Характеристика фенотипических и функциональных свойств антигенпрезентирующих клеток у больных туберкулезом легких тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Распай, Жанар Мейрамбеккызы

• Распай, Жанар Мейрамбеккызы
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Распай, Жанар Мейрамбеккызы

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. АНТИГЕНПРЕЗЕНТИРУЮЩИЕ КЛЕТКИ В ПАТОГЕНЕЗЕ

ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ (Обзор литературы).

1.1. Введение.

1.2. Характеристика циркулирующих моноцитов у больных туберкулезом легких.

1.3. Изменение функциональных свойств макрофагов у больных туберкулезом.

1.4. Дендритные клетки при туберкулезе и их возможная роль в подержании антигенспецифического ответа.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика больных, включенных в исследование.

2.2. Иммунологические исследования.

2.2.1. Оценка пролиферативной активности МНК.

2.2.2. Выделение моноцитов.

2.2.3. Оценка супрессорной активности моноцитов.

2.2.4. Определение субпопуляций клеток методом проточной цитофлуоргшетрии.

2.2.5. Определение процентного содержания моноцитов с внутриклеточной экспрессией TNF- а и IL-10.

2.2.6. Культивирование макрофагов.

2.2.7. Оценка продукции цитокинов генерированными макрофагами.

2.2.8. Оценка аллостимуляторной активности генерированных макрофагов.

2.2.9. Культивирование дендритных клеток.

2.2.10. Оценка продукции цитокинов генерированными дендритными клетками.

2.2.11. Оценка Thl/Th2-стимулирующей активности ДК.

2.2.12. Оценка аллостгшуляторной активности ДК.

2.2.13. Оценка продукции оксида азота ДК.

2.3. Статистическая обработка полученных результатов.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ГЛАВА 3. Поверхностные маркеры и функциональные свойства моноцитов периферической крови у больных ТБ легких.

ГЛАВА 4. Характеристика фенотипических свойств и функциональной активности макрофагов, сгенерированных из моноцитов периферической крови больных туберкулезом легких.

ГЛАВА 5. Фенотипические и функциональные свойства интерферон-а-индуцированных дендритных клеток у больных туберкулезом легких

ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Характеристика фенотипических и функциональных свойств антигенпрезентирующих клеток у больных туберкулезом легких»

Актуальность исследования

Туберкулёз (ТБ) является древнейшим заболеванием. В странах Западной Европы и США меры, принятые по борьбе с этим недугом, оказываются эффективными, и в настоящее время в указанных регионах ТБ относится к группе оппортунистических заболеваний, присущих исключительно вторичным иммунодефицитам. В то же время в Индии, Китае, странах Африки, Латинской Америки и СНГ, несмотря на использование широкого спектра терапевтических мероприятий, частота туберкулёзной инфекции, её осложнений и сопутствующая летальность занимают первое место среди всех инфекционных заболеваний. Средой формирования туберкулезной инфекции в РФ и странах СНГ традиционно считаются учреждения исправительной системы. В тюрьмах и психоневрологических диспансерах каждый десятый болен туберкулезом. Однако в последние годы серьёзные запущенные формы заболевания выявляются у людей из относительно благополучных социальных групп [21, 103, 88, 102, 133].

Особое значение приобретает увеличение числа больных с тяжелыми остро прогрессирующими формами заболевания, первичной множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) к микобактерии туберкулеза, которые способствуют развитию эпидемии туберкулеза, а ее последствия, представленные в прогнозах для населения России и мира в целом, учитывая резко возросшую миграцию населения, крайне неблагоприятны. Поэтому особенно остро встает проблема поиска альтернативных методов лечения обреченных на неблагоприятный исход больных, как правило, молодого и среднего возраста. Указанная задача осложняется тем, что до сих пор патогенез ТБ остаётся во многом неясным.

Туберкулез относится к гранулематозным болезням. Туберкулезная гранулема квалифицируется как инфекционная, по патогенезу - иммунная с развитием клеточно-опосредованной гиперчувствительности IV типа к М.tuberculosis (МТБ), по морфологии - эпителиоидноклеточная с казеозным некрозом [6]. Важнейшая роль в защите от внутриклеточных патогенов (к которым относится и микобактерия) принадлежит врожденным и приобретенным реакциям клеточного иммунитета. Антигенпрезентирующие клетки (АПК), обладая цитотоксическими свойствами, являются с одной стороны эффекторными клетками врождённого иммунитета, а с другой стороны, являются связующим звеном между врождённым и приобретенным иммунитетом, инициируя адаптивный иммунитет [32].

