Клеточные и гуморальные механизмы действия опухолеспецифической иммунотерапии и их модуляция под влиянием гипертермии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Кащенко, Эрика Александровна

• Кащенко, Эрика Александровна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кащенко, Эрика Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Противоопухолевый иммунитет.

1.2.Причины иммунологической толерантности опухолей.

1.3.Специфическая иммунотерапия злокачественных новообразований.

1.3.1 .Опухолевые антигены.

1.4. Виды противоопухолевых вакцин.

1.5. Влияние гипертермического воздействия на клетки млекопитающих.

1.6. Гипертермия в комбинированном лечении опухолей.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Влияние опухолеспецифической иммунотерапии на среднюю продолжительность жизни мышей с меланомой.

3.2. Изучение реактивности спленоцитов на антигены меланомы В16.

3.3. Определение уровня цитокинов в сыворотке крови мышей с меланомой.

3.4. Определение IgG антител в сыворотке крови мышей с меланомой.

3.5. Гистологическое исследование образцов опухоли.

3.6. Влияние гипертермического воздействия на опухолевые и лимфоидные клетки в условиях in vitro.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клеточные и гуморальные механизмы действия опухолеспецифической иммунотерапии и их модуляция под влиянием гипертермии»

За последние годы отмечено увеличение числа онкологических заболеваний во всех странах мира. В России на учете в медицинских онкологических учреждениях состоит 2,5 миллионов человек. При этом каждый год раком заболевает 1,5 миллиона россиян, средний ежегодный показатель смертности от рака составляет около 300 тысяч человек. Традиционные методы лечения злокачественных заболеваний включают оперативное вмешательство, лучевую и химиотерапию. В настоящее время считается, что общепринятые методы достигли предела своего технического совершенства, и их дальнейшая разработка не приведет к кардинальному изменению ситуации. В связи с этим все больше внимания приобретают альтернативные методы лечения онкологических больных, одним из которых является активно развивающаяся в последнее время иммунотерапия [Моисеенко В.М., 2001; Молчанов O.E., 2001; Демидов Л.В., 2003; Балдуева И.А., 2003; Коростелев С.А., 2003; Северин Е.С., 2006; Телетаева Г.М., 2007]. Опухолеспецифическая иммунотерапия привлекает особое внимание иммунологов и онкологов. Это связано с многочисленными доказательствами наличия на клетках опухолей опухолеассоциированных антигенов (ОАА) различного происхождения, способных индуцировать развития эффективного специфического противоопухолевого иммунного ответа [Naftzger С., 1996; Колесник Е.А., 1999; Коростелев С.А., 2003; Тащиев Р.К., 2006]. Посредством разных механизмов опухолевые клетки способны избегать или подавлять иммунный ответ. Поэтому основная задача опухолеспецифичесчкой иммунотерапии - индукция/усиление иммунного ответа, направленного на распознавание и элиминацию злокачественных клеток. Это достигается при помощи вакцинации организма иммуногенными ОАА [Greten Т.F., 1999; Моисеенко В.М., 2001; Yu Z., 2002; Dois А., 2003; Sosman J.A., 2003; Berzofsky J.A., 2004; Селедцов В.И., 2006].

Известно, что ОАА в своем большинстве являются дифференцировочными или онкофетальными. Они являются "общими", поскольку могут экспрессироваться на разных опухолях. Сам по себе этот факт подразумевает возможность создания универсальных противоопухолевых вакцин.

Хорошо известно, что развитие иммунного ответа на одну или несколько опухольассоциированных детерминант зачастую не приводит к замедлению развития опухолевого процесса, а лишь дает селективные преимущества для роста тем опухолевым клеткам, которые не экспрессируют эти детерминанты [Srinivasan R., 2004]. В связи с этим, иммунизация организма полиантигенными опухолевыми клетками выглядит более предпочтительной, поскольку позволяет индуцировать иммунные, поликлональные реакции на широкий спектр ОАА [Foon К.А., 1999; Ward S., 2002].

Эффективность клеточного и гуморального ответа в значительной степени зависит от генетической чужеродности иммунизирующего субстрата. В частности показано, что иммунизация организма ксеногенными опухолевыми клетками способна прервать исходно существующую, иммунологическую толерантность к аутологичным ОАА. При этом противоопухолевая протекция достигается за счет индукции как CD8+ Т- клеточного, так и гуморального ответа [Naftzger С., 1996; Strehl J., 1999; Wei Y.Q., 2000; Luo F., 2001; Graf N., 2003]. Такая перекрестная реакция объясняется высокой степенью гомологии между ОАА человека и животных [Johnston D., 1994; Bloom M.B., 1997; Steitz J., 2000].

Упомянутые выше данные создали теоретическую основу для создания противоопухолевых, ксеногенных, полиантигенных вакцин. Одна из таких вакцин разработана в нашем институте. Это вакцина состоит из мышиных меланомных и карциномных ОАА. В клинических исследованиях показана ее эффективность в лечении продвинутых форм меланомы и колоректального рака [Селедцов В.И., 2006; Фельде М.А., 2006; Seledtsov V.l., 2006; Seledtsov V.l., 2007].

Злокачественная опухоль обладает значительным иммунодерессивным потенциалом, преодолеть который посредством только антигенных воздействий во многих случаях не представляется возможным. Наше внимание привлекла возможность усилить противоопухолевый эффект вакцинотерапии с помощью гипертермии (ГТ). В действительности, использование ГТ в лечении опухолевых заболеваний вызывает особый интерес в силу своей высокой эффективности и общедоступности [Осинский С.П., 2002; Akria L, 2003; Potapnev М.Р., 2004; Потапнев М.П., 2004; Исмаил-заде P.C., 2006]. Показано, что гипертермия способна индуцировать апоптоз в опухолевых клетках, а также значительно усиливать противоопухолевое действие химиотерапевтических средств [Falk М.Н., 2001; Luchetti F, 2003]. Имеются данные об иммуномодулирующих свойствах ГТ [Downing J.F., 1988; Kappel М., 1991 ;Fuggetta М.Р., 2000; Осинский С.П., 2002].

