Химический состав и биологическая активность гидрофильных фракций из соцветий бархатцев распростертых (Tagetes patula L.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат наук Червонная, Надежда Михайловна

• Червонная, Надежда Михайловна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Червонная, Надежда Михайловна

ОГЛАВЛЕНИЕ

5

Глава 1 Химический состав и фармакологически активные компоненты соцветий бархатцев распростертых (Tagetes patula L.)

(Обзор литературы)

1.1 Флавоноиды как антиоксиданты

1.2 Эндотелиопротекторы

Выводы по обзору литературы

Глава 2 Изучение химического состава извлечения из соцветий бархатцев распростертых (Tagetes patula L.), полученного экстракцией сырья

спиртом этиловым 40%

2.1 Обсуждение результатов

2.1.1 Содержание антиоксидантов в различных извлечениях из соцветий бархатцев распростертых

2.1.2 Определение фенолокислот

2.1.3 Флавоноиды

2.1.4 ВЭЖХ фенольных соединений Э-40%Б1

2.1.5 Дубильные вещества

2.1.6 Органические кислоты

2.1.7 Производные тиофена

2.1.8 Аминокислоты

2.1.9 Элементный состав

2.2 Экспериментальная часть

2.2.1 Антиоксиданты

2.2.2 Полифенольный состав

2.2.3 Определение фенольных соединений в Э-40%Б1 методом

ВЭЖХ

2.2.4 Определение дубильных веществ

2.2.5 Определение производных тиофена

Выводы по главе 2

Глава 3 Выделение и идентификация индивидуальных соединений

3.1 Выделение индивидуальных соединений

3.2 Идентификация исследуемых веществ

Выводы по главе 3

Глава 4 Получение стандартного образца патулетина из соцветий

бархатцев распростертых (Tagetes patula L.)

4.1 Выделение патулетина из соцветий бархатцев распростертых

4.2 Физические характеристики исследуемого вещества

4.2.1 ИК-спектроскопия

4.2.2 ЯМР-1Н- и 13С-спектроскопия

4.2.3 Масс-спектроскопия исследуемого вещества

4.3 Стандартизация патулетина

4.4 Количественное определение суммы флавоноидов в 3-40%Et

4.4.1 Валидация методики количественного определения суммы

флавоноидов

Выводы по главе 4

Глава 5 Физико-химические характеристики пектиновых веществ,

выделенных из шрота соцветий бархатцев распростертых

5.1 Выделение полисахаридных комплексов

5.2 Определение средней молярной массы

5.3 Определение изоэлектической точки

5.4 Определение поверхностной активности

5.5 Определение сорбционной емкости

5.6 Определение коэффициента распределения ПВ методом in vitro

Выводы по главе 5

Глава 6 О фармакологической активности извлечения, полученного экстракцией спиртом этиловым 40% соцветий бархатцев распростертых (Tagetes patula L.)

6.1 Изучение антиоксидантной активности Э-40%Б1 в отношении радикалов на различных модельных смесях

6.2 Влияние Э-40%Б1 на заживление ран у крыс с экспериментальным сахарным диабетом

6.3 Изучение влияния Э-40%Б1 на вазодилатирующую и антитромбическую функции эндотелия сосудов головного мозга

6.4 Изучение влияния патулетина на вазодилатирующую функцию эндотелия сосудов головного мозга

Выводы по главе 6

Заключение

Список литературы

Приложения

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Химический состав и биологическая активность гидрофильных фракций из соцветий бархатцев распростертых (Tagetes patula L.)»

Введение

Актуальность темы исследования. В настоящее время продолжают оставаться актуальными исследования по созданию лекарственных средств растительного происхождения, характеризующихся низкой токсичностью, достаточной фармакологической эффективностью и широтой терапевтического действия в сочетании с относительной безопасностью и возможностью длительного применения. В связи с этим интерес представляют растения, содержащие полифенольные соединения, которые опосредованно через ферментные системы регулируют окислительно-восстановительные процессы, определяющие состояние клеточной мембраны. С этой точки зрения бархатцы распростертые (Tagetes patula L.) представляют собой сырьевой источник с богатым и разнообразным составом полифенолов. Настои и отвары бархатцев широко используются в народной медицине в качестве антимикробных, гипотензивных, гепатопротекторных и мочегонных средств.

Благодаря своей неприхотливости, бархатцы распростертые широко интродуцированы во многих эколого-географических районах России, а селекционерами созданы многочисленные сорта, отличающиеся высотой, размером соцветий, их окраской, сырьевой массой.

Своевременным и важным является также разработка технологии получения стандартного образца патулетина, так как этот флавоноид является доминирующим для рода Tagetes (Asteraceae) и характерен для растений некоторых других семейств.

Актуальность данной работы заключается в изучении химического состава и фармакологической активности извлечения, полученного из соцветий бархатцев сорта «Carmen» экстракцией спиртом этиловым 40%. Данное исследование проводится впервые и дополнит общую картину химического состава и фармакологических свойств бархатцев распростертых.

Степень разработанности темы исследования. Соцветия бархатцев распростертых (Tagetes patula L.) являются ценным источником биологически активных веществ (БАВ), преимущественно, флавоноидов, что подтверждается

исследованиями, посвященными изучению, как химического состава, так и фармакологической активности различных фракций и выделенных индивидуальных веществ. Интерес представляет также комплексное использование шрота соцветий как дополнительного источника биологически активных соединений.

Следует отметить, что важной задачей остается разработка стандартного образца патулетина. Ранее была попытка получения стандарта патулетина из цветков бархатцев, однако эти исследования дальнейшего развития не получили, поскольку не были доведены до логического завершения и соответствующая документация не была представлена в Научный центр экспертизы средств медицинского применения.

Цель и задачи исследований. Учитывая вышеперечисленное, мы сочли целесообразным провести комплексное изучение соцветий бархатцев распростертых (Tagetes patula L.), а также разработать технологию получения стандарта патулетина, что собственно, является целью наших исследований.

В связи с поставленной целью мы сочли целесообразным решить следующие задачи:

• осуществить предварительный фармакологический скрининг фракций, полученных экстракцией соцветий бархатцев распростертых сорта «Carmen» спиртом этиловым различной концентрации;

• изучить химический состав извлечения, проявившего наиболее выраженную фармакологическую активность;

• осуществить идентификацию индивидуальных соединений в анализируемом извлечении;

• разработать технологию получения стандартного образца патулетина из сырья (соцветий бархатцев распростертых сорта «Carmen»);

• провести количественное определение суммы флавоноидов в анализируемом извлечении;

• из шрота соцветий бархатцев выделить пектиновые вещества и изучить их физико-химические свойства;

• провести фармакологическое исследование патулетина и анализируемого извлечения.

Для решения поставленных задач предполагается использовать современные химические и физико-химические методы исследования.

Научная новизна исследования заключается в том, что впервые осуществлено углубленное изучение химического состава извлечения, полученного экстракцией спиртом этиловым 40%. Обоснован выбор экстрагента для данного объекта. Приоритетным направлением является изучение и установление химического состава анализируемого извлечения с целью получения субстанции, обладающей ранозаживляющей активностью.

Установлен качественный и количественный состав основных групп БАВ в анализируемом извлечении: флавоноидов, фенолкарбоновых и органических кислот, дубильных веществ, аминокислот, макро- и микроэлементов, производных тиофена.

Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) идентифицированы фенольные соединения. Впервые выявлено наличие дубильных веществ танина, кислоты галловой, эпигаллокатехин галлата. Выявлены различия в количественном содержании дубильных веществ в обертках и цветках соцветий бархатцев, а также обоснован выбор наиболее оптимального экстрагента для их извлечения.

