Характеристика профилей циркулирующих микроРНК крови у пациентов с различными формами ИБС тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Стоногина Дарья Алексеевна

• Стоногина Дарья Алексеевна
• кандидат наук
• 2024

Оглавление диссертации кандидат наук Стоногина Дарья Алексеевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Проблемы своевременной диагностики острого коронарного синдрома: скрининг, дифференциальный диагноз, прогностические возможности

1.2 Современные представления о микроРНК

1.3 Биологический цикл микроРНК

1.4 Механизмы функционирования микроРНК

1.5 Методология детекции циркулирующих микроРНК в биологических жидкостях (получение, изоляция и измерение микроРНК)

1.6 Ограничения использования микроРНК в качестве биомаркеров

1.7 Определение микроРНК при различных формах ИБС

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Клинический этап исследования. Дизайн исследования

2.1.1 Критерии включения, невключения и исключения из исследования

2.1.2 Оборудование для проведения инструментальных диагностических исследований

2.2 Лабораторный этап исследования. Варианты биомаркеров-кандидатов для количественной полимеразной цепной реакции

2.3 Статистическая обработка полученных данных

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Общая характеристика исследуемых групп

3.2 Определение уровней исследуемых циркулирующих микроРНК в исследуемых группах

3.3 Анализ циркулирующих микроРНК плазмы крови при остром коронарном синдроме и стабильной ИБС

3.4 Анализ уровней исследуемых циркулирующих микроРНК в подгруппах пациентов с острым коронарным синдромом

3.5 Ассоциация медикаментозной терапии с уровнями циркулирующих микроРНК плазмы крови в исследуемых группах

3.6 Результаты оценки диагностической точности исследуемых уровней циркулирующих микроРНК

3.7 Проспективное наблюдение пациентов с острым коронарным синдромом

3.8 Значение использования разных форм этилендиаминтетрауксусной кислоты

при анализе уровней исследуемых биомаркеров

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Характеристика профилей циркулирующих микроРНК крови у пациентов с различными формами ИБС»

Актуальность темы исследования

Несмотря на достижения в практической и исследовательской кардиологии, сердечно-сосудистые заболевания (CCЗ) по-прежнему являются одной из лидирующих причин смертности как во всем мире, так и в Российской Федерации [1]. При этом острые формы ишемической болезни сердца (ИБС) традиционно ассоциируются с высокой сердечно-сосудистой смертностью. Первым проявлением острого инфаркта миокарда (ОИМ) может быть внезапная сердечная смерть (ВСС), однако и при его нефатальном течении возможно развитие хронической сердечной недостаточности (ХСН), приводящей к снижению продолжительности и качества жизни [2, 3].

Несмотря на меры первичной профилактики с контролем классических факторов риска ИБС (артериальной гипертензии (АГ), сахарного диабета (СД), дислипидемии, курения), в большинстве стран мира по-прежнему наблюдается рост сердечно-сосудистых заболеваний.

Согласно современным представлениям, ряд инструментальных исследований (тредмил-тест, стресс-эхокардиография, перфузионная сцинтиграфия миокарда с нагрузкой, мультиспиральная компьютерная томография с контрастированием, стресс-МРТ) используется для оценки вероятности клинически значимой ишемии миокарда. Существующие методы диагностики не всегда доступны, что делает актуальным дальнейший поиск биомаркеров ИБС. Для диагностики ОИМ используется определение уровня тропонина крови. Достаточно высокая специфичность тропонинов как биомаркеров повреждения, тем не менее, не всегда позволяет дифференцировать ОИМ с другими причинами повреждения миокарда и предполагает обязательное проведение коронароангиографии (КАГ) с соответствующими перипроцедурными рисками осложнений. Таким образом, поиск дополнительных специфичных и неинвазивных биомаркеров для первичной и вторичной профилактики как острого

коронарного синдрома (ОКС), так и ИБС стабильного течения (СИБС) остается актуальным [4].

Степень её разработанности

Сегодня для первичной профилактики и диагностического скрининга представляется интересным развитие методов молекулярной генетики. Изучаются многочисленныевиды малых РНК, подавляющих экспрессию генов, в том числе микроРНК (microRNA, miR).

В последние годы микроРНК привлекают к себе пристальное внимание многих исследователей, поскольку именно они задействованы в регуляции практически всех основных биологических процессов, включая пролиферацию, дифференцировку и апоптоз клеток и начали демонстрировать свои возможности в диагностике, прогнозе характера течения заболеваний и перспективах их использования для определения ключевой терапевтической мишени [5]. Этот класс малых одноцепочечных молекул рибонуклеиновой кислоты (РНК), длиной 19-25 нуклеотидов [6], осуществляет блокирование трансляции матричной РНК (мРНК) с помощью образования РНК-индуцированного сайленсинг комплекса - RISC (RNA-induced silencing complex). Образование комплекса приводит к нарушению трансляции и/или деградации мРНК с регулировкой функции до 65% существующих мРНК у человека [7]. Это участие в биохимических процессах человека делает микроРНК необходимым «нуклеотидным ключом» практически любого физиологического и патофизиологического пути.

Поскольку микроРНК являются биостабильными соединениями, то их можно легко выявить в любой биологической среде организма человека [8]. Эта биостабильность делает микроРНК перспективными объектами для лабораторного исследования: используя метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР), можно легко и надежно их выделить [5]. Этот метод является хорошо известным в лабораторной диагностике, поскольку часто используется при дифференциальной диагностике инфекционных объектов.

Множественные отечественные и зарубежные исследования показывают явную перспективность изучения роли микроРНК в патогенезе различных форм ИБС. Разные уровни экспрессии микроРНК показаны для ОИМ, нестабильной стенокардии (НС) и СИБС. Несмотря на противоречивость результатов такого изучения, к наиболее перспективным биомаркерам-кандидатам, ассоциированным с ИБС, принято относить такие циркулирующие микроРНК плазмы, как miR-133э/Ъ, miR-499, miR-208a/b, miR-1; для ОКС miR-502, miR-215 и miR-487a для СИБС [9].

Частое несоблюдение международного стандарта и отсутствие единого протокола как получения плазмы, содержащей микроРНК без клеточной контаминации, так и выявления микроРНК в образцах плазмы крови, вероятнее всего, лежит в основе всех противоречий результатов анализа.

Таким образом, исследования уровней ц-микроРНК крови у пациентов с различными формами ИБС является актуальным.

Цели и задачи

Цель исследования - проанализировать уровни исследуемых ц-микроРНК крови и сформировать их профили, характерные для пациентов с различными формами ИБС (ОКС, СИБС).

Задачи исследования:

1. Сравнить уровни ц-микроРНК крови (miR-375-3p, miR-92a-3p, miR-126-3p, miR-21-5p, miR-146a-5p, miR-155-5p, miR-17-5p, miR-145-5p) у пациентов с различными формами ИБС, АГ и здоровыми лицами.

2. Сформировать профили исследуемых биомаркеров-кандидатов для пациентов с различными формами ИБС (ОКС, СИБС).

3. Оценить различия уровней ц-микроРНК у пациентов с различными формами ОКС (ИМпST, ИМбпST, НС).

4. Оценить связь экспрессии исследуемых ц-микроРНК крови с медикаментозной терапией.

Научная новизна

Впервые в РФ охарактеризован профиль циркулирующих микроРНК крови для пациентов с ОКС. Впервые в РФ оценены различия уровней ц-микроРНК крови у пациентов с различными формами ОКС. Впервые в РФ проанализированы диагностические возможности исследуемых ц-микроРНК крови у пациентов с различными формами ИБС.

Теоретическая и практическая значимость работы

Определение профиля ц-микроРНК крови у пациентов с ОКС с повышением относительных уровней ц-микроРНК miR-146a-5p и miR-21-5p и снижением относительного уровня ц-микроРНК miR-17-5p может использоваться как дополнительный диагностический метод у пациентов с ИБС.

