«Клиническая значимость маркеров тканевой гипоксии, эпителиально-мезенхимального перехода и иммунологической толерантности при раке молочной железы» тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Зубарева Евгения Юрьевна

• Зубарева Евгения Юрьевна
• кандидат наук
• 2024

Оглавление диссертации кандидат наук Зубарева Евгения Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О КЛИНИЧЕСКИХ, МОРФОЛОГИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕДИКТОРАХ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ РАКА МОЛОЧНОЙ

ЖЕЛЕЗЫ К ХИМИОТЕРАПИИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Рак молочной железы как актуальная медицинская и

социально-экономическая проблема

1.2. Значение неоадъювантной химиотерапии в лечении рака молочной железы. Современные системы оценки эффективности неоадъювантной химиотерапии

1.3. Предикторы чувствительности рака молочной железы к химиотерапии

1.4. Значение гипоксии, ангиогенеза, эпителиально-мезенхимального перехода и иммунологической толерантности в химиорезистентности рака молочной железы

1.4.1 Роль гипоксии и опухолевого ангиогенеза в развитии химиорезистености рака молочной железы

1.4.2 Роль эпителиально-мезенхимального перехода в развитии химиорезистености рака молочной железы

1.4.3 Роль иммунологической толерантности в развитии химиорезистентности рака молочной железы

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Общий объем проведенного исследования

2.2 Общая характеристика включенных в исследование пациенток

2.3 Определение уровня TGF-P1 в сыворотке крови

2.4 Иммуногистохимические исследования

2.5 Статистический анализ

Глава 3. СОБСТВЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1 Экспрессия HIF-1a, Snail и PD-L1 в ткани рака молочной железы в зависимости от клинико-морфологических характеристик заболевания

3.1.1 Экспрессия HIF- 1а в ткани рака молочной железы

3.1.2 Экспрессия Snail в ткани рака молочной железы

3.1.3 Экспрессия PD-L1 в ткани рака молочной железы

3.2 Уровни TGF-P1 в сыворотке крови в зависимости от клинико-морфологических характеристик рака молочной железы

3.3 Предиктивная значимость клинико-морфологических характеристик

рака молочной железы и изученных биологических маркеров

3.3.1 Установление предиктивных маркеров эффективности неоадъювантной лекарственной терапии, оцениваемой по системе Миллера-Пейна

3.3.2 Установление предиктивных маркеров эффективности неоадъювантной лекарственной терапии, оцениваемой по системе

RCB

ОБСУЖДЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Рак молочной железы (РМЖ) занимает первое место в структуре онкологической заболеваемости и смертности среди женского населения и является не только медицинской, но и социально-экономической проблемой (Каприн А.Д. и соавт., 2021). В настоящее время РМЖ принято считать системным заболеванием. Лечение этой патологии отличается агрессивной тактикой, которая включает многократные курсы дорогостоящей лекарственной терапии, в ряде случаев даже на ранних стадиях заболевания (например, у пациенток с трижды негативным и HER2-позитивным подтипом опухоли). Учитывая, что неэффективное лечение оказывает негативное влияние на здоровье пациента и ассоциировано с необоснованными экономическими затратами, поиск новых факторов и маркеров, позволяющих прогнозировать ответ на лечение, продолжает оставаться актуальным.

В настоящее время установлен ряд новых молекулярных маркеров, ассоциированных с химиорезистентностью РМЖ. Наиболее перспективными являются маркеры тканевой гипоксии и эпителиально-мезенхимального перехода (ЭМП) (Milani M. et al., 2017; Nie C. et al., 2018; Cai F. et al., 2019; Zhang J. et al., 2020). Установлено, что гиперэкспрессия индуцируемого гипоксией фактора-1а (HIF-1a) приводит к развитию химиорезистентности клеток РМЖ, что было показано на клеточных культурах (Li S. et al., 2017; Zhang J. et al., 2018; Bharti R. et al., 2018) и в ряде клинических исследований (Milani M. et al., 2017; Nie C. et al., 2018). Так, в случаях, когда у пациенток определялась экспрессия HIF-1a в опухолевых клетках, достоверно реже наблюдается полный патологический ответ опухоли на неоадъювантную химиотерапию (НАХТ), чем у пациенток, чьи опухоли не экспрессировали этот фактор (Milani M. et al., 2017; Nie C. et al., 2018).

Что касается исследований, посвященных изучению роли ЭМП в прогрессировании и химиорезистентности злокачественных новообразований (ЗНО), то большинство этих исследований проводилось на клеточных культурах и мышиных моделях. В ряде экспериментальных исследований было показано, что

факторы транскрипции, такие как Snail, Slug, Twist, Zeb, FOXM1 и FOXC2, имеют сайты связывания на промоторных участках некоторых генов кассетных ABC-транспортеров и способны усиливать их эффлюксную активность (Saxena M. et al., 2011). Кроме того, образующиеся в ходе ЭМП опухолевые стволовые клетки, благодаря своей способности к репарации повреждений ДНК, устойчивости к апоптозу и аберрантной экспрессии ABC-транспортеров также способствуют развитию множественной лекарственной устойчивости (Dirkse A. et al., 2019).

Также важно отметить, что существует тесная взаимосвязь между гипоксией, ЭМП и развитием иммунологической толерантности (Jing X. et al., 2019; Messeha S.S. et al., 2020; Jiang Y. et al., 2020; Sahoo S. et al., 2021). Установлено, что снижение экспрессии эпителиальных белков и увеличение экспрессии мезенхимальных белков во время ЭМП вызывает иммуносупрессию и усиливает диссеминацию и миграцию опухоли (Alsuliman A. et al., 2015; Messeha S.S. et al., 2020). Кроме того, недавние экспериментальные исследования на клеточных линиях подтвердили роль иммунологической толерантности в развитии химиорезистености РМЖ (Gao L. et al., 2019; Dastmalchi N. et al., 2020). Так, в эксперименте, гиперэкспрессия PD-L1 способствовала химиорезистентности и стволовости клеток РМЖ посредством активации путей PI3K/Akt и ERK1/2 (Gao L. et al., 2019). Однако, следует отметить, что результаты клинических исследований, касающихся связи экспрессии PD-L1 с ответом на НАХТ при РМЖ, были достаточно противоречивыми. Например, одни авторы приводят данные о том, что у пациенток с РМЖ, чьи опухоли были PD-L1-позитивными, достоверно чаще достигался полный патологический ответ (pCR) на неоадъювантную лекарственную терапию (Li C. et al., 2020; Du Q. et al., 2020; Alhesa A. et al., 2022). В тоже время, другие авторы получили противоположные результаты (Asano Y. et al., 2018; Frank G.A. et al., 2019).

Степень разработанности темы

Несмотря на определенные успехи в изучении роли гипоксии, ЭМП и иммунологической толерантности в развитии химиорезистености РМЖ, работ, связанных с комплексным изучением их предиктивной значимости, крайне мало, а полученные результаты достаточно противоречивы (Nie C. et al., 2018; Hoffmann L.G. et al., 2022; Zhang J. et al., 2020). Сказанное выше определило цель и задачи настоящего исследования.

Цель исследования

Цель исследования - установить взаимосвязь уровней маркеров тканевой гипоксии, ЭМП и иммунологической толерантности с клинико-морфологическими характеристиками РМЖ и дать оценку их предиктивной значимости у пациентов с местно-распространенным РМЖ.

Задачи исследования

1. Исследовать уровень маркера ЭМП (TGF-01) в сыворотке крови у пациенток с РМЖ;

2. Изучить экспрессию маркеров гипоксии (HIF-1a), ЭМП (Snail) и иммунологической толерантности (PD-L1) в ткани опухоли до неоадъювантного лечения;

3. Установить взаимосвязь уровней маркеров тканевой гипоксии, ЭМП и иммунологической толерантности с клинико-морфологическими характеристиками РМЖ;

4. Оценить предиктивную значимость исследованных маркеров у пациенток с местно-распространенным РМЖ.

Научная новизна работы

В работе впервые комплексно изучены уровни TGF-01 в сыворотке крови и выраженность экспрессии HIF-1a, Snail и PD-L1 в ткани опухоли при РМЖ. Выполнена оценка корреляций исследованных маркеров с клинико-морфологическими характеристиками и чувствительностью РМЖ к НАХТ. Установлено, что снижение уровня TGF-01 в сыворотке крови, высокие коэффициенты экспрессии HIF-1a, PD-L1 и Snail в ткани опухоли, наличие ядерной экспрессии PD-L1 в строме опухоли коррелируют с неблагоприятными клинико-морфологическими факторами прогноза РМЖ: наличием метастазов в регионарные лимфоузлы (РЛУ) и отдаленные органы, наличием лимфоваскулярной (ЛВИ) и периневральной инвазии (ПНИ), а также с HER-позитивным статусом РМЖ. По данным многофакторного анализа независимыми предикторами низкой эффективности НАХТ РМЖ в общей группе являются люминальный А и люминальный В HER2 негативный молекулярно-биологические подтипы, коэффициент экспрессии Snail в паренхиме опухоли ниже 2,20, коэффициент экспрессии PD-L1 в паренхиме опухоли выше 1,64; в подгруппе HER2-негативного РМЖ - коэффициент экспрессии Snail в строме опухоли менее 1,60, коэффициент экспрессии PD-L1 в паренхиме опухоли более 1,64 и в строме опухоли более 1,12; тогда как в подгруппе HER2-позитивного РМЖ - только коэффициент экспрессии PD-L1 в строме опухоли более 1,12.

Теоретическое и практическое значение работы

Комплексное изучение уровней TGF-01 в сыворотке крови и выраженности экспрессии HIF-1a, Snail и PD-L1 в ткани опухоли и их корреляций с клинико-морфологическими характеристиками и эффективностью неоадъювантной химиотерапии позволило расширить представления о механизмах опухолевой прогрессии и химиорезистености РМЖ. Полученные результаты позволили

разработать способ прогнозирования резистентности к неоадъювантной химиотерапии у больных РМЖ, согласно которому, при коэффициенте экспрессии PD-L1 в паренхиме опухоли выше 1,64 и коэффициенте экспрессии Snail в паренхиме опухоли ниже 2,20 резистентность к неоадъювантной химиотерапии у больных РМЖ. Его внедрение в клиническую практику, будет способствовать более точному выявлению химиорезистентных опухолей и оптимизации проводимого лечения.

Учитывая, что наличие метастазов в РЛУ коррелирует с коэффициентом цитоплазматической экспрессии PD-L1 и ядерной экспрессией PD-L1 в клетках опухолевой стромы, определение этих маркеров может быть полезным для уточнения показаний к лимфодиссекции у пациенток РМЖ. Определение уровней TGF-P1 в сыворотке крови и ядерной экспрессии PD-L1 в биопсийном материале, как дополнительных маркеров, связанных с наличием метастазов в отдаленные органы, может помочь в разработке индивидуального плана обследования и динамического наблюдения этой группы пациенток для своевременного выявления прогрессирования заболевания.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Высокие коэффициенты экспрессии HIF-1a, PD-L1 и Snail в ткани опухоли, наличие ядерной экспрессии PD-L1 в строме опухоли и низкие уровни TGF-P1 в сыворотке крови коррелируют с неблагоприятными клинико-морфологическими факторами прогноза РМЖ: наличием метастазов в РЛУ и отдаленные органы, ЛВИ и ПНИ;

2. Ведущими предикторами химиорезистентного РМЖ, независимо от молекулярно-биологического подтипа, являются высокий уровень экспрессии PD-L1 и низкий уровень экспрессии Snail в ткани опухоли.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему ««Клиническая значимость маркеров тканевой гипоксии, эпителиально-мезенхимального перехода и иммунологической толерантности при раке молочной железы»»

Апробация работы

Результаты исследования апробированы и доложены на следующих всероссийских и международных конференциях: IV Международный молодежный научно-практический форум «Медицина будущего: от разработки до внедрения» (апрель 2020г., г. Оренбург); VI конференция молодых ученых, посвященная памяти академика А.Ф. Цыба «Перспективные направления в онкологии, радиобиологии и радиологии» (27 ноября 2020 г., г. Обнинск); VIII Международный молодежный медицинский форум «Медицина будущего -Арктике» (22 апреля 2021г., г. Архангельск); XI межвузовская научно-практическая конференция молодых ученых с международным участием, посвященная 10-летию Саратовского медицинского университета «РЕАВИЗ» (апрель 2021г., г. Самара); V Международный молодежный научно-практический форум «Медицина будущего: от разработки до внедрения» (апрель 2021 г., г. Оренбург); VI Всероссийской конференции по молекулярной онкологии (21-23 декабря 2021г., г. Москва); Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Аспирантские чтения 2021: молодые ученые -медицине» (13-14 октября 2021г., г. Самара); Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «Молодые ученые науке и практике XXI века» (11 февраля 2022г., Оренбург); XIII Съезд онкологов и радиологов стран СНГ (27-29 апреля 2022 г., Казахстан); I научно-практическая конференция Молодежного совета «Актуальные вопросы современной онкологии» (14 октября 2022г., Москва).

