Хитинолитическая активность ферментов у некоторых беспозвоночных Баренцева моря тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Рысакова, Кира Сергеевна

• Рысакова, Кира Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Рысакова, Кира Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Строение, свойства и применение хитина и его производных.

1. 2. Пути деградации хитина в природе.

1.3. Гидролитические ферменты беспозвоночных.

1.3.1. Протеолитические ферменты.

1.3.2. Характеристика и действие хитинолитических ферментов.

1.3.3. Хитозаназа.

1.3.4. Хитиндеацетилаза.

1.4. Ферменты других классов, гидролизующие хитин и хитозан.

1.5. Распространенность хитиназ в природе.

1.6. Хитиназы ракообразных.

1.7. Изменение сезонной активности хитиназ у различных видов беспозвоночных.

1.8. Физико-химические свойства хитиназ.

1.9. Преимущество ферментативного гидролиза хитина и хитозана.

1.10. Применение хитинолитических ферментов.

1.10.1 Применение хитинолитических ферментов в защите растений.

1.10.2 Применение хитинолитических ферментов в медицине.

ГЛАВА 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1 ХАРАКТЕРИСТИКА ОБЪЕКТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.2.1. Получение ферментного препарата.

2.2.2. Приготовление субстратов.

2.2.3. Методики определения хитиназной активности.

2.2.4. Определение протеолитической активности.

2.2.5. Определение гликолитической активности.

2.2.5.1 Методика определения восстанавливающих Сахаров после ферментативного гидролиза полисахаридов (хитина, хитозана).

2.2.6. Хроматографическое определение D-глюкозамина.

2.2.7. Определение средневязкостной молекулярной массы хитозана.

2.2.8. Определение степени деацетилирования хитозана.

2.2.9 Определение степени деацетилирования хитина и хитозана методом инфракрасной спектроскопии.

2.10. Проведение фракционирования.

2.11. Определение химической чистоты.

2.12. Математическая и статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Хитинолитическая активность ферментов морских беспозвоночных

3.2. Свойства хитинолитических ферментов краба.

3.2.1. Зависимости экзо- и эндохитиназной активности от продолжительности инкубации.

3.2.2. Зависимость экзо- и эндохитиназной активности от температуры

3.2.3. Зависимость экзо- и эндохитиназной активности от рН.

3.2.4. зависимость а экзо- и эндохитиназной активности от концентрации ферментного препарата.

3.3. Обнаружение хитозаназной и деацетилазной активности, влияние степени ацетилирования субстрата.

3.4. Обнаружение гликолитической активности в ферментном препарате из гепатопанкреаса камчатского краба.

3.4.1. Методика определения восстанавливающих Сахаров.

3.4.2. Кинетика образования суммы восстанавливающих Сахаров и ацетнлглюкозамина.

3.4.3 Влияние рН на ферментную активность.

3.4.4. Влияние температуры на ферментную активность.

3.4.5. Влияние концентрации реагентов на степень ферментативного гидролиза.

3.5. Хроматографическое определение D-глюкозамина.

3.6. Выделение фракций ферментов, обладающих максимальной активностью.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Хитинолитическая активность ферментов у некоторых беспозвоночных Баренцева моря»

Актуальность проблемы. В пищеварительных органах всех живых организмов присутствует широкий набор гидролитических ферментов. Огромный интерес к изучению физиологических функций этих ферментов и механизмов гидролиза объясняется их значительной ролью в обмене веществ у животных.

К настоящему времени, данные, имеющиеся в литературе, в большей степени посвящены ферментам рыб и практически не касаются хитиназ беспозвоночных (Сидоров, 1980; Немова, 1996; Высоцкая, 1999; Кузьмина, 2005). Вместе с тем моллюски, ракообразные и иглокожие являются одними из наиболее древних и многочисленных в видовом отношении животных. Изучение биохимических принципов, обеспечивающих их жизнедеятельность, облегчает понимание биохимических процессов у организмов высших таксонов (Сравнительная физиология., 1977; Мухин, 1999).

Актуальность изучения гидролаз морских беспозвоночных определяется, с одной стороны, функциями, которые выполняют эти ферменты в организме, а с другой - их несомненной практической значимостью. Особый интерес представляет изучение вопросов, связанных с такими хозяйственно-ценными объектами, как ракообразные и моллюски. Исследование ферментов беспозвоночных позволяет более рационально использовать добываемое сырье для получения препаратов ферментов и применения их в медицине, микробиологии, пищевой, комбикормовой и легкой промышленности (Мухин, 2002).

Важным направлением использования хитинолитических ферментов в медицине является получение различных неогликоконъюгатов, применяемых в медицине для ингибирования процесса метастазирования при онкопатологии. Производные хитина, такие как хитоолигосахариды и олигосахариды хитозана, получаемые с помощью хитинолитических ферментов, также обладают многими важными и полезными для здоровья свйствами, проявляют противоопухолевое действие, улучшают функции кишечника (последнее объясняется способностью стимулировать рост Bifidobacteria — полезной кишечной бактерии, которая помогает справляться со многими болезнями пищеварительного тракта.

Кроме того, в последние десятилетия широкое распространение получил микробиологический метод защиты растений - использование препаратов на основе Bacillus thuringiensis, выделяющей хитинолитические ферменты. Перенос гена хитиназы в клетки растений позволил сделать их носителями собственного инсектицида (Журавлева, 2004).

Ферментативный гидролиз хитина и хитозана является альтернативным и, как считают многие биохимики, перспективным и более предпочтительным способом переработки хитина и хитозана по сравнению с уже традиционными химическими методами (Sashiwa, 2001; Ильина, 2002).

Акклиматизированный в Баренцевом море камчатский краб не только ценный промысловый вид, но и потенциальный объект аквакультуры. Основные биологические показатели камчатского краба Paralithodes camtschaticus в Баренцевом море не имеют существенных отличий от таковых в естественных популяциях его обитания в Тихом океане. Однако особенности экологии Баренцева моря, по всей вероятности, могут оказывать влияние на соотношение частей тела, химический состав и биохимические свойства мяса, гепатопанкреаса и других внутренних органов краба. Сведения об этих параметрах важны для обоснования возможности использования этого объекта на пищевые цели, а также для разработки комплексной технологии переработки сырья. Анализ научной литературы свидетельствует о том, что к настоящему времени при переработке камчатского краба используются практически все части тела. Из панциря получают производные хитина. Гепатопанкреас представляет собой ценное сырье для получения ферментных препаратов и жиров (Камчатский краб., 2003).

Проблема утилизации отходов промысла и переработки камчатского краба весьма актуальна с точки зрения не только рационального использования добытого сырья, но и получения разнообразных продуктов, находящих широкое применение в медицине и промышленности. (Мухин, 1998).