Цель работы - исследовать механизмы терапевтического противоопухолевого действия вакцин, полученных на основе ксеногенных или сингенных опухолевых антигенов в монотерапии и в сочетании с гипертермией у мышей с меланомой. Задачи исследования:

1. Определить влияние вакцинации ксено- и сингенными опухолевыми антигенами и гипертермического воздействия на продолжительность жизни мышей с перевиваемой меланомой.

2. Охарактеризовать выраженность и направленность иммунных реакций при использовании вакцинотерапии и гипертермического воздействия по уровню IFN-y и IL-4, и антиген-индуцированной пролиферации спленоцитов.

3. Оценить влияние вакцинотерапии и гипертермического воздействия на выраженность инфильтрации опухоли иммунокомпетентными клетками, и степень некроза/апоптоза опухолевых клеток.

4. Оценить формирование специфических антител класса IgG к белкам меланомы В16 у вакцинированных животных.

5. В модели in vitro сравнить влияние гипертермического воздействия 39°-43,5 С на жизнеспособность и пролиферативную активность спленоцитов и клеток меланомы.

Научная новизна. В работе впервые показана значимость иммунных реакций, опосредуемых Th 2 типа в развитии противоопухолевого ответа у ксеновакцинированных опухоленосителей. Показана связь между продолжительностью жизни мышей с меланомой, уровнем инфильтрации опухоли нейтрофилами и увеличением некроза/апоптоза опухолевых клеток. Достигнута индукция IgG антител, специфичных к меланомному антигену, имеющему молекулярную массу 70kD. В работе также впервые показано отрицательное влияние ГТ на развитие индуцированных ксеновакцинацией иммунных реакций, объяснены механизмы подобного воздействия.

Теоретическая и практическая значимость.

Полученные /данные подтверждают эффективность и возможность использования ксеновакцинотерапии в лечении онкологических заболеваний. Развитие иммунного ответа, преимущественно Th2 типа, наличие специфических IgG антител к меланомному белку и их связь с эффективностью вакцинотерапии указывают на перспективность дальнейшего исследования гуморального звена иммунитета в противоопухолевом ответе. Связь инфильтрации опухоли нейтрофильными лейкоцитами со степенью некроза/апоптоза опухолевых клеток и выживаемостью мышей с меланомой свидетельствует о возможности использования данных критериев в качестве прогностического фактора, а также подчеркивает значимость неспецифического звена иммунитета в механизмах противоопухолевой защиты. Отсутствие эффекта ГТ как в виде моновоздействия, так и в сочетании с вакцинотерапией, а также обнаруженные отрицательные эффекты ГТ на пролиферацию клеток иммунной системы, показывают нецелесообразность использования ГТ в комплексном противоопухолевом лечении.

В целом, полученные экспериментальные данные призваны способствовать осознанному внедрению методов опухолеспецифической иммунотерапии в лечении злокачественных заболеваний, особенно тех (например, диссеминированная меланома), которые не поддаются стандартному лечению.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Полиантигенная ксеновакцинация более эффективна в сравнении с полиантигенной сингенной вакцинацией в индукции противоопухолевых, циторедуктивных иммунных реакций.

2. Опосредуемые Th 2 типа, антительные реакции играют основную роль в сдерживании опухолевого роста у экспериментальных мышей с меланомой на поздних стадиях заболевания.

3. Гипертермия оказывает отрицательное воздействие на развитие вакцинальных, противоопухолевых реакций.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на: Всероссийской научно-практической конференции «Дни иммунологии в Сибири» (Красноярск, 2005); на VII отчетной конференции ГУ НИИ КИ СО РАМН. (Новосибирск, 2006); на научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Сибири» (Томск, 2008).

10

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста, содержит 16 рисунков и 10 таблиц, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов исследования и их обсуждения, заключения и выводов. Список цитируемой литературы включает 196 источников, из них 37 отечественных, 159 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Кащенко, Эрика Александровна

ВЫВОДЫ

1) Терапевтическое применение ксеногенной полиантигенной противоопухолевой вакцины статистически значимо пролонгирует жизнь мышей с перевиваемой меланомой. В аналогичных условиях сингенная вакцинация не обладает такой способностью. Использование кратковременного гипертермического воздействия в сочетании с вакцинотерапией или в качестве моновоздействия, не оказывает значимого влияния на продолжительность жизни мышей с меланомой.

2) Ксеновакцинотерапия индуцирует увеличение уровня IL-4 в сыворотке крови животных-опухоленосителей. Сингенная вакцинация вызывает повышение уровня сывороточного IFN-y и сопровождается усилением пролиферативного ответа спленоцитов на антигены меланомы В16. Эти данные свидетельствуют, что ксеновакцинация и аутовакцинация индуцируют качественно разные типы иммунных реакций по Th 2 и Thl типу, соответственно.

3) Ксено- и сингенная вакцинотерапия способствуют усилению инфильтрации опухоли нейтрофилами, моноцитами и лимфоцитами, что коррелирует с выраженностью некроза/апоптоза опухолевых клеток, и свидетельствует об активации специфического и неспецифического звена иммунитета. Гипертермическое воздействие частично отменяет данное действие вакцин.

4) Ксеновакцинация сопровождается формированием в сыворотке крови антител класса IgG к антигену меланомы В16 с молекулярной массой 70 кДа, что подтверждает индукцию ксеновакциной иммунных реакций преимущественно опосредуемых Th2 типа. При использовании сингенной вакцины специфические антитела к антигену меланомы В16 не образуются.