Методом препаративной колоночной хроматографии выделены 4 вещества, которые на основании данных физико-химического анализа идентифицированы как патулетин, патулитрин, кверцетин, кислота кофейная.

Предложен способ получения стандарта патулетина, структура которого

1 13

доказана такими физико-химическими методами, как ЯМР-Щ 13^, масс-, ИК-, УФ-спектроскопия, а в соответствии с требованиями ГФ XIII проведены исследования, предъявляемые к стандартным образцам.

Из шрота, остающегося после экстракции сырья спиртом этиловым 40%, выделены пектиновые вещества и гравиметрически установлено их высокое содержание. Кислотным гидролизом установлен их моносахаридный состав.

Изучены такие физико-химические свойства пектиновых веществ, как средняя молярная масса, константа Хаггинса, поверхностная активность, изоэлектрическая точка, коэффициент распределения. Выявлена комплексообразующая способность по отношению к ионам свинца: степень связывания ионов Pb2+ пектином из шрота соцветий бархатцев составляет 29,2%.

Фармакологические исследования показали, что извлечение, полученное спиртом этиловым 40%, проявляет антиоксидантное, ранозаживляющее, эндотелиопротекторное действие. Установлено также, что анализируемое извлечение и патулетин оказывают благоприятное влияние на вазодилатирующую и антитромботическую функцию эндотелия сосудов головного мозга на фоне его фокальной ишемии экспериментальных животных.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Теоретическая значимость

Проведенные исследования являются достаточным обоснованием, позволяющим расширить сырьевую базу отечественных лекарственных растений с целью последующей разработки лечебно-профилактических средств на основе бархатцев. Разработка стандарта патулетина дополнит каталог стандартных образцов, что в дальнейшем может использоваться в фармакопейном анализе.

Практическая значимость

«Результаты фармакологического исследования извлечения из соцветий бархатцев распростертых (Tagetes patula L.), полученного экстракцией 40% спиртом этиловым» (акт внедрения от 18.04.2017 г.) внедрены на кафедре фармакологии с курсом клинической фармакологии Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ФГБОУ ВО ВолгГМУ МЗ РФ.

«Модифицированный способ получения патулетина из соцветий бархатцев распростертых сорта «Carmen»» внедрен в учебный процесс кафедры фармакогнозии для студентов, обучающихся по специальности «Фармация» на III курсе по теме: «Фитохимический анализ лекарственного растительного сырья, содержащего фенольные соединения» (акт внедрения от 22.03.2017 г.).

Материалы по технологии получения и аналитическим характеристикам стандарта природного флавоноида - патулетина, выделенного из соцветий бархатцев распростертых (Tagetes patula L.) приняты к рассмотрению Центром фармакопеи и международного сотрудничества ФГБУ «НЦЭСМП» Министерства здравоохранения Российской Федерации от 10.08.2017 г. №15426.

Методология и методы исследования. Изучение и обобщение литературных данных об объекте исследования, а также оценка актуальности и разработанности темы является методологической основой настоящей диссертационной работы. Для качественного и количественного определения основных групп БАВ, выделения и идентификации индивидуальных соединений

использовали различные физико-химические методы: хроматографию, ВЭЖХ,

1 1 ^

титриметрический анализ, УФ-спектрофотометрию, ЯМР- Н-, С-, масс-спектроскопию, ИК-спектроскопию. Фармакологические исследования построены на методологии классической фармакологии. Положения, выносимые на защиту:

1. Совокупность данных по изучению химического состава извлечения из соцветий бархатцев, полученного спиртом этиловым 40%.

2. Препаративные методы выделения индивидуальных веществ.

3. Технология получения стандартного образца патулетина.

4. Результаты изучения физико-химических свойств пектиновых веществ.

5. Данные фармакологического исследования анализируемого извлечения и патулетина.

Степень достоверности и апробация результатов. Значительный объем информационной базы, экспериментальные исследования, проведенные с использованием современных методов анализа, определяют степень достоверности полученных результатов. Полученные данные обработаны статистически с помощью компьютерных программ. Методика количественного определения флавоноидов валидирована.

Основные положения диссертационной работы были представлены и доложены на научно-практических конференциях: «Беликовские чтения» (г.

Пятигорск, ПМФИ - филиал ВолгГМУ, 2015 г.); на 74-ой и 75-ой открытой научно-практической конференции молодых ученых и студентов ВолгГМУ с международным участием «Актуальные проблемы экспериментальной и клинической медицины» (г. Пятигорск, ПМФИ - филиал ФГБОУ ВО ВолгГМУ МЗ РФ, 2016-2017 гг.).

Личный вклад автора. При выполнении работы диссертант принимал непосредственное участие на всех этапах научно-практического исследования. Автором самостоятельно осуществлен сбор информации об объекте, проведен экспериментальный анализ, выполнена статистическая обработка полученных результатов, подготовлены основные публикации по теме диссертационной работы, сформулированы выводы и оформлена диссертация.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 147 страницах компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, 5 глав экспериментальной части, заключения, списка литературы и приложения. В тексте содержится 43 таблицы, 55 рисунков. Список литературы включает 149 источников, из них - 24 на иностранных языках.

Глава 1 Химический состав и фармакологически активные компоненты соцветий бархатцев распростертых (Tagetes patula L.)

(Обзор литературы)

Химический состав наиболее распространенных видов растений рода Tagetes представлен богатым набором биологически активных веществ, относящихся к различным классам органических соединений.

Имеются сведения о строении и фармакологической активности некоторых флавоноидов, специфичных для растений рода Tagetes. Так, например, для кверцетагетина и патулитрина доказана антиоксидантная, противовоспалительная и противоопухолевая активности [94,129].

Эфирное масло, получаемое в процессе обработки цветков бархатцев Tagetes minuta L., находит применение в парфюмерно-косметической промышленности. Для профилактики вирусных инфекций и острых респираторных заболеваний применяют гомеопатический препарат на основе масла - «Тагетон» [13,55,65,69,92].

Каротиноиды из цветков Tagetes erecta L. - лютеин и зеаксантин используют в качестве биологически активных добавок [72,73,131].

В корнях трех видов бархатцев (Tagetes patula L., Tagetes erecta L., Tagetes tenuifolia Cav.) обнаружены производные тиофена, обладающие фунгицидными свойствами [38,139]. В некоторых работах приводятся данные об их накоплении в цветках бархатцев распростертых. Возможно, именно наличием этого класса соединений обусловлено антимикробное действие цветков [78,149].

Проводились исследования флавоноидного состава семян Tagetes patula L. (низкорослой и высокорослой форм), и методом препаративной колоночной хроматографии выделены патулетин и патулитрин. Из семян Tagetes erecta L. выделены кверцетагетин и кверцетагитрин [52].

Разработан способ одновременного получения патулетина и патулитрина из растительного сырья [82].

Из разных частей соцветий бархатцев распростертых выделены изокверцитрин, кверцимеритрин, изорамнетин и его гликозид, а также производные хинной кислоты [54].

Химический состав, биологическая и фармакологическая активность цветков бархатцев распростертых Tagetes patula L. сорта «Orange» изучались на кафедре органической химии ПятГФА. Было доказано, что в цветках бархатцев главными флавоноидами являются патулетин и патулитрин, осуществлено их препаративное выделение. Содержание флавоноидов в сырье в пересчете на патулетин составляет 9,43% [86].

Доказано также наличие рутина, кверцетина, дигидрокверцетина, робинина, лютеолин-7-глюкозида, виценина, витексина, гиперозида и апигенина; изучен витаминный, аминокислотный состав, полисахаридный комплекс, а также содержание макро- и микроэлементов различных фракций [36,86].

