Клиническая значимость метриксных металлопротеиназ 2 и 9 типа и рецептора фактора роста эндотелия сосудов 2 при раке молочной железы. тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.10, кандидат медицинских наук Катунина, Алла Ивановна

• Катунина, Алла Ивановна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Катунина, Алла Ивановна

Оглавление.2-5.

Список условных сокращений.6-6.

Введение.7

Глава 1. Матриксные металлопротеиназы и ангиогенные факторы при раке молочной железы (обзор литературы).19-47.

1.1. Матриксные металлопротеиназы. Классификация, общая характеристика. Ингибиторы матриксных металлопротеиназ.19-24.

1.2. Матриксные металлопротеиназы в инвазии и метастазировании опухолей.24-29.

1.3. Клиническое значение матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов при раке молочной железы.29-30.

1.4. Ангиогенные факторы и рак молочной железы.30-35.

1.5. Рецепторы УЕСР.35-38.

1.6. Клинические исследования УЕСЕ при раке молочной железы.38-47.

Глава 2. Материалы и методы исследования.48-65.

2.1. Характеристика больных раком молочной железы.48-61.

2.2. Специальные биохимические методы исследования.61-64.

2.3. Статистические методы исследования.65-65.

Глава 3. Матриксные металлопротеиназы 2 и 9 в сыворотке крови и опухоли больных раком молочной железы (результаты собственных исследований).66-106.

3.1. Содержание ММП-2 и ММП-9 в сыворотке крови, опухоли и неизмененной ткани больных раком молочной железы.66-73.

3.2. Связь содержания ММП-2 и ММП-9 в опухоли, неизмененной ткани и сыворотке крови больных РМЖ с учетом их возраста.73-77.

3.3. Содержание ММП-2 и ММП-9 в неизмененной ткани молочной железы, опухоли и сыворотке крови до и после лечения больных РМЖ с учетом критерия Т.77-81.

3.4. Содержание ММП-2 и ММП-9 в неизмененной ткани, опухоли и сыворотке крови до и после лечения у больных РМЖ с учетом критерия N.81-86.

3.5. Содержание ММП-2 ММП-9 в неизмененной ткани, опухоли и сыворотке крови до и после лечения больных РМЖ с учетом стадии.86-88.

3.6. Содержание ММП-2 и ММП-9 в неизмененной ткани, опухоли и сыворотке крови до и после лечения больных РМЖ с учетом степени злокачественности опухоли.88-91.

3.7. Содержание ММП-2 и ММП-9 в неизмененной ткани, опухоли и сыворотке крови до и после лечения у больных РМЖ с учетом наличия опухолевых эмболов в просвете кровеносных сосудов.91-93.

3.8. Содержание ММП-2 и ММП-9 в неизмененной ткани, опухоли и сыворотке крови до и после лечения больных раком молочной железы с учетом максимального размера опухоли.94-95.

3.9. Содержание ММП-2 и ММП-9 в неизмененной ткани, опухоли и сыворотке крови больных раком молочной железы с учетом статуса рецепторов Нег-2/пеи.96-98.

3.10. Содержание ММП-2 и ММП-9 в неизмененной ткани, опухоли и сыворотке крови больных раком молочной железы с учетом статуса РЭ.98-101.

3.11. Содержание ММП-2 и ММП-9 в неизмененной ткани, опухоли и сыворотке крови больных раком молочной железы с учетом статуса РП.101-103.

3.12. Многофакторный анализ содержания ММП-2 и ММП-9 в неизмененной ткани, опухоли и сыворотке крови больных РМЖ.103-106.

Глава 4. Содержание VEGFR-2 в сыворотке крови больных раком молочной железы и его связь с уровнями матриксных металлопротеиназ.107-119.

4.1. Связь содержания VEGFR-2 в сыворотке крови больных раком молочной железы с ММП-2 и ММП-9, определенными до лечения.107-109.

4.2. Связь содержания VEGFR-2, определенных в сыворотке крови у больных РМЖ до лечения с их возрастом.109-112.

4.3. Содержание VEGFR-2 в сыворотке крови у больных РМЖ с учетом критерия распространенности опухоли Т.112-112.

4.4. Содержание VEGF-R2 в сыворотке крови до лечения у больных РМЖ с учетом критерия N.113-113.

4.5. Содержание VEGFR-2 в сыворотке крови до лечения у больных РМЖ с учетом стадии болезни.114-114.

4.6. Содержание VEGFR-2 в сыворотке крови до лечения у больных РМЖ с учетом степени злокачественности опухоли.114-115.

4.7. Содержание VEGFR-2 в сыворотке крови до лечения у больных РМЖ при наличии опухолевых эмболов в просвете кровеносных сосудов.115-116.

4.8. Содержание VEGFR-2 в сыворотке крови до и после лечения у больных РМЖ с учетом максимального размера опухоли.116-117.

4.9. Содержание VEGFR-2 в сыворотке крови больных РМЖ с учетом статуса Her-2/neu в опухоли.118-118.

4.10. Содержание VEGFR-2 в сыворотке крови больных РМЖ с учетом статуса РЭ и РП в первичной опухоли.118-119.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клиническая значимость метриксных металлопротеиназ 2 и 9 типа и рецептора фактора роста эндотелия сосудов 2 при раке молочной железы.»

Актуальность темы. Статистические данные с каждым годом неумолимо констатируют увеличение числа вновь диагностируемых случаев рака молочной железы (РМЖ) в России, как и в большинстве стран Европы и Северной Америки (В.Г.Иванов, 2004; М.И.Давыдов и соавт., 2007).

Так, например, в структуре онкологической заболеваемости России раку этой локализации принадлежит 1-е место с 1985 г. Во всем мире в 2000 г. впервые выявлено более 796000 случаев РМЖ, в том числе в США - более 183000, в Великобритании — около 26000.

Ежегодная заболеваемость РМЖ в Европе составляет 109,9, а смертность - 38,4 случаев на 100 тыс. женщин в год, имея существенные различия в разных географических регионах. Частота возрастает с увеличением возраста, а смертность определяется исходной стадией и терапевтическими возможностями (Pestalozzi D. et al., 2008).

В 2004 г. в России выявлено 47805 пациенток со злокачественными новообразованиями молочных желез. Ежегодно прирост заболеваемости составил в 2004 г. 8,5%, что на 0,3% ниже по сравнению с 2003 г. Следует отметить, что в 20,7% случаев выявляемость РМЖ связана с профилактическими осмотрами (М.И.Давыдов и соавт., 2010).

Наиболее высокий уровень заболеваемости и темпы прироста отмечены в возрастных группах 60-64 года (136,5 на 100 тыс. населения) и 65-69 (133,2 на 100 тыс. населения). В более молодом возрасте от 20 до 40 лет показатели заболеваемости РМЖ стабилизировались (М.И.Давыдов и соавт., 2007).

Наиболее высокие стандартизованные показатели заболеваемости зарегистрированы в Хабаровском крае (49,7), Санкт-Петербурге (48,3) и Москве (46,4).

В России у 61,6% больных РМЖ выявлен в I-II стадиях, у 25,4% - в III стадии и у 11,9% - в IV стадии болезни. По сравнению с 2003 г. отмечено повышение частоты своевременной диагностики РМЖ (М.И.Давыдов и 1 соавт., 2010).

Злокачественные новообразования молочных желез имеют наибольший удельный вес в структуре смертности — 16,5%. Так, в России в 2004 г. от РМЖ умерли 22054 пациентки.

Наибольший повозрастной показатель смертности приходится на возраст 75 лет и более (86,2 на 100 тыс. населения) и 70-74 года (75,8).

В России самые высокие показатели смертности характерны для Санкт-Петербурга (23,0), Москвы (22,6) и Камчатской области (22,8).

Более чем у 66% женщин, заболевших РМЖ, отсутствовали важнейшие факторы риска заболеваемости.

В России из 480399 находившихся под наблюдением в 2004 г. больных РМЖ 225048 женщин наблюдались 5 лет и более.

Средний показатель выживаемости при данной патологии составил 55%.

Представленные данные свидетельствуют о том, что РМЖ считают наиболее распространенным заболеванием, в ряде наблюдений он характеризуется крайне агрессивным клиническим течением, резистентностью к гормоно и химиотерапии, а стало быть, и неблагоприятным прогнозом (Hamilton A. et al., 2005). Этиология РМЖ, как и большинства опухолей, не известна, патогенез изучен не до конца. Поэтому любые исследования в этой области представляют интерес прежде всего для практических онкологов и вселяют надежду на скорое расширение наших представлений о патогенетических механизмах в развитии заболевания и обнаружение новых мишеней для таргетной терапии РМЖ (М.И.Давыдов и соавт., 2010; Isakoff S.J. et al., 2011).

