Химико-токсикологический анализ тианептина и его метаболитов в биологических объектах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат фармацевтических наук Петухов, Алексей Евгеньевич

• Петухов, Алексей Евгеньевич
• кандидат фармацевтических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Петухов, Алексей Евгеньевич

Список сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Применение тианептина в медицине, клинические эффекты, фармакодинамика и фармакокинетика. Немедицинское использование.

1.1.1. Тианептин и его предшественники.

1.1.2. Механизм действия и клинические эффекты тианептина.

1.1.3. Фармакодинамика и фармакокинетика.

1.2. Физико-химические характеристики тианептина и методы анализа.

1.2.1. Физико-химические характеристики тианептина.

1.2.2. Методы анализа тианептина.

1.3. Валидация методик анализа.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Оборудование и материалы.

2.3. Обработка результатов исследования.

Глава 3. Результаты исследования и их обсуждение.

3.1. Физико-химические характеристики тианептина.

3.2. Анализ мочи иммунохимическими методами.

3.3. Выбор оптимальных условий изолирования тианептина из мочи.

3.4. Применение метода хромато-масс-спектрометрии в анализе тианептина и его метаболитов.

3.5. Метрологическая характеристика методики хромато-масс-спектрометрическго определения ТМС-производного тианептина.

3.6. Выбор оптимальных условий анализа методом тонкослойной хроматографии.

3.7. Анализ волос на наличие тианептина методом ГХ-МС.

3.8. Схема метаболизма тианептина на основании полученных экспериментальных данных.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Химико-токсикологический анализ тианептина и его метаболитов в биологических объектах»

Отличительной чертой современного оборота наркотиков в России является расширение их ассортимента, поскольку на рынке присутствует большое количество лекарственных средств (ЛС), обладающих одурманивающим действием при использовании их в больших дозах.

В настоящее время злоупотребления ЛС занимают одно из лидирующих мест среди употребления других наркотических средств (НС) и психотропных веществ (ПВ) [4, 7].

Список ЛС, злоупотребление которыми отмечается на территории РФ, ежегодно пополняется новыми медикаментами, поступающими на фармацевтический рынок [7].

В последнее время в России отмечается значительное увеличение немедицинского использования тианептина (Коаксила®), наличие антидепрессивного, противотревожного и рединамизирующего эффектов которого, доказано в целом ряде клинических исследований. По сравнению с другими трицикличе-скими антидепрессантами, тианептин имеет менее выраженные побочные эффекты. При употреблении тианептина в дозах, в десятки раз превышающих терапевтические, наблюдается мощный стимулирующий эффект [6].

Одним из направлений борьбы с наркоманией является проведение медицинского обследования подозреваемых с целью установления факта употребления наркотика, результаты которого зависят от лабораторного исследования биологических проб. Значение такого исследования резко возрастает с увеличением сроков, прошедших со времени последнего употребления наркотика. Поэтому создание новых методик определения психоактивных препаратов в биологических объектах является актуальной задачей токсикологической химии [7].

На сегодняшний день для определения тианептина в биологических объектах в основном применяется высокоэффективная жидкостная хроматография с УФ- (ВЭЖХ-УФ) или масс-селективным детектором (ВЭЖХ-МС).

Эти методы являются подтверждающими методами при проведении химико-токсикологического анализа (ХТА), в то время как предварительного метода для обнаружения тианептина в биологических объектах нет. Также методы ВЭЖХ-УФ и ВЭЖХ-МС являются сложными в плане пробоподготовки и, довольно дорогими. Далеко не в каждом регионе Российской Федерации в распоряжении химико-токсилогической лаборатории имеется такое оборудование.

Поэтому разработка методик анализа методами тонкослойной хроматографии (ТСХ), газовой хроматографии (ГХ) и газовой хроматографии - масс-спектрометрии (ГХ-МС) является актуальным.

Все вышесказанное определило цель и задачи исследования.

Цель и задачи исследования.

Целью настоящей работы явилось разработать подходы к химико-токсикологическому анализу тианептина и его метаболитов в моче и волосах при недавнем и отдаленном употреблении.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1) оценить возможность анализа тианептина иммунохимическими методами;

2) разработать методики пробоподготовки мочи и волос, обеспечивающие наибольшую эффективность экстракции;

3) подобрать оптимальные хроматографические условия для анализа тианептина и его метаболитов методами ТСХ, ГХ, ГХ-МС;

4) на основе результатов анализа ГХ-МС идентифицировать метаболиты тианептина;

5) на основании проведенных исследований предложить вероятную схему метаболизма тианептина в организме человека;

6) оценить возможность использования методик анализа в лабораторной практике путем их валидации.