Отходы промысла и переработки камчатского краба содержат значительное количество таких неутилизируемых соединений, как белки, хитин, липиды и ферменты.

Пищеварительные органы различных морских беспозвоночных, и, особенно, гепатопанкреас ракообразных являются уникальным сырьем для получения ферментов. Этот вопрос является предметом детального изучения огромного количества научных работ (Jeuniaux, 1963; Сахаров, 1992; Shigemasa, 1994; Руденская, 1995; Климова, 1999). В ПИНРО также проводятся работы по исследованию протеолитической и хитинолитической активности гепатопанкреаса камчатского краба (Мухин, 1999; Новиков, 2007).

Цель и задачи исследования. Цель данной работы - исследование хитинолитической активности в пищеварительных органах некоторых беспозвоночных Баренцева моря и выделение фракций белков, ответственных за ее проявление.

Задачи исследования сводились к следующему:

1. Провести сравнительное изучение хитиназной активности у различных таксономических групп морских беспозвоночных (камчатского краба, серрипеса, трубача, кукумарии, морской звезды)

2. Изучить динамику ферментативного гидролиза хитина и хитозана под действием ферментного препарата из гепатопанкреаса камчатского краба при различных условиях проведения анализа.

3. Сравнить кинетические характеристики гидролиза хитина (хитозана) под действием ферментного препарата из гепатопанкреаса камчатского краба.

4. Исследовать природу хитинолитических и протеолитических ферментов и охарактеризовать их молекулярные массы (ММ).

Научная новизна. Впервые установлены основные характеристики хитинолитических ферментов гепатопанкреаса камчатского краба. Определены оптимальные условия гидролиза. Проведено сравнительное исследование хитинолитической активности у морских беспозвоночных различных таксономических групп.

Установлено, что наибольшей хитиназной активностью обладают ферменты, выделенные из камчатского краба и морской звезды. Причем эндохитиназная активность выше у фермента выделенного из морской звезды, а экзохитиназная - из краба. Показано отсутствие хитозаназной активности, в частности, экзохитозаназной активности. Доказано, что за хитиназную и протеазную активность ферментного препарата из гепатопанкреаса камчатского краба отвечают различные ферменты. Также подтверждена различная природа экзо- и эндохитиназ ферментного препарата. Впервые также установлена молекулярная масса (50,9) кД хитиназы, выделенной из гепатопанкреаса камчатского краба.

Практическое значение работы.

Результаты настоящих исследований и сделанные на их основании выводы расширяют представление о ферментативных системах беспозвоночных и позволяют лучше понять их физиологические особенности.

Получение хитиназ из отходов переработки морских гидробионтов может способствовать решению проблемы комплексного использования водных ресурсов.

Обнаружение хитинолитических ферментов в гепатопанкреасе камчатского краба, позволит расширить области его применения, что повысит рентабельность использования отходов крабового промысла.

Определенные в ходе исследования оптимальные условия гидролиза хитина, могут быть использованы для совершенствования процесса получения олигомеров и мономера хитина - N-ацетилглюкозамина (GlcNAc), имеющих практическую ценность. При ферментативном гидролизе хитина, по сравнению с химическим гидролизом, происходит образование GlcNAc и не наблюдается выход D-глюкозамина (GlcN). что позволяет получать чистый ацетилированный моносахарид. Мягкие условия ферментативного гидролиза и его избирательность обеспечивают получение целевых и побочных продуктов реакции, соответствующих требованиям экологической безопасности производства.

Основные положения, выдвигаемые на защиту.

1. В пищеварительных органах, полученных из камчатского краба, серрипеса, трубача, кукумарии и морской звезды обнаруживается экзо- и эндохитиназная активность. Наибольшей хитиназной активностью обладают ферменты, выделенные из камчатского краба и морской звезды. Эндохитиназная активность выше у фермента выделенного из морской звезды, а экзохитиназная - из краба.

2. Хитиназная активность фермента, определенная по выходу N-ацетилглюкозамина, увеличивается с увеличением степени ацетилирования субстрата.

3. В гепатопанкреасе камчатского краба отсутствует экзохитозаназная активность.

4. За хитиназную и протеазную активность в гепатопанкреасе краба отвечают различные ферменты. Причем белки, отвечающие за хитиназную активность, имеют большую молекулярную массу (ММ) по сравнению с протеазами.

Апробация работы. Основные результаты исследования были представлены на Российских, региональных и международных конференциях: Пятой региональной науч. студенческой конф. «Естественнонаучные проблемы Арктического региона», Мурманск, 2004; XXV юбилейной конф. молодых ученых ММБИ РАН, Мурманск 2007; 2-ой науч. конф. с участием стран СНГ «Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов», Петрозаводск, 2007; Междунар. конф. «Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов», Петрозаводск, 2004; Межд. науч.-техн. конференциях «Наука и образование», Мурманск, 2003, 2005, 2006, 2007, 2008; Межд. науч.-практ. конференция «Техника и технологии переработки гидробионтов и сельскохозяйственного сырья», посвященная памяти профессора Н. Н. il

Рулёва, Мурманск, 2008; 10 Int. Chemical and Biological Engineering Conf. -CHEMPOR 2008, Braga, Portugal, 2008; Девятой Междунар. конф. «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана», 2008; Всеросс. конф. молодых ученых и специалистов, посвященной 90-летию со дня рождения К. Г. Константинова, 2008 г.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 20 печатных работ, включающих 7 статей, из которых 4 — в реферируемых источниках.

Структура и объем работы: Диссертация изложена на 145 страницах, включает 4 таблицы и 33 рисунка. Работа включает введение, 3-й главы, заключение, выводы, список сокращений и список литературы, включающий 184 публикации, из них 105 иностранных.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Рысакова, Кира Сергеевна

выводы

1. Обнаружено наличие экзо- и эндохитиназной активности в пищеварительных органах камчатского краба, серрипеса, трубача, кукумарии, морской звезды. Наибольшей хитиназной активностью обладают ФП, выделенные из камчатского краба и морской звезды, что объясняется их пищевыми предпочтениями. Причем эндохитиназная активность выше у ФП, выделенного из морской звезды, а экзохитиназная — из краба, что связано с полнотой использования продуктов гидролиза для потребностей организма у этих двух видов беспозвоночных.

2. При сравнении зависимостей экзохитиназной активности ФП из гепатопанкреаса камчатского краба (Аехо, мг GlcNAc/мл) от степени ацетилирования субстрата показано, что хитиназная активность фермента, возрастает с увеличением СА.