Экспериментально доказана гепатопротекторная активность суммы флавоноидов, содержащей преимущественно флавонол патулетин. По совокупности выявленных биохимических показателей, гистологической и морфологической картине печени данная сумма в несколько раз превышает действие Карсила в эквивалентной дозе [17,31,83,103].

Показано, что применение флавоноидов из цветков бархатцев распростертых в лечебных и лечебно-профилактических целях способствует более эффективному сохранению и восстановлению про/антиоксидантного равновесия, повышению эффективности детоксикации, а также усиливается антиоксидантная защита. Установлено более выраженное стимулирующее влияние на процессы желчеобразования и желчевыделения, чем при аналогичном использовании Карсила [21,22,88].

Изучено антимикробное действие субстанций из цветков бархатцев и установлено, что экстракт, полученный спиртом этиловым 70%, оказывает бактерицидное и бактериостатическое действие в отношении некоторых видов бактерий [78].

Установлено также, что экстракты из цветков бархатцев распростертых проявляют гастропротекторное действие в условиях экспериментальной гастропатии у крыс [44,46,79].

Теоретически обоснована и экспериментально разработана технология экстракции цветков бархатцев распростертых, позволяющая извлечь липофильные вещества, характеризующиеся широким спектром биологической активности. В качестве экстрагента был использован спирт этиловый 70%. На основании этих исследований была разработана технология получения капсул, содержащих сухой экстракт цветков бархатцев и кверцетин с оптимальной дозировкой обоих компонентов, а также предложены методики их стандартизации. В эксперименте на лабораторных животных показано, что полученные капсулы полностью предотвращают активацию перекисного окисления липидов в печени при ее поражении тетрахлорметаном [91].

Методом влажного гранулирования были получены гранулы, содержащие сухой и масляный экстракты из цветков бархатцев [34,35,85].

Бархатцы распростертые известны своими фитохимическими и лекарственными свойствами. Настои и отвары из цветков используются в народной медицине и гомеопатии при лечении заболеваний верхних дыхательных путей, в качестве антимикробного, антисептического, гипотензивного, потогонного и мочегонного средства. Кроме того, цветки бархатцев употребляют в пищу, добавляют в освежающие напитки в Латинской Америки и Грузии. Патулетин входит в состав БАД, например, «Гепатолептин», применяется в качестве средства, улучшающего функциональное состояние печени и желчевыводящих путей. Используют для профилактики и в комплексной терапии холециститов, холецистохолангитов, холангитов и холангиогепатитов [62].

Таким образом, экспериментальными исследованиями

доказаны антиоксидантная, противовоспалительная, гепатопротекторная, гастропротекторная, антимикробная, противогрибковая активности биологически активных веществ, входящих в состав цветков бархатцев различных видов и сортов.

1.1 Флавоноиды как антиоксиданты

Флавоноиды относятся к числу широко распространенных природных полифенолов, повышенный интерес к которым можно объяснить их исключительно уникальными свойствами. Они обладают широким спектром фармакологической активности, включающим в себя: антиоксидантную, противовирусную, гипогликемическую, иммуномодулирующую активность [110]. С точки зрения практического использования флавоноидов, наибольший интерес представляют их антиоксидантные свойства [89,94].

Кроме того, многие представители этого класса способны действовать в качестве агентов, предотвращающих или тормозящих образование опухолей, укрепляющих кровеносные сосуды, защищающих печень и желудочно-кишечный тракт, стимулирующих работу мозга и сердца [51,71].

Флавонолы - кемпферол, лютеолин, кверцетин, мирицетин, содержащие от двух до шести фенольных OH-групп, в 2-4 раза превосходят Тролокс по способности ингибировать перекисные радикалы [89].

Известно, что кверцетин и лютеолин на одинаково высоком уровне способствуют обезвреживанию пероксида водорода, ингибируют генерацию супероксидного анион-радикала, который играет ключевую роль в образовании других активных форм кислорода, и угнетают перекисное окисление липидов мембраны [3,20,51,129].

Многочисленные экспериментальные исследования позволили определить наиболее важные для антиоксидантной активности структурные фрагменты флавоноидов: во-первых, это наличие орто-дигидроксигрупп в положениях C3' и C4', что представляют собой наиболее предпочтительную мишень для атаки радикалов. Во-вторых, это система, включающая виниленовую группу в положении С2-С3 и карбонил в положении C4, которые вместе с ароматическим ядром «B», по существу, составляют главную цепь сопряжения в флавонах, флавонолах и халконах. Именно главная цепь сопряжения ответственна за передачу электронных эффектов от кольца «B» к хромоновому ядру. В-третьих, наличие гидроксигрупп в положениях С3 и С5 совместно с карбонильной группой

в положении С4 обеспечивают эффективное связывание ионов железа (Fe ) и ингибирование образующихся радикалов в реакциях разложения гидроперекисей [89].

Благодаря сбалансированной работе ферментативного и неферментативного звена антиоксидантной системы в здоровом организме поддерживается интенсивность перекисного окисления липидов и уровень свободно-радикальных и перекисных форм кислорода.

Таким образом, флавонолы благодаря перечисленным выше трем важным для антиоксидантного действия структурным группировкам, как правило, проявляют наиболее высокую антиокислительную активность в исследованиях in vitro [7,89].

1.2 Эндотелиопротекторы

Известно, что эндотелиальная дисфункция является одной из основных причин развития практически всех сердечно-сосудистых заболеваний. Это универсальный патофизиологический процесс, с которым в той или иной мере ассоциирован целый ряд заболеваний, в том числе и социально значимых, таких как атеросклероз, артериальная гипертензия, сахарный диабет, нарушение мозгового кровообращения [123].

При срыве эндотелиального механизма регуляции мозговой гемодинамики смещается равновесие в системах «вазодилататоры - вазоконстрикторы» и «антиагреганты - проагреганты», как следствие наблюдается сдвиг сосудистого тонуса в сторону вазоконстрикции и возрастает тромбогенный потенциал крови, что может усугубить течение ишемического инсульта. Нормальное состояние эндотелия мозговых сосудов, напротив обеспечивает равновесное состояние в перечисленных системах (вазодилатирующая и антитромботическая функции эндотелия), обеспечивая тем самым адекватное кровоснабжение головного мозга [39].

Одной из многочисленных областей применения полифенольных соединений является коррекция эндотелиальной дисфункции [122]. Известно, что

в этиопатогенезе дисфункции эндотелия сосудов лежит инициация свободнорадикальных процессов с гипрепродукцией токсического пероксинитрита [118].

Патогенетические факторы приводят к дисбалансу между про- и антиоксидантами в организме, что приводит к увеличению количества свободных радикалов и, как следствие, к избыточному накоплению токсичных продуктов. Предупредить или замедлить, к примеру, развитие сосудистых осложнений при сахарном диабете можно с помощью антиоксидантной терапии [14,19,68,98].

Причиной сосудистых осложнений при сахарном диабете является развивающаяся эндотелиальная дисфункция, при которой отмечаются нарушения в системе синтеза и доступности оксида азота (II) [97,100,140,142].

Оксид азота (II) образуется в клетках эндотелия кровеносных сосудов, фагоцитах, нервных клетках и других в процессе окисления L-аргинина молекулярным кислородом с участием гемсодержащих ферментов, называемых NO-синтазами (NOS). Из NO образуется нитроксильный радикал, который является «фактором релаксации» эндотелия. Он играет ключевую роль в регуляции тонуса сосудов, и нарушение его метаболизма приводит к гипертонии и болезням, связанным с нарушением кровяного давления [16].

Регулирование синтеза NO осуществляется NO-синтазой, для которой известны три изоформы NOS-1 (нейрональная или nNOS), NOS-2 (макрофагальная или iNOS), NOS-3 (эндотелиальная или eNOS) [64,95].