Человек обладает высокой резистентностью к МТБ. Однако внутри человеческой популяции существуют большие индивидуальные вариации. Поэтому в одних случаях инфицирование заканчивается элиминацией микобактерии, в других - формированием первичного туберкулёзного комплекса с исходом либо в заживление с инкапсуляцией, обызвествлением или окостенением, либо прогрессирование с развитием различных форм генерализации. Чаще проявления первичного туберкулеза остаются неактивными (молчащими) в течение десятилетий или всей жизни индивида. Точные механизмы, лежащие в основе этого явления, еще до конца не объяснены. Реактивация или реинфекция туберкулеза и его клиническая манифестация развивается у 5-10% из числа всех инфицированных лиц. Как правило, эти процессы связаны с нарушением неспецифической резистентности и ослаблением специфического иммунитета. При этом дефект антигенспецифического Т-клеточного ответа может быть обусловлен усилением апоптоза Т-лимфоцитов, индукцией анергии Т-клеток, а также активной супрессией, опосредованной цитокинами и регуляторными Т-клетками с супрессорной активностью [56, 20, 51].

Важную роль в генерации адекватного иммунного ответа при ТБ играют АПК, представленные моноцитами, макрофагами и дендритными клетками (ДК), которые являются компартментом антигенпрезентирующих клеток с выраженной иммунорегуляторной активностью [32]. Поэтому дисфункции антигенпрезентирующих клеток обсуждаются в качестве одного из существенных механизмов нарушения антигенспецифического ответа. Так, при туберкулёзной инфекции моноциты периферической крови, с одной стороны, характеризуются признаками активации, а с другой - выраженными нарушениями регуляторной активности [124, 125]. Существует большое количество исследований, в которых показано, что антигены МТБ при инфицировании макрофагов и дендритных клеток способны изменять их функциональные свойства [79, 46, 86, 54, 44, 67]. Важно отметить, что резидентные макрофаги лёгкого в момент инфицирования не активированы и не способны полноценно элиминировать МТБ. Поэтому для развития полноценного противотуберкулезного ответа требуется постоянное пополнение пула этих клеток за счёт циркулирующих моноцитов периферической крови [32, 92]. При этом отсутствии информации о том, как функционируют макрофаги и дендритные клетки, сгенерированные из моноцитов периферической крови больных ТБ затрудняет осмысление иммунопатогенеза туберкулезной инфекции. Существуют исследования, свидетельствующие об изменениях количественных и функциональных свойств ДК при ТБ [52, 77]. Так, показано, что при ТБ в периферической крови больных ТБ снижается количество как миелоидных, так и плазмацитоидных ДК. Причем количественный дефицит плазмацитоидных ДК сопряжен с функциональными дисфункциями этих клеток, в частности снижением продукции IFN-a. [71]. Однако антигенпрезентирующая функция моноцитов и генерируемых из них макрофагов и ДК, продукция ими цитокинов, способность активировать Th-l/Th-2 ответ у больных ТБ, особенно с учётом антигенспецифического Т- клеточного ответа, остаются во многом неисследованными. Поэтому изучение особенностей фенотипа и функциональных свойств моноцитов, макрофагов и дендритных клеток у больных ТБ, представляет большой научный и практический интерес. Исходя из этого, были сформулированы цель и задачи исследования.

Цель исследования:

На основании исследования фенотипических и функциональных свойств моноцитов, макрофагов и дендритных клеток у больных туберкулёзом лёгких охарактеризовать компартмент антигенпрезентирующих клеток и изучить их роль в развитии Т- клеточных дисфункций при туберкулёзной инфекции.

Для достижения поставленной цели предусматривалось решение следующих задач:

1. Провести сравнительное исследование фенотипических и функциональных свойств моноцитов периферической крови (содержание CD 14 CD 16 клеток, экспрессию ко-стимуляторных молекул, внутриклеточную продукцию цитокинов, супрессорную активность моноцитов) у здоровых доноров и больных ТБ лёгких с сохранным и сниженным антигенспецифическим ответом.

2. Оценить фенотипические (содержание CD14+, CD16+ клеток, экспрессию ко-стимуляторных молекул) и функциональные свойства макрофагов (спонтанную и LPS-стимулированную продукцию цитокинов, аллостимуляторную активность), полученных из моноцитов периферической крови здоровых доноров и больных туберкулёзом лёгких, в том числе у пациентов в зависимости от уровня PPD-стимулированного Т- клеточного ответа.

3. Провести сравнительное исследование поверхностных маркеров, характеризующих дифференцировку и созревание IFN-a индуцированных дендритных клеток у здоровых доноров и больных ТБ.

4. Изучить функциональные свойства (спонтанную и LPS-стимулированную продукцию цитокинов, продукцию NO, аллостимуляторную и ТЬ1/ТЬ2-стимулирующую активность) ДК у больных ТБ, в том числе пациентов с сохранным и сниженным ответом на PPD.

Научная новизна

В представленной работе впервые показано, что при ТБ изменены все типы АПК. Наиболее выраженные изменения выявлены в группе пациентов со сниженным антигенспецифическим Т-клеточным ответом.