3. Установлены оптимальные условия гидролиза хитина на основе полученных зависимостей: гликолитической, эндо- и экзохитиназной активности ФП от продолжительности инкубации, концентрации ФП, температуры и рН реакционной среды. Оптимальные значения соответствуют температуре 36,5-37 °С; рН среды 4,5 для экзохитиназной активности и рН 6,0 для эндохитиназной активности и степени ацетилирования субстрата (хитина / хитозана) 40-50 %.

4. Сравнение положения температурных и рН-оптимумов позволяет считать, что за хитинолитическую и протеолитическую активности отвечают различные ферменты. Эти же данные, подтверждаются разными видами фракционирования: максимальные пики этих двух активностей соответствуют фракциям белков с разными ММ. Причем, белки отвечающие за хитиназную активность имеют большую ММ (50,9 кД) по сравнению с протеазами (23,4 кД).

5. Определен порядок и константы реакций гидролиза хитина. В первом случае, при зависимости экзо- и эндохитиназной активности от времени инкубации, реакция проводилась в условиях избытка фермента и была отнесена к реакциям первого порядка; в случае кинетики образования суммы восстанавливающих Сахаров, реакция идет в условиях избытка субстрата и относится к реакциям нулевого порядка.

6. Выявлено отсутствие N-ацетилглюкозамин деацетилазной и экзохитозаназной активности. Это обусловлено тем, что в продуктах гидролиза хитина и хитозанов GlcN не был обнаружен.

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор выражает искреннюю благодарность своим наставникам: Новикову В. Ю. и Мухину В. А., а также всей лаборатории биохимии и технологии ПИНРО за помощь в организации и проведении исследований. Особая признательность Карасевой Т. А. и Жилину А. Ю. за поддержку и ценные замечания.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В ходе исследований обнаружено наличие экзо- и эндохитиназной активности в ферментных препаратах, полученных из камчатского краба, серрипеса, трубача, кукумарии, морской звезды. Наибольшей хитиназной активностью обладают ферменты, выделенные из камчатского краба и морской звезды. Причем эндохитиназная активность выше у фермента выделенного из морской звезды, а экзохитиназная - из краба.

Повышенная хитиназная активность в пищеварительных органах камчатского краба и морской звезды, по сравнению с другими беспозвоночными, вероятно, объясняется преобладанием в их рационе животных с хитиновым покровом. Такое увеличение хитиназной активности в пищеварительных органах необходимо этим двум видам хищных беспозвоночных для полного переваривания своих жертв и для лучшего усвоения питательных веществ.

Детально изучен ферментативный гидролиз хитина и хитозана под действием ферментного препарата, полученного из гепатопанкреаса камчатского краба. Получены зависимости эндо- и экзохитиназной активности ФП от продолжительности инкубации, концентрации ФП, температуры и рН реакционной среды. Определены оптимальные условия гидролиза. Установлена зависимость активности ФП от степени ацетилирования субстрата.

Определен порядок и константы реакций гидролиза хитина. В первом случае, при зависимости экзо- и эндохитиназной активности от времени инкубации, реакция проводилась в условиях избытка фермента и была отнесена к реакциям первого порядка. В случае исследования кинетики образования суммы восстанавливающих Сахаров использовался аналитический метод с более высокой чувствительностью, что позволило изучать гидролиз с меньшей концентрацией фермента. В этом случае реакция шла в условиях избытка субстрата и имела нулевой порядок.

Проведено исследование процессов гликолитического ферментативного расщепления хитина и -хитозана под действием ферментного препарата из гепатопанкреаса камчатского краба.

На основании установленных зависимостей гликолитической активности ферментного препарата от различных условий инкубации (рН субстрата, температуры, времени инкубации, концентрации фермента и субстрата) и сравнении их с аналогичными зависимостями, полученными для протеолитической и экзохитиназной активностей, сделаны предположения относительно вероятного направления ферментативного гидролиза хитина и хитозана.

Подтверждено наличие эндохитиназной активности ФП. В продуктах гидролиза хитина показано образование низкомолекулярных фракций и олигомеров.

Показано отсутствие хитозаназной активности, в частности, экзохитозаназной активности. GlcN не был обнаружен в продуктах гидролиза хитина и хитозанов с разной степенью деацетилирования.

Показано отсутствие N-ацетилглюкозамин деацетилазной активности. В продуктах гидролиза хитина и хитозанов был обнаружен GlcNAc и отсутствовал GlcN.

Сравнение положения температурных и рН-оптимумов, наблюдаемых на зависимостях активности ФП позволяет считать, что за хитиназную и протеазную активность ФП отвечают различные ферменты. Эти же экспериментальные данные, по-видимому, указывают на различную природу экзо- и эндохитиназ ФП. Последнее предположение, вероятно, свидетельствует в пользу двухступенчатого процесса ферментативного расщепления хитина: эндогидролиз до олигомеров (эндохитиназа) и экзогидролиз олигомеров (ацетилхитобиозы) до ^ацетил-Б-глюкозамина.

Фракционирование различными методами (высаливание сульфатом аммония, гель-фильтрация, ультрафильтрация, препаративной эксклюзионной ВЭЖХ) проводимое с целью количественного выделения фракций белков, проявляющих максимальную протеолитическую и хитинолитическую активности подтвердило тот факт, что за хитинолитическую и протеолитическую активность отвечают различные ферменты: максимальные пики этих двух видов активностей соответствуют фракциям белков с разными ММ. Причем, белки отвечающие за хитиназную активность имеют большую ММ (50,9 кД) по сравнению с протеазами (23,4 кД).

Таким образом, полученные результаты позволяют утверждать, что в ФП присутствуют разные ферменты, проявляющие хитинолитическую и протеолитическую активность.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Рысакова, Кира Сергеевна, 2008 год

1. Актуганов, Г. Э. Выделение и свойства хитозаназы штамма Bacillus sp. 739 / Г. Э. Актуганов, А. В. Широков, А. И. Мелентьев // Прикл. биохим. и микробиол. 2003. - Т. 39, № 5. - С. 536-541.

2. Алексеенко, Л. П. Определение активности протеиназ по расщеплению белковых субстратов // Современные методы в биохимии. Т. 2. — М.: Медицина, 1968. -112 с.

3. Барнард, Е. Сравнительная биохимия и физиология пищеварения / Е. Барнард // Сравнительная физиология животных. М.: Мир, 1977. - С. 285-348.

4. Беленький, Б. Г. Хроматография полимеров / Б. Г. Беленький, Л. 3. Виленчик. -М.: Химия, 1978. 344 с.

5. Березов, Т. Т. Биологическая химия / Т. Т. Березов, Б. Ф. Коровкин. М.: Медицина, 1983. - 752 с.

6. Биофизика / Под ред. Б. Н. Тарусова и О. Р. Колье. М.: Высш. шк., 1986.-466 с.

