Клинические и молекулярные факторы, ассоциированные с поражением костно-суставной системы при болезни Гоше I типа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат наук Лукина, Кира Анатольевна

• Лукина, Кира Анатольевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Лукина, Кира Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ.................................................................................6

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ..................................................13

1. Болезнь Гоше, как наследственная ферментопатия.........................13

2. Молекулярные аспекты болезни Гоше........................................19

3. Поражение костно-суставной системы при болезни Гоше: нерешенные вопросы..................................................................................21

3.1. Клинические и радиологические признаки поражения костно-суставной системы при болезни Гоше.......................................22

3.2. Нормальное строение кости...............................................28

3.3. Ремоделирование костной ткани.........................................30

3.4. Патогенез поражения костно-суставной системы при болезни Гоше.................................................................................35

3.5. Генетические дефекты метаболизма костной ткани..................38

3.6. Генетические дефекты системы свертывания крови.................45

4. Заключение..........................................................................54

ГЛАВА И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.....................56

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.................................62

1. Клиническая и лабораторная характеристика 100 пациентов с болезнью Гоше I типа..............................................................................62

2. Клиническая оценка степени тяжести поражения костно-суставной системы..................................................................................73

3. Молекулярно-генетические исследования.....................................97

4. Сравнительная характеристика и статистический анализ клинических, лабораторных и радиологических данных у больных с различной степенью тяжести поражения костно-суставной системы..................101

ГЛАВА IV. ЗАКЛЮЧЕНИЕ..........................................................109

ВЫВОДЫ..................................................................................125

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ..........................................126

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ............................................................127

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АПС активированный протеин С

АХЗ анемия хронических заболеваний

БГ болезнь Гоше

ВА волчаночный антикоагулянт

ГЦБ глюкоцереброзидаза (кислая (3-глюкозидаза)

ЗФТ заместительная ферментная терапия

ЛБН лизосомные болезни накопления

МРТ магнитно-резонансная томография

МТГФР метилентетрагидрофолатредуктаза

НО несовершенный остеогенез

нтж насыщение трансферрина железом

ОЖСС общая железосвязывающая способность сыворотки

т.п.н. тысячи пар нуклеотидов

ВЕХА двухэнергетическая рентгеновская денситометрия

И1 протромбин

1ёА иммуноглобулин А

иммуноглобулин О

^м иммуноглобулин М

1Ь-1 интерлейкин-1

1Ь-10 интерлейкин-10

1Ь-11 интерлейкин-11

1Ь-17 интерлейкин-17

1Ь-1Яа антагонист рецептора интерлейкина-1

1Ь-1(3 интерлейкин-1 (3

1Ь-4 интерлейкин-4

1Ь-6 интерлейкин-6

ГИБ-у интерферон-гамма

РАМ ингибитор активатора плазминогена 1

RANK рецептор активатор ядерного транскрипционного фактора каппа В RANKL лиганд рецептора активатора ядерного фактора каппа В

TGF-p трансформирующий фактор роста бета

TNF-a фактор некроза опухоли альфа

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинические и молекулярные факторы, ассоциированные с поражением костно-суставной системы при болезни Гоше I типа»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы исследования

Болезнь Гоше (БГ) - наиболее частая форма наследственных ферментопатий, объединенных в группу лизосомных болезней накопления. В основе БГ лежат мутации гена кислой |3-глюкозидазы (глюкоцереброзидазы, ГЦБ) - лизосомного фермента, ответственного за катаболизм липидов. Присутствие двух мутантных аллелей гена ассоциируется со значительным (< 30% от нормального уровня) снижением каталитической активности глюкоцереброзидазы, что приводит к накоплению в цитоплазме антигенперерабатывающих макрофагов продуктов расщепления деградирующих клеток [Воробьев А.И., 2003; Краснопольская К.Д., 2005; Horowitz М. et al., 1989; Grabowski G.A. et al., 1997; Futerman A.H. and Zimran A., 2007]. Следствием данного метаболического дефекта являются:

1. Хроническая активация макрофагальной системы;

2. Аутокринная стимуляция моноцитопоэза и увеличение абсолютного количества макрофагов в местах «физиологического дома»: селезенка, печень, костный мозг, следствием чего являются спленомегалия, гепатомегалия, инфильтрация костного мозга;

3. Нарушение регуляторных функций макрофагов, что, предположительно, лежит в основе поражения костно-суставной системы (нарушение ремоделирования костной ткани) [Boven L.A. et al., 2004; Futerman A.H. and Zimran A., 2007].

Поражение костно-суставной системы является типичным проявлением БГ и варьирует от бессимптомной остеопении до тяжелейшего остеопороза с множественными патологическими переломами и ишемическими некрозами, ведущими к развитию вторичных остеоартрозов и, как следствие, необратимых ортопедических дефектов. Именно поражение костно-суставной системы определяет тяжесть течения БГ и качество жизни пациентов [Лукина Е.А., 2011]. Однако причина выраженной гетерогенности

клинических проявлений БГ, в том числе исключительной вариабельности характера и степени поражения костно-суставной системы, остается не ясной.

В качестве основных патогенетических механизмов поражения костно-суставной системы при БГ рассматриваются: инфильтрация костного мозга макрофагами/клетками Гоше; нарушение ремоделирования костной ткани; асептические некрозы костей (остеонекрозы) [Wenstrup R.J. et al., 2002; Futerman A.H. and Zimran A., 2007; Weinreb N.J., 2007].

Ген ГЦБ локализуется в регионе q21 на 1 хромосоме [Barneveld R.A. et al., 1983; Horowitz M. et al., 1989]. К настоящему времени описано около 350 мутаций, из которых 4 (N370S, L444P, 84GG, IVS2+1) встречаются наиболее часто и составляют около 60% всех мутаций гена ГЦБ в популяции пациентов с БГ [Mistry Р.К., 1993; Futerman A.H. and Zimran A., 2007; Grabowski G.A., 2012]. Результаты предыдущих исследований не выявили достоверных корреляций тяжести поражения костно-суставной системы ни с типом мутации гена ГЦБ, ни с остаточной активностью фермента ГЦБ [Futerman A.H. and Zimran A., 2007].

Мы предположили, что в основе гетерогенности поражения костно-суставной системы при БГ могут лежать дополнительные генетические дефекты: мутации генов, кодирующих белки, участвующие в процессах ремоделирования костной ткани и/или белки свертывающей системы крови.

В случаях тяжелого остеопороза, в качестве причины нарушения метаболизма костной ткани может рассматриваться дополнительный генетический дефект - мутации гена, ответственного за синтез коллагена 1 типа [Arnheim Е. et al., 2008; Gervas-Arruga J. et al., 2012]. В настоящее время описано более 1000 мутаций в генах COLI AI и COL1A2, кодирующих составные части цепи коллагена 1 типа, который является главным компонентом матрикса кости [Надыршина Д.Д., 2011]. В результате синтеза дефектного коллагена нарушается формирование костного матрикса,

изменяется баланс между резорбцией и формированием кости в сторону преобладания резорбции.

Патогенез остеонекрозов при БГ недостаточно изучен. В качестве одного из важных механизмов рассматривается ишемическое поражение костной ткани вследствие гиперкоагуляционного синдрома. Наличие наследствённой тромбофилии, обусловленной мутациями генов системы свертывания крови, может служить важным дополнительным патогенетическим механизмом гиперкоагуляции [Е^ет Б. е1 а1., 2000].

Поражение костно-суставной системы определяет тяжесть течения БГ и, как правило, является основной клинической проблемой при данном заболевании. Назначение заместительной ферментной терапии имеет целью предупредить развитие необратимого поражения костно-суставной системы и тяжелых ортопедических дефектов. Соответственно, больные с высоким риском тяжелого поражения костно-суставной системы нуждаются в разработке индивидуальных программ лечения. В соответствии с этим, изучение факторов, ассоциированных с высоким риском поражения костно-суставной системы при БГ, является актуальной научной и практической задачей.

