Клиническое значение линейного и адгезивного фенотипов опухолевых клеток при хроническом лимфолейкозе тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.29, Митина, Татьяна Алексеевна

• Митина, Татьяна Алексеевна
• 2005

Оглавление диссертации Митина, Татьяна Алексеевна

Список сокращений.

Введение.

Введение.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клиническое значение линейного и адгезивного фенотипов опухолевых клеток при хроническом лимфолейкозе»

Цель работы...5

Глава 1. Обзор литературы. Значение экспрессии дифференцировочных антигенов и молекул адгезии в оценке клинического течения хронического лимфолейкоза.8

Роль дифференцировочных антигенов опухолевых лимфоцитов в процессах внеклеточного взаимодействия.8

Иммунофенотипический диагноз.12

Иммунологический фенотип и клинический прогноз.15

Иммунофенотипическая характеристика остаточной опухоли.17

Молекулы адгезии, биологическая роль и клиническое значение.18

Клиническое значение экспрессии FAS/APO (CD95) при лимфопролиферативных заболеваниях.23

Глава 2. Методы исследования.26

Клиническая характеристика больных.26

Определение поверхностных дифференцировочных антигенов и адгезивных молекул на опухолевых клетках периферической крови методом проточной цитофлуорометри.28

Определение концентрации растворимых (s) CD50, CD95, HLA-1.30

Статистическая обработка результатов.30

Глава 3 Клиническое значение иммунологического фенотипа хронического лимфолейкоза.31

Глава 4. Клиническое значение растворимых молекул адгезии (sCD50 — ICAM-3), апоптоза (sCD95) и sHLA класса 1 при хроническом лимфолейкозе, лимфомах и множественной миеломе.56

Заключение.65

Выводы.74

Список литературы.75

Список сокращений.

BKJI - волосатоклеточный лейкоз

ИЛ (IL) - интерлейкин

ЛПЗ - лимфопролиферативное заболевание

МГВ - макроглобулинемия Вальденстрема (иммуноцитома)

Me - медиана

МКА - моноклональные антитела

ММ - множественная миелома

НХЛ - неходжкинские лимфомы

ПХТ - полихимиотерапия

СМЖ - спинномозговая жидкость

ФЛ - фолликулярная лимфома

ХЛЛ - хронический лимфолейкоз

ХПЛЛ — хронический пролимфоцитарный лейкоз

ЦНС - центральная нервная система

CD - кластер дифференцировки cyDl - циклин D1

Ig - иммуноглобулин

MZCL - селезеночная лимфома из клеток маргинальной зоны Pig - патологический иммуноглобулин sCD - растворимый кластер дифференцировки SLVL -селезеночная лимфома из ворсинчатых клеток

Введение

Актуальность проблемы

Изучение иммунологического фенотипа опухолевых клеток при хроническом лимфолейкозе представляет собой важную проблему, имеющую большое значение для получения новых знаний о патогенезе и клиническом течении заболевания. Проблема иммунофенотипической идентификации дифференцировочных антигенов на опухолевых клетках в настояще время вышла за рамки их линейной характеристики и более широко отражает их функцию. Так, опухолевые В-лимфоциты при ХЛЛ, имеющие аберрантный межлинейный фенотип CD19CD5, при контакте со стромой получают сигнал на блокирование апоптоза, что приводит к накоплению их в костном мозге [101]. Растворимый CD23 (sCD23), мембранный аналог которого (CD23) является ключевым линейным диагностическим маркером хронического лимфолейкоза, участвует так же в процессе трансэндотелиального перемещения опухолевых лимфоцитов. Антиген CD40, представленный на опухолевых В-лимфоцитах и его лиганд CD 154 усиливают экспрессию BCL-2 блокирующего апоптоз [122]. Трисомия-12 при ХЛЛ сопровождается высокой экспрессией CD1 la, CD20, CD38 и Ig[71],

Стабильно воспроизводимый признак опухолевой клетки при лимфопролиферативных заболеваниях, каким является иммунологический фенотип, имеет большое значение для клинической практики. В этой связи следует указать на имеющиеся иммунофенотипические диагностические стандарты, используемые в клинике для дифференциальной диагностики и мониторинга остаточной опухоли в процессе противоопухолевой терапии. Экспрессия определенных CD- маркеров при В-ХЛЛ достоверно связана с вариантами клинического течения заболевания. Высокие уровни экспрессии CD 14 соответствовали меньшей выживаемости, а повышение уровня sCD23 при А стадии ХЛЛ связано с высоким риском прогрессии. Высокая плотность на опухолевых лимфоцитах CD20 связана с меньшей выживаемостью как при ХЛЛ так и при ММ, а высокий уровень CD 19 при ММ коррелирует с большей выживаемостью. Высокий риск неблагоприятного клинического прогноза заключен в повышенной экспрессии CD38 как при ХЛЛ, так и при ММ. Более прогрессивное течение В-ХЛЛ выявлено у больных с внутрилинейной аберрантной коэкспрессией CD8+CD57+ [57, 77, 146, 163]. Изучение экспрессии молекул адгезии при ЛПЗ, одного из важных аспектов патогенеза опухолевого роста, представляет исключительный интерес для клинической гематологии. В рамках этих исследований по существу дается характеристика адгезивно-лигандной системы опухолевых клеток. Серьезным прогрессом в изучении данной проблемы следует считать выявление на строме лимфоидных органов и костном мозге при ЛПЗ CD54 (ICAM-1) и CD50 (ICAM-3), являющимися межклеточными адгезивными молекулами семейства Ig, а так же установление лиганда для CD38, которым является CD31 (РЕСАМ-1) представленный на эндотелии сосудов, тромбоцитах и строме.

В результате у исследователей появилась возможность для системного клинико-иммунологического анализа результатов экспрессии на опухолевых клетках при ХЛЛ и ЛПЗ молекул адгезии семейства |32-интегринов (LFA-1 - CD 18; Мас-1 - CD lib), которые являются лигандами стромальных CD54 и CD50. Кроме того, изучение растворимых адгезивных молекул (sCD50), позволяет более полно оценивать процесс адгезивно-лигандного взаимодействия опухолевых клеток и стромы.

Цель работы

Клиническая и иммунофенотипическая характеристика линейно-адгезивного фенотипа лимфоцитов периферической крови у больных с хроническим лимфолейкозом. Задачи исследования

1. Определить иммунологический фенотип хронического лимфолейкоза на основе изучения количественной экспрессии мембранных дифференцировочных антигенов на лимфоцитах периферической крови.

2. Изучить коэкспрессию молекул адгезии семейства (32-интегринов (CDlib, CD 18), семейства иммуноглобулинов (CD50) и CD38 на опухолевых В-лимфоцитах крови различных CD-типов и Т-лимфоцитах при хроническом лимфолейкозе.

3. Разработать функциональную модель трансэндотелиальной миграции лимфоцитов периферической крови при хроническом лимфолейкозе с учетом их мембранной адгезивной характеристики и концентрации растворимых CD50 в сыворотке крови.

4. Определить клиническое значение экспрессии линейных и адгезивных антигенов на лимфоцитах периферической крови, а так же растворимых HLA-1 (sHLA-1) в сыворотке у больных с хроническим лимфолейкозом и множественной миеломой.

Научная новизна

Иммунологический фенотип В-хронического лимфолейкоза был сформулирован на основе количественной экспрессии дифференцировочных антигенов, что позволяет оценить воспроизводимость каждого антигена и следовательно его точную диагностическую ценность. Установленное распределение молекул адгезии CD lib, CD 18, CD 50, CD38 на В-лимфоцитах опухолевого клона и на Т-лимфоцитах позволило впервые сформулировать понятие трансэндотелиального вектора и связать его с различными вариантами клинического течения хронического лимфолейкоза. Новыми являются результаты, установившие связь экспрессии CD19 и CD1 lb/CD18 отношения с выживаемостью при множественной миеломе. Получен новый интегральный показатель массы опухоли при хроническом лимфолейкозе и множественной миеломе (sHLA-1), динамика концентрации которого в сыворотке крови может использоваться для оценки результатов противоопухолевой терапии. Научно-практическая ценность

Полученные результаты содержат новые сведения, объясняющие механизм диссеминации опухолевых клеток при хроническом лимфолейкозе и связанные с этим отдельные клинические варианты течения заболевания.

Практическая ценность работы заключается в том, что полученные результаты могут использоваться в непосредственной клинической практике для дифференциальной диагностики лимфопролиферативных заболеваний, оценки редукции опухоли в процессе противоопухолевой терапии и для клинического прогноза. Положения выносимые на защиту

1. На опухолевых В- и Т-лимфоцитах при ХЛЛ коэкспрессированы молекулы адгезии.

2. Адгезивный фенотип лимфоцитов крови при ХЛЛ формирует трансэндотелиальный или стромальный вектор, влияющий на их распределение в организме.

3. Молекулы адгезии и молекулы линейной дифференцировки являются прогностически важными факторами выживаемости пациентов с ХЛЛ и ММ, а растворимые HLA-1 (sHLA-1) интегрально отражают величину массы опухоли.

Внедрение

Результаты исследования внедрены в практику отделения клинической гематологиии иммунотерапии Московского областного научно-исследовательского клинического института им. М.Ф. Владимирского и гематологических отделений центральных районных больниц Московской области. Публикации

По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ.

Апробация диссертации проведена на научной конференции Московского областного научно-исследовательского клинического института им. М.Ф.Владимирского с участием сотрудников отделения клинической гематологии и иммунотерапии, отделения гастроэнтерологии, клинической лаборатории, лаборатории дифференцировки. лимфоцитов ГНЦ Институт имунологии МЗ РФ, лаборатории эксперементальной диагностики и биотерапии опухолей НИИ ЭДиТО РОНЦ им. Н.Н.

Блохина РАМН. Материалы диссертации доложены на симпозиуме " Морфологические, иммунологические и молекулярно-биологические аспекты идентификации гемобластозов и родственных заболеваний (сентябрь 1999, г. Адлер) и Всеросийской научно-практической конференции " Актуальные вопросы гематологии и трансфузиологии" (Санкт-Петербург, июнь 2000).

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 97 страницах машинописного текста, иллюстрирована 19 таблицами и 4 рисунками. Состоит из введения, 4 глав, заключения, выводов. Библиографический указатель включает 189 источников.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Митина, Татьяна Алексеевна

Выводы.