Методология и методы исследования

Выполнено открытое ретроспективное продольное когортное исследование с проспективной частью для определения профилей ц-микроРНК у пациентов с ИБС с 2017 по 2022 гг. В работе также использованы различные методы лабораторной (общий и биохимический анализ крови, коагулограмма, определение уровня тропонина и липидного спектра крови) и инструментальной (электрокардиография покоя (ЭКГ), трансторакальная эхокардиография (ЭХО-КГ), коронароангиография (КАГ), мультиспиральная компьютерная томография с контрастированием коронарных артерий (МСКТ КА), стресс-эхокардиография (стресс-Эхо-КГ), нагрузочный тредмил тест) диагностики ИБС. Произведен научный анализ полученных данных: проведена обработка полученных результатов с помощью методов современного статистического анализа.

Положения, выносимые на защиту

1. Относительные уровни трех из восьми исследуемых ц-микроРНК крови (ш1Я-375-3р, ш1Я-92а-3р, ш1Я-126-3р, ш^-21-5р, ш1Я-146а-5р, ш1Я-155-5р, ш1Я-17-5р, ш1Я-145-5р) значимо различаются у пациентов с ИБС стабильного течения,

ОКС, больных с АГ и здоровых лиц. Для пациентов с ОКС характерны следующие различия: уровни miR-21-5р и miR-146a-5p достоверно ф<0,01; тест Манна-Уитни) выше по сравнению с пациентами с СИБС, пациентами с АГ и здоровыми лицами контрольной группы. Относительный уровень miR-17-5p достоверно ф<0,01; тест Манна-Уитни) ниже у пациентов с обеими формами ИБС (ОКС и СИБС) по сравнению с пациентами с АГ и здоровыми лицами контрольной группы, что отражает его специфичный характер для всех пациентов с ИБС.

2. Достоверных различий уровней miR-21-5р, miR-146a-5p и miR-17-5 между пациентамис разными формами ОКС (ИМпST, ИМбпST, НС) не выявлено.

3. Уровни ц-микроРНК крови miR-17-5p, miR-146a-5p, miR-21-5p не имели статистически значимой связи с любым видом терапии (р<0,05; MRLA). При попарном сравнении всех пациентов с ИБС (ОКС и СИБС, п=74), получавших и не получавших медикаментозную терапию, значимое повышение miR-21-5p наблюдалось при применении диуретиков ф<0,05; тест Манна-Уитни), а уровень miR-17-5p был значимо ниже ф<0,05; тест Манна-Уитни) у пациентов, принимавших антикоагулянты.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности

Научные положения диссертации соответствуют паспорту научной специальности 3.1.20. Кардиология п 3, 6.

Степень достоверности и апробация результатов

Полученные в данном исследовании результаты являются достоверными, что подтверждено репрезентативной выборкой, включающей в себя 136 пациентов, длительностью наблюдения за включенными в исследование пациентами и используемыми высокотехнологичными методами диагностики (ЭКГ, ЭХО-КГ, КАГ, МСКТ КА, стресс ЭХО-КГ). Современная статистическая обработка полученных результатов выполнена при помощи существующих методов обработки информации и статистического анализа.

Результаты исследования были представлены на конференциях: V международная конференция Евразиискои ассоциации кардиологов «Спорные и нерешенные вопросы кардиологии - 2022» (г. Москва, 19-20 октября 2022 г); XXX российский национальный конгресс «Человек и лекарство» (Москва, 10-13 апреля 2023г.); Ежегодная всероссийская научно -практическая конференция «Кардиология на марше!» (Москва, 6-8 июня 2023 г.); XXXI российский национальный конгресс «Человек и лекарство» (Москва, 15-18 апреля 2024г.).

Апробация диссертации состоялась 26 апреля 2024 г. на научно-методическом заседании кафедры кардиологии, функциональной и ультразвуковой диагностики Института клинической медицины им. Н.В. Склифосовского ФГАОУ ВО Первый Московский Государственный Медицинский Университет им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), протокол научно-методического заседания кафедры №4 (2).

Результаты, полученные в ходе диссертационного исследования, внедрены в работу клиники кардиологии УКБ №1 ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), функциональной и ультразвуковой диагностики Института клинической медицины им. Н.В. Склифосовского ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет). Также результаты исследования внедрены в учебную деятельность кафедры кардиологии, функциональной и ультразвуковой диагностики Института клинической медицины им. Н.В. Склифосовского ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет).

Личный вклад автора

Автором был самостоятельно проведен анализ публикаций, посвященных теме исследования. Также автор приняла участие в формировании дизайна работы. Автором самостоятельно отобраны участники исследования, проанализированы истории болезни, осуществлено наблюдение пациентов, включенных в исследование, в динамике; произведен забор биоматериала (крови), выделены

образцы плазмы из крови у 182 пациентов. Автором лично выполнена статистическая обработка полученных результатов научной работы и сформирована база данных профилей циркулирующих микроРНК у пациентов с острым коронарным синдромом. Результаты проведенного исследования представлены в виде диссертационной работы и отформатированы согласно ГОСТ Р 7.0-11-2011.

Вклад автора является ключевым в проведении диссертационной работы.

Публикации по теме диссертации

По результатам исследования автором опубликовано 10 печатных работ, в том числе 3 научные статьи с результатами собственных исследований в изданиях индексируемых в международных базах Web of Science, Scopus, PubMed; 7 публикаций в иных изданиях, из них 2 статьи с обзором литературы, а также 3 публикации в сборниках материалов международных и всероссийских научных конференций.

Структура и объем диссертации

Диссертация выполнена на 99 страницах машинописного текста, иллюстрирована 7 таблицами и 28 рисунками. В структуре работы представлены следующие разделы: введение, 4 основные главы (обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты исследования, обсуждение полученных результатов), выводы и практические рекомендации. В работе представлен библиографический указатель, содержащий 108 источников литературы, в том числе отечественных - 10 и зарубежных - 98.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Проблемы своевременной диагностики острого коронарного синдрома: скрининг, дифференциальный диагноз, прогностические возможности

Сегодня достигнуты несомненные достижения в своевременной диагностике ОКС, хотя в структуре сердечно-сосудистых заболеваний, ассоциированных с ВСС, это состояние по-прежнему занимает одно из лидирующих мест. Представляется крайне перспективным поиск дополнительного неивазивного метода диагностики этого острого состояния, который мог бы использоваться как легко воспроизводимый скрининговый метод. С учетом ряда сомнительных ситуаций с точки зрения дифференциального диагноза состояний, вызывающих повреждение миокарда, актуален поиск биомаркера с высокой диагностической и прогностической ценностью [4].

Само понятие ОКС подразумевает экстренную госпитализацию с целью уточнения и исключения ОИМ. По сути, принимая решение об экстренной госпитализации пациента с ОКС на основании клинического статуса и динамики ЭКГ покоя, врач констатирует некоторое «экстренное патологическое состояние», которое требует немедленной детализации, верификации диагноза и принятия решения о необходимости проведения «золотого стандарта» диагностики ИБС -коронароангиографии (КАГ).

При этом разделение этого синдрома на ОКС с подъемом сегмента ST (где риск нефатальных и фатальных осложнений выше) и ОКС без подъема сегмента ST позволяет стратифицировать риск осложненного течения ОИМ еще на догоспитальном этапе.

Таким образом, выделяя среди ОКС различные формы с учетом риска их осложнений можно экстренно проводить мероприятия вторичной профилактики, где основной целью является сокращение времени ишемии миокарда и проведение реперфузионной терапии. Общепринятая тактика с доставкой больного в ближайший сердечно-сосудистый центр для проведения чрескожного коронарного

вмешательства (ЧКВ) в течение ближайших 2 часов является тактикой выбора. При технической невозможности ЧКВ и при отсутствии противопоказаний пациенту проводится системная тромболитическая терапия.