Личный вклад автора в проведенное исследование

Самостоятельно выполнен анализ отечественных и зарубежных источников литературы по проблеме исследования, разработан дизайн исследования. Согласно критериям включения проведен набор пациенток в исследование и анализ

амбулаторных карт. Выполнено микроскопическое исследование 474 гистологических препаратов, их фотодокументирование и морфометрия 3792 снимков. Проведены статистическая обработка и анализ данных, полученных в результате исследования. Подготовлены публикации по основным результатам исследования.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 26 печатных работ, из них: 3 статьи в отечественных журналах, включенных в базу цитирования Scopus; 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК; 21 работа, опубликованная в материалах международных и всероссийских конференций и съездов (из них 6 - в изданиях, включенных в базу цитирования Scopus; 2 журналах, рекомендуемых ВАК); 10 устных докладов на международных и всероссийских конференциях.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 121 странице машинописного текста и состоит из следующих разделов: введение, глава 1 - обзор литературы, глава 2- материалы и методы, глава 3 - результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, практические рекомендации и список литературы. Диссертация иллюстрирована 22 таблицами и 21 рисунком. Список литературы включает 192 источника (16 отечественных и 176 зарубежных).

Глава 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О КЛИНИЧЕСКИХ,

МОРФОЛОГИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕДИКТОРАХ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ К ХИМИОТЕРАИИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1Рак молочной железы как актуальная медицинская и социально-

экономическая проблема

РМЖ является ведущей онкологической патологией в мире, занимая первое место по показателям заболеваемости и смертности среди женского населения (Каприн А.Д. и соавт., 2021). В Российской Федерации на фоне снижения смертности от этой патологии (на 21% за 10 лет), отмечается неуклонный рост заболеваемости РМЖ (на 13,75% за 10 лет). Снижение смертности стало возможным исключительно благодаря активному выявлению РМЖ на доклинических стадиях заболевания. Однако, несмотря на то, что за 10 лет в РФ показатель активного выявления РМЖ увеличился с 25,8% до 40,5%, он все еще остается довольно низким, по сравнению с аналогичными показателями в ряде экономически развитых стран. Так, показатель запущенности по РМЖ (Ш-1У стадия) в РФ в 2020 году составил 27,7% (Каприн А.Д. и соавт., 2021). Высокие цифры заболеваемости и низкие показатели раннего выявления являются основной причиной того, что РМЖ занимает лидирующее положение в структуре смертности от ЗНО среди женского населения (15,9%). Очевидно, что снижение смертности от данной патологии невозможно без реализации государственной программы скрининга РМЖ.

В настоящее время РМЖ принято считать системным заболеванием. Лечение этой патологии отличается агрессивной тактикой, которая включает многократные курсы дорогостоящей лекарственной терапии, в ряде случаев даже на ранних стадиях заболевания (например, у пациенток с трижды негативным и НЕЯ2-позитивным подтипом опухоли) (Семиглазов В.Ф. и соавт., 2014; Колядина И.В. и

соавт., 2017). Учитывая, что большая часть экономических затрат на лечение РМЖ приходится на химиотерапию, определение чувствительности опухоли к используемым лекарственным препаратам имеет принципиальное значение.

1.2Значение неоадъювантной химиотерапии в лечении рака молочной железы. Современные системы оценки эффективности неоадъювантной химотерапии

Среди методов лекарственной терапии, неоадъювантная химиотерапия (НАХТ) занимает особое место в лечении РМЖ. В настоящее время установлены следующие показания к проведению НАХТ: местно-распространенный РМЖ (стадии Т0-4К2-3М0, Т4ШМ0), в т.ч. инфильтративно-отечная форма; инвазивный первично операбельный РМЖ (Т2ШМ0, Т2ШМ0, Т3ШМ0, Т3ШМ0) с тройным негативным фенотипом или НЕК2-положительным статусом, а также люминальный В рак высокого риска ^3, высокий Ю67) (Тюляндин С.А. и соавт., 2021). Целями НАХТ являются снижение биологической агрессивности опухоли, уменьшение опухолевой массы для возможности выполнения радикальной операции, увеличение доли органосохраняющего лечения, а также достижение полного лекарственного патоморфоза, как маркера благоприятного прогноза заболевания (Колядина И.В. и соавт., 2017; Ганусевич О.Н. и соавт., 2019). При этом, оценка эффективности лечения имеет ключевое значение не только для определения прогноза заболевания, но и для коррекции проводимой терапии. У пациенток РМЖ она может определяться с использованием клинических и морфологических методов исследования (Ганусевич О.Н. и соавт., 2019). К клиническим методам относят оценку динамики размеров опухоли, числа и размеров патологически измененных регионарных лимфоузлов при помощи пальпации, ультразвукового исследования, маммографии и магнитно-резонансной томографии. Морфологические методы исследования позволяют выявить на клеточном и тканевом уровне некробиотические изменения, происходящие в

опухоли под воздействием лекарственной терапии (Ганусевич О.Н. и соавт., 2019).

Следует отметить, что клинические методы не позволяют точно определить размеры остаточной опухоли, что связано с диффузным фиброзом и наличием разрозненных опухолевых клеток, которые невозможно определить при пальпации и при применении инструментальных методов исследования. Наиболее объективно оценить размеры опухоли после лечения позволяет морфологический метод (Сазонов С. В. И соавт., 2016). В связи с этим, в настоящее время для оценки эффективности лекарственной терапии РМЖ в стандарты морфологического исследования операционного материала включено определение степени терапевтического патоморфоза опухоли (Колядина И.В. и соавт., 2017). В классификации ВОЗ 2012 года приводится восемь различных систем для оценки терапевтического патоморфоза РМЖ: Miller-Payne, Pinder, RCB (residual cancer burden), B-18, Chevallier, Sataloff, AJCC(y), MNPI (Modified Notingham Prognostic Index) (Lakhani S.R. et al., 2012). Приведенные системы различаются набором факторов, которые учитываются при оценке ответа опухоли на лечение. Это приводит к значительным вариациям регистрации частоты полного ответа опухоли на проводимое лечение (pCR), недостоверному прогнозу и разночтениям в оценке эффективности НАХТ (Москвина Л.В. и соавт., 2017).

Наиболее современной и точной системой оценки степени ответа опухоли на НАХТ по рекомендациям ESMO и NCCN является система RCB (оценка ложа остаточной опухоли), разработанная в клинике N.D. Anderson Cancer Сenter на основании оценки некоторых характеристик остаточной опухоли и кривых безрецидивной выживаемости больных. При использовании данной системы рассчитывают индекс, по величине которого судят о прогнозе для конкретной пациентки (Symmans W.F., et al., 2007; Москвина Л.В. и соавт., 2017). Выделяют четыре степени (класса) ответа опухоли: RСB0 - при полном ответе (отсутствие опухоли в молочной железе и исследованных РЛУ) и клинически хорошем прогнозе; RCBI (<1,36) - при частичном ответе (минимальная остаточная болезнь) и низком риске прогрессирования заболевания; RCBII (от 1,36 до 3,28) - при

минимальном ответе (умеренная остаточная болезнь) и промежуточном риске прогрессирования заболевания; ЯСВШ (>3,28) - при выраженной остаточной болезни (резистентность к проведенной терапии) и высоком риске прогрессирования заболевания ^утташ W.F., et а1., 2007; Москвина Л.В. и соавт., 2017).

Оптимальным результатом НАХТ является достижение полного регресса первичной опухоли и регионарных метастазов, что наблюдается далеко не во всех случаях.

1.3Предикторы чувствительности рака молочной железы к

химиотерапии

Согласно данным литературы, при РМЖ исследованы многочисленные предиктивные маркеры ответа на НАХТ, но только ЭР и ПР, а также рецепторы к эпидермальному фактору роста человека оказались надежными биомаркерами, позволяющими прогнозировать ответ опухоли на НАХТ, что позволило включить их в международные руководства по лечению РМЖ (Тап W. et а1., 2018; Tarighati Е. et а1., 2022). В тоже время, следует отметить, что при назначении НАХТ у пациенток внутри одного молекулярно-биологического подтипа часто наблюдаются значительные различия в индивидуальном ответе на проводимое лечение. В клинической практике нередко приходится сталкиваться с ситуацией, когда, казалось бы, при чувствительном к химиотерапии подтипе РМЖ наблюдается отсутствие эффекта от проводимой терапии. Это может быть связано с тем, что молекулярно-биологические подтипы являются неоднородными по своим характеристикам. В частности, в последнее десятилетие стали появляться данные о гетерогенности трижды негативного РМЖ (ТНРМЖ). На основании результатов молекулярно-генетических исследований выделено несколько подтипов ТНРМЖ, отличающихся как по прогнозу, так и по чувствительности к лекарственной терапии (Вш^ет МЛ. et а1., 2015). Установлено, что ТНРМЖ с

мутацией гена BRCA1, в отличие от других подтипов ТНРМЖ, является нечувствительным к стандартному лечению таксанами, но демонстрирует выраженный регресс при лечении цисплатином (Foedermayr M. et al., 2014). Наличие некоторых мутаций при люминальных и HER2-позитивных РМЖ может приводить к резистентности к препаратам, которые рекомендованы в стандартах для лечения этих групп пациенток. Так, например, наличие мутации в гене PIK3CA, обычно ассоциируется с устойчивостью к паклитакселу, тамоксифену и трастузумабу (SeoY. et al., 2018; Yang L. et al., 2019; Ali Alqahtani et al., 2020). Однако некоторые авторы не выявили связи между мутациями PIK3CA и чувствительностью опухоли к НАХТ и неоадъювантной эндокринотерапии (Fan H. et al., 2018), а Guarneri V. et al. (2014) вообще показали, что мутация гена PIK3CA может привести к благоприятному объективному ответу на эндокринную терапию (Fan H. et al., 2018; Guarneri V. et al., 2014). Полученные данные свидетельствуют о наличии других дополнительных факторов или даже совокупности факторов, которые могут влиять на результат лечения при РМЖ.

Таким образом, существующие проблемы побуждают ученых к поиску новых факторов и маркеров, которые помогли бы прогнозировать как ответ на лечение, так и выживаемость пациентов.

1.4 Значение гипоксии эпителиально-мезенхимального перехода и иммунологической толерантности в химиорезистентности рака молочной

железы

1.4.1 Роль гипоксии в развитии химиорезистентности рака молочной

железы

Большое влияние на рост и развитие опухоли оказывают факторы микросреды. Одним из таких факторов является тканевая гипоксия, которой отводится индуцирующая роль в патогенезе опухолевого роста. В результате

снижения внутриклеточного напряжения кислорода при гипоксии в ткани опухоли развиваются сначала функциональные, а затем структурные изменения. Поначалу уменьшенная диффузия кислорода из окружающих тканей сдерживает рост опухоли, но с течением времени происходит развитие ряда адаптивных механизмов, таких как активация анаэробного метаболизма, интенсивная неоваскуляризация, изменение регуляции клеточного цикла и усиление пролиферации. Эти механизмы способствуют выживанию опухолевых клеток в сложных условиях пониженного содержания кислорода (Пожилова Е.В. и соавт., 2015; Badowska-Kozakiewicz A. et al., 2016). Кроме того, в условиях гипоксии происходит нарушение межклеточных взаимодействий, что активирует инвазию и метастазирование опухоли. Эти эффекты реализуются через специфический регуляторный белок - гипоксией индуцированный фактор-1а (HIF-la). HIF-la является субъединицей гетеродимерного белка HIF-1. Экспрессия HIF-1a регулируется уровнем тканевого кислорода (Новиков В.Е. и соавт., 2013). При нормальной концентрации кислорода происходит протеосомная деградация белковой молекулы HIF-1a, тогда как при гипоксии она остается стабильной и накапливается. При РМЖ такие генетические изменения как потеря опухолевых супрессоров PTEN, p53 или BRCA1, обеспечивают стабильность молекулы HIF-1a независимо от уровня тканевого кислорода (de Heer E.C. et al., 2020). Кроме того, увеличению экспрессии HIF-1a могут способствовать такие факторы как длительная стимуляция рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), рецептора инсулиноподобного фактора роста-1 (IGF-1R), рецептора фактора стволовых клеток (SCF) KIT, рецепторов трансформирующего фактора роста-в (TGF-0R) и Notch, а также гиперактивация пути PI3K / Akt / mTOR или MAPK (Mimeault M. et al., 2013).