Одним из фундаментальных свойств опухолей считается их способность к инвазии в окружающие ткани и метастазирование в отдаленные органы (Е.С.Герштейн и соавт., 2007; Chabner В.А. et al., 2011). При этом, важным механизмом этих процессов является разрушение окружающей базальной мембраны и внеклеточного матрикса ассоциированными с опухолью протеазами (Е.В.Клишо и соавт., 2003; Е.С.Герштейн и соавт., 20046). Известно, что в инвазии и метастазировании задействовано несколько классов протеаз, важнейшим из которых является мультигенное семейство матриксных металлопротеиназ (ММП) или матриксинов, названных так за свою способность специфически гидролизовать все основные белки внеклеточного матрикса, в первую очередь, коллаген (Н.Е.Кушлинский и соавт., 2010; Deryugina E.I. et al., 2006).

Семейство ММП состоит из более 20 секретируемых или связанных с поверхностью клетки цинк-зависимых эндопептидаз, субстратами которых помимо большинства компонентов внеклеточного матрикса могут быть также другие протеазы, хемотаксические молекулы, латентные формы факторов роста, растворимые и мембранно-ассоциированные белки, связывающие факторы роста (Westermarck J. et al., 1999; Nelson A.R. e al.,

2000). При этом, активность ММП в межклеточном пространстве специфически подавляется тканевыми ингибиторами (ТИМП) - структурно родственными белками, три из которых (ТИМП-1, 2 и 4) секретируются в растворимой форме, а один (ТИМП-3) - связан с внеклеточным матриксом (RamnathN. et al., 2004).

Для многих ММП продемонстрировано увеличение экспрессии в опухолях различного генеза, причем активация происходит по паракринному механизму с участием факторов роста и цитокинов, секретируемых инфильтрирующими опухоль макрофагами и лимфоцитами, а также клетками опухолевой стромы (Westermarck J. et al., 1999).

В последнее время получены данные, свидетельствующие о том, что важную самостоятельную роль в регуляции роста и дифференцировки опухолевых и нормальных клеток играют ТИМП, обладающие антиангиогенными свойствами (Sounni N.E. et al., 2003). В связи с этим различные ММП и ТИМП рассматриваются сейчас в качестве возможных биологических маркеров прогноза и лекарственной чувствительности злокачественных опухолей, в частности, РМЖ, а использование природных и синтетических ингибиторов ММП считается перспективным подходом к лекарственной терапии опухолей, мало чувствительных к классическим противоопухолевым препаратам (Watson S.A. et al., 1999; Yonemura Y. et al.,

2001).

В настоящее время, уже не вызывает сомнения тот факт, что неоангиогенез, или формирование новых микрососудов в РМЖ необходим для ее роста и развития метастазов, а вновь образованные сосуды обеспечивают снабжение опухолевых клеток питательными веществами и кислородом (Folkman J., 1990; Gasparini G. et al., 1994). Ангиогенез -сложный и тонко регулируемый процесс образования и развития новых сосудов из уже существующих, который связан с активацией по крайней мере 82 генов (Mendiola М. et al., 2008), при этом ключевым активатором неоангиогенеза считают фактор роста эндотелия сосудов (VEGF (Gospodarowicz D. et al., 1989; Keck P.J. et al., 1989; Leung D.W. et al., 1989; Conn G. et al., 1990).

Клиническими и экспериментальными исследованиями продемонстрировано увеличение экспрессии ММП и их активности по отношению к коллагену IV типа в процессе метастазирования РМЖ. Во многих экспериментальных исследованиях доказана корреляционная взаимосвязь между повышением экспрессии ММП опухолевыми и/или стромальными клетками с прогрессией, метастазированием и ангиогенезом (Nelson A.R. et al., 2000; Deryugina E.I. et al., 2010).

По данных-ряда исследователей выявлена ассоциация экспрессии ММП-2 с низкими показателями общей выживаемости больных РМЖ и, по всей вероятности, ММП-2 вовлечена в механизмы канцерогенеза молочной железы. Так, в работе A.Sivula et al. (2005) представлен анализ экспрессии ММП-2 в инвазивных РМЖ с помощью ИГХ метода. Авторы показали ассоциацию между высокими уровнями экспрессии ММП-2 в первичной опухоли и низкими показателями выживаемости у больных РМЖ.

Показано также, что ММП-2, наряду с ММП-9 находятся в комплексном взаимодействии с ключевым активатором ангиогенеза VEGF. С одной стороны, коллагеназы индуцируют секрецию VEGF опухолевыми клетками (Zhang A. et al., 2006), а, с другой, секретируемый опухолью VEGF регулирует экспрессию коллагеназ в строме, влияя на инвазивную способность первичной опухоли (Belotti D. et al., 2008). В последние годы интерес у исследователей вызывает не только УЕОБ, но и его растворимые формы рецепторов (УЕОРЯ-1, УЕОРЯ-2), клиническая значимость которых до настоящего времени остается окончательно не изученной.

Поэтому одновременный анализ содержания ММП-2, ММП-9 и УЕОР11-2 в первичной опухоли и сыворотке крови больных РМЖ является своевременным и актуальным.

Цель настоящего исследования — сравнительный анализ перспектив клинического исследования содержания некоторых представителей семейства ММП (ММП-2 и ММП-9), рецептора фактора роста эндотелия сосудов 2 типа (УЕОР-2) в сыворотке крови, опухоли и гистологически неизмененной ткани молочной железы больных РМЖ, взаимосвязь этих маркеров с основными клинико-морфологическими особенностями заболевания и наличием экспрессии РЭ, РП, Нег-2/пеи в первичной опухоли в оценке клинического течения заболевания.

Для достижения выше указанной цели необходимо было решить следующие задачи исследования.

1. Иммуноферментными методами определить содержание ММП-2 и ММП-9 в опухолях, гистологически неизмененной ткани молочной железы и сыворотке крови больных раком молочной железы.

2. Исследовать уровни УЕОРК-2 в сыворотке крови больных раком молочной железы.

3. Проанализировать соотношение концентрации ММП-2 и ММП-9 в сыворотке крови с уровнем их экспрессии в первичной опухоли.

4. Изучить взаимосвязь уровня изучаемых маркеров в опухолях и сыворотке крови с основными клинико-морфологическими особенностями рака молочной железы (стадией процесса, гистологическим вариантом опухоли и степенью ее дифференцировки, возрастом и репродуктивным статусом пациенток).

5. Провести анализ ММП-2, ММП-9 в опухоли, неизмененной ткани и сыворотке крови больных раком молочной железы с учетом рецепторного фенотипа первичной опухоли (РЭ, РП, Нег-2/пеи) и оценить их связь с клиническими и морфологическими характеристиками опухоли. 6. Изучить возможность комплексного использования клинических, морфологических и биохимических факторов в оценке клинического течения заболевания, инвазивного и метастатического потенциала рака молочной железы.

Научная новизна исследования

Впервые в отечественной практике на большом клиническом материале проведено одновременное сравнительное иммуноферментное определение содержания нескольких биохимических маркеров (ММП-2, ММП-9, РЭ, РП, Нег-2/пеи) в опухоли, неизмененной ткани молочной железы, а (ММП-2, ММП-9, УЕОРЯ-2) в сыворотке крови больных РМЖ с учетом их связи с основными клинико-морфологическими характеристиками опухоли и их клиническим течением.

Показано, что в преобладающем числе опухолей (87,3%) больных раком молочной железы обнаружено достоверно высокое содержание ММП-2 по сравнению с гистологически неизмененной тканью (медианы соответственно 38,9 и 13,0 нг/мг белка). При этом, концентрации ММП-2 в сыворотке крови до и после лечения не различались (соответственно 240 до 260 нг/мл), хотя повышение маркера выявлено у 50,8% пациенток.

У 51,7% больных раком молочной железы выявлено достоверное увеличение уровней ММП-9 в опухоли по сравнению с неизмененной тканью (медианы соответственно 10,7 и 0,7 нг/мг белка), а также в сыворотке крови у 86,2% пациенток после лечения (медианы соответственно 208 до 284 нг/мл).

Установлена достоверная корреляционная зависимость между концентрациями ММП в сыворотке крови до и после лечения для ММП-2 (г=0,42; р=0,001) и ММП-9 (г=0,44; р=0,0001).

Медианы содержания ММП-2 в неизмененной ткани молочной железы было достоверно выше при неблагоприятных факторах РМЖ - критерии Т4, низкой степени дифференцировки опухоли, при Нег-2/пеи(+) и РЭ(-) опухолях, а также в репродуктивном периоде. При этом, многофакторный анализ выявил достоверную связь показателей ММП-2 в неизмененной ткани молочной железы с репродуктивным статусом (р=0,001) и критерием Т (р=0,04).