Все изоформы NOS участвуют в образовании оксида азота (II), но каждая из них имеет свои свойства в локализации, механизмах действия, а также в биологическом значении для организма [16,137].

С одной стороны, молекула оксида азота, продуцируемая под влиянием iNOs, находясь в макрофагах, обеспечивает антимикробный эффект. С другой стороны, превращаясь в пероксинитрильный радикал, участвует в разрушении Р-клеток поджелудочной железы [95].

Под влиянием eNOS образуется оксид азота (II), который обладает вазодилатирующими свойствами, регулирует тромбообразование и адгезию

тромбоцитов к поверхности сосудов за счет подавления действия вазоконстрикторов, вследствие чего улучшается кровоснабжения в ране. Блокада эндотелиальной NO-синтазы, а также нарушения в работе NO-системы вызывают снижение показателей микроциркуляции в поврежденной области [71].

Известно, что флавоноиды - кверцетин, гесперидин, флавицин - способны опосредованно влиять на выработку эндогенного оксида азота (II), улучшать вазодилатирующую и антитромботическую функцию эндотелия, реологию крови и микроциркуляцию, оказывать стимулирующее влияние на ангиогенез и коллагенообразование в ране, вследствие чего будет ускоряться заживление ран. Изучено положительное их влияние на углеводный и липидный обмен у животных с экспериментальным сахарным диабетом [97,141,143].

Помимо непосредственно цитотоксических свойств, свободные радикалы могут привлечь различные воспалительные медиаторы, способствуя пролонгированию воспалительной реакции и повреждению тканей. Флавоноиды, в данном случае, ингибируют липоксигеназу, что сокращает сроки воспаления в раневых зонах [89].

Флавоноиды обладают комплексной фармакологической активностью, способностью влиять на различные звенья развития эндотелиальной дисфункции: на систему синтеза, выделения и биодоступности N0, гемореологические параметры крови, липидный и углеводный обмен, воспаление, пролиферацию

[71].

Применение флавоноидов как антиоксидантных и эндотелиопротекторных средств перспективно при лечении ран, поскольку они способны стабилизировать продукцию эндогенного оксида азота конститутивной формой синтазы и дополнительно препятствовать повышенному образованию свободных радикалов [63,123].

Преимущества биологически активных веществ растительного происхождения очевидны по многим причинам, поэтому поиск среди них эндотелипротекторов является перспективным направлением в области фармации и медицины.

Учитывая вышесказанное, бархатцы распростертые являются перспективным источником флавоноидов, содержащих 2 высокоактивных производных флавона - патулетин и патулитрин.

Флавоноиды соцветий бархатцев ингибируют воспаление, экспрессию индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS), простаноидов и лейкотриенов, а тацже других медиаторов воспалительного процесса (некоторых цитокинов и хемокинов) [130,141].

На модели оценки антиоксидантного действия с 1,1-дифенил-2-пикрилгидразилом патулетин и патулитрин проявили выраженные акцепторные свойства к свободным радикалам [133].

Исследования последних лет показали иммуномодулирующее действие патулетина, в частности, в отношении ФНО-а (фактора некроза опухоли). Кроме того, выявлена противоартритная активность, за счет влияния на продукцию противовоспалительных цитокинов [84].

Таким образом, существующая информация о химическом составе соцветий бархатцев распростертых позволяет использовать их в качестве сырья для получения субстанции, обладающей эндотелиопротекторной активностью.

Выводы по обзору литературы

1. Соцветия бархатцев распростертых являются ценным источником биологически активных веществ, в основном, флавоноидов. Это подтверждается результатами многих работ, посвященных изучению, как химического состава, так и фармакологической активности различных фракций и выделенных индивидуальных веществ.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Червонная, Надежда Михайловна, 2017 год

Список литературы

1. Абрамзон, А.А. Поверхностно-активные вещества. Свойства и применение / А.А. Абрамзон. - Л.: Химия, 1981. - 304 с.

2. Агабальянц, Г.Г. Химико-технологический контроль виноделия / Г.Г. Агабальянц. - М.: Пищ. пром-сть, 1986. - 612 с.

3. Агаджанян, В.С. Целенаправленный поиск индивидуальных веществ и суммарных композиций, характеризующихся антирадикальной активностью в отношении супероксидного анион-радикала: дис. ... канд. фармац. наук: 15.00.02 / Агаджанян Владимир Сергеевич. - Пятигорск, 2009. - С. 11-15.

4. Аджиахметова, С.Л. Сравнительный анализ аминокислотного состава листьев крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill.) [Электронный ресурс] / С.Л. Аджиахметова // Современные проблемы науки и образования. -2014. - №1. - Режим доступа: http://www.science-education.ru/115-12146.

5. Аджиахметова, С.Л. Химическое исследование крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill.) семейства крыжовниковые (Grossulariaceae DC.) с целью получения фармакологически активных веществ: автореф. дис. ...канд. фармац. наук: 14.04.02. / Аджиахметова Симилла Леонтьевна -Пятигорск, 2016. - 24 с.

6. Аналитическая хроматография / К.И. Сакодынский [и др.]. - М.: Химия, 1993. - 464 с.

7. Антиокислительная активность флавоноидов в различных системах перекисного окисления липидов / В.А. Костюк [и др.] // Биохимия. - 1988. - Т. 53, №8. - С. 1365-1370.

8. Бандюкова, В.А. Методы исследования природных флавоноидов / В.А. Бандюкова, А.Л. Шинкаренко, А.Л. Казаков. - Пятигорск: Изд-во Бальнеол. ин-т, 1977. - 72 с.

9. Бандюкова, В.А. Применение цветных реакций для обнаружения флавоноидов путем хроматографии на бумаге / В.А. Бандюкова // Раст. ресурсы. - 1965. -Вып. 4. - С. 591-596.

10. Бандюкова, В.А. Фенолокислоты растений, их эфиры и гликозиды / В.А. Бандюкова // Химия природ. соединений - 1983. - №3. - С. 263-272.

11. Беликов, В.В. Аналитические исследования природных фенольных соединений и разработка методов их количественного определения: автореф. дис.... д-ра фармац. наук: 15.00.02. / В.В. Беликов - Харьков, 1990. - 36 с.

12. Березкин, В.Г. Количественная тонкослойная хроматография / В.Г. Березкин, А.С. Бочков. - М.: Наука, 1994. - 183 с.

13. Бодруг, М.В. Биологические особенности, урожайность и химический состав эфирного масла Tagetes signata parti. при выращивании в Молдавии / М.В. Бодруг, И.П. Драгалин, П.Ф. Влад // Раст. ресурсы. - 1983. - Т.19, вып. 3. -С. 323-327.

14. Бондарь, И.А. Антиоксиданты в лечении и профилактике сахарного диабета / И.А. Бондарь, В.В. Климонтов // Сахарный диабет. - 2001. - Т. 4, №1. - С. 4752.

15. Бубенчикова, В.Н. Разработка методов анализа растительного сырья, содержащего флавоноиды / В.Н. Бубенчикова, Т.В. Точкова // Состояние и перспективы развития фармации в Сибири и на Дальнем Востоке: тез. докл. науч.-практ. конф. - Томск, 1991. - С. 117-118.

16. Ванин, А.Ф. Оксид азота: регуляция клеточного метаболизма без участия системы клеточных рецепторов / А.Ф. Ванин // Биофизика. - 2001. - Т. 46, №4. - С. 631-641.

17. Василенко, Ю.К. Гепатозащитные свойства препаратов из бархатцев распростертых / Ю.К. Василенко // Хим.-фармац. журн. - 1990. - Т. 24, №1. -С. 53-56.