Научная новизна.

Впервые разработаны оригинальные методики анализа тианептина и его метаболитов в моче и волосах методами ТСХ, ГХ, ГХ-МС.

Методами ГХ и ГХ-МС идентифицировано большинство метаболитов тианептина, описана их структурная формула и предложена вероятная схема метаболизма.

Практическая значимость.

Подобраны оптимальные условия пробоподготовки с учетом доступных реактивов и материалов, оценены возможности использования различных систем растворителей и хроматографических пластинок (для анализа методом ТСХ), а также различных капиллярных колонок и условий температурного режима (для анализа методом ГХ и ГХ-МС).

Показано, что разработанные методики анализа тианептина и его метаболитов в моче и волосах могут использоваться для установления факта недавнего и отдаленного употребления для целей химико-токсикологических и судеб-но-химических лабораторий.

Внедрение результатов в практику:

Описанные методики анализа тианептина и его метаболитов в моче и волосах внедрены и используются в практике Химико-токсикологической лаборатории (ХТЛ) Наркологической клинической больницы № 17 ДЗ г. Москвы (акт внедрения от 23 марта 2010 г. № 14), ХТЛ Наркологического диспансера №1 г. Тулы (акт внедрения от 22 декабря 2009 г.), ХТЛ ГУЗ «Ярославская областная наркологическая клиническая больница» (акт внедрения от 14 декабря 2009 г. № 1), ГУЗОТ «Пермское краевое бюро судебно-медицинской экспертизы» (акт внедрения от 5 октября 2009 г.).

Публикации результатов исследования.

По результатам диссертационного исследования опубликовано 6 печатных работ, в том числе 2 статьи в изданиях, рекомендуемых ВАК РФ.

Основные положения, выносимые на защиту.

1) Разработанные методики пробоподготовки и хроматографического анализа тианептина и его метаболитов в моче и волосах.

2) Схемы фрагментации и масс-спектры тианептина и его метаболитов.

3) Вероятная схема метаболизма тианептина в организме человека.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 110 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, выводов и списка литературы из 82 источников (66 из которых зарубежные). Работа иллюстрирована 24 рисунками и 24 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», Петухов, Алексей Евгеньевич

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. При определении тианептина в моче методами ИХА и ПФИА показана их неспецифичность, что исключает возможность их использования в качестве предварительных при проведении химико-токсикологического или судебно-химического анализа.

2. Разработаны методики пробоподготовки мочи и волос. Показано, что основной метаболит тианептина ЬМС5 изолируется из мочи как при кислых значениях рН (рН 3 - 4), так и при щелочных (рН 9 - 10). Кроме основного метаболита (МС5), в экстрактах, полученных при рН 3-4 также присутствуют дезалкилдезаминотианептин и дезалкилдезаминонортианептин, а в экстрактах, полученных при рН 9 - 10 - дезалкилтианептин и гидрокси-тианептин, метаболиты МСз и МС5. При этом на практике последние экстракты используются для выявления продуктов распада тианептина методами ТСХ, ГХ и ГХ-МС, а кислые, при необходимости, для подтверждения полученных результатов.

3. Подобраны оптимальные условия анализа тианептина и его метаболитов в моче методами ТСХ, ГХ и ГХ-МС, причем, возможно использование как кислых, так и щелочных экстрактов; в экстрактах из волос - методом ГХ-МС. При этом на практике ТСХ возможно использовать в качестве предварительного метода, а методы ГХ и ГХ-МС - в качестве подтверждающих.

4. Идентифицировано семь основных метаболитов тианептина масс-спектрометрическим анализом.

5. На основании полученных собственных экспериментальных данных предложена вероятная схема метаболизма тианептина в организме человека.

6. Показана возможность использования методик анализа тианептина и его метаболитов в практике химико-токсикологической лаборатории и Бюро судебно-медицинской экспертизы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Петухов, Алексей Евгеньевич, 2010 год

1. Анализ тианептина и его метаболитов в моче методом газовой хроматографии / А.Е. Петухов и др.. // Фармация. - 2010. - №3. - с.15-18.

2. Гнойно-некротические и сосудистые осложнения после парентерального введения «Коаксила» (тианептина) у больных с наркотической зависимостью / В.А. Ступин и др. // Наркология. 2008. - № 3. - с. 49-56.

3. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. 11-е изд., - М.: Медицина, 1989.-400 с.

4. Злоупотребление «Коаксилом» (тианептином) в качестве заместительного средства больными с героиновой зависимостью / B.C. Холодов и др. // Материалы Научно-практической конференции «Актуальные проблемы наркоманий», Москва, 29 30 марта 2007 г.