Обнаружено, что показатели ММП-2 в опухоли больных раком молочной железы не были связаны с основными клинико-морфологическими факторами РМЖ. При этом, медианы ММП-2 в сыворотке крови больных раком молочной железы до лечения были достоверно выше при: наличии множественных метастазов и недостоверно высокими при Illa-IIIc стадиях при Her-2/neu(+), РЭ(-) и РП(-) опухолях, а также в постменопаузе и при наличии опухолевых эмболов в просвете кровеносных сосудов. Многофакторный анализ показал, что уровни ММП-2 в сыворотке крови больных достоверно связаны с критерием N.

Многофакторный анализ выявил, что показатели ММП-9 в неизмененной ткани и опухоли больных раком молочной железы не были связаны с основными клинико-морфологическими факторами РМЖ, однако уровни маркера в опухоли были выше при IIb и 111с стадиях, при наличии множественных метастазов. Исходные уровни ММП-9 в сыворотке крови больных раком- молочной железы были достоверно выше при высокой и умеренной степени дифференцировки опухоли и небольших ее размерах, а многофакторный анализ показал достоверную связь исходных уровней ММП-9 в сыворотке крови со степенью дифференцировки опухоли.

Выявлено, что показатели VEGFR-2 достоверно выше в сыворотке крови больных РМЖ с РЭ" и РП" опухолями, не связаны с экспрессией рецепторов Her-2/neu, достоверно повышались в репродуктивном периоде, при увеличении критериев N, Т и при наличии опухолевых эмболов в просвете кровеносных сосудов, низкой степени дифференцировки опухоли, достоверно снижались с увеличением возраста и при благоприятном прогнозе заболевания.

Показано, что при неблагоприятных клинико-морфологических факторах (Illb-IIIc стадии, низкая степень дифференцировки опухоли) высоким значениям ММП-2 и ММП-9 в сыворотке крови больных РМЖ соответствовали низкие показатели сывороточного УЕОРЫ-2.

Практическая значимость исследования

Высокие значения ММП-2 в неизмененной ткани молочной железы следует считать неблагоприятным фактором при РМЖ. Медианы показателей ММП-2 в неизмененной ткани молочной железы составили 9,1 нг/мг белка у больных с благоприятным прогнозом, 11,7 нг/мг белка в группе с промежуточным прогнозом и 14,3 нг/мг белка в группе больных с неблагоприятным прогнозом заболевания (р=0,053).

В целом, следует оценивать роль ММП-2 в клинике РМЖ как недостаточную.

Высокие значения ММП-9 в опухоли больных раком молочной железы следует считать неблагоприятным прогностическим фактором. При этом, медиана содержания ММП-9 в опухоли больных с неблагоприятными прогностическими факторами составила 17,8 нг/мг белка, а при благоприятном и промежуточном прогнозе соответственно 3,0 и 2,2 нг/мг белка.

Высокие уровни ММП-9 в сыворотке крови больных раком молочной железы следует считать благоприятным фактором РМЖ, при этом медиана сывороточного ММП-9 достоверно ниже в группе больных с неблагоприятным, чем у пациенток с благоприятным и промежуточным прогнозом.

Основные положения, выносимые на защиту

1.В преобладающем числе опухолей (87,3%) больных раком молочной железы обнаружено достоверно высокое содержание ММП-2 по сравнению с гистологически неизмененной тканью (медианы соответственно 38,9 и 13,0 нг/мг белка). При этом, концентрации ММП-2 в сыворотке крови до и после лечения не различались (соответственно 240 до 260 нг/мл), хотя повышение маркера выявлено у 50,8% пациенток.

2. У 51,7% больных раком молочной железы выявлено достоверное увеличение уровней ММП-9 в опухоли по сравнению с неизмененной тканью (медианы соответственно 10,7 и 0,7 нг/мг белка), а также в сыворотке крови у 86,2% пациенток после лечения (медианы соответственно 208 до 284 нг/мл).

3. Установлена достоверная корреляционная зависимость между концентрациями ММП в сыворотке крови до и после лечения для ММП-2 (г=0,42; р=0,001) и ММОП-9 (г=0,44; р=0,0001).

4. Медианы содержания ММП-2 в неизмененной ткани молочной железы было достоверно выше при следующих неблагоприятных факторах РМЖ: критерии Т4 (65,2 нг/мг белка) (р=0,001); низкой степени дифференцировки опухоли (20,6 нг/мг белка) (р=0,001); при Нег-2/пеи(+) (38,2 нг/мг белка) (р=0,0001) и РЭ(-) опухолях (15,3 нг/мг белка) (р=0,0001); в репродуктивном периоде (17,9 нг/мг белка) (р=0,01). Многофакторный анализ выявил достоверную связь показателей ММП-2 в неизмененной ткани молочной железы с репродуктивным статусом (р=0,001) и критерием Т (р=0,04).

5. Высокие значения ММП-2 в неизмененной ткани молочной железы следует считать неблагоприятным фактором при РМЖ. Медианы показателей ММП-2 в неизмененной ткани молочной железы составили 9,1 нг/мг белка у больных с благоприятным прогнозом, 11,7 нг/мг белка в группе с промежуточным прогнозом и 14,3 нг/мг белка в группе больных с неблагоприятным прогнозом заболевания (р=0,053).

6. Показатели ММП-2 в опухоли больных раком молочной железы не были связаны с основными клинико-морфологическими факторами РМЖ.

7. Медианы ММП-2 в сыворотке крови больных раком молочной железы до лечения были достоверно выше при: наличии множественных метастазов (309 нг/мл; р=0,01) и недостоверно высокими при: Ша-Шс стадиях (261 нг/мл); при Нег-2/пеи(+) (248 нг/мл), РЭ(-) (265 нг/мл) и РП(-) (246 нг/мл) опухолях; наличии опухолевых эмболов в просвете кровеносных сосудов (246 нг/мл), в постменопаузе (259 нг/мл). Многофакторный анализ показал, что уровни ММП-2 в сыворотке крови больных достоверно связаны с критерием N (р=0,025).

8. Не получено различий содержания ММП-2 в сыворотке крови больных раком молочной железы в сформированных прогностических группах и в целом, следует оценивать роль ММП-2 в клинике РМЖ как недостаточную.

9. Многофакторный анализ показал, что показатели ММП-9 в неизмененной ткани и опухоли больных раком молочной железы не были связаны с основными клинико-морфологическими факторами РМЖ, однако уровни маркера в опухоли были выше при IIb и 111с стадиях, при наличии множественных метастазов.

10.Высокие значения ММП-9 в опухоли больных раком молочной железы следует считать неблагоприятным прогностическим фактором. При этом, медиана содержания ММП-9 в опухоли больных с неблагоприятными прогностическими факторами составила 17,8 нг/мг белка, а при благоприятном и промежуточном прогнозе соответственно 3,0 и 2,2 нг/мг белка.

1 ¡.Исходные уровни ММП-9 в сыворотке крови больных раком молочной железы были достоверно выше при высокой и умеренной степени дифференцировки опухоли (р=0,001) и небольших ее размерах (р<0,05), а многофакторный анализ показал достоверную связь исходных уровней ММП-9 в сыворотке крови со степенью дифференцировки опухоли (р=0,006).

12.Высокие уровни ММП-9 в сыворотке крови больных раком молочной железы следует считать благоприятным фактором РМЖ, при этом медиана сывороточного ММП-9 достоверно (р=0,0025) ниже в группе из 33 больных с неблагоприятным, чем у 25 пациенток с благоприятным и промежуточным прогнозом (соответственно 195 и 249 нг/мл, р=0,0025).

13.Показатели УЕОРЯ-2 достоверно выше в сыворотке крови больных РМЖ с РЭ" и РП" опухолями, не связаны с экспрессией рецепторов Нег-2/пеи, достоверно повышались в репродуктивном периоде, при увеличении критериев N и Т, наличии опухолевых эмболов в просвете кровеносных сосудов, низкой степени дифференцировки опухоли, достоверно снижались с увеличением возраста и при благоприятном прогнозе заболевания.

14.При неблагоприятных клинико-морфологических факторах (ШЬ-Шс стадии, низкая степень дифференцировки опухоли) высоким значениям ММП-2 и ММП-9 в сыворотке крови больных РМЖ соответствовали низкие показатели сывороточного УЕОР11-2.

Апробация работы Основные результаты диссертации доложены на: Всероссийской конференции с международным участием «Молекулярная онкология» (Новосибирск, 1-3 октября 2008г.); научно-практической конференции «Лабораторная медицина в свете Концепции развития здравоохранения России до 2020 года» (Москва, 28-30 сентября 2009г.); Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» (Москва 10-11 ноября 2009г.); * XVII Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 12-16 апреля 2010г.); конференции «Национальные дни лабораторной медицины России - 2010» (Москва, 5-7 октября 2010г.).