5) В условиях in vitro гипертермичческое воздействие 42,5°С подавляет пролиферацию и усиливает апоптоз лимфоцитов в большей степени, чем

93 клеток опухоли В16. Это означает, что супрессорное действие гипертермии в первую очередь будет затрагивать пролиферативные лимфоидные реакции и объясняет отсутствие эффекта гипертермии как в качестве моновоздействия, так и в сочетании с вакцинотерапией в условиях in vivo.

94

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученные данные поддерживают точку зрения о том, что полиантигенная ксеновакцинация может быть эффективным, терапевтическим методом лечения опухолевых заболеваний. Наши результаты свидетельствуют, что противоопухолевый эффект ксеновакциногерапии может в значительной, если не в определяющей степени, обусловливаться развитием иммунных реакций, опосредуемых Th 2 типа. Развитие этих реакций приводит к выработке опухолеспецифических антител и инфильтрации опухоли нейтрофилами. Выраженность этих процессов прямо коррелирует со степенью гибели опухолевых клеток.

Согласно представленным в диссертации данным кратковременное гипертермическое воздействие обладает мощным иммунодепрессивным действием. Оно способно полностью отменять развитие противоопухолевых, иммунных реакций индуцированных ксеновакцинотерапией. Подобно опухолевым клеткам лимфоциты становятся высокочувствительными к ГТ в S/M фазе клеточного цикла. Развитие антиген-специфичных иммунных реакций неразрывно связано с пролиферацией лимфоидных клонов. Именно эти клоны будут в первую очередь попадать под цитоксическое действие ГТ. С другой стороны, иммуносупрессивное действие ГТ на иммунитет является обратимым. В наших экспериментах ГТ не отменяла развития вакцинальных, иммунных реакций, в случае если она предшествовала вакцинотерапии.

В целом, полученные нами данные указывают на значимость антительных, иммунных реакций в противостоянии развитию опухоли. Создание в организме благоприятных условий для развития этих реакций и реализации опосредуемого ими противоопухолевого эффекта - цель наших дальнейших исследований.

92

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кащенко, Эрика Александровна, 2009 год

1. Агеенко А.И., Гордиенко С.П., Саканделидзе О.Г. Иммунитет и терапия экспериментальных опухолей // Кишенев «Штиинца». 1982

2. Балдуева И.А. Противоопухолевые вакцины // Практическая онкология.2001 .-№ 4.-С.157-166.

3. Балдуева И. А. Противоопухолевые вакцины // Практическая онкология.2003. -№ 3. -С. 157-166.

4. Барышников А.Ю. Принципы и практика вакцинотерапии рака // Бюллетень СО РАМН. 2004.-№.2 (112).-С.-60-63.

5. Барышников А.Ю., Демидов Л.В., Михайлова И.Н., Петенко H.H. Вакцинотерапия рака: от эксперимента к клинике // Вестник Российской АМН. 2007.-№10.-С.46-48.

6. Бережная Н.М., Чехун В.Ф. Иммунология злокачественного роста // К.:Наук думка. 2005.-С.791.

7. Гафтон Г.И., Пхакадзе Н.Р., Сенчик К.Ю., Гельфольд В.М. Перспективные методы терапии больных саркомами мягких тканей конечностей (изолированная регионарная перфузия, локальная гипертермия) // Практическая онкология. 2004.-Т.5.-№4.-С.276-284.

8. Волчек И.В. Лечение интерфероном-альфа (Интроном А) злокачественной меланомы: достижения и перспективы // Терра Медика Нова.2001,- № 2. -С.31-39.

9. Вольпе П. Биохимия клеточного цикла.М. «Мир», 1979.-С. 17-22.9

10. Гадецкая H.A., Гривцова Л.Ю., Кадагидзе З.Г., Летягин В.П., Тупицын H.H. Субпопуляции B-лимфоцитов у больных раком молочной железы: LEC-специфичкские В-клетки // Маммология. 2006.-№ 2.-С.63-67.

11. Галактионов В.Г. Генетический контроль взаимодействия иммунокомпетентных клеток // Соросовский образовательный журнал. 2005.-№12.-Т.27.-С.1-6.

12. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии //Томск. 1992.-С. 191 -192.

13. Демидов Л.В., Харкевич Г.Ю., Тимофеев И.В. Успехи и неудачи применения цитокинов в лекарственной терапии некоторых солидных опухолей // Практическая онкология. 2003.-Т.4.-№ 3.-С.140-146.

14. Зеленина Н.В., Андреева Л.И., Горянчук В.В. Действие непродолжительного умеренного нагревания организма здорового человека на периферические лимфоциты // Цитология. 2000.-Т.42.-№2.-С. 166-169.

15. Игнатов П.Е. Иммунитет и инфекция // Москва «Время». 2002.

16. Инжеваткин Е.В., Савченко A.A., Альбрант А.И., Нефедов В.П. Исследование метаболических изменений печени крыс в динамике восстановительного периода после гипертермического воздействия // Вопросы медицинской химии. 2000.-№2.-С.41-46.

17. Колесник Е. А., Потребня Г. П., Кикоть В.А., Черный В.А., Лисовенко Г.С., Семерников В.А. Противоопухолевая аутовакцина в лечении больных распространенным колоректальным раком // Онкология. 1999.-№2.-С. 104-109.

18. Козлов В.А., Черных Е.Р. Современные проблемы иммунотерапии в онкологии // Бюллетень СО РАМН. -2004,- № 2. -С. 13-19.

19. Коростелев С.А. Противоопухолевые вакцины // Современная онкология.2003 .-№ 4.-С.1-19.