В частности, впервые продемонстрировано, что в периферической крови больных ТБ лёгких увеличена фракция моноцитов с внутриклеточной экспрессией IL-10, которая сосредоточена преимущественно среди CD14+CD16+ клеток. Причем увеличение фракции CD14+CD16+ моноцитов, обладающих супрессорной активностью, наблюдается у больных со сниженным ответом на PPD.

Впервые изучены свойства макрофагов, генерированных из моноцитов периферической крови больных ТБ лёгких. Установлено, что аллостимуляторная активность макрофагов у больных ТБ угнетена и это ассоциировано со снижением экспрессии HLA-DR и костимуляторных молекул и повышенной продукцией противовоспалительных цитокинов (IL-10, IL-6). При этом выявленные дисфункции наиболее выражены в группе PPD-анергичных пациентов.

Получены новые данные, характеризующие свойства ДК, индуцированных из моноцитов периферической крови больных ТБ в присутствии GM-CSF и IFN-a. Показано изменение ряда фенотипических свойств, свидетельствующее о нарушении дифференцировки и активации ДК при ТБ инфекции. Кроме этого, выявлены нарушения функциональных свойств IFN-a-индуцированных ДК, которые проявляются сниженной продукцией IFN-y, IFN-a и нитрооксида; усилением продукции IL-10, угнетением аллостимуляторной активности, а также способности к индукции Thl цитокинов. Причем нарушение антигенпрезентирующей функции и способности ДК активировать Thl ответ сопряжено с угнетением антигенспецифического Т-клеточного ответа.

Полученные в целом данные свидетельствуют о важной роли антигенпрезентирующих клеток в поддержании Т-клеточного ответа и раскрывают новые аспекты патогенеза туберкулезной инфекции.

Практическая значимость.

Результаты проведённых исследований позволяют использовать их в решении многих практических задач, связанных с вопросами диагностики, прогноза и лечения пациентов с ТБ инфекцией.

Установленная взаимосвязь между изменениями фенотипических и функциональных свойств АПК и снижением антигенспецифического ответа обосновывает возможность использования указанных параметров для прогнозирования характера течения туберкулёзной инфекции и позволяет рассматривать АПК в качестве новой мишени имунотерапевтических воздействий у больных ТБ легких. Отработка методов генерации IFN-a-индуцированных ДК in vitro позволит использовать эти клетки не только для оценки их функциональной активности, но и применения в качестве клеточных вакцин антигенспецифической иммунотерапии, особенно у больных с наличием множественной лекарственной устойчивости М. tuberculosis к базовой химиотерапии. При этом, учитывая измененный профиль цитокинов, секретируемых ДК, можно полагать, что адьювантная цитокинотерапия может повысить стимулирующий эффект иммунотерапии ДК.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Течение активных форм туберкулеза легких происходит на фоне изменения фенотипических и функциональных свойств всех трех типов АПК — моноцитов периферической крови, полученных из них макрофагов и ДК.

2. Наиболее выраженные изменения фенотипических и функциональных свойств моноцитов, макрофагов и ДК у больных ТБ лёгких характерны для больных ТБ со сниженным антигенспецифическим Т-клеточным ответом.

3. Усиление продукции IL-10 и угнетение антигенпрезентирующей функции (аллостимуляторной активности) являются общими признаками дисфункций различных типов АПК (моноцитов, макрофагов, дендритных клеток) у больных туберкулезом легких.

Объём и структура диссертации:

Диссертация написана в традиционном стиле и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и результатов исследования, 3 глав

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Распай, Жанар Мейрамбеккызы

Выводы

1. Больные туберкулёзом легких характеризуются изменением фенотипических и функциональных свойств циркулирующих моноцитов, о чем свидетельствует снижение экспрессии ко-стимуляторных молекул (CD86) и антигенов ГКГ II класса (HLA-DR), увеличение субпопуляции CD14+CD16+ моноцитов и появление супрессорной активности моноцитов.

2. Супрессорная активность моноцитов характерна для пациентов со сниженным антигенспецифическим ответом и опосредуется вовлечением CD14+CD16+ клеток, что подтверждается более выраженным увеличением их количества у PPD-ареактивных больных, преимущественной локализацией IL-10-позитивных клеток во фракции CD16+ моноцитов.

3. Снижение экспрессии ко-стимуляторных молекул (CD86) и антигенов II класса ГКГ (HLA-DR) в культурах макрофагов PPD-анергичных больных и отсутствие указанных изменений у пациентов с сохранным пролиферативным ответом МНК на PPD указывает на нарушение дифференцировки/созревания макрофагов у больных с дефектом антигенспецифического ответа.

4. Макрофаги, полученные из моноцитов больных со сниженным антигенспецифическим ответом, характеризуются нарушением антигенпрезентирующей и цитокинсекретирующей функций, что подтверждается усилением спонтанной продукции макрофагами IL-6 и LPS-стимулированной продукция IL-10, а также снижением аллостимуляторной активности макрофагов.