Материалы диссертации доложены на совместной научной конференции сотрудников кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Московского Государственного медико-стоматологического университета, лаборатории клинической биохимии НИИ клинической онкологии РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН и кафедры биохимии Российского Университета дружбы народов 25 февраля 2011 г.

Публикации результатов исследования По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, 5 из них в журналах, рекомендованных ВАК.

Структура и объем работы

Диссертация изложена на 165 страницах машинописного текста, включает введение, обзор данных литературы, главу «Материалы и методы исследования», главу «Результаты собственных наблюдений», обсуждение полученных данных, выводы, список цитируемой литературы, который состоит из 59 работ отечественных и 157 работ зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 41 таблицами, 34 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Клиническая лабораторная диагностика», Катунина, Алла Ивановна

Выводы

1. Достоверно высокое содержание ММП-2 и ММП-9 выявлено в опухолях больных РМЖ соответственно в 87,3 и 51,7% по сравнению с гистологически неизмененной тканью, при этом, концентрации ММП-2 в сыворотке крови до и после лечения не различались, а ММП-9 достоверно увеличивались у 86,2% пациенток после терапии.

2. Высокие показатели ММП-2 в неизмененной ткани молочной железы следует считать неблагоприятным фактором у больных РМЖ и связаны они с критерием Т4, низкой степенью дифференцировки опухоли, Нег-2/пеи+ и Рэ" опухолями и репродуктивным периодом.

3. Показатели ММП-2 и ММП-9 в опухоли больных РМЖ не связаны с основными клинико-морфологическими характеристиками заболевания, тогда как уровни ММП-2 в сыворотке крови этих пациенток достоверно зависели от критерия Ы, а ММП-9 - от степени дифференцировки опухоли.

4. Высокие значения ММП-9 в опухоли больных РМЖ следует считать неблагоприятным прогностическим фактором, при этом, медиана ММП-9 в опухоли пациенток с неблагоприятным прогнозом составила 17,8 нг/мгбелка, а при благоприятном и промежуточном прогнозе 3,0 и 2,2 нг/мг белка соответственно.

5. Высокие уровни ММП-9 в сыворотке крови больных РМЖ следует считать благоприятным фактором, а медиана сывороточного ММП-9 достоверно ниже в группе больных с неблагоприятным, чем с благоприятным и промежуточным прогнозом (соответственно 195 и 249 нг/мл, р=0,0025).

6. Показатели УЕОРК-2 достоверно выше в сыворотке крови больных РМЖ с РЭ" и РП" опухолями, не связаны с экспрессией рецепторов Нег-2/пеи, достоверно повышались в репродуктивном периоде, при увеличении критериев N и Т, наличии опухолевых эмболов в просвете кровеносных сосудов, низкой степени дифференцировки опухоли, достоверно снижались с увеличением возраста и при благоприятном прогнозе заболевания.

7. При неблагоприятных клинико-морфологических факторах (ШЬ-Шс стадии, низкая степень дифференцировки опухоли) высоким значениям ММП-2 и ММП-9 в сыворотке крови больных РМЖ соответствовали низкие показатели сывороточного УЕвРК-2.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Катунина, Алла Ивановна, 2011 год

1. Аббасова С.Г., Щепрова Ж.М., Ламан А.Г., Шепеляковская А.О., Байдакова J1.K., Родионов И.Л., Кушлинский Н.Е. Эпитопное картирование человеческого Fas с помощью пептидного фагового дисплея // Бюлл. Экспер. Биол. Мед.-2007.-том 44, №10.-с.395-400.

2. Абелев Г.И., Эрайзер Т.Л. На пути к пониманию природы рака //

3. Биохимия.-2008.-том 73, №5.-с.605-617.

4. Абраменко И.В., Фильченков A.A. Оценка параметров апоптоза в диагностике онкологических заболеваний, их прогнозе и оптимизации схем терапии // Вопросы онкологии. 2003. - том 49, №1. - с.21-30.

5. Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований женских половых органов // Опухоли женской репродуктивной системы.-2009.-№1-2.-с.7б-85.

6. Барышников А.Ю., Степанова Е.В., Личиницер М.Р. Оценка ангиогенеза опухолей // Успехи современной биологии. 2000. - том 120, №6. - с.599-604.

7. Берштейн Л.М. Эстрогены и проблема гормонального канцерогенеза в молочной железе. В кн.: «Рак молочной железы» (Под ред.

8. Н.Е.Кушлинского, С.М.Портного, К.П.Лактионова) // Редакционно-издательский совет при Президиуме РАМН.-2005.-С.39-51.

9. Булычева И.В., Соловьев Ю.Н., Кушлинский Н.Е., Махсон А.Н. Экспрессия молекулярных маркеров в опухоли и прогноз выживаемости при остеосаркоме // Бюлл. Экспер. Биол. Мед.-2010.-том 150, №8.-с.202-207.

10. Ю.Герштейн Е.С., Грицаенко Е.В., Щербаков М.Е. и соавт. Фактор роста эндотелия сосудов и компоненты системы активации плазминогена при раке и гиперплазии эндометрия // Вопросы онкологии.-2003.-том 49, №6.-с.725-729.

11. П.Герштейн Е.С., Короткова Е.А., Щербаков A.M. и соавт. Матриксные металлопротеиназы 7 и 9 и их тканевые ингибиторы 1 и 4 типа в опухолях и плазме крови больных раком толстой кишки // Бюлл. Эксп. Биол. Мед.-2007.-Уо1.143, N.3.-p.438-441.

12. П.Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Тканевые маркеры как факторы прогноза при раке молочной железы // Практическая онкология: избранные лекции. Под ред. С.А.Тюляндина и В.М.Моисеенко // Ст.-Петербург.-2004б.-«Центр ТОММ».-с.41-50.

13. Н.Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Тканевые маркеры как факторы прогноза при раке молочной железы // Практическая онкология.-2002,-том 3, №1.-с.38-44.

14. Герштейн Е.С., Щербаков A.M., Алиева С.К., Анурова O.A., Лактионов К.П., Кушлинский Н.Е. Фактор роста эндотелия сосудов в опухолях и сыворотке крови больных раком молочной железы // Бюлл. экспер. биол.-2003.-том 135, №1.-с.99-102.

15. Герштейн Е.С., Щербаков A.M., Алиева С.К., Анурова O.A., Лактионов К.П., Кушлинский Н.Е. Фактор роста эндотелия сосудов в опухолях и сыворотке крови больных раком молочной железы // Бюлл. экспер. биол.-2003.-том 135, №1.-с.99-102.

16. Герштейн Е.С., Щербаков A.M., Гончаров Д.Ю. и соавт. Фактор роста эндотелия сосудов при раке пищевода // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии.-2004а.-№1.-с.26-29.

17. Герштейн Е.С., Щербаков A.M., Обушева М.Н., Кушлинский Н.Е. Иммуноферментное исследование содержания фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) в опухолях и сыворотке крови больных раком молочной железы // Кремлевская медицина.-2005.-№3.-с.45-52.

18. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2008г. // Вестник РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН.-2010.-том 21, №2 (Приложение 1).-160с.

19. Давыдов М.И., Летягин В.П., Кузнецов В.В. (Под ред.). Опухоли женской репродуктивной системы // М.-Медицинское информационное агенство.-2007.-376с.

20. Делекторская В.В., Барсуков Ю.А., Кушлинский Н.Е. Влияние ß-катенина на инвазивно-метастатический потенциал и прогноз рака толстой кишки // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии.-2010.-№5.-с.26-29.

21. Дигтярь A.B., Позднякова Н.В., Фельдман Н.Б., Луценко C.B., Северин С.Е. Эндостатин: современные представления о его роли и механизмах действия//Биохимия.-2007.-том 72, №3.-с.291-305. (вставить!)

22. Иванов В.Г. Эпидемиологические факторы риска, ранняя диагностика рака молочной железы. В кн.: «Практическая онкология: избранные лекции» (Под ред. С.А.Тюляндина и В.М.Моисеенко) // Санкт-Петербург.-Издательство «Центр ТОММ».-2004.-е. 15-21.

23. Имянитов E.H. Молекулярная диагностика в онкологии // Мол. Биол.-2008.-том 42, №4.-с.772-785.

24. Имянитов E.H., Хансон К.П. Молекулярная онкология: клинические аспекты // Санкт-Петербург.-Издательский дом СП6МАПО.-2007.-211с.

25. Ким Е.А, Герштейн Е.С., Высоцкая И.В., Кушлинский Н.Е. Экспрессия VEGF и VEGFR2 в опухолях в процессе неоадъювантного лечения больных раком молочной железы // Бюлл. эксп. биол. мед.-2008.-том 145, №2.-с.206-209.

26. Ким Е.А. Прогностическое исследование маркеров ангиогенез у больных первичным раком молочнойжелезы // Автореф.дисс. .канд.мед.наук.-М.-2008.-26с.