Экстренная транспортировка больного с ОКСбпST зависит от стратификации риска. Пациенты с ОКСбпST с очень высоким риском осложнений (нестабильная гемодинамика или кардиогенный шок, некупирующиеся ангинозные боли, признаки острой СН, наличие механических осложнений, жизнеугрожающие нарушения сердечного ритма, остановка кровообращения) также должны быть экстренно доставлены в рентгеноперационную для проведения первичного ЧКВ [10]. Пациентам с высоким риском показано проведение ЧКВ в течение следующих 24 часов, всем прочим больным инвазивная стратегия показана селективно, особенно при наличии клинического подозрения диагноза НС [10, 11].

Важным вопросом является дифференциальный диагноз ОИМ и НС, который основывается на наличии признаков повреждения миокарда. Дифференциация этих состояний абсолютно необходима для пациентов с ОКС в как можно более ранние сроки.

Отошёл в диагностическое прошлое повышенный уровень МВ фракции креатинфосфокиназы (МВ-КФК) через 4 часа после начала инфаркта: сегодня специфическая лабораторная диагностика повреждения миокарда базируется на динамике уровня тропонина.

В соответствии с четвертым универсальным определением ОИМ, он определяется, как состояние с наличием признаков ишемии миокарда и нарастанием и/или снижением уровня сердечного тропонина (при условии, что хотя бы одно значение превышало 99 перцентиль от верхней границы нормы) [12].

Высокий уровень тропонина в крови пациента с повреждением миокарда обусловлен тем, что оба используемых в диагностике варианта (тропонин I и тропонин Т) являются составляющими контрактильного аппарата кардиомиоцитов. Через 3-4 часа после повреждения миокарда эти белки могут быть определены в кровотоке и сохраняются в крови пациента в течение нескольких дней.

Широкая распространённость такого варианта диагностики с общепринятыми высокочувствительными системами детекции этого биомаркера безусловно позволила выявлять признаки повреждения миокарда гораздо раньше по сравнению с отошедшим в прошлое биомаркером МВ-КФК [13]. Тем не менее, можно сказать, что несомненными достоинствами этих дигностических маркеров является их высокая чувствительность при неидеальной специфичности. Именно эта неидеальность не всегда позволяет дифференцировать ОИМ с другими причинами повышения уровня этого биомаркера и, следовательно, предполагает обязательное использование инвазивных инструментальных методов диагностики со всеми вытекающими перипроцедурными рисками осложнений.

Эра диагностики с широким использованием тропонина неизбежно сформировала понятие «лабораторных признаков повреждения миокарда». Повышенный уровень тропонина крови в сочетании с клиникой ОКС предполагает проведение КАГ, при этом значимый коронарный атеросклероз выявляется не всегда. С учетом невысокой доступности такого дорогостоящего метода, как магнитно-резонансная томография (МРТ) сердца и других вариантов визуализации, диагноз у этих пациентов зачастую затруднен.

Давность ИМпST менее 48 часов предполагает проведение первичного ЧКВ, однако повышение уровня тропонина не всегда позволяет точно определить давность повреждения, поскольку, достигая своего максимального значения в течение первых 24 часов, он может сохранять свой повышенный уровень в течение нескольких дней. В соответствии с действующими рекомендациями, рутинное ЧКВ не рекомендовано пациентам с ИМпST при длительности более 48 часов и при отсутствии клинических симптомов ишемии [11].

Нередкая «смазанность» клинической картины и сомнительная динамика ЭКГ затрудняют принятие решения о необходимости проведения первичного ЧКВ. Как известно, проведение ЧКВ с восстановлением кровотока в эпикардиальных артериях, особенно после длительной окклюзии, иногда приводит к повреждению микроциркуляторного русла (МЦР) с развитием феномена по гейо,№.

Повреждение МЦР, окклюзия тромботическими массами мелких сосудов и геморрагическое имбибиция мышечной ткани являются основными причинами этого феномена. [14].

Поиск маркеров с прогностической ценностью у пациентов с постинфарктным кардиосклерозом производился неоднократно. Проведение реваскуляризирующего вмешательства ассоциировано, с одной стороны, со снижением летальности у пациентов с ОИМ. Однако примерно 50% этих больных демонстрируют признаки хронической сердечной недостаточности (ХСН) в течение следующих 5 лет [15].

При этом на сегодняшний день выделен ряд доказанных факторов, связанных с риском развития ХСН после перенесенного ИМ: размер перенесенного ОИМ, систолическая и диастолическая дисфункция левого желудочка (ЛЖ), особенности генотипа и признаки воспаления [16]. Тем не менее, точный прогноз этого осложнения у пациентов с перенесенным ранее инфарктом для своевременной первичной и вторичной профилактики ХСН по-прежнему актуален [17].

Важной задачей практической кардиологии является возможность достоверно оценить риск ОИМ у лиц любого возраста: как молодых пациентов, так и лиц среднего возраста. При этом особый интерес представляют лица, у которых ранее ИБС не диагностировалась и отсутствуют какие-либо жалобы вообще.

1.2 Современные представления о микроРНК

Открытие структуры молекулы ДНК, опубликованное в результатах работы в журнале Nature Френсисом Криком и Джеймсом Уотсоном в 1953 году, явилось базой для современной молекулярной генетики и молекулярной кибернетики [18]. Один из крупнейших научных проектов под названием «Геном человека» (The Human Genome Project), созданный под руководством Джеймса Уотсона, позволил сформулировать задачу, которая продолжает решаться практически ежедневно: проведение полного секвенирования ДНК человека. При этом на сегодняшний день

считается доказанным, что имеются также гены с неясной функцией, которые не кодируют никакие белки.

В течение последних 30 лет именно вопрос функционального назначения некодирующих РНК вызывает большой исследовательский интерес [19, 20]. Сегодня выделяют несколько классов некодирующих РНК, которые регулируют экспрессию генов:

1. малые интерферирующие РНК (siRNA);

2. пиРНК (РШ^А);

3. микроРНК (microRNA).

Представленная работа и настоящий литературный обзор посвящены микроРНК как варианту некодирующих регуляторных малых РНК.

1.3 Биологический цикл микроРНК

Зрелая (готовая к своему функционированию) последовательность микроРНК представляет собой небольшую РНК длиной около 18-25 (чаще - 22) нуклеотидов [5].

На сегодняшний день микроРНК — это уже сформированное понятие, под которым понимают большой класс РНК, широко распространенный у всех высших эукариот [21]. Они могут различаться по происхождению и транскрибироваться с некодирующих последовательностей ДНК, образовываться из интронов или даже экзонов протеин-кодирующих генов.

На первом этапе внутри клеточного ядра происходит транскрипция первичной микроРНК (pri-microRNA) при помощи РНК-полимеразы II. У некоторых вирусных микроРНК транскрипция может происходить с помощью фермента РНК-полимеразы III. Чаще всего транскрипция микроРНК происходит изолированно одна от другой, однако описаны также виды микроРНК, транскрибирующиеся единым фрагментом. Для таких микроРНК принято говорить

о кластере микроРНК, при этом одним из наиболее известных кластеров является miR17-92. Причины кластерной транскрипции до сих пор не до конца ясны.

Доказано, что на транскрипцию первичной микроРНК влияет множество факторов (p53, MYC, MYOD и др.) [22]; изменение конформации белков-гистонов, метилирование ДНК также могут вносить свой вклад в эпигенетическую регуляцию синтеза первичной микроРНК.

