Клинико-биохимические особенности бокового амиотрофического склероза у лиц молодого возраста тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.13, кандидат медицинских наук Васильев, Алексей Владимирович

• Васильев, Алексей Владимирович
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Васильев, Алексей Владимирович

Список сокращений и специальных терминов

Введение

Глава 1. Обзор литературы

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Общая характеристика больных

2.2. Биохимические методы исследования

2.3. Статистическая обработка данных

Глава 3. Результаты исследования гормонального статуса у больных БАС

Глава 4. Результаты исследования эндотелиального фактора роста сосудов у больных БАС

Глава 5. Характеристика антиоксидантной системы у больных БАС:

5.1. Результаты исследования супероксиддисмутазы

5.2. Результаты исследования глутатион-зависимых ферментов (глутатионпероксидаза, глутатионредуктаза, глутатион-Б-трансфераза)

5.3. Результаты исследования белковых и небелковых групп в эритроцитах больных БАС

Глава 6. Обсуждение результатов^

Выводы

Наблюдения

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-биохимические особенности бокового амиотрофического склероза у лиц молодого возраста»

Несмотря на более чем 100-летнее изучение, боковой амиотрофический склероз остается, к сожалению, фатальным заболеванием центральной нервной системы. Заболевание характеризуется неуклонно прогрессирующим течением с избирательным поражением верхнего и нижнего мотонейрона, что приводит к развитию амиотрофий, параличей и спастичности. До настоящего времени вопросы этиологии и патогенеза остаются невыясненными, в связи с чем не разработаны специфические методы диагностики и лечения этого заболевания.

По мнению большинства исследователей, боковой амиотрофический склероз (БАС) является мультифакториальным заболеванием, в развитии которого играют важную роль генетическая предрасположенность, особенности окислительного метаболизма и механизмов нейротрансмиссии.

Спорадическая форма БАС представляет особую значимость в связи с наибольшей частотой заболеваемости (до 90 - 95% от всех случаев БАС), одинаковым повсеместным распространением (4-6 случаев на 100 тыс. населения) и отсутствием знаний ее этиологии. В последние годы отмечается незначительный рост заболеваемости (с 1,4 в 60-е годы до 2,3 случаев на 100 тыс. населения в год в 80-е годы). Возраст больных колеблется от 54 до 61 года (в "среднем - 56,6 лёт), однако рядом авторов отмечено повышение частоты встречаемости среди лиц молодого возраста (до 40 лет).

В настоящее время возраст является основным фактором риска при БАС, что подтверждается нарастанием заболеваемости после 55 лет, и в этой возрастной группе уже не наблюдается различий между мужчинами и женщинами.

Спорадическая форма бокового амиотрофического склероза у лиц молодого возраста встречается в 5-15% среди всех случаев заболевания, и характеризуется более доброкачественным и длительным течением заболевания (Tysnes О.В. et al., 1994; Haverkamp L.J. et al., 1995; ALS CNTF,

1996). Так, средняя длительность заболевания в этой возрастной группе составляет 8,2 года, при этом 50% больных выживают через 80 месяцев от начала заболевания. В старшей возрастной группе эти показатели резко снижены и составляют 2,6 года и 36 месяцев соответственно (Eisen А. et al., 1993; Bakker М. et al., 1995; Mitsumoto H. et al., 1998). В некоторых случаях у лиц молодого возраста отмечалось молниеносное, злокачественное течение заболевания, приводившее к летальному исходу вследствие острой дыхательной недостаточности в короткое время (менее 12 месяцев).

Несмотря на достоверную связь заболевания БАС с возрастом старение является только одним из предрасполагающих факторов развития патологического процесса. Вариабельность заболевания, как в различных возрастных группах, так и среди лиц одного возраста предполагает существование определённых факторов риска, дефицит, или наоборот, наличие определённых нейропротективных факторов, к которым в настоящее время относят:

• нейростероиды или половые гормоны

• нейротрофические факторы

• антиоксиданты.

Некоторые исследователи отмечают особо благоприятное течение - -заболевания-у молодых женщин, что подтверждает несомненную-роль половых гормонов, в особенности эстрадиола, прогестина, в патогенезе бокового амиотрофического склероза, что доказывают следующие факты:

• мужчины болеют чаще, чем женщины до 55 лет, у них отмечено более раннее начало и быстрое прогрессирование заболевания по сравнению с женщинами;

• с наступлением менопаузы женщины болеют также часто, как и мужчины;

• отмечены единичные случаи заболевания боковым амиотрофическим склерозом во время беременности.

В предыдущих исследованиях было выявлено значительное снижение уровня эстрадиола, свободного тестостерона (Завалишин И.А. и др., 1985; Militello A. et al., 2002) у больных с боковым амиотрофическим склерозом. Usuki F. et al., (1989) в своём исследовании определил концентрации эстрона, тестостерона, фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) и лютеинизирующего гормона (ЛГ) среди пациентов с нервно-мышечными заболеваниями (бульбоспинальная амиотрофия Кеннеди, болезнь Кугельберга-Веландера, БАС, мышечная дистрофия Дюшена). Уровень эстрона в плазме крови был значимо выше у всех больных по сравнению с контрольной группой. Серологический уровень тестостерона, ЛГ не отличался от контрольной группы. Уровень ФСГ был понижен у больных с дистрофией Дюшенна. Повышение уровня эстрона было связано, по-видимому, с повышенным превращением андрогенов в t эстрогены.

Одним из новых и перспективных направлений в изучении нейродегенеративных заболеваний является исследование механизмов ангиогенеза и основных факторов его регуляции: сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF) и ангиогенина (ANG).

Экспериментальные исследования in vitro и in vivo показали, что снижение уровня YEGF приводит не только к нарушению нейрональной---перфузии, но и недостаточности VEGF-зависимой нейропротекции.

У мышей с делецией элемента, отвечающего на гипоксию (hypoxia response element) в промоторе VEGF гена развивается дегенерация мотонейронов, клинически и морфологически сходная с БАС (Oosthayse В, 2001).