27. Киселев С.М., Луценко C.B., Северин С.Е., Северин Е.С. Ингибиторы опухолевого ангиогенеза // Биохимия.-2003 .-том 68, №5.-с.611-631.

28. Клишо Е.В., Кондакова И.В., Чойнзонов Е.Л. Матриксные металлопротеиназы в онкогенезе // Сибирский онкологический журнал.-2003 .-№2.-с.62-70.

29. Копнин Б.П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза // Биохимия.-2000.-TOM 65, №1.-с.5-33.

30. Корман Д.Б. Эндокринная терапия злокачественных опухолей (руководство для врачей) // Издательство «Практическая медицина».-М.-2010.-400с.

31. Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С. Биологические маркеры опухолей в клинике — достижения, проблемы, перспективы // Молекулярная медицина.-2008.-№3.-с.48-55.

32. Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С. Современные подходы к молекулярно-биохимической оценке биологического «поведения» опухолей молочной железы // Вестник РАМН.-2001.-№9.-с.65-70.

33. Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С., Овчинникова Л.К., Дигаева М.А. Молекулярные маркеры опухолей // БЭБМ.-2009.-том 148, №8.-с. 199208.

34. Кушлинский Н.Е., Е.С.Герштейн. Роль фактора роста эндотелия сосудов при раке молочной железы // БЭБМ.-2002.-том 133, №6.-с.604-612.

35. Лукашина М. И. Экспрессия биомаркеров при раке молочной железы // Автореф.дисс.канд.биол.наук.-М.-2003.

36. Луценко C.B., Киселев С.М., Северин С.Е. Опухолевый ангиогенез. В кн.: «Рак молочной железы» (под ред. Н.Е.Кушлинского, С.М.Портного, К.П.Лактионова) // М.-Редакционно-издательский совет Президиума РАМН.-2005.-С.110-162.

37. Луценко C.B., Киселев С.М., Фельдман Н.Б., Северин С.Е. Молекулярные механизмы ангиогенеза в физиологических и патологических процесса // В кн.: Введение в молекулярную медицину под ред. М.А.Пальцева.-М.-Медицина.-2004.-с.446-495.

38. Луценко C.B., Фельдман Н.Б., Северин С.Е. Перспективы противоопухолевой антиангиогенной терапии // Молекулярная медицина.-2004б.-№4.-с. 13-24.

39. Мамаев А.Н. Основы медицинской статистики // Издательство «Практическая медицина».-М.-2011.-128с.

40. Манухин И.Б., Франк Г.А., Андреева Ю.Ю., Высоцкий М.М., Синельникова Т.И. Показатели апоптоза и пролиферативной активности у больных с эпителиальными опухолями яичников // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии.-2004.-том 3, №4.-с. 18-22.

41. Пак Д.Д., Сарибекян Э.К. Опухоли молочной железы. Онкология: национальное руководство (Под ред. В.И.Чиссова и М.И.Давыдова) // М.-ГЕОТАР-Медиа.-2008.-с.648-676.

42. Пальцев М.А., Залетаев Д.В. (Под ред.). Системы генетических и эпигенетических маркеров в диагностике онкологических заболеваний // М.-Медицина.-2009.-3 84с.

43. Петров C.B., Райхлин Н.Т. Руководство по иммунологической диагностике опухолей человека // Казань.-«Титул».-2004.-456с.

44. Пожарисский K.M., Леенман Е.Е. Значение иммуногистохимических методик для определения характера лечения и прогноза опухолевых заболеваний // Архив патологии.-2000.-№5.-С.З-11.

45. Проценко С.А. Поиски путей индивидуализации противоопухолевой терапии // Практическая онкология.-2007.-том 8, №4.-с. 173-181.

46. Сергеева Н.С., Маршутина Н.В. Серологические маркеры, ассоциированные с опухолями. Онкология: национальное руководство (Под ред. В.И.Чиссова и М.И.Давыдова) // М.-ГЕОТАР-Медиа.-2008.-с.41-59.

47. Степанова Е.В., Барышников А.Ю., Личиницер М.Р. Оценка ангиогенеза опухолей человека // Успехи современной биологии.-2000,-том 120, №6.-с.599-604.

48. Степанова Е.В., Загрекова Е.И., Ермилова В.Д. и соавт. Молекулярно-биологические маркеры как факторы прогноза при раке молочной железы I-IIA стадии // Архив патологии.-2003.-№3.-с.14-17.

49. Щербаков A.M., Герштейн Е.С. и соавт. Фактор роста эндотелия сосудов, его рецепторы и антиапоптотические белки BCL-2 и АКТ при раке молочной железы // Маммология.-2006.-№3.-с.63-68.

50. Щербаков A.M., Герштейн Е.С., Анурова O.A., Кушлинский Н.Е. Фактор роста эндотелия сосудов и его рецепторы первого и второго типа при раке молочной железы // Вопросы онкологии.-2005.-том 51, №3.-с.317-321.

51. Alitalo K., Korpelainen E. Signaling angiogenesis and lymphangiogenesis // Current Opinion in Cell Biology.- 1998.-Vol.10.-p. 159-164.

52. Allan J.A., Docherty A.J., Barker P.J., Huskisson N.S., Reynolds J.J., Murphy G. Binding of gelatinases A and B to type-I collagen and other matrixcomponents //Biochem. J.-1995.-Vol.309.-p.299-306.

53. Bachelder R.E., Wendt M.A., Mercurio A.M. Vascular endothelial growth factor promotes breast carcinoma invasion in an autocrine manner by regulating the chemokine receptor CXCR4 // Cancer Res.-2002.-Vol. 62 (24).-P. 7203-7206.

54. Baker A.H., Edwards D.R., Murphy G. Metalloproteinase inhibitors: biological actions and therapeutic opportunities // J. Cell Sci.-2002.-Vol.l 15 (Pt 19).-p.3719-3727.

55. Baker A.H., Edwards D.R., Murphy G. Metalloproteinase inhibitors: biological actions and therapeutic opportunities // J Cell S'ci.-2002.-Vol. 115 (Pt 19).-P. 3719-3727.

56. Bartsch J.E., Staren E.D., Appert H.E. Matrix metalloproteinase expression in breast cancer // J. Surg. Res.-2003.-Vol.110.-p.383-392.

57. Boudreau N., Myers C. Breast cancer-induced angiogenesis: multiple mechanisms and the role of the microenvironment // Breast Cancer Res.-2003.-N.5.-p. 140-146.

58. Brew K., Dinakarpandian D., Nagase H. Tissue inhibitors of metalloproteinases: evolution, structure and function // Biochim. Biophys. Acta.-2000.-Vol.1477.-p.267-283.

59. Cao Y., Linden P., Farnebo J. et al. Vascular endothelial growth factor С induced angiogenesis in vivo II Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1998.-Vol.95.-p.14389-14394.

60. Carmeliet P., Ferreira V., Breier G., Pollefeyt S., Kiecekens I., Gertsenstein M. et al. Abnormal blood vessel development and lethality in embryos lacking a single VEGF allele //Nature.-1996.-Vol.380.-p.435-439.

61. Chabner B.A., Lynch Th.J., Longo D.L. (Под ред.). Manual of Oncology // М.-«МЕДпресс-информ».-2011 .-656c.

62. Chen L.C., Noelken M.E., Nagase H. Disruption of the cysteine-75 and zinc ion coordination is not sufficient to activate the precursor of human matrix metalloproteinase 3 (stromelysin 1)//Biochemistry.-1993.-Vol.32.-p. 1028910295.

63. Chung J., Bachelder R.E., Lipscomb E.A. et al. Integrin (alpha 6 beta 4) regulation of eIF-4E activity and VEGF translation: a survival mechanism for carcinoma cells // J Cell Biol.-2002.-Vol. 158 (l).-P. 165-174.

64. Cigler Т., Ryan P.D. Злокачественные новообразования молочной железы: клинические проявления и генетика. Глава в руководстве по онкологии (Под ред. Чебнэр Б.Э., Линч Т.Дж., Лонго Д.Л.) // Москва.-«МЕДпреес-информ».-2011 .-с.547-555.

65. Conn G., Soderman D.D., Schaeffer М.-Т., Wile М., Hatcher V.B., Thomas К.А. Purification of a glicoprotein vascular endothelial cell mitogen from a rat glioma-derived cell line // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1990.-Vol.87.-p.1323-1327.

66. Coradini D., Pellizzaro C., Speranza A., Daidone M.G. Hypoxia and estrogen receptor profile influence the responsiveness of human breast cancer cells to estradiol and antiestrogens // Cell Mol Life Sci.-2004.-Vol.61, N.l.-p.76-82.

