Клиническое значение матриксных металлопротеиназ у больных раком яичников тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат медицинских наук Левкина, Наталья Васильевна

• Левкина, Наталья Васильевна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Левкина, Наталья Васильевна

Введение.

Глава I. Обзор литературы.

Глава II. Материалы и методы.

Глава III. Результаты и их обсуждение.

3.1. Содержание ММП и их тканевых ингибиторов в опухолях больных различными новообразованиями яичников.

3.2. Содержание ММП и их тканевых ингибиторов в сыворотке крови больных различными новообразованиями яичников.

3.3. Содержание ММП и их тканевых ингибиторов в асцитической жидкости.

Глава IV. Заключение.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клиническое значение матриксных металлопротеиназ у больных раком яичников»

Актуальность проблемы. Рак яичников - одна из наиболее инвазив-ных злокачественных опухолей, при этом у большинства больных заболевание диагностируется на достаточно поздних стадиях, когда опухоль уже распространена по брюшине. Трудности ранней диагностики и высокий метастатический и инвазивный потенциал рака яичников определяют необходимость углубленного изучения механизмов распространения опухоли, знание которых могло бы стать основой для создания новых препаратов, целенаправленно воздействующих на процессы метастазирования и инвазии.

Одним из основных механизмов инвазии злокачественных опухолей является разрушение окружающей базальной мембраны и внеклеточного матрикса (ВКМ) ассоциированными с опухолью протеазами, играющими также важную роль в процессах метастазирования и неоангиогенеза [2, 33, 35]. В опухолевой инвазии задействовано несколько классов протеаз, к важнейшим из которых следует отнести группу матриксных металлопро-теиназ (ММП) или матриксинов, названных так именно за свою способность специфически гидролизовать все основные белки внеклеточного матрикса, в первую очередь, коллаген [31, 32, 36, 110]. ММП - это мульти-генное семейство, состоящее из более 20 секретируемых и связанных с поверхностью клетки цинк-зависимых эндопептидаз. Помимо большинства компонентов ВКМ, их субстратами могут быть также другие протеазы, хе-мотаксические молекулы, латентные формы факторов роста, растворимые и мембранно-ассоциированные белки, связывающие факторы роста [39, 100, 114]. Важнейшими представителями семейства ММП являются различные неспецифические (ММП-1, ММП-8, ММП-13) и специфические (ММП-2/желатиназа А и ММП-9/желатиназа В) коллагеназы, матрилизин (ММР-7), стромелизины (ММР-3 и ММР-10). Активность ММР в межклеточном пространстве специфически подавляется тканевыми ингибиторами

ТИМП) - четырьмя структурно родственными белками, три из которых (ТИМГТ-1, -2 и -4) секретируются в растворимой форме, а один (ТИМП-3) -связан с ВКМ [82].

Для многих ММП продемонстрировано увеличение экспрессии в опухолях различного генеза, причем активация происходит по паракринному механизму с участием факторов роста и цитокинов, секретируемых инфильтрирующими опухоль макрофагами и лимфоцитами, а также клетками опухолевой стромы [13]. В последнее время появляются данные, свидетельствующие о том, что ТИМП, в первую очередь, ТИМП-1 и ТИМП-2, играют важную самостоятельную роль в регуляции роста и дифференци-ровки опухолевых и нормальных клеток, а также обладают антиангиоген-ными свойствами [15, 82]. В связи с этим различные ММП и ТИМП рассматриваются в настоящее время в качестве возможных биологических маркеров прогноза и лекарственной чувствительности злокачественных опухолей, в частности, рака яичников [64, 79, 81, 94-96], а использование природных и синтетических ингибиторов ММП считается перспективным подходом к противоопухолевой терапии [10, 12, 14, 30, 44].

Цель работы:

Оценить клинические перспективы исследования содержания ключевых матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в опухолях, асцитической жидкости и сыворотке крови больных раком яичников.

Задачи исследования:

1. Иммуноферментными методами определить содержание ММР 2, 7, 9 и их тканевых ингибиторов 1 и 2 типа в опухолях, асцитической жидкости и сыворотке крови больных раком, пограничными и доброкачественными новообразованиями яичников.

2. Проанализировать соотношение концентрации изучаемых белков в сыворотке крови больных раком яичников с уровнем их экспрессии в опухолевой ткани и концентрацией в асцитической жидкости.

3. Изучить взаимосвязь уровня изучаемых белков в опухолях, асцитической жидкости и сыворотке крови с основными клинико-морфологическими особенностями рака яичников (стадией процесса, гистологической формой и степенью дифференцировки опухоли, возрастом и менструальным статусом больных).

4. Изучить возможность комплексного использования клинических, морфологических и изученных биохимических факторов в прогнозировании эффективности лечения больных раком яичников.

Научная новизна и практическая значимость исследования:

Впервые количественными иммуноферментными методами исследован спектр экспрессии матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в опухолях больных раком, пограничными и доброкачественными новообразованиями яичников, прослежена взаимосвязь внутриопухолевых и сывороточных концентраций этих белков. Показано, что в ткани рака яичников достоверно повышено содержание ММП-7 и снижено содержание ММП-2 и ТИМП-2 по сравнению с доброкачественными опухолями, а уровни ММП-9 и ТИМП-1 в различных новообразованиях яичников достоверно не отличаются. Продемонстрировано также достоверное повышение содержания ММП-7, ММП-9 и ТИМП-1 и снижение содержания ММП-2 в сыворотке крови больных раком яичников по сравнению с показателями группы контроля и пациенток с доброкачественными новообразованиями. У больных раком яичников выявлена положительная корреляция между концентрациями изученных маркеров в опухоли и сыворотке крови.

Предполагается, что несмотря на отсутствие четкой ассоциации уровня экспрессии ММП и ТИМП в опухоли с основными клинико- морфологическими факторами неблагоприятного прогноза рака яичников, при длительном наблюдении за обследованными больными, данные биомаркеры смогут приобрести значение в качестве независимых прогностических факторов, определяющих как течение заболевания в целом, так и его чувствительность к отдельным видам лечения.