Увеличение уровня экспрессии HIF-1a в ткани опухоли способствует активации транскрипции различных ростовых факторов и цитокинов, регулирующих процессы ЭМП, иммунологической толерантности, ангиогенеза (Liu Z-j Semenza G.L. et al., 2015). Так, в условиях гипоксии за счет активации

VEGF запускается процесс ангиогенеза, в ходе которого образуются новые опухолевые сосуды (Zonneville J. et al., 2018); активируются факторы транскрипции Snail, Twist, Zeb, ответственные за активацию программы ЭМП (Bao B. et al., 2012; Гапонова А.В. и соавт., 2020); а также различные факторы роста и цитокины, которые снижают способность иммунных эффекторных клеток бороться с опухолевыми клетками (Palazon A. et al., 2017). В частности, TGF-^1 и VEGF снижают активность Т-лимфоцитов и ограничивают способность дендритных клеток обрабатывать и представлять опухолевые антигены лимфоцитам (Engblom C. et al., 2016; Palazon A. et al., 2017). Повышение экспрессии HIF-1a способствует повышению уровня экспрессии PD-L1 миелоидными супрессорными клетками, опухоль ассоциированными макрофагами, дендритными клетками и опухолевыми клетками (Engblom C. et al., 2016; Palazon A. et al., 2017).

Установлено, что гиперэкспрессия HIF-1a приводит к развитию химиорезистентности клеток РМЖ, что было показано на клеточных культурах (Li S. et al., 2017; Zhang J. et al., 2018; Bharti R. et al., 2018) и в ряде клинических исследований (Milani M. et al., 2017; Nie C. et al., 2018). Так, было установлено, что в случаях, когда у пациенток определялась экспрессия HIF-1a в опухолевых клетках, достоверно реже наблюдается полный патологический ответ опухоли на НАХТ, чем у пациенток, чьи опухоли не экспрессировали этот фактор (Milani M. et al., 2017; Nie C. et al., 2018). Padro M., (2017) продемонстрировали, что под действием гипоксии происходит потеря ЭР на поверхности опухолевых клеток, и, как следствие, развитие гормонорезистнтности РМЖ (Padro M. et al., 2017).

В результате проведенных исследований, было установлено несколько биологических механизмов, объясняющих развитие химиорезистентности в условиях гипоксии. Во-первых, новые опухолевые сосуды, образующиеся в результате ангиогенеза, являются структурно и функционально неполноценными, что приводит к нарушению перфузии (Martin J.D. et al., 2019) и может снизить доставку цитотоксических препаратов. Во-вторых, HIF-1a активирует экспрессию АТФ-зависимых кассетных ABC-транспортеров, таких как ABCB1 и ABCG2

(Samanta D. et al., 2014). Сверхэкспрессия этих мембранных переносчиков является основной причиной усиленного оттока цитотоксических препаратов и неэффективности лечения при различных типах рака (Mohammad I.S. et al., 2018). В-третьих, за счет активации таких транскрипционных факторов как oct 4, sox, nanog, клетки РМЖ в условиях гипоксии могут приобретать фенотип стволовых клеток, отличительной чертой которых является низкая чувствительность к лучевой и лекарственной терапии (Brooks D.L. et al., 2016; Zhang C. et al., 2016).

В тоже время, следует отметить, что в ряде исследований высокий уровень HIF-1a был обнаружен в биопсиях первичных G2-G3 опухолей молочной железы, а также при инвазивном HER2-позитивном РМЖ, характеризующихся высокой степенью агрессивности и худшим прогнозом (Badowska-Kozakiewicz A. et al., 2016). Получается, что с одной стороны низкодифференцированные и HER2-позитивные опухоли более чувствительны к химиотерапии (Павликова О.А. и соавт., 2017; Yoshioka T. et al., 2015; Kurozumi S. et al., 2015; Dave R.V. et al., 2017), а с другой, согласно данным Badowska-Kozakiewicz A. и соавт. (Badowska-Kozakiewicz A. et al., 2016), в этих опухолях чаще наблюдается высокий уровень экспрессии HIF-1a, то есть маркера, связанного с химио- и радиорезистентностью (Tiezzi D.G. et al., 2013; Rundqvist H. et al., 2013; Milani M. et al., 2017; Nie C. et al., 2018). Полагаем, что данное противоречие может быть связано с тем, что резистентность опухолевых клеток обусловлено множеством различных факторов. Таким образом, роль гипоксии в развитии резистентности опухоли к лекарственной и лучевой терапии требует комплексного исследования.

1.4.2 Роль эпителиально-мезенхимального перехода в развитии химиорезистености рака молочной железы

Эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП) представляет собой физиологический процесс, во время которого эпителиальные клетки приобретают морфологические (изменение формы) и физиологические (способность к

подвижности, инвазии, изменение метаболизма) свойства мезенхимальных клеток (Гапонова А.В. и соавт., 2020). Впервые этот процесс был описан Элизабет Хэй в 1980 году в контексте эмбриогенеза (Kothari A.N. et al., 2016). Выделяют три типа ЭМП: тип 1, возникающий в ходе эмбрионального развития, тип 2, ассоциированный с регенерацией повреждений и развитием патологических склеротических процессов, тип 3, связанный с прогрессированием ЗНО (Kalluri R. 2009; Dongre A. et al., 2019; Гапонова А.В. и соавт., 2020). Примечательно, что ЭМП - это обратимый процесс и выделяют мезенхимально-эпителиальный переход (МЭП), который характеризуется потерей клетками мезенхимальных характеристик и приобретением эпителиальных. Данный процесс необходим для формирования новых тканей и органов в процессе эмбриогенеза и образования метастатических очагов, когда мигрирующие клетки колонизируют новую нишу (Sinha D. et al., 2020). Эта динамическая обратимость получила название эпителиально-мезенхимальной пластичности (Varga J., Greten F.R. 2017; Gupta P.B. et al., 2019; Sinha D. et al., 2020). Также следует отметить, что в современной литературе выделяют такое понятие как промежуточный ЭМП (или гибридный, частичный ЭМП). Это понятие отражает постепенную трансформацию эпителиальных клеток через ряд промежуточных стадий в мезенхимальные (Lu W. et al., 2019; Liao T.T. et al., 2020). Гибридные фенотипы ЭМП характеризуются потерей апикально-базальной полярности, лучшей подвижностью, но в тоже время сохраняют адгезивные свойства с соседними клетками, что позволяет им более успешно мигрировать в виде кластеров (Pastushenko I. et al., 2019).

В регуляции ЭМП принимают участие различные внутриклеточные сигнальные пути, которые активируются внеклеточными сигнальными молекулами (Гапонова А.В. и соавт., 2020; Seo J. et al., 2021). Каждая внеклеточная сигнальная молекула связывается со своим конкретным мембранным рецептором и запускает передачу определенного внутриклеточного сигнала. Так, факторы роста (EGF, FGF, IGF, PDGF) связываются с рецепторной тирозинкиназой; трансформирующий фактор роста бета (TGF-в) - с рецептором TGF-в; Wnt - с Frizzled и семейство

Jagged с Notch, соответственно (Lu W. et al., 2019; Seo J. et al., 2021). Далее происходит активация таких путей как митоген-активируемая протеинкиназа, фосфатидилинозитол-3-киназа (Р13К)/протеинкиназа B (Akt), ядерный фактор-кВ, в-катенин или сигнальный путь Smad, которые регулируют экспрессию и стабильность основных факторов транскрипции ЭМП. Другими факторами, участвующими в индукции ЭМП, являются воспалительные цитокины, гипоксия и жесткость внеклеточного матрикса (Wei S.C. et al., 2015; Yeung K.T., Yang J. 2017).

В ответ на плейотропные сигналы, индуцирующие ЭМП, активируется основные факторы транскрипции, которые включают Snail1, Snail2, Twist1, Twist2, ZEB1, ZEB2. (Stemmler M.P. et al., 2019; González-Martínez S. et al., 2021). Данные факторы транскрипции подавляют Е-кадгерин и другие компоненты плотных и адгезионных контактов в эпителиальных клетках, что приводит к потере межклеточной адгезии и апикально-базальной полярности, реорганизации цитоскелета и увеличению подвижности. Кроме того, подавление экспрессии эпителиальных генов сочетается с повышенной экспрессией факторов транскрипции и мезенхимальных генов, таких, как N-кадгерин, виментин, фибронектин (Stemmler M.P. et al., 2019; Гапонова А.В. и соавт, 2020; González-Martínez S. et al., 2021). Важно отметить, что межклеточные соединения не только обеспечивают поддержку эпителиальной структуры, но также регулируют ряд сигнальных путей через связанные с ними белки, которые могут в дальнейшем способствовать ЭМП и инвазии. Так, высвобожденный из соединений адгезии в-катенин потенциально может проникать в ядро и управлять экспрессией гена-мишени WNT, способствуя развитию ЭМП (Yeung K.T., Yang J. 2017). Разрушение сети цитокератина, прикрепленного к десмосомам в эпителиальных клетках, ведет к реорганизации цитоскелета: он преобразуется в цитоплазматическую и базальную сеть промежуточных филаментов (Beaty B.T., Condeelis J. 2014; Yeung K.T., Yang J. 2017). Все это приводит к повышению сократимости клеток, образованию новых мембранных выступов (инвадоподий), повышению экспрессии матричных металлопротеиназ, что способствует деградации внеклеточного

матрикса и инвазивному поведению опухолевых клеток (Yeung K.T., Yang J. 2017).

Важно отметить, что ЭМП способствует опухолевой прогрессии также за счет приобретения опухолевыми клетками стволового фенотипа, развития иммунологической толерантности и лекарственной устойчивости (Nieto M.A. et al., 2016).

ЭМП и опухолевые стволовые клетки. Согласно данным литературы, при различных ЗНО индукция ЭМП связана с образованием популяций клеток со стволовым фенотипом (Nieto M.A. et al., 2016; Wang H. et al., 2019; Celià-Terrassa T. et al., 2020). Установлено, что эти клетки, называемые опухолевыми стволовыми клетками, не только способны in vitro к бесконечной пролиферации за счет самообновления, а in vivo - к стимулированию роста и метастазирования опухоли, но и их образование является одним из ключевых факторов развития лекарственной устойчивости (Zhang C. et al., 2016). Так, при культивировании клеток РМЖ в условиях ЭМП увеличивалась доля опухолевых стволовых клеток (Фармаковская М.Д. и соавт., 2015). Клетки, которые подверглись ЭМП, образовывали в 10 раз больше опухолевых сфер, характерных для стволовых клеток (Wang H. et al., 2019). Обработка культуры эпителиальных клеток молочной железы TGF-в приводила к формированию фенотипа CD44+/CD24-, характерного для опухолевых стволовых клеток (Фармаковская М.Д. и соавт., 2015). Аналогичные результаты, подтверждающие связь между ЭМП и приобретением стволового фенотипа, получены также для рака поджелудочной железы (Wang H. et al., 2019).