Данная делеция приводит к избирательному снижению уровня VEGF на 40% в нервной ткани, а при гипоксии на 60-75%, При этом уровень VEGF в скелетных мышцах, сердце, фибробластах не изменялся, что свидетельствует о тканеспецифичности в регуляции VEGF.

В последующем было показано, что для мотонейронов имеется специфическая изоформа VEGF 165, повышенная экспрессия которой in vitro предотвращает. развитие апоптоза мотонейронов в условиях окислительного стресса, действия фактора некроза опухоли-а, гипоксии, экзайтотоксичности.

Кроме этого, у больных БАС выявлены определенные корреляции уровня VEGF в СМЖ с формой и характером прогрессирования заболевания. Медленно прогрессирующие формы БАС характеризуются более высоким уровнем VEGF, чем злокачественные, например бульбарная форма.

В настоящее время имеются противоречивые данные об уровне VEGF у больных БАС. Исследование VEGF в биологических жидкостях у больных выявило как повышение его содержания (Nygren I., et al., 2002), так и отсутствие каких-либо изменений (Ilzecka J., 2004). Некоторыми исследователями было зарегистрировано снижение концентрации VEGF в плазме крови (Lambrechts D., et al. 2003).

Как известно, окислительный стресс является одним из ведущих патогенетических механизмов развития бокового амиотрофического склероза.

По мнению некоторых авторов, состояние окислительного стресса в центральной нервной системе может быть вызвано не только активацией окислительных процессов, но и угнетением или дефектностью антиоксидантной системы защиты (снижение уровня внутриклеточного глутатиона, изменение функциональной активности супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы (Shaw Р. et al., 1995; Przedborski S. et al., 1996; Bredesen D.Z. et al., 1997; Bromberg M.B., 1999; Bruening W., 1999).

Анализ литературы показал, что имеются единичные и противоречивые публикации по изучению прооксидантов и антиоксидантов при спорадической форме БАС как в аутопсийном материале, так и в биологических жидкостях больных. Так, одни исследователи отмечали снижение активности различных антиоксидантных ферментов в эритроцитах и СМЖ больных БАС (Bracco F. et al., 1991; Iwasaki Y. et al.,

1993; Mitchell J. et al., 1993; Shaw I.C. et al., 1993; Przedborski S. et al., 1996; Oteiza P.I. et al., 1997). В то же время другими авторами либо не было выявлено каких-либо изменений этих параметров (Bowling A.C. et al., 1993; Robberecht W. et al., 1994; Fujita K. et al., 1996), либо, наоборот, было обнаружено повышение активности антиоксидантных ферментов (Ince P.G. et al., 1994; Shaw P. et al., 1997). Столь противоречивые данные, возможно, объясняются исследованием антиоксидантной системы у больных на различных стадиях заболевания.

Изучение механизмов выживания и гибели мотонейронов при БАС показало, что половые гормоны, нейротрофические факторы и антиоксиданты активируют общие сигнальные пути выживания клетки, в связи с чем, изучение именно этих систем при БАС может способствовать пониманию механизмов развития нейродегенеративного процесса, в том числе и у лиц молодого возраста.

В литературе имеются лишь единичные описания результатов исследования антиоксидантной системы, половых гормонов у этих больных. Исследование ангиогенных факторов у больных БАС молодого возраста не проводилось.

В связи с этим были сформулированы цели и задачи исследования.

Цели и задачи исследования.

Основной целью настоящего исследования является исследование клинических и биохимических особенностей бокового амиотрофического склероза у лиц молодого возраста и разработка прогностических критериев течения заболевания.

Задачи исследования:

1. Изучить клинические особенности течения бокового амиотрофического склероза у лиц молодого возраста.

2. Исследовать уровень половых гормонов в сыворотке крови больных боковым амиотрофическим склерозом.

3. Исследовать уровень сосудистого эндотелиального фактора роста в сыворотке крови больных боковым амиотрофическим склерозом и уточнить взаимосвязь с состоянием кислотно-щелочного состояния (КЩС) и дыхательной недостаточностью.

4. Исследовать активность антиоксидантных ферментов в эритроцитах больных БАС (супероксиддисмутаза-1, глутатион-зависимых ферментов).

5. Исследовать уровень белковых и небелковых сульфгидрильных групп в эритроцитах больных БАС.

6. Провести сравнительный анализ клинико-биохимических нарушений в зависимости от формы, варианта течения, длительности заболевания и характера его прогрессирования.

7. На основании полученных данных уточнить патогенетические механизмы бокового амиотрофического склероза у лиц молодого возраста. 6

Научная новизна: Впервые проведено комплексное клинико- ' биохимическое исследование половых гормонов, антиоксидантов и уровня сосудистого эндотелиального фактора роста у больных БАС молодого""" возраста, позволяющее оценить роль этих систем в развитии нейродегенеративного процесса. Установлено, что у пациентов молодого возраста чаще наблюдается более медленное прогрессирование заболевания по сравнению со старшей возрастной группой, а также более редкая встречаемость злокачественной бульбарной формы заболевания. Впервые показано, что недостаточность половых гормонов, особенно выраженная у молодых мужчин имеет важное значение в инициации и прогрессировании заболевания. Впервые установлено, что у больных БАС снижена концентрация УБОР и нарушена его функциональная активность, характеризующаяся парадоксальной реакцией экспрессии УЕОР в условиях гипоксии. Впервые установлено, что у всех больных БАС имеется недостаточность антиоксидантной системы, более выраженная в старшей возрастной группе. Впервые установлено, что степень выраженности нарушений синтеза половых гормонов, антиоксидантов и УЕвР тесно сопряжена с возрастом и основными характеристиками заболевания: первичным уровнем поражения, длительностью и характером прогрессирования патологического процесса. Впервые показано, что в формировании более благоприятного медленного течения заболевания у мужчин молодого возраста существенная роль принадлежит повышению уровня половых гормонов, активности антиоксидантной системы и нормальной экспрессии УЕОБ. На основании клинико-биохимических корреляций разработаны прогностические критерии течения бокового амиотрофического склероза у лиц молодого возраста.