Наиболее перспективным сывороточным маркером для диагностики и мониторинга рака яичников является ММП-7: ее уровень повышен относительно контроля у 78% больных, он также коррелирует с ключевыми показателями распространенности рака яичников: стадией заболевания в целом, размером первичной опухоли по данным УЗИ, наличием и характером диссеминации по брюшине и метастазов в большом сальнике, наличием асцита, а также с уровнем классического сывороточного маркера рака яичников - СА-125.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Изменение внутриопухолевого содержания и сывороточной концентрации матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов при переходе от доброкачественных новообразований яичников к пограничным и злокачественным.

2. Матрилизин (ММП-7) как перспективный серологический маркер рака яичников, коррелирующий с распространенностью процесса.

Апробация работы. Апробация диссертации состоялась на совместной научной конференции сотрудников отделения опухолей женской репродуктивной системы, лаборатории клинической биохимии, отделения гинекологии, отделения амбулаторных методов диагностики и лечения, отделения радиохирургии НИИ КО РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН 21 июня 2011 г. Материалы диссертации представлены на VI Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» (Москва, 2009), XIII Российском онкологическом конгрессе (Москва, 2009), 37, 38 и 39-м съездах ISOBM (International Society of Oncology and Biomarkers) (Амстердам, 2009; Мюнхен, 2010; Флоренция, 2011), Научно-практической конференции «Лабораторная медицина в свете Концепции развития здравоохранения России до 2020 года» (Москва, 2009), Днях лабораторной дицины - 2010,2011 (Москва).

Заключение диссертации по теме «Онкология», Левкина, Наталья Васильевна

выводы

1. Статистический анализ показал, что в группе больных раком яичников достоверно повышено внутриопухолевое содержание ММП-7 и снижено содержание ММП-2 и ТИМП-2 по сравнению с показателями больных доброкачественными опухолями, а уровни ММП-9 и ТИМП-1 в различных новообразованиях яичников достоверно не различаются.

2. При учете показателей распространенности рака яичников выявлены следующие достоверные различия: 1) более высокое содержание ММП-2 и ММП-7 в первичных опухолях при двустороннем поражении яичников, чем при одностороннем; 2) более высокий уровень ММП-7 в опухолях при наличии просовидных очагов по брюшине, чем при наличии более крупных очагов; 3) увеличение уровня ММП-2 в опухолях больных с асцитом по сравнению с опухолями больных, у которых асцита не было.

3. Содержание ММП-2 достоверно увеличено, а содержание ТИМП-1 снижено в серозных раках яичников по сравнению с эндометриоид-ными и муцинозными. Значимых взаимосвязей уровней ММП-7, 9 и ТИМП-2 с гистологическим строением и степенью дифференцировки рака яичников не обнаружено.

4. В сыворотке крови больных раком яичников, обследованных до проведения специфического лечения, достоверно повышено содержание ММП-7, ММП-9 и ТИМП-1 и снижено содержание ММП-2 по сравнению с показателями группы контроля и пациенток с доброкачественными и пограничными новообразованиями яичников. При этом наиболее перспективным маркером для дифференциальной диагностики пограничных, доброкачественных и злокачественных новообразованиями яичников является ММП-7: ее уровень повышен относительно контроля (пороговое значение - 4,67 нг/мл) у 78% больных раком яичников.

5. В общей группе обследованных больных выявлены не сильные, но достоверные положительные корреляции уровней всех трех ММП в сыворотке крови и в опухолевой ткани, усиливающиеся в группе больных раком и не проявляющиеся у больных доброкачественными и пограничными новообразованиями яичников. Уровень ММП-7 в сыворотке крови коррелирует также с ее содержанием в асцитической жидкости.

6. Уровень ММП-7 в сыворотке крови достоверно положительно коррелирует с ключевыми показателями распространенности рака яичников: стадией заболевания в целом, размером первичной опухоли по данным УЗИ, наличием и характером диссеминации по брюшине и метастазов в большом сальнике, наличием и количеством асцита, а также с уровнем классического сывороточного маркера рака яичников - СА-125. Для других ММП и ТИМП значимых взаимосвязей с кли-нико-морфологическими особенностями рака яичников не обнаружено.

7. Проведенное иммуноферментное исследование содержания нескольких ММП и ТИМП в опухолевой ткани, сыворотке крови и асцитической жидкости больных раком, пограничными и доброкачественными новообразованиями яичников показало координированное увеличение тканевой экспрессии и сывороточной концентрации ММП-7 при раке яичников, нарастающее по мере распространения заболевания, что позволяет рассматривать ММП-7 (матрилизин) в качестве потенциально значимого серологического маркера рака яичников.

Глава IV. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Трудности ранней диагностики и высокий метастатический и инва-зивный потенциал рака яичников определяют необходимость углубленного изучения механизмов распространения этой опухоли, знание которых могло бы стать основой для создания новых препаратов, целенаправленно подавляющих процессы метастазирования и инвазии.

Известно, что одним из основных механизмов инвазии злокачественных опухолей является разрушение окружающей базальной мембраны и внеклеточного матрикса (ВКМ) ассоциированными с опухолью протеаза-ми, играющими также важную роль в процессах метастазирования и не-оангиогенеза. В опухолевой инвазии задействовано несколько классов протеаз, к важнейшим из которых следует отнести семейство матриксных металлопротеиназ, названных так именно за свою способность специфически гидролизовать все основные белки внеклеточного матрикса, в первую очередь, коллаген. Важнейшими представителями ММП являются желатина-зы А и В/специфические коллагеназы коллагена IV типа (ММП-2 и 9), а также матрилизин - ММП-7. Публикации последнего десятилетия свидетельствуют о том, что именно эти ММП являются перспективными маркерами для дифференциальной диагностики различных новообразований яичников и прогноза рака яичников. Активность ММП в межклеточном пространстве специфически подавляется четырьмя тканевыми ингибиторами. Среди них наиболее значимым маркером рака яичников, по данным литературы, является ТИМП-1.

Следует отметить, что большая часть исследований опухолевых тканей, описанных в литературе, выполнена полуколичественными иммуно-гистохимическими методами. В них, как правило, оценивали отдельно экспрессию ММП и/или ТИМП в эпителиальных и стромальных клетках, однако общую количественную оценку состояния ММП-зависимого протеолиза в опухолевой ткани не проводили. Не обнаружили мы в литературе и исследований, посвященных сравнению уровня ММП и ТИМП в опухолях и сыворотке крови.