ЭМП и иммунологическая толерантность. В настоящее время установлена тесная связь между ЭМП и иммунным ответом. Так, различные иммунные клетки, такие как натуральные киллеры, регуляторные Т-клетки, макрофаги, миелоидные супрессорные клетки могут индуцировать ЭМП в опухолевых клетках, секретируя цитокины, воспалительные факторы и хемокины, (Zhan H.X. et al., 2017; Singh S. et al., 2019;). Однако сами опухолевые клетки, например, при ТНРМЖ, могут секретировать провоспалительные цитокины, способствующие превращению

моноцитов в опухоль ассоциированных макрофагов, которые, в свою очередь, стимулируют ЭМП, пролиферацию, химиорезистентность и подвижность раковых клеток (Prasmickaite L. et al., 2018). В тоже время, опухолевые клетки с мезенхимальными характеристиками могут способствовать уклонению от иммунитета или вызывать иммуносупрессию (Romeo E. et al., 2019; Jiang Y. et al., 2020) за счет секреции CD73, CSF1 и OPN, снижающих количество и функциональную активность CD8 + Т-лимфоцитов (Dongre A. et al., 2020).

На клеточных линиях РМЖ было продемонстрировано, что опухоли, полученные из линий клеток с эпителиальным фенотипом экспрессируют высокие уровни MHC-I и низкие уровни лиганда-1 запрограммированной клеточной гибели (PD-L1), а в их строме отмечено высокое содержание CD8 + Т-клеток и макрофагов M1 (противоопухолевые). Напротив, в опухолях, которые возникли из линий клеток с мезенхимальным фенотипом, отмечены низкие уровни MHC-I, высокие уровни PD-L1. В строме данных опухолей содержались макрофаги M2, регуляторные T-клетки, и истощенные CD8+ Т-лимфоциты (Dongre A. et al., 2020).

ЭМП может способствовать иммуносупрессии также за счет увеличения экспрессии иммунных контрольных точек (Noman M.Z. et al., 2018; Messeha S.S. et al., 2021). Noman et al. на клеточных линиях РМЖ показали, что сверхэкспрессия ZEB1 индуцирует экспрессию PD-L1 в опухолевых клетках за счет модуляции miR-200, а сверхэкспрессия Snail или ZEB1 увеличивала экспрессию маркера клеточной адгезии CD47, что препятствовало фагоцитозу опухолевых клеток макрофагами (Noman M.Z. et al., 2018).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Зубарева Евгения Юрьевна, 2024 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Башлык В.О. Оценка изменения морфологических и иммуногистохимических характеристик карцином молочной железы при проведении неоадъювантной системной терапии. / Башлык В.О., Семиглазов В.Ф., Кудайбергенова А.Г. и др. // Опухоли женской репродуктивной системы. - 2018. -№14(1). - с.12-9.

2. Ганусевич О.Н. Оценка патоморфоза после неоадъювантной терапии рака молочной железы. / Ганусевич О.Н., Нестерович Т.Н., Ачинович С.Л., Федоркевич И.В. // Вестник Витебского государственного медицинского университета. - 2019. -т. 18. - №3. - с. 61-67. URL: ht1ps://cyberlenmka.m/artide/n/otsenka-patomorfoza-posle-neoadyuvantnoy-terapii-raka-molochnoy-zhelezy (дата обращения: 14.05.2022).

3. Гапонова А.В. Эпителиально-мезенхимальный переход: злокачественная прогрессия и перспективы противоопухолевой терапии. / Гапонова А.В., Родин С., Мазина А.А., Волчков П.В. // Acta Naturae (русскоязычная версия). - 2020. - Т. 12. -№3 (46). - с. 4-23. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/epitelialno-mezenhimalnyy-perehod-zlokachestvennaya-progressiya-i-perspektivy-protivoopuholevoy-terapii (дата обращения: 06.12.2021).

4. Колядина И.В. Эволюция неоадъювантного подхода при первично-операбельном раке молочной железы в последнюю декаду: модный тренд или реальная клиническая практика?. / Колядина И.В., Поддубная И.В., Павликова О.А. и др // Современная онкология. - 2017. - № 01. - с. 24-29. eLIBRARY ID: 29767591

5. Москвина Л. В. Современный подход к диагностике и оценке лечебного эффекта неоадъювантной терапии при раке молочной железы / Л. В. Москвина и соавт. // Злокачественые опухоли. - 2017. - № 1. - с. 38-41.

6. Новиков В.Е. Новые направления поиска лекарственных средств с антигипоксической активностью и мишени для их действия. / Новиков В.Е., Левченкова О.С. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2013. - Т.76. - №5. - С.37-47.

7. Павликова О.А. Клинико-рентгенологическая оценка эффективности предоперационной лекарственной терапии при различных биологических подтипах рака молочной железы стадий T1-3N0-1M0. / Павликова О.А., Поддубная И.В., Колядина И.В. и др. // Современная Онкология. - 2017. - №19 (4). - с. 16-21. eLIBRARY ID: 32210884.

8. Павликова О.А. Факторы-предикторы достижения полного лекарственного патоморфоза при неоадъювантной химиотерапии первично-операбельного рака молочной железы /О.А. Павликова, И.В. Колядина, Д.В. Комов, Я.В. Вишневская, И.В. Поддубная// Современная онкология, 2017, Т.19. - №1. С.24-29.

9. Под ред. А.Д. Каприна, В.В. Старинского, А.О. Шахзадовой Злокачественные новообразования в России в 2020 году (заболеваемость и смертность) - М.: МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, - 2021. - илл. - 252 с. ISBN 978-5-85502-268-1.

10. Под ред. А.Д. Каприна, В.В. Старинского, А.О. Шахзадовой Состояние онкологической помощи населению России в 2020 году. - М.: МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, 2021. - илл. -239 с. ISBN 978-5-85502-262-9.

11. Пожилова Е.В. Роль фактора адаптации к гипоксии в развитии опухолей. / Пожилова Е.В., Новиков В.Е. // Вестник Смоленской государственной медицинской академии. - 2015. - №14 (3). - с. 16-20. УДК 615.015:616-001.8

12. Сазонов С. В. Рак молочной железы. Современное содержание понятий: лечебный патоморфоз, ответ опухоли на химиотерапию, морфологический регресс опухоли, прогноз заболевания / С. В. Сазонов Н. В. Казанцева // Вестн. Урал. мед. акад. науки. - 2016. - № 3. - с. 85-96.

13. Семиглазов В.Ф. Неоадъювантное лечение рака молочной железы. / Семиглазов В.Ф., Семиглазов В.В., Палтуев Р.М. и др. // Опухоли женской репродуктивной системы. - 2014. - №2. - с. 30-36. https://doi.org/10.17650/1994-4098-2014-0-2-30-36

14. Тюляндин С.А. Практические рекомендации по лекарственному лечению рака молочной железы. / Тюляндин С.А., Жукова Л.Г., Королева И.А. и соавт. // Злокачественные опухоли. - 2021. - т. 11. - № 3s2-1. - с. 119-157. DOI: 10.18027/2224-5057-2021-11-3s2-09

15. Фармаковская М.Д. Роль эпителиально-мезенхимального перехода в регуляции свойств раковых стволовых клеток солидных опухолей. / Фармаковская М.Д., Хромова Н.В., Рыбко В.А., Копнин П.Б. // Российский биотерапевтический журнал. - 2015. - Т. 14. - №4. С. 3-8. URL: https://cyberleninka.ru/article/n7rol-epitelialno-mezenhimalnogo-perehoda-v-regulyatsii-svoystv-rakovyh-stvolovyh-kletok-solidnyh-opuholey (дата обращения: 14.05.2022).

16. Франк Г.А. PD-L1-статус рака молочной железы. / Франк Г.А., Кузнецова О.А., Завалишина Л.Э. и соавт. // Архив патологии. - 2019. - №81(2). -с.3 9.

17. Ahmadiankia N. Nutrient Deprivation Modulates the Metastatic Potential of Breast Cancer Cells. / Ahmadiankia N., Bagheri M., Fazli M.// Rep Biochem Mol Biol. -2019. - №8(2). - с. 139-146. PMID: 31832437; PMCID: PMC6844606.

18. Alhesa A. PD-L1 expression in breast invasive ductal carcinoma with incomplete pathological response to neoadjuvant chemotherapy. / Alhesa A., Awad H., Bloukh S. // Int J Immunopathol Pharmacol. - 2022. - №36. - с. 3946320221078433. doi: 10.1177/03946320221078433.

19. Ali Alqahtani. PIK3CA Gene Mutations in Solid Malignancies: Association with Clinicopathological Parameters and Prognosis. / Ali Alqahtani, Hazem S., Ayesh K., Halawani H. // Cancers - 2020. - №12. - с.93. doi:10.3390/cancers12010093.

20. Almozyan S. PD-L1 promotes OCT4 and Nanog expression in breast cancer stem cells by sustaining PI3K/AKT pathway activation. / Almozyan S., Colak D., Mansour F. et al. // Int J Cancer. - 2017. - №141(7). - с.1402-1412. doi:10.1002/ijc.30834

21. Alsuliman A. Bidirectional crosstalk between PD-L1 expression and epithelial to mesenchymal transition: significance in claudin-low breast cancer cells. / Alsuliman

A., Colak D., Al-Harazi O., et al // Mol Cancer. - 2015. - №14. - c.149. doi:10.1186/s 12943-015-0421 -2

22. Arwert E.N. A Unidirectional Transition from Migratory to Perivascular Macrophage Is Required for Tumor Cell Intravasation. / Arwert E.N., Harney A.S., Entenberg D. et al. // Cell Rep. - 2018. - №23(5). - c. 1239-1248. doi: 10.1016/j.celrep.2018.04.007.

23. Asano Y. Prediction of treatment responses to neoadjuvant chemotherapy in triple-negative breast cancer by analysis of immune checkpoint protein expression. / Asano Y., Kashiwagi S., Goto W., et al. // J Transl Med. - 2018. - №16(1). - c.87. doi: 10.1186/s12967-018-1458-y.

24. Badowska-Kozakiewicz A. Expression of Hypoxia-Inducible Factor 1a in Invasive Breast Cancer with Metastasis to Lymph Nodes: Correlation with Steroid Receptors, HER2 and EPO-R. / Badowska-Kozakiewicz A., Sobol M., Patera J. // Adv Clin Exp Med. - 2016. - №25(4). - c. 741-50. DOI: 10.17219/acem/63143.

25. Bahhnassy A. Transforming growth factor-^, insulin-like growth factor I/insulin-like growth factor I receptor and vascular endothelial growth factor-A: prognostic and predictive markers in triple-negative and non-triple-negative breast cancer. / Bahhnassy A., Mohanad M., Shaarawy S., et al. // Mol Med Rep. - 2015. -№12(1). - c. 851-864. doi:10.3892/mmr.2015.3560

26. Balar A.V. Atezolizumab as first-line treatment in cisplatin-ineligible patients with locally advanced and metastatic urothelial carcinoma: a single-arm, multicentre, phase 2 trial. / Balar A.V., Galsky M.D., Rosenberg J.E., et al. // Lancet. - 2017. - №389 (10 064). - c.: 67-76. doi: 10.1016/S0140-6736(16)32455-2

27. Bao B. The biological kinship of hypoxia with CSC and EMT and their relationship with deregulated expression of miRNAs and tumor aggressiveness. / Bao B., Azmi A.S., Ali S., et al. // Biochim Biophys Acta. - 2012. №1826(2). - c.272-296. doi: 10.1016/j.bbcan.2012.04.008.

28. Barrett M.T. The association of genomic lesions and PD-1/PD-L1 expression in resected triple-negative breast cancers. / Barrett M.T., Lenkiewicz E.,

Malasi S. et al. // Breast Cancer Res. - 2018. - №20(1). - p.71. doi:10.1186/s13058-018-1004-0 176.

29. Beaty B.T. Digging a little deeper: the stages of invadopodium formation and maturation. / Beaty B.T., Condeelis J. // Eur J Cell Biol. - 2014. - №93(10-12). - c. 438444. doi:10.1016/j.ejcb.2014.07.003

30. Bharti R. Differential expression of IL-6/IL-6R and MAO-A regulates invasion/angiogenesis in breast cancer. / Bharti R., Dey G., Das A.K., Mandal M. // Br J Cancer. - 2018. - №118(11). - c. 1442-1452. doi: 10.1038/s41416-018-0078-x.