Цель исследования:

Изучение клинических и молекулярных факторов, ассоциированных с тяжелым поражением костно-суставной системы при болезни Гоше I типа. Задачи исследования:

1. Характеристика клинических, лабораторных и радиологических данных пациентов с болезнью Гоше I типа, оценка тяжести поражения костно-суставной системы;

2. Молекулярный анализ мутаций генов, кодирующих: кислую (3-глюкозидазу, белки системы свертывания крови, коллаген 1 типа;

3. Анализ взаимосвязи между тяжестью поражения костно-суставной системы и изученными клиническими и лабораторными параметрами;

4. Разработка рекомендаций по использованию изученных параметров

для прогнозирования тяжести поражения костно-суставной системы.

Научная новизна:

Впервые в Российской Федерации проведен комплексный анализ клинических, лабораторных и радиологических данных 100 взрослых пациентов с болезнью Гоше I типа до начала заместительной ферментной терапии.

Показано, что тяжелое поражение костно-суставной системы имеет достоверную связь с наличием спленэктомии в анамнезе.

Охарактеризован генотип 100 пациентов с болезнью Гоше I типа; установлено, что наиболее частой мутацией в популяции российских пациентов является N3708, наиболее распространенным генотипом -Ш708/другая мутация.

На основании клинической и радиологической картины заболевания разработана шкала оценки тяжести поражения костно-суставной системы при болезни Гоше.

Впервые у пациентов с болезнью Гоше дана характеристика дополнительных генетических дефектов (наследственная тромбофилия, мутации гена коллагена I типа), предположительно, имеющих патогенетическую связь с тяжестью поражения костно-суставной системы.

Научная и практическая ценность:

Охарактеризовано состояние костно-суставной системы у пациентов с болезнью Гоше I типа, в том числе сопоставлена тяжесть течения заболевания у спленэктомированных и неспленэктомированных больных.

Установлена диагностическая ценность скринингового метода -аллель-специфической полимеразной цепной реакции в реальном времени, для идентификации мутаций гена кислой (3-глюкозидазы (молекулярная диагностика болезни Гоше).

Установлено, что частота наследственной тромбофилии -гетерозиготных мутаций генов протромбина и фактора V, гомозиготных мутаций генов метилентетрагидрофолатредуктазы и ингибитора активатора плазминогена 1, составила 1%, 1%, 7% и 33%, соответственно, что в общей сложности составляет 42%.

Показано, что спленэктомия ассоциируется с регрессом цитопенического синдрома, но является фактором риска тяжелого поражения костно-суставной системы.

Доказано, что у 95% нелеченых больных со сниженным уровнем гемоглобина анемия носит характер анемии хронических заболеваний, что является противопоказанием к лечению препаратами железа. Положения, выносимые на защиту:

1. Тяжелое поражение костно-суставной системы у взрослых пациентов с болезнью Гоше I типа имеет достоверную связь с наличием спленэктомии в анамнезе.

2. Не выявлено взаимосвязи между тяжестью поражения костно-суставной системы, с одной стороны, и исследованными молекулярными факторами: генотипом болезни Гоше, наличием наследственной тромбофилии и мутаций гена коллагена 1 типа COLI AI, с другой.

3. Молекулярный анализ 4 мутаций гена кислой ß-глюкозидазы с использованием скринингового метода (аллель-специфическая полимеразная цепная реакция в реальном времени), позволяет идентифицировать 2 мутантных аллеля и, соответственно, верифицировать диагноз болезни Гоше, у 39% больных, что дает основание рекомендовать данный метод в качестве первого этапа диагностики при подозрении на болезнь Гоше.

4. У 95% нелеченых пациентов с болезнью Гоше со сниженным уровнем гемоглобина анемия носит характер «анемии хронических

заболеваний», маркером которой является перераспределительный

дефицит железа, что является противопоказанием к лечению

препаратами железа.

Внедрение в практику

Основные положения диссертационной работы внедрены в работу научно-клинического отделения орфанных заболеваний и лаборатории молекулярной гематологии ФГБУ Гематологического научного центра МЗ РФ (Генеральный директор - академик РАМН, д.м.н., профессор Савченко В.Г.).

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 10 научных работ: 4 в отечественной (из них 2 в журналах, одобренных ВАК) и 6 в зарубежной литературе.

Апробация работы

Работа апробирована 03.06.2013 г. на заседании проблемной комиссии ГНЦ «Клинические исследования в гематологии (гемобластозы, депрессии кроветворения; ТКМ; миело- и лимфопролиферативные заболевания; опухоли лимфатической системы; патология красной крови; ИТП; порфирии)». Основные положения диссертации доложены на 1st European Gaucher Leadership Forum (май 2009 г., г. Милан), на 9th International European Working Group on Gaucher Disease Meeting, (июнь 2010 г., г. Кельн), на 3rd European Gaucher Leadership Forum (сентябрь 2011 г., г. Будапешт), Всероссийских декадниках по гематологии (апрель 2011 г., апрель 2013 г., г. Москва), на 10th International European Working Group on Gaucher Disease Meeting (июнь 2012 г., г. Париж), на Всероссийской конференции «Аналитическая надежность и диагностическая значимость лабораторной медицины» (март 2013 г., г. Москва), на конференции, посвященной вопросам диагностики и терапии редких болезней (апрель 2013 г., г.

Ярославль), на 18th Congress of the European Hematology Association (июнь 2013 г., г. Стокгольм).

Объем и структура работы

Диссертация изложена на 142 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, главы собственных результатов, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Библиографический указатель содержит 150 источников литературы. Работа иллюстрирована 34 таблицами и 27 рисунками.

Работа осуществлялась в период с октября 2010 г. по июнь 2013 г. на базе научно-клинического отделения орфанных заболеваний (зав. отд. -д.м.н., проф. Лукина Е.А.) и лаборатории молекулярной гематологии (рук. лаб. - д.б.н. Судариков А.Б.) при сотрудничестве с другими отделениями и лабораториями ФГБУ ГНЦ МЗ РФ (Генеральный директор - академик РАМН, д.м.н., профессор Савченко В.Г.).

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1. Болезнь Гоше, как наследственная ферментопатия

Термин «Лизосомные болезни накопления» (ЛБН) объединяет более 50 различных наследственных заболеваний, характеризующихся накоплением нерасщепленных метаболитов внутри лизосом клеток вследствие недостаточной активности лизосомных ферментов. Гликосфинголипидозы -группа ЛБН, характеризующихся нарушением ферментативного внутрилизосомного расщепления гликосфинголипидов - важнейших структурных элементов клеточных мембран. К сфинголипидозам относится и БГ. В основе заболевания лежит наследственный дефицит активности ГЦБ -лизосомного фермента, субстратами которого являются глюкозилцерамид и глюкозилсфингозин [Воробьев А.И., 2003; Краснопольская К.Д., 2005; Horowitz M. et al., 1989; Grabowski G.A. et al., 1997; Niederau С., 2006; Futerman A.H. and Zimran A., 2007].

БГ - наиболее частая ЛБН, встречается с частотой от 1:40000 до 1:60000 у представителей всех этнических групп; в популяции евреев ашкенази частота заболевания достигает 1:450-1:1000 [Futerman A.H. and Zimran A., 2007].

Болезнь впервые была описана в 1882 г. французским врачом Philippe С.Е. Gaucher, который выделил патогномоничные для данного заболевания клетки - макрофаги, перегруженные липидами, позднее названные клетками Гоше [Gaucher Р.С.Е., 1882]. В 1901 г. N.E. Brill установил семейный характер заболевания с аутосомно-рецессивным типом наследования [Brill N.E. et al., 1905]. В 1965 г. R.O. Brady и соавторы показали, что причина заболевания - врожденный дефицит ГЦБ [Brady R.O. et al., 1965]. В 1981 г. было установлено, что ген, кодирующий ГЦБ, расположен на длинном плече 1-ой хромосомы [Ginnis E.I. et al., 1985].