Все вышеизложенное определило цель и задачи нашего исследования: 1) используя количественные иммуноферментные тесты, провести сравнительную оценку содержания ММП-2, ММП-7 и ММП-9, их тканевых ингибиторов 1 и 2 типа в опухолях и сыворотке крови больных раком, доброкачественными и пограничными новообразованиями яичников; 2) проанализировать взаимосвязь этих показателей с основными клинико-морфологическими особенностями рака яичников; 3) на основании полученных результатов оценить клинические перспективы определения данных маркеров.

Всего в исследование вошли 67 больных раком яичников, 24 пациентки с доброкачественными и 11 с пограничными новообразованиями яичников. В опухолях и сыворотке крови большинства из них было определено содержание трех металлопротеиназ и ТИМП-1 (в различных сочетаниях), а содержание ТИМП-2 было исследовано у 45 пациенток. У 25 больных было определено содержание всех маркеров также и в асцитической жидкости.

На первом этапе статистического анализа полученных данных мы сопоставили содержание исследованных ММП и ТИМП в доброкачественных, пограничных и злокачественных опухолях яичников. Было выявлено достоверное увеличение уровня ММП-7 в ткани рака яичников по сравнению с доброкачественными и пограничными опухолями, что косвенно подтверждает участие матрилизина в формировании инвазивного потенциала рака яичников. Аналогичная тенденция была продемонстрирована и для ММП-9, однако для этой протеазы различия не достигали порога статистической значимости. В то же время, для ММП-2 обнаружена противоположная закономерность - ее уровень в доброкачественных опухолях оказался достоверно более высоким, чем в пограничных и злокачественных. Такая особенность ММП-2 согласуется с экспериментальными данными о снижении ее экспрессии в клетках рака по сравнению с нетуморо-генными клетками поверхностного эпителия яичников [23, 54], а выявленные закономерности в целом свидетельствуют о различной роли ММП, в том числе и близких по свойствам специфических коллагеназ ММП-2 и ММП-9, в малигнизации опухолей яичников.

По-разному менялась при переходе от доброкачественных опухолей яичников к злокачественным и экспрессия двух типов ТИМП: уровень ТИМП-2 в ткани рака был достоверно снижен, а уровень ТИМП-1 был сходным в доброкачественных и злокачественных опухолях, но существенно повышен в пограничных новообразованиях. Закономерности, выявленные для ТИМП-1, согласуются с данными 8ака1а и соавт. [87], обнаруживших, что диффузное иммуногистохимическое окрашивание на ТИМП-1 было интенсивнее в доброкачественных и пограничных опухолях, чем в аденокарциномах яичников.

Анализ взаимосвязи концентраций исследованных маркеров в ткани рака яичников с основными клинико-морфологическими факторами прогноза проводили только в подгруппе из 43 больных, не получавших специфического лечения до операции и взятия материала для исследования, поскольку оказалось, что предоперационное лечение может существенно влиять по крайней мере на некоторые из изучаемых показателей.

Достоверных различий уровней различных ММП в зависимости от стадии рака яичников выявить не удалось, однако уровни ММП-9 в опухолях больных 1-Н стадии оказались значительно выше, чем в опухолях больных Ш-1У стадии. В то же время уровень ТИМП-1 в опухолях при III-IV стадии был достоверно снижен по сравнению с 1-П. При учете отдельных показателей распространенности рака яичников выяснилось, что внут-риопухолевое содержание ММП-2 и ММП-7 достоверно выше при двустороннем поражении яичников, чем при одностороннем. Противоположная тенденция отмечена для ММП-9, но эти различия не достигли уровня статистической значимости. Выраженной взаимосвязи содержания исследуемых маркеров в ткани первичной опухоли с характером диссеминации рака яичников по брюшине и наличием и размером метастазов в большом сальнике, а также локализацией отдаленных метастазов не обнаружено. Только уровень ММП-7 был достоверно выше в опухолях больных с про-с овидными очагами в брюшной стенке, чем в опухолях больных с более крупными диссеминатами.

Образование асцита - одно из наиболее характерных свойств рака яичников. Экспериментальные исследования свидетельствуют о том, что различные представители семейства ММП в комплексе с факторами роста, ангиогенными факторами, белками клеточной поверхности могут активно участвовать в процессах, ведущих к образованию асцита и появлению опухолевых клеток в асцитической жидкости. Отмечено достоверное увеличение уровня ММП-2 в опухолях больных с объемом асцита до 5 л по сравнению с опухолями больных, у которых асцита не было. В то же время в опухолях у больных с большим количеством асцита уровень этой ММП не отличался от такового у пациенток без асцита. Все исследованные мат-риксные металлопротеиназы и ТИМП обнаружены также в асцитической жидкости больных раком яичников. Выявлена обратная зависимость между количеством асцита и содержанием в нем ММП-2, при этом содержание ММП-2 и ММП-7 в асците положительно коррелировало с содержанием соответствующих протеаз в опухолевой ткани.

Таким образом, однозначной взаимосвязи, свидетельствующей об увеличении уровня ММП в ткани рака яичников по мере распространения опухолевого процесса, выявить не удалось. В ряде случаев наблюдалось даже снижение уровня некоторых ММП при наиболее распространенном процессе: например, уровень ММП-7 снижался при массивной диссеминации по брюшине, а уровень ММП-9 - при двустороннем поражении яичников. В этой связи можно предположить, что продукция ММП в большей степени необходима опухолям на начальных или промежуточных стадиях развития, а при распространенном процессе потребность в протеолитиче-ской деградации внеклеточного матрикса снижается.

Важными факторами, определяющими течение рака яичников, являются гистологическое строение и степень дифференцировки опухоли. Как и ожидалось, более половины исследованных нами первичных эпителиальных раков яичников принадлежали к серозному типу. В опухолях этого гистологического типа отмечено достоверное увеличение уровня ММП-2 и снижение уровня ТИМП-1 по сравнению с эндометриоидными и муциноз-ными новообразованиями. Низкие уровни всех ММП и ТИМП-1 выявлены также в светлоклеточных раках. Несмотря на то, что распределение опухолей по степени дифференцировки было достаточно равномерным, что позволяло провести значимый статистический анализ, достоверной взаимосвязи показателей экспрессии ММП и ТИМП со степенью дифференцировки рака яичников обнаружено не было.