Теоретическая значимость.

Результаты проведенного исследования имеют важное теоретическое значение в плане понимания некоторых механизмов патогенеза бокового амиотрофического склероза. Полученные данные расширяют наши представления о роли УЕОБ, половых гормонов и основных антиоксидантов в инициации и прогрессировании патологического процесса при БАС у лиц молодого возраста

Показано, что при БАС имеются выраженные нарушения синтеза гормонов, нарушение регуляции экспрессии сосудистого эндотелиального фактора в условиях гипоксии у больных молодого возраста, а также снижение антиоксидантной защиты. Данные изменения играют существенную роль в патогенезе заболевания.

Результаты проведенного исследования могут служить основанием для разработки новых методов патогенетической терапии бокового амиотрофического склероза.

Практическая значимость:

Результаты проведённого исследования позволили предложить прогностические критерии течения заболевания у больных БАС молодого возраста.

Выявленные изменения гормонального статуса у больных БАС дают основания для коррекции дефицита половых гормонов с использованием гормоно-заместительной терапии. Снижение концентрации УЕвР у пациентов с БАС является основанием для проведения терапии, направленной на увеличение экспрессии этого нейротрофического фактора.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Васильев, Алексей Владимирович, 2008 год

1. Болдырев A.A. Двойственная роль свободнорадикальных форм кислорода в ишемическом мозге. // Нейрохимия. - 1995. - том. 12. -выпуск 3. - с. 3-13.

2. Ботвинко Т.М., Герасимова М.М. Трудности в диагностике бокового амиотрофического склероза и его эпидемиология в Тверской области. // Рос. Биомед. 2001. - Том 2. - стр. 220-297.

3. Дедов И.И., Калиниченко С.Ю. Возрастной андрогенный дефицит у мужчин. Москва: Практическая медицина., 2006. - 239 с.

4. Завалишин И.А., Захарова М.Н. Латеральный амиотрофический склероз. // Неврологический журнал. 1998 - Том 4. - стр. 4-7.

5. Завалишин И.А., Переседова A.B., Мусаева Л.С., Жученко Т.Д. Боковой амиотрофический склероз. // В кн.: Нейодегенеративные болезни и старение. Руководство для врачей. Под ред. Завалишин И.А., Яхно H.H., Гаврилова С.И. М., ООО «Эльф ИПР» 2001: 138177.

6. Захарова М.Н., Васильев A.B., Брылёв Л.В. Этиология и патогенез БАС. // В кн. Боковой амиотрофический склероз под ред. И.А. Завалишина. Евразия+. 2007. - стр. 353-425.

7. Колесниченко Л.С., Кулинский В.И. Глутатионтрансферазы. // Усп. совр. биол. 1989. - т. 107. - в. 2. - с. 179-194.

8. Ланкин В.З., Тихазе А.К., Ковалевская A.A. Возрастные изменения глутатион-8-трансферазной и глутатионпероксидазной активности цитозоля печени крыс. // Доклад АН СССР. 1981. - т. 261. - №6. - с. 1467-1470.

9. Левицкий Г.И. Молекулярно-генетические и биохимические маркеры антиоксидантной системы при болезни двигательного нейрона. // Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук, 2003.

10. Кеттайл В., Арки Р. Патофизиология эндокринной системы. // Пер. с английского Москва. - 2001. - 335 с.

11. Кишкун А.А. Гормональные и генетические исследования в клинической практике. Москва: Лабора. - 2007. - 400 с.

12. Одинак М.М., Цыган Н.В. Факторы роста нервной ткани в центральной нервной системе. Санкт-Петербург: Наука.- 2005. - 151 с.

13. Попова Л.М. Амиотрофический боковой склероз в условиях продленной жизни. Москва "Медицина". 1998. -144 с.

14. Розен В.Б. Основы эндокринологии. М.: Издательство МГУ. - 1994. -384 с.

15. Самошкина О.И. Клинико-эпидемиологические особенности бокового амиотрофического склероза в Санкт- Петербурге и Ленинградской области. // Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук, 2007.

16. Скворцова В. И., Лимборская С. А., Левицкий Г.И. Современные представления об этиологии, патогенезе и лечении болезни двигательного нейрона. // Журнал неврологии и психиатрии имени С. С. Корсакова. 2005 - Том 1(105) - стр. 4-12.

17. Хондкариан О.А., Бунина Т.Л., Завалишин И.А. Боковой амиотрофический склероз. Москва. "Медицина". 1978. - 25 с.

18. Arany Z., Huang L., Eckner R., Bhattacharya S., Jiang C., Goldberg M., Bunn H., Livingston D. An essential role for рЗОО/CBP in the cellular response to hypoxia. // Proc. Natl. Acad. Sciences USA. 1996 - Vol. 93 -p.12969-12973.

19. Autiero M., Waltenberger J., Communi D., Kranz A., Moons L., et al. Role of P1GF in the intra- and intermolecular cross talk between the VEGF receptors Fltl and Flkl. // Nat Med. 2003 - Vol. 9 - p. 936-43.

20. Awata T, Inoue K, Kurihara S, Ohkubo T, Watanabe M, Inukai K, Inoue I, Katayama S. A common polymorphism in the 5-untranslated region of the VEGF gene is associated with diabetic retinopathy in type 2 diabetes. // Diabetes. -2002 Vol. 51 - p. 1635-9.

21. Azcoitia I., Fernandez-Galaz C., Sierra A., Garcia-Segura L. Gonadal hormones affect neuronal vulnerability to excitotoxin-induced degeneration. // Journal of Neurocytology. 1999 - Vol. 28 - p. 699-710.

22. Azzouz M., Ralph G., Storkebaum E., Walmsley L., Mitrophanous K., Kingsman S., Carmeliet P., Mazarakis N. VEGF delivery with retrogradely transported lentivector prolongs survival in a mouse ALS model. // Nature. 2004 - Vol. 429 - p. 413-417.

23. Barleon B., Sozzani S., Zhou D., Weich H., Mantovani A., Marme D. Migration of human monocytes in response to vascular endothelial growth factor (VEGF) is mediated via the VEGF receptor flt-1. // Blood. 1996 -Vol. 87-p. 3336-43.