БГ наследуется по аутосомно-рецессивному механизму. Присутствие 2 мутантных аллелей гена ГЦБ ассоциируется со снижением (отсутствием)

каталитической активности ГЦБ, что приводит к накоплению в лизосомах макрофагов неутилизированных липидов и образованию характерных клеток накопления (клеток Гоше) - перегруженных липидами макрофагов [Brady R.O., 1966]. В редких случаях дефицит функции ГЦБ обусловлен мутацией гена активатора фермента - сапозина С [Christomanou Н. et al., 1986].

ГЦБ содержится во всех клетках организма, однако дефицит этого фермента имеет наибольшее значение для антигенперерабатывающих макрофагов, поскольку важная функция этих клеток состоит в деградации клеток крови (эритроцитов, лейкоцитов), закончивших свой жизненный цикл [Фрейдлин И. С., 1999]. Накопление в цитоплазме макрофагов нерасщепленных продуктов метаболизма сопровождается продукцией этими клетками провоспалительных цитокинов, аутокринной стимуляцией моноцитопоэза и увеличением абсолютного количества макрофагов в местах их «физиологического дома» (селезенка, печень, костный мозг, легкие), что проявляется гепато- и спленомегалией, инфильтрацией макрофагами костного мозга, легких и других органов [Лукина Е.А., 2011; Barak V., 1999].

Выделяют 3 типа БГ:

Тип I - без неврологических проявлений; наиболее частый вариант заболевания, наблюдается у 94% больных [Mikosch Р., 2010];

Тип II (острый нейронопатический) - у детей, характеризуется прогрессирующим течением, тяжелым поражением центральной нервной системы, приводящим к летальному исходу в возрасте около 2 лет;

Тип III (хронический нейронопатический) - неврологические осложнения могут проявляться как в раннем, так и в подростковом возрасте.

Основные клинические проявления БГ включают: спленомегалию, гепатомегалию, цитопению, поражение костно-суставной системы.

Спленомегалия

Размеры селезенки при БГ могут превышать норму в 5-80 раз: от 300 г до 10 кг. По мере прогрессирования спленомегалии в селезенке могут

развиваться инфаркты и фиброзные изменения. Инфаркты селезенки встречаются довольно часто и, как правило, не имеют клинических проявлений [Mankin H.J. et al., 2001; Futerman A.H. and Zimran A., 2007].

Гепатомегалия

Печень обычно увеличивается в 2-4 раза и не достигает таких больших размеров, как селезенка. Исключение составляют больные после спленэктомии, у которых в отсутствие лечения может наблюдаться гигантская гепатомегалия. Функция печени, как правило, не страдает, однако у 30-50% больных отмечается умеренное увеличение активности сывороточных трансаминаз [Futerman A.H. and Zimran A., 2007].

Цunto пения

Наиболее ранним и характерным проявлением цитопенического синдрома служит тромбоцитопения со спонтанным геморрагическим синдромом в виде подкожных гематом, кровоточивости слизистых оболочек или длительными кровотечениями после малых оперативных вмешательств. В настоящее время известно, что нарушение функции тромбоцитов (агрегации и/или адгезии) может обуславливать кровоточивость у больных Гоше независимо от количества тромбоцитов и коагуляционного статуса [Gillis S. et al., 1999]. В дальнейшем развиваются анемия и лейкопения с абсолютной нейтропенией, что обуславливает предрасположенность к инфекционным заболеваниям [Mistry Р.К., 1999] . Известно, что в развитии цитопений у больных со спленомегалией играет роль как гиперспленизм, так и инфильтрация костного мозга клетками Гоше [Futerman A.H. and Zimran A., 2007].

Поражение ЦНС

Симптомы поражения ЦНС наблюдаются только при нейронопатических типах БГ у детей (типы II и III) и могут включать глазодвигательную апраксию или сходящееся косоглазие, атаксию, потерю

интеллекта, нарушения чувствительности [Vellodi А., 2001; Futerman А.Н. and Zimran А., 2007].

Поражение легких

Поражение легких встречается редко - у 1-2% больных, преимущественно у спленэктомированных пациентов, и проявляется как интерстициальное заболевание легких или поражение легочных сосудов с развитием симптомов легочной гипертензии [Mistry Р.К., 1999].

Поражение костей

Поражение костей при БГ характеризуется исключительным разнообразием. Данная тема будет подробно рассмотрена в разделе 3.

Диагностика болезни Гоше

Золотой стандарт современной диагностики БГ - биохимическое определение активности ГЦБ в лейкоцитах крови (энзимодиагностика). Диагноз подтверждают при снижении активности фермента до уровня 30% и менее от нормального значения. Степень снижения активности фермента не коррелирует с тяжестью клинических проявлений и течения заболевания [Futerman А.Н. and Zimran А., 2007].

Молекулярные исследования для выявления мутаций гена ГЦБ позволяют верифицировать диагноз, однако не относятся к обязательным методам диагностики БГ и используются для дифференциальной диагностики в сложных случаях или для научного анализа.

Морфологическое исследование костного мозга позволяет выявить многочисленные клетки Гоше и одновременно исключить гемобластоз или другое заболевание системы крови как причину цитопении и гепатоспленомегалии.

Дополнительным биохимическим маркером, характерным для БГ, служит значительное повышение активности сывороточной хитотриозидазы - гидролитического фермента, который синтезируется активированными макрофагами. Однако 6% общей популяции составляют носители

гомозиготной мутации гена хитотриозидазы, что выражается в отсутствии активности фермента в сыворотке крови. Поэтому в этих редких случаях определение активности хитотриозидазы не может быть использовано для диагностики и мониторинга БГ [Futerman А.Н. and Zimran А., 2007].

Другими характерными лабораторными симптомами при БГ являются: повышение уровня сывороточного ферритина, ангиотензинпревращающего фермента, хемокина CCL-18, которые отражают степень активности заболевания и могут использоваться как биомаркеры для оценки динамики на фоне лечения [Zimran А. et al., 1992; Futerman А.Н. and Zimran A., 2007; Mistry P.K. et al., 2007; Stein P. et al., 2010; Zimran A., 2011].

Практически у всех пациентов с БГ обнаруживается поликлональная гипергаммаглобулинемия, а у некоторых имеет место моноклональная гаммапатия (от 1 до 35% больных по данным различных авторов) [Mankin H.J. et al., 2001; Futerman А.Н. and Zimran A., 2007; De Fost M. et al., 2008; Grosbois B. et al., 2009; Zimran A., 2011]. Согласно данным некоторых исследований, у пациентов с БГ имеется повышенный риск развития множественной миеломы [Rosenbloom В.Е. et al., 2005; Zimran А. et al., 2005;; Costello R. et al., 2006; Rosenbaum H. et al., 2011]. В основе развития лимфопролиферации, по-видимому, лежит хроническая стимуляция В-лимфоцитов цитокинами активированных макрофагов (интерлейкин-6 (IL-6),' CCL18) [Barak V., 1999; Futerman А.Н. and Zimran А., 2007].

Лечение болезни Гоше

Современное лечение БГ заключается в назначении пожизненной заместительной ферментной терапии (ЗФТ) рекомбинантной ГЦБ -имиглюцеразы (Церезим), синтезируемой клеточной линией, полученной из яичников китайских хомячков. Сложный технологический процесс получения и очистки генно-инженерного продукта определяет высокую стоимость данного лекарственного препарата. Имиглюцераза вводится внутривенно капельно (1-часовая инфузия) каждые 2 недели,

характеризуется отличной переносимостью и высокой клинической эффективностью у пациентов с БГ 1 типа. Однако имиглюцераза не проникает через гематоэнцефалический барьер, поэтому неэффективна для лечения нейронопатических типов заболевания (II и III типов БГ) [Zimran А., 2011].