5. Больные с активными формами туберкулеза легких характеризуются снижением эффективности IFNa -индуцированной дифференцировки и созревания ДК в культуре in vitro, о чем свидетельствует увеличение в культурах ДК относительного содержания клеток с маркером моноцитов (CD 14) и уменьшение доли зрелых активированных ДК, экспрессирующих молекулу CD25, а также количества клеток с рецептором к IL-3 (CD 123).

6. Изменения функциональной активности ДК проявляются рядом общих (свойственных для больных туберкулезом легких в целом) и частных (характерных для больных с дефектом антигенспецифического ответа) дисфункций. К первой категории относится снижение продукции дендритными клетками IFN-y, IFN-a и нитрооксида, ко второй - усиление продукции IL-10, угнетение аллостимуляторной активности ДК, снижение Th-1- и усиление ТЪ2-стимуляторной активности ДК.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Распай, Жанар Мейрамбеккызы, 2008 год

1. Абрамов В.В., Ершов О.В., Филатенков Е.В. Закономерности миграции и циркуляции иммунокомпетентных клеток: фундаментальные и прикладные аспекты.//Успехи современной биологии.- 2007.- т. 127. №3 -стр. 257-266.

2. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге.// Изд-во «Наука» Сибирское отделение.- Новосибирск.-1983.- стр. 141-143.

3. Маянский Д.Н. Хроническое воспаление. М.: Медицина.- 1991.- 272с.

4. Сахно JI.B., Хонина Н.А., Норкина О.В., Мостовая Г.В., Никонов С.Д., Огиренко А.П., Черных Е.Р., Останин А.А. Участие оксида азота в развитии туберкулиновой анергии у пациентов с туберкулезом легких // Пробл. туб. 2001. - N 8. - С.42-46.

5. Сахно JI.B., Тихонова М.А., Курганова Е.В., Шевела Е.Я., Никонов С.Д., Жданов О.А., Мостовая Г.В., Останин А.А., Черных Е.Р. Т-клеточная анергия в патогенезе иммунной недостаточности при туберкулезе легких // Пробл. туб. 2004. - N 5. - С. 23-27.

6. Струков А.И., Кауфман О.Я. Гранулематозное воспаление и гранулематозные болезни // АМН СССР.- М.: Медицина.- 1989.-184с.

7. Хоменко А.Г. Туберкулез //Под ред. А.Г.Хоменко. М., 1997.

8. Шкурупий В.А., Курунов Ю.Н., Яковченко Н.Н. Лизосомотропизм -проблемы клеточной физиологии и медицины// Новосибирск: НГМА.-1999.- 289с.

9. Appelberg R., Sarmento A., Castro A.G. Tumour necrosis factor-alpha (TNF-alpha) in the host resistance to mycobacteria of distinct virulence.//Clin Exp Immunol. 1995 V.101(2).-P.308-313.

10. Banchereau J., Steinman R.M. Dendritic cells and the control of immunity // Nature. -1998 Vol. 392. - P.245-252.

11. Beige K.U., Dayyani F., Horelz A., Siedlar M., Frankenberger M., Frankenberger В., Espevik Т., Ziegler-Heitbrock L. The proinflammatory CD14+CD16+ DR++ monocytes are a major source of TNF // J. Immunol. — 2002.-Vol.168.-P. 3536-3542.

12. Bella S.D., Nicola S., Riva A., Biasin M., Clerici M., Villa M.L. Functional repertoire of dendritic cells generated in granulocyte macrophage-colony stimulating factor and interferon-a // J. Leukoc. Biol. — 2001. — Vol. 75. — P.106-116.

13. Blumenthal A.S., Echlers S., et al. Control of mycobacterial replication in Human macrophages: roles of extracellular signal-regulated 1 and 2 and p38 МАРК pathways // Infect Immun.-2002.-V.70. № 9. - P.4961-4967.

14. Bodnar K.A., Serbina N.V. et al. Fate of Mycobacterium tuberculosis within murin dendritic cells// Infect. Immune. 2001. - Vol. 69. - № 2. - P.800-809.

15. Banchereau, J., Steinman R.M. Dendritic cells and the control of immunity // Nature. -1998 Vol. 392. - P.245-252.

16. Boros D.L. Granulematous infections and inflammations: cellular and molecular mechanisms/ ed. D.L. Boros.- Washington.: ASM Press.-2003.-330P.

17. Boussiotis V.A., Tsay E.Y., Yunis E.J.// IL-10-producing T cells suppress immune response in anergic tuberculosis patients/ J. Clin. Invest. — 2000. — Vol. 105. —P. 1317-1325

18. CDC. Tuberculosis and human immunodeficiency virus infection: recommendations of the Advisory Committee for the Elimination of Tuberculosis (ACET).//MMWR.-1989.-V.38.-P.236-238, P.243-50.