1 1 ^

18. Вдовин, А.Д. Спектроскопия ЯМР Ни С в изучении флаван-3-олов, проантоцианидинов и их производных. III. Спектроскопия ядерного

13

магнитного резонанса С флаван-3-олов и проантоцианидинов / А.Д. Вдовин, З.А. Кулиев, Н.Д. Абдуллаев // Химия природ. соединений. - 1997. - №4. - С. 545-568.

19. Верткин, А.Л. Роль современных сахароснижающих и антиоксидантных препаратов в фармакотерапии сахарного диабета 2-го типа и его осложнений / А.Л. Верткин // Леч. врач. - 2009. - №3. - С. 69-73.

20. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Ю.А. Владимиров // Соросов. образоват. журн. - 2000. - Т. 6, №12. - С. 13-19.

21. Влияние патулетина из цветков бархатцев распростертых на состояние эндогенной антиоксидантной системы / Е.Г. Доркина [и др.] // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. -Пятигорск. - 2007. - Вып. 62 - С. 464-467.

22. Влияние флавоноидного комплекса из цветков бархатцев распростертых на перекисное окисление липидов и активность ферментов антиоксидантной системы при хроническом поражении печени CCl4 / А.Ю. Терехов, Е.Г. Доркина, Е.П. Парфентьева, Е.В. Кабузихина // Актуальные проблемы создания новых ЛП природного происхождения. - 2004. - С. 173-176.

23. Влияние флавоноидов на основные параметры гемостаза крови и антитромбическую функцию эндотелия при сахарном диабете / И.Н. Тюренков [и др.] // Фармация - 2012. - №4. - С. 34-36.

24. Влияние экстракта бархатцев на заживление ран при сахарном диабете / Е.М. Ломкина [и др.] // Фармация. - 2016. - Т. 65, №3. - С. 37-40.

25. Воронков, А.В. Изучение «L-аргининового парадокса» для оценки эндотелиальной функции в норме и патологии / А.В. Воронков, А.И. Робертус, И.Н. Тюренков // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2008. -Т. 7, №3. - С. 54-57.

26. Воронков, А.В. Изучение вазодилатирующей и антитромботичекой функций эндотелия мозговых сосудов на различных моделях его ишемического повреждения [Электронный ресурс] / А.В. Воронков, Д.И. Поздняков, А.В. Мамлеев // Современные проблемы науки и образования. - 2015. - №5. -Режим доступа: http : //www.science-education.ru/128-22406.

27. Выделение и анализ природных биологически активных веществ / Е.А. Краснов [и др.]. - Томск: Изд-во Том. ун-та., 1987. - 184 с.

28. Выделение и общая характеристика полисахаридов из пижмы обыкновенной / А.Я. Полле [ и др.] // Биоорган. химия. - 2001. - Т. 27, №1. - С. 52-56.

29. ВЭЖХ в исследовании флавоноидов. Определение рутина / В.И. Дейнека [и др.] // Хим.-фармац. журн. - 2004. - Т. 38, №4. - С. 23-25.

30. Гаврилин, М.В. Валидация аналитических методов: метод. указания / М.В. Гаврилин, С.П. Сенченко. - Пятигорск, 2009. - 40 с.

31. Гепатозащитное действие цветков бархатцев распростертых / А.Ю. Терехов [и др.] // Фармация. - 2004. - №2. - С. 33-35.

32. Государственная фармакопея Российской Федерации. [Электронный ресурс]. -13-е изд. - Режим доступа: http: //femb .ru/feml

33. Государственная фармакопея СССР. - Вып. 2.: Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1990. - 400 с.

34. Гранкина И.В. Разработка технологии гранул с экстрактами цветков бархатцев / И.В. Гранкина, В.И. Погорелов // Фармация. - 2010 - №1. - С. 30-32.

35. Гранкина И.В. Технология получения сухого экстракта цветков бархатцев / И.В. Гранкина, В.И. Погорелов // Вестн. развития науки и образования. - 2009. - №5. - С. 10-13.

36. Гранкина, И.В. Изучение химического состава СО2-экстракта Tagetes Patula L., и его фармакологической активности / И.В. Гранкина, Ю.А. Огурцов // Известия высш. учеб. заведений. Сев.-Кавк. Регион. Естественные науки. Спецвып. Фармакология. - 2006. - С. 23-24.

37. Гринкевич, Н.И. Химический анализ лекарственных растений / Н.И. Гринкевич. - М.: Высш. шк., 1983. - 176 с.

38. Дейнека, В.И. Определение природных тиофенов хроматографическими методами / В.И. Дейнека, А.М. Григорьев, М.Ю. Третьяков // Науч. ведомости БелГУ. Серия: Медицина. Фармация. - 2011. - №9 (104), Вып. 15. - С. 122130.

39. Дисфункция эндотелия при ишемических нарушениях мозгового кровообращения / З.А. Суслина [и др.] // Клинич. неврология. - 2008. - Т.2, №1. - С. 4-11.

40. Дорофеев, В.Л. Стандартные образцы для фармакопейного анализа / В.Л. Дорофеев, А.П. Арзамасцев // Вопросы биологич. мед. и фармац. химии. -2010. - Т.8, №5. - С. 6-10.

41. Иванов, В.В. Количественное определение дубильных веществ в траве горца сахалинского, интродуцированного в условиях кавказских минеральных вод, различными аналитическими методами [Электронный ресурс] / В.В. Иванов, О.Н. Денисенко // Современные проблемы науки и образования. - 2014. - №6. - Режим доступа: http: //www. science-education. ru/120-16511.

42. Избирательная токсичность / А. Альберт [и др.]. - М.: Медицина, 1989. - Т. 12. - 832 с.

43. Изучение влияния сулодексида на эндотелий-зависимую вазодилатацию мозговых сосудов у животных со стрептозотоцин-индуцированным сахарным диабетом / И.Н. Тюренков [и др.] // Сахарный диабет. - 2011. - №3. - С. 12-15.

44. Изучение гастропротекторного действие БАВ из цветков бархатцев распростертых в условиях экспериментальной язвы желудка / Е.Г. Доркина [и др.] // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. - Пятигорск. - 2008. - Вып. 63 - С. 414-416.

45. Изучение состава фенольных соединений донника лекарственного методом ВЭЖХ / В.Н. Бубенчикова [и др.] // Хим.-фармац. журн. - 2004. - Т. 38, №4. -С. 24-25.

46. Изучение химического состава и влияния экстракта из цветков бархатцев распростертых на про/антиоксидантное равновесие в желудке крыс при вольтареновой гастропатии [Электронный ресурс] / О.И. Папаяни [и др.] // Современные проблемы науки и образования. - 2012. - №1. - Режим доступа: https://www.science-education.ru/ru/article/view?id=5618.

47. Исламбеков, Ш.Ю. Растительные дубильные вещества / Ш.Ю. Исламбеков, А.К. Каримджанов, С.М. Мавлянов // Химия природ. соединений. - 1990. -№3. - С. 293-307.

48. Исследование органических кислот в некоторых представителях рода Боярышник / Н.Ф. Гончаров [и др.] // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр.- Пятигорск: Изд-во ПГФА, 2007. - Вып. 62. - С. 36-39.

49. Исследование сорбционной способности пектина, полученного кислотным экстрагированием из кожуры семян люпина / Т.М. Васина [и др.] // Сибирский мед. журн. - 2012. - №5. - С. 115-117.

50. Исследование сорбционной способности пектинов и водорастворимых полисахаридов крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.)Mill.), листьев шелковицы черной (Morus nigra L.) и шелковицы белой (Morus alba L.) / С.Л. Аджиахметова [и др.] // Науч. ведомости БелГУ. Серия: Медицина. Фармация. - 2013. - №22 (141). - С. 170-173.