До последнего времени имиглюцераза была единственным лекарственным препаратом для лечения БГ. Недавно были синтезированы новые препараты для внутривенного введения: велаглюцераза альфа — человеческая рекомбинантная ГЦБ и талиглюцераза альфа — фермент, продуцируемый клетками растений [Pastores G.M., 2010; Hollak С.Е., 2012]. Велаглюцераза успешно прошла все фазы клинических испытаний, используется в Европе для лечения БГ, наряду с имиглюцеразой, недавно (02.2013 г.) зарегистрирована для клинического применения в нашей стране [Gonzalez D.E., 2013]. Талиглюцераза еще находится на стадии клинических испытаний.

Новым направлением в лечении БГ стала субстрат-редукционная терапия - создание лекарственных препаратов на основе малых молекул, подавляющих активность фермента, который отвечает за синтез субстрата (глюкозилцерамид). Вследствие прекращения синтеза и поступления глюкозилцерамида в лизосомы макрофагов происходит постепенное расщепление накопленного в лизосомах субстрата мутантной ГЦБ, что сопровождается регрессом гепатоспленомегалии и других клинических проявлений БГ [Futerman А.Н. and Zimran А., 2007]. Важное преимущество субстратредукционной терапии - пероральный прием лекарственного препарата. Однако первый препарат миглустат (Завеска) нашел лишь ограниченное применение из-за высокой частоты побочных эффектов, преимущественно со стороны желудочно-кишечного тракта. Новый препарат - элиглустат, в настоящее время проходит клинические испытания 3 фазы [Lukina Е., 2010].

2. Молекулярные аспекты болезни Гоше

Ген ГЦБ, а также его псевдоген локализуются в регионе q21 на 1 хромосоме [Barneveld R.A. et al., 1983; Horowitz M. et al., 1989; Futerman A.H. and Zimran A., 2007]. Структурный ген содержит 11 экзонов и 10 интронов, включает 7,6 тысяч пар нуклеотидов (т.п.н.). Псевдоген расположен на 16 т.п.н. ниже [Horowitz М. al., 1989; Futerman A.H. and Zimran A., 2007]. В гомологичных участках обнаружена 96% идентичность последовательности с таковой структурного гена. Повреждения гена ГЦБ включают нуклеотидные замены, приводящие либо к аминокислотным заменам, либо к мутациям нарушения сайта сплайсинга; мутации, приводящие к сдвигу рамки считывания (инсерции, делеции) и комплексные аллели, объединяющие несколько мутаций [Mistry Р.К. and Сох Т.М., 1993].

К настоящему времени описано около 350 различных мутаций гена ГЦБ, из которых 4 (N370S, L444P, 84GG, IVS2+1) встречаются наиболее часто и составляют 90% всех мутантных аллелей гена ГЦБ в популяции евреев ашкенази и около 60% мутантных аллелей у больных других этнических групп [Mistry Р.К., 1993; Futerman A.H. and Zimran A., 2007; Grabowski G.A., 2012]. Распределение мутаций варьирует среди больных различных этнических групп.

Наиболее распространенная мутация гена ГЦБ при БГ I типа - Asn370 —» Ser (N370S), которая вызвана заменой аденина (А) на гуанин (G) в позиции 1226 комплементарной цепи ДНК. Эта мутация присутствует в 67,2% мутантных аллелей у евреев ашкенази и в 35% - у пациентов других национальностей [Mankin H.J. et al., 2001]. По данным Международного Регистра БГ, наиболее частым генотипом в мире является N370S/N370S [ICGG Gaucher Registry Annual Report, 2011].

Миссенс мутация Leu444 —»Pro (L444P) вызвана заменой тимина (Т) на цитозин (С) в позиции 1448 комплементарной цепи ДНК. Данная мутация встречается с частотой 3,1% мутантных аллелей в популяции евреев

ашкенази и 27,5% аллелей у пациентов других национальностей [Mankin HJ. et al., 2001]. По данным Международного Регистра БГ, генотип N370S/L444P занимает второе место по частоте встречаемости [ICGG Gaucher Registry Annual Report, 2011].

Мутации, приводящие к нарушению синтеза ГЦБ, в гомозиготном и сочетанном гетерозиготном (84GG/IVS2+1) состоянии являются летальными. Мутация 84GG приводит к сдвигу рамки считывания, что препятствует трансляции глюкозидазы, а мутация IVS2+1 (замена G на А в позиции 1067) приводит к удалению 2-го экзона из первичного транскрипта вследствие нарушения сплайсинга [Beutler Е. et al., 1994].

Мутация 84GG в гетерозиготном состоянии встречается с частотой 12,5% мутантных аллелей в популяции евреев ашкенази и 0,25% - у пациентов других национальностей. IVS2+1 в гетерозиготном состоянии встречается с частотой 3,1% мутантных аллелей в популяции евреев ашкенази и практически не встречается среди пациентов других национальностей [Mankin H.J. et al., 2001].

БГ I типа ассоциируется с миссенс-мутациями, которые приводят к частичному дефициту фермента. Генотип N370S/N370S ассоциируется с развитием только БГ I типа; присутствие аллеля N370S «защищает» от поражения нервной системы. Напротив, инактивирующие точечные мутации, рекомбинантные аллели и внутригенные делеции сопряжены с накоплением продуктов деградации гликосфинголипидов в нервной ткани (нейроны, адвентициальные клетки, микроглия) и ассоциируются с развитием нейронопатических типов БГ (II и III). Известно, что гомозиготность по L444P ассоциируется с БГ III типа [Букина Т.М., 2005; Grabowski G.A., 1997; Сох Т.М., 2001].

Молекулярный анализ гена ГЦБ затруднен вследствие присутствия высоко гомологичного транскрибируемого псевдогена [Mistry Р.К. and Сох Т.М., 1993]. Так как некоторые мутации гена (например, L444P) входят в

состав нормальной последовательности псевдогена, то для молекулярного анализа необходимо использовать методы, позволяющие анализировать только последовательности активного гена.

Для обнаружения/исключения наличия нескольких наиболее распространенных мутаций у пациента используют скрининговые методы молекулярно-генетического анализа, такие, как рестрикционный анализ ДНК, а также ARMS (amplification refractory mutation system) [Mistry P.K. et al., 1992; Mistry P.K. and Сох T.M., 1993]. Для идентификации всех, в том числе редких и ранее не описанных мутаций используется секвенирование ДНК [Sidransky Е., 2004].

Исследования, посвященные изучению корреляции генотипа и фенотипа БГ, показали выраженную генотипическую гетерогенность у больных со сходными клиническими проявлениями заболевания. Установлено, что характер клинических проявлений БГ невозможно предсказать по генотипу, так как имеется целый спектр различных клинических вариантов БГ, ассоциированных с определенной мутацией [Beutler Е., 1993; Mankin H.J. et al., 2001; Niederau С., 2006; Futerman A.H. and Zimran A., 2007; Blech-Hermoni Y.H. et al., 2010].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Лукина, Кира Анатольевна, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Анатомия человека // Под ред. М.Р. Сапина. - М.: Медицина. - 1997 -Т.1.-544 с.

2. Афанасьев Ю.И., Юрина H.A., Котовский Е.Ф. Гистология // 5-е изд., перераб. и доп. — Москва: Медицина. - 2002. - 744 с.

3. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза // — 3-е изд. — М.: Ньюдиамед. - 2008. — 292 с.

4. Баркаган З.С. Клинико-патогенетические варианты, номенклатура и основы диагностики гематогенных тромбофилий // Проблемы гематол. и перелив, крови. - 1996. -№3. - С.5-15.