31. Breunig C. TGFß1 regulates HGF-induced cell migration and hepatocyte growth factor receptor MET expression via C-ets-1 and miR-128-3p in basal-like breast cancer. / Breunig C., Erdem N., Bott A. et al. // Mol Oncol. - 2018. - №12(9). - c. 14471463. DOI: 10.1002/1878-0261.12355.

32. Brooks D.L. ITGA6 is directly regulated by hypoxia-inducible factors and enriches for cancer stem cell activity and invasion in metastatic breast cancer models. / Brooks D.L., Schwab L.P., Krutilina R. et al. // Mol Cancer. - 2016. - №15. - c.26. doi:10.1186/s12943-016-0510-x

33. Burstein M.D. Comprehensive genomic analysis identifies novel subtypes and targets of triple-negative breast cancer. / Burstein M.D., Tsimelzon A., Poage G.M. et al. // Clin Cancer Res. - 2015. - №21(7). - c. 1688-1698. doi:10.1158/1078-0432.CCR-14-0432

34. Cai F. Expression of Snail and E-cadherin in Drug-resistant MCF-7/ADM Breast Cancer Cell Strains. / Cai F., Xiao H., Sun Y. et al. // J Coll Physicians Surg Pak. -2019. - №29(3). - c. 240-244. doi: 10.29271/jcpsp.2019.03.240. PMID: 30823950.

35. Catacchio I. Intratumoral, rather than stromal, CD8+ T cells could be a potential negative prognostic marker in invasive breast cancer patients. / Catacchio I., Silvestris N., Scarpi E. et al. // Transl Oncol. - 2019. - №12(3). - c.585-595. doi:10.1016/j.tranon.2018.12.005

36. Celia-Terrassa T. Cancer Stem Cells and Epithelial-to-Mesenchymal Transition in Cancer Metastasis. / Celia-Terrassa T., Jolly M.K. // Cold Spring Harb Perspect Med. -2020. - №10(7). - c. a036905. doi:10.1101/cshperspect.a036905

37. Chang H.Y. High snail expression predicts a poor prognosis in breast invasive ductal carcinoma patients with HER2/EGFR-positive subtypes. / Chang H.Y., Tseng Y.K., Chen Y.C. et al. // Surg Oncol. - 2018. - №27(2). - c. 314-320. doi: 10.1016/j.suronc.2018.05.002.

38. Chen J. ALDH1+ stem cells demonstrate more stem cell-like characteristics than CD44+/CD24-/low stem cells in different molecular subtypes of breast cancer. / Chen J., Liu S., Su Y., Zhang X. // Transl Cancer Res. - 2020. - №9(3). - c. 1652-1659. doi:10.21037/tcr.2020.01.53

39. Cho E.S. Therapeutic implications of cancer epithelial-mesenchymal transition (EMT). / Cho E.S., Kang H.E., Kim N.H., Yook J.I. // Arch Pharm Res. - 2019. -№42(1). - c. 14-24. doi:10.1007/s12272-018-01108-7

40. Chod J. Preoperative transforming growth factor-beta 1 (TGF-beta 1) plasma levels in operable breast cancer patients. / Chod J., Zavadova E., Halaska M.J. et al. // Eur J Gynaecol Oncol. - 2008. - №29(6). - c. 613-6.

41. Choi H. Comparison of Programmed Cell Death Ligand 1 Status between Core Needle Biopsy and Surgical Specimens of Triple-Negative Breast Cancer. / Choi H., Ahn S.G., Bae S.J. et al. // Yonsei Med J. - 2023. - №64(8). - p.518-525. doi:10.3349/ymj.2023.0090

42. Chowdhury S. Programmed death-ligand 1 overexpression is a prognostic marker for aggressive papillary thyroid cancer and its variants. / Chowdhury S., Veyhl J., Jessa F. et al. // Oncotarget. - 2016. - №7. - p.32318-28. 10.18632/oncotarget.8698

43. Ciftci R. High serum transforming growth factor beta 1 (TGFB1) level predicts better survival in breast cancer. / Ciftci R., Tas F., Yasasever C.T. et al. // Tumour Biol. -2014. - №35(7). - c. 6941-6948. doi: 10.1007/s13277-014-1932-y.

44. Cirqueira M.B. Prognostic Role of PD-L1 Expression in Invasive Breast Cancer: A Systematic Review and Meta-Analysis. / Cirqueira M.B., Mendon5a C.R.,

Noll M. h gp. // Cancers (Basel). - 2021. - №13(23). - c. 6090. doi: 10.3390/cancers13236090.

45. Cullinane C, Brien AO, Shrestha A, Hanlon EO, Walshe J, Geraghty J, Evoy D, McCartan D, McDermott E, Prichard R. The association between breast density and breast cancer pathological response to neoadjuvant chemotherapy. Breast Cancer Res Treat. 2022 Jul;194(2):385-392. doi: 10.1007/s10549-022-06616-1. Epub 2022 May 23. PMID: 35606616; PMCID: PMC9239960.

46. Dastmalchi N. Molecular mechanisms of breast cancer chemoresistance by immune checkpoints. / Dastmalchi N., Safaralizadeh R., Baghbanzadeh A., et al. // Life Sci. - 2020. - №263. - c.118604. doi: 10.1016/j.lfs.2020.118604.

47. Dave H. Prognostic utility of circulating transforming growth factor beta 1 in breast cancer patients. / Dave H., Shah M., Trivedi S., Shukla S. // Int J Biol Markers. -2012. - №27(1). - c. 53-59. doi: 10.5301/JBM.2011.8736.

48. Dave R.V. Neoadjuvant chemotherapy with MRI monitoring for breast cancer. / Dave R.V., Millican-Slater R., Dodwell D. et al. // Br J Surg. - 2017. - №104(9). - c. 1177-1187. doi:10.1002/bjs.10544

49. de Heer E.C. HIFs, angiogenesis, and metabolism: elusive enemies in breast cancer. / de Heer E.C., Jalving M., Harris A.L. // J Clin Invest. - 2020. - №130(10). - c. 5074-5087. doi: 10.1172/JCI137552.

50. Derouane F. Predictive Biomarkers of Response to Neoadjuvant Chemotherapy in Breast Cancer: Current and Future Perspectives for Precision Medicine. / Derouane F., van Marcke C., Berlière M., et al. // Cancers (Basel). - 2022. - №14(16). - c.3876. doi:10.3390/cancers14163876

51. Desruisseau S. Determination of TGFbeta1 protein level in human primary breast cancers and its relationship with survival. / Desruisseau S., Palmari J., Giusti C. et al. // Br J Cancer. - 2006. - №94(2). - c.239-246. doi:10.1038/sj.bjc.6602920

52. Ding M.J. Association between transforming growth factor-ß1 expression and the clinical features of triple negative breast cancer. / Ding M.J., Su K.E., Cui G.Z., et al // Oncol Lett. - 2016. - №11(6). - c.4040-4044. doi: 10.3892/ol.2016.4497.

53. Dirkse A. Stem cell-associated heterogeneity in Glioblastoma results from intrinsic tumor plasticity shaped by the microenvironment. / Dirkse A., Golebiewska A., Buder T. et al. // Nat Commun. - 2019. - №10. - c. 1787. 10.1038/s41467-019-09853-z

54. Dong H.M. Expressions of MACC1, Snail, and KISS-1 Proteins in Infiltrating Breast Carcinoma and Its Clinicopathological Features. / Dong H.M., Huang J.K., Gong X.M., Tao Y.S. // Sichuan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. - 2016. - №47(5). - c.732-737.

55. Dongre A. Direct and Indirect Regulators of Epithelial-Mesenchymal Transition-Mediated Immunosuppression in Breast Carcinomas. / Dongre A., Rashidian M., Eaton E.N. et al. // Cancer Discov. - 2020. - №11. - c. 1286-1305. doi: 10.1158/2159-8290.CD-20-0603.

56. Dongre A., Weinberg R.A. New insights into the mechanisms of epithelial-mesenchymal transition and implications for cancer. / Dongre A., Weinberg R.A. // Nat Rev Mol Cell Biol. - 2019. - №20(2). - c. 69-84. doi:10.1038/s41580-018-0080-4

57. Doroshow D.B. Immunotherapy in non-small cell lung cancer: Facts and hopes. / Doroshow D.B., Sanmamed M.F., Hastings K. et al. // Clin. Cancer Res. - 2019. - №25. - p.4592-4602. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-18-1538.

58. Du Q. PD-L1 Acts as a Promising Immune Marker to Predict the Response to Neoadjuvant Chemotherapy in Breast Cancer Patients. / Du Q., Che J., Jiang X. et al. // Clin Breast Cancer. - 2020. - №20(1). - c.e99-e111. doi: 10.1016/j.clbc.2019.06.014.

59. Engblom C. The role of myeloid cells in cancer therapies. / Engblom C., Pfirschke C., Pittet M.J. // Nat Rev Cancer. - 2016. - №16(7). - c. 447-462. doi:10.1038/nrc.2016.54.

60. Evangelou Z. PD-L1 Expression and Tumor-infiltrating Lymphocytes in Breast Cancer: Clinicopathological Analysis in Women Younger than 40 Years Old. / Evangelou Z., Papoudou-Bai A., Karpathiou G. et al. // In Vivo. - 2020. - №34(2). -c.639-647. doi:10.21873/invivo. 11818

61. Exman P. PD-L1 Testing in Patients with Breast Cancer: Controversies and Current Practice. / Exman P., Garrido-Castro AQ.C., Tolaney S.M. // Current Breast Cancer Reports. - 2019. - №11. - p.353-357

62. Fabisiewicz A. Circulating Tumor Cells in Early and Advanced Breast Cancer; Biology and Prognostic Value. / Fabisiewicz A., Szostakowska-Rodzos M., Zaczek A.J., Grzybowska E.A. // Int J Mol Sci. - 2020. - №21(5). - c.1671. doi:10.3390/ijms21051671

63. Fan H. PIK3CA mutations and their response to neoadjuvant treatment in early breast cancer: A systematic review and meta-analysis. / Fan H., Li C., Xiang Q. et al. // Thorac Cancer. - 2018. - №9(5). - c. 571-579. doi: 10.1111/1759-7714.12618.

64. Figueroa J.D. Expression of TGF-beta signaling factors in invasive breast cancers: relationships with age at diagnosis and tumor characteristics. / Figueroa J.D., Flanders K.C., Garcia-Closas M., et al. // Breast Cancer Res Treat. - 2010. - №121(3). -c.727-735. doi:10.1007/s10549-009-0590-z

65. Foedermayr M. BRCA-1 methylation and TP53 mutation in triple-negative breast cancer patients without pathological complete response to taxane-based neoadjuvant chemotherapy. / Foedermayr M., Sebesta M., Rudas M. et al. // Cancer Chemother Pharmacol. - 2014. - №73(4). - C. 771-778. doi: 10.1007/s00280-014-2404-1.

66. Francia G. Mouse models of advanced spontaneous metastasis for experimental therapeutics. / Francia G., Cruz-Munoz W., Man S. et al. // Nat Rev Cancer. - 2011. -№11(2). - c. 135-141. doi:10.1038/nrc3001

67. Frank G.A. PD-L1-status raka molochnoi zhelezy [PD-L1 status in breast cancer]. / Frank G.A., Kuznetsova O.A., Zavalishina L.E. h gp. // Arkh Patol. - 2019. -№81(2). - c. 3-9. Russian. doi: 10.17116/patol2019810213.

68. Gao L. MiR-873/PD-L1 axis regulates the stemness of breast cancer cells. / Gao L., Guo Q., Li X., et al. // EBioMedicine. - 2019. - №41. - c.395-407. doi: 10.1016/j.ebiom.2019.02.034.

69. Gao Y. Acetylation-dependent regulation of PD-L1 nuclear translocation dictates the efficacy of anti-PD-1 immunotherapy. / Gao Y., Nihira N.T., Bu X. h gp. // Nat Cell Biol. - 2020. - №22(9). - c. 1064-1075. doi: 10.1038/s41556-020-0562-4.