51. Кабиев, О. Природные фенолы - перспективный класс противоопухолевых и радиопотенциирующих соединений / О. Кабиев, С.Б. Балмуханов - М.: Медицина, 1975. - 188 с.

52. Калошина, Н.А. О флавоноидах семян растений рода Tagetes / Н.А. Калошина,

A.В. Мазулин // Химия природ. соединений. - 1983. - №1. - С. 104-105.

53. Карпович, Н.С. Пектин. Производство и применение. / Н.С. Карпович, Л.В. Донченко. - Киев: Урожай, 1989. - 88 с.

54. Кащенко, Н.И. Фенольные соединения и полисахариды соцветий Tagetes patula / Н.И. Кащенко, Л.М. Танхаева, Д.Н. Оленников // Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья: материалы V Всерос. конф. с междунар. участием. - Барнаул, 2012. - С. 262-263.

55. Кекилидзе, Н.А. Исследование эфирного масла бархатцев и его применение в пищевой и парфюмерно-косметической промышленности / Н.А. Кекилидзе,

B.Г. Пруидзе, А.Д. Дембицкий // Актуальные проблемы изучения эфирно-

масличных растений и эфирных масел: тез. докл. 2 симпоз. 26-29 авг. 1970 г. -Кишенев, 1970. - 135 с.

56. Клышев, А.К. Флавоноиды растений / А.К. Клышев, В.А. Бандюкова, Л.С. Алюкина. - Алма-Ата, 1978. - 220 с.

57. Ковалев, И.П. Инфракрасные спектры поглощения некоторых групп природных соединений (Атлас спектров) / И.П. Ковалев, Е.В. Титов. -Харьков, 1966. - 204 с.

58. Ковалев, И.П. Исследование флавоноидных гликозидов I Моногликозиды. / И.П. Ковалев, В.И. Литвиненко // Химия природ. соединений. - 1965. - №4. -С. 233-241.

59. Кодониди, М.И. Химическое исследование цветков хризантемы корейской (Chrysanthemum х koreanum Makai) с целью получения фармакологически активных суммарных фитокомплексов: автореф. дис. ...канд. фармац. наук: 15.00.02. / Кодониди Максим Иванович - Пятигорск, 2009. - 24 с.

60. Комарова, Н.В. Практическое руководство по использованию систем капиллярного электрофореза «Капель» / Н.В. Комарова, Я.С. Каменцев. -СПб.: Веда, 2006. - 212 с.

61. Короткова, Е.И. Новый вольтамперометрический способ определения активности антиоксидантов / Е.И. Короткова, Ю.А. Корбаинов, О.А. Аврамчик // Биоантиоксидант. тез.докл. VI междунар. конф. 16-19 апр. 2002 г. - М., 2002. - С. 298-299.

62. Кьосев, П.А. Полный справочник лекарственных растений / П.А. Кьосев. - М.: ЭКСМО - Пресс, 2000. - С. 437-438.

63. Малаховская, Е.А. Доноры оксида азота: характеристика вазодилатирующего действия / Е.А. Малаховская, Н.Н. Петрищев // Регионарное кровообращение и микроциркуляция - 2005. - Т. 4, №4 - С. 4-12.

64. Малышев, И.Ю. Стресс, Адаптация и оксид азота / И.Ю. Малышев, Е.Б. Манухин // Биохимия. - 1998. - Т. 63. - С. 992-1006.

65. Машанов, В.М. Пряно-Ароматические растения / В.И. Машанов, А.А. Покровский. - М.: Агропромиздат, 1991. - 223 с.

66. Методика определения массовой концентрации свободных аминокислот / М.В. Захарова [и др.] // Методическое и аналитическое обеспечение исследований по садоводству. - Краснодар, 2010. - С. 289-295.

67. Методическое и аналитическое обеспечение исследований по садоводству / М.В. Захарова [и др.]. - Краснодар, 2010. - 273 с.

68. Мисникова, И.Р. Актуальные вопросы профилактики сахарного диабета 2-го типа / И.Р. Мисникова, А.И. Древаль // Врач. - 2014. - №3. - С. 83-84.

69. Муравьева, Д.А. Фармакогнозия: учебник / Д.А. Муравьева, И.А. Самыкина, Г.П. Яковлев - 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2002. - 656 с.: ил.

70. Назарова, Л.Е. Влияние феруловой кислоты на зону некроза, возникающего в результате окклюзии средней мозговой артерии / Л.Е. Назарова, И.Н. Дьякова // Мед. вестн. Башкортостана - 2011. - Т. 6, №3. - С. 133-135.

71. Насибуллин, P.C. Изменение структуры фосфолипидов клеточных мембран под действием флавоноидов / P.C. Насибуллин, Афанасьева Ю.Г. // Вопросы биологич., мед. и фармац. химии. - 2010. - №5. - С. 41-45.

72. Нащенкова, О.В. Применение биологически активных веществ в лечении возрастной макулодистрофии / О.В. Нащенкова // Рус. мед. журн. - 2004. - Т. 5, №2. - С. 253.

73. Новые каротиноидсодержащие фитопрепараты / П.П. Ветров [и др.] // Провизор. - 2000. - №16. - С. 19-20.

74. О содержании дубильных веществ в соцветиях бархатцев распростертых / Н.М. Червонная [и др.] // Науч. ведомости БелГУ. Серия: Медицина. Фармация. - 2016. - №26 (247), вып. 36. - С. 147-152.

75. Определение антиоксидантной активности экстрактов растительного сырья методом катодной вольтамперометрии / Е.И. Короткова [и др.] // Хим.-фармац. журн. - 2003. - Т. 37, №9. - С. 55-56.

76. Определение биологически активных соединений фенольной и полифенольной природы в различных объектах методами хроматографии / М.В. Кочетова [и др.] // Успехи химии. - 2007. - Т. 76, №1. - С. 88-100.

77. Определение параметров адсорбционного слоя, образованного природным высокомолекулярным соединением на границе раздела фаз «раствор-воздух» / Л.П. Мыкоц, Н.Н. Богдашев, З.М. Нерсесян, Т.А. Савельева // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. -Пятигорск, 2009. - Вып. 64. - С. 194-196.

78. Папаяни, О.И. Изучение антимикробного действия некоторых субстанций из цветков бархатцев распростертых / О.И. Папаяни, И.И. Клишина // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. -Пятигорск, 2010. - Вып. 65. - С. 485-486.

79. Папаяни, О.И. Изучение фармакологической активности цветков бархатцев распростертых на модели хронической гастропатии у крыс / О.И. Папаяни, Е.Г. Доркина // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. - Пятигорск, 2011. - Вып. 66. - С. 556-557.

80. Пат. 2238554 Российская Федерация, МКИ G01 N33/15 N27/26. Способ определения суммарной антиоксидантной активности биологически активных веществ / В.П. Пахомов [и др.] (РФ). - № 2003123072/15; заявл. 25.07. 03; опубл. 20.10.04, Бюл. №15. - 3 с.

81. Пат. 2522227 Российская Федерация, МПК A61 K36/00 B01 D11/02. Способ раздельного выделения дубильных веществ и флавоноидов из лекарственного растительного сырья / А.И. Марахова [и др.] (РФ). - №2013113899/15, заявл. 28.03.2013; опубл. 10.07.2014, Бюл. №19 - 5 с.

82. Пат. 2546298 Российская Федерация, МПК A61K 36/28 B01D 11/02. Способ получения патулетина и патулетин-7-О^^-глюкопиранозида (патулитрина) из растительного сырья / Д.Н. Оленников [и др.] (РФ). - № 2013115723/15; заявл. 20.10.2014; опубл. 10.04.2015, Бюл. №10. - 14 с.