5. Инструкция по медицинскому применению препарата «Коаксил».

6. Крупицкий Е.М., Бураков A.M. Зависимость от «Коаксила»: сообщение о случае // Наркология. 2007. - № 1. - с.73-75.

7. Приказ МЗиСР РФ от 13 октября 2006 г. №703 «О внесении изменения в приказ МЗиСР РФ от 14 декабря 2005 г. №785».

8. Приказ МЗиСР РФ от 14 декабря 2005 г. № 785 «О порядке отпуска лекарственных средств» (в ред. Приказов Минздравсоцразвития РФ от2404.2006 № 302, от 13.10.2006 № 703, от 12.02.2007 № 109, от1202.2007 № 110, от 06.08.2007 № 521).

9. Разработка методики хромато-масс-спектрометрического анализа тианеп-тина в моче / А.Е. Петухов и др. // Вестник ВГУ. 2009. - № 2 (серия: химия, биология, фармация) - с. 174-180.

10. Рябцева A.A., Бардеева Ю.Н. Токсическое поражение органа зрения у инъекционных потребителей «Коаксила» (тианептина) // Наркология.2008. -№ 1. — с. 48-54.

11. Фармакология / Под ред. Р.Н. Аляутдина. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. -591 с.

12. Химико-токсикологический анализ тианептина и его метаболитов в моче / Г.В. Раменская и др. // Клиническая фармакология и терапия. 2009. -№6 (дополнительный). - с.18-19.

13. Шевцова Ю.Б. Особенности формирования зависимости от тианептина («Коаксила») // Наркология. 2008. - № 2. - с. 56-59.

14. ACD/ChemSketch (Advanced Chemistry Development, Inc), V. 9.05 DVDROM. (ограниченная доступность).

15. Acute and chronic tianeptine treatments attenuate ethanol withdrawal syndrome in rats / T. Uzbay et al. // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 2006. - № 30(3). - p. 478-485.

16. Addictive potential of Tianeptine the threatening reality / D. Vadachkoria et al. // Georgian Med. News. - 2009. - № 174. - p. 92-94.

17. A division of the American Chemical Society. URL: http://www.cas.org (дата обращения 21.12.2008).

18. Analgesic effect of tianeptine in mice / I.T. Uzbay et al. // Life Sci. 1999. -№64(15).-p. 1313-1319.

19. Barrick C.B. Sad, glad, or mad hearts? Epidemiological evidence for a causal relationship between mood disorders and coronary artery disease // J. Affect. Disord. 1999.-№53(2).-p. 193-201.

20. Baselt R.C. Disposition of toxic Drugs and Chemicals in Man // Biomedical Publications. 2004. - № 415(14). - p. 1105-1106.

21. Basic mechanisms of augmentation of antidepressant effects with thyroid hormone / T. Lifschytz et al. // Curr. Drug Targets. 2006. - № 7(2). - p. 203210.

22. Boyce P., Judd F., Hindmarch I. The behavioural toxicity of antidepressants: effects on cognition and sexual function // Int. Clin. Psychopharmacol. 1998. -№ 13(6).-p. 5-8.

23. British Pharmacopoeia (2007).

24. Bruce G., Charlton M.D. The malaise theory of depression: Major depressive disorder is sickness behavior and antidepressants are analgesic // Medical Hypotheses. 2000. - № 54. - p. 126-130.

25. Chronic administration of tianeptine balances lipopolysaccharide-induced expression of cytokines in the spleen and hypothalamus of rats / N. Castanon et al. // Psychoneuroendocrinology. 2004. - № 29(6). - p. 778-790.

26. Clark E.G.C. Analysis of drug and poisons. Vol 1-2. London: Pharmaceutical Press, 2004.

27. Clinical efficacy of tianeptine in patients with ischemic heart disease and com-orbid depression / G.V. Pogosova et al. // Kardiologiia. 2004. - № 44(3). -p. 20-24.

28. Delbende C. Effect of chronic treatment with the antidepressant tianeptine on the hypothalamo-pituitary-adrenal axis / C. Delbende et al. // Eur. J. Pharmacol. 1994. - № 251(2-3). - p. 245-251.

29. Dopamine agonist amineptine prevents the antidepressant effect of sleep deprivation / F. Benedetti et al. // Psychiatry Res. 1996. - № 65(3). - p. 179-184.

30. Effect of chronic treatment with the antidepressant tianeptine on the hypotha-lamo-pituitary-adrenal axis / C. Delbende et al. // Eur. J. Pharmacol. 1994. -№251(2-3).-p. 245-251.