70. Ghebeh H., Lehe C., Barhoush E. et al. Doxorubicin downregulates cell surface B7-H1 expression and upregulates its nuclear expression in breast cancer cells:

role of B7-H1 as an anti-apoptotic molecule. / Ghebeh H., Lehe C., Barhoush E. et al. // Breast Cancer Res. - 2010. - №12. - p.R48. 10.1186/bcr2605

71. González-Martínez S. Epithelial Mesenchymal Transition and Immune Response in Metaplastic Breast Carcinoma. / González-Martínez S., Pérez-Mies B., Pizarro D. et al. // Int J Mol Sci. - 2021. - №22(14). - c. 7398. doi:10.3390/ijms22147398

72. Gooding A.J. Epithelial-Mesenchymal Transition Programs and Cancer Stem Cell Phenotypes: Mediators of Breast Cancer Therapy Resistance. / Gooding A.J., Schiemann W.P. // Mol Cancer Res. - 2020. - №18(9). - c. 1257-1270. doi:10.1158/1541-7786.MCR-20-0067

73. Goulet C.R. TGFß Signaling in the Tumor Microenvironment. / Goulet C.R., Pouliot F. // Adv Exp Med Biol. - 2021. - №1270. - c. 89-105. doi:10.1007/978-3-030-47189-7_6

74. Guarneri V. Double-blind, placebo-controlled, multicenter, randomized, phase IIb neoadjuvant study of letrozole-lapatinib in postmenopausal hormone receptor-positive, human epidermal growth factor receptor 2-negative, operable breast cancer. / Guarneri V., Generali D.G., Frassoldati A. et al. // J Clin Oncol. - 2014. - №32(10). -c.1050-7. doi: 10.1200/JC0.2013.51.4737.

75. Guo H. Comparison of three scoring methods using the FDA-approved 22C3 immunohistochemistry assay to evaluate PD-L1 expression in breast cancer and their association with clinicopathologic factors. / Guo H., Ding Q., Gong Y., et al. // Breast Cancer Res. - 2020. - №22(1). - c. 69. doi:10.1186/s13058-020-01303-9

76. Gupta P.B. Phenotypic plasticity: driver of cancer initiation, progression, and therapy resistance. / Gupta P.B., Pastushenko I., Skibinski A. et al. // Cell Stem Cell. -2019. - №24. - c. 65-78.doi:10.1016/j.stem.2018.11.011

77. Hachim M.Y. Differential expression of TGFß isoforms in breast cancer highlights different roles during breast cancer progression. / Hachim M.Y., Hachim I.Y., Dai M., et al. // Tumour Biol. -2018. - №40(1). - c. 1010428317748254. doi:10.1177/1010428317748254

78. Hashimoto M. CD8 T Cell Exhaustion in Chronic Infection and Cancer: Opportunities for Interventions. / Hashimoto M., Kamphorst A.O., Im S.J., et al. // Annu Rev Med. - 2018. - №69. - c.301-318. doi: 10.1146/annurev-med-012017-043208.

79. Hirsch F.R. PD-L1 Immunohistochemistry Assays for Lung Cancer: Results from Phase 1 of the Blueprint PD-L1 IHC Assay Comparison Project. / Hirsch F.R., McElhinny A., Stanforth D., et al. // J Thorac Oncol. - 2017. - №12(2). - p.208-222. doi: 10.1016/jjtho.2016.11.2228.

80. Hoffmann L.G. Evaluation of PD-L1 and tumor infiltrating lymphocytes in paired pretreatment biopsies and post neoadjuvant chemotherapy surgical specimens of breast carcinoma. / Hoffmann L.G., Sarian L.O., Vassallo J. h gp. // Sci Rep. - 2021. -№11(1). - c. 22478. doi: 10.1038/s41598-021-00944-w

81. Hong M. Programmed cell death-ligand 1 expression in stromal immune cells is a marker of breast cancer outcome. / Hong M., Kim J.W., Kim M.K. et al. // J Cancer. - 2020. - №11(24). - c.7246-7252. doi:10.7150/jca.50441

82. https://www.uniprot.org/uniprotkb/Q9NZQ7/entry#subcellular location

83. Hua D. B7-H1 expression is associated with expansion of regulatory T cells in colorectal carcinoma. / Hua D., Sun J., Mao Y., Chen L.J. // World J Gastroenterol. -2012. - №18. - p.971-8. 10.3748/wjg.v18.i9.971

84. Huang W. Prognostic and clinicopathological value of PD-L1 expression in primary breast cancer: a meta-analysis. / Huang W., Ran R., Shao B., Li H. // Breast Cancer Res Treat. - 2019. - №178(1). - c. 17-33. doi:10.1007/s10549-019-05371-0

85. Jiang Y. Communication between EMT and PD-L1 Signaling: New Insights into Tumor Immune Evasion. / Jiang Y., Zhan H. // Cancer Lett. - 2020. - №468. - c. 7281. doi: 10.1016/j.canlet.2019.10.013.

86. Jiang Z.S. Epithelial-mesenchymal transition: potential regulator of ABC transporters in tumor progression. / Jiang Z.S., Sun Y.Z., Wang S.M., Ruan J.S. // J Cancer. - 2017. - №8(12). - c. 2319-2327. doi:10.7150/jca.19079

87. Jing X. Role of hypoxia in cancer therapy by regulating the tumor microenvironment. / Jing X., Yang F., Shao C., et al. // Mol Cancer. - 2019. - №18(1). -C.157. doi: 10.1186/s12943-019-1089-9.

88. Kalluri R. EMT: when epithelial cells decide to become mesenchymal-like cells. / Kalluri R. // J Clin Invest. - 2009.- №119(6). - p.1417-9. doi: 10.1172/JCI39675.

89. Karnik T. PD-L1 in breast cancer: comparative analysis of 3 different antibodies. / Karnik T., Kimler B.F., Fan F., Tawfik O. // Hum Pathol. - 2018. - №72. -c. 28-34. doi: 10.1016/j.humpath.2017.08.010.

90. Kelly A. Human monocytes and macrophages regulate immune tolerance via integrin avß8-mediated TGFß activation. / Kelly A., Gunaltay S., McEntee C.P. et al. // J Exp Med. - 2018. - №215(11). - c. 2725-2736. doi: 10.1084/jem.20171491.

91. Khadri F.Z. Impact of Epithelial-Mesenchymal Transition on the Immune Landscape in Breast Cancer. / Khadri F.Z., Issac M.S.M., Gaboury L.A. // Cancers (Basel). - 2021. - №13(20). - c. 5099. doi:10.3390/cancers13205099

92. Khairil Anwar N.A. Prognostic prospect of soluble programmed cell death ligand-1 in cancer management. / Khairil Anwar N.A., Mohd Nazri M.N., Murtadha A.H. et al. // Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). - 2021. - №53(8). - p. 961-978. doi: 10.1093/abbs/gmab077.

93. Kim B.G. Novel therapies emerging in oncology to target the TGF-ß pathway. / Kim B.G., Malek E., Choi S.H. et al. // J Hematol Oncol. - 2021. - №14(1). - c. 55. doi: 10.1186/s13045-021-01053-x.

94. Kothari A.N. Osteopontin-A Master Regulator of Epithelial-Mesenchymal Transition. / Kothari A.N., Arffa M.L., Chang V. et al. // J Clin Med. - 2016. - №5(4). -c. 39. doi:10.3390/jcm5040039

95. Kurozumi S. ER, PgR, Ki67, p27(Kip1), and histological grade as predictors of pathological complete response in patients with HER2-positive breast cancer receiving neoadjuvant chemotherapy using taxanes followed by fluorouracil, epirubicin, and cyclophosphamide concomitant with trastuzumab. / Kurozumi S., Inoue K., Takei H. et

al. // BMC Cancer. - 2015. - №15. - c. 622. Published 2015 Sep 7. doi:10.1186/s12885-015-1641-y

96. Kurozumi S., Inoue K., Matsumoto H. Clinicopathological values of PD-L1 expression in HER2-positive breast cancer. / Kurozumi S., Inoue K., Matsumoto H. h gp. // Sci Rep. - 2019. - №9(1). - c. 16662. doi: 10.1038/s41598-019-52944-6.

97. Lakhani S.R., Ellis I.O., Schnitt S. J., Tan P.H., van de Vijver M. J. (Ed.): WHO Classification of Tumours of the Breast. IARC: Lyon 2012.

98. Lebrecht A. Transforming growth factor beta 1 serum levels in patients with preinvasive and invasive lesions of the breast. / Lebrecht A., Grimm C., Euller G., et al. // Int J Biol Markers. - 2004. - №19(3). - c.236-239. doi:10.1177/172460080401900309

99. Li C. A Potential Predictive Biomarker for Miller/Payne Grading: PD-L1 Expression before Neoadjuvant Chemotherapy in Breast Cancer. / Li C., Ma R.Z., Han G.Y. // Oncol Res Treat. - 2020. - №43(11). - c. 573-583. doi: 10.1159/000508139.

100. Li C. Plasma levels of soluble CD105 correlate with metastasis in patients with breast cancer. / Li C., Guo B., Wilson P.B., et al. // Int J Cancer. -2000. - №89(2). -c.122-126. doi:10.1002/(sici)1097-0215(20000320)89:2<122::aid-ijc4>3.0.co;2-m

101. Li D. Prognostic values of SNAI family members in breast cancer patients. / Li D., Li L., Yang W. et al. // Ann Transl Med. - 2020. - №8(15). - c. 922. doi:10.21037/atm-20-681

102. Li S. Inhibitory effects of compound DMBT on hypoxia-induced vasculogenic mimicry in human breast cancer. / Li S., Zhang Q., Zhou L. et al. // Biomed Pharmacother. - 2017. - №96. - c.982-992. doi: 10.1016/j.biopha.2017.11.137.

103. Li Y. Prevalence Study of PD-L1 SP142 Assay in Metastatic Triple-negative Breast Cancer. / Li Y., Vennapusa B., Chang C.W. et al. // Appl Immunohistochem Mol Morphol. - 2021. - №29(4). - p.258-264. doi:10.1097/PAI.0000000000000857

104. Liao T.T. Hybrid Epithelial/Mesenchymal State in Cancer Metastasis: Clinical Significance and Regulatory Mechanisms. / Liao T.T., Yang M.H. // Cells. -2020. - №9. - c. 623. doi: 10.3390/cells9030623.

105. Liu Z-j Semenza G.L. Hypoxia-inducible factor 1 and breast cancer metastasis. / Liu Z-j Semenza G.L., Zhang H-f. // J Zhejiang Univ Sci B. - 2015. -№16(1). - c. 32-43. DOI: 10.1631/jzus.B1400221.

106. Lu W. Epithelial-Mesenchymal Plasticity in Cancer Progression and Metastasis. / Lu W., Kang Y. // Dev. Cell. - 2019. - №49. - c. 361-374. doi: 10.1016/j.devcel.2019.04.010.

107. Luo M. Breast cancer stem cells: current advances and clinical implications. / Luo M., Clouthier S.G., Deol Y. et al. // Methods Mol Biol. - 2015. - №1293. - c. 1-49. doi:10.1007/978-1-4939-2519-3_1

108. Mansour F.A. PD-L1 is overexpressed on breast cancer stem cells through notch3/mTOR axis. / Mansour F.A., Al-Mazrou A., Al-Mohanna F. et al. // Oncoimmunology. - 2020. - №9(1). - c.1729299. doi:10.1080/2162402X.2020.1729299

109. Mariathasan S. TGFß attenuates tumour response to PD-L1 blockade by contributing to exclusion of T cells. / Mariathasan S., Turley S.J., Nickles D. et al. // Nature. - 2018. - №554(7693). - c. 544-548. doi:10.1038/nature25501

110. Marinelli D. Neoadjuvant Immune-Checkpoint Blockade in Triple-Negative Breast Cancer: Current Evidence and Literature-Based Meta-Analysis of Randomized Trials. / Marinelli D., Mazzotta M., Pizzuti L., et al. // Cancers (Basel). - 2020. - №12(9). - c.2497. doi:10.3390/cancers12092497

111. Martin J.D. Normalizing Function of Tumor Vessels: Progress, Opportunities, and Challenges. / Martin J.D., Seano G., Jain R.K. // Annu Rev Physiol. - 2019. - №81. -c505-534. doi:10.1146/annurev-physiol-020518-114700

112. Messeha S.S. Polyphenols Modulating Effects of PD-L1/PD-1 Checkpoint and EMT-Mediated PD-L1 Overexpression in Breast Cancer. / Messeha S.S., Zarmouh N.O., Soliman K.F.A. // Nutrients. - 2021. - №13(5). - c. 1718. doi:10.3390/nu13051718

113. Milani M. Hypoxia-related biological markers as predictors of epirubicin-based treatment responsiveness and resistance in locally advanced breast cancer. / Milani M., Venturini S., Bonardi S. et al. // Oncotarget. - 2017. - №8(45). - c. 78870-78881. DOI: 10.18632/oncotarget.20239.