7. Влияние способа сушки на свойства ферментного препарата из гепатопанкреаса камчатского краба Paralithodes camtschaticus / В. А. Мухин, К. С. Рысакова, И. И. Лыжов, В. Ю. Новиков // Рыбное хозяйство. — 2007. -№ 3. С. 103-105.

8. Герасимова, Н. А. Свойства протеиназ из внутренних органов камчатского краба Paralithodes camtschatica / Н. А. Герасимова, Н. М. Купина // Прикл. биохимия и микробиол. 1996. — Т. 32, № 4. - С. 411-415.

9. ГОСТ 7636-85. Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа. — М.: Изд-во стандартов, 1985.— 141 с.

10. Гудимова, Е. Н. Распространение Cucumaria frondosa (Gunnerus) в Баренцевом море в связи с абиотическими факторами среды //

11. Особенности биологии и условия обитания гидробионтов Баренцева моря. — Апатиты, 1988. С. 125-139. - Рук. деп. в ВИНИТИ 23.03.88, № 2246-В88.

12. Гудимова, Е. Н., Биология, экология и ресурсы промысловой голотурии кукумарии / Е. Н. Гудимова, С. Г. Денисенко. Мурманск, 1995. -43 с.

13. Дёрффель, К. Статистика в аналитической химии / Пер. с нем. -М.: Мир, 1994.-268 с.

14. Донные беспозвоночные Баренцева моря (рекомендации к промысловому использованию). Мурманск, ПИНРО, 1989. — 68 с.

15. Дэвени, Т. Аминокислоты, пептиды и белки / Т. Дэвени, Я. Гергей / Пер. с англ. М.: Изд-во «Мир», 1976. - 366 с.

16. Журавлева, Н. В. Хитинолитические ферменты: источники, характеристика и применение в биотехнологии / Н. В. Журавлева, П. А. Лукьянов. Вестник ДВО РАН. - 2004. - № 3. - С. 83.

17. Зажигаев, Л. С. Методы планирования и обработки результатов физического эксперимента / Л. С. Зажигаев, А. А. Кирьяш, Ю. И. Романиков. М.: Атомиздат, 1978. - 232 с.

18. Ильина, А. В. Энзимология синтеза и деградации хитина и хитозана / А. В. Ильина, В. П. Варламов // Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / Под. ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. М.: Наука, 2002. - С. 79-90.

19. Исаев, В. А. Способ получения препарата коллагеназы : Пат. RU 2008353, МКИ5 С 12 N 9/64, С 12 N 9/48 / В. А. Исаев, Г. Н. Руденская, О. Г. Купенко, В. М. Степанов, И. М. Попова, Ю. Г. Диденко. Опубл. 28.02.94.

20. Казицына, Л. А. Применение УФ-, ИК-, ЯМР- и масс-спектроскопии в органической химии / Л. А. Казицына, Н. Б. Куплетская. — М.: Изд-во Моск. ун-та, 1979. 240 с.

21. Камчатский краб в Баренцевом море. Изд. 2-е, перераб. и доп. -Мурманск : Изд-во ПИНРО, 2003. - 383 с.

22. Климова, О. А. Коллагенолитический комплекс протеаз изгепатопанкреаса камчатского краба: разделение на индивидуальные компоненты / О. А. Климова, В. Ю. Чеботарев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. - Т. 128, № 9. - С. 308313.

23. Кнорре, Д. Г. Биологическая химия / Д. Г. Кнорре, С. Д. Мызина. М.: Высш. шк., 2002. - 479 с.

24. Компанцев, В. А. Разработка лечебных и профилактических препаратов на основе пектина и хитина / В. А. Компанцев, И. И. Самокиш, A. JI. Казаков, JI. П. Гокжаева // Научные труды ВНИИ фармации. 1990. -Т. 28.-С. 18-23.

25. Корн, Г. Справочник по математике (для научных сотрудников и инженеров) / Г. Корн, Т. Корн / Пер. с англ. М.: Наука, 1978. - 832 с.

26. Кочетков, Н. А. Химия углеводов / Н. А. Кочетков, А. Ф. Бочков и др. М.:Химия, 1967. - 672 с.

27. Кудинов, С. А. Способ получения комплекса протеолитических f ферментов: А. с. 933097 СССР, МКИЗ А 61 К 35/60 / С. А. Кудинов, Л. М. Эпштейн, М. В. Колодзейская, В. Н. Акулин, Т. Н. Пивненко. — Заявл. 29.05.80; № 2955550/28-13; Опубл. 07.06.82.

28. Кузьмина, В. В. Физиолого-биохимические основы экзотрофии рыб. М.: Наука, 2005. - 300 с.

29. Кулезнев, В. Н. Химия и физика полимеров: Учеб. для хим. -технол. вузов / В. Н. Кулезнев, В. А. Шершнев. М.: Высшая школа, 1988. -312 с.

30. Купина, Н. М. Характеристика протеолитических комплексов, выделенных из гепатопанкреаса крабов / Н. М. Купина, Н. А. Герасимова // Прикладная биохимия и микробиология, 1999. Т. 35, № 3. - С. 303-307.

31. Лакин, Г. Ф. Биометрия: Учеб. пособие для биол. спец. вузов / Г. Ф. Лакин / 4-е изд., перераб. и доп. М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.

32. Левин, В. С. Дальневосточный трепанг / В. С. Левин. -Владивосток, 1982.- 191 с.

33. Ленинджер, А. Биохимия. Молекулярные основы структуры и функций клетки / А. Ленинджер. М.: Мир, 1974. - 960 с.

34. Литвин, Ф. Е. Коллагенолитические протеазы из гепатопанкреаса камчатского краба: выделение и свойства: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Ф. Е. Литвин. -М., 1993.-20 с.

35. Манасова, Т. А. Липиды дальневосточного трепанга, их гликолипидемическое действие в эксперименте: Автореф. дис. канд. биол. наук, 1978.-40 с.

36. Манушин, И. Е. Трофические взаимоотношения камчатского краба с местной фауной; 8.11.2001 // Мурманские рыбные ресурсы; сайт: www.murfish.ru

37. Мухин, В. А. Кислая протеин аза из гепатопанкреаса камчатского краба Paralithodes camtschatica / В. А. Мухин, Н. Н. Немова и др. — Прикладная биохимия и микробиология, 1999. Т. 35, № 4, С. 409-412.

38. Мухин, В. А. Протеолитические ферменты в тканях некоторых морских беспозвоночных : Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1998. - 22 с.

39. Мухин, В. А. Ферментативные белковые гидролизаты тканей морских гидробионтов : получение, свойства и практическое использование / В. А. Мухин, В. Ю. Новиков. Мурманск : Изд-во ПИНРО, 2001. - 97 с.

