pathog. 2010 Nov 4;6(ll):el001179.

70.Matsuzaka M, Fukuda S, Yamai K, Tsuya R, Fukuoka Y, Takahashi I, Yaegaki M, Shimoyama T, Sakamoto J, Umeda T, Nakaji S. Are individuals with lower neutrophil oxidative burst activity more prone to Helicobacter pylori infection?//Luminescence. 2008 May-Jun;23(3): 132-8.

71.Melhus A, Ryan AF. Effects of amoxicillin on cytokine and osteocalcin expression in bone tissue during experimental acute otitis media.// Cytokine. 2004 Mar 21;25(6):254-9.

72.Menday AP. Symptomatic vaginal candidiasis after pivmecillinam and norfloxacin treatment of acute uncomplicated lower urinary tract infection.// Int J Antimicrob Agents. 2002 0ct;20(4):297-300.

73.Mita S, Shimizu Y, Notsu T, Imada K, Kyo S. Dienogest inhibits Toll-like receptor 4 expression induced by costimulation of lipopolysaccharide and high-mobility group box 1 in endometrial epithelial cells //Fertil Steril. 2011 Dec;96(6): 1485-1489.e4. Epub 2011 Oct 20.

74.Nishimura S, Nagata N, Kobayakawa M, Sako A, Nakashima R, Uemura N. A case of candidal infection of gastric ulcers with characteristic endoscopic findings.//Nihon Shokakibyo Gakkai Zasshi. 2011;108(8): 1393-8.

75.Ou XM, Feng YL, Wen FQ, Wang K, Yang J, Deng ZP, Liu DS, Li YP. Macrolides attenuate mucus hypersecretion in rat airways through inactivation ofNF-kappaB.//Respirology. 2008 Jan;13(l):63-72.

76.Park JS, Lee CH, Yim JJ, Yang SC, Yoo CG, Chung HS, Kim YW, Han SK, Shim YS, Kim DK. Impact of antibiotic prophylaxis on postbronchoscopy fever: a randomised controlled study.// Int J Tuberc Lung Dis. 2011 Apr;15(4):528-35.

77.Park Y, Lee DG, Hahm KS. HP(2-9)-magainin 2(1-12), a synthetic hybrid peptide, exerts its antifungal effect on Candida albicans by damaging the plasma membrane.// J Pept Sci. 2004 Apr;10(4):204-9.

78.Peltier MR, Berlin Y, Tee SC, Smulian JC. Does progesterone inhibit bacteria-stimulated interleukin-8 production by lower genital tract epithelial cells?// J Perinat Med. 2009;37(4):328-33.

79.Pivarcsi A, Nagy I, Koreck A, Kis K, Kenderessy-Szabo A, Szell M, Dobozy A, Kemeny L. Microbial compounds induce the expression of proinflammatory cytokines, chemokines and human beta-defensin-2 in vaginal epithelial cells.// Microbes Infect. 2005 Jul;7(9-10):l 117-27. Epub 2005 Apr 19.

80.Radulovic NV, Ekerhovd E, Abrahamsson G, Norstrm A. Cervical tissue changes in women with miscarriage: a morphological and biochemical investigation.//Acta Obstet Gynecol Scand. 2010;89(l):54-64.

81 .Reato G, Cuffini AM, Tullio V, Palarchio AI, Bonino A, Foa R, Carlone NA. Co-amoxiclav affects cytokine production by human polymorphonuclear cells.// J Antimicrob Chemother. 1999 May;43(5):715-8.

82.Ribeiro PD, Medina-Acosta E. Prevention of lethal murine candidiasis using HP (2-20), an antimicrobial peptide derived from the N-terminus of

Helicobacter pylori ribosomal protein LI.// Peptides. 2003 Nov;24(l 1): 1807-14. 83.Ronnqvist D, Forsgren-Brusk U, Husmark U, Grahn-Hakansson E. Lactobacillus fermentum Ess-1 with unique growth inhibition of vulvovaginal candidiasis pathogens.// J Med Microbiol. 2007 Nov;56(Pt 11): 15004.

84.Salmanian AH, Siavoshi F, Akbari F, Afshari A, Malekzadeh R. Yeast of the oral cavity is the reservoir of Heliobacter pylori.// J Oral Pathol Med.

2008 Jul;37(6):324-8. Epub 2008 Feb 5.

85.Sato K, Chiba T, Ohkusa T. Serial changes of cytokines in active ulcerative colitis: effects of antibiotic combination therapy.// Hepatogastroenterology.

2009 Jul-Aug;56(93): 1016-21.

86.Sawada M, Otsuki K, Mitsukawa K, Yakuwa K, Nagatsuka M, Okai T. Cervical inflammatory cytokines and other markers in the cervical mucus of pregnant women with lower genital tract infection.// Int J Gynaecol Obstet. 2006 Feb; 92(2): 117-21. Epub 2005 Nov 22. 87.Shen L, Fahey JV, Hussey SB, Asin SN, Wira CR, Fanger MW. Synergy between IL-8 and GM-CSF in reproductive tract epithelial cell secretions promotes enhanced neutrophil chemotaxis.// Cell Immunol. 2004 Jul;230(l):23-32.