20. Мардынский Ю.С., Курпешев O.K.,Ткачев С.И. Гипертермия как универсальный радиосенсибилизатор //V Российская онкологическая конференция. Москва. 2001// htt: //www.rosoncoweb.ru./ library / 5th-conf /47.html. 1

21. Моисеенко В.М. Возможности вакцинотерапии меланомы кожи: поиски стандартов лечения // Практическая онкология.2001.-№ 4,-С.69-72.

22. Молчанов O.E., Попова И.А., Козлов В.К., Карелин М.И. Современные тенденции иммунотерапии злокачественных опухолей //СПб.: Изд-во С.-Петербург, 2001.-С.88.

23. Осинский С. П. Гипертермия в клинической онкологии: современное состояние проблемы // по итогам 20-й ежегодной конференции Европейского общества гипертермической онкологии (ESHO) //0нкология.2002.-т.4. № 4.С.288-292.2

24. Петров Р.В. Иммунология // М., Медицина. 1987.-С.415.

25. Потапнев М.П., Истомин Ю.П., Исмаил-заде P.C., Жаврид Э.А. Применение комбинации гипертермии и интерлейкина-2 для усиления противоопухолевой защиты крыс // Экспериментальная онкология. 2004.-Т.26.-№ 1.-Март.

26. Северин Е.С., Родина A.B. Проблемы и перспективы современной противоопухолевой терапии // Успехи биологической химии.2006.-Т.46.-С.43-64.

27. Тащиев Р.К., Абраменко И.В., Шляховенко В.А.,Ашраф Авад Эль Карим. Влияние криодеструкции с аутовакцинацией на некоторые параметры клеточного и гуморального иммунитета больны раком молочной железы // Онкология. 2006.-Т.8.-№1.-С.61-64.

28. Телетаева Г.М. Цитокины и противоопухолевый иммунитет // Практическая онкология. 2007.-Т.8.-№4.-С.211-218.

29. Фрадкин С.З. Современное состояние гипертермической онкологии и тенденции ее развития // Медицинские новости. 2004.-№ 3.-C.3-8.

30. Чиссов В.И., Старинский В.В., Ременник Л.В. Злокачественные новообразования в России в 1997 году (заболевания и смертность) //М: Медицина. 1999.-С.157.

31. Шляховенко В.А. Современные подходы к созданию противоопухолевых вакцин // Экспериментальная онкология. 2000.-Т.22.-С.99-109.

32. Ярмоненко С.П. Терморадиотерапия рака: состояние проблемы, перспективы //Медицинская радиология. 1987.- №1.-С.10-18.5

33. Agarwala S.S., Katz E.J., Loeb L.A. Effect of hyperthermia on the survival of normal human peripheral blood mononuclear cells // Cancer Res. 1983.-V.43.-№7.-P.3124-3126.

34. Anjum A., Fleischmann W.R. Effect of hyperthermia on the antitumor actions of Interferons // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. 1992.-Vol. 6.-№3.-P. 75-86.

35. Antonia S.J., Extermann M., Flavell R.A. Immunologic nonresponsiveness to tumors // Crit Rev Oncol. 1998. -Vol.-№ 9. -P.3541.

36. Berd D., Sato T., Cohn H., Maguire H.C., Mastrangelo M.J. Treatment of metastatic melanoma with autologous, hapten-modified melanoma vaccine: regression of pulmonary metastases // Int.J.Cancer. 2001. -Vol.94. -P.531-539.

37. Berzofsky J.A., Terabe M., Oh S.K., Belyakov I.M., Ahlers J.D., Janik J.E., Morris J.C. Progress on new vaccine strategies for the immunotherapy and prevention of cancer // The Journal of Clinical Investigation. 2004. -Vol.113. -P.1515-1525.

38. Bhattachary R., Bukkapatnam R., Prawoko I., Soto J., Morgan M., Salup R.R. Efficacy of vaccination with plasmid DNA encoding for

39. HER-2/neu or HER-2/neu-eGFP fusion protein against prostate cancer in rats // Int.Immunopharmacol. 2002. -Vol.2. -P.783-796.

40. Bhattacharya-Chatterjee M., Chatterjee S.K., Foon K.A. Anti- idiotype vaccine against cancer // Immunol Lett. 2000. -Vol. 1. -P.51-58.

41. Bitton R.J., Guthmann M.D., Gabri M.R., Carnero A.J., Alonso D.F., Fainboim L., Gomez D.E. Cancer vaccines: an update with special focus on ganglioside antigens //Oncology Reports. 2002. -Vol.9. -P.267-276.

42. Blazickova S., Rovensky J. Effect of hyperthermic water bath on parameters of cellular immunity // Int J Clin Phar-macol Res. 2000.-Vol.20.-№l-2.-P.41-46.

43. Bogdan C., Rollinghoff M., Diefenbach A. Reactive oxygen and reactive nitrogen, intermediates in innate and specific immunity// Curr.Opin.Immunol. 2000. -Vol.12. -P.64-76.

44. Boon T., Old L. Tumor antigens // Cur. Opin. Immunol. 1997.-Vol.9.-P.681-683.

45. Botti C., Seregni E., Ferrari L., Martinetti A., Bombardieri E. Immunosuppressive factors: role in cancer development and progression // Int J Biol Markers. 1998. -Vol.13. -P.51-69.

46. Carlo E.D., Forni G., Lollini P.L., Colombo M.P., Modesti A., Musiani P. The intriguing role of polimorphonuclear neutrophils in antitumor reactions// Blood. 2001. -Vol.97.-P.339-345.