19. Cavanagh L.L., Von Andrian U.H. Travellers in many guises: the origins and destinations of dendritic cells.// Immunol Cell Biol.- 2002 V. 80(5).-P.448-62

20. Chang J.C., Wysocki A., Tchou-Wong K.M., Moskowitz N., ZhangY. and Rom W.N. Effect of Mycobacterium tuberculosis and its components on macrophages and the release of matrix metalloproteinases// Thorax.-1996.-, V. 51.-P. 306-311.

21. Cho H., Lasco T.M. et al. Recombinant guinea pig tumor necrosis factor alpha stimulates the expression of IL-12 and the inhibition of Mycobacterium tuberculosis grouyh in macrophages // Infect.Immun.-2005.-V.73.-№3.-P. 13671376.

22. Cordona P.-J., Ruiz-Manzano J. On the Mycobacterium tuberculosis-latent bacilli // Eur. Respir. J. 2004. - Vol.4. - № 6. - P. 1044-1051.

23. Dahl K.E., Shiratsuchi H., Hamilton B.D., Ellner J.J., Toossi Z. Selective induction of transforming growth factor beta in human monocytes by lipoarabinomannan of Mycobacterium tuberculosis.//Infect Immun.- 1996 .-V.64(2).-P.399-405.

24. Dayyani F., Beige K.U., Frankenberger M., Mack M., Berki Т., Ziegler-Heitbrock L. Mechanism of glucocorticoid-induced depletion of human CD14+CD16+ monocytes // J. Leukoc. Biol. 2003. - Vol. 74. - P. 33-39.

25. Ellner J.J., Hinman A.R., Dooley S.W., Fischl M.A., Sepkowitz K.A., Goldberger M.J., Shinnick T.M., Iseman M.D., Jacobs W.R. Jr. Tuberculosis symposium: emerging problems and promise.//J Infect Dis.- 1993 .-V.l 68(3).-P.537—551.

26. Engele M., Sto el E., Castiglione K. et al. Induction of TNF in Human Alveolar Macrophages As a Potential Evasion Mechanism of Virulent Mycobacterium tuberculosis // The Journal of Immunology. 2002.-V.168.-P.1328-1337.

27. Ernst J.D. Macrophage Receptors for Mycobacterium tuberculosis//- Infect Immun.- 1998.- V. 66(4).- P. 1277-1281.

28. Fenton, M.J., Vermeulen M.W. Immunopathology of tuberculosis: roles of macrophages and monocytes // Infect. Immun. 1996. — Vol. 64. — P.683-690.

29. Fingerle G., Pforte A., Passlick В., Blumenstein M., Strobel M., Ziegler-Heitbrock H.W. The novel subset of CD14+/CD16+ blood monocytes is expanded in sepsis patients // Blood. 1993. - Vol. 82. - P. 3170-3176.

30. Flynn, J. L., Chan J. Immunology of tuberculosis // Annu. Rev. Immunol. -2001.-Vol. 19. -P.93-129.

31. Fujiwara H., Ohnshi K., Kishimoto S., Ellner J .J., Tsuyuguchi I. Release of a suppressor cell-inducing factor by monocytes from patients with pulmonary tuberculosis.//Immunology1991 .-Vol.72(2).- P. 194-198.

32. Geijtenbeek T.B.H., van Vliet S.J., Koppel E.A., Sanchez-Hernandez M., Vandenbroucke-Grauls C.M.J.E., Appelmelk В., van Kooyk V. Mycobacteria target DC-SIGN to suppress dendritic cell function // J. Exp. Med. 2003. -Vol. 197.-P.7-17.

33. Gercken J., Pryjma J., Ernst M. and Flad H.D. Defective antigen presentation by Mycobacterium tuberculosis-infected monocytes.//Infect Immun.-1994.-Vol. 62(8).-P.3472-3478.

34. Gordon S. Alternative activation of macrophages// Immunology. 2003. -Vol.3.-P.23-35.

35. Guyot-Revol V.I., Hackforth S., Hinks T. and Lalvani A. Regulatory T Cells Are Expanded in Blood and Disease Sites in Patients with Tuberculosis.// American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine.-2006.- Vol 173.-P. 803-810.

36. Hanekom W.A., Mendillo M., Manca C., Haslett P.A.J., Siddiqui M.R., Barry C., Kaplan G. Mycobacterium tuberculosis inhibits maturation of human monocyte-derived dendritic cells in vitro // J. Infect. Diseases. 2003. - Vol. 188. -P.257-266.

37. Herrmann J.L., Tailleux L., Nigou J., Giquel В., Puzo G. et al. The role of human dendritic cells in tuberculosis: protector or non-protector?// Rev Mai Respir.- 2006.- Vol.3.-P.621-628.