40. Мухин, В. А. Рекомендации по рациональному использованию отходов переработки камчатского краба Баренцева моря / В. А. Мухин, В. Ю. Новиков // Камчатский краб в Баренцевом море. Изд. 2-е, перераб. и доп. - Мурманск: Изд-во ПИНРО, 2003. - С. 312-325.

41. Мухин, В. А. Протеолиз и протеолитические ферменты в тканях морских беспозвоночных / В. А. Мухин, В. Ю. Новиков. — Мурманск: Изд-во1. ПИНРО, 2002.-118 с.

42. Немова, Н. Н. Внутриклеточные протеолитические ферменты у рыб. Петрозаводск: КНЦ РАН, 1996. - 104 с.

43. Новиков, В. Ю. Кинетика реакции деацетилирования хитина и хитозана / В. Ю. Новиков, Т. А. Орлова, И. Э. Воронина // Изв. вузов. Пищ. технология. 1990. - № 5. - С. 64-67.

44. Новиков, В. Ю. Свойства хитинолитических ферментов гепатопанкреаса камчатского краба Paralithodes camtschaticus / В. Ю. Новиков, В. А. Мухин, К. С. Рысакова // Прикл. биохимия и микробиол. -2007. Т. 43, № 2. - С. 178-183.

45. Новые достижения в исследовании хитина и хитозана: Материалы Шестой международной конференции. Москва-Щелково, 22-24 октября, 2001. -М.: Изд-во ВНИРО, 2001. 398 с.

46. Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана: Материалы Пятой конференции. Москва Щелково, 25-27 мая, 1999. - М.: Изд-во ВНИРО, 1999. - 296 с.

47. Несмеянов, А. Н. Радиохимия. М.: Химия, 1972. - 592 с.

48. Нудьга, JI. А. О-Алкилирование хитозана / JT. А. Нудьга, Е. А. Плиско, С. Н. Данилов // Журнал общей химии. 1973. - Т. 43, №12. - С. 2752-2756.

49. Определитель фауны и флоры северных морей СССР / Под ред. Гаевской Н. С. -М.: Сов. наука, 1948. С. 431.

50. Орлов, Ю. И. Камчатский краб в Северо-Восточной Атлантике / Ю. И. Орлов // Рыбное хозяйство. 1993. - № 5. - С. 37-38.

51. Павлов, Г. М. Скоростная седиментация, молекулярная масса иконформационные параметры некоторых растворимых производных хитина / Г. М. Павлов, С. Г. Селюнин // Высокомолекул. соедин. А. 1986. - Т. 28, № 8.-С. 1727-1731.

52. Перечень критических технологий Российской Федерации (Утв. Президентом Российской Федерации В. В. Путиным 30 марта 2002 г. Пр-578).

53. Пивненко, Т. Н. Получение и характеристика белковых гидролизатов с использованием ферментных препаратов различной специфичности / Т. Н. Пивненко, Ю. М. Позднякова, В. В. Давидович // Изв. ТИНРО-центра , 1997. Т. 120. - С. 23-31.

54. Плиско, Е. А. Хитин и его химические превращения / Е. А. Плиско, Л. А. Нудьга, С. Н. Данилов // Успехи химии, 1977. Т. 46, № 8. -С. 1470-1488.

55. Руденская, Г. Н. Выделение и свойства карбоксипептидазы камчатского краба Paralithodes camtschatica / Г. Н. Руденская, О. Г. Купенко, В. А. Исаев, В. М. Степанов, Я. Е. Дунаевский // Биоорганическая химия, 1995. Т. 21, № 4. - С. 249-255.

56. Сафронова, Т. М. О роли гексозаминов в покоричневении мяса крабов в консервах / Т. М. Сафронова, Т. Д. Щиголева // Рыбное хоз-во. — 1973.-№9-С. 59-60.

57. Сахаров, И. Ю. Очистка и характеристика коллагенолитической протеазы из гепатопанреаса Paralithodes camtschatica / И. Ю. Сахаров, Ф. Е. Литвин, А. А. Артюков, Н. Н. Кофанова // Биохимия, 1988. Т. 53, № 11. -С. 1844-1849.

58. Сахаров, И. Ю. Способ получения коллагеназы / И. Ю. Сахаров,

59. A. В. Джунковская, А. А. Артюков, В. В. Сова, О. Г. Саканделидзе, Э. П. Козловская; Институт иммунологии и Тихоокеанский институт биоорганической химии: А. с. SU 1343591 А1, МКИ4 А 61 К 35 / 56. Заявл. 13.12.85 ; № 3992368 /28 - 14.-2 с.

60. Сахаров, И. Ю. Физико-химические свойства коллагенолитической протеазы С камчатского краба / И. Ю. Сахаров // Биохимия. 1992. - Т. 57, вып. 1. - С. 40-44.

61. Сенников, А. М. Результаты акклиматизации камчатского краба в Баренцевом море / А. М. Сенников // Материалы отчетной сессии по итогам НИР ПИНРО в 1992 г. Мурманск : Изд-во ПИНРО, 1993. - С. 210-219.

62. Сидоров, В. С. Активность лизосомальных ферментов у взрослых самок озерного лосося Saimo salar L. в период преднерестового созревания /

63. B. С Сидоров, Р.У. Высоцкая, Ю.А. Костылев // Вопр. ихтиологии. 1980. -Т. 20, вып. 4, № 123. - С. 713-718.

64. Скоупс, Р. Методы очистки белков. М.: Мир, 1985. - 358 с.

65. Сравнительная физиология животных. Т. 1. / Под ред. проф. Л. Проссера / Пер. с англ. под ред. чл.-корр. АН СССР Т. М. Турпаева. М.: Мир, 1977.-608 с.

66. Телишевская, Л. Я. Белковые гидролизаты. Получение, состав, применение / М. : Аграрная наука, 2000. - 296 с.

67. Технология рыбы и рыбных продуктов: учебник для ВУЗов / В. В. Баранов, И. Э. Бражная, В. А. Гроховский и др.; Под ред. А. М. Ершова. -СПб.: ГИОРД, 2006. 944 с

68. Технологическая инструкция № 9280-026-00472182-04 по изготовлению полуфабриката ферментного препарата: Утв. И. о. директора

69. ФГУП ПИНРО В. Л. Мишиным 14Л2.2004. 16 с.

70. Тимофеев, С. Ф. Макропланктон / С. Ф. Тимофеев // Биологические ресурсы прибрежья Кольского полуострова — Апатиты, 1995.- С. 46-52.

71. Уголев, А. М. Пищеварительные процессы и адаптация у рыб: Монография / А. М. Уголев, В. В. Кузьмина. СПб. : Гидрометеоиздат, 1993.-239 с.