1. Установлена коэкспрессия на лимфоцитах опухолевого клона при В-хроническом лимфолейкозе адгезивных молекул CD18 (LFA-1), CD50 (ICAM-3), CD38.

2. Определен линейно-адгезивный фенотип опухолевых лимфоцитов при В-хроническом лимфолейкозе CD20+CD18+; CD21+CD18+CD50+; CD22+CD50+; CD23+CD38+. He выявлена коэкспрессия адгезивных молекул на опухолевых клетках с фенотипом CD19+CD5+.

3. Т-лимфоциты при В-ХЛЛ, не относящиеся к опухолевому клону, коэкспрессировали молекулы адгезии CDllb (Мас-1) и CD50 (ICAM-3): CD3+CDllb+CD50+; CD8+CDllb+.

4. Сформулировано понятие трансэндотелиального и стромального векторов перераспределения В- и Т-лимфоцитов в зависимости от их адгезивного фенотипа.

5. При костномозговой форме В-хронического лимфолейкоза экспрессия CD 18 и CD38 на опухолевых клетках достоверно выше, чем при лейкемическом варианте болезни.

6. Степень увеличения селезенки при В-хроническом лимфолейкозе связана с большей экспрессией адгезивной молекулы CD1 lb (Мас-1) на Т-лимфоцитах, что означает их участие в формировании спленомегалии.

7. Тромбоцитопения при В-хроническом лимфолейкозе ассоциирована с высокими показателями CD 18 и низкими значениями CD38 на опухолевых В-лимфоцитах. Не выявлено связи экспрессии изучаемых адгезивных молекул с анемическим синдромом.

8. Установлена прямая корреляционная связь между показателем массы опухоли и концентрацие растворимых HLA-1 (sHLA-1) при В-хроническом лимфолейкозе и множественной миеломе. Сывороточная концентрация молекулы адгезии CD50 (sCD50) при В-хроническом лимфолейкозе была достоверно ниже значений контроля.

Заключение

Исследование иммунологического фенотипа опухолевых лимфоцитов при ХЛЛ остается важным и перспективным направлением в клинической гематологии. Изучение линейных дифференцировочных антигенов опухолевых клеток позволяет уточнить патогенез заболевания, понять закономерности межклеточных взаимодействий. В итоге иммунофенотипирование направлено на более точную систематизацию ЛПЗ и более совершенную клиническую диагностику. За период 1998-2002 гг. опубликовано большое количество работ по данной проблеме, что свидетельствует об актуальности затронутой темы. Выделены наиболее диагностически значимые иммунофенотипические характеристики для ряда нозоологических форм ЛПЗ [13,17,30,43,111,114]. Так при изучении иммунологического фенотипа опухолевых лимфоцитов при ХЛЛ отмечен ряд опорных маркеров, позволяющих с большой долей вероятности прогнозировать течение данного заболевания и, следовательно, оптимизировать подходы и принципы к его лечению.

Установлено, что опухолевый клон CD5 -позитивных лимфоцитов при контакте со стромой костного мозга угнетает апоптоз при ХЛЛ, что ведет к накоплению клеток в костном мозге [161]. Преимущественное отличие абберантных B-CD5+ -клеток от обычных В-лимфоцитов состоит в том, что при иммунном ответе в их V-генах не повышается частота мутаций и вариабельность продуцируемых ими антител ограничивается репертуаром зародышевых V-генов [166, 109]. Эти клетки не подвергаются селекции и служат источником естественных полиспицифических IgM-аутоантител, играя важную роль в развитии аутоимунной патологии при лимфопролиферативных процессах [25, 182]. Взаимодействие CD40+CD154+ лимфоцитов дает сигнал на выживание опухолевых лимфоцитов при ХЛЛ, путем блокирования FAS-L-системы за счет индукции BCL-2 экспрессии в лимфоцитах зародышевых центров [122]. Отмечено, что экспрессия CD40, CD27 и его лиганда CD70 - является неблагоприятным фактором в течении заболевания, так как представляет собой биологическую основу для прогрессии ЛПЗ [189]. Двойная коэкспрессия CD79b и CD5 на опухолевых лимфоцитах снижает функцию антигенпрезентирующих клеток, вызывая возникновение иммунодефицитных состояний при ХЛЛ. Установлено участие растворимой молекулы sCD23 в формировании трансэндотелиальной миграции лимфоцитов. А высокие уровни селектина и sCD23 указывают на активность процесса инфильтрации опухолевыми клетками различных органов при ХЛЛ [30,57,162]. Изучение функции HLA антигенов I и II классов показало их прямую количественную зависимость от опухолевой массы при

ЛПЗ [105]. Трисомия - 12 при ХЛЛ совпадает с высокой экспрессией CD1 la, CD20, FMC7 и CD38. Отношение CD4/CD8<1 совпадает с повышением количества CD57, что вызывает апоптоз в иммунокомпетентных клетках и разрушает их [45,66,168]. Описаны случаи В-ХЛЛ, протекающие с высоким уровнем экспрессии CD 14, характеризующиеся тяжелым течением заболевания и небольшой выживаемостью. Так же связана с короткой безрецидивной выживаемостью и экспрессия CD25 и CD38 антигенов [136]. Новые данные уточняющие патогенез ММ получены благодаря исследованиям линейного иммунологического фенотипа опухолевых клеток. Так в литературе описана большая группа иммунологических маркеров, являющихся ценными диагностическими и прогностическими показателями при ММ. Отмечено, что высокие уровни продукции ИЛ-6, опосредованы влиянием CD40+ через лигандные механизмы (CD 126 и CD 130) [10]. Взаимодействие CD38 и CD31 обеспечивает связь опухолевых клеток со стромой костного мозга и эндотелием [7,177]. Экспрессия CD23 сдерживает опухолевый рост, тогда как низкое количество CD23 -позитивных клеток характеризует агрессивное течение ММ. Большой процент CD14+ лимфоцтов совпадал с тяжелым течение болезни и коррелировал с высокой продукцией ИЛ-6[154]. Отмечена более низкая выживаемость пациентов с ММ, у которых была выявлена экспрессия CD20. Высокая концентрация sCD38 при ММ может рассматриваться как фактор тяжелого течения болезни, установлена его обратная корреляция с уровнем гемоглобина. Также высокий уровень мембранного CD38 наблюдался у пациентов с выраженной неврологической симптоматикой, в то же время как у пациентов с отсутствием экспрессии CD56-позитивных клеток эти осложнения не наблюдались [148, 127, 179.]. Мононуклеары костного мозга не несущие на своей мембране CD 19 выявляются при неблагоприятном течении ММ и сопровождаются отсутствием РАХ-5 гена [90]. Количественный анализ экспрессии CD4 выявил прямую зависимость между этим маркером и большим уровнем выживаемости пациентов [57, 76, 96].

Определение линейных маркеров иммунологического фенотипа при ЛПЗ важно и для точной характеристики объема остаточной опухоли. Показано, что количество CD20+ и CD19+ лимфоцитов крови прямо отражает величину остаточной опухоли при ММ и связано с длительностью ремиссии [74]. У пациентов с ХЛЛ наиболее значимыми маркерами остаточной опухоли являются CD5 -позитивные В-лимфоциты и отношение CD197CD19" [22, 94], а при остром миелобластном лейкозе CD34 [3]. Изучение межклеточных взаимодействий, их влияние на процессы накопления опухолевой массы и метастазирования представляют большой интерес не только в плане научно-исследовательской работы, но и в практической гематологии. Важнейшим фактором межклеточного взаимодействия являются молекулы адгезии, осуществляющие связь либо по типу клетка - клетка, либо клетка - матрикс. В настоящее время молекулы адгезии принято делить на четыре группы: суперсемейство селектинов, суперсемейство иммуноглобулинов, суперсемейство кадрхеринов, суперсемейство интегринов. Все эти классы трансмембранных белков различны по своей молекулярной массе, имеют уникальные химические особенности строения, экспрессированы на разных клетках и выполняют различные адгезивные функции. В связи с чем представляло интерес дать клинический анализ линейно-адгезивного фенотипа опухолевых клеток при ХЛЛ, НХЛ и ММ, являющейся В-лимфопролиферативным заболеванием.

В исследовании включено 59 больных. У 42 диагностирован В-ХЛЛ, у 3-х В-клеточная НХЛ в фазе лейкемизации, у 14 пациентов диагностирована ММ (2-3 стадии). Всем пациентам проводились клинические исследования, принятые в гематологической клинике, включающие миелограмму, трепанобиопсию, биопсию л/у и видимых опухолевых образований, иммунохимические исследования сыворотки крови и мочи для идентификации белков (для больных ММ). Стадию болезни пациентам с ХЛЛ определяли по Rai, для пациентов с ММ по Dune и Solmon S.E. Иммунологический фенотип определяли на лимфоцитах периферической крови с помощью метода непрямой поверхностной иммунофлюоресценции, основанном на взаимодействии специфических антител с мембранными антигенами опухолевых лимфоидных клеток. Использовали широкую линейную и адгезивную панель моноклональных антител серии ICO, отечественного производства. Концентрацию растворимых молекул sCD50, sCD95 и sHLA-1 определяли иммуноферментным способом с применением моноклональных антител вышеуказанной серии.

Одним из этапов исследования было изучение линейно-адгезивного фенотипа опухолевых лимфоцитов периферической крови у больных ХЛЛ. В результате этой работы была осуществлена количественная характеристика линейных дифференцировочных антигенов опухолевых клеток, основаная на предложенном нами понятии уровней экспрессии указанных анигенов. Наиболее часто встречаемым линейным маркером при В-ХЛЛ в наших наблюдениях был CD 19 (89%). Высокий уровень CD5 ( частота встречаемости 80%) практически совпадал с показателями В-клеточного антигена, что еще раз подтверждало коэкспрессию Т-клеточного CD5 на опухолевых CD 19. Достаточно часто обнаруживались CD20+ и CD23+ - лимфоциты (70%). Антигены CD21 и CD22 определялись на опухолевых лимфоцитах реже (в 50% и 35% соответственно). Эти наблюдения позволили нам составить иммунофенотипическую формулу В-ХЛЛ на основе количественной экспрессии маркеров клеточных линий: CD19+ CD5+ CD23+ CD20+ CD211 CD22-. Отметим, что первые четыре из перечисленных маркеров имеют наиболее высокую диагностическую значимость при данной патологии.