5. Беневоленская Л.И. Руководство по остеопорозу // М.: БИНОМ. Лаборатория знаний. - 2003. - 524 с.

6. Букина Т.М. Биохимическая и молекулярно-генетическая характеристика болезни Гоше у российских пациентов: дис. ... канд. биол. наук. - Москва. - 2005. - 114 с.

7. Быков В.Л. Цитология и общая гистология // Sotis, С.-П. - 2000. - 519 с.

8. Бенедиктова A.A. Роль протеаз различных классов в развитии остеопороза у крыс: дисс. канд. биол. наук. - Новосибирск, 2009. - 166 с.

9. Волков Н.М. Физиология метаболизма костной ткани и механизм развития метастазов в кости // Практическая Онкология. - 2011. - Т. 12. -№3. -С.97-102.

10. Дворниченко М.В., Нечаев К.А., Митриченко Д.В. и др. Взаимосвязь ремоделирования костной ткани и системы цитокинов у детей в норме и при патологии // Современная травматология и ортопедия. - 2012. - № 3.

11. Зубов Д.А., Оксимец В.М. Цитокиновая иммунорегуляция репаративной регенерации костной ткани культивированными мезенхимальными стволовыми клетками // НД1 травматологй' та ортопедй' Донецького нащонального медичного ушверситету ¿м.М.Горького Том 9, №2, 2008 http://archive.nbuv.gov.ua/portal/chem_biol/travma/2008_2/2008_2_6.pdf.

12. Кадурина Т.И. Наследственные коллагенопатии (клиника, диагностика, лечение и диспансеризация) // Спб.: Невский Диалект. - 2000. - 271 с.

13. Калашникова Е.А., Кокаровцева С.Н., Коваленко Т.Ф. и др. Частоты мутаций в генах фактораУ (FVLeiden), протромбина (G20210A) и 5,10-метилентетрагидрофолатредуктазы (С677Т) у русских // Медицинская генетика. - 2006. - № 7. - С.23-24.

14. Корнилов Н.В., Грязнухин Э.Г. Травматология и ортопедия. Руководство для врачей // Спб.: Гиппократ. - 2006. - том 3. - 896 с.

15. Краснопольская К.Д. Наследственные болезни обмена веществ // М.: 2005.-С. 20-22.

16. Лашутин C.B. Фосфорно-кальциевый обмен в норме / под ред. Е.А. Стецюка, C.B. Лашутина, В.Б. Чупрасова // Диализный альманах СПб.: ЭЛБИ-СПб. - 2005. - С.244-271.

17. Лукина Е.А. Болезнь Гоше // М.: Литера. - 2011. - 54 с.

18. Мазуренко С.О. Диагностика и лечение остеопороза в общей клинической практике: Руководство для врачей // СПб.: Изд-во С-Петерб. ун-та. - 2010. — 56 с.

19. Надыршина Д.Д. Эпидемиологическое и молекулярно-генетическое исследование несовершенного остеогенеза: дис. ... канд. биол. наук. -Уфа.-2011,-167 с.

20. Омельяненко Н.П., Слуцкий Л.И. Соединительная ткань (гистофизиология и биохимия) // Под. ред. Миронова С.П. - М.: Известия. - 2009. - том 1. - 379 с.

21. Омельяненко Н.П., Слуцкий Л.И. Соединительная ткань (гистофизиология и биохимия) // Под. ред. Миронова С.П. - М.: Известия. - 2010. - том 2. - 600 с.

22. Оноприенко Л.В. Молекулярные механизмы регуляции активности макрофагов // Биоорганическая химия. - 2011. - №4. - т.З. - С.437-451.

23. Павлова Е.В. Динамика печеночных и костных изменений на фоне комплексной терапии при болезни Гоше у детей: дис. канд. мед. наук. -Москва.-2004.-128 с.

24. Поворознюк В.В., Гречанина Е.Я., Балацкая Н.И., Вайда В.М. Несовершенный остеогенез: патогенез, классификация, клиническая картина, лечение // Ортопедия, травматология и протезирование. - 2009. - № 4. - С. 110-117

25. Руководство по гематологии // Под. ред. А.И. Воробьева. - В 3-х т. - М.: Ньюдиамед. - 2003. - Т. 2 - С. 202-205.

26. Северин Е.С. Биохимия // М.: ГЭОТАР-медиа. - 2003. - 779 с.

27. Фрейдлин И.С. Клетки иммунной системы // СПб: Наука. - 1999. - 232 с.

28. Abe М, Hiura К, Wilde J, et al. Role for macrophage inflammatory protein (MlP)-la and MlP-lb in the development of osteolytic lesions in multiple myeloma // Blood. 2002;100:2195-2202.

29. Arnheim E, Chicco G, Phillips M, et al. Molecular aspects of osteopathy in type 1 Gaucher disease: correlation between genetics and bone density // Rheumatol Int. 2008 Jul;28(9):873-7.

30. Barak V, Acker M, Nisman B, Kalickman I, Abrahamov A, Zimran A, Yatziv S. Cytokines in Gaucher's disease // Eur Cytokine Netw. 1999 Jun;10(2):205-10.

31. Barneveld RA, Keijzer W, Tegelaers FP, Ginns EI, Geurts van Kessel A, Brady RO, Barranger J A, Tager JM, Galjaard H, Westerveld A, Reuser AJ. Assignment of the gene coding for human beta-glucocerebrosidase to the region q21 -q31 of chromosome 1 using monoclonal antibodies // Hum Genet. 1983;64(3):227-31.

32. Bell RS, Mankin HJ, Doppelt SH. Osteomyelitis in Gaucher disease // J Bone Joint Surg Am. 1986 Dec;68(9): 1380-8.

33. Ben Amor IM, Glorieux FH, Rauch F. Genotype-phenotype correlations in autosomal dominant osteogenesis imperfecta // J Osteoporos. 2011;2011:540178.

34. Bertina RM, Koeleman BP, Koster T, Rosendaal FR, Dirven RJ, de Ronde H, van der Velden PA, Reitsma PH. Mutation in blood coagulation factor V associated with resistance to activated protein C // Nature 1994 May 5;369(6475):64-7.

35. Beutler E. Gaucher disease as a paradigm of current issues regarding single gene mutations in humans // Proc Natl Acad Sei USA. 1993 Jun 15;90(12):5384-90.

36. Beutler E., Demina A., Gelbart T. Glucocerebrosidase mutations in Gaucher disease // Mol Med. 1994; 1(1): 82-92.

37. Björkman A, Svensson PJ, Hillarp A, Burtscher IM, Rünow A, Benoni G. Factor V leiden and prothrombin gene mutation: risk factors for osteonecrosis of the femoral head in adults // Clin Orthop Relat Res. 2004 Aug;(425):168-72.

38. Blech-Hermoni YN, Ziegler SG, Hruska KS, et al. In silico and functional studies of the regulation of the glucocerebrosidase gene // Mol Genet Metab. 2010 Mar;99(3):275-82.

39. Botto LD, Yang Q. 5,10-Methylenetetrahydrofolate reductase gene variants and congenital anomalies: a HuGE review // Am J Epidemiol. 2000 May l;151(9):862-77.

40. Boven LA, van Meurs M, Boot RG, et al. Gaucher cells demonstrate a distinct macrophage phenotype and resemble alternatively activated macrophages // Am J Clin Pathol. 2004;122:359-369.

41. Brady RO, Kanfer JN, Shapiro D. Metabolism of Glucocerebrosides. II. Evidence of an Enzymatic Deficiency in Gaucher's Disease // Biochem Biophys Res Commun, 1965. 18: p. 221-5.

42. Brady RO, Kanfer JN, Bradley RM, Shapiro D. Demonstration of a deficiency of glucocerebroside-cleaving enzyme in Gaucher's disease // J Clin Invest. 1966 My; 45(7): 1112-1115.