Синтезированная первичная микроРНК имеет сравнительно большую (по сравнению со зрелой микроРНК) по данным рентгенокристаллографии длину: ее составляют 300-1000 пар нуклеотидов. В этом полинуклеотиде происходят преобразования структуры, известные под общим названием - процессинг [23]. Далее в процессе трансформации к первичной микроРНК присоединяется белок Drosha, который является РНазой III-типа эндонуклеазой и кофакторный белок DGCR8 (DiGeorge Syndrome Critical Region 8) [24]. DGCR8 «узнает» свою комплементарную первичную микроРНК, связываясь с белком Drosha в области С-конца.

Однако, белок DGCR8 способен образовывать димер независимо от Drosha, стабилизировать структуру Drosha, обеспечивая этим наиболее эффективный процессинг. Таким образом, в микропроцессорном комплексе происходит расщепление первичной микроРНК с образованием предшественника микроРНК (пре-микроРНК). Эта двухцепочечная РНК имеет гораздо меньшую длину (около 60 пар нуклеотидов) и характерную форму шпильки с «основанием» и терминальной петлей. Затем, с помощью белка экспортина 5, который «узнает» нуклеотидную последовательность в основании молекулы, она экспортируется из ядра клетки в цитоплазму.

Неактивность гена, кодирующего белок экспортин 5, которое происходит при некоторых видах новообразований, приводит к снижению концентрации микроРНК не только в цитоплазме, но и внутри ядра, что позволяет предположить антинуклеолитическое действие этого белка [25, 26].

Следующей ступенью трансформации микроРНК является взаимодействие с эндонуклеазой Dicer. Считается, что РНазная активность Dicer является ключевой

в процессе преобразования микроРНК, сайленсинге генов и противовирусной реакции [27]. Имеется ряд исследований, которые показывают, что Dicer с помощью своего PAZ домена узнает З'выступающий нуклеотидный конец и расщепляет микроРНК, создавая короткий дуплекс РНК.

Существует несколько способов созревания микроРНК по направлению отсчета взаимодействия молекулы и белка Dicer: от 3' конца, от 5' конца или от терминальной петли молекулы [28]. В зависимости от направления цепочки микроРНК определяется название зрелой микроРНК: в названии имеется пометка 5p, если цепочка направляется от 5' конца, а Зр - если направление исходит именно от этого З'конца.

Образованная последовательность зрелой микроРНК может быть погружена в комплекс с белком AGO в зависимости от различных условий (тип клетки, концентрация микроРНК и RISC комплекса в цитоплазме и т.д.). AGO является одним из представителей целого семейства белков (Argonaute family), 4 из которых встречаются в организме человека (AGO 1-4).

Известно, что при большей термодинамической нестабильности 5' конца или наличии урацила в этой позиции лидирующей будет 5' цепочка. Непогружённая в комплекс с AGO цепочка называется пассажирской, далее она отделяется и расщепляется эндонуклеазой [29]. После такого «пассажирского отделения» образуется зрелый РНК-индуцированный сайленсинг комплекс (RNA-induced silencing complex, RISC). Именно он - лидирующая цепочка РНК, связанная с AGO белком. К RISC могут присоединяться различные белки, модифицируя его функцию. Этот комплекс связывается в области между 2 и 8 нуклеотидом микроРНК с комплементарной последовательностью матричной РНК. Так блокируется или уменьшается трансляция белка.

Различные механизмы влияют на результат взаимодействия RISC и мРНК: в случае высокой комплементарности таргентной мРНК возникает деградация последней. На данный момент описано множество способов взаимодействия RISC и мРНК, которые определяются рядом сложных внутриклеточных взаимодействий.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Стоногина Дарья Алексеевна, 2024 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Эпидемиология сердечно-сосудистых заболеваний и их факторов риска в регионах Российской Федерации. Третье исследование (ЭССЕ-РФ-3). Обоснование и дизайн исследования / О.М. Драпкина, С.А. Шальнова, А.Э. Имаева [и др.] // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2022. - Т. 21. - № 5. - С. 48-57. - doi:10.15829/1728-8800-2022-3246.

2. Jones, N.R. Prognosis following a diagnosis of heart failure and the role of primary care: a review of the literature / N.R Jones, F.R Hobbs, C.J. Taylor // British Journal of General Practice Open (BJGP). - 2017. - Vol. 1. - № 3. -bjgpopen17X101013. - doi: 10.3399/bjgpopen17X101013. PMID: 30564675; PMCID: PMC6169931.

3. Социально-экономический ущерб от острого коронарного синдрома в Российской Федерации / А.В. Концевая, А.М. Калинина, И.Е. Колтунов, Р.Г. Оганов // Рациональная Фармакотерапия в Кардиологии (РФК). - 2011. - Т. 7. - № 2. - С. 158 - 166. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n7sotsialno-ekonomicheskiy-uscherb-ot-ostrogo-koronarnogo-sindroma-v-rossiyskoy-federatsii (дата обращения: 03.01.2024).

4. Современный алгоритм диагностики ишемической болезни сердца: достижения и перспективы. / Нго Билонг Экеди Анж Вероник, А.С. Аксельрод, Д.Ю. Щекочихин, Д.А. Стоногина [и др.] // Кардиология и сердечно-сосудистая хирургия. - 2019. - Т. 12. - № 5. - С. 418 - 428.

5. Циркулирующие микроРНК как биомаркеры риска сердечнососудистых осложнений у больных с ИБС: достижения и трудности последних лет / Д.А. Стоногина, А.В. Желанкин, А.С. Аксельрод [и др.] // Кардиология и сердечно-сосудистая хирургия. - 2019. - Т.12. - №1. - С. 17-24.

6. Bhaskaran, M. MicroRNAs: history, biogenesis, and their evolving role in animal development and disease / M. Bhaskaran, M. Mohan // Veterinary Pathology. -2014. - Vol. 51. - № 4. - Р. 759-774. - doi: 10.1177/0300985813502820. Epub 2013 Sep 17. PMID: 24045890; PMCID: PMC4013251.

V. Kiselev, F.L. MicroRNA and cancer / F.L. Kiselev // Molecular Biology. -2014. - Vol. 48. - № 2. - P. 232-242. Russian. PMID: 25S50292.

S. Assessing sample and miRNA profile quality in serum and plasma or other biofluids / T. Blondal, S.J. Nielsen, A. Baker, [et al.] II Methods. - 2013. - Vol. 59. -№ 1. - P. S1-S6. - https://doi.org/10.1016/j.ymeth.2012.09.015. ISSN 10462023.

9. Systematic review of microRNA biomarkers in acute coronary syndrome and stable coronary artery disease / A. Kaur, S.T Mackin, K. Schlosser, [et al.] // Cardiovascular Research. - 2020. - Vol. 11б. - № б. - P. 1113-1124. - https://doi.org/ 10.1093/cvr/cvz302.

10. 2023 ESC Guidelines for the management of acute coronary syndromes / R.A. Byrne, X. Rossello, J.J Coughlan, [et al.] // European Heart Journal. - 2023. -Vol. 44. - № 38. - Р. 3720-3826. - doi: 10.1093/eurheartj/ehad191. PMID: 3?б22б54.

11. Острый инфаркт миокарда с подъемом сегмента ST электрокардиограммы. Клинические рекомендации 2020. Российское кардиологическое общество, Aссоциация сердечно-сосудистых хирургов России. II Российский кардиологический журнал. - 2020. - Т. 25. - № 11. - 4103. -doi: 10.15829/15б0-40?1 -2020-4.

12. Fourth Universal Definition of Myocardial Infarction (2018) / K. Thygesen, J.S. Alpert, A.S. Jaffe, [et al.] // Global Heart. - 2018. - Vol. 13. - № 4. - Р. 305-338. -doi: 10.1016/j.gheart.2018.08.004. Epub 2018 Aug 25. PMID: 30154043.

13. Mueller, C. Biomarkers and acute coronary syndromes: an update / C. Mueller // European Heart Journal. - 2014. - Vol. 35. - № 9. - P. 552-55б. -https ://doi.org/10.1093/eurheartj/eht530.