При изучении экспрессии адгезивных молекул CD 18 (LFA-1 Р), CD50 (ICAM-3), CD38 обнаружена их ассоциациях маркерами В-клеточной опухолевой линии, а именно : CD20+CD18+; CD21+CD18+CD50+; CD22+CD50+; CD23+CD38+. Однако, на клетках лейкозного клона с линейным абберантным фенотипом CD19+CD5+ - маркеров адгезии не было обнаружено. Интегриновая молекула CD lib так же отсутствовала на всех субпопуляциях опухолевых В-лимфоцитов. В процессе исследования Т-клеточной популяции лимфоцитов, не относящихся, к опухолевому клону при В-ХЛЛ, получены данные о коэкспрессии молекул адгезии CD50 и CD lib на определенных субпопуляционных Т-линейных маркерах. Обнаружена ассоциация CD3+CDllb+CD50+; CD8+CDllb+. Вышеописанные наблюдения позволили нам охарактеризовать адгезивно-лигандный фенотип опухолевых В-леток при ХЛЛ. Используя результаты собственных исследований с учетом данных литературы [102, 130, 169] нами было сформулировано понятие трансэндотелиального и стромального векторов распределения опухолевых клеток при В-ХЛЛ. В основе этого понятия лежат установленные в наших исследованиях механизмы адгезивно-лигандного взаимодействия системы опухолевых В-лимфоцитов и Т-лимфоцитов. Проведенные исследования показали, что лишь опухолевая субпопуляция с фенотипом CD19+CD5+ не имела на своей поверхности адгезивных молекул, изучаемых в этой работе. В то время как на других иммунофенотипических подвариантах В-ХЛЛ выявлена линейно-адгезивная коэкспрессия, описанная выше. Исходя из этого становится очевидным, что иммунофенотипический подвариант В-ХЛЛ CD22+, несущий на своей поверхности ICAM-3 может взаимодействовать со своим лигандом CD 18 в циркуляции осуществляя межклеточное взаимодействие. А так как у CD50 на сосудистом эндотелии и строме внутренних органов нет лиганда, то этот тип опухолевых лимфоцитов не обладает способностью к трансэндотелиальному перемещению. На это способны опухолевые клетки В-субпопуляции CD21+ и CD20+, несущие на своей поверхности CD 18, способный связываться со своими лигандами CD50 и CD54, экспрессированными на эндотелии сосудов и стромальных элементах. Аналогично может формироваться трансэндотелиальный вектор при взаимодействии CD23+ опухолевых лимфоцитов с тромбоцитарно-эндотелиальным маркером CD31 [61]. Экспрессия CD lib на CD3 -позитивных клетках обеспечивает их фиксацию на эндотелии сосудов благодаря CD54 и CD50 и следующее за этим их трансэндотелиальное перемещение. Опухолевые В-лимфоциты с коэспрессией CD18+ и CD38+ могут взаимодействовать со своими лигандами на строме, фибробластах и стволовых кроветворных клетках (CD34). Таким образом экспрессия изучаемых молекул адгезии на различных иммунофенотипических подвариантах В-ХЛЛ влияет на процессы распределения и накопления опухолевой массы [29, 82]. Особенности распределения лейкозного пула лимфоцитов при В-ХЛЛ в зависимости от характеристики адгезивного фенотипа стали следующим этапом нашего исследования. Пациентов с В-ХЛЛ условно поделили на две группы с лейкемическим и органомегалическим вариантами болезни. Критерием такого деления стал средний показатель кратностей превышения нормальных значений лимфоцитов крови (свыше 10тыс. в мкл) и зон поражения лимфатической системы. Степень поражения последней определялась суммой баллов зон поражения (одна зона = 1 балл). В среднем по групам отношение кратностей кровь/л/у составляло 1,5+0,2, что свидетельствовало о более интенсивном насыщении опухолевыми лимфоцитами циркуляции, нежели чем лимфоидных органов ( 3,3+0,4 и 0,6+0,1, р<0,05). Однако анализ экспрессии адгезивных молекул CD lib, CD 18, CD50 и CD38 не выявил достоверных различий количественного уровня этих маркеров в выделенных клинических вариантах В-ХЛЛ. Видимо, они не задействованы в процессе перераспределения опухолевых клеток между паренхимой лимфоидных органов и периферической кровью. Безусловно, представлялось интересным сравнить и проанализировать процесс передислокации опухолевых клеток между стромой костного мозга и периферической кровью. Для чего были сформированы две группы больных с В-ХЛЛ: с лейкемическим и костномозговым вариантами болезни. Для этого у каждого больного определяли кратность превышения нормы лимфоцитов крови (свыше 10 тыс. в мкл.) и костного мозга (свыше 10% лимфоцитов), затем высчитывали отношения кратностей у каждого больного, определяли средние значения этого показателя в целом по группе ( 1,3+0,001). К лейкемическому варианту болезни относили случаи с показателем больше среднего (2,2+0,02), к костномозговому - случаи с отношением кратности меньше среднего, что составляло 0,48+0,09, р<0,05. Сравнительная клинико-иммунологическая характеристика пациентов с лейкемической и костномозговой формами течения В-ХЛЛ показала, что экспрессия CD18 (54,3+12 и 84,1+5, р=0,05) и CD38 (11,8±3,2 и 31,3±7,4, р<0,05) была достоверно выше у больных с костномозговым вариантом клинического течения В-ХЛЛ. Полученные нами результаты не противоречат данным литературы о связи неравномерного распределения опухолевых лимфоцитов у больных В-ХЛЛ и экспрессии молекул адгезии: CDlla, CD18, CD50, CD54, CD31, CD102 [29, 81]. Контакт опухолевых лимфоцитов со стромой костного мозга возможен лишь при наличии молекул адгезии суперсемейства интегринов [82]. В результате этого контакта со стромой увеличивается выживаемость лейкозных клеток за счет блокирования апоптоза [169].

Рассматривая роль молекул адгезии в развитии спленомегалии мы определяли среднее значение увеличения размеров селезенки у изучаемых пациентов с В-ХЛЛ (10+1,5см из под реберной дуги). Затем относительно среднего значения формировали группы с большим увеличением селезенки (16,6+1,Зсм) и меньшим (5+1,4см), р<0,05. У пациентов с В-ХЛЛ с достоверно большей степенью спленомегалии экспрессия CD lib на циркулирующих Т-лимфоцитах была достоверно выше ( 33,8+11 и 7,9+1,3, р<0,05), что свидетельствовало об участии Т-клеток в развитии спленомегалии за счет коэкспрессии CD3+CDllb+ и CD8+CDllb+. Клинически этот факт проявлялся не только выраженной спленомегалией, но и, по-видимому, Т-клеточным дефицитом в циркуляции, что является одной из причин высокого риска инфекционных осложнений при ХЛЛ. Анализ наиболее важных клинических синдромов В-ХЛЛ, осложняющих течение заболевания, в концепции изучения адгезивного фенотипа был проведен у 28 больных. В двух группах исследуемых , достоверно различающихся по степени концентрации гемоглобина ( 120+9г/л и 93+7г/л, р<0,05), определяли средний уровень адгезивных маркеров. Результаты исследования экспрессии CD lib, CD 18, CD50 и CD38 не выявили достоверных различий значений указанных адгезивных молекул в зависимости от выраженности анемического синдрома. При анализе экспрессии CD 18 и CD38 обнаружены достоверные различия их значений от степени тромбоцитопении. Для проведения этого анализа пациенты делились на две группы, достоверно различающиеся по количеству тромбоцитов (233+11 х 106/л и 114+12 х 106/л, р<0,05).Установлено, что у пациентов с достоверно низким количеством тромбоцитов уровень CD 18 -положительных лимфоцитов выше, чем в группе с нормальными показателями пластинок (83+6 и 61+9 , р<0,05). Это может быть объяснено косвенным супрессивным влиянием адгезивно-лигандных комплексов клетка-строма: CD18+CD50+ и CD18+CD54+ на мегакариоциты костного мозга. Выявлена и связь между низким уровнем тромбоцитов при В-ХЛЛ и достоверно низкими значениями С038-позитивных лимфоцитов ( 16+3% в группе с низким значение тромбоцитов и 34,5+8% в группе с нормальным кол-вом тромбоцитов, р<0,05). Вероятно, и в этом случае запускается адгезивно-лигандный механизм CD38+ CD31+, однако это не исключает и наличие других путей развития тромбоцитопении. Рассмотренные выше синдромы и осложнения В-ХЛЛ в контексте адгезивно-лигандного взимодействия позволили нам подойти к одному из наиболее важных прогностических факторов в клинической гематологии - общей выживаемости больных, которая оценивалась с точки зрения особенностей адгезивного фенотипа [61, 124, 134, 169]. Более точно оценить связь между экспрессией адгезивных молекул с выживаемостью больных В-ХЛЛ позволил анализ двух групп пациентов, различающихся между собой по экспрессии CD18, CD50, CD38. В процессе дальнейшего изучения обшей выживаемости исследуемых больных с показателями CD18"CD38"CD50+ отмечался более высокий лейкемический индекс(>1,3), а в подгруппе с адгезивным фенотипом СВ18+СВ38+СВ50" лейкемический индекс был меньше среднего по группе. Установлено, что при лейкемическом варианте течения болезни с адгезивным фенотипом CD18"CD38" CD50+ показатель выживаемости был достоверно ниже, чем при костномозговой форме с адгезивным фенотипом CD18+CD38+CD50". Общая выживаемость оценивалась и в группе пациентов с ММ. Эта проблема рассматривалась как в рамках стандартной В-линейной экспрессии антигенов на лимфоцитах периферической крови, так и с точки зрения адгезивной экспрессии. В ходе этого этапа исследования получены сведения о пан-В-клеточном маркере CD 19, как о важном прогностическом факторе. В нашем исследовании выживаемость пациентов, имеющих большее количество С019-положительных клеток (17+4%) была достоверно выше, чем в группе с меньшими количественными значениями CD 19 (2,4+ 0,7%) (Welkonxon-Gehan r=l,56, р<0,06). Этот факт подтверждается сведениями об выраженном супрессивном действии опухолевых CD 19+ на общую поликлоновую популяцию CD 19 [167,188], что в свою очередь сказывается на продолжительности жизни больных. Кроме того, анализ экспрессии адгезивных антигенов у пациентов с ММ выявил связь между их общей выживаемостью и количественной экспрессией интегринового комплекса. В группе больных с отношением CD1 lb/CD18 <0,59 выживаемось была достоверно ниже, чем в группе с CD1 lb/CD18>0,59 (Logrank х2=56,р<0,02). Само отношение CDllb/CD18 отражает вариабельность в системе интегриновой молекулы адгезии, где помимо CDllb представлены еще две а-субъединицы, нековалентно связанные с CD 18: CD 11 а, экспрессирована как на зрелых, так и незрелых В- и Т-лимфоцитах, и CDllc -антиген, представленный преимущественно на В-клетках. Следовательно, чем меньше количественное отношение CD lib/CD 18, тем больше вероятнось экспрессии CDlla и CDllc на мембранах опухолевых предшественников. Это не противоречит опубликованным сведениям [130]. Параллельно изучению мембранных линейных и адгезивных маркеров проводилось исследование и растворимых молекул адгезии sCD50, апоптоза sCD95 и sHLA-класса I при ХЛЛ, лейкемизированных НХЛ и ММ. Особенностью растворимых молекул является осуществление межклеточного взаимодействия, взаимодействия между клетками и стромой путем регуляции этих контактов по гуморально-опосредованному механизму. В этом случае для связи с лигандом не нужен клеточный контакт. В литературе описана группа растворимых молекул адгезии, которые рассматриваются в качестве важных прогностических маркеров при ЛПЗ [7,150,162,189]. К ним относят sCD40-L, sCD23.