24. Baulieu E. Neurosteroids: of the nervous system, by the nervous system, for the nervous system. // Recent Prog Horm Res. 1997 - Vol. 52 -p. 1-32.

25. Belcredito S., Vegeto E., Brusadelli A., Ghisletti S., Mussi P., Ciana P., Maggi A. Estrogen neuroprotection: the involvement of the Bcl-2 binding protein BNIP2. // Brain Research Reviews. 2001 - Vol. 37 - p. 335-342.

26. Bramlett H., Dietrich W. Neuropathological protection after traumatic brain injury in intact female rats versus males or ovariectomized females. // Neurotrauma. 2001 - Vol. 18 - p. 891-900.

27. Breier G., Albrecht U., Sterrer S., Risau W. Expression of vascular endothelial growth factor during embryonic angiogenesis and endothelial cell differentiation. // Development. 1992 - Vol. 114 - p. 521-32.

28. Brinton R., Marwah J., Teitelbaum H., et al. Estrogens and Alzheimer's Disease. 11 Advances in Neurodegenerative Disorders. Alzheimer'sand Aging. Scottsdale, AZ: Prominent Press. 1998 - Vol 1 - p 99-130.

29. Cerdan C., Rouleau A., Bhatia M. VEGF-A165 augments erythropoietic development from human embryonic stem cells. // Blood. 2004 - Vol. 103(7)-p. 2504-12.

30. Chen J., Chopp M., Li Y. Neuroprotective effects of progesterone after —---- transient middle cerebral artery occlusion in rat. // J. Neurol. Sci: 1999Vol. 171-p. 24-30.

31. Claesson-Welsh L. Signal transduction by vascular endothelial growth factor receptors. // Biochem Soc Trans. 2003 - Vol. 3 l(Pt 1) - p. 20-4.

32. Clauss M. Molecular biology of the VEGF and the VEGF receptor family. // Semin Thromb Hemost. 2000 - Vol. 26(5) - p. 561-9.

33. Cleveland D., Rothstein J. From Charcot to Lou Gehrig: deciphering selective motor neuron death in ALS. // Nat Rev Neurosci. 2001 -Vol. 2(11)-p. 06-19.

34. Cohen T., Nahari D., Cerem L., Neufeld G., Levi B. Interleukin 6 induces the expression of vascular endothelial growth factor. // J Biol Chem. -1996-Vol. 271-p. 736-41.

35. Compagnone N., Mellon S. // Neurosteroids: biosynthesis and function of these novel neuromodulators. // Front. Neuroendocrinology. 2000 -Vol.21 - p. 1-56.

36. Cross M., Dixelius J., Matsumoto T., Claesson-Welsh L. VEGF-receptor signal transduction. // Trends Biochem Sci. 2003 - Vol. 28(9) - p. 48894.

37. Cronin S., Greenway M., Ennis S., et al. Elevated serum angiogenin levels in ALS. //Neurology. 2006. - Vol. 67. - p. 1833-1836.

38. D'Astous M., Morissette M., Tanguay B., Callier S., DiPaolo T. Dehydroepiandrosterone (DHEA) such as 17beta-estradiol prevents MPTP-induced dopamine depletion in mice. // Synapse. 2003 - Vol. 47 -p. 10-14.

39. Devos D., Moreau C., Lassalle P., Perez T., De Seze J., Brunaud-Danel V., Destee A., Tonnel A., Just N. Low levels of the vascular endothelial growth factor in CSF from early ALS patients. // Neurology. 2004 - Vol. 62(11)-p. 2127-9.

40. Dibbens J., Miller D., Damert A., Risau W., Vadas M., Goodall G. Hypoxic regulation of vascular endothelial growth factor mRNA stability requires the cooperation of multiple RNA elements. // Mol. Biol. Cell.----------- 1999-Vol. 10-p. 907-919.

41. Drake E., Henderson V., Stanczyk F., McCleary C., Brown W., Smith C., Rizzo A., Murdock G., Buckwalter J. Associations between circulating sex steroid hormones and cognition in normal elderly women. // Neurology. -2000-Vol. 54-p. 599-603.

42. Dulak J., Jozkowicz A. Regulation of vascular endothelial growth factor synthesis by nitric oxide: facts and controversies. // Antioxid Redox Signal. -2003-Vol. 5-p. 123-32.

43. Ferrara N., Gerber H., LeCouter J. The biology of VEGF and its receptors. // Nat Med. 2003 - Vol. 9(6) - p. 669-76.

44. Finnerty H., Kelleher K., Morris G., Bean K.5 Merberg D., Kriz R., Morris J., Sookdeo H., Turner K., Wood C. Molecular cloning of murine FLT and FLT4. // Oncogene. 1993 - Vol. 8(8) - p. 2293-8.

45. Fong G., Rossant J., Gertsenstein M., Breitman M. Role of the Flt-1 receptor tyrosine kinase in regulating the assembly of vascular endothelium. // Nature. 1995 - Vol. 376 - p. 66-70.

46. Forsythe J., Jiang B., Iyer N., Agani F., Leung S., Koos R., Semenza G. Activation of vascular endothelial growth factor gene transcription by hypoxiainducible factor 1. // Mol Cell Biol. 1996 - Vol. 16 - p. 4604-13.

47. Fräser H., Lunn S. Angiogenesis and its control in the female reproductive system. // Br Med Bull. 2000 - Vol. 56(3) - p. 787-97.

48. Fuh G., Garcia K., de Vos A. The interaction of neuropilin-1 with vascular endothelial growth factor and its receptor flt-1. // J Biol Chem. 2000 -Vol. 275(35)-p. 26690-5.

49. Gluzman-Poltorak Z., Cohen T., Shibuya M.5 Neufeld G. Vascular endothelial growth factor receptor-1 and neuropilin-2 form complexes. // J Biol Chem. 2001 - Vol. 276(22)-p. 18688-94.