83. Пат. № 2085217 Российская Федерация, МКИ А61 L15/00 К31/74. Способ получения гепатозащитного средства из цветков бархатцев распростертых (Tagetes Patula L.) / Э.Т. Оганесян [и др.] (РФ). - № 2007110014/15; заявл. 19.03.07; опубл. 30.09.2008, Бюл. №10. - 6 с.

84.Пат. US2015/0025131 A1 Patuletin a potent anti-TNF-a and anti-arthritic compound from Tagetes patula [Электронный ресурс] / Muhammed Ahmed Mesaik, Almas Jabeen et al. - USA №13/944,387; заявл. 17.07.2013; опубл. 22.01.2015. - 5 с. - Режим доступа: http://www.freepatentsonline.com/y2015/00 25131.html

85. Погорелов, В.И. Технология получения масляного экстракта цветков бархатцев / В.И. Погорелов, И.В. Гранкина // Научн. публикации аспирантов и докторантов (Курск). - 2009. - №9 - С. 89-90.

86. Подгорная, Ж.В. Исследование цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L.) с целью получения биологически активных веществ: дис. ... канд. фарм. наук: 15.00.02. / Подгорная Жанна Валерьевна - Пятигорск, 2009. - 145 с.

87. Полифенольный состав листьев крыжовника отклоненного и шелковицы черной / С.Л. Пеливанова [и др.] // Науч. ведомости БелГУ. Серия: Медицина. Фармация. - 2012. - №22 (141), Вып. 20/1. - С. 170-173.

88. Получение липофильной фракции из цветков Tagetes Patula L., ее качественный состав и изучение антиаритмической активности / Э.Т. Оганесян [и др.] - Пятигорск: Пятигорская ГФА, 2005; 18. - Деп. в ВИНИТИ РАН 31.01.06. № 110-в-06.

89. Природные флавоноиды / Д.Ю. Корулькин [и др.]. - Новосибирск: Гео, 2007. -232 с.

90. Разарёнова, К.Н Сравнительная оценка содержания дубильных веществ в некоторых видах рода Geranium L. флоры Северо-Запада / К.Н. Разарёнова, Е.В. Жохова // Химия раст. сырья. - 2011. - №4. - С. 187-192.

91. Разработка технологии и способов анализа капсул с кверцетином и экстрактом бархатцев распростертых / В.И. Погорелов [и др.] // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. - Пятигорск, 2009. - Вып. 64. - С. 324-326.

92. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав и использование / под ред. А.Д. Соколова. - Л.: Нева, 1980. - C. 16-20.

93. Расчет и верификация коэффициентов распределения октанол/вода гербицидов / А.М. Колбин, Т.С. Соломина, Л.А. Тюрина, С.Ф. Крылов // Башкирский хим. журн. - 2007. - Т. 14, №3. - С. 76-78.

94. Рогинский, В.А. Фенольные антиоксиданты. - М.: Медицина, 1988. - 247 с.

95. Роль оксида азота в регуляции микроциркуляторного звена системы гемостаза / Е.В. Андронов, В.Ф. Киричук, А.Н. Иванова, Н.В. Мамонтова // Саратовский научн.-мед. журн. - 2007. - №3 (17). - С. 39-44.

96. Самылина, И.А. Исследования по разработке фармакопейного метода определения содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье / И.А. Самылина, Н.П. Антонова, И.П. Рудакова // Фармация. - 2009. -№6. - С. 3-6.

97. Слиецанс, А.А. Заживление ран и их кровоснабжение у крыс с сахарным диабетом при блокаде индуцибельной и конститутивной NO-синтаз / А.А. Слиецанс, Е.М. Ломкина, И.Н. Тюренков // Вестн. ВолгГМУ. - 2013. - №1 (45). - С. 37-49.

98. Слиецанс, А.А. Изучение эндотелиопротекторных свойств флавоноидов при экспериментальном сахарном диабете: автореф. дис... канд. фармац. наук: 14.03.06. / Слиецанс Анна Альбертовна - Пятигорск, 2011. - 24 с.

99. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии / О.Б. Рудаков [и др.]. - Воронеж: Водолей, 2004. - 528 с.

100. Сравнительная оценка вазодилатирующей функции эндотелия при патологиях различного генеза / И.Н. Тюренков [и др.] // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2011. - Т. 10, №4. - С. 87-90.

101. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов. Моносахариды / Б.Н. Степаненко. - М.: Высш. шк., 1977. - 222 с.

102. Степаненко, Б.Н. Химия и биохимия углеводов. Полисахариды / Б.Н. Степаненко. - М.: Высш. шк., 1978. - 256 с.

103. Терехов, А.Ю. Изучение терапевтического действия флавоноидов Tagetes patula при хроническом поражении печени у крыс / А.Ю. Терехов //

Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. - Пятигорск, 2005. - Вып. 60. - С. 425-428.

104. Тонкослойная хроматография флавоноидов / В.А. Бандюкова [и др.] // Химия природ. соед. - 1973. - №1. - С. 20-25.

105. Тюренков, И.Н. Влияние гесперидина и флавицина на печеночный кровоток в норме и в условиях стимуляции и блокады синтеза эндогенного оксида азота / И.Н. Тюренков, А.В. Воронков, Е.Г. Доркина // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2006. - Т. 5, №3. - С. 84-87.

106. Тюренков, И.Н. Методический подход к оценке эндотелиальной дисфункции в эксперименте / И.Н. Тюренков, А.В. Воронков // Эксперим. и клинич. фармакология. - 2008. - Т. 71, №1. - С. 49-51.

107. Федосеева, Л.М. Изучение флавоноидов листьев бадана толстолистного, произрастающего на Алтае / Л.М. Федосеева, Е.А.Тимохин // Химия раст. сырья. - 1999. - №4. - С. 81-84.

108. Физико-химические характеристики пектинов и водорастворимых полисахаридов крыжовника отклоненного (Grossularia reclinata (L.) Mill.), листьев шелковицы черной (Morus nigra L.) и шелковицы белой (Morus alba L.) / И.И. Селина [и др.] // Вопросы биологич., мед. и фармац. химии. - 2013.

- №10. - С. 20-25.

109. Флавоноидные соединения коры лиственницы сибирской и лиственницы гмелина / С.З. Иванова [и др.] // Химия раст. сырья. - 2002. - №4. - С. 5-13.

110. Флавоноиды: биохимия, биофизика, медицина / Ю.С. Тараховский, Ю.А. Ким, Б.С. Абдраимов, Е.Н. Музафаров // Synchrobook. - 2013. - 310 с.

111. Фролов, Ю.Г. Поверхностные явления в дисперсных системах / Ю.Г. Фролов.

- М.: Химия. - 1982. - 400 с.

112. Химия углеводов / Н.К. Кочетков [и др.]. - М.: Химия, 1967. - 672 с.

113. Хотимченко, Ю.С. Фармакологические свойства пектинов / Ю.С. Хотимченко, А.В. Кропотов, М.Ю. Хотимченко // Эфферентная терапия. -2001. - Т. 7, № 4. - С. 22-36.

114. Хроматография на бумаге / под ред. И.М. Хайца, К. Мацека. - М.: Изд-во ин. лит, 1962. - 457 с.

115. Цветков, В.Н. Структура макромолекул в растворах. / В.Н. Цветков, В.Е. Эскин, С.Я. Френкель. - М.: Наука, 1964. - 720 с.

116. Червонная, Н.М. Об антиоксидантной активности спирто-водных извлечений из цветков бархатцев распростертых [Электронный ресурс] / Н.М. Червонная, О.А. Андреева // Современные проблемы науки и образования. - 2015 - №2 (часть 3). - Режим доступа: http://www.science-education.ru//ru/article/ view?id=23713.