При анализе взаимосвязи исследованных показателей с состоянием репродуктивной функции и некоторыми другими факторами гинекологического анамнеза пациенток была отмечена тенденция к снижению уровня всех маркеров в опухолях больных старшей возрастной группы, находящихся в менопаузе. Это наблюдение косвенно отражает тот факт, что у пожилых больных злокачественный процесс протекает, как правило, медленнее и менее агрессивно, чем у более молодых.

В целом, можно заключить, что четкой ассоциации уровня экспрессии ММП и ТИМП в опухоли с основными клинико-морфологическими факторами неблагоприятного прогноза рака яичников не выявлено, однако возможно, что при дальнейшем наблюдении за обследованными больными, данные биомаркеры смогут приобрести значение в качестве независимых прогностических факторов, определяющих как течение заболевания в целом, так и его чувствительность к отдельным видам лечения.

Одной из важных задач этого исследования было выяснение вопроса о том, в какой мере изменение продукции ММП и ТИМП в опухолевой ткани отражается на их концентрации в периферической крови. Проанализировав корреляционные взаимосвязи тканевого и сывороточного уровня исследуемых маркеров, мы выявили в общей группе обследованных больных не сильные, но достоверные положительные корреляции уровней всех трех ММП в сыворотке крови и в опухолевой ткани, усиливавшиеся в группе больных раком и не проявлявшиеся у больных доброкачественными и пограничными новообразованиями яичников. Таким образом, можно предположить, что у больных раком яичников концентрация ММП-7, ММП-9 и ММП-2 в периферической крови, в определенной степени отражает уровень экспрессии этих белков в опухолевой ткани, а при доброкачественных и пограничных новообразованиях яичников сывороточные ММП, скорее всего, имеют неопухолевое происхождение.

Другим важным аспектом изучения уровня биологических маркеров в сыворотке крови является возможность их использования для дифференциальной диагностики и/или мониторинга эффекта лечения. При исследовании сыворотки крови нами дополнительно была обследована контрольная группа практически здоровых женщин. Продемонстрировано достоверное увеличение содержания ММП-7 и ТИМП-1 в сыворотке крови больных раком яичников по сравнению с контролем и пациентками с доброкачественными и пограничными новообразованиями. Содержание ММП-9 в сыворотке крови больных раком яичников, обследованных до проведения специфического лечения, также было достоверно выше, чем в группе контроля и у пациенток с доброкачественными опухолями. В то же время, содержание ММП-2 в сыворотке крови больных раком и пограничными опухолями яичников сывороточный уровень ММП-2 был достоверно ниже, чем в контроле, а у больных доброкачественными новообразованиями яичников достоверно не отличалось от показателей контрольной группы. Это соотношение соответствует закономерностям, выявленным для опухолевых тканей.

При сравнении показателей сыворотки крови больных раком яичников, обследованных до и после проведения специфического лечения, обнаружено, что после лечения происходит относительная нормализация показателей ММП-9 и ММП-2: в первом случае снижение, а во втором - повышение уровня маркера.

В целом, анализ содержания матриксных металлопротеиназ и ТИМП в сыворотке крови показал, что наиболее перспективным маркером для дифференциальной диагностики пограничных, доброкачественных и злокачественных новообразованиями яичников является ММП-7. Уровень этого маркера повышен относительно контроля только у больных раком яичников. Превышение верхней границы нормы (4,67 нг/мл), соответствующей специфичности 95%, отмечено у 38 из 49 первичных больных раком, т.е. чувствительность относительно контроля составляет 78%.

ММП-7 оказалась и самым значимым маркером при анализе взаимосвязи показателей сыворотки крови с клинико-морфологическими особенностями рака яичников. Ее уровень достоверно положительно коррелировал с ключевыми показателями распространенности рака яичников: стадией заболевания в целом, размером первичной опухоли по данным УЗИ, наличием и характером диссеминации по брюшине и метастазов в большом сальнике, наличием и количеством асцита. Уровень ММП-7 в сыворотке крови коррелировал также и с ее концентрацией в асцитической жидкости. Кроме того, только уровень этой ММП был положительно ассоциирован с показателями классического сывороточного маркера рака яичников - СА-125.

Таким образом, проведенное иммуноферментное исследование содержания нескольких матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов в опухолевой ткани, сыворотке крови и асцитической жидкости больных раком, пограничными и доброкачественными новообразованиями яичников показало координированное увеличение тканевой экспрессии и сывороточной концентрации ММП-7 при раке яичников, нарастающее по мере распространения заболевания. Противоположная направленность изменений обнаружена для другой металлопротеиназы - ММП-2. В меньшей степени выражены изменения в показателях содержания ММП-9 и ТИМП 1 и 2 типа. Наиболее значимым маркером рака яичников следует признать ММП-7 (матрилизин), которая помимо разрушения компонентов внеклеточного матрикса, участвует также в процессинге некоторых биологически важных молекул клеточной поверхности.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Левкина, Наталья Васильевна, 2011 год

1. Герштейн, Е.С. Клиническая роль системы активации плазминогена в опухолях человека / Е.С. Герштейн, Ш.Ж. Талаева, Н.Е. Кушлинский // Молекулярная медицина.- 2007. Vol. (1). - С. 4-8.

2. Давыдов, М.И. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ (состояние онкологической помощи, заболеваемость и смертность) / М.И. Давыдов, Е.М. Аксель// Вестник РОНЦ им. Н. Н. БлохинаРАМН. 2009 .- Vol. 20 (3 (прил. 1)). - С. 52-122.

3. Жорданиа, К.И. Злокачественные эпителиальные опухоли яичников / К.И. Жорданиа//Современная онкология. 2000. - Vol. 2 (2).-С. 5155.

4. Жорданиа, К.И. Злокачественные новообразования яичников // Энциклопедия клинической онкологии. 2004. - Vol. - С. 356-358

5. Жорданиа, К.И. Опухоли яичников / К.И Жордания, Н.Е. Кушлинский , В.П. Козаченко // Клиническая онкогинекология. Руководство для врачей под редакцией проф. В.П. Козаченко, М., Медицина, Глава 11. -2005.-Vol.-Р. 220-269.