47. Chattopadhyay U. Tumour immunotherapy: developments and strategies // Immunology Today. 1999. -Vol.20. -P.480-482.

48. Chen Q., Fisher D.T., Kucinska S.A., Wang W.C., Evans S.S. Dynamic control of lymphocyte trafficking by fever-range thermal stress // Cancer Immunol Immunother. 2005.-Vol.26.-P. 1-13.

49. Chouaib S., Asselin-Paturel C., Mami-Chouaib F., Caignard A., Blay J.Y. The host-tumor immune conflict: from immunosuppression to resistance and destruction // Immunology Today. 1997.-Vol. 10.-P.493-497.

50. Cippitelli M. Fionda C., Di Bona D., Piccoli M., Frati L., Santoni A. Hyperthermia enhances CD95-ligand gene expression in T-lymphocytes/ T T 1 s-S i~\/~\ XT 1 1 A "X I* 1 T> ^ <'•> ^1. J Immunol. 20uj.-voi.i

51. Clynes R., Takechi Y., Moroi Y., Houghton A., Ravetch J. Fc receptors are required in passive and active immunity to melanoma // PNAS. 1998.-Vol.95.-P.652-656.

52. Costello R.T., Gastaut J.A., Olive D. Mechanisms of tumor escape from immunologic response // Rev Med Interne. 1999.-Vol.7. -P.579-588.

53. Curiel T.J., Curiel D.T. Tumor immunotherapy: inching toward the finish line // J.Clin.Invest. -2002. -V.109. -P.311-312.

54. Diederichsen A.C., Stenholm A.C., Kronborg O., Fenger C., Jensenius J.C., Zeuthen J., Kristensen T., Christensen P.B. Immunisation of colorectal cancer patients with autologous tumour cells // Oncology reports. 1998.-Vol.5. -P.823-826.

55. Diederichsen A.C., Zeuther J., Christensen P.B., Kristensen T. Characterisation of tumour infiltrating lymphocytes and correlations with immunological surface molecules in colorectal cancer // European Journal of Cancer. 1999. -Vol.35. -P.721-726.

56. Diehl K.A., Crawford E. Alterations in hemostasis associated with hyperthermia in a canine model // Am J Hematol. 2000.-Vol.64.-№4.-P.262-270.

57. Dieing A., Ahlers O., Kerner T. Whole body hyperthermia induced apoptosis in subpopulations of blood lymphocytes // Immunobiology.1. T7 1 r\r7 /( T\ S' C1. ZUUJ.-VOL r.ZO^-Z/J.

58. Dols A., Meijer S.L., Smith II J.W., Fox B.A., Urba W.J. Allogeneic breast cancer cell vaccines // Clin.Breast Cancer. 2003 -Vol.4. -P. 173180.

59. Downing J.F., Martinez-valdez H., Elizondo R.S., Walker E.B., Taylor M.W. Hyperthermia in humans enhances interferon-y synthesis andalters the peripheral lymphocyte population // Journal of Interferon Research. 1988.-Vol.8.-№ 2.-P.143-150.

60. Dyson J.E., Simmons D.M., Daniel J., McLaughlin J.M., Quirke P., Bird C.C. Kinetic and physical studies of cell death induced by chemotherapeutic agents or hyperthermia // Cell Tissue Kinet. 1986.-Vol.l9.-№3.-P.311-324.

61. Enk A.H., Jonuleit H., Saloga J., Knop J. Dendritic cells as mediators of tumor-induced tolerance in metastatic melanoma // Int J Cancer. 1997. -Vol.73. P.309-316.

62. Euggetta MP, Alvino E, Tricarico M, et al. In vitro effect of hyperthermia on natural cell-mediated cytotoxicity // Anticancer Rees. 2000 May-Jun; 20 (3A):1667-1672.

63. Expinosa-Delganol.//Onkologist. 2002.-Vol.7.-P.2-33.

64. Falk MH, Issels RD. Hyperthermia in oncology. Int. J. Hyperthermia. 2001.-Vol.17.-P.l-18.

65. Feng H., Yi Z., Graner M., Katsanis E. Stressed apoptotic tumor cells stimulate dendritic cells and induce specific cytotoxic T cells // Blood.

66. OAAO T7-1 X (V 1 O r* A 1 r\C) A 1 1 C

67. ZUUZ.- V Ol. 1UU.- JN" iZ.-r.^+lWO-H-I IJ.

68. Field S.B. 1985 douglas lea memorial lecture. Hyperthermia in the treatment of cancer // Physics in Medicine and Biology. 1987.-Vol.32.-P.789-811.

69. Foon K.A., John W.J., Chakraborty M., Das R., Teitelbaum A., Garrison J., Kashala O.L., Chatterjee S.K., Bhattacharya-Chatterjee M.

70. Clinical and immune responses in resected colon cancer patients treated with anti-idiotype monoclonal antibody vaccine that mimics the carcinoembryonic antigen // Clin Oncol. 1999. -Vol.9. -P.2889-2895.

71. Fritz K.L., Koziol S., Fabian D.F., Lefor A.T. Tumor necrosis factor alpha mediate the antitumor effect of combined interleukin-2 and whole body hyperthermia//J. Surg. Res. 1996,-Vol. 60.-№i.p. 55-60.

72. Fuggetta M.P., Alvino E., Tricarico M., D'Atri S., Pepponi R., Prete S.P., Bonmassar E. In vitro effect of hyperthermia on natural cellmediated cytotoxicity // Anticancer Rec. 2000,- Vol.20.-3A.-P.1667-1672.

73. Galili U., LaTempe D.C. Natural anti-Gal antibody as a universal augmenter of autologous tumor vaccine immunogenicity // Immunology Today. 1997.-Vol.18.-P.281-285.

74. Gerlce P., Filejski W. Nephrotoxicity of ifosfamide, carboplatin and etoposide (ICE) alone or combined with extra-corporeal or radiant-heat-induced whole-body hyperthermia // J Cancer Res Clin Oncol. 2000.-Vol.l26.-№3.-P.173-177.