38. Hickman S.P., Chan J., Salgame P. Mycobacterium tuberculosis Induces Differential Cytokine Production from Dendritic Cells and Macrophages with Divergent Effects on Naive T Cell Polarization.//J. Immunol.-2002.-V.168. -P.4636-4642

39. Hirsh C.S., Toossi Z., Vanham G. et al. Apoptosis and T cell hyporesponsiveness in pulmonary tuberculosis// J.Infect. Dis. -1999.-Vol. 179(4).- P.945-953.

40. Ina Y., Takada K., Yamamoto M., Morishita M., Yoshikawa K. Antigen-presenting capacity of alveolar macrophages and monocytes in pulmonary tuberculosis//- Eur. Respir. J.-1991.-V.4. -P.88-93.

41. Kapsenberg M.L. Dendritic-cell control of pathogen-driven T-cell polarization // Nature Rev Immunol. 2003. - Vol. 3. - P.984-993.о

42. Karakousis P.С., Bishai W.R. and S.E.Dorman. Mycobacterium tuberculosis cell envelope lipids and the host immune response.//Cell Microbiol.- 2004.-V.6.- P.105-116.

43. Karakousis P.C., Yoshimatsu Т., Lamichhane G. et all. Dormancy Phenotype Displayed by Extracellular Mycobacterium tuberculosis within Artificial Granulomas in Mice.// JEM.-2004.-V.200.- No. 5.-P.647-657.

44. Kaufmann S. H. E. How can immunology contribute to the control of tuberculosis?//Nat. Rev. Immunol.- 2001.-V.1.- P.20-30.

45. Kleihenz M.E., Ellner J.J. Immunoregulatory adherent cells in human tuberculosis: radiation-sensitive antigen-specific suppression by monocytes.// J. Infect. Dis.-1985. -Vol.1. -P.171-176.

46. Koul A., Herget Т., Klebl В., Ullrich A. Interplay between mycobacteria and host signaling pathways // Nature Rev Microbiol. 2004. - Vol. 2. - P. 189-202.

47. Li G., Kim Y.J., Mantel C., Broxmeyer H.E. P-selectin enhances generation of CD14+CD16+ dendritic-like cells and inhibits macrophage maturation from human peripheral blood monocytes // J. Immunol. — 2003. Vol. 171. - P. 669677.

48. Luft Т., Pang K.C., Thomas E., Hertzog P., Hart D.J., Trapani J.A. & Cebon J. Type I IFNs enhance the terminal differentiation of dendritic cells.//Journal of Immunology.- 1998.-V. 161.-P.1947-1953.

49. MacDonald A.J., Semper A.E., Libri N.A., Rosenberg W.M. Monocyte-derived dendritic cell function in chronic hepatitis С is impaired at physiological numbers of dendritic cells.// Clin Exp Immunol.- 2007.-Vol. 148(3).-P.494-500.

50. Mohan V.P., Scanga C.A. et al. Effects of tumor necrosis factor alpha on hostimmune response in chronic persistent tuberculosis: possible role for limiting pathology // Infect. Immun.-2001. -V.69. №3 P.1847-1855.

51. Nockher W.A., Scherberich J.A. Expanded CD14+ CD16+ Monocyte Subpopulation in Patients with Acute and Chronic Infections Undergoing Hemodialysis.//Infect Immun.-1998.-Vol. 66(6).-P.2782-2790.

52. Noss E.H., Pai R.K., Sellati T.J. et al. Toll-Like Receptor 2-Dependent Inhibition of Macrophage Class II MHC Expression and Antigen Processing by 19-kDa Lipoprotein of Mycobacterium tuberculosis.// J. Immunol. 2001. -Vol.167.-P. 910-918.

53. Othieno C., Hirsch C.S., Hamilton B.D., Wilkinson K., Ellner J.J., and Toossi Z. Interaction of Mycobacterium tuberculosis-Induced Transforming Growth Factor-pl and Interleukin-10.// Infection and Immunity.- 1999.-Vol. 67.-P.5730-5735.

54. Ozeki Y, Kaneda K, Fujiwara N, Morimoto M, Oka S, Yano I. In vivo induction of apoptosis in the thymus by administration of mycobacterial cord factor (trehalose 6,6'-dimycolate).// Infect Immun.- 1997.-V.65.-P.1793-1799.

55. Pieters J., Gatfield J. Hijacking the host: survival of pathogenic mycobacteria inside macrophages.// Trends Microbiol. — 2002. — Vol.10. — P. 142-146.

56. Puig-Kroger A., Serrano-Gomez D., Caparros E., Dominguez-Soto A., Relloso M. et al. Regulated Expression of the Pathogen Receptor Dendritic

57. Cell-specific Intercellular Adhesion Molecule 3 (ICAM-3)-grabbing Nonintegrin in THP-1 Human Leukemic Cells, Monocytes, and Macrophages.// J. Biol. Chem.-2004.-Vol. 279 (24).- P.25680-25688.