50. Goerges A., Nugent M. Regulation of vascular endothelial growth factor binding and activity by extracellular pH. // J Biol Chem. 2003 -Vol. 278-p. 19518-25.

51. Goldberg-Cohen I., Furneauxb H., Levy A. A 40-bp RNA element that mediates stabilization of vascular endothelial growth factor mRNA by HuR. // J Biol Chem. 2002 - Vol. 277 - p. 13635-40.

52. Gu C., Rodriguez E., Reimert D., Shu T., Fritzsch B., Richards L., Kolodkin A., Ginty D. Neuropilin-1 conveys semaphorin and VEGF signaling during neural and cardiovascular development. // Dev Cell. -2003 -Vol. 5(1)-p. 45-57.

53. Gubay S., Kahana E., Zilber N. et al. Amyotrophic Lateral Sclerosis. A study of its presentation and prognosis. // J.Neurol. 1985 - Vol. 232 - p. 295-300.

54. Haverkamp L., Appel V., Appel S. Natural history of amyotrophic lateral sclerosis in a database population. Validation of a scoring system and a model for survival prediction. // Brain. 1995 - Vol. 118(Pt 3) - p. 707-19.

55. Hayashi T., Abe K., Suzuki H., Itoyama Y. Rapid induction of vascular endothelial growth factor gene expression after transient middle cerebral artery occlusion in rats. // Stroke. 1997 - Vol. 28 - p. 2039^14.

56. Ikeda M., Sato I., Yuasa T. et al. Nitrite, nitrate and cGMP in the cerebrospinal fluid in?, degenerative neurologic diseases., // J. Neural Transm. 1995 - Vol. 100 - p. 263-267.

57. Iliopoulos O, Levy AP, Jiang C, Kaclin WG Jr, Goldberg MA. Negative regulation of hypoxia-inducible genes by the von Hippel-Lindau protein. // Proc Natl Acad Sci USA. 1996 - Vol. 93 - p. 10595-9.

58. Ilzecka J. Cerebrospinal fluid vascular endothelial growth factor inpatients with amyotrophic lateral sclerosis. // Clin Neurol Neurosurg. -2004 Vol. 106(4) - p. 289-93.

59. Issa R., Krupinski J., Bujny T., Kumar S., Kaluza J., Kumar P. Vascular ^. endothelial growth factor and its receptor, KDR, in human brain tissueafter ischemic stroke. // Lab Invest. 1999 - Vol. 79 - p. 417-25.

60. Jokelainen M. Amyotrophic Lateral Sclerosis in Finland. Clinical characteristics. // Acta. Neurol. Scand. 1977 - Vol. 56 - p. 194-204.

61. Jonsson P., Ernhill K., Andersen P., Bergemalm D., Brannstrom: T., Gredal O., Nilsson P., Marklund S. Minute quantities of misfolded mutantsuperoxide dismutase-1 cause amyotrophic lateral sclerosis. // Brain. -2004-Vol. 127(Pt l)-p. 73-88.

62. Kaasik A., Kalda A., Jaako K., Zharkovsky A. Dehydroepiandrosterone sulphate prevents oxygen-glucose deprivation-induced injury in cerebellar granule cell culture. // Neuroscience. 2001 - Vol. 102 - p. 427-432.

63. Kawasaki T.5 Kitsukawa T., Bekku Y., Matsuda Y., Sanbo M., Yagi T., Fujisawa H. A requirement for neuropilin-1 in embryonic vessel formation. // Development. 1999 - Vol. 126 - p. 4895-902.

64. Kelemen J., Hedlund W., Orlin J.B. et al. Plasmapheresis with immunosuppression in amyotrophic lateral sclerosis. // Arch. Neurol. -1993 -Vol. 40-p. 752-753.

65. Kim T., Warren H., Jung Y. Alternative cleavage of Alzheimer-associated presenilins during apoptosis by a caspase- 3 family protease. // Science. -1997-Vol. 277-p. 373-376.

66. Kitsukawa T., Shimizu M.5 Sanbo M., Hirata T., Taniguchi M., Bekku Y., Yagi T., Fujisawa H. Neuropilin-semaphorin III/D-mediated chemorepulsive signals play a crucial role in peripheral nerve projection in mice. // Neuron. 1997 - Vol. 19 - p. 995-1005.

67. Kitsukawa T., Shimono A., Kawakami A., Kondoh H., Fujisawa H. Overexpression of a membrane protein, neuropilin, in chimeric mice causes anomalies in the cardiovascular system, nervous system and limbs. // Development. 1995 - Vol. 121 - p. 4309-18.

68. Kosower N., Kosower E. Influence of glutathione on membranes. // In: Glutathione. Chemical, Biochemical and medical aspects. D.Dolphin, R.Poulson, O. Avramovic (eds), New York: JohnWiley&Sons. 1985 - p. 370-420.

69. Kunst C. Complex genetics of amyotrophic lateral sclerosis. // Am J Hum Genet. 2004 - Vol. 75(6) - p. 933-47.

70. Labombarda F., Gonzalez S., Gonzales D., Guennoun R., Schumacher M., De Nicola A. Cellular basis for progesterone neuroprotection in the injured spinal cord. // J. Neurotrauma. 2002 - Vol. 19 - p. 343-355.

71. Lambrechts D., Poesen K., et al. P.Meta-analysis of VEGF variations in ALS: increased susceptibility in male carriers of the -2578AA genotype.J Med Genet. 2008 Jul 17. --

72. Lanius P., Krieger C., Wagly R. Increased 355. glutathione binding sites in spinal cords from patient with sporadic amyotrophic lateral sclerosis. // Neurosci Lett. 1993 - Vol. 163 - p. 89-92.

73. Lapchak P., Chapman D., Nunez S., Zivin J. Dehydroepiandrosterone sulfate is neuroprotective in a reversible spinal cord ischemia model:possible involvement of GABA(A) receptors. // Stroke. 2000 - Vol. 31-p. 1953-1956.

74. LeCouter J., Moritz D., Li B., Phillips G., Liang X., Gerber H., Hillan K., Ferrara N. Angiogenesis-independent endothelial protection of liver: role of VEGFR-1. // Science. -2003 Vol. 299 - p. 890-3.