75. Gold P., Freeman S. Specific carcinoembryonic antigens of the human digestive system//J.Exp. Med. 1995.-Vol.122.-P.467.

76. Graf N., Adam C., Mocikat R. Persistence of xenogenized vaccine cells in vivo // Int.J.Cancer. 2003.-Vol.105.-P.217-220.

77. Greenberg P. Adoptive T-cell therapy of tumors: mechanisms operative in the recognition and elimination of tumor cells // Adv. Immunol.1.AI ir.1 /1A T\ Offlyyi.- V Ol.H-y.-r.ZOl-JJ^.

78. Greten Tim F., Jaffee Elizabeth M. Cancer vaccines // Journal of Clinical Oncology. 1999.-Vol. 17.-P. 1047-1060.

79. Hall E.J., Roizin-Towle L. Biological effects of heat // Cancer Research. 1984.-Vol.44.-P.4708-4713.

80. Hara N., Ichinose Y., Asoh H., Yano T., Kawasaki M., Ohta M. Superoxide anion-generating activity of polimorphonuclear leukocytes and monocytes in patients with lung cancer // Cancer. 1992.-Vol.69-P.1682-1687.

81. Hara Y., Kawasaki T. A case of unresectable gallbladder cancer responding to combination therapy with hyper-thermia and local chemotherapy. Gan To Kagaku Ryoho. 2000.-Vol.27.-№1 .-P. 117-120.

82. Haupt K., Roggendorf M., Mann K. The potential of DNA vaccination against tumor-associated antigens for antitumor therapy // Exp.Biol.Med. 2002.-Vol.227.-P.227-237.

83. Hidalgo G., Zhong L., Doherty D., Hirschowitz E. Plasma PGE-2 levels and altered cytokine profiles in adherent peripheral blood mononuclear cells in non-small cell lung cancer // Molecular Cancer.irtAi A 1 1 D i c1. WZ.-VUl.i.-r.I-J.

84. Iiornell T.M.C., Beresfod G.W., Bushey A. // J. Immunol. 2003,-Vol. 171 .-P.23 74-2386.

85. Hsu F.J., Benilce C., Fagnonin F. Yaccinacion of patients with B-cell lymphoma using aitologius antigen-pulsed dendritic cells // Nat. Med. 1996.-Vol.2.-P.52-58.

86. FIuang Y.H., Haegerstrand A., Frostegard J. Effects of in vitro hyperthermia on proliferative responses and lymphocyte activity // Clinical & Experimental Immunology. 1996.-Vol.l03.-№ 1.-P.61066.

87. Ivarsson K., Myllymaki L., Jansner K., Stenram U., Tranberg K.G. Resistance to tumor challenge after tumor laser thermotherapy is associated with a cellular immune response // Br J Cancer. 2005,-Vol.93.-№4.-P.435-440.

88. Johnston D., el Rouby S., Bystryn J.C. Identification of melanoma cell surface antigens immunogenic in mice // J. Cancer Biother. 1994.-Vol.9.-P.29-38.

89. Julie R., Ostberg and Elizabeth A. Repasky. Emerging evidence indicates that physiologically relevant thermal stress regulates dendritic cell function // Cancer Immunol Immunother. 2006.- March.- Vol. 55.-№3.- P.292-298.

90. Kamradt T., Mitchison A. Tolerance and autoimmunity // N Engl J Med. 2001.-Vol.344.-P.655-663.

91. Kappel M., Stadeager C., Tvede N„ Galbo H., Pedersen B.K. Effect of in vivo hyperthermia on natural cell activity, In vitro proliferative responses and blood mononuclear cell subpopulation // Clin. Exp. Immunol. 1991.-Vol.84.-№ 1 .-P. 175-180.

92. Kearns R.J., Ringler S., Krakowka S., Tallman R., Sites J., Oglesbee M.J. Whole body hyperthermia // Clinical & Experimental Immunology. 1999,-Vol.116.-№1.-P.188-192.

93. Kimura M, Ooi T, Morimoto T, et al. Effects of extracorporeal^ induced systemic hyperthermia on cell-mediated immunity // Nippon Geka Gakkai Zasshi. 1983.-Vol.84.-№12.-P. 1220-1228.

94. Kugler A., Stuhler G., Walder P. et al // Regression of human metastatic renal cell carcinoma after vaccination with tumor cell-dendritic cell hybrids. Nat. Med. 2000.-Vol.6.-P.332-336.

95. Lee T.K., O'Brien. Effect of ex vivo hyperthermia on radiation-induced micronuclei in lymphocytes of cancer pa-tients before and during radiotherapy // Mutat Res. 1998.-Vol.417.-№l.-P.l-8.

96. Luchetti F, Canonico B, Delia Felice M, et al. Hyperthermia triggers apoptosis and affects cell adhesiveness in human neuroblastoma cells // Histol Histopathol. 2003.-Vol.l8.-№4.-P.1041-1052.

97. Luo F., Wei Y., Kan B. Anti-tumor immune response agains mouse melanoma to xenogeneic vaccination // Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 2001. -Vol.23. -P. 118-121.

98. Maehara Y., Kakeji Y., Kabashima A., Emi Y., Watanabe A., Akazawa K., Baba H., Kohnoe S., Sugimachi K. Role of transforminggrowth factor-pi in invasion and metastasis in gastric carcinoma // Journal of Clinical Oncology. 1999.-Vol.17-P.607-614.

99. Matsumoto M., Takagi H., Yoshimura N. Synergistic suppression of retinal pigment epithelian cell proliferation in culture by radiation and hyperthermia//Visual Science. 1993.-Vol.34.-№6.-P.2068-2073.