6. Кадагидзе З.Г., Шелепова В.М. Роль опухолеассоциированных антигенов в диагностике онкогинекологических заболеваний. // В кн: Клиническая онкогинекология Руководство для врачей Под редакцией проф В.П. Козаченко, М., Медицина, гл. 4.- 2005.-Vol. С. 49-61.

7. Урманчеева, А.Ф. Вопросы эпидемиологии и диагностики рака яичников / А.Ф.Урманчеева, И.Е. Мешкова // Практическая онкология.-2000.- Vol. (4). С. 7-8.

8. Acar, A. Clinical significance of serum MMP-2 and MMP-7 in patients with ovarian cancer / A. Acar, A. Onan, U. Coskun et al. // Med. Oncol. -2008. Vol. 25 (3). - P. 279-283.

9. Adachi, Y. Retinoic acids reduce matrilysin (matrix metalloproteinase 7) and inhibit tumor cell invasion in human colon cancer / Y. Adachi, F. Itoh , H. Yamamoto et al. // Tumour Biol. 2001. - Vol. 22 (4). - P. 247-253.

10. Ahmed, N. Molecular pathways regulating EGF-induced epithelio-mesenchymal transition in human ovarian surface epithelium / N. Ahmed, S. Maines Bandiera , M.A. Quinn et al. // Am. J. Physiol. Cell Physiol. -2006. - Vol. 290 (6). - P. 1532 -1542.

11. Ala-aho R. Targeted inhibition of human collagenase-3 (MMP-13) expression inhibits squamous cell carcinoma growth in vivo / R. Ala-aho M.Ahonen, S.J.Georgeet al. // Oncogene.- 2004. Vol. 23 (30). - P. 5111 -5123.

12. Ardi, V.C. Neutrophil MMP-9 proenzyme, unencumbered by TIMP-1, undergoes efficient activation in vivo and catalytically induces angiogenesis via a basic fibroblast growth factor (FGF-2)/FGFR-2 pathway / V. C. Ardi,

13. P.E. Van den Steen, G. Opdenakker et al. // Biol. Chem. 2009. - Vol. 284 (38). - P. 2554 - 2566.

14. Australian Institute of Health and Welfare (AIHW) A.A.o.C.R.A. Cancer survival in Australia, 2001. Parti: National summary statistics. // Canberra; 2001 Report No: AIHW Cat. No CAN. 13. 2001. Vol. - P.342 -346.

15. Baker, A.H. Metalloproteinase inhibitors: biological actions and therapeutic opportunities / A.H. Baker, D.R. Edwards, G. Murphy G. // J. Cell Sci. -2002. Vol. 115 (Pt 19). - P. 3719 - 3727.

16. Bast, R.C. New tumor markers: CA125 and beyond / R.C. Bast, D. Badg-well, Z. Lu et al. // Int. J. Gynecol. Cancer. 2005. - Vol. 15 Suppl. 3. - P. 274-281.

17. Bast, R.C. Cell growth regulation in epithelial ovarian cancer / R.C. Bast, Boyer C.M. Jacobs et al. // Cancer. 1993. - Vol. 71 (4 Suppl.) - P. 1597 -1601.

18. Belotti, D. Vascular endothelial growth factor stimulates organ-specific host matrix metalloproteinase-9 expression and ovarian cancer invasion / D. Belotti, C. Calcagno, A. Garofalo et al. // Mol. Cancer Res. 2008. -Vol. 6 (4). - P. 525 - 534.

19. Berrino, F. The EUROCARE study of survival of cancer patients in Europe: aims, current status, strengths and weaknesses / F. Berrino, G. Gatta, M. Sant, R. Capocaccia // Eur. J. Cancer. 2001. - Vol. 37 (6). - P. 673 -677.

20. Brand, K. Treatment of colorectal liver metastases by adenoviral transfer of tissue inhibitor of metalloproteinases-2 into the liver tissue / K. Brand,

21. A.H. Baker, A. Perez-Canto et al. // Cancer Res. 2000. - Vol. 60 (20).-P. 5723 - 5730.

22. Cai, K.Q. Prominent expression of metalloproteinases in early stages of ovarian tumorigenesis /K.Q. Cai, W.L. Yang , C.D. Capo-Chichi et al. // Mol. Carcinog. 2007. - Vol. 46 (2). - P. 130 -143.

23. Celiker, M.Y. Inhibition of Wilms' tumor growth by intramuscular administration of tissue inhibitor of metalloproteinases-4 plasmid DNA / M.Y. Celiker, M. Wang, E. Atsidaftos et al. // Oncogene. 001. - Vol. 20 (32). -P. 4337 - 4343.

24. Davidson, B. Expression of membrane-type 1, 2, and 3 matrix metalloproteinases messenger RNA in ovarian carcinoma cells in serous effusions / B. Davidson, I. Goldberg, A. Berner et al. // Am J Clin Pathol. -2001. Vol. 115 (4). - P. 517 - 524.

25. Davidson, B. High levels of MMP-2, MMP-9, MT1-MMP and TIMP-2 mRNA correlate with poor survival in ovarian carcinoma / B. Davidson, I. Goldberg, W.H. Gotlieb et al. // Clin. Exp. Metastasis. 1999. - Vol. 17 (10). - P.799 - 808.

26. Davidson. B. The prognostic value of metalloproteinases and angiogenic factors in ovarian carcinoma / B. Davidson, I. Goldberg, W.H. Gotlieb et al. // Mol Cell Endocrinol. 2002. - Vol. 187 (1-2). - P. 39 - 45.

27. Demeter, A. Molecular prognostic markers in recurrent and in nonrecurrent epithelial ovarian cancer / A. Demeter, I. Sziller, Z. Csapo et al. // Anticancer Res. 2005. - Vol. 25 (4). - P. 2885 - 2889.

28. Denkert, C. Cytokine-suppressive anti-inflammatory drugs (CSAIDs) inhibit invasion and MMP-1 production of ovarian carcinoma cells / C. Denkert, I. Koch, S. Berger et al. // Cancer Lett. 2003. - Vol. 195 (l).-P. 101 -109.