114. Mimeault M. Hypoxia-inducing factors as master regulators of stemness properties and altered metabolism of cancer- and metastasis-initiating cells. / Mimeault M, Batra SK. // J Cell Mol Med. - 2013. - №17(1). - c. 30-54. doi: 10.1111/jcmm.12004.

115. Mohammad I.S. Understanding of human ATP binding cassette superfamily and novel multidrug resistance modulators to overcome MDR. / Mohammad I.S., He W., Yin L. // Biomed Pharmacother. - 2018. - №100. - c. 335-348. doi: 10.1016/j.biopha.2018.02.038.

116. Muenst S. Nuclear expression of snail is an independent negative prognostic factor in human breast cancer. / Muenst S., Däster S., Obermann E.C. h gp. // Dis Markers. - 2013. - №35(5). - c. 337-44. doi: 10.1155/2013/902042.

117. Nanda R. et al. Effect of Pembrolizumab Plus Neoadjuvant Chemotherapy on Pathologic Complete Response in Women With Early-Stage Breast Cancer: An Analysis of the Ongoing Phase 2 Adaptively Randomized I-SPY2 Trial. / Nanda R., Liu M.C., Yau C., et al. // JAMA Oncol. - 2020. - №6(5). - c.676-684. doi: 10.1001/jamaoncol.2019.6650

118. Nedeljkovic M. Mechanisms of Chemotherapy Resistance in Triple-Negative Breast Cancer-How We Can Rise to the Challenge. / Nedeljkovic M., Damjanovic A. // Cells. - 2019. - №8(9). - c. 957. doi: 10.3390/cells8090957.

119. Nie C. Hypoxia-inducible factor 1-alpha expression correlates with response to neoadjuvant chemotherapy in women with breast cancer. / Nie C., Lv H., Bie L. et al. // Medicine (Baltimore). - 2018. №.97(51). - c. e13551. doi:10.1097/MD.0000000000013551

120. Nieto M.A. EMT: 2016. / Nieto M.A., Huang R.Y., Jackson R.A., Thiery J.P. // Cell. - 2016. - №.166(1). - c. 21-45. doi:10.1016/j.cell.2016.06.028

121. Noman M.Z. CD47 Is a Direct Target of SNAI1 and ZEB1 and Its Blockade Activates the Phagocytosis of Breast Cancer Cells Undergoing EMT. / Noman M.Z., Van Moer K., Marani V. et al. // OncoImmunology. - 2018. - №7. - c. e1345415. doi: 10.1080/2162402X.2017.1345415.

122. Ogston K.N. A new histological grading system to assess response of breast cancers to primary chemotherapy: prognostic significance and survival. / Ogston K.N., Miller I.D., Payne S., Hutcheon A.W. et al. // Breast. - 2003. - №12(5). - p.320-7. doi: 10.1016/s0960-9776(03)00106-1.

123. Oshimori N. TGF-ß promotes heterogeneity and drug resistance in squamous cell carcinoma. / Oshimori N., Oristian D., Fuchs E. // Cell. - 2015. - №160(5). - c. 963976. doi: 10.1016/j.cell.2015.01.043.

124. Padro M. Genome-independent hypoxic repression of estrogen receptor alpha in breast cancer cells. / Padro M., Louie R.J., Lananna B.V. et al. // BMC Cancer. - 2017.

- №17(1). - c. 203. doi:10.1186/s12885-017-3140-9

125. Palazon A. An HIF-1a/VEGF-A Axis in Cytotoxic T Cells Regulates Tumor Progression. / Palazon A., Tyrakis P.A., Macias D. et al. // Cancer Cell. - 2017. - №32(5).

- c. 669-683.e5. doi:10.1016/j.ccell.2017.10.003

126. Pang J.B. SP142 PD-L1 Scoring Shows High Interobserver and Intraobserver Agreement in Triple-negative Breast Carcinoma But Overall Low Percentage Agreement With Other PD-L1 Clones SP263 and 22C3. / Pang J.B., Castles B., Byrne D.J. et al. // Am J Surg Pathol. - 2021. - №45(8). - p.1108-1117. doi: 10.1097/PAS.0000000000001701.

127. Panis C. Screening of circulating TGF-ß levels and its clinicopathological significance in human breast cancer. / Panis C., Herrera A.C., Victorino V.J. et al. // Anticancer Res. - 2013. - №33(2). - c. 737-42

128. Papadopoulou E. Evaluation of predictive and prognostic significance of serum TGF-beta1 levels in breast cancer according to HER-2 codon 655 polymorphism. / Papadopoulou E., Anagnostopoulos K., Tripsianis G. et al. // Neoplasma. - 2008. -№55(3). - c. 229-38.

129. Papageorgis P. Role of TGFß in regulation of the tumor microenvironment and drug delivery (review). / Papageorgis P., Stylianopoulos T. // Int J Oncol. - 2015. -№46(3). - c. 933-943. doi:10.3892/ijo.2015.2816

130. Pastushenko I. EMT Transition States during Tumor Progression and Metastasis. / Pastushenko I., Blanpain C. // Trends Cell Biol. - 2019. - №29(3). - c. 212226. doi:10.1016/j.tcb.2018.12.001

131. Polioudaki H. Nuclear localization of PD-L1: artifact or reality? / Polioudaki H., Chantziou A., Kalyvianaki K.h gp. // Cell Oncol (Dordr). - 2019. - №42(2). - c. 237242. doi: 10.1007/s13402-018-00419-7.

132. Powles T. Atezolizumab versus chemotherapy in patients with platinum-treated locally advanced or metastatic urothelial carcinoma (IMvigor211): a multicentre, open-label, phase 3 randomised controlled trial. / Powles T., Duran I., van der Heijden M.S., et al. // Lancet. - 2018. -№391(10122). - c.748-757. doi: 10.1016/S0140-6736(17)33297-X.

133. Prasmickaite L. Basal-like Breast Cancer Engages Tumor-supportive Macrophages via Secreted Factors Induced by Extracellular S100A4. / Prasmickaite L., Tenstad E.M., Pettersen S. et al. // Mol. Oncol. - 2018. - №12. - c. 1540-1558. doi: 10.1002/1878-0261.12319

134. Pu S. Nomogram-derived prediction of pathologic complete response (pCR) in breast cancer patients treated with neoadjuvant chemotherapy (NCT). / Pu S., Wang K., Liu Y. et al. // BMC Cancer. - 2020. - №20(1). - c. 1120. doi:10.1186/s12885-020-07621-7

135. Qu L., Jin J., Lou J. The nuclear transportation of PD-L1 and the function in tumor immunity and progression. / Qu L., Jin J., Lou J. h gp. // Cancer Immunol Immunother. - 2022. doi: 10.1007/s00262-022-03176-7.

136. Romeo E. The Vicious Cross-Talk between Tumor Cells with an EMT Phenotype and Cells of the Immune System. / Romeo E., Caserta C.A., Rumio C., Marcucci F.// Cells. - 2019. - №8. - c. 460. doi: 10.3390/cells8050460.

137. Rom-Jurek E.M. Regulation of Programmed Death Ligand 1 (PD-L1) Expression in Breast Cancer Cell Lines In Vitro and in Immunodeficient and Humanized Tumor Mice. / Rom-Jurek E.M., Kirchhammer N., Ugocsai P. h gp. // Int J Mol Sci. -2018. - №19(2). - c. 563. doi: 10.3390/ijms19020563.

138. Rundqvist H. Tumour oxygenation: implications for breast cancer prognosis. / Rundqvist H., Johnson R.S. // J Intern Med. - 2013. - №274(2). - c. 105-112. doi:10.1111/joim.12091

139. Sahoo S. Immunosuppressive Traits of the Hybrid Epithelial/Mesenchymal Phenotype. / Sahoo S, Nayak SP, Hari K, et al. // Front Immunol. - 2021. - №12. - c. 797261. doi: 10.3389/fimmu.2021.797261.

140. Saitoh M. Involvement of partial EMT in cancer progression. / Saitoh M. // J Biochem. - 2018. - №164(4). - c.257-264. doi:10.1093/jb/mvy047

141. Samanta D., Gilkes D.M., Chaturvedi P., Xiang L., Semenza G.L. Hypoxia-inducible factors are required for chemotherapy resistance of breast cancer stem cells. / Samanta D., Gilkes D.M., Chaturvedi P. et al. // Proc Natl Acad Sci U S A. - 2014. -№111(50). - c. E5429-E5438. doi:10.1073/pnas.1421438111

142. Santarpia M. Non-Small-Cell Lung Cancer Signaling Pathways, Metabolism, and PD-1/PD-L1 Antibodies. / Santarpia M., Aguilar A., Chaib I. et al. // Cancers (Basel). - 2020. - №12(6). - p.1475. doi:10.3390/cancers12061475

143. Satelli A. Potential role of nuclear PD-L1 expression in cell-surface vimentin positive circulating tumor cells as a prognostic marker in cancer patients. / Satelli A., Batth I.S., Brownlee Z. et al. // Sci Rep. - 2016. -№6. - p.28910. 10.1038/srep28910

144. Saxena M. Transcription factors that mediate epithelial-mesenchymal transition lead to multidrug resistance by upregulating ABC transporters. / Saxena M., Stephens M.A., Pathak H., Rangarajan A. // Cell Death Dis. - 2011. - №2. - c. e179. 10.1038/cddis.2011.61

145. Seo J. The role of epithelial-mesenchymal transition-regulating transcription factors in anti-cancer drug resistance. / Seo J., Ha J., Kang E., Cho S. // Arch Pharm Res. - 2021. - №44(3). - c. 281-292. doi:10.1007/s12272-021-01321-x

146. SeoY. PIK3CA Mutations and Neoadjuvant Therapy Outcome in Patients with Human Epidermal Growth Factor Receptor 2-Positive Breast Cancer: A Sequential Analysis. / SeoY., Park Y.H., Ahn J.S. et al. // J Breast Cancer. - 2018. - №21(4). - c. 382-390. doi: 10.4048/jbc.2018.21.e48.

147. Shibel P.E.E. Investigation of Immunohistochemical Expression of Programmed Death-Ligand 1 (PD-L1) in Female Mammary Carcinoma and its Correlation with the Extent of Stromal Tumour Infiltrating Lymphocytes. / Shibel P.E.E., Abdelhamid H.S., Soliman S.A.M., et al. // J. Clin. Diagn. Res. - 2019.- №13. - c. EC11-EC17. doi: 10.7860/JCDR/2019/42239.13150.

148. Singh S. Consequences of EMT-Driven Changes in the Immune Microenvironment of Breast Cancer and Therapeutic Response of Cancer Cells. / Singh S., Chakrabarti R. // J. Clin. Med. - 2019. - №8. - c. 642. doi: 10.3390/jcm8050642.

149. Sinha D. Emerging Concepts of Hybrid Epithelial-to-Mesenchymal Transition in Cancer Progression. / Sinha D., Saha P., Samanta A., Bishayee A. // Biomolecules. -2020. - №10(11). - c. 1561. doi:10.3390/biom10111561

150. Song M. PTEN loss increases PD-L1 protein expression and affects the correlation between PD-L1 expression and clinical parameters in colorectal cancer. / Song M., Chen D., Lu B. et al. // PLoS One. - 2013. - №8(6). - p.e65821. doi: 10.1371/journal.pone.0065821.

151. Stemmler M.P. Non-redundant functions of EMT transcription factors. / Stemmler M.P., Eccles R.L., Brabletz S., Brabletz T. // Nat Cell Biol. - 2019. - №21(1). -c. 102-112. doi:10.1038/s41556-018-0196-y

152. Stovgaard E.S. PD-L1 expression in breast cancer: expression in subtypes and prognostic significance: a systematic review. / Stovgaard E.S., Dyhl-Polk A., Roslind A. et al. // Breast Cancer Res Treat. - 2019. - №174(3). - c.571-584. doi: 10.1007/s10549-019-05130-1.