14. Intramyocardial haemorrhage after acute myocardial infarction / R. Betgem, G. de Waard, R. Nijveldt, [et al.] // Nature Reviews Cardiology. - 2015. - Vol. 12. -P. 15б-1б?. - https://doi.org/10.103S/nrcardio.2014.1SS.

15. Intramyocardial hemorrhage drives fatty degeneration of infarcted myocardium / I. Cokic, S.F. Chan, X. Guan, [et al.] // Nature Communications. - 2022. -Vol. 13 - Article б394. - https://doi.org/10.1038/s41467-022-33776-x.

16. Heart failure after myocardial infarction: incidence and predictors / D. Jenca, V. Melenovsky, J. Stehlik, [et al.] // ESC Heart Failure. - 2021. - Vol. 8. - № 1. -Р. 222-237. doi: 10.1002/ehf2.13144. Epub 2020 Dec 14. PMID: 33319509; PMCID: PMC7835562.

17. Кожевникова, М.В. Биомаркеры сердечной недостаточности: настоящее и будущее / М.В. Кожевникова, Ю.Н. Беленков // Кардиология. - 2021. - Т. 61. - № 5. - С. 4-16. - https://doi.org/10.18087/cardio.202L5.n1530.

18. Watson, J. Molecular Structure of Nucleic Acids: A Structure for Deoxyribose Nucleic Acid / J. Watson, F. Crick // Nature. - 1953. - Vol. 171. - P. 737738. - https://.org/10.1038/171737a0.

19. Lee, R.C. The C. elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14. / R.C. Lee, R.L. Feinbaum, V. Ambros // Cell. -1993. - Vol. 75. - № 5. - P. 843-854. - doi: 10.1016/0092-8674(93)90529-y. PMID: 8252621.

20. Napoli, C. Introduction of a chimeric chalcone synthase gene into petunia results in reversible co-suppression of homologous genes in trans / C. Napoli, C. Lemieux, and R. Jorgensen // Plant Cell. - 1990. - Vol. 2. - P. 279-289. -doi:10.2307/3869076.

21. microRNAs in action: biogenesis, function and regulation / R. Shang, S. Lee, G. Senavirathne, [et al.] // Nature Reviews Genetics. - 2023. - Vol. 24. - P. 816-833. -https://.org/10.1038/s41576-023-00611-y.

22. Ha, M. Regulation of microRNA biogenesis / M. Ha, V. Kim // Nature Reviews Molecular Cell Biology. - 2014. - Vol. 15. - P. 509-524. -https ://doi.org/10.103 8/nrm3838.

23. Schanen, B.C. Transcriptional regulation of mammalian miRNA genes. / Schanen B.C., Li X. // Genomics. - 2011. - Vol. 97. - № 1. - P. 1-6. -doi: 10.1016/j.ygeno.2010.10.005. Epub 2010 Oct 23. PMID: 20977933; PMCID: PMC3019299.

24. Molecular cloning and expression analysis of a novel gene DGCR8 located in the DiGeorge syndrome chromosomal region / A. Shiohama, T. Sasaki, S. Noda, [et

al.] // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 2003. - Vol. 304. - № 1. - P. 184-190. - doi: 10.1016/s0006-291x(03)00554-0. PMID: 12705904.

25. Exportin-5 mediates the nuclear export of pre-microRNAs and short hairpin RNAs / R. Yi, Y. Qin, I.G. Macara, [et al.] // Genes & Development. - 2003. - Vol. 17.

- № 24. - P. 3011-3016. - doi: 10.1101/gad.1158803. Epub 2003 Dec 17. PMID: 14681208; PMCID: PMC305252.

26. A genetic defect in exportin-5 traps precursor microRNAs in the nucleus of cancer cells / S.A. Melo, C. Moutinho, S. Ropero, [et al.] // Cancer Cell. - 2010. - Vol. 18. - № 4. - P. 303-315. - doi: 10.1016/j.ccr.2010.09.007. PMID: 20951941.

27. Carmell, M.A. RNase III enzymes and the initiation of gene silencing / M.A. Carmell, G.J. Hannon // Nature Structural & Molecular Biology. - 2004. - Vol. 11. - № 3. - P. 214-218. - doi: 10.1038/nsmb729. PMID: 14983173.

28. Dicer recognizes the 5' end of RNA for efficient and accurate processing / J.E. Park, I. Heo, Y. Tian, [et al] // Nature. - 2011. - 475 (7355). - P. 201-205. - doi: 10.1038/nature10198. PMID: 21753850; PMCID: PMC4693635.

29. Overview of MicroRNA Biogenesis, Mechanisms of Actions, and Circulation / J. O'Brien, H. Hayder, Y. Zayed, [et al.] // Frontiers in Endocrinology (Lausanne). - 2018. - Vol. 9. - Article 402. - doi: 10.3389/fendo.2018.00402. PMID: 30123182; PMCID: PMC6085463.

30. A MicroRNA targeting dicer for metastasis control / G. Martello, A. Rosato, F. Ferrari, [et al.] // Cell. - 2010. - Vol. 141. - № 7. - P. 1195-1207. - doi: 10.1016/j.cell.2010.05.017. PMID: 20603000.

31. Pardini, B. MicroRNAs and Long Non-Coding RNAs and Their HormoneLike Activities in Cancer / B. Pardini, G.A. Calin // Cancers (Basel). - 2019. - Vol. 11.

- № 3. - 378. - doi: 10.3390/cancers11030378. PMID: 30884898; PMCID: PMC6468345.

32. MicroRNAs are transported in plasma and delivered to recipient cells by high-density lipoproteins / K. Vickers C., B.T. Palmisano, B.M. Shoucri, [et al.] // Nature Cell Biology. - 2011. - Vol. 13. - № 4. - P. 423-433. - doi: 10.1038/ncb2210. Epub

2011 Mar 20. Erratum in: Nat Cell Biol. 2015 Jan;17(1):104. PMID: 21423178; PMCID: PMC3074610.

33. The microRNA spectrum in 12 body fluids / J.A. Weber, D.H. Baxter, S. Zhang, [et al.] // Clinical Chemistry. - 2010. - Vol. 56. - № 11. - P. 1733-1741. -doi: 10.1373/clinchem.2010.147405. Epub 2010 Sep 16. PMID: 20847327; PMCID: PMC4846276.

34. Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection / P.S. Mitchell, R.K. Parkin, E.M. Kroh, [et al.] // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2008. - Vol. 105. - № 30. - P. 10513-10518. - doi: 10.1073/pnas.0804549105. Epub 2008 Jul 28. PMID: 18663219; PMCID: PMC2492472.

35. Peng, Y. The role of MicroRNAs in human cancer / Y. Peng, C. Croce // Signal Transduction and Targeted Therapy. - 2016. - Vol. 1. - Article 15004. -https://doi.org/10.1038/sigtrans.2015.4.

36. Взгляд на гипертрофию миокарда с позиции транскриптомики и метаболомики / Г.А. Шакарьянц, М.В. Кожевникова, В.Ю. Каплунова [и др.] // Кардиология. - 2020. - Т. 60. - № 4. - С. 120-129. -https://doi.org/10.18087/cardio.2020.4.n1063.

37. Циркулирующие микроРНК-21-5р, микроРНК146а-5р, микроРНК320а-3р у пациентов с фибрилляцией предсердий в сочетании с гипертонической болезнью и ишемической болезнью сердца / С.В. Васильев, А.С. Аксельрод, А.В Желанкин, Д.А. Стоногина [и др.] // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. -2022. - Т. 21. - № 1. - 2814.