29. Deryugina, E.I. Matrix metalloproteinases and tumor metastasis / E.I. De-ryugina, J.P. Quigley // Cancer Metastasis Rev. 2006. - Vol. 25 (1). -P. 9 -34.

30. Deryugina, E.I. Pleiotropic roles of matrix metalloproteinases in tumor an-giogenesis: contrasting, overlapping and compensatory functions / E. I. Deryugina, J.P. Quigley // Biochim Biophys Acta. 2010. - Vol. 1803 (1). - P. 103 -120.

31. Duffy, M.J. Proteases as prognostic markers in cancer / M.J. Duffy// Clin. Cancer Res. -1996. Vol. 2 (4). - P. 613 - 618.

32. Duffy, M.J. Urokinase-type plasminogen activator: a potent marker of metastatic potential in human cancers // Biochem. Soc. Trans. 2002. -Vol. 30 (2). - P. 207 - 210.

33. Duffy, M.J. Cancer invasion and metastasis: changing views/ M. J. Duffy, P.M/McGowan, W.N. Gallagher // J Pathol. 2008. - Vol. 214 (3). - P. 283-293.

34. Egeblad, M. New functions for the matrix metalloproteinases in cancer progression / M. Egeblad, Z. Werb // Nat. Rev. Cancer. 2002. - Vol. 2 (3). - P. 16 -174.

35. Ellerbroek, S.M. Functional interplay between type I collagen and cell surface matrix metalloproteinase activity / S.M. Ellerbroek, Y.I. Wu, C.M. Overall // J. Biol. Chem. 2001. - Vol. 276 (27). - P. 24833-24842.

36. Fishman, D.A. Lysophosphatidic acid promotes matrix metalloproteinase (MMP) activation and MMP-dependent invasion in ovarian cancer cells /

37. D.A. Fishman, Y. Liu, S.M. Ellerbroek S.M. // Cancer Res.-2001. Vol. 61 (7). - P. 3194-3199.

38. Furuya M. Analysis of matrix metalloproteinases and related tissue inhibitors in cystic fluids of ovarian tumors // Hokkaido Igaku Zasshi.-1999.-Vol. 74 (2). P. 145-155.

39. Furuya, M. Expression of matrix metalloproteinases and related tissue inhibitors in the cyst fluids of ovarian mucinous neoplasms / M. Furuya, H. Ishikura, Y. Kawarada et al. // Gynecol. Oncol. 2000. - Vol. 78 (2). - P. 106-112.

40. Furuya, M. Clarification of the active gelatinolytic sites in human ovarian neoplasms using in situ zymography / M. Furuya, H. Ishikura, R. Nemori et al. // Hum. Pathol. -2001.-Vol. 32 (2).-P. 163-168.

41. Furuya, M. Analyses of matrix metalloproteinases and their inhibitors in cyst fluid of serous ovarian tumors / M. Furuya, H. Ishikura, Y. Ogawa et al. // Pathobiology. 2000. - Vol. 68 (6). - P. 239-244.

42. Gabelloni, P. Inhibition of metalloproteinases derived from tumours: new insights in the treatment of human glioblastoma / P. Gabelloni, E. Da Poz-zo, S. Bendinelli et al. // Neuroscience. 2010. - Vol. 168 (2). - P. 514-522.

43. Goldman, S. MMPS and TIMPS in ovarian physiology and pathophysiology / S. Goldman, E. Shalev // Front. Biosci. 2004. - Vol. 9. - P. 24742483.

44. Hu, X.X. Expression of matrix metalloproteinases-9,2,7,and tissue inhibitor of metalloproteinases-1,2,3 mRNA in ovarian tumors and their clinical significance / X.X.Hu, L. Li, D.R. Li et al. // Ai Zheng. 2004. -Vol. 23 (10). -P. 1194-1198.

45. Hu, X.X. Inhibitory effects of antisense MMP-9 oligodeoxynucleotides on invasiveness and adherence of ovarian cancer cells / X.X.Hu, L. Li, D.R.Li D.R. et al. // Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 2006. - Vol. 28 (9). -P. 662665.

46. Jemal, A. Cancer statistics, 2003 / A. Jemal, T. Murray, A. Samuels et al. // C. A. Cancer J. Clin. 2003. - Vol. 53 (1). - P. 5-26.

47. Kamat, A.A. The clinical relevance of stromal matrix metalloproteinase expression in ovarian cancer / A.A. Kamat, M. Fletcher, L.M. Gruman et al // Clin. Cancer Res. 2006. - Vol. 12 (6). - P. 1707-1714.

48. Kenny, H.A. The initial steps of ovarian cancer cell metastasis are mediated by MMP-2 cleavage of vitronectin and fibronectin / H.N. Kenny, S. Kaur, L.M. Coussens // J. Clin. Invest. 2008. - Vol. 118 (4). - P. 1367-1379.

49. Kenny, H.A. MMP-2 functions as an early response protein in ovarian cancer metastasis / H.A. Kenny, E. Lengyel // Cell Cycle. 2009. - Vol. 8 (5). - P. 683-688.

50. Kim, T.J. High expression of tissue inhibitor of metalloproteinase-2 in serous ovarian carcinomas and the role of this expression in ovarian tumorige-nesis / T.J. Kim, S.B. Rho, Y.L. Choi et al. // Hum. Pathol. 2006. - Vol. 37 (7). - P. 906-913.

51. Lau, M.T. Gonadotropins Induce Tumor Cell Migration and Invasion by Increasing Cyclooxygenases Expression and Prostaglandin E2 Production in Human Ovarian Cancer Cells / M.T. Lau, A.S. Wong, P.S. Leung // Endocrinology. 2010. - Vol. 92 - P.765-767.

52. Liotta, L.A. Metastatic potential correlates with enzymatic degradation of basement membrane collagen / L.A. Liotta, K. Tryggvason, S. Garbisa et al. // Nature. 1980. - Vol. 284 (5751). - P. 67-68.

53. Lutgendorf, S.K. Biobehavioral influences on matrix metalloproteinase expression in ovarian carcinoma / S.K. Lutgendorf, D.M. Lamkin, N.B. Jennings et al. // Clin. Cancer Res. 2008. - Vol. 14 (21). - P. 6839-6846.