Поэтому возможность изучения концентрации растворимых молекул sCD50, sCD95 и sHLA-1 при ХЛЛ, НХЛ и ММ в зависимости от клинических особенностей болезни представлялась весьма интересной. Оценку параметров концентрации вышеперечисленных маркеров проводили до и после курсов химиотерапии, с учетом изменения объективных критериев показателей опухолевой массы для ХЛЛ и НХЛ: количество лимфоцитов, органомегалия; для ММ - масса опухоли определялась в соответствиями со стадиями по Durie and Solmon и наличием видимых опухолей). Основным результатом этого этапа исследования явилась возможность рассматривать концентрацию sHLA-1 как интегральный критерий опухолевой массы при ЛПЗ, изученных в этой работе. Была выявлена прямая зависимость между величиной массы опухоли и концентрацией sHLA-1 антигенов. В наших исследованиях у пациентов с показателями опухолевой массы больше средних значений (15,3балла для ХЛЛ и НХЛ; 11,1 баллов для ММ) концентрации sHLA-1 достоверно различались с концентрациями в группе с более низким уровнем опухоли (4212+862ед/мл и 1480+89ед/мл, р<0,05 для В-ХЛЛ и НХЛ; 3484±1057ед/мл и 1192±122ед/мл, р=0,05).Изменения концентрации sCD50 в зависимости от изменения опухолевой массы при ЛПЗ не дали четкого представления о роли этой адгезивной молекулы в патогенезе ХЛЛ, НХЛ и ММ. Однако, при сравнении уровня концентрации sCD50 с мембранными значениями экспрессии CD50 при ХЛЛ и ММ был установлен факт диспропорции: достаточно высокая экспрессия мембранного CD50 и невысокой концентрацией sCD50 (в сравнении с контролем 342+20ед/мл). Это, вероятно связано с патогенозом ЛПЗ. Дефицит sCD50 означает снижение активности взаимодействия с лигандом на клеточной поверхности (CD1 lb/CD 18), в то же время как LFA-1 будет взаимодействовать с CD50 и CD54 на строме лимфоидных органов, костного мозга и эндотелии, создавая условия для формирования трансэндотелиального и стромального векторов клоновых лимфоцитов с последующей костномозговой и тканевой инфильтрацией. Это и было подтверждено в большинстве случаев клинических наблюдений. У большинства обследованных больных с В-ХЛЛ, НХЛ имелась выраженная опухолевая инфильтрация костного мозга, лимфатических узлов, печени, селезенки, желудка. Однако в одном клиническом наблюдении ХЛЛ низкая концентрация sCD50 на фоне гигантской гепатоспленомегалии сочеталась с гиперлейкоцитозом. Последний, по-видимому, мог быть обусловлен избытком опухолевых клеток в органах, что препятствовало их дальнейшему поступлению в паренхиму и они накапливались в крови. В другом случае наблюдения ХЛЛ высокая концентрация sCD50 сочеталась с выраженной лимфоаденопатией и лейкоцитозом, но при этом не отмечалось спленомегалии. Вероятно, в этом наблюдении опухолевые CD 18 лимфоциты взаимодействовали со своим растворимым лигандом CD50 и их дальнейшая трансэндотелиальная и стромальная миграция была невозможна за счет вышеописанного блока. Изучение концентраци sCD95 при ХЛЛ, НХЛ и ММ показало высокие значения, совпадающие с большой массой опухоли. Полученные данные могут свидетельствовать о важной роли sCD95 в накоплении опухолевых клеток за счет блокирования FAS-L.

Итоги изучения адгезивного фенотипа, линейных дифференцировочных маркеров и растворимых молекул sCD50, sCD95 и sHLA-1 при ХЛЛ,НХЛ и ММ позволили более глубоко понять проблему патогенеза этих заболевани и расширить спектр диагностических и клинических критериев имеющих важное значение в клинической гематологии.

Список литературы диссертационного исследования Митина, Татьяна Алексеевна, 2005 год

1. Барышников А.Ю., Заботина Т.Н., Седяхина Н.П., Хорошко Н. Д., Туркина А.Г., Палкина Т.Н. и др.

2. Коэкспрессия антигена CD34 ранних гемопатических предшественников и антигена FAS/APO-1, опосредующего апоптоз. Экспериментальная онкология 1994, 16, 4-6, с. 343-347.

3. Барышников А.Ю., Кадагидзе З.Г., Махонова Л.А., Тупицин Н.Н. Иммунологический фенотип лейкозной клетки.1. М., 1989.

4. Гальцева И.В., Паровичникова Е.Н., Савченко В.Г.

5. Минимальная остаточная популяция лейкемических клеток у больных острыми миелоидными лейкозами. Терапевтический архив, 1997, 7, 74-79.

6. Голенков А.Н., Митирев Г.Ю., Попов В.М., Шахер А.Л

7. Клиническое значение иммунологического фенотипа Неходжкинских лимфом. Терапевтический архив, 1995, 7, с.30-31.5. Шишкин Ю.В.

8. CD95 опосредованный апоптоз в лейкозных и нормальных кроветворных клетках. Автореферат дисс. докт. М. 2000, с. 58.

9. Ajdukovic R., Svoboda-Beuson I., Bendeljak К., Kusec R. et al

10. CD31 overexpression is associated with peor prognosis in Multiple Myeloma. The Hematology journal 2001, vl, si, p.36.

11. Aladle D.A., JawischH.E., AwadM.A.

12. Soluble vascular cell adhesion molecule -I (SVCAM 1) Is it a marker of microvascular complications in diabetes? Haematologica 1999, 84, EHA-4, abst. beon p. 42

13. Amiot L., Onno M., Lamy Т., Dauriac C., Le Prise P-G., Fauchet R., Dremon1.ss of HLA molecules in В Lymphomas is assotiated with an aggressive clinical course. Brit. j. Haematology 1998, 100, 655-663

14. Asosingh K., De Raeve H., Van Riet I., Van Camp В., Vanderkerken K.

15. Multiple Myeloma Tumor Genesis a Mutlistage process of Differentiation, Proliferation, Invasion, Apoptosis and Angiogenesis.

16. Blood, 2002, 11,100, pl,pl01a.

17. Barille S., Thabard W., Robillard N., Moreau Ph., Pineau D., Garoussean J-L., Bataille R., Amiot M.

18. CDi3o rather than CD 126 expressoin is associated with disease activity in multiple myeloma.

19. Brit. j. Haematol, 1999, 106, 532-535.

20. Bandonin F., Philip P. j. M., Ducailar A., Sudaka I., Alterescu R, Bayle J., Goguel A. Quatitafive expression of CD37 in lymphoproliferative disordes: a corporative study with the Matutes scoring system.

21. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI p. 567.

22. Benet I., Marugan I., Martinez-Climent J.A., Terol M. Jetal

23. Adhesion molecules (MA) in B-cell clinical, biological and cytogenetic correlations. The Hematology journal, 2000, VI, SI, p. 89.13. BergerF.1.dolent lymphomas. Different enfities and diagnostic problems. EHA-5-Ed. Book 5-th Congress 2000, h. 1-6.

24. Berger R, Hilgarth M., Hubmann R., Jruber J., Shehatam M.

25. Down regulation of CD23 expression in B-cell by counterreceptor blockade. Haematologica, 1999, 84 EHA-4, abstr. book, p. 25-25

26. Berrebi A., Bassons L., Shvidel.

27. Spontaneous apoptosis in B-cell variations according to maturation stages andenhancement with verapamil.

28. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI p. 581.

29. Besostri В., Beggiato E., Bianchi A., Mariani S., Coscia M., Peola S., Foglietta M., Boccadoro M., Pileri A., Moretta L., Massaia M.

30. Britt. Haematol., 2000, 109, 1, 46-53.

31. Bezares R.F., Murro H.H., Diaz A.F., Saidon J.

32. Prevention of infections events with immunoglobulin A (IgA) nebulisations in patients with chronic lymphoproliferative disordes treated with purine analogues. Hematol Cell Ther, 1997, 39, SI p. 583-584.

33. Bila J., Kraguljak N., Boskovic D., Jankovic J.

34. Prognostic value of CDub expression in acute myeloid leucemia. Haematologica, 1999, 84, p. 147.19. Bladon I., Taylor P.C.

35. CD/ helper and CDs cytotoxic T lymphocytes are equally sensitive to apoptosis induced by extracorporeal photopheresis. The Hematology, 2000,1, 1, 11.20. Bladon J., Taylor P.C.