67. Creemers E.E., Cleutjens J.P., Smits J.F., Daemen M.J. Matrix metalloproteinase inhibition after myocardial infarction: a new approach to prevent heart failure? // Circ. Res.-2001.-Vol.89.-p.201-210.

68. Deryugina E.I., Quigley J.P. Matrix metalloproteinases and tumor metastasis // Cancer Metastasis Rev.-2006.-Vol.25, N.l.-p.9-34.

69. Deryugina E.I., Quigley J.P. Matrix metalloproteinases and tumor metastasis // Cancer Metastasis Rev.-2006.-Vol. 25 (l).-P. 9-34.

70. Deryugina E.I., Quigley J.P. Pleiotropic roles of matrix metalloproteinases in tumor angiogenesis: contrasting, overlapping and compensatory functions //Biochim. Biophys. Acta.-2010.-Vol. 1803, N.l.-p.l03-120.

71. Duffy M.J. Evidence for the clinical use of tumour markers // Ann. Clin. Biochem.-2004.-Vol.41 .-p.370-3 77.

72. Duffy M.J. Predictive markers in breast and other cancers: a review // Clinical Chemistry.-2005.-Vol.51, N.3.-p.494-503.

73. Duffy M.J. Proteases as prognostic markers in cancer // Clin. Cancer Res.-1996.-Vol.2, N.4.-p.613-618.

74. Egeblad M., Werb Z. New functions for the matrix metalloproteinases in cancer progression //Nat. Rev. Cancer.-2002.-Vol.2, N.3.-p.l61-174.

75. Ferrara N. The role of vascular endothelial growth factor in pathological angiogenesis // Breast Cancer Res. Treat.-1995.-Vol.36, N.2.-p.l27-137.

76. Ferrara N., Carver-Moore K., Chen H., Dowd M., Lucy Lu K., O'Shea S. et al. Heterozigous embrionic lethality induced by targeted inactivation of the VEGF gene // Nature.-1996.-Vol.380.-p.439-442.

77. Ferrara N., Davis-Smith T. The biology of vascular growth factor // Endocrinol. Reviews.-1997.-Vol.l, N.18.-p.4-25.

78. Ferrara N., Gerber H.P., LeCouter J. The biology of VEGF and its receptors //Nat. Med.-2003.-Vol.9, N.6.-p.669-676.

79. Foekens J.A., Peters H.A., Grebenchtchikov N., Look M.P., MeijervanGelder M.E., GeurtsMoespot A., vanderKwast T.H., Sweep

80. C.G., Klijn J.G. High tumor levels of vascular endothelial growth factor predict poor response to systemic therapy in advanced breast cancer // Cancer Res.-2001 .-Vol.61, N. 14.-p.5407-5414.

81. Folkman J. Angiogenesis. In: Harrison's Textbook of Internal Medicine, 15th Edition. Braunwald E., Fauci A.S., Kasper D.L., Hauser S.L., Longo

82. D.L., Jameson J.L., eds. New York: McGraw-Hill.-2001.-p.517-530.

83. Folkman J. Tumor angiogenesis // Adv. Cancer Res.-1985.-Vol.43.-p. 175230.

84. Folkman J., Haudenschild C. Angiogenesis in vitro // Nature (Lond).-1980.-Vol.288, N.5791.-p.551-556.

85. Folkman J., Long D.M., Becker F.F. Growth and metastasis of tumor in organ culture // Cancer.-1963.-p.453-467.

86. Fong G.H., Rossant J., Gertsenstein M., Breitman M.L. Role of the Flt-1 receptor tyrosine kinase in regulating the assembly of vascular endothelium // Nature.-1995.-Vol.376.-p.66-70.

87. Fox S., Generali D., Harris A. Breast tumour angiogenesis // Breast Cancer Res.-2007.-Vol.9, N.6.-p.216-227.

88. Fürstenberger G., von Moos R., Lucas R. Circulating endothelial cells and angiogenic serum factors during neoadjuvant chemotherapy of primary breast cancer//Br. J. Cancer.-2006.-Vol.27, N.94(4).-p.524-531.

89. Galis Z.S., Khatri J.J. Matrix metalloproteinases in vascular remodeling and atherogenesis: the good, the bad, and the ugly // Circ. Res.-2002.-Vol.90.-p.251-262.

90. Gasparini G. Clinical significance of determination of surrogate markers of angiogenesis in breast cancer // Crit. Rev. Oncol. Hematol.-2001.-Vol.37, N.2.-p.97-114.

91. Gasparini G. Prognostic value of vascular endothelial growth factor in breast cancer // 0ncologist.-2000.-Vol.5, Suppl.l.-p.37-44.

92. Gershtein E.S., ScherBakov A.M., Shatskaya V.A., et al. Phosphatidylinositol 3-kinase/AKT signalling pathway components in human breast cancer: clinico-pathological correlations // Anticancer Res.-2007.-Vol.27.-N.4A.-p. 1777-1782.

93. Gimbrone M., Cotran R., Leapman S., Folkman J. Tumor growth and • neovascularization an experimental model using the rabbit cornea // J. Natl. Cancer Inst.-1974.-Vol.52.-p.413-427.

94. Gimbrone M., Leapman S., Cotran R.S., Folkman J. Tumor angiogeneses: iris neovascularization at a distance from experimental intraocular tumors // J. Natl. Cancer Inst.-1973.-Vol.50.-p.219-228.

95. Glasspool R.M., Twelves C.J. Matrix metalloproteinase inhibitors: past lessons and future prospects in breast cancer // Breast.-2001.-Vol.10.-p.368-378.

96. Gomez D.E., Alonso D.F., Yoshiji H., Thorgeirsson U.P. Tissue inhibitors of metalloproteinases: structure, regulation and biological functions // Eur. J. Cell Biol.-1997.-Vol.74.-p.l 11-122.

97. Gospodarowicz D., Abraham J.A., Schillng J. Isolation and characterization of a vascular endothelial cell mitogen produced by pituitary-derived folliculo stellate cells // Proc. Natl. Sci. USA.-1989.-Vol.86.-p.7311-7315.

98. Gu Z., Kaul M., Yan B., Kridel S.J., Cui J., Strongin A., Smith J.W., Liddington R.C., Lipton S.A. S-Nitrosylation of matrix metalloproteinases: signaling pathway to neuronal cell death // Science.-2002.-Vol.297.-p.1186-1190.

99. Guidi A.J., Abu J.G., Tognazzi K., Dvorak H.F., Brown L.F. Expression of vascular permeability factor (vascular endothelial growth factor) and its receptors in endometrial carcinoma // Cancer.-1996.-Vol.78.-p.464-460.

100. Guo P., Fang Q., Tao H.Q. et al. Overexpression of vascular endothelial growth factor by MCF-7 breast cancer cells promotes estrogen-independent tumor growth in vivo // Cancer Res.-2003.-Vol. 63 (15).-P. 4684-4691.

101. Hamilton A., Hortobagyi %G. Chemotherapy: what progress in the last 5 years? // J. Clin. Oncol.-2005.-Vol.23, N.8.-p.l760-1775.

102. Hatake R., Tokudome N., Ito Y. Next Generation Molecular Targeted Agents for Breast Cancer: Focus on EGFR and VEGFR Pathways // Breast Cancer.-2007.-Vol. 14, N.2.-p. 132-149.

103. Huang L.W., Garrett A.P., Bell D.A. et al. Differential expression of matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 protein and mRNA in epithelial ovarian tumors // Gynecol. 0ncol.-2000.-Vol.77, N.3.-p.369-376.

104. Hughes S., Agbaje O., Bowen R.L., Holliday D.L., Shaw J.A., Duffy S., Jones J.L. Matrix metalloproteinase single-nucleotide polymorphisms and haplotypes predict breast cancer progression // Clin. Cancer Res.-2007.-Vol. 13.-p.6673-6680.

105. Isakoff S.J., Ryan P.D. Метастатический рак молочной железы. Глава в руководстве по онкологии (Под ред. Чебнэр Б.Э., Линч Т.Дж., Лонго Д.Л.) // Москва.-«МЕДпресс-информ».-2011.-С.562-571.

106. Keck P.J., Hauser S.D., "Krivi G., Sanzo K., Warren Т., Feder J., Connoly D.T. Vascular permeability factor, an endothelial cell mitogen related to PDGF // Science.- 1989.-Vol.246.-p. 1309-1312.

107. Kolb C., Mauch S., Peter H.H., Krawinkel U., Sedlacek R. The matrix metalloproteinase RASI-1 is expressed in synovial blood vessels of a rheumatoid arthritis patient // Immunol. Lett.-1997.-Vol.57.-p.83-88.

108. Kraft A., Weindel K., Ochs A., Marth С., Zmija J., Schumacher P., Unger C., Marme D., Gastl G. Vascular endothelial growth factor in the sera and effusions of patients with malignant and nonmalignant disease // Cancer.-1999.-Vol.85, N. 1 .-p. 178-187.