100. McKallip R., Li R., Ladisch S. Tumor gangliosides inhibit the tumor-specific immune response // J. of immunology. 1999.-Vol.163.-P.3718-3726.

101. Melief C.J., Offringa R., Toes R.E., Kast W.M. Peptide-based cancer vaccines // Current Opinion in Immunology. 1996.-V.8.-P.651-657.

102. Murray T.G., Cicciarelli N., McCabe C.M., Ksander B., Feuer W., Schiffman J., Mieler W.F., O'Brien J.M. In vitro efficacy of carboplatin and hyperthermia in a murine retinoblastoma cell line // Visual Science. 1997.-Vol.38.-№12.-P.2516-2522.

103. Natale V.A., McCullough K.C. Macrophage culture: influence of species-specific incubation temperature // Journal of immunological methods. 1998.-Vol.214.-№l-2.-P. 165-174.

104. Neeley Y.C., McDonagh K.T., Overwijk W.W., Restifo N.P., sanda M.G. Antigen-specific tumor vaccine efficacy in vivo against prostate cancer with low class I MHC requires competent class II MHC // Prostate. -2002. Vol.53 .-P. 183-191.

105. O'Neill K.L., Fairbarn D.W., Smith M.J., Poe BS. Critical parametes influencing hyperthermia-induced apoptosis in human lymphoid cell lines. //Appoptosis. 1998.-Vol. 3.-P.369-375.

106. Ockert D., Schmitz M., Hampl M., Rieber P. Advances in cancer immunotherapy // Immunology Today. 1999.-Vol.20 -P.63-65.

107. Oglesbee M.J., Diehl K. Whole body hyperthermia: effects upon canine immune and hemostatic functions // Vet Im-munol Immunopathol. 1999.Vol.69.-№2-4.-P. 185-199.

108. Ostberg J.R., Gellin C., Patel R., Repasky E.A. Regulatory potential of fever-range whole body hyperthermia on langerhans cells and lymphocytes in an antigen-dependent cellular immune response // The Journal of Immunology. 2001.-Vol.l67.-P.2666-2679.

109. J P /TT"V A "{"T'l 1 1 L II TVX T A 1 AAA X 7 1 r\ £requirement lor ^uh i lympnocytes // rN/va. -voi.yo.-r.zyoz2987.

110. Pappalardo F., Lollini P.-L., Castiglione F., Motta S. Modeling and stimulation of cancer immunoprevention vaccine // Systems biology.-2005.-Vol.2 l.-№12.-P.2891-2897.

111. Pardoll D. T cells take aim at cancer // PNAS.2002.-Vol.99.-P. 1584015842.

112. Parmiani G. Melanoma antigens and their recognition by T cells // Keio.J.Med. 2001.-Vol.50.-P.86-90.

113. Pekarek L.A., Starr B.A., Toledano A.Y., Schreiber H. Inhibition of tumor growth by elimination of granulocytes// J.Exp.Med. 1995-Vol. 181 -P.435-440.

114. Pervin S., Chakraborty M., Bhattacharya-Chatterjee M., Zeytin H., Foon K.A., Chatterjee S.K. Induction of antitumor immunity by an antiidiotype antibody mimicking carcinoembryonic antigen // Cancer Res.l997.-Vol.4. -P.728-734.

115. Portoukalian J., Carrel S., Dore J.F., Rumke P. Humoral immune response in disease-free advanced melanoma patients after vaccination with melanoma-associated gangliosides. EORTC Cooperative Melanoma Group // Int J Cancer. 1991.-Vol.49.-P.893-899.

116. Potapnev M.P., Istomin Y.P., Ismail-zade R.S., Zhavrid E.A. Enhancement of antitumor response to sarcoma 45 in rats by combination of whole-body hyperthermia and interleukin-2 // Eksp Onkol. 2004.-Vol.26.-№l.-P.67-70.

117. Price G.S., Cline J.M. Potential complications associated with normothermic lonidamine infusion and with systemic acidosis in dogs receiving lonidamine during whole body hyperthermia (WBH) // Int J Hyperthermia. 1998.-Vol. 14.-№3 .-P.271 -283.

118. A f t-^.- T T-»- 1. <1.1 1 . TI T1-, O -\r T^I1T^ n11„

119. JK-icmer u., ^cnuier i., lDe ¿5., ^ao A., DiaiiKensiem i. d ucijls inhibit induction of T cell-dependent tumor immunity // Nat.Med.1998-Vol.4.-P.627-630.

120. Rafiq K., Bergtold A., Clynes R. Immune complex-mediated antigen presentation induces tumor immunity // J. Clin. Invest. 2002.-Vol.l-P.71-79.

121. Renkvist N., Castelli C., Parmiani G. A listing of human tumor antigens recognized by T cells // Cancer Immunology Immunotherapy.2001 -Vol. 5 0.-P. 3 -15.

122. Robbins P. Kawakami Y. Human tumor antigens recognaized T cells // Cur. Opin. Immunol. 1996.-Vol.8.-P.628-636.

123. Roberts NJ Jr. Differential effect of hyperthermia on human leukocyte production of interferon-alpa and interferon-gamma // Proc Soc Exp Biol Med. 1986,-Vol. 183.-P.42047

124. Rosenberg S.A. Cancer vaccines based on the identification of genes encoding cancer regression antigens // Immunology Today. 1997-Vol.18.-P.175-182.

125. Sato T., Bullock T.N., Eisenlohr L.C., Mastrangelo M.J., Berd D. Dinitrophenyl-modified autologous melanoma vaccine induces a T cell response to hapten-modified, melanoma peptides // Clinical immunology and Immunopathology.l997.-Vol.85.-P.265-272.