31. Effect of repeated treatment with tianeptine and fluoxetine on central dopamine D(2)/D(3) receptors / M. Dziedzicka-Wasylewska et al. // Behav. Pharmacol. -2002.-№13(2).-p. 127-138.

32. Effect of tianeptine and fluoxetine on the levels of Met-enkephalin and mRNA encoding proenkephalin in the rat / M. Dziedzicka-Wasylewska et al. // J. Physiol. Pharmacol. 2002. - № 53(1). - p. 117-125.

33. Endogenous opioids mediate basal hedonic tone independent of dopamine d-1 or d-2 receptor activation / S. Narayanan et al. // Neuroscience. 2004. - № 124(1).-p. 241-246.jL

34. European Pharmacopoeia, 4 ed. (2002)

35. Evidence that serotonin reuptake modulators increase the density of serotonin innervation in the forebrain / L. Zhou et al. // J. Neurochem. 2006. - № 96(2). - p. 396-406.

36. Ewen B.S., Chattarji S. Molecular mechanisms of neuroplasticity and pharmacological implications: the example of tianeptine // Eur. Neuropsychopharma-col. 2004. - № 5. - p. 497-502.

37. Eye-blink rates and depression. Is the antidepressant effect of sleep deprivation mediated by the dopamine system? / D. Ebert et al. // Neuropsychopharma-cology. 1996. - № 15(4). - p. 332-339.

38. Fatal intoxication with tianeptine (Stablon®) / P. Proenca et al. // Forensic Science International. 2007. - № 170. - p. 200-203.

39. GC/MS analysis of tianeptine and its metabolites in human urine / A. Petuhov et al. // Basic & Clinical Pharmacology & Toxicology 2009. - № 105(1) -p.121.

40. Guillem E., Lepine J.P. Does addiction to antidepressants exist? About a case of one addiction to tianeptine // Encephale. 2003. - № 29(5). - p. 456-459.

41. High-performance liquid chromatographic determination of tianeptine in plasma applied to pharmacokinetic studies / J.M. Gaulier et al. // J. Chromatogr. B 2000. - № 748(2). - p. 407-414.

42. Ion-pair extraction and high-performance liquid chromatographic determination of tianeptine and its metabolites in human plasma, urine and tissues / G. Nicot et al. // J. Chromatogr. 1986. - № 381(1). - p. 115-126.

43. Khedr A. High-performance liquid chromatographic stability indicating assay method of tianeptine sodium with simultaneous fluorescence and UV detection // J. Chromatogr. Sci. 2007. - № 45(6). - p. 305-310.

44. Kinetic profiles of tianeptine and its MC5 metabolite in plasma, blood and brain after single and chronic intraperitoneal administration in the rat / W. Couet et al. // Eur. J. Drug. Metab. Pharmacokinet. 1990. - № 15. - p. 6974.

45. Labrid C., Mocaer E., Kamoun A. Neurochemical and pharmacological properties of tianeptine, a novel antidepressant // Br. J. Psychiatry Suppl. 1992. - № 15.-p. 56-60.

46. Local, but not systemic, administration of serotonergic antidepressants decreases hippocampal nitric oxide synthase activity / G. Wegener et al. // Brain Res. 2003. - № 959(1). - p. 128-134.

47. Lucassen P.J., Fuchs E., Czeh B. Antidepressant treatment with tianeptine reduces apoptosis in the hippocampal dentate gyrus and temporal cortex // Biol. Psychiatry. 2004. - № 55(8). - p. 789-796.

48. Magarinos A.M., Deslandes A., Ewen B.S. Effects of antidepressants and benzodiazepine treatments on the dendritic structure of CA3 pyramidal neurons after chronic stress // Eur. J. Pharmacol. 1999. - № 371(2-3). - p. 113-122.

49. Metabolic activation of the new tricyclic antidepressant tianeptine by human liver cytochrome P450 / D. Larrey et al. // Biochem. Pharmacol. 1990. - № 40.-p. 545-550.

50. Misuse of tianeptine: five cases of abuse / L. Leterme, et al. // Ann. Med. Interne (Paris). 2003. - № 154 (2) - p. 58-63.

51. Neurotransmitter changes by interferon-alpha and therapeutic implications / M. Schaefer et al. // Pharmacopsychiatry. 2003. - № 36(3). - p. 203-206.

52. Noväkovä E. Detection of new antidepressive agents using thin-layer chromatography // Soud Lek. 2004. - № 49(1). - p. 2-6.