58. Raviglione M.C., Narain J.P., Kochi A. HIV-associated tuberculosis in developing countries: clinical features, diagnosis, and treatment.//Bull WHO. -1992.-V.70.-P. 515-526.

59. Rincon M., Anguita J., Nakamura T. et al. Interleukin (IL)-6 Directs the Differentiation of IL-4-producing CD4+ T Cells. // J.Exp. Med. 1997. -Vol.185. - P.461-469.

60. Rossman M.D., MacGregor R.R. Tuberculosis—Clinical Management and New Challenges.// New York, NY: McGraw-Hill, Inc.-1995.-P.323-331.

61. Sakhno L.V., Tikhonova M.A., Ostanin A.A., Nikonov S.D., Zhdanov O.A., Chernykh E.R. Interleukin-2 in the correction of T-cell anergy in patients with pulmonary tuberculosis.// Probl Tuberk Bolezn Legk.-2006.-Vol.l.-P.48-52.

62. Samten В., Thomas E.K., Gong J., Barnes P.F. Depressed CD40 Ligand Expression Contributes to Reduced Gamma Interferon Production in Human Tuberculosis.// Infection and Immunity.-2000.- Vol. 68.- P. 3002-3006.

63. Sanchez M.D., Garcia Y., Montes C., Paris S.C., Rojas M., et al. Functional and phenotypic changes in monocytes from patients with tuberculosis are reversed with treatment.// Microbes Infect.- 2006.-Vol.8 (9-10).-P.2492-2500.

64. Sanchez-Torres C., Garcia-Romo G.S., Cornejo-Cortes M.A. at al. // Internal Immunol. 2001. - Vol.13. - P. 1571-1581.

65. Santini S.M., Pucchio T.D., Lapenta C., Parlato S., Logozzi M., Belardelli F. A new type I IFN-mediated pathway for the rapid differentiation of monocytes into highly active dendritic cells // Stem cells. 2003. - Vol. 21. -P.357-362.

66. Selvaraj P., Venkataprasad N., Vijayan V.K., Prabhakar R., Narayanan P.R. Alveolar macrophages in patients with pulmonary tuberculosis//- Lung India.-1988.-V.- 6.-P. 71-74.

67. Schorey J.S., Carroll M.C., Brown E.J. A Macrophage Invasion Mechanism of Pathogenic Mycobacteria // Science. - 1997. - V. 277 (5329). - P. 1091 -1093.

68. Selwyn P.A., Sckell B.M., Alcabes P., Friedland G.H., Klein R.S., Schoenbaum E.E. High risk of active tuberculosis in HIV infected drug users with cutaneous anergy.// JAMA. 1992.-V.268.- P.504-509.

69. Shafer RW, Chirgwin KD, Glatt AE, Dahdouh MA, Landesman SH, Suster B. HIV prevalence, immunosuppression, and drug resistance in patients with tuberculosis in an area endemic for AIDS.// AIDS.-1991.-V.5.- P. 399-405.

70. Scherberich J.E., Nockher W.A. CD 14++ monocytes, CD14+/CD16+ subset and soluble CD 14 as biological markers of inflammatory system diseases andmonitoring immunosuppressive therapy // Scand. J. Immunol. 2002. - Vol. 55. -P. 629-638.

71. Singh В., Singh G., Trajkovic V. et al. Intracellular expression of Mycobacterium tuberculosis-specific 10-kDa antigen down-regulates macrophage B7-1 expression and nitric oxide release // Clin. Exp. Immunol. -2003.-Vol. 134.-P.70-77.

72. Skrzeczynska J., Kobylarz K., Hartwich Z., Zembala M., Pryjma J. CD 14+16+ monocytes in the course of sepsis in neonates and small children: monitoring and functional studies // Scand. J. Immunol. 2002. -Vol. 55. - P. 629-638.

73. Slots J., Rams Т.Е. Microbiology of periodontal disease // Slots J., Taubman M.A. Contemporary Oral Microbiology and Immunology. 1992.- P. 425-443.

74. Stenger S., Niazi K.R., Modlin R.L. Down-Regulation of CD1 on Antigen-Presenting Cells by Infection with Mycobacterium tuberculosis // J. Immunol-1998. Vol.161. - P.3582-3588.

75. Stenger S. Immunological control of tuberculosis: role of tumor necrosis factor and more // Annals of the Rheumatic Diseases.- 2005.- Vol.64 (4).-P. 2428.

76. Steppich В., Dayyani F., Gruber R., Lorenz R., Mack M., Ziegler-Heitbrock H.W. Selective mobilization of CD14+CD16+ monocytes by exercise.// Am J Physiol Cell Physiol.- 2000.-Vol. 279(3).-P.578-586.

77. Sweet L. and Schorey J. S. Glycopeptidolipids from Mycobacterium avium promote macrophage activation in a TLR2- and MyD88-dependent manner// Journal of Leukocyte Biology.-2006.-V.80.-P.415-423.