54. Maatta, M. Matrix metalloproteinases 2 and 9 and their tissue inhibitors in low malignant potential ovarian tumors / M. Maatta, M. Santala, Y. Soini et al. // Tumour Biol. 2004. - Vol. 25 (4).- P. 188-192.

55. Maatta, M. Matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and -9 (MMP-9) and their tissue inhibitors (TIMP-1 and TIMP-2) in differential diagnosis between low malignant potential (LMP) and malignant ovarian tumours / M. Maatta,

56. A. Talvensaari-Mattila, T. Turpeenniemi-Hujanen // Anticancer Res. -2007. Vol. 27 (4C). - P. 2753-2758.

57. Malemud, CJ. Matrix metalloproteinases (MMPs) in health and disease: an overview / C.J. Malemud // Front. Biosci. 2006. - Vol. 11. - P. 1696-1701.

58. Meinhold-Heerlein, I. An integrated clinical-genomics approach identifies a candidate multi-analyte blood test for serous ovarian carcinoma /1. Meinhold-Heerlein, D. Bauerschlag, Y.Zhou et al. // Clin. Cancer Res.-2007. -Vol. 13 (2 Pt 1). P. 458-466.

59. Moore, R.G. The use of multiple novel tumor biomarkers for the detection of ovarian carcinoma in patients with a pelvic mass / R.G. Moore, A.K. Brown, M.C. Miller et al. // Gynecol. Oncol. 2008. - Vol. 108 (2). - P. 402-408.

60. Moore, R.G. Current state of biomarker development for clinical application in epithelial ovarian cancer / R.G. Moore, S. Mac Laughlan, R.C. Bast // Gynecol. Oncol. 2010. - Vol. 116 (2). - P. 240-245.

61. Murphy, G. Progress in matrix metalloproteinase research / G. Murphy, H. Nagase // Mol. Aspects Med. 2008. - Vol. 29 (5). - P. 290-308.

62. Nakajima, M. Serum and plasma M(r) 92,000 progelatinase levels correlate with spontaneous metastasis of rat 13762NF mammary adenocarcinoma /

63. M. Nakajima, D.R. Welch, D.M. Wynn et al. // Cancer Res.-1993. Vol. 53 (23). - P. 5802-5807.

64. Naylor, M.S. Expression and activity of MMPS and their regulators in ovarian cancer / M.S. Naylor, G.W. Stamp, B.D. Davies // Int. J. Cancer. -1994. Vol. 58 (1). - P. 50-56.

65. Nelson, A.R. Matrix metalloproteinases: biologic activity and clinical implications / A.R. Nelson, B. Fingleton, M.L. Rothenberg // J. Clin. Oncol. -2000. Vol. 18 (5). - P. 1135-1149.

66. Nicosia, S.V. Oncogenic pathways implicated in ovarian epithelial cancer / S.V. Nicosia, W. Bai, J.Q. Cheng et al. // Hematol. Oncol. Clin. North Am.- 2003. Vol. 17 (4). - P. 927-943.

67. Okamoto, T. Increased expression of tissue inhibitor of metalloproteinase-2 in clear cell carcinoma of the ovary / T. Okamoto, R. Niu, S. Yamada // Mol. Hum. Reprod .- 2003. Vol. 9 (10). - P. 569-575.

68. Ozalp, S. Prognostic value of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase-B) expression in epithelial ovarian tumors / S. Ozalp, H.M. Tanir, O.T. Yalcin et al. // Eur. J. Gynaecol. Oncol. 2003. - Vol. 24 (5). - P. 417-420.

69. Paulsen, T. Expression of matrix metalloproteinase-2 in serous borderline ovarian tumors is associated with noninvasive implant formation / T. Paulsen, A.H. Ree, J. Kaern et al. // Eur. J. Gynaecol. Oncol. 2007. - Vol. 28 (5).-P. 356-363.

70. Perigny, M. Role of immunohistochemical overexpression of matrix metal-loproteinases MMP-2 and MMP-11 in the prognosis of death by ovarian cancer / M. Perigny, I. Bairati, I. Harvey et al. // Am. J. Clin. Pathol. 2008. - Vol. 129 (2). - P. 226-231.

71. Ramnath, N. Matrix metalloproteinase inhibitors / N. Ramnath, P.J. Crea-ven // Curr. Oncol. Rep. 2004. - Vol. 6 (2). - P. 96-102.

72. Rauvala, M. Gelatinases and their tissue inhibitors in ovarian tumors; TIMP-1 is a predictive as well as a prognostic factor / M. Rauvala, U. Puis-tola, T. Turpeenniemi-Hujanen // Gynecol. Oncol. 2005. - Vol. 99 (3). - P. 656-663.

73. Rauvala, M. The value of sequential serum measurements of gelatinases and tissue inhibitors during chemotherapy in ovarian cancer / M. Rauvala, T. Turpeenniemi-Hujanen, U. Puistola // Anticancer Res. 2006. -Vol. 26 (6C). - P. 4779-4784.

74. Ripley, D. Expression of matrix metalloproteinase-26 and tissue inhibitors of metalloproteinase-3 and -4 in normal ovary and ovarian carcinoma / D. Ripley, R. Tunuguntla, L. Susi L. // Int. J. Gynecol. Cancer. 2006. - Vol. 16 (5). - P. 1794-1800.

75. Rodriguez, G.C. Regulation of invasion of epithelial ovarian cancer by transforming growth factor-beta / G.C. Rodriguez, C. Haisley, J. Hurteau et al. // Gynecol. Oncol. 2001. - Vol. 80 (2). - P. 245-253.

76. Sakata, K. Expression of matrix metalloproteinases (MMP-2, MMP-9, MT1-MMP) and their inhibitors (TIMP-1, TIMP-2) in common epithelial tumors of the ovary / K. Sakata, K. Shigemasa, N. Nagai, K. Ohama // Int. J. Oncol. 2000. - Vol. 17 (4). - P. 673-681.

77. Sant, M. EUROCARE-3: survival of cancer patients diagnosed 1990-94-results and commentary / M. Sant, T. Aareleid, F. Berrino et al. // Ann. Oncol. 2003. - Vol. 14 Suppl 5. - P. v61-118.