153. Sun C. Regulation and Function of the PD-L1 Checkpoint. Immunity. / Sun C., Mezzadra R., Schumacher T.N // 2018. - №48(3). - c.434-452. doi: 10.1016/j.immuni.2018.03.014.

154. Symmans W.F. Measurement of residual breast cancer burden to predict survival after neoadjuvant chemotherapy. / Symmans W.F., Peintinger F., Hatzis C. et al. // J Clin Oncol. - 2007. - №25(28). - p.4414-22. doi: 10.1200/JTO.2007.10.6823

155. Tan W. Predicting the response to neoadjuvant therapy for early-stage breast cancer: tumor-, blood-, and imaging-related biomarkers. / Tan W., Yang M., Yang H. et al. // Cancer Manag Res. - 2018. - №10. - c. 4333-4347. DOI: 10.2147/CMAR.S174435.

156. Tarighati E. A review of prognostic and predictive biomarkers in breast cancer. / Tarighati E., Keivan H., Mahani H. // Clin Exp Med. - 2022. -№10.1007/s10238-021-00781-1. doi:10.1007/s10238-021-00781-1

157. Tauriello D.V.F. Overcoming TGF^-mediated immune evasion in cancer. / Tauriello D.V.F., Sancho E., Batlle E. // Nat Rev Cancer. - 2022. - №22(1). - c. 25-44. doi: 10.1038/s41568-021-00413-6.

158. Tauriello D.V.F. TGF0 drives immune evasion in genetically reconstituted colon cancer metastasis. / Tauriello D.V.F., Palomo-Ponce S., Stork D. et al. // Nature. -2018. - №554(7693). - c. 538-543. doi:10.1038/nature25492

159. Tiezzi D.G. Expression of aldehyde dehydrogenase after neoadjuvant chemotherapy is associated with expression of hypoxia-inducible factors 1 and 2 alpha and predicts prognosis in locally advanced breast cancer. / Tiezzi D.G., Clagnan W.S., Mandarano L.R. et al. // Clinics. - 2013. - №68(5). - c. 592-598. doi: 10.1371/journal.pone.0146823.

160. Tsou S.H. A critical dose of doxorubicin is required to alter the gene expression profiles in MCF-7 cells acquiring multidrug resistance. / Tsou S.H., Chen T.M., Hsiao H.T., Chen Y.H. // PLoS One. - 2015. - №10(1). - c. e0116747. Published 2015 Jan 30. doi:10.1371/journal.pone.0116747

161. Varga J. Cell plasticity in epithelial homeostasis and tumorigenesis. / Varga J., Greten F.R. // Nat Cell Biol. - 2017. - №19(10). - c. 1133-1141. doi:10.1038/ncb3611

162. Vinay D.S. Immune evasion in cancer: Mechanistic basis and therapeutic strategies. / Vinay D.S., Ryan E.P., Pawelec G., et al. // Semin Cancer Biol. - 2015. -№35. - S185-S198. doi:10.1016/j.semcancer.2015.03.004

163. Vitiello G.A. Transforming growth factor beta 1 (TGF01) plasmatic levels in breast cancer and neoplasia-free women: Association with patients' characteristics and

TGFB1 haplotypes. / Vitiello G.A., Amarante M.K., Oda J.M., Hirata B.K. et al. // Cytokine. - 2020. - №130. - c. 155079. doi: 10.1016/j.cyto.2020.155079.

164. von Minckwitz G. Responsiveness of adjacent ductal carcinoma in situ and changes in HER2 status after neoadjuvant chemotherapy/trastuzumab treatment in early breast cancer--results from the GeparQuattro study (GBG 40). / von Minckwitz G., Darb-Esfahani S., Loibl S. et al. // Breast Cancer Res Treat. - 2012. - №132(3). - c. 863-870. doi:10.1007/s10549-011-1621-0

165. Von Waldenfels G. Outcome after neoadjuvant chemotherapy in elderly breast cancer patients - a pooled analysis of individual patient data from eight prospectively randomized controlled trials. / Von Waldenfels G., Loibl S., Furlanetto J. h gp. // Oncotarget. - 2018. - №9(20). - c. 15168-15179. DOI: 10.18632/oncotarget.24586.

166. Vranic S. PD-L1 testing by immunohistochemistry in immuno-oncology. / Vranic S., Gatalica Z. // Biomol Biomed. - 2023. - №23(1). - p.15-25. doi: 10.17305/bjbms.2022.7953

167. Wang C. Prognostic Value of PD-L1 in Breast Cancer: A Meta-Analysis. / Wang C., Zhu H., Zhou Y. h gp. // Breast J. - 2017. - №23. - c. 436-443. doi: 10.1111/tbj.12753.

168. Wang H. Epithelial-mesenchymal Transition and Cancer Stem Cells: At the Crossroads of Differentiation and Dedifferentiation. / Wang H., Unternaehrer J.J. // Dev Dyn. - 2019. - №248(1). - c. 10-20. doi:10.1002/dvdy.24678

169. Wang J. Role and clinical significance of TGF ß1 and TGF ßR1 in malignant tumors (Review). / Wang J., Xiang H., Lu Y., Wu T. // Int J Mol Med. - 2021. - №47(4). - c.55. doi:10.3892/ijmm.2021.4888

170. Wei S.C. Matrix stiffness drives epithelial-mesenchymal transition and tumour metastasis through a TWIST1-G3BP2 mechanotransduction pathway. / Wei S.C., Fattet L., Tsai J.H. et al. // Nat Cell Biol. - 2015. - №17(5). - c. 678-688. doi:10.1038/ncb3157

171. Wu Y. PD-L1 Distribution and Perspective for Cancer Immunotherapy-Blockade, Knockdown, or Inhibition. / Wu Y., Chen W., Xu Z.P., Gu W. // Front Immunol. - 2019. - №10. - p.2022. doi: 10.3389/fimmu.2019.02022.

172. Xiong W. Extracellular and nuclear PD-L1 in modulating cancer immunotherapy. / Xiong W., Gao Y., Wei W., Zhang J. // Trends Cancer. - 2021. -№7(9). - c. 837-846. doi: 10.1016/j.trecan.2021.03.003.

173. Xu W. Predictors of Neoadjuvant Chemotherapy Response in Breast Cancer: A Review. / Xu W., Chen X., Deng F. et al. // Onco Targets Ther. - 2020. - №13. - c. 5887-5899. doi: 10.2147/OTT.S253056.

174. Xu X. TGF-ß plays a vital role in triple-negative breast cancer (TNBC) drug-resistance through regulating stemness, EMT and apoptosis. / Xu X., Zhang L., He X. et al. // Biochem Biophys Res Commun. - 2018. - №502(1). - c. 160-165. doi: 10.1016/j.bbrc.2018.05.139.

175. Yang L. Somatic alterations of TP53, ERBB2, PIK3CA and CCND1 are associated with chemosensitivity for breast cancers. / Yang L., Ye F., Bao L. et al. // Cancer Sci. - 2019. - №110(4). - c. 1389-1400. doi: 10.1111/cas.13976.

176. Yeung K.T. Epithelial-mesenchymal transition in tumor metastasis. / Yeung K.T., Yang J. // Mol Oncol. - 2017. - №11(1). - c. 28-39. doi:10.1002/1878-0261.12017

177. Yoshioka T. Prognostic significance of pathologic complete response and Ki67 expression after neoadjuvant chemotherapy in breast cancer. / Yoshioka T., Hosoda M.., Yamamoto M. et al. // Breast Cancer. - 2015. - №22(2). - c. 185-191. doi:10.1007/s12282-013-0474-2

178. Yu J. Regulation of sister chromatid cohesion by nuclear PD-L1. / Yu J., Qin B., Moyer A.M. h gp. // Cell Res. - 2020. - №30(7). - c. 590-601. doi: 10.1038/s41422-020-0315-8.

179. Zarzynska J.M. Two faces of TGF-beta1 in breast cancer. // Mediators Inflamm. - 2014. - №2014. - c.141747. doi: 10.1155/2014/141747.

180. Zhan H.X. Crosstalk between Stromal Cells and Cancer Cells in Pancreatic Cancer: New Insights into Stromal Biology. / Zhan H.X., Zhou B., Cheng Y.G. et al. // Cancer Lett. - 2017. - №392. - c. 83-93. doi: 10.1016/j.canlet.2017.01.041.

181. Zhang C. Hypoxia induces the breast cancer stem cell phenotype by HIF-dependent and ALKBH5-mediated m6A-demethylation of NANOG mRNA / Zhang C., Samanta D., Lu H., et. al // Proc Natl Acad Sci U S A. - 2016 - №113(14). - c. 20472056. PMID: 27001847.

182. Zhang C. TGF01 Promotes Breast Cancer Local Invasion and Liver Metastasis by Increasing the CD44high/CD24- Subpopulation. / Zhang C., Gao H., Li C. et al. // Technol Cancer Res Treat. - 2018. - №17. doi:10.1177/1533033818764497

183. Zhang H. Cancer stem cells, epithelial-mesenchymal transition, ATP and their roles in drug resistance in cancer. / Zhang H., Steed A., Co M., Chen X. // Cancer Drug Resist. - 2021. - №4. - c. 684-709. doi:10.20517/cdr.2021.32

184. Zhang J. Can We Reliably Identify the Pathological Outcomes of Neoadjuvant Chemotherapy in Patients with Breast Cancer? Development and Validation of a Logistic Regression Nomogram Based on Preoperative Factors. / Zhang J., Xiao L., Pu S. et al. // Ann Surg Oncol. - 2021. - №28(5). - c. 2632-2645. doi:10.1245/s10434-020-09214-x

185. Zhang J. HIF-1a, TWIST-1 and ITGB-1, associated with Tumor Stiffness, as Novel Predictive Markers for the Pathological Response to Neoadjuvant Chemotherapy in Breast Cancer. / Zhang J., Zhang S., Gao S., et al. // Cancer Manag Res. - 2020. -№12. - c.2209-2222. doi: 10.2147/CMAR.S246349

186. Zhang J. Hypoxia-Induced TPM2 Methylation is Associated with Chemoresistance and Poor Prognosis in Breast Cancer. / Zhang J., Zhang J., Xu S. et al. // Cell Physiol Biochem. - 2018. - №45(2). - c.692-705. doi: 10.1159/000487162.

187. Zhang M. Role of transforming growth factor-01 in triple negative breast cancer patients. / Zhang M., Wu J., Mao K., et al. // Int J Surg. - 2017. - №45. - c. 72-76. doi:10.1016/j.ijsu.2017.07.080

188. Zhang M.K. TGF-01 and its signal molecules: are they correlated with the elasticity characteristics of breast lesions?. / Zhang M.K., Wang B., Li S.Y., et al. // BMC Cancer. - 2021. - №21(1). - c.1336. doi:10.1186/s12885-021-09036-4

189. Zhang X. The diagnostic accuracy of magnetic resonance imaging in predicting pathologic complete response after neoadjuvant chemotherapy in patients with different molecular subtypes of breast cancer. / Zhang X., Wang D., Liu Z. et al. // Quant Imaging Med Surg. - 2020. - №10(1). - c.197-210. doi:10.21037/qims.2019.11.16

190. Zhao Q. Prognostic value of PD-L1 for invasive breast cancer and its miR-34a-related mechanism of regulation. / Zhao Q., Guo Y., Liu C., Huang T. // Int. J. Clin. Exp. Med. - 2019. - №12. - c.9984-9997.

191. Zhou T. Expression of programmed death ligand-1 and programmed death-1 in samples of invasive ductal carcinoma of the breast and its correlation with prognosis. / Zhou T., Xu D., Tang B. et al. // Anticancer Drugs. - 2018. - №29(9). - c.904-910. doi:10.1097/CAD.0000000000000683

192. Zonneville J. TGF-0 signaling promotes tumor vasculature by enhancing the pericyte-endothelium association. / Zonneville J., Safina A., Truskinovsky A.M. et al. // BMC Cancer. - 2018. - №18(1). - c. 670. doi: 10.1186/s12885-018-4587-z.