72. Хочачка, П. Биохимическая адаптация / П. Хочачка, Дж. Сомеро.1. М.: Мир, 1988.-567 с.

73. Чеботок, Е. Н. Влияние кристалличности хитина и хитозана на кинетику щелочного деацетилирования / Е. Н. Чеботок, В. Ю. Новиков, И. Н. Коновалова // Журнал прикладной химии. 2007. - Т. 80 , № 10. - С. 1724-1729.

74. Шмид, Р. Неформальная кинетика. В поисках путей химических реакций / Р. Шмид, В. Н. Сапунов / Пер. с англ. М.: Мир, 1985. - 264 с.

75. Bade, M. L. Localization of moulting chitinase in incect culture / M. L. Bade // Biochem. et Biophys. 1974. - Vol. 372, No. 2. - P. 474-477.

76. Bade, M. L. Time pattern of appearance and disappearance of active molting chitinase in Manduca cuticle. The endogenus activity / M. L. Bade // FEBS Lett. 1975. - Vol. 51. - P. 161-163.

77. Bade, M. L. Structure and isolation of native animal chitins / M. L. Bade // Application of chitin and chitosan. Lancaster, Pennsylvania, USA: Technomic Publishing Company, Inc., 1997. - P. 255-277.

78. Bernier, I. Characterization of chitinases from haemolymph and cell cultures of cockroach {Periplaneta americana) / I. Bernier, J.-C. Landureau, P. Grellet, P. Jolles // Comparative Biochemistry and Physiology. Part B:

79. Biochemistry and Molecular Biology. 1974. - Vol. 47, No. 1. - P. 41-44.

80. Biochemical Organics Compounds for Research and Diagnostic Reagents : Catalog SIGMA. St. Louis, MO USA: Sigma Chemical Co., 1994. -2352 p.

81. Candy, D. J. Studies on chitin synthesis in the Desert Locust / D. J. Candy, B. A. Kilby // J. Exp. Biol. 1962. - Vol. 39, No. 1. - P. 129-140.

82. Chen, H.-C. Purification and characterization of a chitinase from Alteromonas haloplanktis K-12 / H.-C. Chen, M.-L.Yeh, S.-T. Jiang // Chitin Enzymology. Vol. 2 / Ed. by R.A.A. Muzzarelli. Grottammare, Italy: Atec Edizioni, 1996. - P. 253-260.

83. Colin, D. A. Etude comparee des systems enzymatiques chitinolytiques du tube digestive de quelquels teleosteens marins / D. A. Colin, G. Peres // Ann. Inst. Mishee Pacha. 1971. - № 4. - P. 1-9.

84. Cornelius, C. Biosynthesis of chitinases by mammals of the order carnivore. Biochem / C. Cornelius, G. Dandrifosse, C. Jeuniaux // Syst. and Ecol. 1975. - Vol. 3, No. 2. - P. 121-122.

85. Dandrifosse, G. Purification of chitinases contained in panereas or gastric mucosa of frog / G. Dandrifosse // Biochemie. 1975. - Vol. 57. - P. 829831.

86. Davies, G. Structures and mechanisms of glycosyl hydrolases / G. Davies, B. Henrissat // Structure, 1995. Vol. 3, No. 9. - P. 853-859.

87. Davis, B. Chitosanases: occurrence, production and immobilization / B. Davis, D. Eveleigh // Chitin, chitosan and related enzymes / Ed. by J. P. Zikakis. Orlando: Academic Press, 1984. - P. 161-179.

88. Davis, T. P. High-performance liquid chromatographic analysis of biogenic amines in biological materials as o-phthalaldehyde derivatives / T. P.

89. Davis, С. W. Gehrke, С. W. Gehrke, Jr., T. D. Cunningham, К. C. Kuo, К. O. Gerhardt, H. D. Johnson, С. H. Williams // J. Chromatogr. B: Biomedical Sciences and Applications. 1979. - Vol. 162, No. 3. - P. 293-310.

90. Deshpande, M. V. Enzymatic degradation of chitin and its biological applications / M. V. Deshpande // Journal of Scientific and Industrial Research. -1986. Vol. 45. - P. 273-281.

91. Domszy, J. G. Evaluation of infrared spectroscopic techniques for analysing chitosan / J. G. Domszy, G. A. F. Roberts // Die Makromolekulare Chemie. 1985. - Vol. 186, No. 8. - P. 1671-1677.

92. Faire, J. R. Crustacean and fish derived multifunctional enzyme / J. R. Faire, R. L. Franklin, J. Kay, R. Lindblom // US Pat. N 00594102 A. 1999.

93. Fukamizo, T. Mechanism of chitin hydrolysis by the binary chitinase system in insect moulting fluid / T. Fukamizo, K. Kramer // Insect Biochem. -1985. Vol. 15, № 2. - P. 141-145.

94. Fukamizo, T. Chitinolytic enzymes: catalysis, substrate binding, and their application / T. Fukamizo // Curr. Protein and Peptide Sci. 2000. - Vol. 1, № l.-P. 105-124.

95. Fukamizo, T. Comparative Enzymology of Chitinases from Plants and Microbes / T. Fukamizo // Chitin enzymology, 2001 / Ed. by R. A. A. Muzzarelli. Grottammare, Italy: Atec Edizioni, 2001. - P. 213-218.

96. Galgani, F. Digestive proteolysis and digestive proteinases in deep sea crabs Geryon offinis and Chionoecetes japonicus / F. Galgani, F. Nagayama // Bull. Jap. Soc. Sci. Fish. 1988. - Vol. 54, No. 6. - P. 983-987.

97. Gao, X. D. Purification and characterization of chitin deacetylase from Absidia coerulea / X. D. Gao, T. Katsumoto, K. Onodera // The Journal of Biochemistry (Tokyo). 1995. - Vol. 117, No. 2. - P. 257-263.

98. Goodrich, T. D. Incidence and estimation of chitinase activity associated with marine fish and other estuarine samples / T. D. Goodrich, R. Y. Morita // Marine Biology: Historical Archive. 1977. - Vol. 41, No. 4. - P. 349353.

99. Henrissat, B. A classification of glycosyl hydrolases based on amino acid sequence similarities / B. Henrissat // Biochemical Journal. 1991. - Vol. 280, Pt. 2. - P. 309-316.

100. Henrissat, B. New families in the classification of glycosyl hydrolases based on amino acid sequence similarities / B. Henrissat, A. Bairoch // Biochem. J. -1993. Vol. 293. - P. 781-788.

101. Hirano, S. Chitin biotechnology applications / S. Hirano // Biotechnol. Annu. Rev. -1996. Vol. 2, № 1. - P. 237-258.