78. Sawada. K. c-Met overexpression is a prognostic factor in ovarian cancer and an effective target for inhibition of peritoneal dissemination and invasion / K. Sawada, A.R. Radjabi, N. Shinomiya et al. // Cancer Res.-2007. -Vol. 67 (4). P. 1670-1679.

79. Sedlakova, I. Lysophosphatidic acid: an ovarian cancer marker /1. Sedla-kova, J. Vavrova, J. Tosner, L. Hanousek// Eur. J. Gynaecol. Oncol. -2008. -Vol. 29 (5).-P. 511-514.

80. Shield, K. Alpha2betal integrin affects metastatic potential of ovarian carcinoma spheroids by supporting disaggregation and proteolysis / K. Shield, C. Riley, M.A. Quinn et al. // J. Carcinog. 2007. - Vol. 6. - P. 11.

81. Shigemasa, K. Induction of matrix metalloprotease-7 is common in mucinous ovarian tumors including early stage disease / K. Shigemasa, H. Ta-nimoto, K. Sakata et al. // Med. Oncol. 2000. - Vol. 17 (1). - P. 52-58.

82. Sillanpaa, S. Prognostic significance of extracellular matrix metalloprotei-nase inducer and matrix metalloproteinase 2 in epithelial ovarian cancer / S. Sillanpaa, M. Anttila, K. Suhonen et al. // Tumour Biol. 2007.-Vol. 28 (5). - P. 280-289.

83. Sillanpaa, S. Prognostic significance of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in epithelial ovarian cancer / S. Sillanpaa, M. Anttila, K. Voutilainen et al // Gynecol. Oncol. 2007. - Vol. 104 (2). - P. 296-303.

84. Sodek, K.L. MT1-MMP is the critical determinant of matrix degradation and invasion by ovarian cancer cells / K.L. Sodek, M.J. Ringuette, T.J. Brown // Br. J. Cancer. 2007. - Vol. 97 (3). - P. 358-367.

85. Sood, A.K. Stress hormone-mediated invasion of ovarian cancer cells / A.K. Sood, R. Bhatty, A.A. Kamat et al. // Clin. Cancer Res. 2006. -Vol. 12 (2). - P. 369-375.

86. Sood, A.K. Functional role of matrix metalloproteinases in ovarian tumor cell plasticity / A.K. Sood, M.S. Fletcher, J.E. Coffin et al. // Am. J. Obstet. Gynecol. 004. - Vol. 190 (4). - P. 899-909.

87. Sounni, N.E. Membrane type-1 matrix metalloproteinase and TIMP-2 in tumor angiogenesis / N.E. Sounni, M. Janssen, J.M. Foidart // Matrix Biol. 2003. - Vol. 22 (1). - P. 55-61.

88. Tanimoto, H. The matrix metalloprotease pump-1 (MMP-7, Matrilysin): A candidate marker/target for ovarian cancer detection and treatment / H. Tanimoto, L.J. Underwood, K. Shigemasa et al. // Tumour Biol. 1999. -Vol. 20 (2). - P. 88-98.

89. Torng, P.L. Prognostic significance of stromal metalloproteinase-2 in ovarian adenocarcinoma and its relation to carcinoma progression / P.L. Torng, T.L. Mao, W.Y. Chan et al. // Gynecol. Oncol. 2004. - Vol. 92 (2). - P. 559-567.

90. Ulku, A.S. Essential role of Raf in Ras transformation and deregulation of matrix metalloproteinase expression in ovarian epithelial cells / A.S. Ulku, R. Schafer, C.J. Der // Mol. Cancer Res. 2003. - Vol. 1 (14). - P. 10771088.

91. Visintin, I. Diagnostic markers for early detection of ovarian cancer /1. Vi-sintin, Z. Feng, G. Longton et al. // Clin. Cancer Res. 2008. - Vol. 14 (4).- P. 1065-1072.

92. Visse, R. Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloprotei-nases: structure, function, and biochemistry / R. Visse, H. Nagase // Circ. Res. 2003. - Vol. 92 (8). - P. 827-839.

93. Wang, F.Q. Inhibition of matrilysin expression by antisense or RNA interference decreases lysophosphatidic acid-induced epithelial ovarian cancer invasion / F.Q. Wang, Y. Smicun, N. Calluzzo // Mol. Cancer Res. 2006. -Vol. 4 (11).-P. 831-841.

94. Wang, F.Q. Matrilysin (MMP-7) promotes invasion of ovarian cancer cells by activation of progelatinase / F.Q. Wang, J. So, S. Reierstad, D.A. Fish-man // Int. J. Cancer. 2005. - Vol. 114 (1). - P. 19-31.

95. Westermarck, J. Regulation of matrix metalloproteinase expression in tumor invasion / J. Westermarck, V.M. Kahari // FASEB J. 1999. - Vol. 13 (8). - P. 781-792.

96. Wu, M. Construction of antisense MT1-MMP vector and its inhibitory effects on invasion of human ovarian cancer cells / M. Wu M, Y. Shi, L. Xi et al. // J. Huazhong Univ. Sci. Technolog. Med. Sci. 2005. - Vol. 25 (6).- P. 715-717.

97. W, M. Down-regulation of MT1-MMP expression suppresses tumor cell invasion in metastatic human SW626 ovarian cancer cells / M. Wu, G. Xu, L. Xi et al. // Oncol. Rep. 2006. - Vol. 15 (2). - P. 501-505.

98. Wu, X. Activated matrix metalloproteinase-2-a potential marker of prognosis for epithelial ovarian cancer / X. Wu, H. Li, L. Kang et al. // Gynecol. Oncol. 2002. - Vol. 84 (1). - P. 126-134.

99. Zhang, A. Enhanced in vitro invasiveness of ovarian cancer cells through up-regulation of VEGF and induction of MMP-2 / A. Zhang, L. Meng, Q. Wang et al. // Oncol. Rep. 2006. - Vol. 15 (4). - P. 831-836.

100. Zhou, H.Y. Activation of p70S6K induces expression of matrix metallopro-teinase 9 associated with hepatocyte growth factor-mediated invasion in human ovarian cancer cells / H.Y. Zhou, A.S. Wong // Endocrinology. -2006. Vol. 147 (5). - P. 2557-2566.