126. Satomi A., Murakami S., Ishida K., Mastuki M., Hashimoto T., Sonoda M. Significance of increased neutrophils in patients with advanced colorectal cancer // Acta.Oncol. 1995.-Vol.34.-P.69-73.

127. Seledtsov V.I., Niza N.A., Surovtseva M. A., Shishkov A.A., Samarin D.M., Seledtsova G.V., Seledtsov D.V. Xenovaccinotherapy for colorectal cancer//Biomed. Pharmacother. 2007.- Vol.61.- P.125-130.

128. Seledtsov V.I., Shishkov A.A., Surovtseva M.A., Samarin D.M., Seledtsova G.V., Niza N.A., Seledtsov D.V. Xenovaccinotherapy for melanoma//Eur. J. Dermatol. 2006.-Vol.16.-P.655-661.

129. Shaif-Muthana M., Mclntyre C., Sisley K., Rennie I., Murray A. Dead or alive: immunogenicity of human melanoma cells when presented by dendritic cells // Cancer Research.2000.-Vol.60.-P.6441-6447.

130. Sioud M., Sorensen D. Generation of an effective anti-tumor immunity after immunization with xenogeneic antigens // Eur.J.Immunol.2003-Vol.33.-P.38-45.

131. Sosman J.A., Sondalc V.K. Melacine: an allogeneic melanoma tumor cell lysate vaccine // Expert. Rev.Vaccines.2003.-Vol.2.-P.353-368.

132. Soti C., Csermely P. Molecular chaperones in the etiology and therapy of cancer // Pathology oncology research. 1998.-Vol.4.-№ 4.-P.316-321.

133. Srinivasan R., Houghton A.N., Wolchok J.D. Induction of autoantibodies against tyrosinase-related proteins following DNA vaccination: unexpected reactivity to a protein paralogue // Cancer Immun. 2002.-Vol.19.-P.2-8.

134. Srinivasan R., Wolchok J.D. Tumor antigens for cancer immunotherapy: therapeutic potential of xenogeneic DNA vaccines // Journal of translational medicine. 2004.-Vol.2.-P.l-12.

135. Steitz J., Bruck J., Steinbrink K., Enk A., Knop J., Tuting T. Genetic immunization of mice with human tyrosinase-related protein 2: implications for the immunotherapy of melanoma // Int J. Cancer.2000.-Vol.86.-P.89-94.

136. Strehl J., Selmayr M., Kremer J.P., Hultner L., Lindhofer H., Mocikat R. Gene therapy of B-cell lymphoma with cytokine gene-modified trioma cells // Int.J.Cancer. 1999.-Vol.83.-P. 113-120.

137. Sutmuller R.P., Schurmans L.R., van Duivenvoorde L.M., Tine J.A., van Der Voort E.I., Toes R.E., Melief C.J., Jager M.J., Offringa R. Adoptive T cell immunotherapy of human uveal melanoma targeting gplOO // J.Immunol.2000.-Vol.l65.-P.7308-7315.

138. Talmadge J.E., Donkor M., Scholar E. Inflammatory cell infiltration of tumor: Jekyll or Hyde // Cancer Metastasis Rev.2007.-Vol.24.-P.615-635.

139. Trapani J. A., Smyth M.J. Functional significance of the perforin/granzyme cell death pathway // Immunology.2002.-Vol.2-P.735-747.

140. Tutt A.L, Stevenson F.K., Smith J.L., Stevenson G.T. Antibodies against urinary light chain idiotypes as agents for detection and destruction of human neoplastic B lymphocytes // The Journal of Immunology. 1983.-Vol.l31.-P.3058-3063.

141. Wagner U., Kohler S., Reinartz S., Giffels P., Huober J., Renke K., Schlebusch H., Biersack H.J., Mobus V., Kreienberg R., Bauknecht T.,

142. Krebs D., Wall wiener D. Immunological consolidation of ovarian carcinoma recurrences with monoclonal anti-idiotype antibody ACA125: immune responses and survival in palliative treatment // Clin.Cancer Res. 2001.-Vol.5.-P. 1154-1162.

143. Ward S., Casey D., Labarthe MC., Whelan M., Dalgleish A., Pandha H., Todryk S. Immunotherapeutic potenial of whole tumour cells // Cancer Immunol Immunother.2002.-Vol.51 .-P.351 -357.

144. Wojtowicz-Praga S. Reversal of tumor-induced immunosuppression: a new approach to cancer therapy //J Immunother. 1997.-Vol.20.-P. 165177.

145. Wolchok J.D, Srinivasan R., Perales M.A., Houghton A.N., Bowne W.B., Blachere N.E. Alternative roles for interferon-gamma in the immune response to DNA vaccines encoding related melanosomal antigens// Cancer Immun.2001.-Vol.16.-P. 1-9.

146. Young M R., Wright M. A., Coogan M., Young M.E., Bagash J. Tumor-derived cytokines induce bone marrow suppressor cells that mediate immunosuppression through transforming growth factor beta // Cancer Immunol. Immunother. 1992.-Vol.35.- P. 14-18.

147. Yu J.S., Wheeler P.M., Zeltzer et al. Vacination of malignant glioma patients with peptide-pulsed dendritic cells elicits systemic cytotoxicity and intracranial T-cell infiltration // Cancer Res. 2001.-Vol.61.-P.842-847.

148. Yu Zhiya, Restifo N.P. Cancer vaccines: progress reveals new complexities // The Journal of Clinical Investigation.2002.-Vol.-№110.— P.289-294.

149. Zhang H., Wang W., Zhang S., Huang W. Comparison of the antitumor effects of various whole-body hyperthermia protocols: Correlation with HSP 70 expression and composition of splenic lymphocytes // Immunol Invest. 2005.-Vol.34.-№ 3.-P.245-258.