43. Brill N, Mandelbaum F, Lindman E. Primary splenomegaly-gaucher type. Report on one of four cases occuring in a single generation in one family // Am J Med Sci, 1905. 129: p. 491-504.

44. Castoldi E, Brugge JM, Nicolaes GA, Girelli D, Tans G, Rosing J. Impaired APC cofactor activity of factor V plays a major role in the APC resistance associated with the factor V Leiden (R506Q) and R2 (H1299R) mutations // Blood. 2004 Jun 1; 103(11):4173-9.

45. Ceelie H, Spaargaren-van Riel CC, Bertina RM, Vos HL. G20210A is a functional mutation in the prothrombin gene; effect on protein levels and 3'-end formation // J Thromb Haemost. 2004;2:119-127.

46. Cesari M, Pahor M, Incalzi RA. Plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1): a key factor linking fibrinolysis and age-related subclinical and clinical conditions // Cardiovasc Ther. 2010 Oct;28(5):e72-91.

47. Christomanou H, Aignesberger A, Linke RP. Immunochemical characterization of two activator proteins stimulating enzymic sphingomyelin degradation in vitro. Absence of one of them in a human Gaucher disease variant // Biol Chem Hoppe Seyler, 1986. 367(9): p. 879-90.

48. Constantoulakis M, Trichopoulos D, Avgoustaki O and Economidou J. Serum immunoglobulin concentrations before and after splenectomy in patients with homozygous beta-thalassaemia // J Clin Pathol. 1978 June; 31(6): 546-550.

49. Costello R, O'Callaghan T, Sebahoun G. Gaucher disease and multiple myeloma // Leuk Lymphoma. 2006 Jul;47(7): 1365-8.

50. Cox TM, Aerts JM, Belmatoug N, Cappellini MD, vom Dahl S, Goldblatt J, Grabowski GA, Hollak CE, Hwu P, Maas M, Martins AM, Mistry PK, Pastores GM, Tylki-Szymanska A, Yee J, Weinreb N. Management of non-neuronopathic Gaucher disease with special reference to pregnancy,

splenectomy, bisphosphonate therapy, use of biomarkers and bone disease monitoring // J Inherit Metab Dis. 2008 Jun;31(3):319-36.

51. Cox TM, Schofield JP. Gaucher's disease: clinical features and natural history // Baillieres Clin Haematol. 1997;10:657-89.

52. Cox TM. Gaucher's disease—an exemplary monogenic disorder // QJM. 2001 Aug;94(8):399-402.

53. Dahlback B. Anticoagulant factor V and thrombosis risk (editorial) // Blood 2004; 103:3995.

54. Dahlback B. New molecular insights into the genetics of thrombophilia. Resistance to activated protein C caused by Arg506 to Gin mutation in factor V as a pathogenic risk factor for venous thrombosis // Thromb Haemost 1995;74:139-148.

55. Dalgleish R. The human type I collagen mutation database // Nucleic Acids Res. 1997 Jan l;25(l):181-7.

56. D'Angelo G. Role of hepcidin in the pathophysiology and diagnosis of anemia // Blood Res. 2013 March; 48(1): 10-15.

57. Dawson S, Hamsten A, Wiman B, Henney A, Humphries S. Genetic variation at the plasminogen activator inhibitor-1 locus is associated with altered levels of plasma plasminogen activator inhibitor-1 activity // Arterioscler Thromb. 1991 Jan-Feb;l 1(1): 183-90.

58. De Fost M, Out TA, de Wilde FA, Tjin EPM, Pals ST, van Oers MHJ, Boot RG, Aerts JFMG, Maas M, vom Dahl S, Hollak CEM. Immunoglobulin and free light chain abnormalities in Gaucher disease type I: data from an adult cohort of 63 patients and review of the literature // Ann Hematol. 2008 June; 87(6): 439—449.

59. De Groot PG, Lutters B, Derksen RH, Lisman T, Meijers JC, Rosendaal FR. Lupus anticoagulants and the risk of a first episode of deep venous thrombosis // J Thromb Haemost. 2005 Sep;3(9): 1993-7.

60. Deegan PB, Moran MT, McFarlane I, Schofield JP, Boot RG, Aerts JM, Cox TM: Clinical evaluation of chemokine and enzymatic biomarkers of Gaucher disease // Blood Cells Mol Dis 2005, 35:259-267.

61. Deegan PB, Pavlova E, Tindall J, Stein PE, Bearcroft P, Mehta A, Hughes D, Wraith JE, Cox TM. Osseous manifestations of adult Gaucher disease in the era of enzyme replacement therapy // Medicine (Baltimore). 2011 Jan;90(l):52-60.

62. Demeter J, Böhm U, Päloczi K, Lehoczky D, Meretey K. Immunoglobulin profiles and antibacterial antibody levels in 50 patients a long time after posttraumatic splenectomy // J Clin Lab Immunol. 1990 Sep;33(l):7-9.

63. Edwards JP, Zhang X, Frauwirth KA, Mosser DM. Biochemical and functional characterization of three activated macrophage populations // J Leukoc Biol. 2006 Dec;80(6): 1298-307.

64. Eleftheriou A, Zalavras Ch, Kakosimos G, Malizos K, Vartholomatos G. Genetic thrombophilic risk factors for osteonecrosis of the femoral head. Proceedings of the 4th Congress of the European Haematology Association // Haematologica 1999; 84: [abstract 787].

65. Elstein D, Renbaum P, Levy-Lahad E, Zimran A. Incidence of thrombophilia in patients with Gaucher disease // Am J Med Genet. 2000 Dec 18;95(5):429-31.

66. Eriksen E.F. Cellular mechanisms of bone remodeling // Rev.Endocr.Metab Disord. - 2010. - Vol. 11. - №4. - P.219-227.

67. Eriksen E.F. Normal and pathological remodeling of human trabecular bone: three dimensional reconstruction of the remodeling sequence in normals and in metabolic bone disease // Endocr. Rev., 1986. Vol.7. №4 P.379-408.

68. Eriksen E.F., Hodgson S.F., Eastell R. et al. Cancellous bone remodeling in type I (postmenopausal) osteoporosis: quantitative assessment of rates of formation, resorption, and bone loss at tissue and cellular levels // J. Bone Miner. Res. - 1990. - Vol.5. - №4. - P.311-319.

69. Eriksen EF, Melsen F, Mosekilde L. Reconstruction of the resorptive site in iliac trabecular bone: a kinetic model for bone resorption in 20 normal individuals // Metab Bone Dis. Relat Res., 1984. Vol.5. №5. P.235-242.

70. Frosst P, Blom HJ, Milos R, et al. A candidate genetic risk factor for vascular disease: a common mutation in methylenetetrahydrofolate reductase // Nat Genet. 1995 May;10(l):lll-3.

71. Galli M, Finazzi G, Barbui T. Antiphospholipid antibodies: predictive value of laboratory tests // Thromb Haemost. 1997 Jul;78(l):75-8.

72. Galli M, Luciani D, Bertolini G, Barbui T. Lupus anticoagulants are stronger risk factors for thrombosis than anticardiolipin antibodies in the antiphospholipid syndrome: a systematic review of the literature // Blood 2003; 101: 1827-32.

73. Gaucher Disease / Eds. A.H. Futerman and A. Zimran. - Taylor & Francis Group, LLC, 2007. - 528 p.

74. Gaucher P. De l'epithelioma primitive de la rate, hypertrophie idiopathique de la rate sans leucemie (doctoral thesis). 1882: Paris.

75. Gervas-Arruga J, Roca M, de Bias I, et al. Bone disease, genetic and cytokines as markers in Gaucher disease // Abstract book EWGGD 2012 Jun 28-30, Poster 33, 110.