38. Elevated Plasma Levels of Circulating Extracellular miR-320a-3p in Patients with Paroxysmal Atrial Fibrillation / A.V. Zhelankin, S.V. Vasiliev, D.A. Stonogina, [et al.] // International Journal of Molecular Sciences. - 2020. - Vol. 21. - № 10. - 3485. -doi: 10.3390/ijms21103485. PMID: 32429037; PMCID: PMC7279020.

39. The Impact of Hemolysis on Cell-Free microRNA Biomarkers / M.B. Kirschner, J.J. Edelman, S.C. Kao, [et al.] // Frontiers in Genetics. -2013. - Vol. 4. -Article 94. - doi: 10.3389/fgene.2013.00094. PMID: 23745127; PMCID: PMC3663194.

40. Comparison of methods for miRNA isolation and quantification from ovine plasma / K. Wright, K. de Silva, A.C. Purdie, [et al.] // Scientific Reports. - 2020. - № 10. - P. 825. - https://doi.org/10.1038/s41598-020-57659-7.

41. Cross-platform analysis of global microRNA expression technologies / C.L. Yauk, A. Rowan-Carroll, J.D. Stead, A. Williams, [et al.] // BMC Genomics. - 2010. -Vol. 11. - 330. - doi: 10.1186/1471-2164-11-330. PMID: 20504329; PMCID: PMC2890562.

42. Systematic review of microRNA biomarkers in acute coronary syndrome and stable coronary artery disease / A. Kaur, S.T. Mackin, K. Schlosser, [et al.] // Cardiovascular Research. - 2020. - Vol. 116. - № 6. - P. 1113-1124. -doi: 10.1093/cvr/cvz302. PMID: 31782762.

43. Диагностические возможности профилей циркулирующих микроРНК у пациентов с острым коронарным синдромом и стабильной ИБС / Д.А. Стоногина, А.В. Желанкин, С.В. Васильев [и др.] // Кардиология и сердечно-сосудистая хирургия. - 2024. - Т. 17, № 2. - С. 122-132.

44. Gupta, S.K. Circulating microRNAs as biomarkers and potential paracrine mediators of cardiovascular disease / S.K. Gupta, C. Bang, T. Thum // Circulation: Cardiovascular Genetics. - 2010. - Vol. 3. - № 5. - P. 484-488. - doi: 10.1161/CIRCGENETIC S.

110.958363. PMID: 20959591.

45. Deficiency of the microRNA-31 -microRNA-720 pathway in the plasma and endothelial progenitor cells from patients with coronary artery disease / H.W. Wang, T.S. Huang, H.H. Lo, [et al.] // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology (ATVB). - 2014. - Vol. 344. - P. 857-869. - doi: 10.1161/ATVBAHA.113.303001. Epub 2014 Feb 20. PMID: 24558106.

46. Связь регуляторных микроРНК miRNA21, miRNA92, miRNA221 и miRNAlet7 с атеросклеротическим процессом в коронарных и каротидных артериях / Т.В. Соболева, Д.Ю. Щекочихин, Т.А. Демура [и др.] // Кардиология и сердечно-сосудистая хирургия. - 2024. - Т. 17. - № 3. - С. 245-252.

47. Identification of a circulating microRNAs biomarker panel for non-invasive diagnosis of coronary artery disease: case-control study / H.Y. Abdallah, R. Hassan, A. Fareed, [et al.] // BMC Cardiovascular Disorders. - 2022. - Vol. 22. - Article 286. -https://doi.org/10.1186/s12872-022-02711-9.

48. Plasma levels of microRNA-145 are associated with severity of coronary artery disease / H. Gao, R.R. Guddeti, Y. Matsuzawa, [et al.] // PloS One. - 2015. - Vol.

10. - № 5. - e0123477.

49. Plasma levels of lipometabolism-related miR-122 and miR-370 are increased in patients with hyperlipidemia and associated with coronary artery disease / W. Gao, H.-W. He, Z.-M. Wang, [et al.] // Lipids in Health and Disease. - 2012. - Vol.

11. - Article 55.

50. Altered serum microRNAs as novel diagnostic biomarkers for atypical coronary artery disease / J. Wang, Y. Pei, Y. Zhong, [et al.] // PLoS One. - 2014. - Vol. 9. - e107012.

51. Circulating miR-155, miR-145 and let-7c as diagnostic biomarkers of the coronary artery disease / J. Faccini, J.B. Ruidavets, P. Cordelier, [et al.] // Scientific Reports. - 2017. - Vol. 7. - Article 42916.

52. Decision making micro RNAs (miR-124, -133a/b, -34a and -134) in patients with occluded target vessel in acute coronary syndrome / J. Gacon, A. Kablak-Ziembicka, E. Sepien, [et al.] // Kardiologia Polska. - 2016. - Vol. 74. - P. 280-288.

53. Plasma microRNA-133a is a new marker for both acute myocardial infarction and underlying coronary artery stenosis / F. Wang, G. Long, C. Zhao, [et al.] // Journal of Translational Medicine. - 2013. - Vol. 11. - Article 222.

54. Circulating microRNAs: a novel potential biomarker for diagnosing acute aortic dissection / J. Dong, J. Bao, R. Feng, [et al.] // Scientific Reports. - 2017. - Vol. 7. - Article 12784. - https://doi.org/10.1038/s41598-017-13104-w.

55. miRNA-197 and miRNA-223 Predict Cardiovascular Death in a Cohort of Patients with Symptomatic Coronary Artery Disease / C. Schulte, S. Molz, S. Appelbaum, [et al.] // PLoS One. - 2015. - Vol. 10. - № 12. - e0145930. - doi: 10.1371/ journal.pone.0145930. PMID: 26720041; PMCID: PMC4699820.

56. MicroRNA expression in circulating microvesicles predicts cardiovascular events in patients with coronary artery disease / F. Jansen, X. Yang, S. Proebsting, [et al.] // Journal of the American Heart Association. - 2014. - Vol. 3. - e001249. -doi: 10.1161/JAHA.114.001249.

57. MicroRNA miR-1 is up-regulated in remote myocardium in patients with myocardial infarction / E. Bostjancic, N. Zidar, D. Stajner, [et al.] // Folia Biologica (Praha). - 2010. - Vol. 56. - P. 27-31.

58. Circulating microRNA-1 as a potential novel biomarker for acute myocardial infarction / J. Ai, R. Zhang, Y. Li, [et al.] // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 2010. - Vol. 391. - P. 73-77.

59. Plasma miR-1, miR-208, miR-499 as potential predictive biomarkers for acute myocardial infarction: an independent study of Han population / X. Liu, Z. Fan, T. Zhao, [et al.] // Experimental Gerontology. - 2015. - Vol. 72. - P. 230-238.

60. Comparing the diagnostic values of circulating microRNAs and cardiac troponin T in patients with acute myocardial infarction / Y.Q. Li, M.F. Zhang, H.Y. Wen, [et al.] // Clinics. - 2013. - Vol. 68. - P. 75-80.

61. Increased microRNA-1 and microRNA- 133a levels in serum of patients with cardiovascular disease indicate myocardial damage / Y. Kuwabara, K. Ono, T. Horie, [et al.] // Circulation: Cardiovascular Genetics. - 2011. - Vol. 4. - P. 446-454.

62. Early assessment of acute coronary syndromes in the emergency department: the potential diagnostic value of circulating microRNAs / M.I. Oerlemans, A. Mosterd, M.S. Dekker, [et al.] // EMBO Mol Med. - 2012. - Vol. 4. - P. 1176-1185.

63. Circulating Extracellular miRNA Analysis in Patients with Stable CAD and Acute Coronary Syndromes / A.V. Zhelankin, D.A. Stonogina, S.V. Vasiliev, [et al.] // Biomolecules. - 2021. - Vol. 11. - № 7. - Article 962. - doi: 10.3390/biom 11070962. PMID: 34209965; PMCID: PMC8301961.