78. Tacke F., Randolph G.J. Migratory fate and differentiation of blood monocyte subsets.//Immunobiology.-2006.-V.211.-№10.-P.6-8.-P.609.

79. Tapping R.I., Tobias P.S. Mycobacterial lipoarabinomannan mediates physical interactions between TLR1 and TLR2 to induce signaling.// Journal of Endotoxin Research.-2003.- V. 9.- No. 4,- P.264-268.

80. Trinite В., Voisine C., Yagita H., Josien R. A subset of cytolytic dendritic cells in rat // J Immunol.- 2000.- Vol. 165(8).- P.4202-4208.

81. Tsuchiya Т.К., Chida K., et al. Dendritic cells involvement in pulmonary granuloma formation elicited by bacillus Calmete-Guerin in rats// Am. J. Respire Crit. Care Med. 2002.-vol.165. - №12.-P.1640 - 1646.

82. Ueda W., Fujiwara H., Tsuyuguchi I., Kroki Т., Yano I. Increased production of interleukin-10 by human blood monocytes stimulated with Mycobacterium avium-intracellulare complex.//Kansensogaku Zasshi.- 1998.- Vol.72(7).-753-760.

83. Uehira R., Amakawa R., Ito Т., Tajima K., Naitoh S. et al. Dendritic Cells Are Decreased in Blood and Accumulated in Granuloma in Tuberculosis.//Clinical Immunology.- 2002.-Vol. 105(3).- P.296-303.

84. Ulrichs Т., Moody D.B., Grant E., Kaufmann S.H.E., Porcelli S.A. T-cell responses to CD 1-presented lipid antigens in humans with Mycobacterium tuberculosis infection // Infection & Immunity. 2003. - Vol. 71. - P.3076-3087.

85. Van Crevel R., Ottenhoff T.H.M., van der Meer J.W.M. Innate Immunity to Mycobacterium tuberculosis // Clin. Microbiol. Reviews. -2002. -Vol.15. — P.294-309.

86. Vanham G., Edmonds K., Qing L., Horn D., Toossi Z. et al. Generalized immune activation in pulmonary tuberculosis : co-activation with HIV infection.// Clin. exp. Immunol.- 1996.- Vol. 103.- P. 30-34.

87. Verreck F.A.W., de Boer Т., Langenberg D.M.L. et al. Human IL-23-producing type 1 macrophages promote but IL-10-producing type 2 macrophages subvert immunity to (myco)bacteria // PNAS. 2004. - Vol.101. -P.4560-4565.

88. Vidarsson G.G.J., Vidarsson J.G.J. Fc receptor and complement receptor-mediated phagocytosis in host defence. Pathogenesis and immune response.//Current Opinion in Infectious Diseases.- 1998.-V.11(3).-P.271-278.

89. Wahl S.M., Swisher J., McCartney-Francis N. and Chen W. TGF-B: the perpetrator of immune suppression by regulatory T cells and suicidal T cells.// Journal of Leukocyte Biology. 2004. -Vol.76. -P.15-24.

90. Waggoner A.S. Fluorescent probes for cytometry // In: Melamed M.R., Lindmo Т., Mendelsohn M.L. (eds) Flow cytometry and sorting. Second edition. Wiley-Liss, Inc., 1990.- P. 209-225.

91. Wang S.Y., Мак IC.L., Chen L.Y., Chou M.P., Ho C.K. Heterogeneity of human blood monocytes: two subpopulations with different sizes, phenotypes and function // Immunol. 1992. - Vol. 77. - P. 298-303.

92. Wang F.-S., Xing L.-H., Liu M.-X., Zhu C.-L., Liu H.-G., Wang H.-F., Lei Z.-Y. Dysfunction of peripheral blood dendritic cells from patients with chronic hepatitis В virus infection // World J. Gastroenterol. 2001. — Vol. 7. - P.537-541.

93. WHO, The World Health Report, 1999.

94. Woltman A.M., van Kooten G. Functional modulation of dendritic cells to suppress adaptive immune responses. // J. Leukoc. Biol. 2003. - Vol.73. -P.428-441.

95. Zhang M., Gong J., Yang Z., Samten В., Cave M. D., Barnes P. F. Enhanced Capacity of a Widespread Strain of Mycobacterium tuberculosis to Grow in Human Macrophages//- The Journal of Infectious Diseases.- 1999.-V. 179.-P.1213-1217.

96. Ziegler-Heitbrock H.W., Fingerle G., Strobel M., Schraut W., Stelter F., Schutt C., Passlick В., Pforte A. The novel subset of CD14+/CD16+ blood monocytes exhibits features of tissue macrophages // Eur. J. Immunol. 1993. -Vol. 23. - P.2053-2058.

97. Ziegler- Heibrock H.W.L. Heterogeneity of human blood monocytes: the CD14+CD16+ subpopulation.// Immunology today.-1996.-vol.l7(9).-P.424-428.