76. Gillis S et al. Platelet function abnormalities in Gaucher disease patients // Am J Hematol, 1999. 61(2): 103-6.

77. Ginnis EI, et al. Gene mapping and leader polypeptide sequence of human glucocerebrosidase: implications for Gaucher disease // Proc Natl Acad Sci U S A, 1985. 82 (20): p. 7101-5.

78. Girolami A, Simoni P, Scarano L, Carraro G. Prothrombin and the prothrombin 20210 G to A polymorphism: their relationship with hypercoagulability and thrombosis // Blood Reviews. - 1999. - V.13. - P. 205-210.

79. Glueck CJ, Fontaine RN, Gruppo R, Stroop D, Sieve-Smith L, Tracy T, Wang P. The plasminogen activator inhibitor-1 gene, hypofibrinolysis, and osteonecrosis // Clin Orthop Relat Res. 1999 Sep;(366):133-46.

80. Glueck CJ, Freiberg R, Tracy T, Stroop D, Wang P. Thrombophilia and hypofibrinolysis: pathophysiologies of osteonecrosis // Clin Orthop Relat Res. 1997 Jan;(334):43-56.

81. Glueck CJ, Freiberg RA, Wang P. Heritable Thrombophilia-Hypofibrinolysis and Osteonecrosis of the Femoral Head // Clin Orthop Relat Res. 2008 May; 466(5): 1034-1040.

82. Goker-Alpan O, Hruska KS, Orvisky E, Kishnani PS, Stubblefield BK, Schiffmann R, et al. Divergent phenotypes in Gaucher disease implicate the role of modifiers // J Med Genet 2005; 42: e37.

83. Gonzalez DE, Turkia HB, Lukina EA, Kisinovsky I, et al. Enzyme replacement therapy with velaglucerase alfa in Gaucher disease: Results from a randomized, double-blind, multinational, Phase 3 study // Am J Hematol. 2013 Mar;88(3): 166-71.

84. Grabowski G.A. Gaucher disease: gene frequencies and genotype/phenotype correlations//Genet. Test. 1997; 1:5-12.

85. Grabowski G.A. Gaucher disease and other storage disorders // In: Hematology 2012: 54th ASH Annual Meeting and Exposition. Atlanta, Georgia, 2012; 13-18.

86. Grosbois B, Rose C, Noel E, Serratrice Cde R, Dobbelaere D, Gressin V, Cherin P, Hartmann A, Javier RM, Clerson P, Hachulla E, Jaussaud R. Gaucher disease and monoclonal gammopathy: a report of 17 cases and impact of therapy // Blood Cells Mol Dis. 2009 Jul-Aug;43(l): 138-9.

87. Harmanci O, Bayraktar Y. Gaucher disease: new developments in treatment and etiology // World J Gastroenterol. 2008;14:3968-3973.

88. Hollak СЕ. An evidence-based review of the potential benefits of taliglucerase alfa in the treatment of patients with Gaucher disease // Core Evid. 2012;7:15-20.

89. Horowitz M, Wilder S, Horowitz Z, Reiner O, Gelbart T, Beutler E. The human glucocerebrosidase gene and pseudogene: structure and evolution // Genomics 1989 Jan;4(l):87-96.

90. Hughes D, Cappellini MD, Berger M, et al. Recommendations for the management of the haematological and onco-haematological aspects of Gaucher disease // Br J Haematol. 2007;138:676-86.

91. International Collaborative Gaucher Group Gaucher Registry Annual Report, 2011.

92. Jones LC, Mont MA, Le ТВ, Petri M, Hungerford DS, Wang P, Glueck CJ. Procoagulants and osteonecrosis // J Rheumatol. 2003 Apr;30(4):783-91.

93. Khan A, Hangartner T, Weinreb NJ, Taylor JS, Mistry PK. Risk factors for fractures and avascular osteonecrosis in type 1 Gaucher disease: a study from the International Collaborative Gaucher Group (ICGG) Gaucher Registry // J Bone Miner Res. 2012 Aug;27(8): 1839-48.

94. Kim HO, Cho CH, Cho YJ et al. Significant associations of PAI-1 genetic polymorphisms with osteonecrosis of the femoral head // BMC Musculoskelet Disord. 2011; 12: 160.

95. Kishnani P, Skeletal and Hematologic Pathology of Type 1 Gaucher Disease // Duke University School of Medicine, CME Course, 2008.

96. Korompilias A, Ortel T, Gilkeson G, Coogan PG, Gunneson EE, Urbaniak JR. Hypercoagulability and osteonecrosis. In: Urbaniac JR, Jones JP Jr, editors. Osteonecrosis: etiology, diagnosis and treatment // American Academy of Orthopaedic Surgeons: Rosemont;1997. p. 111-6.

97. Lafforgue P. Pathophysiology and natural history of avascular necrosis of bone // Joint Bone Spine. 2006 Qct;73(5):500-7.

98. Lafforgue P. Pathophysiology of skeletal manifestations in type I Gaucher disease // Abstract book EWGGD 2012 Jun 28-30, p. 44.

99. Li Y. Plasminogen Activator Inhibitor-1 4G/5G Gene Polymorphism and Coronary Artery Disease in the Chinese Han Population: A Meta-Analysis // PLoS One. 2012; 7(4): e33511.

100. Lukina E, Watman N, Arreguin EA, Dragosky M, et al. Improvement in hematological, visceral, and skeletal manifestations of Gaucher disease type 1 with oral eligiustat tartrate (Genz-112638) treatment: 2-year results of a phase 2 study//Blood. 2010 Nov 18;116(20):4095-8.

101. Maas M, Poll LW, Terk MR. Imaging and quantifying skeletal involvement in Gaucher disease // Br J Radiol. 2002;75 Suppl l:A13-24.

102. Makris M, Rosendaal FR, Preston FE. Familial thrombophilia: genetic risk factors and management // J Intern Med Suppl. 1997;740:9-15.

103. Mankin HJ, Rosenthal DI, Xavier R. Gaucher Disease. New approaches to an ancient disease // J Bone Joint Surg Am. 2001 May;83-A(5):748-62.

104. Mankin HJ. Nontraumatic necrosis of bone (osteonecrosis) // N Engl J Med. 1992;326:1473-9.

105. Mehrez M. J. Epidemiology of Prothrombin G20210A Mutation in the Mediterranean Region // Mediterr J Hematol Infect Dis. 2011; 3(1): e2011054.

106. Mehta R, Shapiro AD. Plasminogen activator inhibitor type 1 deficiency // Haemophilia. 2008 Nov; 14(6): 1255-60.

107. Mikosch P. Editorial: Gaucher disease // Wien Med Wochenschr. 2010 Dec;160(23-24):593.

108. Mistry PK and Cox TM. The glucocerebrosidase locus in Gaucher's disease: molecular analysis of a lysosomal enzyme // J Med Genet. 1993 November; 30(11): 889-894.

109. Mistry PK, Sadan S, Yang R, et al. Consequences of diagnostic delays in type 1 Gaucher disease: the need for greater awareness among hematologists-

oncologists and an opportunity for early diagnosis and intervention // Am J of Hematol. 2007; 82:697-701.

110. Mistry PK, Smith SJ, Ali M, Hatton CS, Mclntyre N, Cox TM. Genetic diagnosis of Gaucher's disease // Lancet. 1992 Apr 11;339(8798):889-92.

111. Mistry PK. Gaucher disease: a model for modern management of a genetic disease // J. Hepatology, 1999. 30: p. 1-5.

112. Monti E, Mottes M, Fraschini P, Brunelli P, Forlino A, Venturi G, Doro F, Perlini S, Cavarzere P, Antoniazzi F. Current and emerging treatments for the management of osteogenesis imperfecta // Ther Clin Risk Manag. 2010; 6: 367-381.

113. Murthy R.K., Morrow P.K., Theriault R.L. Bone biology and the role of the RANK ligand pathway // Oncology (Williston.Park).- 2009. - Vol.23. -№14, Suppl. 5. -P.9-15.