109. Kurachi K., Davie E.W., Strydrom D.G., Riordan J.F., Vallie B.L. Seguence of the cDNA and gene for angiogenenin, a human angiogenesis factor // Biochemistry.-1985.-Vol.24, N.20.-p.5495.

110. Lee A.H., Dublin E.A., Bobrow L.G., Poulsom R. Invasive lobular and invasive ductal carcinoma of the breast show distinct patterns of vascular endothelial growth factor expression and angiogenesis // J. Pathol.-Vol.185, N.4.-p.394-401.

111. Lepage Т., Gache C. Early expression of a collagenase-like hatching enzyme gene in the sea urchin embryo // EMBO J.-1990.-Vol.9.-p.3003-3012.

112. Leung D.W., Cachianes G., Kuang W-J., Goeddel D.V., Ferrara N. Vascular endothelial growth factor is a secreted angiogenic mitogen // Science.-1989.-Vol.246.-p. 1306-1309.

113. Lewandowski K.C., Komorowski J., O'Callaghan C.J. et al. Increased circulating levels of matrix metalloproteinase-2 and -9 in women with the polycystic ovary syndrome // J. Clin. Endocrinol. Metab.-2006.-Vol.91, N.3.-p.l 173-1177.

114. Li W., Gibson C.W., Abrams W.R., Andrews D.W., DenBesten P.K. Reduced hydrolysis of amelogenin may result in X-linked amelogenesis imperfect // Matrix Biol.-2001.-Vol.l9.-p.755-760.

115. Liang Y., Hyder S.M. Proliferation of endothelial and tumor epithelial cells by progestin-induced vascular endothelial growth factor from human breast cancer cells: paracrine and autocrine effects // Endocrinology.-2005.-Vol.146, N.8.-p.3632-3641.

116. Linderholm B., Lindh B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. p53 and vascular-endothelial-growth-factor (VEGF) expression predicts outcome in 833 patients with primary breast carcinoma // Int. J. Cancer.-2000.-Vol.89, N.l.-p.51-62.

117. Linderholm B., Tavelin B., Grankvist K., Henriksson R. Does vascular endothelial growth factor (VEGF) predict local relapse and survival in radiotherapy-treated node-negative breast cancer? // Br. J. Cancer.-1999.-Vol.81, N.4.-p.727-732.J

118. Liotta L.A., Tryggvason K., Garbisa S. et al. Metastatic potential correlates with enzymatic degradation of basement membrane collagen // Nature.-1980.-Vol.284, N.5751 .-p.67-68.

119. Liu S.C., Yang S.F., Yeh K.T., Yeh C.M., Chiou H.L., Lee C.Y., Chou M.C., and Hsieh Y.S. Relationships between the level of matrix metalloproteinase-2 and tumor size of breast cancer // Clin. Chim. Acta.-2006.-Vol.371 .-p.92-96.

120. Locopo N., Fanelli M., Gasparini G. Clinical significance of angiogenic factors in breast cancer // Breast Cancer Res. Treat.-1998.-Vol.52, N. 1-3.-p. 159-173.

121. Lohi J., Wilson C.L., Roby J.D., Parks W.C. Epilysin, a novel human matrix metalloproteinase (MMP-28) expressed in testis and keratinocytes and in response to injury // J. Biol. Chem.-2001.-Vol.276.-p.l0134-10144.

122. Maidment J.M., Moore D., Murphy G.P., Murphy G., Clark I.M. Matrix metalloproteinase homologues from Arabidopsis thaliana: expression and activity // J. Biol. Chem.-1999.-Vol.274.-p.34706-34710.

123. Malemud CJ. Matrix metalloproteinases (MMPs) in health and disease: an overview//Front Biosci.-2006.-Vol. 11.-P. 1696-1701.

124. Marehenko G.N., Strongin A.Y. MMP-28, a new human matrix metalloproteinase with an unusual cysteine-switch sequence is widely expressed in tumors // Gene.-2001.-Vol.265.-p.87-93.

125. Matsumoto T., Claesson-Welsh L. VEGF receptor signal transduction // Sci STKE.-2001.-Vol. 2001 (112).-P. RE21.

126. McGowan P.M., Duffy M.J. Matrix metalloproteinase expression and outcome in patients with breast cancer: analysis of a published database // Ann. Qncol.-2008.-Vol. 19.-p. 1566-1572.

127. Miralem Т., Steinberg R., Price D., Avraham H. VEGF(165) requires extracellular matrix components to induce mitogenic effects and migratory response in breast cancer cells // Oncogene.-2001.-Vol. 20 (39).-P. 5511-5524.

128. Mohamed I. Рак молочной железы. In: Handbook of cancer chemotherapy Skeel R.T. (Edifor) / Пер. с англ. В.С.Покровского; под ред. С.В.Орлова // М.-ШЭТАР-Медиа.-2011.-411-439с.

129. Murphy G., Nagase Н. Progress in matrix metalloproteinase research //Mol Aspects Med.-2008.-Vol.29, N.5.-p.290-308.

130. Nagase H. Activation mechanisms of matrix metalloproteinases // Biol. Chem.-1997.-Vol.378.-p. 151-160.

131. Nagase H., Enghild J.J., Suzuki K., Salvesen G. Stepwise activation mechanisms of the precursor of matrix metalloproteinase 3 (stromelysin) by proteinases and (4-aminophenyl)mercuric acetate // Biochemistry.-1990.-Vol.29.-p.5783-5789.

132. Nagase H., Woessner J.F.Jr. Matrix metalloproteinases // J. Biol. Chem.-1999.-Vol.274.-p.21491-21494.

133. Nakajima M., Welch D.R., Wynn D.M. et al. Serum and plasma M(r) 92,000 progelatinase levels correlate with spontaneous metastasis of rat 13762NF mammary adenocarcinoma // Cancer Res.-1993.-Vol. 53 (23).-P. 5802-5807.

134. Nelson A.R., Fingleton В., Rothenberg M.L., Matrisian L.M. Matrix metalloproteinases: biologic activity and clinical implications // J. Clin. Oncol.-2000.-Vol. 18, N.5.-p.l 135-1149.

135. Neufeld G., Cohen Т., Gengrinovitch S. et al. Vascular endothelial growth factor (VEGF) and its receptors // FASEB J.-1999.-Vol.l3.-p.9-22.

136. Nicolson G. Organ specificity of tumor metastasis: role preferential adhesion, invasion and growth of malignant cells at specific secondary sites // Cancer Metastasis Rev.-1988.-Vol.7.-'p.l43-188.

137. Nilsson U.W., Jonsson J.A. et al. Tamoxifen decreases extracellular TGF-betal secreted from breast cancer cells A post-translational regulation involving matrix metalloproteinase activity // Exp.-Cell Res.-2009.-Vol.315, N.L-p.1-9.

138. Obermair A., Kurz C., Czerwenka K., Thoma M., Kaider A., Wagner T. et al. Microvessel density and vessel invasion in lymph-nod'e-negative breast cancer: effect on recurrence-free survival // Int. J. Cancer.-1995.-Vol.62.-p.126-131.

139. Ohuchi E., Imai K., Fujii Y., Sato H., Seiki M., Okada Y. Membrane type 1 matrix metalloproteinase digests interstitial collagens and other extracellular matrix macromolecules // J. Biol. Chem.-1997.-Vol.272.-p.2446-2451.

140. Okada Y., Harris E.D., Nagase H. The precursor of a metalloendopeptidase from human rheumatoid synovial fibroblasts: purification and mechanisms of activation by endopeptidases and 4-aminophenylmercuric acetate //Biochem J.-1988.-Vol.254.-p.731-741.

141. Okuyama N., Matsumine A., Kosugi R., Wakabayashi H., Uchida A. (2008) Matrix metalloproteinase-1 is a crucial bone metastasis factor in a human breast cancer-derived highly invasive cell line // Oncol. Rep.-2008.-Vol.20.-p. 1497-1504.

142. Olson T.A., Mohanraj D., Carson L.F., Ramakrishnan S. Vascular permeability factor gene expression in normal and neoplastic human ovaries // Cancer Res.-1994.-Vol.54.-p.276-280.

143. Park H.I., Ni J., Gerkema F.E., Liu D., Belozerov V.E., Sang Q.X. Identification and characterization of human endometase (matrix metalloproteinase-26) from endometrial tumor // J. Biol. Chem.-2000.-Vol.275.-p.20540-20544.

144. Park J.E., Keller G.-A., Ferrara N. The vascular endothelial growth factor (VEGF) isofirms: differantional deposition into the subepithelial extracellular matrix and bioactivity of ECM-bound VEGF // Mol. Biol. Cell.-1993 .-Vol.4.-p. 1317-1326.