75. Levy A., Levy N., Goldberg M. Hypoxia-inducible protein binding to vascular endothelial growth factor mRNA and its modulation by the von Hippel-Lindau protein. // J Biol Chem. 1996 - Vol. 271 - p. 25492-7.

76. Levy A., Levy N., Goldberg M. Post-transcriptional regulation of vascular endothelial growth factor by hypoxia. // J Biol Chem. 1996 -Vol. 271 - p. 2746-53.

77. Li T., Alberman E., Swash M. Clinical features and association of 560 cases of motor neuron disease. // J. Neurol. Neurosurg. Psycyatry. 1990 — Vol. 53-p. 1043-1045.

78. Liu Y., Cox S., Morita T., Kourembanas S. Hypoxia regulates vascular endothelial growth factor gene expression in endothelial cells. Identification of a 5y enhancer. // Circ Res. 1995 - Vol. 77 - p. 638-43.

79. Lovell M., Xie C., Markesbery W. Decreased glutathione transferase activity in brain and ventricular fluid in Alzheimer's disease. // Neurology. 1998-Vol. 51-p. 1562-1566. --

80. Lowe J. New pathological findings in amyotrophic lateral sclerosis. // J. Neurol. Sei. 1994 - Vol. 124 (suppl), - p. 38-51.

81. Luttun A., Tjwa M., Moons L., Wu Y., Angelillo-Scherrer A., et al. Revascularization of ischemic tissues by P1GF treatment, and inhibition of tumor angiogenesis, arthritis and atherosclerosis by anti-Fit 1. // Nat Med. -2002-Vol. 8-p. 831-40.

82. Majewska M. Neurosteroids: endogenous bimodal modulators of the GABA receptor. Mechanism of action and physiological significance. // Prog. Neurobiology. 1992 - Vol. 38 - p. 379-395.

83. Mao X., Barger S. Neuroprotection by dehydroepiandrosterone-sulfate: role of an NFkappaB-like factor. // Neuroreport. 1998 - Vol. 9 -p. 759-763.

84. Marti H. Vascular endothelial growth factor. // Adv Exp Med Biol. -2002-Vol. 513 -p. 375-94.

85. Marti H., Bernaudin M., Bellail A., Schoch H., Euler M., Petit E., Risau W. Hypoxia-induced vascular endothelial growth factor expression precedes neovascularization after cerebral ischemia. // Am J Pathol. 2000 -Vol. 156-p. 965-76.

86. Martin R., Lahlil R., Damert A., Miquerol L., Nagy A., Keller G., Hoang T. SCL interacts with VEGF to suppress apoptosis at the onset of hematopoiesis. // Development. 2004 - Vol. 131(3) - p. 693-702.

87. Martinou J., Dubais-Dauphin M., Staple J. Overexpression of Bcl-2 in transgenic mice protects neurons from naturally occurring cell death and experimental ishemia. //Neuron. 1994 - Vol. 13 - p. 1017-1030.

88. Matsuishi T., Nagamitsu S., Shoji H., Itoh M. et al. Increased cerebrospinal fluid levels of substance P in patients with amyotrophic lateral sclerosis. // Journal of Neural Transmission. 1999 - Vol.106 - p. 943-948.

89. Matsumoto T., Claesson-Welsh L. VEGF receptor signal transduction^// -Sci STKE. 2001 - Vol. 2001(112)-p. 21-25.

90. Maurer M., Tripps W., Feldmann R., Kuschinsky W. Expression of vascular endothelial growth factor and its receptors in rat neural stem cells. // Neurosci Lett. 2003 - Vol. 344 - p. 165-8.

91. Maxwell P., Ratcliffe P. Oxygen sensors and angiogenesis. // Semin Cell Dev Biol. 2002 - Vol. 13(1) - p. 29-37.

92. McCarron S., Edwards S., Evans P., Gibbs R., Dearnaley D., Dowe A., Southgate C., Easton D., Eeles R., Howell W. Influence of cytokine gene polymorphisms on the development of prostate cancer. // Cancer Res. 2002 - Vol. 62 - p. 3369-72.

93. Mellon S., Griffin L., Compagnone N. Biosynthesis and action of neurosteroids. // Brain Research Reviwe 2001 - Vol. 37 - p. 3-12.

94. Meyer R., Rahimi N. Comparative structure-function analysis of VEGFR-1 and VEGFR-2: What have we learned from chimeric systems? Ann N Y // Acad Sci. 2003 - Vol. 995 - p. 200-7.

95. Militello A., Vitello G., Lunetta C., Toscano A., Mariorana G., Picolli T., et al. // Journal of the Neurogical Sciences. 2002 - Vol. 195 - p. 67-70.

96. Monacci W., Merrill M., Oldfield E. Expression of vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor in normal rat tissues. // Am J Physiol. 1993 - Vol. 264 - p. 995-1002.

97. Moreau C., Devos D., Brunaud-Danel V., Defebvre L., Perez T., Destee A., Tonnel A., Lassalle P., Just N. Paradoxical response of VEGF expression to hypoxia in CSF of patients with ALS. // J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2006 - Vol. 77(2) - p. 255-7.

98. Namiki A., Brogi E., Kearney M., Kim E., Wu T., Couffinhal T., Varticovski L., Isner J. Hypoxia induces vascular endothelial growth factor in cultured human endothelial ceils. // J Biol Chem. 1995 - Vol. 270(52) -p. 31189-95.

99. Neufeld G., Cohen T., Shraga N., Lange T., Kessler O., Herzog Y. The neuropilins: multifunctional semaphoring and VEGF receptors that modulate axon guidance and angiogenesis. // Trends Cardiovasc Med. -2002-Vol. 12-p. 13-19.

100. Nilsen J., Brinton R. Impact of progestins on estrogeninduced neuroprotection: progesterone and 19-norprogesterone and antagonism by medroxyprogesterone acetate. // Endocrinology. 2002 - Vol. 143 - p. 205-212.