114. Nachman RL, Silverstein R. Hypercoagulable states // Ann Intern Med. 1993 Oct 15;119(8):819-27.

115. Nairz M, Weiss G. Molecular and clinical aspects of iron homeostasis: From anemia to hemochromatosis // Wien Klin Wochenschr. 2006 Aug;l 18(15-16):442-62.

116. Naran NH, Chetty N, Crowther NJ. The influence of metabolic syndrome components on plasma PAI-1 concentrations is modified by the PAI-1 4G/5G genotype and ethnicity // Atherosclerosis. 2008 Jan;196(l):155-63.

117. Nicolaes GA, Dahlback B. Factor V and thrombotic disease: description of a janus-facedprotein // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2002 Apr l;22(4):530-8.

118. Niederau C. Gaucher disease // Bremen: Uni-Med, 2006. - 84 p.

119. Pastores GM. Velaglucerase alfa, a human recombinant glucocerebrosidase enzyme replacement therapy for type 1 Gaucher disease // Curr Opin Investig Drugs. 2010 Apr;l l(4):472-8.

120. Poll LW, Koch JA, vom Dahl S, Sarbia M, Niederau C, Haussinger D, Modder U. Type I Gaucher disease: extraosseous extension of skeletal disease // Skeletal Radiol. 2000;29:15-21.

121. Poort SR, Rosendaal FR, Reitsma PH at al. A common genetic variation in the 3'-untranslated region of the prothrombin gene is associated with elevated plasma prothrombin levels and an increase in venous thrombosis // Blood. 1996;88:3698-3703.

122. Raggatt LJ, Partridge NC. Cellular and molecular mechanisms of bone remodeling // J Biol Chem. 2010 Aug 13;285(33):25103-8.

123. Raisz LG. Physiology and pathophysiology of bone remodeling // Clin Chem. 1999 Aug;45(8Pt 2): 1353-8.

124. Rodrigue SW, Rosenthal DI, Barton NW, Zurakowski D, Mankin HJ. Risk factors for osteonecrosis in patients with type 1 Gaucher's disease // Clin Orthop. 1999;362:201-7.

125. Rosenbaum H, Avivi I, Rachmilewitz EA, Petchenko P. Gaucher Disease and Multiple Myeloma: A Diagnostic and Treatment Challenge // Abstract 2166, 53th ASH Annual Meeting and Exposition, 10-13 December, 2011.

126. Rosenbloom BE, Weinreb NJ, Zimran A, Kacena KA, Charrow J, Ward E. Gaucher disease and cancer incidence: a study from the Gaucher Registry // Blood. 2005 Jun 15;105(12):4569-72.

127. Rosendaal FR, Koster T, Vandenbroucke JP, Reitsma PH. High risk of thrombosis in patients homozygous for factor V Leiden (activated protein C resistance)//Blood. 1995 Mar 15;85(6): 1504-8.

128. Roubey R. Autoantibodies to phospholipid-binding plasma proteins: a new view of lupus anticoagulants and other "antiphospholipid" autoantibodies // Blood 1994, 84:2854-2867.

129. Roughley PJ, Rauch F, Glorieux FH. Osteogenesis imperfecta—clinical and molecular diversity // Eur Cell Mater. 2003 Jun 30;5:41-7.

130. Shaheen K, Alraies MC, Alraiyes AH, Christie R. Factor V Leiden: how great is the risk of venous thromboembolism? // Cleve Clin J Med. 2012 Apr;79(4):265-72.

131. Sidransky E. Gaucher disease: complexity in a "simple" disorder // Mol Genet Metab. 2004 Sep-Oct;83(l-2):6-15.

132. Stein P, Yu H, Jain D, Mistry PK. Hyperferritinemia and iron overload in type 1 Gaucher disease. Am J Hematol. 2010;85(7):472-476.

133. Stirnemann J, Belmatoug N, Vincent C, Fain O, Fantin B, Mentre F. Bone events and evolution of biologic markers in Gaucher disease before and during treatment // Arthritis Res Ther. 2010;12(4):R156.

134. Taddei TH, Kacena KA, Yang M, Yang R, Malhotra A, Boxer M, Aleck KA, Rennert G, Pastores GM, Mistry PK. The underrecognized progressive nature of N370S Gaucher disease and assessment of aacancer risk in 403 patients // Am J Hematol. 2009 Apr;84(4):208-14.

135. Tani-Ishii N, Tsunoda A, Teranaka T, Umemoto T. Autocrine regulation of osteoclast formation and bone resorption by IL-1 alpha and TNF alpha. J Dent Res. 1999 0ct;78(10): 1617-23.

136. Tovo PA, Miniero R, Barbera C, Sacchetti L, Saitta M. Serum immunoglobulins in homozygous beta-thalassemia // Acta Haematol. 1981 ;65(l):21-5.

137. Van Breemen MJ, De Fost M, Voerman JS, et al. Increased plasma macrophage inflammatory protein (MIP)-l alpha and MlP-lbeta levels in type 1 Gaucher disease // Biochim Biophys Acta. 2007;1772:788-96.

138. Vellodi A, Bembi B, de Villemeur TB, et al. Management of neuronopathic Gaucher disease: a European consensus // J Inherit Metab Dis. 2001 Jun;24(3):319-27.

139. Weinreb NJ. The Bone in Gaucher Disease // European Musculoskeletal Review 2007;(2):33-37.

140. Weiss G, Goodnough LT. Anemia of Chronic Disease // N Engl J Med 2005; 352:1011-1023.

141. Wenstrup RJ, Roca-Espiau M, Weinreb NJ, et al., Skeletal aspects of Gaucher disease: a review // Br J Radiol, 2002; 75(Suppl. 1):A2-A12.

142. Wrighting DM, Andrews NC. Interleukin-6 induces hepcidin expression through STAT3 // Blood. 2006 Nov l;108(9):3204-9.

143. Yosipovitch Z, Katz K. Bone crisis in Gaucher disease—an update // Isr J Med Sci. 1990;26:593-5.

144. Zalavras C, Dailiana Z, Elisaf M, Bairaktari E, Vlachogiannopoulos P, Katsaraki A, et al. Potential aetiological factors concerning the development of osteonecrosis of the femoral head // Eur J Clin Invest 2000; 30:215-21.

145. Zalavras CG, Malizos KN, Dokou E, Vartholomatos G. The 677C~>T mutation of the methylene-tetrahydrofolate reductasegene in the pathogenesis of osteonecrosis of the femoral head // Haematologica. 2002 Jan;87(l):l 11-2.

146. Zalavras CG, Vartholomatos G, Dokou E, Malizos KN. Genetic background of osteonecrosis: associated with thrombophilic mutations? // Clin Orthop Relat Res. 2004;422:251-255.

147. Zhang CK, Stein PB, Liu J, Wang Z, Yang R, Cho JH, Gregersen PK, Aerts JM, Zhao H, Pastores GM, Mistry PK. Genome-wide association study of N370S homozygous Gaucher disease reveals the candidacy of CLN8 gene as a genetic modifier contributing to extreme phenotypic variation // Am J Hematol. 2012 Apr;87(4):377-83.

148. Zimran A, Kay A, Gelbart T, Garver P, Thurston D, Saven A, Beutler E. Gaucher disease. Clinical, laboratory, radiologic, and genetic features of 53 patients // Medicine (Baltimore). 1992 Nov;71(6):337-53.

149. Zimran A, Liphshitz I, Barchana M, Abrahamov A, Elstein D. Incidence of malignancies among patients with type I Gaucher disease from a single referral clinic // Blood Cells Mol Dis. 2005 May-Jun;34(3): 197-200.

150. Zimran A. How I treat Gaucher disease // Blood. 2011 Aug 11;118(6): 146371.