102. Hohnke, L. A. Enzymes of chitin metabolism in the decapode

103. Hemigapsas nudus / L. A. Hohnke // Сотр. Biochem. Phisiol. 1971. - Vol.40, No.3.-P. 757-779.

104. Imoto, T. A simple activity measurement of lisozyme / T. Imoto, K. Yagishita // Agricultural and Biological Chemistry, 1971. Vol. 35, No. 7. - P. 1154-1156.

105. Smidsrod. Norway, Trondheim : NTNU, 2003. - P. 145-148.

106. Jeuniaux, C. Chitinases in digestive tract of vertebrates / C. Jeuniaux // Nature. 1961. - Vol. 192. - P. 135-136.

107. Jeuniaux, C. Chitinases of vertebrates and invertebrates / C. Jeuniaux // Arch. Int. Physiol. Biochem. 1963. - Vol. 71. - P. 307.

108. Jeuniaux, C. Chitine et chitinolyse / C. Jeuniaux. Paris: Masson, 1963. -181 p.

109. Jeuniaux C. Chitinases. In methods of Enzymology / C. Jeuniaux / Ed. by N. E. F. Ginsburg. 1966. - Vol. 8. - P. 644-650.

110. Khan, T. A. Reporting degree of deacetylation values of chitosan: the influence of analytical methods / T. A. Khan, К. K. Peh, H. S. Chang // Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Science. 2002. - Vol. 5, No. 3. - P. 205-212.

111. Kim, J. Agarase, amylase, cellulase and chitinase activity at deep-sea pressures / J. Kim, С. E. Zobell // J. Oceanogr. Soc. Jap. 1972. - Vol. 28. - P. 131-137.

112. Koga, D. Comparative biochemistry of insect and plant chitinases / D. Koga // Chitin Enzymology. Vol. 2. / Ed. Muzzarelli R. A. A. Grottammare,1.aly: Atec Edizioni, 1996. P. 85-94.

113. Kolodziejska, I. Properties of chitin deacetylase from crude extracts of Mucor rouxii mycelium / I. Kolodziejska, M. Malesa-Ciecwierz, A. Lerska, Z. Sikorski // Journal of Food Biochemistry, 1999. Vol. 23, No. 1. - P. 45-57.

114. Kumar, M. N. V. R Chitosan chemistry and pharmaceutical perspectives / M. N. V. R. Kumar, R. A. A. Muzzarelli, C. Muzzarelli, H. Sashiwa, A. J. Domb // Chemical Reviews, 2004. Vol. 104, No. 12. - P. 60176084.

115. Kumar, А. В. V. A comparative study on depolymerization of chitosan by proteolytic enzymes / А. В. V. Kumar, R. N. Tharanathan // Carbohydrate Polymers. 2004. - Vol. 58, No. 3. - P. 275-283.

116. Kurita, K. Controlled functionalization of the polysaccharide chitin / K. Kurita // Progress in Polymer Science. 2001. - Vol. 26, No. 9. - P. 19211971.

117. Lorito, M. Synergistic, antifungal interactions of chitinolytic enzymes from fungi, bacteria and plants / M. Lorito, S. L. Woo et al. // Chitin Enzymology. Vol. 2 / Ed. by R. A. A. Muzzarelli. Grottammare, Italy: Atec Edizioni, 1996. - P. 157-164.

118. McMurrough, I. Properties of a particulate chitin synthetase from Mucor / I. McMurrough, S. Bartnicki-Garcia // J. Biol. Chem. 1971. - Vol. 246. -P. 4008-4016.

119. Martin, M. M. The presence of chitinase in the digestive fluids of ants / M. M. Martin, M. J. Grieselmann, J. S. Martin // Сотр. biochem. phisiol. Part A. 1976. - Vol. 53, No 4. - P. 331-332.

120. Monreal, J. The chitinase of Serratia marcescens / J. Monreal, E. T. Reese // Canadian Journal of Microbiology. 1969. - Vol. 15, No. 7. - P. 689696.

121. Morrisey, R. F. Chitinase production by an Arthrobacter sp. lysing cells of Fusarium roseum / R. F. Morrisey, B. P. Dugan and J. S. Koths // Soil Biology and Biochemistry. 1976. - Vol. 8, No. 1 - P. 23-28.

122. Lin, H. Preparation of chitosan oligomers by immobilized papain / H. Lin, H. Wang, C. Xue, M. Ye // Enzyme and Microbial Technology. 2002. -Vol. 31, No. 5.-P. 588-592.

123. Lundblad, G. Chitinase in goat serum. Preliminary purification and characterization / G. Lundblad, B. Hederstect, J. Lind, M. Steby // Eur. J. Biochem. 1974. - Vol. 46. - P. 367-376.

124. Martin, M. M. The presence of protease activity in the rectal fluids of primitive attine ants / M. M. Martin, J. S. Martin // J. Insect. Physiol. 1971. -Vol. 17.-P. 1897-1906.

125. McWhile, M. Bload glucose in the crab Hemigrapsus nudus / M. McWhile, В. T. Scheer // Science. 1959. - Vol. 128. - P. 90-93.

126. Morrisey, R. F. Chitinase production by an Arthrobacter sp. lysing cells of Fusarium roseum / R. F. Morrisey, B. P. Dugan, J. S. Koths I I Soil Biology and Biochemistry. 1976. - Vol. 8, No. 1 - P. 23-28.

127. Muzzarelli, R. A. A. Chitin / R. A. A. Muzzarelli. Oxford, New York et al.: Pergamon Press, 1977. - 310 p.

128. Muzzarelli, R. A. A. The discovery of chitin, a > 570 Megayear old polymer / R. A. A. Muzzarelli // Chitosan in Pharmacy and Chemistry / Ed. by R. A. A. Muzzarelli and C. Muzzarelli. Grottammare, Italy: Atec Edizioni, 2002. -P. 1-8.

129. Muzzarelli, R. A. A. Depolymerization of chitosan with the aid of papain / R. A. A. Muzzarelli, M. Tomasetti, P. Ilari // Enzyme and Microbial Technology. 1994. - Vol. 16, No. 2. - P. 110-114

130. Nanjo, F. Purification and characterization of an exo-p-D-glucosaminidase, a novel type of Enzyme, from Nocarardia orientalis / F. Nanjo, R. Katsumi, K. Sakai // The Journal of Bioligical Chemistry. 1990. - Vol. 265, No. 17. - P. 10088-10094.

131. No, H. K. Preparation of chitin and chitosan / H. K. No, S. P. Meyers // Chitin Handbook / Ed. by R. A. A. Muzzarelli, M. G. Peter. Grottammare, Italy: Atec Edizioni, 1997. - P. 475-489.