101. Norris F. Motor neurone disease. // BMJ. 1992 - Vol. 304(6825) - p. 459-60.

102. Ogunshola O., Antic A., Donoghue M., Fan S., Kim H., Stewart W., Madri J., Ment L. Paracrine and autocrine functions of neuronal vascular endothelial growth factor (VEGF) in the central nervous system. // J Biol Chem.-2002-Vol. 277-p. 11410-15.

103. Oosthuyse B., Moons L., Storkebaum E., Beck H., Nuyens D., Brusselmans K., et.al. Deletion of the hypoxia-response element in the vascular endothelial growth factor promoter causes motor neuron degeneration. // Nat Genet. 2001 - Vol. 28 - p. 131-8.

104. Palmer T., Willhoite A., Gage F. Vascular niche for adult hippocampal neurogenesis. // J Comp Neurol. 2000 - Vol. 425 - p. 479-94- ---

105. Perez J., Kelley D. Trophic effects of androgen: receptor expression and survival of laryngeal motor neurons after axonotomy. // Neurosciences. -1996-Vol.16-p. 625-633.

106. Piemonte and Valle d'Aosta Register for Amyotrophic Lateral Sclerosis (PARALS). Incidence of ALS in Italy: evidence for a uniform frequency in Western countries. // Neurology. 2001 - Vol. 56(2) - p. 239-44.

107. Price D., Sisodia S., Borchelt D. Genetic neurodegenerative diseases: the human illness and transgenic models. // Science. 1998 - Vol. 282(5391)-p. 1079-83.

108. Pringle A., SchmidtW., Deans J.,Wulfert E., Reymann K., Sundstrom L. 7-Hydroxylated epiandrosterone (7-OH-EPIA) reduces ischemia-induced neuronal damage both in vivo and in vitro. // European J. Neurosciences -2003-Vol. 18.-p. 117-124.

109. Richardson R., Wagner H., Mudaliar S., Henry R., Noyszewski E., Wagner P. Human VEGF gene expression in skeletal muscle: effect of acute normoxic and hypoxic exercise. // Am J Physiol. 1999 - Vol. 277(6 Pt 2) - p. 2247-52.

110. Rosenstein J., Mani N., Khaibullina A., Krum J. Neurotrophic effects of vascular endothelial growth factor on organotypic cortical explants and primary cortical neurons. // J Neurosci. 2003 - Vol. 23(35) - p. 11036-44.

111. Safran M., Kaelin W. Jr. HIF hydroxylation and the mammalian oxygen-sensing pathway. // J Clin Invest. 2003 - Vol. 111 - p. 779-83.

112. Satake S.s Kuzuya M., Miura H., Asai T., Ramos M., Muraguchi M., Ohmoto Y., Iguchi A. Up-regulation of vascular endothelial growth factor in response to glucose deprivation. // Biol Cell. 1998 -Vol. 90 - p. 161— 8.

113. Sherwin B. Oestrogen and cognitive function throughout the female lifespan. // Novartis Found Symp. 2000 - Vol. 230 - p. 188-196.

114. Shibuya M. Structure and function of VEGF/VEGF-receptor system involved in angiogenesis. // Cell Struct Funct. 2001 - Vol. 26(1) - p. 2535.

115. Shweiki D., Itin A., Soffer D., Keshet E. Vascular endothelial growth factor induced by hypoxia may mediate hypoxiainitiated angiogenesis. // Nature. 1992 - Vol. 359 - p. 843-5.

116. Silverman W., Krum J., Mani N., Rosenstein J. Vascular, glial and neuronal effects of vascular endothelial growth factor in mesencephalic explant cultures. //Neuroscience. 1999 - Vol. 90 - p. 1529-41.

117. Soker S., Takashima S., Miao H., Neufeld G., Klagsbrun M. Neuropilin-1 is expressed by endothelial and tumor cells as an isoform-specific receptor for vascular endothelial growth factor. // Cell. 1998 - Vol. 92(6) -p. 735-45.

118. Soker S., Takashima S., Miao H., Neufeld G., Klagsbrun M. Neuropilin-1 is expressed by endothelial and tumor cells as an isoform-specific receptor for vascular endothelial growth factor. // Cell. 1998 - Vol. 92 -p. 735-45.

119. Sondell M., Kanje M. Postnatal expression of VEGF and its receptor flk-1 in peripheral ganglia. // Neuroreport. 2000 - Vol. 12 - p. 105-8.

120. Stein I., Itin A., Einat P., Skaliter R., Grossman Z., Keshet E. Translation of vascular endothelial growth factor mRNA by internal ribosome entry: implications for translation under hypoxia. // Mol Cell Biol. 1998 - Vol. 18-p. 3112-19.

121. Stein I., Neeman M., Shweiki D., Itin A., Keshet E. Stabilization of vascular endothelial growth factor mRNA by hypoxia and hypoglycemia and coregulation with other ischemia-induced genes. // Mol Cell Biol. -1995-Vol. 15-p. 5363-8.

122. Sussmuth S., Brettschneider J., Ludolph A., Tumani H. Biochemical markers in CSF of ALS patients. // Curr Med Chem. 2008 - Vol. 15(18) -p. 1788-801.

123. Swash M. Clinical features and diagnosis of amyotrophic lateral sclerosis. Amyotrophic Lateral Sclerosis. Eds. R. Brown, V. Meininger, M. Swash. London, Martin Dunitz. 2000 - p. 3-30.

124. Szymczak J., Milewicz A., Jos H., et al. Concentration of sex steroids in adipose tissue after menopause. // Steroids. 1998 - Vol. 63 - p. 319-321.

125. Tang M., Jacobs D., Stern Y., Marder K., Schofield P., Gurland B., Andrews H., Mayeux R. Effect of estrogen during menopause on risk and age at onset of Alzheimer's disease. // Lancet. 1996 -Vol. 348 - p. 429432.

126. Tanzer L., Jones K.J. Gonadal steroid regulation of hamster facial nerve regeneration: effects of DHT and estradiol. // Exp. Neurol. 1997 - Vol. 146-p. 258-264.