64. Signature of circulating microRNAs as potential biomarkers in vulnerable coronary artery disease / J. Ren, J. Zhang, N. Xu, [et al.] // PLoS One. - 2013. - Vol. 8. - e80738.

65. Novel biomarker microRNAs for subtyping of acute coronary syndrome: a bioinformatics approach / Y. Zhu, Y. Lin, W. Yan, [et al.] // BioMed Research International. - 2016. - 4618323.

66. Human circulating microRNA-1 and microRNA-126 as potential novel indicators for acute myocardial infarction / G. Long, F. Wang, Q. Duan, [et al.] // International Journal of Biological Sciences. - 2012. - Vol. 8. - P. 811-818.

67. Circulating miR-1 as a potential predictor of left ventricular remodeling following acute ST-segment myocardial infarction using cardiac magnetic resonance / Q. Ma, Y. Ma, X. Wang, [et al.] // Quantitative Imaging in Medicine and Surgery. - 2020. -Vol. 10. - P. 1490-1503.

68. Circulating cardio-enriched microRNAs are associated with long-term prognosis following myocardial infarction / O. Gidlof, J.G. Smith, K. Miyazu, [et al.] // BMC Cardiovascular Disorders. - 2013. - Vol. 13. - P. 12.

69. Relationship between circulating miRNA-3 0e and no-reflow phenomenon in STEMI patients undergoing primary coronary intervention / Q. Su, Z. Ye, Y. Sun, [et al.] // Scandinavian Journal of Clinical Laboratory Investigation. - 2018. - Vol. 78. - P. 318324.

70. MicroRNA-21 prevents excessive inflammation and cardiac dysfunction after myocardial infarction through targeting KBTBD7 / L. Yang, B. Wang, Q. Zhou, [et al.] // Cell death & disease. - 2018. - Vol. 9. - Article 769.

71. 2019 ESC Guidelines for the diagnosis and management of acute pulmonary embolism developed in collaboration with the European Respiratory Society (ERS) / S.V. Konstantinides, G. Meyer, C. Becattini, [et al.] // European Heart Journal. - 2020. - Vol. 41. - № 4. - P. 543-603. - doi: 10.1093/eurheartj/ehz405. PMID: 31504429.

72. Serum microRNA-1233 is a specific biomarker for diagnosing acute pulmonary embolism / T. Kessler, J. Erdmann, B. Vilne, [et al.] // Journal of Translational Medicine. - 2016. - Vol. 14. - № 1. -Article 120. - doi: 10.1186/s12967-016-0886-9. PMID: 27150028; PMCID: PMC4858885.

73. MicroRNA-221-3p promotes pulmonary artery smooth muscle cells proliferation by targeting AXIN2 during pulmonary arterial hypertension / X. Nie, Y.

Chen, J. Tan, [et al.] // Vascular Pharmacology. - 2019. - Vol. 116. - P. 24-35. -doi: 10.1016/j.vph.2017.07.002. Epub 2017 Jul 8. PMID: 28694128.

74. Madias, J.E. Takotsubo Cardiomyopathy: Current Treatment / J.E. Madias // Journal of Clinical Medicine. - 2021. - Vol. 10. - № 15. - Article 3440. -https://doi.org/10.3390/jcm10153440.

75. A signature of circulating microRNAs differentiates takotsubo cardiomyopathy from acute myocardial infarction / M. Jaguszewski, J. Osipova, J.R. Ghadri, [et al.] // European Heart Journal. - 2014. - Vol. 35. - № 15. - P. 999-1006. -doi: 10.1093/eurheartj/eht392. Epub 2013 Sep 17. PMID: 24046434; PMCID: PMC3985061.

76. Xia, K. miR-217 and miR-543 downregulation mitigates inflammatory response and myocardial injury in children with viral myocarditis by regulating the SIRT 1/AMPK/NF-kB signaling pathway / K. Xia, Y. Zhang, D. Sun // International Journal of Molecular Medicine. - 2020. - Vol. 45. - № 2. - P. 634-646. - doi: 10.3892/ijmm.2019.4442. Epub 2019 Dec 27. PMID: 31894309.

77. A Novel Circulating MicroRNA for the Detection of Acute Myocarditis / R. Blanco-Domínguez, R. Sánchez-Díaz, H. de la Fuente, [et al.] // New England Journal of Medicine. - 2021. - Vol. 384. - № 21. - P. 2014-2027. - doi: 10.1056/NEJMoa2003608. Erratum in: N Engl J Med. 2022 Nov 17;387(20):1912. PMID: 34042389; PMCID: PMC8258773.

78. Circulating microRNAs predict future fatal myocardial infarction in healthy individuals - The HUNT study / A. Bye, H. Rosjo, J. Nauman, [et al.] // Journal of Molecular and Cellular Cardiology. - 2016. - Vol. 97. - P. 162-168. - doi: 10.1016/j.yjmcc.2016.05.009. Epub 2016 May 15. PMID: 27192016.

79. Rupaimoole, R. MicroRNA therapeutics: towards a new era for the management of cancer and other diseases / R. Rupaimoole, F. Slack // Nature Reviews Drug Discovery. - 2017. - Vol. 16. - P. 203-222. - https://doi.org/10.1038/nrd.2016.246.

80. MicroRNA therapy stimulates uncontrolled cardiac repair after myocardial infarction in pigs / K. Gabisonia, G. Prosdocimo, G.D. Aquaro, [et al.] // Nature. - 2019. - Vol. 569. - P. 418-422. - https://doi.org/10.1038/s41586-019-1191-6.

81. Therapeutic inhibition of miR-208a improves cardiac function and survival during heart failure / R.L. Montgomery, T.G. Hullinger, H.M. Semus, [et al.] // Circulation. - 2011. - Vol. 124. - № 14. - P. 1537-1547. - doi: 10.1161/ CIRCULATIONAHA. 111.030932. Epub 2011 Sep 6. PMID: 21900086; PMCID: PMC3353551.

82. Treatment of HCV infection by targeting microRNA / H.L. Janssen, H.W. Reesink, E.J. Lawitz, [et al.] // New England Journal of Medicine. - 2013. - Vol. 368. -№ 18. - P. 1685-1694. - doi: 10.1056/NEJMoa1209026. Epub 2013 Mar 27. PMID: 23534542.

83. Novel antisense therapy targeting microRNA-132 in patients with heart failure: results of a first-in-human Phase 1b randomized, double-blind, placebo-controlled study / J. Täubel, W. Hauke, S. Rump, [et al.] // European Heart Journal. - 2021. - Vol. 42. - № 2. - P. 178-188. - doi: 10.1093/eurheartj/ehaa898. PMID: 33245749; PMCID: PMC7954267.

84. Viereck, J. Development of a Mechanism-Based Next-Generation Therapeutic for Heart Failure Derived From the Dark Genome / J. Viereck, T. Thum // JACC: Basic to Translational Science. - 2023. - Vol. 8. - № 12. - P. 1595-1598. -doi: 10.1016/j.jacbts.2023.09.006. PMID: 38205345; PMCID: PMC10774590.

85. Small Things Matter: Relevance of MicroRNAs in Cardiovascular Disease / L.J.F. Peters, E.A.L. Biessen, M. Hohl, [et al.] // Frontiers in Physiology. - 2020. - Vol. 11. - Article 793. - doi: 10.3389/fphys.2020.00793. PMID: 32733281; PMCID: PMC7358539.

86. miR-21 in Human Cardiomyopathies / S. Surina, R.A. Fontanella, L. Scisciola, [et al.] // Frontiers in cardiovascular medicine. - 2021. - Vol. 8. - Article 767064. - doi: 10.3389/fcvm.2021.767064. Erratum in: Front Cardiovasc Med. 2022 Apr 25;9: 913429. PMID: 34778418; PMCID: PMC8578278.