36. The apoptotic effect of extracorporeal photopheresis using the XTS versus NVAR system. Haematoligica, 1999, 84, p. 105.21. Bladon I., Taylor P.C.

37. CD4+ helper and CDs+ cytotoxic T-lymphocytes are equally sensitive to apoptosis induced by extracorporeal photopheresis. The Hematol. j, 2000, IV, SI, p. 14.

38. Blasinska-Morawiec M., Blonski J., Robak T.

39. Serum cytokines and immunophenotype of peripheral blood lymphocytes in patients with1. B-cell treated with.

40. The Hematol. j. 2000, VI, SI, p. 92.

41. Blonski J.Z., Niewiadomska H., Najder M., Fronzak A., Krykowski E. Expression of surface adhesion molecules and clinical staging in B-cell chronic lymphocytic leukaemia (B-cell).

42. Hematol Cell Ther, 1997, 39, SI, p. 76.

43. Bosch F., Villamor N., Craspo M., Bellosillo B. et al

44. Zap-70 Expression is a Reliable Surrogate for Immunoglobulin Variable Region Mutatione in Cronic Lymfocytic Leukemia.

45. Blood, 2002,11,100,pl, 169a.

46. Brouwer R.E., Zwinferman A.H., Klin-Nelemans H.C.

47. The expression of co-stimulatory and adhesion molecules on acute myeloid leukaemia: implications for immunotherapy. Hematologica, 1999, 84, p. 135.

48. Brugnoni D., Rossi I., Tucci A., Cattaneo R., Airo P.

49. Study of CD 40 ligand expression in B-cell chronic lymphocytic leukaemia. Haematologica, 1995, 40, 440-42.

50. Bumbea H., Vladareanu A.M., Cisleanu D., Barbu D. et al

51. The variable expression of CD23 in CDS positive lymphoproliferative disorders aclue indiagnosis and prognosis.

52. The Hematology journal 2001, v7, si, p.48.

53. Buysmann S., Bemelman F.J., Schellekens P. Th.A., Van Kooyk V. et al

54. Activation and Increased Expression of Adhesion Molecules on Peripheral blood lymphocytes is a Mechanism for the immediate lymphocytopenia after administration OKT3.

55. Blood 1996, 1, v87 p 404-411.30. Caligaris-Cappio F.

56. Relationship beetween autoimmunity and immunodeficiency in CLL. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. 13-16.

57. Callea V., Stelitano C., Oliva B.M., Filanqeri M., Musolino C., Morabito F., Iacopino P., Nobile F., Brugiatelli M.

58. Surface CD 14 positivity in B-cell chronic lymphocytic leukaemia (CLL) is related with the clinical outcome.

59. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. 590.

60. Callea V., Morabito F., Oliva B.M., Levato D.,Dattilo A., Gangemi F., Gorfida A., Lacopino P., Nobile F., Molica S., Brugiatelli M.

61. Surface CD 14 positivity in B-cell chronic lymphocytic leukaemia is related to clinical outcome.

62. Brit. j. Haematology, 1999, 107, 347-352.

63. Camera A., Pezzullo L., Villa M.R., Luciano L.

64. Coexistence of two distinct cell population (CDTCRytf and CD54 TCRyS) in a case of aggressive CD56 lyphoma/leukaemia. Haematologica, 2000, 85, p.496 501.

65. Camp B.V., Vanderkerken, Bakkus M., Riet I.V.

66. New insights into myeloma biology.5.th Congr. oftheEHA. Ed. book, 2000, Birmingham, p. 36-41.

67. Catovsky D., Pawson R., Dyer M.j.S., Barge R, Matutes E., Thornton P.D., Emmett E., Kluin-Nelemans J.C., Fibbe W.E., Willemenze R.

68. Successfull treatment of T-cell prolymphocyte leukaemia with human CDws2 antibody, CAMPATH-IH.

69. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. 599.36. Catovsky D.

70. How do we recognise and manage B-cell leukaemias and lyphomas? Leukaemia and Lymphoma, 1998, VI, ISS-1, p. 11.37. Catovsky D.

71. Morphology, atipical chronic lymphocitic leukaemia andprognistic features affecting choice of therapy.

72. Haematologica, 1999, 84 (EHA-4 ed. book), p. 92-93.

73. Chen J.R., Yn B.J., Lan-Phuong Dao, Bradley C.J., Mulligan S.P., Wiley J.S. Transendothelial migration lymphocytes in chronic lymphocytic leukaemia is impared and involves down-regulation of both L-selection and CD23.

74. Brit. j. Haematology, 1999, 105, 1, 181-189.

75. Christiansen I., Sundstrom C., Torreman T.

76. Elevated serum levels of soluble vascular cell adhesion molecule-1 (SVCAM-1) closely reflect tumor burden in chronic B-lymphocytic leukaemia. Brit. j. Haematology, 1998, 4, 103, 1129-1137.

77. Clark P., Boswell F., Pearson C., Walker I.D., Grur I. A.

78. Thrombin induction ofICAM-1 on monocytes and the relationship between monocytes 1С AM-1 and plasma 1С AM-1 in pregnancy. Haematologica, 1999, 84, p. 184.41. Clark E. A.

79. Regulation of signalling the B-lymphocyte antigen receptor complex. Hematol. Cell Ther., 1997, 39 SI, p. 555.

80. Clementson K.J., Clementson J.M.

81. Hereditary disordes ofplatelet receptors for adhesive proteins: collagen andvon Willebrandfactor. Hematologica, 1999, 84, p. 129.

82. Cohen P.L., Kurtin P.J., Donovan K.A., Hanson C.A.

83. Bone marrow and peripheral blood involvement in mantle cell lymphoma. Brit. j. Haematology, 1998, 101, 302-310.

84. Corin D., Vasilica M., Dumitrescu A., Dobrea C.

85. Clinical and biological analysis of mantle cell lymphoma. A single centre experience. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 176.

86. Criel A., Verhoef G., Vlietinck R., Meccuci C.

87. Furthear characterisation of morphologically defined typical and atypical CLL: a clinical, immunophenotypic, cytogenetic and prognostic study on 390 cases. Brit. j. of Haematol., 1997, 97, 383-391.

88. Criel A., Verhoef G., Vlietinck R., Meccucci C., Billiet J., Michaux L., Van Hoof A., Boogaerts M., Van den Berghe H., De Wolf-Peeters C.

89. Typical and atypical cell: two different entries. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p.93.

90. Daniels J.T., Davis В., McGrail L.H., Byrd C.

91. Clonal selection of CD$6 t (8:21) AML blast: further suggestion of the adverse clinical significance of this biological marker? Brit. j. Haematology, 1999, 107,381-383.

92. D'Arena G., Cascavilla N., Musto P., Bisogno R.C.

93. CD79b expression in B-cell chronic lymphocytic leukaemia. Haematologica, 2000, 85, p.556-557.

94. D Arena G., Nunziata G., Cascavilla N., Colella-Bisogno R. et al

95. Antigenic density of surface antigens in B-ctll chronic lymphocytic leukemia evoluated bymeans of quantitative flow cytometry.

96. The Hematology journal 2001, vl, si, p. 42.50. Dattilo M.S., D. Levato

97. Clinical relevance of the intensity of CD20 antigen in B-cell chronic lymphocytic leukaemia.

98. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. 565-566.

99. Del Poeta G., Maurillo L., Suppo G„ Venditti A.

100. Both high CD38 and soluble APO-1/FAS (CD95) correlate with advanced stages and a poor outcome in В chronic lymphoid leukaemia (B-cell). The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 91.

101. De Rossi G., Zarcone D., Mauro F., Cerruti G.

102. Adhesion molecule expression on B-cell chronic lyphocytic leukaemia (B-cell). A study of 74 cases.1.ukaemia and Lymphoma, 1994, V13, S-l, p. 124.

103. De Rossi G., Zarcone D., Mauro F.R., Cerruti G., tenca C., Molica S., Grossi C.E. Adhesion molecule expression in B-cell chronic lymphocytic leukaemia. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p.575.

104. De Totero D., Tazzari P.L., Clavio M., Catellani S.

105. Modulation ofFludarabine induced apoptosis in chronic lymphocytic leukaemia (CLL) B-cell following CD40 CD40L interaction. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p.90.

106. Dettke M., Dreer M., Horvath, Leither G., Hocker P.

107. Treatment with prednisolone reduces the monocytes in healthy men. Haematologica, 1999, 84, p.255.

108. De Waele M., Reumans W, Jochmans K., Schots

109. Abberant expression of adhesion molecules on CD3/ cells of acute leukaemia. Brit. j. Haematology, 1998, 102, 1, ISH-EHA, p.161.57. Dighiero G.

110. Chronic lymphocytic leukaemia treatment. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. 531-540.

111. Dmoszynska A., Domanski D., Rolinski J., Bojarska-Junak A. Immunophenotype changes in multiple myeloma patients during thalidomide treatment. The Hematol. j., 2000, VL, SI, p. 167.

112. Dohner H., Stilgenbauer S., Fischer K., Bentz M., Lichter P.

113. Cytogenetic and molecular cytogenetic analys of B-cell chronic lymphocytic leukaemia: specific chromosome aberration identify prognostic subgroup ofpatients and point to loci of candidate genes. Leukaemia, 1997, 11, S2, p. 19-24.

114. Donfrid М., Jankovic G., Cemerikic V., Kraguljac N. CD25 and Lambda expression in mantle cell lymphoma. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 173.

115. Duering J., Schwarzmeier J.D., Hilgarth m., Strommer S. et al

116. Human Stromal Fibroblasts Inhibit Apoptosis of B-CLL Cells through a Mechanism Involving Phosphatidiliositol 3-Kinase Pathway.

117. Blood, 2002,11,100, pi, p382a.

118. Dyer M.j.S., Siebert R., Willis T.G., Schlegelberger B.

119. Elliot M.A., Letendre L., Chin-Yang Li, Hoyer J.D., Hammack J.E.

120. Chronic lymphocytic leukaemia with symptomatic diffuse central nervous system infiltration responding to therapy with systemic fludarabine. Brit. j. Haematology, 1999, 4, 104, 689-694.65. Fernandes M., Alarcon G.

121. Alternations in bone marrow stromal cells function in multiple myeloma. Brit. j. Haematology, 1998, 102, 1, ISH-EHA, p.350.