145. Patterson M.L., Atkinson S.J., Knauper V., Murphy G. Specific collagenolysis by gelatinase A, MMP-2, is determined by the hemopexin domain and not the fibronectin-like domain // FEBS Lett.-2001.-Vol.503.-p.158-162.

146. Pei D. Leukolysin/MMP25/MT6-MMP: a novel matrix metalloproteinase specifically expressed in the leukocyte lineage // Cell Res.-1999.-Vol.9.-p.291 -303.

147. Pepper M.S. Extracellular proteolysis and angiogenesis I I Thromb. Haemost.-2001.-Vol.86.-p.346-355.

148. Phillips H.S., Hains J., Leung D.W., Ferrara N. Vascular endothelial growth factor is expressed in rat corpus luteum // Endocrinology.-1990.-Vol. 127.-p.965-967.

149. Pintucci G., Bikfalvi A., Klein S., Rifkin D.B. Angiogenesis and the fibrinolytic system // Semin. Thromb. Hemost.-1996.-Vol.22, N.6.-p.517-24.

150. Ramnath N., Creaven P.J. Matrix metalloproteinase inhibitors // Curr. Oncol. Rep.-2004.-Vol.6, N.2.-p.96-102.

151. Ramnath N., Creaven P.J. Matrix metalloproteinase inhibitors // Curr. Oncol. Rep.-2004.-Vol.6, N.2.-p.96-102.

152. Ravindranath N., Little-Ihrig L., Phillips H. S., Ferrara N., Zeleznik A.J. Vascular endothelial growth factor messenger ribonucleic acid expression- in the primate ovary // Endocrinology.-1992.-Vol. 131.-p.254-260.

153. Risau W. Mechanisms of angiogenesis // Nature.-1997.-Vol.386.-p.671-674.

154. Saarialho-Kere U., Kerkela E., Jahkola T., Suomela S., Keski-Oja J., Lohi J. Epilysin (MMP-28) expression is associated with cell proliferation during epithelial repair// J. Invest. Dermatol.-2002.-Vol.119.-p. 14-21.

155. Salven P., Manpaa H., Orpana A., Alitalo K., Joensuu H. Serum vascular endothelial growth factor is often elevated in disseminated cancer // Clin. Cancer Res.-1997.-Vol.3, N.5.-p.647-651.

156. Sato Y. Transcription factor ETS-1 as a molecular target for angiogenesis inhibition // Hum. Cell.-1998.-Vol.l 1, N.4.-p.207-214.

157. Shalaby F., Rossant J., Yamaguchi T., Gertsenstein M., Wu X., Breitman M., Schuh A. Failure of blood-island formation and vasculogenesis in Flk-1-deficient mice // Nature.-1995.-Vol.376.-p.62-66.

158. Shapiro S.D., Kobayashi D.K., Ley T.J. Cloning and characterization of a unique elastolytic metalloproteinase produced by human alveolar macrophages//J. Biol. Chem.-1993.-Vol.268.-p.23824-23829.

159. Shin A., Cai Q., Shu X.O., Gao Y.T., Zheng W. (2005) Genetic polymorphisms in the matrix metalloproteinase 12 gene (MMP 12) and breast cancer risk and survival: the Shanghai Breast Cancer Study // Breast Cancer Res.-2005.-Vol.7.-p.506-512.

160. Shipley J.M., Wesselschmidt R.L., Kobayashi D.K., Ley T.J., Shapiro S.D. Metalloelastase is required for macrophage-mediated proteolysis and matrix invasion in mice // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1996.-Vol.93.-p.3942-3946.

161. Sounni N.E., Janssen M., Foidart J.M., Noel A. Membrane type-1 matrix metalloproteinase and TIMP-2 in tumor angiogenesis // Matrix Biol.-2003.-Vol.22, N.L-p.55-61.a

162. Spinale F.G. Matrix metalloproteinases: regulation and dysregulation in the failing heart // Circ. Res.-2002.-Vol.90.-p.520-530.

163. Sternlicht M.D., Werb Z. How matrix metalloproteinases regulate cell behavior//-Ann. Rev. Cell Dev. Biol.-2001.-Vol.l7.-p.463-516.

164. Stewart P.A., Wiley M.J. Developing nervous tissue induces formation of blood-brain characteristics in invading endothelial cells: a study using quail-chick transplantation chimeras // Dev. Biol.-1981.-Vol.84.p.183-192.

165. Suzuki K., Enghild J.J., Morodomi T., Salvesen G., Nagase H. Mechanisms of activation of tissue procollagenase by matrix metalloproteinase 3 (stromelysin) // Biochemistry.-1990.-Vol.29.-p. 10261-10270.

166. Toi M., Hoshina S., Takayanagi T., Tominaga T. Association of vascular endothelial growth factor expression with tumor angiogenesis and with early relapse in primary breast cancer // Jpn. J. Cancer Res.-1994.-Vol.85, N.10.-p. 1045-1049.

167. Toi M., Kondo S., Suzuki H., Yamamoto Y., Inada K., Imazawa T., Taniguchi T., Tominaga T. Quantitative analysis of vascular endothelial growth factor in primary breast cancer // Cancer.-1996.-Vol.77, N.6.-p.l 1011106.

168. Tolentino M.J., Miller J.W., Gragoudas E.S. et al. Vascular endothelial growth factor is sufficient to produce iris neovascularization and neovascular glaucoma in a nonhuman primate // Arch. Ophthalmol.-1996.-Vol.l 14.-p.964-970.

169. Ulku A.S., Schafer R., Der C.J. Essential role of Raf in Ras transformation and deregulation of matrix metalloproteinase expression in ovarian epithelial cells // Mol. Cancer Res.-2003.-Vol.l, N.14.-p.l077-1088.

170. Uria J.A., Lopez-Otin C. Matrilysin-2, a new matrix metalloproteinase expressed in human tumors and showing the minimal domain organization required for secretion, latency, and activity // Cancer Res.-2000.-Vol.60.-p.4745-4751.

171. Van Wart H.E., Birkedal-Hansen H. The cysteine switch: a principle of regulation of metalloproteinase activity with potential applicability to the entire matrix metalloproteinase gene family // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1990.-Vol.87.-p.5578-5582.

172. Vandenbunder B., Wernert N., Stehelin D. L'oncogene c-ets 1 participe-t-il a la regulation de l'angiogenese tumorale? // Bull. Cancer.-1993.-Vol.80.-p.38-49.

173. Visse R., Nagase H. Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases: structure, function, and biochemistry// Circ. Res.-2003.-Vol.92, N.8.-p.827-839.

174. Watson S.A., Morris T.M., Collins H.M. et al. Inhibition of tumour growth by marimastat in a human xenograft model of gastric cancer: relationship with levels of circulating CEA // Br. J. Cancer.-1999.-Vol.81, N.l.-p.l9-23.

175. Weider N., Folkman J., Pozza F., Bevilacqua P., Allred E.N., Moore D.H. et al. Tumour angiogenesis: a new significant and independent prognostic indicator in early stage breast carcinoma // J. Natl. Cancer Inst.-1992.-Vol.84.-p.l875-l 887.

176. Westermarck J., Kahari V.M. Regulation of matrix metalloproteinase expression in tumor invasion // Faseb J.-1999.-Vol.l3, N.8.-p.781-792.

177. Woessner J.F. The matrix metalloproteinase family. In: Parks W.C., Mecham R.P., eds. Matrix Metalloproteinases. San Diego, Calif: Academic Press.-1998.-p.1-13.

178. Yonemura Y., Endo Y., Fujita H. et al. Inhibition of peritoneal dissemination in human gastric cancer by MMP-7-specific antisense oligonucleotide // J. Exp. Clin. Cancer Res.-2001.-Vol.20, N.2.-p.205-212.

179. Yoshiji H., Gomez D.E., Shibuya M., Thorgeirsson U.P. Expression of vascular endothelial growth factor. Its receptor, and other angiogenic factors in human breast cancer // Cancer Res.-1996.-Vol.56.-p.2013-2016.

180. Zagouri F., Sergentanis Th., Zografos G. Precursors and preinvasive lesions of the breast: the role of molecular prognostic markers in the diagnostic and therapeutic dilemma // World J. Surg. Oncol.-2007.-Vol.5.-p.57-68.

181. Zebrowski B.K., Yano S., Liu W., Shaheen R.M., Hicklin D.J., Putnam J.B. Jr, Ellis L.M. Vascular endothelial growth factor levels and induction of permeability in malignant pleural effusions // Clin. Cancer Res.-1999.-Vol.5, N. 11 .-p.3364-3368.

182. Zhou S., Liu C., Wu S.M., Wu R.L. Expressions of CD147 and matrix metalloproteinase-2 in breast cancer and their correlations to prognosis // Ai. Zheng.-2005.-Vol.24.-p.874-879.