87. PTEN and PDCD4 are bona fide targets of microRNA-21 in human cholangiocarcinoma / C.Z. Liu, W. Liu, Y. Zheng, [et al.] // Chinese medical sciences journal. - 2012. - Vol. 27. - № 2. - P. 65-72. PMID: 22770403.

88. miRNA-21 is dysregulated in response to vein grafting in multiple models and genetic ablation in mice attenuates neointima formation / R.A. McDonald, K.M. White, J. Wu, [et al.] // European Heart Journal. - 2013. - Vol. 34. - № 22. -P. 1636-1643. - doi: 10.1093/eurheartj/eht105. Epub 2013 Mar 25. PMID: 23530023; PMCID: PMC3675389.

89. miR-21-3p regulates cardiac hypertrophic response by targeting histone deacetylase-8 / M. Yan, C. Chen, W. Gong, [et al.] // Cardiovascular Research. - 2015. -Vol. 105. - № 3. - P. 340-352. - https://doi.org/10.1093/cvr/cvu254.

90. MicroRNA expression signature and the role of microRNA-21 in the early phase of acute myocardial infarction / S. Dong, Y. Cheng, J. Yang, [et al.] // Journal of Biological Chemistry. - 2009. - Vol. 284. - № 43. - P. 29514-29525. -doi: 10.1074/jbc.M109.027896. Epub 2009 Aug 25. PMID: 19706597; PMCID: PMC2785585.

91. Role of microRNA-21 and Its Underlying Mechanisms in Inflammatory Responses in Diabetic Wounds / C. Liechty, J. Hu, L. Zhang, [et al.] // International Journal of Molecular Sciences. - 2020. - Vol. 21. - № 9. - Article 3328. - doi: 10.3390/ijms21093328. PMID: 32397166; PMCID: PMC7247578.

92. Anti-microRNA-21 oligonucleotides prevent Alport nephropathy progression by stimulating metabolic pathways / I.G. Gomez, D.A. MacKenna, B.G. Johnson, [et al.] // Journal of Clinical Investigation. - 2015. - Vol. 125. - № 1. - P. 141-156. - doi: 10.1172/JCI75852. Epub 2014 Nov 21. PMID: 25415439; PMCID: PMC4382246.

93. Inhibition of microRNA-146a attenuated heart failure in myocardial infarction rats / J. He, Y. Lu, X. Song, [et al.] // Bioscience Reports. - 2019. - Vol. 39. -№ 12. - BSR20191732. - doi: 10.1042/BSR20191732. PMID: 31763669; PMCID: PMC6928527.

94. NF-kappaB dysregulation in microRNA-146a-deficient mice drives the development of myeloid malignancies / J.L. Zhao, D.S. Rao, M.P. Boldin, [et al.] // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. -

2011. - Vol. 108. - № 22. - P. 9184-9189. - doi: 10.1073/pnas.1105398108. Epub 2011 May 16. PMID: 21576471; PMCID: PMC3107319.

95. NGS-identified circulating miR-375 as a potential regulating component of myocardial infarction associated network / N. Baulina, G. Osmak, I. Kiselev, [et al.] // Journal of Molecular and Cellular Cardiology. - 2018. - Vol. 121. - P. 173-179. - doi: 10.1016/j.yjmcc.2018.07.129. Epub 2018 Jul 17. PMID: 30025897.

96. Plasma microRNA-21, microRNA-146a and IL-13 expression in asthmatic children / R.H.M. Hammad, D.H.E.D. Hamed, M.A.E.R. Eldosoky, [et al.] // Innate Immunity. - 2018. - Vol. 24. - № 3. - P. 171-179. - doi: 10.1177/1753425918763521. PMID: 29635981; PMCID: PMC6852388.

97. Analysis of MiRNA Signatures in CSF Identifies Upregulation of MiR-21 and MiR-146a/b in Patients with Multiple Sclerosis and Active Lesions / M. Muñoz-San Martín, G. Reverter, R. Robles-Cedeño, [et al.] // Journal of Neuroinflammation. - 2019.

- Vol. 16. - Article 220.

98. Interplay between microRNA-17-5p, insulin-like growth factor-II through binding protein-3 in hepatocellular carcinoma / D.A. Habashy, H.M. El Tayebi, I.O. Fawzy, [et al.] // World Journal of Hepatology. - 2016. - Vol. 8. - № 23. - P. 976-984.

- doi: 10.4254/wjh.v8.i23.976. PMID: 27621763; PMCID: PMC4990761.

99. MicroRNA-17-5p Promotes Cardiac Hypertrophy by Targeting Mfn2 to Inhibit Autophagy / X. Xu, Y.L. Su, J.Y. Shi, [et al.] // Cardiovascular Toxicology. -2021. - Vol. 21. - № 9. - P. 759-771. - doi: 10.1007/s12012-021-09667-w. Epub 2021 Jun 12. PMID: 34120306.

100. Circulating pro-angiogenic micro-ribonucleic acid in patients with coronary heart disease / H. Zhang, J. Hao, X. Sun, [et al.] // Interactive Cardiovascular and Thoracic Surgery. - 2018. - Vol. 27. - № 3. - P. 336-342. - doi: 10.1093/icvts/ivy058. PMID: 29608698.

101. U6 is not a suitable endogenous control for the quantification of circulating microRNAs / M. Xiang, Y. Zeng, R. Yang, [et al.] // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 2014. - Vol. 454. - № 1. - P. 210-214. - doi: 10.1016/j.bbrc.2014.10.064. Epub 2014 Oct 18. PMID: 25450382.

102. Atherosclerotic Conditions Promote the Packaging of Functional MicroRNA-92a-3p Into Endothelial Microvesicles / Y. Liu, Q. Li, M.R. Hosen, [et al.] // Circulation Research. - 2019. - Vol. 124. - P. 575-587.

103. Diagnostic Potential of Plasmatic MicroRNA Signatures in Stable and Unstable Angina / Y. D'Alessandra M.C., Carena L., Spazzafumo, [et al.] // PLoS ONE.

- 2013. - Vol. 8. - e80345.

104. Veryaskina, Y.A. Reference Genes for qPCR-Based miRNA Expression Profiling in 14 Human Tissues / Y.A. Veryaskina, S.E. Titov, I.F Zhimulev // Medical Principles and Practice. - 2022. - Vol. 31. - № 4. - P. 322-332. - doi: 10.1159/000524283. Epub 2022 Mar 30. PMID: 35354155; PMCID: PMC9485981.

105. Plasma levels of platelet-enriched microRNAs change during antiplatelet therapy in healthy subjects / T.L. Krammer, M. Kollars, P.A. Kyrle, [et al.] // Frontiers in Pharmacology. - 2022. - Vol. 13. - Article 1078722. -doi: 10.3389/fphar.2022.1078722. PMID: 36578552; PMCID: PMC9790905.

106. Halucha, K. Protective Role of Platelets in Myocardial Infarction and Ischemia/Reperfusion Injury / K. Halucha, A. Rak-Pasikowska, I. Bil-Lula // Cardiology Research and Practice. - 2021. - Article 5545416. - doi: 10.1155/2021/5545416. PMID: 34123416; PMCID: PMC8169247.

107. High miR-126-3p levels associated with cardiovascular events in a general population / O. Martinez-Arroyo, A. Ortega, A. Flores-Chova [et al.] // European Journal of Internal Medicine. - 2023. - Vol. 113. - P. 49-56. - doi: 10.1016/j.ejim.2023.04.013. Epub 2023 Apr 18. PMID: 37080818; PMCID: PMC10271715.

108. Circulating MicroRNAs Are New and Sensitive Biomarkers of Myocardial Infarction / Y. D'Alessandra, P. Devanna, F. Limana, [et al.] // European Heart Journal.

- 2010. - Vol. 31. - P. 2765-2773.