122. Finn W.G., Thangavelu M., Gelavarthi k.K., Goolsby C.L.

123. Karyotype correlates with peripheral blood morphology and immunophenotype inchronic lymphocytic leukaemia.

124. American j. of Clinical Pathology, 1996, 105, 458-467.

125. Fossa A., Brandhorst D., Seeber S., Nowrousian M.R.

126. Relation between anemia tumor cell cycle activity in multiple myeloma. Acta Haematologica, 1997, 98, SI, p.71.

127. Frassanito M.A., Silvestis F., CafForio P., Dammacco F.

128. CD8+/CDs7+ cells and apoptosis supress T-cell function in multiple myeloma. Brit. j. Haematology, 1998, 100, 469-477.

129. Fujii R., Ishikawa H., Mahmond M.S., Asaoku H., Kawano M.M.

130. MFC-1- CD49e~ immature myeloma cells include CD45+ subpopulations that can proliferate in response to IL-6 in human myeloma.

131. Brit. J. Haematology, 1999,105,1,131-140.

132. Gahn В., Wenderburg В., Troff С., Neef J., Grove D., Haferlach T. et al Analisis of progenitor eel involvement in B-cell by simultaneous immunophenotypic and genotypic analysis at the single cell level.

133. Brit. J. Haematology, 1999,105,p955-959.

134. Geister C.H., Philip P., Egelund Christensen В., Hou-Jensen K.

135. Trisomy-12 is found cell with both typical and atypical immunophenotype and hasno prognostic significance.

136. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, si, p 568.

137. Ginaldi L., Dastino A., De Martinis M., Loreto M.F., Marini L. et al The value of immunophenotypic analyses in characterization of B-cell.

138. Brit. J. Hatmatology, 1999, si, 105, p 83.

139. Genzalez-Barca E., Domingo-Claras A., Fernandes-Sevilla A. et al

140. Expression of adgesion molecules in peripheral B-lymphocytes from patients with chronic lymphoprolyferative disease: relationship with clinical features.

141. Hematol. Cell Ther., 1997,39,sl,p.76-77.

142. Golenkov A.K., Sedov K.A., Mitina T.A., Polosukhina E.R., Baryshnikov A.G. Immunophenotypic identification of residual disease in exranodal non-Hodgkins lymphoma and myltiple myeloma.

143. Experimental Haematol., 1995,23,8,p.763.

144. Gordon M.G., Marley S.B., Davidson R.J., Lewis J.L.

145. CD34- an adhesion and signaling molecule for haemopoetic progenitor cell.

146. Brit. J. Haematology, 1998, 102,1, ISH-EVA, p. 161.

147. Grogan T.M., Dune B.G.M., Shier C.M., Richter L., Vela E. Myelomonocytic antigen positive multiple myeloma.1. Blood, 1989,73,763-769.78. Hambin T.J.

148. Autoimmune haemolytic anaemia in patients treated with purine analogues.

149. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, si, p.559.

150. Hatrimichael E., Makia F., Chaidos A., Chistou L. Soluble aghesion molecules in plasma cell leukaemia.

151. The Hematol.J., 2000, si, p. 163.

152. Hausor I., Simonitsch I., Ott G., Weltermann A.

153. The plasmablastic variant of diffuse large B-cell lymphoma is associated with very poor clinical outcome.

154. The Hematol. J., 2000, vl,sl, p. 182.

155. Huh G.O., Lee J.N., Lerner S., Wierda W.G. et al T-cell Subset in B- Cell Chonic Lymphocetic Leukemia. Blood, 2002, 11, 100, p.2,p.358.

156. Jaksis В., Jaksis O., Kardum M.M., Jaksis I.K.D. et al

157. Adhesion Molecules Expression on B-Cells is Significantly Diffeent among

158. Peripheral Blood, Bone Marrow and Lymph Node Compartments and Has

159. Significant interaction with Gluder in Patients with B-cell Chronic Lymphocytic1.ukemia.

160. Blood, 2002,11,100, p.l, p.597a.

161. Javniak D., Dmoszynska A., Goracy A.

162. The role of 01-integrins in pathogenesis of renalfailure in patients with multiple myeloma.

163. Haematologica, 1999,84, EHA-4, abst. Book, p. 28-28.

164. Javniac D., Dmoszynska A., Goracy A., Krawczyk P.1. antigen CD56 (neural cell adhesion molecule N-CAM) characteristic of malignant plasma cell?

165. Brit. J. Haematology, 1998, 102,1, ISH-EHA, p.350.

166. Jones D.L., Wickzemasinghe R.G., Mehta A.B., Prentice H.G.

167. The role of induced FAS expression in the killing of B-chronic lymphocytic leukemia cell by DNA damaging agents.

168. Hematologyca, 1999, 84, p. 106.

169. Jourdan M., Ferlin M., Legouffe E., Horvathova M., Rossi J.F. et al The myeloma cell antigen syndecan-1 is lost by apoptotic myeloma cell.

170. Brit. J. Haematology, 1998, 100, p. 637-646.87. Julinsson G.

171. Complications in the tretment of CLL with purine analogues.

172. Hematol. Cell Ther., 1997, si, p.41-44.

173. Kay N.F., Leong Т., Bone N., Kyle R., Greipp P.R., Van Ness В., Oken M.M.

174. T-helper phenotypes in the blood of myeloma patients an ECOY phase III trials E 948/E3A93.

175. Brit. J. Haematology, 1998, 100,p.459-463.

176. Kowano M.M., Mahmound M.S., Ishikawa H.1.ss of PAX-5 expression is possibly involved in growth of huan myeloma cells. Acta Haematologica, 1997, 98, SI, p.89.91. Keating M. J.

177. What is the best salvage approach in relapsed B-cell patients? Leukaemia and lymphoma, 1998, voll, issuel, p. 10.

178. Kibaroglu A., Eksioglu-Demiralp E., Ratp S., Autan M.1.creased adhesion of В chronic lymphocytic cells to the bone marrow: role of bonemarrow microenvironment. Haematologica, 1999, 84, p. 163.

179. Kilber C., Schermutzki F., Woller H.D., Timpl R, Muller C.A., Klein G.

180. Adhesive interaction of human multiple myeloma cell lines with different extracellular matrix molecules.

181. Cell Adhes. Commun., 1998, 5(4), 307-323.

182. Kimby E., Osterborg A., Mellstedt H.1.terleukin-4 (IL-4) therapy in patients with chronic lymphocytic leukaemia of B-cell type (BCLL): clinical and biological effects. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p.597.

183. Kipps T.J., Cantwell M., Sharma S., Kato K. Gene therapy of chronic lymphocytic leukaemia. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p.562.

184. KnaufW.U., Hingenfeld E.I., Schutte H.I., Schroder J., Kath R., Thiel E.

185. VH gene expression in hairy leukaemia. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p.88.

186. Koh MBC., Lowdel M.W., Prentice H.G.

187. The GvH reaction: the cytokine storm and its effect on lymphocyte alloreactive responses. Haematologica, 1999, 84, EHA-4, abst. book, p.62-62.

188. Krai M., Kopec-Szlezak J., Poglod R.

189. Expression of cytoadhesion molecules in plasma cell leukaemia. Haematologica, 1999, 84, EHA-4, abst. book, p.30-30.

190. Kronenwelt R, Lichterfeld M., Zoller M., Haas R

191. Mobilisation of CDs/ haemopoetic progenitor cells in vitro by VLA-4 directed antisenseoligonucleotides.

192. Haematologica, 1999, 84, p.256.

193. Kuribayashi N., Hata H., Yoshida M., Sonoki Т., Nagasaki A., Kimura Т., Harada N., Matsuzaki H.

194. Establishement and characterization of CD95 (FAS/APO-1) — negative myeloma cell line. Acta Haematologica, 1999, 101, 113-118.

195. Lagneaux L., Delforge A., Bron D., De Bruyn C., Stryckmans P.

196. Chronic lymphocytic leukaemie (CLL) CDjg+ CDs+ lymphocytes but not normal CD 19

197. CDs+ lymphocytes are rescuedfrom apoptosis by contact with bone murrow (BM) stromal cells.

198. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p.574-575.

199. Lagneaux L., Delforge A., Dejeneffe M., Schols D. et al

200. SDF-1/CXCR 4 interactions are Clinical in the Migration and Survival of Chronic Lymphocytic Leukemia cells in the Bone Marrow Mieroeviroument.

201. Blood, 2002,11, 100, p.l, p.351a.

202. Laytragoon-Lewin N., Mellstedt H.

203. Down-regulating the apoptosis-mediated CD95 receptor and altered signal transduction through the CD40 receptor inB-chronic lyphocytic leukaemia (CLL) cells. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. S75.

204. Lazzari M., Borleri G., Dastoli G., Barbui T.

205. Hetergeneous susceptibility of different, freshly isolated В non-Hodgkin's lymphoma cellto Rituximab and complement.

206. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 185.

207. Leleu X., Le Friec G., Amiot L., Fauchet R. et al

208. Total Soluble HLA class I (HLA-!s) a new prognostic factor in multiple myeloma.

209. Blood, 2002, 11, v 100, p.2, p.378b.

210. Lemoli R.M., Martinelli G., Oliveri A., Motta M.R, Rizzi S., Terragna C., Leopardi G., Benni M., Ronconi S., Canton I., Rondelli D., et. al.

211. Selection and transplantation of antologous CD34+ B-lineage negative cell in advanced multiple myeloma patients: a pilot study. Brit. j. Haematology, 1999, 107, 419-428.

212. Lens S.M.A., Drillenburg P., Drijver B.F.A., Gijsvan Schijndel, Pals S.T., Van Lier R.A.W., Van Oers M.H.J.

213. Aberrant expression and reverse signalling of CD 70 on malignant B-cells. Brit. j. Haematology, 1999, 106,491-503.

214. Lopez-Matas M., Rodriges-Justo M., Morilla R, Catovsky D., Matutes E. Quantitative expression of CD23 and its ligand CD21 in chronic lymphocytic leukaemia. Haematologica, 2000, 11, p. 1140-1145.

215. Mackus W. J.M., Grummels A., Van Lier R. A. W., Eldering E. et al

216. B-cell Rceptor (BCR) Triggering Leads to Enhanced Survival of Leukemic B-Cell in B-Cell Patients with UnmutatedIgVH Genes and Zap-70 Expression.