117. Червонная, Н.М. Об антиоксидантной активности экстрактов из соцветий бархатцев распростертых на модели Fe2+-индуцированного перекисного окисления липидов / Н.М. Червонная, А.А. Кобин // Новая наука: теоретич. и практич. взгляд. - Стерлитамак: АМИ, 2017. - Т. 2, №4. - С. 161-164.

118. Черток, В.М. Эндотелиальный (интимальный) механизм регуляции мозговой гемодинамики: трансформация взглядов / В.М. Черток, А.Е. Коцюба // Тихоокеанс. мед. журн. - 2012. - №2. - С. 17-26.

119. Шварценбах, Г. Комплексометрическое титрование / Г. Шварценбах, Г. Флашка. - М.: Химия, 1970. - С. 182-192.

120. Шелухина, Н.П. Пектин и параметры его получения / Н.П. Шелухина, Р.Ш. Абаева, Г.Б. Аймухамедова. - Фрунзе: Илим, 1987. - 108 с.

121. Щукин, Е.Д. Коллоидная химия. / Е.Д. Щукин, А.В. Перцев, А.Е. Амалис. -М.: Высш. шк., 2006. - 444 с.

122. Эндотелиальная дисфункция и микроциркуляторные нарушения у больных сахарным диабетом 2 типа / Ю.В. Башкирова [и др.] // Бюл. Сиб. отд. Рос. акад. мед. наук. - 2008. - №6. - С. 182-186.

123. Эндотелиопротекторы - новый класс фармакологических препаратов / И.Н. Тюренков, А.В. Воронков, А.А. Слиецанс, Е.В. Волотова // Вестн. Рос. акад. мед. наук. - 2012. - №7. - С. 50-57.

124. Яшин, А.Я. Инжекционно-проточная система с амперометрическим детектором для селективного определения антиоксидантов пищевых

продуктах и напитках/ А.Я. Яшин // Рос. хим. журн. Рос. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева. - 2008. - №2. - С. 130-135.

125. Яшин, А.Я. Прибор для определения антиоксидантной активности растительных лекарственных экстрактов и напитков / А.Я. Яшин, Я.И. Яшин // Журн. междунар. информационная система по резонансным технологиям. -2004. - №34. - С. 10-14.

126. A blend of polyphenolic compounds explains the stimulatory effect of red wine on human endothelial no synthase / T. Wallerath, H. Li, U. Godtel-Ambrust, P.M. Schwarz, U. Forstermann // Nitric Oxide. - 2005. - Vol. 12, №2 - P. 97-104.

127. Amudha, M. Evaluation of «in vitro» antioxidant potential of Cordia retusa / M. Amudha, S. Rani // Indian Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2016. - Vol. 78, №1. - P. 80-86.

128. Benzie, I.F. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of «antioxidant power»: The FRAP assay / I.F. Benzie, J.J. Strain // Anal. Biochem. -1996. - Vol. 239. - P. 70.

129. Cai, Q. Dietary flavonoids, quarcetin, luteolin and genistein, reduce oxidative DNA damage and lipid peroxidation and quench free radicals / Q. Cai, R.O., K. Zhang // Cancer Lett. - 1997. - Vol. 119, №1. - P. 99-107.

130. Camuesco, D. The intestinal anti-inflammatory effect of quercitrin is associated with an inhibition in iNOS expression / D. Camuesco, M. Comalada, M.E. Rodriguez-Cabezas // British J. of Pharmacology. - 2004. - Vol. 143, №7. - P. 9080-918.

131. Carotinoid composition of marigold (Tagetes erecta) flower extract used as nutritional supplement / Hadden W.L. [et al.] // J. Argic food Chem. - 1999. - Vol. 47, №10. - P. 4189-4194.

132. Deng, Y-R. Chemical components of Seriphidium santolium Poljak / Y-R. Deng, A-X. Song, H-Q. Wang // J. of the Chinese Chemical Society. - 2004. - №51. - Р. 629-636.

133. Faizi, S. Bioassay-guided isolation of antioxidant agents with analgesic properties from flowers of Tagetes patula / S. Faizi, A. Dar, H. Siddiqi // Pharmaceutical Biology. - 2011. - Vol. 49, №5. - P. 516-525.

134. Freedman, J.E. Select flavonoids and whole juice from purple grapes inhibit platelet function and enhance nitric oxide release / J.E. Freedman // Circulation. -2002. - Vol. 103, №23. - P. 2792-2798.

135. GLC and GLC-MS analysis of thiophene derivatives in plants and in «in vitro» cultures of Tagetes patula L. (Asteraceae) / L. Margl, A. Tei, I. Gyurjan, M. Wink // Zeitschrifft fur Naturforschung C. - 2002. - Vol. 57. - P. 63-17.

136. Harborne, J.B. The flavonoids / J.B. Harbone, T.J. Mabry, H. Mabry. - London: Chapman and Hall, 1974. - 1202 p.

137. Ignarro, J. Biosynthesis and metabolism of endothelium-derived nitric oxide / J. Ignarro // Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. - 1990. - Vol. 30. - P. 535-560.

138. Mabry, T.Y. The systematic identification of flavonoids / T.Y. Mabry, K.R. Markham, M.B. Thomas. - Berlin: Springer, 1970. - 707 p.

139. Munkundan, U., Hjorsto, M.A. Effect of fungal elicitor on thiophene production in hairy root cultures of Tagetes patula / U. Munkundan, M.A. Hjorsto // Appl. Microbiol. Biotechn. - 1990. - Vol. 33. - P. 145-147.

140. Nitric oxide in wound-healing / J.S. Isenberg [et al.] // Inc. Microsurgery. - 2005. -Vol. 25, №5. - P. 442-451.

141. Potential of flavonoids as anti-inflammatory agents: modulation of proinflammatory gene expression and signal transduction pathways / M.J. Tunon [et al.] // Current Drug Metabolism. - 2009. - Vol. 10, №3. - P. 256-271.

142. Radomski, W.W. The antiaggregating properties in endothelium: interaction prostacyclin and nitric oxide / W.W. Radomski, R.M. Palmer, S. Moncada / Br. J. Pharmacol. - 2007. - Vol. 92. - P. 639-646.

143. Rasik, A.M., Shukla, A. Antioxidant status in delayed healing type of wounds / A.M. Rasik, A. Shukla // Int. J. Exp. Pathol. - 2010. - Vol. 81. - P. 257-263.

144. Sease, J.W. Chromatographic and spectral characteristics of some polythienyls / J.W. Sease, L. Zeichmeister // J. Amer. Chem Soc. - 1947. - Vol. 69. - P. 270273.

145. Sinner, M. The chromatographic behavior of polysaccharides / M. Sinner, J.J. Puls // Chromatography. - 1978. - Vol. 156. - P. 194-204.

146. The estimation of red cell superoxide dismutase activity / C.C. Winterbourn, R.E. Hawkins, M. Brian, R.W. Carrell // J. Lab. Clin. Med. - 1975. - Vol. 85. - P. 3741.

147. The nitric oxide-scavenging properties of Ginkgo biloba extract EGb 761 / L. Marcocci, J.J. Maguire, M.T. Droy-Lefaix, L. Packer // Biochem Biophys Res Commun. - 1994. - Vol. 201. - P.748-755.

148. Thiophene occurrence in different Tagetes species: agricultural biomasses as sources of biocidal substances / I. Marotti [et al.] // J. of the Science of Food and Agriculture. - 2010. - Vol. 90, №7. - P. 1210-1217.

149. Thiophenes of Tagetes flowers and partial purification of xanthophyll esters / V.I. Deineka [et al.] // Universal J. of Agricultural Research. - 2014. - Vol. 2, №3. - P. 101-106.

147