127. Testa D., Lovati R., Ferrarini M., Salmoiraghi F., Filippini G. Survival of 793 patients with amyotrophic lateral sclerosis diagnosed over a 28-year period. // Amyotroph Lateral Scler Other Motor Neuron Disord. 2004 -Vol. 5(4)-p. 208-12.

128. Tysnes O., Vollset S., Larsen J., Aarli J. Prognostic factors and survival in amyotrophic lateral sclerosis. // Neuroepidemiology. 1994 - Vol. 13(5)-p. 226-35.

129. Tysnes O., Vollset S., Larsen J., Aarli J. Prognostic factors and survival in amyotrophic lateral sclerosis. // Neuroepidemiology. 1994 -Vol. 13(5)-p. 226-35.

130. Van Den Bosch L., Storkebaum E., Vleminckx V., Moons L., Vanopdenbosch L., Scheveneels W., Carmeliet P., Robberecht W. Effects of vascular endothelial growth factor (VEGF) on motor neuron degeneration. // Neurobiol Dis. 2004 - Vol. 17(1) - p. 21-8.

131. Veldink J., Van den Berg L., Wokke J. The future of motor neuron disease: the challenge is in the genes. // J Neurol. 2004 - Vol. 251(4) - p. 491-500.

132. Vincenti V., Cassano C., Rocchi M., Pérsico G. Assignment of the vascular endothelial growth factor gene to human chromosome 6p21.3. // Circulation. 1996 - Vol. 93 - p. 1493-5.

133. Waltenberger J., Claesson-Welsh L., Siegbahn A., Shibuya M., Heldin C. Different signal transduction properties of KDR and Fltl, two receptors for vascular endothelial growth factor. // J Biol Chem. 1994 - Vol: 269 - p. 26988-95.

134. Wang L., Zeng H., Wang P., Soker S., Mukhopadhyay D. Neuropilin-1-mediated vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor-dependent endothelial cell migration. // J Biol Chem. 2003 - Vol. 278(49) -p. 48848-60.

135. Wang L., Zeng H., Wang P., Soker S., Mukhopadhyay D. Neuropilin-1-mediated vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor (VPF/VEGF) -dependent endothelial cell migration. // J Biol Chem. -2003 Vol. 278 - p. 48848-60.

136. Wang Y., Mao X., Xie L., Banwait S., Marti H., Greenberg D., Jin K. Vascular endothelial growth factor overexpression delaysneurodegeneration and prolongs survival in amyotrophic lateral sclerosis mice. // J Neurosci. 2007 - Vol. 27(2) - p. 304-7.

137. Wenger R., Gassmann M. Oxygen(es) and the hypoxia-inducible factor-1. //Biol Chem. 1997 - Vol. 378(7) - p. 609-16.

138. Wenger R. Mammalian oxygen sensing, signaling and gene regulation. // J Exp Biol. 2000 - Vol. 203 - p. 1253-63.

139. Whitaker G., Limberg B., Rosenbaum J. Vascular endothelial growth factor receptor-2 and neuropilin-1 form a receptor complex that is responsible for the differential signaling potency of VEGF (165) and VEGF (121). // J Biol Chem. 2001; 276: 25520-31

140. Are associated with cognitive performance in older women and men. // Hormone Behavior. 2002 - Vol. 41 - p. 259-266.

141. Woodley C. Effects of estrogen in CNS. // Curr. Opin. Neurobiology. -1999-Vol. 9-p. 349-354.

142. Woolley C. Electrophysiological and cellular effects of estrogen on neuronal function. // Crit. Rev. Neurobiology. 1999 - Vol. 13 - p. 1-20.

143. Worms P. The epidemiology of motor neuron diseases: a review of recent studies. // J Neurol Sci. 2001 - Vol. 191(1-2) - p. 3-9.

144. Wojtal,K., Micha K. Trojnarl, Czuczwar J. Endogenous neuroprotective factors: neurosteroids. // Farmacological reports. 2006 - Vol.58 - p. 335340.

145. Xu L., Fukumura D., Jain R. Acidic extracellular pH induces vascular endothelial growth factor (VEGF) in human glioblastoma cells via ERK1/2 МАРК signaling pathway: mechanism of low pH-induced VEGF. // J Biol Chem. 2002 - Vol. 277 - p. 11368-74.

146. Yang R., Thomas G., Bunting S., Ко A., Ferrara N., Keyt В., Ross J., Jin H. Effects of vascular endothelial growth factor on hemodynamics and cardiac performance. // J Cardiovasc Pharmacol. 1996 - Vol. 27(6) - p. 838-44.

147. Yang S., Zhang L., Huang Y., Sun F. Distribution of Flk-1 and Flt-1- receptors in neonatal and adult rat brains. // Anat Rec. —2003 Vol. 274: -p. 851-6.

148. Yilmaz A., Kliche S., Mayr-Beyrle U., Fellbrich G., Waltenberger J. p38 МАРК inhibition is critically involved in VEGFR-2-mediated endothelial cell survival. // Biochem Biophys Res Commun. 2003 - Vol. 306(3) - p. 730-6.

149. Yu Y., Sato J. MAP kinases, phosphatidylinositol 3-kinase, and p70 S6 kinase mediate the mitogenic response of human endothelial cells to vascular endothelial growth factor. // J Cell Physiol. 1999 - Vol. 178(2) -p. 235-46.

150. Zelzer E., McLean W., Ng Y., Fukai N., Reginato A., Lovejoy S., D'Amore P., Olsen B. Skeletal defects in VEGF( 120/120) mice reveal multiple roles for VEGF in skeletogenesis. // Development. 2002 - Vol. 129(8)-p. 1893-904.

151. Zheng C., Nennesmo I., Fadeel B., Henter J. (2004) Vascular endothelial growth factor prolongs survival in a transgenic mouse model of ALS. // Ann Neurol. Vol. 56 - p. 564 -567.

152. Zhu Y., Jin K., Mao X., Greenberg D. Vascular endothelial growth factor promotes proliferation of cortical neuron precursors by regulating E2F expression.//FASEB J.-2003-Vol. 17-p. 186-93.