217. Blood, 2002,11, vlOO, p.l, p. 169a.

218. Magiola M., Oliva В., Cuzzola M., Cuzzerea, et. al.

219. Chronic lymphocytic leukaemia (CLL) B-cells express CDjo when undergoingspontaneous apoptosis.

220. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 90.

221. Maloun K, Magnac C., Azgui Z., Can C., et. al. VH gene expression in hairy leukaemia.

222. Brit. j. Haematology, 1998, 101, 171-178.112. Marmont A.M.1.ukaemic meningitis in B-cell chronic lymphocytic leukaemia. Resolution followingintrathecal methotrexate.

223. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p.93.

224. Matutes E., Cabezudo E., Morilla R., Catovsky D.

225. Analysis of resedual disease in chronic lymphocytic leukaemia by flow cytometry. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p.98.

226. Matutes E., Moreau E., Zomas A.P., Morilla A., Morilla R., et. al. Revised CLL scoring system including the monoclonal antibody SNs (CD79b)-Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. S67.

227. Mecuci C., Van den Berghe H. Cytogenetic and immunophenotype. Leukaemia and lymphoma, 1994, 13, SI, p.49-51.

228. Molica S., Dattilo A., Ginlino C., Levato D.

229. Flow cytometric expression of cyclin D1 in typical B-cell CLL allows identification of patients at high risk of disease-progression. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p.91.117. MonserratE.

230. New therapeutic issues in CLL.

231. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. S45-S49.

232. Morel D., Pages J., Callet-Bauchu E., Baseggio L., et. al.

233. Splenic marginal cell lymphomas in peripheral blood: arguments for the existence of acommon type beside SLVL.

234. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 176.

235. Mitterer M., Oduncu F., Lanthaler A.J., Drexler E., Amaddi G., Fabris P., Emmerich В., Coser P., Strava C.

236. The relationship between monoclonal myeloma precursor B-cells in the peripheral blood stem cell harvests and the clinical response of multiple myeloma patients. Brit. j. Haematology, 1999, 106, 737-743.

237. Mulligan S.P., Dao L.P., Walls R.S.

238. Diagnostic and prognostic potential of cell adhesion molecule expression in chronic B-cell leukaemias.

239. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. S77.121. Mulligan S.P., Dao L.P.

240. A cytokine cascade midiated spontaneous "cycle" phenomenon with fever in a B-cellchronic lymphoid leukaemia.

241. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. 92.

242. Mulligan S.P., Dao L.P., Francis S.

243. B-cell chronic lymphocytic leukaemia with aberrant expression of the CDs antigen. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. 66.

244. Murasko D.M., Nelson B.J., Silver R., Motour D., Kay D. Immunologic response in an eldery population with a mean age of 85. Am. j. of Medicine, 1986, 81, 612-618.

245. Orchard J.A., Ibbotson R.E., Davis Z.A. Gardiner A.C. et al

246. Zap-70 Evlaaion by Flow Cytometry is a Significant Prognjstic Marker in B-Cell. Blood, 2002, 11, vlOO, p.l, p. 168a.125. Osier D.G.

247. Cytogenetic and molecular genetic of chronic lymphocytic leukaemia. Haematologica, 1999, 84 (EHA-4 ed. book), p. 88-91.

248. Osorio L.M., Aquilar-Santelises M., de Santiago A., Mellstedt H., Jondal M. Potential role of the BCL-2 gene family in apoptosis of B-chronic lymphocytic leukaemia cells.

249. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. S81-S82.

250. Pagnucco G., Bragotti L.L., Cabrlon S., Corso A., Vanelli L. et al Multiparametria immunophenotyping of bone marrow plasma cells in Multiple Myeloma andMGUS.

251. The Hematology journal 2001, vl, si, p. 102.

252. Pagnucco G., Ardizzone F., Maiocchi M., Vanelli L. et al

253. Prognostic significance of CD38 and FMC7 expression in chronic lymphocytic leukemia (B-cell).

254. The Hematology journal 2001, vl, si, p. 47.

255. Paietta E., Andersen J., Yunis J., Rowe J.M., Cassileth P.A., Tallman M.S., Bennet J.M., Wiernik P.H.

256. Acute myeloid leukaemia expressing the leucocyte integrin CDui a new leucaemic syndrome with poor prognosis: result of an ECOG database analysis. Brit. j. Haematology, 1998, 100, 265-272.

257. Painter J., Shain K., Sapota S., Dalton W.S.

258. Cell Adhesion MediatedMelphalan Resistanse is Mechanistically Distinet from

259. AcyniredMlphalan Resistance and does not correlate with Melphalan Induced Crosslink.

260. Blood, 2002, 11, v 100, part.l, p. 66a.

261. Panayiotidis P., Ganeshaguru K., Foroni L., Hoffbrand A. V.

262. Expression and function of the FAS antigen in B-chronic lymphocytic leukaemia and hairy cell leukaemia. Leukaemia, 1995, 9, 1127-1232.

263. Perutelli P., Cevasco M., Dini G., Comaglia-Ferraris P.

264. Adhesion of cord blood leucocytes to extracellular matrix: a comparative approach to graft-vs-host disease.

265. Haematologica, 1999, 84, EHA-4, abst. book, p. 61-61.

266. Pettitt A.R., Griffiths S.D., Cawley J.C.

267. Spontaneous apoptosis in chronic lymphocytic leukaemia (CLL) is inhibited by homotypic cell-cell contact involving a sialic acid-containing ligand. Brit. j. Haematology, 1998, V101, SI, p. 41-41.

268. Pittner B.T., Kay N.C., Jelinek D.F.1.terferon-Induced Increase of CD38 Surface Expression in B-CLL Leukemic Cells is Restricted to the CD38-positive subset.

269. Blood, 2002, 11. vlOO, part.l p.382a.

270. Poglod R., Kraj M., Kopec-Szlezak J., Kruk B.

271. Patterns of H-CAM, I-CAM, N-CAM and LFA-1 expression on lymphoid cells in multiple myeloma.

272. Haematologica, 1999, 84, EHA-4 abstr. book, p. 31-31.

273. Prieto A., GarciaqSuarez J., Henander M.P. reyes E., et. al.

274. Expression of CD25 and CD38 by leukaemic B-cells improves the definition of risk of patients on early stage B-CLL patients The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 91.

275. Pruijt J.F.M., Figdor C.G., Van Kooyk G., Willemze R., Fibbe W.E. Murine haemapoietic progenitor cells do not express LFA-1.

276. Brit. j. Haematology, 1998, 102, 1, ISH-EHA, p. 160.

277. Rai K.R., Brien S.O., Cunnigham C., Turkina A.G., Golenkov A.K. et al

278. Gertasens (BCL-2 antisens) Monotherapy in atients with Relapsed or Refractory Chronic Lymphocytic Leukemia: phase I and II results.

279. Blood 2002, 11 vlOO, part. 1, p.384a.

280. Rasmussen Т., Kastrup J., Knudsen L.M., Johnsen H.E.

281. High number of clonal CD19 cells in the peripheral blood ofpatient with multiple myeloma.

282. Brit. j. Haematology, 1999, 105, 1, 265-267.

283. Rasmussen Т., Jensen L., Hohore L., Andersen H., Johnsen H.E.

284. Circulating clonal cells in multiple myeloma do not express CD34 in RNA, as measured by single-cell and real-time RT-PCR assays. Brit. j. Haematology, 1999, 107, 818-824.

285. Rawstorn A.C., Davies F.E., Owen R.G., English A., Pratt G., Child A., jack A.S., Morgan G.J.

286. B-lymphocyte suppression in multiple myeloma is a reversible phenomenon specific to normal B-cell progenitors and plasma precursors. Brit. j. Haematology, 1998, 100, 176-183.

287. Rawstron A.C., Barrans S.L., Blythe D., Davies F.E., English A., Pratt G., Child J.A., Jack A.S., Morgan G.J.

288. The degree of blood and marrow plasma cell infiltration depend on CD56 expression. Brit. j. Haematology, 1998, 101, p. 48-48.

289. Rawstron A.C., Barrans S.L., Blythe D., Davies F.E., English A., Pratt G., Child J.A., Jack A.S., Morgan G.J.

290. Proliferative myeloma plasma cells are at the latest stage of differentiation. Brit. j. Haematology, 1998, V101, SI, p. 23-23.

291. Raya J.M., Brito M L., Gonzales-Brito G., Caballero M.M, et. al.

292. Blood T-helper lymphocyte subsets in patients with monoclonal gammopaties: correlations with treatment status and clinical stage. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 165.

293. Raya J.M., Brito ML., Gonzales-Brito G., Caballero M.M, et. al.

294. Plasma cells of patients with "smolderig" myeloma show intermediate phenotypic features between mesus and multiple myeloma. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 165.

295. Retter W.W., Hopp C., Murr M.

296. A simple staging system for multiple myeloma based on the relations of CD38 positive lymphoid and myeloma cell subpopulations to predict the necessity of chemotherapy. Acta Haematologica, 1997, 98, SI, p. 91.

297. Rigolin G.M., Sneddon C., Castoldi G., Mufti G.J.

298. MDS dendritic cells are phenotypically and functionally different from those obtained in healthy subjects.

299. Haematologica, 1999, 84, EHA-4, abstr. book, p. 79-79.

300. Rottenburger C., Kiel K., Bosing Т., Cremer W., Moldenhauer G., Ho A.D., Goldschmidt H., Moos M.

301. Clonotypic CD20* and CDjg+ B-cells in peripheral blood of patients with multiple myeloma post high-dose therapy and peripheral blood stem cell transplantation. Brit. j. Haematology, 1999, 106, 545-552.

302. Sadek I., Layed E., fernandez L. A.

303. Difference in the expression of adhesion molecules on stimulatory normal CDs B-cells, normal CDs+ B-cells and chronic lymphocytic leukaemia B-cells involved in theautologous mixed lymphocyte reaction. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. S77.

304. Salem M., Elbaz O., Alwady M., Mabed M., et. al.

305. Serum levels of soluble adhesion molecules (ICAM and VCAM-1): efficient biomarkers of disease status and response to therapy in non-Hodgkin's lymphoma (NHL). Haematologica, 1999, 84, p. 155.