88.Sobel JD, Ferris D, Schwebke J, Nyirjesy P, Wiesenfeld HC, Peipert J, Soper D, Ohmit SE, Hillier SL. Suppressive antibacterial therapy with 0.75% metronidazole vaginal gel to prevent recurrent bacterial vaginosis.// Am J Obstet Gynecol. 2006 May; 194(5): 1283-9. Epub 2006 Apr 21. 89.Spinillo A, Capuzzo E, Acciano S, De Santolo A, Zara F. Effect of antibiotic use on the prevalence of symptomatic vulvovaginal candidiasis.// Am J Obstet Gynecol. 1999 Jan;180(l Pt l):14-7. 90.Tabrizi SN, Pirotta MV, Rudland E, Garland SM. Detection of Candida species by PCR in self-collected vaginal swabs of women after taking antibiotics.//Mycoses. 2006 Nov;49(6):523-4.

91.Tanida T, Okamoto T, Okamoto A, Wang H, Hamada T, Ueta E, Osaki T. Decreased excretion of antimicrobial proteins and peptides in saliva of patients with oral candidiasis.//J Oral Pathol Med. 2003 Nov;32(10):586-94.

92.Veldhuyzen van Zanten S, Hunt RH, Cockeram A, Schep G, Malatjalian D, Sidorov J, Matisko A, Jewell D Adding once-daily omeprazole 20 mg to metronidazole/amoxicillin treatment for Helicobacter pylori gastritis: a randomized, double-blind trial showing the importance of metronidazole resistance.// Am J Gastroenterol. 1998 Jan; 93(1):5-10.

93.Vijayakumari S., Khin M.M., Jiang B., Ho B.The pathogenic role of the coccoid form of Helicobacter pylori.// Cytobios - 1995 - Vol.82 № 331 - P. 251-60

94.Veldhuyzen van Zanten S, Hunt RH, Cockeram A, Schep G, Malatjalian D, Sidorov J, Matisko A, Jewell D Adding once-daily omeprazole 20 mg to metronidazole/amoxicillin treatment for Helicobacter pylori gastritis: a randomized, double-blind trial showing the importance of metronidazole resistance.// Am J Gastroenterol. 1998 Jan; 93(1):5-10.

95.Wandall JH. Effects of omeprazole on neutrophil chemotaxis, super oxide production, degranulation, and translocation of cytochrome b-245.// Gut. 1992 May;33(5):617-21.

96.Weber C. Platelets and chemokines in atherosclerosis: partners in crime // Circ. Res. - 2005. - Vol.96. - P.612- 616.

97.Wenisch C, Parschalk B, Zedtwitz-Liebenstein K, Weihs A, el Menyawi I, Graninger W. Effect of single oral dose of azithromycin, clarithromycin, and roxithromycin on polymorphonuclear leukocyte function assessed ex vivo by flow cytometry.// Antimicrob Agents Chemother. 1996 Sep;40(9):2039-42.

98.Wilton L, Kollarova M, Heeley E, Shakir S. Relative risk of vaginal candidiasis after use of antibiotics compared with antidepressants in women: postmarketing surveillance data in England// Drug Saf. 2003;26(8):589-97.

99.Wittmann S, Arlt M, Rothe G, Fröhlich D. Differential effects of clindamycin on neutrophils of healthy donors and septic patients.// Int Immunopharmacol. 2004 Jul;4(7):929-37.

100. Xu J, Schwartz K, Bartoces M, Monsur J, Severson RK, Sobel JD. Effect of antibiotics on vulvovaginal candidiasis: a MetroNet study.// J Am Board Fam Med. 2008 Jul-Aug;21(4):261-8.

101. Yaguchi Y, Fukatsu K, Moriya T, Maeshima Y, Ikezawa F, Omata J, Ueno C, Okamoto K, Hara E, Ichikura T, Hiraide H, Mochizuki H, Touger-Decker RE. Influences of long-term antibiotic administration on Peyer's patch lymphocytes and mucosal immunoglobulin A levels in a mouse model.// JPEN J Parenter Enteral Nutr. 2006 Sep-Oct;30(5):395-8; discussion 399.

102. Yao XD, Fernandez S, Kelly MM, Kaushic C, Rosenthal KL. Expression of Toll-like receptors in murine vaginal epithelium is affected by the estrous cycle and stromal cells.// J Reprod Immunol. 2007 Oct;75(2): 106-19. Epub 2007 Jun 18.

103. Zariffard MR, Novak RM, Lurain N, Sha BE, Graham P, Spear GT. Induction of tumor necrosis factor- alpha secretion and toll-like receptor 2 and 4 mRNA expression by genital mucosal fluids from women with bacterial vaginosis.// J Infect Dis. 2005 Jun 1;191(11):1913-21. Epub 2005 Apr 28.

104. Ziegeler S, Raddatz A, Hoff G, Buchinger H, Bauer I, Stockhausen A, Sasse H, Sandmann I, Hörsch S, Rensing H. Antibiotics modulate the stimulated cytokine response to endotoxin in a human ex vivo, in vitro model.// Acta Anaesthesiol Scand. 2006 0ct;50(9):l 103-10. Epub 2006 Aug 25.