132. No, H. K. Preparation and characterization of chitin and chitosan a review / H. K. No, S. P. Meyers // Journal of Aquatic Food Product Technology. - 1995. - Vol. 4, No. 2. - P. 27-52.

133. Bezouska, K. Oligosaccharide ligands for NKR-P1 protein activate NK cells and cytotoxicity / K. Bezouska, С. T. Yuen, J. O'Brien et al. // Nature. -1994. Vol. 372, № 6502. - P. 150-157.

134. Piavaux, A. B. Digestive tract -polysaccharidases of Ran a temporaria L. during growth and metamorphosis / A. B. Piavaux // Arch Int Physiol Biochim 1972. Vol. 80, No. 1. - P. 153-160.

135. Price, J. S. Production, purification, and characterization of an extracellular chitosanase from Streptomyces / R. Storck // Journal of Bacteriology. 1975. - Vol. 124, No. 3. - P. 1574-1565.

136. Pujalte, J. M. The basic treatment of osteoarthrosis / J. M. Pujalte, E. P. Llavore, F. R. Ylescupidez // Current Med. Res. and Opinion. 1980. - Vol. 7. -P. 110.

137. Raa, A. J. Purification and Characterization of chymotrypsin, trypsin and elastase like proteinases from cod Gadus morhua (L.) / A. J. Raa, B.T. Walther // Сотр. Biochem. Physiol. 1989. - Vol. 93 B, No. 2. - P. 317-324.

138. Reissing, J. L. A modified colorimetric method for the estimation of N-acetylamino sugars. / J. L. Reissing, J. L. Strominger, L. F. Leloir // The journal of biological chemistry. 1955. - Vol. 217, No 2. - P. 959-966.

139. Renaud, L. Le cycle des reserves organiqes chez les crustaces decapods / L. Renauld // Ann. Inst. Jceanog. (Paris). 1949. - Vol. 24. - P. 259557.

140. Roseman, S. Glucosamine metabolism. I. N-Acetylglucosamine deacetylase / S. Roseman // The Journal of Biological Chemistry. 1957. - Vol. 226, No. 115-123.

141. Sadorf, P. A. Chitosan: commercial uses and potential applications / P. A. Sadorf // Chitin and Chitosan / Ed. by G. Skjak-Braek, T. Anthonsen, P. A. Sadorf. Elsevier, 1989. - P. 51-69.

142. Samsinakova, A. Action of enzymatic systems of Beauveria bassiana on the cuticle of the greater wax moth larvae (Galleria mellonella) / A. Samsinakova, S. Misikova, J. Leopold // Journal of Invertebrate Pathology. -1971. -Vol. 18, No. 3. P. 322-330.

143. Schlumbaum, A. Plant chitinases are potent inhibitors of fungal growth / A. Schlumbaum, F. Mauch, K.Vogeli, T. Boiler // Nature. 1986. - Vol. 324, No. 11. - P. 365-367.

144. Shigemasa, Y. Enzymatic degradation of chitins and partially deacetylated chitins / Y. Shigemasa, K. Saito, H. Sashiwa, H. Saimoto // Int. J. Biol. Macromol. 1994. - Vol. 16, No. 1. - P. 43-49.

145. Skujins, J. Adsorption and reactions of chitinase and lysozyme on chitin / J. Skujins, A. Pukite, A. D. McLaren // Molecular and Cellular Biochemistry. 1973. - Vol. 2, No. 2. - P. 221-228.

146. Stefansson, J. Enzymes in the fishing industry / J. Stefansson // Food Technol. 1988. - Vol. 42, No. 3. - P. 64-65.

147. Tominago, Y. Purification and some enzymatic properties of the chitosanase from Bacillus R-4 which lyses Rhizopus cell walles / Y. Tominago, Y. Tsujisaka // Biochem. et biophys. acte. Enzymology. 1975. - Vol. 410, No. 1. -P. 141-155.

148. Toyoda, H. Suppression of the powdery mildew pathogen by chitinase microinjected into barley coleoptile cells / H. Toyoda, Y. Matsuda, T. Yamaga, S. Ikeda, M. Morita, T. Tamai, S. Ouchi // Plant Cell Rep. 1991. - Vol. 10, No. 5. - P. 217-220.

149. The 5th International Conference of the European Chitin Society (EUCHIS"02). Trondheim, Norway, 26-28 June, 2002: Abstract Book. Norway, Trondheim: The Norwegian University of Science and Technology, 2002. - 154 p.

150. Tronsmo, A. Chitinolytic enzymes from the biocontrol agent Trichoderma harzianum / A. Tronsmo, L. Hjeljord, S. S. Klemsdal et al. // Chitin Enzymology. Vol. 2. / Ed. by R. A. A. Muzzarelli. Grottammare, Italy: Atec Edizioni, 1996. - P. 235-244.

151. Vonk, H. J. Comparative aspects of digestion / H. J. Vonk // Comparative Biochemistry, Vol. 6 / Ed. by M. Florkin and H. S. Mason. New York: Academic Press, 1964. - P. 347-401.

152. Usui, T. Transglycosylation reaction of a chitinase purified from Nocardia orientalis / T. Usui, Y. Hayashi, F. Nanjo, K. Sakai, Y. Ishido // Biochim. Biophys. Acta. 1987. - Vol. 923, No. 2. - P. 302-309.

153. Van Ceillie, R. Rythmicle ensymatique saisonpiere ches ungasterropode d'eau douse. / R! Van Ceillie, A. Reusseau, C. Van Ceillie-Raron I I Ann. Limnol. 1973. - Vol. 9. - P. 1-10.

154. Varum, К. M. Acid hydrolysis of chitosans / K. M.Varum, M. H. Ottoy, O. Smidsrod // Carbohydrate Polymers. 2001. - Vol. 46, No. 1. - P. 8998.

155. Wang, T. Selected properties of pH-sensitive, biodegradable chitosan-poly(vinyl alcohol) hydrogel / T. Wang, M. Turhan, S. Gunasekaran // Polymer International. 2004. - Vol. 53. - P. 911-918.

156. Yatsunami, K. Changes in nitrogenous components and protease activity of fermented sardine with rice-bran / K.Yatsunami, T. Takenaka // Fish. Sci., 1996. Vol. 62, No. 62. - P. 790-795.

157. Yokoe, Y. Cellulase in invertebrates / Y. Yokoe, I. Yasumasu // Сотр. Biochem. Physiol. 1964. - Vol. 13. - P. 323-338.

158. Winicur, S. Chitinase activity during Drosophila development / S. Winicur, H. K. Mitchely // J. insect. Physiol. 1974. - Vol. 20, № 9. - P. 17951805.