53. Nucleus accumbens muscarinic receptors in the control of behavioral depression: antidepressant-like effects of local Ml antagonist in the Porsolt swim test / D.T. Chau et al. // Neuroscience. 2001. - № 104(3). - p. 791-798.

54. Oluyomi A.O., Datla K.P., Curzon G. Effects of the (+) and (-)-enantiomers of the antidepressant drug tianeptine on 5-HTP-induced behaviour // Neuropharmacology. 1997. -№ 36. - p. 383-387.

55. Paul I.A., Skolnick P. Glutamate and depression: clinical and preclinical studies // Ann. N.Y. Acad. Sei. 2003. - № 1003. - p. 250-272.

56. Plasticity at hippocampal to prefrontal cortex synapses is impaired by loss of dopamine and stress: importance for psychiatric diseases / T.M. Jay et al. // Neurotox Res. 2004. - № 6(3). - p. 233-244.

57. Pharmacokinetics and bioavailability of tianeptine in the elderly / D. Carlhant et al. // Drug Invest. 1990. - № 2. - p. 167-172.

58. Pharmacokinetics of the antidepressant tianeptine at steady state in the elderly / F. Demotes-Mainard et al. // J. Clin. Pharmacol. 1991. - № 31. - p. 174178.

59. Rosen R.C., Lane R.M., Menza M. Effects of SSRIs on sexual function: a critical review // J. Clin. Psychopharmacol. 1999. - № 19(1). - p. 67-85.

60. Saatcioglu O., Erim R., Cakmak D. A case of tianeptine abuse // Turk. Psikiya-tri Derg. 2006. - № 17(1). - p. 72-75.

61. Settle E.C. Antidepressant drugs: disturbing and potentially dangerous adverse effects // J. Clin. Psychiatry. 1998. - № 59(16). - p. 25-30.

62. SSRIs and cognitive performance in a working sample / E.J. Wadsworth et al. // Hum. Psychopharmacol. 2005. - № 52(12). - p. 121-127.

63. Switching to tianeptine in patients with antidepressant-induced sexual dysfunction / M. Atmaca et al. // Hum. Psychopharmacol. 2003. - № 18(4). - p. 277-280.

64. Synaptic plasticity and tianeptine: structural regulation / E. Fuchs et al. // Eur. Psychiatry. 2002. - № 3. - p. 311-317.

65. Tatar Ulu S. Determination of tianeptine in human plasma using highperformance liquid chromatography with fluorescence detection // J. Chroma-togr. B 2006. - № 834(1-2). - p. 62-67.

66. The metabolic pathways of tianeptine, a new antidepressant, in healthy volunteers / L. Grislain et al. // Drug. Metab. Dispos. 1990. - № 18. - p. 804-808.

67. Thyroid hormones in the rat amygdala as common targets for antidepressant drugs, mood stabilizers, and sleep deprivation / G. Pinna et al. // Biol. Psychiatry. 2003. - № 54(10). - p. 1049-1059.

68. Tianeptine and its main metabolite. Disposition in chronic renal failure and haemodialysis / C. Salvadori et al. // Fundam. Clin. Pharmacol. 1990. - № 4.-p. 663-671.

69. Treatment with tianeptine of depressive disorders in drug addicts under withdrawal. Assessment of efficacy and study of dependence / H. Loo et al. // Encephale. 1987. - № 13(5). - p. 295-299.

70. Tzschentke T.M. Glutamatergic mechanisms in different disease states: overview and therapeutical implications // Amino Acids. 2002. - № 23(1-3). - p. 147-152.

71. Ulu S.T. Determination of tianeptine in tablets by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection // J. AOAC Int. 2007. - № 90(3). - p. 720-724.

72. United States Pharmacopoeia, 29th revision (2008)

73. Vyas A., Bernal S., Chattarji S. Effects of chronic stress on dendritic arborization in the central and extended amygdale // Brain Res. 2003. - № 965(1-2). - p. 290-294.

74. WADA Technical Document TD2003IDCR, v. 1.2, January 1, 2004

75. Wagstaff A J., Ormrod D., Spencer C.M. Tianeptine: A review of its use in depressive disorders // CNS Drugs. 2001. - № 15(3). - p. 231-259.

76. Wilde M.I., Benfield P. Tianeptine: a review of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties, and therapeutic efficacy in depression and coexisting anxiety and depression // Drugs. 1995. - № 49. - p. 411-439.

77. Wise T.N., Arnold L.M., Maletic V. Management of painful physical symptoms associated with depression and mood disorders // CNS Spectr. 2005. -№ 10.-p. 1-13.

78. Wojciech L. Complex intoxication by tramadol and tianeptine: a case report // XLIV. — 2000. № 17.-p. 130-139.