306. San Miguel J.E., Gonzalez M., Gascon A., Moro M. J., Hernandez J.M., Ortega F., et. al. Immunophenotypic heterohenity of multiple myeloma: influence on the biology and clinical course of the disease.

307. Brit. j. Haematology, 1997, 77, 185-190.

308. Santini V., Gozzini A., Scappini В., Rossi-Ferrini P.

309. TNF-a induced maturation and apoptosis are exclusively mediated by CDnoa in primaryacute myeloid leukaemia blast.

310. Haematologica, 1999, 84, EHA-4, abstr. book, p. 60-60.

311. Sanz-Rodriguez F., Ruiz-Velasco N., Pascual-Salcedo D., Teixido J. Characterization of VLA-4-dependent myeloma cell adhesion to fibronectin and VCAM-1.

312. Brit. j. Haematology, 1999, 107, 825-834.

313. Schafer G.B., Neef C., TrofFC., Feuring-Buske M., Hiddeman W., Wormann B. Detection of leukaemia-associated genetic markers in CD34 positive progenitor cells of patients with B-cells.

314. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. 67.

315. Schlossman S.F., Boumsell L., Gilks W., Harlan J.M., et. al.

316. CD antigens, 1993. 5-th International Workshop on Human leyкосуte Differentiation antigens, Boston, USA.1.ukemia and lymphoma, 1994, 13, SI, p. 59-60.

317. Schofield K.P., Dueling J., Rushton G., Testa N., et. al.

318. CC4P1 integrin-mediated adhesion of CDз4+ cells from patients with chronic leukaemia:influence ofIL-3.

319. Brit. j. Haematology, 1998, 102, 1, ISH-EHA, p. 162.

320. Schultze J.L., Seamon M.J., Michalak S., Gribben J.J., Nadler L.M. Antologous tumor infiltrating T-cells cytotoxic for follicular lymphoma cells can be expanded in vitro.

321. Blood, 1997, 89, 3806-3816.

322. Schuster-Kolbe J., Ludwig H., Adolf G.R., Heider K.H.

323. Expression of CD44 isoform on isolated bone marrow plasma cells and peripheral CD 19 B-cells of patients with multiple myeloma and healthy individuals. Lenk lymphoma (Switzerland) 1999, 34, 1-2, 95-103.

324. Shehata M., Hilgarth M., Berger R., Berer A., et. al.

325. Hairy cell adhesion to bone marrow fibroblasts via VLA-4/VCAM-1 is regulated by TGF1. P.

326. Haematologica, 1999, 84, p. 257.

327. Shehata M., Schwarzmaier J.D., Hilgarth M.H., Strommer S. et al

328. Human Stromal Fibroblasts inhibit Apoptosis of C-CLL Cells though a Mechanism Involving Phosphatidylinositol 3-Kinase Pathway.

329. Blood, 2002, 11, vlOO, part.l, p.382a.

330. Schwarzmaier J.D., Shehata M., Hilgarth, Hubman R., Treil R.

331. The role of soluble CD23 in differentiation between stable and progressive forms of B-CLL.

332. The Hematology journal 2001, vl, si, p. 102

333. Serrano D., Monteiro J., batliwala F., Chiorazzi N., Gregersen P.K.

334. Clonal expansion within the CD4* CDs?* and CDs* CD57е T-cell subjects in B-cell. Hematol. Cell Ther., 1997, 39S1, p. S72-S73.

335. Skov S., Bregenholt S., Claesson M.H.

336. Class I ligation of human T-cells activates the ZAP 70 and p561CK tyrosine kinases leads tj an alternative phenotype of th TCR/CD3 S-chain and induces apoptosis. Journal of Immunology, 1997, 158, p. 3189-3196.

337. Stauder R., Bechter O., van Driel N., Thaler J., et. al.

338. CD44.9V expression represents a new independent prognostic parameter in multiplemyeloma.

339. Brit. j. Haematology, 1998, 102, 1, ISH-EHA, p. 345.

340. Stevenson F.K., Landham S., Hamblin T.J., Ibbotson R. et al

341. Vh Gene Mutational Status in Chronic Lymphocytic Leukemia is Associated with Differential Signaling via Surface IgM.

342. Blood, 2002, 11, v 100, part. 1, p.99a.

343. Sucik I., Shain K.H., Mackley P. A., Gerbino E. et al

344. STI 571 Inhibits ckit phosphorylation and cytotoxic to drug sensitive and resistant myeloma cell lines.

345. Blood, 2002, 11, v 100, part,l, p. 169-170.

346. Suut L., O'Connor S.J.M., Richards S.J., Jones R.A., Roberts B.E., et. al.

347. Trisomy 12 is seen within a specific subtype of B-cell chronic lymphoproliferative disease affecting the peripheral blood/bone marrow and co-segrates with elevated expression of1. CDUa.

348. Brit. j. Haematology, 1998, 101, 165-170.

349. Tamburini A., Verditi A., Bucciasano F., Maurillo L. et al Expression of adhesion molecules in Acute Myeloid Leukemia.

350. Blood, 2002, 11, v 100, parti, p.335a.

351. Terol M., LopezGuillermo A., Bosch F., Montoto S., et. al.

352. Expression of fi-integrin (filTG) adhesion molecules in diffuse large-cell lymphoma (DLCL). Correlation with initial characteristics and outcome. Haematologica, 1999, 84, p. 119.

353. Truman J.P., Choqueux C., Tchopp J., erdenne J., Le Deist F., Charron D., Mooney N. HLA class IImediated death is induced via FAS/FAS ligand interaction in human splenic B-lymphocytes.

354. Blood, 1997, 89, p. 1996-2007.

355. Tsekouras C., Angelopoulon M.K., Pangalis G.A.

356. Treatment of B-chronic lymphocytic leukaemia with monoclonal antibodies. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. S102.

357. Turner M., Masek L.C., Hardy C.L., Parker C., Sweetenham W. Comparative adhesion of human haemopoietic cell lines to extracellular matrixcomponents, bone marrow stromal and endothelial cultures. Brit. j. Haematology, 1998, 100, 112-122.

358. Vallespi Т., Miguel R., Villiamor N., Rozman M., Bosch F., Aquilar J.L, Montserrat E., Campo E.

359. Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. S90.

360. Vant Veer M.B., Gratama W.

361. Quality assesment for immunophenotyping of leukaemia and lymphomas: the Dutch experience.1.ukaemia and lymphoma, 1994, V13, SI, p. 77-79.

362. Vassilakopoulos T.P., Angelopoulou M.K., Gribabis D.A., Ronsson P.A., Pangalis G.A. The evolution of immunoglobulin disorders in B-chronic lymphocytic leukaemia (B-cell). Hematol. Cell Ther., 1997, 39, SI, p. S72.

363. Villario A., Chilosi M., Adami F., Montaga 1., Deaglio S., Malavasi F., Caligaris-Cappio F.

364. Human myeloma cells express the CD за ligand CD31. Brit. j. Haematology, 1999, 105, p. 441-444.

365. Vidovic A., Cemerikic V., Petrovic M., Colovic M.

366. T-cell-rich B-cell lymphoma. A clinicopatological study of eleven cases. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 177.

367. Vladareanu A.M., Gherasim R., Bajenaru O., Mut Popescu D., et. al. Neurological disorders in multiple myeloma.

368. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 166.

369. Werda L., Zdzilowska E., Mensah P., Skotnicki A.B.

370. The role ofBCL-2 in apoptosis of B-chronic lymphocytic leukaemia. The Hematol. j., 2000, VI, SI, p. 11-12.

371. Wierbowska A., Urbanska E., Rys H., Robak T.

372. Circulating IL-6 type cytokines and SIL-6R in patients with multiple myeloma. Brit. j. Haematology, 1999, 105, 412-419.

373. Wiestner A., Rosenwald A., Barry Т., Ibbotson R.E. et al

374. Zap-70 expression identifies B-CLL with ummutated immunoglobulin genes, wjrse clinical outcome and distinet gene expression profile.

375. Blood, 2002, 11, vlOO, part.l, p. 168a.

376. Wolowiec D., Frydecka I., Kopelko-Slowic K., Potocrek S. et al

377. Concentration of serum soluble form of ICAM-l and e-selectin in patients with differentphases of non-Hodgkins lymphoma.

378. The Hematology journal 2001, vl, si, p. 140.

379. Woodle E.S., Smith D.M., Bluestone J.A., OKirkman W.M., Green D.R., Skowronski E.W.

380. Anti-human class IMHC antibodies induce apoptosis by a pathway that is distinct fromthe AS antigen-mediated pathway.

381. Journal of Immunology, 1997, 158, p. 2156-2164.

382. Wipori D., Barda-Saad M., Ben-Hamo H., Rozenszajn L.A., et. al.

383. Regulation of stroma dependent T-cell lymphopoiesis: involvement of novel sets of adhesion molecules.

384. Brit. j. Haematology, 1998, 102, 1 ISH-EHA, p. 160-161.

385. Zweegman S., VeenhofM.A., Huijqens P.C., Drager A.M.

386. Adhesion of megakaryocyte prigenitors to fibroblasts in an in vitro stroma model: role of TPO, VLA-4 and VLA-5.

387. Haematologica, 1999, 84, EHA-4, abstr. book, p. 56-56.

388. Yamada O., Wang Yun-Hua, Moto J.I.T., Mizoguchi H.

389. Clonal T-cell proliferation cansing pure red cell aplasia in chronic B-cell lymphocytic leukaemia successful treatment with cyclosporine following in vitro abrogtion of erythroid colony-suppressing activity. Brit. j. Haematology, 1998, 101, p. 335-337.

390. Yamaguchi M., Ogawa S., Oka K., Taniguchi M. et al

391. Prognostic signigicance of CD21 expression in diffuse largB-cells lymphomas. Blood, 2002, 11, vlOO, part.l, p.351a.

392. Yuones A., Shell V., Consoli U., Clodi K., Zhao S., Palmer J.L., Thomas E.K., Armitage R.J., Andreeff M.

393. Elevated levels of biologically active soluble CD40 ligand in the serum of patients withchronic lymphocytic leukaemia.

394. Brit. j. Haematology, 1998, 100, p. 135-141.